JP2004512009A5 - - Google Patents
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Description
【特許請求の範囲】
【請求項１】 ポリペプチドが次の群：
ａ）カリウムチャネルＫＣＮＱ５のアミノ酸配列を有するポリペプチド、
ｂ）ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ.２のアミノ酸配列を有するポリペプチド、
ｃ）ｂ）が１つまたはそれ以上のアミノ酸を欠失しているポリペプチド、または
ｄ）ｂ）が１つまたはそれ以上の置換されたアミノ酸を有するポリペプチド、から選択されるものである、ＫＣＮＱ５活性を有するポリペプチドをコードするＤＮＡ配列。
【請求項２】 次の群のポリヌクレオチド配列：
ａ）ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ.１のポリヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチド、
ｂ）ａ）に関するポリヌクレオチド配列に対してストリンジェントなハイブリダイゼーション条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
ｃ）ａ）に関するポリヌクレオチド配列に対して、低または中程度のストリンジェンシーの条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド。
ｄ）ａ）、ｂ）、またはｃ）の１つに定義されるポリヌクレオチド配列に相補的なポリヌクレオチド配列
のうち少なくとも１つから選択される請求項１記載のＤＮＡ配列。
【請求項３】 ＤＮＡ配列が哺乳類の部分である請求項１または２記載のＤＮＡ配列。
【請求項４】 ＤＮＡ配列がヒトの部分である請求項１または２記載のＤＮＡ配列。
【請求項５】 ベクターが、
ａ）原核細胞または真核細胞においてベクターを増殖に適したものとするポリヌクレチドエレメント、
ｂ）請求項１〜４のうちのいずれかに記載のＤＮＡ配列
からなるものである、組換えＤＮＡベクター。
【請求項６】 原核細胞において、特に微生物の細胞において、ベクターを増殖に適当なものとするポリヌクレオチドエレメントからなる、請求項５記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項７】 バクテリア細胞がEscherichia coliまたはBacillus specの細胞である、請求項５または６記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項８】 真核細胞において、特に細胞系の細胞または酵母細胞において、ベク
ターを増殖に適当なものとするポリヌクレオチドエレメントからなる請求項６記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項９】 細胞系の細胞がCOS細胞系、Hela細胞系、または3T3細胞系であり、酵母細胞がSaccharomyces cerevisiaeの細胞である、請求項８記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１０】 請求項１〜４のいずれかに記載のＤＮＡ配列が関連ＲＮＡの転写および／または関連タンパク質の発現をさせるプロモーターエレメントに実施可能に結合するものである、請求項５〜９のいずれかに記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１１】 プロモーターエレメントが原核プロモーターである、請求項１０記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１２】 プロモーターエレメントが真核プロモーターである、請求項１０記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１３】 プロモーターエレメントが誘導可能である請求項１１または１２記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１４】 請求項５〜１３記載の少なくとも１つの組換えＤＮＡベクターを包含する宿主細胞。
【請求項１５】 宿主細胞が真核細胞または原核細胞である、請求項１４記載の宿主細胞。
【請求項１６】 原核細胞がバクテリア、特にEscherichia coli、Bacillus specの細胞である、請求項１５記載の宿主細胞。
【請求項１７】 真核細胞が細胞系の細胞、特にCOS細胞系、Hela細胞系、または3T3細胞系の細胞、または酵母細胞、特にSaccaromyces cerevisiaeの細胞である、請求項１５記載の宿主細胞。
【請求項１８】 請求項５〜１３のいずれかに記載の組換えＤＮＡベクターにより宿主細胞が形質転換されるものである、請求項１４〜１７のいずれかに記載の宿主細胞の製造。
【請求項１９】 請求項１〜４記載のＤＮＡ配列の一つにコードされたタンパク質。
【請求項２０】 第１に請求項１４〜１７のいずれかに記載の宿主細胞を培養し、第２にその細胞を採集して処理し、次いで第３にタンパク質の精製をするものである、請求項１９記載のタンパク質の製造。
【請求項２１】 ｅ）ＫＣＮＱ５、または請求項１９または２０記載のタンパク質を用意すること；
ｆ）少なくとも１つの化合物を用意すること；
ｇ）請求項１記載のｂ）の化合物をａ）のタンパク質とインキュベートすること；
ｈ）請求項１記載のａ）のタンパク質の活性を測定すること
からなる、請求項１９または２０に記載のＫＣＮＱ５活性を有するタンパク質の活性の修飾に適した化合物を同定する方法。
【請求項２２】 請求項１のａ）に記載のタンパク質が、請求項１４〜１７のいずれかに記載の宿主細胞内に提供され、その宿主細胞がそのタンパク質を発現するものである、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】 請求項１のａ）に記載のタンパク質がＫＣＮＱ３と相互作用するものである、請求項２１記載の方法。
【請求項２４】 次の工程：
ｄ）生物学的材料を提供すること；
ｅ）その生物学的材料とＫＣＮＱ５活性を修飾する化合物または請求項１９または２０記載のタンパク質と、さらに必要な場合には参照目的でＫＣＮＱ５の活性を修飾しない化合物または請求項１９または２０記載のタンパク質をインキュベートすること；
ｆ）生物学的材料と請求項１のｂ）記載の化合物をインキュベートした後に、ＫＣＮＱ５または請求項１９または２０記載のタンパク質の活性を測定すること；
からなる、請求項１９または２０記載のＫＣＮＱ５活性を有するタンパク質の検出方法。
【請求項２５】 異なる部分、特にＫＣＮＱ５活性の修飾に好適な化合物からなる試験用キット。
【請求項２６】 ＫＣＮＱ５または請求項１９または２０記載のタンパク質の活性を修飾するのに適した化合物であって、その化合物が請求項２１〜２３のいずれかに従って同定されたものである化合物。
【請求項１】 ポリペプチドが次の群：
ａ）カリウムチャネルＫＣＮＱ５のアミノ酸配列を有するポリペプチド、
ｂ）ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ.２のアミノ酸配列を有するポリペプチド、
ｃ）ｂ）が１つまたはそれ以上のアミノ酸を欠失しているポリペプチド、または
ｄ）ｂ）が１つまたはそれ以上の置換されたアミノ酸を有するポリペプチド、から選択されるものである、ＫＣＮＱ５活性を有するポリペプチドをコードするＤＮＡ配列。
【請求項２】 次の群のポリヌクレオチド配列：
ａ）ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ.１のポリヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチド、
ｂ）ａ）に関するポリヌクレオチド配列に対してストリンジェントなハイブリダイゼーション条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
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ｄ）ａ）、ｂ）、またはｃ）の１つに定義されるポリヌクレオチド配列に相補的なポリヌクレオチド配列
のうち少なくとも１つから選択される請求項１記載のＤＮＡ配列。
【請求項３】 ＤＮＡ配列が哺乳類の部分である請求項１または２記載のＤＮＡ配列。
【請求項４】 ＤＮＡ配列がヒトの部分である請求項１または２記載のＤＮＡ配列。
【請求項５】 ベクターが、
ａ）原核細胞または真核細胞においてベクターを増殖に適したものとするポリヌクレチドエレメント、
ｂ）請求項１〜４のうちのいずれかに記載のＤＮＡ配列
からなるものである、組換えＤＮＡベクター。
【請求項６】 原核細胞において、特に微生物の細胞において、ベクターを増殖に適当なものとするポリヌクレオチドエレメントからなる、請求項５記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項７】 バクテリア細胞がEscherichia coliまたはBacillus specの細胞である、請求項５または６記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項８】 真核細胞において、特に細胞系の細胞または酵母細胞において、ベク
ターを増殖に適当なものとするポリヌクレオチドエレメントからなる請求項６記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項９】 細胞系の細胞がCOS細胞系、Hela細胞系、または3T3細胞系であり、酵母細胞がSaccharomyces cerevisiaeの細胞である、請求項８記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１０】 請求項１〜４のいずれかに記載のＤＮＡ配列が関連ＲＮＡの転写および／または関連タンパク質の発現をさせるプロモーターエレメントに実施可能に結合するものである、請求項５〜９のいずれかに記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１１】 プロモーターエレメントが原核プロモーターである、請求項１０記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１２】 プロモーターエレメントが真核プロモーターである、請求項１０記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１３】 プロモーターエレメントが誘導可能である請求項１１または１２記載の組換えＤＮＡベクター。
【請求項１４】 請求項５〜１３記載の少なくとも１つの組換えＤＮＡベクターを包含する宿主細胞。
【請求項１５】 宿主細胞が真核細胞または原核細胞である、請求項１４記載の宿主細胞。
【請求項１６】 原核細胞がバクテリア、特にEscherichia coli、Bacillus specの細胞である、請求項１５記載の宿主細胞。
【請求項１７】 真核細胞が細胞系の細胞、特にCOS細胞系、Hela細胞系、または3T3細胞系の細胞、または酵母細胞、特にSaccaromyces cerevisiaeの細胞である、請求項１５記載の宿主細胞。
【請求項１８】 請求項５〜１３のいずれかに記載の組換えＤＮＡベクターにより宿主細胞が形質転換されるものである、請求項１４〜１７のいずれかに記載の宿主細胞の製造。
【請求項１９】 請求項１〜４記載のＤＮＡ配列の一つにコードされたタンパク質。
【請求項２０】 第１に請求項１４〜１７のいずれかに記載の宿主細胞を培養し、第２にその細胞を採集して処理し、次いで第３にタンパク質の精製をするものである、請求項１９記載のタンパク質の製造。
【請求項２１】 ｅ）ＫＣＮＱ５、または請求項１９または２０記載のタンパク質を用意すること；
ｆ）少なくとも１つの化合物を用意すること；
ｇ）請求項１記載のｂ）の化合物をａ）のタンパク質とインキュベートすること；
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からなる、請求項１９または２０に記載のＫＣＮＱ５活性を有するタンパク質の活性の修飾に適した化合物を同定する方法。
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【請求項２３】 請求項１のａ）に記載のタンパク質がＫＣＮＱ３と相互作用するものである、請求項２１記載の方法。
【請求項２４】 次の工程：
ｄ）生物学的材料を提供すること；
ｅ）その生物学的材料とＫＣＮＱ５活性を修飾する化合物または請求項１９または２０記載のタンパク質と、さらに必要な場合には参照目的でＫＣＮＱ５の活性を修飾しない化合物または請求項１９または２０記載のタンパク質をインキュベートすること；
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