JP2006291359A - 物質の電気化学的配置方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】保護された化学的官能基を有する分子に近接する電極をその表面に有する基質を準備する工程、該分子の保護された化学的官能基を脱保護できる電気化学的試剤を生成させるのに充分に該電極に電位を適用する工程、および脱保護された化学的官能基をモノマーまたは予め形成された分子と結合する工程を含んでなる方法。
【選択図】なし
Description
本発明は、基質(substrate、(基材))上の選択された部位において物質を合成し及び配置することに関する。特に、本発明は、基質上の選択された部位において化学物質のモノマーの独立したシーケンスを提供するための方法に関する。
既知のターゲット分子と、既知のターゲット分子に選択的に結合することが知られている種々の分子、すなわちリガンドとの結合能(binding capability)を測定するためのアッセイとしては多くのものが知られている。そのような実験から入手し得る情報は、利用し得るリガンドの種類及び数によって制限されることがしばしばある。新たなリガンドを見出すことを目的とする研究が続けられている。新しいリガンドは、偶然によって、又は分子構造を解明するための技術の適用によって、又は分子構造と結合活性との間の関係の系統だった分析によって見出されることがある。
本発明のさらに別の目的は、コンビナトリアル化学において使用するために非常に近接して電極を配置することを可能にする多電極を有する分離した純粋なポリマーまたはオリゴヌクレオチドまたはDNA合成用の基質を提供することにある。本発明のさらに他の目的は、研究、産業、商業および治療の使用のために有用である物質の機能的ゲノム、診断、遺伝子スクリーニング、薬品発見およびスクリーニングにおいて使用でき、ポリマーまたはDNA合成法の自動化を可能にし、非常に接近して電極の多電極アレイを有する分離したおよび純粋なポリマーまたはDNA合成用の基質を提供することにある。
上記目的は、基質上の特定位置で物質を電気化学的に配置する方法であって、
少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する少なくとも1つの分子に近接する少なくとも1つの電極をその表面に有する基質を準備する工程、
該分子の保護された化学的官能基の少なくとも1つを脱保護できる電気化学的試剤を生成させるのに充分に該電極に電位を適用する工程、
脱保護された化学的官能基をモノマーまたは予形成分子と結合する工程
ことを含んでなる方法
を提供することによって本発明にしたがって達成される。
本発明は、基質上に別個に形成されたポリマーのアレイを電気化学的に合成する方法であって、
基質表面に近接している電極のアレイと接触して緩衝液またはスカベンジ液を配置する工程、該表面は、それに付着している少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する1つまたはそれ以上の分子に隣接しており、
該分子の少なくとも1つにおける少なくとも1つの保護された化学的官能基を選択的に脱保護する工程、
少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する第1モノマーを、該分子の1つまたはそれ以上の脱保護された化学的官能基に結合する工程、
少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する該分子の他または結合した分子における化学的官能基を選択的に脱保護する工程、
少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する第2モノマーを、該他の脱保護分子または結合分子の脱保護化学的官能基に結合する工程、
所望の長さの少なくとも2つの分離したポリマーが基質表面に形成されるまで、結合保護モノマーまたは結合保護分子における化学的官能基の選択的脱保護、および該脱保護化学的官能基への追加的モノマーの続いての結合を繰り返す工程
を含んでなる方法をも提供する。
別の要旨によれば、本発明は、
基質上に別個に形成されたオリゴヌクレオチドのアレイを電気化学的に合成する方法であって、
基質表面に近接している電極のアレイと接触して緩衝液またはスカベンジ液を配置する工程、該表面は、それに付着している少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する1つまたはそれ以上の分子に隣接しており、
該分子の少なくとも1つにおける少なくとも1つの保護された化学的官能基を選択的に脱保護する工程、
少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する第1ヌクレオチドを、該分子の1つまたはそれ以上の脱保護された化学的官能基に結合する工程、
少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する該分子の他のまたは結合分子における化学的官能基を選択的に脱保護する工程、
少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する第2ヌクレオチドを、該他の脱保護された分子または結合分子の脱保護化学的官能基に結合する工程、
所望の長さの少なくとも2つの分離したオリゴヌクレオチドが基質表面に形成されるまで、保護された結合ヌクレオチドまたは保護された結合分子における化学的官能基の選択的脱保護、および該脱保護化学的官能基への追加的ヌクレオチドの続いての結合を繰り返す工程
を含んでなる方法をも提供する。
CMOSスイッチング回路は、CMOSトランジスタスイッチへのそれぞれの電極の接続を包含する。スイッチは、電子アドレスシグナルを共通ブスへ、それぞれの電極に伴ったSRAM(スタティクランダムアクセスメモリ)回路に送ることによってアクセスされる。スイッチがオンの状態にある場合に、電極は電源に接続される。これは、操作の好ましいモードである。
背景
エンドルフィンは、脳中でアヘン剤受容体に結合する、例えば約20〜40のアミノ酸を含む天然の小ペプチドである。エンドルフィンの活性の大部分は、ペプチドの最後の5つのアミノ酸によるものであることが知られている。これらの末端ペンタペプチドが、いわゆるエンケファリンである。
Leu−エンケファリンエピトープを検出するための免疫蛍光法は、標準検出プロトコルに従う。例えば、F.M.Ausubel et.al., Short Protocols in Molecular Biology, 第3版、Unit 14,14-23ff頁(1995)参照。このアセイは、第1抗体、例えば3-E7単クローン抗体、および第1抗体の源種に特異的な第2抗体蛍光色素複合体、例えばヒツジ抗マウス蛍光色素複合体を必要とする。3−E7抗体は、Leu−エンケファリンに結合するβ−エンドルフィンに対するマウス単クローン抗体である。この技術のための両方の抗体は、Boehringer, Mannheim Biochemicals Indianapolis, Indianaから得られる。
さらに、3-E7単クローン抗体に関する情報は、Meo,Tommaso et al., “Monoclonal antibody to the message sequence Try-Gly-Gly-Phe of opioid peptides exhibits the specificity requirements of mammalian opioid receptors", Proc. Natl. Acad. Sci USA 80, pps.4084-4088(1983)参照。
図6に示されるように、10×10白金電極アレイを使用する。カラム1および10は、対電極として使用される。アレイの活性カラムは、カラム2、3、5、6および7である。カラム4、8および9はこの合成において活性化されていない。
アレイの表面は、半導体製造工程において適した条件下の二酸化ケイ素の蒸着によってアレイに適用される制御多孔性ガラス(CPG)から形成される透過膜層によって変性される。CPGは、イオンを透過できる化学的に不活性な膜を形成する。この膜は、クロロメチルシランによるシラン処理によって官能化される。クロロメチルシラン基は、さらに、10のエチレングリコール部分を有するエチレングリコールリンカー分子によって、10のエチレングリコール部分およびそれぞれの末端の2つのアミノ基を有する分子とシラン処理されたCPG膜を反応することによって変性される。この膜は、アミン基によって官能化されたアレイの表面を覆う層を提供し、アミン基は、シラン部分によってCPGマトリックに付着する。ジアミノエチレングリコール分子は、形成されるエピトープ分子と膜の間のリンカー分子(スペーサー基)として作用する。
官能化CPG膜被覆電極アレイを、カップリング剤、例えば限定しないが、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)またはジイソプロピルカルボジイミドを含有するベンジルオキシカルボニル(CBZ)保護L−ロイシンのDMF溶液に、室温で、約2時間曝露した。この曝露によって、エチレングリコールリンカー分子によって膜層に付着したCBZ−保護L−ロイシン部分によって完全に被覆されたアレイ被覆CPG膜層を得る。この部分被覆膜層は、図7に示す。これは、エピトープ分子が構築された分子の床である。
部分被覆膜層を次いで、pH7.4を有する0.1Mリン酸緩衝水溶液によって3回洗浄した。
電気化学的に発生した試剤(プロトン)を使用する保護アミノ酸からCBZ保護基の除去、つまり脱保護は、以下のとおり行う。
図6の電極アレイについて、予め条件を整える工程を行う:カラム2、3、5、6および7を、対電極として作用するカラム1および10に関して負方向にバイアスをかける。このシステムに参照電極はない。電位差は、約3ボルトであり、この電圧を約10秒間印加する。この予め条件を整える工程において、ヒドロキシルイオンが負バイアスを有する電極に形成され、プロトンが正バイアスを有する対電極で形成される。この予め条件を整える工程において、さらにプロトンが負バイアスを有する電極で水素分子に還元される。白金電極は、塊状金属における水素分子のいくらかを吸収し、保持する。
予め条件を整える工程に続いて、バイアスを次いで逆にする。カラム1および10の電極(対電極)をカラム2、3、5、6、および7に関して負方向にバイアスする。電位差は、約2.6ボルトであり、この電圧を、約3秒間印加する。この工程において、予め条件を整える工程の間に白金電極に吸収された水素分子の酸化および水の加水分解から、プロトンが正バイアスを有する電極に形成される。予め条件を整える工程およびこの後の工程の結果として、CBZ保護基は、カラム2、3、5、6および7において電極でロイシンアミノ酸部分から除去される。
これらの2工程の結果、図8に示されるように、これらの部位(カラム2、3、5、6および7)でロイシンに付着したままである脱保護された反応性アミン残基が得られる。
CBZ−L−フェニルアラニンを脱保護ロイシン基にカップリングするための反応性アミン部分被覆膜を調製するために、以下の工程を行う:
反応性アミン部分被覆膜を含有する電極アレイを純DMFによって2回洗浄する。電極アレイを次いで、CBZ−L−フェニルアラニンおよびカップリング剤、例えばDCCを含有するDMF溶液に室温で約2時間曝露する。この工程によって、ロイシンおよびフェニルアラニンのCBZ保護ジペプチドによって変性されたカラム2、3、5、6および7の電極を得た。これは図9に示される。
脱保護およびカップリング工程は、次いでカラム3、5、6および7で繰り返す。つまり、電極アレイを、pH7.4を有する0.1Mリン酸緩衝水溶液に再び曝露する。次いで、電極アレイを室温で約2時間、CBZ保護グリシンおよびカップリング剤のDMF溶液に曝露する。この結果、図10に示されるように、CBZ−保護トリペプチドグリシン−フェニルアラニン−ロイシン(G−F−L)によって修飾されたカラム3、5、6および7の電極を得た。
脱保護およびカップリング工程は、次いでカラム5、6および7で繰り返す。つまり、電極アレイを、pH7.4を有する0.1Mリン酸緩衝水溶液に再び曝露し、次いで、電極アレイを室温で約2時間、CBZ−保護グリシンおよびカップリング剤のDMF溶液に曝露する。この結果、CBZ−保護テトラペプチドグリシン−グリシン−フェニルアラニン−ロイシン(G−G−F−L)によって修飾されたカラム5、6および7の電極を得た。
次いで、脱保護工程をカラム2、3、5および6で、予め条件を整える工程なしで繰り返し、コンビナトリアル配列の末端アミノ酸からCBZ保護基を除去した。この製造工程は以下の配列を作成する:
カラム1および10:保護Leu−エンケファリンエピトープによる修飾
(これらが対電極である)
カラム2:脱保護ジペプチドF−Lによる修飾
カラム3:脱保護トリペプチドG−F−Lによる修飾
カラム4、8および9:CBZ−保護ロイシンアミノ酸による修飾
カラム5:脱保護テトラペプチドG−G−F−Lによる修飾
カラム6:脱保護Leu−エンケファリンエピトープによる修飾
カラム7:CBZ−保護Leu−エンケファリンエピトープによる修飾
修飾電極アレイ、つまり、10の修飾カラムを有する電極アレイを、上記のLeu−エンケファリンエピトープ検出技術によって、3−E7単クローン抗体に曝露し、その後、ヒツジ抗マウス蛍光色素複合体に曝露した。次いで、エピフルオレセント顕微鏡を使用して電極アレイを調べた。予想された結果が、図12および13に示される。図12および13に示されるように、活性Leu−エンケファリンエピトープは、カラム6の電極に最も近接している(カラム6は、脱保護Leu−エンケファリンエピトープによって修飾されている唯一のカラムである。)。
注:合成は、対電極(カラム1および10)で進行する。というのは、それぞれの予め条件を整える(脱保護)工程の間に対電極でプロトンが発生するためにである。予め条件を整える工程を最終の脱保護工程では行わないため、最終工程では、プロトンを対電極に発生せず、保護されたLeu−エンケファリンエピトープが対電極に生成され、抗体と蛍光色素複合体の曝露によって反応しない。
背景
DNAのコンビナトリアル合成のためのモノマーユニットは、いわゆるホスホラミダイトである。ホスホラミダイトは、ホスホジエステル結合によって1本鎖核酸ポリマーに一緒に結合する。リンは、合成の間シアノエチルエーテル部分によって保護されているので、結合は、ホスホトリエステル結合である。シアノエチル基は、合成末端で塩基によって除去でき、ホスホジエステル結合を与える。ホスホラミダイトは、いわゆる3’および5’末端である2つの末端を有する。1つのホスホラミダイトの3’末端が、他の5’末端とカップリングする。通常3’末端は固体支持体に付着され、5’末端は他のホスホラミダイトによって変性され、合成サイクルを開始する。5’末端は、ジメチルトリチル(DMT)と呼ばれる分子によって保護されうるヒドロキシル基である。DMT基は、酸に不安定な保護基である。
DNAは、天然の多くは、有名な二重らせん構造を有する「二重らせん」形態で見られる。このことは、DNAの2つの1本鎖がヌクレオシド塩基の間の相互作用によってともに結合することを意味する。ヌクレオシド塩基Tは、ヌクレオシド塩基Aと相互作用して、A−T結合を形成する。ヌクレオシド塩基Cは、ヌクレオシド塩基Gと相互作用して、C−G結合を形成する。A−TおよびC−G相互作用は、唯一安定な相互作用であり、他の組合せは弱い。A−TまたはC−Gでない結合は生じることがあるが、いわゆるミスマッチである。DNAの2つの相補的な1本鎖がともに生じて、二重らせんを形成する場合、これをハイブリダイゼーションという。二重らせんのDNAの1本鎖がばらばらである場合、二重らせんDNAは変性されているという。DNA二重らせんは、加熱および/または低いイオン強度の水溶液に曝露されたとき、典型的に変性する。
電極アレイを最初にアクリレート/ポリビニルアルコールコポリマー層または膜によって変性する。コポリマー層は、ホスホラミダイトに対して反応性である、数多くのペンダントヒドロキシル基を含有する。次いで、ポリマー修飾電極アレイを、無水のアセトニトリル中で0.05Mの濃度のテトラゾールおよびDMT−保護シチジンホスホラミダイトに室温で30秒間曝露する。FOD保護スキームを使用して、シトシン塩基およびこの実施例で使用される他の塩基を保護する(FOD保護基は、環外アミンの汚染に対して最も良好な保護を提供する。)。次いで、このアレイを、無水のアセトニトリルで洗浄する。表面上の未反応のヒドロキシル基を、無水酢酸および1−メチルイミダゾールの無水のアセトニトリル溶液に30秒間曝露することによってキャップする。この結果、DMT保護されたC塩基ユニットによってあらゆる場所で修飾させた表面が得られる。
この方法を第2、第3、第4などに選択された部位に繰り返し、アレイの選択された部位に4つの異なるフォーティンマーオリゴヌクレオチドをコンビナトリアル合成する。アレイを次いで0.1M水酸化アンモニウム水溶液に50℃で1時間曝露する。ホスホトリエステル上のシアノエチル保護基およびFOD保護基を、ヒドロキシルイオンによって除去する。得られるアレイは、ポリマー膜に共有結合したオリゴマー核酸の1本鎖からなる
コンビナトリアルアレイの忠実度は、アレイ上に合成されたオリゴヌクレオチドと相補的である4つの異なる蛍光標識オリゴヌクレオチドプローブを使用して試験する。アレイをpH7.2で0.1Mリン酸ナトリウム緩衝溶液中の蛍光標識オリゴヌクレオチドプローブの第1の100nM溶液に室温で30分間曝露する。アレイを次いでpH7.2の0.1Mリン酸ナトリウム緩衝溶液で3回洗浄する。アレイを次いで、エピフルオレセント顕微鏡で調べる。明るいスポットが、オリゴヌクレオチドが存在する第1の領域で見られた。オリゴヌクレオチドプローブおよびその相補体が実際的に交雑することを確かめるために、アレイを70℃で5分間脱イオン水で数回洗浄する。エピフルオレセント顕微鏡によるアレイの再調査は暗い領域を明らかにする。これは、プローブが相補体と交雑することを意味し、その結果は非特異的な吸収のよるものではない。アレイは、pH7.2の0.1Mリン酸ナトリウム緩衝溶液中の、他の蛍光標識オリゴヌクレオチドプローブの第2の100nM溶液に曝露する。その後、アレイを洗浄し、エピフルオレセント顕微鏡で調べ、次いで非特異的吸収を調べる。明るいスポットが、ヌクレオチドプローブが合成する第2の領域で見られる。この手順を第3および第4のオリゴヌクレオチド配列について繰り返す。コントロール領域は蛍光標識プローブに結合せず、アセイにおいて、いくつかの点で明るくなる。
以下の実施例および比較例のために、結果を記録し、さまざまな条件下で、それぞれの電極アレイチップをデジタル的に捕らえたビデオ顕微鏡写真の形態で再現する。
結果の記録−写真撮影
顕微鏡写真は、Pulnix TM-745集積CCDカメラを備えたOlympus BX60顕微鏡を使用して撮影する。Pentium(登録商標)ベースのパーソナルコンピーターによって作動するData Translation DT3155ビデオ捕獲カードによってカメラは制御され、イメージが撮られている。DT3155カードを制御するソフトウェアは、当業者によって容易に入力することができる。
顕微鏡写真の多くは、ほぼ16の電極をそれぞれのイメージで見ることを可能にする10×対物レンズで撮影されるが、評価の目的によって、関心のある電極活性上の焦点に、イメージはときどきトリミングされる。ときには、4×対物レンズも使用される。2種の顕微鏡写真が撮影される。数枚の写真は、白光光源を使用して撮影される。これらの場合において、電極は反射する。例えば、図14参照。顕微鏡写真の大部分は、エピフルオレセント光源を使用して撮影される。これらの場合、電極は被覆されていない場合、すなわち、蛍光被覆が存在しない場合、電極の金属、例えば白金が存在する蛍光を消滅させるので、電極は顕微鏡写真において暗くみえる。
エピフルオレセント顕微鏡は、チップ表面に鉛直な経路に沿って、チップ表面上の位置から電極アレイチップを照射することを含む。照射ビームは、フィルターを通過して、使用される蛍光色素の励起波長で中央となる狭いバンドを得る。以下の実施例および比較例で使用される蛍光色素は、595nmで最大吸収を有するTexas Redであった。この色素は、ほぼ595nmの光で励起するときに615nmで最大発光を有する蛍光を放射する。Texas Redは、Molecular Probes, Eugene Oregonから得ることができる。Olympus BX60顕微鏡のフィルターは、励起光がCCDカメラの光学検出器に移動することを妨げる。Olympus BX60顕微鏡は、補助技術認識計器モジュールを備え、Texas Red色素を使用してエピフルオレセント顕微鏡法を行う。
白光源およびエピフルオレセント光源を使用して撮影された例となる顕微鏡写真は、図14〜16に示す。図14および15は、非被覆電極アレイチップを示し、図16は、蛍光膜で被覆された電極アレイチップを示す。
以下の実施例および比較例で作成されるおよび使用されるチップは、100μmの直径白金電極の16(x方向)×64(y方向)を有する長方形デバイスである。これらのアレイにおける電極の総数は1024であった。チップの寸法は、約0.5cm(x方向)×2.3cm(y方向)であり、チップの全表面積は約1cm2であった。それぞれのアレイの電極は、電極の中心から測定して、x方向において約250μm離れ、y方向において約350μm離れていた。
アレイのそれぞれの電極は、SRAMセル(静的ランダムアクセスメモリ)、アレイの電気的回路を独立してアドレスする標準技術認識方法を使用して、独立してアドレスすることができる。SRAMセルは、電極に付随する電気回路において電極の隣に位置される。アレイ中のそれぞれの電極は、電極に付着した4つに分離した切り替えできる電圧線を有し、アレイ中のそれぞれの電極は、1電圧線から他の電圧線に独立して切り替えできる。電圧は、任意であり、外部からの電圧源によって設定された。
チップは、ハイブリッドデジタル/アナログの超大規模集積回路(VLSI)を使用して3μ工程によって作成された。当業者には、そのような工程は周知であり、本発明において使用するためのチップを容易に調製することができる。Mead, C., Analog VLSI and Neural Systems, Addison-Wesley(1989)参照。使用される回路は、CMOS(相補的な金属/酸化物ケイ素)に基づき、当業者に周知である。
背景
16×64白金電極を含んでなる上記の電極アレイチップの1つを本実施例で使用した。上記のように、13のハードワイヤ接続した電極を有するチップは、チップの長いサイドの1末端で局在化した。しかしながら、これらのハードワイヤ接続した電極は本発明には含まれない。
電気化学的に発生した試剤を使用する選択的な脱保護および局在化を示すための本実施例で使用されるモデル化学的システムは、トリチルリンカー分子によって電極アレイチップを覆う膜に、Vector Laboratories, Burlingame, Californiaから得られる蛍光標識されたストレプトアビジン分子、周知のさまざまな種のアビジンを付着することを必要とする。使用される被覆膜は、ポリサッカリドベースであった。使用されるトリチルリンカー分子は、酸に不安定であり、つまりプロトンに不安定であり、プロトンの存在下で被覆膜から分離して、付着した蛍光標識ストレプトアビジン分子を運ぶ。さらに好ましくは、使用されるトリチルリンカー分子は、Perseptive Biosystems, Framingham, Massachusettsから得られる環外活性エステルによって修飾された4,4’ジメトキシトリチル分子であった。
分子の付着するチップの作成
電極に近接して合成および/または脱保護のための電極アレイチップの表面に、分子、特にトリチルリンカー分子が付着できるように、チップをポリサッカリドベースの物質の被覆膜によって被覆および/または修飾した。特に、ポリガラクトシドを、本実施例における被覆膜の物質として使用した。ポリガラクトシド膜は、チップ上に浸漬被覆した。
電極アレイチップをポリサッカリド膜で被覆した後、トリリンカー分子をチップに付着した。本実施例で使用されたトリチルリンカー分子は、環外活性エステルによって変性された4,4’−ジメトキシトリチル分子であり、特にその分子は、N−スクシンイミジル−4−[ビス−(4−メトキシフェニル)−クロロメチル]−ベンゾエートであった。この分子の合成および使用は、A Versatile Acid-Labile Linker for Modification of Synthetic Biomoleucules, by Brian D. Gildea, James M. Coull and Hubert Koester, Tetrahedron Letters, Volume 31, No.49, pgs 7095-7098(1990)に記載されている。
トリチルリンカー分子は、0.5Mのt-ブチルアンモニウム過塩素酸塩、0.75Mの2,4,6−コリジンおよび0.2Mのトリチルリンカーを含有するDMF溶液へのポリサッカリド膜被覆チップの浸漬によってポリサッカリド膜に付着される。ポリサッカリド膜被覆のチップをDMFリンカー溶液に浸漬することを周囲温度で30分間続けた。しかしながら、当業者に既知のいずれかの方法による浸漬または被覆は許容できる。トリチルリンカー被覆チップを次いでDMFで洗浄し、残留試剤を除去した。次いで、トリチルリンカー被覆チップを、pH8.0に調節した0.1Mリン酸ナトリウム緩衝水溶液中で洗浄し、乾燥した。
次いでトリチルリンカー被覆チップを1mLにつき50mgの濃度を有する蛍光色素(Texas Red)標識ストレプトアビジン分子の水溶液に浸漬し、周囲温度で1時間この溶液中でそのままにした。浸漬の間、リンカー分子が誘導化され、蛍光色素標識ストレプトアビジン分子がリンカー分子に付着した。
蛍光色素標識ストレプトアビジン分子を有するチップを、pH8.0に調節した0.1Mリン酸ナトリウム緩衝水溶液によって洗浄して、残留している試剤を除去して、乾燥した。チップは、本発明の電気化学的工程、すなわち選択的脱保護工程の使用のための準備ができていた。
蛍光標識ストレプトアビジン分子への作成したチップの曝露に続いて、電流および電圧の印加より前であるが、アレイにおける電極は、蛍光によってすべて明るい。というのは、電極に近傍の膜は、トリチルリンカーによって膜に結合する蛍光標識ストレプトアビジン分子を含むからであった。これの顕微鏡写真は、図19aに示す。
選択的脱保護工程を行うために、作成したチップを、試剤の電気化学的発生を可能にする0.05Mリン酸ナトリウム緩衝水溶液に浸漬した。約10分間、選択電極に2.8ボルトの電位差を印加し(チャッカーボードパターンにおいて交替する)、アノードにプロトンを電気化学的に発生させた。
プロトンを電気化学的に発生した後、アノードは、暗くなった。というのは、アノードに近接して予め結合したトリチルリンカーは、アノードから解離し、蛍光標識ストレプトアビジン分子が除去されるからである。チェッカーボードパターンにおいてアノードで生じて、カソードで生じない程度は、アレイ中の電極間で生じる化学的クロストークの尺度である。つまり、化学的クロストークが生じる場合、カソードは、暗くなる。というのは、プロトンが移動して、カソードでトリチルリンカーを解離するからである。
つまり、エピフルオレセント顕微鏡法の下において、明るい電極(カソード)は、電極でリンカー分子に結合したTexas Red標識ストレプトアビジン分子の存在を示し、暗い電極(アノード)は、電極でリンカー分子に結合したTexas Red標識ストレプトアビジン分子の欠落を示す。図20および21において、このことは示され、図20は、2秒の集積時間で4×対物レンズを使用して撮影し、図21は、500ミリ秒の集積時間で10×対物レンズを使用して撮影した。
チップの乾燥の後に、脱保護工程の終了後に電極アレイの顕微鏡写真を撮影し、図20および21に再現した。これらの図に示されるように、選択的な脱保護は、本発明の方法を使用することによって達成された。これらの図に示されるように、チェッカーボードパターンの繰り返しを行い、本発明の方法がアノードで発生するプロトンの局在化を達成し、カソードへのこれらのプロトンの移動を妨げることを示した。暗い領域(アノード)ははっきりと示され、はっきりと示される明るい領域(カソード)と区別される。顕微鏡写真で示されるはっきりと分けられたチェッカーボードパターンは、脱保護工程の間に化学的クロストークが全くまたはほとんど生じないことを示した。
本発明によって作成させた2つの電極アレイチップを使用して、1つのチップを、緩衝溶液を使用する本発明による選択的脱保護工程を使用して処理し、第2チップを、Southern (WO93/22480,1993年11月11日出願)の実施例に使用される電解質を本発明の緩衝溶液に置き換えることだけで変更した選択的脱保護工程を用いて処理した。
電極アレイを使用するよりむしろ、この対比は、電極アレイチップの面に見出される数個のハードワイヤ接続した電極上で行った。図17は、図14と同じ条件で顕微鏡写真を撮影したが、本実施例に使用されるハードワイヤ接続した電極を示した。
ポリサッカライド膜でチップを被覆し、トリチルリンカー分子を膜に付着する工程を実施例3で使用した上記手順にしたがって行った。
蛍光色素ラベルストレプトアビジン分子の付着および脱保護工程は実施例3にしたがって行ったが、試剤の電気化学的発生を可能にするように20mMのリン酸ナトリウム緩衝水溶液を、実施例3で使用した0.05M溶液に代えて使用した。選択電極間に適用した電圧は2.8Vであり、約30秒間にわたって適用した。
図22は、T1,T2およびT4としてラベルした、本方法に含まれるハードワイヤ接続された電極を示す。この方法において、T1はカウンター電極、即ちカソードであり、T2およびT4は電流または電圧の適用時にプロトンが発生するアノードである。図22に示す電極には電圧は適用されていない。
図23は、蛍光ラベルストレプトアビジン分子による誘導体化または結合の後の同様の電極である。示すように、電極T2およびT4は明るく、これら電極のそれぞれに隣接するリンカー分子に結合したTexas Redラベルしたストレプトアビジンの存在を示す。
図24は、アノードでのプロトンの電気化学的発生を生じさせる電圧の適用およびこれら位置でトリチルリンカーの結果的な解離の後のアノードT2およびT4の条件を示す。一旦解離が生じると、蛍光ラベルしたストレプトアビジン分子が洗浄除去され、アノードを暗くする。顕著なことには、アノードT2およびT4は、近隣の電極よりも暗く、化学的混信が生じていないことを示している。
図23および図24に示すように、局在化および選択的脱保護が、望むように、アノードT2およびT4において達成される。
本発明に従った緩衝液を使用することに代えて、Southenの実施例に開示されているように、アセトニトリル溶媒中で1%のトリエチルアンモニウムスルフェート電解質の存在下で脱保護を行うこと以外は、本発明の上記方法と同様に全ての工程を行った。
示すラベルした電極T1およびT4において、電極T1はカソードを示し、電極T4はアノードを示す。
Claims (15)
- 基質上の特定位置で物質を電気化学的に配置する方法であって、
少なくとも1つの保護された化学的官能基を有する少なくとも1つの分子に近接する少なくとも1つの電極をその表面に有する基質を準備する工程、
該分子の保護された化学的官能基の少なくとも1つを脱保護できる電気化学的試剤を生成させるのに充分に該電極に電位を適用する工程、
脱保護された化学的官能基をモノマーまたは予形成分子と結合する工程
を含んでなる方法。 - 基質の表面で電極と接触して緩衝液またはスカベンジング液を配置して、電気化学的に生成した試剤が電極の位置から出て行くのを防止することをさらに含んでなる請求項1に記載の方法。
- 該緩衝液が、アセテートバッファ、ボレートバッファ、カーボネートバッファ、シトレートバッファ、グリシンバッファ、HEPESバッファ、MOPSバッファ、ホスフェートバッファ、TRISバッファおよびKI溶液から選択されたものである請求項2に記載の方法。
- 該緩衝液が少なくとも0.01mMの濃度で存在する請求項2に記載の方法。
- 該緩衝液の濃度が0.1〜100mMである請求項2に記載の方法。
- 該モノマーまたは予形成分子が、分子の脱保護された化学的官能基との結合が生じる位置と異なった位置で少なくとも1つの他の保護された化学的官能基を有する請求項1に記載の方法。
- 該モノマーがアミノ酸である請求項1に記載の方法。
- 該予形成分子がタンパク、核酸、ポリサッカライド、ポルフィリンから選択される請求項2に記載の方法。
- 該分子がリンカー分子またはモノマーである請求項1に記載の方法。
- 該分子が、該基質の表面に直接に付着しているか、リンカー分子を介して該基質の表面に付着しているか、または該基質に重なる物質の層に付着している請求項1に記載の方法。
- 該リンカー分子が、電気化学的に生成した試剤によって開裂可能である基を有しており、該開裂可能な基が基質から物質の除去を可能にする請求項9に記載の方法。
- 該保護された化学的官能基が、酸または塩基可変性の保護基によって保護されている請求項1に記載の方法。
- 該少なくとも1つの電極が電極のアレイを有してなる請求項1に記載の方法。
- 電極の該アレイが少なくとも100個の電極を有してなる請求項13に記載の方法。
- モノマーまたは予形成分子の他の保護された化学的官能基を脱保護し、脱保護したモノマーまたは予形成分子に他のモノマーまたは予形成分子を結合することをさらに含んでなる請求項6に記載の方法。
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Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011506074A (ja) * | 2007-12-13 | 2011-03-03 | スヴェン オスカルソン、 | 粒子の部分的誘導体化 |
CN103945931A (zh) * | 2011-09-26 | 2014-07-23 | 基因技术股份公司 | 高效的小体积核酸合成 |
US10407676B2 (en) | 2014-12-09 | 2019-09-10 | Life Technologies Corporation | High efficiency, small volume nucleic acid synthesis |
JP2020002095A (ja) * | 2018-06-29 | 2020-01-09 | 国立大学法人東京工業大学 | 電気化学的手法による修飾タンパク質の製造方法 |
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Families Citing this family (108)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6017696A (en) | 1993-11-01 | 2000-01-25 | Nanogen, Inc. | Methods for electronic stringency control for molecular biological analysis and diagnostics |
US5605662A (en) | 1993-11-01 | 1997-02-25 | Nanogen, Inc. | Active programmable electronic devices for molecular biological analysis and diagnostics |
US6051380A (en) * | 1993-11-01 | 2000-04-18 | Nanogen, Inc. | Methods and procedures for molecular biological analysis and diagnostics |
US7172864B1 (en) | 1993-11-01 | 2007-02-06 | Nanogen | Methods for electronically-controlled enzymatic reactions |
US6306348B1 (en) * | 1993-11-01 | 2001-10-23 | Nanogen, Inc. | Inorganic permeation layer for micro-electric device |
US7314708B1 (en) * | 1998-08-04 | 2008-01-01 | Nanogen, Inc. | Method and apparatus for electronic synthesis of molecular structures |
US20040086917A1 (en) * | 1995-09-27 | 2004-05-06 | Nanogen, Inc. | Methods for electronic fluorescent perturbation for analysis and electronic perturbation catalysis for synthesis |
US20030050437A1 (en) * | 1998-01-05 | 2003-03-13 | Montgomery Donald D. | Electrochemical solid phase synthesis |
US6093302A (en) * | 1998-01-05 | 2000-07-25 | Combimatrix Corporation | Electrochemical solid phase synthesis |
AU4833799A (en) * | 1998-06-24 | 2000-01-10 | Therasense, Inc. | Combinatorial electrochemical syntheses |
FR2789401B1 (fr) * | 1999-02-08 | 2003-04-04 | Cis Bio Int | Procede de fabrication de matrices de ligands adresses sur un support |
WO2000051721A2 (en) * | 1999-03-01 | 2000-09-08 | Combimatrix Corporation | Combinatorial chelator array |
AU3883300A (en) * | 1999-03-11 | 2000-09-28 | Combimatrix Corporation | Microarrays of peptide affinity probes for analyzing gene products and methods for analyzing gene products |
EP1185363B1 (en) * | 1999-03-11 | 2005-06-15 | Combimatrix Corporation | Self assembling arrays |
FR2796571B1 (fr) * | 1999-07-19 | 2001-09-14 | Bio Merieux | Dispositif d'analyse avec une biopuce |
AU7090600A (en) * | 1999-09-02 | 2001-03-26 | Corning Incorporated | Porous substrates for dna arrays |
WO2001023082A2 (en) * | 1999-09-30 | 2001-04-05 | Nanogen, Inc. | Biomolecular attachment sites on microelectronic arrays |
CN1223851C (zh) * | 1999-10-20 | 2005-10-19 | 内田和彦 | 基因检测芯片、检测装置及检测方法 |
US6303082B1 (en) * | 1999-12-15 | 2001-10-16 | Nanogen, Inc. | Permeation layer attachment chemistry and method |
WO2001073125A2 (en) * | 2000-03-24 | 2001-10-04 | Lyles Mark B | High throughput screening array containing porous material |
US8568766B2 (en) | 2000-08-24 | 2013-10-29 | Gattadahalli M. Anantharamaiah | Peptides and peptide mimetics to treat pathologies associated with eye disease |
DE10156329A1 (de) * | 2001-07-17 | 2003-02-06 | Frieder Breitling | Verfahren und Anordnung zum Anbringen von in Transportmittel immobilisierten Substanzen sowie Monomerpartikel |
US10539561B1 (en) | 2001-08-30 | 2020-01-21 | Customarray, Inc. | Enzyme-amplified redox microarray detection process |
US6960298B2 (en) * | 2001-12-10 | 2005-11-01 | Nanogen, Inc. | Mesoporous permeation layers for use on active electronic matrix devices |
FR2834383B1 (fr) | 2001-12-27 | 2004-02-13 | Commissariat Energie Atomique | Procede de depot selectif de matiere sur des electrodes de biocapteurs ou de puces realises a partir d'un meme substrat |
US7563600B2 (en) | 2002-09-12 | 2009-07-21 | Combimatrix Corporation | Microarray synthesis and assembly of gene-length polynucleotides |
WO2004027384A2 (en) * | 2002-09-17 | 2004-04-01 | Perkinelmer Life Sciences, Inc. | Real-time detection of nucleic acid reactions |
EP1599173B1 (en) | 2002-11-13 | 2017-02-22 | The Uab Research Foundation | Synthetic single domain polypeptides mimicking apolipoprotein e and methods of use |
US7217396B2 (en) * | 2003-05-05 | 2007-05-15 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Microfabricated micro fluid channels |
US20040228962A1 (en) * | 2003-05-16 | 2004-11-18 | Chang Liu | Scanning probe microscopy probe and method for scanning probe contact printing |
FR2855269B1 (fr) * | 2003-05-21 | 2007-06-08 | Commissariat Energie Atomique | Dispositif et procedes d'accrochage/decrochage d'une cible ou d'un objet present dans un echantillon |
US7416911B2 (en) * | 2003-06-24 | 2008-08-26 | California Institute Of Technology | Electrochemical method for attaching molecular and biomolecular structures to semiconductor microstructures and nanostructures |
US7723099B2 (en) * | 2003-09-10 | 2010-05-25 | Abbott Point Of Care Inc. | Immunoassay device with immuno-reference electrode |
WO2005089110A2 (en) * | 2004-02-27 | 2005-09-29 | President And Fellows Of Harvard College | Polynucleotide synthesis |
JP2005285980A (ja) * | 2004-03-29 | 2005-10-13 | Sanyo Electric Co Ltd | 半導体装置および半導体装置の製造方法 |
US20050239112A1 (en) * | 2004-04-01 | 2005-10-27 | Migenix, Inc. | Methods and processes for attaching compounds to matrices |
CA2513340A1 (en) * | 2004-08-25 | 2006-02-25 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Reusable substrate for dna microarray production |
JP4742544B2 (ja) * | 2004-09-08 | 2011-08-10 | 凸版印刷株式会社 | 遺伝子チェック装置及び方法 |
US7718579B2 (en) * | 2004-09-13 | 2010-05-18 | Combimatrix Corporation | Electrochemical deblocking using a hydrazine derivative |
US7314542B2 (en) * | 2004-09-23 | 2008-01-01 | Nanogen, Inc. | Methods and materials for optimization of electronic transportation and hybridization reactions |
US20060102471A1 (en) | 2004-11-18 | 2006-05-18 | Karl Maurer | Electrode array device having an adsorbed porous reaction layer |
US20060105355A1 (en) * | 2004-11-18 | 2006-05-18 | Karl Maurer | Electrode array device having an adsorbed porous reaction layer having a linker moiety |
US20060166285A1 (en) * | 2005-01-26 | 2006-07-27 | Jainamma Krotz | Charged permeation layers for use on active electronic matrix devices |
US20060189166A1 (en) * | 2005-02-22 | 2006-08-24 | Combimatrix Corporation | Process for performing an isolated Pd(II)-mediated oxidation reaction |
US20070034513A1 (en) | 2005-03-25 | 2007-02-15 | Combimatrix Corporation | Electrochemical deblocking solution for electrochemical oligomer synthesis on an electrode array |
US9394167B2 (en) | 2005-04-15 | 2016-07-19 | Customarray, Inc. | Neutralization and containment of redox species produced by circumferential electrodes |
US20060240443A1 (en) * | 2005-04-20 | 2006-10-26 | Combimatrix Corporation | Microarray-based single nucleotide polymorphism, sequencing, and gene expression assay method |
US8053774B2 (en) | 2005-06-06 | 2011-11-08 | Intel Corporation | Method and apparatus to fabricate polymer arrays on patterned wafers using electrochemical synthesis |
US8940143B2 (en) | 2007-06-29 | 2015-01-27 | Intel Corporation | Gel-based bio chip for electrochemical synthesis and electrical detection of polymers |
JP4639982B2 (ja) * | 2005-06-17 | 2011-02-23 | 凸版印刷株式会社 | マイクロ反応チップ |
US20070037169A1 (en) * | 2005-08-09 | 2007-02-15 | Combimatrix Corporation | Selective Dehybridization using Electrochemically-Generated Reagent on an Electrode Microarray |
US20070065877A1 (en) | 2005-09-19 | 2007-03-22 | Combimatrix Corporation | Microarray having a base cleavable succinate linker |
US7281419B2 (en) * | 2005-09-21 | 2007-10-16 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Multifunctional probe array system |
US20070231794A1 (en) | 2005-09-21 | 2007-10-04 | Combimatrix Corporation | Process to detect binding events on an electrode microarray using enzymes |
US8855955B2 (en) | 2005-09-29 | 2014-10-07 | Custom Array, Inc. | Process and apparatus for measuring binding events on a microarray of electrodes |
US7902063B2 (en) * | 2005-10-11 | 2011-03-08 | Intermolecular, Inc. | Methods for discretized formation of masking and capping layers on a substrate |
WO2008048269A2 (en) * | 2005-10-20 | 2008-04-24 | Combimatrix Corporation | Microarray for pathogen identification |
US20070122842A1 (en) * | 2005-11-30 | 2007-05-31 | Rajasekaran John J | Massively parallel synthesis of proteinaceous biomolecules |
JP4774980B2 (ja) * | 2005-12-21 | 2011-09-21 | 凸版印刷株式会社 | Dnaチップ装置 |
US20070154946A1 (en) * | 2005-12-29 | 2007-07-05 | Rajasekaran John J | Massively parallel synthesis of biopolymeric arrays |
WO2007087377A2 (en) * | 2006-01-25 | 2007-08-02 | Massachusetts Institute Of Technology | Photoelectrochemical synthesis of high density combinatorial polymer arrays |
CN101395279A (zh) * | 2006-03-01 | 2009-03-25 | 霍夫曼―拉罗奇有限公司 | 用于核酸扩增的基质 |
US20070231805A1 (en) * | 2006-03-31 | 2007-10-04 | Baynes Brian M | Nucleic acid assembly optimization using clamped mismatch binding proteins |
WO2008027558A2 (en) | 2006-08-31 | 2008-03-06 | Codon Devices, Inc. | Iterative nucleic acid assembly using activation of vector-encoded traits |
US7687103B2 (en) * | 2006-08-31 | 2010-03-30 | Gamida For Life B.V. | Compositions and methods for preserving permeation layers for use on active electronic matrix devices |
US20080108149A1 (en) * | 2006-10-23 | 2008-05-08 | Narayan Sundararajan | Solid-phase mediated synthesis of molecular microarrays |
US7892719B2 (en) * | 2006-11-03 | 2011-02-22 | Intel Corporation | Photonic crystal EUV photoresists |
US7622295B2 (en) * | 2006-12-19 | 2009-11-24 | Edelmira Cabezas | Molecular microarrays and helical peptides |
US8614086B2 (en) | 2006-12-28 | 2013-12-24 | Intel Corporation | Quality control methods for the manufacture of polymer arrays |
US7923237B2 (en) * | 2006-12-28 | 2011-04-12 | Intel Corporation | Method and apparatus for combined electrochemical synthesis and detection of analytes |
US8999724B2 (en) | 2006-12-28 | 2015-04-07 | Intel Corporation | Method and apparatus for match quality analysis of analyte binding |
US20090176664A1 (en) * | 2007-06-01 | 2009-07-09 | Keting Chu | High density peptide arrays containing kinase or phosphatase substrates |
AU2008296478B9 (en) | 2007-08-28 | 2015-03-19 | The Uab Research Foundation | Synthetic apolipoprotein E mimicking polypeptides and methods of use |
US8557767B2 (en) | 2007-08-28 | 2013-10-15 | Uab Research Foundation | Synthetic apolipoprotein E mimicking polypeptides and methods of use |
EP2307130A1 (fr) * | 2008-06-27 | 2011-04-13 | STMicroelectronics (Research & Development) Limited | Dispositif d'analyse biologique de type pixel, biocapteur cmos et procedes de fabrication correspondants |
FR2933197A1 (fr) * | 2008-06-27 | 2010-01-01 | Univ Paul Cezanne Universite D | Dispositif d'analyse biologique de type pixel,biocapteur cmos et procedes de fabrication correspondants |
FR2933198B1 (fr) * | 2008-06-27 | 2010-08-27 | Univ Aix Marseill Iii Paul Cezanne | Procede de fabrication d'un biocapteur sur substrat semi-conducteur |
US8697605B2 (en) | 2008-06-30 | 2014-04-15 | Intel Corporation | Polymer co-location in surface-attached biopolymers and arrays of biopolymers |
WO2011056872A2 (en) | 2009-11-03 | 2011-05-12 | Gen9, Inc. | Methods and microfluidic devices for the manipulation of droplets in high fidelity polynucleotide assembly |
WO2011066185A1 (en) | 2009-11-25 | 2011-06-03 | Gen9, Inc. | Microfluidic devices and methods for gene synthesis |
US9217144B2 (en) | 2010-01-07 | 2015-12-22 | Gen9, Inc. | Assembly of high fidelity polynucleotides |
WO2011090793A2 (en) | 2010-01-20 | 2011-07-28 | Customarray, Inc. | Multiplex microarray of serially deposited biomolecules on a microarray |
WO2012064975A1 (en) | 2010-11-12 | 2012-05-18 | Gen9, Inc. | Protein arrays and methods of using and making the same |
JP6118725B2 (ja) | 2010-11-12 | 2017-04-19 | ジェン9・インコーポレイテッドGen9,INC. | 核酸合成のための方法およびデバイス |
EP2649094B1 (en) | 2010-12-10 | 2016-04-27 | University of Central Florida Research Foundation, Inc. | Methods and compositions comprising il-7 receptor ligands |
LT3594340T (lt) | 2011-08-26 | 2021-10-25 | Gen9, Inc. | Kompozicijos ir būdai, skirti nukleorūgščių didelio tikslumo sąrankai |
US9150853B2 (en) | 2012-03-21 | 2015-10-06 | Gen9, Inc. | Methods for screening proteins using DNA encoded chemical libraries as templates for enzyme catalysis |
CA2871505C (en) | 2012-04-24 | 2021-10-12 | Gen9, Inc. | Methods for sorting nucleic acids and multiplexed preparative in vitro cloning |
AU2013280661A1 (en) | 2012-06-25 | 2015-01-22 | Gen9, Inc. | Methods for nucleic acid assembly and high throughput sequencing |
US9404922B2 (en) | 2013-07-15 | 2016-08-02 | The Rockefeller University | Recombinant phages and proteins |
EP3127148A4 (en) | 2014-03-31 | 2017-11-15 | Multerra Bio, Inc. | Low-cost packaging for fluidic and device co-integration |
CN107074923B (zh) | 2014-07-31 | 2021-08-03 | Uab研究基金会 | Apoe模拟肽及对清除血浆胆固醇的较高效力 |
CN106799196A (zh) * | 2015-11-26 | 2017-06-06 | 上海美迪维康生物科技有限公司 | Dna原位合成半导体芯片及其控制方法 |
US10629468B2 (en) | 2016-02-11 | 2020-04-21 | Skyworks Solutions, Inc. | Device packaging using a recyclable carrier substrate |
US20170243739A1 (en) * | 2016-02-24 | 2017-08-24 | Skyworks Solutions, Inc. | 3d micromold and pattern transfer |
US10453763B2 (en) | 2016-08-10 | 2019-10-22 | Skyworks Solutions, Inc. | Packaging structures with improved adhesion and strength |
CN106248758B (zh) * | 2016-09-30 | 2019-04-16 | 南京理工大学 | 一种dna探针与电极表面相互作用的分析方法 |
US10532356B2 (en) * | 2017-11-09 | 2020-01-14 | International Business Machines Corporation | pH control for analyte detection |
CN113056327A (zh) | 2018-07-23 | 2021-06-29 | Dna斯克瑞普特公司 | 核酸链的大规模平行酶促合成 |
WO2020120442A2 (en) | 2018-12-13 | 2020-06-18 | Dna Script | Direct oligonucleotide synthesis on cells and biomolecules |
US11584956B2 (en) | 2018-12-21 | 2023-02-21 | Microsoft Technology Licensing, Llc | Selectively controllable cleavable linkers |
CN109735528A (zh) * | 2019-02-27 | 2019-05-10 | 天津大学 | 用于染料降解的整体型生物反应器的制备方法 |
WO2020243072A1 (en) | 2019-05-31 | 2020-12-03 | Illumina, Inc. | Flow cell with selective deposition or activation of nucleotides |
US11773422B2 (en) | 2019-08-16 | 2023-10-03 | Microsoft Technology Licensing, Llc | Regulation of polymerase using cofactor oxidation states |
US11795450B2 (en) | 2019-09-06 | 2023-10-24 | Microsoft Technology Licensing, Llc | Array-based enzymatic oligonucleotide synthesis |
CN114729389B (zh) | 2019-09-23 | 2024-03-08 | Dna斯克瑞普特公司 | 增加多核苷酸的无模板酶促合成中的长序列产率 |
US11896945B2 (en) * | 2019-10-09 | 2024-02-13 | Microsoft Technology Licensing, Llc | High surface area coatings for solid-phase synthesis |
US11592420B2 (en) | 2020-07-17 | 2023-02-28 | Robert Bosch Gmbh | Closed-loop PH control with differential sensor |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995012808A1 (en) * | 1993-11-01 | 1995-05-11 | Nanogen, Inc. | Self-addressable self-assembling microelectronic systems and devices for molecular biological analysis and diagnostics |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4280885A (en) * | 1979-11-09 | 1981-07-28 | Savery James W | Method of and apparatus for active electro-chemical water and similar environmental contaminant elimination in semi-conductor and other electronic and electrical devices and the like |
US5510481A (en) * | 1990-11-26 | 1996-04-23 | The Regents, University Of California | Self-assembled molecular films incorporating a ligand |
US5364851A (en) * | 1991-06-14 | 1994-11-15 | International Synthecon, Llc | Conformationally restricted biologically active peptides, methods for their production and uses thereof |
US5632957A (en) * | 1993-11-01 | 1997-05-27 | Nanogen | Molecular biological diagnostic systems including electrodes |
CA2064683A1 (en) * | 1992-03-26 | 1993-09-27 | Krishna Mohan Rao Kallury | Formation of thermostable enzymes with extra-ordinary heat tolerance by immobilization on phospholipid matrices |
US5667667A (en) * | 1992-04-24 | 1997-09-16 | Isis Innovation Limited | Electrochemical treatment of surfaces |
FR2703359B1 (fr) * | 1993-03-31 | 1995-06-23 | Cis Bio Int | Copolymère nucléotide(s)/polymère conducteur électronique ; son procédé de préparation et son utilisation . |
US5756362A (en) * | 1993-10-12 | 1998-05-26 | Cornell Research Foundation, Inc. | Liposome-enhanced immunoaggregation assay and test device |
US5952172A (en) * | 1993-12-10 | 1999-09-14 | California Institute Of Technology | Nucleic acid mediated electron transfer |
US5824470A (en) * | 1995-05-30 | 1998-10-20 | California Institute Of Technology | Method of preparing probes for sensing and manipulating microscopic environments and structures |
US5798035A (en) * | 1996-10-03 | 1998-08-25 | Pharmacopeia, Inc. | High throughput solid phase chemical synthesis utilizing thin cylindrical reaction vessels useable for biological assay |
-
1997
- 1997-07-02 ZA ZA975891A patent/ZA975891B/xx unknown
- 1997-07-03 DK DK97932422T patent/DK0910467T3/da active
- 1997-07-03 AT AT97932422T patent/ATE198427T1/de active
- 1997-07-03 TW TW086109406A patent/TW593334B/zh not_active IP Right Cessation
- 1997-07-03 WO PCT/US1997/011463 patent/WO1998001221A1/en active IP Right Grant
- 1997-07-03 DE DE69703841T patent/DE69703841T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-03 IL IL12789897A patent/IL127898A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1997-07-03 ES ES97932422T patent/ES2156000T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-03 JP JP50526298A patent/JP4303319B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-03 EP EP97932422A patent/EP0910467B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-03 AU AU35884/97A patent/AU734511B2/en not_active Ceased
- 1997-07-03 CA CA002259523A patent/CA2259523C/en not_active Expired - Fee Related
-
1999
- 1999-10-13 US US09/416,860 patent/US6444111B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-27 HK HK99104849A patent/HK1020540A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-04-11 JP JP2006108755A patent/JP4740020B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995012808A1 (en) * | 1993-11-01 | 1995-05-11 | Nanogen, Inc. | Self-addressable self-assembling microelectronic systems and devices for molecular biological analysis and diagnostics |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011506074A (ja) * | 2007-12-13 | 2011-03-03 | スヴェン オスカルソン、 | 粒子の部分的誘導体化 |
CN103945931A (zh) * | 2011-09-26 | 2014-07-23 | 基因技术股份公司 | 高效的小体积核酸合成 |
CN103945931B (zh) * | 2011-09-26 | 2017-03-22 | 基因技术股份公司 | 高效的小体积核酸合成 |
US10519439B2 (en) | 2011-09-26 | 2019-12-31 | Life Technologies Corporation | High efficiency, small volume nucleic acid synthesis |
US11046953B2 (en) | 2011-09-26 | 2021-06-29 | Life Technologies Corporation | High efficiency, small volume nucleic acid synthesis |
US10563240B2 (en) | 2013-03-14 | 2020-02-18 | Life Technologies Corporation | High efficiency, small volume nucleic acid synthesis |
US10407676B2 (en) | 2014-12-09 | 2019-09-10 | Life Technologies Corporation | High efficiency, small volume nucleic acid synthesis |
JP2020002095A (ja) * | 2018-06-29 | 2020-01-09 | 国立大学法人東京工業大学 | 電気化学的手法による修飾タンパク質の製造方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE69703841T2 (de) | 2001-08-09 |
CA2259523A1 (en) | 1998-01-15 |
EP0910467B1 (en) | 2001-01-03 |
IL127898A0 (en) | 1999-11-30 |
ATE198427T1 (de) | 2001-01-15 |
JP2000514802A (ja) | 2000-11-07 |
JP4740020B2 (ja) | 2011-08-03 |
EP0910467A1 (en) | 1999-04-28 |
DE69703841D1 (de) | 2001-02-08 |
WO1998001221A1 (en) | 1998-01-15 |
DK0910467T3 (da) | 2001-05-21 |
AU3588497A (en) | 1998-02-02 |
TW593334B (en) | 2004-06-21 |
AU734511B2 (en) | 2001-06-14 |
US6444111B1 (en) | 2002-09-03 |
ZA975891B (en) | 1998-07-23 |
CA2259523C (en) | 2010-01-12 |
JP4303319B2 (ja) | 2009-07-29 |
ES2156000T3 (es) | 2001-06-01 |
HK1020540A1 (en) | 2000-05-12 |
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