JP2003169667A - 果糖資化性酵母 - Google Patents
果糖資化性酵母Info
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Abstract
も、果糖の資化性が高く、アルコール収得を低下させず
に酒類を製造できる新規な酵母及びその分離技術を提供
することを目的とする。また、もろみ温度が高温であっ
ても、アルコール発酵中の酢酸生成が少なく、製品中の
酢酸濃度が低い酒類を製造できる新規な酵母及びその分
離技術を提供することを目的とする。 【解決手段】酵母から、高温、高エタノール条件下で、
果糖を炭素源として生育でき、果糖資化性及びアルコー
ル収得が高く、酢酸生成の少ない酵母の分離し、得られ
た酵母を用いて酒類を製造することで、上記課題を解決
した。
Description
て、高温条件下においてもアルコール収得が高いサッカ
ロマイセス セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)
に属する酵母並びに当該酵母を使用する酒類及びその製
造法に関するものである。
熱により高温となるため、もろみを冷却する必要があ
る。特に黒糖焼酎においては、黒糖を投入後もろみ温度
が急昇するため、温度制御が難しい。
(醸造協会誌87、453(1992))により報告さ
れている。中田らは、黒糖の集積培養液から糖高濃度条
件で発酵が良好な酵母を分離した。この酵母はもろみ温
度27℃の条件で発酵試験したとき、他の焼酎用酵母と
比較して黒糖焼酎製造においてアルコール生成能が高か
った。
究報告8、1(1994))は、焼酎用酵母の分離を目
的として、鹿児島2号酵母(K2)、4号酵母(C4)
及び5号酵母(H5)の発酵試験を行った。もろみの最
高温度を35℃としたとき、30℃の場合と比較して、
各酵母は発酵中に酢酸を多く生成した。
高エタノール条件下で、果糖を炭素源にして生育できる
新規な酵母及びその分離技術を提供することを目的とす
る。本発明者らは、もろみ温度が高温であっても、果糖
の資化性が高く、アルコール収得を低下させずに酒類を
製造できる新規な酵母及びその分離技術を提供すること
を目的とする。本発明者らは、もろみ温度が高温であっ
ても、アルコール発酵中の酢酸生成が少なく、製品中の
酢酸濃度が低い酒類を製造できる新規な酵母及びその分
離技術を提供することを目的とする。
を鋭意検討した結果、次に記載した発明を完成した。本
発明者らは、黒糖焼酎製造において、もろみ温度が高温
となった場合、酵母の果糖資化性が低下し、その結果ア
ルコール収得が低下することを見いだした。そこで本発
明者らは、高温、高エタノール条件下で、果糖を炭素源
にして生育できる果糖資化性酵母を分離した。次いで、
この果糖資化性酵母を用いて、もろみ温度が高温であっ
ても、果糖の資化性が高く、アルコール収得の高い高発
酵能酵母を分離するという新規な方法を確立した。さら
に、この高発酵能酵母を用いて黒糖焼酎を製造すること
で、上記課題を解決した。
べて、酵母はアルコール発酵中に、もろみ中で過剰に酢
酸を生成しやすい。そこで本発明者らは、高温、高エタ
ノール条件下で、果糖を炭素源にして生育できる果糖資
化性酵母を分離した。次いで、この果糖資化性酵母を用
いて、もろみ温度が高温であっても、酢酸生成の少ない
低酢酸生成酵母を分離するという新規な方法を確立し
た。この低酢酸生成酵母を用いて黒糖焼酎を製造するこ
とで、上記課題を解決した。
タノールを生成するすべての酵母である。また酵母は分
離前に変異処理を行っても差し支えない。本発明におい
て、果糖資化性酵母は、培養温度35〜45℃、好まし
くは35℃〜40℃、エタノール濃度40〜120g/
lの培養条件下で果糖を炭素源に生育できる酵母であ
る。
化性酵母を分離するための選択用培地であり、エタノー
ルを40〜120g/l含有し炭素源を果糖とする固層
培地である。この培地の組成は、例えば、エタノール4
0〜120g/l、Difco Nitrogen Base6.7g/
l、果糖5〜200g/l、寒天20g/lである。こ
の培地に適量の酵母を塗抹し、培養温度35〜45℃、
好ましくは35〜40℃で生育したコロニーを分離す
る。
ら高発酵能酵母又は低酢酸生成酵母を分離するための試
験である。そのもろみは、黒糖100重量部、米麹30
〜100重量部、水200〜400重量部の組成であ
る。本発明において、もろみ温度は、上述のもろみの温
度を指す。
温度35〜45℃、好ましくは35〜40℃の条件で発
酵試験を行い、発酵もろみ中の残存果糖濃度が1〜20
g/lとなり、発酵歩合が85〜95%となる酵母であ
る。果糖濃度は、高速液体クロマトグラフィーを用いた
外部標準物質による絶対検量線法で定量する。発酵歩合
は、発酵終了もろみ中の純エタノール容量と全原料(米
麹及び黒糖)から得られる理論上の純エタノール容量の
割合から求める(アルコールハンドブック(財)発酵工
業協会)。その際に必要なアルコール度数、原料の全糖
分の測定は国税庁所定分析法による。
み温度35〜45℃、好ましくは35〜40℃の条件で
発酵試験を行い、もろみ中の酢酸濃度が400〜700
mg/lとなる酵母である。もろみ中の酢酸濃度は、高
速液体クロマトグラフィーを用いた外部標準物質による
絶対検量線法で定量する。
る、アルコール分1度以上の飲料をいう。狭義には、果
糖又は蔗糖を含有する原料を用いて得られる、アルコー
ル分1度以上の飲料をいう。
(以下、Saccharomyces cerevisiaeとする)に属する果
糖資化性酵母は、Saccharomyces cerevisiaeに属する酵
母を用いて、培養温度35〜45℃、好ましくは35〜
40℃、エタノール濃度40〜120g/l、炭素源が
果糖の培養条件で生育可能な酵母を分離して得られる。
これらの酵母のうち、Ka4-3、Ka4-10及びKa5-5を寄託し
た。それぞれの寄託番号は、FERM P-18636、FERM P-186
37及びFERM P-18638である。
る高発酵能酵母は、Saccharomyces cerevisiaeに属する
酵母を用いて、もろみ温度35〜45℃、好ましくは3
5〜40℃の条件で発酵試験し、残存果糖濃度が1〜2
0g/lであり、かつ発酵歩合が85〜95%である酵
母を分離して得られる。これらの酵母のうち、Ka4-3及
びKa4-10を寄託した。それぞれの寄託番号は、FERM P-1
8636及びFERM P-18637である。
る低酢酸生成酵母は、Saccharomycescerevisiaeに属す
る酵母から、もろみ温度35〜45℃、好ましくは35
〜40℃の条件で発酵試験し、もろみ中の酢酸生成が4
00〜700mg/lである酵母を分離して得られる。
これらの酵母のうち、Ka4-3及びKa5-5を寄託した。それ
ぞれの寄託番号は、FERM P-18636及びFERM P-18638であ
る。
くは35〜40℃、エタノール濃度40〜120g/
l、炭素源が果糖の培養条件で生育可能であって、もろ
み温度35〜45℃、好ましくは35〜40℃の条件で
発酵試験し、残存果糖濃度が1〜20g/lであり、発
酵歩合が85〜95%であり、もろみ中の酢酸生成が4
00〜700mg/lである酵母を分離して得られるSa
ccharomyces cerevisiaeに属する酵母も含まれる。これ
らの酵母のうち、Ka4-3を寄託した。この寄託番号は、F
ERM P-18636である。
も1つを使用する酒類製造方法である。本発明は、これ
らの製造方法により製造される酒類である。
母をエタノール40〜120g/l含有し炭素源を果糖
とする果糖選択培地に塗抹し、培養温度35〜45℃、
好ましくは35〜40℃の条件下にて静置培養し、生育
した酵母を分離することからなる。
をもろみ温度35〜45℃、好ましくは35〜40℃に
て発酵試験し、残存果糖が1〜20g/lであり、かつ
発酵歩合が85〜95%である酵母を分離することから
なる。
母をもろみ温度35〜45℃、好ましくは35〜40℃
にて発酵試験し、もろみ中の酢酸生成が400〜700
mg/lである酵母を分離することからなる。
を炭素源にして生育できる酵母(以下、果糖資化性酵
母)は以下の手法により分離できる。純粋培養した酵母
又はもろみ中の酵母群を果糖選択培地に塗抹し、高温下
で生育した酵母を分離することから成る。具体的には以
下のとおりである。
成できる酵母すべてを用いることができ、保存菌株から
の純粋培養又は発酵もろみ中に存在する酵母群を用いる
ことができる。純粋培養における培養液は、その酵母が
生育可能なものであれば特に限定されない。また酵母は
分離前に変異処理を行っても差し支えない。変異処理と
しては、紫外線、X線、γ線などの放射線の照射、化学
的変異誘発剤、例えば亜硝酸、エチルメタンスルホネー
ト、N−メチル−N−ニトロ−N−ニトロソグアニジ
ン、アクリジン色素誘導体を接触させる方法がある。
を、遠心分離により集菌し滅菌水で洗浄する。この洗浄
操作を複数回繰り返す。洗浄した菌塊を果糖選択培地に
適量塗抹する。果糖選択培地は、果糖資化性酵母を分離
するための選択用培地であり、エタノール40〜120
g/l含有し炭素源を果糖とする固層培地である。この
培地の組成は、例えば、エタノール40〜120g/
l、Difco Nitrogen Base6.7g/l、果糖5〜20
0g/l、寒天20g/lである。この培地に適量の酵
母を塗抹し、培養温度35〜45℃、好ましくは35〜
40℃で生育したコロニーを分離する。この分離法はさ
らに適当な回数繰り返して処理しても良い。
l未満では、エタノール耐性の低い酵母も生育し、目的
の酵母の分離が困難になる。また、エタノール濃度が1
20g/lを超えると、酵母が生育できないか、生育が
非常に遅くなり、培養期間が著しく長くなる。培養温度
は35℃未満では、高温耐性の低い酵母も生育し、目的
の酵母の分離が困難になる。また、45℃を超えると、
酵母が生育できないか、生育が非常に遅くなり、培養期
間が著しく長くなる。
性が高く、アルコール収得収得が低下しない酵母(以
下、高発酵能酵母)は、以下の手法で分離できる。果糖
資化性酵母を用いて、発酵試験を行う。そのもろみは、
黒糖100重量部、米麹30〜100重量部、水200
〜400重量部の組成である。次に発酵終了もろみの果
糖濃度及び発酵歩合から、高発酵能酵母を分離すること
から成る。具体的には以下のとおりである。
に果糖資化性酵母を培養する。次に、培養液、米麹、水
を混合し1次もろみを仕込む。1次もろみの組成は米麹
100重量部、水100〜140重量部である。培養液
は1次もろみ仕込み時点で酵母密度1×104〜1×1
07/ml、好ましくは1×105〜1×106/ml
となるように添加する。酵母密度は国税庁所定分析法に
より測定する。この1次もろみを、2〜7日間発酵させ
る。
水200〜400重量部を加え2次もろみを仕込み、1
〜5日間発酵させる。さらに上記2次もろみに黒糖10
0重量部、水200〜400重量部を加え3次もろみを
仕込み,発酵が終了するまで、8〜16日間発酵させ
る。
次もろみの任意の時期に、高温経過を実現するため、6
〜24時間、35〜45℃、好ましくは35〜40℃と
する。その後25〜32℃とする。発酵終了もろみの果
糖濃度及びアルコール度数を測定し、果糖濃度が1〜2
0g/lであり、発酵歩合が85〜95%であるものに
ついて高発酵能酵母として分離する。
発酵中の酢酸生成が少ない酵母(以下、低酢酸生成酵
母)は、以下の手法で選別できる。高発酵能酵母と同様
に、発酵試験を行ない、次に発酵終了もろみの酢酸濃度
を高速液体クロマトグラフィーの外部標準物質による絶
対検量線法により定量し、酢酸濃度400〜700mg
/lの範囲にあるものを低酢酸生成酵母として分離す
る。
より分離した。黒糖もろみ中のSaccharomycescerevisia
eに属する酵母を遠心分離により集菌し滅菌水で洗浄し
た。この洗浄操作を3回繰り返した。洗浄した菌塊を果
糖選択培地(エタノール80g/l、Difco Nitrogen B
ase6.7g/l、果糖5g/l、寒天20g/l)に
適量塗抹し、培養温度40℃で14日間静置培養した。
この結果、果糖資化性酵母20株のコロニーが出現し
た。これらの酵母のうち、Ka4-3、Ka4-10及びKa5-5を寄
託した。それぞれの寄託番号は、FERM P-18636、FERM P
-18637及びFERM P-18638である。
より分離した。実施例1で得た果糖資化性酵母を用い
て、表1に示したもろみ組成で発酵試験を行った。すな
わち、米麹20g、水24g及び酵母培養液0.5gを
200ml容の三角フラスコに加え1次もろみを仕込
み,5日間発酵した。この1次もろみに,黒糖20gを
水60gに溶解した黒糖溶液を加え2次もろみを仕込
み,2日間発酵した。この2次もろみに黒糖30gを水
50gに溶解した黒糖溶液を加え,3次もろみを仕込み
12日間発酵した。発酵条件として、もろみ温度を1次
仕込みから3次仕込み後24時間経過するまで30℃に
保ち、その後16時間を37℃に保ったのち,30℃に
保った。
に示した。また発酵歩合及び発酵終了もろみの果糖濃度
を表2に示した。この結果、高温条件下においても、残
存果糖濃度が1〜20g/lであり、かつ発酵歩合が8
5〜95%であるアルコール発酵能が高い酵母を9株分
離できた。この分離した酵母を表2の評価欄の○印で示
した。これらの酵母のうち、Ka4-3及びKa4-10を寄託し
た。それぞれの寄託番号は、FERM P-18636及びFERM P-1
8637である。高発酵能酵母は、高温条件下においても既
存の酵母と比べて極めて果糖資化性が高く、またアルコ
ール収得も高い。
s cerevisiaeに属する酵母の鹿児島2号酵母(K2)を
用いて、実施例2と同様の条件で発酵試験を行った。仕
込み中の炭酸ガス減量経過を図1に示した。また発酵歩
合及び発酵終了もろみの果糖濃度を表2に示した。この
結果が示すように、K2は炭酸ガス減量が少ないことが
わかる。
により分離した。実施例1で得た果糖資化性酵母及び比
較対照の既存株としてSaccharomyces cerevisiaeに属す
る酵母である鹿児島2号酵母(K2)を用いて、実施例
2同様に発酵試験を行った。発酵終了もろみの酢酸濃度
を表2に示した。この結果、高温条件下においても、も
ろみ中の酢酸濃度が400〜700mg/lである酢酸
生成の少ない酵母を17株分離できた。この分離した酵
母を表2の評価欄の○印で示した。これらの酵母のう
ち、Ka4-3及びKa5-5を寄託した。それぞれの寄託番号
は、FERM P-18636及びFERM P-で18638ある。低酢酸生成
酵母は、高温条件下においても既存の酵母と比べてアル
コール発酵中に生成する酢酸が極めて少ない。
cerevisiaeに属する酵母の鹿児島2号酵母(K2)を用
いて、実施例3と同様の条件で発酵試験を行った。発酵
終了もろみの酢酸濃度を表2に示した。この結果が示す
ように、K2は1430mg/lと酢酸濃度が極めて高
い。
(以下4−3酵母)を用いて、表3に示したもろみ組成
で発酵試験を行った。すなわち、米麹36g、水36g
及び酵母培養液0.5gを300ml容の三角フラスコ
に加え1次もろみを仕込み,5日間発酵した。この1次
もろみに黒糖30gを水90gに溶解した黒糖溶液を加
え2次もろみを仕込み,2日間発酵した。この2次もろ
みに黒糖30gを水90gに溶解した黒糖溶液に加え3
次もろみを仕込み,9日間発酵した。
から3次仕込み後24時間経過するまで30℃に保ち、
その後16時間を37℃に保ち、さらにその後30℃に
保った。仕込み中の炭酸ガス減量経過を図2に示した。
また発酵歩合及び発酵終了もろみの果糖濃度を表4に示
した。この結果、本発明者らが分離したKa4−3酵母
は、高温条件下においても、残存果糖濃度が2g/lで
あり、発酵歩合が90.2%である、極めて優れた高発
酵能酵母である。またKa4−3酵母は、もろみ中の酢酸
濃度が504mg/lであり、極めて優れた低酢酸生成
酵母であった。
属する既存酵母である鹿児島2号酵母(K2)、鹿児島
5号酵母(H5)、協会酵母(SH−4)、泡盛1号酵
母(AW−1)、宮崎酵母(MK)を用いて、実施例4
と同様の条件で発酵試験を行った。仕込み中の炭酸ガス
減量経過を図2に示した。また発酵歩合及び発酵終了も
ろみの果糖濃度を表4に示した。この結果,これら既存
の酵母は,炭酸ガス減量が少なく,酢酸濃度が高い。本
発明者らが選別したKa4−3酵母は、既存酵母と比較し
て、高温条件下においても果糖資化性及びアルコール収
得が高く、酢酸生成が少ない。
により、高温、高エタノール条件下で、果糖を炭素源に
して生育できる酵母を分離する新規な技術を完成した。
この技術により、新規な酵母を取得できる。
あっても、果糖の資化性が高く、アルコール収得を低下
させずに酒類を製造できる酵母を分離する新規な技術を
完成した。この技術により、高温条件下においても、残
存果糖濃度が1〜20g/lであり、かつ発酵歩合が8
5〜95%である、アルコール発酵能が高い新規な酵母
を分離できる。これらの分離酵母は、高温条件下におい
ても既存の酵母と比べて極めて果糖資化性が高く、また
アルコール収得も高い。
温であっても、アルコール発酵中の酢酸生成が少なく、
製品中の酢酸濃度が低い酒類を製造できる酵母を分離す
る新規な技術を完成した。この技術により、もろみ中の
酢酸濃度が400〜700mg/lである酢酸生成の少
ない酵母を分離できる。これらの分離酵母は、高温条件
下においても既存の酵母と比べてアルコール発酵中に生
成する酢酸が極めて少ない。
ある鹿児島2号酵母(K2)の発酵経過を示すグラフで
ある。
株の発酵経過を示すグラフである。
Claims (9)
- 【請求項1】サッカロマイセス セレビシエ(Saccharo
myces cerevisiae)に属する酵母を用いて、培養温度3
5〜45℃、好ましくは35〜40℃、エタノール濃度
40〜120g/l、炭素源が果糖の培養条件で生育可
能である酵母を分離して得られるサッカロマイセス セ
レビシエ(Saccharomyces cerevisiae)に属する果糖資
化性酵母。 - 【請求項2】サッカロマイセス セレビシエ(Saccharo
myces cerevisiae)に属する酵母を用いて、もろみ温度
35〜45℃、好ましくは35〜40℃の条件で発酵試
験し、残存果糖濃度が1〜20g/lであり、かつ発酵
歩合が85〜95%である酵母を分離して得られるサッ
カロマイセス セレビシエ(Saccharomyces cerevisia
e)に属する高発酵能酵母。 - 【請求項3】サッカロマイセス セレビシエ(Saccharo
myces cerevisiae)に属する酵母を用いて、もろみ温度
35〜45℃、好ましくは35〜40℃の条件で発酵試
験し、もろみ中の酢酸濃度が400〜700mg/lで
ある酵母を分離して得られるサッカロマイセス セレビ
シエ(Saccharomyces cerevisiae)に属する低酢酸生成
酵母。 - 【請求項4】サッカロマイセス セレビシエ(Saccharo
myces cerevisiae)に属する酵母を用いて、培養温度3
5〜45℃、好ましくは35〜40℃、エタノール濃度
40〜120g/l、炭素源が果糖の培地において生育
でき、さらにもろみ温度35〜45℃、好ましくは35
〜40℃の条件で発酵試験し、残存果糖濃度が1〜20
g/lであり、発酵歩合が85〜95%であり、もろみ
中の酢酸濃度が400〜700mg/lである酵母を分
離して得られるサッカロマイセス セレビシエ(Saccha
romyces cerevisiae)に属する酵母。 - 【請求項5】請求項1から請求項4に記載した少なくと
も一つの酵母を使用する酒類の製造方法。 - 【請求項6】請求項5に記載した製造方法により製造さ
れた酒類。 - 【請求項7】酵母をエタノール40〜120g/l含有
し炭素源を果糖とする果糖選択培地に塗抹し、培養温度
35〜45℃、好ましくは35〜40℃の条件下にて静
置培養し、生育した酵母を分離することからなる果糖資
化性酵母の分離方法。 - 【請求項8】酵母を、もろみ温度35〜45℃、好まし
くは35〜40℃にて発酵試験し、残存果糖濃度が1〜
20g/lであり、かつ発酵歩合が85〜95%である
酵母を分離することからなる高発酵能酵母の分離方法。 - 【請求項9】酵母を、もろみ温度35〜45℃、好まし
くは35〜40℃にて発酵試験し、もろみ中の酢酸濃度
が400〜700mg/lである酵母を分離することか
らなる低酢酸生成酵母の分離方法。
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---|---|---|---|---|
CN102827719A (zh) * | 2012-08-21 | 2012-12-19 | 黄先全 | 气动压曲机及压曲方法 |
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2001
- 2001-12-10 JP JP2001375459A patent/JP3876975B2/ja not_active Expired - Fee Related
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CN102827719A (zh) * | 2012-08-21 | 2012-12-19 | 黄先全 | 气动压曲机及压曲方法 |
CN102827719B (zh) * | 2012-08-21 | 2013-07-24 | 黄先全 | 气动压曲机及压曲方法 |
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