JPWO2003091237A1 - Method for producing high content of proanthocyanidins - Google Patents

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Abstract

植物体からプロアントシアニジンを抽出し、得られた抽出物と所定量のキチン、キトサン、またはそれらの誘導体とを接触させ、非吸着物を回収することによって、生理活性の高いOPCを多く含むプロアントシアニジン含有物を容易に得ることができる。さらに、このプロアントシアニジン含有物を合成樹脂系吸着剤で処理することによって、OPC含量が極めて高いプロアントシアニジン含有物を得ることができる。Proanthocyanidins are extracted from a plant body, the obtained extract is brought into contact with a predetermined amount of chitin, chitosan, or a derivative thereof, and non-adsorbed substances are collected, thereby proanthocyanidins rich in physiologically active OPC. Inclusions can be easily obtained. Further, by treating the proanthocyanidin-containing material with a synthetic resin adsorbent, a proanthocyanidin-containing material having an extremely high OPC content can be obtained.

Description

技術分野
本発明は、生理活性の高いOPCを多く含むプロアントシアニジン含有物を、効率よく製造する方法に関する。
背景技術
プロアントシアニジンは、各種植物中に存在する重合または縮合したタンニンであり、フラバン−3−オールまたはフラバン−3,4−ジオールを構成単位として縮合または重合(以下、縮重合という)により、結合した化合物群である。これらは、酸処理によりシアニジン、デルフィニジン、ペラルゴニジンなどのアントシアニジンを生成することから、その名称が与えられている。
プロアントシアニジンの中でも、重合度が低いプロアントシアニジンが好適に用いられている。重合度が2〜30の縮重合体(2〜30量体)が好ましく、重合度が2〜10の縮重合体(2〜10量体)がより好ましく、重合度が2〜4の縮重合体(2〜4量体)がさらに好ましく用いられる。
本明細書では、プロアントシアニジンの縮重合体のうち、フラバン−3−オールおよび/またはフラバン−3,4−ジオールを構成単位とする重合度が2〜4の縮重合体を、OPC(オリゴメリック・プロアントシアニジン;oligomeric proanthocyanidin)という。
プロアントシアニジンは、ポリフェノール類の一種で、植物が作り出す強力な抗酸化物質であり、植物の葉、樹皮、果物の皮もしくは種の部分に集中的に含まれている。プロアントシアニジン、特にOPCは、具体的には、ブドウの種、松の樹皮、ピーナッツの皮、イチョウ葉、ニセアカシアの果実、コケモモの果実などに含まれている。また、西アフリカのコーラナッツ、ペルーのラタニアの根、日本の緑茶にも、OPCが含まれることが知られている。OPCは、ヒトの体内では、生成することのできない物質である。
さらにOPCは、抗酸化作用のほか、口腔内のバクテリア増殖を抑制してプラーク(歯こう)を減少させる効果;血管の弾力性を回復させる効果;血液中でのリポタンパク質が活性酸素によりダメージを受けるのを防止して、損傷した脂肪が血管の内壁に凝集し、コレステロールが付着することを防止する効果;活性酸素によって分解されたビタミンEを再生させる効果;ビタミンEの増強剤としての効果などを有することが知られている。
さらに、フラバン−3−オールおよび/またはフラバン−3,4−ジオールの重合体であるタンニン、ならびにキチン、キトサン、およびこれらの誘導体は、黄色ブドウ球菌、サルモネラ菌、腸チフス菌、コレラ菌などに対する抗菌作用や殺菌作用が顕著である。特にほとんどの抗生物質が効かないために話題となったMRSA(メチシリン耐性ブドウ球菌)にも効果があることが報告されている。
プロアントシアニジンは、一般的には植物体からの抽出によって得られる。抽出に用いる溶媒としては、水;メタノール、エタノール、アセトン、ヘキサン、酢酸エチルなどの有機溶媒;またはこれらの混合物が挙げられる(特開平11−80148号公報)。しかし、単に溶媒による抽出のみでは、プロアントシアニジンの回収量は低く、純度も低い。したがって、健康食品、化粧品および医薬品原料として使用するためには、純度を上げるためのさらなる濃縮、精製などの工程が必要であり、コストおよび時間がかかる。
特開平5−279264号公報および特開平6−56689号公報には、プロアントシアニジンを含むポリフェノール類を回収する方法が記載されている。この方法では、ポリフェノール類をキチンに吸着させ、ポリフェノール類が吸着したキチンをポリフェノール製品として利用する。しかし、吸着されたポリフェノール類は、重合度の高いポリフェノール類であり、上記生理活性が高い2〜4量体のOPCの含有量は極めて低く、そのため抗酸化作用などの生理活性が低い。
特開平4−190774号公報、特開平10−218769号公報、特開2001−131027号公報、およびEberhard Scholzら,Proanthocyanidins from Krameria triandra Root,Planta Medica,55(1989),379−384頁には、植物体からOPCを抽出する方法および/またはOPCを合成する方法が記載されている。しかし、抽出方法においては、OPCを得るために、植物体の抽出液を合成樹脂系吸着剤に吸着・溶出させ、得られた画分を回収する工程、さらにこの工程を繰り返す工程が必要であり、効率的ではない。合成方法についても、工程数が多く、コストおよび時間もかかるなどの問題がある。
発明の開示
本発明者らは、有用な生理活性を有するOPC含量の多いプロアントシアニジン含有物を効率よく得る方法について、鋭意検討した。その結果、植物体からプロアントシアニジンを抽出し、得られた抽出物と所定量のキチン、キトサン、またはこれらの誘導体とを接触させ、非吸着物を回収することによって、生理活性の高いOPCを多く含むプロアントシアニジン含有物が効率良く得られることを見出した。このプロアントシアニジン含有物を、さらに合成樹脂系吸着剤で処理することによって、よりOPC含量の高いプロアントシアニジン含有物が得られることを見出して本発明を完成させた。
本発明は、プロアントシアニジン含有物の製造方法を提供し、この方法は、(a)植物体から抽出または圧搾により抽出物または搾汁を得る工程;および
(b)該抽出物または搾汁を、該抽出物または搾汁中のポリフェノール含有量に対して乾燥重量で2〜10倍量のキチン、キトサン、またはそれらの誘導体と接触させ、非吸着物を回収する工程を包含する。
好ましい実施態様においては、上記抽出は、熱水抽出である。
さらに好ましい実施態様においては、さらに(c)上記工程(b)で得られる非吸着物と合成樹脂系吸着剤とを接触させる工程を包含する。
本発明はまた、オリゴメリック・プロアントシアニジンおよびカテキン類を含有するプロアントシアニジン含有物を提供し、これは、該プロアントシアニジン含有物中に乾燥重量換算でオリゴメリック・プロアントシアニジンを30重量%以上、そしてカテキン類を5〜15重量%の割合で含有する。
発明を実施するための最良の形態
本発明に用いられる植物体は、プロアントシアニジンを含有する植物体であり、その種類には特に制限はない。プロアントシアニジンを多く含む杉、檜、松などの樹皮;ブドウ、ブルーベリー、イチゴ、アボガド、ニセアカシア、コケモモ、エルダーベリーの果実、果皮、もしくは種子;大麦;小麦;大豆;黒大豆;カカオ;小豆;トチの実の殻;ピーナッツの薄皮;イチョウ葉;茶葉および茶抽出液;モロコシキビ;リンゴ果実;クマザサ;フコイダン;ヤーコン葉;コーラナッツ(例えば、西アフリカのコーラナッツ);ラタニア(例えば、ペルーのラタニア)の根;などが挙げられる。これらの中で、特に松樹皮、ブドウ種子および果皮、ピーナッツの薄皮などが好適に用いられる。
以下、本発明のプロアントシアニジン含有物の製造方法について説明する。まず、植物体からプロアントシアニジンを抽出し、あるいは植物体から搾汁を得る。抽出を行う場合には、抽出効率の点から、好ましくは植物体を適当な大きさに破砕し、体積当たりの表面積を大きくする。破砕方法は、特に限定されない。例えば、カッター、スライサーなどで処理した破砕物;ミキサー、ジューサー、ブレンダー、マスコロイダーなどで処理した粉砕物などでもよい。破砕物または粉砕物の大きさは、0.1〜10cm、好ましくは0.1〜5cmの細片である。破砕効率を上げるために、破砕時に水、あるいはエタノール、メタノール、酢酸エチルなどの有機溶媒を加えてもよい。
抽出溶媒としては、水または有機溶媒が用いられる。有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、1−プロパノール、2−プロパノール、1−ブタノール、2−ブタノール、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレングリコール、エチルメチルケトン、グリセリン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、食用油脂、1,1,1,2−テトラフルオロエタン、および1,1,2−トリクロロエテンが挙げられる。さらに、水−有機溶媒の混合溶媒も好ましく用いられる。これらの有機溶媒は単独で用いてもよいし、組合わせて用いてもよい。なお、製造時の廃液処理の観点から、水が好適に用いられる。
植物体に添加する抽出溶媒の量は、目的とするプロアントシアニジン濃度および抽出効率を考慮して設定し得る。例えば、水を抽出溶媒として使用する場合、植物体:水の比が重量比で1:5〜1:50、好ましくは1:10〜1:20である。水および/または有機溶媒を添加して破砕した場合は、破砕に使用した量を考慮し、添加する抽出溶媒の量を調整すればよい。
抽出温度は、抽出効率を高めるためには高い方が好ましい。水を用いる場合、50〜120℃、好ましくは70〜100℃の熱水で抽出する。植物体に熱水を加えてもよく、植物体に水を加えた後、加熱してもよい。抽出時間は、一般的には10分〜24時間であるが、抽出温度により適宜決定され得る。
また、有機溶媒を用いた抽出方法として、加温抽出または超臨界流体抽出法による抽出を行ってもよい。有機溶媒を用いた加温抽出法としては、植物体に加温した溶媒を加える方法、または植物体に溶媒を添加して加温する方法が用いられる。例えば、粉砕した植物体に対して、水:エタノールの比が、重量比で1:1である水−エタノール混合溶媒を抽出溶媒として5倍量使用して、70〜75℃で還流させながら、3時間攪拌する方法が挙げられる。なお、有機溶媒を使用する場合の抽出温度は、その有機溶媒の沸点以下に設定する必要がある。
超臨界流体抽出法は、物質の気液の臨界点(臨界温度、臨界圧力)を超えた状態の流体である超臨界流体を用いて目的成分を抽出する方法である。超臨界流体としては、二酸化炭素、エチレン、プロパン、亜酸化窒素(笑気ガス)などが用いられ、二酸化炭素が好ましく用いられる。超臨界流体抽出法は、目的成分を超臨界流体によって抽出する抽出工程および目的成分と超臨界流体とを分離する分離工程からなる。分離工程では、圧力変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、または吸着剤・吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよい。
また、エントレーナー添加法による超臨界流体抽出を行ってもよい。この方法は、超臨界流体に、例えば、エタノール、プロパノール、n−ヘキサン、アセトン、トルエン、その他の脂肪族低級アルコール類、脂肪族炭化水素類、芳香族炭化水素類、またはケトン類を2〜20W/V%程度添加し、得られた抽出流体で超臨界流体抽出を行うことによって、OPC、カテキン類(後述)などの目的とする被抽出物の抽出流体に対する溶解度を飛躍的に上昇させる、あるいは分離の選択性を増強させ、プロアントシアニジンの効率的な抽出を可能にする。
抽出には、例えば、回分式、半連続式、または連続式などのいずれの抽出装置を用いてもよい。
植物体から搾汁を得る場合には、植物体を直接圧搾し、あるいは適宜切断または破砕した後に圧搾する。この方法は、水分含量の高い植物体を使用する場合に好適に採用される。例えば、ブドウ果実の場合には、圧搾によりプロアントシアニジンを含む搾汁が得られる。植物体を破砕して得られる植物体由来の固形分を含む植物体破砕物(例えば、上記ブドウ果実破砕物)もまた搾汁と同様に用いられ、本明細書中では、この植物体由来の固形分を含む植物体破砕物も搾汁に包含される。
次に、得られた抽出物または搾汁(以下、抽出物等という)と所定量のキチン、キトサン、またはそれらの誘導体(以下、キチン、キトサン、およびこれらの誘導体のうちの少なくとも1種をキチン類という)とを接触させる。
以下、この工程を接触工程という。
接触工程に用いられるキチン類の形状は、粉末のままでもよいし、繊維、フィブリル、フィルム、多孔体、マイクロビーズなどの成形体でもよい。あるいは、樹脂等の担体と結合してもよい。
所定量のキチン類とは、抽出物等中のポリフェノール含有量に対して、乾燥重量で2〜10倍量、好ましくは3〜8倍量、より好ましくは4〜7倍量のキチン類をいう。なお、キチン類が樹脂などの担体と結合している場合は、担体部分の重量を除いた重量をキチン類の重量とする。
抽出物等中のポリフェノール含有量は、例えば、抽出液の一部(1〜5mL程度)を分取し、温風乾燥、凍結乾燥、真空乾燥、減圧濃縮などにより粉末化し、抽出物等の粉末(以下、抽出物粉末という)の重量を測定した後、この抽出物粉末中のポリフェノール含有率(%)をFolin法などにより測定することによって算出することができる。
Folin法による抽出物粉末中のポリフェノール含有率(%)の測定は、例えば、以下のように行われる。まず、カテキンをポリフェノールの標準物質として精製水に溶解し、0.005〜0.05重量/容量%の範囲内で段階的に標準検体を調製する。次いで、上記抽出物粉末を0.01〜0.05重量/容量%の範囲内で適宜精製水に溶解し、検体を調製する。標準検体および検体をそれぞれFolin試薬(100mL中にタングステン酸ナトリウム2.5g、リンモリブデン酸0.5g、および85重量%リン酸溶液1.25mLを含有する水溶液)と等量混合し、3分間攪拌した後、10重量/容量%炭酸ナトリウム溶液3mLを加え、1時間放置する。放置後、遠心分離によって上清を回収して、この上清の730nmにおける吸光度を測定する。各濃度の標準検体の吸光度から検量線を作成し、この検量線を用いて検体中に含まれるポリフェノール濃度を得る。得られたポリフェノール濃度および検体濃度から抽出物粉末中のポリフェノール含有率(%)を算出することができる。
接触工程においては、抽出物等とキチン類とが接触すれば、接触はいかなる方法で行ってもよい。例えば、簡易な方法としては、合成樹脂担体にキチンを結合させたキチン樹脂をカラムに充填し、抽出液を通過させるカラム法、キチン類を抽出物等に加え、一定時間後、キチン類を除去するバッチ法などが挙げられる。なお、抽出物等に有機溶媒が含まれる場合は、キチン類が有機溶媒に溶解しない程度に抽出物等を希釈するか、有機溶媒を除去しておく必要がある。
カラム法は、カラムの詰まりなどを考慮して、抽出物等に含まれる不溶物をあらかじめ除去することが好ましい。不溶物を除去する方法としては、当業者が通常用いる方法、例えば、濾過や遠心分離などが挙げられる。処理時間の点から、濾過が好適に用いられる。濾過は、好ましくは50〜100℃で行われ得る。高温ほど、より多くのプロアントシアニジンを回収することができ、好ましくは50℃以上、より好ましくは70℃以上で行われる。濾過により除去された不溶物を、さらに70℃以上の熱水または加温溶媒で洗浄することによって、より多くのプロアントシアニジンを回収することができる。
不溶物を除去した後、キチン類への吸着効率を考慮して、得られた抽出物等を冷却することが好ましい。好ましくは抽出物等を4〜30℃になるまで冷却する。冷却としては、放冷による自然冷却;水、氷、あるいは冷凍庫や冷蔵庫などの冷却装置を用いた強制冷却などが挙げられる。
冷却後、キチン類を充填したカラムに抽出物等を通液する。例えば、カニ由来のキチンを用いて、松樹皮からプロアントシアニジン含有物を得る場合、松樹皮の熱水抽出物中のポリフェノール含有量を測定した後、該ポリフェノールの含有量に対して乾燥重量で2〜10倍量、より好ましくは3〜8倍量のキチンを充填したカラムに松樹皮抽出物を通液する。その後、カラムをカラム容量の約2〜3倍量の水で洗浄し、得られたカラム通過液および洗浄液を回収することによって、プロアントシアニジン含有物を得ることができる。ここで、プロアントシアニジン含有物とは、その後、当業者が通常用いる方法によって得られる濃縮物、希釈物、粉末なども含む。
バッチ法におけるキチン類による処理は、例えば、松樹皮の熱水抽出物中のポリフェノールの乾燥重量に対して、キチン類を乾燥重量で2〜10倍量、好ましくは3〜8倍量添加して、攪拌しながら1〜3時間行うことが好ましい。
処理後、キチン類を濾過または遠心分離により、除去することで、プロアントシアニジン含有物を得ることができる。
上記接触工程を経ることによりOPC含量の多いプロアントシアニジン含有物(以下、プロアントシアニジン含有物Iという)を容易に得ることができる。プロアントシアニジン含有物Iは、乾燥重量換算でOPC(オリゴメリック・プロアントシアニジン)を30〜90重量%、より好ましくは40重量%〜70重量%含有する。
得られたプロアントシアニジン含有物Iは、さらに、乾燥重量換算でカテキン類を好ましくは5〜15重量%、より好ましくは10〜15重量%含有し得る。カテキン(catechin)類は、単独では水溶性が乏しく、その生理活性が低いが、OPCは、カテキン類と共存すると、カテキン類の水溶性を増加させると同時に、カテキン類の作用を活性化する性質を有する。したがって、OPCとカテキン類とを含有するプロアントシアニジン含有物Iは、特に有用である。
カテキン類とは、ポリヒドロキシフラバン−3−オールの総称である。カテキン類としては、(+)−カテキン、(−)−エピカテキン、(+)−ガロカテキン、(−)−エピガロカテキン、エピガロカテキンガレート、エピカテキンガレートなどが挙げられる。さらに、天然物由来のアフゼレキン、ならびに(+)−カテキンまたはガロカテキンの3−ガロイル誘導体も含む。
カテキン類の作用としては、発癌抑制作用、動脈硬化予防作用、脂肪代謝異常の抑制作用、血圧上昇抑制作用、血小板凝集抑制作用、抗アレルギー作用、抗ウイルス作用、抗菌作用、虫歯予防作用、口臭防止作用、腸内細菌叢正常化効果、活性酸素やフリーラジカルの消去作用、抗酸化作用、血糖の上昇を抑制する抗糖尿病効果などが挙げられる。
得られたプロアントシアニジン含有物Iは、さらに合成樹脂系吸着剤で処理することにより、糖類や有機酸などの夾雑物が除去され、さらに精製される。すなわち、プロアントシアニジン含有物Iを合成樹脂系吸着剤と接触させて、プロアントシアニジンを合成樹脂系吸着剤に吸着させた後、所定の溶媒で溶出することにより、OPC含量が極めて高いプロアントシアニジン含有物(以下、プロアントシアニジン含有物IIという)を得ることができる。
上記精製に用いられる合成樹脂系吸着剤としては、有機系樹脂、イオン交換樹脂、シリカゲル、逆相シリカゲルなどが挙げられる。
有機系樹脂としては、例えば、スチレン−ジビニルベンゼン系樹脂などの芳香族系樹脂、アクリル酸系メタクリル樹脂、アクリロニトリル脂肪族系樹脂などが使用できる。好ましくは、芳香族系樹脂である。芳香族樹脂としては、疎水性置換基を有する芳香族系樹脂、無置換基型の芳香族系樹脂、無置換基型に特殊処理を施した芳香族系樹脂が挙げられ、無置換基型に特殊処理を施した芳香族系樹脂がより好適である。これらの樹脂は、多孔性であることが好ましい。このような合成樹脂は市販されており、例えば、次のものが挙げられる:アクリル酸系メタクリル樹脂としては、ダイアイオン(登録商標)HP1MG、HP2MG(以上、三菱化学株式会社製);芳香族系樹脂としては、SP−900(三菱化学株式会社製)、アンバーライト(登録商標)XAD−2、XAD−4、XAD−16、XAD−2000(以上、株式会社オルガノ製);疎水性置換基を有する芳香族系樹脂としては、ダイアイオン(登録商標)SP−205、SP−206、SP−207、HP−2MG、EX−0021(以上、三菱化学株式会社製)、アンバーライト(登録商標)XAD−7、XAD−8(以上、株式会社オルガノ製);無置換基型の芳香族系樹脂としては、ダイアイオン(登録商標)HP−10、HP−20、HP−21、HP−30、HP−40、HP−50(以上、三菱化学株式会社製);無置換基型に特殊処理を施した芳香族系樹脂としては、SP−825、SP−800、SP−850、SP−875(以上、三菱化学株式会社製);架橋デキストランの誘導体としては、セファデックス(登録商標)LH20、LH60(以上、ファルマシアバイオテク株式会社製)など。中でもダイアイオンHP−20またはセファデックスLH20が好ましい。
イオン交換樹脂としては、陽イオン交換樹脂および陰イオン交換樹脂のいずれも使用できる。市販されている陽イオン交換樹脂としては、例えば、官能基としてスルホン酸塩基を有する樹脂である、アンバーライト(登録商標)CG−4000、CG−5000、CG−6000、CG−8000、IR−116、IR−118、IR−120B、IR−122、IR−124、XT−1007、XT−1009、XT−1002(以上、株式会社オルガノ製)などが挙げられる。弱塩基性陰イオン交換樹脂としては、例えば、官能基として4級アミンを有する樹脂である、OPTIPORE−XUS40285.00、OPTIPORE−XUS 40390.00(以上、ダウケミカル株式会社製)などが挙げられる。イオン交換樹脂を用いる際の溶出溶媒は、水が好ましく、カラム温度は50〜120℃、カラム内は常圧または加圧された状態であることが好ましい。
合成樹脂系吸着剤の量は、溶媒の種類、合成樹脂系吸着剤の種類等によって適宜設定すればよい。例えば、プロアントシアニジン含有物Iの乾燥重量に対して、0.01〜5倍重量の合成樹脂系吸着剤を使用することが好ましい。
プロアントシアニジン含有物Iを合成樹脂系吸着剤を用いて精製するには、例えば、まず、合成樹脂系吸着剤をカラムに充填し、そのカラムにプロアントシアニジン含有物Iを通液し、次いで合成樹脂系吸着剤の重量に対し、5倍から10倍の重量の水を通液させる。これにより、不純物である糖類および有機酸が除去される。その後、適切な溶媒によりプロアントシアニジンを溶出する。溶媒としては、水、メタノール、エタノール、酢酸エチル、クロロホルム、およびこれらの混合溶媒が挙げられる。好ましくは水とエタノールとの混合溶媒が用いられる。水とエタノールとの混合比は、用いる合成樹脂系吸着剤によって異なるが、例えば、ダイアイオンHP−20の場合、水:エタノールの比が体積比で1:1〜4:1である。このようにして、OPC含量が極めて高いプロアントシアニジン含有物IIが得られる。
上記精製工程を経ることにより得られるプロアントシアニジン含有物IIは、乾燥重量換算で、OPCを80重量%以上、好ましくは95重量%以上含有し得る。このプロアントシアニジン含有物IIは、OPCを極めて多く含有するが、カテキン類はほとんど含有しない。
上記精製工程を経ることにより得られたプロアントシアニジン含有物IIを用いて、カテキン類を5〜15重量%含有するプロアントシアニジン含有物Iとすることもできる。例えば、プロアントシアニジン含有物IIに純度の高いカテキン類を添加することによって得られ得る。
上記方法によって製造されるプロアントシアニジン含有物IまたはIIは、濃縮して食品素材とすることもできる。濃縮には、膜濃縮、加熱濃縮、真空(減圧)濃縮、凍結濃縮などの種々の方法が用いられる。
さらに必要に応じて、これらのプロアントシアニジン含有物IまたはIIを殺菌処理して保存する。殺菌は、気流殺菌、高圧殺菌、加熱殺菌などの当業者が用いる方法により行われる。
また、これらのプロアントシアニジン含有物IまたはIIは、殺菌後、濃縮、乾燥、粉末化してもよい。乾燥には、当業者が通常用いる方法によって行われる。中でも、凍結乾燥、真空乾燥、および噴霧乾燥が好ましく用いられる。
このようにして得られたプロアントシアニジン含有物IまたはIIは、食品、化粧品、医薬品の原料として使用することができる。
得られたプロアントシアニジン含有物IまたはIIは、ドリンク剤およびゲル化した飲食物などとしても利用できる。さらに、プロアントシアニジン含有物は、そのまま飲食に供するだけでなく、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、香料、食品添加物、調味料などと混合し、用途に応じて、顆粒、錠剤などの形態に成形することもできる。例えば、ローヤルゼリー、ビタミン類、プロテイン、カルシウム、キトサン、レシチン、カフェインなどと混合し、さらに糖液および調味料により味が整えられる。さらにこれらは、ハードカプセルおよびソフトカプセルなどのカプセル剤、丸剤、またはティーバッグ状などにされる。これらは、これらの形状または好みに応じて、そのまま食してもよく、あるいは水、湯、牛乳などに溶いて飲んでもよい。またティーバッグ状などの場合、成分を浸出させてから飲んでもよい。
実施例
以下、実施例に基づいて本発明を説明するが、この実施例は本発明を制限するものではない。実施例に示す単位(V/V)は(容量/容量)を、(W/W)は(重量/重量)を示す。
(実施例1)
松樹皮300gに精製水2.4Lを加え、ブレンダー(Waring Blender)で破砕した後、100℃で10分間加熱した。次いで、直ちに濾過し、濾過後の不溶物を精製水600mLで洗浄し、濾液と洗浄液を合わせて3Lの抽出液を得た。
この抽出液の一部(5mL)を減圧濃縮し、得られた抽出物粉末の重量を測定した(40mg)。次いで、Folin法にて抽出物粉末中のポリフェノール含有率を測定したところ、15.78重量%であった。したがって、この抽出液1mLの乾燥重量は8mgであり、抽出液中のポリフェノール含有量は1.26mgであることがわかった。
上記抽出液400mL(抽出物粉末重量3.2gおよびポリフェノール含有量0.5g)を25℃まで放冷し、ポリフェノール含有量の3倍量相当(1.5g)のキチン(ナカライテスク株式会社製)を充填したカラムに通液した。次いで、このカラムを精製水40mLで洗浄し、通過液と洗浄液とを合わせて、440mLのプロアントシアニジン含有液Iaを得た。
プロアントシアニジン含有液Iaの半量(220mL)を減圧濃縮し、得られた乾燥粉末の重量を測定した。乾燥粉末の重量は574mgであり、プロアントシアニジン含有液Ia全量の乾燥重量が1148mgであることがわかった。
次に、プロアントシアニジン含有液Ia中のOPCおよびカテキンの乾燥重量換算での含有率および含有量を測定するために以下の操作を行った。
上記のようにして得られたプロアントシアニジン含有液Iaの乾燥粉末を、OPCを含む成分と、カテキン類を含む成分と、ポリマーなどを含むその他の成分(以下、その他の成分という)とに、以下のようにして分離した。まず、水で膨潤させたセファデックスLH−20(ファルマシアバイオテク株式会社製)25mLを15×300mLのカラムに充填し、25mLのエタノールで洗浄した。100mgの上記乾燥粉末を2mLのエタノールに溶解し、これをカラムに通液して吸着させた後、100〜80%(V/V)エタノール−水混合溶媒でグラジエント溶出し、10mLずつ分取した。分取すると同時に、2〜4量体のOPCの標品(2量体:プロアントシアニジンB−2(Rf値:0.6)、3量体:プロアントシアニジンC−1(Rf値:0.4)、および4量体:シンナムタンニンA(Rf値:0.2))を指標として、各画分中のOPCをシリカゲル薄層クロマトグラフィー(TLC)により検出した。
TLCの展開条件および検出方法は下記の通りである。
TLC:シリカゲルプレート(Merck & CO.,Inc.製)
展開溶媒:ベンゼン/蟻酸エチル/蟻酸(2/7/1)
検出試薬:硫酸およびアニスアルデヒド硫酸
サンプル量:各10μL
TLCでの検出によりOPCが含まれることを確認した溶出画分を合わせて、OPC画分を得た。
次いで、OPCが検出されなくなった時点で、100mLの50%(V/V)水−アセトン混合溶媒を通液し、カラムに吸着した残りの成分を溶出させた。
次いで、OPC画分以外の画分について、カテキンを指標として、TLCを行い(Rf値:0.8)、カテキン類を含む画分とその他の成分の画分とに分離した。TLCの展開条件および検出方法は上記と同様に行った。
カテキン類を含む画分については、さらに、以下のようにカテキン類とカテキン類以外の成分とに分離した。まず、カテキン類を含む画分を凍結乾燥し、得られた粉末を3mLの水に溶解し、これを水で膨潤させた20mLのMCIゲル(三菱化学株式会社製)を15×300mLのカラムに充填したカラムに通液して吸着させた。このカラムを水で洗浄した後、10〜100%(V/V)エタノール−水混合溶媒でグラジエント溶出し、10mLずつ分取した。溶出終了後、カテキンを指標として、各画分中のカテキン類をTLCにより検出し、カテキン類画分とカテキン類以外の成分の画分とに分離した。
上記のようにして得たOPC画分、カテキン類画分、カテキン類以外の成分の画分、およびその他の成分の画分をそれぞれ凍結乾燥により粉末化し、乾燥重量を測定した。
得られたOPCは、上記プロアントシアニジン含有液Iaの乾燥粉末100mgに対して30.2mgであった。すなわち、プロアントシアニジン含有液Ia中のOPCの含有率は、乾燥重量換算で30.2重量%であり、プロアントシアニジン含有液Ia全量中にOPCを347mg含有することがわかった。
得られたカテキン類は10.1mgであった。すなわち、プロアントシアニジン含有液Ia中のカテキン類の含有率は、乾燥重量換算で10.1重量%であり、プロアントシアニジン含有液Ia全量中にカテキン類を116mg含有することがわかった。なお、OPC画分、カテキン類画分、カテキン類以外の成分の画分、およびその他の成分の画分の総和は、プロアントシアニジン含有液Iaの乾燥粉末100mgに対して99.2mgであり、ほぼ全量回収されていた。
表1に、プロアントシアニジン含有液Iaの乾燥重量、ならびにOPCおよびカテキン類の乾燥重量換算での含有率および含有量を示す。
(実施例2および3)
カラムに充填したキチンの量を、抽出液中のポリフェノール乾燥重量のそれぞれ5倍量相当の2.5gおよび7倍相当量の3.5gとしたこと以外は、実施例1と同様にして、それぞれ440mLのプロアントシアニジン含有液IbおよびIcを得た。プロアントシアニジン含有液IbおよびIcの各半量220mLを減圧濃縮し、得られた各乾燥粉末の重量を測定し、それぞれのプロアントシアニジン含有液IbおよびIc全量の乾燥重量に換算した。プロアントシアニジン含有液Ibの乾燥重量は1024mgであり、プロアントシアニジン含有液Icの乾燥重量は632mgであった。次にプロアントシアニジン含有液IbおよびIcをそれぞれ100mgを用いて、実施例1と同様にOPCおよびカテキン類の乾燥重量換算での含有率および含有量を求めた。結果を表1に併せて示す。なお、得られた画分の乾燥重量の総和は、プロアントシアニジン含有液IbおよびIcの乾燥粉末各100mgに対してそれぞれ98.9mgおよび99.5mgであり、いずれもほぼ全量回収されていた。
(実施例4)
実施例2で得られたプロアントシアニジン含有液Ibの半量220mLを用いて、さらに精製を行った。まず、プロアントシアニジン含有液Ibを5gの芳香族系合成樹脂(ダイアイオンHP−20:三菱化学株式会社製)を充填したカラムに通液し、プロアントシアニジンをカラムに吸着させた。このカラムを20mLの精製水で洗浄し、次いでカラムを20〜40%(V/V)のエタノール−水混合溶媒でグラジエント溶出し、40mLのプロアントシアニジン含有液IIbを得た。
このプロアントシアニジン含有液IIbを減圧濃縮して得られた乾燥粉末の重量は143mgであり、プロアントシアニジン含有液IIb全量の乾燥重量に換算すると286mgであることがわかった。実施例1と同様に、プロアントシアニジン含有液IIbの乾燥粉末100mg用いて、OPCおよびカテキン類の乾燥重量換算での含有率および含有量を求めた。結果を表1に併せて示す。
(比較例1および2)
カラムに充填したキチンの量を、抽出液中のポリフェノール乾燥重量のそれぞれ1倍量相当の0.5gおよび13倍相当量の6.5gとしたこと以外は、実施例1と同様にして、440mLのプロアントシアニジン含有液IdおよびIeを得た。プロアントシアニジン含有液IdおよびIeの各半量220mLを減圧濃縮し、得られた各乾燥粉末の重量を測定し、それぞれのプロアントシアニジン含有液IdおよびIe全量の乾燥重量に換算した。プロアントシアニジン含有液Idの乾燥重量は2288mgであり、プロアントシアニジン含有液Ieの乾燥重量は472mgであった。次にプロアントシアニジン含有液IdおよびIeの乾燥粉末をそれぞれ100mgを用いて、実施例1と同様にOPCおよびカテキン類の乾燥重量換算での含有率および含有量を測定した。結果を表1に併せて示す。なお、得られた画分の乾燥重量の総和は、プロアントシアニジン含有液IdおよびIeの乾燥粉末各100mgに対してそれぞれ99.3mgおよび98.8mgであり、いずれもほぼ全量回収されていた。

Figure 2003091237
表1からわかるように、抽出液中のポリフェノール含有量に対して3〜7倍量のキチンで処理して得られたプロアントシアニジン含有液Ia〜Icは、乾燥重量換算でOPCを30重量%以上含有している。これらのOPC含有量は、抽出物粉末中に含まれるポリフェノール(15.78重量%)の約2倍に相当する。特にプロアントシアニジン含有液IbおよびIcは、乾燥重量換算でOPCを40重量%以上も含有している。一方、抽出液中のポリフェノール乾燥重量に対して1あるいは13倍量のキチンで処理して得られるプロアントシアニジン含有液IdおよびIeでは、乾燥重量換算でOPCをそれぞれ17.2重量%および10.5重量%含有し、これらは3〜7倍量のキチンで処理した場合よりも低かった。これらのことから、植物体抽出物等を所定量のキチンで処理することによって、プロアントシアニジン、特にOPCを高い割合で含むプロアントシアニジン含有物が得られることを示す。
また、プロアントシアニジン含有液Ia〜Icが、乾燥重量換算でカテキン類を10.1〜14.8重量%含有しているのに対して、プロアントシアニジン含有液IdおよびIeに含まれるカテキン類はそれぞれ7.3重量%および3.8重量%であった。このことは、植物体抽出物等を所定量のキチンで処理することによって、OPCだけでなく、さらにカテキン類も高い割合で含むプロアントシアニジン含有物が得られることを示す。
さらに、プロアントシアニジン含有液IIbは、乾燥重量換算でOPCを80重量%以上含有していた。このように、OPCを極めて高い割合で含むプロアントシアニジン含有物が、抽出液を2種類のカラムを通す工程のみで容易に得られることがわかった。
(実施例5)
松樹皮100gに1Lの精製水を加え、破砕し、100℃で10分間加熱した。次いで、直ちに濾過し、濾過後の不溶物を精製水200mLで洗浄し、濾液と洗浄液とを合わせて1.2Lの抽出液を得た。この抽出液の一部(5mL)を減圧濃縮し、得られた抽出物粉末の重量を測定した(39mg)。さらに、抽出物粉末中のポリフェノール含有率をFolin法を用いて測定したところ、15.55重量%であった。抽出液全量中のポリフェノール含有量は1.46gであった。
次いで、上記抽出物粉末を残りの抽出液に加え、湯で全量1.2Lに調整した後、25℃まで放冷し、ポリフェノール含有量に対して乾燥重量で約7倍量のキチン10gを加え、3時間攪拌を行った。攪拌後、濾過し、1.2Lのプロアントシアニジン含有液Ifを得た。
次いで、このプロアントシアニジン含有液Ifを減圧濃縮し、3.36gのプロアントシアニジン含有液Ifの乾燥粉末を得た。100mgのプロアントシアニジン含有液Ifの乾燥粉末を用いて、実施例1と同様にOPCおよびカテキン類の含有率を測定したところ、乾燥重量換算でOPCを40重量%以上およびカテキン類を12.1重量%含有することがわかった。さらに、3.26gのプロアントシアニジン含有液Ifの乾燥粉末を2Lのメタノールに溶解し、実施例1と同様に50gのダイアイオンHP20を充填したカラムへ通液し、プロアントシアニジンを吸着させた。このカラムを精製水で洗浄した後、カラムを20〜40%(V/V)エタノール−水混合溶媒でグラジエント溶出し、400mLのプロアントシアニジン含有液IIfを得た。このプロアントシアニジン含有液IIfを減圧濃縮し、2.05gのプロアントシアニジン含有液IIfの乾燥粉末を得た。プロアントシアニジン含有液IIf中のOPCの含有率を実施例1と同様に測定したところ、乾燥重量換算でOPCを80重量%以上含有していることがわかった。
産業上の利用可能性
本発明の方法によれば、生理活性の高いOPCを高い割合で含有するプロアントシアニジン含有物を容易に得ることができる。このOPC含量が高いプロアントシアニジン含有物は、カテキン類も含有する。そのため、OPCがカテキン類の作用を活性化させるという相乗効果を有する。このプロアントシアニジン含有物を、単に合成樹脂系吸着剤で処理することによって、OPC含量が極めて高いプロアントシアニジン含有物を提供することができる。このOPC含量が極めて高いプロアントシアニジン含有物は、ほとんどカテキン類を含有しないため、より精製されたOPCとして利用し得る。これらのプロアントシアニジン含有物は、血管増強、高血圧、冷え性などの改善に効果があり、食品、化粧品、医薬品の製造原料として非常に有用である。Technical field
The present invention relates to a method for efficiently producing a proanthocyanidin-containing product containing a large amount of highly bioactive OPC.
Background art
Proanthocyanidin is a polymerized or condensed tannin present in various plants, and is a compound bonded by condensation or polymerization (hereinafter referred to as polycondensation) using flavan-3-ol or flavan-3,4-diol as a constituent unit. A group. These are given their names because they produce anthocyanidins such as cyanidin, delphinidin and pelargonidin by acid treatment.
Of the proanthocyanidins, proanthocyanidins having a low degree of polymerization are preferably used. A condensation polymer having a degree of polymerization of 2 to 30 (2 to 30 mer) is preferred, a condensation polymer having a degree of polymerization of 2 to 10 (2 to 10 mer) is more preferred, and a degeneracy having a degree of polymerization of 2 to 4 is preferred. A combination (2 to 4 mer) is more preferably used.
In the present specification, among the condensed polymers of proanthocyanidins, a condensed polymer having a polymerization degree of 2 to 4 having flavan-3-ol and / or flavan-3,4-diol as a structural unit is referred to as OPC (oligomeric). -Proanthocyanidins; called oligomeric proanthocyanidins).
Proanthocyanidins, a type of polyphenols, are powerful antioxidants produced by plants and are concentrated in plant leaves, bark, fruit peels or seed parts. Specifically, proanthocyanidins, particularly OPC, are contained in grape seeds, pine bark, peanut skin, ginkgo biloba, black acacia fruit, cowberry fruit, and the like. It is also known that cola nuts in West Africa, Latania roots in Peru, and Japanese green tea contain OPC. OPC is a substance that cannot be produced in the human body.
Furthermore, in addition to antioxidant action, OPC has the effect of suppressing bacterial growth in the oral cavity and reducing plaque (dentals); the effect of restoring the elasticity of blood vessels; and lipoproteins in the blood are damaged by active oxygen The effect of preventing ingestion and preventing damaged fat from aggregating on the inner wall of blood vessels and adhering cholesterol; the effect of regenerating vitamin E decomposed by active oxygen; the effect of vitamin E as an enhancer, etc. It is known to have
Furthermore, tannin, which is a polymer of flavan-3-ol and / or flavan-3,4-diol, and chitin, chitosan, and derivatives thereof have antibacterial activity against Staphylococcus aureus, Salmonella, Salmonella typhi, Vibrio cholerae, etc. And bactericidal action is remarkable. In particular, it has been reported that MRSA (methicillin-resistant staphylococci), which has become a topic because most antibiotics do not work, is also effective.
Proanthocyanidins are generally obtained by extraction from plant bodies. Examples of the solvent used for extraction include water; organic solvents such as methanol, ethanol, acetone, hexane, and ethyl acetate; or a mixture thereof (Japanese Patent Laid-Open No. 11-80148). However, simply by extraction with a solvent, the recovered amount of proanthocyanidins is low and the purity is low. Therefore, in order to use as a raw material for health foods, cosmetics, and pharmaceuticals, further steps such as concentration and purification for increasing the purity are necessary, and cost and time are required.
JP-A-5-279264 and JP-A-6-56789 describe methods for recovering polyphenols containing proanthocyanidins. In this method, polyphenols are adsorbed to chitin, and chitin adsorbed with polyphenols is used as a polyphenol product. However, the adsorbed polyphenols are polyphenols having a high degree of polymerization, and the content of OPC in the above-described 2- to 4-mer having high physiological activity is extremely low, so that the physiological activity such as antioxidant action is low.
JP-A-4-190774, JP-A-10-218769, JP-A-2001-131027, and Eberhard Scholz et al., Proanthocyanidins from Kramania trio Root, Planta Medica, 55 (1989), pages 379-384. A method for extracting OPC from a plant and / or a method for synthesizing OPC is described. However, in the extraction method, in order to obtain OPC, a step of adsorbing and eluting a plant extract to a synthetic resin-based adsorbent, collecting the obtained fraction, and a step of repeating this step are required. Is not efficient. The synthesis method also has problems such as a large number of steps and cost and time.
Disclosure of the invention
The present inventors diligently investigated a method for efficiently obtaining a proanthocyanidin-containing product having useful OPC content and having a useful physiological activity. As a result, proanthocyanidins are extracted from the plant body, the obtained extract is brought into contact with a predetermined amount of chitin, chitosan, or a derivative thereof, and non-adsorbed substances are recovered, thereby increasing the amount of highly active OPC. It has been found that the proanthocyanidin-containing product can be obtained efficiently. The present invention was completed by finding that a proanthocyanidin-containing material having a higher OPC content can be obtained by further treating this proanthocyanidin-containing material with a synthetic resin-based adsorbent.
The present invention provides a method for producing a proanthocyanidin-containing product, the method comprising (a) obtaining an extract or juice from a plant by extraction or pressing; and
(B) The extract or juice is brought into contact with chitin, chitosan, or a derivative thereof in an amount of 2 to 10 times by dry weight with respect to the polyphenol content in the extract or juice, Including the step of recovering.
In a preferred embodiment, the extraction is hot water extraction.
In a further preferred embodiment, the method further includes (c) a step of bringing the non-adsorbed product obtained in the step (b) into contact with a synthetic resin-based adsorbent.
The present invention also provides a proanthocyanidin-containing product containing oligomeric proanthocyanidins and catechins, which comprises 30% by weight or more of oligomeric proanthocyanidins in terms of dry weight in the proanthocyanidin-containing product, and Catechins are contained in a proportion of 5 to 15% by weight.
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
The plant used in the present invention is a plant containing proanthocyanidins, and there is no particular limitation on the type thereof. Bark of barley, wheat, soybeans, black soybeans, cacao, red beans, tochi Peanut husk; Peanut skin; Ginkgo biloba; Tea leaves and tea extract; Sorghum; Apple fruit; Kumazasa; Root; and the like. Among these, pine bark, grape seeds and pericarp, peanut thin skin, and the like are particularly preferably used.
Hereinafter, the manufacturing method of the proanthocyanidin containing material of this invention is demonstrated. First, proanthocyanidins are extracted from the plant body, or juice is obtained from the plant body. When performing extraction, from the viewpoint of extraction efficiency, the plant body is preferably crushed to an appropriate size to increase the surface area per volume. The crushing method is not particularly limited. For example, the crushed material processed with a cutter, a slicer, etc .; The pulverized material processed with the mixer, the juicer, the blender, the mass collider, etc. may be sufficient. The size of the crushed product or crushed product is 0.1 to 10 cm, preferably 0.1 to 5 cm. In order to increase the crushing efficiency, water or an organic solvent such as ethanol, methanol or ethyl acetate may be added during crushing.
As the extraction solvent, water or an organic solvent is used. Examples of the organic solvent include methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, acetone, hexane, cyclohexane, propylene glycol, hydrous ethanol, hydrous propylene glycol, ethyl methyl ketone, glycerin, and acetic acid. Examples include methyl, ethyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, edible fats and oils, 1,1,1,2-tetrafluoroethane, and 1,1,2-trichloroethene. Furthermore, a mixed solvent of water-organic solvent is also preferably used. These organic solvents may be used alone or in combination. Water is preferably used from the viewpoint of waste liquid treatment during production.
The amount of the extraction solvent added to the plant body can be set in consideration of the target proanthocyanidin concentration and extraction efficiency. For example, when water is used as the extraction solvent, the ratio of plant body: water is 1: 5 to 1:50 by weight, preferably 1:10 to 1:20. In the case of crushing by adding water and / or an organic solvent, the amount of extraction solvent to be added may be adjusted in consideration of the amount used for crushing.
A higher extraction temperature is preferable in order to increase extraction efficiency. When water is used, extraction is performed with hot water at 50 to 120 ° C, preferably 70 to 100 ° C. Hot water may be added to the plant body, and water may be added to the plant body and then heated. The extraction time is generally 10 minutes to 24 hours, but can be appropriately determined depending on the extraction temperature.
As an extraction method using an organic solvent, extraction by warm extraction or supercritical fluid extraction may be performed. As a warming extraction method using an organic solvent, a method of adding a warmed solvent to a plant body, or a method of heating a plant body by adding a solvent is used. For example, with respect to the pulverized plant body, using a 5-fold amount of a water-ethanol mixed solvent having a water: ethanol ratio of 1: 1 by weight as an extraction solvent, while refluxing at 70 to 75 ° C., The method of stirring for 3 hours is mentioned. In addition, when using an organic solvent, it is necessary to set the extraction temperature below the boiling point of the organic solvent.
The supercritical fluid extraction method is a method in which a target component is extracted using a supercritical fluid that is a fluid that exceeds a critical point (critical temperature, critical pressure) of a gas-liquid substance. As the supercritical fluid, carbon dioxide, ethylene, propane, nitrous oxide (laughing gas) or the like is used, and carbon dioxide is preferably used. The supercritical fluid extraction method includes an extraction step of extracting a target component with a supercritical fluid and a separation step of separating the target component and the supercritical fluid. In the separation step, any one of extraction separation by pressure change, extraction separation by temperature change, or extraction separation using an adsorbent / absorbent may be performed.
Moreover, you may perform supercritical fluid extraction by the entrainer addition method. In this method, 2 to 20 W of ethanol, propanol, n-hexane, acetone, toluene, other aliphatic lower alcohols, aliphatic hydrocarbons, aromatic hydrocarbons, or ketones are added to the supercritical fluid. / V%, and by performing supercritical fluid extraction with the obtained extraction fluid, the solubility of the target extract such as OPC and catechins (described later) in the extraction fluid is dramatically increased, or Increases the selectivity of the separation and enables efficient extraction of proanthocyanidins.
For the extraction, for example, any extraction device such as a batch type, a semi-continuous type, or a continuous type may be used.
When obtaining squeezed juice from a plant body, the plant body is squeezed directly, or squeezed after being appropriately cut or crushed. This method is preferably employed when a plant having a high water content is used. For example, in the case of grape fruits, squeezed juice containing proanthocyanidins is obtained by pressing. A plant crushed material containing solid matter derived from the plant body obtained by crushing the plant body (for example, the above-mentioned grape fruit crushed material) is also used in the same manner as squeezed juice. The crushed plant containing solid content is also included in the juice.
Next, at least one of the obtained extract or juice (hereinafter referred to as an extract or the like) and a predetermined amount of chitin, chitosan, or a derivative thereof (hereinafter, chitin, chitosan, or a derivative thereof is chitin. Contact).
Hereinafter, this process is referred to as a contact process.
The shape of the chitins used in the contacting step may be a powder or may be a molded body such as a fiber, fibril, film, porous body, or microbead. Or you may couple | bond with support | carriers, such as resin.
The predetermined amount of chitin refers to chitins having a dry weight of 2 to 10 times, preferably 3 to 8 times, and more preferably 4 to 7 times the polyphenol content in the extract or the like. . In addition, when chitin is couple | bonded with support | carriers, such as resin, the weight remove | excluding the weight of a support | carrier part is made into the weight of chitins.
The polyphenol content in the extract, for example, is obtained by separating a part of the extract (about 1 to 5 mL) and pulverizing it by hot air drying, freeze drying, vacuum drying, vacuum concentration, etc. After measuring the weight of the extract powder (hereinafter referred to as extract powder), it can be calculated by measuring the polyphenol content (%) in the extract powder by the Folin method or the like.
The measurement of the polyphenol content rate (%) in the extract powder by the Folin method is performed as follows, for example. First, catechin is dissolved in purified water as a polyphenol standard substance, and a standard sample is prepared stepwise within a range of 0.005 to 0.05% by weight / volume. Next, the extract powder is appropriately dissolved in purified water within a range of 0.01 to 0.05% by weight / volume to prepare a specimen. Standard sample and sample are mixed in equal amounts with Folin reagent (aqueous solution containing 2.5 g of sodium tungstate, 0.5 g of phosphomolybdic acid and 1.25 mL of 85 wt% phosphoric acid solution in 100 mL), and stirred for 3 minutes After that, add 3 mL of 10 wt / vol% sodium carbonate solution and let stand for 1 hour. After standing, the supernatant is collected by centrifugation, and the absorbance of the supernatant at 730 nm is measured. A calibration curve is created from the absorbance of the standard sample at each concentration, and the concentration of polyphenol contained in the sample is obtained using this calibration curve. The polyphenol content (%) in the extract powder can be calculated from the obtained polyphenol concentration and specimen concentration.
In the contact step, the contact may be performed by any method as long as the extract or the like and the chitin are in contact with each other. For example, a simple method is to fill a column with a chitin resin in which chitin is bound to a synthetic resin carrier and allow the extract to pass through, adding chitins to the extract, etc., and removing the chitins after a certain period of time. And batch method. In addition, when an organic solvent is contained in an extract etc., it is necessary to dilute an extract etc. to such an extent that chitin does not melt | dissolve in an organic solvent, or to remove an organic solvent.
In the column method, it is preferable to remove insoluble matters contained in the extract or the like in advance in consideration of clogging of the column. Examples of the method for removing insoluble materials include methods usually used by those skilled in the art, such as filtration and centrifugation. From the viewpoint of processing time, filtration is preferably used. Filtration can preferably be performed at 50-100 ° C. The higher the temperature, the more proanthocyanidins can be recovered, preferably 50 ° C or higher, more preferably 70 ° C or higher. A larger amount of proanthocyanidins can be recovered by washing the insoluble matter removed by filtration with hot water or a heated solvent of 70 ° C. or higher.
After removing the insoluble matter, it is preferable to cool the obtained extract or the like in consideration of the adsorption efficiency to chitins. Preferably, the extract or the like is cooled to 4 to 30 ° C. Examples of the cooling include natural cooling by cooling; forced cooling using water, ice, or a cooling device such as a freezer or a refrigerator.
After cooling, the extract is passed through a column filled with chitins. For example, when a proanthocyanidin-containing product is obtained from pine bark using crab-derived chitin, after measuring the polyphenol content in the hot water extract of pine bark, the dry weight is 2 with respect to the polyphenol content. The pine bark extract is passed through a column packed with 10 to 10 times, more preferably 3 to 8 times the amount of chitin. Thereafter, the column is washed with about 2 to 3 times the column volume of water, and the resulting column passage liquid and washing liquid are collected, whereby a proanthocyanidin-containing material can be obtained. Here, the proanthocyanidin-containing product includes concentrates, dilutions, powders, and the like obtained by methods usually used by those skilled in the art.
The treatment with chitins in the batch method is, for example, adding chitins in a dry weight of 2 to 10 times, preferably 3 to 8 times the dry weight of polyphenol in the hot water extract of pine bark. It is preferable to carry out for 1 to 3 hours with stirring.
After the treatment, chitins are removed by filtration or centrifugation, whereby a proanthocyanidin-containing product can be obtained.
By passing through the contact step, a proanthocyanidin-containing product having a high OPC content (hereinafter referred to as proanthocyanidin-containing product I) can be easily obtained. The proanthocyanidin-containing product I contains OPC (oligomeric proanthocyanidins) in an amount of 30 to 90% by weight, more preferably 40% to 70% by weight in terms of dry weight.
The obtained proanthocyanidin-containing product I can further contain catechins in terms of dry weight, preferably 5 to 15% by weight, more preferably 10 to 15% by weight. Catechins alone have poor water solubility and low physiological activity, but OPC, when coexisting with catechins, increases the water solubility of catechins and at the same time activates the action of catechins. Have Therefore, the proanthocyanidin-containing product I containing OPC and catechins is particularly useful.
Catechin is a general term for polyhydroxyflavan-3-ol. Examples of catechins include (+)-catechin, (−)-epicatechin, (+)-gallocatechin, (−)-epigallocatechin, epigallocatechin gallate, epicatechin gallate and the like. Further, it includes natural product-derived afzelekin, and (+)-catechin or 3-galloyl derivatives of gallocatechin.
The effects of catechins include carcinogenesis-inhibiting action, arteriosclerosis-preventing action, fat metabolism abnormality-inhibiting action, blood pressure rise-inhibiting action, platelet aggregation-inhibiting action, antiallergic action, antiviral action, antibacterial action, caries prevention action, bad breath Effects, intestinal microbiota normalizing effect, active oxygen and free radical scavenging effect, antioxidant effect, anti-diabetic effect that suppresses the increase of blood sugar, and the like.
The obtained proanthocyanidin-containing product I is further treated with a synthetic resin adsorbent to remove impurities such as saccharides and organic acids, and further purified. That is, the proanthocyanidin-containing product I is brought into contact with the synthetic resin-based adsorbent, and after the proanthocyanidin is adsorbed on the synthetic resin-based adsorbent and then eluted with a predetermined solvent, the proanthocyanidin-containing material having an extremely high OPC content is obtained. (Hereinafter referred to as proanthocyanidin-containing product II).
Examples of the synthetic resin-based adsorbent used for the purification include organic resins, ion exchange resins, silica gel, reverse phase silica gel, and the like.
Examples of organic resins that can be used include aromatic resins such as styrene-divinylbenzene resins, acrylic acid-based methacrylic resins, and acrylonitrile aliphatic resins. An aromatic resin is preferable. Examples of the aromatic resin include an aromatic resin having a hydrophobic substituent, an unsubstituted aromatic resin, and an aromatic resin obtained by subjecting the unsubstituted group to a special treatment. An aromatic resin subjected to special treatment is more preferable. These resins are preferably porous. Such synthetic resins are commercially available, and include, for example, the following: As acrylic acid-based methacrylic resins, Diaion (registered trademark) HP1MG, HP2MG (manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation); Examples of the resin include SP-900 (manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation), Amberlite (registered trademark) XAD-2, XAD-4, XAD-16, XAD-2000 (above, manufactured by Organo Corporation); Examples of the aromatic resin include Diaion (registered trademark) SP-205, SP-206, SP-207, HP-2MG, EX-0021 (manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation), Amberlite (registered trademark) XAD. -7, XAD-8 (above, manufactured by Organo Co., Ltd.); as an unsubstituted aromatic resin, Diaion (registered trademark) HP-10, HP- 0, HP-21, HP-30, HP-40, HP-50 (manufactured by Mitsubishi Chemical Co., Ltd.); SP-825, SP- 800, SP-850, SP-875 (above, manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation); Derivatives of crosslinked dextran include Sephadex (registered trademark) LH20, LH60 (above, manufactured by Pharmacia Biotech Co., Ltd.) and the like. Of these, Diaion HP-20 or Sephadex LH20 is preferable.
As the ion exchange resin, any of a cation exchange resin and an anion exchange resin can be used. Examples of commercially available cation exchange resins include Amberlite (registered trademark) CG-4000, CG-5000, CG-6000, CG-8000, and IR-116, which are resins having a sulfonate group as a functional group. , IR-118, IR-120B, IR-122, IR-124, XT-1007, XT-1009, XT-1002 (manufactured by Organo Corporation), and the like. Examples of the weakly basic anion exchange resin include OPTIPORE-XUS40285.00 and OPTIPORE-XUS40390.00 (above, manufactured by Dow Chemical Co., Ltd.), which are resins having a quaternary amine as a functional group. The elution solvent when using the ion exchange resin is preferably water, the column temperature is preferably 50 to 120 ° C., and the inside of the column is preferably in a normal pressure or pressurized state.
What is necessary is just to set the quantity of a synthetic resin type adsorbent suitably according to the kind of solvent, the kind of synthetic resin type adsorbent, etc. For example, it is preferable to use a synthetic resin-based adsorbent in an amount of 0.01 to 5 times the dry weight of the proanthocyanidin-containing product I.
In order to purify the proanthocyanidin-containing product I using a synthetic resin-based adsorbent, for example, first, a synthetic resin-based adsorbent is packed into a column, and the proanthocyanidin-containing material I is passed through the column, and then the synthetic resin is used. 5 to 10 times the weight of water is passed through the weight of the system adsorbent. Thereby, the saccharide | sugar and organic acid which are impurities are removed. Thereafter, the proanthocyanidins are eluted with an appropriate solvent. Examples of the solvent include water, methanol, ethanol, ethyl acetate, chloroform, and a mixed solvent thereof. Preferably, a mixed solvent of water and ethanol is used. The mixing ratio of water and ethanol varies depending on the synthetic resin adsorbent used. For example, in the case of Diaion HP-20, the ratio of water: ethanol is 1: 1 to 4: 1 in volume ratio. In this way, proanthocyanidin-containing product II having an extremely high OPC content is obtained.
The proanthocyanidin-containing product II obtained through the above purification step can contain OPC in an amount of 80% by weight or more, preferably 95% by weight or more in terms of dry weight. This proanthocyanidin-containing product II contains an extremely large amount of OPC, but hardly contains catechins.
Proanthocyanidin-containing product I containing 5 to 15% by weight of catechins can also be obtained using proanthocyanidin-containing product II obtained through the purification step. For example, it can be obtained by adding highly pure catechins to the proanthocyanidin-containing product II.
The proanthocyanidin-containing product I or II produced by the above method can be concentrated to obtain a food material. For the concentration, various methods such as membrane concentration, heat concentration, vacuum (reduced pressure) concentration, freeze concentration and the like are used.
Further, if necessary, these proanthocyanidin-containing materials I or II are sterilized and stored. Sterilization is performed by methods used by those skilled in the art, such as air sterilization, high-pressure sterilization, and heat sterilization.
These proanthocyanidin-containing products I or II may be concentrated, dried, or powdered after sterilization. Drying is performed by a method commonly used by those skilled in the art. Among these, freeze drying, vacuum drying, and spray drying are preferably used.
The proanthocyanidin-containing product I or II thus obtained can be used as a raw material for foods, cosmetics, and pharmaceuticals.
The obtained proanthocyanidin-containing product I or II can also be used as a drink or gelled food or drink. Furthermore, the proanthocyanidin-containing product is not only used for food and drink as it is, but also mixed with excipients, extenders, binders, thickeners, emulsifiers, fragrances, food additives, seasonings, etc. It can also be formed in the form of granules, tablets and the like. For example, it is mixed with royal jelly, vitamins, protein, calcium, chitosan, lecithin, caffeine, etc., and the taste is adjusted with a sugar solution and a seasoning. Furthermore, these are made into capsules such as hard capsules and soft capsules, pills, or tea bags. These may be eaten as they are, depending on their shape or preference, or may be taken by dissolving in water, hot water, milk or the like. Moreover, in the case of a tea bag shape etc., you may drink after leaching a component.
Example
EXAMPLES Hereinafter, although this invention is demonstrated based on an Example, this Example does not restrict | limit this invention. In the examples, the unit (V / V) indicates (capacity / capacity), and (W / W) indicates (weight / weight).
(Example 1)
Purified water 2.4 L was added to 300 g of pine bark, crushed with a blender (Waring Blender), and then heated at 100 ° C. for 10 minutes. Subsequently, the mixture was immediately filtered, and the insoluble matter after filtration was washed with 600 mL of purified water, and the filtrate and the washing solution were combined to obtain 3 L of an extract.
A part (5 mL) of this extract was concentrated under reduced pressure, and the weight of the resulting extract powder was measured (40 mg). Subsequently, when the polyphenol content rate in extract powder was measured by the Folin method, it was 15.78 weight%. Therefore, the dry weight of 1 mL of this extract was 8 mg, and the polyphenol content in the extract was found to be 1.26 mg.
400 mL of the above extract (extract powder weight 3.2 g and polyphenol content 0.5 g) was allowed to cool to 25 ° C. and chitin (1.5 g) equivalent to three times the polyphenol content (manufactured by Nacalai Tesque) The solution was passed through a column packed with. Next, this column was washed with 40 mL of purified water, and the passing solution and the washing solution were combined to obtain 440 mL of a proanthocyanidin-containing solution Ia.
Half of the proanthocyanidin-containing liquid Ia (220 mL) was concentrated under reduced pressure, and the weight of the resulting dry powder was measured. The weight of the dry powder was 574 mg, and the dry weight of the total amount of the proanthocyanidin-containing liquid Ia was 1148 mg.
Next, the following operations were performed to measure the content and content of OPC and catechin in terms of dry weight in the proanthocyanidin-containing liquid Ia.
The dry powder of the proanthocyanidin-containing liquid Ia obtained as described above is divided into a component containing OPC, a component containing catechins, and other components (hereinafter referred to as other components) containing a polymer and the like. It separated like. First, 25 mL of Sephadex LH-20 (manufactured by Pharmacia Biotech Co., Ltd.) swollen with water was packed in a 15 × 300 mL column and washed with 25 mL of ethanol. 100 mg of the above dry powder was dissolved in 2 mL of ethanol, passed through a column and adsorbed, and then eluted with a gradient of 100 to 80% (V / V) ethanol-water to separate 10 mL. . Simultaneously with the fractionation, a 2- to 4-mer OPC preparation (dimer: proanthocyanidin B-2 (Rf value: 0.6), trimer: proanthocyanidin C-1 (Rf value: 0.4) ), And tetramer: cinnamtannin A 2 Using (Rf value: 0.2)) as an index, OPC in each fraction was detected by silica gel thin layer chromatography (TLC).
TLC development conditions and detection methods are as follows.
TLC: Silica gel plate (Merck & CO., Inc.)
Developing solvent: benzene / ethyl formate / formic acid (2/7/1)
Detection reagent: sulfuric acid and anisaldehyde sulfuric acid
Sample volume: 10 μL each
The elution fractions confirmed to contain OPC by detection by TLC were combined to obtain an OPC fraction.
Next, when no OPC was detected, 100 mL of a 50% (V / V) water-acetone mixed solvent was passed through to elute the remaining components adsorbed on the column.
Subsequently, TLC was performed on the fractions other than the OPC fraction using catechin as an index (Rf value: 0.8), and separated into a fraction containing catechins and a fraction of other components. TLC development conditions and detection methods were the same as described above.
The fraction containing catechins was further separated into catechins and components other than catechins as follows. First, a fraction containing catechins was freeze-dried, and the obtained powder was dissolved in 3 mL of water, and 20 mL of MCI gel (Mitsubishi Chemical Corporation) swollen with water was placed in a 15 × 300 mL column. The solution was adsorbed by passing through a packed column. This column was washed with water, and then eluted with a gradient of 10 to 100% (V / V) ethanol-water mixed solvent, and 10 mL each was collected. After completion of elution, catechins in each fraction were detected by TLC using catechin as an index, and separated into a catechin fraction and a fraction of components other than catechins.
The OPC fraction, the catechins fraction, the fractions of components other than catechins, and the fractions of other components obtained as described above were pulverized by freeze-drying, and the dry weight was measured.
The obtained OPC was 30.2 mg with respect to 100 mg of the dry powder of the proanthocyanidin-containing liquid Ia. That is, the content of OPC in the proanthocyanidin-containing liquid Ia was 30.2% by weight in terms of dry weight, and it was found that 347 mg of OPC was contained in the total amount of the proanthocyanidin-containing liquid Ia.
The obtained catechins were 10.1 mg. That is, it was found that the content of catechins in the proanthocyanidin-containing liquid Ia was 10.1% by weight in terms of dry weight, and 116 mg of catechins were contained in the total amount of the proanthocyanidin-containing liquid Ia. The total of the OPC fraction, the catechins fraction, the fractions of components other than the catechins, and the fractions of other components was 99.2 mg with respect to 100 mg of the dry powder of the proanthocyanidin-containing liquid Ia, The entire amount was recovered.
Table 1 shows the dry weight of the proanthocyanidin-containing liquid Ia, and the content and content of OPC and catechins in terms of dry weight.
(Examples 2 and 3)
In the same manner as in Example 1, except that the amount of chitin packed in the column was 2.5 g corresponding to 5 times the dry weight of polyphenol in the extract and 3.5 g corresponding to 7 times the amount respectively. 440 mL of proanthocyanidin-containing liquids Ib and Ic were obtained. 220 mL of each half amount of the proanthocyanidin-containing liquids Ib and Ic was concentrated under reduced pressure, the weight of each of the obtained dry powders was measured, and converted to the dry weight of the total amount of each proanthocyanidin-containing liquid Ib and Ic. The dry weight of the proanthocyanidin-containing liquid Ib was 1024 mg, and the dry weight of the proanthocyanidin-containing liquid Ic was 632 mg. Next, using 100 mg of each of the proanthocyanidin-containing liquids Ib and Ic, the content and content of OPC and catechins in terms of dry weight were determined in the same manner as in Example 1. The results are also shown in Table 1. The total dry weight of the obtained fractions was 98.9 mg and 99.5 mg, respectively, for each 100 mg of dry powders of the proanthocyanidin-containing liquids Ib and Ic, and almost all of them were recovered.
(Example 4)
Further purification was carried out using 220 mL of half of the proanthocyanidin-containing liquid Ib obtained in Example 2. First, the proanthocyanidin-containing liquid Ib was passed through a column packed with 5 g of an aromatic synthetic resin (Diaion HP-20: manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation), and the proanthocyanidins were adsorbed on the column. This column was washed with 20 mL of purified water, and then the column was eluted with a gradient of 20 to 40% (V / V) ethanol-water to obtain 40 mL of proanthocyanidin-containing liquid IIb.
The weight of the dry powder obtained by concentrating the proanthocyanidin-containing liquid IIb under reduced pressure was 143 mg, which was 286 mg in terms of the dry weight of the total amount of the proanthocyanidin-containing liquid IIb. In the same manner as in Example 1, 100 mg of the dry powder of the proanthocyanidin-containing liquid IIb was used to determine the content and content of OPC and catechins in terms of dry weight. The results are also shown in Table 1.
(Comparative Examples 1 and 2)
440 mL in the same manner as in Example 1, except that the amount of chitin packed in the column was 0.5 g corresponding to 1 times the amount of dry weight of polyphenol in the extract and 6.5 g corresponding to 13 times the amount of polyphenol. Proanthocyanidin-containing liquids Id and Ie were obtained. 220 mL of each half amount of the proanthocyanidin-containing liquids Id and Ie was concentrated under reduced pressure, the weight of each of the obtained dry powders was measured, and converted to the dry weight of the total amount of each proanthocyanidin-containing liquid Id and Ie. The dry weight of the proanthocyanidin-containing liquid Id was 2288 mg, and the dry weight of the proanthocyanidin-containing liquid Ie was 472 mg. Next, using 100 mg of each dry powder of the proanthocyanidin-containing liquids Id and Ie, the content and content of OPC and catechins in terms of dry weight were measured in the same manner as in Example 1. The results are also shown in Table 1. The total dry weight of the obtained fractions was 99.3 mg and 98.8 mg, respectively, for each 100 mg of dry powder of the proanthocyanidin-containing liquids Id and Ie, and almost all of them were recovered.
Figure 2003091237
As can be seen from Table 1, the proanthocyanidin-containing liquids Ia to Ic obtained by treating with 3-7 times the amount of chitin with respect to the polyphenol content in the extract are 30% by weight or more of OPC in terms of dry weight. Contains. These OPC contents correspond to about twice the polyphenol (15.78% by weight) contained in the extract powder. In particular, the proanthocyanidin-containing liquids Ib and Ic contain 40% by weight or more of OPC in terms of dry weight. On the other hand, in the proanthocyanidin-containing liquids Id and Ie obtained by treating with 1 or 13 times the amount of chitin relative to the dry weight of polyphenol in the extract, OPC is 17.2% by weight and 10.5% in terms of dry weight, respectively. Contained by weight, these were lower than when treated with 3-7 times the amount of chitin. From these facts, it is shown that a proanthocyanidin-containing product containing a high proportion of proanthocyanidins, particularly OPC, can be obtained by treating plant extracts and the like with a predetermined amount of chitin.
The proanthocyanidin-containing liquids Ia to Ic contain 10.1-14.8% by weight of catechins in terms of dry weight, whereas the catechins contained in the proanthocyanidin-containing liquids Id and Ie are respectively It was 7.3 wt% and 3.8 wt%. This indicates that a proanthocyanidin-containing product containing not only OPC but also catechins in a high ratio can be obtained by treating a plant extract or the like with a predetermined amount of chitin.
Further, the proanthocyanidin-containing liquid IIb contained 80% by weight or more of OPC in terms of dry weight. Thus, it was found that the proanthocyanidin-containing product containing OPC at a very high ratio can be easily obtained only by the process of passing the extract through two types of columns.
(Example 5)
1 L of purified water was added to 100 g of pine bark, crushed, and heated at 100 ° C. for 10 minutes. Subsequently, the mixture was immediately filtered, and the insoluble matter after filtration was washed with 200 mL of purified water, and the filtrate and the washing solution were combined to obtain 1.2 L of an extract. A part (5 mL) of this extract was concentrated under reduced pressure, and the weight of the resulting extract powder was measured (39 mg). Furthermore, when the polyphenol content rate in extract powder was measured using the Folin method, it was 15.55 weight%. The polyphenol content in the total amount of the extract was 1.46 g.
Next, the extract powder is added to the remaining extract, adjusted to a total volume of 1.2 L with hot water, allowed to cool to 25 ° C., and 10 g of chitin, about 7 times the dry weight of the polyphenol content, is added. Stirring was performed for 3 hours. After stirring, the mixture was filtered to obtain 1.2 L of proanthocyanidin-containing liquid If.
Subsequently, this proanthocyanidin-containing liquid If was concentrated under reduced pressure to obtain 3.36 g of a dry powder of the proanthocyanidin-containing liquid If. Using 100 mg of the dried powder of the proanthocyanidin-containing liquid If, the OPC and catechin contents were measured in the same manner as in Example 1. As a result, the OPC was 40 wt% or more and the catechins were 12.1 wt. % Content was found. Further, 3.26 g of the dried powder of proanthocyanidin-containing liquid If was dissolved in 2 L of methanol and passed through a column packed with 50 g of Diaion HP20 in the same manner as in Example 1 to adsorb the proanthocyanidins. After this column was washed with purified water, the column was gradient eluted with a 20-40% (V / V) ethanol-water mixed solvent to obtain 400 mL of a proanthocyanidin-containing liquid IIf. The proanthocyanidin-containing liquid IIf was concentrated under reduced pressure to obtain 2.05 g of a dry powder of the proanthocyanidin-containing liquid IIf. When the content of OPC in the proanthocyanidin-containing liquid IIf was measured in the same manner as in Example 1, it was found that OPC was contained at 80% by weight or more in terms of dry weight.
Industrial applicability
According to the method of the present invention, a proanthocyanidin-containing product containing a high proportion of highly bioactive OPC can be easily obtained. This proanthocyanidin-containing product having a high OPC content also contains catechins. Therefore, OPC has a synergistic effect of activating the action of catechins. By simply treating this proanthocyanidin-containing material with a synthetic resin-based adsorbent, it is possible to provide a proanthocyanidin-containing material having an extremely high OPC content. This proanthocyanidin-containing product having a very high OPC content contains almost no catechins and can be used as a more purified OPC. These proanthocyanidin-containing materials are effective in improving blood vessel enhancement, hypertension, coldness, etc., and are very useful as raw materials for producing foods, cosmetics, and pharmaceuticals.

Claims (4)

(a)植物体から抽出または圧搾により抽出物または搾汁を得る工程;および(b)該抽出物または搾汁を、該抽出物または搾汁中のポリフェノール含有量に対して乾燥重量で2〜10倍量のキチン、キトサン、またはそれらの誘導体と接触させ、非吸着物を回収する工程を包含する、プロアントシアニジン含有物の製造方法。(A) a step of obtaining an extract or juice by extraction or pressing from a plant body; A method for producing a proanthocyanidin-containing product, comprising a step of contacting a 10-fold amount of chitin, chitosan, or a derivative thereof and recovering a non-adsorbed product. 前記抽出が、熱水抽出である、請求項1に記載の方法。The method of claim 1, wherein the extraction is hot water extraction. さらに、(c)前記工程(b)で得られた非吸着物と合成樹脂系吸着剤とを接触させる工程を包含する、請求項1または2に記載の方法。Furthermore, (c) The method of Claim 1 or 2 including the process of making the non-adsorbent obtained by the said process (b) and a synthetic resin type adsorbent contact. オリゴメリック・プロアントシアニジンおよびカテキン類を含有するプロアントシアニジン含有物であって、該プロアントシアニジン含有物中に乾燥重量換算でオリゴメリック・プロアントシアニジンを30重量%以上、そしてカテキン類を5〜15重量%の割合で含有する、プロアントシアニジン含有物。A proanthocyanidin-containing product containing oligomeric proanthocyanidins and catechins, wherein 30% by weight or more of oligomeric proanthocyanidins and 5-15% by weight of catechins in terms of dry weight in the proanthocyanidin-containing materials Containing proanthocyanidins,
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