JP2003128576A - エンドトキシン誘発性疾患治療薬 - Google Patents

エンドトキシン誘発性疾患治療薬

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JP2003128576A
JP2003128576A JP2001328430A JP2001328430A JP2003128576A JP 2003128576 A JP2003128576 A JP 2003128576A JP 2001328430 A JP2001328430 A JP 2001328430A JP 2001328430 A JP2001328430 A JP 2001328430A JP 2003128576 A JP2003128576 A JP 2003128576A
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Japan
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thr
cys
ser
val
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Application number
JP2001328430A
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English (en)
Inventor
Toshimitsu Kamiide
利光 上出
Manabu Inobe
学 猪部
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G-IN TECHNO SCIENCE KK
Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
G-IN TECHNO SCIENCE KK
Taisho Pharmaceutical Co Ltd
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Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】新規なエンドトキシン誘発性疾患治療薬を供給
することを目的とする。 【解決手段】ヘベム蛋白質(HERPES VIRUS ENTRY MEDIAT
OR)と免疫グロブリンとの融合蛋白質を含有するエンド
トキシン誘発性疾患治療薬。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、エンドトキシン誘
発性疾患治療薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】エンドトキシンとは細菌が産生する毒素
であり、グラム陰性菌の細胞外膜を構成するリポ多糖(L
PS)が本態である。エンドトキシンは組織に直接的には
ほとんど影響を与えないが、生物学的メディエーターの
連鎖反応を誘発し、エンドトキシンショックを生ずる。
【０００３】単球及びマクロファージはエンドトキシン
の刺激を受けることにより一次メディエーターである腫
瘍壊死因子とインターロイキン−１を産生する。さらに
これらのメディエーターは二次メディエーター（例え
ば、プロスタグランジン、ロイコトリエン、インターフ
ェロン、血小板活性化因子等）の分泌を促し、この結果
発熱、血管拡張・透過性亢進、血圧降下、血栓形成、多
形核白血球増多などを伴う汎発性血管内凝固症候群を招
きショック症状を呈する。
【０００４】エンドトキシン関連疾患の治療法として
は、エンドトキシンを介した細胞膜損傷を軽減し、ある
種の生物学的メディエーターの産生を減ずると示唆され
ているコルチコステロイド処置、LPS エンドトキシンを
中和するように設計された抗体の投与、敗血症症候群に
伴う降圧効果を明らかに阻害するナロキソンによる処置
などの報告がある。
【０００５】一方、ヘベム蛋白質（HERPES VIRUS ENTRY
MEDIATOR 、以下HVEMとする）は1996年Montgomery等に
よりヘルペスウイルスに結合するTNF受容体スーパーフ
ァミリーに属する分子として同定され、さらにHVEMと免
疫グロブリンＧとの融合蛋白質（以下HVEM-Igとする）
がHVEMに対する抗体作成に抗原として用いられている
（Cell Vol.87,427-436(1996))。また、1997年にKwon等
によってHVEMがリンパ球の増殖活性化に関与することが
報告され、1998年にはWare等によりHVEMのリガンドであ
るLIGHTの同定がなされている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、新規なエン
ドトキシン誘発性疾患治療薬を供給することを目的とす
る。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
の達成のために鋭意研究した結果、HVEM-Igがエンドト
キシン誘発性疾患の抑制に有効であることを見いだし、
本発明を完成するに至った。
【０００８】すなわち、本発明は（１）ヘベム蛋白質と
免疫グロブリンとの融合蛋白質を含有するエンドトキシ
ン誘発性疾患治療薬、（２）ヘベム蛋白質の細胞外ドメ
インと免疫グロブリンＦCドメインとの融合蛋白質を含
有するエンドトキシン誘発性疾患治療薬、（３）免疫グ
ロブリンＦCドメインがヒンジ−CH2−CH3−ドメインで
ある（２）のエンドトキシン誘発性疾患治療薬、（４）
ヘベム蛋白質の細胞外ドメインが配列番号１のアミノ酸
配列からなる蛋白質である（２）記載のエンドトキシン
誘発性疾患治療薬、（５）免疫グロブリンＦCドメイン
が配列番号２のアミノ酸配列からなる蛋白質である
（２）記載のエンドトキシン誘発性疾患治療薬、であ
る。
【０００９】
【発明の実施形態】本発明においてHVEMと免疫グロブリ
ンとの融合蛋白質とは、免疫グロブリンの不変領域にHV
EMを結合させた融合蛋白質であり、その形態は単量体で
あっても、多量体（二量体、四量体等）であってもよ
い。好ましくは二量体の融合蛋白質である。また、多量
体にあってはホモ多量体であっても、ヘテロ多量体であ
ってもよい。
【００１０】該融合蛋白質のHVEM領域は、齧歯動物由来
の蛋白質であり、好ましくはマウス又はヒト由来の蛋白
質である。
【００１１】マウスHVEMは、配列番号３に示されるよう
な276のアミノ酸残基からなる。276のアミノ酸は、1-36
のシグナルペプチド、1-206の細胞外ドメイン（配列番
号１）、207-230の膜貫通ドメインに分類することがで
きる。
【００１２】ヒトHVEMは、配列番号５に示されるような
283のアミノ酸残基からなる。283のアミノ酸は、1-38の
シグナルペプチド、1-185の細胞外ドメイン（配列番号
４）、203-225の膜貫通ドメインに分類することができ
る。
【００１３】該融合蛋白質のHVEM領域は、HVEMの全長配
列であっても、Ｎ末端又はＣ末端に１個又は数個のアミ
ノ酸残基が付加したものであってもよい。
【００１４】また、HVEMの全長配列から30〜100個程度
のアミノ酸残基が欠失したものであっても、LIGHT及びL
Tαへの結合活性が損なわれない限り該融合蛋白質を構
成しうる。なかでも、LIGHT及びLTαへの結合領域を含
む細胞外ドメインからなる部分配列がHVEM領域として好
ましく、さらに好ましいHVEM領域は配列番号１又は４で
表される部分配列である。
【００１５】また、該融合蛋白質のHVEM領域はLIGHT及
びLTαへの結合活性が損なわれない限りその変異体であ
ってもよい。異なるアミノ酸残基間の例としては、グリ
シン（Gly）とプロリン（Pro）、グリシン（Gly）とア
ラニン（Ala）またはバリン（Val）、ロイシン（Leu）
とイソロイシン（Ile）、グルタミン酸（Glu）とグルタ
ミン（Gln）、アスパラギン酸（Asp）とアスパラギン
（Asn）、システイン（Cys）とスレオニン（Thr）、ス
レオニン（Thr）とセリン（Ser）又はアラニン（Ala）
等のアミノ酸間の置換が知られている。
【００１６】例えば、配列番号５においてのSer108がTh
r108に変異したものやのAla140がArg140に変異したもの
も本発明の範囲に含まれる。
【００１７】免疫グロブリン領域は、いずれのサブクラ
ス（IgG、IgA、IgM、IgD、IgE）のものでもよいが、安
定性の点から IgG1、IgG3、IgG4のようなIgG が好まし
い。また融合するIgGは、Ｆcドメインが含まれることが
好ましく、ヒンジ-CH2-CH3-ドメインが含まれることが
さらに好ましい。
【００１８】該融合蛋白質は、慣用な方法により製造す
ることができる。例えば適当な宿主細胞に目的とする遺
伝子を組み込んだ発現ベクターをトランスフェクトし、
適当な培養条件で発現させることにより該融合蛋白質を
得ることができる。このとき発現ベクターにはエンハン
サー、プロモーターが連結していることが好ましく、CA
Gプロモーターの支配下で発現させることが特に好まし
い。
【００１９】宿主細胞としてはE.coliのような原核細
胞、COS細胞、Hela細胞、CHO細胞等のような真核細胞で
もよい。また、発現ベクターとしてはアデノウイルス、
プラスミド、ファージをあげることができる。
【００２０】本発明のエンドトキシン誘発性疾患治療薬
は、敗血症、グラム陰性菌症により誘発されるショック
症状の他、非感染症外傷時においての臓器へのリンパ球
流入によるショック症状を軽減する薬剤を意味する。
【００２１】該治療薬は、エンドトキシン誘発性疾患が
全身性免疫反応に伴う疾患であるため、静脈注射、血管
内投与、皮下投与されるのが通常である。有効成分とし
て用いられる HVEM-Igの用量は、患者の年齢、体重等に
より異なるが、成人に対し通常10〜600mg／回を１週２
回又はそれ以下の間欠で投与する。
【００２２】注射剤は、溶液、懸濁液あるいは使用前に
適当な賦形剤に溶解又は懸濁する乾燥粉末とすることが
できる。液体投与単位形はパイロジェンを含まない滅菌
賦形剤を用いて調製する。溶液の調製において、当該融
合蛋白質を賦形剤に溶解し要すれば塩化ナトリウムの添
加により等張化し、適当な滅菌バイアルに充填し、密封
する前に無菌法により滅菌フィルターで濾過して滅菌す
ることができる。
【００２３】以下、実施例、製造例により本発明を具体
的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものでは
ない。
【００２４】製造例 HVEMの細胞膜直上にBamHIサイトを含むオリゴヌクレオ
チド-cgggatccgaggagcaggtggtgtct-（配列番号６）及び
HVEMのＮ末端にXhoIサイトを付加したオリゴヌクレオチ
ド-tccgctcgagctcttggcctgaagtttc-（配列番号７）をプ
ライマーとしマウス脾細胞cDNAを鋳型としてPCR操作を
行った。PCRのサーマルプロファイルは、94℃１分、60
℃１分、72℃１分を30サイクルで増幅した。
【００２５】ヒトIgGFCドメインを含むプラスミドベク
ターpCDM8-hIgGFCをXhoI/BamHIで切断し、PCRで増幅し
たHVEM細胞外領域（同様にXhoI/BamHIで切断）に連結し
た。作成したpCDM8-hIgGFCプラスミドからXhoI/XbaI切
断により、HVEM細胞外領域とヒトIgGFCドメインが連結
されたDNA断片を切り出し、アデノウイルスベクターに
組み込んだ。
【００２６】DNA断片を組み込んだアデノウイルスをCOS
細胞（リン酸生理食塩水で洗浄したもの）に導入し、５
％CO2、37℃の条件下でDMEM培地にて７日間培養した。
この培養上清を遠心、メンブラン濾過（0.45μm）、プ
ロテインＡカラムクロマトグラフィー処理することによ
りHVEM-IgG（50mg）を得た。このようにして調製したHV
EM-IgG（配列番号１１）を下記試験用検体とした。
【００２７】試験例１ 急性肝障害モデルを用いた低用
量LPS投与試験 急性肝障害モデルを用いた低用量LPS投与試験はChvatch
koらの方法（J.Exp.Med, 2000, 191:1755-1763）に準じ
て行った。それぞれの検体200μgを７週齢BDF1マウス
（雄、日本slc社）に腹腔内投与した。検体投与12時間
後に、リン酸生理食塩水100μLに溶解したガラクトサミ
ン（Sigma）20mg、及び、リン酸生理食塩水100μLに溶
解したLPS10μgを腹腔内投与した。検体を投与した群毎
の生存率を図１に示した（Ｎ＝８又は９）。検体 hIg
G、CTLA4-IgG、HVEM-IgG。
【００２８】試験例２ 高用量LPS投与試験 高用量LPS投与試験はChvatchkoらの方法（J.Exp.Med, 2
000, 191:1755-1763）に準じて行った。それぞれの検体
200μgを７週齢BDF1マウス（雄、日本slc社）に腹腔内
投与した。検体投与12時間後に、リン酸生理食塩水に溶
解したLPS80mg/kgを腹腔内投与した。検体を投与した群
毎のの生存率を図２に示した（Ｎ＝８又は９）。検体
hIgG、CTLA4-IgG、HVEM-IgG。
【図面の簡単な説明】
【図１】急性肝障害モデルを用いた低用量LPS投与試験
の結果を示す。
【図２】高用量LPS投与試験の結果を示す。
【図３】マウスHVEMの細胞外ドメインのアミノ酸配列を
示す。
【図４】ヒトIgGの部分配列を示す。
【配列表】 SEQUENCE LISTING <110>GENE TECHNOSCIENCE CO.,LTD. <110>TAISHO PHARMACEUTICAL CO.,LTD. <120>THERAPETICAL AGENT FOR ENDOTOXIN INDUCED DISIEASE <130>00TS-P3282 <160>11 <210>1 <211>206 <212>PROTEIN <213>MOUSE <400>1 Met Glu Pro Leu Pro Gly Trp Gly Ser Ala Pro Trp Ser Gln Ala 1 5 10 15 Pro Thr Asp Asn Thr Phe Arg Leu Val Pro Cys Val Phe Leu Leu 20 25 30 Asn Leu Leu Gln Arg Ile Ser Ala Gln Pro Ser Cys Arg Gln Glu 35 40 45 Glu Phe Leu Val Gly Asp Glu Cys Cys Pro Met Cys Asn Pro Gly 50 55 60 Tyr His Val Lys Gln Val Cys Ser Glu His Thr Gly Thr Val Cys 65 70 75 Ala Pro Cys Pro Pro Gln Thr Tyr Thr Ala His Ala Asn Gly Leu 80 85 90 Ser Lys Cys Leu Pro Cys Gly Val Cys Asp Pro Asp Met Gly Leu 95 100 105 Leu Thr Trp Gln Glu Cys Ser Ser Trp Lys Asp Thr Val Cys Arg 110 115 120 Cys Ile Pro Gly Tyr Phe Cys Glu Asn Gln Asp Gly Ser His Cys 125 130 135 Ser Thr Cys Leu Gln His Thr Thr Cys Pro Pro Gly Gln Arg Val 140 145 150 Glu Lys Arg Gly Thr His Asp Gln Asp Thr Val Cys Ala Asp Cys 155 160 165 Leu Thr Gly Thr Phe Ser Leu Gly Gly Thr Gln Glu Glu Cys Leu 170 175 180 Pro Trp Thr Asn Cys Ser Ala Phe Gln Gln Glu Val Arg Arg Gly 185 190 195 Thr Asn Ser Thr Asp Thr Thr Cys Ser Ser Gln 200 205 <210>2 <211>232 <212>PROTEIN <213>HOMO SAPIENS <400>2 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 5 10 15 Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 20 25 30 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 35 40 45 Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 50 55 60 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 65 70 75 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 80 85 90 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 95 100 105 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 110 115 120 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 125 130 135 Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 140 145 150 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 155 160 165 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 170 175 180 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu 185 190 195 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 200 205 210 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 215 220 225 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 230 <210>3 <211>276 <212>PROTEIN <213>MOUSE <400>3 Met Glu Pro Leu Pro Gly Trp Gly Ser Ala Pro Trp Ser Gln Ala 1 5 10 15 Pro Thr Asp Asn Thr Phe Arg Leu Val Pro Cys Val Phe Leu Leu 20 25 30 Asn Leu Leu Gln Arg Ile Ser Ala Gln Pro Ser Cys Arg Gln Glu 35 40 45 Glu Phe Leu Val Gly Asp Glu Cys Cys Pro Met Cys Asn Pro Gly 50 55 60 Tyr His Val Lys Gln Val Cys Ser Glu His Thr Gly Thr Val Cys 65 70 75 Ala Pro Cys Pro Pro Gln Thr Tyr Thr Ala His Ala Asn Gly Leu 80 85 90 Ser Lys Cys Leu Pro Cys Gly Val Cys Asp Pro Asp Met Gly Leu 95 100 105 Leu Thr Trp Gln Glu Cys Ser Ser Trp Lys Asp Thr Val Cys Arg 110 115 120 Cys Ile Pro Gly Tyr Phe Cys Glu Asn Gln Asp Gly Ser His Cys 125 130 135 Ser Thr Cys Leu Gln His Thr Thr Cys Pro Pro Gly Gln Arg Val 140 145 150 Glu Lys Arg Gly Thr His Asp Gln Asp Thr Val Cys Ala Asp Cys 155 160 165 Leu Thr Gly Thr Phe Ser Leu Gly Gly Thr Gln Glu Glu Cys Leu 170 175 180 Pro Trp Thr Asn Cys Ser Ala Phe Gln Gln Glu Val Arg Arg Gly 185 190 195 Thr Asn Ser Thr Asp Thr Thr Cys Ser Ser Gln Val Val Tyr Tyr 200 205 210 Val Val Ser Ile Leu Leu Pro Leu Val Ile Val Gly Ala Gly Ile 215 220 225 Ala Gly Phe Leu Ile Cys Thr Arg Arg His Leu His Thr Ser Ser 230 235 240 Val Ala Lys Glu Leu Glu Pro Phe Gln Gln Glu Gln Gln Glu Asn 245 250 255 Thr Ile Arg Phe Pro Val Thr Glu Val Gly Phe Ala Glu Thr Glu 260 265 270 Glu Glu Thr Ala Ser Asn 275 <210>4 <211>185 <212>PROTEIN <213>HOMO SAPIENS <400>4 Met Glu Pro Pro Gly Asp Trp Gly Pro Pro Pro Trp Arg Ser Thr 1 5 10 15 Pro Arg Thr Asp Val Leu Arg Leu Val Leu Tyr Leu Thr Phe Leu 20 25 30 Gly Ala Pro Cys Tyr Ala Pro Ala Leu Pro Ser Cys Lys Glu Asp 35 40 45 Glu Tyr Pro Val Gly Ser Glu Cys Cys Pro Lys Cys Ser Pro Gly 50 55 60 Tyr Arg Val Lys Glu Ala Cys Gly Glu Leu Thr Gly Thr Val Cys 65 70 75 Glu Pro Cys Pro Pro Gly Thr Tyr Ile Ala His Leu Asn Gly Leu 80 85 90 Ser Lys Cys Leu Gln Cys Gln Met Cys Asp Pro Ala Met Gly Leu 95 100 105 Arg Ala Ser Arg Asn Cys Ser Arg Thr Glu Asn Ala Val Cys Gly 110 115 120 Cys Ser Pro Gly His Phe Cys Ile Val Gln Asp Gly Asp His Cys 125 130 135 Ala Ala Cys Arg Ala Tyr Ala Thr Ser Ser Pro Gly Gln Arg Val 140 145 150 Gln Lys Gly Gly Thr Glu Ser Gln Asp Thr Leu Cys Gln Asn Cys 155 160 165 Pro Pro Gly Thr Phe Ser Pro Asn Gly Thr Leu Glu Glu Cys Gln 170 175 180 His Gln Thr Lys Cys 185 <210>5 <211>283 <212>PROTEIN <213>HOMO SAPIENS <400>5 Met Glu Pro Pro Gly Asp Trp Gly Pro Pro Pro Trp Arg Ser Thr 1 5 10 15 Pro Arg Thr Asp Val Leu Arg Leu Val Leu Tyr Leu Thr Phe Leu 20 25 30 Gly Ala Pro Cys Tyr Ala Pro Ala Leu Pro Ser Cys Lys Glu Asp 35 40 45 Glu Tyr Pro Val Gly Ser Glu Cys Cys Pro Lys Cys Ser Pro Gly 50 55 60 Tyr Arg Val Lys Glu Ala Cys Gly Glu Leu Thr Gly Thr Val Cys 65 70 75 Glu Pro Cys Pro Pro Gly Thr Tyr Ile Ala His Leu Asn Gly Leu 80 85 90 Ser Lys Cys Leu Gln Cys Gln Met Cys Asp Pro Ala Met Gly Leu 95 100 105 Arg Ala Ser Arg Asn Cys Ser Arg Thr Glu Asn Ala Val Cys Gly 110 115 120 Cys Ser Pro Gly His Phe Cys Ile Val Gln Asp Gly Asp His Cys 125 130 135 Ala Ala Cys Arg Ala Tyr Ala Thr Ser Ser Pro Gly Gln Arg Val 140 145 150 Gln Lys Gly Gly Thr Glu Ser Gln Asp Thr Leu Cys Gln Asn Cys 155 160 165 Pro Pro Gly Thr Phe Ser Pro Asn Gly Thr Leu Glu Glu Cys Gln 170 175 180 His Gln Thr Lys Cys Ser Trp Leu Val Thr Lys Ala Gly Ala Gly 185 190 195 Thr Ser Ser Ser His Trp Val Trp Trp Phe Leu Ser Gly Ser Leu 200 205 210 Val Ile Val Ile Val Cys Ser Thr Val Gly Leu Ile Ile Cys Val 215 220 225 Lys Arg Arg Lys Pro Arg Gly Asp Val Val Lys Val Ile Val Ser 230 235 240 Val Gln Arg Lys Arg Gln Glu Ala Glu Gly Glu Ala Thr Val Ile 245 250 255 Glu Ala Leu Gln Ala Pro Pro Asp Val Thr Thr Val Ala Val Glu 260 265 270 Glu Thr Ile Pro Ser Phe Thr Gly Arg Ser Pro Asn His 275 280 <210>6 <211>26 <212>DNA <213>ARTIFICIAL SEQUENCE <400>6 cgggatccga ggagcaggtg gtgtct 26 <210>7 <211>28 <212>DNA <213>ARTIFICIAL SEQUENCE <400>7 tccgctcgag ctcttggcct gaagtttc 28 <210>8 <211>644 <212>DNA <213>MOUSE <400>8 ctcttggcct gaagtttctt gatcaagaaa atggaacctc tcccaggatg 50 ggggtcggca ccctggagcc aggcccctac agacaacacc ttcaggctgg 100 tgccttgtgt cttccttttg aacttgctgc agcgcatctc tgcccagccc 150 tcatgcagac aggaggagtt ccttgtggga gacgagtgct gccccatgtg 200 caacccaggt taccatgtga agcaggtctg cagtgagcat acaggcacag 250 tgtgtgcccc ctgtccccca cagacatata ccgcccatgc aaatggcctg 300 agcaagtgtc tgccctgcgg agtctgtgat ccagacatgg gcctgctgac 350 ctggcaggag tgctccagct ggaaggacac tgtgtgcaga tgcatcccag 400 gctacttctg tgagaaccag gatgggagcc actgttccac atgcttgcag 450 cacaccacct gccctccagg gcagagggta gagaagagag ggactcacga 500 ccaggacact gtatgtgctg actgcctaac agggaccttc tcacttggag 550 ggactcagga ggaatgcctg ccctggacca actgcagtgc atttcaacag 600 gaagtaagac gtgggaccaa cagcacagac accacctgct cctc 644 <210>9 <211>708 <212>DNA <213>HOMO SAPIENS <400>9 gatcccgagg agcccaaatc ttgtgacaaa actcacacat gcccaccgtg 50 cccagcacct gaactcctgg ggggaccgtc agtcttcctc ttccccccaa 100 aacccaagga caccctcatg atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg 150 gtggtggacg tgagccacga agaccctgag gtcaagttca actggtacgt 200 ggacggcgtg gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg gaggagcagt 250 acaacagcac gtaccgggtg gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac 300 tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag gtctccaaca aagccctccc 350 agcccccatc gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag ccccgagaac 400 cacaggtgta caccctgccc ccatcccggg atgagctgac caagaaccag 450 gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc tatcccagcg acatcgccgt 500 ggagtgggag agcaatgggc agccggagaa caactacaag accacgcctc 550 ccgtgctgga ctccgacggc tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg 600 gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc ttctcatgct ccgtgatgca 650 tgaggctctg cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc ctgtctccgg 700 gtaaatga 708 <210>10 <211>555 <212>DNA <213>HOMO SAPIENS <400>10 atggagcctc ctggagactg ggggcctcct ccctggagat ccacccccag 50 aaccgacgtc 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Ala Pro Cys Pro Pro Gln Thr Tyr Thr Ala His Ala Asn Gly Leu 80 85 90 Ser Lys Cys Leu Pro Cys Gly Val Cys Asp Pro Asp Met Gly Leu 95 100 105 Leu Thr Trp Gln Glu Cys Ser Ser Trp Lys Asp Thr Val Cys Arg 110 115 120 Cys Ile Pro Gly Tyr Phe Cys Glu Asn Gln Asp Gly Ser His Cys 125 130 135 Ser Thr Cys Leu Gln His Thr Thr Cys Pro Pro Gly Gln Arg Val 140 145 150 Glu Lys Arg Gly Thr His Asp Gln Asp Thr Val Cys Ala Asp Cys 155 160 165 Leu Thr Gly Thr Phe Ser Leu Gly Gly Thr Gln Glu Glu Cys Leu 170 175 180 Pro Trp Thr Asn Cys Ser Ala Phe Gln Gln Glu Val Arg Arg Gly 185 190 195 Thr Asn Ser Thr Asp Thr Thr Cys Ser Ser Asp Pro Glu Glu Pro 200 205 210 Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 215 220 225 Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 230 235 240 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 245 250 255 Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 275 280 285 Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 290 295 300 Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 305 310 315 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 320 325 330 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 335 340 345 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 350 355 360 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 365 370 375 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 380 385 390 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 395 400 405 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 410 415 420 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 425 430 435 Leu Ser Pro Gly Lys 440
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｎ 15/09 Ｃ１２Ｎ 15/00 Ａ (72)発明者 猪部 学 札幌市西区八軒１条西４丁目琴似住宅618 −24 Ｆターム(参考） 4B024 AA01 BA61 BA63 CA02 CA04 DA02 EA02 HA17 4C084 AA02 BA22 BA41 CA53 CA56 MA66 NA14 ZA511 ZB351 4H045 AA10 AA11 AA30 BA10 BA41 CA40 DA50 DA75 EA29 FA74

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】ヘベム蛋白質と免疫グロブリンとの融合蛋
    白質を含有するエンドトキシン誘発性疾患治療薬。
  2. 【請求項２】ヘベム蛋白質の細胞外ドメインと免疫グロ
    ブリンＦCドメインの融合蛋白質を含有するエンドトキ
    シン誘発性疾患治療薬。
  3. 【請求項３】免疫グロブリンＦCドメインがヒンジ−CH2
    −CH3−ドメインであるエンドトキシン誘発性疾患治療
    薬。
  4. 【請求項４】ヘベム蛋白質の細胞外ドメインが配列番号
    １のアミノ酸配列からなる蛋白質である請求項２記載の
    エンドトキシン誘発性疾患治療薬。
  5. 【請求項５】免疫グロブリンＦCドメインが配列番号２
    のアミノ酸配列からなる蛋白質である請求項２記載のエ
    ンドトキシン誘発性疾患治療薬。
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