JP2005295834A

JP2005295834A - 生体ホールドキット及び保管容器

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Publication number: JP2005295834A
Application number: JP2004113764A
Authority: JP
Inventors: Takafumi Kajitani; 隆文梶谷
Original assignee: KAJIKKUSU TRADING KK
Current assignee: KAJIKKUSU TRADING KK
Priority date: 2004-04-08
Filing date: 2004-04-08
Publication date: 2005-10-27
Anticipated expiration: 2024-04-08
Also published as: JP4634062B2

Abstract

【課題】保存・搬送が効率良く行え、マルチウエルプレートの各ウエルに検体を確実に供給することができると共に、微生物を長期間生存させることができ、しかも繰り返し使用することが可能な生体ホールドキット及びその専用の保管容器を提供する。
【解決手段】複数のウエル４０１が配列されているマルチウエルプレート４００の上面に配置される板状部３と、板状部３のウエル４０１に対応した位置にウエル４０１内に挿入されるように突出して設けられた突起部４と、突起部４の突端部に保持された吸水性部材５とを有する構造の生体ホールドキット１とする。この生体ホールドキット１の各突起部４ごとに封入して収容する構造の保管容器１００を用いて生体ホールドキット１を保存する。
【選択図】図１

Description

本発明は、大腸菌、ファージ、ＤＮＡ、細胞などの保存、搬送に用いられる生体ホールドキット及びその保管容器に関する。

従来から、新薬開発のソースとして微生物の産生する物質が用いられており、そのような有用産物を産生する微生物の探索が行われている。

また、最近の遺伝子組み換え技術の発展により、有用物質のＤＮＡ（ＲＮＡ）を大腸菌やファージ等に形質転換させて増殖させることにより、目的としたＤＮＡを大量に生産することができる。また、ＰＣＲ法によってＤＮＡを試験管の中で増幅させる方法も行われている。

このような実験を行う場合に、複数のウエルが規則正しく配置されたマルチウエルプレートが用いられる。マルチウエルプレートを使用することにより、一枚のプレートで多くのサンプルを扱い、実験の効率化を図ることができる。

図４にマルチウエルプレートの一例を示す。図４（ａ）は平面図、図４（ｂ）はＡ−Ａ’線に沿った断面図を示す。このマルチウエルプレート４００には、横１２列、縦８行の合計９６のウエル４０１が設けられている。このマルチウエルプレート４００の各ウエル４０１に培養液を注入し、各ウエル４０１に大腸菌やＤＮＡ等を入れて培養を行う。

現在、極めて多種類の大腸菌等の微生物やＤＮＡ等の検体が保存され、それを増幅して検査や治療に使用している。保存方法は、通常、穿刺培養法、冷凍法、凍結乾燥法などである。保存されている微生物などを保管している研究機関などが、他の研究機関の求めに応じて、微生物などを保存しながら搬送して供給することが行われる。

微生物などを保存・搬送する方法としては、従来、シャーレに定量の濾紙を敷き、濾紙に検体を染み込ませて保存する方法が一般的である。

しかし、この方法によると、微生物では、保存・搬送時にかさばってしまい、大量に送るには運送費用が多大であると共に、大きな保管場所が必要となる。増幅する場合にもシャーレから取り出した微生物を一つずつ取りだしてマルチウエルプレートの各ウエルに植え付ける煩雑さがあった。

また、ＤＮＡでは、濾紙に染み込ませ乾燥したものを保存していたが、実施に使用する都度濾紙を切ってマルチウエルプレートの各ウエルの培養液に浸す必要があり、培養後も、各ウエルから濾紙を取り除かなければならず、非常に繁雑な作業が必要であった。

このような問題を解決するため、下記の特許出願において、上下２枚のシートの間にマルチウエルプレートの各ウエルに対応する位置毎に合成樹脂シートを打ち抜き、この合成樹脂シートの両面に粘着性のシートを打ち抜き部に濾紙を配した状態で貼り合わせて用いる薄いシート状保存・搬送容器が開発されている。

上記シート状保存・搬送容器は、薄く、嵩張らず、破損するおそれもないと共に、マルチウエルプレートの各ウエルに一度に検体を供給することができるなど、優れた保存・搬送容器である。
特願２００３−３５９５３４

しかしながら、上記シート状保存・搬送容器は、濾紙が付着した粘着シートをマルチウエルプレートに貼り付けて用いるため、接着不良箇所で雑菌のコンタミネーションを起こしやすく、また、粘着シートをマルチウエルプレートから剥がすときに隣接のウエルの液だれによる混濁が起こりやすいという問題点がある。また、使い捨てであり、繰り返し使用できず、貴重な検体を無駄にしてしまうという問題点もある。更に、薄いシートの中に密封するため、空気量が少なく、検体の大腸菌が長時間生きられないという問題点がある。

本発明は、上記事情に鑑みてなされたもので、保存・搬送が効率良く行え、マルチウエルプレートの各ウエルに検体を確実に供給することができると共に、微生物を長期間生存させることができ、しかも繰り返し使用することが可能な生体ホールドキットを提供することを目的とする。

また、本発明は、かかる生体ホールドキットを密封して保存・搬送することができる保管容器を提供することを目的とする。

上記目的を達成するため、本発明は、複数のウエルが配列されているマルチウエルプレートの上面に配置される板状部と、前記板状部のそれぞれの前記ウエルに対応した位置に前記ウエル内に挿入されるように突出して設けられた突起部と、前記突起部の突端部に保持された吸水性部材とを有することを特徴とする生体ホールドキットを提供する。

この生体ホールドキットの使用方法は、それぞれの突起部の突端部に保持されている吸水性部材に検体を滲入させる操作を行った後、保管容器に入れて保存し、搬送する。使用時には、保管容器から取り出し、マルチウエルプレートの上面に突起部が下になるように板状部を載置すると、それぞれの突起部がマルチウエルプレートの各ウエル内に進入し、突起部の突端部に保持されている吸水性部材がウエル内の培養液の中に浸漬し、検体を各ウエルに供給することができる。

この生体ホールドキットは、マルチウエルプレートのウエルに対応した多数の種類の検体をまとめて保存・搬送することができると共に、一回の操作でマルチウエルプレートの各ウエルに検体を供給することができる。そのため、保存・搬送効率が極めて良好である。しかも、独立した突起部に保持されている吸水性部材がウエル内の培養液中に浸漬した後、取り出すため、隣接のウエル間の混濁は生じ難い。また、一回検体を供給した後、再度保管容器に保管することが可能であるため、繰り返し使用が可能である。更に、吸水性部材が突起部の突端部に保持されている形状であり、突起部を収納する容器との間には空隙が生じるため、空隙にある空気で微生物を長期間生存させることが可能である。

また、本発明は、請求項１記載の生体ホールドキットにおいて、前記突起部が、前記板状部に開口部が形成された中空部を有することを特徴とする生体ホールドキットを提供する。

突起部を板状部に開口部が形成された中空状とすることにより、突起部を下側にした状態で検体を上側から供給することができる。これによって、マルチウエルプレートと同じ多連パターンで検体を供給することができる。

また、本発明は、請求項２記載の生体ホールドキットにおいて、前記中空部を有する突起部の突端部に貫通孔が設けられていることを特徴とする生体ホールドキットを提供する。

この貫通孔は、突起部の突端部の外側に保持されている吸水性部材に検体を供給する通路として機能する。

また、本発明は、複数のウエルが配列されているマルチウエルプレートの上面に配置される板状部と、前記板状部のそれぞれの前記ウエルに対応した位置に設けられた前記ウエル内に挿入されるように突出する突起部と、前記突起部の突端部に保持された吸水性部材とを有する生体ホールドキット用の保管容器であって、前記板状部を載置する平板部と、前記平板部の前記突起部に対応した位置に設けられたそれぞれの前記突起部を収容するウエルとを有する保管容器本体と、前記平板部に対して固定される蓋部とを有し、前記生体ホールドキットを収納したときにそれぞれの前記吸水性部材をそれぞれの前記収容用ウエル内に封入することを特徴とする保管容器を提供する。

この保管容器の使用方法は、本発明の生体ホールドキットの板状部を保管容器本体の平板部に載置し、蓋部を平板部に固定すると、保管容器の各ウエル内に各突起部がそれぞれ独立して封入して収容される。これによって、生体ホールドキットの各吸水性部材を密封し、隔離して保存・搬送を行うことができる。

本発明の生体ホールドキットは、保存・搬送が効率良く行え、マルチウエルプレートの各ウエルに検体を確実に供給することができると共に、微生物を長期間生存させることができ、しかも繰り返し使用することが可能である。

また、本発明の保管容器は、本発明の生体ホールドキットを密封して確実に保存・搬送することができる。

以下、本発明の生体ホールドキット及び保管容器の実施の形態について説明するが、本発明は以下の実施の形態に限定されるものではない。

図１は、本発明の生体ホールドキットの一実施形態を示すもので、図１（ａ）は平面図、図１（ｂ）は側面図である。

この生体ホールドキット１は、プラスチックの一体成形で形成されたキット本体２を有し、キット本体２は、マルチウエルプレートの上面に収まる形状の板状部３と、マルチウエルプレートの各ウエル内に収容される板状部３から突出した複数の突起部４とを有し、各突起部４の突端部に保持されている吸水性部材５を有する。

マルチウエルプレートの大きさ及び形は世界的にほぼ統一されており、形状は同じであるが、ウエルの大きさにより、４ウエル、１２ウエル、２４ウエル、４８ウエル、９６ウエル、３８４ウエルなどのバリエーションがあり、使用目的によって使い分けされる。

図４に示したマルチウエルプレート４００は、横１２列、縦８行の合計９６のウエル４０１が設けられている９６ウエルである。ポリプロピレンで一体成形されており、ＰＣＲ法での短時間の温度の上昇下降に耐えるようになっている。マルチウエルプレートには、ウエルの底面が平板状で透明なポリスチレンで成形されたものも存在する。マルチウエルプレート４００の各ウエル４０１の開口部の周縁は、上面からやや突き出たリブ状になっている。また、マルチウエルプレートの上面の周縁に上面から突出した外周リブ４０２が設けられている。また、マルチウエルプレート４００の一角に位置決めのための切り欠き部４０３が設けられている。

本発明の生体ホールドキット１は、いずれのマルチウエルプレートにも適用することができる。以下では、図４に示した９６ウエルのマルチウエルプレート４００に適した生体ホールドキットについて説明を行う。

キット本体２を構成する板状部３は、マルチウエルプレート４００の上面の周縁に設けられている外周リブ４０２の内面に外縁がほぼ接してマルチウエルプレート４００の上面に収まって配置される形状であり、マルチウエルプレート４００の一角に設けられている位置決めのための切り欠き部４０３に対応した切り欠き部３１を有する。

キット本体２を構成する突起部４は、板状部３と一体に形成され、マルチウエルプレート４００の各ウエルの中心と中心が一致するような位置に板状部３から突出してそれぞれ設けられている。９６ウエルのマルチウエルプレートに使用する場合は、９ｍｍピッチでウエルが形成されているため、同じピッチで突起部４が形成されている。

図２（ａ）に、図１（ａ）のＢ−Ｂ’線に沿った突起部４の一例と吸水性部材５の拡大断面図を示す。突起部４は基端側から突端側に行くに従って細くなるテーパー状の円錐台形になっており、板状部３に設けられた開口部４１と連通する中空部４２を有し、中空状になっている。突起部４の突端は円形の平坦な底面となっている。突端の底面の中央には薬液浸透用の貫通孔４３が穿設されている。突起部４の突端部に突起部４の底面と同じ程度の径を有する円盤状の吸水性部材５が接着剤で固定されている。突起部４の壁面には上下に延伸する矩形状の空気抜き孔４４が穿設されている。空気抜き孔４４の下端は突起部４の内底面より数ｍｍ程度高くすることが好ましい。突起部４の基端部の外径は、マルチウエルプレート４００のウエル４０１の開口端の内径よりわずかに小さくすることが好ましい。

突起部４の突起高さは、突起部４の突端部に保持されている吸水性部材５がマルチウエルプレート４００のウエル４０１の中に進入してウエル４０１の中に注入された培養液に浸るように、マルチウエルプレート４００のウエル４０１の中に半分以上進入できる程度とすることが好ましい。図４（ｂ）に示すように、破線で示した生体ホールドキット１の各突起部４をマルチウエルプレート４００の各ウエル４０１の中に進入させて生体ホールドキット１の板状部３をマルチウエルプレート４００の上面に配置すると、生体ホールドキット１の板状部３の下面がマルチウエルプレート４００のウエル４０１の開口部周縁のリブに乗った状態で、板状部３の周縁がマルチウエルプレート４００の外周リブ４０２の内面に収納される状態になる。このときに、突起部４の突端部の吸水性部材５はウエル４０１の中間よりやや下側に位置するように突起部４の高さを設定することが好ましい。

吸水性部材５は、保存・搬送の目的対象物である検体を保持するために、微生物やＤＮＡを含有する液体が滲入してこれを保持することができれば、形状、材質は問わない。材質としては、濾紙、不織布、フェルト、セルロース（ニトロセルロースを含む）等の繊維状物質が用いられる。形状は円盤形、球状、半球状などがよい。吸水性部材５を突起部４の突端部に保持させる方法としては、接着剤を用いることが好ましい。接着剤としてはシリコーン系接着剤が好ましく、突然変異を誘発するかどうかの変異原性試験で異常がないと認められた接着剤を用いる。また、突起部４の突端部に吸水性部材５を挟み込んで保持するような保持部材を設けるようにしてもよい。

このような生体ホールドキット１の製造方法は、例えばプラスチックシートから真空成形法や圧空成形法で板状部３と突起部４とを一体成形してキット本体２を形成した後、突起部４の突端の貫通孔４３と側面の空気抜き孔４４とを穿設し、予め所定の形状に切り抜いた吸水性部材５を突起部４の突端面に接着剤で貼り付ける方法を採用することができる。プラスチックシートの材質としては、例えばポリエチレン、ポリプロピレン等のポリオレフィン樹脂、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート等のポリエステル樹脂、ポリアミド樹脂等を例示することができる。一般的にはポリプロピレンを好ましく用いることができる。プラスチックシートの厚みは適宜選定されるが、０．１〜１ｍｍの範囲とすることができる。

上記説明では、突起部４は中空状であるとして説明しているが、図２（ｂ）に示すように、円錐台形の柱状で中実の突起部４ｂとしてもよい。このような突起部４ｂと板状部３とを一体成形するには、射出成形法が適している。

また、図２（ｃ）に示すように、突起部４の突端部に保持される吸水性部材５は、突起部４の中空部４２の内底面に保持されるように配置することも可能である。突起部４内に吸水性部材５を配置する場合にも、突起部４の突端部に貫通孔４３を設けることが好ましい。この貫通孔４３は、マルチウエルプレート４００のウエル４０１内の培養液に突起部４の突端部を浸漬させたときに、培養液の浸入路として機能する。

次に、本発明の生体ホールドキット１を保管するための保管容器について、図３を参照しながら説明する。本発明の生体ホールドキット１を検体の保存、搬送に用いる際には、吸水性部材５に保持されている検体のコンタミネーションを防止するため、各突起部４毎に封入して隔離する専用の保管容器を用いることが好ましい。

図３（ａ）は第１実施形態の第１保管容器１００を示す断面図である。この第１保管容器１００は、図２（ａ）及び図２（ｃ）に示した中空状の突起部４を備える生体ホールドキット１を収納する専用の容器である。第１保管容器１００は、保管容器本体１１０と蓋部１２０から構成されている。保管容器本体１１０は、生体ホールドキット１の板状部３を保持する平板部１１１と生体ホールドキット１の各突起部４を収容する収容用ウエル１１２とが一体に形成された構造を有する。平板部１１１は板状部３より大きな矩形状の板状体であり、上面には生体ホールドキット１の板状部３を収納する凹部１１３が設けられている。収容用ウエル１１２は平板部１１１から凹んだ有底円筒状であり、生体ホールドキット１の各突起部４を収容できる位置及び形状を有する。収容用ウエル１１２の開口部は円形で、生体ホールドキット１の各突起部４の基端部の外径が各収容用ウエル１１２の開口部の内径よりごくわずか大きくなっており、生体ホールドキット１を収納したときに、生体ホールドキット１の各突起部４の基端部の外面が収容用ウエル１１２の開口部の内面に嵌合するようになっている。

蓋部１２０は、保管容器本体１１０と一体に成形され、平板部１１１とほぼ同じ形状の板状体で、平板部１１１の一辺全体の幅の薄いフィルム状のヒンジ１１４を介して保管容器本体１１０に対して開閉自在に接続されている。ヒンジ１１４が設けられている一辺を除く蓋部１２０の３辺の周縁部には平板部１１１の周縁に嵌る断面コ字状の嵌合部１２１が設けられ、蓋部１２０を閉じ、嵌合部１２１を平板部１１１の周縁に嵌め込むことにより、ヒンジ１１４と嵌合部１２１で保管容器本体１１０の保管容器本体１１０内部を蓋部１２０で密封することができるようになっている。また、蓋部１２０の下面には、生体ホールドキット１を収納して蓋部１２０を閉じたときに、中空状の各突起部４の開口部へ嵌り込み、中空状の各突起部４の開口部を閉塞する短軸の円錐台形の嵌合突起部１２２がそれぞれの各収容用ウエル１１２に対応した位置に突出して設けられている。生体ホールドキット１を収納して蓋部１２０を平板部１１１に被せるように閉じると、生体ホールドキット１の突起部４の基端部の外面が保管容器１００の収容用ウエル１１２の開口部の内面に嵌合し、更に、蓋部１２０の嵌合突起部１２２の周縁乃至周面が中空状の突起部４の開口部の内面を押圧して嵌合する。これによって、蓋部１２０の嵌合突起部１２２が生体ホールドキット１の突起部４の開口部を構成する壁体を介して突起部４を密栓した状態となり、突起部４の突端部に保持されている吸水性部材５を各収容用ウエル１１２内に封入し、隔離することができるようになっている。

この第１保管容器１００は、例えばポリエチレン、ポリプロピレンなどのポリオレフィン樹脂等を用いた射出成形などで一体成形して製造することができる。

また、図３（ｂ）の断面図に示す第２実施形態の第２保管容器１００ｂは、図２（ｂ）に示した中実の突起部４ｂを備える生体ホールドキット１を収納する専用の容器である。第２保管容器１００ｂは、保管容器本体１１０ｂ、蓋部１２０ｂ、クランプ１３０、パッキン１４０を有する構造となっている。保管容器本体１１０ｂは、生体ホールドキット１の板状部３を保持する平板部１１１ｂと生体ホールドキット１の各突起部４を収容する収容用ウエル１１２とが一体に形成された構造を有する。平板部１１１ｂは板状部３より大きな矩形状の板状体であり、上面には生体ホールドキット１の板状部３を収納する凹部１１３が設けられている。また、平板部１１１ｂの凹部１１３を囲む周辺部にはリング状の溝部１１５が設けられ、この溝部１１５にリング状のパッキン１４０が配置され、パッキン１４０の上側は平板部１１１ｂの上面から突出している。収容用ウエル１１２は平板部１１１ｂから凹んだ有底円筒状であり、生体ホールドキット１の各突起部４を収容できる位置及び形状を有する。この第２保管容器１００ｂでも、収容用ウエル１１２の開口部は円形で、生体ホールドキット１の各突起部４の基端部の外径が各ウエル１１２の開口部の内径よりごくわずか大きく、生体ホールドキット１を収納したときに、生体ホールドキット１の各突起部４の基端部がウエル１１２の開口部に嵌合し、ウエル１１２の開口部を中実の突起部４ｂでいわば栓をして密封できるようになっている。

蓋部１２０ｂは保管容器本体１１０ｂとは別体であり、平板部１１１ｂとほぼ同じ形状の樹脂製の板状体である。蓋部１２０ｂの内面には、蓋部１２０ｂを閉じたときに蓋部１２０ｂで生体ホールドキット１の板状部３の上面を押圧する押圧部１２３が収容用ウエル１１２が存在する領域に亘って突出して設けられている。また、クランプ１３０は軟質樹脂やゴム製のリング形状で、内側の壁面に蓋部１２０ｂを平板部１１１ｂに被せるように載置したときにこれらの蓋部１２０ｂと平板部１１１ｂの両方の端部の周囲を上下から押さえつける機能を有する溝部１３１が形成されている。

この第２保管容器１００ｂの使用方法は、保管容器本体１１０ｂの平板部１１１ｂの凹部１１３に生体ホールドキット１の板状部３を載置して生体ホールドキット１を収納した後、蓋部１２０ｂを平板部１１１ｂの上に載置し、クランプ部材１３０を蓋部１２０ｂと平板部１１１ｂの端部の周りに嵌め込む。クランプ部材１３０で蓋部１２０ｂと平板部１１１ｂの端部を上下から押さえることによって、蓋部１２０ｂの下面がパッキン１４０を強く押しつけ、内部を密封状態とすることができると共に、蓋部１２０ｂの押圧部１２３が生体ホールドキット１の板状部３を押圧し、突起部３ｂの基端部を収容用ウエル１１２の開口部内面に押圧することによって、突起部３ｂによる収容用ウエル１１２の密栓状態を維持し、収容用ウエル１１２の密封を維持できるようになっている。

次に、本発明の生体ホールドキット１と第１保管容器１００の使用方法について説明する。準備段階として、生体ホールドキット１を第１保管容器１００に収納し、蓋部１２０を被せて第１保管容器１００の中に生体ホールドキット１を密封する。図３（ａ）に示すように、破線で示す生体ホールドキット１の各突起部４の突端部の吸水性部材５は、第１保管容器１００のそれぞれの収容用ウエル１１２の中に収容され、中空の突起部４の基端部がウエル１１２の開口部に嵌合し、更に、蓋部１２０の嵌合突起部１２２が中空の突起部４の開口部に嵌合することによって、各収容用ウエル１１２はその開口部においてそれぞれ密封され、隔離される。生体ホールドキット１を収納した第１保管容器１００を電子線滅菌、ガンマ線滅菌、高圧蒸気滅菌などの慣用の滅菌方法で滅菌し、保管する。

使用時に、滅菌室内で第１保管容器１００の蓋部１２０を開け、中の生体ホールドキット１を取り出す。図２（ａ）、図２（ｃ）に示した中空状の突起部４を有する生体ホールドキット１の場合は、突起部４を下にして板状部３の開口部４１の上側から分注器で検体を含んだ適宜な量の溶液を所定の突起部４の中空部４２の中に滴下する。滴下された溶液は貫通孔４３を通って又は直接吸水性部材５に滲入し、保持される。この場合は、マルチウエルプレート４００と同じ多連パターンで注入できる。一方、図２（ｂ）に示した中実の突起部４ｂを有する場合は、生体ホールドキット１を裏返し、突起部４ｂの突端部に保持されている吸水性部材５を上側にした状態で検体を含んだ溶液を滴下し、溶液を吸水性部材５に滲入させ、保持させる。この場合は、マルチウエルプレート４００のパターンとは鏡像関係の多連パターンで注入することになる。

検体を保持させた生体ホールドキット１を第１保管容器１００の中に収納し、蓋部１２０を閉じると、第１保管容器１００の中に生体ホールドキット１のそれぞれの吸水性部材５はそれぞれの収容用ウエル１１２の中に封入され、隔離される。生体ホールドキット１を密封収納した第１保管容器１００を保冷器の中に重ねて収納して必要な場所に搬送する。このようにして本発明の生体ホールドキット１は、マルチウエルプレート４００のウエル４０１に対応した多数の種類の検体をまとめて保存・搬送することができる。また、保存・搬送時に、一つの突起部４の周囲を囲む第１保管容器１００の密封された収容用ウエル１１２の空間には微生物にとって十分な量の空気が存在するため、検体が微生物の場合に、長期間生存させることができる。シート状保存・搬送容器の場合はせいぜい２日程度でしか微生物を生存させることができなかった。

搬送された第１保管容器１００を使用するときは、予めプラズマ滅菌や電子線滅菌処理などで表面を滅菌した後、中の生体ホールドキット１を滅菌室内で取り出す。マルチウエルプレート４００の切り欠き部４０３と生体ホールドキット１の切り欠き部３１の位置を合わせ、各ウエル４０１内に培養液を注入してあるマルチウエルプレート４００の各ウエル４０１内に生体ホールドキット１の各突起部４が進入するように板状部３をマルチウエルプレート４００の上面に載置する。これにより、突起部４の突端部に保持されている吸水性部材５がマルチウエルプレート４００のウエル４０１内の培養液に浸漬し、検体を培養液に移すことができる。図２（ｃ）に示すように吸水性部材５が突起部４内部に保持されている場合には、培養液は貫通孔４３を通って突起部４内に浸入し、吸水性部材５を浸漬し、検体を培養液に移すことができる。

図２（ａ）、図２（ｃ）に示すような空気抜き孔４４を中空状の突起部４に設けてあると、突起部４を培養液に浸すときに、培養液が突起部４内に空気抜き孔４４から浸入し、スムーズに突起部４を培養液内に浸漬することができる。空気抜き孔４４がないと、突起部４が培養液の上に浮いてしまい、突起部４を培養液中に浸漬するための時間がかかり、作業性が悪くなる。

生体ホールドキット１をマルチウエルプレート４００から取り出す際に、真っ直ぐに引き上げれば、各突起部４は独立しているため、各突起部４に付着した培養液が隣のウエルに移って混濁を起こす可能性は非常に少ない。

また、検体を寒天培地などに移す場合は、生体ホールドキット１の突起部４の突端部の吸水性部材５を寒天に押しつけることにより簡単にスタンプし、培地上にレプリカすることができる。これによって、マルチウエルプレート４００の多連パターンで寒天培地上にレプリカすることができる。

このように、本発明の生体ホールドキット１は、マルチウエルプレート４００の各ウエル４０１に一度の操作でウエルの数の種類の検体を移すことができると共に、吸水性部材５がウエル４０１内に残存することがないため、極めて作業性が良い。

培養液や寒天培地に検体を移した後、まだ検体が吸水性部材５に残存している場合、検体が微生物のときはＤＭＳＯ等の凍結保護剤を吸水性部材５に滴下した後、生体ホールドキット１を再度第１保管容器１００に収納して密封し、冷凍保存することができる。このように、本発明の生体ホールドキットは、従来の粘着シートを用いたシート状保存・搬送容器と異なり、繰り返しの使用が可能である。

上記説明では、第１保管容器１００を用いて説明しているが、第２保管容器１００ｂを用いても全く同様に行うことができる。

また、上記説明では、突起部４の形状は円錐台形として説明しているが、突起部４の形状は適宜変更可能であり、更に、吸水性部材５の保持方法も適宜変更可能である。
なお、保管容器も適宜変更可能であり、例えば蓋部を保管容器本体と別体にして、蓋部の周縁全体に平板部の周縁に嵌る嵌合用の凹部を設けるような構造とすることも可能である。この場合、保管容器本体を比較的硬いポリスチレンなどで形成し、蓋部をポリエチレンやポリプロピレン等の軟質樹脂で形成するようにしても良い。また、蓋部の嵌合突起部の形状もリング状とすることが可能であり、収容用ウエルの開口部を閉塞できればどのような形状でもよい。

厚さ０．４ｍｍのポリプロピレンシートを真空成形法で図１に示すような９６ウエルのマルチウエルプレート用の生体ホールドキット１のキット本体２を一体成形した。板状部３は１２１×７９ｍｍの大きさであり、突起部４のピッチは９ｍｍ、開口部４１の径は４ｍｍ、突起部４の突起高さは約１１ｍｍ、突起部４の突端面の径は約２ｍｍである。

このキット本体２の突起部４の底面に約０．５ｍｍ径の貫通孔４３を穿設し、更に、突起部４に縦７ｍｍ、幅約１ｍｍの矩形状の空気抜き孔４４を一つの突起部４の側面に３箇所穿設した。空気抜き孔４４の下端は突端面から約２ｍｍ上の位置にある。
キット本体２の突起部４の突端面に厚さ３００μｍの濾紙を約２．５ｍｍ径の円形に切り取った吸水性部材５をシリコーン系接着剤で貼り付けて生体ホールドキット１を作製した。

ポリプロピレンを用いた射出成形により、図１（ａ）に示す第１保管容器１００を蓋部１２０と保管容器本体１１０とを一体成形した。第１保管容器１００の平坦部１１１は１２７ｍｍ×８５ｍｍの大きさで、収容用ウエル１１２の開口部の径は約４．７ｍｍ、収容用ウエル１１２のピッチは９ｍｍ、収容用ウエルはほぼ円筒状の形状で外径は約５．６ｍｍ、高さは約１５ｍｍである。また、蓋部１２０の嵌合突起部１２２は基端部の外径が約４ｍｍ、高さが約１．５ｍｍで、突起部３と同じテーパーを有する。

作製した生体ホールドキット１を第１保管容器１００中に収納し、蓋部１２０を閉じた。第１保管容器１００各収容用ウエル１１２の開口部は、生体ホールドキット１の突起部４の基端部が嵌合すると共に、蓋部１２０の嵌合突起部１２２が突起部４の開口部に嵌合することによって、栓をされた状態で密封された。第１保管容器１００ごとガンマ線滅菌を行った。

滅菌室内で第１保管容器１００から生体ホールドキット１を取り出し、分注器で大腸菌を含む１０μｌの溶液を定位置の突起部４の開口部４１から突起部４内の中空部４２に注入し、貫通孔４３を通して９６個の濾紙５全てに検体を吸収させた
濾紙５に液体を吸収させた生体ホールドキット１を第１保管容器１００中に収納し、蓋部１２０を閉じて密封した。各収容用ウエル１１２内の各濾紙５の周りの空間はそれぞれ密封され、他の濾紙５との空気の流通はなく、隔離された状態となる。その状態のまま保管し、１週間経過後に、滅菌室内で予めプラズマ滅菌した第１保管容器１００から生体ホールドキット１を取り出し、９６ウエルの各ウエル４０１に培養液を入れたマルチウエルプレート４００に突起部４を浸入させ、濾紙５を培養液中に浸漬させた後、取り出し、再度第１保管容器１００中に収納させ、密封した後、保存した。大腸菌を移したマルチウエルプレート４００を問題なく増幅させることができた。

本発明の生体ホールドキットは、ＤＮＡ、微生物などを多連パターンで保存、搬送できるため、遺伝子解析、微生物アッセイ、臨床関連、創薬研究資料の保存、運搬、増幅に利用することができる。
また、本発明の保管容器は、かかる生体ホールドキットを保存、運搬する用途に利用することができる。

本発明の生体ホールドキットの一実施形態を示し、（ａ）は平面図、（ｂ）は側面図である。本発明の生体ホールドキットの突起部の拡大断面図であり、（ａ）〜（ｃ）は異なる実施形態を示す。本発明の保管容器を示す断面図であり、（ａ）と（ｂ）は異なる実施形態を示す。マルチウエルプレートの一例を示すもので、（ａ）は平面図、（ｂ）はＡ−Ａ’線に沿った断面図である。

符号の説明

１：生体ホールドキット
２：キット本体
３：板状部
４：突起部
４１：開口部
４２：中空部
４３：貫通孔
４４：空気抜き孔
１００：第１保管容器
１１０：保管容器本体
１１１：平板部
１１２：収容用ウエル
１１３：凹部
１１４：ヒンジ
１２０：蓋部
１２１：嵌合部
１２２：嵌合突起部
１２３：押圧部

Claims

複数のウエルが配列されているマルチウエルプレートの上面に配置される板状部と、前記板状部のそれぞれの前記ウエルに対応した位置に前記ウエル内に挿入されるように突出して設けられた突起部と、前記突起部の突端部に保持された吸水性部材とを有することを特徴とする生体ホールドキット。
請求項１記載の生体ホールドキットにおいて、
前記突起部が、前記板状部に開口部が形成された中空部を有することを特徴とする生体ホールドキット。
請求項２記載の生体ホールドキットにおいて、
前記中空部を有する突起部の突端部に貫通孔が設けられていることを特徴とする生体ホールドキット。
複数のウエルが配列されているマルチウエルプレートの上面に載置される板状部と、前記板状部のそれぞれの前記ウエルに対応した位置に前記ウエル内に挿入されるように突出して設けられた突起部と、前記突起部の突端部に保持された吸水性部材とを有する生体ホールドキット用の保管容器であって、
前記板状部を載置する平板部と、前記平板部の前記突起部に対応した位置に設けられたそれぞれの前記突起部を収容する収容用ウエルとを有する保管容器本体と、前記平板部に対して固定される蓋部とを有し、前記生体ホールドキットを収納したときにそれぞれの前記吸水性部材をそれぞれの前記収容用ウエル内に封入することを特徴とする保管容器。