JP2004535566A - Maldi質量分析用脱塩プレート - Google Patents
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Abstract
Description
【0001】
(発明の背景)
マトリックス支援レーザー脱離イオン化(MALDI)によるイオン化質量分析(MS)は、大きな分子(例えば、タンパク質、ペプチド、オリゴヌクレオチド、DNA、RNA等の生体高分子)の分析に有用なツールである。この分析の感度と自動分析の速度が、MALDIプレート上のサンプル調製とサンプル純度に大きく依存することは、広く知られている。MALDI質量分析用のサンプル調製に関する多くの問題点が、ブルカー社(Bruker)の英国特許出願公開第GB2332273A号にまとめられている。特に、塩は、付加体を形成するため、マススペクトルの結果に大きな影響を及ぼすことがある。
【0002】
塩を除去する従来の方法の1つは、逆相吸着剤(C18-シリカやジビニルベンゼンを主体とするポリマーなど)を利用するものである。例えば、かかる吸着剤が充填されている充填相へ分析対象の混合物を通すと、分析対象は充填材料に吸着される一方、塩は充填材料に保持されない。次いで、適当な溶媒によって、吸着された分析対象を吸着剤から溶離させる。このような応用例として、数種の市販品が出回っている。
【0003】
しかし、これらの製品はすべて、サンプルをMALDIプレートへ添加する前に、いくつかの精密な工程が必要である。こういった付加的な工程によって、サンプルの大きなロス(損失)やサンプルの潜在的なコンタミネーションが生じてしまう。さらに、必要な溶離液の量が比較的多いため、通常、サンプル調製工程にてサンプルを希釈する。MALDIのレーザーは、添加したサンプルの全面積の数パーセントのみに照射されるため、添加した希釈サンプルのほんの一部分だけが脱離・検出される。これが、感度悪化の原因である。
【0004】
従来のMALDIプレート上へのサンプル添加に関する他の問題は、プレート上でのサンプルの乾燥に関する。サンプルの乾燥に際して、ターゲットである分析対象は場所により様々に濃縮される。その結果、分析に適した分析対象をターゲット中においてレーザーで探さなければならず、各サンプルの分析時間が長くなってしまう。例えば、清浄な金属製サンプル支持プレートに添加したサンプルとマトリックスの溶液の液滴が金属表面上で乾燥すると、マトリックスの小結晶からなるサンプルスポットが、既に湿っている部分に広がる。一般に、湿った部分では均一にコーティングされない。水溶液中では、マトリックスの小結晶の大部分が、金属プレート上の濡れた部分の縁から徐々に生成し始め、濡れた部分の中心へ向かって結晶成長する。そのため、分析対象の分子が不均一に分散し、サンプルスポットの中心に結晶が存在しないか、サンプルスポットの中心が(高濃度のアルカリ塩が他にも存在するため)MALDIのイオン化に実際に用いることのできない細かな小結晶によってコーティングされてしまうことが多い。こういった結晶には、通常、高濃度の塩が存在するため、MALDIイオン化に十分なものではない。さらに、MALDIのイオン化収率と質量分析能が、サンプルスポット中の位置によって変動してしまう。サンプルスポット上で、分析対象のイオン収率と質量分析能とが良好な好ましい位置を見出すことは、しばしば大変な作業である。このため、MALDI質量分析におけるサンプルのハイスループット(高速大量処理)化の発展が困難となっている。
【0005】
英国特許出願GB 2332273A には、MALDIプレート上の表面特性(親水性または疎水性)修飾を利用した疎水性パッチ(patches)(「アンカー」)を有する、テフロンのような疎水性皮膜でコーティングされたMALDI プレートが記載されている。サンプルの液滴がこのアンカー上に滴下されると、溶媒の蒸発につれてこの液滴は小さくなり、アンカーのある位置において中心方向に向かう。これによって、分析対象が小さなスポットに濃縮され、質量分析の感度が、サンプル液滴を乾燥させる上述した従来のサンプル調製法と比較して、10〜100倍に向上した。このサンプルスポットは、迅速・自動化されたMALDI−MSを容易にするよう、適切なグリッドにて配置することができる。このようにコーティングされたプレートは、ブルカー・ダルトニクス社よりアンカーチップ(AnchorChip(商標))として市販されている。しかし、このプレートは、分析対象の分析を妨害する塩を除去するための洗浄工程の間、分析対象分子を保持することができない。
【0006】
米国特許第6,020,208号および第6,124,137号には、MALDI−MSプレートのデザインが記載されており、この場合、ターゲットスポットのサンプル提示面が、分析対象を特異的または非特異的にサンプル提示面上に捕捉する親和性分子で修飾されている。これによれば、MALDI−MS分析の効率と感度が従来法に比べ改善されたと報告されている。分析に用いなかった分子をさらに処理して、サンプル提示面上で分析することもできる。
【0007】
公開されたPCT出願第WO98/59360号、第WO98/59361号、第WO98/59362号、およびこれらに対応する欧州特許出願第EP00990256号、第EP00990257号、および第EP00990258号には、選択性のある様々な条件によって、選択された分子を様々な吸着剤上に保持するためのプレート、および未透過(retentate)クロマトグラフィー法が記載されている。選択された分子を分析するための、MALDI−MSにおける最高の親和条件が選択されている。
【0008】
米国特許第5,480,526号には、キャピラリー電気泳動法によって、MALDI−MS分析をするサンプルを分析前に脱塩することが記載されている。
米国特許第6,104,028号には、マトリックスの改良により、MALDI−MSの感度と分解能とを向上させることが記載されている。
【0009】
米国特許第5,260,571号、第5,281,538号、第5,308,978号には、サンプルを添加する前に、MALDI−MSサンプルプレートのターゲットスポットへマトリックスを層状に配置することにより、検出感度と分解能を向上させることが記載されている。これにより、乾燥後、サンプルとマトリックス材料との密な混合物ができる。同様に、米国特許第5,595,636号には、サンプルを添加する前に、ラッカー状の薄い平滑性のある膜を使用して、分析対象分子を脱離しやすくすることが記載されている。
【0010】
米国特許第5,770,860号、第5,770,272号、および第5,705,813号には、質量分析に関して使用する装置を改良したことが記載されている。特に、米国特許第5,770,272号には、噴霧スプレーによって、MALDIマトリックス材料の均一な連続膜をMALDIターゲット状に形成することが記載されている。米国特許第5,705,813号には、MALDI−MSによる質量分析前のサンプル操作について、統一された液体の取扱法が記載されている。米国特許第5,770,860号には、多数のピペット装置によってマイクロタイタープレートから同時に多数のサンプルを移動させ、質量分析機へサンプル支持台を挿入する方法が開示されている。この方法によると、挿入を繰り返すことにより、サンプルプレート上に高密度のサンプルが生成される。
【0011】
しかし、適当な溶媒(例えば、水)を使用して塩を除去することによって、未修飾の表面上でも分析対象とマトリックスとを保持しつつ、MALDIプレート上でサンプルを直接脱塩でき、それによって、MALDI−MSの検出感度と分解能とを向上させつつサンプル処理工程の数を減らすことができるような、MALDI−MSのサンプル調製についての技術的進歩が望まれている。サンプルスポットを小さくすることによって、サンプルを特定の部分に濃縮し、サンプル位置を探す手間がなくすことができる。
(発明の概要)
本発明は、MALDI−MS用の脱塩サンプル支持プレートに関する。本発明により、本発明のサンプル支持プレートの簡便な作製法と使用法が提供される。また、本発明により、サンプルの調製法および分析法が提供される。さらに、本発明のサンプルの調製法と分析法によれば、適切な溶媒(例えば、水)を用いて塩を洗浄することによって、未修飾の表面上に分析対象とマトリックスとを保持しつつ、MALDIプレート上で直接脱塩することができ、それによって、MALDI−MSの検出感度と分解能とを向上させつつ、サンプル処理の工程数を減らすことができる。サンプルスポットを小さくすることにより、サンプルを特定の部分へ集中させることができ、それによって、サンプル位置を探す必要がなくなる。
【0012】
したがって、1つの観点からは、本発明は、マトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析(MALDI−MS)に使用する脱塩サンプル支持プレートである。本発明のMALDIプレートにはサンプル提示面があり、サンプル提示面には1以上の吸着層の受け入れ面がある。この吸着層によって、選択された分子が受け入れ面に保持される。
【0013】
他の観点からは、本発明は、MALDI−MS用サンプルの調製方法である。上記のサンプル支持プレートを準備し、サンプルが受け入れ面へ添加される。サンプル中の選択された分子が吸着層に保持される。溶媒を受け入れ面に添加して塩や他の不純物を洗浄し、それによって、ターゲットスポットに添加したサンプルを脱塩し、MALDI−MS用のサンプルが調製される。
【0014】
さらに他の観点からは、本発明は、上記のサンプル支持プレートの作製法である。サンプル提示面と1以上の吸着層の受け入れ面とを備えたサンプル支持プレートが準備される。この吸着層により、受け入れ面上に選択された分子が保持される。
【0015】
関連した観点からは、本発明は、上記のサンプル支持プレートの作製法である。この方法は、サンプル提示面を備えたサンプル支持プレート上に、1以上の吸着層の受け入れ面を形成させることを含む。この吸着層によって、選択された分子が受け入れ面上に保持される。
【0016】
他の観点からは、本発明は、上記の脱塩用サンプルプレートを用いて、分析対象にマトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析(MALDI−MS)を行う方法である。この方法には、サンプル提示面を備えたサンプル支持プレート(サンプル提示面には1以上の吸着層の受け入れ面があり、吸着層によって、選択された分子が受け入れ面に保持される)を準備し;分析対象を含有するサンプルを吸着層の受け入れ面に添加し、サンプル中の分析対象を吸着層に保持させ;吸着層を水溶液で洗浄して吸着層から塩を除去し、それによってサンプルを脱塩し;吸着層に保持されている脱塩された分析対象にMALDI−MSを行うことが含まれる。
(発明の詳細な説明)
本発明は、MALDI−MS用の脱塩サンプル支持プレートに関する。本発明によって、本発明のサンプル支持プレートの簡便な作製法および使用法が提供される。また、本発明によって、サンプルの調製法および分析法が提供される。さらに、本発明のサンプルの調製法および分析法によれば、適当な溶媒(例えば、水)を用いて塩を洗浄することによって、未修飾表面上に分析対象とマトリックスとを保持しつつMALDIプレート上でサンプルを直接脱塩することができ、それによって、MALDI−MSの検出感度と分解能とを向上させつつサンプルの操作回数を減らすことが可能である。サンプルスポットを小さくすることにより、サンプルをある部分に集中させることができ、それによってサンプルの位置を探す必要がなくなる。
(定義)
本発明をさらに詳細に説明する前に、本明細書、実施例、および添付の特許請求の範囲において用いられる一定の用語について、便宜上、ここにまとめる。
【0017】
本明細書で用いられる「サンプル支持プレート」または「サンプルプレート」という用語は、MALDI−MS分析をするためにサンプルを置く装置をいう。本発明のサンプル支持プレートを作製するために、従来のMALDI−MSサンプル支持プレートを十分な吸着性を有する材料でコーティングして、受け入れ面上(例えば、ターゲットスポット上)に吸着層を設けることができる。
【0018】
本明細書で用いられる「ターゲットスポット」という用語は、ある具体的なサンプルやサンプルの混合物を分析するための、サンプル支持プレート上の指定された部分をいう。
本明細書で用いられる「吸着層」または「十分な吸着」という用語は、選択された分子(例えば、分析対象)を誘導化したり化学修飾することなく、選択された分子を保持することができるいかなる材料(例えば、高分子フィルムまたは高分子コーティング)を指す。この吸着層は、選択された分子(例えば、分析対象)を他の分子(例えば、塩)から選択的に吸着できるため、洗浄手順を適切に選択することによって吸着層から望ましくない分子種を除去することができる。吸着層に添加された分子が膜に吸収されたり、膜に浸透しないように、この吸着層は実質的に多孔性でなくてもよい。また、本発明の十分に多孔性の吸着層を用いて表面積を増大させ、それによって、保持されている選択された分子を濃縮し、分析感度を向上させることができる。
【0019】
本明細書で用いられる「塩」という用語は、付加体の形成により、分析対象の質量分析(の質)に悪影響を与えるすべての塩(アルカリ塩を含む)をいう。
本明細書で用いられる「分析対象」という用語は、分析される単独の分子、または分析される複数の分子をいう。
【0020】
本明細書で用いられる「マトリックス材料」という用語は、MALDI−MSでの使用に適したすべての材料(例えば、1以上の、光吸収性である酸性のいくつかの小さな化学物質(例えば、ニコチン酸またはシナピン酸))をいう。ターゲットスポット上で乾燥し、マトリックス結晶に包含された分析対象分子が(レーザー照射によって)固相結晶から気層または蒸気層へ十分に脱離・イオン化され、分子イオンとして飛び出させられるよう、マトリックス材料を分析対象と溶液中で混合する。マトリックス材料を何倍も過剰量にすると、結晶形成しやすくなり、分析対象を捕捉しやすくなる。
【0021】
本明細書で用いられる「選択された分子」という用語は、分析のために保持される分子(例えば、分析対象、マトリックス材料、または分析対象とマトリックス材料との組み合わせ)をいう。選択された分子は、MALDI−MS分析を改善するための本発明の方法によって除去される他の分子(例えば、塩)とは異なる。
【0022】
本明細書で用いられる「水溶液」または「水性溶媒」という用語は、水、および成分として水を含む液体をいう。この用語には、他の成分(例えば、溶液中に溶解している有機化合物または無機化合物)および水と混和性のある有機溶媒または無機溶媒を含む溶液も含まれると解される。例えば、水とメタノールとの混合物は水溶液と考えられる。
【0023】
本明細書で用いられる「受け入れ面」という用語は、吸着層が付加されるサンプル提示面の1部分をいう。吸着層は、何ら修飾(例えば、物理的修飾または化学的修飾による処理)されることなく、受け入れ面に付加される。
【0024】
本明細書で用いられる「選択基準」という用語は、吸着層が吸着層に添加された分子を逆相分離する性質(例えば、疎水性)をいう。
(発明の実施態様の説明)
1つの実施態様において、本発明は、マトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析(MALDI−MS)用の脱塩サンプル支持プレートである。本発明のMALDIプレートにはサンプル提示面があり、このサンプル提示面には1以上のサンプル受け入れ面がある。この吸着層は、選択された分子を受け入れ面上に保持する。本発明は、また、サンプル支持プレートの作製方法、サンプルの調製方法、および分析方法に関する。
【0025】
吸着層は、選択された分子を吸着層に保持できるよう、十分に吸着性を有する。本発明の他の実施態様において、吸着層表面に保持される選択された分子は、分析対象、マトリックス、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される。好ましい実施態様において、吸着層は高分子フィルムである。
【0026】
本発明の1つの実施態様において、ターゲットスポットは、自動分析を容易にするように正確に定められた位置に受け入れ面を有する。他の実施態様において、本発明のMALDI−MSサンプルプレートには複数の受け入れ面とそれに近接する受け入れ面があり、サンプル受け入れ面上に受け入れ面のグリッドが形成されている。この複数の受け入れ面によって、ハイスループット分析が容易になる。好ましい実施態様において、このグリッドには96の受け入れ面が含まれる。
【0027】
他の観点からは、本発明は、上記のMALDI−MSサンプル支持プレートの作製方法である。サンプル提示面を備えたサンプル支持プレートが提供される。本発明のサンプル支持プレートを作製するために、ほぼすべての材料を使用できる。しかし、使用する材料は、サンプル調製に使用する試薬と望ましくない反応を生じてはならず、MALDI-MSにおける通常の条件において分解しないものでなければならない。適した材料としては、プラスチック(例えば、ポリオレフィン、特に、ポリエチレン、およびポリプロピレン、PVC、およびポリスチレン)、ガラス、および金属(例えば、ステンレス鋼)が挙げられる。好ましい実施態様において、サンプル支持プレートの作製に用いる材料は、導電性を有する。
【0028】
1つの実施態様において、サンプル提示面は、1以上の吸着層の受け入れ面を有する。吸着層の受け入れ面は、吸着層溶液をプレートのサンプル提示面上へ添加することによって、作製される。1つの実施態様において、吸着層は、ピペッターを用いて面上に「スポット(spot)」される。他の実施態様においては、ソレノイド駆動弁(solenoid actuated valves)または圧電性蒸着(piezoelectric deposition)によってスポットされる。他の実施態様においては、当業者に公知の技術を用いて、ピン(pin)によってスポットされる。
【0029】
好ましい実施態様において、吸着材料によって、サンプル中の分子の逆相分離が容易になる。これによって、選択された分子(例えば、分析対象)は吸着層への非特異的結合によって保持される一方、他の分子(例えば、塩)は保持されず、除去することができる。例えば、吸着層は、疎水性で、同時に水で濡らすことができる性質であってよい。
【0030】
好ましい実施態様において、吸着層には高分子フィルムが含まれる。高分子フィルムは、モノマー、ポリマー、またはこれらの組み合わせ、ポロゲン(porogen:細孔形成剤)、および開始剤を混合して、作製される。また、他の態様では、高分子フィルムは、モノマーポリマー、またはこれらの組み合わせ、および開始剤を混合して、作製される。ある具体的な態様では、このポリマーは、ポリスチレンとポリビニルピロリジノンから選択される。
【0031】
1つの実施態様において、モノマーは、モノビニルモノマー、ポリビニルモノマー、またはモノビニルモノマーとポリビニルモノマーとの混合物である。使用することのできるモノビニルモノマーとしては、例えば、スチレン、N−ビニルピロリジノン、メタクリレート、ビニルアセテート、グリシジル・メタクリレート、およびこれらのいかなる組み合わせが挙げられる。1つの実施態様において、モノビニルモノマーは、N−ビニルピロリジノンである。
【0032】
用いることのできるポリビニルモノマーとしては、例えば、ジビニルベンゼン、エチレンジメタクリレート、ビス−アクリルアミド、ジビニルピリジン、エチレンジメタクリレート、ヒドロキシアルキレンジメタクリレート、またはこれらのいかなる組み合わせが挙げられる。1つの実施態様おいて、ポリビニルモノマーは、ジビニルベンゼンである。他の実施態様において、モノビニルモノマーとポリビニルモノマーとの混合物は、ジビニルベンゼンとN−ビニルピロリジノンである。
【0033】
好適なポロゲンとしては、例えば、脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、エステル、アルコール、ケトン、エーテル、またはこれらのいかなる組み合わせが挙げられる。同様に、好適な開始剤としては、例えば、過酸化ベンゾイル、過酸化ラウロイル、過酸化二硫酸、バゾ(Vazo)52、バゾ64、バゾ67、バゾ88、V70、またはこれらのすべての組み合わせが挙げられる。
【0034】
本発明の具体的な実施態様において、本発明のサンプル支持プレートは、モノマー、ポリマー、またはこれらの組み合わせ、ポロゲン、および開始剤を混合し;この混合物でサンプル支持プレートの受け入れ面を(例えば、ピペットによって)コーティングし;重合反応を開始させて高分子フィルムを形成させ;および、高分子フィルムを洗浄して、未反応のモノマー、ポロゲン、および開始剤を除去することによって、作製される。また、ポロゲンを使用しない以外は上述の方法と同様にして、この方法を行うこともできる。
【0035】
1つの実施態様において、本発明のコーティングされたサンプルプレートを、サンプルを添加する前に有機溶媒(特には、極性有機溶媒)で処理する。極性有機溶媒としては、例えば、アセトニトリル、メタノール、または水/有機溶媒混合物が挙げられる。
【0036】
他の観点からは、本発明は、MALDI−MS用サンプルの調製方法である。上述の本発明のサンプル支持プレートが提供され、ターゲットスポット上の受け入れ面にサンプルが添加される。サンプル中の選択された分子が、吸着層に保持される。これによって、ターゲットスポットの受け入れ面に添加されたサンプルが効果的に脱塩される。1つの実施態様において、吸着層が水溶液で洗浄されて、吸着層から塩が除去される。
【0037】
上述のように、1つの実施態様において、本発明のコーティングされたサンプル支持プレートは、サンプル添加前に有機溶媒(特には、極性有機溶媒)で処理される。比較的表面積の小さい高分子材料(例えば、高分子フィルム中に含まれるモノビニルモノマーが少ないことによる)は、有機溶媒での前処理が必要になることがある。かかる処理により、吸着層の表面が十分に濡れ、それによって、吸着層表面に選択させた分子を保持することが促進される。
【0038】
1つの実施態様において、サンプルには、分析対象、マトリックス材料、1以上の塩、および1以上の溶媒が含まれる。具体的な態様において、この溶媒は水性である。1つの実施態様において、サンプルは、マトリックス材料の溶液を含む。他の態様において、サンプルは、マトリックス材料を含まない。さらに他の態様において、マトリックス材料は、吸着層が水溶液で洗浄された後に添加される。
【0039】
他の観点からは、本発明は、上述した本発明のサンプル支持プレートを使用して、分析対象に、マトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析(MALDI−MS)を行う方法である。この方法は、上述のサンプル支持プレートを提供し、分析対象を含むサンプルを吸着層の受け入れ面へ添加し;サンプル中の分析対象を吸着層に保持させ;吸着層を水溶液で洗浄して吸着層から塩を除去することによって、サンプルを脱塩し;および吸着層に保持されている脱塩された分析対象にMALDI−MSを行うことを含む。
【0040】
本発明の1つの実施態様において、サンプル提示面には1以上のサンプルターゲットスポットがあり、ターゲットスポットには吸着層がある。
(実施例)
以下の実施例によって本発明をさらに説明するが、これは本発明を限定するものではない。
(実施例1)
ポリマーがスポットされたプレート(polymer spotted plates)の作製と初期評価
ジビニルベンゼン9.75g、N−ビニルピロリドン5.25g、V70(開始剤)0.3gからなるモノマー溶液を準備した。ピペッターを用いて、従来の金属製MALDIプレートの受け入れ面にモノマー溶液でスポットを作製した。その結果、このプレート上には、十分にモノマー溶液でコーティングされたスポットの列(A〜D列とする)と、少量のモノマー溶液のスポットの列(E〜H列とする)とが含まれる。このプレートを約60℃のオーブンで一晩加熱し、重合反応を開始させ、プレート上の各スポットに非多孔質高分子コーティングを形成させた。
【0041】
このプレートは、MALDI−MSプレートのターゲットスポット上に付加された非多孔質フィルムを有する。このプレートを、塩化メチレン中で超音波処理した後に、メタノール中で超音波処理することにより、簡便に洗浄した。次いで、以下の方法により、このプレートを分析するために処理した。
1.高分子コーティングの処理
・1μLの100%アセトニトリルで高分子コーティングを洗浄する。
【0042】
・1μLの80%アセトニトリルで高分子コーティングを洗浄する。
・アセトニトリルを除去し、2μLの0.1%トリフルオロ酢酸で洗浄する。
2.サンプルの結合
・0.1%トリフルオロ酢酸を除去する。
【0043】
・0.1%トリフルオロ酢酸中に、2μLのサンプルを入れる。
・溶媒を気化させて乾燥させる。
3.サンプルの洗浄
・2μLの0.1%トリフルオロ酢酸をターゲット上に添加する。
【0044】
・4分間インキュベートする。
・洗浄液を除去する。
・これを繰り返す。
4.マトリックス材料の添加
・0.5μLのαシアノ5mg/mL(アセトニトリル25%、エタノール25%、トリフルオロ酢酸0.05%)を添加する。
【0045】
・気化させて乾燥させる。
バックグラウンドの混入(コンタミネーション)を測定するため、上述のプレートを、サンプルなしの従来型MALDI−MSプレートと比較した。次いで、コーティングした受け入れ面上におけるMALDI−MSによるペプチドのイオン化能を試験するため、サンプル(ウシ血清アルブミン(BSA)トリプシン消化物)を高分子コーティングしていないコントロールサンプルと比較分析した。次いで、サンプル(トリプシン消化物)を載せた高分子コーティングしたMALDI−MSプレートを、水で2回洗浄し、洗浄しなかったサンプルの結果と比較した。上述のような比較的直径の大きい高分子コーティングを有するMALDI−MSプレートを作製し、結果を比較した。
【0046】
4つの図の内、図1には、以下のような上記の比較実験の結果を示す。
1.高分子コーティングによって、MALDI−TOF−MSに顕著なバックグラウンドが発生することはなかった。
2.BSAが、高分子コーティングからイオン化された。
3.BSAはコーティングに結合し、洗浄工程中も保持された。
4.SN比(signal to noise ratio)は、直径の小さいコーティングがされたプレートで改善される。
(実施例2)
種々のコーティング組成物のMALDI−MSプレート上への調製
いくつかのコーティング組成物を、ポリスチレン(分子量280,000、アルドリッチ18242-7、ロット130 15902CI)、ポリビニルピロリジノン(分子量360,000、シグマP-5288、ロット38H0092)、および1−メチル−2−ピロリジノン(アルドリッチ44377-8、ロットP1 00850 MI)を用いて調製し、以下の方法で、MALDI−MSプレート上にスポットを作製した。
1.A1〜A12のスポットを、ポリマー溶液(20mlのガラスバイアル中の、1gのポリスチレンと15mlの1−メチルー2−ピロリジノンとの混合物)で作製した。
2.B1〜B12のスポットを、ポリマー溶液(20mlのガラスバイアル中の、0.9gのポリスチレン、0.1gのポリビニルピロリジノン、および15mlの1−メチル−2−ピロリジノンの混合物)で作製した。
3.C1〜C12のスポットを、ポリマー溶液(20mlガラスバイアル中の、0.8gのポリスチレン、0.2gのポリビニルピロリジノン、および15mlの1−メチル−2−ピロリジノンの混合物)で作製した。
4.D1〜D12のスポットを、ポリマー溶液(20mlガラスバイアル中の、0.7gのポリスチレン、0.3gのポリビニルピロリジノン、および15mlの1−メチル−2−ピロリジノン)で作製した。
5.E1〜E12のスポットを、ポリマー溶液(20mlガラスバイアル中の、0.6gのポリスチレン、0.4gのポリビニルピロリジノン、および15mlの1−メチル−2−ピロリジノン)で作製した。
6.F1〜F12のスポットを、ポリマー溶液(20mlガラスバイアル中の、0.5gのポリスチレン、0.5gのポリビニルピロリジノン、および15mlの1−メチル−2−ピロリジノン)で作製した。
【0047】
このプレートを約60℃のオーブンに1時間入れ、次いで、10秒間アセトニトリルの超音波バスに入れ、最後にメタノールで洗浄した。
(実施例3)
MALDI−MSプレートの第2の作製法
1−メチル−2−ピロリジノンを除去し、加熱して高分子フィルムのスポットを形成させた後に、ポリマー溶液をスポットして、4つのMALDI−MSプレートを作製した。この方法は、プレート上での重合開始が一定でないことによるプレート作製に関する問題点を改善し、バックグラウンドのノイズおよび感度の問題を検討するためのものである。以下の方法によりプレートを作製し、実施例2で作製したプレートと比較した。
1.ポリスチレン(平均分子量2,802,000)とポリビニルピロリジノン(平均分子量360,000)とを1−メチル−2−ピロリジノン中へ溶解させた。
2.ポリマー溶液によりMALDIプレート上にスポットを作製した。
3.プレートをオーブンに入れ、1−メチル−2−ピロリジノンを除去し、高分子フィルムを作製した。
【0048】
MALDIプレート上にスポットしたポリマー溶液は、ポリマー溶液Aおよびポリマー溶液Bとした。ポリマー溶液Aは、1.6gのポリスチレン(平均分子量280,000)、0.4gのポリビニルピロリジノン(平均分子量360,000)と15mlの1−メチル−2−ピロリジノンとの混合物である。ポリマー溶液Bは、1.0gのポリスチレン(平均分子量280,000)、1.0gのポリビニルピロリジノン(平均分子量360,000)、および15mlの1−メチル−2−ピロリジノンの混合物である。
【0049】
2つのプレートに、約0.05μLのポリマー溶液Aでスポットを作製し、他の2つのプレートには、0.05μLのポリマー溶液Bでスポットを作製した。
(参照による本明細書への導入)
すべての特許、公開された特許出願、および本明細書で引用した他の文献についての全内容を、参照により本明細書に含めるものとする。
(均等物)
当業者は、本明細書に具体的に記載されている本発明の具体的な実施態様に対する多くの均等物を、通常の実験(routine experimentation)以上のことをすることなく、認識し、確認することができるだろう。このような均等物も、本特許請求の範囲に含まれると考える。
【図面の簡単な説明】
【0050】
【図1】図1は、本発明の高分子コーティングされたブランクのサンプルプレートと、本発明の高分子コーティングされていないブランクのサンプルプレートとを、MALDI−MSによって比較分析したものである。
【図2】図2は、高分子コーティングしたサンプルプレートと高分子コーティングしていないサンプルプレート上のウシ血清アルブミン(BSA)トリプシン消化物を、MALDI−MSによって比較分析したものである。
【図3】図3は、図2に示した高分子コーティングしたプレートを水で2回洗浄する前と後のサンプルプレートを、MALDI−MSによって比較分析したものである。
【図4】図4は、上述のように、BSAトリプシン消化物を添加した後に洗浄したサンプルプレートにおいて、高分子コーティングの直径が小さいものと大きいものを、MALDI−MSによって比較分析したものである。
Claims (50)
- サンプル提示面を備えたマトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析(MALDI−MS)用の脱塩サンプル支持プレートであって、前記サンプル提示面には1以上の吸着層の受け入れ面があり、この吸着層によって、選択された分子が受け入れ面上に保持される、前記脱塩サンプル支持プレート。
- 前記吸着層が、選択された分子を吸着層に保持するのに十分な吸着性を有する、請求項1に記載のサンプル支持プレート。
- 前記吸着層が、塩を吸着層から除去するために水溶液で洗浄される、請求項1に記載のサンプル支持プレート。
- 吸着層に保持される前記選択された分子が、分析対象、マトリックス、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項3に記載のサンプル支持プレート。
- 吸着層が、高分子フィルムである、請求項2に記載のサンプル支持プレート。
- 前記高分子フィルムが、モノマー、ポリマー、またはこれらの組み合わせ、ポロゲン、および開始剤を混合することによって調製される、請求項5に記載のサンプル支持プレート。
- 前記高分子フィルムが、モノマー、ポリマー、またはこれらの組み合わせ、および開始剤を混合することによって調製される、請求項5に記載のサンプル支持プレート。
- 前記ポリマーが、ポリスチレンおよびポリビニルピロリジノンからなる群より選択される、請求項6または7に記載の方法。
- 前記モノマーが、モノビニルモノマー、ポリビニルモノマー、およびモノビニルモノマーとポリビニルモノマーとの混合物からなる群より選択される、請求項6または7に記載のサンプル支持プレート。
- 前記モノビニルモノマーが、スチレン、N−ビニルピロリドン、メタクリレート、ビニルアセテート、グリシジル・メタクリレート、およびこれらのいかなる組み合わせからなる群より選択される、請求項8に記載のサンプル支持プレート。
- 前記モノビニルモノマーが、N−ビニルピロリドンである、請求項8に記載の方法。
- 前記ポリビニルモノマーが、ジビニルベンゼン、エチレンジメタクリレート、ビス−アクリルアミド、ジビニルピリジン、エチレンジメタクリレート、ヒドロキシアルキレンジメタクリレート、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項8に記載のサンプル支持プレート。
- 前記ポリビニルモノマーが、ジビニルベンゼンである、請求項8に記載の方法。
- 前記モノビニルモノマーとポリビニルモノマーとの混合物が、ジビニルベンゼンとN−ビニルピロリドンである、請求項8に記載の方法。
- 前記ポロゲンが、脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、エステル、アルコール、ケトン、エーテル、およびこれらのいかなる組み合わせからなる群より選択される、請求項6に記載のサンプル支持プレート。
- 前記開始剤が、過酸化ベンゾイル、過酸化ラウロイル、過酸化二硫酸、バゾ(Vazo)52、バゾ64、バゾ67、バゾ88、V70、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項6または7に記載のサンプル支持プレート。
- 前記受け入れ面が、正確に定められた位置にある、請求項1に記載のMALDI−MSサンプル支持プレート。
- 前記受け入れ面の正確に定められた位置が、自動分析を容易にするものである、請求項17に記載のMALDI−MSサンプル支持プレート。
- 受け入れ面のグリッドがサンプル提示面上に形成されている、複数の受け入れ面を備えた請求項17または18に記載のMALDI−MSサンプル支持プレート。
- 前記グリッドが、96の受け入れ面を有する、請求項19に記載のMALDI−MSサンプル支持プレート。
- 前記複数の受け入れ面が、ハイスループット分析を容易にするものである、請求項19に記載のMALDI−MSサンプル支持プレート。
- 請求項1に記載のサンプル支持プレートを準備し;
サンプルを受け入れ面に添加し;
サンプル中の選択された分子を吸着剤層に保持させ;および
塩および他の不純物を洗浄するために受け入れ面に溶媒を添加して、受け入れ面に添加したサンプルを脱塩することを含む、MALDI−MS用のサンプルを調製するための、マトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析(MALDI−MS)用のサンプル調製方法。 - サンプルを受け入れ面に添加する前に、前記サンプル支持プレートを極性有機溶媒で処理する、請求項22に記載の方法。
- 前記極性有機溶媒が、アセトニトリル、メタノール、および水/有機溶媒の混合物からなる群より選択される、請求項23に記載の方法。
- 前記極性有機溶媒が、アセトニトリルである、請求項24に記載の方法。
- 前記吸着層が、吸着層から塩を除去するために水溶液で洗浄される、請求項22に記載の方法。
- 前記サンプルが、分析対象、マトリックス材料、1以上の塩、および1以上の溶媒を含んでなる、請求項22に記載の方法。
- 前記溶媒が、水性である、請求項27に記載の方法。
- 前記サンプルが、マトリックス材料の溶液を含有する、請求項22に記載の方法。
- 前記サンプルが、マトリックス材料を含有しない、請求項22のサンプル支持プレートの作製方法。
- 前記マトリックス材料が、吸着層が水溶液で洗浄された後に添加される、請求項30に記載の方法。
- サンプル提示面を備えたサンプル支持プレートを準備し;
前記サンプル提示面に1以上の吸着層の受け入れ面(ここで、吸着層によって、選択された分子が受け入れ面上に保持される)を作製することを含む、請求項1に記載のサンプル支持プレートの作製方法。 - サンプル提示面を備えたサンプル支持プレート上に、1以上の吸着層の受け入れ面(ここで、吸着層によって、選択された分子が受け入れ面上に保持される)を作製することを含む請求項1に記載のサンプル支持プレートの作製方法。
- 前記吸着層が、高分子フィルムを含んでなる、請求項32または33に記載の方法。
- モノマー、ポリマー、またはこれらの組み合わせ、ポロゲン、および開始剤を混合し;
ターゲットスポットをこの混合物でコーティングし;
重合反応を開始させ、高分子フィルムを形成させ;および
未反応のモノマー、ポロゲン、および開始剤を除去するために、高分子フィルムを洗浄することをさらに含む、請求項34に記載の方法。 - モノマー、ポリマー、またはこれらの組み合わせ、および開始剤を混合し;
ターゲットスポットをこの混合物でコーティングし;
重合反応を開始させて、高分子フィルムを形成させ;および
未反応のモノマー、ポロゲン、および開始剤を除去するために、高分子フィルムを洗浄することをさらに含む、請求項34に記載の方法。 - 前記高分子フィルムを極性有機溶媒で処理することをさらに含む、請求項35または36に記載の方法。
- 前記極性有機溶媒が、アセトニトリル、メタノール、および水/有機溶媒混合物からなる群より選択される、請求項37に記載の方法。
- 前記極性有機溶媒が、アセトニトリルである、請求項38に記載の方法。
- 前記ポリマーが、ポリスチレンおよびポリビニルピロリドンからなる群より選択される、請求項35または36に記載の方法。
- 前記モノマーが、モノビニルモノマー、ポリビニルモノマー、およびモノビニルモノマーとポリビニルモノマーとの混合物からなる群より選択される、請求項35または36に記載の方法。
- 前記モノビニルモノマーが、スチレン、N−ビニルピロリドン、メタクリレート、ビニルアセテート、グリシジル・メタクリレート、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項41に記載の方法。
- 前記モノビニルモノマーが、N−ビニルピロリドンである、請求項41に記載の方法。
- 前記ポリビニルモノマーが、ジビニルベンゼン、エチレンジメタクリレート、ビス−アクリルアミド、ジビニルピリジン、エチレンジメタクリレート、ヒドロキシアルキレンジメタクリレート、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項41に記載の方法。
- 前記ポリビニルモノマーが、ジビニルベンゼンである、請求項41に記載の方法。
- 前記モノビニルモノマーとポリビニルモノマーとの混合物が、ジビニルベンゼンとN−ビニルピロリドンである、請求項41に記載の方法。
- 前記ポロゲンが、脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、エステル、アルコール、ケトン、エーテル、およびこれらのいかなる組み合わせからなる群より選択される、請求項35または36に記載の方法。
- 前記開始剤が、過酸化ベンゾイル、過酸化ラウロイル、過酸化二硫酸、バゾ(Vazo)52、バゾ64、バゾ67、バゾ88、V70、およびこれらのいかなる組み合わせからなる群より選択される、請求項47に記載の方法。
- サンプル提示面を備えたサンプル支持プレート(前記サンプル支持プレートには1以上の吸着層の受け入れ面があり、吸着層によって、選択された分子が受け入れ面上に保持される)を準備し;
分析対象を含有するサンプルを、吸着層の受け入れ面へ添加し;
サンプル中の分析対象を吸着層に保持させ;
吸着層から塩を除去するため吸着層を水溶液で洗浄して、サンプルを脱塩し;および
吸着層に保持された前記脱塩された分析対象にMALDI−MSを行うことを含む、分析対象にマトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析(MALDI−MS)を行う方法。 - 前記サンプル提示面に1以上のサンプルターゲットスポットがあり、当該ターゲットスポットには吸着層がある、請求項1、22、32、33、または49のいずれか1項に記載のサンプル支持プレートまたは方法。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015178249A1 (ja) * | 2014-05-19 | 2015-11-26 | 国立大学法人名古屋大学 | サンプル中の成分の分析方法、サンプル中の成分の特異的分離方法及び質量分析用サンプル |
Families Citing this family (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20050130222A1 (en) * | 2001-05-25 | 2005-06-16 | Lee Peter J.J. | Sample concentration maldi plates for maldi mass spectrometry |
US7462494B2 (en) * | 2003-06-09 | 2008-12-09 | 3M Innovative Properties Company | Method for laser desorption mass spectrometry using porous polymeric substrates with particle fillers |
US20050023456A1 (en) * | 2003-06-09 | 2005-02-03 | The Regents Of The University Of California | Matrix for MALDI analysis based on porous polymer monoliths |
WO2005022583A2 (en) | 2003-08-21 | 2005-03-10 | Applera Corporation | Reduction of matrix interference for maldi mass spectrometry analysis |
DE102004062281A1 (de) * | 2003-12-29 | 2005-07-28 | Siemens Ag | Verfahren und Spotting-Lösung zum Herstellen von Microarrays |
JP4148143B2 (ja) * | 2004-01-19 | 2008-09-10 | 株式会社島津製作所 | 液体クロマトグラフ等の分画装置 |
US20060266941A1 (en) * | 2005-05-26 | 2006-11-30 | Vestal Marvin L | Method and apparatus for interfacing separations techniques to MALDI-TOF mass spectrometry |
GB0700475D0 (en) * | 2007-01-10 | 2007-02-21 | Cole Polytechnique Federale De | Ionization device |
US7663100B2 (en) * | 2007-05-01 | 2010-02-16 | Virgin Instruments Corporation | Reversed geometry MALDI TOF |
US7564028B2 (en) * | 2007-05-01 | 2009-07-21 | Virgin Instruments Corporation | Vacuum housing system for MALDI-TOF mass spectrometry |
US7667195B2 (en) * | 2007-05-01 | 2010-02-23 | Virgin Instruments Corporation | High performance low cost MALDI MS-MS |
US7838824B2 (en) * | 2007-05-01 | 2010-11-23 | Virgin Instruments Corporation | TOF-TOF with high resolution precursor selection and multiplexed MS-MS |
JP5030166B2 (ja) * | 2007-05-01 | 2012-09-19 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | レーザー脱離イオン化質量分析に使用される試料支持用基板の試験方法 |
US7564026B2 (en) * | 2007-05-01 | 2009-07-21 | Virgin Instruments Corporation | Linear TOF geometry for high sensitivity at high mass |
US7589319B2 (en) | 2007-05-01 | 2009-09-15 | Virgin Instruments Corporation | Reflector TOF with high resolution and mass accuracy for peptides and small molecules |
DE102017110476B4 (de) | 2017-05-15 | 2019-03-07 | Bruker Daltonik Gmbh | Präparation biologischer Zellen auf massenspektrometrischen Probenträgern für eine desorbierende Ionisierung |
Family Cites Families (42)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB219309A (en) | 1923-07-20 | 1925-04-09 | British Thomson Houston Co Ltd | Improvements in and relating to power station arrangements |
GB1201318A (en) | 1966-08-17 | 1970-08-05 | Minnesota Mining & Mfg | Improvements in or relating to polyester materials |
DE3125335A1 (de) | 1981-06-27 | 1983-01-13 | Alfred Prof. Dr. 4400 Münster Benninghoven | Verfahren zur analyse von gasen und fluessigkeiten |
GB2235529B (en) | 1989-08-23 | 1993-07-28 | Finnigan Mat Ltd | Method of preparing samples for laser spectrometry analysis |
GB2235528B (en) | 1989-08-23 | 1993-07-28 | Finnigan Mat Ltd | Method of preparing samples for laser spectrometry analysis |
GB2236184B (en) | 1989-09-12 | 1993-07-28 | Finnigan Mat Ltd | Method of preparing samples for laser spectrometry analysis |
GB2257295B (en) | 1991-06-21 | 1994-11-16 | Finnigan Mat Ltd | Sample holder for use in a mass spectrometer |
WO1993007945A1 (en) | 1991-10-21 | 1993-04-29 | Cornell Research Foundation, Inc. | Column with macroporous polymer media |
US5605798A (en) | 1993-01-07 | 1997-02-25 | Sequenom, Inc. | DNA diagnostic based on mass spectrometry |
EP1347493A3 (en) * | 1993-05-28 | 2005-11-23 | Baylor College Of Medicine | Method and apparatus for desorption and ionization of analytes |
US6020208A (en) | 1994-05-27 | 2000-02-01 | Baylor College Of Medicine | Systems for surface-enhanced affinity capture for desorption and detection of analytes |
US6071610A (en) * | 1993-11-12 | 2000-06-06 | Waters Investments Limited | Enhanced resolution matrix-laser desorption and ionization TOF-MS sample surface |
DE4408034C1 (de) * | 1994-03-10 | 1995-07-13 | Bruker Franzen Analytik Gmbh | Verfahren zur massenspektrometrischen Analyse von Proben aus 2D-Gel-Elektrophoreseplatten mit matrixunterstützter ionisierender Laser-Desorption |
US5480526A (en) | 1994-06-07 | 1996-01-02 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Methods for the desalting of biological samples: a simple approach to eliminate disturbances in isoelectric focusing caused by the presence of salts |
US5770272A (en) | 1995-04-28 | 1998-06-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Matrix-bearing targets for maldi mass spectrometry and methods of production thereof |
US6004770A (en) | 1995-06-07 | 1999-12-21 | Arizona State University Board Of Regents | Sample presentation apparatus for mass spectrometry |
US5705813A (en) | 1995-11-01 | 1998-01-06 | Hewlett-Packard Company | Integrated planar liquid handling system for maldi-TOF MS |
DE19617011C2 (de) | 1996-04-27 | 2000-11-02 | Bruker Daltonik Gmbh | Matrixkomponentengemisch für die matrixunterstützte Laserdesorption und Ionisierung sowie Verfahren zur Zubereitung eines Matrixkomponentengemisches |
DE19618032C2 (de) | 1996-05-04 | 2000-04-13 | Bruker Daltonik Gmbh | Lagerfähig vorpräparierte Maldi-Probenträger |
DE19628178C1 (de) * | 1996-07-12 | 1997-09-18 | Bruker Franzen Analytik Gmbh | Verfahren zum Beladen von Probenträgern für Massenspektrometer |
NZ516848A (en) | 1997-06-20 | 2004-03-26 | Ciphergen Biosystems Inc | Retentate chromatography apparatus with applications in biology and medicine |
WO1999016103A1 (en) | 1997-09-23 | 1999-04-01 | Ciphergen Biosystems, Inc. | Secondary ion generator detector for time-of-flight mass spectrometry |
US6326616B1 (en) | 1997-10-15 | 2001-12-04 | Analytica Of Branford, Inc. | Curved introduction for mass spectrometry |
DE19754978C2 (de) | 1997-12-11 | 2000-07-13 | Bruker Daltonik Gmbh | Probenträger für die MALDI-Massenspektrometrie nebst Verfahren zur Herstellung der Platten und zum Aufbringen der Proben |
CA2228413A1 (en) * | 1998-01-30 | 1999-07-30 | University Of Manitoba | Use of polyurethane membrane for maldi-tofms analysis of whole blood |
US6265715B1 (en) | 1998-02-02 | 2001-07-24 | Helene Perreault | Non-porous membrane for MALDI-TOFMS |
US6104028A (en) | 1998-05-29 | 2000-08-15 | Genetrace Systems Inc. | Volatile matrices for matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry |
US6342393B1 (en) | 1999-01-22 | 2002-01-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods and apparatus for external accumulation and photodissociation of ions prior to mass spectrometric analysis |
WO2000066265A2 (en) * | 1999-04-27 | 2000-11-09 | Ciphergen Biosystems, Inc. | Probes for a gas phase ion spectrometer |
CA2371738A1 (en) | 1999-04-29 | 2000-11-09 | Jody Beecher | Sample holder with hydrophobic coating for gas phase mass spectrometers |
WO2000077812A2 (en) | 1999-06-10 | 2000-12-21 | Northeastern University | Light-induced electron capture at a surface |
JP3548769B2 (ja) | 1999-06-29 | 2004-07-28 | 旭テクネイオン株式会社 | 微細で均一な結晶を形成するためのカーボン製支持板及びその応用 |
WO2001019520A1 (en) | 1999-09-13 | 2001-03-22 | Millipore Corporation | High density cast-in-place sample preparation card |
EP1301939A2 (en) | 2000-06-28 | 2003-04-16 | The Johns Hopkins University | Time-of-flight mass spectrometer array instrument |
DE10043042C2 (de) | 2000-09-01 | 2003-04-17 | Bruker Daltonik Gmbh | Verfahren zum Belegen eines Probenträgers mit Biomolekülen für die massenspektrometrische Analyse |
GB0029040D0 (en) | 2000-11-29 | 2001-01-10 | Micromass Ltd | Orthogonal time of flight mass spectrometer |
US6825477B2 (en) | 2001-02-28 | 2004-11-30 | Jan Sunner | Method and apparatus to produce gas phase analyte ions |
EP1395824A1 (en) | 2001-05-14 | 2004-03-10 | The Penn State Research Foundation | Matrix-free desorption ionization mass spectrometry using tailored morphology layer devices |
US20050130222A1 (en) | 2001-05-25 | 2005-06-16 | Lee Peter J.J. | Sample concentration maldi plates for maldi mass spectrometry |
US20030010908A1 (en) * | 2001-07-02 | 2003-01-16 | Phillip Clark | Conductive card suitable as a MALDI-TOF target |
DE10140499B4 (de) | 2001-08-17 | 2005-02-03 | Bruker Daltonik Gmbh | Probenträgerplatten für Massenspektrometrie mit Ionisierung durch matrixunterstützte Laserdesorption |
GB0120131D0 (en) | 2001-08-17 | 2001-10-10 | Micromass Ltd | Maldi target plate |
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2002
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Cited By (3)
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