JP2003511381A - 新規なイミダゾピリジンカルボニトリル化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、哺乳類破骨細胞活性の選択的阻害剤、その製造方法およびそれを含む医薬組成物、ならびに該選択的阻害剤をヒトまたは動物患者に投与する処置方法に関する。該選択的阻害剤は液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼ、例えば破骨細胞における液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼを阻害することが見出され、従って骨吸収を伴う生理学的障害に対して治療上有効である。本発明の実施形態において、該選択的阻害剤は一般式（Ｉ）のイミダゾピリジンカルボニトリル化合物を含む。 【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【技術分野】

一般的に、本発明は、哺乳類破骨細胞活性の選択的阻害剤、その製造方法、そ
れを含む医薬組成物、ならびに該選択的阻害剤をヒトまたは動物患者に投与する
処置方法に関する。より詳細には、本発明は、哺乳類破骨細胞における液胞型Ｈ ⁺ −ＡＴＰアーゼの選択的阻害剤に関する。

【０００２】

【背景技術】

骨質量の損失に関連する疾患、すなわち骨吸収を伴う状態は、破骨細胞の過剰
活性によって引き起こされることが知られている。ある種の化合物、通常は構造
がバフィロマイシンに関連する化合物は、破骨細胞における液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰ
アーゼの阻害剤であり、従って上記疾患の処置のために潜在的に有用であること
が知られている、例えばＷＯ ９１／０６２９６、ＷＯ ９８／０１４４３、ＷＯ
９８／０１４２３、ＷＯ ９８／０１４３６、ＷＯ ９８／０１４４５およびＷ
Ｏ ９６／２１６４４参照。さらに、ある種のキノリンおよびベンズイミダゾー
ルも液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼの阻害剤であると特許請求されており、例えばＷ
Ｏ ９７／１４６８１およびＷＯ ９７／１０２２１９参照、ある種のイミダゾピ
リジンが異常な骨代謝により引き起こされる疾患の治療処置に有効であると特許
請求されている、ＷＯ ９６／３４８６６参照。最近の証拠は、液胞型Ｈ⁺−ＡＴ
Ｐアーゼの１１６kDa（「ａ」）サブユニットのイソ型が存在することを示唆し
ている。現在は、脊椎動物種では「ａ」の三つのサブタイプがあるようであり、
これらはそれぞれ「ａ１」、「ａ２」および「ａ３」と呼ばれる。これらのうち
、「ａ１」はラットおよびウシの脳からクロ−ン化されており、「ａ」の偏在性
細胞内イソ型を代表することができる（Perin, M.S., Fried, V.A., Stone, D.K
., Xie, X.S., および Sudhof, T.C., Journal of Biological Chemistry, 266
(6), 3877-81 (1991) および Peng, S.B., Crider, B.P., Xie, X.S., および S
tone, D.K., Journal of Biological Chemistry, 269(25), 17262-6 (1994) 参
照）。その配列相同性だけに基づけば、サブタイプ「ａ２」（ＴＪ６マウス免疫
抑制因子）は、「ａ」のイソ型と考えられる（Lee, C., Ghoshal, K., および B
eaman, K.D., Molecular Immunology, 27(11), 1137-44 (1990)）。第三のサブ
タイプ、すなわち「ａ３」（ＥＭＢＬ受託番号Ｕ４５２８５）は、ヒト破骨細胞
腫ｃＤＮＡライブラリーからクロ−ン化されており、「ａ」の破骨細胞特異的イ
ソ型であることを示唆した（Li, Y.P., Chen, W. および Stashenko, P., Bioch
emical & Biophysical Communications, 218(3), 813-21 (1996)）。

【０００３】 要約すると、上記先行技術に開示された化合物はどれも、骨吸収に関連する障
害の処置において充分な治療的効能を与えない。従って、この技術分野ではこの
ような障害に対する新規な治療剤の需要がある。

【０００４】

【発明の開示】

本発明者らは、予想外にも、とりわけ骨吸収を伴う生理学的障害に対して優れ
た治療効果を有する新規な化合物を見出した。より詳細には、これらの化合物は
、哺乳類破骨細胞活性の選択的阻害剤を含み、この阻害剤はイミダゾピリジンカ
ルボニトリル化合物を含む。本発明の選択的阻害剤が液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼ
、例えば骨吸収細胞における液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼを阻害することが見出さ
れたので、従ってこの阻害剤は骨吸収を伴う生理学的障害に対して治療上有効で
ある。

【０００５】 本発明によれば、上記イミダゾピリジンカルボニトリル化合物は一般式Ｉ：

【化２】

【０００６】 ［式中、Ｒ₁は (ａ) Ｈ； (ｂ) １〜３個の炭素原子を有するＯ−アルキル； (ｃ) Ｒ₁＋Ｒ₂が少なくとも１個のＯ、Ｓおよび／またはＮを含有する５員環
を形成し； (ｄ) １〜３個の炭素原子を有するアルキル：および (ｅ) Ｓ−メチルまたはＳ−エチル からなる群から選択され； Ｒ₂は (ａ) Ｈ； (ｂ) １〜６個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状の飽和または
不飽和のアルキル； (ｃ) ＮＲ₈Ｒ₉、ここでＲ₈およびＲ₉は、Ｈ；場合によりＯ−アルキル、ＮＨ
−アルキル、Ｎ−ジアルキル、Ｎ−ピロリジニル、Ｎ−ピペリジニル、Ｎ−モル
ホリニルまたはＮ−ピペラジニルで置換された１〜６個の炭素原子を有する直鎖
状、分枝鎖状または環状の飽和または不飽和のアルキル；およびフェニル、イミ
ダゾリル、ピリジニルまたはピロリルからなる群から選択されるアリールからな
る群から独立して選択されるか；または一緒になって、場合によりＯ、Ｓおよび
／またはＮを含有する５員または６員の飽和環または不飽和環を形成し； （ｄ） 場合によりＯ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、Ｎ−
ピロリジニル、Ｎ−ピペリジニル、Ｎ−モルホリニルまたはＮ−ピペラジニルで
置換された１〜６個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状の飽和また
は不飽和のＯ−アルキル； (ｅ) 場合によりＯ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、Ｎ−ピロ
リジニル、Ｎ−ピペリジニルで置換された１〜６個の炭素原子を有する直鎖状、
分枝鎖状または環状の飽和または不飽和Ｓ−アルキル からなる群から選択され；

【０００７】 Ｒ₃〜Ｒ₇は (ａ) Ｈ； (ｂ) １〜３個の炭素原子を有するアルキル； (ｃ) １〜３個の炭素原子を有するＯ−アルキル； (ｄ) Ｓ−メチルまたはＳ−エチル からなる群から選択され； ただし、それぞれＲ₁〜Ｒ₃およびＲ₄〜Ｒ₇の少なくとも一つはＨではない］ を有し、またはその製薬上許容される塩である。

【０００８】 別の好ましい実施形態において、Ｒ₂はＳ−Ｍｅ、ＮＲ₈Ｒ₉、１〜６個の炭素
原子を有するＯ−アルキルまたはアルキルであり；Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄はＨであり；
Ｒ₅、Ｒ₆およびＲ₇は１〜３個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状
の飽和または不飽和のＯ−アルキルである。

【０００９】 また別の好ましい実施形態において、Ｒ₂はＳ−Ｍｅ、ＮＲ₈Ｒ₉、１〜６個の
炭素原子を有するＯ−アルキルまたはアルキルであり；Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はＨ
であり；Ｒ₆およびＲ₇は１〜３個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環
状の飽和または不飽和のＯ−アルキルである。

【００１０】 さらに別の好ましい実施形態において、Ｒ₂はＳ−Ｍｅ、ＮＲ₈Ｒ₉、１〜６個
の炭素原子を有するＯ−アルキルまたはアルキルであり；Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₅、Ｒ₆、
Ｒ₇はＨであり；Ｒ₄は１〜３個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状
の飽和または不飽和のＯ−アルキルである。

【００１１】 本発明の特に好ましい実施形態において、上記化イミダゾピリジンカルボニト
リル化合物は ７−（４−ジメチルアミノ−フェニル）−５−（３,４,５−トリメトキシ−フ
ェニル）−イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル； ５−（３,４−ジメトキシ−フェニル）−７−（４−メトキシ−フェニル）−
イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル； ７−（４−ピロリジン−１−イル−フェニル）−５−（３,４,５−トリメトキ
シ−フェニル）−イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル からなる群から選択される。

【００１２】 本発明は、上記実施形態の何れか一つに係るイミダゾピリジンカルボニトリル
化合物の製造方法にも関する。 この製造の一つの実施形態において、適切に置換されたアミノ−ニコチノニト
リルを、α−ハロ置換カルボニル試薬とともに塩基性条件下で、場合により溶剤
の存在下に、２〜２４時間加熱する。

【００１３】 別の実施形態において、適切に置換された１,３−ジフェニル−プロパン−１,
３−ジオンおよび適切に置換された（１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−
アセトニトリルを、アルカリ金属アルコキシドで処理し、アルコール中で２〜１
２時間還流する。

【００１４】 本発明に係るイミダゾピリジンカルボニトリル化合物の製造において、下記の
参考文献は、例えば好適な反応条件および試薬および出発材料の適切な選択に関
する有用な手引きを提供する： Zimmermann, T., J. Parkt. Chem./Chem.-Ztg., 335(8), 717-20 (1993); Kaminski, J.J., Doweyko, A.M., J. Med. Chem., 40(4), 427-436 (1997); Barlin, G.B., Davies, L.P., Harrison, P.W., Aust. J. Chem., 48(5), 103
1-1038 (1995); Kambe, S., Saito, K., Synthesis, 5, 366-368 (1980); Hishmat, O.H., Micky, J.A.A., Sahleh, N.M., Pharmazie, 44(12), 823-825
(1989)。

【００１５】 下記のスキーム１により、本発明のイミダゾピリジンカルボニトリル化合物を
製造するための一般的な合成経路を説明する。とりわけ公知の参考文献（上記参
照）の手引きに従って、好適な出発材料の合成は当業者により容易に行われる。

【００１６】 スキーム１．一般式Ｉの化合物の合成

【化３】

【００１７】 式Ｉで表される化合物を合成するための一般的手順を以下に概説する。 手順１： 適切な量の適切に置換されたアミノ−ニコチノニトリルおよびα−ハロ置換カ
ルボニル試薬を、塩基性条件下で例えばＮａＨＣＯ₃の存在下に、例えばエタノ
ール、ブタノールまたはクロロホルムのような好適な溶剤中で、約２〜２４時間
加熱する。蒸発し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で希釈し、塩水で洗浄し、乾燥した後、溶剤を除
去する。残留物を再結晶、またはシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより精
製する。この手順から、置換５，７−ジフェニル−イミダゾ［１,２−ａ］ピリ
ジン−８−カルボニトリルを単離する。

【００１８】 手順２（特にＲ₉およびＲ₁₀がベンゼン環の一部である化合物に関して）： 適切な量の適切に置換された１,３−ジフェニル−プロパン−１,３−ジオンお
よび適切に置換された（１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−アセトニトリ
ルを、アルカリ金属アルコキシド、例えばＮａＯＥｔで処理し、アルコール中で
２〜１２時間還流する。イミダゾピリジンカルボニトリル化合物を手順１と同様
にして単離する。

【００１９】 さらに、本発明は、医薬としての使用するための一般式Ｉのイミダゾピリジン
カルボニトリル化合物に関する。 従って、本発明はまた、活性成分として上記実施形態の何れか一つに係るイミ
ダゾピリジンカルボニトリル化合物を、製薬上許容される補助剤、希釈剤または
担体とともに含む医薬組成物に関する。

【００２０】 上記医薬組成物において、用量単位当たりの上記活性成分の量は一般的に約１
〜１０００mg、好ましくは１〜３００mgの範囲内にある。 さらに、上記活性成分の量は典型的には上記医薬組成物の約０．１〜９５重量
％の範囲内にある。 さらに、本発明はまた、ヒトまたは動物の身体の治療的または予防的処置に使
用するための医薬の製造における、上記で概説した実施形態の何れか一つに係る
イミダゾピリジンカルボニトリル化合物の使用に関する。

【００２１】 好ましい実施形態において、上記使用は、液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼ、好まし
くは破骨細胞における液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼの阻害を伴う処置のために意図
される医薬に関する。 上記使用の別の好ましい実施形態において、上記医薬はイソ型ａ３を含有する
液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼの阻害を伴う処置のために意図され、該液胞型Ｈ⁺−Ａ
ＴＰアーゼは好ましくは破骨細胞に存在する。 また別の好ましい実施形態において、上記医薬は骨吸収の阻害を伴う処置のた
めに意図されるか、または上昇した骨吸収に関連する疾患、好ましくは骨粗鬆症
の処置および／または予防のために意図される。

【００２２】 上記使用のさらに別の好ましい実施形態において、上記医薬は骨パジェット病
、上皮小体機能亢進症、悪性腫瘍、歯周病、プロテーゼおよび／またはインプラ
ント関連の骨損失、腫瘍、ＡＩＤＳおよびこれに関連する障害、アルツハイマー
病、血管形成、アテローム性動脈硬化症、リウマチ様関節炎、糖尿病性網膜症、
乾せんまたは糖尿病の処置のために意図される。

【００２３】 本発明はまた、液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼ、好ましくは破骨細胞における液胞
型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼを阻害する方法、またはイソ型ａ３を含有する液胞型Ｈ⁺−
ＡＴＰアーゼ（該液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼは好ましくは破骨細胞に存在する）
を阻害する方法に関し、これらの方法は何れも、ヒトまたは動物患者に上記で概
説した実施形態の何れか一つに係るイミダゾピリジンカルボニトリル化合物の治
療上有効量を投与することを含む。

【００２４】 本発明はさらに、骨吸収を阻害する方法、または上昇した骨吸収に関連する疾
患、好ましくは骨粗鬆症を処置および／または予防する方法に関し、これらの方
法は何れも、ヒトまたは動物患者に上記の実施形態の何れか一つに係るイミダゾ
ピリジンカルボニトリル化合物の治療上有効量を投与することを含む。

【００２５】 本発明はさらに、骨パジェット病、上皮小体機能亢進症、悪性腫瘍、歯周病、
プロテーゼおよび／またはインプラント関連の骨損失、腫瘍、ＡＩＤＳおよびこ
れに関連する障害、アルツハイマー病、血管形成、アテローム性動脈硬化症、リ
ウマチ様関節炎、糖尿病性網膜症、乾せんまたは糖尿病を処置する方法に関し、
この方法は、ヒトまたは動物患者に上記で概説した実施形態の何れか一つに係る
イミダゾピリジンカルボニトリル化合物の治療上有効量を投与することを含む。

【００２６】 活性成分の典型的な１日量は広い範囲内で変化し、例えば各患者の個々の必要
条件、投与経路および疾患のような種々のファクターに依存するであろう。しか
しながら、経口用量および非経口用量は、１日当たり、通常１〜１０００ｍｇ、
好ましくは１〜３００mgの活性成分の範囲内にある。

【００２７】 別の態様において、本発明は、本発明に係る化合物またはその製薬上許容され
る塩の少なくとも１種を活性成分として含有する医薬組成物に関する。活性成分
が塩基性窒素を含有する場合、製薬上許容される塩は酸付加塩を包含する。治療
上許容される塩を形成する酸は、例えばハロゲン化水素酸、例えば塩酸、硫酸、
リン酸、硝酸、脂肪族、脂環族、芳香族またはヘテロ環式のカルボン酸またはス
ルホン酸、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、乳酸、
リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイ
ン酸、ピルビン酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、エンボン酸、メタンスルホン酸、
エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、ハロゲンベンゼンスルホン酸
、トルエンスルホン酸およびナフタレンスルホン酸である。

【００２８】 上記で概説したように、医薬として使用するためのイミダゾピリジンカルボニ
トリル化合物が提供される。従ってこの化合物を、経口、静脈内、局所的、腹腔
内または皮下投与のための医薬組成物に、当業者に周知の１種またはそれ以上の
製薬上許容される担体、希釈剤または補助剤と一緒に使用することができる。 本発明の医薬組成物は、溶液、懸濁液の形態で局所的に投与することができ、
または例えば錠剤、カプセル、シロップ、粉末または顆粒の形態での経口投与に
より、または溶液または懸濁液の形態での非経口的投与により、または皮下投与
により、または坐剤の形態での直腸内投与により、または経皮的に投与すること
ができる。

【００２９】 実験の部 本発明を例証する化合物の製造 実施例１ ７−（４−ジメチルアミノ−フェニル）−５−（３,４,５−トリメトキシ−フェ
ニル）−イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル クロロアセトアルデヒド（水中５０％）１mlをクロロホルム１０mlに溶解し、
水を分離しながら（ディーン−スターク）、約５ｍｌのクロロホルム／水が除去
されるまで還流した。２−アミノ−３−シアノ−４−（４−ジメチルアミノ−フ
ェニル）−６−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−ピリジン１２０mg（
０.３mmol）およびＮａＨＣＯ₃ ５０mg（０.６mmol）を加え、この混合物を６０
℃で一夜撹拌した。溶剤を真空除去し、残留物を塩化メチレンに溶解した。有機
相を水洗し、硫酸ナトリウム上で乾燥した。エタノールから再結晶して、表題の
化合物９０mg（７０％）を得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃), δ-値 ppm: 3.05 (
s, 6H); 3.91 (s, 6H); 3.96 (s, 3H); 6.82 (d, 2H); 6.86 (s, 2H); 6.96 (s,
1H); 7.69 (d, 2H); 7.71 (m, 2H)。

【００３０】 実施例２ ５−（３,４−ジメトキシ−フェニル）−７−（４−メトキシ−フェニル）−
イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル 実施例１と同様にして、ただし、２−アミノ−３−シアノ−４−（４−メトキ
シ−フェニル）−６−（３,４,５−トリメトキシ−フェニル）−ピリジン１００
mg（０.２８mmol）およびＮａＨＣＯ₃ ４５mg（０.４２mmol）を用いた。溶離剤
としてＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨを用いたシリカゲル上でのクロマトグラフィーによ
り精製し、表題の化合物（２７mg）を単離した。¹H NMR (600 MHz, CDCl₃), δ-
値 ppm: 3.87 (s, 3H); 3.93 (s, 3H); 3.98 (s, 3H); 6.95 (s, 1H); 7.04 (d,
2H); 7.05 (d, 1H); 7.13 (d, 1H); 7.27 (dd, 1H); 7.67 (d, 2H); 7.74 (d,
1H); 7.76 (d, 1H)。

【００３１】 実施例３ ７−（４−ピロリジン−１−イル−フェニル）−５−（３,４,５−トリメトキ
シ−フェニル）−イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル 実施例１と同様にして、ただし、２−アミノ−３−シアノ−４−（４−ピロリ
ジン−１−イル−フェニル）−６−（３,４,５−トリメトキシ−フェニル）−ピ
リジン１００mg（０.２３mmol）およびＮａＨＣＯ₃ ３８mg（０.４６mmol）を用
いた。溶離剤としてヘプタン／ＥｔＯＡｃを用いたシリカゲル上でのカラムクロ
マトグラフィー、次いでエタノール中での再結晶により精製し、表題の化合物（
１０mg）を単離した。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃), δ-値 ppm: 2.05 (m, 4H); 3.
37 (m, 4H); 3.91 (s, 6H); 3.96 (s, 3H); 6.67 (d, 2H); 6.86 (s, 2H); 6.96
(s, 1H); 7.67 (d, 2H); 7.69 (d, 1H); 7.70 (d, 1H)。

【００３２】 生物学的試験 インビトロ実験 液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼを含有する膜小胞の調製 ニワトリ髄骨 以前に記載されたようにして（Mattsson, J.P., Lorentzon, P., Wallmark, B
., および Keeling, D.J., Biochim. Biophys. Acta, 1146(1), 106-12 (1993)
）、若干の変更を加えて、カルシウム欠乏食を１４日間与えた後の産卵雌ニワト
リから膜小胞を調製した。簡単に述べると、長骨から削り取った髄骨を、５mM H
epes／Tris、pH７.４、２５０mM ショ糖および１mM ＥＧＴＡを含む単離用緩衝
液に再懸濁し（１mg／Ｌ 髄骨）、鋏を用いて切り刻み、単離用緩衝液に１：１
０（w/v）に希釈し、ポリトロンホモジナイザーで均質化した。この均質化物を
２５０μｍナイロンメッシュに通して濾過した。次いで示差遠心（２０００×ｇ
で１０分、１０,０００×ｇで２０分および４０,０００×ｇで１時間）により膜
小胞を得た。最後のペレットを、テフロン（登録商標）／ガラスホモジナイザー
を用いて２０回通過させることにより、単離用緩衝液に再懸濁し（０.４ml／ｇ
の髄骨）、ＭｅＯＨ／ドライアイス中で急速凍結し、次いで−７０℃で貯蔵した
。

【００３３】 ウシ脳 地方の畜殺場から新鮮なウシ脳を得た。髄骨膜小胞について記載したようにし
て、全脳から膜小胞を調製した。

【００３４】 ヒト破骨細胞腫 ヒト破骨細胞腫瘍を Bjoern Gunterberg 博士（Sahlgrenska 病院，Sweden）
の好意により得た。各腫瘍の部分を液体窒素中で急速凍結し、−７０℃で貯蔵し
た。プロテアーゼ阻害剤（０.２mM ＡＥＢＳＦ，１５.４μＭ アプロチニン，３
.６μＭ ベスタチン，８.８μＭ ロイペプチン）を単離用緩衝液に含ませた以外
は、髄骨膜小胞について記載したようにして膜小胞を調製した。

【００３５】 ＡＴＰ依存性プロトン輸送の測定 膜小胞中のプロトン輸送を、９６−ウェルプレートリーダーで弱い塩基性のア
クリジンオレンジを用いて測定した（Mattsson, J.P., Lorentzon, P., Wallmar
k, B., および Keeling, D.J., Biochim. Biophys. Acta, 1146(1), 106-12 (19
93)）。試験物質（ＤＭＳＯに溶解）またはＤＭＳＯ（コントロール）を９６−
ウェルプレートのウェルに加え、次いで２２０μｌのアクリジンオレンジ緩衝液
（最終濃度：５mM Hepes／Tris，pH７.４，１２５mM ＫＣｌ，３mM ＭｇＳＯ₄，
０.２５mM ＤＴＴ，１μＭ バリノマイシンおよび５μＭ アクリジンオレンジ）
および膜小胞（１０−５０μｇタンパク質）を加えた。混合しながら１０分間イ
ンキュベートした後、Tris−ＡＴＰ（pH７.４）を最終濃度３ｍＭまで加えて反
応を開始させ、Molecular Devices プレートリーダーでアクリジンオレンジ吸光
度（Ａ₄₉₀）の消滅を２分間測定することにより、プロトン輸送を監視した。ア
クリジンオレンジ吸光度の最大速度低下とみなしたプロトン輸送の初期速度を、
Molecular devices Softmax ソフトウェアを用いて計算した。４−パラメーター
のロジスティック式を用いて作図した用量−反応曲線からＩＣ₅₀値を得た。

【００３６】 新生児マウス頭蓋冠（頭蓋）骨からの⁴⁵Ｃａ放出による骨吸収の測定 マウス頭蓋冠からの⁴⁵Ｃａ放出による骨吸収の測定を、文献に記載されたよう
にして（Mattsson, J.P., Vaeaenaenen, K., Wallmark, B., および Lorentzon,
P., Biochim. Biophys. Acta, 1065(2), 261-8 (1991)）、しかし若干の変更を
加えて行った。妊娠マウスに、⁴⁵Ｃａ−溶液（０.２５ml １２０μＣｉ／ml，皮
下）を出産前の第２日目および第１日目に注射した。新生児マウスが５〜８日齢
になったときに断頭して殺し、頭蓋冠を摘出し、４等分した。これらの片を、１
０nM ＰＴＨを添加したか添加しないインキュベーション媒質（１mM Ｌ−グルタ
ミン，１００Ｕ／ml ペニシリン，１００μｇ／ml ストレプトマイシン，１mg／
ml アルブミンおよび１μＭ インドメタシン）を入れたペトリ皿に置き、ＣＯ₂
インキュベーター（空気中５％ＣＯ₂）中で３７℃において２０〜２４時間前イ
ンキュベートした。次いで、新しいインキュベーション媒質を入れた２４−ウェ
ルプレートに頭蓋冠片を移した。２４時間後、このインキュベーション媒質のア
リコート（４００μｌ）を Microbeta（Wallac）シンチレーションカウンター
で⁴⁵Ｃａ含有量について分析した（コントロールＣＰＭ）。頭蓋冠片を新しいイ
ンキュベーション媒質に移し、試験物質を添加したか添加しないでインキュベー
トし、さらに２４時間インキュベートした後、このインキュベーション媒質のア
リコート（４００μｌ）を⁴⁵Ｃａ含有量について分析した（化合物ＣＰＭ）。コ
ントロール期間と化合物期間との間の吸収比（化合物ＣＰＭ／コントロールＣＰ
Ｍ）を計算し、４−パラメーターのロジスティック式を用いて用量−反応曲線を
作図した。

【００３７】 タンパク質の決定 Bio Rad のタンパク質アッセイキットおよび標品としてのγ−グロブリンを用
いて、Bradford に従ってタンパク質を決定した（Bradford, M.M., Anal. Bioch
em., 72, 248-54 (1976)）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 17/06 Ａ６１Ｐ 17/06 19/00 19/00 19/02 19/02 19/10 19/10 25/28 25/28 27/02 27/02 29/00 １０１ 29/00 １０１ 31/18 31/18 35/00 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ， ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ， ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，Ｃ Ａ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ， ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，Ｋ Ｅ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ， ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，Ｒ Ｕ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ， ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ヘンリク・セーレンセン スウェーデン国エス−431 83メルンダー ル．アストラゼネカ．アール・アンド・デ ィー・メルンダール Ｆターム(参考） 4C065 AA03 BB05 CC01 DD02 EE02 HH02 JJ01 KK01 LL01 PP03 QQ01 QQ02 4C086 AA02 AA03 CB05 MA02 MA05 NA14 ZA16 ZA31 ZA33 ZA36 ZA59 ZA96 ZA97 ZB15 ZB26 ZC20 ZC35 ZC55 ZC61

Claims (22)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記式Ｉ： 【化１】 ［式中、Ｒ₁は (ａ) Ｈ； (ｂ) １〜３個の炭素原子を有するＯ−アルキル； (ｃ) Ｒ₁＋Ｒ₂が少なくとも１個のＯ、Ｓおよび／またはＮを含有する５員環
   を形成し； (ｄ) １〜３個の炭素原子を有するアルキル：および (ｅ) Ｓ−メチルまたはＳ−エチル からなる群から選択され； Ｒ₂は (ａ) Ｈ； (ｂ) １〜６個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状の飽和または
   不飽和のアルキル； (ｃ) ＮＲ₈Ｒ₉、ここでＲ₈およびＲ₉は、Ｈ；場合によりＯ−アルキル、ＮＨ
   −アルキル、Ｎ−ジアルキル、Ｎ−ピロリジニル、Ｎ−ピペリジニル、Ｎ−モル
   ホリニルまたはＮ−ピペラジニルで置換された１〜６個の炭素原子を有する直鎖
   状、分枝鎖状または環状の飽和または不飽和のアルキル；およびフェニル、イミ
   ダゾリル、ピリジニルまたはピロリルからなる群から選択されるアリールからな
   る群から独立して選択されるか；または一緒になって、場合によりＯ、Ｓおよび
   ／またはＮを含有する５員または６員の飽和環または不飽和環を形成し； (ｄ) 場合によりＯ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、Ｎ−ピロ
   リジニル、Ｎ−ピペリジニル、Ｎ−モルホリニルまたはＮ−ピペラジニルで置換
   された１〜６個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状の飽和または不
   飽和のＯ−アルキル； (ｅ) 場合によりＯ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、Ｎ−ピロ
   リジニル、Ｎ−ピペリジニルで置換された１〜６個の炭素原子を有する直鎖状、
   分枝鎖状または環状の飽和または不飽和Ｓ−アルキル からなる群から選択され； Ｒ₃〜Ｒ₇は (ａ) Ｈ； (ｂ) １〜３個の炭素原子を有するアルキル； (ｃ) １〜３個の炭素原子を有するＯ−アルキル； (ｄ) Ｓ−メチルまたはＳ−エチル からなる群から選択され； ただし、それぞれＲ₁〜Ｒ₃およびＲ₄〜Ｒ₇の少なくとも一つはＨではない］ のイミダゾピリジンカルボニトリル化合物、またはその製薬上許容される塩。
2. 【請求項２】 Ｒ₂がＳ−Ｍｅ、ＮＲ₈Ｒ₉、１〜６個の炭素原子を有するＯ
   −アルキルまたはアルキルであり；Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄がＨであり；Ｒ₅、Ｒ₆および
   Ｒ₇が１〜３個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状の飽和または不
   飽和のＯ−アルキルである、請求項１に記載のイミダゾピリジンカルボニトリル
   化合物。
3. 【請求項３】 Ｒ₂がＳ−Ｍｅ、ＮＲ₈Ｒ₉、１〜３個の炭素原子を有するＯ
   −アルキルまたはアルキルであり；Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅がＨであり；Ｒ₆および
   Ｒ₇が１〜３個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状の飽和または不
   飽和のＯ−アルキルである、請求項１または２に記載のイミダゾピリジンカルボ
   ニトリル化合物。
4. 【請求項４】 Ｒ₂がＳ−Ｍｅ、ＮＲ₈Ｒ₉、１〜６個の炭素原子を有するＯ
   −アルキルまたはアルキルであり；Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇がＨであり；Ｒ₄が
   １〜３個の炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状の飽和または不飽和の
   Ｏ−アルキルである、請求項１〜３の何れか一項に記載のイミダゾピリジンカル
   ボニトリル化合物。
5. 【請求項５】 化合物が ７−（４−ジメチルアミノ−フェニル）−５−（３,４,５−トリメトキシ−フ
   ェニル）−イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル； ５−（３,４−ジメトキシ−フェニル）−７−（４−メトキシ−フェニル）−
   イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル； ７−（４−ピロリジン−１−イル−フェニル）−５−（３,４,５−トリメトキ
   シ−フェニル）−イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−８−カルボニトリル からなる群から選択される、請求項１〜４の何れか一項に記載のイミダゾピリジ
   ンカルボニトリル化合物。
6. 【請求項６】 適切に置換されたアミノ−ニコチノニトリルを、α−ハロ置
   換カルボニル試薬とともに塩基性条件下で、場合により溶剤の存在下に、２〜２
   ４時間加熱する、請求項１〜５の何れか一項に記載のイミダゾピリジンカルボニ
   トリル化合物の製造方法。
7. 【請求項７】 適切に置換された１,３−ジフェニル−プロパン−１,３−ジ
   オンおよび適切に置換された（１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−アセト
   ニトリルを、アルカリ金属アルコキシドで処理し、アルコール中で２〜１２時間
   還流する、請求項１〜５の何れか一項に記載のイミダゾピリジンカルボニトリル
   化合物の製造方法。
8. 【請求項８】 医薬として使用するための、請求項１〜５の何れか一項に記
   載のイミダゾピリジンカルボニトリル化合物。
9. 【請求項９】 活性成分として請求項１〜５の何れか一項に記載のイミダゾ
   ピリジンカルボニトリル化合物を、製薬上許容される補助剤、希釈剤または担体
   とともに含む医薬組成物。
10. 【請求項１０】 用量単位当たりの上記活性成分の量が約１〜１０００mg、
    好ましくは１〜３００mgの範囲内にある、請求項９に記載の医薬組成物。
11. 【請求項１１】 活性成分の量が上記医薬組成物の約０.１〜９５重量％の
    範囲内にある、請求項９または１０に記載の医薬組成物。
12. 【請求項１２】 ヒトまたは動物の身体の治療的または予防的処置に使用す
    るための医薬の製造における、請求項１〜５の何れか一項に記載のイミダゾピリ
    ジンカルボニトリル化合物の使用。
13. 【請求項１３】 医薬が液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼ、好ましくは破骨細胞に
    おける液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼの阻害を伴う処置のために意図される、請求項
    １２に記載の使用。
14. 【請求項１４】 医薬がイソ型ａ３を含有する液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼの
    阻害を伴う処置のために意図され、該液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼが好ましくは破
    骨細胞に存在する、請求項１２に記載の使用。
15. 【請求項１５】 医薬が骨吸収の阻害を伴う処置のために意図される、請求
    項１２に記載の使用。
16. 【請求項１６】 医薬が上昇した骨吸収に関連する疾患、好ましくは骨粗鬆
    症の処置および／または予防のために意図される、請求項１２に記載の使用。
17. 【請求項１７】 医薬が骨パジェット病、上皮小体機能亢進症、悪性腫瘍、
    歯周病、プロテーゼおよび／またはインプラント関連の骨損失、腫瘍、ＡＩＤＳ
    およびこれに関連する障害、アルツハイマー病、血管形成、リウマチ様関節炎、
    糖尿病性網膜症、乾せんまたは糖尿病の処置のために意図される、請求項１２に
    記載の使用。
18. 【請求項１８】 ヒトまたは動物患者に請求項１〜５の何れか一項に記載の
    イミダゾピリジンカルボニトリル化合物の治療上有効量を投与することを含む、
    液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼ、好ましくは破骨細胞における液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアー
    ゼを阻害する方法。
19. 【請求項１９】 ヒトまたは動物患者に請求項１〜５の何れか一項に記載の
    イミダゾピリジンカルボニトリル化合物の治療上有効量を投与することを含む、
    イソ型ａ３を含有する液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼ（該液胞型Ｈ⁺−ＡＴＰアーゼは
    好ましくは破骨細胞に存在する）を阻害する方法。
20. 【請求項２０】 ヒトまたは動物患者に請求項１〜５の何れか一項に記載の
    イミダゾピリジンカルボニトリル化合物の治療上有効量を投与することを含む、
    骨吸収を阻害する方法。
21. 【請求項２１】 ヒトまたは動物患者に請求項１〜５の何れか一項に記載の
    イミダゾピリジンカルボニトリル化合物の治療上有効量を投与することを含む、
    上昇した骨吸収に関連する疾患、好ましくは骨粗鬆症を処置および／または予防
    する方法。
22. 【請求項２２】 ヒトまたは動物患者に請求項１〜５の何れか一項に記載の
    イミダゾピリジンカルボニトリル化合物の治療上有効量を投与することを含む、
    骨パジェット病、上皮小体機能亢進症、悪性腫瘍、歯周病、プロテーゼおよび／
    またはインプラント関連の骨損失、腫瘍、ＡＩＤＳおよびこれに関連する障害、
    アルツハイマー病、血管形成、リウマチ様関節炎、糖尿病性網膜症、乾せんまた
    は糖尿病を処置および／または予防する方法。