JP2006206895A - 架橋ポリマー粒子およびその製造方法 - Google Patents

Abstract

【課題】 生理物質および／もしくは細胞を含む液体を処理する吸着材・処理材やその担体として有用であり、特に血液や血漿等の体液を処理する吸着材・処理材やその担体として有用である、補体系や凝固系の活性化を起こし難く、非特異吸着等による有用物質の損失が少なく、細胞の活性化や付着が少ない、安全性の高い架橋ポリマー粒子を提供する。
【解決手段】 ビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子であって、乾燥重量中の、元素分析法により特定される窒素含有量が７．３〜９．２重量％の範囲にある架橋ポリマー粒子。および、ビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子であって、架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対する窒素を含有する重合単位の割合が４３．０〜５４．０重量％の範囲にある架橋ポリマー粒子。

Description

本発明は、生理物質および／もしくは細胞を含む液体を処理する吸着材・処理材やその担体として有用であり、特に血液や血漿等の体液を処理する吸着材・処理材やその担体として有用である架橋ポリマー粒子およびその製造方法に関する。

近年、薬剤の投与などでは十分な改善が達成できない種々の難治性疾患の治療法として、体外循環治療が広く行われるようになった。体外循環治療とは、患者の血液等の体液を体外に導き、体液中に存在し疾患と密接に関連する物質や細胞を除去してその濃度を低下させたり、何らかの治療に寄与する影響を与えたりした後、再び体液を患者に戻す方法である。

その一つとして、体外に導いた患者の血液から血漿分離膜や遠心分離器によって血漿成分を分離し、該血漿を体液処理器で処理した後、血球成分と合わせて患者の体内に戻す、いわゆる血漿灌流方式による血液浄化法があり、血漿中から疾患関連物質を吸着除去する種々の吸着器が開発されている。

さらに最近では、直接血液灌流方式と呼ばれる、患者の血液から血漿成分を分離することなく、血液を直接処理する方法が注目されるようになった。直接血液灌流方式は体外循環の回路が単純で操作が簡素化され、治療に当たる医療スタッフの負担が軽減されるばかりでなく、患者への生理的な負担も軽減されるものと期待されている。

一方で、周知のように体外に出た血液細胞は生理的に極めて不安定であり、吸着材等の異物と接触した際に付着や活性化を生じ易く、それにともない種々の問題を引き起こす懸念がある。そのため、直接血液灌流方式で使用される吸着材やその担体には、血液細胞との相互作用が小さく付着や活性化を起こさないことが求められる。

さらに、いずれの方式の吸着器おいても、使用される吸着材には、非特異的な吸着等による有用成分の損失が少なく、かつ凝固系や補体系などの活性化を引き起こさないことが求められる。ここで、体液中の有用成分の損失が大きいと、該物質の欠乏症等の問題を引き起こす危険がある。凝固系の活性化が著しいと、患者の体内で塞栓等の重大な問題を引き起こす可能性がある。また、補体系の活性化が著しくなると、白血球走化性促進、血管透過性亢進、血圧低下、アナフィラキシー反応等の問題をもたらす。

血液や血漿などを処理する吸着材やその担体には、セルロースやアガロースなどの天然高分子、ポリビニルアルコールやポリヒドロキシエチルメタクリレートなどの合成高分子、これらを含む共重合体やポリマーブレンド、さらにはそれらで表面を被覆した材料などの使用が試みられてきた。

一方で、これら材料は補体系を活性化させ易い問題があることが指摘されている。この活性化の過程で産生される活性化補体Ｃ３ａ、Ｃ５ａはアナフィラトキシンとして強い生物学的作用をもつ。そのため補体系の活性化は広範な有害作用をもたらすと考えられており、臨床上大きな課題となっている。しかしながら、これら材料の特性が補体系に及ぼす影響に関して定量的な知見は十分には得られていない。また、これら材料の特性が細胞や凝固系の活性化に及ぼす影響について定量的な知見は十分には得られていない。
には、粒子状担体の比表面積が少なくとも５ｍ２／ｇである硬質ゲル担体にリガンドを保持させてなる体外循環治療用吸着材が開示されている。また、該硬質ゲル担体がビニルアルコール単位を主構成要素とする架橋合成高分子である体外循環治療用吸着材が開示されている。さらに、該硬質ゲル担体がカルボン酸のビニルエステルとトリシアジン環を有するビニル化合物の共重合体を加水分解して得られる架橋合成高分子である体外循環治療用吸着材が開示されている。ここでは、該吸着材にヒト血漿やヒト全血を通液した際の血漿タンパク質（アルブミン、補体）の損失、血球数減少、残血、血栓の有無について検討がなされている。しかしながら、補体系活性化の懸念に対しては全く検討がなされていない。また、凝固系や血液細胞の活性化に関する定量的な検討もない。 には、ポリビニルアルコールゲルよりなる、径７４〜２１０μｍの多孔性ゲルに、トリプトファンをリガンドとして固定した吸着材を使用して、雑種成犬で直接血液灌流を試みた例が示されている。しかしながら、補体系活性化の懸念に対しては全く検討がなされていない。また、血液細胞の活性化に関する定量的な検討もない。 には、体積平均粒子径が比較的小さな吸着材であっても、特定の粒子径分布を有するものであれば、圧力損失の著しい上昇や溶血を起こすことなく血液の灌流が可能であることが開示されている。しかしながら、天然高分子であるセルロース系材料を例示するにとどまり、合成高分子については何ら言及してない。さらに、補体系活性化の懸念に対しては全く検討がなされていない。また、凝固系や血液細胞の活性化に関する定量的な検討もない。 特開昭５８−１２６５６ 特開昭６３−１１５５７２ 市川他、人工臓器１２（１），１１６−１１９（１９８３）

本発明は、生理物質および／もしくは細胞を含む液体を処理する吸着材・処理材やその担体として有用であり、特に血液や血漿等の体液を処理する吸着材・処理材やその担体として有用である、補体系や凝固系の活性化を起こし難く、非特異吸着等による有用物質の損失が少なく、細胞の活性化や付着が少ない架橋ポリマー粒子を提供するものである。また、これらの高粘度の液体を高流速で安定に流通させることが可能であり、微粒子の流出が極めて少ない、前記架橋ポリマー粒子を提供するものである。

本発明者らは、上記の従来からある吸着材の問題点を解決し、より安全に使用できる吸着材・処理材やその担体について鋭意検討を重ねた結果、ビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子であって、窒素含有量が特定の範囲にある架橋ポリマー粒子を使用することにより、あるいはビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子であって、窒素を含有する重合単位の割合が特定の範囲にある架橋ポリマー粒子を使用することにより、驚くべきことに、補体系や凝固系の活性化を起こし難く、非特異吸着等による有用物質の損失が少なく、細胞の活性化や付着が少ない、極めて血液や血漿等との適合性に優れた吸着材・処理材を達成し得ることを見出した。また、前記架橋ポリマー粒子は水性媒体中で適度な弾性率を有し、通液時の圧力損失等の外力による変形が小さく、壊れたり欠けたりし難く微粒子の発生量が極めて少ない吸着材・処理材を達成し得ることを見出した。

さらには、特定範囲の平均粒子径と粒子径分布を有する前記架橋ポリマー粒子を使用することにより、血液や血漿等の高粘度および／もしくは細胞を含む液体に対しても通過性が極めて良好であり、高い安全性と優れた処理効率を達成し得ることを見出した。

しかも従来は得ることが困難であった、このような架橋ポリマー粒子を製造する方法を見出し、本発明を達成するに至った。

すなわち本発明は、ビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子であって、元素分析法により特定される乾燥重量での窒素含有量が７．３〜９．２重量％である架橋ポリマー粒子である。

また、ビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子であって、架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対する窒素を含有する重合単位の割合が４３．０〜５４．０重量％である架橋ポリマー粒子である。

なお、本発明で言う重合単位とは、重合に供される単量体に基づく単位であって、該単位から化学反応等により導かれる単位を含む。

本発明の架橋ポリマー粒子は、好ましくは、カルボン酸ビニルエステルおよび窒素を含有するビニル化合物を含む単量体混合物を重合させ、カルボン酸ビニルエステル単位を構成要素の一つとする架橋重合体を形成し、その後鹸化及び／もしくはエステル交換反応を行ってカルボン酸ビニルエステル単位の一部もしくは全部をビニルアルコール単位とした前記架橋ポリマー粒子である。

より好ましくは、カルボン酸ビニルエステル、トリアジン環構造を有するビニル化合物、以下必要に応じて、その他のビニル化合物、非重合性液体、線状ポリマー、重合開始剤等を含む単量体混合物を、カルボン酸ビニルエステルの重合転化率が１０〜８０％の範囲になるように重合させてカルボン酸ビニルエステル単位を構成要素の一つとする架橋重合体を形成し、その後鹸化及び／もしくはエステル交換反応を行ってカルボン酸ビニルエステル単位の一部もしくは全部をビニルアルコール単位とした前記架橋ポリマー粒子である。

さらに、体積平均粒子径が１００〜３０００μｍの架橋ポリマー粒子であって、該粒子の８０体積％以上が体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にあり、かつ１００μｍ未満の粒子が５体積％以下である前記架橋ポリマー粒子である。

また、単量体混合物の均一な径の液滴を分散媒中に形成させた後、該液滴を合着または付加的な分散を生じることのない条件下で重合させ、必要に応じて処理、改質することにより得られる前記架橋ポリマー粒子である。

さらに、ノズル孔から分散媒中に噴出する単量体混合物の液柱に規則的な振動撹乱を与えて均一な径の液滴を分散媒中に形成させた後、該液滴を合着または付加的な分散を生じることのない条件下で重合させ、必要に応じて処理、改質する前記架橋ポリマー粒子の製造方法である。

本発明の架橋ポリマー粒子は、補体系や凝固系の活性化を起こし難く、非特異的な吸着等による有用物質の損失が少なく、細胞の活性化や付着が少ない、体液等との適合性に優れたものである。

さらには、体液等の高粘度の液体を高流速で安定に流通させることが可能であり、微粒子の流出が極めて少ない、高い安全性と優れた処理効率を達成しうるものである。

本発明のビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子において、乾燥重量中の、元素分析法により特定される窒素含有量は、好ましくは７．５重量％以上であり、より好ましくは７．７重量％以上であり、特に好ましくは７．９重量％以上であり、最も好ましくは８．１重量％以上である。また、乾燥重量中の、元素分析法により特定される窒素含有量は、好ましくは９．０重量％以下であり、より好ましくは８．８重量％以下であり、特に好ましくは８．６重量％以下であり、最も好ましくは８．４重量％以下である。

また、本発明のビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子において、架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対する窒素を含有する重合単位の割合は、好ましくは４４．０重量％以上であり、より好ましくは４５．０重量％以上であり、さらに好ましくは４６．０重量％以上であり、特に好ましくは４７．０重量％以上であり、最も好ましくは４８．０重量％以上である。また、架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対する窒素を含有する重合単位の割合は、好ましくは５３．０重量％以下であり、より好ましくは５２．０重量％以下であり、特に好ましくは５１．０重量％以下であり、最も好ましくは５０．０重量％以下である。

ここで、該窒素含有量が７．３重量％未満である場合や、該窒素を含有する重合単位の割合が４３．０重量％未満である場合、補体系、凝固系、血液細胞を活性化させ易く好ましくない。一方、該窒素含有量が９．２重量％を超える場合や、該窒素を含有する重合単位の割合が５４．０重量％を超える場合、非特異的な吸着等による有用成分の損失が大きくなり好ましくない。また、粒子が脆くなり微粒子が発生し易くなる傾向がある。

本発明の架橋ポリマー粒子において、窒素を含有する重合単位の化学構造が判明している場合は、元素分析法により特定される窒素含有量等から、窒素を含有する重合単位の割合を計算することが可能である。

なお、例えば共重合によって窒素を含有する重合単位を導入する場合でも、重合転化率が１００％未満においては、共重合体の組成は単量体の仕込み組成とは必ずしも一致しない。そのため、該窒素含有量、あるいは該窒素を含有する重合単位の割合は、吸着材・処理材やその担体として実際に使用されるものについて決定する必要がある。

該架橋ポリマー粒子は通常は水性媒体中で使用されるが、本発明で言う、元素分析法により特定される乾燥重量中の窒素含有量とは、十分に洗浄された清浄な該架橋ポリマー粒子を真空乾燥等により実質的に完全に乾燥させた後元素分析を行うことにより特定される該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中の窒素含有量である。また、架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対する窒素を含有する重合単位の割合とは、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位の乾燥重量中の窒素を含有する重合単位の割合である。なお、ビニルアルコール単位を含む合成高分子は吸水・吸湿し易く分析に当たっては注意が必要である。

本発明のビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を含む合成高分子は、ビニルアルコール単位および少なくとも１種類の窒素を含有する重合単位を構成要素として含み、上記の範囲内であれば、複数の窒素を含有する重合単位を含んでもよく、またこれら以外の構成要素を含んでもよい。

ビニルアルコール単位が有する水酸基は、前述のように補体系を活性化させ易いことが指摘され、これら材料を利用する上で大きな課題となっていたが、本発明の架橋ポリマー粒子においては、分子内に窒素を特定の割合で存在させることにより、あるいは分子内に窒素を含有する重合単位を特定の割合で存在させることにより、該水酸基と生理物質や細胞との相互作用が特異的に抑制され、補体系や凝固系や細胞の活性化を大幅に低減できるものと考えられる。

なお、本発明の架橋ポリマー粒子において、窒素を含有する重合単位が疎水性の構造を有する重合単位である場合に、生理物質や細胞との相互作用がより低く抑えられて好ましい。

窒素を含有する重合単位は、例えば架橋ポリマーが有する官能基を利用して、窒素を含有する側鎖を導入することで得ることができる。

また、窒素を含有する重合単位は、窒素を含有する単量体を共重合させることで、より容易に導入することができる。

本発明の架橋ポリマー粒子は、少なくとも１種類のビニルアルコール単位を与える単量体および少なくとも１種類の窒素を含有する単量体を含む単量体混合物を重合させて架橋重合体を形成し、その後ビニルアルコール単位を与える単量体単位の一部もしくは全部を化学反応等によりビニルアルコール単位とした架橋ポリマー粒子であることが、ポリマー組成の調整や粒子設計の面で好ましい。なお、該単量体混合物は、必要に応じてその他の単量体、および／もしくは非重合性液体、および／もしくは線状ポリマー、および／もしくは重合開始剤等を含んでもよいし、これらを含まなくてもよい。

ビニルアルコール単位を与える単量体としては、好ましくはカルボン酸ビニルエステルがあげられる。本発明で好ましく用いられるカルボン酸ビニルエステルとしては、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル、酪酸ビニル、吉草酸ビニル、カプロン酸ビニル、アジピン酸ジビニル等の脂肪族カルボン酸ビニルエステル化合物や、安息香酸ビニル、フタル酸ビニル等の芳香族カルボン酸ビニルエステル化合物等を例示できる。これらのうち、重合や鹸化／エステル交換反応の容易さおよび経済性の点で、酢酸ビニルやプロピオン酸ビニル等の脂肪族カルボン酸ビニルエステル化合物がより好ましく、酢酸ビニルが最も好ましい。カルボン酸ビニルエステルは１種類を使用しても良く、２種類以上を組み合わせて使用することもできる。

窒素を含有する単量体としては、前述の理由より窒素を含有する疎水性のビニル化合物が好ましく用いられる。さらに、窒素を含有する重合単位が架橋構造を形成する場合、生理物質や細胞との相互作用がより低く抑えられて好ましい。従って、窒素を含有する単量体としては、単官能であるより多官能の架橋性単量体を用いた方が好ましい。

窒素を含有する単量体のより好ましい例としては、トリアリルシアヌレート、トリアリルイソシアヌレート、トリメタアリルイソシアヌレート等のトリアジン環構造を有するビニル化合物があげられ、物理的あるいは化学的安定性の良さからトリアリルイソシアヌレートやトリメタアリルイソシアヌレート等のイソシアヌレート類が特に好ましく、取り扱いの容易さからトリアリルイソシアヌレートが最も好ましい。窒素を含有する単量体は１種類を使用しても良く、２種類以上を組み合わせて使用することもできる。

本発明で用いられるビニルアルコール単位を与える単量体と窒素を含有する重合単位を与える単量体は、重合反応や粒子設計の面より、相互に可溶であり、分散媒に不溶もしくは難溶であるのが好ましい。

本発明で用いられるビニルアルコール単位を与える単量体や窒素を含有する単量体以外の単量体としては、前記ビニルアルコール単位を与える単量体および／もしくは前記窒素を含有する単量体と直接もしくは間接的に共重合可能な単量体などが使用可能であり、必要に応じて使用してもよいし、使用しなくてもよい。

このような単量体としては、アクリル酸、アクリル酸メチル、アクリル酸エチル、アクリル酸ブチル、アクリル酸アルキル、アクリル酸メトキシエチル、アクリル酸２−ヒドロキシエチル、アクリル酸２−ヒドロキシプロピル、ポリオキシエチレンモノアクリレート、ポリオキシプロピレンモノアクリレート等のアクリル酸やそのエステル、メタクリル酸、メタクリル酸メチル、メタクリル酸ブチル、メタクリル酸アルキル、メタクリル酸ｔ−ブチル、メタクリル酸メトキシエチル、メタクリル酸シクロヘキシル、メタクリル酸ベンジル、メタクリル酸２−エチルヘキシル、メタクリル酸２−ヒドロキシエチル、メタクリル酸２−ヒドロキシプロピル、グリシジルメタクリレート、グリセロールモノメタクリレート、ポリエチレングリコールモノメタクリレート、テトラヒドロフルフリルメタクリレート等のメタクリル酸やそのエステル、スチレン、メチルスチレン、エチルスチレン、スチレンスルフォン酸塩等の芳香族ビニル化合物、アクリロニトリル、メタクリロニトリル等のニトリル化合物などのビニル化合物があげられる。および／もしくは下記のごとき多官能のビニル化合物を使用することができる。これら単量体は必要に応じ単独または２種類以上を組み合わせて使用することができる。

本発明の架橋ポリマー粒子における架橋構造は、例えば多官能のビニル化合物を共重合させることにより得ることができる。共重合可能な架橋性単量体の例としては、エチレングリコールジメタクリレート、ジエチレングリコールジメタクリレート、ポリエチレングリコールジアクリレート、ポリエチレングリコールジメタクリレート、ポリアルキレングリコールジアクリレート、ポリアルキレングリコールジメタクリレート、１．３−ブチレングリコールジメタクリレート、１．６−ヘキサンジオールジアクリレート、グリセロールジメタクリレート、トリメチロールプロパントリアクリレート、トリメチロールプロパントリメタクリレート、ペンタエリスリトールトリアクリレート、ジペンタエリスリトールヘキサアクリレート等のアクリレート類およびメタクリレート類、ブタンジオールジビニルエーテル、ジエチレングリコールジビニルエーテル等のジビニルエーテル類、ジビニルベンゼン、ジビニルナフタレン等の芳香族類、アリルメタクリレート、トリアリルシアヌレート、トリアリルイソシアヌレート、フタル酸ジアリル等のアリル化合物等があげられる。なかでも高い機械的強度や緻密な細孔構造を得やすい点で、トリメチロールプロパントリメタクリレート、トリメチロールプロパントリアクリレート、ペンタエリスリトールトリアクリレート、トリアリルシアヌレート、トリアリルイソシアヌレート、トリメタアリルイソシアヌレート等の３官能以上の架橋性ビニル基を有する化合物がより好ましい。さらに、前述の理由から窒素を含有する単量体でもあるトリアリルシアヌレート、トリアリルイソシアヌレート、トリメタアリルイソシアヌレート等のトリアジン環構造を有する化合物が特に好ましく、トリアリルイソシアヌレートが最も好ましい。これら架橋性単量体は１種類を使用しても良く、２種類以上を組み合わせて使用することもできる。

共重合反応において、重合転化率が十分に高い場合、最終的に得られる共重合体の組成は仕込み単量体組成と一致する。一方、ある時点で生成される共重合体の組成は、その時点における単量体組成や、あるラジカルに対する各単量体の反応性の違いによる影響を受けることが知られている。そのため、ある時点で生成される共重合体の組成は必ずしも仕込みの単量体組成とは一致しない。すなわち、比較的低重合転化率で重合を終了して得られる共重合体の組成や組成分布は、通常の共重合で一般に行われるような高重合転化率で得られる共重合体のそれとは大きく異なるものと成り得る。本発明の架橋ポリマー粒子においては、単量体の組み合わせや重合転化率の調整により、前記架橋ポリマー粒子を得ることが可能であり、さらには該架橋ポリマー粒子の表面組成や組成分布などを生理物質や細胞との親和性にとってより好ましいものとすることが可能である。

すなわち、本発明の架橋ポリマー粒子において、カルボン酸ビニルエステルおよびトリアジン環構造を有するビニル化合物を含む単量体混合物を重合させるにあたり、カルボン酸ビニルエステルの重合転化率が１０〜８０％の間になるように重合させて、カルボン酸ビニルエステル単位を構成要素の一つとする架橋重合体を形成し、その後鹸化及び／もしくはエステル交換反応を行ってカルボン酸ビニルエステル単位の一部もしくは全部をビニルアルコール単位とした架橋ポリマー粒子である場合に、補体系や凝固系や細胞の活性化が一段と低く抑えられてより好ましい。

カルボン酸ビニルエステルのより好ましい重合転化率は１０〜７０％であり、さらに好ましくは１５〜６５％であり、なかでも好ましくは２０〜６０％であり、特に好ましくは２５〜５５％であり、最も好ましくは２５〜５０％である。

ここで、カルボン酸ビニルエステルの重合転化率が１０％未満で低い場合、十分な粒子強度を得ることが難しくなる。一方、カルボン酸ビニルエステルの重合転化率が８０％を超えて高い場合は補体系等の活性化が増す傾向があり好ましくない。

また、該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中の窒素含有量や、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対する窒素を含有する重合単位の割合が、仕込みの単量体組成から計算される窒素含有量や窒素を含有する重合単位の割合より高値である場合に、補体系や凝固系や細胞の活性化が一段と低く抑えられてより好ましい。

より好ましくは該乾燥重量中の窒素含有量が、仕込みの単量体組成から計算される窒素含有量より、０．５重量％以上高い場合であり、さらに好ましくは１重量％以上高い場合であり、最も好ましくは１．５重量％以上高い場合である。

また、より好ましくは該窒素を含有する重合単位の割合が、仕込みの単量体組成から計算される窒素を含有する重合単位の割合より、５重量％以上高い場合であり、さらに好ましくは７重量％以上高い場合であり、最も好ましくは１０重量％以上高い場合である。

なお、カルボン酸ビニルエステルおよびトリアジン環構造を有するビニル化合物を含む単量体混合物を重合させるにあたり、カルボン酸ビニルエステル１００重量部に対して、トリアジン環構造を有するビニル化合物５〜７０重量部を用いるのが好ましい。より好ましくは１０〜６０重量部であり、さらに好ましくは１５〜５０重量部であり、特に好ましくは２０〜４０重量部であり、最も好ましくは２４〜３４重量部である。

カルボン酸ビニルエステル１００重量部に対してトリアジン環構造を有するビニル化合物が５重量部未満で少ない場合は粒子強度が不足しがちである。一方、トリアジン環構造を有するビニル化合物が７０重量部を超えて多い場合は粒子が脆くなり、粒子の一部が壊れたり欠けたりして微粒子が発生し易くなる。

本発明で用いられる重合開始剤としては、例えば２，２’−アゾビス（イソブチロニトリル）、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）、２，２’−アゾビス（２−メチルブチロニトリル）、２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオナミジン）ジハイドロクロライド等のアゾ系重合開始剤や、ベンゾイルパーオキサイド、ラウロイルパーオキサイド、ｔ−ブチルパーベンゾエート、ｔ−ブチルパーピバレート、ｔ−ブチルパーオキシイソプロピルカーボネート、ｔ−ブチルパーオキシアセテート、ｔ−ブチルパーオキシ−３，３，５−トリメチルシクロヘキサンなどの有機過酸化物などをあげることができるが、上記に限定されるものではない。重合開始剤は、単量体混合物に可溶なものが重合反応が円滑に進み易く好ましい。また、分散媒に不溶であるか分散媒への溶解度が低いものが微粒子の生成が少なく好ましい。

ここで重合開始剤は、単量体との反応性や分解速度等の重合開始剤としての特性、重合時間や重合温度等の反応条件を考慮して、所定の重合転化率が得られるように使用量や種類を選択することが好ましく、単独または２種類以上の混合物として用いることができる。

重合温度は、重合反応の制御の面から、０〜１８０℃の範囲が好ましく、より好ましくは２０〜１２０℃であり、さらに好ましくは４０〜９０℃であり、最も好ましくは５０〜７０℃である。

本発明の架橋ポリマー粒子は、多孔質構造を採用することができる。多孔質構造により被処理液体との接触面積を大幅に増すことが可能であり、高い処理性能を得やすい。多孔質構造には、被処理物質の大きさや形態等に応じて、適宜最適な細孔径や細孔構造が選ばれる。処理性能の面からは、被処理物質が容易に通過でき、かつ被処理物質と接触可能な面積ができるだけ大きくなるような細孔径や細孔構造を与えるのが好ましい。また、対象物質の大きさに合わせて細孔径や細孔構造を選択することにより、例えば細孔内に進入し得る物質のみを吸着除去するといった、分子ふるい効果に基づく選択性を与えることが可能である。

なお、血液やリンパ液や骨髄液等の細胞を含む液体中より、特定の細胞を選択的に除去あるいは回収したり、特定の細胞に何らかの好ましい影響を与えたりする体液処理器は、例えば白血球除去療法や細胞医療等の新しい治療法への応用が期待されているが、このような細胞を対象とした吸着材・処理材やその担体においては、必ずしも多孔質でなくて良い。

本発明の架橋ポリマー粒子には、多孔質構造の導入等のため非重合性液体を使用することができる。均一な多孔質構造を得るためには、非重合性液体は単量体混合物に可溶であり、分散媒には不溶または難溶であることが好ましい。具体例として、トルエン、キシレン、ベンゼン等の芳香族炭化水素、ヘキサン、ヘプタン、ペンタン、オクタン等の脂肪族炭化水素、酢酸エチル、酢酸ｎ−ブチル、酢酸ｎ−ヘキシル等のエステル化合物、ジブチルエーテル等のエーテル類、ｎ−ヘプタノール、アミルアルコールなどのアルコール類、メチルイソブチルケトンなどのケトン類などをあげることができるが、上記に限定されるものではない。

細孔部分の構造は非重合性液体の使用量や、非重合性液体と生成する架橋ポリマーとの親和性の違いにより大きな影響を受ける。例えば、生成ポリマーとの親和性がより低い非重合性液体を選択すれば、架橋ポリマー粒子に形成される多孔質構造は細孔径がより大きなものとなる。非重合性液体は１種類を用いても良いし、異なる２種類以上を混合しても良く、その種類や混合比で生成ポリマーとの親和性を変え、細孔径などの多孔質構造を調整することが可能である。さらに、非重合性液体の使用量を変えることにより、細孔容積などの多孔質構造を調整することが可能である。

非重合性液体の好ましい使用量は４００重量部以下であり、より好ましくは３００重量部以下であり、さらに好ましくは２６０重量部以下であり、特に好ましくは２２０重量部以下であり、最も好ましくは１８０重量部以下である。非重合性液体の使用量が４００重量部を超えると強度が不足しがちである。

架橋ポリマー粒子に多孔質構造を導入する必要がある場合の非重合性液体の好ましい使用量は５０重量部以上であり、より好ましくは１００重量部以上であり、さらに好ましくは１２０重量部以上であり、特に好ましくは１４０重量部以上であり、最も好ましくは１５０重量部以上である。

また、本発明の架橋ポリマー粒子には、多孔質構造の導入等のため線状ポリマーを使用することができる。なお本発明で言う線状ポリマーとは、実質的に非架橋であるポリマーを指し、分岐構造を含んでも良く、溶媒に可溶であれば若干の架橋構造を含んでも良い。本発明で用いる線状ポリマーは、非重合性液体と並び細孔部分の構造を決める重要な成分である。例えば、線状ポリマーの使用量を増すことで、あるいは線状ポリマーの平均重合度を高くすることで得られる架橋ポリマー粒子の細孔径は大きくなる傾向がある。非重合性液体と線状ポリマーを組み合わせて使用することで、架橋ポリマー粒子の多孔質構造の制御がより容易となる。

線状ポリマーの具体例としては、ポリ酢酸ビニル等のエステル系樹脂、ポリメチルメタクリレート等のアクリル系樹脂、ポリスチレン等の芳香族系樹脂、ポリアクリロニトリル等のニトリル系樹脂、ポリ塩化ビニル等のハロゲン系樹脂、ポリブタジエン等のジエン系樹脂、さらにこれらの共重合物やブレンド物等があげられるが、単量体混合物に可溶であれば特に制約はなく、これら以外のポリマーも使用可能である。

線状ポリマーの好ましい使用量は、１００重量部以下であり、より好ましくは４０重量部以下であり、なかでも好ましくは２５重量部以下であり、特に好ましくは２０重量部以下であり、最も好ましくは１５重量部以下である。

架橋ポリマー粒子に多孔質構造を導入する必要がある場合の線状ポリマーの好ましい使用量は１重量部以上であり、より好ましくは２重量部以上であり、特に好ましくは４重量部以上であり、最も好ましくは６重量部以上である。

また、線状ポリマーの好ましい平均重合度は１００〜１００００であり、より好ましくは１５０〜５０００であり、さらに好ましくは２００〜３０００であり、最も好ましくは３００〜１５００である。

線状ポリマーの使用量が１００重量部を超える場合や、平均重合度が１００００を超えると、単量体混合物の粘度が高くなり取り扱いが難しくなる。また重合中に凝集塊ができ易くなる。

また、架橋性単量体の使用量を増すと細孔構造が緻密になる傾向がある。これらを利用して、重合処方によって細孔構造を広範囲に調整可能である。

本発明の架橋ポリマー粒子は、好ましくは体積平均粒子径が１００〜３０００μｍであって、該粒子の８０体積％以上が体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にあり、かつ１００μｍ未満の粒子が５体積％以下である架橋ポリマー粒子である。

該粒子のより好ましい体積平均粒子径は１５０μｍ以上であり、さらに好ましくは２２０μｍ以上であり、なかでも好ましくは２６０μｍ以上であり、特に好ましくは３００μｍ以上であり、最も好ましくは４２０μｍ以上である。また、該粒子のより好ましい体積平均粒子径は２０００μｍ以下であり、さらに好ましくは１５００μｍ以下であり、なかでも好ましくは１０００μｍ以下であり、特に好ましくは８００μｍ以下であり、最も好ましくは６００μｍ以下である。

体積平均粒子径が１００μｍ未満では被処理液体の流路となる粒子間隙が狭く、血液や血漿等の高粘度の液体では流通時の圧力損失が大きくなる。また、全血など細胞成分を含む場合は細胞がスムーズに通過できず、カラム詰まりを起こし易く好ましくない。一方、３０００μｍを超えると圧力損失は低く抑えられるものの、吸着材や処理材としての効率が悪く好ましくない。

また、該粒子の８０体積％以上が体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にあることがより好ましく、該粒子の９０体積％以上が粒子径の体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にあることが特に好ましく、該粒子の９５体積％以上が粒子径の体積中央値の０．９倍から１．１倍の範囲内にあることが最も好ましい。粒子径分布が広く体積平均粒子径の０．８倍未満の小粒子や１．２倍を超える大粒子が多い場合は、体積平均粒子径が同一であっても流路となる間隙が小さくなって、圧力損失が大きくなったり、カラム詰まりを起こし易くなる傾向がある。

さらに、１００μｍ未満の粒子は１体積％以下であることがより好ましく、さらに好ましくは０．１体積％以下であり、なかでも好ましくは０．０１体積％以下であり、特に好ましくは０．００１体積％以下であり、最も好ましくは１００μｍ未満の粒子を含まない場合である。１００μｍ以下の粒子が５体積％より多く存在する場合は、カラム詰まりを起こし易くなる。また、使用中に微粒子が流出する懸念が高まる。

本発明の架橋ポリマー粒子は、水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率が０．０２ＭＰａ以上２ＭＰａ以下であることが好ましい。より好ましくは体積弾性率が０．１ＭＰａ以上１ＭＰａ以下であり、さらに好ましくは０.１２ＭＰａ以上０．８ＭＰａ以下であり、特に好ましくは０.１５ＭＰａ以上０．６ＭＰａ以下であり、最も好ましくは０．１５ＭＰａ以上０．３５ＭＰａ以下である。

体積弾性率が０．０２ＭＰａ未満の場合、粒子が変形し易く、流路となる間隙が減少して圧力損失の増大を招いたり、カラム詰まりを起こし易くなる。また、強度が不足して微粒子を生成し易くなり好ましくない。一方、体積弾性率が２ＭＰａを超える場合、粒子は硬く変形し難いものの、血液やリンパ液や骨髄液等の細胞を含む液体を流した場合、細胞が高速で粒子に接触する際の衝撃等による刺激を強く受け、細胞の活性化や粒子への非特異的な付着を起こし易くなり好ましくない。

一般の懸濁重合においては、分散安定剤の存在下、機械的撹拌によって単量体混合物の液滴を連続相となる分散媒中に形成させ、液滴中で重合反応を行わせてポリマー粒子を得る。この際、液滴は撹拌により分割されて小さくなったり、他の液滴と合一して大きくなったりする。そのため、単量体混合物の液滴は幅広い粒子径分布を有するものとなる。また、得られるポリマー粒子においても幅広い粒子径分布を有するものとなり、微粒子も比較的多い。そのため懸濁重合等で得られた幅広い粒子径分布を有する粒子については、分級操作等により大粒子や小粒子、微粒子を除いて使用するのが好ましい。

より好ましくは、単量体混合物の均一な径の液滴を分散媒中に形成させた後、該液滴を実質的に合着または付加的な分散を生じることのない条件下で重合させ、必要に応じて処理、改質することにより得られる該架橋ポリマー粒子である。

ここで言う均一な径の液滴とは、液滴が実質的に単一の粒子径を有するか、実質的に単一の粒子径を有する液滴と、別の粒子径で実質的に単一の粒子径を有する液滴の２種類もしくは複数種類を含む液滴である場合を指す。

このような架橋ポリマー粒子は、ノズル孔から分散媒中に噴出する単量体混合物の液柱に規則的な振動撹乱を与えて均一な径の液滴を分散媒中に形成させた後、該液滴を実質的に合着または付加的な分散を生じることのない条件下で重合させ、必要に応じて処理、改質することにより得ることができる。これにより、従来の方法では得ることが難しかった、均一な径の前記架橋ポリマー粒子を得ることが可能になる。このようにして得られた架橋ポリマー粒子は、大粒子や小粒子、微粒子が極めて少なく、分級操作等によるロスが著しく少ない長所を有している。

ここで、第一の工程は均一な径の液滴を分散媒中に形成する工程である。液滴生成装置の例としては、分散媒を満たしたカラムに単量体混合物を噴出するノズルを挿入し、ノズルには少なくとも１つの小孔を配し、さらに振動を伝達する機構を設置したものなどをあげることができる。カラムには分散媒タンクより分散媒を供給する導入管を接続することができ、ノズルには単量体混合物タンクより単量体混合物を供給する導入管を接続することができる。なお、均一な液滴生成のためには、単量体混合物の供給に、できるだけ脈動の少ない定量ポンプを使用することが好ましい。

第一の工程で形成される液滴の粒子径は、ノズル孔径、単量体混合物のノズル通過速度、単量体混合物や分散媒の粘度、ならびに単量体混合物がノズルを通過して生成する液柱に与えられる振動撹乱の種類、周波数、および振幅などの要因により決定され、これらの要因やその組み合わせによって所望の粒子径を有する液滴を得ることができる。また、これらの一つまたは複数を組み合わせて変化させることにより、所望の粒子径分布を有する液滴を得ることができる。

本工程に使用できるノズルは特に限定されるものではなく、例えば少なくとも１つの小孔を有するオリフィスなどを使用することができる。このようなノズルを単独もしくは複数で使用することができる。

振動撹乱を与える方法としては、単量体混合物に機械的振動を加えながら単量体混合物をノズルから噴出させる方法、分散媒に機械的振動を加えながら単量体混合物をノズルから噴出させる方法、単量体混合物が噴出するノズルに機械的振動を加える方法などが例示できるが、これに限定されるものではない。

連続相を形成する分散媒には、液滴を形成する単量体混合物と混和しないものが使用され、安全性や経済性や環境面より水性媒体が好ましく用いられる。また該分散媒は分散安定剤を含むことができる。

第二の工程は、形成した均一な径の液滴を合着または付加的な分散を生じることのない条件下で重合させる工程である。ここで、合着または付加的な分散を生じることのない条件とは、ノズル孔から分散媒中に噴出され振動撹乱を与えられて形成された単量体混合物の液滴が、他の液滴と合一してより大きな液滴となったり、あるいは逆に分割されてより小さな液滴となったりするようなことが実質的に生じない条件を意味する。

第二の工程を実施する方法は、通常の重合方法を採用でき、例えば第一の工程で形成された液滴を、撹拌翼を有する反応器内に導入し、液滴を含む分散媒を撹拌翼にて緩やかに撹拌しつつ重合反応を行わせても良いし、あるいは液滴を塔型反応器へ導入し、反応器内の分散媒を一端から抜き取って別の一端へ循環供給させ、反応器内で液滴の流動層を形成させながら重合反応を行わせても良いし、これらを組み合わせた方法や、中間的な方法などを採用することもできる。

ただし、撹拌が不十分であると液滴が合着し易くなり、逆に撹拌が過剰であると付加的な分散を生じ易くなるため、撹拌の方式や条件は適宜設定する必要がある。例えば、撹拌翼を用いて撹拌を行う場合は、比較的低剪断で高吐出の形式を選択し、撹拌速度を調整して使用するのが好ましい。

なお、液滴の合着や付加的な分散をより少なくするためには、液滴を重合反応器内に予め存在する分散媒中へ導入するのが好ましく、液滴生成装置は重合反応器の下部へ導入管等を介して接続することがより好ましい。

また、第一の工程と第二の工程はそれぞれ別の装置で行っても良いし、単一の装置を用いて第一の工程と第二の工程を行っても良い。

分散安定剤は特に限定されるものでなく、懸濁重合で一般に使用されるものを用いることができ、例えば、分散媒に可溶な分散安定剤や、微粒子状の固体分散安定剤や、界面活性剤などを使用することができる。これらは単独で用いても良いが、組み合わせて使用することでより大きな効果をあげることができる。また、補助剤を併用しても良い。なお、分散安定性が不足すると液滴の合着が起こり易くなり、逆に分散安定性が過剰になると付加的な分散が起こり易くなるため、分散安定剤や補助剤は、種類や使用量、使用方法に注意する必要がある。

より好ましい方法は、単量体混合物の液滴を分散媒中に形成させるに当たり、分散媒に可溶な分散安定剤の存在下で単量体混合物の液滴を分散媒中に形成させ、微粒子状の固体分散安定剤を添加し、および／もしくは塩の存在下で該液滴の重合を行わせる方法である。

分散媒に可溶な分散安定剤としては、高分子保護コロイドが好ましく使用される。具体例としてはポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸ナトリウム等の水溶性合成高分子、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースなどの水溶性セルロース誘導体、デンプン、ゼラチン等の水溶性天然高分子などをあげることができる。これらは単独で用いても良いし、２種類以上を混合して使用することができる。

分散媒に可溶な分散安定剤の好ましい使用量は、分散媒に対し０．００１〜１０重量％であり、より好ましくは０．００５〜５重量％であり、さらに好ましくは０．０１〜１．５重量％であり、特に好ましくは０．０１５〜０．６重量％であり、最も好ましくは０．０３〜０．３重量％である。

分散媒に可溶な分散安定剤の使用量が１０重量％を超える場合は、液滴の付加的な分散が起こり易く、あるいは乳化重合等による新粒子を生成し易く好ましくない。

微粒子状の固体分散安定剤としては、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ピロリン酸マグネシウム等の難溶性無機物質などをあげることができ、特に第三リン酸カルシウムが効果的である。これらは単独で用いても良いし、２種類以上を混合して使用することができる。微粒子状の固体分散安定剤の好ましい使用量は、分散媒に対し０．０１〜２０重量％であり、より好ましくは０．０５〜１０重量％であり、特に好ましくは０．１〜５重量％であり、最も好ましくは０．３〜３重量％である。微粒子状の固体分散安定剤を適量使用することにより重合粒子の２次的な凝集を防止する効果が大きくなる。

界面活性剤としては、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルアリルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン誘導体、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステルなどのノニオン性界面活性剤や、アルキル硫酸エステル塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルファオレフィンスルホン酸塩、ジアルキルスルホコハク酸塩、アルキルジフェニルエーテルジスルホン酸塩、アルキルリン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルリン酸エステル、ポリオキシエチレンアルキル硫酸エステル塩、ポリオキシエチレンアルキルアリル硫酸エステル塩などのアニオン性界面活性剤を例示することができる。これら界面活性剤は単独で用いても良いし、２種類以上を混合して使用することができる。

これら界面活性剤を前記分散安定剤と併用することで分散安定性を一層向上させることができる。特に微粒子状の固体分散安定剤を使用する場合は、アニオン性界面活性剤を併用するのが効果的である。

界面活性剤の好ましい使用量は分散媒に対して０．０００１〜５重量％であり、より好ましくは０．０００５〜０．５重量％であり、特に好ましくは０．００１〜０．１重量％であり、最も好ましくは０．００２〜０．０５重量％である。

界面活性剤の使用量が５重量％を超える場合は、液滴の付加的な分散が起こり易く、あるいは乳化重合等による新粒子を生成し易く、好ましくない。

塩としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム等の塩化物、硫酸ナトリウム、硫酸マグネシウム等の硫酸塩、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム等のリン酸塩等をあげることができる。

さらに、分散媒に可溶な重合禁止剤の存在下で前述の重合を行うことにより、微粒子の生成を抑制することができる。分散媒に可溶な重合禁止剤の例としては、亜硝酸ナトリウム等の亜硝酸塩、ハイドロキノン、ｐ−ジアミノフェニレン等があげられる。重合禁止剤の好ましい濃度は、分散媒に対して０．０００１〜１重量％であり、より好ましくは０．０００５〜０．５重量％であり、特に好ましくは０．００１〜０．１重量％であり、最も好ましくは０．００２〜０．０５重量％である。

重合禁止剤の使用量が１重量％を超えると重合反応が円滑に進み難くなり好ましくない。

本発明の架橋ポリマー粒子は、物理的、化学的に安定であり、高温高圧処理やガンマ線照射等の滅菌操作に耐え、長時間に渡り変質、劣化することなく保存可能である。

本発明の架橋ポリマー粒子は、そのままで、あるいは化学的および／もしくは物理的な改質を行った上で使用することができる。

さらに、本発明の架橋ポリマー粒子は、例えばビニルアルコール単位に由来する水酸基を直接および／もしくは間接的に利用して、被吸着成分や被吸着細胞と結合可能な物質を保持させて、および／もしくは目的の生理物質や細胞と特定の相互作用を有する物質を保持させて使用することができる。

また、例えば入口と出口を有するカラムに充填して、生理物質および／もしくは細胞を含む液体を処理するために使用することができる。

（実施例１）
酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）２４重量部、酢酸エチル１３１．５重量部、ヘプタン４８．２重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度８００）１２．８重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）５．０重量部よりなる単量体混合物５０１．６ｇを、水６９１．５重量部、ポリビニルアルコール０．１０３重量部、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウム０．０２３重量部、微粒子状の第三リン酸カルシウム５．１５重量部（固形分）、亜硝酸ナトリウム０．０３９重量部を含む水相１０４５．２ｇがあらかじめ仕込まれた、平板状の撹拌翼と２枚の邪魔板を有する２Ｌセパラブルフラスコ中に室温で添加した。十分な撹拌混合および窒素置換を行った後、内温を６５℃に５時間保持して懸濁重合させた。所定時間の重合の後、セパラブルフラスコの内容物を室温まで冷却した。得られた重合スラリーをサンプリングして重量を測定し、重合禁止剤を添加して１２０℃のオーブンで揮発分を乾燥させ、恒量を確認して乾燥重量を測定した。当該乾燥条件では、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）の減量はわずかであることから、乾燥前後の重量より酢酸ビニルの重合転化率を計算したところ５４％であった。

次いでセパラブルフラスコの内容物に塩酸を加えてｐＨを２以下に調整し第三リン酸カルシウムを溶解させ、その後水で良く洗浄した。洗浄液のｐＨが中性付近になったことを確認した後、水をアセトンで置換し、アセトンで十分に洗浄した。次いでアセトンを水で置換した後、酢酸ビニル単位に対して過剰量となるよう下式の量の水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）を水溶液として加えた。

ＮａＯＨ（固形分重量）＝粒子乾燥重量／８６．０９×４０×１．５
なお水に対するＮａＯＨ濃度が４重量％になるように水量は調整した。これを撹拌下、反応温度４０℃で６時間保持して鹸化を行った。その後、洗浄液のｐＨが中性付近になるまで水洗し、次いで温水を加えて８０℃で十分に洗浄を行った。さらに温水を加えて１２１℃のオートクレーブで２０分間の処理を２回行い、清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液中のトータルカーボン（ＴＣ）を、ＳＩＭＡＤＺＵ ＴＯＣ−５０００Ａを用いて測定したところ４．８ｐｐｍであり、溶出物はわずかであった。

得られた架橋ポリマー粒子を、ＯＭＲＯＮ ３Ｄデジタルファインスコープを用いて水中で撮影した画像より求めた数平均粒子径は３３２μｍ、体積平均粒子径は４７２μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は７４体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は４９体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．０７７体積％であった。タッピング等により水中で均一に沈降させた粒子の沈降体積１ｍｌあたりの乾燥固形分重量（かさ比重）は０．１４２ｇ／ｍＬであった。

得られた架橋ポリマー粒子を、水中における細孔構造を保ったまま観察するため、エタノール濃度を徐々に高くしながら含水をエタノールで置換し、次いで徐々に濃度を高くしながらｔ−ブタノールで完全に置換し凍結真空乾燥させた。この乾燥に伴い粒子に目立った収縮や膨張がないことをＯＭＲＯＮ ３Ｄデジタルファインスコープで確認した。蒸着処理の上、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）で粒子の表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が多数存在することを確認した。

得られた架橋ポリマー粒子について、条件をそろえるため大粒子（目開き７１０μｍのメッシュ上）および小粒子や微粒子（目開き３００μｍのメッシュ下）を分級操作で除いた後、下記の評価を行った。

該架橋ポリマー粒子を脱水して恒量まで真空乾燥させ、マイクロコーダーＪＭ１０（ジェイ・サイエンス・ラボ）を用いて元素分析を行い、乾燥重量中の窒素（Ｎ）含有量を求めたところ７．８重量％であった。また、該元素分析値から次式により該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するトリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）単位の割合を計算したところ４６．３重量％であった。

ＴＡＩＣ含有量＝Ｎ含有量×ＴＡＩＣ分子量／（Ｎ原子量×ＴＡＩＣ中のＮ原子数）

該架橋ポリマー粒子の体積弾性率を次の方法で測定した。まず、内径が１５ｍｍの目盛り付き硬質ガラス製シリンダに水に分散した該粒子の懸濁液を加え、タッピング等により粒子を均一に充填して非加重時の沈降体積が４ｍＬになるよう粒子を正確に計り取った。次いでシリンダの内径より若干小さく、ピストンとシリンダとの間を水は自由に通過できるが粒子は通さないような直径を有するピストンを用い、充填された粒子をオートグラフ（ＳＨＩＭＡＤＺＵ ＥＺ−ＴＥＳＴ）により５ｍｍ／ｍｉｎの速度で圧した。荷重が２０Ｎを超えるか、もしくは充填体積が２０％減少するまで圧縮して、変位と荷重変化を測定した。次式による、水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の該架橋ポリマー粒子の体積弾性率は０．２００ＭＰａであった。

体積弾性率＝（荷重変化／シリンダ断面積）／単位体積あたりの充填体積変化

水中で均一に沈降させた該架橋ポリマー粒子１ｍＬを計り取り、生理食塩水で含水を置換した後、ヘパリンを添加した健常人の新鮮血１０ｍＬと３７℃インキュベータ中で３０分間穏やかに撹拌しつつ接触させた。サンプリングした血液を所定の処理を行った後、外部検査機関（株式会社エスアールエルおよびシオノギ バイオメディカル ラボラトリーズ）に依頼して活性化補体（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）濃度および顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度を測定した。その結果、該架橋ポリマー粒子と接触後も活性化補体（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）濃度は比較的低値にとどまり、補体系の活性化は軽微であった。また、顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度は比較的低値にとどまり、白血球の活性化は軽微であった。

水中で均一に沈降させた該架橋ポリマー粒子１ｍＬを計り取り、生理食塩水で含水を置換した後、健常人のクエン酸抗凝固新鮮血漿６ｍＬと３７℃インキュベータ中で１２０分間穏やかに撹拌しつつ接触させた。サンプリングした血漿について外部検査機関（シオノギ バイオメディカル ラボラトリーズ）に依頼してフィブリノーゲン濃度およびアルブミン濃度を測定し、同体積の生理食塩水のみで粒子を含まない場合と比較した。その結果、フィブリノーゲン濃度やアルブミン濃度はほとんど変化せず、該架橋ポリマー粒子への非特異的な吸着はほとんど認められなかった。

水中で均一に沈降させた該架橋ポリマー粒子１ｍＬを計り取り、ヘパリン添加生理食塩水で含水を置換した後、少量のヘパリンを添加した健常人の新鮮血６ｍＬと３７℃インキュベータ中で１２０分間穏やかに撹拌しつつ接触させた。サンプリングした血液を所定の処理を行った後、外部検査機関（シオノギ バイオメディカル ラボラトリーズ）に依頼してトロンビン・アンチトロンビンIII複合体（ＴＡＴ）濃度を測定した。その結果、該架橋ポリマー粒子と接触後もトロンビン・アンチトロンビンIII複合体（ＴＡＴ）濃度は比較的低値にとどまり、凝固系の活性化は軽微であった。

入口と出口に目開き１５０μｍのメッシュを配した内径１０ｍｍのカラムに、生理食塩水で含水を置換した該粒子を沈降体積で２．７ｍＬ充填し、ヘパリン添加生理食塩水８．１ｍＬを流通させプライミング操作を行った。ヘパリンを添加した健常人の新鮮血４０ｍＬを３７℃のウオーターバス中におき、これを血液プールとして血液を２．４ｍＬ／ｍｉｎの速度で１２０分間カラムに循環させた。通血の間、カラムに充填された該架橋ポリマー粒子に明瞭な変形や圧密化は観察されなかった。また、カラム入口側と出口側から少量の血液をサンプリングし、血球カウンターを用いて血液細胞数を測定した。その結果、赤血球、白血球、血小板の通過性はいずれも良好であり、血液細胞の該架橋ポリマー粒子への付着は軽微であった。さらに、白血球や血小板の活性化を示す指標として１２０分間循環後の顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度やβ−ＴＧ濃度を外部検査機関（シオノギ バイオメディカル ラボラトリーズ）にて測定した。その結果、ＰＭＮ−Ｅ濃度やβ−ＴＧ濃度の上昇は比較的小さく、白血球や血小板の活性化は軽微であった。なお、通血後のカラムには明瞭な血栓等は観察されなかった。

あらかじめデカンテーションにより上澄み中の微粒子を除いた該架橋ポリマー粒子を沈降体積で５ｍＬ計り取り、ガラス製の共栓付試験管中へ水とともに加えて全量を２０ｍＬとした。これを３００往復／分で１分間激しく振盪させた後、上澄み１０ｍＬを採取して替わりに水１０ｍＬを加えた。この操作を６０回繰り返し、上澄み中に含まれる１０μｍ以上の微粒子数の変化をコールターカウンター（アパーチャー径１００μｍ）で測定した。なおコールターカウンターによる粒子径は、ＯＭＲＯＮ ３Ｄデジタルファインスコープで撮影した画像から求めた水中の体積平均粒子径で補正した。その結果、激しい振盪を６０回繰り返した後の上澄み中の微粒子数は低値であり、該架橋ポリマー粒子は強い機械的刺激によっても微粒子を発生させ難いものであることを確認した。

該架橋ポリマー粒子の特性と評価結果を表１〜３に示した。

（実施例２）
酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）２４重量部、酢酸エチル１０８重量部、ヘプタン４９重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度４００）９．６重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）５．０重量部よりなる単量体混合物５０２．６ｇを、水６３５．６重量部、ポリビニルアルコール０．０９５重量部、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウム０．０２１重量部、微粒子状の第三リン酸カルシウム４．７３重量部（固形分）、亜硝酸ナトリウム０．０３５重量部を含む水相１０８８．９ｇがあらかじめ仕込まれた、平板状の撹拌翼と２枚の邪魔板を有する２Ｌセパラブルフラスコ中に室温で添加した。十分な撹拌混合および窒素置換を行った後、内温を６５℃に５時間保持して懸濁重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は６０％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液中のトータルカーボン（ＴＣ）測定値は３．４ｐｐｍであり、溶出物はわずかであった。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は３０８μｍ、体積平均粒子径は４８０μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は６７体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は４５体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．１３体積％であった。また、かさ比重は０．１５６ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が多数存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中のＮ含有量は７．３重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は４３．２重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．２２２ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該架橋ポリマー粒子と接触後も活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は比較的低値にとどまり、補体系の活性化は軽微であった。血漿中のフィブリノーゲンやアルブミンの該架橋ポリマー粒子への非特異的な吸着はほとんど認められなかった。さらに、該架橋ポリマー粒子と接触後もトロンビン・アンチトロンビンIII複合体（ＴＡＴ）濃度は比較的低値にとどまり、凝固系の活性化は軽微であった。

また、激しい振盪を６０回繰り返した後の上澄み中の微粒子数は低値であり、該架橋ポリマー粒子は強い機械的刺激によっても微粒子を発生させ難いものであることを確認した。

（実施例３）
酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）２６重量部、酢酸エチル１２２重量部、ヘプタン５１重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度４００）１２．８重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）５．１重量部よりなる単量体混合物５２２．９ｇを、水６８１．４重量部、ポリビニルアルコール０．１０１重量部、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウム０．０２２重量部、微粒子状の第三リン酸カルシウム５．０７重量部（固形分）、亜硝酸ナトリウム０．０３８重量部を含む水相１１３２．９ｇがあらかじめ仕込まれた、平板状の撹拌翼と２枚の邪魔板を有する２Ｌセパラブルフラスコ中に室温で添加した。十分な撹拌混合および窒素置換を行った後、内温を６５℃に５時間保持して懸濁重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は４７％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液中のトータルカーボン（ＴＣ）測定値は１．９ｐｐｍであり、溶出物はわずかであった。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は３８３μｍ、体積平均粒子径は４８６μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は６８体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は３６体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．０２０体積％であった。また、かさ比重は０．１３８ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が多数存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中のＮ含有量は８．３重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は４９．０重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．２３９ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該架橋ポリマー粒子と接触後も活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は比較的低値にとどまり、補体系の活性化は軽微であった。また、該架橋ポリマー粒子と接触後も顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度は比較的低値にとどまり、白血球の活性化は軽微であった。血漿中のフィブリノーゲンやアルブミンの該架橋ポリマー粒子への非特異的な吸着はほとんど認められなかった。

また、激しい振盪を６０回繰り返した後の上澄み中の微粒子数は低値であり、該架橋ポリマー粒子は強い機械的刺激によっても微粒子を発生させにくいものであることを確認した。

（実施例４）
酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）２０．７重量部、酢酸エチル１９２重量部、ヘプタン６４重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度５００）１２．８重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）４．９重量部よりなる単量体混合物５１２．８ｇを、水８５０．５重量部、ポリビニルアルコール０．１２５重量部、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウム０．０２８重量部、微粒子状の第三リン酸カルシウム６．３３重量部（固形分）、亜硝酸ナトリウム０．０４８重量部を含む水相１１１４．１ｇがあらかじめ仕込まれた、平板状の撹拌翼と２枚の邪魔板を有する２Ｌセパラブルフラスコ中に室温で添加した。十分な撹拌混合および窒素置換を行った後、内温を６５℃に５時間保持して懸濁重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は３６％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液中のトータルカーボン（ＴＣ）測定値は７．１ｐｐｍであり、溶出物はわずかであった。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は３０１μｍ、体積平均粒子径は４２１μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は６５体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は３６体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．１４体積％であった。また、かさ比重は０．０９６ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が多数存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中のＮ含有量は７．６重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は４５．２重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．０４５ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該架橋ポリマー粒子と接触後も活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は比較的低値にとどまり、補体系の活性化は軽微であった。血漿中のフィブリノーゲンやアルブミンの該架橋ポリマー粒子への非特異的な吸着はほとんど認められなかった。

さらに、該架橋ポリマー粒子をカラムに充填し血液循環実験を行ったところ、該架橋ポリマー粒子に明瞭な変形や圧密化は観察されず、赤血球、白血球、血小板の通過率はいずれも良好であり、血液細胞の該架橋ポリマー粒子への付着は軽微であった。なお、通血後のカラムには明瞭な血栓等は観察されなかった。

また、激しい振盪を６０回繰り返した後の上澄み中の微粒子数は低値であり、該架橋ポリマー粒子は強い機械的刺激によっても微粒子を発生させにくいものであることを確認した。

（実施例５）
ジャケットおよび撹拌翼を有する重合反応器に、水１６．０５ｋｇ、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウムの３重量％水溶液７４．２ｇ、微粒子状の第三リン酸カルシウムの１０重量％スラリー５．０９ｋｇを仕込み、穏やかに撹拌させておいた。

液滴生成装置として、分散媒を満たしたカラムに単量体混合物を噴出する３つのノズルを挿入し、ノズルの上端は孔径０．１７ｍｍの小孔を４５個有するオリフィス板よりなり、下端には振動を伝達する振動板を設置し、振動板を加振器と接続したものを用いた。カラムには分散媒タンクより分散媒を供給する導入管を接続し、ノズルには単量体混合物タンクより単量体混合物を供給する導入管を接続した。単量体混合物の供給には定量性が高く脈動の少ない３連プランジャーポンプを使用した。該液滴生成装置は、重合反応器の底部に液滴の導入管を介して接続した。

単量体混合物タンクより、酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）２０．７重量部、酢酸エチル１９２重量部、ヘプタン６４重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度８００）９．６重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）４．９重量部よりなる単量体混合物１９．５３ｋｇを、３３８ｍＬ／ｍｉｎの速度でノズルに供給し、液滴生成装置を経由して重合反応器に仕込んだ。それと同時に分散媒タンクより、分散媒として０．３重量％のポリビニルアルコールおよび１２０ｐｐｍの亜硝酸ナトリウムを含む水溶液２１．２１ｋｇを２８７ｍＬ／ｍｉｎの速度でカラムに供給し、液滴生成装置を経由して重合反応器に仕込んだ。

この際、単量体混合物には加振器により４００Ｈｚの機械的振動を与えた。ノズル孔より噴出する単量体混合物は、該機械的振動により分割されて実質的に均一な径の液滴をカラム中に形成し、同時に供給される分散媒とともに均一な径を保ったまま重合反応器内へ送られた。

上記液滴生成装置で生成した液滴を重合反応器内へ導入した後、重合反応器内の窒素置換を行い、内温を６５℃に５時間保持して重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は４１％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液中のトータルカーボン（ＴＣ）測定値は３．８ｐｐｍであり、溶出物はわずかであった。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は４０８μｍ、体積平均粒子径は４８６μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は９３体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は８６体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．０４２体積％であった。また、かさ比重は０．１０４ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中のＮ含量は８．１重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は４８．０重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．０３４ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該架橋ポリマー粒子と接触後も活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は低値にとどまり、補体系の活性化は軽微であった。また、該架橋ポリマー粒子と接触後も顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度は比較的低値にとどまり、白血球の活性化は軽微であった。血漿中のフィブリノーゲンやアルブミンの該架橋ポリマー粒子への非特異的な吸着はほとんど認められなかった。さらに、該架橋ポリマー粒子と接触後もトロンビン・アンチトロンビンIII複合体（ＴＡＴ）濃度は比較的低値にとどまり、凝固系の活性化は軽微であった。

また、激しい振盪を６０回繰り返した後の上澄み中の微粒子数は低値であり、該架橋ポリマー粒子は強い機械的刺激によっても微粒子を発生させ難いものであることを確認した。

（実施例６）
撹拌翼を有する２Ｌセパラブルフラスコ中に、水４３８．２ｇ、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウムの３重量％水溶液１．８３ｇ、微粒子状の第三リン酸カルシウムの１０重量％スラリー１２６．４ｇを仕込み、穏やかに撹拌させておいた。

液滴生成装置として、分散媒を満たしたカラムに単量体混合物を噴出するノズルを挿入し、ノズルの上端は孔径０．１７ｍｍの小孔を１２個有するオリフィス板よりなり、下端には振動を伝達する振動板を設置し、振動板を加振器と接続したものを用いた。カラムには分散媒タンクより分散媒を供給する導入管を接続し、ノズルには単量体混合物タンクより単量体混合物を供給する導入管を接続した。単量体混合物の供給には定量性が高く脈動の少ない２連プランジャーポンプを使用した。

単量体混合物タンクより、酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）２６重量部、酢酸エチル１２２重量部、ヘプタン５１重量部、ポリ酢酸ビニル（平均重合度４００）１２．８重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）５．１重量部よりなる単量体混合物５２３．６ｇを、２７．６ｍＬ／ｍｉｎの速度でノズルに供給し、液滴生成装置を経由して重合反応器に仕込んだ。それと同時に分散媒タンクより、分散媒として０．１重量％のポリビニルアルコールおよび１１０ｐｐｍの亜硝酸ナトリウムを含む水溶液６１０．８ｇをカラムに供給し、液滴生成装置を経由して重合反応器に仕込んだ。

この際、単量体混合物には加振器により周波数５００Ｈｚ、強度０．４Ｇの機械的振動を与えた。ノズル孔より噴出する単量体混合物は、該機械的振動により分割されて実質的に均一な径の液滴をカラム中に形成し、同時に供給される分散媒とともに重合反応器内へ送られた。

上記液滴生成装置で生成した液滴を重合反応器内へ導入した後、重合反応器内の窒素置換を行い、内温を６５℃に５時間保持して重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は５１％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液のトータルカーボン（ＴＣ）は２．８ｐｐｍであり、溶出物はわずかであった。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は４５９μｍ、体積平均粒子径は４６９μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は９９体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は９８体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．００６体積％であった。また、かさ比重は０．１３４ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中のＮ含量は７．８重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は４６．１重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．２０４ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該架橋ポリマー粒子と接触後も活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は比較的低値にとどまり、補体系の活性化は軽微であった。また、該架橋ポリマー粒子と接触後も顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度は比較的低値にとどまり、白血球の活性化は軽微であった。血漿中のフィブリノーゲンやアルブミンの該架橋ポリマー粒子への非特異的な吸着はほとんど認められなかった。

また、激しい振盪を６０回繰り返した後の上澄み中の微粒子数は低値であり、強い機械的刺激によっても微粒子を発生させ難いものであることを確認した。

（実施例７）
撹拌翼を有する２Ｌセパラブルフラスコ中に、水５７９．７ｇ、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウムの３重量％水溶液１．８７ｇ、微粒子状の第三リン酸カルシウムの１０重量％スラリー１２８．８ｇを仕込み、穏やかに撹拌させておいた。

実施例６と同様の液滴生成装置を使用し、単量体混合物タンクより、酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）２８重量部、酢酸エチル１１２重量部、ヘプタン５１重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度４００）９．６重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）５．２重量部よりなる単量体混合物５２３．６ｇを、２７．６ｍＬ／ｍｉｎの速度でノズルに供給し、液滴生成装置を経由して重合反応器に仕込んだ。それと同時に分散媒タンクより、分散媒として０．１重量％のポリビニルアルコールおよび１１０ｐｐｍの亜硝酸ナトリウムを含む水溶液５８２．２ｇをカラムに供給し、液滴生成装置を経由して重合反応器に仕込んだ。

この際、単量体の混合液には加振器により周波数５００Ｈｚ、強度０．２Ｇの機械的振動を与えた。ノズル孔より噴出する単量体混合物は、該機械的振動により分割されて実質的に均一な径の液滴をカラム中に形成し、同時に供給される分散媒とともに重合反応器内へ送られた。

上記液滴生成装置で生成した液滴を重合反応器内へ導入した後、重合反応器内の窒素置換を行い、内温を６５℃に５時間保持して重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は４７％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液のトータルカーボン（ＴＣ）は４．４ｐｐｍであり、溶出物はわずかであった。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は４７０μｍ、体積平均粒子径は４７９μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は９６体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は９６体積％であり、１００μｍ未満の粒子はデジタルファインスコープを用いて撮影した画像には確認されなかった。また、かさ比重は０．１４５ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中のＮ含量は７．９重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は４６．５重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．３１３ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該架橋ポリマー粒子と接触後も活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は比較的低値にとどまり、補体系の活性化は軽微であった。また、該架橋ポリマー粒子と接触後も顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度は比較的低値にとどまり、白血球の活性化は軽微であった。血漿中のフィブリノーゲンやアルブミンの該架橋ポリマー粒子への非特異的な吸着はほとんど認められなかった。

また、激しい振盪を６０回繰り返した後の上澄み中の微粒子数は低値であり、該架橋ポリマー粒子は強い機械的刺激によっても微粒子を発生させ難いものであることを確認した。

（実施例８）
撹拌翼を有する８Ｌセパラブルフラスコ中に、水１７７６．３ｇ、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウムの３重量％水溶液７．４ｇ、微粒子状の第三リン酸カルシウムの１０重量％スラリー５０７．５ｇを仕込み、穏やかに撹拌させておいた。

実施例６と同様の液滴生成装置を使用し、単量体混合物タンクより、酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）３２重量部、酢酸エチル１１６重量部、ヘプタン５３重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度４００）９．６重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）５．０重量部よりなる単量体混合物２１１４．２ｇを、２７．６ｍＬ／ｍｉｎの速度でノズルに供給し、液滴生成装置を経由して重合反応器に仕込んだ。それと同時に分散媒タンクより、分散媒として０．１重量％のポリビニルアルコールおよび１１０ｐｐｍの亜硝酸ナトリウムを含む水溶液２２９７．４ｇをカラムに供給し、液滴生成装置を経由して重合反応器に仕込んだ。

この際、単量体の混合液には加振器により周波数５００Ｈｚ、強度０．２Ｇの機械的振動を与えた。ノズル孔より噴出する単量体混合物は、該機械的振動により分割されて実質的に均一な径の液滴をカラム中に形成し、同時に供給される分散媒とともに重合反応器内へ送られた。

上記液滴生成装置で生成した液滴を重合反応器内へ導入した後、重合反応器内の窒素置換を行い、内温を６５℃に５時間保持して重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は４８％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液のトータルカーボン（ＴＣ）は４．５ｐｐｍであり、溶出物はわずかであった。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は４６８μｍ、体積平均粒子径は４８５μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は９３体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は９１体積％であり、１００μｍ未満の粒子はデジタルファインスコープを用いて撮影した画像には確認されなかった。また、かさ比重は０．１４０ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中のＮ含量は８．４重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は４９．６重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．３２５ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該架橋ポリマー粒子と接触後も活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は比較的低値にとどまり、補体系の活性化は軽微であった。また、該架橋ポリマー粒子と接触後も顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度は比較的低値にとどまり、白血球の活性化は軽微であった。血漿中のフィブリノーゲンやアルブミンの該架橋ポリマー粒子への非特異的な吸着はほとんど認められなかった。

また、激しい振盪を６０回繰り返した後の上澄み中の微粒子数は低値であり、該架橋ポリマー粒子は強い機械的刺激によっても微粒子を発生させ難いものであることを確認した。

（比較例１）
酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）２０．７重量部、酢酸エチル１２８重量部、ヘプタン４２．７重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度５００）１２．８重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）４．９重量部よりなる混合液５２５．５ｇを、水６６６．４重量部、ポリビニルアルコール０．０９８重量部、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウム０．０２２重量部、微粒子状の第三リン酸カルシウム４．９６重量部（固形分）、亜硝酸ナトリウム０．０３８重量部を含む水相１１４１．６ｇがあらかじめ仕込まれた、平板状の撹拌翼と２枚の邪魔板を有する２Ｌセパラブルフラスコ中に室温で添加した。十分な撹拌混合および窒素置換を行った後、内温を６５℃に５時間保持して懸濁重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は５５％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液中のトータルカーボン（ＴＣ）測定値は５．２ｐｐｍであった。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は３３０μｍ、体積平均粒子径は５１０μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は６９体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は３５体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．０８６体積％であった。また、かさ比重は０．１５０ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が多数存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該粒子の乾燥重量中のＮ含有量は６．８重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は４０．５重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．１２ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該粒子と接触後に活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は高値を示し、補体系の活性化が認められた。また、該粒子と接触後に顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度は相対的に高値を示し、白血球の活性化が認められた。さらに、該粒子と接触後にトロンビン・アンチトロンビンIII複合体（ＴＡＴ）濃度は相対的に高値を示し、凝固系の活性化が認められた。

（比較例２）
酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）２５．９重量部、酢酸エチル１７３．６重量部、ヘプタン５７．９重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度５００）１３．４重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）２．６重量部および２，２’−アゾビス（イソブチロニトリル）（ＡＩＢＮ）１．７重量部よりなる単量体混合物５２４．９ｇを、水８０８．３重量部、ポリビニルアルコール０．１１９重量部、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウム０．０２７重量部、微粒子状の第三リン酸カルシウム６．０２重量部（固形分）、亜硝酸ナトリウム０．０４６重量部を含む水相１１４０．３ｇがあらかじめ仕込まれた、平板状の撹拌翼と２枚の邪魔板を有する２Ｌセパラブルフラスコ中に室温で添加した。十分な撹拌混合および窒素置換を行った後、内温を６５℃に８時間保持して懸濁重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は９１％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は２３８μｍ、体積平均粒子径は４１２μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は５６体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は３３体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．４０体積％であった。また、かさ比重は０．１２２ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が多数存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中のＮ含有量は６．９重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は４１．０重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．０９６ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該粒子と接触後に活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は相対的に高値を示し、補体系の活性化が認められた。また、該粒子と接触後に顆粒球エラスターゼ濃度（ＰＭＮ−Ｅ）は相対的に高値を示し、白血球の活性化が認められた。

（比較例３）
酢酸ビニル１００重量部、トリアリルイソシアヌレート（ＴＡＩＣ）３１．１重量部、酢酸エチル２０８．５重量部、ヘプタン６９．５重量部、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）（平均重合度５００）１２．８重量部、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（Ｖ−６５）５．３重量部よりなる単量体混合物５３４ｇを、水９２１重量部、ポリビニルアルコール０．１３６重量部、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウム０．０３重量部、微粒子状の第三リン酸カルシウム６．８６重量部（固形分）、亜硝酸ナトリウム０．０５２重量部を含む水相１１６０．１ｇがあらかじめ仕込まれた、平板状の撹拌翼と２枚の邪魔板を有する２Ｌセパラブルフラスコ中に室温で添加した。十分な撹拌混合および窒素置換を行った後、内温を６５℃に５時間保持して懸濁重合させた。酢酸ビニルの重合転化率は３５％であった。

その後、実施例１と同様の操作を経て清浄な架橋ポリマー粒子を得た。オートクレーブ操作２回目の抽出液中のトータルカーボン（ＴＣ）測定値は３．３ｐｐｍであった。

以下、実施例１と同様に測定した。得られた架橋ポリマー粒子の水中における数平均粒子径は２８６μｍ、体積平均粒子径は４３８μｍであった。体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は７２体積％であり、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は４１体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．１４体積％であった。また、かさ比重は０．０８０ｇ／ｍＬであった。

ＳＥＭで表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が多数存在することを確認した。

以下、得られた架橋ポリマー粒子の評価を実施例１と同様に行った。

該架橋ポリマー粒子の乾燥重量中のＮ含有量は９．３重量％であった。また、該架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対するのＴＡＩＣ単位の割合は５５．１重量％であった。該架橋ポリマー粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．０５０ＭＰａであった。

血液を用いた評価を行った結果、該粒子と接触後に血漿中のフィブリノーゲン濃度の大幅な低下が観察され、フィブリノーゲンが該粒子へ非特異的に吸着し失われたものと考えられた。

また、激しい振盪を６０回繰り返した後の上澄み中の微粒子数は高値を示し、該粒子は機械的刺激によって微粒子を発生させ易いものであることがわかった。

（比較例４）
ビニルアルコール単位を有する合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子の替わりに、かさ比重が０．０５５ｇ／ｍＬである多孔質のセルロース粒子を用いた。

以下、実施例１と同様に測定した。該セルロース粒子の水中における数平均粒子径は４５７μｍ、体積平均粒子径は４８５μｍであり、体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にある粒子の割合は８７体積％で、体積平均粒子径の０．９倍から１．１倍の範囲内にある粒子の割合は４６体積％であり、１００μｍ未満の粒子の割合は０．０１３体積％であった。

ＳＥＭで該セルロース粒子の表面及び断面を観察したところ、粒子全体にミクロンオーダー以下の微細な細孔が多数存在することを確認した。

以下、実施例１と同様に評価を行った。

該セルロース粒子を水中でシリンダに充填しピストンで圧した際の体積弾性率は０．２２ＭＰａであった。

血液を用いた評価の結果、該セルロース粒子と接触後に活性化補体濃度（Ｃ５ａ、Ｃ３ａ）は相対的に高値を示し、補体系の活性化が認められた。また、該セルロース粒子と接触後に顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度は相対的に高値を示し、白血球の活性化が認められた。

さらに、該セルロース粒子をカラムに充填し血液循環実験を行ったところ、該セルロース粒子に明瞭な変形や圧密化は観察されなかったものの、白血球および血小板の通過率がやや低く、白血球および血小板の該セルロース粒子への付着が認められた。また、１２０分間の血液循環後の顆粒球エラスターゼ（ＰＭＮ−Ｅ）濃度やβ−ＴＧ濃度は相対的に高値を示し、白血球や血小板の活性化が認められた。

Claims (7)

1. ビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子であって、元素分析法により特定される乾燥重量での窒素含有量が７．３〜９．２重量％である架橋ポリマー粒子。
2. ビニルアルコール単位および窒素を含有する重合単位を構成要素として含む合成高分子よりなる架橋ポリマー粒子であって、架橋ポリマー粒子を構成する全重合単位に対する窒素を含有する重合単位の割合が４３．０〜５４．０重量％である架橋ポリマー粒子。
3. カルボン酸ビニルエステルおよび窒素を含有するビニル化合物を含む単量体混合物を重合させ、カルボン酸ビニルエステル単位を構成要素の一つとする架橋重合体を形成し、その後鹸化及び／もしくはエステル交換反応を行ってカルボン酸ビニルエステル単位の一部もしくは全部をビニルアルコール単位とした請求項１から２に記載の架橋ポリマー粒子。
4. カルボン酸ビニルエステル、トリアジン環構造を有するビニル化合物、以下必要に応じて、その他のビニル化合物、非重合性液体、線状ポリマー、重合開始剤等を含む単量体混合物を、カルボン酸ビニルエステルの重合転化率が１０〜８０％の範囲になるように重合させてカルボン酸ビニルエステル単位を構成要素の一つとする架橋重合体を形成し、その後鹸化及び／もしくはエステル交換反応を行ってカルボン酸ビニルエステル単位の一部もしくは全部をビニルアルコール単位とした請求項１から２に記載の架橋ポリマー粒子。
5. 体積平均粒子径が１００〜３０００μｍの架橋ポリマー粒子であって、該粒子の８０体積％以上が体積平均粒子径の０．８倍から１．２倍の範囲内にあり、かつ１００μｍ未満の粒子が５体積％以下である請求項１から４に記載の架橋ポリマー粒子。
6. 単量体混合物の均一な径の液滴を分散媒中に形成させた後、該液滴を合着または付加的な分散を生じることのない条件下で重合させ、必要に応じて処理、改質することにより得られる請求項１から５に記載の架橋ポリマー粒子。
7. ノズル孔から分散媒中に噴出する単量体混合物の液柱に規則的な振動撹乱を与えて均一な径の液滴を分散媒中に形成させた後、該液滴を合着または付加的な分散を生じることのない条件下で重合させ、必要に応じて処理、改質する請求項６に記載の架橋ポリマー粒子の製造方法。