JP2002535278A - β−２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシ−５−フルオロシチジンにより選択されるＨＩＶ−１突然変異 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は逆転写酵素領域の７０（ＫからＮに）、９０または１７２コドン以外の位置でＨＩＶ−１に突然変異を生じさせる薬剤と組み合わせて、または交互に、β−Ｄ−Ｄ４ＦＣあるいはその薬学的に許容可能な塩またはプロドラッグを治療を要するヒトに投与することを含むＨＩＶ感染を治療するための方法を開示している。更に、他の抗ＨＩＶ薬に対して薬剤耐性を示す患者に対する「サルベージ治療」としてβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣを使用するための方法を開示している。β−Ｄ−Ｄ４ＦＣは通常、７０（ＫからＮに）、９０または１７２コドン以外の位置で突然変異を生じさせる薬剤に対して耐性を示す患者のためのサルベージ治療として使用される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 本発明は、補助金番号１Ｒ０１−Ａ１−４１９８０−０１で米国国立保健研究
所からの助成金により一部、助成されている。米国政府はこの発明に対して一定
の権利を有する。

【０００２】 本出願は、１９９９年１月２２日に出願された米国仮特許出願第６０／１１６
，７７３号に対して優先権を主張する。

【０００３】 発明の背景 １９８３年に、ＡＩＤＳの病因がヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）であること
が確定された。１９８５年に、合成ヌクレオシド３’−アジド−３’−デオキシ
チミジン（ＡＺＴ）がヒト免疫不全ウイルスの複製を阻害することが報告された
。その後、２’，３’−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジデオキ
シシチジン（ＤＤＣ）、２’，３’−ジデオキシ−２’，３’−ジデヒドロチミ
ジン（Ｄ４Ｔ）、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−
１−イル）−１，３−オキサチオラン（ＦＴＣ）、（−）−シス−２−ヒドロキ
シメチル−５−（シトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン（３ＴＣ）を
含む他のいくつかの合成ヌクレオシドがＨＩＶに対して有効であることが証明さ
れている。細胞キナーゼによる５’−トリホスフェートへの細胞リン酸化の後に
、これらの合成ヌクレオシドはウイルスのＤＮＡの成長鎖中に入り込み、３’−
ヒドロキシル基の不在により鎖停止反応をもたらす。したがってこれらは、ウイ
ルス酵素である逆転写酵素を阻害しうる。

【０００４】 抗ウイルス薬での長期にわたる治療の後にＨＩＶの薬剤耐性変異体が出現する
ことが認められている。薬剤耐性は最も典型的には、ウイルスの複製で使用され
る酵素、ＨＩＶの場合に最も典型的には逆転写酵素、プロテアーゼまたはＤＮＡ
ポリメラーゼをコードする遺伝子の突然変異により生じる。最近、主要薬剤によ
り生じた突然変異とは異なる突然変異を生じさせる第２の、かつ場合によっては
第３の抗ウイルス化合物と組み合わせて、または交互に投与することにより、Ｈ
ＩＶ感染に対する薬剤の効力を持続させ、増大させ、または回復させることがで
きることが示された。もしくは、薬剤の薬物動態、生体内分布または他のパラメ
ータをこのような組み合わせまたは交互治療に替えることができる。通常、組み
合わせ治療が交互治療よりも典型的には好ましい。それというのも、それにより
、ウイルスに対して同時に複数の圧力をかけることができるためである。しかし
ながら、所定の薬剤によりどの突然変異がＨＩＶ−１ゲノムに生じ、その突然変
異が永続的または一過性であるかどうか、あるいは突然変異したＨＩＶ−１シー
クエンスに感染した細胞がどの程度、組み合わせまたは交互での他の薬剤での治
療に応答するかどうかは、予見することができない。最近の抗レトロウイルス薬
で処理されている長期細胞培養での薬剤耐性の動態に関するデータが不足してい
るという事実がさらに事態を悪化させている。

【０００５】 ３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）、２’，３’−ジデオキシ
イノシン（ＤＤＩ）または２’，３’−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）に対して
耐性のあるＨＩＶ−１変異体が、これらの薬剤で長期単独治療を受けた患者から
単離されている（Ｌａｒｄｅｒ ＢＡ，Ｄａｒｂｙ Ｇ，Ｒｉｃｈｍａｎ ＤＤ
．Ｓｃｉｅｎｃｅ １９８９；２４３：１７３１−４；Ｓｔ Ｃｌａｉｒ ＭＨ
，Ｍａｒｔｉｎ ＪＬ，Ｔｕｄｏｒ ＷＧ他。Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９１；２５
３：１５５７−９；Ｓｔ Ｃｌａｉｒ ＭＨ，Ｍａｒｔｉｎ ＪＬ，Ｔｕｄｏｒ
ＷＧ他。Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９１；２５３：１５５７−９；およびＦｉｔｚ
ｇｉｂｂｏｎ ＪＥ，Ｈｏｗｅｌｌ ＲＭ，Ｈａｂｅｒｚｅｔｔｌ ＣＡ，Ｓｐ
ｅｒｂｅｒ ＳＪ，Ｇｏｃｋｅ ＤＪ，Ｄｕｂｉｎ ＤＴ。Ａｎｔｉｍｉｃｒｏ
ｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９２；３６：１５３−７）。臨床
証拠は、ＡＺＴ耐性が小児と成人の両方において、良くない臨床転帰を予見する
ものであることを示す臨床証拠が増えてきている（Ｍａｙｅｒｓ ＤＬ．Ｌｅｃ
ｔｕｒｅ ａｔ ｔｈｅ Ｔｈｉｒｔｙ−ｓｅｃｏｎｄ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎ
ｃｅ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔ
ｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．（Ａｎａｈｅｉｍ，ＣＡ．１９９２）
；Ｔｕｄｏｒ−Ｗｉｌｌｉａｍｓ Ｇ，Ｓｔ Ｃｌａｉｒ ＭＨ，ＭｃＫｉｎｎ
ｅｙ ＲＥ他。Ｌａｎｃｅｔ １９９２；３３９：１５−９；Ｏｇｉｎｏ ＭＴ
，Ｄａｎｋｎｅｒ ＷＭ，Ｓｐｅｃｔｏｒ ＳＡ。Ｊ Ｐｅｄｉａｔｒ １９９
３；１２３：１−８；Ｃｒｕｍｐａｃｋｅｒ ＣＳ，Ｄ’Ａｑｕｉｌａ ＲＴ，
Ｊｏｈｎｓｏｎ ＶＡ他。Ｔｈｉｒｄ Ｗｏｒｋｓｈｏｐ ｏｎ Ｖｉｒａｌ
Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ．１９９３）；および
Ｍａｙｅｒｓ Ｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ＲＶ４３ Ｓｔｕｄｙ Ｇｒｏｕｐ．Ｔｈ
ｉｒｄ Ｗｏｒｋｓｈｏｐ ｏｎ Ｖｉｒａｌ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．（Ｇａ
ｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ．１９９３））。非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤
（ＮＮＲＴＩ）に対するＨＩＶ−１耐性の急速な発現が、細胞培養およびヒト臨
床試験でのいずれでも報告されている（Ｎｕｎｂｅｒｇ ＪＨ，Ｓｃｈｌｅｉｆ
ＷＡ，Ｂｏｏｔｓ ＥＪ他。Ｊ Ｖｉｒｏｌ １９９１；６５（９）：４８８
７−９２；Ｒｉｃｈｍａｎ Ｄ，Ｓｈｉｈ ＣＫ，Ｌｏｗｙ Ｉ他。Ｐｒｏｃ
Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ（ＵＳＡ）１９９１；８８：１１２４１−５； Ｍ
ｅｌｌｏｒｓ ＪＷ，Ｄｕｔｓｃｈｍａｎ ＧＥ，Ｉｍ ＧＪ，Ｔｒａｍｏｎｔ
ａｎｏ Ｅ，Ｗｉｎｋｌｅｒ ＳＲ，Ｃｈｅｎｇ ＹＣ。Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍ
１９９２； ４１ ４４６−５１； Ｒｉｃｈｍａｎ ＤＤ ａｎｄ ｔｈｅ
ＡＣＴＧ １６４／１６８ Ｓｔｕｄｙ Ｔｅａｍ．Ｓｅｃｏｎｄ Ｉｎｔｅｒ
ｎａｔｉｏｎａｌ ＨＩＶ−１ Ｄｒｕｇ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ Ｗｏｒｋｓ
ｈｏｐ．（Ｎｏｏｒｄｗｉｊｋ，ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ．１９９３）
；ａｎｄ Ｓａａｇ ＭＳ，Ｅｍｉｎｉ ＥＡ，Ｌａｓｋｉｎ ＯＬ他。Ｎ Ｅ
ｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ １９９３； ３２９： １０６５−１０７２）。ＮＮＲＴ
ＩＬ’６９７６６１の場合、治療の開始後２〜６週間以内に、処置前レベルのウ
イルス血症への戻りを伴う薬剤耐性ＨＩＶ−１が生じる（Ｓａａｇ ＭＳ，Ｅｍ
ｉｎｉ ＥＡ，Ｌａｓｋｉｎ ＯＬ他。Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ １９９３；
３２９：１０６５−１０７２）。薬剤耐性株の発現に伴うウイルス血症の発症は
プロテアーゼ阻害剤を含む他のクラスのＨＩＶ−１阻害剤でも言及されている（
Ｊａｃｏｂｓｅｎ Ｈ，Ｃｒａｉｇ ＣＪ，Ｄｕｎｃａｎ ＩＢ，Ｈａｅｎｇｇ
ｉ Ｍ，Ｙａｓａｒｇｉｌ Ｋ，Ｍｏｕｓ Ｊ．Ｔｈｉｒｄ Ｗｏｒｋｓｈｏｐ
ｏｎ Ｖｉｒａｌ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，Ｍ
Ｄ．１９９３））。この経験は、ＨＩＶ−１薬剤耐性の可能性は、ＨＩＶ−１の
ための全ての新しい治療の前臨床評価で早期に評価すべきであるという認識をも
たらしている。

【０００６】 ２’，３’−ジデオキシ−２’，３’−ジデヒドロ−５−フルオロシチジン（
Ｄ４ＦＣ）は公知の化合物である。Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．によ
り出願されたヨーロッパ特許出願第０４０９２２７号はβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣ（例２
）およびＢ型肝炎を治療するためのその使用を開示している。Ｓｔｉｃｈｔｉｎ
ｇ Ｒｅｇａ Ｖ．Ｚ．Ｗ．により出願されたオランダ国特許第８９０１２５８
号は一般に、ＨＩＶおよびＢ型肝炎（「ＨＢＶ」）の治療で使用するための５−
ハロゲノ−２’，３’−ジデオキシ−２’，３’−ジデヒドロシチジン誘導体を
開示している。米国特許第５，７０３，０５８号は有効量のβ−Ｌ−Ｄ４ＦＣを
、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１
，３−オキサチオラン、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン−１−イ
ル）−１，３−オキサチオラン、９−［４−（ヒドロキシメチル）−２−シクロ
ペンテン−１−イル）−グアニン（カルボビル；ｃａｒｂｏｖｉｒ）、９−［（
２−ヒドロキシエトキシ）メチル］グアニン（アシクロビル）、インターフェロ
ン、３’−デオキシ−３’−アジド−チミジン（ＡＺＴ）、２’，３’−ジデオ
キシイノシン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）、（−）
−２’−フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−アラウリジン（Ｌ−ＦＭＡＵ）または
２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチミジン（Ｄ４Ｔ）と組み合
わせて、または交互に投与することを含むＨＩＶおよびＨＢＶ感染を治療するた
めの方法を開示している。米国特許第５，９０５，０７０号は有効量のβ−Ｄ−
Ｄ４ＦＣを、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１−
イル）−１，３−オキサチオラン、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（シトシ
ン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、９−［４−（ヒドロキシメチル）−
２−シクロペンテン−１−イル）−グアニン（カルボビル）、９−［（２−ヒド
ロキシエトキシ）メチル］グアニン（アシクロビル）、インターフェロン、３’
−デオキシ−３’−アジド−チミジン（ＡＺＴ）、２’，３’−ジデオキシイノ
シン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）、（−）−２’−
フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−アラ−ウリジン（Ｌ−ＦＭＡＵ）または２’，
３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチミジン（Ｄ４Ｔ）と組み合わせて
、または交互に投与することを含むＨＩＶおよびＨＢＶ感染を治療するための方
法を開示している。

【０００７】 本発明の目的は、ＨＩＶを治療するためのβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣの最適な投与を決
定することである。

【０００８】 本発明の別の目的は、β−Ｄ−Ｄ４ＦＣを単独で投与するよりも有利な、また
は改善された薬物動態、生体内分布、代謝、耐性または他のパラメータを示す、
ＨＩＶに感染している患者を治療するためのβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣを含有する方法お
よび組成物を提供することである。

【０００９】 本発明の更に別の目的は、ウイルスに対してβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣと共に相乗的に
作用する第２の化合物と組み合わせて、または交互にβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣを投与す
る、ＨＩＶに感染している患者を治療するための方法および組成物を提供するこ
とである。

【００１０】 本発明の更に別の目的は薬剤耐性型ＨＩＶに感染している患者を治療するため
の方法および組成物を提供することである。

【００１１】 本発明の更に別の目的はβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣを投与するための最良の方法を評価
するための方法およびキットを提供することである。

【００１２】 発明の概要 β−Ｄ−Ｄ４ＦＣはウイルスの逆転写酵素領域の７０（ＫからＮに）、９０お
よび１７２コドンでＨＩＶ−１に突然変異を生じさせることが判明している。こ
の発見に基づき、逆転者酵素領域の７０（ＫからＮに）、９０および１７２コド
ン以外の位置でＨＩＶ−１に突然変異を生じさせる薬剤と組み合わせて、または
交互に、β−Ｄ−Ｄ４ＦＣあるいはその薬学的に許容可能な塩またはプロドラッ
グを、治療に要するヒトに投与することを含む、ＨＩＶを治療するための方法が
提供されている。公知の抗ＨＩＶ薬に関して公表されている突然変異パターンを
参照することにより、または新規薬剤に関する突然変異パターンを決定すること
により、本発明は実施することができる。

【００１３】 この発見に基づき、他の抗ＨＩＶ薬に対して薬剤耐性を示す患者に、「サルベ
ージ治療」としてβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣを使用する方法も提供される。β−Ｄ−Ｄ４
ＦＣはＡＺＴ、ＤＤＣ、ＤＤＩ、Ｄ４Ｔ、３ＴＣ、（−）−ＦＴＣまたはβ−Ｌ
−Ｄ４ＦＣに対して顕著な交差耐性は示さないことが判明している。対照的に、
β−Ｌ−Ｄ４ＦＣはコドン８１４（メチオニンからバリンに）に突然変異を迅速
にもたらし、その結果、３ＴＣおよびＦＴＣに高レベルの耐性をもたらす。β−
Ｄ−Ｄ４ＦＣは通常、７０（ＫからＮに）９０または１７２コドン以外の位置で
突然変異を生じさせる薬剤に対して耐性を示す患者のためのサルベージ治療とし
て使用することができる。

【００１４】 本発明はしたがって、更に一般的に少なくとも次の態様を含む： （ｉ）逆転写酵素領域の７０（ＫからＮに）、９０または１７２コドン以外の
位置でＨＩＶ−１に突然変異を生じさせ、かつシス−２−ヒドロキシメチル−５
−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、シス−２−
ヒドロキシメチル−５−（シトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、９
−［４−（ヒドロキシメチル）−２−シクロペンテン−１−イル）−グアニン（
カルボビル）、９−［（２−ヒドロキシエトキシ）メチル］グアニン（アシクロ
ビル）、インターフェロン、３’−デオキシ−３’−アジド−チミジン（ＡＺＴ
）、２’，３’−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジデオキシシチ
ジン（ＤＤＣ）、（−）−２’−フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−アラウリジン
（Ｌ−ＦＭＡＵ）または２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチミ
ジン（Ｄ４Ｔ）以外である薬剤と組み合わせて、または交互に、任意選択で薬学
的に許容可能な担体中の有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣあるいはその薬学的に許容可
能なプロドラッグまたは塩をヒトに投与することを含む、ヒトのＨＩＶ感染を治
療するための方法。

【００１５】 （ｉｉ）逆転写酵素領域のコドン７０のリジンからアスパラギンへの（Ｋから
Ｎに）ＨＩＶ−１突然変異、コドン９０のバリンからイソロイシンへの（Ｖから
Ｉに）突然変異またはコドン１７２のアルギニンからリジンへの（ＲからＫに）
の突然変異を生じさせ、かつシス−２−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロ
シトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、シス−２−ヒドロキシメチル
−５−（シトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、９−［４−（ヒドロ
キシメチル）−２−シクロペンテン−１−イル）−グアニン（カルボビル）、９
−［（２−ヒドロキシエトキシ）メチル］グアニン（アシクロビル）、インター
フェロン、３’−デオキシ−３’−アジド−チミジン（ＡＺＴ）、２’，３’−
ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）、
（−）−２’−フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−アラ−ウリジン（Ｌ−ＦＭＡＵ
）または２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチミジン（Ｄ４Ｔ）
以外である薬剤と組み合わせて、または交互に、任意選択で薬学的に許容可能な
担体中の有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣまたはその薬学的に許容可能な塩をヒトに投
与することを含む、ヒトのＨＩＶ感染を治療するための方法。

【００１６】 （ｉｉｉ）任意選択で薬学的に許容可能な担体中の有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣ
あるいはその薬学的に許容可能なプロドラッグまたは塩を患者に投与することを
含む、３ＴＣに対して耐性のあるＨＩＶウイルス株に感染している患者を治療す
るための方法。

【００１７】 （ｉｖ）任意選択で薬学的に許容可能な担体中の有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣあ
るいはその薬学的に許容可能なプロドラッグまたは塩を患者に投与することを含
む、ＡＺＴに対して耐性のあるＨＩＶウイルス株に感染している患者を治療する
ための方法。

【００１８】 （ｖ）任意選択で薬学的に許容可能な担体中の有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣある
いはその薬学的に許容可能なプロドラッグまたは塩を患者に投与することを含む
、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１
，３−オキサチオランに対して耐性のあるＨＩＶウイルス株に感染している患者
を治療するための方法。

【００１９】 （ｖｉ）任意選択で薬学的に許容可能な担体中の有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣあ
るいはその薬学的に許容可能なプロドラッグまたは塩を患者に投与することを含
む、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン−１−イル）−１，３−オキ
サチオランに対して耐性のあるＨＩＶウイルス株に感染している患者を治療する
ための方法。

【００２０】 （ｖｉｉ）任意選択で薬学的に許容可能な担体中の有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣ
あるいはその薬学的に許容可能なプロドラッグまたは塩を患者に投与することを
含む、２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチミジン（Ｄ４Ｔ）に
対して耐性のあるＨＩＶウイルス株に感染している患者を治療するための方法。

【００２１】 （ｖｉｉｉ）任意選択で薬学的に許容可能な担体中の有効量のβ−Ｄ−Ｄ４Ｆ
Ｃあるいはその薬学的に許容可能なプロドラッグまたは塩を患者に投与すること
を含む、２’，３’−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）に対して耐性のあるＨＩＶ
ウイルス株に感染している患者を治療するための方法。

【００２２】 （ｉｘ）任意選択で薬学的に許容可能な担体中の有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣあ
るいはその薬学的に許容可能なプロドラッグまたは塩を患者に投与することを含
む、２’，３’−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）に対して耐性のあるＨＩＶウイ
ルス株に感染している患者を治療するための方法。

【００２３】 （ｘ）有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣあるいはそのプロドラッグまたは薬学的に許
容可能な塩を、有効量の（Ｓ）−６−クロロ−４−シクロプロピルエチニル−４
−トリフルオロメチル−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−
２−オン（ＳＵＳＴＩＶＡ、米国特許第５，５１９，０２１号参照）と組み合わ
せて、または交互に患者に投与することを含む、ＨＩＶに感染している患者を治
療するための方法。

【００２４】 開示されている組み合わせ、交互またはサルベージ養生は、ＨＩＶ感染および
ＡＩＤＳ関連疾患群（ＡＲＣ）、持続性汎発性リンパ節症（ＰＧＬ）、ＡＩＤＳ
関連神経症状、抗ＨＩＶ抗体陽性およびＨＩＶ陽性状態、カポジ肉腫、血小板減
少性紫斑病および日和見感染のような他の関連症状の予防および治療で使用する
ことができる。加えて、これらの化合物または製剤は、抗ＨＩＶ抗体またはＨＩ
Ｖ抗原陽性であるか、またはＨＩＶにさらされた個人の臨床疾患の進行を予防す
るか、または遅らせるために予防的に使用することができる。

【００２５】 図面の簡単な説明 図１は、β−Ｄ−Ｄ４ＦＣを示す図である。 図２は、ｐ２４抗原産生の抑制率に対するβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣの濃度（マイクロモ
ル）を示すグラフである。この図はβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣに対して低減した感受性を
有するウイルスの選択を説明するものである。

【００２６】 発明の詳細な説明 Ｉ．定義 ここで使用される用語「耐性ウイルス」とは、それらには限られないが末梢血
単核細胞（ＰＢＭＣ）またはＭＴ２またはＭＴ４細胞を含む一定の細胞株でのナ
イーブなウイルスに比較してＥＣ_５０で３倍、かつより典型的には５倍またはそ
れ以上の倍数での増加を示すウイルスのことである。

【００２７】 Ｄ−Ｄ４ＦＣとの用語は、以下β−Ｄ−Ｄ４ＦＣと互換的に使用する。

【００２８】 本明細書で使用される用語「実質的に純粋」または「実質的に光学異性体１種
の形で」とは、該当するヌクレオシドの単一エナンチオマーを少なくとも９５〜
９８％、またはより好ましくは９９〜１００％含有するヌクレオシド組成物のこ
とである。好ましい実施形態では、β−Ｄ−Ｄ４ＦＣを記載の表示に関して実質
的に純粋な形で投与する。

【００２９】 本明細書で使用される用語「プロドラッグ」とは、Ｄ−Ｄ４ＦＣの５’または
Ｎ^４アシル化、アルキル化またはホスホリル化（モノ、ジおよびトリホスフェー
トエステルも、安定化されたホスフェートおよびリン脂質も含む）誘導体のこと
を意味する。一実施形態では、アシル群は、エステル基の非カルボニル部分が直
鎖、分枝鎖または環式アルキル、メトキシメチルを含むアルコキシアルキル、ベ
ンジルを含むアラルキル、フェノキシメチルを含むアリールオキシアルキル、任
意選択でハロゲン、アルキル、アルキルまたはアルコキシで置換されていてもよ
いフェニルを含むアリール、アルキルまたはメタンスルホニルを含むアラルキル
スルホニルのようなスルホネートエステル、トリチルまたはモノメトキシトリチ
ル、置換されたベンジル、トリアルキルシリルまたはジフェニルメチルシリルか
ら選択されているカルボン酸エステルである。エステル中のアリール基は好適に
は、フェニル基からなる。アルキル基は直鎖、分枝鎖または環式であることが可
能で、かつ好ましくはＣ_１〜Ｃ_１８である。

【００３０】 本明細書で使用される用語「薬学的に許容可能な塩」とは、受容者に投与する
際に、β−Ｄ−Ｄ４ＦＣを直接または間接的にもたらしうるか、またはそれ自体
活性を示す薬学的に許容可能な塩である。

【００３１】 ここで使用されるアミノ酸の略語を表１中に記載する。

【００３２】

【表１】

【００３３】 ＩＩ．β−Ｄ−Ｄ４ＦＣによって選択されるＨＩＶ−１逆転写酵素での突然変
異 β−２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシ−５−フルオロシチジ
ン（Ｄ４ＦＣ）のＤ−およびＬ−エナンチオマーはともに強力で選択的なＨＩＶ
−１の阻害剤であるが、Ｄ−エナンチオマーの方がより選択的である。Ｄ−Ｄ４
ＦＣに対する耐性のインビトロでの発現は、濃度が増加している薬剤の存在下に
、ＭＴ−２細胞および末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中でのＨＩＶ−１_ＬＡＩの連
続継代により評価した。Ｄ−Ｄ４ＦＣに対して耐性を有する変異体は薬剤に長期
間曝した後にのみ生じた。ＭＴ−２細胞中での２０継代の後に得られたウイルス
はＤ−Ｄ４ＦＣに対して５．３倍の耐性を示した。多数回、試みたにも関わらず
ＰＢＭＣ中で耐性ウイルスを単離することができなかった。ＭＴ−２細胞中で選
択されたウイルスからのＲＴのＤＮＡ塩基配列決定は２つの突然変異を示した：
Ｋ６５ＲおよびＶ１７９Ｄ。Ｄ−Ｄ４ＦＣ耐性ウイルスの選択をＭＴ−２細胞中
で繰り返し、１９．３倍の耐性を示す変異体は、３つの新規ＲＴ突然変異をコー
ドした：Ｋ７０Ｎ、Ｖ９０ＩおよびＲ１７２Ｋ。Ｋ６５Ｒ組換えＨＩＶ−１_{ＬＡ Ｉ} ウイルスはＤ−Ｄ４ＦＣに対して３．９倍の耐性を示した。非ヌクレオチドＲ
Ｔ阻害剤に対する耐性を与える突然変異であるＶ１７９Ｄが、最もＫ６５Ｒに代
償的である。Ｄ−Ｄ４ＦＣに対する耐性での他の突然変異の役割も、単一および
複数突然変異を伴う組換えウイルスの構築により評価した。しかしながら、試験
された組換え体のいずれも＞２倍の耐性を示さなかった。

【００３４】 材料および方法 化学薬品。以前記載されたように（Ｓｈｉ他、１９９９年）、我々の研究所の
１つでＤ−Ｄ４ＦＣを合成した。滅菌水中の原液１０ｍＭとして製造して、かつ
−２０℃で貯蔵した。化合物を解かして、かつ使用の直前に所望の濃度に希釈し
た。

【００３５】 細胞。ＭＴ−２細胞（ＡＩＤＳ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｒｅｆｅｒｅｎ
ｃｅ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｐｒｏｇｒａｍ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔ
ｅ ｏｆ Ａｌｌｅｒｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ
，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｄ．Ｒｉｃ
ｈｍａｎにより寄託）を、ウシ胎児血清１０％、ＨＥＰＥＳ緩衝液１０ｍＭ、ペ
ニシリン（５０ＩＵ／ｍｌ）およびストレプトマイシン（５０μｇ／ｍｌ）を補
われているＲＰＭＩ１６４０（Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ Ｍ．Ａ．，Ｂｉｏｐｒｏｄ
ｕｃｔｓ，Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ，ＭＤ）中で培養した。

【００３６】 ウイルス。ＨＩＶ−１_ＬＡＩ、分子的にクローン化された臨床分離株を耐性選
択のため、組換え変異体の発生のための出発ウイルスとして使用した。ＨＩＶ−
１_ＬＡＩのストック調製物を、１．３×１０^７ＭＴ２細胞中にプロウイルスプラ
スミドＤＮＡ５〜１０ｊｉｇを電気泳動させることにより調製した。ウイルス細
胞変性効果のピークで（通常、トランスフェクションの７日後）、感染した培養
からの上澄みを集め、分取し、かつ使用するまで−８０℃で貯蔵した。ウイルス
調製物をＭＴ−２細胞中の３倍終点希釈により滴定し、かつＴＣＩＤ_５０をＲｅ
ｅｄ−Ｍｕｅｎｃｈ式で算出した。

【００３７】 耐性ウイルスの選択。Ｄ−Ｄ４ＦＣ耐性ウイルスの選択を開始する前に、出発
ウイルス（ＨＩＶ−１_ＬＡＩ）を薬剤の不在下にＭＴ−２細胞中で無細胞ウイル
スとして１０サイクル、継代させた。Ｄ−Ｄ４ＦＣ耐性ウイルスを徐々に濃度が
増加しているＤ−Ｄ４ＦＣの存在下にＭＴ−２細胞中でＨＩＶ−１_ＬＡＩを連続
的に継代させることにより選択した。Ｄ−Ｄ４ＦＣ耐性ウイルスの選択を２回行
った。選択を、ＭＴ−２細胞１×１０^６にウイルス０．０１モルを接種すること
により開始した。ウイルス細胞変性効果のピーク（感染の４〜７日後）に、感染
させた培養からの上澄みを集め、０．１〜０．３ｍｌを順次、感染の別のサイク
ルを開始するために使用した。上澄みを分取し、かつ選択されたウイルスの同定
のために−８０℃で貯蔵した。ウイルスを少なくとも３回、それぞれの濃度で継
代させたが、その際、所定の濃度の薬剤でのサイクル数は、Ｄ−Ｄ４ＦＣの特定
濃度で成長するウイルスの可能性に依存している。第１の選択処置の間、薬剤濃
度を上昇させる前にウイルスを一度、薬剤の不在下に継代させた（表２）。対照
として、ウイルスを並行して薬剤の不在下に継代させた。第１の選択を０．７５
μＭで開始し、かつ徐々に、無細胞継代の３７サイクルの間に４．０μＭまで上
昇させた。第２の選択を０．２μＭで開始し、かつ無細胞継代の２７サイクルの
間に６．２μＭまで増加させた（表２）。

【００３８】

【表２】

【００３９】 抗ウイルス感受性アッセイ。Ｄ−Ｄ４ＦＣに対するウイルス感受性をｐ２４抗
原産生の抑制率を測定することにより測定した。簡単には、ＭＴ−２細胞（細胞
１×１０^５／ｍｌ）を連続するＤ−Ｄ４ＦＣ希釈液の存在下に０．０１ｍｏｉで
ウイルスに感染させた。それぞれの希釈液を３回、試験した。培養上澄み液を感
染の７日後に集め、かつ商品アッセイ（ＤｕＰｏｎｔ，ＮＥＮ Ｐｒｏｄｕｃｔ
ｓ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，Ｄｅｌ．）を使用してｐ２４抗原産生に関してアッ
セイした。ウイルス感受性を、ｐ２４抗原の産生を５０％阻害するために必要な
薬剤濃度として示した（ＥＣ_５０）。

【００４０】 選択されたウイルス逆転写酵素のＤＮＡ塩基配列決定。選択されたウイルスか
らのウイルスＲＮＡ（ｖＲＮＡ）をＴＲＩｚｏｌ試薬（ＧｉｂｃｏＢＲＬ，Ｇｒ
ａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）を用いて単離した。全長ＲＴコード化領域をＲＴ
−ＰＣＲにより増幅した。続いてＰＣＲ産生物を、Ｗｉｚａｒｄ ＰＣＲ ｐｒ
ｅｐｓ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ ＷＩ）を使用して精製し、かつ塩基
配列決定した。

【００４１】 変異組換え体ＨＩＶ−１の産生。変異体ＲＴをＡｌｔｅｒｅｄ ＳｉｔｅｓＩ
Ｉ ｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇ
ａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用いて産生させた。突然変異誘発を突然変異誘発
ベクター中でクローン化されたＨＩＶ−１_ＬＡＩ、ＲＴ（ＰＡＬＴＥＲ，Ｐｒｏ
ｍｅｇａ）で実施した。所望の変異の存在を、ＲＴ遺伝子の直接的塩基配列決定
により決定した。変異体ＲＴを順次、ｐｘｘＨＩＶ−１_ＬＡＩベクターにつない
だ。次いで、変異体ウイルスのストックを、前記のようにＭＴ−２細胞１．３×
１０^７中にＤＮＡ５〜１０μｇを電気泳動させることにより調製した。

【００４２】 結果および考察 耐性ウイルスの表現形。Ｄ−Ｄ４ＦＣに対して耐性なウイルスを、ＭＴ−２細
胞への感染の３７（選択＃１）および２０（選択＃２）サイクル後に選択した。
選択＃１継代３７（ｐ３７ Ｄ−Ｄ４ＦＣ＃１）からのウイルスのＤ−Ｄ４ＦＣ
感受性の評価は、ＥＣ_５０が０．２１μＭから４．０７μＭへと上昇することに
より示されるように、ｐ３７ Ｄ−Ｄ４ＦＣ＃１が原種よりもＤ−Ｄ４ＦＣに対
して１９．４倍低い感受性を有することを示している（図２、表３）。選択＃２
継代２０（ｐ２０ Ｄ−Ｄ４ＦＣ＃２）からのウイルスのＤ−Ｄ４ＦＣ感受性の
評価は、ＥＣ_５０で０．２１μＭから１．１μＭへと上昇することにより示され
るように、ｐ２０ Ｄ−Ｄ４ＦＣ＃２は原種よりもＤ−Ｄ４ＦＣに対して５．３
倍低い感受性を有することを示している（図２、表３）。

【００４３】 耐性ウイルスの遺伝子形。ｐ３７ Ｄ−Ｄ４ＦＣ＃１およびｐ２０ Ｄ−Ｄ４
ＦＣ＃２からのｖＲＮＡを単離し、かつＲＴ−ＰＣＲにより増幅させた。ＰＣＲ
産生物の塩基配列決定は、ｐ３７ Ｄ−Ｄ４ＦＣ＃１中に３つの新規変異体：Ｋ
７０Ｎ（ＡＡＡ→４ＡＡＴ）、Ｖ９０Ｉ（ＧＴＴ→ＡＴＴ）およびＲ１７２Ｋ（
ＡＧＡ→ＡＡＡ）（表２）の存在を明らかにした。２つの異なる変異体がｐ２０
Ｄ−Ｄ４ＦＣ＃２：Ｋ６５Ｒ（ＡＡＡ→ＡＧＡ）およびＶ１７９Ｄ（ＧＴＴ→
ＧＡＴ）（表３）中で同定された。これらのウイルスからのＲＴ遺伝子中で、他
の突然変異は発見されなかった（アミノ酸８〜３３０）。加えて、薬剤の不在下
に並行して継代させた対照ウイルス中には突然変異は発見されなかった。

【００４４】 異なる関連変異を有するＤ−Ｄ４ＦＣ耐性ウイルスの単離は、Ｄ−Ｄ４ＦＣ耐
性ウイルスを単離するために使用された異なる選択技術の結果でありえた。選択
＃１では、薬剤濃度を上昇させる前に、感染の１サイクルのために選択的圧力を
除いた。これは、第２の選択処置の間には行わなかった。加えて、それぞれの選
択処置のために使用されたＤ−Ｄ４ＦＣの出発濃度は約３倍変動した。薬剤のよ
り高い出発濃度を選択＃１では使用した（０．７５μｍ）。これら２つの違いが
、選択されたウイルス中で見られた異なる変異体の原因であるようであった。

【００４５】 変異組換え体ＨＩＶ−１。選択ウイルスで同定された突然変異を含む変異組換
え体ＨＩＶ−１を、特定部位の突然変異誘発を介して発生させた。表４は、発生
させたそれぞれの変異組換え体ならびに対応するＥＣ_５０を挙げている。ｘｘＨ
ＩＶ−１_ＬＡＩ、Ｋ６５ＲウイルスはＤ−Ｄ４ＦＣに対する感受性で３．９倍の
低下を示すのに対して、他のウイルスのいずれも＞３．０倍の耐性を示さなかっ
た。しかしながら、三重変異体（ｘｘＨＩＶ−１_ＬＡＩ、Ｋ７０Ｎ／Ｖ９０Ｉ／
ＲＩ７２Ｋ）はよく成長せず、かつこれは、インビトロで選択されたウイルス中
で観察される耐性を再産生することが不可能であることが原因であった。

【００４６】

【表３】

【００４７】

【表４】

【００４８】 表５は、急性感染させたヒトＰＢＭ細胞（６日）でのＤ−Ｄ４ＦＣ単独での、
およびＡＺＴおよびＤ４Ｔと組み合わせてのメディアン有効濃度および組み合わ
せ指数（Ｃ．Ｉ．）を示している。表６は、ＨＩＶ−１およびクローン化された
ウイルスＩヒトＰＢＭ細胞に対するβ−Ｄおよびβ−Ｌ−Ｄ４ＦＣの効果を記載
している。

【００４９】

【表５】

【００５０】

【表６】

【００５１】 ＩＩＩ．ＨＩＶ薬の組み合わせまたは交互使用 通常、交互治療の間はそれぞれの薬剤の有効投薬量を連続的に投与するが、組
み合わせ治療では、２種またはそれ以上の薬剤の有効投薬量を一緒に投与する。
交互治療では例えば、１種またはそれ以上の第１の薬剤を有効期間、有効量で、
ウイルス感染を治療するために投与することができ、かつ次いで、１種またはそ
れ以上の第２の薬剤をこれらの第１の薬剤に常用治療で代え、かつ同様に、有効
期間、有効量で投与する。

【００５２】 投薬量はそれぞれの薬剤の吸収、生体内分布、代謝および排出率のようなファ
クタ、更に当業者に公知のほかのファクタに基づいている。投薬量の値は緩和さ
れるべき症状の重度に応じて変動させることもできる。更に、いずれの特異的な
被験者にも、個々の必要性および投薬する、または組成物の投与を管理する人の
専門的判断に応じて全期間にわたり、特異的な投薬量摂生およびスケジュールが
調整されることも理解されるはずである。ヌクレオシド誘導体（例えば、ＡＺＴ
、Ｄ４Ｔ、ＤＤＩおよび３ＴＣ）またはプロテアーゼ阻害剤、例えばネルフィナ
ビル（ｎｅｌｆｉｎａｖｉｒ）およびインディナビル（ｉｎｄｉｎａｖｉｒ）を
含む抗ＨＩＶ化合物のための好適な投薬量範囲の例は、科学文献およびＰｈｙｓ
ｉｃｉａｎｓ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅに見出すことができる。ここに記
載されている他の化合物のための好適な投薬量範囲の多くの例は、公知文献でも
見出すことができるか、または公知の処置を使用して決定することができる。こ
れらの投薬量範囲は所望の結果を得るために望ましいように変えることができる
。

【００５３】 好ましい一実施形態では、Ｄ−Ｄ４ＦＣをプロテアーゼ阻害剤と組み合わせて
投与する。特別な実施形態ではＤ−Ｄ４ＦＣをインディナビル（Ｃｒｉｘｉｖａ
ｎ）、ネルフィナビル（［３Ｓ−［２（２Ｓ＊、３Ｓ＊），３−α，４−ａ−β
、８ａ−β−］］−Ｎ−（１，１−ジメチルエチル）デカヒドロ−２−）２−ヒ
ドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−（
フェニルチオ）ブチル］−３−イソキノリンカルボキサミドモノメタンスルホネ
ート（Ｖｉｒａｃｅｐｔ）、サキナビル（ｓａｑｕｉｎａｖｉｒ；Ｉｎｖｉｒａ
ｓｅ）または１４１Ｗ９４（アンプレナビル（Ａｍｐｒｅｎａｖｉｒ；（Ｓ）−
テトラヒドロフラン−３−イル−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［Ｎ−［（４−ア
ミノフェニル）スルホニル］−Ｎ−イソブチルアミノ］−１−ベンジル−２−ヒ
ドロキシプロピル］カルバメート；またはエファビレンツ（ｅｆａｖｉｒｅｎｚ
）（Ｓ）−６−クロロ−４−（シクロプロピルエチニル）−１，４−ジヒドロ−
４−（トリフルオロメチル）−２Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−２−オン）と
組み合わせて、または交互に投与する。

【００５４】 他の好ましい実施形態では、Ｄ−Ｄ４ＦＣを、（１Ｓ，４Ｒ）−４−［２−ア
ミノ−６−シクロプロピル−アミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル］−２−シクロ
ペンテン−１−メタノールスクシネートであるアバカビア（ａｂａｃａｖｉｒ）
（１５９２Ｕ８９）を含むヌクレオシド類似体と組み合わせて、または交互に投
与する。

【００５５】 別の実施形態では、Ｄ−Ｄ４ＦＣを、ＤＭＰ−２６６（（Ｓ）−６−クロロ−
４−シクロプロピルエチニル−４−トリフルオロメチル−１，４−ジヒドロ−２
Ｈ−３，１−ベンゾオキサジン−２−オン（ＳＵＳＴＩＶＡ、米国特許第５，５
１９，０２１号参照）；デラビアジン（ｄｅｌａｖｉｒｄｉｎｅ）、（１−［３
−（１−メチル−エチル）アミノ］−２−ピリジニル−４−［［５−［（メチル
スルホニル）アミノ］−１Ｈ−インドール−２−イル］カルボニル］−，モノエ
タンスルホネート）、ネビラピン（ｎｅｖｉｒａｐｉｎｅ）またはデラルビルジ
ン（ｄｅｌａｒｖｉｒｄｉｎ）のような非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤と組み
合わせて投与する。

【００５６】 他の実施形態では、Ｄ−Ｄ４ＦＣをＨＩＶ−インテグラーゼ阻害剤またはケモ
カイン阻害剤と組み合わせて、または交互に投与する。

【００５７】 ＩＩ． Ｄ−Ｄ４ＦＣにより誘発されるＨＩＶゲノムの突然変異の分析 ＡＺＴに関してＬａｒｄｅｒらの米国特許第５，４０９，８１０号に記載され
たのと同様の方法およびキットは、Ｄ−Ｄ４ＦＣに関する突然変異体のプロフィ
ールに基づいたが、突然変異を誘発するＤ−Ｄ４ＦＣの存在を分析するために利
用でき、それゆえに、本明細書に示される発明の一部となる。参照によってその
全体の中でＬａｒｄｅｒ特許を組み込むことに加えて、これらの技術を以下に提
示する。

【００５８】 本発明の１つの態様は、Ｄ−Ｄ４ＦＣに対するＨＩＶ−１サンプルの感受性を
評価する方法を提供することであり、以下の （ｉ）サンプルから核酸を単離すること、 （ｉｉ）野生型ＤＮＡ配列（またはこれに対応するＲＮＡ）の領域にまたは突
然変異体のＤＮＡ配列（またはこれに対応するＲＮＡ）の領域に相補的であるオ
リゴヌクレオチドを核酸にハイブリッド形成すること、 （ｉｉｉ）オリゴヌクレオチドの３’−末端から核酸を重合させること、 （ｉｖ）オリゴヌクレオチドプライマー伸長産物が存在するかどうかを確認す
ること、 を含む。

【００５９】 本方法においてＨＩＶ−１サンプルから単離されたゲノムのＤＮＡまたはＲＮ
Ａを用いることができる。ＨＩＶ−１単離物の成長を支えるのに適切な細胞を、
ある期間インキュベートする。細胞を遠心分離により回収する。次いで、ＥＤＴ
ＡおよびＳＤＳなどの界面活性剤の存在下にプロテイナーゼＫを用いて細胞を消
化し、続いてフェノールで抽出することによりＤＮＡを単離できる。

【００６０】 よく知られている抽出および精製方法をサンプルからのＤＮＡの単離に用いる
ことができる。ＲＮＡは以下の方法を用いて単離できる。適切な細胞を感染させ
、次いである期間インキュベートする。遠心分離により細胞を回収する。ＲＮＡ
抽出緩衝液に細胞を再懸濁した後、プロテイナーゼ消化緩衝液を用いて消化し、
またプロテイナーゼＫを用いて消化する。フェノール／クロロホルム混合物の存
在下にタンパクを除去する。次いでＲＮＡを回収した後さらに遠心分離工程を行
うことができる（Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓらの「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｏｎｉｎ
ｇ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（分子クローニング実験説明書）
」、第２版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
Ｐｒｅｓｓ刊、１９８９年）。

【００６１】 増幅されていない核酸を使用することができるけれども、ＨＩＶ−１サンプル
中核酸が相対的に欠乏するので、増幅することが好ましい。少量のテンプレート
から確定した長さおよび配列を有する多量の特異的核酸フラグメントを生産する
インビトロ方法である、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技術を用いて核酸を選
択的に増幅できる。

【００６２】 ＰＣＲは、Ｍｇ^２＋濃度を用いる標準反応物質、オリゴヌクレオチドプライマ
ー、およびプライマーを用いてＲＴ遺伝子を増幅させる温度循環条件から構成さ
れる。突然変異したコドンを含むＨＩＶ−１の野生型ＤＮＡ配列の領域に対応す
るヌクレオチドが組み込まれている、完全なＲＴ遺伝子または選択された配列を
増幅するように、プライマーが選ばれる。

【００６３】 ＲＮＡはＰＣＲにより直接は増幅できない。これに対応するｃＤＮＡを合成し
なければならない。ｃＤＮＡの合成は、通常オリゴ−ｄＴプライマーを用いて初
回刺激を受けた逆転写により行われる。有利には、野生型ＤＮＡ配列に対応する
ＲＮＡの領域に、または逆転写領域の７０番（ＫからＮ）、９０番または１７２
番のコドンに対応する突然変異体のＤＮＡ配列の領域に対応するヌクレオチドが
組み込まれている選択された配列を、またはＲＴに関する核酸配列を簡素化する
ようにプライマリーを選択する。これは、野生型ＤＮＡ配列の対応する配列の上
流域であるＲＮＡストランド領域に相補性のあるオリゴヌクレオチドプライマー
を調製することにより行われる。次いで、この方法により調製されたｃＤＮＡ（
上記Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓらの記載を参照）は、ＤＮＡに関して既述したのと同
様の方法に用いることができる。

【００６４】 本方法の次の段階は、野生型ＤＮＡ配列（またはその対応するＲＮＡ）の領域
に、または突然変異体のＤＮＡ配列（またはその対応するＲＮＡ）の領域に相補
性のあるオリゴヌクレオチドを核酸にハイブリダイズすることである。

【００６５】 次いで、オリゴヌクレオチドプライマーの３’−末端から核酸が重合するよう
に、条件および試剤を提供する。この種の重合反応は当技術分野においてよく知
られている。

【００６６】 オリゴヌクレオチドプライマーがその３’−末端に突然変異遺伝子型に相補性
のあるヌクレオチドを有する場合、すなわちＲＴ領域中の７０番（ＫからＮ）、
９０番または１７２番のコドンにヌクレオチド変化を有する遺伝子型であり、核
酸配列の重合はサンプルの核酸が突然変異遺伝子型と同一である場合にのみ起こ
る。オリゴヌクレオチドプライマーの３’−末端でのヌクレオチドとサンプルの
核酸配列との不一致のため、野生型核酸配列の重合は起こらないかまたは少なく
とも充分な程度は起こらない。

【００６７】 オリゴヌクレオチドプライマーがその３’−末端に野生型遺伝子型に相補性の
あるヌクレオチドを有する場合、すなわちＲＴ領域中の７０番（ＫからＮ）、９
０番または１７２番のコドンに野生型ヌクレオチドを有する遺伝子型であり、そ
の部位で野生型である核酸配列の重合が起こる。３’−末端に突然変異ヌクレオ
チドを有する核酸の重合は起こらない。

【００６８】 それぞれのオリゴヌクレオチドの好ましい長さは、１５〜２０ヌクレオチドで
ある。オリゴヌクレオチドは当業者に知られている方法により調製することがで
き（Ｈ．ＫｏｓｔｅｒのＤｒｕｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、３０巻、５４８頁、１９
８０年；Ｈ．ＫｏｓｔｅｒのＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ、１５２
７頁、１９７２年；ＣａｒｕｔｈｅｒｓのＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅ
ｒｓ、７１９頁、１９８０年；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ、１８
５９頁、１９８１年；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ、２４巻、２４
５頁、１９８３年；Ｍ．ＧａｔｅのＮｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓｅａｒｃ
ｈ、８巻、１０８１頁、１９８０年）、および通常、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓ
ｙｓｔｅｍｓ ３８１Ａ合成機などの自動ＤＮＡ合成機を用いて調製される。

【００６９】 オリゴヌクレオチドプライマー伸長生成物の存在を決定することは有用である
。検出を行うための方法は適切な標識を用いることである。

【００７０】 オリゴヌクレオチドプライマーに、またはプライマー伸長重合産物を結合する
他の多くの分子に標識を都合よく取り付けることができる。

【００７１】 標識は例えば、酵素、放射性同位体または蛍光色素である。好ましい標識は、
ペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼなどの酵素に共役したストレプ
トアビジンを用いて続いて検出できるビオチンである。オリゴヌクレオチドプラ
イマー伸長重合生成物の存在は、例えばアガロースゲル上で重合反応を行い、次
いで重合生成物に対応するバンドの存在または非存在を検出するため、臭化エチ
ジウムで標識されたまたはサザンブロットおよびオートラジオグラフされた特異
的なＤＮＡフラグメントを観察することにより検出できる。標識されたオリゴヌ
クレオチドにのみ対応する顕著なバンドが存在する場合、これは重合が起こった
ことを示している。バンドが正確に予想された大きさで存在する場合、これは重
合が起こったことを示している。

【００７２】 例えば、本明細書に記載したように患者のリンパ球から単離したＤＮＡは、合
成オリゴヌクレオチドプライマーを用いるＰＣＲ増幅のためのテンプレートとし
て用いられ、これは増幅された配列とマッチするかまたはミスマッチを生ずるか
のいずれかである。このような突然変異を検出するＰＣＲの可能性は既に示した
。Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ Ｍｕｔａｔｉｏｎ ｓ
ｙｓｔｅｍ（増幅抵抗性突然変異システム、「ＡＲＭＳ」）（Ｃ．Ｒ．Ｎｅｗｔ
ｏｎらのＮｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１７巻、２５０３頁
、１９８９年）を用いるＰＣＲは、その合成オリゴヌクレオチドの３’−末端が
突然変異または野生型の配列とマッチするかまたはミスマッチするかのいずれか
であるような特異的突然変異を含むものに隣接する領域にアニールするような合
成オリゴヌクレオチドが産出される。ＰＣＲを行うことにより、マッチしたＤＮ
Ａフラグメントまたはミスマッチの起ったフラグメントがないことを（ゲル電気
泳動法を用いて）同定することができる。

【００７３】 本明細書に記載するようにＨＩＶ−１を感染させたＴ細胞からＤＮＡを抽出し
、これらのプライマーを用いる「ＡＲＭＳ」ＰＣＲに供する。

【００７４】 上述のようにオリゴヌクレオチドプライマーを用いることにより、すなわち相
補ＤＮＡのハイブリッド形成のみを起こす厳密な条件下に増幅されたＤＮＡフラ
グメントとして標識することができるオリゴヌクレオチドプライマーを用いて重
合を行うことによりフラグメントの存在が、同定される（唯一の差は、「ＡＲＭ
Ｓ」法により増幅されたＤＮＡのフラグメントが、突然変異体のＤＮＡまたは野
生型ＤＮＡから誘導されたいずれかと同一であるように、差別的なハイブリッド
形成を行う必要がないことであり、そのため通常のオリゴヌクレオチドはこれら
のフラグメントの存在を検出するために用いることができる。この種のオリゴヌ
クレオチドの配列はＨＩＶ−１菌株内に保存されているＤＮＡフラグメント中の
ＤＮＡ配列から誘導される）。

【００７５】 ウイルスを得るようには培養されてきてはいない感染した個体からのＰＢＬサ
ンプルから、ＤＮＡ中においてＤ−Ｄ４ＦＣ耐性と関連する突然変異の直接的検
出を行うために上記ＰＣＲアッセイを適用することができる。この物質は通常、
感染したリンパ培養液中のＨＩＶ−１ ＤＮＡよりも極めて少ない量含まれるの
で、「二重ＰＣＲ」（またはネスト化したセット）プロトコールをサンプル中の
目標ＨＩＶ−１ ＲＴ ＤＮＡシグナルの総量を増加させるために用いることが
できる（Ｐ．Ｓｉｍｍｏｎｄｓ，Ｐ．Ｂａｌｆｅ，Ｊ．Ｆ．Ｐｅｕｔｈｅｒｅｒ
，Ｃ．Ａ．Ｌｕｄｌａｍ，Ｊ．Ｏ．ＢｉｓｈｏｐおよびＡ．Ｊ．Ｌｅｉｇｈ Ｂ
ｒｏｗｎのＪ．Ｖｉｒｏｌ．、６４巻、８６４〜８７２頁、１９９０年）。二重
ＰＣＲはまれなテンプレート配列の増幅が制限されるという問題を解決する。少
量の事前増幅物質を、野生型と突然変異残基との区別が行えるように設計された
プライマーペアとともに、第２のＰＣＲに用いることができる。

【００７６】 本発明の第１の態様によれば、どの方法を使用するかを決めるＤ−Ｄ４ＦＣに
対するＨＩＶ−１サンプルの耐性状態を決定するためのアッセイに用いられる適
切な試験キットは、野生型ＤＮＡ配列（またはそれに対応するＲＮＡ）の領域に
または本明細書に記載するように突然変異ＤＮＡ配列の領域に相補的であるオリ
ゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチドの３’−末端からの核酸の重合に必要な他
の物質、およびオリゴヌクレオチドプライマー伸長生成物の存在を決定する装置
から構成される。このような他の物質は、適切な酵素、緩衝液および洗浄液、お
よび必要であれば標識のための標識および基質を含む。ＰＣＲが核酸を増幅する
ために使用される場合、野生型ＤＮＡ配列（またはそれに対応するＲＮＡ）の領
域または本明細書に記載するように突然変異ＤＮＡ配列（またはそれに対応する
ＲＮＡ）の領域およびｄＮＴＰを増幅する適切なオリゴヌクレオチドプライマー
などの更なる物質が含まれなければならない。

【００７７】 本発明の第２の態様は、Ｄ−Ｄ４ＦＣに対するＨＩＶ−１サンプルの感受性を
評価する方法を提供することであり、 （ｉ）サンプルから核酸を単離すること、 （ｉｉ）ＲＴ領域中の７０番（ＫからＮ）、９０番または１７２番の領域で１
つまたはそれ以上のヌクレオチドを含む、野生型ＤＮＡ配列（またはこれに対応
するＲＮＡ）の領域にまたは図１に示した突然変異体のＤＮＡ配列（またはこれ
に対応するＲＮＡ）の領域に相補的であるオリゴヌクレオチドで核酸をハイブリ
ダイズすること、および （ｉｉｉ）オリゴヌクレオチドと核酸とのハイブリッドの結果、これらの位置
の１つで相補ヌクレオチドを有するかどうかを確認すること、 を含む。

【００７８】 好ましくは、オリゴヌクレオチドはその補体と完全に一致してハイブリッドを
形成するように設計される。

【００７９】 核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）は、本発明の第１の態様において記載した方法に
よりサンプルから単離される。

【００８０】 同様に、ＰＣＲはＲＴ ＤＮＡ（またはこれに対応するＲＮＡ）を増幅するた
めに、または好ましくは指定された位置で１つまたはそれ以上のヌクレオチドを
含むＤＮＡ（またはこれに対応するＲＮＡ）を取り込んだＲＴ ＤＮＡ（または
これに対応するＲＮＡ）の領域を増幅するために用いることができる。

【００８１】 次いで、本方法の第２の段階において、野生型のＤＮＡ配列（またはこれに対
応するＲＮＡ）の領域にまたは突然変異体のＤＮＡ配列の領域に相補的であるオ
リゴヌクレオチドにハイブリッドするために核酸が用いられる。

【００８２】 オリゴヌクレオチドは、試験される関心のあるヌクレオチド部位の数に依存し
たいかなる長さでも構わない。オリゴヌクレオチドが関心あるたった１つの部位
でヌクレオチドを含むように設計される場合、このヌクレオチドはオリゴヌクレ
オチドの中心部にまたはその近傍にあることが好ましい。

【００８３】 オリゴヌクレオチドおよび核酸配列が組み合わされたハイブリッドを形成する
かどうかを確認するために、オリゴヌクレオチドまたは逆転写領域の７０番（Ｋ
からＮ）、９０番または１７２番コドンでのヌクレオチドが、対応するヌクレオ
チドにまたはハイブリッド形成するかまたはハイブリッド形成しないオリゴヌク
レオチドのヌクレオチドに相補的である場合にのみハイブリッドが形成されるよ
うに、特異なハイブリッド形成条件が決められる。特異性を保証するに充分厳密
である条件を見出すために、ハイブリッド形成段階を行う前に、例えば反応温度
および塩溶液濃度を確立することが重要である（Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓらの「Ｍ
ｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ
（分子クローニング、実験説明書）」、第２版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａ
ｒｂｏｕｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ刊、１９８９年）。オリゴヌク
レオチドプローブが、逆転写領域の７０番（ＫからＮ）、９０番または１７２番
コドンに対応する１つまたはそれ以上のそのヌクレオチドで野生型核酸配列に相
補的であるＤＮＡ配列を有する場合、このオリゴヌクレオチドは野生型の核酸に
完全にハイブリッド形成する。野生型の核酸に完全にはハイブリッド形成しない
場合。ハイブリッド形成しない場合、これから単離された核酸が１つまたはそれ
以上の突然変異を含むことが示唆される。

【００８４】 オリゴヌクレオチドプローブが突然変異核酸配列に相補的であるＤＮＡ配列を
有する場合、このオリゴヌクレオチドは突然変異核酸にハイブリッド形成する。
ハイブリッド形成しない場合、サンプルから単離された核酸はこのような突然変
異体または突然変異体を含まないと考えられる。オリゴヌクレオチドプローブは
本発明の第１の態様において、検出する方法として標識される。

【００８５】 ハイブリッド形成および引き続いてのハイブリッド形成しない核酸の除去を、
相補ＤＮＡと一致しないオリゴヌクレオチド以外とのハイブリッド形成のみを起
こす厳密な条件下に行う（すなわち、β−グロビンまたはＨＬＡ−ＤＱα遺伝子
を用いての鎌状細胞突然変異の検出用に記載したオリゴヌクレオチド特異的ハイ
ブリッド形成（Ｒ．Ｋ．ＳａｉｋｔらのＮａｔｕｒｅ、３２４巻、１６３頁、１
９８６年）、活性化Ｒａｓ遺伝子（Ｍ．Ｖｅｒ Ｌａａｎ−ｄｅ Ｖｒｉｅｓら
のＧｅｎｅ、５０巻、３１３頁、１９８６年）、およびβ−サラセミア（Ｃ．Ｗ
ｏｎｇらのＮａｔｕｒｅ、３３０巻、３８４頁、１９８７年））。

【００８６】 ニトロセルロース、ナイロンまたは他の固体マトリックス（例えばドットブロ
ット）へのＲＴ核酸配列の固定化によりハイブリッド形成が行われる。標識法を
用いることによりハイブリッドの存在を決定することは便利である。例えば、化
学合成されたオリゴヌクレオチドプローブは、酵素、放射性同位体または蛍光色
素を用いて適切に標識することができる。好ましい標識は、ペルオキシダーゼま
たはアルカリホスファターゼなどの酵素に複合したストレプトアビジンを用いて
続いて検出できるビオチンである。

【００８７】 別法として、標識されていない上記に示した化学合成されたオリゴヌクレオチ
ドを上記に示した固体担体に固定化し、続いて前述のように標識されたＲＴ核酸
配列によりハイブリッド形成することによりハイブリッド形成が行われる。

【００８８】 ハイブリッド形成に対する前述した両方の立場において、効果的にハイブリッ
ド形成が行われていることを評価するために（例えば、オリゴヌクレオチドの相
補オリゴヌクレオチドへのハイブリッド形成）、適切な制御反応を行うことがで
きる。

【００８９】 単離された核酸が野生型のオリゴヌクレオチドまたは突然変異オリゴヌクレオ
チドのいずれかにハイブリッド形成していることが、結果から容易に解釈できる
。

【００９０】 本発明の第２の態様による方法を用いてＨＩＶ−１サンプルのＤ−Ｄ４ＦＣへ
の感受性を評価するためのアッセイに用いられる適切な試験キットは、ハイブリ
ッド形成させるのに必要な他の物質とともに、野生型ＤＮＡ配列（またはそれに
対応するＲＮＡ）の領域にまたは突然変異体のＤＮＡ配列の適切な領域に相補性
があるオリゴヌクレオチドを含む。この種の物質は、適切な緩衝液および洗浄溶
液、および必要である場合に標識するための標識および基質を含む。通常、オリ
ゴヌクレオチドは標識される。ＰＣＲをハイブリッド形成前に核酸を増幅させる
ために使用する場合、野生型ＤＮＡ配列（またはそれに対応するＲＮＡ）の領域
または突然変異体のＤＮＡ配列の領域を増幅する適切なオリゴヌクレオチドプラ
イマー、適切な酵素、およびｄＮＴＰ’ｓ（デオキシヌクレオチド３リン酸塩）
などの更なる物質を含まなければならない。

【００９１】 アッセイの１つの代わりうる構成において、増幅におけるｄＮＴＰ’ｓは、放
射性同位体、ビオチン、蛍光色素または酵素などの検出分子と結合していてもま
たは結合していなくてもよい。

【００９２】 ＲＮＡ増幅システムを用いて、臨床サンプルから単離されたＨＩＶ−１ ＲＴ
ＲＮＡ中のジドブジン耐性突然変異を検出することもできる。Ｇｕａｔｅｌｌ
ｉらにより記載されている方法（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（Ｕ
ＳＡ）、８／７巻、１８７４〜１８７８頁、１９９０年３月）を用いて、レトロ
ウイルスの複製に不可欠な３つの酵素活性：逆転写、ＲＮａｓｅ ＨおよびＤＮ
Ａ依存ＲＮＡポリマーを用いることにより、生体外で定温条件下、指数関数的に
目標核酸配列を複製する（増幅する）ことができる。この種の方法が行われ、前
述のように野生型から突然変異体のヌクレオチドを区別するハイブリッド形成段
階に続く。

【００９３】 医薬組成物の調製 本明細書に記載するいずれかの疾病、特にＨＩＶの感染により引き起こされる
影響に悩むヒトに対し、本明細書に詳細に記載する投与の効能または様式のいず
れかにおいて、薬剤として許容しうる担体または希釈剤の存在下に、Ｄ−Ｄ４Ｆ
Ｃまたは薬剤として許容しうるこれらの塩またはプロドラッグの効果的な量を患
者に投与することにより処置することができる。活性物質は、任意の適切なルー
ト、例えば、経口的、非経口的、経腸的、静脈内、皮内、皮下、経皮的、鼻腔内
、または局所的に、液体または固体形態で投与することができる。

【００９４】 活性化合物は、治療上効果的な量の化合物を患者に送達するために充分な量で
、薬剤として許容しうる担体または希釈剤中に含まれる。これによって、処置さ
れる患者に深刻な毒性の影響を与えることなく、生体内でウイルスの複製、特に
ＨＩＶの複製が阻害される。「阻害量」とは、阻害効果をもたらすために充分な
活性成分の量を意味し、この効果は、例えば、本明細書に記載するようなアッセ
イにより測定される。

【００９５】 上述した条件全てにおいて好ましい化合物の用量は、体重に対して１日につき
約１から７５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１から２０ｍｇ／ｋｇ、より一般的には１
日体重１キログラムにつき０．１から約１００ｍｇの範囲である。薬剤として許
容しうる誘導体の効果的な用量範囲は、送達される親ヌクレオシドの重量に基づ
いて計算することができる。誘導体がそれ自体活性を示す場合、効果的な用量は
誘導体の重量を用いて上記のように、または当業者に知られている他の方法によ
り推定することができる。

【００９６】 化合物はいかなる適切な投与形態でも投与され、単位剤形あたりの活性材料を
７から３０００ｍｇ、好ましくは７０から１４００ｍｇを含むがこれに限定され
るものではない。５０から１０００ｍｇの経口用量が通常便利である。

【００９７】 理想的には、活性成分は、活性化合物のピーク血漿濃度が約０．０２から７０
マイクロモル、好ましくは約０．５から１０ｍＭを達成するように投与されるべ
きである。これは例えば、活性成分の、所望により食塩水中の、または活性成分
のボーラスとしての０．１から２５％溶液の静脈内注射によって達成できる。

【００９８】 薬物組成物中における活性化合物の濃度は、薬物の吸収率、分配率、代謝率、
および排出率、次いで当業者に知られている他の要素に依存する。投与量の値は
また、緩和すべき状態の重篤さによっても変化することに注意されたい。さらに
、任意の特定の被験者について、特定の投与プログラムは、個人の必要に応じて
、および組成物を投与する者または投与の監督を行う者の専門家としての判断に
応じて、経時的に調節される。本明細書に記載の濃度範囲は、例示にすぎず、本
発明の組成物の範囲または使用を制限するものではない。活性成分は、一度に投
与することができるし、また、少量ずつ分けて様々な時間的間隔をおいて投与す
ることもできる。

【００９９】 活性化合物の好適な投与方法は、経口である。経口組成物は、一般的に不活性
な希釈剤または食用の担体を含む。これらはゼラチンカプセルに封入することが
でき、またはタブレット状に圧縮することもできる。経口治療投与のために、活
性化合物を賦形剤と混合して、錠剤、トローチ剤、またはカプセル剤という形態
で使用することができる。薬剤として適合する結合剤および／または補助物質が
、組成物の一部として含まれる。

【０１００】 錠剤、ピル、カプセル剤、およびトローチ剤などは、以下の成分または同様の
性質を有する化合物を任意に含むことができ、これらは、微結晶セルロース、ト
ラガカントゴム、またはゼラチンなどのバインダー；デンプンまたはラクトース
などの賦形剤、アルギン酸、プリモゲル、またはコーンスターチなどの崩壊剤；
ステアリン酸マグネシウムまたはステロテスなどの潤滑剤；コロイド状二酸化ケ
イ素などの滑剤；スクロースまたはサッカリンなどの甘味料；または、ペパーミ
ント、サリチル酸メチル、またはオレンジ香味料などの香味料である。用量単位
形態がカプセル剤である場合、カプセルは、上記の種類の物質に加えて、脂肪油
などの液体担体を含むことができる。さらに、用量単位形態は、用量単位の物理
的形態を修飾する他の様々な物質、例えば、砂糖、シェラック、または他の腸剤
のコーティングを含むことができる。

【０１０１】 化合物は、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウェハ、またはチューインガムな
どの成分として投与することができる。シロップは、活性化合物に加えて、甘味
料としてのスクロース、および特定の防腐剤、染料および着色料、次いで香味料
を含むことができる。

【０１０２】 化合物またはその薬剤として許容しうる誘導体またはその塩は、上記にさらに
詳細に記載したように、所望の作用をそこなわない他の活性物質、または、所望
の作用を補う物質、例えば抗生物質、抗真菌剤、抗炎症剤、蛋白質分解酵素抑制
剤、または他のヌクレオシドまたは非ヌクレオシド抗ウイルス剤などとも混合す
ることができる。非経口、皮内、皮下、または局所的適応のための溶液または懸
濁液は、以下の成分を含むことができ、これらは、注射用水、生理食塩水、不揮
発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、または
他の合成溶媒などの無菌希釈液；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなど
の抗菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレン
ジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩、またはリン酸塩などの
緩衝剤および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの緊張性調整剤である。
非経口調製物は、アンプル、使い捨て注射器、または、ガラスまたはプラスチッ
ク製の複数用量バイアル内に封入することができる。

【０１０３】 静脈投与される場合、好ましい担体は、生理的食塩水または食塩加リン酸緩衝
液（ＰＢＳ）である。

【０１０４】 リポソーム懸濁液（感染細胞を標的とすべく、ウイルス性抗原に対するモノク
ローナル抗体を備えたリポソームを含む）もまた、薬剤として許容しうる担体と
して好ましい。これらは、当業者に知られている方法、例えば、米国特許第４，
５２２，８１１号（参照として全体的に本明細書に組み込まれる）に記載の方法
により調製することができる。例えば、リポソーム製剤は、以下のように調製で
きる。すなわち、適切な脂質（ステアロイルホスファチジルエタノールアミン、
ステアロイルホスファチジルコリン、アラカドイルホスファチジルコリン、およ
びコレステロールなど）を無機溶媒中に溶解した後、濃縮し、容器の表面上に乾
燥した脂質の薄膜を残す。次いで活性化合物、またはそのモノリン酸エステル、
ジリン酸エステル、および／またはトリリン酸エステル誘導体の水溶液を、容器
に導入する。次いで容器を手で揺り動かして、脂質物質を容器側壁から放出させ
、次いで、脂質凝集物を分散させて、それによりリボソーム懸濁液を調製する。

【０１０５】 制御された放出製剤 制御された放出製剤について本項で述べる全ての米国特許は、これらが全体的
に参照として取り込まれる。

【０１０６】 生分解性ポリマーの分野は、ポリ乳酸の合成および生分解性がＫｕｌｋａｒｎ
ｉらにより１９６６年に報告されて以来、急速に発展してきている（「Ｐｏｌｙ
ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｆｏｒ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｉｍｐｌａｎｔｓ（手術
による移植用のポリ乳酸）」、Ａｒｃｈ．Ｓｕｒｇ．、９３巻、８３９頁）。送
達手段用のマトリクス材として有用と報告されている他のポリマーの例としては
、ポリ酸無水物、ポリグリコリドおよびポリ乳酸−ポリグリコリド共重合体など
のポリエステル、ポリリジンなどのポリアミノ酸、ポリエチレンオキシド、アク
リル酸末端ポリエチレンオキシド、ポリアミド、ポリウレタン、ポリオルソエス
テル、ポリアクリロニトリルおよびポリホスファゼンなどのポリマーおよびコポ
リマーを含む。例えば、Ｌａｎｇｅｒへの米国特許第４，８９１，２２５号およ
び第４，９０６，４７４号（ポリ酸無水物）、Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎへの第４，
７６７，６２８号（ポリ乳酸、ポリ乳酸−ポリグリコリド酸共重合体）、および
Ｔｉｃｅらへの第４，５３０，８４０号（ポリ乳酸、ポリグリコリドおよび共重
合体）を参照のこと。また、組織に接触する物質および制御された放出担体とし
ての光重合性生分解性ヒドロゲル（生分解性単量体のまたはオリゴマーの伸長を
有する親水性オリゴマーを含む重合したまたは架橋したマクロマーのヒドロゲル
であり、重合および架橋することができるモノマーまたはオリゴマーが末端キャ
ップされたヒドロゲル）を記載するＨｕｂｂｅｌｌらへの米国特許第５，６２６
，８６３号、および薬剤送達のための制御された放出剤および組織処置剤として
用いられるマルチブロック生分解性ヒドロゲルを指示しているＦｏｃａｌ，Ｉｎ
ｃ．により出願されたＰＣＴ国際出願特許第９７／０５１８５号も参照のこと。

【０１０７】 例えば架橋ゼラチンなどの生物由来の分解性物質がよく知られている。ヒアル
ロン酸は架橋され、かつ生物医学用の分解性膨潤ポリマーとして使用されてきて
いる（Ｄｅｌｌａ Ｖａｌｌｅらへの米国特許第４，９５７，７４４号、「Ｓｕ
ｒｆａｃｅ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ ｂｉｏｍ
ａｔｅｒｉａｌｓ ｆｏｒ ｒｅｄｕｃｅｄ ｔｈｒｏｍｂｏｇｅｎｉｃｉｔｙ
（血栓形成性を減少させるためのポリマー性生体材料の表面修飾）」、Ｐｏｌｙ
ｍ．Ｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｅｎｇ．、６２巻、７３１〜７３５頁、１９９１年）
。

【０１０８】 多くの分散システムが基質、特に生体活性化合物の担体として現在用いられて
いるかまたは用いられようとしている。薬剤および化粧品製剤に用いられる分散
システムは、懸濁液または乳濁液の何れかとして分類することができる。懸濁液
は、懸濁剤を用いて液体媒体中に懸濁させた、数ナノメートルから数百ミクロン
の範囲の径の固体粒子として定義される。固体粒子は、ミクロスフェア、マイク
ロカプセルおよびナノスフェアを含む。乳濁液は、界面活性剤および脂質などの
乳化剤の界面膜により安定化された、１つの液体の他の液体中の分散として定義
される。乳濁液製剤は、油中水型および水中油型乳濁液、多重乳濁液、マイクロ
エマルジョン、ミクロ液滴（microdroplet）、およびリポソームを含む。ミクロ
液滴は、Ｈａｙｎｅｓに発行された米国特許第４，６２２，２１９号および第４
，７２５，４４２号に定義されているように、内部にオイル相を有する球状脂質
層から成る単層のリン脂質ベシクルである。リポソームは、水不溶性の極性脂質
と水溶液とを混合することにより調製されるリン脂質ベシクルである。水中に不
溶性の脂質を混合することにより引き起こされる不利なエントロピーのために、
水溶液が内部に閉じこめられたリン脂質の薄膜閉鎖球から成る高度に整列した集
合体が生成する。

【０１０９】 Ｄｕｎｎらへの米国特許第４，９３８，７６３号には、非反応性で水不溶性の
熱可塑性ポリマーを生体適合性水溶性溶媒中に溶解させることにより体内に液体
が配置されている液体を形成し、そして溶媒に分散させて固体のインプラントを
形成させるという、ｉｎ ｓｉｔｕでインプラントを形成する方法が開示されて
いる。ポリマー溶液は注射により体内に導入することができるインプラントはそ
の周囲が空洞の形状であると仮定することができる。代わりの実施形態において
、インプラントは、溶媒を含まず、かつ固体を形成するために適切な位置に通常
硬化触媒を添加して硬化された、反応性の液体オリゴマー性ポリマーから形成さ
れる。

【０１１０】 多くの特許が、Ｄ−Ｄ４ＦＣまたはヌクレオチドまたは他の定義されたこれら
のプロドラッグを投与するために用いることができる薬剤送達システムを開示し
ている。米国特許第５，７４９，８４７号には、電気泳動法により有機体中にヌ
クレオチドを送達する方法が開示されている。米国特許第５，７１８，９２１号
には、ポリマーおよびこの中に分散させた薬剤を含むミクロスフェアが開示され
ている。米国特許第５，６２９，００９号には、生体活性因子を制御して放出さ
せるための送達システムが開示されている。米国特許第５，５７８，３２５号に
は、非線形親水性疎水性多重ブロック共重合体のナノ粒子およびミクロ粒子が開
示されている。米国特許第５，５４５，４０９号には、生体活性因子を制御して
放出させるための送達システムが開示されている。米国特許第５，４９４，６８
２号には、イオン架橋したポリマーマイクロカプセルが開示されている。

【０１１１】 Ａｎｄｒｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．への米国特許第５，
７２８，４０２号には、ヒドロゲル形成剤と混合して、活性薬剤、その塩または
プロドラッグを含む内部相、および胃中での溶解を防ぐコーティングを含む外部
相を含む、制御された放出製剤が開示されている。Ａｎｄｒｘ Ｐｈａｒｍａｃ
ｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．への米国特許第５，７３６，１５９号および第５，
５５８，８７９号には、通路が生体内に形成されるように、ほとんど水溶性のな
い薬剤のための制御された放出製剤が開示されている。Ａｎｄｒｘ Ｐｈａｒｍ
ａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．への米国特許第５，５６７，４４１号には、１
日１度に制御された放出製剤が開示されている。米国特許第５，５０８，０４０
号には、多微粒子拍動性薬剤送達システムが開示されている。米国特許第５，４
７２，７０８号には、拍動性粒子を基盤とする薬剤送達システムが開示されてい
る。米国特許第５，４５８，８８８号には、重量平均分子量が３，０００から１
０，０００であるポリエチレングリコールポリマーを含む外部相および内部に薬
剤を含む相を有するブレンドを用いることができる制御された放出錠剤製剤が開
示されている。米国特許第５，４１９，９１７号には、ヒドロゲルからの薬剤の
放出速度を修飾する方法が開示されており、これはヒドロゲルからの薬剤の放出
速度を実質的に０次にすることができるように、薬剤として許容しうるイオン性
化合物を効果的な量使用することに基づくものである。米国特許第５，４５８，
８８８号には、制御された放出錠剤製剤が開示されている。

【０１１２】 Ｅｌａｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ｐｌｃへの米国特許第５，６４１，７４
５号には、ミクロスフェアまたはナノスフェアを形成するように生分解性ポリマ
ー中に活性薬剤を含む、制御された放出医薬製剤が開示されている。生分解性ポ
リマーは、適切にはポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチドまたはポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチドおよ
びポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチド−グリコリド共重合体とのブレンドである。Ｅｌａｎ
Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ｐｌｃへの米国特許第５，６１６，３４５号には、
有機酸と関連する活性化合物、および核を取り囲み次いで多量の薬剤として許容
しうる膜形成水不溶性合成ポリマーと少量の薬剤として許容しうる膜形成水溶性
合成ポリマーとを含む多層膜を含有する、１日１回の投与用として制御された吸
収製剤が記載されている。米国特許第５，６４１，５１５号には、生分解性ナノ
粒子に基づく制御された放出製剤が開示されている。米国特許第５，６３７，３
２０号には、１日１回の投与用として制御された吸収製剤が記載されている。米
国特許第５，５８０，５８０号および第５，５４０，９３８号には、神経性疾病
の処置のための製剤およびこれらの使用が示されている。米国特許第５，５３３
，９９５号には、制御された薬剤送達による受動性の経皮的方法が示されている
。米国特許第５，５０５，９６２号には、制御された放出薬剤製剤が記載されて
いる。

【０１１３】 プロドラッグ製剤 Ｄ−Ｄ４ＦＣまたはこれに関連する化合物と組み合わせてまたはこの代わりと
して治療に使用するために本明細書に記載したいずれのヌクレオシドもまたは他
の化合物をまたはＤ−Ｄ４ＦＣを、以下に詳細に記載するように、アシル化プロ
ドラッグまたはヌクレオチドプロドラッグとして投与することができる。

【０１１４】 本明細書に記載したいずれのヌクレオシドをもまたはヒドロキシル基またはア
ミン基を含む他の化合物を、活性、生物学的利用率、安定性または他にはヌクレ
オシドの性質の変化を増加させるためのヌクレオチドプロドラッグとして投与す
ることができる。多くのヌクレオチドプロドラッグリガンドが知られている。通
常、化合物のヒドロキシル基をまたはヌクレオシドのモノ、ジまたはトリリン酸
塩をアルキル化、アシル化または他のリン脂質修飾すると、ヌクレオチドの安定
性が増加する。リン酸部位またはヒドロキシル上の１つまたは複数の水素を置換
することができる置換基の例は、アルキル、アリール、ステロイド、糖を含む炭
水化物、１，２−ジアシルグリセロールおよびアルコールである。多くは、Ｒ．
ＪｏｎｅｓおよびＮ．ＢｉｓｃｈｏｆｂｅｒｇｅｒのＡｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅ
ｓｅａｒｃｈ、２７巻、１〜１７頁、１９９５年に記載されている。これらのい
ずれもが、所望する効果を達成するために記載したヌクレオシドまたは他の化合
物と組み合わせて用いることができる。

【０１１５】 活性ヌクレオシドまたは他のヒドロキシル含有化合物もエーテル脂質（および
特にヌクレオシドの５’位−エーテル脂質）として提供することができ、これら
は以下の参考文献に記載されており、これらは参照として本発明に組み込まれる
。Ｌ．Ｓ．Ｋｕｃｅｒａ、Ｎ．Ｉｙｅｒ、Ｅ．Ｌｅａｋｅ、Ａ．Ｒａｂｅｎ、Ｅ
．Ｋ．Ｍｏｄｅｓｔ、Ｄ．Ｌ．Ｗ．およびＣ．Ｐｉａｎｔａｄｏｓｉらの「Ｎｏ
ｖｅｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ−ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ ｅｔｈｅｒ ｌｉｐｉｄ
ａｎａｌｏｇｓ ｔｈａｔ ｉｎｈｉｂｉｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ＨＩＶ
−１ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅ ｄｅｆｅｃｔｉｖｅ ｖ
ｉｒｕｓ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ（感染性のＨＩＶ−１の産生を阻害し、欠陥のあ
るウイルスを生成させる新規な膜−相互作用性エーテル脂質類縁体）」、ＡＩＤ
Ｓ Ｒｅｓ．Ｈｕｍ．Ｒｅｔｒｏ Ｖｉｒｕｓｅｓ．、６巻、４９１〜５０１頁
、１９９０年；Ｃ．Ｊ．Ｐｉａｎｔａｄｏｓｉ、Ｃ．Ｊ．Ｍａｒａｓｃｏ、Ｓ．
Ｌ．Ｍｏｒｒｉｓ−Ｎａｔｓｃｈｋｅ、Ｋ．Ｌ．Ｍｅｙｅｒ、Ｆ．Ｇｕｍｕｓ、
Ｊ．Ｒ．Ｓｕｒｌｅｓ、Ｋ．Ｓ．Ｉｓｈａｑ、Ｌ．Ｓ．Ｋｕｃｅｒａ、Ｎ．Ｉｙ
ｅｒ、Ｃ．Ａ．Ｗａｌｌｅｎ、Ｓ．ＰｉａｎｔａｄｏｓｉおよびＥ．Ｊ．Ｍｏｄ
ｅｓｔ「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｖｅ
ｌ ｅｔｈｅｒ ｌｉｐｉｄ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ
ｆｏｒ ａｎｔｉ−ＨＩＶ ａｃｔｉｖｉｔｙ（抗−ＨＩＶ活性に関する新規な
エーテル脂質ヌクレオシド複合体の合成および評価）」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ
．３４巻、１４０８〜１４１４頁、１９９１年；Ｋ．Ｙ．Ｈｏｓｔｅｌｌｅｒ、
Ｄ．Ｄ．Ｒｉｃｈｍａｎ、Ｄ．Ａ．Ｃａｒｓｏｎ、Ｌ．Ｍ．Ｓｔｕｈｍｉｌｌｅ
ｒ、Ｇ．Ｍ．Ｔ．ｖａｎ ＷｉｊｋおよびＨ．ｖａｎ ｄｅｎ Ｂｏｓｃｈの「
Ｇｒｅａｔｌｙ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ
ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １ ｒｅｐｌｉ
ｃａｔｉｏｎ ｉｎ ＣＥＭ ａｎｄ ＨＴ４−６Ｃ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ３，
−ｄｅｏｘｙｔｈｙｍｉｄｉｎｅ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｉｍｙｒｉｓｔ
ｏｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ，ａ ｌｉｐｉｄ ｐｒｏｄｒｕｇ ｏｆ ３’−ｄｅ
ｏｘｙｔｈｙｍｉｄｉｎｅ（３，−デオキシチミジンの脂質プロドラッグである
３’−デオキシチミジンジホスフェートジミリストイルグリセロールによる、Ｃ
ＥＭ細胞およびＨＴ４−６Ｃ細胞におけるヒト免疫不全Ｉ型ウイルス複製の強力
に高められた阻害）」、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈ
ｅｒ．、３６巻、２０２５〜２０２９頁、１９９２年；Ｋ．Ｙ．Ｈｏｓｔｅｔｌ
ｅｒ、Ｌ．Ｍ．Ｓｔｕｈｍｉｌｌｅｒ、Ｈ．Ｂ．Ｌｅｎｔｉｎｇ、Ｈ．ｖａｎ
ｄｅｎ ＢｏｓｃｈおよびＤ．Ｄ．Ｒｉｃｈｍａｎの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａ
ｎｄ ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈ
ｏｌｉｐｉｄ ａｎａｌｏｇｓ ｏｆ ａｚｉｄｏｔｈｙｍｉｄｉｎｅ ａｎｄ
ｏｔｈｅｒ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ（アジドチミジン
および他の抗ウイルス性ヌクレオシドのリン脂質類縁体の合成および抗レトロウ
イルス活性）」、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６５巻、６１１２７頁、１９９
０年。

【０１１６】 ヌクレオシドまたは他のヒドロキシルまたはアミン含有化合物に、好ましくは
ヌクレオシドまたは親油性調製の５’−ＯＨ位で、共有結合的に取り込まれる適
切な親油性置換体を開示している米国特許の非限定的な例としては、米国特許第
５，１４９，７９４号（１９９２年９月２２日、Ｙａｔｖｉｎら）；第５，１９
４，６５４号（１９９３年３月１６日、Ｈｏｓｔｅｔｌｅｒら）、第５，２２３
，２６３号（１９９３年６月２９日、Ｈｏｓｔｅｔｌｅｒら）；第５，２５６，
６４１号（１９９３年１０月２６日、Ｙａｔｖｉｎら）；第５，４１１，９４７
号（１９９５年５月２日、Ｈｏｓｔｅｔｌｅｒら）；第５，４６３，０９２号（
１９９５年１０月３１日、Ｈｏｓｔｅｔｌｅｒら）；第５，５４３，３８９号（
１９９６年８月６日、Ｙａｔｖｉｎら）；第５，５４３，３９０号（１９９６年
８月６日、Ｙａｔｖｉｎら）；第５，５４３，３９１号（１９９６年８月６日、
Ｙａｔｖｉｎら）；および第５，５５４，７２８号（１９９６年９月１０日、Ｂ
ａｓａｖａら）を含み、これら全ては参照として本発明に組み込まれる。本発明
のヌクレオシドに結合できる親油性置換基、または親油性調製を開示する外国特
許出願としては、国際特許出願第８９／０２７３３号、国際特許出願第９０／０
０５５５号、国際特許出願第９１／１６９２０号、国際特許出願第９１／１８９
１４号、国際特許出願第９３／００９１０号、国際特許出願第９４／２６２７３
号、国際特許出願第９６／１５１３２号、欧州特許出願第０３５０２８７号、欧
州特許出願第９３９１７０５４．４号および国際特許出願第９１／１９７２１号
を含む。

【０１１７】 ヌクレオチドプロドラッグの非限定的な例が、以下の参考文献に記載されてい
る。Ｄ．Ｈ．Ｗ．Ｈｏの「Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｋｉｎａｓｅ ａ
ｎｄ ｄｅａｍｉｎａｓｅ ｏｆ １β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙ
ｌｃｙｔｏｓｉｎｅ ｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｍａｎ ａｎｄ ｍｕｓｅ
（人間およびマウスの組織中における１β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンの
キナーゼおよびデアミナーゼの分布）」、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、３３巻、２
８１６〜２８２０頁、１９７３年；Ａ．Ｈｏｌｙの「Ｉｓｏｐｏｌａｒ ｐｈｏ
ｓｐｈｏｒｏｕｓ−ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ａｎａｌｏｇｕ
ｅｓ（等極性リン修飾ヌクレオチド同類体）」、Ｄｅ Ｃｌｅｒｃｑ編「Ａｄｖ
ａｎｃｅｓ ｉｎ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ」、ＪＡＩ
Ｐｒｅｓｓ刊、１巻、１７９〜２３１頁、１９９３年；Ｃ．Ｉ．Ｈｏｎｇ、Ａ．
Ｎｅｃｈａｅｖ、およびＣ．Ｒ．Ｗｅｓｔの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ａ
ｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ １β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏ−ｆｕ
ｒａｎｏｓｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｏｆ ｃｏｒｔｉｓ
ｏｌ ａｎｄ ｃｏｒｔｉｓｏｎｅ（コルチゾールおよびコルチゾンの１β−Ｄ
−アラビノ−フラノシルシトシン複合体の合成および抗腫瘍活性）」、Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、８８巻、１２２３〜１２２９
頁、１９７９年ａ；Ｃ．Ｉ．Ｈｏｎｇ、Ａ．Ｎｅｃｈａｅｖ、Ａ．Ｊ．Ｋｉｒｉ
ｓｉｔｓ、Ｄ．Ｊ．Ｂｕｃｈｈｅｉｔ、およびＣ．Ｒ．Ｗｅｓｔの「Ｎｕｃｌｅ
ｏｓｉｄｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｔｉｔｕ
ｍｏｒ ａｇｅｎｔ．３．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ
ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ １−（β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）
ｃｙｔｏｓｉｎｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｏｆ ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉ
ｄｓ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ ａｌｃｏｈｏｌｓ（
抗腫瘍剤として可能性のあるヌクレオシド複合体。３．コルチコステロイドおよ
び選択された親油性アルコールの１−（β−Ｄ−アラビノフラノシル）シトシン
複合体の合成および抗腫瘍活性）」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２８巻、１７１
〜１７７頁、１９８０年；Ｋ．Ｙ．Ｈｏｓｔｅｌｌｅｒ、Ｌ．Ｍ．Ｓｔｕｈｍｉ
ｌｌｅｒ、Ｈ．Ｂ．Ｍ．Ｌｅｎｔｉｎｇ、Ｈ．ｖａｎ ｄｅｎ Ｂｏｓｃｈ、お
よびＲｉｃｈｍａｎのＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ、２６５巻、６１１２〜６１１７
頁、１９８０年；Ｋ．Ｙ．Ｈｏｓｔｅｌｌｅｒ、Ｄ．Ａ．Ｃａｒｓｏｎ、および
Ｄ．Ｄ．Ｒｉｃｈｍａｎの「Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌａｚｉｄｏｔｈｙｍｉｄ
ｉｎｅ：ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ａｃｔｉ
ｏｎ ｉｎ ＣＥＭ ｃｅｌｌｓ（ホスファチジルアジドチミジン：ＣＥＭ細胞
中の抗レトロウイルス作用の機構）」、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６６巻、
１１７１４〜１１７１７頁、１９９１年；Ｋ．Ｙ．Ｈｏｓｔｅｌｌｅｒ、Ｂ．Ｋ
ｏｒｂａ、Ｃ．Ｓｒｉｄｈａｒ、Ｍ．Ｇａｒｄｅｎｅｒの、「Ａｎｔｉｖｉｒａ
ｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ−ｄｉｄｅｏｘｙｃｙ
ｔｉｄｉｎｅ ｉｎ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ
ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｈｅｐａｔｉｃ ｕｐｔａｋｅ ｉｎ ｍｉｃｅ
（Ｂ型肝炎感染細胞中のホスファチジル−ジデオキシシチジンの抗ウイルス活性
およびマウスへの高肝臓摂取）」、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．、２４巻、５
９〜６７頁、１９９４年ａ；Ｋ．Ｙ．Ｈｏｓｔｅｌｌｅｒ、Ｄ．Ｄ．Ｒｉｃｈｍ
ａｎ、Ｃ．Ｎ．Ｓｒｉｄｈａｒ、Ｐ．Ｌ．Ｆｅｌｇｎｅｒ、Ｊ．Ｆｅｌｇｎｅｒ
、Ｊ．Ｒｉｃｃｉ、Ｍ．Ｆ．Ｇａｒｄｅｎｅｒ、Ｄ．Ｗ．Ｓｅｌｌｅｓｅｔｈ、
およびＭ．Ｎ．Ｅｌｌｉｓの「Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌａｚｉｄｏｔｈｙｍｉ
ｄｉｎｅ ａｎｄ ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙ−ｄｄＣ：Ａｓｓｅｓｍｅｎｔ ｏ
ｆ ｕｐｔａｋｅ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅｓ ａ
ｎｄ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｉｍ
ｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ
ａｎｄ ｉｎ ｒａｕｓｃｈｅｒ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｖｉｒｕｓ−ｉｎｆｅｃ
ｔｅｄ ｍｉｃｅ（ホスファチジルアジドチミジンおよびホスファチジル−ｄｄ
Ｃ：マウスのリンパ系組織中への摂取、およびヒト免疫不全ウイルス−感染細胞
中およびラウチャー白血病ウイルス−感染マウス中の抗ウイルス活性の評価）」
、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、３８巻、
２７９２〜２７９７頁、１９９４ｂ年、Ｒ．Ｎ．Ｈｕｎｓｔｏｎ、Ａ．Ａ．Ｊｏ
ｎｅｓ、Ｃ．ＭｃＧｕｉｇａｎ、Ｒ．Ｔ．Ｗａｌｋｅｒ、Ｊ．Ｂａｌｚａｒｉｎ
ｉ、およびＥ．ＤｅＣｌｅｒｃｑの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｂｉｏｌｏ
ｇｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｓｏｍｅ ｃｙｃｌｉｃ ｐｈｏｓ
ｐｈｏｔｒｉｅｓｔｅｒｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ２’−ｄｅｏｘｙ−５
−ｆｌｕｏｒｏｕｒｉｄｉｎｅ（２’−デオキシ−５−フルオロウリジンから誘
導される多くの環状リン酸トリエステルの合成および生物学的性質）」、Ｊ．Ｍ
ｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２７巻、４４０〜４４４頁、１９８４年；Ｙ．Ｈ．Ｊｉ、Ｃ
．Ｍｏｏｇ、Ｇ．Ｓｃｈｍｉｔｔ、Ｐ．Ｂｉｓｃｈｏｆｆ、およびＢ．Ｌｕｕの
「Ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ ｅｓｔｅｒｓ ｏｆ ７−β−ｈ
ｙｄｒｏｘｙｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ａｎｄ ｏｆ ｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ
ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ａｓ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｇ
ｅｎｔｓ：ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｅｖａｌｕ
ａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ（抗腫瘍剤としての
可能性がある７−β−ヒドロキシコレステロールのおよびピリミジンヌクレオシ
ドのモノリン酸エステル：抗腫瘍活性の合成および予備的評価）」、Ｊ．Ｍｅｄ
．Ｃｈｅｍ．、３３巻、２２６４〜２２７０頁、１９９０年；Ａ．Ｓ．Ｊｏｎｅ
ｓ、Ｃ．ＭｃＧｕｉｇａｎ、Ｒ．Ｔ．Ｗａｌｋｅｒ、Ｊ．Ｂａｌｚａｒｉｎｉ、
およびＥ．ＤｅＣｌｅｒｃｑの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，
ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｏｍｅ ｎｕｃｌ
ｅｏｓｉｄｅ ｃｙｃｌｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄａｔｅｓ（多くのヌク
レオシド環状ホスホルアミデートの合成、性質および生物活性）」、Ｊ．Ｃｈｅ
ｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ．Ｉ、１４７１〜１４７４頁、１９８４
年；Ｂ．Ａ．Ｊｕｏｄｋａ、および、Ｊ．Ｓｍａｒｔの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ
ｏｆ ｄｉｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｐｈｏｓｐｈ（Ｐ→Ｎ）ａｍｉｎｏ
ａｃｉｄ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ（ジリボヌクレオシドホスホ（Ｐ→Ｎ）ア
ミノ酸誘導体の合成）」、Ｃｏｌｌ．Ｃｚｅｃｈ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．、３９
巻、３６３〜９６８頁、１９７４年；Ｓ．Ｋａｔａｏｋａ、Ｊ．Ｉｍａｉ、Ｎ．
Ｙａｍａｊｉ、Ｍ．Ｋａｔｏ、Ｍ．Ｓａｉｔｏ、Ｔ．Ｋａｗａｄａ、およびＳ．
Ｉｍａｉの「Ａｌｋｙｌａｔｅｄ ｃＡＭＰ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ；ｓｅｌ
ｅｃｔｉｖｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉ
ｖｉｔｉｅｓ（アルキル化ｃＡＭＰ誘導体：選択的合成および生物活性）」、Ｎ
ｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．Ｓｙｍ．Ｓｅｒ．、２１巻、１〜２頁、１
９８９年；Ｓ．Ｋａｔａｏｋａ、Ｕｃｈｉｄａの「（ｃＡＭＰ）ｂｅｎｚｙｌ
ａｎｄ ｍｅｔｈｙｌ ｔｒｉｅｓｔｅｒｓ（（ｃＡＭＰ）ベンジルおよびメチ
ルトリエステル）」、Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ、３２巻、１３５１〜１３５６
頁；Ｄ．Ｋｉｎｃｈｉｎｇｔｏｎ、Ｊ．Ｊ．Ｈａｒｖｅｙ、Ｔ．Ｊ．Ｏ’Ｃｏｎ
ｎｏｒ、Ｂ．Ｃ．Ｎ．Ｍ．Ｊｏｎｅｓ、Ｋ．Ｇ．Ｄｅｖｉｎｅ、Ｄ．Ｔａｙｌｏ
ｒ−Ｒｏｂｉｎｓｏｎ、Ｄ．Ｊ．Ｊｅｆｆｒｉｅｓ、およびＣ．ＭｃＧｕｉｇａ
ｎの「Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏ
ｆ ｚｉｄｏｖｕｄｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄａｔｅ ａｎｄ ｐｈｏ
ｓｐｈｏｒｏｄｉａｍｉｄａｔｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ａｇａｉｎｓｔ
ＨＩＶ ａｎｄ ＵＬＶ ｉｎ ｖｉｔｒｏ（インビトロでのＨＩＶおよびＵＬ
Ｖに対するジドブジンホスホルアミデートおよびホスホロジアミデート誘導体の
抗ウイルス効果の比較）」、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅ
ｒ．、３巻、１０７〜１１２頁、１９９２年；Ｋ．Ｋｏｄａｍａ、Ｍ．Ｍｏｒｏ
ｚｕｍｉ、Ｋ．Ｉ．Ｓａｉｔｈｏｈ、Ｈ．Ｋｕｎｉｎａｋａ、Ｈ．Ｙｏｓｉｎｏ
およびＭ．Ｓａｎｅｙｏｓｈｉの「Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａ
ｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ １−β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａ
ｎｏｓｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ−５’−ｓｔｅａｒｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｅ；ａｎ
ｏｒａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｏｆ １−β−Ｄ−ａ
ｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ（１−β−Ｄ−アラビノフラ
ノシルシトシン−５’−ステアリルホスフェートの抗腫瘍活性および薬理学：１
−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンの経口活性誘導体）」、Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、８０巻、６７９〜６８５頁、１９８９年；Ｍ．Ｋｏｒｔ
ｙおよびＪ．Ｅｎｇｅｌｓの「Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｄｅｎｏｓｉ
ｎｅ− ａｎｄ ｇｕａｎｏｓｉｎｅ ３’，５’ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｎ
ｄ ａｃｉｄ ｂｅｎｚｙｌ ｅｓｔｅｒｓ ｏｎ ｇｕｉｎｅａ−ｐｉｇ ｖ
ｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ（ギニアピッグ心室心筋へのアデ
ノシン−およびグアノシン−３’，５’−リン酸ベンジルエステルの効果）」、
Ｎａｕｎｙｎ−Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇ’ｓ Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ
．、３１０巻、１０３〜１１１頁、１９７９年；Ａ．Ｋｕｍａｒ、Ｐ．Ｌ．Ｇｏ
ｅ、Ａ．Ｓ．Ｊｏｎｅｓ、Ｒ．Ｔ．Ｗａｌｋｅｒ、Ｊ．Ｂａｌｚａｒｉｎｉおよ
びＥ．ＤｅＣｌｅｒｃｑの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａ
ｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｍｅ ｃｙｃｌｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｒ
ａｍｉｄａｔｅ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ（多くの環状
ホスホロアミデートヌクレオシド誘導体の合成および生物学的評価）」、Ｊ．Ｍ
ｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３３巻、２３６８〜２３７５頁、１９９０年；Ｃ．ＬｅＢｅ
ｃおよびＴ．Ｈｕｙｎｈ−Ｄｉｎｈの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｏｐ
ｈｉｌｉｃ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｔｒｉｅｓｔｅｒ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ
ｏｆ ５−ｆｌｕｏｒｏｕｒｉｄｉｎｅ ａｎ ａｒａｂｉｎｏｃｙｔｉｄｉ
ｎｅ ａｓ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｐｒｏｄｒｕｇｓ（抗癌プロドラッグとし
ての５−フルオロウリジンおよびアラビノシチジンの親油性リン酸トリエステル
誘導体の合成）」、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．、３２巻、６５５３〜
６５５６頁、１９９１年；Ｊ．Ｌｉｃｈｔｅｎｓｔｅｉｎ、Ｈ．Ｄ．Ｂａｒｎｅ
ｒおよびＳ．Ｓ．Ｃｏｈｅｎの「Ｔｈｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｏｆ ｅｘｏ
ｇｅｎｏｕｓｌｙ ｓｕｐｐｌｉｅｄ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ｂｙ Ｅｓｃ
ｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ．（大腸菌により外因的に供給されたヌクレオチド
の代謝）」、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２３５巻、４５７〜４６５頁、１９６
０年；Ｊ．Ｌｕｃｔｈｙ、Ａ．Ｖｏｎ Ｄａｅｎｉｋｅｎ、Ｊ．Ｆｒｉｅｄｅｒ
ｉｃｈ、Ｂ．Ｍａｎｔｈｅｙ、Ｊ．Ｚｗｅｉｆｅｌ、Ｃ．Ｓｃｈｌａｔｔｅｒお
よびＭ．Ｈ．Ｂｅｎｎの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉ
ｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｎａｔｕｒａｌｌｙ ｏｃ
ｃｕｒｒｉｎｇ ｃｙａｎｏｅｐｉｔｈｉｏａｌｋａｎｅｓ（３種の天然由来の
シアノエピチオアルカンの合成および毒性）」、Ｍｉｔｔ．Ｇｅｇ．Ｌｅｂｅｎ
ｓｍｉｔｔｅｌｕｎｔｅｒｓ．Ｈｙｇ．、７２巻、１３１〜１３３頁、１９８１
年、（Ｃｈｅｍ．Ａｂｓｔｒ、９５巻、１２７０９３）；Ｃ．ＭｃＧｕｉｇａｎ
、Ｓ．Ｍ．ＴｏｌｌｅｒｆｉｅｌｄおよびＰ．ａ．Ｒｉｌｅｙの「Ｓｙｎｔｈｅ
ｓｉｓ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｍ
ｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｔｒｉｅｓｔｅｒ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ
ｔｈｅ ａｎｔｉ−ｖｉｒａｌ ｄｒｕｇ Ａｒａ（抗ウイルス剤Ａｒａのいく
つかのホスフェートトリエステル誘導体の合成および生物学的評価）」Ｎｕｃｌ
ｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ、１７巻、６０６５〜６０７５頁、１９８９年；Ｃ
．ＭｃＧｕｉｇａｎ、Ｋ．Ｇ．Ｄｅｖｉｎｅ、Ｔ．Ｊ．Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ、Ｓ．
Ａ．Ｇａｌｐｉｎ、Ｄ．Ｊ．ＪｅｆｆｒｉｅｓおよびＤ．Ｋｉｎｃｈｉｎｇｔｏ
ｎの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｍｅ
ｎｏｖｅｌ ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄａｔｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ
３’−ａｚｉｄｏ−３’−ｄｅｏｘｙｔｈｙｍｉｄｉｎｅ（ＡＺＴ）ａｓ ａ
ｎｔｉ−ＨＩＶ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（抗−ＨＩＶ化合物としての３’−アジド
−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）のいくつかの新規なホスホルアミデート誘
導体の合成および評価）」、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅ
ｒ．、１巻、１０７〜１１３頁、１９９０年ａ；Ｃ．ＭｃＧｕｉｇａｎ、Ｔ．Ｊ
．Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ、Ｓ．Ｒ．Ｎｉｃｈｏｌｌｓ、Ｃ．ＮｉｃｋｓｏｎおよびＤ
．Ｋｉｎｃｈｉｎｇｔｏｎの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ａｎｔｉ−ＨＩＶ
ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｏｍｅ ｎｏｖｅｌ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ
ｄｉａｌｋｙｌ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ ＡＺＴ
ａｎｄ ｄｄＣｙｄ（ＡＺＴおよびｄｄＣｙｄのいくつかの新規な置換ジアル
キルホスフェート誘導体の合成および抗−ＨＩＶ活性）」、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ
Ｃｈｅｍ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、１巻、３５５〜３６０頁、１９９０年ｂ；
Ｃ．ＭｃＧｕｉｇａｎ、Ｓ．Ｒ．Ｎｉｃｈｏｌｌｓ、Ｔ．Ｊ．Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ
およびＤ．Ｋｉｎｃｈｉｎｇｔｏｎの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｓｏｍｅ
ｎｏｖｅｌ ｄｉａｌｋｙｌ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｏ
ｆ ３’−ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔｉ
ａｌ ａｎｔｉ−ＡＩＤＳ ｄｒｕｇｓ（潜在的な抗ＡＩＤＳ薬としての３’位
−修飾ヌクレオシドのいくつかの新規なジアルキルホスフェート誘導体の合成）
」、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、１巻、２５〜３３
頁、１９９０年ｃ；Ｃ．ＭｃＧｕｉｇａｎ、Ｋ．Ｇ．Ｄｅｖｉｎｅ、Ｔ．Ｊ．Ｏ
’Ｃｏｎｎｏｒ、およびＤ．Ｋｉｎｃｈｉｎｇｔｏｎの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ
ａｎｄ ａｎｔｉ−ＨＩＶ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｏｍｅ ｈａｌｏａｌ
ｋｙｌ ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄａｔｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ ３
’−ａｚｉｄｏ−３’ｄｅｏｘｙｔｈｙｌｍｉｄｉｎｅ（ＡＺＴ）；ｐｏｔｅｎ
ｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌ ｍｅｔ
ｈｏｘｙａｌａｎｉｎｙｌ ｃｏｍｐｏｕｎｄ（３’−アジド−３’デオキシチ
ミジン（ＡＺＴ）のいくつかのハロアルキルホスホルアミデート誘導体の合成お
よび抗−ＨＩＶ活性；トリクロロエチルメトキシアラニニル化合物の強力な活性
）」、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．１５巻、２５５〜２６３頁、１９９１年；
Ｃ．ＭｃＧｕｉｇａｎ、Ｒ．Ｎ．Ｐａｔｈｉｒａｎａ、Ｊ．Ｂａｌｚａｒｉｎｉ
およびＥ．ＤｅＣｌｅｒｃｑの「Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｅｌｉｖｅｒ
ｙ ｏｆ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ＡＺＴ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ｂｙ ａｒ
ｙｌ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ ＡＺＴ（ＡＺＴの
アリールホスフェート誘導体による生物活性ＡＺＴヌクレオチドの細胞内送達）
」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３６巻、１０４８〜１０５２頁、１９９３年ｂ。

【０１１８】 抗−ＨＩＶ剤であるＡＺＴのアルキル水素ホスフェート誘導体は、親のヌクレ
オシド類縁体よりも毒性が低い。Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍ．Ｃｈｅｍｏｔ
ｈｅｒ．、５巻、２７１〜２７７頁；Ｒ．Ｂ．Ｍｅｙｅｒ、Ｄ．Ａ．Ｓｈｕｍａ
ｎおよびＲ．Ｋ．Ｒｏｂｉｎｓの、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｐｕｒｉｎｅ
ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ３’，５’−ｃｙｃｌｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉ
ｄａｔｅｓ（プリンヌクレオシド３’，５’−環状ホスホルアミデートの合成）
」、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．、２６９〜２７２頁、１９７３年；Ｊ
．Ｎａｇｙｖａｒｙ、Ｒ．Ｎ．Ｇｏｈｉｌ、Ｃ．Ｒ．ＫｉｒｃｈｎｅｒおよびＪ
．Ｄ．Ｓｔｅｖｅｎｓの「Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｎｅｕｔｒａｌ ｅｓｔｅｒ
ｓ ｏｆ ｃｙｃｌｉｃ ＡＭＰ（環状ＡＭＰの中性エステルに関する研究）」
、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、５５巻、１０７
２〜１０７７頁、１９７３年；Ａ．Ｎａｍａｎｅ、Ｃ．Ｇｏｕｙｅｔｔｅ、Ｍ．
Ｐ．Ｆｉｌｌｉｏｎ、Ｇ．ＦｉｌｌｉｏｎおよびＴ．Ｈｕｙｎｈ−Ｄｉｎｈの「
Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｂｒａｉｎ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ＡＺＴ ｕｓｉｎｇ
ａ ｇｌｙｃｏｓｙｌ ｐｈｏｓｐｈｏｔｒｉｅｓｔｅｒ ｐｒｏｄｒｕｇ（
グリコシルホスホトリエステルプロドラッグを用いる改良されたＡＺＴの脳内送
達）」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３５巻、３０３９〜３０４４頁、１９９２年
；Ｊ．Ｎａｒｇｅｏｔ、Ｊ．Ｍ．Ｎｅｒｂｏｎｎｅ、Ｊ．ＥｎｇｅｌｓおよびＨ
．Ａ．Ｌｅｓｅｒの、Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．、８０巻、２
３９５〜２３９９頁、１９８３年；Ｋ．Ａ．Ｎｅｌｓｏｎ、Ｗ．Ｇ．Ｂｅｎｔｒ
ｕｄｅ、Ｗ．Ｎ．ＳｔｓｅｒおよびＪ．Ｐ．Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎの、「Ｔｈｅ
ｑｕｅｓｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈａｉｒ−ｔｗｉｓｔ ｅｑｕｉｌｉｂｒｉａ
ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｒｉｎｇ ｏｆ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ
ｃｙｃｌｉｃ ３’，５’ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ．^１ＨＮＭＲ ａｎ
ｄ ｘ−ｒａｙ ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｈ
ｅ ｄｉａｓｔｅｒｅｏｍｅｒｓ ｏｆ ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ ｐｈｅｎｙｌ
ｃｙｃｌｉｃ ３’，５’−ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ．（ヌクレオシド環状
３’，５’−モノホスフェートのホスフェート環の椅子型ねじれ平衡の疑問、チ
ミジンフェニル環状３’，５’−モノホスフェートのジアステレオマーの^１ＨＮ
ＭＲおよびＸ線結晶学的研究）」、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１０９巻、
４０５８〜４０６４頁、１９８７年；Ｊ．Ｍ．Ｎｅｒｂｏｎｎｅ、Ｓ．Ｒｉｃｈ
ａｒｄ、Ｊ．Ｎａｒｇｅｏｔ、およびＨ．Ａ．Ｌｅｓｔｅｒの「Ｎｅｗ ｐｈｏ
ｔｏａｃｔｉｖａｔａｂｌｅ ｃｙｃｌｉｃ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ｐｒｏ
ｄｕｃｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｊｕｍｐｓ ｉｎ ｃｙｃｌｉｃ Ａ
ＭＰ ａｎｄ ｃｙｃｌｉｃ ＧＭＰ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ（新規な
光活性化環状ヌクレオチド類によりもたらされる環状ＡＭＰおよび環状ＧＭＰの
細胞内濃度の上昇）」、Ｎａｔｕｒｅ、３０１巻、７４〜７６頁、１９８４年；
Ｊ．Ｍ．Ｎｅｕｍａｎｎ、Ｍ．Ｈｅｒｖ、Ｊ．Ｃ．Ｄｅｂｏｕｚｙ、Ｆ．Ｉ．Ｇ
ｕｅｒｒａ、Ｃ．Ｇｏｕｙｅｔｔｅ、Ｂ．ＤｕｐｒａｚおよびＴ．Ｈｕｙｎｙ−
Ｄｉｎｈの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ ｔｒ
ａｎｓｐｏｒｔ ｓｔｕｄｉｅｓ ｂｙ ＮＭＲ ｏｆ ａ ｇｌｕｃｏｓｙｌ
ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｏｆ ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ（チミジンのグルコシ
ルリン脂質の合成およびＮＭＲによるトランスメンブラン輸送の研究）」、Ｊ．
Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１１１巻、４２７０〜４２７７頁、１９８９年；Ｒ
．Ｏｈｎｏ、Ｎ．Ｔａｔｓｕｍｉ、Ｍ．Ｈｉｒａｎｏ、Ｋ．Ｉｍａｉ、Ｈ．Ｍｉ
ｚｏｇｕｃｈｉ、Ｔ．Ｎａｋａｍｕｒａ、Ｍ．Ｋｏｓａｋａ、Ｋ．Ｔａｋａｔｕ
ｓｋｉ、Ｔ．Ｙａｍａｙａ、Ｋ．Ｔｏｙａｍａ、Ｔ．Ｙｏｓｈｉｄａ、Ｔ．Ｍａ
ｓａｏｋａ、Ｓ．Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ、Ｔ．Ｏｈｓｈｉｍａ、Ｉ．Ｋｉｍｕｒａ
、Ｋ．ＹａｍａｄａおよびＪ．Ｋｉｍｕｒａの「Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍ
ｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ ｗｉｔｈ ｏｒａｌｌｙ
ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ １−β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｕｒａｎｏｓｙｌｃ
ｙｔｏｓｉｎｅ−５’ ｓｔｅａｒｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｅ（経口投与１−β−
Ｄ−アラビノウラノシルシトシン−５’−ステアリルホスフェートを用いる脊髄
形成異常症の治療）」、Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、４８巻、４５１〜４５５頁、１９９
１年；Ｅ．Ｐａｌｏｍｉｏ、Ｄ．ＫｅｓｓｌｅおよびＪ．Ｐ．Ｈｏｒｗｉｔｚの
「Ａ ｄｉｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ ｃａｒｒｉｅｒ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏ
ｒ ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ２’３’ｄｉｄｅｏｘｙｎｕ
ｃｌｅｏｓｉｄｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ（脳への２’，３’−ジデオキ
シヌクレオシドの持続的送達のためのジヒドロピリジンキャリアシステム）」、
Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３２巻、２２〜６２５頁、１９８９年；Ｒ．Ｍ．Ｐｅ
ｒｋｉｎｓ、Ｓ．Ｂａｒｎｅｙ、Ｒ．Ｗｉｔｔｒｏｃｋ、Ｐ．Ｈ．Ｃｌａｒｋ、
Ｒ．Ｌｅｖｉｎ、Ｄ．Ｍ．Ｌａｍｂｅｒｔ、Ｓ．Ｒ．Ｐｅｔｔｅｗａｙ、Ｈ．Ｔ
．Ｓｅｒａｆｉｎｏｗｓｋａ、Ｓ．Ｍ．Ｂａｉｌｅｙ、Ｓ．Ｊａｃｋｓｏｎ、Ｍ
．Ｒ．Ｈａｒｎｄｅｎ、Ｒ．Ａｓｈｔｏｎ、Ｄ．Ｓｕｔｔｏｎ、Ｊ．Ｊ．Ｈａｒ
ｖｅｙおよびＡ．Ｇ．Ｂｒｏｗｎの「Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＢＲＬ４７９２
３ ａｎｄ ｉｔｓ ｏｒａｌ ｐｒｏｄｒｕｇ，ＳＢ２０３６５７Ａ ａｇａ
ｉｎｓｔ ａ ｒａｕｓｃｈｅｒ ｍｕｒｉｎｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｖｉｒｕ
ｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ（マウスにおけるマウスラウシャー白
血病ウイルス感染に対するＢＲＬ４７９２３およびその経口プロドラッグＳＢ２
０３６５７Ａの活性）」、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．、２０巻（補足１）、
８４頁、１９９３年；Ｃ．Ｐｉａｎｔａｄｏｓｉ、Ｃ．Ｊ．Ｍａｒａｓｃｏ，Ｊ
ｒ．、Ｓ．Ｌ．Ｎｏｒｒｉｓ−Ｎａｔｓｃｈｋｅ、Ｋ．Ｌ．Ｍｅｙｅｒ、Ｆ．Ｇ
ｕｍｕｓ、Ｊ．Ｒ．Ｓｕｒｌｅｓ、Ｋ．Ｓ．Ｉｓｈａｑ、Ｌ．Ｓ．Ｋｕｃｅｒａ
、Ｎ．Ｉｙｅｒ、Ｃ．Ａ．Ｗａｌｌｅｎ、Ｓ．ＰｉａｎｔａｄｏｓｉおよびＥ．
Ｊ．Ｍｏｄｅｓｔの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏ
ｆ ｎｏｖｅｌ ｅｔｈｅｒ ｌｉｐｉｄ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｃｏｎｊｕ
ｇａｔｅｓ ｆｏｒ ａｎｔｉ−ＨＩＶ−１ ａｃｔｉｖｉｔｙ（抗−ＨＩＶ−
１活性のための新規なエーテル脂質ヌクレオシド複合体の合成および評価）」、
Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３４巻、１４０８〜１４１４頁、１９９１年；Ａ．Ｐ
ｏｍｐｏｎ、Ｉ．Ｌｅｆｅｂｖｒｅ、Ｊ．Ｌ．Ｉｍｂａｃｈ、Ｓ．Ｋａｈｎおよ
びＤ．Ｆａｒｑｕｈａｒの「Ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｐａｔｈｗａｙｓ
ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｎｏ−ａｎｄ ｂｉｓ（ｐｉｖａｌｏｙｌｏｘｙｍｅｔｈｙ
ｌ）ｅｓｔｅｒｓ ｏｆ ａｚｉｄｏｔｈｙｍｉｄｉｎｅ−５’−ｍｏｎｏｐｈ
ｏｓｐｈａｔｅ ｉｎ ｃｅｌｌ ｅｘｔｒａｃｔ ａｎｄ ｉｎ ｔｉｓｓｕ
ｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ；ａｎ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔ
ｈｅ ‘ｏｎ−ｌｉｎｅ ＩＳＲＰ−ｃｌｅａｎｉｎｇ ＨＰＬＣ ｔｅｃｈｎ
ｉｑｕｅ（細胞抽出物内および組織培養媒体内でのアジドチミジン−５’−モノ
ホスフェートのモノ−およびビス（ピバロイルオキシメチル）エステルの分解経
路；オンラインＩＳＲＰクリーニングＨＰＬＣ法の適用）」、Ａｎｔｉｖｉｒａ
ｌ Ｃｈｅｍ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、５巻、９１〜９８頁、１９９４年；Ｔ．
Ｐｏｓｔｅｍａｒｋ、「Ｃｙｃｌｉｃ ＡＭＰ ａｎｄ ｃｙｃｌｉｃ ＧＭＰ
（環状ＡＭＰおよび環状ＧＭＰ）」、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．
、１４巻、２３〜３３頁、１９７４年；Ｅ．Ｊ．Ｐｒｉｓｂｅ、Ｊ．Ｃ．Ｍ．Ｍ
ａｒｔｉｎ、Ｄ．Ｐ．Ｃ．ＭｃＧｈｅｅ、Ｍ．Ｆ．Ｂａｒｋｅｒ、Ｄ．Ｆ．Ｓｍ
ｅｅ、Ａ．Ｅ．Ｄｕｋｅ、Ｔ．Ｒ．ＭａｔｔｈｅｗｓおよびＪ．Ｐ．Ｊ．Ｖｅｒ
ｈｅｙｄｅｎの「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ａｎｔｉｈｅｒｐｅｓ ｖｉｒ
ｕｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｎ ｐｈｏｓｐｈｏｎ
ａｔｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ ９−［（１，３−ｄｉｈｉｄｒｏｘｙ
−２−ｐｒｏｐｏｘｙ）ｍｅｔｈｙｌ］ｇｕａｎｉｎｅ（９−［（１，３−ジヒ
ドロキシ−２−プロポキシ）メチル］グアニンのホスフェートおよびホスホネー
ト誘導体の合成および抗ヘルペスウイルス活性）」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、
２９巻、６７１〜６７５頁、１９８６年；Ｆ．Ｐｕｃｃｈ、Ｇ．Ｇｏｓｓｅｌｉ
ｎ、Ｉ．Ｌｅｆｅｂｖｒｅ、Ａ．Ｐｏｍｐｏｎ、Ａ．Ｍ．Ａｕｂｅｒｔｉｎ、Ｄ
ｉｒｎおよびＪ．Ｌ．Ｉｍｂａｃｈの「Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｅｌｉ
ｖｅｒｙ ｏｆ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｔｈｒ
ｏｕｇｈ ａ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ
ｐｒｏｃｅｓｓ（レダクターゼ媒介活性化プロセスによるヌクレオシドモノホ
スフェートの細胞内送達）」、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．、２２巻、１５５
〜１７４頁、１９９３年；Ｖ．Ｐ．Ｐｕｇａｅｖａ、Ｓ．Ｉ．Ｋｌｏｃｈｋｅｖ
ａ、Ｆ．Ｄ．ＭａｓｈｂｉｔｓおよびＲ．Ｓ．Ｅｉｚｅｎｇａｒｔの「Ｔｏｘｉ
ｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ａｎｄ ｈｅａｌｔｈ ｓｔａｎ
ｄａｒｄ ｒａｔｉｎｇｓ ｆｏｒ ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｓｕｌｆｉｄｅ ｉｎ
ｔｈｅ ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ ａｔｍｏｓｐｈｅｒｅ（工業的雰囲気中のエ
チレンスルフィドの毒物学的分析および健康標準に関する評価）」、Ｇｉｇ．Ｔ
ｒｆ．Ｐｒｏｆ．Ｚａｂｏｌ．、１４巻、４７〜４８頁（Ｃｈｅｍ．Ａｂｓｔｒ
．７２，２１２）１９６９年；Ｒ．Ｋ．Ｒｏｂｉｎｓ「Ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉ
ａｌ ｏｆ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ａｎａｌｏｇｓ ａｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏ
ｒｓ ｏｆ Ｒｅｔｒｏ ｖｉｒｕｓｅｓ ａｎｄ ｔｕｍｏｒｓ（レトロウイ
ルスおよび腫瘍に対する阻害剤としてのヌクレオチド類縁体の可能性）」、Ｐｈ
ａｒｍ．Ｒｅｓ．、１１〜１８頁、１９８４年；Ａ．Ｒｏｓｏｗｓｋｙ、Ｓ．Ｈ
．Ｋｉｍ、Ｊ．ＲｏｓｓおよびＭ．Ｍ．Ｗｉｃｋの「Ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ ５
’−（ａｌｋｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｅ）ｅｓｔｅｒｓ ｏｆ １−β−Ｄ−ａｒ
ａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ ａｎｄ ｉｔｓ Ｎ^４−ａｃ
ｙｌ ａｎｄ ２．２’−ａｎｈｙｄｒｏ−３’−Ｏ−ａｃｙｌ ｄｅｒｉｖａ
ｔｉｖｅｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｐｒｏｄｒｕｇｓ（潜在的なプロドラ
ッグとしての１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンの親油性５’−（アルキ
ルホスフェート）エステルおよびそのＮ^４−アシルおよび２，２’−アンヒドロ
−３’−Ｏ−アシル誘導体）」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２５巻、１７１〜１
７８頁、１９８２年；Ｗ．Ｒｏｓｓ、「Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖ
ｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｗａｌｋｅｒ ｔｕｒｎｏｕｔ ｔｏｗａｒｄｓ ａｒ
ｏｍａｔｉｃ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｍｕｓｔａｒｄｓ ｃａｒｒｙｉｎｇ ｂａ
ｓｉｃ ｓｉｄｅ ｃｈａｉｎｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｇｌｕｃｏｓｅ ｐｒ
ｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ（グルコースによる予備処置後の、塩基性側鎖を有する芳
香族窒素マスタードに対するウォーカーターンアウト感受性の増大）」、Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．、８巻、２３５〜２４０頁、１９６１年；Ｅ．Ｋ．Ｒｙ
ｕ、Ｒ．Ｊ．Ｒｏｓｓ、Ｔ．Ｍａｔｓｕｓｈｉｔａ、Ｍ．ＭａｃＣｏｓｓ、Ｃ．
Ｉ．ＨｏｎｇおよびＣ．Ｒ．Ｗｅｓｔの「Ｐｈｏｓｐｏｌｉｐｉｄ−ｎｕｃｌｅ
ｏｓｉｄｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．３．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｐｒｅ
ｌｉｍｉｎａｒｙ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ １−
β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ５’ｄｉｐｈｏｓ
ｐｈａｔｅ［−］，２−ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌｓ（リン脂質−ヌクレオ
シド複合体、３．１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン５’−ジホスフェー
ト〔−〕，２−ジアシルグリセロールの合成および予備的生物学的評価）」、Ｊ
．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２５巻、１３２２〜１３２９頁、１９８２年；Ｒ．Ｓａ
ｆｆｈｉｌｌおよびＷ．Ｊ．Ｈｕｍｅの「Ｔｈｅ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏ
ｆ ５−ｉｎｄｏｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ ａｎｄ ５−ｂｒｏｍｏｅｔｈｏ
ｘｙｕｒｉｄｉｎｅ ｂｙ ｓｅｒｕｍ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏ
ｕｒｃｅｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｕ
ｓｅ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｆｏｒ ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔ
ｉｏｎ ｉｎｔｏ ＤＮＡ（５−ヨードデオキシウリジンおよび５−ブロモエト
キシウリジンの種々の供給源からの血清による分解、およびこれらの化合物のＤ
ＮＡへの組み込みのための使用の結果）」、Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．Ｉｎｔｅｒａ
ｃｔ．、５７巻、３４７〜３５５頁、１９８６年；Ｍ．Ｓａｎｅｙｏｓｈｉ、Ｍ
．Ｍｏｒｏｚｕｍｉ、Ｋ．Ｋｏｄａｍａ、Ｊ．Ｍａｃｈｉｄａ、Ａ．Ｋｕｎｉｎ
ａｋａおよびＨ．Ｙｏｓｈｉｎｏの「Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄ
ｅｓ ａｎｄ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ．ＸＶＩ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ
ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓ ｏｆ ａ ｓｅｒｉｅｓ
ｏｆ １−β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ ５
’−ａｌｋｙ ｏｒ ａｒｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ（合成ヌクレオシドおよび
ヌクレオチド、ＸＶＩ．一連の１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン５’−
アルキルまたはアリールホスフェートの合成および生物学的評価）」、Ｃｈｅｍ
．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．、２８巻、２９１５〜２９２３頁、１９８０年；Ｊ．
Ｋ．Ｓａｓｔｒｙ、Ｐ．Ｎ．Ｎｅｈｅｔｅ、Ｓ．Ｋｈａｎ、Ｂ．Ｊ．Ｎｏｗａｋ
、Ｗ．Ｐｌｕｎｋｅｔｔ、Ｒ．Ｂ．ＡｒｌｉｎｇｈａｕｓおよびＤ．Ｆａｒｑｕ
ｈａｒの「Ｍｅｍｂｒａｎｅ−ｐｅｒｍｅａｂｌｅ ｄｉｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉ
ｎｅ ５’−ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｎａｌｏｇｕｅ ｉｎｈｉｂｉｔ
ｓ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃ
ｔｉｏｎ（ヒト免疫不全ウイルス感染を阻害する膜透過性ジデオキシウリジン５
’−モノホスフェート類縁体）」、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、４１巻、４
４１〜４４５頁、１９９２年；Ｊ．Ｐ．Ｓｈａｗ、Ｒ．Ｊ．Ｊｏｎｅｓ、Ｍ．Ｎ
．Ａｒｉｍｉｌｌｉ、Ｍ．Ｓ．Ｌｏｕｉｅ、Ｗ．Ａ．ＬｅｅおよびＫ．Ｃ．Ｃｕ
ｎｄｙの「Ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ＰＭＥＡ ｆｒ
ｏｍ ＰＭＥＡ ｐｒｏｄｒｕｇｓ ｉｎ ｍａｌｅ Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗ
ｌｅｙ ｒａｔｓ（雄のＳＤラットにおけるＰＭＥＡプロドラッグからのＰＭＥ
Ａの経口的生体利用率）」、９ｔｈ Ａｎｎｕａｌ ＡＡＰＳ Ｍｅｅｔｉｎｇ
．ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ（アブストラクト）１９９４年；Ｓ．Ｓｈｕｔｏ、Ｓ
．Ｕｅｄａ、Ｓ．Ｉｍａｍｕｒａ、Ｋ．Ｆｕｋｕｋａｗａ、Ａ．Ｍａｔｓｕｄａ
およびＴ．Ｕｅｄａの「Ａ ｆａｃｉｌｅ ｏｎｅ−ｓｔｅｐ ｓｙｎｔｈｅｓ
ｉｓ ｏｆ ５’ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｙｌｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ ｂｙ
ａｎ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｔｗｏ−ｐｈａｓｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ（酵素的２
相反応による５’−ホスファチジルヌクレオシドの容易な１段階合成）」、Ｔｅ
ｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．、２８巻、１９９〜２０２頁、１９８７年；Ｓ
．Ｓｈｕｔｏ、Ｈ．Ｉｔｏｈ、Ｓ．Ｕｅｄａ、Ｓ．Ｉｍａｍｕｒａ、Ｋ．Ｋｕｋ
ｕｋａｗａ、Ｍ．Ｔｓｕｊｉｎｏ、Ａ．ＭａｔｓｕｄａおよびＴ．ＵｅｄａのＰ
ｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．、３６巻、２０９〜２１７頁、１９８８年。有用なホスフ
ェートプロドラッグ群の例としては、Ｓ−アシル−２−チオエチル基があり、こ
れはまた「ＳＡＴＥ」とも呼ばれている。

【０１１９】 本発明をその好ましい実施形態に関して記載した。当業者にとっては、上記し
た本発明の詳細な説明から、本発明の変形および修飾は当然のことである。この
ような変形および修飾は、本発明の範囲内に包含されることを意図している。

【図面の簡単な説明】

【図１】 β−Ｄ−Ｄ４ＦＣを示す図である。

【図２】 ｐ２４抗原産生の抑制率に対するβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣの濃度（マイクロモル）を
示すグラフである。この図はβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣに対して低減した感受性を有する
ウイルスの選択を説明するものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 メローズ，ジヨン・ダブリユ アメリカ合衆国、ペンシルベニア・15218、 ピツツバーグ、ビーチ・ストリート・201 (72)発明者 リオツタ，デニス・シー アメリカ合衆国、ジヨージア・30253、マ クダナー、モントローズ・ドライブ・251 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 AA19 BA34 BA44 CA59 MA02 NA05 NA14 ZC552 4C086 AA01 AA02 EA11 GA02 GA07 MA01 MA02 MA04 NA05 NA14 ZC55

Claims (17)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ヒトのＨＩＶ感染を治療するための方法において、逆転写酵
   素領域の７０（ＫからＮに）、９０または１７２コドン以外の位置でＨＩＶ−１
   に突然変異を生じさせ、かつシス−２−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロ
   シトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、シス−２−ヒドロキシメチル
   −５−（シトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、９−［４−（ヒドロ
   キシメチル）−２−シクロペンテン−１−イル）−グアニン（カルボビル）、９
   −［（２−ヒドロキシエトキシ）メチル］グアニン（アシクロビル）、インター
   フェロン、３’−デオキシ−３’−アジド−チミジン（ＡＺＴ）、２’，３’−
   ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）、
   （−）−２’−フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−アラウリジン（Ｌ−ＦＭＡＵ）
   または２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチミジン（Ｄ４Ｔ）以
   外である薬剤と組み合わせて、または交互に、任意選択的で薬学的に許容可能な
   担体中で、有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣあるいはその薬学的に許容可能なプロドラ
   ッグまたは塩をヒトに投与することを含む、ヒトのＨＩＶ感染を治療するための
   方法。
2. 【請求項２】 ヒトのＨＩＶ感染を治療するための方法において、逆転写酵
   素領域のコドン７０でのリジンからアスパラギンへの（ＫからＮに）ＨＩＶ−１
   突然変異、コドン９０でのバリンからイソロイシンへの（ＶからＩに）突然変異
   またはコドン１７２でのアルギニンからリジンへの（ＲからＫに）突然変異を生
   じさせ、かつシス−２−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１−
   イル）−１，３−オキサチオラン、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（シトシ
   ン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、９−［４−（ヒドロキシメチル）−
   ２−シクロペンテン−１−イル）−グアニン（カルボビル）、９−［（２−ヒド
   ロキシエトキシ）メチル］グアニン（アシクロビル）、インターフェロン、３’
   −デオキシ−３’−アジド−チミジン（ＡＺＴ）、２’，３’−ジデオキシイノ
   シン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）、（−）−２’−
   フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−アラウリジン（Ｌ−ＦＭＡＵ）または２’，３
   ’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチミジン（Ｄ４Ｔ）以外である薬剤と
   組み合わせて、または交互に、任意選択で薬学的に許容可能な担体中で、有効量
   のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣまたはその薬学的に許容可能な塩をヒトに投与することを含
   む、ヒトのＨＩＶ感染を治療するための方法。
3. 【請求項３】 （−）−シス−２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン−１
   −イル）−１，３−オキサチオラン（３ＴＣ）、ＡＺＴ、シス−２−ヒドロキシ
   メチル−５−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン（
   ＦＴＣ）、９−［４−（ヒドロキシメチル）−２−シクロペンテン−１−イル］
   グアニン（カルボビル）、２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチ
   ミジン（Ｄ４Ｔ）、２’，３’−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）、２’，３’−
   ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、９−［（２−ヒドロキシエトキシ）メチル］グ
   アニン（アシクロビル）、（−）−２’−フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−アラ
   −ウリジン（Ｌ−ＦＭＡＵ）および（Ｓ）−６−クロロ−４−シクロプロピルエ
   チニル−４−トリフルオロメチル−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−３，１−ベンゾオ
   キサジン−２−オン（ＳＵＳＴＩＶＡ（登録商標））からなる群から選択される
   抗ウイルス薬に対して耐性のあるＨＩＶウイルス株に感染している患者を治療す
   るための方法において、任意選択で薬学的に許容可能な担体中で、有効量のβ−
   Ｄ−Ｄ４ＦＣまたはその薬学的に許容可能なプロドラッグまたは塩を患者に投与
   することを含む、ＨＩＶウイルス株に感染している患者を治療するための方法。
4. 【請求項４】 抗ウイルス薬が（−）−シス−２−ヒドロキシメチル−５−
   （シトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン（３ＴＣ）である、請求項３
   に記載の方法。
5. 【請求項５】 抗ウイルス薬が３’−デオキシ−３’−アジドチミジン（Ａ
   ＺＴ）である、請求項３に記載の方法。
6. 【請求項６】 抗ウイルス薬がシス−２−ヒドロキシメチル−５−（５−フ
   ルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン（ＦＴＣ）である、請求
   項３に記載の方法。
7. 【請求項７】 抗ウイルス薬が９−［４−（ヒドロキシメチル）−２−シク
   ロペンテン−１−イル］−グアニン（カルボビル（carbovir））である、請求項
   ３に記載の方法。
8. 【請求項８】 抗ウイルス薬が２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデ
   オキシチミジン（Ｄ４Ｔ）である、請求項３に記載の方法。
9. 【請求項９】 抗ウイルス薬が２’，３’−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）
   である、請求項３に記載の方法。
10. 【請求項１０】 抗ウイルス薬が２’，３’−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ
    ）である、請求項３に記載の方法。
11. 【請求項１１】 抗ウイルス薬が（Ｓ）−６−クロロ−４−シクロプロピル
    エチニル−４−トリフルオロメチル−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−３，１−ベンゾ
    オキサジン−２−オン（ＳＵＳＴＩＶＡ（登録商標））である、請求項３に記載
    の方法。
12. 【請求項１２】 抗ウイルス薬が９−［（２−ヒドロキシエトキシ）メチル
    ］グアニン（アシクロビル）である、請求項３に記載の方法。
13. 【請求項１３】 抗ウイルス薬が（−）−２’−フルオロ−５−メチル−β
    −Ｌ−アラ−ウリジン（Ｌ−ＦＭＡＵ）である、請求項３に記載の方法。
14. 【請求項１４】 ヒトのＨＩＶ−１を治療するための医薬組成物において、
    逆転写酵素領域の７０（ＫからＮに）、９０または１７２コドン以外の位置でＨ
    ＩＶ−１に突然変異を生じさせ、かつシス−２−ヒドロキシメチル−５−（５−
    フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、シス−２−ヒドロキ
    シメチル−５−（シトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、９−［４−
    （ヒドロキシメチル）−２−シクロペンテン−１−イル）−グアニン（カルボビ
    ル）、９−［（２−ヒドロキシエトキシ）メチル］グアニン（アシクロビル）、
    インターフェロン、３’−デオキシ−３’−アジド−チミジン（ＡＺＴ）、２’
    ，３’−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジデオキシシチジン（Ｄ
    ＤＣ）、（−）−２’−フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−アラウリジン（Ｌ−Ｆ
    ＭＡＵ）または２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチミジン（Ｄ
    ４Ｔ）以外である有効量の薬剤と組み合わせた、薬学的に許容可能な担体中の有
    効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣあるいはその薬学的に許容可能なプロドラッグまたは塩
    を含有する、ヒトのＨＩＶ−１を治療するための医薬組成物。
15. 【請求項１５】 ヒトのＨＩＶ−１を治療するための医薬組成物において、
    逆転写酵素領域のコドン７０の位置でのリジンからアスパラギンへの（ＫからＮ
    に）ＨＩＶ−１突然変異、コドン９０の位置でのバリンからイソロイシンへの（
    ＶからＩに）突然変異またはコドン１７２の位置でのアルギニンからリジンへの
    （ＲからＫに）突然変異を生じさせ、かつシス−２−ヒドロキシメチル−５−（
    ５−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、シス−２−ヒド
    ロキシメチル−５−（シトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン、９−［
    ４−（ヒドロキシメチル）−２−シクロペンテン−１−イル）−グアニン（カル
    ボビル）、９−［（２−ヒドロキシエトキシ）メチル］グアニン（アシクロビル
    ）、インターフェロン、３’−デオキシ−３’−アジド−チミジン（ＡＺＴ）、
    ２’，３’−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジデオキシシチジン
    （ＤＤＣ）、（−）−２’−フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−アラウリジン（Ｌ
    −ＦＭＡＵ）または２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジデオキシチミジン
    （Ｄ４Ｔ）以外である有効量薬剤と組み合わせた、薬学的に許容可能な担体中の
    有効量のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣまたはその薬学的に許容可能な塩を含有する、ヒトの
    ＨＩＶ−１を治療するための医薬組成物。
16. 【請求項１６】 逆転写酵素領域の７０（ＫからＮに）、９０または１７２
    コドン以外の位置でＨＩＶ−１に突然変異を生じさせ、かつシス−２−ヒドロキ
    シメチル−５−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン
    、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン−１−イル）−１，３−オキサ
    チオラン、９−［４−（ヒドロキシメチル）−２−シクロペンテン−１−イル）
    −グアニン（カルボビル）、９−［（２−ヒドロキシエトキシ）メチル］グアニ
    ン（アシクロビル）、インターフェロン、３’−デオキシ−３’−アジド−チミ
    ジン（ＡＺＴ）、２’，３’−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、２’，３’−ジ
    デオキシシチジン（ＤＤＣ）、（−）−２’−フルオロ−５−メチル−β−Ｌ−
    アラウリジン（Ｌ−ＦＭＡＵ）または２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−ジ
    デオキシチミジン（Ｄ４Ｔ）以外である薬剤と組み合わせての、または交互での
    、任意選択で薬学的に許容可能な担体中のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣあるいはその薬学的
    に許容可能なプロドラッグまたは塩の、ヒトのＨＩＶ−１を治療するための医薬
    の製造での使用。
17. 【請求項１７】 逆転写酵素領域のコドン７０の位置でのリジンからアスパ
    ラギンへの（ＫからＮに）ＨＩＶ−１突然変異、コドン９０の位置でのバリンか
    らイソロイシンへの（ＶからＩに）突然変異またはコドン１７２の所でのアルギ
    ニンからリジンへの（ＲからＫに）突然変異を生じさせ、かつシス−２−ヒドロ
    キシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラ
    ン、シス−２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン−１−イル）−１，３−オキ
    サチオラン、９−［４−（ヒドロキシメチル）−２−シクロペンテン−１−イル
    ）−グアニン（カルボビル）、９−［（２−ヒドロキシエトキシ）メチル］グア
    ニン（アシクロビル）、インターフェロン、３’−デオキシ−３’−アジド−チ
    ミジン（ＡＺＴ）、２’，３’−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、２’，３’−
    ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）、（−）−２’−フルオロ−５−メチル−β−Ｌ
    −アラウリジン（Ｌ−ＦＭＡＵ）または２’，３’−ジデヒドロ−２’，３’−
    ジデオキシチミジン（Ｄ４Ｔ）以外である有効量の薬剤と組み合わせての、また
    は交互での、任意選択で薬学的に許容可能な担体中のβ−Ｄ−Ｄ４ＦＣまたはそ
    の薬学的に許容可能な塩の、ヒトのＨＩＶ−１を治療するための医薬の製造での
    使用。