JP2003155237A - 免疫調節剤、細胞接着阻害剤および自己免疫疾患の治療・予防剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】免疫調節剤、細胞接着阻害剤および慢性関節リ
ウマチを除く自己免疫疾患の予防・治療剤を提供する。 【解決手段】一般式 の４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその
塩などは、優れた免疫調節作用および細胞接着阻害作用
を発揮し、さらに、慢性関節リウマチを除く自己免疫疾
患に対して、ステロイド剤に匹敵する改善効果が期待で
きる。したがって、４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン
誘導体またはその塩などは、慢性関節リウマチを除く自
己免疫疾患（たとえば、全身性エリテマトーデス、強皮
症、混合性結合組織病、結節性多発動脈炎、多発性筋炎
／皮膚筋炎、シューグレン症候群、ベーチェット病、多
発性硬化症、自己免疫性糖尿病、橋本病、乾癬、原発性
粘液水腫、悪性貧血、重症筋無力症、潰瘍性大腸炎、慢
性活動性肝炎、自己免疫性溶血性貧血および特発性血小
板減少性紫斑病など）の治療および予防に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、一般式［１］

【化１２】 「式中、Ｒ¹は、ハロゲン原子で置換されていてもよい
アルキル、アルケニルまたはアリール基を；Ｒ²は、水
素原子、アルキル基またはアシル基を；Ｒ³は、水素原
子、ハロゲン原子、シアノ基、アジド基、カルボキシル
基、ヒドロキシル基、ホルミル基もしくはアルコキシカ
ルボニル基または置換されていてもよいアルキル、アル
コキシ、フェノキシ、シクロアルキル、カルバモイル、
アミノもしくはフェニル基を；Ｒ⁴は、水素原子、ハロ
ゲン原子、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、アシ
ル基、ヒドロキシル基もしくはアルコキシカルボニル基
または置換されていてもよいアルキル、アルコキシ、ア
ルキルチオ、フェニルチオ、アルキニル、アルケニル、
スルファモイル、アルカンスルフィニル、アルカンスル
ホニル、アミジノ、フェニルもしくは複素環式基、また
は式

【化１３】 もしくは式

【化１４】 （式中、Ｒ⁶は、水素原子、ヒドロキシル基、シアノ基
もしくはアルコキシカルボニル基または置換されていて
もよいアルキル、シクロアルキル、フェニル、アミノ、
アシル、カルバモイル、アルカンスルホニル、イミノメ
チルもしくはアミジノ基を；Ｒ⁷は、水素原子、置換さ
れていてもよいアルキル、アルコキシ、フェニル、シク
ロアルキルもしくは複素環式基を示すかまたはＲ⁶とＲ⁷
が隣接する窒素原子と一緒になって３〜７員環の置換さ
れていてもよい複素環式基を示す。）で表わされる基
を；Ｒ⁵は、置換されていてもよいフェニル、チエニ
ル、フリルまたはピリジル基を；Ｚは、酸素原子、硫黄
原子またはイミノ基を；および破線は、単結合または二
重結合を示す。」で表わされる４Ｈ−１−ベンゾピラン
−４−オン誘導体またはその塩を有効成分とする細胞接
着阻害剤、慢性関節リウマチを除く自己免疫疾患を予防
・治療剤および一般式［１ａ］

【化１５】 「式中、Ｒ^1aは、ハロゲン原子で置換されていてもよい
低級アルキル基を；Ｒ^3aは、水素原子または置換されて
いてもよいアルキル基を；Ｒ^4aは、水素原子、カルボキ
シル基、置換されていてもよいアルキルチオ、置換され
ていてもよいアシルアミノまたはカルバモイル基を；Ｒ
^5aは、置換されていてもよいフェニル基を；Ｚ^aは、酸
素原子またはイミノ基を示す。」で表わされる４Ｈ−１
−ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩を有効成
分とする免疫調節剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】自己免疫疾患は、自己抗原に対する自己
抗体や細胞性免疫などの免疫応答が原因となって起こる
疾患の総称であり、たとえば、慢性関節リウマチ、全身
性エリテマートデス、強皮症、混合性結合組織症、結節
性多発動脈炎、多発性筋炎／皮膚筋炎、シューグレン症
候群、ベーチェット症、多発性硬化症、自己免疫性糖尿
病、橋本病、乾癬、原発性粘液水腫、悪性貧血、重症筋
無力症、潰瘍性大腸炎、慢性活動性胆炎、自己免疫性溶
血性貧血および特発性血小板減少性紫斑病などが挙げら
れる。自己免疫疾患の発症機序については、遺伝的要因
や環境因子がその根底にあり、ウイルス感染などが引き
金となり、免疫異常を通して発症するものと考えられて
いる。従来、このような疾患の治療には非ステロイド性
抗炎症剤などによる炎症症状の抑制といった対症療法が
主として行われてきたが、その有効性については限界が
あり、本質的な治療には至っていないのが現状である。
一方、ステロイド性抗炎症剤は比較的有効な薬剤とされ
ているが、副作用の点で使用が制限されている。このよ
うな状況下で、最近は免疫調節作用および／または細胞
接着阻害作用に基づいて免疫異常および細胞接着の異常
亢進を改善するという原因療法により近づいた療法が注
目されるようになってきており、免疫調節作用を有する
薬剤として、たとえば、アニュアル・レポーツ・イン・
メディシーナル・ケミストリー(Annu.Rep.Med. Che
m.)、第21巻、第201 -210頁（1986年）には、D-ペニシ
ラミンやスルファサラジンなどが挙げられている。ま
た、細胞接着分子の細胞表面への発現を抑制する薬物
は、自己免疫疾患の治療に有用であると期待されている
［アルスリティス・アンド・リウマチズム（Arthritis
and Rheumatism）、第36巻、第2号、第147-157頁(1993
年)；臨床免疫、第26巻、第2号、第190ー197頁（1994
年）］。

【０００３】一般式［１］および［１ａ］の４Ｈ−１−
ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩は、既知化
合物であり、抗炎症作用、解熱鎮痛作用、抗関節炎作用
および抗アレルギー作用を有すること（特開平２−4977
8号）およびインターロイキン１および６の産生抑制作
用を発揮し、インターロイキン１および６の産生異常が
原因となる症状の予防および治療に有用であること［ジ
ャーナル・オブ・ファルマコビオ・ダイナミックス（J.
Pharmacobio-Dyn.）、第15巻、第649-655頁（1992
年）］が知られている。しかし、免疫調節作用および／
または細胞接着阻害作用に基づいて免疫異常または細胞
接着の異常亢進を改善する作用を有することは知られて
いない。

【０００４】従来、免疫調節剤または自己免疫疾患の治
療薬として、D−ペニシラミンおよびロベンザリットな
どが用いられている。しかし、これらの薬物の種類は限
られており、また、免疫異常の改善効果が十分でなく、
長期間投与の場合、効果が逓減し、免疫調節剤としては
決して満足できるものではない。また、細胞接着阻害剤
は実用化に向けて研究中である［ドラッグ・ニュース・
アンド・パースペクティブス（Drug News & Perspectiv
es）第5巻、第6号、第331-337頁（1992年）］。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】それ故、優れた免疫異
常の改善および細胞接着の異常亢進の軽減作用を有す
る、免疫調節剤、細胞接着阻害剤および自己免疫疾患を
予防・治療剤の開発が望まれていた。本発明の目的は、
免疫調節剤、細胞接着阻害剤および慢性関節リウマチを
除く自己免疫疾患を予防・治療剤を提供することであ
る。

【０００６】

【課題を解決するための手段】このような状況下におい
て、本発明者らは鋭意研究を行った結果、一般式［１］
および［１ａ］の４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン誘
導体またはその塩が、上記目的を達成することを見出
し、本発明を完成するに至った。以下、本発明の医薬に
関する化合物について詳述する。

【０００７】本明細書において各用語は、特にことわら
ない限り、以下の意味を有する。アルキル基とは、好ま
しくは、メチル、エチル、n-プロピル、iso-プロピル、
n-ブチル、iso-ブチル、tert−ブチル、ペンチル、ヘキ
シル、ヘプチルおよびオクチルなどのようなＣ_1-8アル
キル基を；シクロアルキル基とは、好ましくは、シクロ
プロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキ
シルおよびシクロヘプチルなどのような Ｃ_3-8シクロ
アルキル基を；アルケニル基とは、好ましくは、ビニ
ル、アリル、１−プロペニルおよび１-ブテニルなどの
ようなＣ_2-8アルケニル基を；アルコキシ基とは、-Ｏ-
アルキル基（アルキル基は、上記したアルキル基を示
す。）を；アシル基とは、好ましくは、ホルミル基また
はアセチル、プロピオニルおよびブチリル基などのよう
なＣ_2-8アルカノイル基またはメトキサリルおよびエト
キサリルなどのアルコキシオキサリル基、シクロヘキサ
ンカルボニルのようなＣ_3-8シクロアルカンカルボニル
基またはベンゾイル基のようなアロイル基などを；アル
コキシカルボニル基とは、−ＣＯＯ−アルキル基（アル
キル基は、上記したアルキル基を示す。）を；アルコキ
シカルボニルアミノ基とは、−ＮＨＣＯＯ−アルキル基
（アルキル基は、上記したアルキル基を示す。）を；ハ
ロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子およ
びヨウ素原子などを；アルキルチオ基とは、-Ｓ-アルキ
ル基（アルキル基は、上記したアルキル基を示す。）
を；アルカンスルフィニル基とは、好ましくは、メタン
スルフィニルおよびエタンスルフィニルなどのＣ_1-8ア
ルカンスルフィニル基を；アルカンスルホニル基とは、
好ましくは、メタンスルホニルおよびエタンスルホニル
などのＣ_1-8アルカンスルホニル基を；アリール基と
は、好ましくは、フェニルおよびナフチルなどの基を；
アシルアミノ基とは、−ＮＨ−アシル基（アシル基は、
上記したと同様の意味を有する。）を；アルキルアミノ
基とは、-ＮＨ-アルキル基（アルキル基は、上記したア
ルキル基を示す。）を；ジアルキルアミノ基とは、−Ｎ
(アルキル)₂基（アルキル基は、上記したアルキル基を
示す。）を；ハロアルキル基とは、好ましくは、クロロ
メチル、フルオロメチル、ジクロロメチル、トリフルオ
ロメチル、ジクロロエチルおよびトリクロロエチルなど
のようなハロ−Ｃ_1-8アルキル基を；アルキニル基と
は、好ましくは、エチニルおよび２−プロピニルなどの
ようなＣ_2-8アルキニル基を；複素環式基とは、好まし
くは、チエニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、イ
ソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、イミダ
ゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、１,
２,３−チアジアゾリル、１,２,４−チアジアゾリル、
１,３,４−チアジアゾリル、１,３,４−オキサジアゾリ
ル、１,２,３−トリアゾリル、１,２,４−トリアゾリ
ル、テトラゾリル、ピリジル、キノリル、イソキノリ
ル、ピリミジニル、ピペラジニル、ピラジニル、ピリダ
ジニル、１,２,３,４−テトラヒドロキノリル、１,２,
４−トリアジニル、イミダゾ［１,２−ｂ］［１,２,
４］トリアジニル、ピロリジニル、モルホリニルおよび
キヌクリジニルなどのような酸素原子、窒素原子および
硫黄原子から選ばれる少なくとも１つの異項原子を含有
する４〜６員または縮合複素環式基を示す。また、本明
細書において”低級”とは、炭素数５以下の基を示す。

【０００８】一般式［１］において、Ｒ⁶とＲ⁷が隣接す
る窒素原子と一緒になって３〜７員環の複素環式基を形
成する場合、その複素環式基としては、たとえば、アゼ
チジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン
−１−イルおよびピロール−１−イルなどのような３〜
７員環の含窒素複素環式基が挙げられる。また、一般式
［１］または［１ａ］において、Ｒ³におけるアルキ
ル、アルコキシ、フェノキシ、シクロアルキル、カルバ
モイル、アミノおよびフェニル基；Ｒ⁴におけるアルキ
ル、アルコキシ、アルキルチオ、フェニルチオ、アルキ
ニル、アルケニル、スルファモイル、アルカンスルフィ
ニル、アルカンスルホニル、アミジノ、フェニルおよび
複素環式基；Ｒ⁶におけるアルキル、シクロアルキル、
フェニル、アミノ、アシル、カルバモイル、アルカンス
ルホニル、イミノメチルおよびアミジノ基；Ｒ⁷におけ
るアルキル、アルコキシ、フェニル、シクロアルキルお
よび複素環式基；Ｒ⁶とＲ⁷が隣接する窒素原子と一緒に
なって形成される３〜７員環の複素環式基並びにＲ⁵に
おけるフェニル、チエニル、フリルおよびピリジル；Ｒ
^3aのアルキル基；Ｒ^4aのアルキルチオ、アシルアミノ
基；Ｒ^5aのフェニル基は、ハロゲン原子、アルコキシ、
アルキルチオ、フェノキシ、カルボキシル、アシル、ア
ルコキシカルボニル、カルバモイル、スルファモイル、
シアノ、アルカンスルホニル、ヒドロキシル、メルカプ
ト、アシルアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミ
ノ、アルキル、シクロアルキル、オキソ、ニトロ、ハロ
アルキル、アミノ、フェニル、アルコキシカルボニルア
ミノ、ヒドロキシイミノおよび複素環式基から選ばれる
一種以上の置換基で置換されていてもよい。

【０００９】一般式［１］および［１ａ］の４Ｈ−１−
ベンゾピラン−４−オン誘導体の塩としては、医薬とし
て許容される塩、たとえば、ナトリウムおよびカリウム
などのようなアルカリ金属との塩；カルシウムおよびマ
グネシウムなどのようなアルカリ土類金属との塩；アン
モニウム塩；トリエチルアミンおよびピリジンなどのよ
うな有機アミン類との塩；リジン、アルギニンおよびオ
ルニチンなどのようなアミノ酸との塩；塩酸、臭化水素
酸および硫酸などのような鉱酸との塩；フマル酸、マレ
イン酸、リンゴ酸およびクエン酸などのような有機カル
ボン酸との塩；並びにメタンスルホン酸、p-トルエンス
ルホン酸およびナフタレンジスルホン酸などのようなス
ルホン酸との塩などが挙げられる。

【００１０】一般式［１］および［１ａ］の４Ｈ−１−
ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩は、さら
に、異性体（幾何異性体および光学異性体）、水和物、
溶媒和物および結晶形を包含するものである。

【００１１】一般式［１］および［１ａ］の４Ｈ−１−
ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩は、特開平
２−49778号公報に記載された方法などによって製造す
ることができる。

【００１２】本発明の薬剤は、常法によりカプセル剤、
散剤、顆粒剤、丸剤、錠剤、懸濁剤、乳剤、液剤、軟膏
剤、注射剤、シロップ剤または坐剤として経口または非
経口で投与することができる。また、投与方法、投与量
および投与回数は患者の年齢および症状に応じて適宜増
減されるが、通常成人に対して１日約5.0〜1000mgを１
回から数回に分割して投与すればよい。

【００１３】本発明の細胞接着阻害剤および慢性関節リ
ウマチを除く自己免疫疾患の予防・治療剤の有効成分で
ある４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン誘導体の化合物
中、Ｒ¹がハロゲン原子で置換されていてもよいアルキ
ル基；Ｒ²が水素原子；Ｒ³が水素原子または置換されて
いてもよいアルキル基；Ｒ⁴が水素原子、カルボキシル
基、置換されていてもよいアルキルチオ基、置換されて
いてもよいアシルアミノ基またはカルバモイル基；Ｒ⁵
が置換されていてもよいフェニル基；Ｚが酸素原子また
はイミノ基；および破線が二重結合である化合物が好ま
しく、さらにＲ ¹がアルキル基；Ｒ²が水素原子；Ｒ³が
水素原子；Ｒ⁴が置換されていてもよいアシルアミノ
基；Ｚが酸素原子；Ｒ⁵が置換されていてもよいフェニ
ル基；Ｚが酸素原子；および破線が二重結合である化合
物が好ましい。

【００１４】本発明の免疫調節剤の有効成分である４Ｈ
−１−ベンゾピラン−４−オン誘導体の化合物中、Ｒ^3a
が水素原子；Ｒ^4aが置換されていてもよいアシルアミノ
基；Ｚ^aが酸素原子である化合物が好ましい。

【００１５】本発明の免疫調節剤、細胞接着阻害剤およ
び慢性関節リウマチを除く自己免疫疾患の治療・予防剤
の有効成分である４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン誘
導体の代表的化合物は、以下のとおりである。 １．３−ホルミルアミノ−７−メチルスルホニルアミノ
−６−フェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン ２．７−メチルスルホニルアミノ−６−フェノキシ−４
Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン ３．６−（２,４−ジフルオロフェノキシ）−７−メチ
ルスルホニルアミノ−４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オ
ン ４．３−カルバモイル−７−メチルスルホニルアミノ−
６−フェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン ５．３−カルバモイル−２−メチル−７−メチルスルホ
ニルアミノ−６−フェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン
−４−オン ６．３−（Ｎ−ホルミル−Ｎ−メチル）アミノ−７−メ
チルスルホニルアミノ−６−フェノキシ−４Ｈ−１−ベ
ンゾピラン−４−オン ７．３−カルボキシ−７−メチルスルホニルアミノ−６
−フェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン ８．３−メチルチオ−７−メチルスルホニルアミノ−６
−フェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン ９．６−（２,４−ジフルオロフェニルアミノ）−３−
ホルミルアミノ−７−メチルスルホニルアミノ−４Ｈ−
１−ベンゾピラン−４−オン 10．３−カルバモイル−６−（２,４−ジフルオロフェ
ニルアミノ）−７−メチルスルホニルアミノ−４Ｈ−１
−ベンゾピラン−４−オン 11．２−メチル−７−メチルスルホニルアミノ−６−フ
ェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン 12．６−（２−フルオロフェニルアミノ）−３−ホルミ
ルアミノ−７−メチルスルホニルアミノ−４Ｈ−１−ベ
ンゾピラン−４−オン

【００１６】つぎに、本発明の免疫調節剤、細胞接着阻
害剤および慢性関節リウマチを除く自己免疫疾患の予防
・治療剤の薬理作用について試験例を挙げて説明する。
なお、以下の試験例における被験化合物は、上記した化
合物番号で示す。 試験例１ 遅延型アレルギー反応に対する作用 シクロホスファミド前処置による免疫亢進状態における
マウス遅延型アレルギー反応は、ピー・エッチ・ラグラ
ンジェ（P.H.Lagrange）らの方法［ジャーナル・オブ・
エキスペリメンタル・メディシン（J. Exp.Med.）、第1
39巻、第1529-1539頁（1974年）］を参考にして行っ
た。すなわち、BALB/c系雄性マウス（8週齢、1群6匹か
ら8匹）に、シクロホスファミド75mg/kgを腹腔内投与
し、4日後尾静脈内に羊赤血球浮遊液（5×10⁷個/ml）0.
2mlを注射して感作した。感作3日後、羊赤血球浮遊液
（8×10⁹個/ml）0.05mlを左後肢足蹠皮内に注射し、遅
延型アレルギー反応を惹起した。24時間後動物を屠殺
し、両後肢を踝部で切断後各々の重量を測定し、惹起足
（左後肢）と非惹起足（右後肢）の差を足浮腫量（mg）
とした。対照群の足浮腫量との比較から各被験化合物投
与群の足浮腫抑制率を求めた。被験化合物は、0.5%(W/
V)カルボキシメチルセルロース（CMC）溶液に懸濁し、
感作2日前より1日 1回、5日間経口投与した。対照群に
は、被験化合物の代わりに0.5%CMC溶液を投与した。そ
の結果を表１に示す。

【００１７】

【表１】 表１から明らかなように、被験化合物は、免疫亢進状態
における遅延型アレルギー反応をステロイド剤であるプ
レドニゾロンと同様、明らかに抑制し、この作用は、D-
ペニシラミンやスルファサラジンより強い。

【００１８】試験例２ 抗体産生応答[hemolytic plaqu
e forming cell（PFC）応答]に対する作用 BDF1系雄性マウス（1群6匹から7匹）に2×10⁶もしくは2
×10⁸個の羊赤血球を静脈内注射して感作した。感作後4
日目に脾臓を摘出し、エヌ・ケー・ジェーン（N.K.Jern
e）らの方法［サイエンス（Science）、第140巻、第405
頁（1963年）］に従って、カニンガム（Cunningham）ら
の方法［イムノロジー（Immunology）、第14巻、第599
頁（1968年）］により、抗体産生応答[hemolytic plaqu
e forming cell（PFC）応答]数を測定した。各群につい
て脾臓組織当たりのPFC数を求め、対照群のPFC数に対す
る割合(%)を算出した。被験化合物は、0.5%(W/V)CMC溶
液に懸濁し、感作の前後、3日間にわたり1日1回経口投
与した。対照群には、被験化合物の代わりに0.5%CMC溶
液を投与した。その結果を表２に示す。

【００１９】

【表２】 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 投与群 用量 PFC数／脾臓^a) 対照群に (mg/kg) ×10³個 対する割合(%) −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 2×10⁸個感作 対照群 − 240± 8 100 化合物番号 1 1 231±18 96 10 221±17 92 100 129±20 54 プレドニゾロン 10 17± 3 7 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 2×10⁶個感作 対照群 − 4.87±0.53 100 化合物番号 1 1 7.06±1.17 145 10 7.13±0.52 146 100 5.40±0.49 111 プレドニゾロン 10 3.97±0.78 81 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− a) 数字は平均±S.E.を表す。表２から明らかなよう
に、本被験化合物は、至適感作条件（2×10⁸個感作）で
はPFC数を明らかに減少させ、低感作条件（2×10⁶個感
作）では増加作用を示した。この結果から、本被験化合
物は、異常に亢進した免疫応答を抑制し、低反応性の応
答を増強するという免疫調節作用を有することが明らか
である。

【００２０】試験例３ 実験的アレルギー性脳脊髄炎に
対する作用 実験的アレルギー性脳脊髄炎（experimental allergic
encephalomyelitis:EAE）は、細胞性免疫を介する病態
モデルで、ヒトの多発性硬化症の動物モデルとして広く
利用されている。本試験ではLewis系雌性ラット（1群5
匹）を用い、出口らの方法［脳神経、第42巻、第391-39
7頁（1990年）］に従って、EAEを誘発した。すなわち、
モルモットの脊髄の50%ホモジネート液と完全フロイン
ド・アジュバント（Freund's Adjuvant）の等量エマル
ジョン0.1mlをラットの両後肢に皮下注射して感作し
た。感作当日から連日、動物の臨床症状を観察し、その
症状の程度を以下のようにスコア化した。 ０：無症状 １：尾の緊張度の低下 ２：後肢の不完全麻痺 ３：時に尿失禁をともなう後肢の完全麻痺 ４：四肢の麻痺または死亡 被験化合物を、0.5％（W/V）CMC溶液に懸濁させ、感作
日（0日目）から13日目まで1日1回、14日間連日経口投
与し、症状を18日目まで観察した。対照群には、被験化
合物の代わりに0.5%CMC溶液を投与した。個々の動物に
ついて18日間の累積スコアを求め、対照群の平均スコア
と被験化合物投与群の平均スコアの比較から症状スコア
の抑制率を算出した。その結果を表３に示す。

【００２１】

【表３】 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 被験化合物 用量 症状スコアの (mg/kg) 抑制率(%) −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 化合物番号 1 1 21 100 67 化合物番号 3 30 86 化合物番号 4 30 50 化合物番号 6 30 66 化合物番号 7 30 50 化合物番号 8 30 17 化合物番号 9 30 50 化合物番号10 30 42 化合物番号11 30 52 化合物番号12 30 67 D-ペニシラミン 100 -10 スルファサラジン 300 1 プレドニゾロン 10 52 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 表３から明らかなように、被験化合物は、ステロイド剤
であるプレドニゾロンと同様、EAEの症状の発現および
進展を明らかに抑制し、この作用は、D-ペニシラミンや
スルファサラジンより強い。

【００２２】試験例４ 実験的アレルギー性脳脊髄炎に
おける細胞接着 Very late antigen-4（VLA-4）発現に
対する作用 VLA-4はリンパ球の浸潤に関与する細胞接着分子の一つ
であり、この表面抗原発現に対する作用をEAEの末梢血
リンパ球を用いて検討した。すなわち、試験例３と同様
にモルモットの脊髄の50%ホモジネート液と完全フロイ
ンド・アジュバントの等量エマルジョン0.1mlをLewis系
雌性ラット（一群7匹)の両後肢に皮下注射して感作し
た。感作後10日目にエーテル麻酔下で腹部下大静脈より
ヘパリン加採血を行なった。血液5mlから比重遠心法に
より白血球分画を回収した。5×10⁵個の白血球を0.1％
牛血清アルブミンを含むリン酸緩衝生理食塩水（PBS）
0.5mlに浮遊させ、マウス抗ラットVLA-4抗体5μlと4℃
で1時間反応させた後、さらに反応液をフルオレセイン
標識抗マウスイムノグロブリン抗体と30分間反応し、PB
Sで洗浄した後、フロサイトメトリー（FACS）解析を行
った。結果は、前方散乱光および90度散乱光よりリンパ
球と思われる分画におけるリンパ球数に対するVLA-4陽
性細胞数の百分率で表した。

【００２３】

【表４】 表４から明らかなように、被験化合物は、対照群に比べ
てリンパ球中のVLA-4陽性細胞の割合を減少させる。

【００２４】試験例５ ホルボールミリステートアセテ
ート（PMA）刺激によって誘導されるHL-60細胞（ヒト骨
髄性白血病細胞）の細胞接着分子CD11b発現増強に対す
る阻害作用 CD11bは単球の活性化に伴い発現上昇がみられる細胞接
着分子Mac-1のα鎖であり、この発現に対する作用を検
討した。すなわち、5×10⁵個のHL-60細胞と各被験化合
物およびPMA（終濃度3ng/ml）を10%牛胎児血清（FCS）
含有RPMI-1640培地2mlと合わせ、12ウェルマルチプレー
トの各ウェルに添加した。24時間、37℃、5%炭酸ガス存
在下で培養した後、細胞を回収し、PBS溶液で洗浄した
後、1%FCS含PBS溶液300μlあたり3×10³個の細胞数とな
るように調製した。この細胞調製液にフィコエリトリン
標識マウス抗ヒトCD11b抗体5μlを添加し、4℃で1時間
反応させた。反応終了後、PBS溶液で細胞を洗浄し、CD1
1bの発現量をFACS解析した。結果は、PMA非添加の場合
に対するCD11b発現の増加率で示した。その結果を表５
に示す。

【００２５】

【表５】 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 被験化合物 濃度 測定 CD11b発現増加率(%) （μg/ml） 回数 平均±標準誤差 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 対照 − 6 82.2±4.9 化合物番号１ 10 6 49.9±1.8 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 表５から明らかなように、被験化合物は、PMA刺激によ
るCD11bの発現増強を抑制する。従って、被験化合物は
細胞接着分子の発現抑制および発現増強を抑制すること
から、細胞接着阻害活性を有する。

【００２６】

【実施例】以下に本発明製剤を具体的に実施例を挙げて
説明するが、本発明はこれらに限定されるものではな
い。なお、実施例で使用されている化合物は、それぞ
れ、前述の被験化合物No.の化合物と対応している。

【００２７】実施例１ 以下の成分を用いて常法により硬ゼラチンカプセルを調
製する。 化合物１(化合物番号１) 50mg 乳糖 114.5mg コーンスターチ 20mg ヒドロキシプロピルセルロース 2mg 軽質無水ケイ酸 1.5mg カルボキシメチルセルロース カルシウム 10mg ステアリン酸マグネシウム 2mg −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 計 200mg

【００２８】実施例２ 以下の成分を用いて常法により錠剤を調製する。 化合物１(化合物番号１) 25mg 乳糖 49mg 微結晶セルロース 36mg ヒドロキシプロピルセルロース 1mg カルボキシメチルセルロース カルシウム 6.6mg ステアリン酸マグネシウム 1.2mg タルク 1.2mg −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 計 120mg

【００２９】実施例３ 以下の成分を用いて常法により錠剤を調製する。 化合物１(化合物番号１) 50mg 乳糖 74mg 微結晶セルロース 55mg ヒドロキシプロピルセルロース 2mg カルボキシメチルセルロース カルシウム 15mg ステアリン酸マグネシウム 2mg タルク 2mg −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 計 200mg

【００３０】実施例４ 以下の成分を用いて常法により錠剤を調製する。 化合物１（化合物番号１） 100mg 乳糖 49mg 微結晶セルロース 55mg ヒドロキシプロピルセルロース 2mg カルボキシメチルセルロース カルシウム 15mg ステアリン酸マグネシウム 2mg タルク 2mg −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 計 225mg

【００３１】実施例５ 以下の成分を用いて常法により錠剤を調製する。 化合物２(化合物番号２) 200mg 微結晶セルロース 100mg グリコール酸ナトリウムデンプン 30mg ステアリン酸マグネシウム 3mg −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− 計 333mg

【００３２】

【発明の効果】一般式［１］および［１ａ］の４Ｈ−１
−ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩は、優れ
た免疫調節作用および細胞接着阻害作用を発揮し、さら
に、慢性関節リウマチを除く自己免疫疾患に対して、ス
テロイド剤に匹敵する改善効果が期待できる。したがっ
て、一般式［１］の化合物は、免疫異常または細胞接着
の異常亢進が病因の根底にある慢性関節リウマチを除く
自己免疫疾患（全身性エリテマートデス、強皮症、混合
性結合組織症、結節性多発動脈炎、多発性筋炎／皮膚筋
炎、シューグレン症候群、ベーチェット症、多発性硬化
症、自己免疫性糖尿病、橋本病、乾癬、原発性粘液水
腫、悪性貧血、重症筋無力症、潰瘍性大腸炎、慢性活動
性胆炎、自己免疫性溶血性貧血および特発性血小板減少
性紫斑病など）の治療および予防に有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 霜鳥 智也 富山県富山市小杉175−３ (72)発明者 相川 幸彦 富山県富山市水橋中村町230 (72)発明者 稲場 太喜広 富山県滑川市高塚1823 (72)発明者 吉田 長作 富山県高岡市熊野町５−27 (72)発明者 高野 俊太郎 東京都三鷹市上連雀２−４−３ (72)発明者 谷口 洋一 富山県高岡市明野町２−１ Ｆターム(参考） 4C062 EE39 EE44 EE46 EE48 4C086 BA08 MA01 MA04 NA14 ZA55 ZA89 ZB05 ZB07 ZB11 ZB21 ZC35

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 【化１】 「式中、Ｒ¹は、ハロゲン原子で置換されていてもよい
   アルキル、アルケニルまたはアリール基を；Ｒ²は、水
   素原子、アルキル基またはアシル基を；Ｒ³は、水素原
   子、ハロゲン原子、シアノ基、アジド基、カルボキシル
   基、ヒドロキシル基、ホルミル基もしくはアルコキシカ
   ルボニル基または置換されていてもよいアルキル、アル
   コキシ、フェノキシ、シクロアルキル、カルバモイル、
   アミノもしくはフェニル基を；Ｒ⁴は、水素原子、ハロ
   ゲン原子、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、アシ
   ル基、ヒドロキシル基もしくはアルコキシカルボニル基
   または置換されていてもよいアルキル、アルコキシ、ア
   ルキルチオ、フェニルチオ、アルキニル、アルケニル、
   スルファモイル、アルカンスルフィニル、アルカンスル
   ホニル、アミジノ、フェニルもしくは複素環式基または
   式 【化２】 もしくは式 【化３】 （式中、Ｒ⁶は、水素原子、ヒドロキシル基、シアノ基
   もしくはアルコキシカルボニル基または置換されていて
   もよいアルキル、シクロアルキル、フェニル、アミノ、
   アシル、カルバモイル、アルカンスルホニル、イミノメ
   チルもしくはアミジノ基を；Ｒ⁷は、水素原子、置換さ
   れていてもよいアルキル、アルコキシ、フェニル、シク
   ロアルキルもしくは複素環式基を示すかまたはＲ⁶とＲ⁷
   が隣接する窒素原子と一緒になって３〜７員環の置換さ
   れていてもよい複素環式基を示す。）で表わされる基
   を；Ｒ⁵は、置換されていてもよいフェニル、チエニ
   ル、フリルまたはピリジル基を；Ｚは、酸素原子、硫黄
   原子またはイミノ基を；および破線は、単結合または二
   重結合を示す。」で表わされる４Ｈ−１−ベンゾピラン
   −４−オン誘導体またはその塩を有効成分とする細胞接
   着阻害剤。
2. 【請求項２】Ｒ¹が、ハロゲン原子で置換されていても
   よい低級アルキル、低級アルケニルまたはアリール基
   を；Ｒ²は、水素原子、アルキル基またはアシル基を；
   Ｒ³は、水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、アジド
   基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、ホルミル基もし
   くはアルコキシカルボニル基または置換されていてもよ
   いアルキル、アルコキシ、フェノキシ、シクロアルキ
   ル、カルバモイル、アミノもしくはフェニル基を；Ｒ⁴
   は、水素原子、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、カ
   ルボキシル基、アシル基、ヒドロキシル基もしくはアル
   コキシカルボニル基または置換されていてもよいアルキ
   ル、アルコキシ、アルキルチオ、フェニルチオ、低級ア
   ルキニル、低級アルケニル、スルファモイル、低級アル
   カンスルフィニル、低級アルカンスルホニル、アミジ
   ノ、フェニルもしくは複素環式基または式 【化４】 もしくは式 【化５】 （式中、Ｒ⁶は、水素原子、ヒドロキシル基、シアノ基
   もしくはアルコキシカルボニル基または置換されていて
   もよいアルキル、シクロアルキル、フェニル、アミノ、
   アシル、カルバモイル、低級アルカンスルホニル、イミ
   ノメチルもしくはアミジノ基を；Ｒ⁷は、水素原子、置
   換されていてもよいアルキル、アルコキシ、フェニル、
   シクロアルキルもしくは複素環式基を示すかまたはＲ⁶
   とＲ⁷が隣接する窒素原子と一緒になって３〜７員環の
   置換されていてもよい複素環式基を示す。）で表わされ
   る基を；Ｒ⁵は、置換されていてもよいフェニル、チエ
   ニル、フリルまたはピリジル基を；Ｚは、酸素原子、硫
   黄原子またはイミノ基を；および破線は、単結合または
   二重結合である４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン誘導
   体またはその塩を有効成分とする請求項１に記載の細胞
   接着阻害剤。
3. 【請求項３】Ｒ¹がハロゲン原子で置換されていてもよ
   いアルキル基；Ｒ²が水素原子；Ｒ³が水素原子または置
   換されていてもよいアルキル基；Ｒ⁴が水素原子、カル
   ボキシル基、置換されていてもよいアルキルチオ基、置
   換されていてもよいアシルアミノ基またはカルバモイル
   基；Ｒ⁵が置換されていてもよいフェニル基；Ｚが酸素
   原子またはイミノ基；および破線が二重結合である４Ｈ
   −１−ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩を有
   効成分とする請求項１に記載の細胞接着阻害剤。
4. 【請求項４】Ｒ¹がハロゲン原子で置換されていてもよ
   い低級アルキル基；Ｒ²が水素原子；Ｒ³が水素原子また
   は置換されていてもよいアルキル基；Ｒ⁴が水素原子、
   カルボキシル基、置換されていてもよいアルキルチオ
   基、置換されていてもよいアシルアミノ基またはカルバ
   モイル基；Ｒ⁵が置換されていてもよいフェニル基；Ｚ
   が酸素原子またはイミノ基；および破線が二重結合であ
   る４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその
   塩を有効成分とする請求項１に記載の細胞接着阻害剤。
5. 【請求項５】Ｒ³が水素原子；Ｒ⁴が置換されていてもよ
   いアシルアミノ基；Ｚが酸素原子である４Ｈ−１−ベン
   ゾピラン−４−オン誘導体またはその塩を有効成分とす
   る請求項３または４に記載の細胞接着阻害剤。
6. 【請求項６】３−ホルミルアミノ−７−メチルスルホニ
   ルアミノ−６−フェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン−
   ４−オンを有効成分とする細胞接着阻害剤。
7. 【請求項７】一般式 【化６】 「式中、Ｒ^1aは、ハロゲン原子で置換されていてもよい
   低級アルキル基を；Ｒ ^3aは、水素原子または置換されて
   いてもよいアルキル基を；Ｒ^4aは、水素原子、カルボキ
   シル基、置換されていてもよいアルキルチオ、置換され
   ていてもよいアシルアミノまたはカルバモイル基を；Ｒ
   ^5aは、置換されていてもよいフェニル基を；Ｚ^aは、酸
   素原子またはイミノ基を示す。」で表わされる４Ｈ−１
   −ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩を有効成
   分とする免疫調節剤。
8. 【請求項８】Ｒ^3aが水素原子；Ｒ^4aが置換されていても
   よいアシルアミノ基；Ｚ^aが酸素原子である４Ｈ−１−
   ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩を有効成分
   とする請求項７に記載の免疫調節剤。
9. 【請求項９】３−ホルミルアミノ−７−メチルスルホニ
   ルアミノ−６−フェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン−
   ４−オンを有効成分とする免疫調節剤。
10. 【請求項１０】一般式 【化７】 「式中、Ｒ¹は、ハロゲン原子で置換されていてもよい
    アルキル、アルケニルまたはアリール基を；Ｒ²は、水
    素原子、アルキル基またはアシル基を；Ｒ³は、水素原
    子、ハロゲン原子、シアノ基、アジド基、カルボキシル
    基、ヒドロキシル基、ホルミル基もしくはアルコキシカ
    ルボニル基または置換されていてもよいアルキル、アル
    コキシ、フェノキシ、シクロアルキル、カルバモイル、
    アミノもしくはフェニル基を；Ｒ⁴は、水素原子、ハロ
    ゲン原子、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、アシ
    ル基、ヒドロキシル基もしくはアルコキシカルボニル基
    または置換されていてもよいアルキル、アルコキシ、ア
    ルキルチオ、フェニルチオ、アルキニル、アルケニル、
    スルファモイル、アルカンスルフィニル、アルカンスル
    ホニル、アミジノ、フェニルもしくは複素環式基または
    式 【化８】 もしくは式 【化９】 （式中、Ｒ⁶は、水素原子、ヒドロキシル基、シアノ基
    もしくはアルコキシカルボニル基または置換されていて
    もよいアルキル、シクロアルキル、フェニル、アミノ、
    アシル、カルバモイル、アルカンスルホニル、イミノメ
    チルもしくはアミジノ基を；Ｒ⁷は、水素原子、置換さ
    れていてもよいアルキル、アルコキシ、フェニル、シク
    ロアルキルもしくは複素環式基を示すかまたはＲ⁶とＲ⁷
    が隣接する窒素原子と一緒になって３〜７員環の置換さ
    れていてもよい複素環式基を示す。）で表わされる基
    を；Ｒ⁵は、置換されていてもよいフェニル、チエニ
    ル、フリルまたはピリジル基を；Ｚは、酸素原子、硫黄
    原子またはイミノ基を；および破線は、単結合または二
    重結合を示す。」で表わされる４Ｈ−１−ベンゾピラン
    −４−オン誘導体またはその塩を有効成分とする慢性関
    節リウマチを除く自己免疫疾患の治療・予防剤。
11. 【請求項１１】Ｒ¹が、ハロゲン原子で置換されていて
    もよい低級アルキル、低級アルケニルまたはアリール基
    を；Ｒ²は、水素原子、アルキル基またはアシル基を；
    Ｒ³は、水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、アジド
    基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、ホルミル基もし
    くはアルコキシカルボニル基または置換されていてもよ
    いアルキル、アルコキシ、フェノキシ、シクロアルキ
    ル、カルバモイル、アミノもしくはフェニル基を；Ｒ⁴
    は、水素原子、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、カ
    ルボキシル基、アシル基、ヒドロキシル基もしくはアル
    コキシカルボニル基または置換されていてもよいアルキ
    ル、アルコキシ、アルキルチオ、フェニルチオ、低級ア
    ルキニル、低級アルケニル、スルファモイル、低級アル
    カンスルフィニル、低級アルカンスルホニル、アミジ
    ノ、フェニルもしくは複素環式基または式 【化１０】 もしくは式 【化１１】 （式中、Ｒ⁶は、水素原子、ヒドロキシル基、シアノ基
    もしくはアルコキシカルボニル基または置換されていて
    もよいアルキル、シクロアルキル、フェニル、アミノ、
    アシル、カルバモイル、低級アルカンスルホニル、イミ
    ノメチルもしくはアミジノ基を；Ｒ⁷は、水素原子、置
    換されていてもよいアルキル、アルコキシ、フェニル、
    シクロアルキルもしくは複素環式基を示すかまたはＲ⁶
    とＲ⁷が隣接する窒素原子と一緒になって３〜７員環の
    置換されていてもよい複素環式基を示す。）で表わされ
    る基を；Ｒ⁵は、置換されていてもよいフェニル、チエ
    ニル、フリルまたはピリジル基を；Ｚは、酸素原子、硫
    黄原子またはイミノ基を；および破線は、単結合または
    二重結合である４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン誘導
    体またはその塩を有効成分とする請求項１０に記載の慢
    性関節リウマチを除く自己免疫疾患の治療・予防剤。
12. 【請求項１２】Ｒ¹がハロゲン原子で置換されていても
    よいアルキル基；Ｒ²が水素原子；Ｒ³が水素原子または
    置換されていてもよいアルキル基；Ｒ⁴が水素原子、カ
    ルボキシル基、置換されていてもよいアルキルチオ基、
    置換されていてもよいアシルアミノ基またはカルバモイ
    ル基；Ｒ⁵が置換されていてもよいフェニル基；Ｚが酸
    素原子またはイミノ基；および破線が二重結合である４
    Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩を
    有効成分とする請求項１０に記載の慢性関節リウマチを
    除く自己免疫疾患の治療・予防剤。
13. 【請求項１３】Ｒ¹がハロゲン原子で置換されていても
    よい低級アルキル基；Ｒ²が水素原子；Ｒ³が水素原子ま
    たは置換されていてもよいアルキル基；Ｒ⁴が水素原
    子、カルボキシル基、置換されていてもよいアルキルチ
    オ基、置換されていてもよいアシルアミノ基またはカル
    バモイル基；Ｒ⁵が置換されていてもよいフェニル基；
    Ｚが酸素原子またはイミノ基；および破線が二重結合で
    ある４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン誘導体またはそ
    の塩を有効成分とする請求項１０に記載の慢性関節リウ
    マチを除く自己免疫疾患の治療・予防剤。
14. 【請求項１４】Ｒ³が水素原子；Ｒ⁴が置換されていても
    よいアシルアミノ基；Ｚが酸素原子である４Ｈ−１−ベ
    ンゾピラン−４−オン誘導体またはその塩を有効成分と
    する請求項１２または１３に記載の慢性関節リウマチを
    除く自己免疫疾患の治療・予防剤。
15. 【請求項１５】３−ホルミルアミノ−７−メチルスルホ
    ニルアミノ−６−フェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン
    −４−オンを有効成分とする慢性関節リウマチを除く自
    己免疫疾患の治療・予防剤。
16. 【請求項１６】慢性関節リウマチを除く自己免疫疾患が
    全身性エリテマートデス、強皮症、混合性結合組織症、
    結節性多発動脈炎、多発性筋炎/皮膚筋炎、シューグレ
    ン症候群、ベーチェット症、多発性硬化症、自己免疫性
    糖尿病、橋本病、乾癬、原発性粘液水腫、悪性貧血、重
    症筋無力症、潰瘍性大腸炎、慢性活動性胆炎、自己免疫
    性溶血性貧血および特発性血小板減少性紫斑病である請
    求項１０−１５のいずれかの項に記載の自己免疫疾患の
    治療・予防剤。