JP2003329551A

JP2003329551A - 標準試料の値付け方法

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Publication number: JP2003329551A
Application number: JP2002140364A
Authority: JP
Inventors: Tetsuo Hamafuji; 徹郎浜藤; Magohei Yamada; 孫平山田; Mimatsu Takayama; 三松高山
Original assignee: Sysmex Corp
Current assignee: Sysmex Corp
Priority date: 2002-05-15
Filing date: 2002-05-15
Publication date: 2003-11-19

Abstract

(57)【要約】【課題】本発明は臨床検査の分野において、測定値か
ら目的対象物の量を求めるのに使用する標準試料に関
し、該標準試料に正確な値付けを行う方法および該値付
け法により製造された標準試料を提供することを課題と
する。【解決手段】測定対象物の濃度もしくは絶対量が既知
の試料（既知試料）から少なくとも２種の濃度の検体を
調製し、各測定対象物の濃度若しくは絶対量（ｘ）とそ
の実測値（ｙ）に基づき標準試料の値付けを行う場合に
おいて、直線回帰式の相関係数（ｒ）が０．８〜１．０
となるように、例えばBox-Cox変換式に従ってｘおよび
／またはｙの値を変換させてｘ’、ｙ’値を得、ｘ若し
くはｘ’およびｙ若しくはｙ’のいずれかの値に基づき
一次関数式を得、該関数式に実測値を代入して行う標準
試料の値付けを行う。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は臨床検査の分野にお
いて、測定値から目的対象物の量を求めるのに使用する
標準試料の値付け方法および値付けられた標準試料に関
する。

【０００２】

【従来の技術】標準物質（reference material;RM）は
測定機器の校正、測定法の評価、管理試料の値付けなど
に用いられる物質で、専門団体などの合意による規格に
基づいて作成され、公的機関によって測定値が認証され
ているものが多い。日本臨床検査標準協議会（JCCLS）
は、標準物質の認証・配布、規格作成等に携わってい
る。国際的な標準物質の供給先には、ＷＨＯと欧米の国
内機関であるアメリカのＮＩＳＴとＥＵのＩＲＭＭ（Ｂ
ＣＲ）がある。

【０００３】臨床検査における物質濃度測定、酵素活性
測定、免疫測定においてそれぞれの検査に適した測定体
系が検討されている。物質濃度測定では、秤量可能で絶
対基準法（同位体稀釈質量分析法、ＩＤＭＳなど）で値
付けされた標準物質が１次標準物質であり、これによっ
て実用基準法の測定条件が設定される。さらに、実用基
準法によって２次標準物質が値付けされ、これによって
日常検査法に正確さが伝達されるとともに、下位の測定
法の正確さを上位測定法のそれに合わせることができる
ように体系づけられている（臨床検査法提要、31版、p.
470（1998）。酵素活性測定では、絶対基準法は存在し
ないから、学会などによる勧告法の設定と正確さの伝達
が重要となる。また、血漿タンパク測定などで、勧告法
も設定されていない場合には標準物質の設定とその正確
さが要求される。基準法が設定されていない項目につい
ては、基準的な測定法で標準値が決定された標準物質を
利用することによって日常検査法に正確さを伝達し評価
することができる。

【０００４】糖尿病病態の主徴である高血糖の持続は、
血液中ヘモグロビンの糖化を促進させる。ヘモグロビン
Ａ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）はヘモグロビンβ鎖のＮ末端がグ
ルコースと安定なケトアミンを形成したものであり、総
ヘモグロビン量に対するＨｂＡ１ｃ量は過去１−２ヶ月
間の積分的な血糖値を反映する。ＨｂＡ１ｃは現在最も
利用されている血糖コントロールマーカーであり、糖尿
病患者の経過観察あるいは病態の診断にとって不可欠な
情報である。

【０００５】診断マーカーには、その測定値に基づいた
病態の統一的な評価が可能であることが要求される。し
かしＨｂＡ１ｃが血糖コントロールマーカーとして利用
され始めた当初はこの要求が満たされていなかった。IF
CC（International Federation of Clinical Chemistr
y）では、標準化（standardization）された測定体系を
確立するため、精製ＨｂＡ１ｃとＨｂＡ０を混合した１
次標準物質とペプチドマッピングによる実用基準法を定
めた。現在１次標準物質の値付け作業が進められてお
り、近い将来に確立されるであろうIFCCの測定体系はわ
が国を含め世界各国で取り入れられる方針である。わが
国においては1993年から1998年の日本糖尿病学会（Japa
n Diabetes Society：ＪＤＳ）「グリコヘモグロビンの
標準化に関する委員会（委員長：島健二）」の活動、そ
れを引き継いだ日本糖尿病学会「糖尿病関連検査の標準
化に関する委員会（委員長：富永真琴）」と日本臨床化
学会（Japan Society of Clinical Chemistry：JSCC）
「糖尿病関連指標専門委員会（委員長：星野忠夫）」に
より標準化が進められてきた。これらの委員会ではIFCC
の測定体系にスムーズに移行することを視野に入れ、IF
CCの規格に準じた標準物質（ＪＤＳ標準品(Lot.2)）を
作製した。この標準物質を基準とした測定値の管理によ
り、ＨｂＡ１ｃによる病態の統一評価が可能である。従
って、臨床応用されるＨｂＡ１ｃ測定法にとってＪＤＳ
標準品に対する正確性は、標準化に対応するための要求
事項である。

【０００６】このように、標準液の値付けは、測定の正
確さにとって重要である。通常は、既知濃度が与えられ
た標準物質と基準測定法に従って値付けが行われるが、
免疫反応などを利用した測定法などでは、検量線が直線
的ではないなど、的確な表示値を与えることが困難であ
り、多点検量を要するなど煩雑であった。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、管理
試料、１次標準物質および２次標準物質等の目的対象物
が既知濃度の試料と実測値の関係から、標準試料につい
て正確な値付けを行う方法および該値付け法により製造
された標準試料を提供するものである。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、鋭意研究
を重ねた結果、測定対象物の濃度もしくは絶対量が既知
の試料（既知試料）を稀釈または濃縮して種々の濃度の
既知試料検体群を調製し、これを測定したときに得られ
る測定値と、該既知試料の稀釈、濃縮率から計算される
既知濃度の関係が、一定の数学的関数式で表されること
を見出し、本発明を完成するに至った。

【０００９】すなわち本発明は、１．測定対象物の濃度もしくは絶対量が既知の試料（既
知試料）から少なくとも２種の濃度の検体を調製し、各
測定対象物の濃度若しくは絶対量（ｘ）とその実測値
（ｙ）に基づき標準試料の値付けを行う場合において、
直線回帰式の相関係数（ｒ）が０．８〜１．０となるよ
うに、一定の変換式に従ってｘおよび／またはｙの値を
変換させてｘ’、ｙ’値を得、ｘ若しくはｘ’およびｙ
若しくはｙ’のいずれかの値に基づき一次関数式を得、
該関数式に実測値を代入して行う標準試料の値付け方
法、２．上記実測値ｘからｘ’および／またはｙからｙ’へ
の一定の変換式が、Box-Cox変換若しくはLog変換である
前項１に記載の方法、３．上記実測値が吸光度の測定シグナルにより得られる
ものである前項１または２に記載の方法、４．上記の測定が免疫学的手法により行われる前項１〜
３のいずれか１に記載の方法、５．上記目的対象物がＨｂＡ１ｃである前項１〜４のい
ずれか１に記載の方法、６．前項１〜５のいずれか１に記載の方法で値付けられ
た標準試料、７．前項６に記載の標準試料の製造方法、８．前項６に記載の標準試料を使用する検査方法、９．前項６に記載の標準試料を構成試薬として含む検査
用試薬キット、からなる。

【００１０】

【発明の実施の態様】本発明において「測定対象物の濃
度もしくは絶対量が既知の試料」とは、文言通り測定対
象物の濃度、絶対量が既知の試料であれば良く、特に限
定されないが、例えば公的機関によって認証された標準
物質、各基準法で値付けられた１次標準物質、実用基準
法で値付けされた２次標準物質、学会などの勧告法で設
定された標準物質、精度管理物質等、その他の濃度、絶
対量が既知の試料をいう。以下、単に「既知試料」とい
う。

【００１１】本発明の測定対象物は、特に限定されるも
のではないが、通常の臨床検査で測定されているものの
例として、ＨｂＡ１ｃ、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、リウ
マチ因子（ＲＦ）、抗ストレプトリジンＯ抗体価（ＡＳ
Ｏ）、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、Ｃ３、Ｃ４、トランス
フェリン、ヘモペキシン、ＡＴ−ＩＩＩ、プラスミノゲ
ン、α１−アシッドグリコ蛋白、リポ蛋白、抗ウイルス
抗体、β２−ミクログロブリン等が挙げられる。

【００１２】本発明において「実測値」とは、測定対象
物に関し、自動検査機器測定法、手動的に行う検査法等
の測定の手段にかかわらず、公知あるいは今後開発され
るあらゆる手段によって測定して得られる数値をいう。
例えば吸光度分析装置により得られる吸光度のシグナル
値、ＨＰＬＣのようなコンピュータ制御の自動化専用機
により得られるシグナル値、あるいは単純放射免疫拡散
法や感作血球凝集反応などで得られた結果を目視により
判断して得る値等が挙げられるが、ここに例示するもの
に限られるものではないことは明らかである。

【００１３】本発明において、「標準試料」とは、測定
値を得るために測定装置に対して値付を目的とする検量
用試料や、検査や測定の精度管理に用いる試料である精
度管理用物質をも含む意味であり、１次標準品、２次標
準品または管理試料等として使用される試料などをい
う。また、標準物質は凍結乾燥品、凍結品、液状品であ
っても良い。

【００１４】（変換式について）本発明において１次関
数式は、次の式１で表される。既知試料から少なくとも
２種の濃度の検体を調製し、各検体の濃度若しくは絶対
量をｘとし、実測値をｙとしたときの値を各々式１のＸ
およびＹに代入し、ａおよびｂの値を求める。次いで、
値付けされる試料の実測値をＹに代入し、Ｘを求めて値
付けを行う。

【００１５】（式１）Ｙ＝ａＸ＋ｂ

【００１６】しかし、測定対象物によっては、試料の濃
度若しくは絶対量（ｘ）および実測値（ｙ）をそのまま
上記式１の１次関数式に代入したのみでは、十分な相関
関係が得られない場合がある。その結果、濃度若しくは
絶対量が未知の試料（以下、単に「未知試料」とい
う。）について、実測値ｙを代入して得たＸの値が信頼
性に乏しくなる。このような場合に、直線回帰式の相関
係数（ｒ）が１に近づくようｘおよび／またはｙの値を
一定の法則にしたがって変換することができれば、変換
したｘ’および／またはｙ’の値を式１に代入すること
で信頼性のあるＸ値を得ることが可能となる。相関係数
（ｒ）は、０．８〜１．０、好ましくは０．９〜１．
０、より好ましくは０．９８〜１．０とすることが信頼
性のある値を得るのに好適である。一定の変換式は、こ
のような相関係数を導くことができるものであれば、特
に限定されるものではないが、具体的にはBox-Cox変換
またはLog変換による変換式が例示される。

【００１７】Log変換は、ｘおよび／またはｙの値を文
言どおりLog変換することをいう。このような変換によ
り、変換後の値から相関係数（ｒ）が０．８〜１．０の
１次回帰線が得られる場合に適用される。

【００１８】Box-Cox変換式は、次の変換式で表され
る。（式２） λ＝０のときＹ^λ＝log Ｙ λ＝０でないときＹ^λ＝（Ｙ^λ−１）／λ このとき、λは任意の値であり、直線回帰式の相関係数
（ｒ）を限りなく１に近づけるようなλを選択すること
ができる。

【００１９】既知試料に基づき標準試料の値付けを行う
場合において、直線回帰式の相関係数（ｒ）が０．８〜
１．０となるように、Box-Cox変換式に従ってｘおよび
／またはｙの値を変換させる場合、適切なλ値を選択す
ることが必要である。適切なλ値を得るためには、既知
試料を濃縮および／または稀釈して、少なくとも２種の
濃度の既知試料検体を調製して、各検体の濃度若しくは
絶対量（ｘ）および実測値（ｙ）を求めることが必要で
ある。より正確な値を得るためには、濃度を変えた既知
試料検体を可能な限り多く調製し、多点についてｘおよ
びｙを求め、正確な測定曲線を得ることが必要である。
好ましくは４以上、より好ましくは３０以上の種類の濃
度の既知試料検体についてｘおよびｙを求めることで、
適切なλ値を選択してBox-Cox変換することができる。
変換される値は、ｘおよびｙのいずれであっても良い。

【００２０】（標準試料の値付けについて）本発明の標
準試料の測定対象物または絶対値の値付けは次のよう行
われる。まず、既知試料検体の濃度若しくは絶対量
（ｘ）および実測値（ｙ）を得、これらの値または一定
の変換式にしたがった変換値から一次関数式を得る。次
に、未知試料である標準試料について実測値を得、該実
測値または該一定の変換式にしたがった変換値を上記一
次関数式に代入することで、標準試料の濃度または絶対
値が計算により求められる。

【００２１】具体的には、既知試料を濃縮および／また
は稀釈して、多点について測定した実測値を基にBox-Co
x変換のλ値を選択し、変換した値に基づき一次関数式
を得る。未知試料である標準試料を測定し、実測値を選
択されたλ値に基づきBox-Cox変換し、その値を上記一
次関数式に代入し、標準試料の濃度または絶対値を計算
により求める。

【００２２】（標準試料の製造方法）本発明の標準試料
は、各測定分野の標準試料の製造方法において、公知あ
るいは今後開発される製造方法に従って製造することが
でき、該製造工程で上記方法による標準試料の値付けが
行われることが必要である。この値付けは、標準試料の
製造のいずれの工程で行われても良く、また通常の製造
施設同一の施設または異なる施設のいずれで行われてい
て良い。また、本発明の標準試料の剤型は液状、凍結乾
燥品、粉状品のいずれであっても良く、用事に適当な緩
衝液、生理食塩液または精製水等を用いて測定に適切な
試料として提供できれば良い。したがって、製造工程に
おいてこのような剤型にするための工程を組み込むこと
も可能である。

【００２３】（検査用方法および検査用試薬キット）本
発明は、上記値付けられた標準試料を用いて行う検査方
法にもおよぶ。さらに、上記値付けられた標準試料を１
種または濃度を変えて２種以上含む標準用試薬キットま
たは検査用試薬キットにも及ぶ。

【００２４】（免疫比濁阻害法について）本発明の標準
試料を用いて測定可能な例として、免疫比濁阻害法によ
るＨｂＡ１ｃの測定を例示して説明するが、本発明はこ
れらに限定されるものではない。なお、ＨｂＡ１ｃの臨
床検査値は、通常0.3 g/dl（総ヘモグロビン量に対し、
約4.0％程度）から2.0 g/dl（総ヘモグロビン量に対
し、約12.0％程度）の範囲内である。また、総ヘモグロ
ビン量に対するＨｂＡ１ｃの基準範囲は4.3％から5.8％
であり、糖尿病と診断されるのはＨｂＡ１ｃ＞6.5％で
ある。

【００２５】１）ＨｂＡ１ｃの測定全血を0.9％テトラデシルトリメチルアンモニウムブロ
マイドを主成分とする検体調製液で希釈し、抗原決定基
となるＨｂＡ１ｃのβ鎖Ｎ末端部分が露出した溶血検体
を調製する。溶血検体中のＨｂＡ１ｃに対して過剰量の
抗ＨｂＡ１ｃポリクローナル抗体（ヒツジ）を含む第１
試薬（R1）を添加した後、ＨｂＡ１ｃの抗原決定基を持
つポリハプテンを第２試薬（R2）として添加し、未反応
の抗体とポリハプテンとの複合物の濁度（340nm）を測
定することにより、ＨｂＡ１ｃ量を定量する。

【００２６】２）総ヘモグロビン量の測定総ヘモグロビン量は、上記溶血検体のヘモグロビン由来
の吸収（570nm）により比色定量する。

【００２７】３）総ヘモグロビン量に対するＨｂＡ１ｃ
量の比率ＨｂＡ１ｃ量と総ヘモグロビン量のそれぞれの測定結果
から総ヘモグロビン量に対するＨｂＡ１ｃ量、すなわち
ＨｂＡ１ｃ（％）が算出される。

【００２８】

【実施例】以下本発明を実施例により具体的に説明する
が、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。

【００２９】

【実施例１】（ＨｂＡ１ｃ測定用試薬キット）本キット
の構成は次の通りである。検体調製液ＨｂＡ１ｃ測定用第１試薬（R1）および第２試薬（R2）総ヘモグロビン測定用緩衝液標準試料（４濃度）

【００３０】（被検試料）被検試料は、全血（EDTA加血
あるいはヘパリン加血）１容量を１００容量の検体調製
液で希釈することにより調製し、溶血検体とした。標準
試料（４濃度）は、それぞれの凍結乾燥バイアルを2ml
の検体調製液で溶解したものを用いた。測定は、日立71
70自動分析機を用いて行った。測定手法の概略を図１に
示した。

【００３１】

【実施例２】実施例ＨｂＡ１ｃ測定用の標準試料を次の
方法で調製し、値付けを行った。１）ＨｂＡ１ｃ測定用の標準試料として、４点のヒト血
球成分凍結乾燥品として作製したものを用い、それぞれ
の凍結乾燥バイアルを2mlの検体調製液で溶解した。既
知試料としてＪＤＳ標準品(Lot.2)を用いた。２）５濃度の既知試料（ＨｂＡ１ｃ表示値＝4.04％、5.
38％、7.32％、9.88％、12.63％）をそれぞれ８段階希
釈し、様々な総ヘモグロビン量、ＨｂＡ１ｃ量を示す４
０の既知試料検体を調製した。３）ＨｂＡ１ｃ（％）と比色法（570 nm）により測定
した総ヘモグロビン量から、各既知試料のＨｂＡ１ｃ量
を0.18 g/dlから3.06 g/dlと算出した。４）上記４０の既知試料検体について、ＨｂＡ１ｃ測定
用試薬を用で波長340nmでの吸光度を求め、得られた実
測値（ｙ）をBox-Cox変換（λ＝-0.05）した。既知試料
検体のＨｂＡ１ｃ量（ｘ）とBox-Cox変換後の実測値
（ｙ’）の関係は図２に示した。その結果、直線回帰式
（１次関数式）が得られた（式３）。（式３）Ｙ＝-0.777Ｘ−0.269 また、相関係数はｒ＝0.996となり、ＨｂＡ１ｃ量とBox
-Cox変換した測定吸光度は良好な直線性を示した。５）次に４点の標準試料についても、上記既知試料と同
様にＨｂＡ１ｃ測定用試薬を用いて吸光度を求め、得ら
れた実測値（ｙ）をBox-Cox変換（λ＝-0.05）した。上
記式３に、４点の標準試料のBox-Cox変換値（ｙ’）を
代入することによりＨｂＡ１ｃ量を求め、値付けを行っ
た。その結果、各標準試料のＨｂＡ１ｃ量は、それぞれ
Std-1：0.42 g/dl、Std-2：1.08 g/dl、Std-3：1.81 g/
dl、Std-4：2.70 g/dlであった。

【００３２】（実験例１）標準試料の正確性の確認上記実施例２で使用した既知試料（ＪＤＳ標準品(Lot.
2)）から調製した４０の既知試料検体について、ＨｂＡ
１ｃ量（ｘ）および吸光度実測値（ｙ）から作成した検
量線を図２に示した。また、上記実施例１で作製した４
種の濃度の標準試料についてのＨｂＡ１ｃ量（ｘ）およ
び吸光度実測値（ｙ）を、同様に図２に示した。

【００３３】その結果、４０の既知試料検体から得られ
た検量線は0.2 g/dlから1.0 g/dl付近までの領域ではほ
ぼ直線的であり、1.0 g/dl付近から2.0 g/dl付近までは
緩やかな曲線を描いた。また2.0 g/dl以上ではほとんど
吸光度変化が認められなかった。４種の標準試料は、こ
の検量線の変極点付近に位置し、精製水及び４点の標準
試料から得られる検量線はＪＤＳ標準品(Lot.2)をもと
に作成した検量線とよく一致した。

【００３４】（実験例２）ＪＤＳ値に対する正確性（Ｈ
ＰＬＣ法との比較） 146例の実検体試料およびＪＤＳ標準品(Lot.2)につい
て、本試薬キットの測定法およびＪＤＳ標準品で標準化
したHPLC法によりＨｂＡ１ｃを測定し、各測定法により
得られた測定値の相関性を調べた。その結果を図４に示
した。本試薬キットの測定値（Ｍ）とＪＤＳ値（Ｎ）の
関係はＮ＝1.012Ｍ−0.108による直線回帰式が得られ、
相関係数r＝0.989と良好な相関性を示した。またＪＤＳ
標準品(Lot.2)は、実検体試料とほぼ同じ回帰式上に位
置し、ＪＤＳ標準品(Lot.2)を基準とした実検体試料の
測定値の管理が可能であることが示された。

【００３５】（実験例３）表示値に対する正確性ＪＤＳ標準品(Lot.2)について、本試薬キットを用いて
ＨｂＡ１ｃを測定したときの平均測定値（n=5）および
各表示値に対する相対比を調べた。

【００３６】その結果を表１に示した。標準品の最低濃
度（ＨｂＡ１ｃ＝4.04％）では相対値113%、最高濃度
（ＨｂＡ１ｃ＝12.63％）では相対値108％であり、若干
高値を示したが、臨床検体が集中するその他の濃度では
いずれも相対比は105％以内であり、高い正確性を示し
た。

【００３７】

【表１】

【００３８】（実験例４）低値検体および高値検体に対
する正確性実験体試料の内、低値検体を１０回連続して測定したと
きの平均測定値±標準偏差は4.90％±0.05、CV=0.98％
であり、高値検体では9.66％±0.09、CV=0.95％であ
り、良好な同時再現性を示した。

【００３９】

【発明の効果】以上説明したように、本発明の方法によ
り調製された標準試料を用いて測定を行うと正確性に優
れた測定値を得ることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＨｂＡ１ｃ測定方法の概略を示す図である。
（実施例１）

【図２】既知試料についての実測値のBox-Cox変換後の
標準曲線を示す図である。（実施例２）

【図３】既知試料についての実測値の標準曲線を示す図
である。（実験例２）

【図４】本試薬キットの測定法およびＨＰＬＣ測定法の
各測定値（％）の比較を示す図である。（実験例１）

【符号の説明】

○ 既知試料検体（図２）（図３） ◆ 標準試料（図２）（図３） ● 実検体試料（図４） □ 標準試料（図４）

フロントページの続き (72)発明者高山三松兵庫県神戸市中央区脇浜海岸通１丁目５番１号シスメックス株式会社内Ｆターム(参考） 2G042 AA01 BD19 HA10 2G045 AA13 CA25 DA48 FA11 FB03 GC10 JA02 2G052 AA30 AB17 AD46 FD01 GA12 JA09 2G059 AA01 BB12 BB13 CC16 CC18 DD20 EE01 FF08 FF12 HH02 HH06 MM01 MM02 MM12

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】測定対象物の濃度もしくは絶対量が既知
の試料（既知試料）から少なくとも２種の濃度の検体を
調製し、各測定対象物の濃度若しくは絶対量（ｘ）とそ
の実測値（ｙ）に基づき標準試料の値付けを行う場合に
おいて、直線回帰式の相関係数（ｒ）が０．８〜１．０
となるように、一定の変換式に従ってｘおよび／または
ｙの値を変換させてｘ’、ｙ’値を得、ｘ若しくはｘ’
およびｙ若しくはｙ’のいずれかの値に基づき一次関数
式を得、該関数式に実測値を代入して行う標準試料の値
付け方法。
【請求項２】上記実測値ｘからｘ’および／またはｙ
からｙ’への一定の変換式が、Box-Cox変換またはLog変
換である請求項１に記載の方法。
【請求項３】上記実測値が吸光度の測定シグナルによ
り得られるものである請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】上記の測定が免疫学的手法により行われ
る請求項１〜３のいずれか１に記載の方法。
【請求項５】上記目的対象物がＨｂＡ１ｃである請求
項１〜４のいずれか１に記載の方法。
【請求項６】請求項１〜５のいずれか１に記載の方法
で値付けられた標準試料。
【請求項７】請求項６に記載の標準試料の製造方法。
【請求項８】請求項６に記載の標準試料を使用する検
査方法。
【請求項９】請求項６に記載の標準試料を構成試薬と
して含む検査用試薬キット。