JP2006500375A - ９−β−アノマー性ヌクレオシド類似体の調製方法 - Google Patents

Abstract

９−β−アノマー性ヌクレオシド類似体の位置選択的及び立体選択的合成を十分に増進させるための方法を説明する。６−置換プリン塩基への糖部分の導入は、９−β−Ｄ−又はＬ−プリンヌクレオシド類似体のみが得られるように実施された。糖部分のこの位置選択的及び立体選択的導入により、実質上７位―位置異性体の形成なしに高収率でヌクレオシド類似体、特に２’−デオキシ、３’−デオキシ、２’−デオキシ２’−β−フルオロ及び２’，３’−ジデオキシ−２’−β−フルオロプリンヌクレオシド類似体を合成できるようになる。該化合物は薬剤又は薬剤に対する中間体である。

Description

本発明は、９−β−アノマー性ヌクレオシド類似体の調製方法に関する。詳細には、本発明は、２’−デオキシ、３’−デオキシ、２’−デオキシ−２’−β−フルオロ及び２’，３’−ジデオキシ−２’−フルオロプリンヌクレオシド類似体の調製に関する。該方法は、６位の保護基により７位−位置異性体の形成を防止する。

２−デオキシ−β−Ｄ−又はＬ−リボフラノシル（２−デオキシ−β−Ｄ−又はＬ−エリトロ−ペントフラノシル）、３−デオキシ−β−Ｄ−又はＬ−リボフラノシル（３−デオキシ−β−Ｄ−又はＬ−エリトロ−ペントフラノシル）、２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシル（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−又はＬ−トレオ−ペントフラノシル）、２，３−ジデオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシル（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−又はＬ−トレオ−ペントフラノシル）或いはβ−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシル部分をアグリコン部分中に導入する従来のグリコシル化法は、常にアノマー混合物及び位置異性体を与え、その結果、所望するヌクレオシドの収率が極めて低くなる。これらの困難を考慮し、フェノキシチオカルボニル化を利用する４ステップでのデオキシ化法が開発され、２’−デオキシヌクレオシド（Ｊ．Ａ．Ｃ．Ｓ．、１９８３年、１０５巻、４０５９頁）、又は２，３−ジデオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシルヌクレオシド（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９０年、３３巻、９７８頁）が得られた。アデノシンから出発し、エポキシドの開環が後に続く２’，３’−無水アデノシン経路を経由して、３’−アデノシン（コルジセピン）も作られた（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．、１９８５年、１１０８頁）。

しかし、これらの方法は、すべて、前もって形成されたヌクレオシドを入手可能であることを必要とせず、また、さらなる求核置換に最も有用なものであるハロ複素環（好ましくは２−ハロ）の存在下でも適用できるように十分改善された方法ではない。その後、Ｒｏｂｉｎｓ他は、２’−デオキシヌクレオシドを合成するための立体特異的ナトリウム塩グリコシル化法を開発した（Ｊ．Ａ．Ｃ．Ｓ．、１９８４年、１０６巻、６３７９頁）。この方法により、α−アノマー性ヌクレオシドの形成問題は排除されるが、位置異性体の問題（Ｎ−９及びＮ−７）は解決されずに残っている。さらに、極めて類似した２つの位置異性体の間での厄介なシリカゲルカラム精製は、２’−デオキシヌクレオシドの大規模調製では受け入れ難い。ナトリウム塩グリコシル化法は、２’−Ｆ−アラ（ａｒａ）−ｄｄＡの合成に対しても試みられたが（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９４年、３７巻、８２１頁）、やはり、異性体の分離及び適切な大規模法は解決されずに残っている。また、Ｍａｒｑｕｅｚ他は、プリン又は６−クロロプリンを２’−β−フルオロ−ブロモ糖とカップリングさせ、予想した４種のヌクレオシド異性体を得たこと、及びシリカゲルカラムクロマトグラフィーによる時間のかかる反応混合物の精製を報告している（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９０年、３３巻、９７８頁、及び１９９１年、３４巻、１６４７頁）。さらに、アデノシン型ヌクレオシド（プリン部分に６−アミノ基を有する）を合成する場合には、高められた温度及び圧力で６−クロロでブロックしたプリンヌクレオシドをメタノール性アンモニアと処理し、６−アミノプリンヌクレオシドを得るのも選択される方法である。この変換は、鋼製ボンベ又は密閉管中において高められた温度で反応を実施する必要のあることが多い。従って、目標とする生物活性ヌクレオシドに対しより簡単化された方法を提供する、より適切で適応性のある手法が必要とされている。

関連技術：Ｒｏｂｉｎｓ他、米国特許第４，７６０，１３７号；Ｉｋｅｈａｒａ，Ｍ．他、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、８７巻、３頁（１９６５年）；Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ｔｏ ｔｈｅ Ｅｄｉｔｏｒ、８５巻、２３４４頁（１９６３年）；Ｃｏｏｋ他、米国特許第５，４５９，２５５号；Ｆｕｒｕｋａｗａ，Ｙ．他、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．、１６巻（６号）、１０７６〜１０８０頁（１９６８年）。

従って、本発明の目的は、９−β−アノマー性ヌクレオシド類似体の新規な調製方法を提供することである。詳細には、本発明の目的は、該類似体を高収率で製造する比較的経済的な方法を提供することである。本発明のこれら及びその他の目的は、以下の説明から次第に明らかになろう。

本発明は、次式の保護された９―置換プリンヌクレオシド（Ｉ）

［式中、アシルは１〜１４個の炭素原子を含み、非反応性基である］の製造方法であって、次式のアニオン性６−置換プリン塩（ＩＩ）

［式中、ＺはＮａ又はＫである］を非反応性溶媒中でＯ−保護活性化糖と、本質的に７位−類似体の形成なしに（ＩＩ）が（Ｉ）を生成するように反応させることを含む製造方法に関する。

本発明は、詳細には、次式の保護された９−置換プリンヌクレオシド（Ｉ）

［式中、ｘは４〜１２であり、Ｙは非妨害部分であり、好ましくはＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、ＯＣＨ_３、ＮＨ_２、ＨＮＲ（Ｒは非反応性基である）からなる群から選択される］の製造方法であって、
（ａ）次式のアニオン性６−置換プリン塩（ＩＩ）

［式中、ＺはＮａ又はＫである］を、
（ｂ）非反応性溶媒中でＯ−保護活性化糖と、本質的に７位−類似体の形成なしに（ＩＩ）が（Ｉ）を生成するように反応させることを含む製造方法に関する。Ｒは、好ましくは、置換されることのできる１〜２０個の炭素原子を含み、アルコキシ、アルキル、カルボキシル、複素環及びアリール基が含まれる。Ｘは、好ましくは５である。活性化糖は、好ましくはペンタフラノース、２−デオキシペントフラノース及び保護されたＯＨ基を有する置換２−デオキシペンタフラノースからなる群から選択される。溶媒は、好ましくは無水テトラヒドロフランである。（ＩＩ）は、好ましくは、次式の化合物（ＩＩＩ）を

塩基、特にカリウム又はナトリウムヘキサメチルジサラジド（ｄｉｓａｌａｚｉｄｅ）（ＫＨＭＤＳ）と反応させることによって製造される。化合物（ＩＩＩ）は、好ましくはアデニンを次式の無水物

［式中、ｘは４〜１２である。ｘは好ましくは５〜９である］と反応させることによって調製される。糖は、好ましくは１−ハロ糖である。

本発明は、従来方法の困難及び欠点を克服するものであり、２’−デオキシアデノシン類、３’−デオキシアデノシン類、２’−β−Ｆ−２’−デオキシアデノシン類２’β−Ｆ−２’，３’−ジデオキシアデノシン類及び２−Ｆ−アラ−Ａ化合物、及びアラ−Ａを含む９−β−Ｄ−又はＬ−プリンヌクレオシドの製造方法であって、次の一般式、

を有するプリン化合物のカリウム塩を、１−クロロ−２−デオキシ−３，５−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−α−Ｄ−又はＬ−エリトロペンタフラノース、１−クロロ−３−デオキシ−２，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−又はＬ−エリトロペンタフラノース、２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシルブロミド、２，３−ジデオキシ−２−フルオロ−５−Ｏ−ｐ−トルオイル−α−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシルクロリド、及び２，３，５−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシルブロミドでグリコシル化すること、得られる一般式５

［式中、ＹはＨ，Ｃｌ又はＦである］を有する９−（２−デオキシ−３，５−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−β−Ｄ−又はＬ−エリトロペントフラノシル）プリン、一般式６

［式中、ＹはＨ，Ｃｌ又はＦである］を有する９−（３−デオキシ−２，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−又はＬ−エリトロペントフラノシル）プリン、一般式７

［式中、ＹはＨ，Ｃｌ又はＦである］を有する９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシル）プリン、一般式８

［式中、ＹはＨ，Ｃｌ又はＦである］を有する９−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ−５−Ｏ−ｐ−トルオイル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン、一般式９

を有する２−フルオロ−９−（２，３，５−トリ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）プリンをそれぞれ単離すること、及び、上記のサンプルをナトリウムメトキシドを用いる脱ブロック条件下に曝し、対応する目的のヌクレオシド、式１０

［式中、Ｙ＝Ｈは１０ａ、Ｙ＝Ｃｌは１０ｂである］を有する２’−デオキシアデノシン、式１１

［式中、Ｙ＝Ｈは１１ａ、Ｙ＝Ｃｌは１１ｂである］を有する３’−デオキシアデノシン、式１２

［式中、Ｙ＝Ｈは１２ａ、Ｙ＝Ｃｌは１２ｂである］を有する９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシル）アデニン、一般式１３

［式中、Ｙ＝Ｈは１３ａ、Ｙ＝Ｃｌは１３ｂである］を有する９−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシル）アデニン、及び保護ベンジル基を除去した後に式１４

を有する２−フルオロ−９−β−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシルアデニン（フルダラビン）をそれぞれ得ることを含む製造方法に関わる。

ヘプタノイルアミドプリン（１、Ｙ＝１；２、Ｙ＝Ｃｌ；３、Ｙ＝Ｆ）は、対応する６−アミノプリンをＮ−メチルイミダゾール中でヘプタン酸無水物と処理することによって調製した。プリン化合物のカリウム塩は、プリン塩基のテトラヒドロフラン懸濁液を−３５℃で有機塩基であるカリウムビス（トリメチルシリル）アミドで処理し、続いて反応混合物を室温まで温めることによってｉｎ ｓｉｔｕで形成した。グリコシル化は、外界温度又は還流温度で完結するまで、通常は１４時間以内で実施した。グリコシル化段階においてＮ−９でのみグリコシル化された生成物を得るための位置特異性、及びβ−ヌクレオシド生成物を高収率で得ることは、いずれも予想できなかった。対応する６−へプタノイルアミドプリンは、該プリン塩基の有機溶媒への溶解性を高めたのみならず、Ｎ−９でグリコシル化された生成物の形成を促進し、公表されているほとんどの方法とは異なって、Ｎ−７でグリコシル化された生成物は実質上極めて少量も観察されなかった。ほとんどの場合、所望のＮ−９でβにグリコシル化された生成物の形成は、速く、かつ、認めうるほどのアノマー化なしに選択的に起こった。Ｎ−９でβにグリコシル化された生成物は、任意の適当な方法、好ましくは再結晶によって、又はシリカゲルカラム精製によって反応混合物から単離される。保護基の脱ブロックは、ブロックされたヌクレオシドを還流温度で当技術分野で周知のナトリウムメトキシド−メタノールで処理することによって完遂され、目的のヌクレオシドが得られる。当技術分野で広く知られているように、アリール（ＲＯ⁻）低級アルキルオキシド又はアルコール中のアンモニアも脱ブロックを引き起こす。糖保護基の除去、それに続き付随的に起こるアグリコン部分中のへプタノイルアミド基の加水分解は、両方とも、ブロックされたヌクレオシドをナトリウムメトキシドで処理することによって達成され、対応する６−アミノプリンヌクレオシドが得られた。本方法の生成物、２’−デオキシアデノシン１０ａ及び２−クロロ−２’−デオキシアデノシン（クラドリビン）１０ｂは有用な細胞障害剤であり、また２’−デオキシアデノシン類似体（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、１９８２年、４２巻、３９１１頁、及び欧州特許出願第３５１７９５号）、３’−デオキシアデノシン（コルジセピン）１１ａ、抗腫瘍活性を有するヌクレオシド抗体（Ｓｕｈａｄｏｌｎｉｋ，Ｒ．Ｊ．、「Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ」ニューヨーク、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）及び２−クロロ−３’−デオキシアデノシン１１ｂ（クラドリビンの直接類似体、有用な細胞障害剤）、２’−Ｆ−２’−デオキシ−アラ−アデノシン１２ａ及び２−クロロ−２’−Ｆ−２’−デオキシ−アラ−アデノシン１２ｂ（クロファラビン、種々のヒト細胞系に対する細胞障害剤、ネズミ白血病Ｌ１２１０及びマウスのＰ３８８白血病、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９２年、３５巻、３９７頁）、２’−Ｆ−ジデオキシ−アラ−アデノシン１３ａ（抗ＨＩＶ剤として、Ｈ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９０年、３３巻、９７８頁）及び２−クロロ−２’−Ｆ−ジデオキシ−アラ−アデノシン１３ｂ、及び２−フルオロ−アラ−アデノシン１４（フルダラビン、リン酸フルダラビン合成用の前駆体、難治性慢性リンパ性白血病治療用ＦＤＡ承認製品）の製造にとって有用である。

実験
６−へプタノイルアミドプリン（１）
アデニン（４０．０ｇ、２９６．３ミリモル）をＮ−メチルイミダゾール（１００ｍｌ）中に懸濁させた。窒素雰囲気下で機械的に撹拌されている混合物にヘプタン酸無水物（１２５ｍｌ、４７６．２ミリモル）を添加し、混合物を１３０℃で加熱して澄明溶液を得た。この溶液を１３０℃で３０分間温め、撹拌しながら９０℃まで冷却した。９０℃で撹拌されている溶液にメタノール（７００ｍｌ）を徐々に添加し、混合物を４０℃で５分間撹拌した。分離した固体を濾過して集め、８０℃／０．３ｍｍＨｇで３時間乾燥し、粗生成物を得た。この材料を沸騰エタノール（７００ｍｌ）から結晶化させ、５１．０ｇ（７０％）の標題物１を得た。

２−クロロ−６−ヘプタノイルアミドプリン（２）
２−クロロアデニン（１０．０ｇ、５９ミリモル）をＮ−メチルイミダゾール（２５ｍｌ）及びヘプタン酸無水物（３０ｍｌ、１１４．２ミリモル）と共に、６−ヘプタノイルアミドプリンについて記載したものと同様の方法で、１３０℃で加熱し、１２．０ｇ（７２％）の２−クロロ−６−ヘプタノイルアミドプリン２を得た。

６−ヘプタノイルアミド−９−（２−デオキシ−３，５−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−β−Ｄ−エリトロ−ペントフラノシル）−プリン
１．ヘプタノイルアミドプリン１（４．９４ｇ、２０ミリモル）を無水ＴＨＦ（５５ｍｌ）に懸濁した。混合物を機械的に撹拌し、窒素雰囲気下で−３５℃まで冷却した。−３５℃で撹拌されている混合物に０．５Ｍ ＫＨＭＤＳトルエン溶液（４０ｍｌ、２０ミリミル）を５分間に渡って滴加した。混合物を４５分間撹拌し、次いで、徐々に室温まで温め、そして室温で３０分間撹拌した。撹拌されている混合物に乾燥粉末化した１−クロロ−２−デオキシ−３，５−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−α−Ｄ−エリトロペントフラノース（８．５８ｇ、２２ミリモル）を１０分に渡って分割して添加し、混合物を外界温度で３時間撹拌した。溶液を真空で濃縮し、残留物を塩化メチレン（１５０ｍｌ）に溶かした。有機層を水（１×１００ｍｌ）、５％ＮａＨＣＯ_３溶液（１×５０ｍｌ）、塩水（１×５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒を蒸発させて粗残留物を得た。この材料を、溶媒として酢酸エチル：ヘキサン（４：６、ｖ／ｖ）を使用するシリカゲルカラム（３．５×４０ｃｍ）で精製した。標題の９−β−Ｄヌクレオシドを単離し、エーテル：石油エーテル（３：１）から結晶化させ、７．６ｇ（６４％）の生成物を得た。

６−アミノ−９−（２−デオキシ−β−Ｄ−エリトロペントフラノシル）プリン（２’−デオキシアデノシン）１０ａ
２．６−ヘプタノイルアミド−９−ペントフラノシルプリン（１ａの生成物、５．９９ｇ、１０ミリモル）の無水メタノール（５０ｍｌ）溶液に、４５℃で２５％ＣＨ_３ＯＮａ−ＣＨ_３ＯＨ（１．６ｍｌ、７ミリモル）を一度に添加し、撹拌しながら溶液を４５℃で１０分間保持し、続いて室温で１時間撹拌した。溶液を撹拌しながら１時間冷却（氷浴）した。分離した固体を濾過して集め、メタノール（１×１０ｍｌ）で洗浄した。最後に、固体を水から結晶化させ、１．８３ｇ（７３％）の生成物１０ａを得た。融点１８８〜１９０℃（文献値、融点１８７〜１８９℃、標題の２−デオキシアデノシン生成物のその他すべての物理化学的特性は文献に報告されている２−デオキシアデノシンと同一である。

２−クロロ−６−ヘプタノイルアミド−９−（２−デオキシ−３，５−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−β−Ｄ−エリトロペントフラノシル）プリン
ａ．２−クロロ−６−ヘプタノイルアミドプリン２（２．８１ｇ、１０ミリモル）を無水ＴＨＦ（２８ｍｌ）に懸濁した。窒素雰囲気下−３０℃で機械的に混合されている混合物に、０．５Ｍ ＫＨＭＤＳトルエン溶液（２０ｍｌ、１０ミリモル）を添加し、混合物を−３０℃で３０分間撹拌した。混合物を室温まで温め、そして室温で３０分間撹拌し、続いて１−クロロ−２−デオキシ−３，５−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−α−Ｄ−エリトロペントフラノース（３．９０ｇ、１０ミリモル）を５分間に渡って分割して添加した。溶液を外界温度で２時間撹拌した。溶液を真空で濃縮し、残留物を塩化メチレン（１００ｍｌ）に溶かした。有機層を水（１×５０ｍｌ）、５％ＮａＨＣＯ_３溶液（１×４０ｍｌ）、塩水（１×４０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒を蒸散させて残留物を得た。この材料を、溶媒として酢酸エチル：ヘキサン（３：７、ｖ／ｖ）を使用するシリカゲルカラム（２．５×３５ｃｍ）で精製した。純粋な分画を貯め、一緒にして溶媒を蒸発させて泡状物を得た。この材料を無水エーテルに懸濁し、３０分間穏やかに還流させ、そして室温まで冷却した。分離した固体を濾過して集め、３．８０ｇ（６０％）の標題化合物を得た。

２−クロロ−６−アミノ−９−（２−デオキシ−β−Ｄ−エリトロ−ペントフラノシル）プリン（クラドリビン）１０ｂ
ｂ．２−クロロ−６−ヘプタノイルアミド−９−ペントフラノシルプリン（２ａの生成物、３．６０ｇ、５．６８ミリモル）の無水メタノール（３０ｍｌ）溶液に、窒素雰囲気下、５０℃で２５％ＣＨ_３ＯＮａ−ＣＨ_３ＯＨ（１．０ｍｌ、４．３７５ミリモル）を一度に添加した。混合物は直ちに澄明な溶液になり、溶液を還流温度で２０分間温め、続いて室温で３０分撹拌した。混合物をさらに１０℃で３０分間撹拌し、分離した固体を濾過して集め、冷メタノール（１×１０ｍｌ）で洗浄し、気流乾燥した。この材料は１％エタノール水から結晶化され、純粋の１０ｂ（１．１６ｇ、７２％）を与えた。融点２１７〜２０℃（軟化）、凝固して２９０℃未満で融解しない［文献値、融点２１０〜１５℃（軟化）次いで凝固して褐色に変化する］。

６−ヘプタノイルアミド−９−（３−デオキシ−２，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−エリトロペントフラノシル）プリン
１．反応混合物を還流温度で６時間温めたこと以外は実施例１に記載したものと同様にして、６−ヘプタノイルアミドプリン１（２．４７ｇ、１０ミリモル）を２，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−β−Ｄ−又はＬ−エリトロ−ペントフラノシルクロリド（３．６０ｇ、１０ミリモル）とカップリングさせ、シリカゲルカラム精製の後に２．０７ｇ（３７％）の標題化合物を得た。融点７２〜７４℃。

６−アミノ−９−（３−デオキシ−β−Ｄ−エリトロペントフラノシル）プリン（３’−デオキシアデノシン、コルジセピン）１１ａ
２．６−ヘプタノイルアミド−９−（３−デオキシ）ペントフラノシルプリン（３ａの生成物、１．８ｇ、３．１５ミリモル）を、実施例１に対して記載したものと同様にして、ナトリウムメトキシド−メタノールで脱ブロックし、３−でオキシアデノシンを得た。粗生成物を沸騰水から結晶化させて、純粋な３−でオキシアデノシン１１ａ（０．５９ｇ、７５％）を得た。融点２２４〜２２５℃。［文献値、融点２２４〜２２５℃、標題の３−デオキシアデノシン生成物の他のすべての物理化学的特性は文献に報告されているものと同一である］。

２−クロロ−６−ヘプタノイルアミド−９−（３−デオキシ−２，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−エリトロ−ペントフラノシル）プリン
ａ．反応混合物を還流温度で４時間温めたこと以外は実施例２に記載したものと同様にして、２−クロロ−６−ヘプタノイルアミドプリン２（２．０ｇ、７ミリモル）を２，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−β−Ｄ−エリトロ−ペントフラノシルクロリド（２．５５ｇ、７．１ミリモル）とカップリングさせ、シリカゲルカラム精製の後に１．７６ｇ（４１％）の標題化合物を得た。

２−クロロ−６−アミノ−９−（３−デオキシ−β−Ｄ−エリトロ−ペントフラノシル）プリン（２−クロロ−３’−デオキシアデノシン）１１ｂ
ｂ．２−クロロ−６−ヘプタノイルアミド−９−３−デオキシ−ペントフラノシルプリン（４ａの生成物、１．７ｇ、２．８ミリモル）を、実施例２に対して記載したものと同様に、ナトリウムメトキシド−メタノールで処理して２−クロロ−３’−デオキシアデノシン１１ｂ（０．５７２、７２％）を得た。

６−ヘプタノイルアミド−９−（２’−デオキシ−２’−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン
ａ．６−ヘプタノイルアミドプリン１（２．４７ｇ、１０ミリモル）を、実施例３に対して記載したものと同様にして、３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−２−デオキシ−２−フルオロ−α−Ｄ又はＬ−アラビノフラノシルブロミド（４．４４ｇ、１０ミリモル）とカップリングさせ、シリカゲルクロマト精製の後に標題のブロックされたヌクレオシド３．０４ｇ（５１％）を得た。

６−アミノ−９−（２’−デオキシ−２’−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン１２ａ（２’−デオキシ−２’−β−フルオロアデノシン）
ｂ．６−ヘプタノイルアミド−９−２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−又はＬ−アラビノフラノシルプリン（５ａの生成物、２．７２ｇ、４．５ミリモル）を、実施例１に対して記載したものと同様に、ナトリウムメトキシド−メタノールで処理して、２’−デオキシ−２’−β−フルオロアデノシン１２ａ（１．０１ｇ、８１％）を得た。

２−クロロ−６−ヘプタノイルアミド−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン
ａ．２−クロロ−６−ヘプタノイルアミドプリン２（５．０ｇ、１７．８ミリモル）を、実施例４に対して記載したものと同様にして、３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−２−デオキシ−２−フルオロ−α−Ｄ又はＬ−アラビノフラノシルブロミド（７．８６ｇ、１７．８５ミリモル）とカップリングさせ、シリカゲルクロマト精製の後に標題のブロックされたヌクレオシド６．０ｇ（５４％）を脱ブロックに適した泡状物として得た。泡状物の僅かな部分をエタノールから再結晶させ、白色固体を得た。融点８５℃で軟化し、９５〜９８℃で融解する。

２−クロロ−９−（２’−デオキシ−２’−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（クロファラビン）１２ｂ
ｂ．２−クロロ−６−ヘプタノイルアミンド−９−（２−デオキシ−２−フルオロ）−β−Ｄ−アラビノフラノシルプリン（６ａの生成物、１４．３ｇ、２２．９１ミリモル）の懸濁液を、実施例２に対して記載したものと同様に、ナトリウムメトキシド−メタノールで処理し、粗クロファラビンを得た。この材料を沸騰９５％エタノール水から２回結晶化させて純粋なクロファラビン１２ｂ（５．０１ｇ、６０％）を得た。

６−ヘプタノイルアミド−９−（２’，３’−ジデオキシ−２’−フルオロ−５−Ｏ−ｐ−トルオイル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン
ａ．６−ヘプタノイルアミドプリン１（２．４７ｇ、１０ミリモル）を、実施例３に対して記載したものと同様に、２，３−ジデオキシ−２−β−フルオロ−５−Ｏ−ｐ−トルオイル−クロリド（２．９ｇ、１０ミリモル）とカップリングさせ、シリカゲルクロマト精製の後に標題のブロックされたヌクレオシドを得た。ブロックされたヌクレオシドをメタノールから再結晶し、２．０８ｇ（４３％）の生成物を得た。

９−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−トレオ−ペントフラノシル）アデニン（２’−Ｆ−ｄｄアラ−Ａ、１３ａ）
ｂ．６−ヘプタノイルアミド−２’−３’−ジデオキシ−２’−フルオロ−５−Ｏ−トルオイルプリン（７ａの生成物、１．９０ｇ、３．９３ミリモル）の懸濁液を、実施例１に対して記載したものと同様に、ナトリウムメトキシド−メタノールで処理し、粗２’−Ｆ−ｄｄ−アラ−Ａを得た。この材料を２０％エタノール水から結晶化して純粋Ｆ−ｄｄ−アラ−Ａ １３ａ（０．８１ｇ、８１％）を得た。

２−クロロ−６−ヘプタノイルアミド−９−（２’，３’−ジデオキシ−２’−フルオロ−５−Ｏ−ｐ−トルオイル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン
ａ．２−クロロ−６−ヘプタノイルアミドプリン２（５．６２ｇ、２０ミリモル）を、実施例４に対して記載したものと同様に、２’，３’−ジデオキシ−２’−β−フルオロ−５−Ｏ−ｐ−トルオイルクロリド（５．８ｇ、２０ミリモル）とカップリングさせ、シリカゲルクロマト精製の後に標題のブロックされたヌクレオシドを得て、メタノールから再結晶し、２．４９ｇ（２４．３％）の生成物を得た。

２−クロロ−９−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−トレオ−ペントフラノシル）アデニン（２−クロロ−２’−Ｆ−ｄｄアラＡ）１３ｂ
ｂ．２−クロロ−６−ヘプタノイルアミド−２’，３’−ジデオキシ−２’−フルオロ−５−Ｏ−トルオイルプリン（８ａの生成物、２．０７ｇ、４ミリモル）の懸濁液を、実施例２に対して記載したものと同様に、ナトリウムメトキシド−メタノールで処理し、粗生成物を得た。これを５％メタノール水から結晶化して純粋な生成物１３ｂ（０．９６ｇ、８４％）を得た。

２−クロロ−６−ヘプタノイルアミドプリン（２）
６−アミノ−２−クロロプリン（２．３７ｇ、１４ミリモル）を乾燥キシレン（５ｍＬ）に懸濁し、懸濁液に窒素雰囲気下で磁気撹拌しながらヘプタン酸無水物（４．０ｍＬ、１５．２６ミリモル）を添加した。混合物を還流温度で２時間温め、真空（高真空、６０℃湯浴）で半固体物になるまで濃縮した。残留物に新しいヘプタン酸無水物（４．０ｍＬ、１５．２６ミリモル）を添加し、撹拌しながら混合物をオイルバス中（２１０℃）で加熱した。この時点で、澄明橙色の溶液が観察された（内温２０５〜２０７℃）。澄明液を撹拌しながら氷浴（２〜５℃）中で急速に冷却した。混合物（内温５５℃）にメタノール（３０ｍＬ）を添加し、さらに３０分間撹拌を継続した（氷浴）。濾過によって集められ分離された固体を、メタノール（１×１０ｍＬ）、続いてジエチルエーテル（２×２０ｍＬ）で洗浄した。固体を７０℃／０．３ｍｍＨｇで３時間乾燥し、灰白色固体として３．０１ｇ（７６％）の２を得た。ｍｐ２６９〜２７０℃。Ｒ_ｆ ０．８２（２０％メタノール−塩化メチレン）。

２−デオキシ−３，５−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル）−α−Ｄ−リボフラノシルクロリド
２−デオキシ−Ｄ−リボース（２４．２ｇ、０．２モル）を無水メタノール（４８６ｍＬ）に溶解した。１％メタノール性ＨＣＬ（５４ｍＬ、メタノール中に無水ＨＣｌを吹き込んで調製）を添加し、容器を密閉し、１５分間密閉状態に置きメチルグリコシドを形成した。炭酸銀（１０．０ｇ）を添加した。混合物を十分に振とうし、次いで濾過した。濾液を真空（アスピレータ、３０℃）でオイルまで濃縮した。乾燥ピリジンを添加し（２×１０ｍＬ）、溶液を真空で濃縮し、次いで３０℃／０．３ｍｍＨｇの高真空下に１時間保ち粗メチルグリコシド（約３６ｇ）を得た。グリコシドを乾燥ピリジン（１６０ｍＬ）に溶解し、溶液を３〜５℃まで冷却した（氷水浴）。温度を２０℃未満に維持しながら、ｐ−トルオイルクロリド（６８ｇ、０．４４モル）を滴加した。添加終了後、混合物を１夜室温に保持した。翌日、氷冷水（６００ｍＬ）を添加し、混合物をエーテル（２×４００ｍＬ）で抽出した。一緒にしたエーテル抽出液を引き続き水（２×２００ｍＬ）、希硫酸（２．５Ｎ、２×３００ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２×４００ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。混合物を濾過し、濾液を３０℃で真空下に（アスピレータ、次いで０．３ｍｍＨｇで１時間）濃縮し、黄色シロップとして１−Ｏ−メチル−３，５−ジ−（ｐ−トルオイル）−２−デオキシ−Ｄ−リボフラノシド（約９０ｇ）を得た。シロップを氷酢酸（６０ｍＬ）に溶解し、次いでＨＣｌガスで飽和した酢酸（１６０ｍＬ）に添加した。温度を１０℃に維持しながら、溶液中に無水ＨＣｌを１０分間通した（溶液は濃い結晶性ペーストに変化した）。混合物を無水エーテル（１００ｍＬ）で希釈し、そして濾過し、得られた固体をトルエン（５００ｍＬ）から再結晶し、真空デシケータ中、ソーダ石灰及びＰ_２Ｏ_５上で乾燥して純粋な生成物４４．０ｇ（５１％）を得た。融点１１７〜１１９℃。

２−クロロ−６−ヘプタノイルアミド−９−（２−デオキシ−３，５−ジ−Ｏ−ｐ−トルオイル−β−Ｄ−エリトロペントフラノシル）プリン（５）
アミド２（３．９４ｇ、１４ミリモル）を乾燥アセトニトリル（６０ｍＬ）に懸濁し、混合物を窒素雰囲気下で４０℃まで温めた。水素化ナトリウム（６０％油性、０．５６ｇ、１４ミリモル）を５分間に渡って分割して添加し、得られた懸濁液を室温で３０分間撹拌した。混合物に、乾燥粉末化α−クロロ糖（６．０ｇ、１５．４ミリモル）を、撹拌しながら１０分間に渡って分割して添加した。撹拌を２時間３０分継続した。反応混合物を真空で（アスピレータ、４０℃湯浴）濃縮し、残留物を塩化メチレン（２００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間に分配させた。有機層を分離し、水層を塩化メチレンで抽出した（２×７５ｍＬ）。一緒にした有機抽出液を１％希塩酸（１×１００ｍＬ）、５％炭酸水素ナトリウム溶液（１×１００ｍＬ）及び塩水（１×１００ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして半固体物にまで濃縮（アスピレータ、４０℃湯浴）した。残留物をさらに１時間乾燥し（高真空、３５℃湯浴）固体を得た。ブロックされたヌクレオシド５）の収率を最大にするためには、この段階で残留塩化メチレンを除去することが必須である。固体を沸騰ジエチルエーテル（１×７０ｍＬ）と一緒にして粉砕し、次いで、混合物を室温で３０分間撹拌した。分離した固体を濾過して集め４．０ｇの固体を得た（気流乾燥、１０分）。この材料をさらに沸騰エーテル（１×２５ｍＬ）と一緒にして１０分間粉砕し、室温まで冷却し、濾過して固体を集め、次いで５０℃／０．３ｍｍＨｇで２時間乾燥して３．６４ｇ（４１％）の化合物５を得た。融点１２８〜１３０℃。Ｒ_ｆ ０．５５（４０％酢酸エチル−ヘキサン）。

２−クロロ−２’−デオキシアデノシン（１０ｂ）
ブロックされたヌクレオシド５（３．６０ｇ、５．６８ミリモル）を無水メタノール（３０ｍＬ）に懸濁し、撹拌しながら５０℃（内温）まで温めた。撹拌されている懸濁液にナトリウムメトキシド（２５ｗｔ％メタノール溶液、１．０ｍＬ、４．３７５ミリモル、ｐＨ約１０．５）を添加すると、得られた澄明溶液は、室温で２０分間撹拌した後に曇りを生じた。溶液を氷冷浴中（５〜１０℃）で窒素雰囲気下にさらに３０分間撹拌した。濾過して固体を集め、冷メタノール（１×１０ｍＬ）で洗浄し、気流乾燥して１．２８ｇを得た。
材料を沸騰エタノール（２０ｍＬ）と一緒にして粉砕し、混合物を室温で１５分間撹拌した。濾過して固体を集め、７０℃／０．３ｍｍＨｇで３時間乾燥して１．１６４ｇ（７２％）の２−クロロ−２’−デオキシアデノシン６を得た。融点２２０℃（２１０〜２１５℃で軟化）。Ｒ_ｆ ０．３１（２０％メタノール−塩化メチレン）。

本発明は、以下の長所を備えている。
１．６−アミノプリン（「アデニン誘導体」）に対し、そのプリン塩基に対して適切な溶解性及びかさばりを付与する保護基を使用することによって、有機溶媒に可溶で、かつ、Ｎ^７位が障害され、活性化糖とカップリングさせて９−β−プリンヌクレオシドを合成する際にその位置での反応を最小にするような保護された塩基を与える。
２．保護されたプリン塩基を適当な塩基及び溶媒と一緒に使用することによって、保護されたプリンを活性化糖にカップリングさせてヌクレオシドを形成する際のα−異性体の形成を最小にする。
３．双極性、非プロトン溶媒中で有機可溶性金属塩基を使用することによって、有機可溶性プリン塩基誘導体を活性化糖とカップリングさせてヌクレオシドを形成する。
４．溶媒テトラヒドロフラン中で６−ヘプタノイルアミドプリン塩基及びカリウムヘキサメチルジシラジドを使用することによって、その塩基を活性化糖にカップリングさせてヌクレオシドを形成する。
５．クラドリビン、クロファラビン、フルオロジデオキシアデノシン（ＦｄｄＡ）、フルダラビン、及びコルジセピンの合成。

以上の説明は本発明を単に例示するものであり、本発明は以下に添付の特許請求の範囲によってのみ制約されるものであることを意味する。

Claims (20)

1. 次式の保護された９−置換プリンヌクレオシド（Ｉ）
   

   

   
   ［式中、アシルは１〜１４個の炭素原子を含み、Ｙは非反応性基である］の製造方法であって、
   次式のアニオン性６−置換プリン塩（ＩＩ）
   

   

   
   ［式中、ＺはＮａ又はＫである］を非反応性溶媒中でＯ−保護活性化糖と、本質的に７位−類似体の形成なしに（ＩＩ）が（Ｉ）を生成するように反応させることを含む、
   製造方法。
2. 次式の保護された９−置換プリンヌクレオシド（Ｉ）
   

   

   
   ［式中、ｘは４〜１２であり、ＹはＨ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、ＯＣＨ_３、ＮＨ_２及びＮＨＲ（Ｒは非反応性基である）からなる群から選択される］の製造方法であって、
   （ａ）次式のアニオン性６−置換プリン（ＩＩ）
   

   

   
   ［式中、ＺはＮａ又はＫである］を、
   （ｂ）Ｏ−保護活性化糖と、非反応性溶媒中で本質的に７位−類似体の形成なしに（ＩＩ）が（Ｉ）を生成するように反応させることを含む、
   製造方法。
3. ｘが５である、請求項１記載の方法。
4. 前記活性化糖がペンタフラノース、２−デオキシペントフラノース、及び保護されたＯＨ基を有する置換２−デオキシペンタフラノースからなる群から選択される、請求項２又は３に記載の方法。
5. 前記溶媒が無水テトラヒドロフランである、請求項２又は３に記載の方法。
6. （ＩＩ）が、次式の化合物（ＩＩＩ）
   

   

   
   を塩基と反応させることによって製造される、請求項２又は４に記載の方法。
7. 化合物（ＩＩＩ）がＹ−アデニンを次式の無水物
   

   

   
   ［式中、ｘは４〜１２である］と反応させることによって調製される、請求項６記載の方法。
8. ｘが５〜９である、請求項２記載の方法。
9. 前記活性化糖が１−ハロ糖である、請求項１記載の方法。
10. （ＩＩ）が、次式の化合物ＩＩＩ
    

    

    
    をカリウムヘキサメチルジシラジド（ＫＨＭＤＳ）と反応させることによって製造される、請求項２又は３に記載の方法。
11. 前記のＯが保護された糖Ｉを脱保護し、及び前記アシル基を加水分解して６−アミノプリンヌクレオシドを製造する、請求項１記載の方法。
12. 前記６−アミノプリンヌクレオシドが２−クロロ−２’−Ｆ−２’−デオキシ−アラ−アデノシンである、請求項１１記載の方法。
13. 前記６−アミノプリンヌクレオシドが２−クロロ−２’−Ｆ−ジデオキシ−アラ−アデノシンである、請求項１１記載の方法。
14. 前記６−アミノプリンヌクレオシドが２’−Ｆ−ジデオキシ−アラ−アデノシンである、請求項１１記載の方法。
15. 前記６−アミノプリンヌクレオシドが２−フルオロ−アラ−アデノシンである、請求項１１記載の方法。
16. 前記６−アミノプリンヌクレオシドが２−デオキシアデノシンである、請求項１１記載の方法。
17. 前記６−アミノプリンヌクレオシドが２−クロロ−２’−デオキシアデノシンである、請求項１１記載の方法。
18. 前記６−アミノプリンヌクレオシドが３’−デオキシアデノシンである、請求項１１記載の方法。
19. 前記６−アミノプリンヌクレオシドが２−クロロ−３’−デオキシアデノシンである、請求項１１記載の方法。
20. 前記６−アミノプリンヌクレオシドが２’−Ｆ−２’−デオキシ−アラ−アデノシンである、請求項１１記載の方法。