JP2004043380A - トロンボキサンａ２合成酵素阻害剤 - Google Patents

Abstract

【課題】安全で、副作用の無い天然物由来のトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤、血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞又は狭心症の予防又は治療剤、それらを含有する経口用あるいは非経口用組成物、食品又は医薬を提供すること。
【解決手段】プロポリス又はその抽出物を含有するトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤、血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞又は狭心症などに対する予防又は治療剤、これらを含有する経口用組成物、非経口用組成物、その食品、医薬。
【選択図】　　　　なし

Description

【０００１】
【発明が属する技術分野】本発明は、トロンボキサンＡ２合成酵素阻害作用を有し、血栓、気管支喘息、心筋梗塞、脳梗塞、狭心症の予防又は／及び治療に有効な剤、それらを含有する経口用組成物又は非経口用組成物、食品又は医薬に関する。
【０００２】
【従来技術】アラキドン酸の代謝産物の一つであるトロンボキサンＡ２（以下、ＴＸＡ２と略す）は、ＴＸＡ２合成酵素の作用により生成され、血小板凝集作用や血管平滑筋収縮（血管収縮、気管支収縮）作用などの強力な生理活性を有する。
【０００３】
ＴＸＡ２が体内で過剰に産生されると、血小板凝集、血管閉塞、血管れん縮又は気管支収縮などを引き起こし、血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞又は狭心症などの発症原因となることが知られている。
【０００４】
従って、ＴＸＡ２合成酵素の阻害剤は、ＴＸＡ２の産生を選択的に抑制することにより、前記の血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞又は狭心症などに対する予防剤又は治療剤として有用性を期待することができる。
【０００５】
従来、ＴＸＡ２合成酵素阻害作用を有する化合物としては、塩酸オザクレル（製品名：ベガ、ドメナン）やセラトロダスト（製品名：ブロニカ）、ラマトロバン（製品名：バイナス）などが知られている。
【０００６】
しかし、これらの化合物は、血清ビリルビン値の上昇を伴う重篤な肝機能異常が稀に見られるなどの副作用を示すことが報告されている。
【０００７】
そこで、安全で副作用の無い天然物由来のＴＸＡ２合成酵素阻害剤の開発が強く求められているが、本発明者の知る限りでは、安全で副作用の無い天然物由来のＴＸＡ２合成酵素阻害剤は全く報告されていないのが現状である。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、安全で、副作用の無い天然物由来のＴＸＡ２合成酵素阻害剤、血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞又は狭心症の予防又は治療剤、それらを含有する経口用あるいは非経口用組成物、食品又は医薬を提供することである。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上述した課題を解決するために鋭意研究を行った結果、抗癌作用や免疫賦活作用などの目的で健康補助食品に利用されているプロポリスにＴＸＡ２合成酵素阻害作用を有することを見出し、本発明を完成させた。
【００１０】
すなわち、本発明は、プロポリス又はその抽出物を含有するＴＸＡ２合成酵素阻害剤血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞又は狭心症などに対する予防又は治療剤、これらを含有する経口用組成物、非経口用組成物、その食品、医薬に関する。
【００１１】
【発明の実施形態】本発明で使用するプロポリスは、蜂が集めた樹脂状の黒い塊であり、ブラジル産プロポリス、中国産プロポリス、オーストラリア産プロポリス、ウルグアイ産プロポリス、日本産プロポリスなど何れの産地のものでもよく、特に限定されるものではないが、汎用性の面から見て、ブラジル産プロポリス、中国産プロポリスが好ましい。
【００１２】
本発明におけるプロポリスは、プロポリス自体を乾燥させた乾燥物、その粉砕物、超臨界抽出物、水あるいはアルコール、エーテル、アセトンなどの有機溶媒による粗抽出物、および粗抽出物を分配、カラムクロマトなどの各種クロマトグラフィーなどで段階的に精製して得られた抽出物画分など、全てを含む。これらは単独で用いても良く、また２種以上混合して用いても良い。
【００１３】
例えば、ブラジル産プロポリスの原塊乾燥物１Ｋｇに９９．５％エタノール抽出液３Ｌを加え、室温で一晩浸漬することにより得た抽出液を、そのまま使用しても良いし、各種クロマトグラフィーを組み合わせて、精製したものを使用しても良い。
【００１４】
抽出されたプロポリス抽出物の溶液中のプロポリス抽出物濃度は特に制限はないが、１５〜７０質量％、好ましくは２０〜６０質量％程度が好ましい。この濃度が１５質量％未満では、乾燥時に多量のエタノールや水などの溶液を蒸発させる必要があり、７０質量％超えると溶液の粘度が高くなり過ぎ、加工適性が悪くなる恐れがある。
【００１５】
これらの本発明によるプロポリスの乾燥物又は抽出物にＴＸＡ２合成酵素阻害作用を有することは、従来から全く知られておらず、本発明により得られた新知見である。
【００１６】
本発明によるプロポリスは、卓越したＴＸＡ２合成酵素阻害作用を有しており、血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞あるいは狭心症などに対する予防又は治療を目的とした食品又は医薬として使用可能である。
【００１７】
本発明のプロポリスをＴＸＡ２合成酵素阻害剤、血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞又は狭心症などに対する予防又は治療剤含有食品又は医薬として製造することができる。
【００１８】
本発明のＴＸＡ２合成酵素阻害剤、血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞あるいは狭心症などに対する予防又は治療剤のような医薬の適用方法としては、経口投与又は非経口投与のいずれも採用することができる。投与に際しては、有効成分を経口投与、直腸内投与、注射などの投与方法に適した固体又は液体の医薬用無毒性担体と混合して、慣用の医薬製剤の形態で投与することができる。このような製剤としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などの固形剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤などの液剤、凍結乾燥製剤などが挙げられ、これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。医薬用無毒性担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングルコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、ゼラチン、アルブミン、水、生理食塩水などが挙げられる。また、必要に応じて、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤などの慣用の添加剤を適宜添加することもできる。
【００１９】
食品としては、そのまま、又は種々の栄養成分を加えて、若しくは飲食品中に含有せしめて、ＴＸＡ２合成酵素阻害、血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞あるいは狭心症などに対する症状改善、予防又は治療に有用な保健用食品又は食品素材として食される。例えば、上述した適当な助剤を添加した後、慣用の手段を用いて、食用に適した形態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル、ペーストなどに成形して食用に供してもよく、また種々の食品、例えば、ハム、ソーセージなどの食肉加工食品、かまぼこ、ちくわなどの水産加工食品、パン、菓子、バター、粉乳、発酵乳製品に添加して使用したり、水、果汁、牛乳、茶、清涼飲料などの飲料に添加して使用してもよい。
【００２０】
本発明のプロポリスの有効投与量は、患者の年齢、体重、症状、患者の程度、投与経路、投与スケジュール、製剤形態、素材の阻害活性の強さなどにより、適宜選択・決定されるが、例えば、経口投与の場合、一般に乾燥重量として１日当たり１０〜５００ｍｇ／ｋｇ体重程度、好ましくは、１日当たり１５０〜３５０ｍｇ／ｋｇ体重程度とされ、１日に数回に分けて投与してもよい。
【００２１】
プロポリス又はその抽出物の毒性は低く、例えばブラジル産プロポリスのエタノール抽出物を毎日１０００ｍｇ／ｋｇ、１００日間という長期間に亘ってラットに経口投与しても、死亡例は認められず、体重変化も観察されなかった。
【００２２】
【実施例】以下に実施例を挙げて、具体的に説明するが、これに限定されるものではない。
【００２３】
［製造例］プロポリス抽出物の製造
ブラジル産及び中国産プロポリス原塊それぞれ１０ｇに９９．５％エタノール（和光純薬工業）３Ｌを加え、５０℃で一晩浸漬した後、ロータリーエバポレーターにてエタノールを除去することにより、プロポリス抽出物をそれぞれ３２４ｍｇ、２１６ｍｇを得た。
【００２４】
［実施例］ＴＸＡ２合成酵素阻害活性試験
ＴＸＡ２合成酵素阻害活性試験は、ＷＡＤＥ，　Ｍ．　Ｌ．とＦＩＴＺＰＡＴＲＩＣＫ，　Ｆ．　Ａ．の方法（Ａｒｃｈ．　Ｂｉｏｃｈｅｍ．　Ｂｉｏｐｈｙｓ．，　３４７，　１７４−１８０，　１９９７）を一部改変して、ヒト血小板ミクロソームのトロンボキサン合成酵素阻害活性を調べた。
【００２５】
すなわち、１０ｍＭ　リン酸緩衝液（ｐＨ　７．４）中に、血小板ミクロソーム（０．５ｍｇ　タンパク質）、１０μＭ　プロスタグランジンＨ２（以下、ＰＧＨ２と略す）、５ｍＭ　エピネフリン、２μＭ　ヘミン、及び前記製造例で調製した各プロポリス抽出物を含む反応液（全量　０．２ｍｌ）を用いた。各プロポリス抽出物と血小板ミクロソームを２２℃で３分間プレインキュベーションした後、基質として１０μＭ　ＰＧＨ２を添加して２２℃で２分間反応させた。その後、塩化スズ溶液を添加して反応を停止し、生成したトロンボキサンＢ２（以下、ＴＸＢ２と略す）の量を、ＴＸＢ２ＥＩＡ（Ｅｎｚｙｍｅ　Ｉｍｍｕｎｏ　Ａｓｓａｙ）キット（アマシャム　ファルマシア　バイオテク社製）を用いて測定し、次式にて阻害率（％）を算出した。その結果を表１に示した。
【００２６】
【数１】

（ここで、Ａは阻害剤を含まない場合のＴＸＢ２量を表わし、Ｂは阻害剤を添加した場合のＴＸＢ２量を表わす。）
【００２７】
なお、本反応系におけるポジティブコントロールとしてのＴＸＡ２合成酵素阻害剤であるフレグラレート（ｆｕｒｅｇｒｅｌａｔｅ）のＩＣ_５０値（酵素活性を５０％阻害する濃度）は０．２１μＭであった。
【００２８】
表１から、本発明のプロポリス抽出物は、強力なＴＸＡ２合成酵素阻害活性を有することが分かる。
【００２９】
【表１】

【００３０】
以下に処方例を示す。
［錠剤の製造］
製造例で得られたブラジル産プロポリスのエタノール抽出物を用いて、常法に従って、下記の組成の錠剤を製造した。

【００３１】
［ジュースの製造］
製造例で得られた中国産プロポリスのエタノール抽出物を用いて、常法に従って、下記の組成のジュースを製造した。

【００３２】
【発明の効果】プロポリス又はその抽出物がＴＸＡ２合成酵素阻害作用を有することから、これを含有するＴＸＡ２合成酵素阻害剤は、血栓、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、心筋梗塞、脳梗塞あるいは狭心症などに対する予防又は治療剤、それらを含有する経口用組成物、非経口用組成物、食品又は医薬として有用である。このような組成物は、長期間服用しても安全で、確実な治療を行うことができる。

Claims (11)

1. プロポリス又はその抽出物を含有することを特徴とするトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤。
2. 請求項１記載のトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤を含有することを特徴とするアレルギー疾患予防又は／及び治療剤。
3. 請求項１記載のトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤を含有することを特徴とする気管支喘息の予防又は／及び治療剤。
4. 請求項１記載のトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤を含有することを特徴とするアレルギー性鼻炎の予防又は／及び治療剤。
5. 請求項１記載のトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤を含有することを特徴とする血栓の予防又は／及び治療剤。
6. 請求項１記載のトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤を含有することを特徴とする心筋梗塞の予防又は／及び治療剤。
7. 請求項１記載のトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤を含有することを特徴とする脳梗塞の予防又は／及び治療剤。
8. 請求項１記載のトロンボキサンＡ２合成酵素阻害剤を含有することを特徴とする狭心症の予防又は／及び治療剤。
9. 請求項１〜８のいずれか記載の剤を含む経口用組成物又は非経口用組成物。
10. 食品である請求項９記載の経口用組成物。
11. 医薬である請求項９記載の経口用組成物又は非経口用組成物。