JP2003528820A

JP2003528820A - 果実、野菜、および種子の消毒薬

Info

Publication number: JP2003528820A
Application number: JP2001544498A
Authority: JP
Inventors: ケスタティス・トートビダス; ジェフリー・エフ・アンドリューズ
Original assignee: 3M Innovative Properties Co
Current assignee: 3M Innovative Properties Co
Priority date: 1999-11-24
Filing date: 2000-10-25
Publication date: 2003-09-30
Also published as: WO2001043549A2; BR0015806A; WO2001043549A3; CA2390483C; EP1231838A2; EP1231838B1; DE60043451D1; US20060276541A1; MXPA02005127A; EP2140760A3; EP2140760A2; AU4503701A; CA2390483A1

Abstract

(57)【要約】植物および植物器官表面の微生物レベルを低減するのに使用することができる抗菌製剤を記載する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】技術分野本発明は、植物または植物器官上の微生物の増殖を阻止する方法に関する。

【０００２】背景アメリカ合衆国では毎年、食品伝染疾患によって、推定で７６００万件の疾患
が生じ、５０００人が死亡しており、直接医療費および間接医療費は年間で１０
億ドルであると推定されている。Ｍｅａｄ他著，Ｅｍｅｒｇ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄ
ｉｓ．，５（５）：６０７−６２５（１９９９）。一般的な食物病原体には、サ
ルモネラ、リステリアモノサイトゲネス、大腸菌、カンピロバクタージェジュニ
、セレウス菌、およびノーウォーク様ウイルスが含まれる。食品伝染疾患の発生
は通常、汚染された肉製品、生乳、または卵などの家禽製品に関連している。し
かしながら、果実および野菜もまた食品伝染疾患の原因であるという認識が浮上
している。例えばＯ１５７：Ｈ７などの腸管出血性大腸菌株の発生は、低温殺菌
されていないリンゴジュースおよび芽を摂取することに関連している。したがっ
て、果実、野菜、および種子表面から病原体を減少させるか、または除去し、か
つ果実、野菜、および種子の品質保持期間を延ばす方法が必要とされている。

【０００３】概要本発明は、脂肪酸モノエステル、エンハンサー、および１種または複数種の界
面活性剤を含有し、食品の微生物レベルを低減するのに有用な抗菌製剤に基づく
。例えば、芽を製造するか、または新鮮な低温殺菌していないオレンジジュース
を製造する場合には、発芽種子もしくはオレンジ表面にある接種病原菌を５対数
値減少させて、規制条件を守ることが必要とされるか、あるいはそれらの製品を
飲食すると健康を損なう可能性があるという注意書きのラベルを、その芽または
ジュースに付けなければならないだろう。しかしながら、本明細書で開示する製
剤および方法を用いて、食品の病原菌を５対数値減少させることができる。さら
に、抗菌製剤の成分は既に、消費者に表示されている複数の食品添加物を有する
か、または一般に安全であると認められており（ＧＲＡＳ）、それによって安全
に対する懸念が最小限に抑えられる。本発明の好ましい製剤は、有機物質によっ
て失活せず、植物および植物器官の表面に再び適用することができる。

【０００４】一態様において、本発明は、脂肪酸モノエステル、エンハンサー、２種類以上
のアニオン界面活性剤（例えば、２種類のアニオン界面活性剤）および賦形剤を
含む抗菌製剤を特徴とする。脂肪酸モノエステルは、グリセロールモノラウレー
ト、グリセロールモノカプリレート、グリセロールモノカプレート、プロピレン
グリコールモノラウレート、プロピレングリコールモノカプリレート、プロピレ
ングリコールモノカプレート、またはそれらの組み合わせであることが可能であ
る。エンハンサーは、ＥＤＴＡもしくはその塩などのキレート剤；有機酸などの
酸（例えば、乳酸、マンデル酸、コハク酸、酒石酸、アスコルビン酸、サリチル
酸、安息香酸、酢酸、リンゴ酸またはアジピン酸）；またはエタノールもしくは
イソプロパノールなどのアルコールであることが可能である。２種類以上のアニ
オン界面活性剤は、アシルラクチレート塩、ジオクチルスルホスクシネート塩、
ラウリル硫酸塩、ドデシルベンゼンスルホン酸塩、およびＣ８〜Ｃ１８脂肪酸の
塩からなる群から選択することができる。賦形剤は、水、プロピレングリコール
、ポリエチレングリコール、グリセリン、エタノール、イソプロパノール、また
はそれらの組み合わせであることが可能である。その製剤は、さらに着香剤を含
有することが可能である。

【０００５】本発明は、植物または植物器官の微生物レベルを低減する方法もまた特徴とす
る。この方法は、脂肪酸モノエステル、エンハンサー、２種類以上のアニオン界
面活性剤、および賦形剤を含有する有効量の抗菌製剤と植物または植物器官とを
接触させることを含む。

【０００６】他の態様において、本発明は、脂肪酸モノエステル、エンハンサー、界面活性
剤、および賦形剤を含有する抗菌製剤であり、脂肪酸モノエステルの濃度が、即
使用可能な製剤に対して約０．２重量％〜約２．０重量％であり、エンハンサー
濃度が、即使用可能な製剤に対して約１．１重量％〜約２５重量％（例えば、１
．１〜１５重量％または１．１〜２．１重量％）である、即使用可能な抗菌製剤
を特徴とする。その製剤はさらに、着香剤を含有することが可能である。即使用
可能な有効量のかかる抗菌製剤と植物または植物器官とを接触させることを含む
、植物または植物器官上の微生物レベルを低減する方法もまた記載する。包装材
料およびその包装材料内の抗菌製剤を備える製造物品もまた特徴とし、その包装
材料は、微生物レベルを低減するために植物または植物器官に製剤をそのまま使
用できることを表示するラベルを含む。

【０００７】他の態様では、本発明は、脂肪酸モノエステル組成物を有する第１容器と、エ
ンハンサーを有する第２容器とを備えるキットを特徴とする。その脂肪酸モノエ
ステル組成物は、脂肪酸モノエステル、界面活性剤、および賦形剤、さらに一部
の実施形態では、２種類以上のアニオン界面活性剤を含有する。脂肪酸モノエス
テルは、グリセロールモノラウレート、グリセロールモノカプリレート、グリセ
ロールモノカプレート、プロピレングリコールモノラウレート、プロピレングリ
コールモノカプリレート、プロピレングリコールモノカプレート、またはそれら
の組み合わせであることが可能である。特に有用なエンハンサーは乳酸であり、
特に有用な賦形剤はプロピレングリコールであり、有用な脂肪酸モノエステルは
プロピレングリコールモノカプリレートである。

【０００８】そのキットはさらに、第１容器および第２容器の内容物を混合して、植物およ
び植物器官上の微生物レベルを低減するのに有効な抗菌製剤が生成されることを
示すラベルまたは添付文書を備えることが可能である。さらに、そのラベルまた
は添付文書によって、植物または植物器官に適用する前に抗菌製剤を希釈するこ
とを示すことができる。

【０００９】本発明は、抗菌製剤を含む植物または植物器官もまた特徴とし、その抗菌製剤
は、脂肪酸モノエステル、エンハンサー、界面活性剤、および賦形剤を含有する
。その製剤はさらに、着香剤およびまたは食品等級コーティングを含んでもよい
。抗菌製剤は、植物もしくは植物器官と食品等級コーティングとの間に介在させ
ることができる。抗菌製剤はまた、食品等級コーティングと混合することが可能
である。

【００１０】別段の指定がない限り、本明細書中で使用するすべての技術および科学用語は
、本発明が属する分野の当業者によって通常理解される意味と同じ意味を有する
。本明細書に記載のものと同様または等しい方法および材料を使用して、本発明
を実施することができるが、適切な方法および材料を以下に記載する。本明細書
に記載のすべての出版物、特許出願、特許、および他の参考文献の開示内容全体
を参照により援用する。抵触の場合には、定義を含む本明細書によって規定され
るだろう。さらに、その材料、方法および実施例は単に実例として示すものであ
り、制限することは意図されていない。

【００１１】本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から
理解されよう。

【００１２】詳細な説明本発明は、植物および植物器官（例えば、種子、野菜、および果実）上の微生
物レベルを低減するのに有用な製剤に関する。適切な植物および植物器官には、
自然のままの農産物（つまり、未加工製品）および処理製品が含まれる。未加工
農産物の非制限的な例には、アルファルファの種子、芽、キュウリ、メロン、タ
マネギ、レタス、キャベツ、ニンジン、ジャガイモ、ナス、グレープフルーツ、
レモン、ライムおよびオレンジなどの柑橘類果実、バナナ、パイナップル、キー
ウィ、およびリンゴが含まれる。加工製品には、裂かれた、スライスされた、刻
まれた、細断された、もしくは切り刻まれた果実または野菜、ならびに果実また
は野菜から得られるジュースが含まれる。

【００１３】本発明の抗菌製剤は、１種または複数種の脂肪酸モノエステルと、１種または
複数種の界面活性剤と、１種または複数種のエンハンサーとを含有し、植物およ
び植物器官上のグラム陰性細菌およびグラム陽性バク細菌、ウイルス、および菌
類を含む微生物のレベルを低減するのに使用することができる。本明細書中で使
用する、「微生物レベルの低減」とは、微生物の増殖を阻止することと、微生物
の死滅を促進することと、植物もしくは植物器官表面から微生物を除去すること
を含む。本発明の製剤は、大腸菌、サルモネラ血清型を含むネズミチフス菌、リ
ステリア（例えば、リステリアモノサイトゲネス）、カンピロバクター（例えば
、カンピロバクタージェジュニ）、赤痢菌属、およびセレウス菌を含む食品伝染
ヒト病原体のレベルを低減するのに特に有用である。植物および植物器官表面の
植物病原体のレベルを低減することも可能であり、植物および植物器官の品質保
持期間を延ばすことができる。植物病原体の非制限的な例には、エルウィニアカ
ロトボーラ（Ｅｒｗｉｎｉａｃａｒｏｔｏｖｏｒａ）、フザリウム（Ｆｕｓａ
ｒｉｕｍ）種、ボトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）種、疫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｔｈ
ｅｒａ）種、フォーマ（Ｐｈｏｍａ）種、バーティシリウム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌ
ｉｕｍ）種、および炭疽病（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）種が含まれる。本
発明の製剤は、枯草菌からの胞子など、植物および植物器官表面における胞子の
生存度を低減するのにもまた有効である。

【００１４】抗菌製剤抗菌製剤に使用するのに適した脂肪酸モノエステルは一般に、食品等級でＧＲ
ＡＳと見なされ、かつ／または米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって認可された
食品添加物である。特に、Ｃ_８〜Ｃ_１２脂肪酸から誘導される１種または複数種
の脂肪酸モノエステル、例えばカプリル酸、カプリン酸もしくはラウリン酸のグ
リセロールモノエステル、および／またはカプリル酸、カプリン酸もしくはラウ
リン酸のプロピレングリコールモノエステルが本発明の製剤で有用である。脂肪
酸モノエステルの組み合わせを標的の微生物に合わせることができる。例えば、
植物または植物器官表面の菌類レベルを低減することが望ましい場合には、ラウ
レートモノエステルをカプリレートモノエステルおよび／またはカプレートモノ
エステルと組み合わせることができる。

【００１５】本発明で有用なモノグリセリドは通常、未反応グリセロール、モノグリセリド
、ジグリセリド、およびトリグリセリドの混合物の形状で入手可能である。した
がって、高濃度（例えば、約８５重量％を超える濃度、好ましくは約９０重量％
）のモノグリセリドを含有する材料を使用することが好ましい。特に有用な市販
の材料の例には、商品名ＬＡＵＲＩＣＩＤＩＮ（商標）としてＭｅｄ−Ｃｈｅｍ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社（ミシガン州イーストランシング）から市販のグ
リセロールモノラウレート（ＧＭＬ）、商品名ＰＯＥＭ（商標）Ｍ‐１００およ
びＰＯＥＭ（商標）Ｍ‐２００としてそれぞれＲｉｋｅｎＶｉｔａｍｉｎ社（
日本、東京）から市販のグリセロールモノカプリレート（ＧＭ‐Ｃ８）およびグ
リセロールモノカプレート（ＧＭ‐Ｃ１０）、商品名「ＭＯＮＯＭＵＬＳ（商標
）９０Ｌ−１２」としてＨｅｎｋｅｌ社（ドイツ）から市販の材料が含まれる。
プロピレングリコールモノカプリレート（ＰＧ‐Ｃ８）、プロピレングリコール
モノカプレート（ＰＧ‐Ｃ１０）、およびプロピレングリコールモノラウレート
（ＰＧ‐Ｃ１２）が、ＵｎｉｑｕｅｍａＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ社（イリ
ノイ州シカゴ）から市販されている。

【００１６】適切なエンハンサーは、有機酸、キレート剤、およびアルコールである。エン
ハンサーは、食品等級がＧＲＡＳと示され、かつ／またはＦＤＡにより認可され
た食品添加物であることが好ましい。有機酸には、例えば乳酸、酒石酸、アジピ
ン酸、コハク酸、クエン酸、アスコルビン酸、リンゴ酸、マンデル酸、酢酸、ソ
ルビン酸、安息香酸、およびサリチル酸が含まれる。キレート剤には、例えばエ
チレンジアミン四酢酸（ＥＴＤＡ）およびその塩が含まれる。乳酸およびマンデ
ル酸が、特に有用なエンハンサーである。アルコールは、例えばエタノール、イ
ソプロパノール、またはオクタノールもしくはデシルアルコールなどの長鎖アル
コールである。

【００１７】抗菌製剤は、濃縮物を希釈した場合に、水にモノエステルを溶解または分散す
るのを促進し、かつ／あるいは農産物および種子表面から付着微生物を放すか、
または除去するのに役立ち、その結果、微生物をより容易に接触させ、製剤によ
って駆除することができる、１種または複数種の界面活性剤を含有することも可
能である。例えば、抗菌製剤は、アシルラクチレート塩、ジオクチルスルホスク
シネート塩、ラウリル硫酸塩、ドデシルベンゼンスルホン酸塩、およびＣ８〜Ｃ
１８脂肪酸の塩など、２種類以上のアニオン界面活性剤を含有することが可能で
ある。適切な塩には、ナトリウム塩、カリウム塩、またはアンモニウム塩が含ま
れる。アシルラクチレートには、例えばステアロイル−２−乳酸ナトリウムまた
はカルシウム、イソステアロイル−２−乳酸ナトリウム、ラウロイル−２−乳酸
ナトリウム、カプロイル乳酸ナトリウム、ココイル乳酸ナトリウム、およびベヘ
ノイル乳酸ナトリウムが含まれる。非イオン性界面活性剤には、デカグリセリル
テトラオレエートなどのグリセロールエステル；ＵｎｉｑｕｅｍａＩｎｔｅｒ
ｎａｔｉｏｎａｌ社（イリノイ州シカゴ）からＳＰＡＮ（商標）２０として市販
のモノラウリル酸ソルビタンなどのソルビタンエステル；およびポリアルキレン
オキシドのブロック共重合体、例えばＢＡＳＦ社（ニュージャージー州パーシッ
パニー）からＰｌｕｒｏｎｉｃｓ（商標）およびＴｅｔｒｏｎｉｃｓ（商標）と
して市販のポリエチレンオキシドおよびポリプロピレンオキシドが含まれる。ス
ルホコハク酸ジオクチルナトリウムは、ＧＥＭＴＥＸ（商標）ＳＣ４０界面活性
剤（イソプロパノール中でスルホコハク酸ジオクチルナトリウム４０％）として
Ｆｉｎｅｔｅｘ社（ノースカロライナ州スペンサー）から市販されている。カプ
ロイル乳酸ナトリウムは、ＲＩＴＡ（イリノイ州ウッドストック）からＰＡＴＩ
ＯＮＩＣ（商標）１２２Ａとして市販されている。ラウリル硫酸ナトリウムは、
ＳｔｅｐａｎＣｈｅｍｉｃａｌ社（イリノイ州ノースフィールド）から市販さ
れている。

【００１８】本発明の製剤は、非水溶液もしくは水溶液または懸濁液中にあることが可能で
ある。その溶液または懸濁液を調製するのに適切な賦形剤は安全であり、ＦＤＡ
および米国環境保護局（ＥＰＡ）などの規制機関に容認されている。特に許容可
能な賦形剤には、水、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセ
リン、エタノール、イソプロパノール、およびそれらの組み合わせが含まれる。
プロピレングリコールに溶解した脂肪酸のプロピレングリコールモノエステルの
製剤またはグリセリンに溶解した脂肪酸のグリセロールモノエステルの製剤によ
って、賦形剤とエステルとの間にエステル交換反応が生じる可能性を最小限にす
ることができる。グリセリンにグリセロールモノラウレートを添加すると、溶液
の代わりに弱いゲルが生成するが、ゲルの形成は、エタノールもしくはイソプロ
パノールなどの補助溶剤を添加することによって防ぐことができる。

【００１９】微生物の増殖を有効に阻止するのに必要とされる、前述の成分の濃度は、標的
とされる微生物の種類および使用する製剤（例えば、存在するエンハンサーおよ
び界面活性剤の種類）によって異なる。単独で考えると、各成分の濃度または量
では、広範な病原性もしくは望ましくない微生物は死滅しないか、あるいはかか
る微生物の数が許容可能なレベルまで減少しない。したがって共に使用した場合
には、製剤の成分は、同一条件下において単独で使用した同一成分と比較すると
、植物または植物器官に相乗的抗菌活性を提供する。

【００２０】有効量の各成分は、本明細書中の教示および技術上既知のアッセイを用いて、
当業者により容易に確かめることができる。製剤を濃縮物として調製することが
可能であり、次いで使用する前に希釈する。通常、抗菌製剤に対して、脂肪酸モ
ノエステルは約０．００１〜３０重量％（ｗｔ％）であり、エンハンサーは約０
．００１〜３０重量％であり、１種または複数種の界面活性剤は０．００１〜３
０重量％である。エンハンサーが、イソプロパノールもしくはエタノールなどの
アルコールである場合には、相乗的抗菌活性が維持される最低濃度は約１５重量
％（例えばエタノールについては１５〜３０重量％、イソプロパノールについて
は１５〜２０重量％）である。デシルアルコールなどの長鎖アルコールに関して
は、相乗的抗菌活性が維持される最低濃度は約１重量％（例えば、１〜２重量％
）であり、１−オクタノールについては、最低濃度が約０．５重量％（例えば、
０．５〜１．０重量％）である。例えば、即使用可能な製剤（つまり、植物また
は植物器官に適用される製剤）は、脂肪酸モノエステルを０．０１〜５．０重量
％、エンハンサーを約０．５〜３０重量％、界面活性剤を約０．５重量％〜５．
０重量％含有することが可能である。特に、即使用可能な製剤は、脂肪酸モノエ
ステルを約０．２重量％〜約２．０重量％、エンハンサーを約１．１重量％〜約
２５．０重量％（例えば、１．１〜１５．０重量％または１．１〜２．１重量％
）、１種または複数種の界面活性剤を約０．１重量％〜約１．５重量％含有する
ことが可能である。

【００２１】抗菌製剤の他の成分には、例えば食品等級用ワックスなどの食品等級コーティ
ング、紫外線による不活性化または劣化から製剤を保護する成分、着色剤、香り
増強剤、トラガカントゴム、アカシアゴム、カラゲナン、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（オ
ハイオ州クリーブランド、Ｂ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉｃｈ社）、ガーゴム、およびセ
ルロースガムなどの粘度調節剤、シリコーン消泡剤などの消泡剤、例えばポリジ
メチルシロキサン（ミシガン州ミッドランド、ＤｏｗＣｏｒｎｉｎｇ社）、固
着剤、または天然油もしくは人工甘味料などの着香剤が含まれる。

【００２２】植物および植物器官の処理例えば噴霧、浸漬、ワイピング、ブラッシング、スポンジング、またはパジン
グによって、本発明の製剤を植物および植物器官に塗布することができる。植物
または植物器官の表面全体を、製剤で完全に湿潤させることが好ましい。温度範
囲２℃〜７０℃で製剤を塗布することが可能であり、微生物レベルを低減するの
に十分な時間（例えば、３０秒〜２０分）植物または植物器官表面と接触する。
通常、温度が上がるのに伴って、塗布時間が少なくなる。製剤を４０℃〜６５℃
（例えば、４４〜６０℃、４６〜５８℃、４８〜５６℃、または５０〜５４℃）
に加熱し、まだ温かい間に表面に塗布することが、植物または植物器官の微生物
レベルを低減するのに特に有効である。液体賦形剤は、例えば空気乾燥によって
植物もしくは植物器官表面から除去することができる。

【００２３】例えば、オレンジなどの果実を本発明の抗菌製剤で処理し、空気乾燥させ、次
いで食品等級用ワックスでコーティングすることができる。これによって、オレ
ンジと食品等級コーティングとの間に介在する抗菌製剤を有するオレンジが得ら
れる。代替方法としては、抗菌製剤および食品等級コーティングを塗布前に混合
することが可能である。

【００２４】本発明の抗菌製剤で植物および植物器官を処理しても、植物または植物器官に
悪影響を及ぼすことはない。例えば、処理した植物または植物器官の風味は変化
せず、処理した種子の生存度は保持される。

【００２５】製造物品本発明の製剤は、キットにパッケージすることができる。脂肪酸モノエステル
は、特にヒドロキシ置換有機酸もしくはキレート剤などのエンハンサー存在下で
本質的に活性である。例えば、モノエステルは水性媒体中でそれに対応する脂肪
酸に加水分解し、ヒドロキシ含有エンハンサー（例えば、乳酸）とエステル交換
反応するか、またはヒドロキシ含有溶媒とエステル交換反応する可能性がある。
これらの反応の結果、液体組成物の抗菌活性が低減し、品質保持期間が１年未満
に短くなる。

【００２６】したがって、２液系（キット）に便利にパッケージして、安定性を向上させる
ことができる。２液系の一例では、エンハンサーを除く、製剤のすべての成分が
１つの容器内に存在し、エンハンサーは別の容器内に存在する。植物または植物
器官を処理する前に、それぞれの容器の内容物を共に混合し、通常は希釈する。
一部の実施形態では、２種類の成分を保存する別個の区画を有する１つの容器内
にパッケージする。例えば、エンハンサーは一方の区画中にあり、脂肪酸モノエ
ステル、１種または複数種の界面活性剤および賦形剤は、同一容器の第２区画中
にある。かかる２区画容器には通常、２つの区画間に壊れやすいもしくは移動可
能な間仕切りが使用される。次いで、その間仕切りを壊すかまたは移動させて、
混合させることができる。代替方法としては、各区画の内容物全体を混合するこ
となく、各区画の内容物の一部を除去することができるように、容器を構成する
。２区画容器の説明については、例えば、米国特許第５，８６２，９４９号、同
第６，０４５，２５４号および同第６，０８９，３８９号を参照のこと。

【００２７】驚くべきことに、本発明の２液系によって示される抗菌活性は、処理するごく
短時間（例えば、３日未満）前に調製しておいた、対応する製剤の活性よりも時
折極めて高かった。試験評価の一部では、例えば大腸菌もしくはサルモネラを接
種したアルファルファでは、６対数値を超える細菌の減少が達成された。

【００２８】本発明をさらに以下の実施例で説明するが、特許請求の範囲に記載の本発明の
範囲を制限するものではない。

【００２９】実施例本発明の理解を助けるために以下の実施例を提供するが、その範囲を制限する
ものと解釈すべきではない。別段の指定がない限り、すべての部およびパーセン
テージは重量による。

【００３０】用語モノエステルＧＭＬ：Ｍｅｄ−ＣｈｅｍＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社（ミシガン州イース
トランシング）から商品名「ＬＡＵＲＩＣＩＤＩＮ（商標）」として市販のグリ
セロールモノラウレート。ＰＧＭＣ８：ＵｎｉｑｕｅｍａＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ社（イリノイ州
シカゴ）から市販のプロピレングリコールモノカプリレート。ＰＧＭＣ１０：ＵｎｉｑｕｅｍａＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ社（イリノイ
州シカゴ）から市販のプロピレングリコールモノカプレート。

【００３１】エンハンサー物質ＬＡ：Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ社（ニュージャージー州フィリップスバーグ）から
市販の乳酸、ＵＳＰ。ＭＡ：ＡｖｏｃａｄｏＲｅｓｅａｒｃｈＣｈｅｍｉｃａｌｓ社（英国、ヒ
ーシャム）から市販のマンデル酸、ＵＳＰ。

【００３２】界面活性剤ＰＡＴ１２２Ａ：ＲＩＴＡ社（イリノイ州ウッドストック）から市販のＰＡＴ
ＩＯＮＩＣ（商標）１２２Ａアニオン界面活性剤（カプロイル乳酸ナトリウム）
。ＮａＬＳＯ_４：ＳｔｅｐａｎＣｈｅｍｉｃａｌ社（イリノイ州ノースフィー
ルド）から市販のラウリル硫酸ナトリウム、アニオン界面活性剤。ＤＯＳＳ：ＡｍｅｒｉｃａｎＣｙａｎａｍｉｄ社（ニュージャージー州ウェ
イン）から市販のスルホコハク酸ジオクチルナトリウム（エタノール中で５０重
量％）、アニオン界面活性剤。ＧＥＭＳＣ４０：Ｆｉｎｅｔｅｘ社（ノースカロライナ州スペンサー）から
市販のＧＥＭＴＥＸ（商標）ＳＣ４０アニオン界面活性剤（イソプロパノール中
でスルホコハク酸ジオクチルナトリウム４０重量％）。ＳＰＡＮ２０：ＵｎｉｑｕｅｍａＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ社（イリノイ
州シカゴ）から市販のＳＰＡＮ（商標）非イオン性界面活性剤（モノラウリル酸
ソルビタン）。ＰＬＵＲＰ−６５：ＢＡＳＦ（ニュージャージー州パーシッパニー）から市
販のＰＬＵＲＯＮＩＣ（商標）Ｐ−６５非イオン性界面活性剤。

【００３３】賦形剤／溶媒ＰＧ：Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ社（ニュージャージー州フィリップスバーグ）から
市販のプロピレングリコール。

【００３４】試験法アルファルファ種子／接種の方法：接種したアルファルファ種子上の抗菌剤と
して、以下の試験法に従って試料製剤を評価した。細菌培養の調製。トリプチケ
ースソイブロス（ＴＳＢ）（ＤｉｆｃｏＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＶＷＲ
Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）培地（５ｍｌ）を、寒天平板から採取した指定の細菌コ
ロニー（例えば、大腸菌またはサルモネラ血清型Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）で接
種し、３５℃で１６〜１８時間インキュベートした。得られた第１細胞培養から
、次いでループフル（ｌｏｏｐｆｕｌｌ）１０マイクロリットルをＴＳＢ培地５
ｍｌ中に接種し、３５℃で１６〜１８時間インキュベートした。得られた第２細
胞培養から、次いで０．５ｍｌをＴＳＢ培地１５０ｍｌ中に接種し、３５℃で１
６〜１８時間インキュベートして、約１０^９コロニー形成ユニット（ＣＦＵ）／
ｍｌを含有する細菌培養を得た。通常、４種の菌株の混合物を用いた。各菌株を
記載のように別個に増殖させ、その結果得られた培養液（それぞれ１５０ｍｌ）
を、種子に接種する直前に混合して、混合菌株（カクテル）６００ｍｌを得た。
サルモネラ血清型Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの場合と同様に、単一菌株または血清
型（ｓｅｒ．）を使用する場合には、次いで、種子の接種に使用するために細菌
培養６００ｍｌを増殖させた。

【００３５】アルファルファ種子の接種。通常、細菌培養を周囲温度に冷却して、層流フー
ドにおける２Ｌビーカー中に注いだ。アルファルファ種子（７５０ｇ）を加え、
プラスチック製スパチュラで１分間迅速に攪拌して、すべての種子が完全に湿潤
するようにした。２層のチーズクロスで覆われた金網（０．６ｃｍの穴）から作
製された３つのラック上に、その種子を注いだ。それぞれのスクリーンの下に受
け皿を置いて、流出物を受け止めた。チーズクロス上の薄層中にその種子を広げ
、４８時間乾燥させた。第１日目には、種子およびチーズクロスが乾燥している
と思われるまで、２時間毎に種子を攪拌した。第２日目には、種子がチーズクロ
スから放れ、再分布した。４８時間乾燥した後、種子を密封可能なプラスチック
製バッグに移し、使用前に少なくとも４日間冷蔵庫内にて５℃で保存した。

【００３６】試料製剤の評価。細菌を接種したアルファルファ種子のアリコート１０ｇを４
００ｍｌビーカー中に入れ、試料製剤１０ｍｌを添加した。通常、試料製剤は、
製剤濃縮物１部と水１５部とからなり、種子を添加する前に指定の温度（通常５
０℃）に温めた。１００ｒｐｍの回転振とう機の水浴に、指定の温度で指定の時
間（一般に、１０〜１５分）種子を浸漬した。次いで、液体をデカントし、ペー
パータオルで余分な液体を吸い取り、ワイヤーメッシュ篩上で種子を回収した。
その種子を８０ｍｌストマッカーバッグに移し、ｌｅｔｈｅｅｎブロス（Ｄｉｆ
ｃｏＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＶＷＲＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）２０ｍｌを
添加した。１ＮのＮａＯＨでｐＨを７．５に調節した。ストマッカーバッグをス
トマッカー８０（ＳｅｗａｒｄＬａｂＳｙｓｔｅｍ、ＶＷＲＳｃｉｅｎｔ
ｉｆｉｃ）内に設置し、通常速度設定で６０秒間処理した。必要な場合には、ス
トマッキングした懸濁液のｐＨをｐＨ７にまで調節する。上清試料１０ｍｌを１
５ｍｌ円錐形チューブに移し、連続希釈して、２５〜２５０ＣＦＵ／平板菌数範
囲を得た。次いで、細菌に適した選択培地寒天平板上に試料を置いた。サルモネ
ラ血清型を数えるのに、ＸＬＤ寒天培地（Ｄｉｆｃｏ、ＶＷＲＳｃｉｅｎｔｉ
ｆｉｃ）を使用し、大腸菌株を数えるのに、マッコンキーソルビトール寒天培地
（Ｄｉｆｃｏ、ＶＷＲＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用した。すべてのプレート
を３５℃で２４時間インキュベートし、形成したコロニーをカウントした。

【００３７】試料製剤の代わりに脱イオン水１０ｍｌを使用したことを除いては、上述と同
様の手法で水の対照を評価した。初期の接種材料数を得るために、細菌を接種し
た種子１０ｇおよびｌｅｔｈｅｅｎブロス１０ｍｌをストマッカーバッグに入れ
た。そのストマッカーバッグを振とう機‐水浴中のビーカー内に入れ、製剤処理
と同じ時間攪拌した。浸漬期間の終わりに、ｌｅｔｈｅｅｎブロス−種子懸濁液
のｐＨを７．０に調節し、試料製剤処理と同じ手法でその試料を処理した。それ
ぞれの処理、水の対照、および初期接種材料試料を１０倍に複製し、示すデータ
はこれらの複製の平均である。

【００３８】オレンジの実験室方法：接種したオレンジ上の抗菌剤として、以下の試験法に
従って実験室条件下において試料製剤を評価した。

【００３９】細菌培養の調製およびオレンジの接種。５ポンドのオレンジの袋を小売雑貨店
から手に入れ、個々のオレンジの直径を測定し、きれいにして、一般的な大腸菌
細菌を接種した。オレンジは、大腸菌（ＡＴＣＣ２５９２２）ブロス２０００
ｍｌ中に室温で１５分間浸漬することによって接種した。その大腸菌ブロスは、
トリプトソイ寒天（ＴＳＡ、ＤｉｆｃｏＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）平板から
１つの大腸菌コロニーを選択し、そのコロニーを他のＴＳＡ平板に画線すること
によって調製した。新しく画線されたＴＳＡ平板を３５℃で一晩インキュベート
した。滅菌ダクロンスワブを用いて、平板から得た増殖を回収し、ニュートリエ
ントブロス（ＤｉｆｃｏＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）２０００ｍｌ中に分散さ
せた。そのニュートリエントブロスを３５℃で一晩（２０〜２４時間）インキュ
ベートした。接種したオレンジを、試料製剤で処理する前に１時間乾燥させた。
一部のオレンジは製剤で処理せず、果実上の大腸菌の接種レベルを決定するのに
用いた。

【００４０】試料製剤の評価。接種した２個のオレンジを、指定の温度（一般に２２℃およ
び５０℃）で製剤濃縮物１部（１３３．３ｍｌ）と滅菌水１５部（２０００ｍｌ
）から調製しておいた試料製剤を含有するビーカー中に入れた。オレンジを２分
間浸漬し、次いで１０〜１５秒間すすぐために、指定の温度で滅菌水２０００ｍ
ｌを含有するビーカーに移した。すすぎ水からオレンジを取り出し、冷却された
０．１％ペプトン水（マサチューセッツ州グロスター、ＮｕｔｒａｍａｘＰｒ
ｏｄｕｃｔｓ社）５００ｍｌと共に、滅菌プラスチック製バッグに入れた。その
プラスチック製バッグを他のプラスチック製バッグの中に入れ、次いで回転振と
う機（１５０振動／分）の氷の上に１時間置いた。次いで、アリコート（１１ｍ
ｌ）を０．１％ペプトン水９９ｍｌ中にピペッティングし、連続希釈を行い、Ｐ
ｅｔｒｉｆｉｌｍ（商標）大腸菌計数平板（ミネソタ州セントポール、３Ｍ社）
上に置いた（希釈液１ｍｌ／平板）。各希釈液の４つの複製をプレーティングし
た。すべての平板を３５℃で２４±２時間インキュベートした。

【００４１】インキュベートした後、コロニーを数えた。Ｐｅｔｒｉｆｉｌｍ（商標）大腸
菌計数平板上で、気泡に伴う青いコロニーは、大腸菌コロニーと見なす。４つの
複製の未処理菌数（ＣＦＵ／ｍｌ）を各試料製剤について平均した。オレンジの
平均面積を平均直径から計算し、オレンジ（５００ｍｌ）の処理に使用した希釈
液のｍｌの数字を処理したオレンジ２個の平均面積で割ることによって、換算計
数を決定した。この換算計数を用いて、計数平板から得た実際のコロニー数／ｍ
ｌをコロニー／オレンジ面積ｃｍ^２に換算した。次のように、各試料の平均ＣＦ
Ｕ／ｍｌに換算計数（ｍｌ／ｃｍ^２）を掛けて、オレンジのＣＦＵ／ｃｍ^２の計
数を得た。この計数を底１０の対数に変換し、初期接種レベルから減じて、細菌
の対数減少値を示した。

【００４２】オレンジの初期接種レベルを、接種しかつ乾燥させたオレンジ２個を取り、冷
却された０．１％ペプトン水５００ｍｌを有する滅菌プラスチック製バッグ中に
それを入れることによって決定した。そのプラスチック製バッグを他のプラスチ
ック製バッグの中に入れ、次いで回転振とう機（１５０振動／分）の氷の上に１
時間置いた。次いで、このペプトン溶液をサンプリングし、処理したオレンジと
同じ同じ方法で希釈し、上述のようにＰｅｔｒｉｆｉｌｍ（商標）大腸菌計数平
板上に置いた。オレンジの初期接種レベルを得るために、コロニーをカウントし
、処理したオレンジのコロニー数について記載のように計算を行った。

【００４３】オレンジのパイロットプラント法：以下の試験法に従って工業用処理装置を用
いて、パイロットプラント条件下において、接種したオレンジ上の抗菌剤として
試料製剤を評価した。パイロットプラント実験を、フロリダ州レイクアルフレッ
ドにあるＣｉｔｒｕｓＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＥｄｕｃａｔｉｏｎＣｅ
ｎｔｅｒ（ＣＲＥＣ）で行った。

【００４４】オレンジの接種。大腸菌のカクテル（ＡＴＴＣ２５９２２、ＡＴＴＣ３５
２１８、およびＡＴＴＣ１１２２９）を使用したことを除いては、熟した、中
程度の大きさの、畑で摘んだオレンジをきれいにして、オレンジの実験室方法で
先に記載のように、大腸菌ブロス培養液２０リットル中に浸漬することによって
大腸菌属の細菌を接種した。次いで、試料製剤で処理する前に、オレンジを１時
間乾燥させた。いくつかのオレンジは試料製剤で処理しなかったが、果実の大腸
菌接種レベルを決定するのに使用した。

【００４５】試料製剤の評価。接種したオレンジ２０個を、指定の温度（一般に２２℃およ
び５０℃）で製剤濃縮物１部と滅菌水１５部から調製しておいた試料製剤（１０
Ｌ）を含有するタンク中に入れた。希釈製剤を調製して１時間以内にオレンジを
加えることが好ましい。オレンジを所定の時間（２分間）浸漬し、次いで１０〜
１５秒間すすぐために、指定の温度の飲料水１０Ｌを含有する他のタンクに移し
た。すすぎ水から６個のオレンジを取り出し、冷却された０．１％ペプトン水１
リットルと共に、滅菌プラスチック製バッグに入れた。そのプラスチック製バッ
グを他のプラスチック製バッグの中に入れ、次いで回転振とう機（１５０振動／
分）の氷の上に１時間置いた。

【００４６】他の処理は、ブラシローラーのコンベヤシステム上に置かれたオレンジ上にオ
ーバーヘッド噴霧器から試料製剤を噴霧することであった。６個のオレンジ上に
、速度１０ｍｌ／秒／オレンジで試料製剤を５秒間噴霧し、続いて製剤を噴霧せ
ず、ブラシローラー上でオレンジを２５秒間回転させた。この手順を合計処理時
間２分間で４回繰り返した。次いで、飲料水を上から噴霧することによって、オ
レンジを１０〜１５秒間すすいだ。冷却されたペプトン水を有する滅菌プラスチ
ック製バッグ中にオレンジ６個を入れ、上記の浸漬手順で記載のように振とうし
た。

【００４７】次いで、浸漬手順または噴霧手順のいずれかから得られる試料アリコートを、
オレンジの実験的方法で記載のように、計算された大腸菌細菌および細菌の対数
減少値について分析した。

【００４８】野菜の方法Ａ：以下の試験法に従って、天然に存在する細菌を有する様々な野
菜上の抗菌剤として、試料製剤を評価した。試験した野菜の種類の例は、切って
あるニンジン（プレパッケージされている）、葉レタス、ねぎ（葉および球根）
、および切ってあるキャベツ（プレパッケージされている）である。実施例で使
用したすべての野菜は、地方の小売食品店から手に入れた。評価を行う前に、葉
レタスおよびねぎを小さく（長さ０．３〜０．６ｃｍ）刻んだ。

【００４９】処理手順は以下のとおりである。刻んだ野菜１１ｇを処理溶液（試料製剤また
は脱イオン水）１５０ｍｌと共に４００ｍｌビーカーに入れ、１００ｒｐｍで回
転する回転振とう機上で室温にて１０分間浸漬した。製剤濃縮物１部と滅菌脱イ
オン水１５部とから試料製剤を調製した。次いで、滅菌脱イオン水で試料を５回
すすぎ、バターフィールド緩衝液（ＶＷＲＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を９９ｍｌ
含有するストマッカーバッグ（ＳｅｗａｒｄＬｉｍｉｔｅｄ、Ｎｏ．４００）
に移し、Ｓｅｗａｒｄストマッカー中で２分間ストマッキングした。上清を除去
し、標準手順に従って、適切なＰｅｔｒｉｆｉｌｍ（商標）平板［ＴＡＣに対し
てはＰｅｔｒｉｆｉｌｍ（商標）気性菌計数（ＡＣ）平板、大腸菌、大腸菌型、
および非大腸菌型グラム陰性菌に対してはＰｅｔｒｉｆｉｌｍ（商標）大腸菌計
数平板］を用いて、好気性菌総数（ＴＡＣ）、大腸菌型、およびグラム陰性菌を
数えるために、アリコート１ｍｌを連続希釈した（１０段階）。表に示すデータ
は、３つの複製の平均である。

【００５０】野菜の方法Ｂ：以下の試験法に従って、天然に存在する細菌を有するねぎ（葉
および球根）上の試料製剤を評価した。

【００５１】ねぎの植物器官（葉または球根）を小さく（長さ０．２〜０．５ｍｍ）刻んだ
。刻んだねぎの器官の一部（１０ｇ）を、製剤濃縮物１部と滅菌水１５部とから
調製しておいた試料製剤４０ｍｌ中に２３℃で浸漬した。得られた懸濁液を、回
転振とう機上で１００ｒｐｍにて１０分間振とうし、篩上に排出した。次いで、
ｌｅｔｈｅｅｎブロス６０ｍｌ（ｌｅｔｈｅｅｎ９０％、脱イオン水１０％）を
有するストマッカー８０バッグ（ＳｅｗａｒｄＬｉｍｉｔｅｄ）に、ねぎの器
官を移し、水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを７．５に調節し、懸濁液を６０秒間
ストマッキングした。ストマッカーから得た試料を連続希釈し、標準手順に従っ
てＰｅｔｒｉｆｉｌｍ（商標）ＡＣ平板を用いて、存在する細菌を数えた。その
結果は、３つの複製の平均として報告し、滅菌脱イオン水を負の対照として使用
した。

【００５２】アルファルファ種子／陰性菌の方法：種子に細菌を接種しなかったことを除い
ては、上述のアルファルファ種子／接種の方法に従って、天然に存在するアルフ
ァルファ種子上の抗菌剤として試料製剤を評価し、その結果から、種子に存在す
るどのような陰性菌も死滅したことが表されている。種子は２３℃または４４℃
のいずれかの温度で処理した。存在する細菌は、標準手順に従ってＰｅｔｒｉｆ
ｉｌｍ（商標）ＡＣ平板を用いて数えた。その結果を４つの複製の平均として報
告し、滅菌脱イオン水を負の対照として使用した。

【００５３】ジャガイモ／真菌の方法：以下の変更を除いては、オレンジの実験室方法につ
いて記載のように、フザリウムソラニを接種したジャガイモ上の抗真菌剤として
、試料製剤を評価した。初期の接種材料の定量に使用する接種したジャガイモを
、試料処理の場合と同じ時間（１５分間）０．１％ペプトン水中に浸漬し、次い
で浸漬された溶液のアリコートを連続希釈し、適切な寒天培地上にプレーティン
グした。フザリウムソラニを収集し、浸漬段階で使用する０．１％ペプトン水１
．５Ｌ中に入れた。ペプトン浸漬バッグからアリコート１．０ｍｌをピペットで
取り、ポテトデキストロース寒天培地（カンザス州レネクサ、Ｒｅｍｅｌ）上に
ディスペンスすることによって、存在する真菌を数えた。真菌を適切に増殖させ
るのに４日から７日間必要なことを除いては、標準手順に従って、平板をインキ
ュベートした。複製１０個の平均の１０進対数減少値として、その結果を報告し
、対照として滅菌水を使用した。

【００５４】ジャガイモ／細菌の方法：以下に示す手順の変更を除いては、オレンジの実験
室方法について上述のように、エルウィニアカロトボーラを接種したジャガイモ
上の抗菌剤として、試料製剤を評価した。試料製剤の処理の２４時間前に、エル
ウィニアカロトボーラ（１０^８に濃縮された）０．２５ｍｌをＴＳＢ培地１００
ｍｌに添加することによって、エルウィニアカロトボーラ接種材料を調製した。
得られた懸濁液を３７℃で２４時間インキュベーター内に置いた。できるだけ芽
を避けて、各ジャガイモの最も平らな部分に細菌懸濁液を０．５ｍｌ画線するこ
とによって、ジャガイモを接種した。試料製剤または水で処理する前に、ジャガ
イモを１時間乾燥させた。処理してすすいだ後に、これらのジャガイモを０．１
％ペプトン水と共に滅菌プラスチック製バッグに入れ、回転振とう機（１５０振
動／分）の氷の上に１時間置いた。次いで、プラスチック製バッグの単一層を通
して手でジャガイモをこすり、そのバッグを４５秒間力強く振とうした。試料を
バッグから取り出し、０．１％ペプトン水で連続希釈した。上述のように、ＴＳ
Ａ混釈平板上に試料をプレーティングし（希釈液０．１ｍｌ／平板）、インキュ
ベートし、細菌を数えた。複製１０個の平均の１０進対数減少値として、その結
果を報告し、対照として滅菌水を使用した。

【００５５】ｉｎｖｉｔｒｏの胞子の方法：製剤濃縮物（希釈していない）を枯草菌胞子
（約１０^８ＣＦＵ／ｍｌに濃縮された）に対して５０℃で、暴露時間３０、４５
および６０分でｉｎｖｉｔｒｏにて評価した。試験試料をＴＳＡ平板上にプレ
ーティングした。その平板を３７℃で４８時間インキュベートし、標準手順によ
りコロニーをカウントした。複製３個の平均の１０進対数減少値として、その結
果を報告する。

【００５６】製剤果実、野菜、または種子の抗菌を評価するために使用した製剤濃縮物の組成を
、表１および表２に示す。標的の植物または植物器官を処理する前に、すべての
濃縮物を水（別段の指定がない限り、濃縮物１部に水１５部）で希釈した。

【００５７】

【表１】

【００５８】

【表２】

【００５９】実施例１−接種したアルファルファ種子上の試料製剤の評価：本明細書に記載
のアルファルファ種子／接種の方法に従って、細菌を接種したアルファルファ種
子上の試料製剤を評価し、その結果を表３（大腸菌を接種した種子）および表４
（ネズミチフス菌を接種した種子）に示す。大腸菌は、４種の菌株：ＡＴＣＣ
１１２２９、ＡＴＣＣ２５９２２、ＡＴＣＣ３５２１８、および９７−１の
混合物、ＣｉｔｒｕｓＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＥｄｕｃａｔｉｏｎＣｅ
ｎｔｅｒ（ＣＲＥＣ）（フロリダ州レイクアルフレッド）から入手した菌株であ
る。すべての実施に使用したサルモネラ血清型は、以下の４種の血清型：Ｔｙｐ
ｈｉｍｕｒｉｕｍ（ＡＴＣＣ１４０２９）、Ｈａｒｔｆｏｒｄ（ＣＤＣＨＯ
６５７）、Ｍｕｅｎｃｈｅｎ（ＡＴＣＣ８３８８）、およびＭｂａｎｄａｋａ
（ＡＴＣＣ５１９５８）のカクテルを使用した実施２１、２２、２３および２
４を除いては、血清型Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍである。表３では、２％ＴＷＥＥ
Ｎ（商標）８０を含有するｌｅｔｈｅｅｎブロスを、実施２、３、および４のみ
に使用し；表４では、２％ＴＷＥＥＮ（商標）８０を含有するｌｅｔｈｅｅｎブ
ロスを、実施１２〜２０および実施２５、２６、および２７で使用したことに留
意のこと。表３および表４に示す他のすべての実施では、標準ｌｅｔｈｅｅｎブ
ロスを使用した（０．５％Ｔｗｅｅｎ８０）。

【００６０】試験方法で記載のように、試料製剤は一般に、１液系として評価した。つまり
、製剤濃縮物（一般に、脂肪酸モノエステル、エンハンサー、界面活性剤、およ
び賦形剤成分を含有する。表１および表２を参照）１部を、アルファルファ種子
を処理する前に、水１５部で希釈した。実施８〜１０および２４を除いては、こ
の実施例のすべての実施にこれが当てはまる（表３および表４を参照）。この後
半の４つの実施では、２液系として試料製剤を評価した。つまり、アルファルフ
ァ種子を処理する直前に、製剤濃縮物の異なる成分（脂肪酸モノエステル、界面
活性剤、および賦形剤成分を含有する１つの容器、エンハンサー成分を含有する
別の容器）を水で希釈した。したがって、実施８〜１０および２４では、種子を
処理する直前に、製剤濃縮物３７Ａを１部、ＬＡを０．２部、および水を１５部
添加することによって、試料製剤を調製した。

【００６１】

【表３】 ^＊製剤３７Ａ（１部）＋ＬＡ（０．２部）＋水（１５部）

【００６２】

【表４】 ^＊製剤３７Ａ（１部）＋ＬＡ（０．２部）＋水（１５部）

【００６３】本発明の製剤（脂肪酸モノエステル、エンハンサー、界面活性剤、および賦形
剤成分を含有する）すべてについて、接種したアルファルファ種子上の大腸菌お
よびネズミチフス菌のいずれも３対数値を超える減少数が得られたことが表３お
よび表４からの結果により示されている。一部の試料製剤では、評価条件下で４
対数値または５対数値を超える減少数が得られた。それと対照的に、例えば製剤
濃縮物７８Ｃおよび７８Ｄから調製された、界面活性剤および水成分のみを含有
する対照製剤では、細菌制御のレベルがかなり低く、つまり２対数値未満の減少
数であった。異なる成分、例えば濃縮物３７Ａ（脂肪酸モノエステル、界面活性
剤、および賦形剤成分）と乳酸（ＬＡ）から、種子を処理する直前に調製した試
料製剤では、細胞制御のレベルが非常に高く、場合によっては、６対数値を超え
る減少数が得られることもまた確認された。

【００６４】実施例２−接種したオレンジ上の試料製剤の評価：試料製剤（濃縮物７３Ａお
よび７３Ｂから調製した）を、本明細書に記載のオレンジの実験室方法およびオ
レンジのパイロットプラント（ＰＰ）方法に従って、細菌を接種したオレンジ上
で評価し、その結果を表５に示す。

【００６５】

【表５】

【００６６】表５からの結果により、本発明の製剤（脂肪酸モノエステル、エンハンサー、
界面活性剤、および賦形剤成分を含有する）では一般に、実験室条件もしくはパ
イロットプラント条件下において、接種したオレンジ上でどちらの大腸菌の減少
数も３対数値を超えた。一部の試料製剤では、評価条件下で４対数値または５対
数値を超える減少数が得られた。

【００６７】実施例３−野菜およびアルファルファ種子上の試料製剤の評価：試料製剤（濃
縮物１１Ｃ、３０Ｄおよび４２Ｃから調製した）を、本明細書に記載の野菜の方
法Ａに従って、天然に存在する細菌を有する様々な野菜上で評価した。さらに、
本明細書に記載の野菜の方法Ｂおよびアルファルファ種子／天然細菌の方法にそ
れぞれ従って、どちらも天然に存在する細菌を有するねぎおよびアルファルファ
種子上で、試料製剤（濃縮物４９Ａから調製した）を評価した。その結果を表６
に示し、その結果から、本発明の製剤試料によって、アルファルファ種子および
広範な異なる野菜の種類に用いられた水の対照と比較して、天然細菌の良好ない
しは優れた減少数（ＴＡＣ、グラム陰性菌もしくは大腸菌型により測定）が得ら
れたことが示されている。

【００６８】

【表６】 ^＊試験せず

【００６９】実施例４−ジャガイモ上の真菌に対する試料製剤の評価：濃縮物１５Ａから調
製した試料製剤を、本明細書に記載のジャガイモ／真菌の方法に従って、真菌フ
ザリウムソラニを接種したジャガイモで評価した。その結果を表７に示し、その
結果から、本発明の製剤試料によって、水の対照と比較して、非常に良好な真菌
の死滅が得られたことが示されている。

【００７０】

【表７】

【００７１】実施例５−ジャガイモ上の細菌に対する試料製剤の評価：濃縮物１５Ａから調
製した試料製剤（２液系として適用）を、本明細書に記載のジャガイモ／細菌の
方法に従って、細菌エルウィニアカロトボーラを接種したジャガイモで評価した
。処理する直前に、製剤濃縮物１５Ａを１部（ＬＡ成分の方が少ない）、ＬＡを
０．２部および水を１５部加えることによって、試料製剤を調製した。その結果
を表８に示し、その結果から、本発明の製剤試料によって、水の対照と比較して
、エルウィニアカロトボーラに対して優れた死滅が得られたことが示されている
。

【００７２】

【表８】

【００７３】実施例６−ｉｎｖｉｔｒｏでの枯草菌胞子に対する製剤濃縮物の評価：本明
細書に記載のｉｎｖｉｔｒｏの胞子の方法に従って、５０℃および暴露時間３
０、４５、および６０分で枯草菌胞子に対して、製剤濃縮物１３Ｂおよび１３Ｃ
をｉｎｖｉｔｒｏで評価した。その結果を表９に示し、その結果から、本発明
の製剤濃縮物によって、胞子の非常に良好な死滅が得られ、暴露時間が増大する
のに伴って死滅レベルが増大することが示されている。

【００７４】

【表９】

【００７５】他の実施形態本発明は、その詳細な説明と共に記載されており、上述の説明は本発明を説明
するものであり、添付の特許請求の範囲により定義される本発明の範囲を制限す
るものではないことを理解されたい。他の態様、利点、および修正は、以下の特
許請求の範囲内である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷＦターム(参考） 4H011 AA01 AA02 BA01 BA02 BB06 BC03 BC07 DA14 DC05 DD03 DE15

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】脂肪酸モノエステルと、エンハンサーと、２種類以上のアニ
オン性界面活性剤と、賦形剤とを含有する抗菌製剤。
【請求項２】前記脂肪酸モノエステルが、グリセロールモノラウレート、
グリセロールモノカプリレート、グリセロールモノカプレート、プロピレングリ
コールモノラウレート、プロピレングリコールモノカプリレート、プロピレング
リコールモノカプレート、またはそれらの組み合わせである、請求項１に記載の
製剤。
【請求項３】前記エンハンサーが、キレート剤、酸、またはアルコールで
ある、請求項１に記載の製剤。
【請求項４】前記キレート剤が、ＥＤＴＡまたはその塩である、請求項３
に記載の製剤。
【請求項５】前記エンハンサーが有機酸である、請求項３に記載の製剤。
【請求項６】前記有機酸が、乳酸、マンデル酸、コハク酸、酒石酸、アス
コルビン酸、サリチル酸、安息香酸、酢酸、リンゴ酸、またはアジピン酸である
、請求項５に記載の製剤。
【請求項７】前記アルコールが、エタノールまたはイソプロパノールであ
る、請求項３に記載の製剤。
【請求項８】前記２種類以上のアニオン性界面活性剤が、アシルラクチレ
ート塩、ジオクチルスルホスクシネート塩、ラウリル硫酸塩、ドデシルベンゼン
スルホン酸塩、およびＣ_８〜Ｃ_１８脂肪酸の塩からなる群から選択される、請求
項１に記載の製剤。
【請求項９】前記製剤が、２種類のアニオン界面活性剤を含有する、請求
項１に記載の製剤。
【請求項１０】前記賦形剤が、水、プロピレングリコール、ポリエチレン
グリコール、グリセリン、エタノール、イソプロパノール、またはそれらの組み
合わせである、請求項１に記載の製剤。
【請求項１１】前記製剤が、着香剤をさらに含有する、請求項１に記載の
製剤。
【請求項１２】植物もしくは植物器官を有効量の抗菌製剤と接触させるこ
とを含む、植物もしくは植物器官上の微生物レベルを低減する方法であって、前
記抗菌製剤が、脂肪酸モノエステルと、エンハンサーと、２種類以上のアニオン
界面活性剤と、賦形剤とを含有する方法。
【請求項１３】脂肪酸モノエステル、エンハンサー、界面活性剤、および
賦形剤を含有する、即使用可能な抗菌製剤であって、前記脂肪酸モノエステルの
濃度が、前記即使用可能な製剤に対して約０．２重量％〜約２．０重量％であり
、前記エンハンサーの濃度が、前記即使用可能な製剤に対して約１．１重量％〜
約２５重量％である抗菌製剤。
【請求項１４】前記エンハンサーが、前記製剤に対して約１．１〜１５重
量％である、請求項１３に記載の即使用可能な製剤。
【請求項１５】前記エンハンサーが、約１．１〜２．１重量％である、請
求項１３に記載の即使用可能な製剤。
【請求項１６】前記製剤が、着香剤をさらに含有する、請求項１３に記載
の即使用可能な製剤。
【請求項１７】植物もしくは植物器官を有効量の即使用可能な抗菌製剤と
接触させることを含む、植物もしくは植物器官上の微生物レベルを低減する方法
であって、前記の即使用可能な抗菌製剤が、脂肪酸モノエステル、エンハンサー
、界面活性剤、および賦形剤を含有し、前記脂肪酸モノエステルの濃度が、前記
の即使用可能な製剤に対して約０．２重量％〜約２．０重量％であり、前記エン
ハンサーの濃度が、前記即使用可能な製剤に対して約１．１重量％〜約２５重量
％である方法。
【請求項１８】脂肪酸モノエステル組成物を有する第１容器であって、前
記脂肪酸モノエステル組成物が、脂肪酸モノエステルと、界面活性剤と、賦形剤
とを含有する第１容器、およびエンハンサーを有する第２容器、を備えるキット
。
【請求項１９】前記脂肪酸モノエステル組成物が、２種類以上のアニオン
界面活性剤を含有する、請求項１８に記載のキット。
【請求項２０】前記脂肪酸モノエステルが、グリセロールモノラウレート
、グリセロールモノカプリレート、グリセロールモノカプレート、プロピレング
リコールモノラウレート、プロピレングリコールモノカプリレート、プロピレン
グリコールモノカプレート、またはそれらの組み合わせである、請求項１８に記
載のキット。
【請求項２１】前記キットが、前記第１容器の内容物および前記第２容器
の内容物を混合して、植物もしくは植物器官の微生物レベルを低減するのに有効
な抗菌製剤を製造することを示す、ラベルまたは添付文書をさらに備える、請求
項１８に記載のキット。
【請求項２２】前記ラベルまたは添付文書が、植物もしくは植物器官に適
用する前に、前記抗菌製剤を希釈することをさらに示す、請求項２１に記載のキ
ット。
【請求項２３】前記エンハンサーが乳酸である、請求項１８に記載のキッ
ト。
【請求項２４】前記賦形剤がプロピレングリコールであり、かつ前記脂肪
酸モノエステルがプロピレングリコールモノカプリレートである、請求項１８に
記載のキット。
【請求項２５】包装材料と、前記包装材料内の抗菌製剤とを備える製造物
品であって、前記抗菌製剤が、脂肪酸モノエステル、エンハンサー、界面活性剤
、および賦形剤を含有し、前記脂肪酸モノエステルの濃度が、前記製剤に対して
約０．２重量％〜約２．０重量％であり、前記エンハンサーの濃度が、前記製剤
に対して約１．１重量％〜約２５重量％であり、前記包装材料が、植物および植
物器官に製剤をそのまま適用して、微生物レベルを低減することができることを
示すラベルを含む製造物品。
【請求項２６】脂肪酸モノエステルと、エンハンサーと、界面活性剤と、
賦形剤とを含有する抗菌製剤を含む植物または植物器官。
【請求項２７】前記抗菌製剤が、着香剤をさらに含有する、請求項２６に
記載の植物または植物器官。
【請求項２８】前記植物または植物器官が、食品等級コーティングをさら
に含む、請求項２６に記載の植物または植物器官。
【請求項２９】前記抗菌製剤が、前記植物もしくは植物器官と前記食品等
級コーティングとの間に介在する、請求項２８に記載の植物または植物器官。
【請求項３０】前記抗菌製剤および前記食品等級コーティングが混ぜ合わ
される、請求項２８に記載の植物または植物器官。