JP2005023032A

JP2005023032A - Prophylactic agent for arteriosclerosis

Info

Publication number: JP2005023032A
Application number: JP2003191369A
Authority: JP
Inventors: Kinya Takagaki; 欣也高垣; Yushi Mitsui; 雄史三井
Original assignee: Toyo Shinyaku Co Ltd
Current assignee: Toyo Shinyaku Co Ltd
Priority date: 2003-07-03
Filing date: 2003-07-03
Publication date: 2005-01-27

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an excellent prophylactic agent for arteriosclerosis having action reducing an oxidized lipid of arteria. <P>SOLUTION: The prophylactic agent for arteriosclerosis comprises an extract of pine bark and the extract of pine bark comprises proanthocyanidin in an amount of <95 wt.% expressed in terms of dried weight. The extract of pine bark in the prophylactic agent for arteriosclerosis is preferably obtained by hot water extraction and the extract comprises, preferably further, oligomeric proanthocyanidin (OPC) in an amount of ≥20 wt.% expressed in terms of dried weight and catechins in an amount of ≥5 wt.% expressed in terms of dry weight. <P>COPYRIGHT: (C)2005,JPO&NCIPI

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、動脈硬化予防剤に関し、より詳しくは、動脈の酸化脂質を低減する作用を有する動脈硬化予防剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、生活習慣病と呼ばれる、脳卒中、心臓病、高血圧等の血管に関連した成人病疾患が増加し、社会問題となっている。これらの疾患は、主として高カロリー食の過剰摂取や、社会的ストレスにより引き起こされている。
【０００３】
高カロリーな食材としては、例えば、卵や畜肉が挙げられ、このような食材には、コレステロール、脂肪酸、中性脂肪などの脂質成分が特に多く含有される。近年では、加工食品などにも酸化コレステロールが多量に含有される。このように、食材中の脂質成分、特にコレステロールは、近年の食生活の変化から過剰に摂取されがちである。
【０００４】
コレステロールは、血中において、特異的なタンパク質と結合した低密度のリポタンパク質（ＬＤＬ）の形で末梢組織に運搬される。他方、コレステロールの排出は、高密度のリポタンパク質（ＨＤＬ）により末梢から肝臓に運搬され、肝臓で行われる。ＬＤＬが血中に多く存在すると、高コレステロール血症の原因となる。さらに、ＬＤＬが酸化されると血管に付着するため、マクロファージがこれを消化しようと集積する結果、ＬＤＬ付着部分にマクロファージの死骸が吸着し、動脈硬化が引き起こされる。
【０００５】
ＬＤＬの酸化を防止する動脈硬化予防食品として、植物界に広く存在するポリフェノール類を含む食品が提案されている。ポリフェノール類の中でも、フラバン−３−オールおよび／またはフラバン−３，４−ジオールを構成単位とする重合度が２以上の縮重合体からなる化合物群であるプロアントシアニジンは、抗酸化作用などの種々の活性を有することが知られており、このプロアントシアニジンを含むリンゴまたはブドウの抽出物がＬＤＬの酸化を抑制することが知られている（例えば、特許文献１および２、非特許文献１）。しかし、上記の抽出物では、ＬＤＬの酸化防止効果および動脈硬化の予防効果は十分とはいえない。
【０００６】
【特許文献１】
特許第１６４３１０１号公報
【特許文献２】
特開平１０−３３０２７８号公報
【非特許文献１】
Ｙａｍａｋｏｓｈｉら、Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ（１４２）１３９−１４９頁、１９９９年
【非特許文献２】
Ｒ．Ｂ．Ｂｒｏａｄｈｕｒｓｔら、Ｊ．Ｓｃｉ．Ｆｄ．Ａｇｒｉｃ．、１９７８年、２９巻、７８８〜７９４頁
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、優れた動脈硬化予防剤を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、プロアントシアニジンを含有する植物の動脈硬化予防作用について鋭意検討を行ったところ、松樹皮抽出物が、他の植物由来の抽出物に比べて、血管における高い脂質の酸化抑制効果を有することを見出して本発明を完成するに至った。
【０００９】
本発明は、松樹皮抽出物を含有する動脈硬化予防剤を提供し、該松樹皮抽出物は、プロアントシアニジンを乾燥重量換算で９５重量％未満の割合で含む。
【００１０】
好ましい実施態様においては、上記松樹皮抽出物は、松樹皮を熱水抽出することによって得られる。
【００１１】
さらに好ましい実施態様においては、上記松樹皮抽出物は、オリゴメリック・プロアントシアニジンを乾燥重量換算で２０重量％以上の割合で含有する。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明の動脈硬化予防剤は、松樹皮抽出物を含有し、該松樹皮抽出物は、プロアントシアニジンを含む。この動脈硬化予防剤は、さらに必要に応じて、その他の成分を含有し得る。以下、各成分および本発明の動脈硬化予防剤について説明する。なお、以下に説明する構成は、本発明を限定するものでなく、本発明の趣旨の範囲内で種々改変することができる。
【００１３】
松樹皮抽出物の原料となる松樹皮としては、フランス海岸松（ＰｉｎｕｓＭａｒｔｉｍａ）、カラマツ、クロマツ、アカマツ、ヒメコマツ、ゴヨウマツ、チョウセンマツ、ハイマツ、リュウキュウマツ、ウツクシマツ、ダイオウマツ、シロマツ、カナダのケベック地方のアネダ等の樹皮が好ましく用いられる。中でも、フランス海岸松（ＰｉｎｕｓＭａｒｔｉｍａ）の樹皮が好ましく用いられる。
【００１４】
フランス海岸松は、南仏の大西洋沿岸の一部に生育している海洋性松をいう。このフランス海岸松の樹皮は、プロアントシアニジン、有機酸、ならびにその他の生理活性成分などを含有する。プロアントシアニジンとは、フラバン−３−オールおよび／またはフラバン−３，４−ジオールを構成単位とする重合度が２以上の縮重合体からなる化合物群をいう。この主要成分であるプロアントシアニジンには、活性酸素を除去する強い抗酸化作用があることが知られている。
【００１５】
本発明に用いられる松樹皮抽出物は、上記の松の樹皮を水または有機溶媒で抽出して得られる。水を用いる場合には、温水または熱水が用いられる。有機溶媒を用いる場合には、食品あるいは薬剤の製造に許容される溶媒が用いられ、このうような有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレングリコール、メチルエチルケトン、グリセリン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、食用油脂、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、および１，１，２−トリクロロエテンが挙げられる。これらの水および有機溶媒は単独で用いてもよいし、組合わせて用いてもよい。水、熱水、エタノール、含水エタノール、および含水プロピレングリコールが好ましく用いられる。食品または医薬品に用いる場合の安全性の観点から、水、熱水、エタノール、および含水エタノールがより好ましく、熱水がさらに好ましく用いられる。
【００１６】
抽出において、水または有機溶媒の量に特に制限はないが、好ましくは、松樹皮（乾燥重量）１００重量部に対して、１〜１００重量部である。さらに、熱水を用いる場合の温度は、５０〜１２０℃、好ましくは７０〜１００℃に設定することが好ましい。松樹皮を熱水抽出することによって得られた松樹皮抽出物は、他の抽出方法で得られた松樹皮抽出物に比べて、水に対する溶解性が高く、かつ優れた生理活性（動脈硬化予防効果）を発揮する。
【００１７】
松樹皮からの抽出方法に特に制限はないが、例えば、加温抽出法、超臨界流体抽出法などが用いられる。
【００１８】
超臨界流体抽出法は、物質の気液の臨界点（臨界温度、臨界圧力）を超えた状態の流体である超臨界流体を用いて抽出を行う方法である。超臨界流体としては、二酸化炭素、エチレン、プロパン、亜酸化窒素（笑気ガス）などが用いられ、二酸化炭素が好ましく用いられる。
【００１９】
超臨界流体抽出法では、目的成分を超臨界流体によって抽出する抽出工程および目的成分と超臨界流体とを分離する分離工程とを行う。分離工程では、圧力変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、または吸着剤・吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよい。
【００２０】
また、エントレーナー添加法による超臨界流体抽出を行ってもよい。この方法は、超臨界流体に、例えば、エタノール、プロパノール、ｎ−ヘキサン、アセトン、トルエン、その他の脂肪族低級アルコール類、脂肪族炭化水素類、芳香族炭化水素類、またはケトン類を２〜２０Ｗ／Ｖ％程度添加し、この流体で超臨界流体抽出を行うことによって、プロアントシアニジン、カテキン類などの目的とする抽出物の抽出溶媒に対する溶解度を飛躍的に上昇させる、あるいは分離の選択性を増強させる方法であり、効率的な松樹皮抽出物を得る方法である。
【００２１】
超臨界流体抽出法は、比較的低い温度で操作できるため、高温で変質・分解する物質にも適用できるという利点；抽出流体が残留しないという利点；および溶媒の循環利用が可能であり、脱溶媒工程などが省略でき、工程がシンプルになるという利点がある。
【００２２】
また、松樹皮からの抽出は、上記の方法以外に、液体二酸化炭素回分法、液体二酸化炭素還流法、超臨界二酸化炭素還流法などにより行ってもよい。
【００２３】
松樹皮からの抽出は、複数の抽出方法を組み合わせてもよい。複数の抽出方法を組み合わせることにより、種々の組成の松樹皮抽出物を得ることが可能となる。
【００２４】
上記抽出により得られた松樹皮抽出物は、プロアントシアニジン含有量を増加させる目的で精製してもよい。精製には、通常、酢酸エチルなどの溶媒が用いられるが、安全性などの面から、溶媒を使用しない方法、例えば、限外濾過、あるいはダイヤイオンＨＰ−２０、Ｓｅｐｈａｄｅｘ−ＬＨ２０、キチンなどの吸着性担体を用いたカラム法またはバッチ法により精製することが好ましい。
【００２５】
本発明の動脈硬化予防剤に用いられる松樹皮抽出物は、具体的には、以下のような方法により調製されるが、これは例示であり、この方法に限定されない。
【００２６】
フランス海岸松の樹皮１ｋｇを、塩化ナトリウムの飽和水溶液３Ｌに入れ、１００℃にて３０分間抽出し、抽出液を得る（抽出工程）。その後、抽出液を濾過し、得られる不溶物を塩化ナトリウムの飽和溶液５００ｍＬで洗浄し、洗浄液を得る（洗浄工程）。この抽出液と洗浄液を合わせて、松樹皮の粗抽出液を得る。
【００２７】
次いで、この粗抽出液に酢酸エチル２５０ｍＬを添加して分液し、酢酸エチル層を回収する工程を５回行う。回収した酢酸エチル溶液を合わせて、無水硫酸ナトリウム２００ｇに直接添加して脱水する。その後、この酢酸エチル溶液を濾過し、濾液を元の５分の１量になるまで減圧濃縮する。濃縮された酢酸エチル溶液を２Ｌのクロロホルムに注ぎ、攪拌して得られる沈殿物を濾過して回収する。その後、この沈殿物を酢酸エチル１００ｍＬに溶解した後、再度１Ｌのクロロホルムに添加して沈殿させる操作を２回繰り返す洗浄工程を行う。この方法により、例えば、重合度が２〜４のプロアントシアニジンを２０重量％以上含み、かつカテキン類を５重量％以上含有する、約５ｇの松樹皮抽出物が得られる。
【００２８】
本発明に用いられる松樹皮抽出物は、プロアントシアニジンを含有する。このプロアントシアニジンを含有する松樹皮抽出物を摂取した場合に、優れた動脈硬化予防効果が得られる。さらに、プロアントシアニジンの中でも、重合度が低い縮重合体を含むものが好ましく用いられる。重合度が２〜３０の縮合重合体（２〜３０量体）を含むものが好ましく、重合度が２〜１０の縮合重合体（２〜１０量体）を含むものがより好ましく、重合度が２〜４の縮合重合体（２〜４量体）を含むものがさらに好ましく用いられる。ＯＰＣ含有量が高い松樹皮抽出物を用いると、重合度の高いプロアントシアニジン（ＯＰＣ含有量が少ないもの）を用いた場合と対比して、優れた動脈硬化予防効果が得られる。
【００２９】
本明細書では、上記の重合度が２〜４の重合体を、オリゴメリック・プロアントシアニジン（ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ、以下「ＯＰＣ」という）という。ＯＰＣは、ポリフェノールの一種で、植物が作り出す強力な抗酸化物質であり、植物の葉、樹皮、果物の皮や種の部分に集中的に含まれている。
【００３０】
本発明に用いられる松樹皮抽出物は、プロアントシアニジンを抽出物中に乾燥重量換算で９５重量％未満、好ましくは４０重量％以上９５重量％未満、より好ましくは４０重量％以上９０重量％未満、さらに好ましくは４０重量％以上７５重量％未満、最も好ましくは４０重量％以上６０重量％未満の割合で含有する。そしてＯＰＣを抽出物中に乾燥重量換算で好ましくは２０重量％以上、より好ましくは３０重量％以上の割合で含有する。松樹皮抽出物中に含まれるプロアントシアニジンが９５重量％以上になると、松樹皮抽出物中のプロアントシアニジン以外の成分含有量が減少するため、水への溶解性が悪くなったり、抽出物の持つ生理活性が低下するなどの問題が生ずる場合がある。
【００３１】
上記松樹皮抽出物には、さらにカテキン（ｃａｔｅｃｈｉｎ）類が含有され得、このカテキン類は、好ましくは５重量％以上、より好ましくは１０重量％以上の割合で含有される。カテキン類は、上記抽出方法によって、プロアントシアニジン（ＯＰＣ）とともに抽出され得る。カテキン類とは、ポリヒドロキシフラバン−３−オールの総称である。カテキン類としては、（＋）−カテキン（狭義のカテキンといわれる）、（−）−エピカテキン、（＋）−ガロカテキン、（−）−エピガロカテキン、エピガロカテキンガレート、エピカテキンガレート、アフゼレキンなどが知られている。上記松樹皮抽出物からは、上記の（＋）−カテキンの他、ガロカテキン、アフゼレキン、ならびに（＋）−カテキンまたはガロカテキンの３−ガロイル誘導体が単離されている。カテキン類には、発癌抑制作用、動脈硬化予防作用、脂肪代謝異常の抑制作用、血圧上昇の抑制作用、血小板凝集抑制作用、抗アレルギー作用、抗ウイルス作用などがあることが知られている。カテキン類は、ＯＰＣの存在下で水溶性が増すと同時に、ＯＰＣを活性化する性質を有し、ＯＰＣとともに摂取することで効果的に作用する。
【００３２】
本発明に用いられる松樹皮抽出物は、ＯＰＣを２０重量％以上の割合で含有し、かつ、カテキン類を５重量％以上の割合で含有することが最も好ましい。カテキン類が上記の含有量を満たさない場合は、カテキン類を５重量％以上の割合で含有するように添加することが好ましい。
【００３３】
本発明の動脈硬化予防剤は、さらに必要に応じて、通常食品、医薬などに用いられる種々の成分を含む。このような成分としては、栄養補助剤、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、調味料、食品添加物などが挙げられる。
【００３４】
本発明の動脈硬化予防剤は、松樹皮抽出物を任意の割合で含有する。好ましくは該予防剤中に乾燥重量換算で０．００１重量％〜７０重量％、より好ましくは０．００２重量％〜５０重量％の割合で含有することが好ましい。
【００３５】
本発明の動脈硬化予防剤は、松樹皮抽出物を一日の摂取量が、好ましくは５ｍｇ〜１０００ｍｇ、より好ましくは１０ｍｇ〜５００ｍｇとなるように含有することが好ましい。
【００３６】
本発明によれば、このように、プロアントシアニジンを含む松樹皮抽出物を含有する動脈硬化予防剤が得られる。この予防剤を摂取することによって、動脈の酸化脂質を低減する作用が発揮されるため、優れた動脈硬化予防効果が得られる。特に、松樹皮の熱水抽出物を含有する予防剤が、より優れた動脈硬化予防効果を発揮する点で好ましい。本発明の予防剤は、食品および医薬品として利用され得る。
【００３７】
【実施例】
以下に、本発明を実施例に基づいて更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００３８】
（調製例１：松樹皮の熱水抽出物１の調製）
松樹皮９００ｇに精製水７．２Ｌを加え、ブレンダー（ＷａｒｉｎｇＢｌｅｎｄｅｒ）で破砕した後、１００℃で１０分間加熱抽出した。次いで、直ちに濾過して濾液を得た。濾過後の残渣を精製水１．８Ｌで洗浄し、濾液と洗浄液とを合わせて９Ｌの松樹皮の熱水粗抽出液を得た。この抽出液１ｍＬを凍結乾燥したところ、乾燥重量は８ｍｇであった。
【００３９】
上記粗抽出液１Ｌ（粉末乾燥重量８ｇ）を２５℃まで放冷し、塩化ナトリウムを１００％飽和濃度となるまで添加してよく攪拌した後、４℃で２４時間静置した。静置後、この溶液を濾過し、９１０ｍＬの濾液を得た。この濾液を以下に示す工程によりさらに精製した。まず、水で膨潤させた芳香族系合成樹脂（ダイアイオンＨＰ−２０：三菱化学株式会社製）を１００ｍＬ充填した３０×３００ｍｍのカラムに上記濾液を通液し、さらに１Ｌの精製水で洗浄した。次いで、カラムから１５％（Ｖ／Ｖ）のエタノール−水混合溶媒で溶出し、２００ｍＬの松樹皮の熱水抽出精製物を得た（以下、松樹皮の熱水抽出物１とする）。得られた精製物を凍結乾燥して粉末化した。本操作を繰り返して、９Ｌの松樹皮の熱水抽出液から松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末７．５１ｇを得た。
【００４０】
上記乾燥粉末中のプロアントシアニジンおよびＯＰＣの含有量を以下のようにして測定した。
【００４１】
プロアントシアニジンの含有量は、プロシアニジンＢ−２を標品として、Ｒ．Ｂ．Ｂｒｏａｄｈｕｒｓｔらの方法（非特許文献２）にしたがって測定した。その結果、プロアントシアニジンは、上記乾燥粉末中に４０重量％含有されていた。
【００４２】
ＯＰＣの含有量は、以下のようにして測定した。まず、水で膨潤させたセファデックスＬＨ−２０（アマシャムバイオサイエンス株式会社製）１００ｍＬを３０×３００ｍｍのカラムに充填し、５０ｍＬのエタノールで洗浄した。次いで、４００ｍｇの上記松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末を８ｍＬのエタノールに溶解し、この溶液をカラムに通液し、プロアントシアニジンを吸着させた。その後、１００〜８０％（Ｖ／Ｖ）エタノール−水混合溶媒でグラジエント溶出し、１０ｍＬずつ分取した。分取すると同時に、２、３、および４量体のＯＰＣの標品（２量体：プロアントシアニジンＢ−２（Ｒｆ値：０．６）、３量体：プロアントシアニジンＣ−１（Ｒｆ値：０．４）、および４量体：シンナムタンニンＡ_２（Ｒｆ値：０．２））を各々指標として、各画分中のＯＰＣをＴＬＣにより検出した。ＴＬＣの条件は下記のとおりである：
ＴＬＣ：シリカゲルプレート（Ｍｅｒｃｋ＆ＣＯ．，Ｉｎｃ．製）
展開溶媒：ベンゼン／蟻酸エチル／蟻酸（２／７／１）
検出試薬：硫酸およびアニスアルデヒド硫酸
サンプル量：各１０μＬ
【００４３】
ＴＬＣにより２〜４量体が検出されなくなった時点で、溶出溶媒を５０％（Ｖ／Ｖ）水−アセトン混合溶媒に変更し、この混合溶媒１２００ｍＬを通液し、カラムに吸着した残りのプロアントシアニジンを溶出させた。得られた２〜４量体が検出された画分をＯＰＣ含有画分とし、該ＯＰＣ含有画分以降の画分をＯＰＣ非含有プロアントシアニジン含有画分とした。ＯＰＣ含有画分を凍結乾燥し、ＯＰＣの乾燥粉末を得た。得られた乾燥粉末の重量から松樹皮の熱水抽出物１中のＯＰＣの含有量を算出したところ、乾燥重量換算で２０重量％であった。
【００４４】
（調製例２：松樹皮の熱水抽出物２の調製）
調製例１の操作と同様にして、松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末７．５１ｇを得た。さらにプロアントシアニジン含有量を高めるために、調製例１のＯＰＣの測定方法に準じて、この抽出物１からプロアントシアニジンを含有する画分（ＯＰＣ含有画分およびＯＰＣ非含有プロアントシアニジン含有画分）を得、この画分を松樹皮の熱水抽出精製画分（以下、松樹皮の熱水抽出物２という）とした。この松樹皮の熱水抽出物２を凍結乾燥し、抽出物１の乾燥粉末７．５１ｇから松樹皮の熱水抽出物２の乾燥粉末２．９３ｇを得た。この抽出物２のプロアントシアニジン含有量は、９５．７重量％であった。
【００４５】
（調製例３：松樹皮のエタノール抽出物の調製）
調製例１の精製水を用いて抽出する代わりにエタノールを用いて抽出したこと以外は、調製例１と同様に操作して、松樹皮のエタノール抽出物（プロアントシアニジン４１重量％含有）を得た。
【００４６】
（実施例１：飼料１の調製）
調製例１で得られた松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末（プロアントシアニジン４０重量％（ＯＰＣとして２０重量％）含有）が０．１重量％およびコレステロールが１重量％となるように基本飼料（ＣＲ−１：日本クレア株式会社）中に混合して、飼料を調製した（飼料１とする）。
【００４７】
（実施例２：飼料２の調製）
調製例１で得られた松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末（プロアントシアニジン４０重量％含有）と調製例２で得られた松樹皮の熱水抽出物２の乾燥粉末（プロアントシアニジン９５．７重量％含有）とを重量比で４：６で混合してプロアントシアニジンを７３．４重量％含有する松樹皮の熱水抽出物３の乾燥粉末を調製した。松樹皮の熱水抽出物１の代わりに、この抽出物３の乾燥粉末を用いた以外は、実施例１と同様にして飼料を調製した（飼料２とする）。
【００４８】
（実施例３：飼料３の調製）
松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末の代わりに、調製例３で得られた松樹皮のエタノール抽出物の乾燥粉末を用いたこと以外は、実施例１と同様にして、飼料を調製した（飼料３とする）。
【００４９】
（比較例１：飼料４の調製）
松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末の代わりに、調製例２で得られた松樹皮の熱水抽出物２の乾燥粉末（プロアントシアニジン９５．７重量％含有）を用いたこと以外は、実施例１と同様にして、飼料を調製した（飼料４とする）。
【００５０】
（比較例２：飼料５の調製）
松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末の代わりに、ブドウ種子抽出物（プロアントシアニジン３８重量％含有：キッコーマン株式会社）を用いたこと以外は、実施例１と同様にして、飼料を調製した（飼料５とする）。
【００５１】
（比較例３：飼料６の調製）
松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末の代わりに、リンゴポリフェノール（プロアントシアニジン４０重量％含有：ニッカウヰスキー株式会社）を用いたこと以外は、実施例１と同様にして、飼料を調製した（飼料６とする）。
【００５２】
（比較例４：飼料７の調製）
松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末を用いなかったこと以外は、実施例１と同様にして、飼料を調製した（飼料７とする）。
【００５３】
（実施例５：動脈脂質酸化抑制効果の検討）
実施例１〜３の飼料１〜３および比較例１〜４の飼料４〜７を用いて、動脈脂質酸化抑制効果を調べた。まず、平均体重が２．１±０．２ｋｇである３５匹のウサギ（チャールズリバー）を一群５匹に分けた。１群のウサギに飼料１を一日当たり１００ｇ、４週間摂取させた。摂取期間終了後、ウサギを解剖して、大動脈弓および胸大動脈を摘出した。これらの摘出部位をそれぞれ０．１ＭのＰＢＳ（−）で３回洗浄した後、各摘出部位の湿重量に対して１０倍量の０．１ＭのＰＢＳ（−）を添加し、ホモジェネートして、各摘出部位の抽出液を調製した。この抽出液の過酸化脂質量を、過酸化脂質測定キット（ＬＰＯ−５８６、ＯＸＩＳインターナショナル社）を用いて、マロニルジアルデヒド（ＭＤＡ）を標品としてタンパク質１ｍｇ当たりのＭＤＡ量を測定した。飼料２〜７についても上記と同様にして行い、ＭＤＡ量を測定した。結果を表１に示す。なお、ＭＤＡ量が多いほど、動脈に結合した過酸化脂質量が多いことを示す。
【００５４】
【表１】

【００５５】
表１の結果から、実施例のプロアントシアニジンを９５重量％未満の割合で含む松樹皮抽出物の乾燥粉末を含有する飼料（実施例１〜３）を摂取した群は、比較例のプロアントシアニジンを９５．７重量％含む松樹皮抽出物を含有する飼料（比較例１）あるいは松樹皮抽出物を含有していない飼料を摂取した群（比較例２〜４）に比べて、大動脈弓および肺動脈のＭＤＡ量が減少しており、動脈における過酸化脂質に起因する動脈硬化を効果的に予防できることが分かる。さらに、実施例１および３の比較から、松樹皮の熱水抽出物がエタノール抽出物に比べて、より高い動脈硬化予防効果を有することがわかる。実施例１および３と比較例２および３とを比較すると、この松樹皮抽出物は、同量のプロアントシアニジンを含有するブドウ種子抽出物またはリンゴポリフェノールに比べて、ＭＤＡ量を減少させることから、松樹皮抽出物が他の植物抽出物に比べて優れた動脈硬化予防効果を発揮することがわかる。
【００５６】
【発明の効果】
本発明の動脈硬化予防剤を摂取すると、優れた動脈硬化予防効果が得られる。本発明の予防剤に含有される松樹皮抽出物は、同量のプロアントシアニジンを含有する他の植物抽出物に比べて、優れた動脈硬化予防効果を発揮する。このような松樹皮抽出物は、熱水抽出により得ることが好ましい。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to an arteriosclerosis preventive agent, and more particularly to an arteriosclerosis preventive agent having an action of reducing oxidized lipids in arteries.
[0002]
[Prior art]
In recent years, adult diseases related to blood vessels such as stroke, heart disease, and hypertension, which are called lifestyle-related diseases, have increased and become a social problem. These diseases are mainly caused by excessive intake of high-calorie diet and social stress.
[0003]
Examples of high-calorie foods include eggs and livestock meat, and such foods contain a particularly large amount of lipid components such as cholesterol, fatty acids, and neutral fats. In recent years, processed foods and the like contain a large amount of oxidized cholesterol. As described above, lipid components in food materials, in particular cholesterol, tend to be taken excessively due to recent changes in diet.
[0004]
Cholesterol is transported to peripheral tissues in the form of low density lipoprotein (LDL) combined with specific proteins in the blood. On the other hand, cholesterol excretion is transported from the periphery to the liver by high-density lipoprotein (HDL), and is performed in the liver. When a large amount of LDL is present in the blood, it causes hypercholesterolemia. Furthermore, when LDL is oxidized, it adheres to blood vessels, and as a result, macrophages accumulate to try to digest it. As a result, the dead body of macrophages is adsorbed on the LDL-attached portion, causing arteriosclerosis.
[0005]
Foods containing polyphenols widely present in the plant kingdom have been proposed as arteriosclerosis preventing foods that prevent oxidation of LDL. Among the polyphenols, proanthocyanidins, which are compounds composed of condensation polymers having a degree of polymerization of 2 or more having flavan-3-ol and / or flavan-3,4-diol as structural units, have various antioxidative effects and the like. It is known that the apple or grape extract containing this proanthocyanidin suppresses the oxidation of LDL (for example, Patent Documents 1 and 2, Non-Patent Document 1). However, the above-mentioned extract is not sufficient for the antioxidant effect of LDL and the preventive effect of arteriosclerosis.
[0006]
[Patent Document 1]
Japanese Patent No. 1643101 [Patent Document 2]
Japanese Patent Laid-Open No. 10-330278 [Non-Patent Document 1]
Yamakoshi et al., Atherosclerosis (142) pp. 139-149, 1999 [Non-patent Document 2]
R. B. Broadhurst et al. Sci. Fd. Agric. 1978, 29, 788-794.
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide an excellent arteriosclerosis preventive agent.
[0008]
[Means for Solving the Problems]
The present inventors have conducted extensive studies on the prophylactic action of proanthocyanidins in arteriosclerosis. As a result, the pine bark extract has higher lipid oxidation-inhibiting effect in blood vessels than other plant-derived extracts. As a result, the present invention has been completed.
[0009]
The present invention provides an arteriosclerosis preventive agent containing a pine bark extract, and the pine bark extract contains proanthocyanidins in a proportion of less than 95% by weight in terms of dry weight.
[0010]
In a preferred embodiment, the pine bark extract is obtained by hot water extraction of pine bark.
[0011]
In a more preferred embodiment, the pine bark extract contains oligomeric proanthocyanidins in a proportion of 20% by weight or more in terms of dry weight.
[0012]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The agent for preventing arteriosclerosis of the present invention contains a pine bark extract, and the pine bark extract contains proanthocyanidins. The arteriosclerosis preventive agent may further contain other components as necessary. Hereafter, each component and the arteriosclerosis preventive agent of this invention are demonstrated. Note that the configuration described below does not limit the present invention and can be variously modified within the scope of the gist of the present invention.
[0013]
The pine bark used as the raw material for the pine bark extract is Pinus Martina, larch, Japanese black pine, Japanese red pine, Japanese pine, Japanese pine, Korean pine, Japanese pine, Ryukyu pine, Utsukushima, Japanese pine, Japanese pine, Quebec region of Canada Bark such as Aneda is preferably used. Among them, the bark of French maritime pine (Pinus Martina) is preferably used.
[0014]
French coastal pine is a marine pine that grows on the Atlantic coast of southern France. This French coastal pine bark contains proanthocyanidins, organic acids, and other physiologically active ingredients. Proanthocyanidins refer to a group of compounds composed of a condensation polymer having a degree of polymerization of 2 or more having flavan-3-ol and / or flavan-3,4-diol as a structural unit. This main component, proanthocyanidins, is known to have a strong antioxidant action to remove active oxygen.
[0015]
The pine bark extract used in the present invention is obtained by extracting the pine bark with water or an organic solvent. When water is used, warm water or hot water is used. When an organic solvent is used, a solvent that is acceptable for the production of food or drugs is used. Examples of such organic solvents include methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2 -Butanol, acetone, hexane, cyclohexane, propylene glycol, hydrous ethanol, hydrous propylene glycol, methyl ethyl ketone, glycerin, methyl acetate, ethyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, edible oils and fats, 1,1,1,2-tetrafluoroethane, and 1,1,2-trichloroethene is mentioned. These water and organic solvent may be used alone or in combination. Water, hot water, ethanol, hydrous ethanol, and hydrous propylene glycol are preferably used. From the viewpoint of safety when used in foods or pharmaceuticals, water, hot water, ethanol, and hydrous ethanol are more preferable, and hot water is more preferably used.
[0016]
In the extraction, the amount of water or organic solvent is not particularly limited, but is preferably 1 to 100 parts by weight with respect to 100 parts by weight of pine bark (dry weight). Furthermore, the temperature in the case of using hot water is preferably set to 50 to 120 ° C, preferably 70 to 100 ° C. The pine bark extract obtained by hot water extraction of pine bark has higher water solubility and superior physiological activity (arteriosclerosis prevention) than pine bark extract obtained by other extraction methods. Effect).
[0017]
The extraction method from pine bark is not particularly limited, and for example, a warm extraction method, a supercritical fluid extraction method, or the like is used.
[0018]
The supercritical fluid extraction method is a method of performing extraction using a supercritical fluid that is a fluid that exceeds the critical point (critical temperature, critical pressure) of a gas-liquid substance. As the supercritical fluid, carbon dioxide, ethylene, propane, nitrous oxide (laughing gas) or the like is used, and carbon dioxide is preferably used.
[0019]
In the supercritical fluid extraction method, an extraction process for extracting a target component with a supercritical fluid and a separation process for separating the target component and the supercritical fluid are performed. In the separation step, any one of extraction separation by pressure change, extraction separation by temperature change, or extraction separation using an adsorbent / absorbent may be performed.
[0020]
Moreover, you may perform supercritical fluid extraction by the entrainer addition method. In this method, 2 to 20 W of ethanol, propanol, n-hexane, acetone, toluene, other aliphatic lower alcohols, aliphatic hydrocarbons, aromatic hydrocarbons, or ketones are added to the supercritical fluid. / V% is added, and supercritical fluid extraction is performed with this fluid, thereby dramatically increasing the solubility of the target extract such as proanthocyanidins and catechins in the extraction solvent, or enhancing the selectivity of the separation. This is a method for obtaining an efficient pine bark extract.
[0021]
Since the supercritical fluid extraction method can be operated at a relatively low temperature, it can be applied to substances that are altered or decomposed at high temperatures; the advantage that the extraction fluid does not remain; and the recycling of the solvent is possible. There is an advantage that the process can be omitted and the process becomes simple.
[0022]
Extraction from pine bark may be performed by a liquid carbon dioxide batch method, a liquid carbon dioxide reflux method, a supercritical carbon dioxide reflux method, or the like, in addition to the above method.
[0023]
For extraction from pine bark, a plurality of extraction methods may be combined. By combining a plurality of extraction methods, it becomes possible to obtain pine bark extracts having various compositions.
[0024]
The pine bark extract obtained by the above extraction may be purified for the purpose of increasing the content of proanthocyanidins. For purification, a solvent such as ethyl acetate is usually used, but from the viewpoint of safety, a method that does not use a solvent, for example, ultrafiltration or adsorption of Diaion HP-20, Sephadex-LH20, chitin, etc. It is preferable to purify by a column method or a batch method using a functional carrier.
[0025]
Specifically, the pine bark extract used in the arteriosclerosis-preventing agent of the present invention is prepared by the following method, but this is illustrative and is not limited to this method.
[0026]
1 kg of French coastal pine bark is placed in 3 L of a saturated aqueous solution of sodium chloride and extracted at 100 ° C. for 30 minutes to obtain an extract (extraction process). Thereafter, the extract is filtered, and the resulting insoluble matter is washed with 500 mL of a saturated solution of sodium chloride to obtain a washing solution (washing step). The extract and washing solution are combined to obtain a crude extract of pine bark.
[0027]
Next, 250 mL of ethyl acetate is added to the crude extract and the phases are separated to recover the ethyl acetate layer 5 times. The collected ethyl acetate solutions are combined and added directly to 200 g of anhydrous sodium sulfate for dehydration. Thereafter, the ethyl acetate solution is filtered, and the filtrate is concentrated under reduced pressure until the original volume is reduced to 1/5. The concentrated ethyl acetate solution is poured into 2 L of chloroform, and the resulting precipitate is collected by filtration. Thereafter, the precipitate is dissolved in 100 mL of ethyl acetate, and then added to 1 L of chloroform again for precipitation to perform a washing step of repeating twice. By this method, for example, about 5 g of pine bark extract containing 20% by weight or more of proanthocyanidins having a polymerization degree of 2 to 4 and containing 5% by weight or more of catechins is obtained.
[0028]
The pine bark extract used in the present invention contains proanthocyanidins. When a pine bark extract containing this proanthocyanidin is ingested, an excellent effect of preventing arteriosclerosis can be obtained. Further, among proanthocyanidins, those containing a condensation polymer having a low degree of polymerization are preferably used. Those containing a condensation polymer (2-30 mer) having a polymerization degree of 2-30 are preferred, those containing a condensation polymer (2-10 mer) having a polymerization degree of 2-10 are more preferred, and the degree of polymerization is Those containing 2 to 4 condensation polymers (2 to 4 mer) are more preferably used. When a pine bark extract having a high OPC content is used, an excellent effect of preventing arteriosclerosis can be obtained as compared with the case of using a proanthocyanidin having a high degree of polymerization (a product having a low OPC content).
[0029]
In the present specification, the polymer having a degree of polymerization of 2 to 4 is referred to as oligomeric proanthocyanidin (hereinafter referred to as “OPC”). OPC is a kind of polyphenol, a powerful antioxidant produced by plants, and is concentrated in the leaves, bark, fruit peels and seeds of plants.
[0030]
The pine bark extract used in the present invention is less than 95% by weight of proanthocyanidins in terms of dry weight in the extract, preferably 40% or more and less than 95% by weight, more preferably 40% or more and less than 90% by weight, More preferably, it is contained in a proportion of 40 wt% or more and less than 75 wt%, and most preferably 40 wt% or more and less than 60 wt%. The OPC is contained in the extract in a proportion of preferably 20% by weight or more, more preferably 30% by weight or more in terms of dry weight. If the content of proanthocyanidins contained in the pine bark extract is 95% by weight or more, the content of components other than proanthocyanidins in the pine bark extract decreases, so that the solubility in water becomes poor or the extract has Problems such as a decrease in physiological activity may occur.
[0031]
The pine bark extract may further contain catechins, and the catechins are preferably contained in a proportion of 5% by weight or more, more preferably 10% by weight or more. Catechin can be extracted together with proanthocyanidins (OPC) by the above extraction method. Catechin is a general term for polyhydroxyflavan-3-ol. As catechins, (+)-catechin (referred to as catechin in a narrow sense), (−)-epicatechin, (+)-gallocatechin, (−)-epigallocatechin, epigallocatechin gallate, epicatechin gallate, afzelechin, etc. It has been known. In addition to the above (+)-catechin, gallocatechin, afzelekin, and (+)-catechin or 3-galloyl derivatives of gallocatechin have been isolated from the pine bark extract. Catechins are known to have carcinogenesis-inhibiting action, arteriosclerosis-preventing action, fat metabolism abnormality-inhibiting action, blood pressure rise-inhibiting action, platelet aggregation-inhibiting action, antiallergic action, antiviral action and the like. Catechins have the property of activating OPC at the same time as increasing water solubility in the presence of OPC, and act effectively when ingested with OPC.
[0032]
The pine bark extract used in the present invention most preferably contains OPC in a proportion of 20% by weight or more and catechins in a proportion of 5% by weight or more. When the catechins do not satisfy the above content, it is preferable to add the catechins so as to contain 5% by weight or more.
[0033]
The arteriosclerosis-preventing agent of the present invention further contains various components that are usually used in foods, medicines, and the like, if necessary. Examples of such components include nutritional supplements, excipients, bulking agents, binders, thickeners, emulsifiers, colorants, fragrances, seasonings, food additives, and the like.
[0034]
The arteriosclerosis preventive agent of the present invention contains a pine bark extract in an arbitrary ratio. Preferably, the preventive agent is contained in a proportion of 0.001 wt% to 70 wt%, more preferably 0.002 wt% to 50 wt% in terms of dry weight.
[0035]
The arteriosclerosis preventive agent of the present invention preferably contains a pine bark extract so that the daily intake is preferably 5 mg to 1000 mg, more preferably 10 mg to 500 mg.
[0036]
According to the present invention, an arteriosclerosis preventive agent containing a pine bark extract containing proanthocyanidins is thus obtained. By ingesting this prophylactic agent, the effect of reducing the oxidized lipids of the arteries is exhibited, so that an excellent arteriosclerosis preventing effect can be obtained. In particular, a prophylactic agent containing a hot water extract of pine bark is preferable in that it exhibits a superior effect of preventing arteriosclerosis. The prophylactic agent of the present invention can be used as food and medicine.
[0037]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail based on examples, but the present invention is not limited to these examples.
[0038]
(Preparation Example 1: Preparation of hot water extract 1 of pine bark)
To 900 g of pine bark, 7.2 L of purified water was added, crushed with a blender (Waring Blender), and then extracted by heating at 100 ° C. for 10 minutes. Then, it filtered immediately and obtained the filtrate. The residue after filtration was washed with 1.8 L of purified water, and the filtrate and the washing solution were combined to obtain 9 L of a crude hot water extract of pine bark. When 1 mL of this extract was freeze-dried, the dry weight was 8 mg.
[0039]
1 L of the above crude extract (powder dry weight 8 g) was allowed to cool to 25 ° C., sodium chloride was added to 100% saturation concentration and stirred well, and then allowed to stand at 4 ° C. for 24 hours. After standing, this solution was filtered to obtain 910 mL of filtrate. This filtrate was further purified by the steps shown below. First, the filtrate was passed through a 30 × 300 mm column packed with 100 mL of an aromatic synthetic resin swollen with water (Diaion HP-20: manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation), and further washed with 1 L of purified water. . Next, the column was eluted with a 15% (V / V) ethanol-water mixed solvent to obtain 200 mL of a pine bark hot water extraction purified product (hereinafter referred to as pine bark hot water extract 1). The obtained purified product was freeze-dried and powdered. This operation was repeated to obtain 7.51 g of dry powder of hot water extract 1 of pine bark from 9 L of hot water extract of pine bark.
[0040]
The contents of proanthocyanidins and OPC in the dry powder were measured as follows.
[0041]
The content of proanthocyanidins was determined using R.Procyanidin B-2 as a standard. B. The measurement was performed according to the method of Broadhurst et al. As a result, 40% by weight of proanthocyanidins was contained in the dry powder.
[0042]
The content of OPC was measured as follows. First, 100 mL of Sephadex LH-20 (manufactured by Amersham Biosciences) swollen with water was packed in a 30 × 300 mm column and washed with 50 mL of ethanol. Next, 400 mg of the dry powder of the above-mentioned pine bark hot water extract 1 was dissolved in 8 mL of ethanol, and this solution was passed through a column to adsorb proanthocyanidins. Then, gradient elution was performed with 100 to 80% (V / V) ethanol-water mixed solvent, and 10 mL each was collected. At the same time as the fractionation, 2, 3, and tetramer OPC preparations (dimer: proanthocyanidin B-2 (Rf value: 0.6), trimer: proanthocyanidin C-1 (Rf value: 0.4) and tetramer: cinnamtannin A ₂ (Rf value: 0.2)) were used as indicators, and OPC in each fraction was detected by TLC. TLC conditions are as follows:
TLC: Silica gel plate (Merck & CO., Inc.)
Developing solvent: benzene / ethyl formate / formic acid (2/7/1)
Detection reagent: sulfuric acid and anisaldehyde sulfuric acid Sample amount: 10 μL each
[0043]
When the 2- to 4-mer is no longer detected by TLC, the elution solvent is changed to a 50% (V / V) water-acetone mixed solvent, 1200 mL of this mixed solvent is passed, and the remaining pro- Anthocyanidins were eluted. The obtained fraction in which the 2- to 4-mer was detected was defined as an OPC-containing fraction, and the fractions after the OPC-containing fraction were defined as OPC-free proanthocyanidin-containing fractions. The OPC-containing fraction was freeze-dried to obtain a dry powder of OPC. When the content of OPC in the hot water extract 1 of pine bark was calculated from the weight of the obtained dry powder, it was 20% by weight in terms of dry weight.
[0044]
(Preparation Example 2: Preparation of hot water extract 2 of pine bark)
In the same manner as in Preparation Example 1, 7.51 g of dry powder of hot water extract 1 of pine bark was obtained. In order to further increase the content of proanthocyanidins, the fraction containing proanthocyanidins from this extract 1 (an OPC-containing fraction and an OPC-free proanthocyanidin-containing fraction) was extracted from Extract 1 according to the OPC measurement method of Preparation Example 1. This fraction was used as a pine bark hot water extraction and purified fraction (hereinafter referred to as pine bark hot water extract 2). This hot water extract 2 of pine bark was freeze-dried to obtain 2.93 g of dry powder of hot water extract 2 of pine bark from 7.51 g of dry powder of extract 1. The extract 2 had a proanthocyanidin content of 95.7% by weight.
[0045]
(Preparation Example 3: Preparation of ethanol extract of pine bark)
A pine bark ethanol extract (containing 41% by weight of proanthocyanidins) was obtained in the same manner as in Preparation Example 1, except that ethanol was used instead of extraction using the purified water of Preparation Example 1. .
[0046]
(Example 1: Preparation of feed 1)
Basic so that the dry powder (containing 40% by weight of proanthocyanidins (20% by weight as OPC)) of hot water extract 1 of pine bark obtained in Preparation Example 1 is 0.1% by weight and cholesterol is 1% by weight. The feed was prepared by mixing in feed (CR-1: Nippon Claire Co., Ltd.) (referred to as feed 1).
[0047]
(Example 2: Preparation of feed 2)
Dry powder of hot water extract 1 of pine bark obtained in Preparation Example 1 (containing 40% by weight of proanthocyanidins) and dry powder of hot water extract 2 of pine bark obtained in Preparation Example 2 (proanthocyanidins 95. 7% by weight) was mixed at a weight ratio of 4: 6 to prepare a dry powder of pine bark hot water extract 3 containing 73.4% by weight of proanthocyanidins. A feed was prepared in the same manner as in Example 1 except that the dry powder of this extract 3 was used instead of the hot water extract 1 of pine bark (referred to as feed 2).
[0048]
(Example 3: Preparation of feed 3)
A feed was prepared in the same manner as in Example 1, except that the dry powder of pine bark ethanol extract obtained in Preparation Example 3 was used instead of the dry powder of hot water extract 1 of pine bark. (Feed 3).
[0049]
(Comparative Example 1: Preparation of feed 4)
Instead of using the dry powder of pine bark hot water extract 1, the dry powder of pine bark hot water extract 2 obtained in Preparation Example 2 (containing 95.7% by weight of proanthocyanidins) was used. A feed was prepared in the same manner as in Example 1 (referred to as feed 4).
[0050]
(Comparative Example 2: Preparation of feed 5)
A feed was prepared in the same manner as in Example 1, except that a grape seed extract (containing 38% by weight of proanthocyanidins: Kikkoman Corporation) was used instead of the dry powder of hot water extract 1 of pine bark. (Feed 5).
[0051]
(Comparative Example 3: Preparation of feed 6)
A feed was prepared in the same manner as in Example 1 except that apple polyphenol (containing 40% by weight of proanthocyanidins: Nikka Whiskey Co., Ltd.) was used instead of the dry powder of hot water extract 1 of pine bark ( Feed 6).
[0052]
(Comparative Example 4: Preparation of feed 7)
A feed was prepared in the same manner as in Example 1 except that the dry powder of hot water extract 1 of pine bark was not used (referred to as feed 7).
[0053]
(Example 5: Examination of arterial lipid oxidation inhibitory effect)
Using the feeds 1 to 3 of Examples 1 to 3 and the feeds 4 to 7 of Comparative Examples 1 to 4, the effect of inhibiting arterial lipid oxidation was examined. First, 35 rabbits (Charles River) having an average body weight of 2.1 ± 0.2 kg were divided into 5 groups. One group of rabbits was fed 100 g of diet 1 per day for 4 weeks. At the end of the intake period, the rabbits were dissected and the aortic arch and thoracic aorta were removed. Each of these excision sites was washed three times with 0.1 M PBS (-), and then 10 times the amount of 0.1 M PBS (-) with respect to the wet weight of each excision site was added and homogenized. An extract of each excision site was prepared. The amount of lipid peroxide in this extract was measured using a lipid peroxide measurement kit (LPO-586, OXIS International) with malonyl dialdehyde (MDA) as a standard sample. The feeds 2 to 7 were performed in the same manner as described above, and the amount of MDA was measured. The results are shown in Table 1. In addition, it shows that there are many amounts of lipid peroxide couple | bonded with the artery, so that there are many amounts of MDA.
[0054]
[Table 1]

[0055]
From the results of Table 1, the group that ingested the feed (Examples 1 to 3) containing the dry powder of the pine bark extract containing the proanthocyanidins of the examples in a proportion of less than 95% by weight is the proanthocyanidins of the comparative examples. Compared to the group containing 95.7% by weight of pine bark extract containing feed (Comparative Example 1) or the feed containing no pine bark extract (Comparative Examples 2 to 4), the aortic arch and pulmonary artery It can be seen that the amount of MDA is decreased, and arteriosclerosis caused by lipid peroxide in the artery can be effectively prevented. Furthermore, it can be seen from the comparison between Examples 1 and 3 that the hot water extract of pine bark has a higher effect of preventing arteriosclerosis than the ethanol extract. Comparing Examples 1 and 3 with Comparative Examples 2 and 3, this pine bark extract reduces the amount of MDA compared to grape seed extract or apple polyphenol containing the same amount of proanthocyanidins, It can be seen that the pine bark extract exhibits a superior effect of preventing arteriosclerosis compared to other plant extracts.
[0056]
【The invention's effect】
When the arteriosclerosis preventive agent of the present invention is ingested, an excellent arteriosclerosis preventive effect can be obtained. The pine bark extract contained in the prophylactic agent of the present invention exhibits a superior arteriosclerosis preventing effect as compared with other plant extracts containing the same amount of proanthocyanidins. Such a pine bark extract is preferably obtained by hot water extraction.

Claims

An arteriosclerosis preventive agent containing a pine bark extract,
An agent for preventing arteriosclerosis, wherein the pine bark extract contains proanthocyanidins in a proportion of less than 95% by weight in terms of dry weight.

The preventive agent according to claim 1, wherein the pine bark extract is obtained by hot water extraction of pine bark.

The preventive agent according to claim 1 or 2, wherein the pine bark extract contains oligomeric proanthocyanidins in a proportion of 20% by weight or more in terms of dry weight.