JP2002531531A - 循環している抗体を減少させるための方法および処方物 - Google Patents

循環している抗体を減少させるための方法および処方物

Info

Publication number
JP2002531531A
JP2002531531A JP2000586377A JP2000586377A JP2002531531A JP 2002531531 A JP2002531531 A JP 2002531531A JP 2000586377 A JP2000586377 A JP 2000586377A JP 2000586377 A JP2000586377 A JP 2000586377A JP 2002531531 A JP2002531531 A JP 2002531531A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
epitope
αgal
compound
antibody
antibodies
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
JP2000586377A
Other languages
English (en)
Inventor
リチャード エム． ジャック，
デイビッド エス． ジョーンズ，
リン ユ，
スティーブン ビー． イングル，
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
La Jolla Pharmaceutical Co
Original Assignee
La Jolla Pharmaceutical Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by La Jolla Pharmaceutical Co filed Critical La Jolla Pharmaceutical Co
Publication of JP2002531531A publication Critical patent/JP2002531531A/ja
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/595—Polyamides, e.g. nylon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

(57)【要約】 本発明は、抗体、特に疾患関連抗体の循環レベルを減少させるための方法を提供する。本方法は、有効量のエピトープ提示キャリアを、個体に投与する工程を伴う。他の実施形態では、エピトープ提示キャリアを用いた、抗体の循環レベルを減少させるためのエキソビボ方法が提供される。エピトープ提示部分は、多くの実施形態のいずれかであり得、そして好ましくは、結合手プラットホーム分子およびエピトープを含む結合体である。エピトープは、必要な結合活性を示す限り任意の部分であり得る。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 （関連出願） 本願は、１９９８年１２月９日に出願された米国仮特許出願第６０／１１１，
６３９号の優先権を主張し、この内容は、その全体が参考として援用される。
【０００２】 （技術分野） 本発明は、抗体をエピトープ提示キャリアに結合することによって、循環して
いる抗体、特に、疾患に関連する抗体を減少することに関する。
【０００３】 （背景技術） 種々のクラスの循環している抗体と関連する多くの状態および障害がある。こ
れらの状態のいくつかは、例えば、自己免疫障害（例えば、狼瘡および特発性血
小板減少性紫斑病（ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｏｐｅｎｉａ
ｐｕｒｐｕｒａ）およびＩｇＥ関連の障害である。
【０００４】 これらの障害を処置するか、またはこれらの障害と戦う１つのアプローチは、
循環している抗体を除去および／または減少することである（たとえ基本的に一
過性であるとしても）。そのようなアプローチの１つの例は、血液が個体から除
去され、そして抗体が、アフィニティーカラム（例えば、プロテインＡカラム）
を用いて体外に除去されるアフェレーシスである。例えば、米国特許第４，８５
１，１２６号、同第４，２５５，６２７号、同第４，０８６，２９４号、同第５
，１４７，２９０号、同第４，４１１，７９２号；Ｂａｄｎａｒｅｎｋｏ（１９
９６）Ｃｌｉｎｉｃｓ ｉｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １６
：９０７−９２９；Ｓｎｙｄｅｒら（１９９２）Ｂｌｏｏｄ ７９：２２３７−
２４５；Ｒｉｃｈｔｅｒら（１９９３）Ｍｅｔａｂｏｌ．Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．４
２：８８８−８９４；Ｒｉｃｈｔｅｒら（１９９７）ＡＳＡＩＯ Ｊ．４３（１
）：５３−５９；Ｐａｓｃｈｅｒら（１９９７）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏ
ｎ ６３６３（６）：８６７−８７５；Ｗａｌｌｕｋａｔら（１９９６）Ｉｎｔ
’ｌ Ｊ．Ｃａｒｄ．５４：１９１−１９５；Ｎｉｌｌｓｏｎら（１９８１）Ｂ
ｌｏｏｄ ５８：３８−４４；Ｗａｔｓｏｎら（１９８９）Ｃａｎｃｅｒ ６４
：１０００；Ｓｕｚｕｋｉら（１９９４）Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ １９：１
０５−１１２；Ｓｕｚｕｋｉら（１９９５）Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｏｒｇａｎ
ｓ ２０（４）：２９６−３０２；Ｂａｎｄａｒｅｎｋｏ（１９９６）Ｃｌｉｎ
ｉｃｓ ｉｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １６：９０７−９２
９を参照のこと。
【０００５】 循環している抗体のレベルを減少させるための技術としてアフェレーシスを用
いる問題は、扱いにくさおよび高価であることである。さらに、アフェレーシス
はしばしば、頻繁かつ繰返しの適用を必要とする。
【０００６】 他の文献は、寛容の誘導（すなわち、Ｂ細胞アネルギーを誘導することによる
循環している抗体のレベルの減少）を記載する。例えば、米国特許第５，２７６
，０１３号、同第５，３９１，７８５号、同第５，７８６，５１２号、同第５，
７２６，３２９号、同第５，５５２，３９１号、同第５，２６８，４５４；ＰＣ
Ｔ／ＵＳ９６／００９９７６；ＰＣＴ／ＵＳ９７／１００７５；ＰＣＴ／ＵＳ９
１／０９１７６；米国第５，２６８，４５４号；米国出願第０８／１１８，０５
５号；米国出願第６０／０８８，６５６号；米国出願第６０／１０３，０８８号
を参照のこと。
【０００７】 必要なことは、循環している抗体、特に、疾患と関連する抗体を減少する方法
の改善である。
【０００８】 本明細書に引用される全ての刊行物は、その全体が本明細書によって参考とし
て援用される。
【０００９】 （発明の開示） 本発明は、循環している抗体、特に、疾患または障害に関連する抗体のレベル
を減少させる方法を提供する。
【００１０】 従って、１つの局面において、本発明は個体における循環している抗体、特に
、疾患に関連する抗体のレベルを減少するための方法を提供し、有効な量のエピ
トープ提示部分を個体に投与する工程を包含する。エピトープ提示部分は、多く
の実施形態のいずれかであり得、そして好ましくは、結合手プラットホーム（ｖ
ａｌｅｎｃｙ ｐｌａｔｆｏｒｍ）分子およびエピトープを含む結合体である。
エピトープは、必要な結合活性を示す限り任意の部分であり得る。
【００１１】 別の局面において、本発明は、エピトープ提示部分を用いて循環している抗体
を減少するエキソビボの方法を提供する。この方法は、個体における疾患に関連
する抗体のレベルを減少する方法を提供し、抗体がエピトープに結合することが
可能な条件下で、個体の血液（抗体を含むそれらの任意の成分を含む）をエピト
ープ提示キャリアを用いて体外で処置する工程；必要であれば、抗体−エピトー
プ提示キャリア複合体を除去する工程；および血液を個体に戻す工程を包含する
。
【００１２】 （発明を実施するための態様） 本発明は、抗体、特に疾患に関連する抗体の循環レベルを除去および／または
減少する効果的な方法を提供する。この除去および／または減少は、一般的に、
一過性である。なぜなら、除去および／または減少は、Ｂ細胞のアネルギーを生
じることと対照的に、循環している抗体への結合に基づくからであり、しかし、
Ｂ細胞アネルギーの誘導はこれらの方法と伴い得る。
【００１３】 （一般的な技術） 本発明の実施は、特に指定されない限り、当該分野の技術の範囲内である分子
生物学（組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学および免疫学の従
来技術を利用する。そのような技術は、「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ
：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」、第２版（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、
１９８９）；「Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（Ｍ．
Ｊ．Ｇａｉｔ編、１９８４）；「Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ」（
Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ編、１９８７）；「Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙ
ｍｏｌｏｇｙ」（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；「Ｈａｎｄｂｏ
ｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」（Ｄ．Ｍ．Ｗ
ｅｉｒおよびＣ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ編）；「Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ
Ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ」（Ｊ．Ｍ．Ｍｉ
ｌｌｅｒおよびＭ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ編、１９８７）；「Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏ
ｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓ
ｕｂｅｌら編、１９８７）；「ＰＣＲ： Ｔｈｅ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈ
ａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ」、（Ｍｕｌｌｉｓら編、１９９４）；および「Ｃｕ
ｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」（Ｊ．Ｅ．Ｃ
ｏｌｉｇａｎら編、１９９１）のような文献に十分に説明されている。
【００１４】 （定義） 本発明の目的に関して、循環している抗体を「減少する」および／または「除
去する」は、遊離または結合していない循環している抗体のレベルを減少するこ
とを意味する。いくつかの実施形態において、エピトープ提示キャリアの抗体に
対する結合によって、抗体はエフェクター分子となること（すなわち他の標的に
結合すること）を妨げられ、従って「減少される」。いくつかの実施形態におい
て、循環している抗体を「減少する」とは、抗体のクリアランス（例えば、循環
からの物理的な除去）を含む。このクリアランスがもたらされる１つの例は、細
網内皮系によるエピトープ提示キャリアおよび抗体を含む複合体のクリアランス
である。
【００１５】 「エピトープ」とは、当該分野で十分理解される用語であり、そして抗体への
特異的な結合を示す任意の化学的部分を意味する。「エピトープ」はまた、抗原
を含み得、抗原はエピトープを含む部分であり、そして、それ自体でもまた抗体
に特異的に結合する。
【００１６】 抗体に「特異的に結合する」エピトープまたは抗原は、当該分野で十分に理解
される用語であり、そしてそのような特異的結合を決定するための方法もまた、
当該分野で周知である。分子が、代替の細胞または代替の物質と会合するよりも
、特定の細胞または特定の物質とより頻繁に、より迅速に、より長い持続時間お
よび／またはより強い親和性で反応または会合する場合、分子は、「特異的結合
」を示すといわれる。抗体が、他の物質に結合するよりもより強い親和性、アビ
ディティで、より容易に、および／またはより長いで持続期間で結合する場合、
抗体は、標的に「特異的に結合する」。
【００１７】 「抗体」（複数形と交換可能に使用される）は、炭水化物またはポリペプチド
のような標的に、免疫グロブリン分子の可変領域に位置する少なくとも１つの抗
原認識部位を通して特異的に結合し得る免疫グロブリン分子である。本明細書で
使用される場合、この用語は、インタクトな抗体だけでなく、そのフラグメント
（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆｖ）、単鎖（ＳｃＦｖ）、そ
の変異体、抗体部分を含む融合タンパク質、ヒト化抗体、および必要とされる特
異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の任意の他の改変された構造もま
た含む。
【００１８】 当業者によって十分理解されるように、「疾患に関連する抗体」は、その産生
が疾患状態の間に生じるおよび／または産生が所望されない（例えば、自己免疫
疾患および移植拒絶）抗体である。疾患に関連する抗体の例は、当該分野で公知
であり、そして抗二本鎖（ａｎｔｉ−ｄｏｕｂｌｅ−ｔｒａｎｄｅｄ）ＤＮＡ抗
体（狼瘡）および抗αＧａｌ抗体（移植拒絶）を含むが、これらに限定されない
。
【００１９】 「天然に存在する」とは、炭水化物、ポリヌクレオチド配列またはポリペプチ
ド配列（すなわち、天然に見出されるもの）のような内因性化学部分をいう。天
然に存在する部分のプロセシングは、１つ以上の工程で生じ得、そしてこれらの
用語は、プロセシングの全ての段階を含む。逆に、「天然に存在しない」部分は
、組換えポリヌクレオチド配列および天然に存在しない炭水化物のような他の全
ての部分（すなわち、天然に生じないもの）をいう。
【００２０】 本明細書で使用される場合、用語「模倣物（ｍｉｍｅｔｉｃ）」（「アナログ
」とも呼ばれる）とは、抗αＧａｌ抗体に特異的に結合する生物学的化合物また
は化学的化合物を意味する。本発明の目的に関して、それ自身では「αＧａｌエ
ピトープ」は、天然に存在するαＧａｌの模倣物（例えば、ペプチド）を含む。
「模倣物」とは、αＧａｌとのエピトープまたは結合特異性を共有する。模倣物
は、必要な結合特性を示す任意の化学物質であり得、従って、例えば、単一また
は複合体の有機分子または無機分子；ポリペプチド；ポリヌクレオチド；炭水化
物；脂質；リポ多糖；リポタンパク質、または（ポリヌクレオチド含有ポリペプ
チド；グリコシル化ポリペプチド；および糖脂質を含むがこれらに限定されない
）上記の任意の組合せであり得る。用語「模倣物」とは、当該分野で周知の用語
である、用語「ミモトープ」を含む。
【００２１】 「個体」とは、脊椎動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトである。
哺乳動物は、家畜、競技用動物、愛玩動物、霊長類、マウスおよびラットを含む
が、これらに限定されない。
【００２２】 「有効な量」は、臨床的な結果を含む有益な結果または所望する結果をもたら
すに十分な量である。有効な量は、１回以上の投与で投与され得る。本発明の目
的に関して、有効な量は、循環している遊離の（すなわち、キャリア上のエピト
ープに結合していない）抗体のレベルを減少するために十分な量である。
【００２３】 「キャリア」とは、エピトープへの付着部位を含む分子である。キャリアの１
つの好ましい例は、結合手プラットホーム分子である。用語「キャリア」および
「部分」は、本明細書で交換可能に使用される。
【００２４】 「エピトープ提示キャリア」とは、付着または結合するエピトープを含むキャ
リアであり、少なくともいくつか（少なくとも２つ）は、目的の抗体に結合し得
る。
【００２５】 本明細書で使用される場合、「結合手プラットホーム分子」とは、不連続な数
のエピトープおよび／またはエピトープの模倣物の付着を可能にする部位を含む
非免疫原性分子を意味する。結合体または結合手プラットホーム分子の「結合価
」とは、エピトープに対する１分子当たりの付着部位の数を示す。あるいは、結
合体の結合価は、結合手プラットホーム分子へのエピトープの比（絶対かまたは
平均にかかわらず）である。
【００２６】 キャリア（結合手プラットホーム分子を含む）を記載するために使用される場
合、「非免疫原性」は、免疫応答（すなわち、Ｔ細胞応答および／またはＢ細胞
応答）を誘発することが出来ない、および／または個体にそれ自身が投与された
場合に十分な免疫応答を誘発することが出来ないキャリア（例えば、結合手プラ
ットホーム分子）を意味する。受容可能な免疫応答の程度は、結合手プラットホ
ーム分子が使用される背景に依存し、そして経験的に決定され得る。
【００２７】 キャリア（例えば、結合手プラットホーム分子）に「結合する」エピトープは
、共有結合および／または共有結合性の相互作用のいずれかによってキャリアに
付着したエピトープである。
【００２８】 「安定な複合体」は、複合体の形成後、引き続く検出および／または除去が可
能であるように十分に持続する複合体である。
【００２９】 「Ｔ細胞エピトープ」は、Ｔ細胞が、抗原特異的な特異的結合部位を有するた
めの構成成分またはその部分を意味し、結合部位への結合の結果、Ｔ細胞を活性
化する。本発明の実施形態が、Ｔ細胞エピトープを「欠く」として記載される場
合、このことは、Ｔ細胞エピトープが、当該分野で標準的なアッセイを使用して
検出され得ないということを意味すると解釈される。本発明の目的に関して、Ｔ
細胞エピトープを「欠く」エピトープは、このエピトープが、処置された個体（
すなわち、エピトープ提示キャリアを受けた個体）において、Ｔ細胞活性化を引
き起こすＴ細胞エピトープを欠くことを意味する。例えば、エピトープは、おそ
らく、個体または個体の群に関するＴ細胞エピトープを欠き得るが、他の個体に
関するＴ細胞エピトープを保有し得る。Ｔ細胞エピトープの存在を検出するため
の方法は、Ｔ細胞増殖（例えば、チミジン取込み）を検出するアッセイを含む。
バックグラウンドより上の統計学的に有意なチミジンの取込み（すなわち、一般
的に、標準的な統計学的方法を使用して、ｐが０．０５未満）を誘導することが
出来ないポリペプチドまたは他の抗原は、一般的にＴ細胞エピトープを欠くと考
えられるが、定量的なチミジン取込みの量が、試験されるポリペプチド（または
他の抗原）に依存して変化し得ることが理解される。一般的に、約２〜３より下
（より好ましくは、約１より下）の刺激指標（ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎｄ
ｅｘ）は、Ｔ細胞エピトープの欠失を示す。Ｔ細胞エピトープの存在はまた、標
準的な方法に従うＴ細胞由来リンフォカインの分泌を測定することにより決定さ
れ得る。Ｔ細胞エピトープの位置および含量は、存在する場合、経験的に決定さ
れ得る。
【００３０】 本明細書で使用される場合、用語「血液」とは、細胞構成成分および血漿を含
む体液である。「血液」は、全血またはその構成成分を意味する。「個体の血液
」を処理するとは、個体の血液のいくらかまたは全体を処理することを意味する
。
【００３１】 「安定な複合体」とは、複合体の形成後、引き続く検出および／または除去が
可能であるように十分に持続する複合体である。
【００３２】 （本発明の方法） 本発明は、抗体、特に、疾患に関連する抗体の循環しているレベルを減少する
方法を提供する。これらの方法は、一般的に、有効な量のエピトープ提示（抗原
提示を含む）キャリア（またはエピトープ提示キャリアを含む組成物）を個体に
投与する工程を含む。これらの方法は、アフェレーシスのような当該分野で公知
の他の方法を用いるよりも、より単純かつ所望する方法で安全なクリアランス（
すなわち、炎症および／または他の所望されない副作用が無い）および迅速なク
リアランスをもたらすために特に有用である。本発明者らは、特定の理論によっ
て結合されることを望まなければ、多価キャリア上に抗体を結合することにより
、十分に大きい複合体は、形成されるようであり、これは、所望されない副作用
（例えば、炎症）を引き起こす過剰に大きな多価複合体を形成することなく、循
環から迅速なクリアランスに効果を与え得るが、以下に述べるように循環してい
る抗体のレベルの「減少」は、本発明の目的に関してこのクリアランスを必要と
しないことを述べる。循環している抗体の初期の減少は、エピトープ提示キャリ
アの結合によるものであり、そしてさらに、より効果的な減少がクリアランスに
よって得られる。
【００３３】 本発明の目的に関して、抗体の減少および／または除去は、好ましくは選択的
であり、すなわち、減少または除去が所望される抗体のみが影響される。しかし
、目的の抗体を含むより大きなクラスの抗体が除去されることは、受容可能であ
り得る。エピトープによる結合の交差反応性の延長は、一般的に、循環から除去
された抗体の型に支配される。好ましくは、減少（例えば、力価に反映されるよ
うな）は、好ましくは少なくとも約５０％、好ましくは少なくとも約６０％、好
ましくは少なくとも約８０％、好ましくは少なくとも約８５％、好ましくは少な
くとも約９０％、好ましくは少なくとも約９５％である。本発明の目的に関して
、全部の減少（すなわち、１００％）は、これらの方法が有効であることに、効
果的である必要はないことが理解される。結合アッセイまたは中和アッセイのい
ずれかによる抗体力価を測定する方法は、当該分野で周知である。
【００３４】 特定のサブクラスの抗体を減少および／または除去することが所望され得ると
いうこと、そして、抗体に結合する全てのクラスのエピトープを減少および／ま
たは除去することは必要ではないこともまた理解される。例えば、ＩｇＭ抗体は
、異種移植において急性拒絶を媒介するので、この型のαＧａｌ抗体の減少が示
され得る。例えば、本発明者らは、αＧａｌ抗体の場合において、結合価の変化
に影響し得、そして特定のクラスの抗体の吸収（結合）に有意な影響を有しうる
ことを見出した（例えば、実施例の節に記載）。
【００３５】 いくつかの実施形態において、個体において循環している、疾患に関連する抗
体のレベルを減少するための方法を提供し、有効な量のエピトープ提示キャリア
（またはエピトープ提示キャリアを含む組成物）を個体に投与する工程を包含し
、このキャリアは、抗体を吸収（すなわち、結合）するために有効な様式でエピ
トープを提示するキャリアに結合した複数のエピトープを含む。
【００３６】 エピトープ提示キャリアは、多価性であり、すなわち、１つより多くのエピト
ープを提示し得る。好ましくは、結合価は、少なくとも２である。他の実施例に
おいて、結合価は、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも６、少なくとも８
、少なくとも１０、少なくとも１２、少なくとも１６、少なくとも２０、少なく
とも２４、少なくとも３０、少なくとも３２、少なくとも３６、少なくとも４０
、少なくとも４２、少なくとも４６、少なくとも５０である。結合価の上限は、
エピトープ提示キャリアが、所望しない副作用なしに減少および／またはクリア
ランスをもたらす限り、必ずしも重要ではない。 いくつかの実施形態において、結合価は２である。他の実施形態において、結合
価は４である。他の実施形態において、結合価は６である。他の実施形態におい
て結合価は、以下のうちのいずれかである：８；１０；１２；１６；２０；２２
；２４；２６；２８；３０；３２；３４；３６；３８；４０；４２；４４；４６
；４８；５０；５２；５４；５６；５８；６０；６２；６４；６６；６８；７０
；および１２８まで２ずつ増加。
【００３７】 （エピトープ提示キャリア） 任意の種々のキャリアは、そのキャリアが所望でないかまたは受容可能でない
免疫応答を惹起しない限り、使用され得る。そのキャリアは、任意の化学部分で
あり得、そして任意の化学構造（有機および無機分子、ポリペプチド（すなわち
、アミノ酸のポリマー）、核酸、炭水化物、その他のポリマー、人工構造、およ
び標準的な技術で作製されたかまたは米国特許第５，５１２，２９４号に記載さ
れるようにポリマー化された脂質構造（例えば、リポソームまたはミセル）を含
むがこれらに限定されない）を有する。
【００３８】 キャリアは、タンパク質性または非タンパク質性（すなわち、有機）であり得
る。タンパク質性のプラットフォームの例には、アルブミン、ガンマグロブリン
、免疫グロブリン（ＩｇＧ）、およびオボアルブミンが含まれるが、これらに限
定されない。Ｂｏｒｅｌら（１９９０） Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １
２６：１５９−１６８；Ｄｕｍａｓら（１９９５）Ａｒｃｈ．Ｄｅｍａｔｏｌ．
Ｒｅｓ．２８７：１２３−１２８；Ｂｏｒｅｌら（１９９５）Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ
．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０７：２６４−２６７；Ｂｏｒｅｌら（
１９９６）Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７７８：８０−８７。
【００３９】 好ましくは、エピトープ提示キャリアは、正確な結合価が提供される（平均と
は反対に）化学的に規定された結合価のプラットフォーム分子を含む結合体であ
る有するが提供される。例えば、共有に係る米国特許第５，１６２，５１５号；
同第５，２７６，０１３号；同第５，５５２，３９１号；同第５，３９１，７８
５号；同第５，７８６，５１２号；同第５，７２６，３２９号；同第５，２６８
，４５４号；同第５，６０６，０４７号；および同第５，６６３，３９５号を参
照のこと。共有に係る米国特許出願第０８／４８２，６５１号；同第０８／６６
０，０９２号；同第０８／７６０，５０８号もまた参照のこと。従って、規定さ
れた結合価のプラットフォームは、規定された構造、従って、規定された数の結
合点および規定された結合価を有するプラットフォームである。以前に記載され
たより伝統的なプラットフォームとは対照的に、これらのプラットフォームは、
相同な（すなわち、均一な）分子量（多分散分子量とは反対に）を有する利点を
有し、従って、「化学的に規定されている」。従って、これらのプラットフォー
ムを使用する結合体の集団が、均一な分子量のプラットフォームを含むか、また
は実質的に単分散である（すなわち、狭い分子量分布を有する）ことが理解され
る。プラットフォーム分子のサンプル（例えば、プラットフォーム分子の組成物
および／または集団）の分子量の分布の幅の尺度は、そのサンプルの多分散性で
ある。多分散性は、ポリマーサンプルの分子量の均一性または非均一性の尺度と
して使用される。多分散性は、重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）
で除算することによって計算される。Ｍｗ／Ｍｎの値は、完全に単分散のポリマ
ーについて単一性である。多分散性（Ｍｗ／Ｍｎ）は、当該分野で利用可能な方
法（例えば、ゲル透過クロマトグラフィー）によって測定される。プラットフォ
ーム分子のサンプルの多分散性（Ｍｗ／Ｍｎ）は、好ましくは、２よりも小さく
、より好ましくは、１．５よりも小さく、または１．２よりも小さく、１．０７
よりも小さく、１．０２よりも小さく、または例えば、１．０５〜１．５、また
は約１．０５〜１．２である。代表的なポリマーは、一般に、２〜５、または場
合によっては、２０以上の多分散性を有する。結合手プラットフォーム分子の低
い多分散性の特性の利点は、改善された生体適合性およびバイオアベイラビリテ
ィーを含む。なぜなら、その分子は、実質的にサイズが均一であり、そして分子
量の広範な変動に起因する生物活性の変動が最小化されているからである。従っ
て、低い多分散性分子は、薬学的に至適に処方され、そして分析が容易である。
さらに、サンプル中の分子の集団の制御された結合価が存在する。
【００４０】 いくつかの実施形態において、結合手プラットフォーム分子は、カルバミン酸
（すなわち、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ＜）である。米国特許出願第６０／１１１，
６４１号（「カルバメート結合を含む結合手プラットフォーム分子」）を参照の
こと。カルバミン酸プラットフォームの例は、化合物３０（図７）である。
【００４１】 好ましい結合手プラットフォーム分子は、生物学的に安定である。すなわち、
それらは、治療効力を与えるために、しばしば、数時間から数日から数ヶ月のイ
ンビボ排出物半減期を示し、そして好ましくは、規定された組成物の合成一本鎖
から構成される。それらは、一般に、約２００から約２００，０００の範囲、好
ましくは、約２００から約５０，０００（またはそれ以下、例えば、３０，００
０）の範囲の分子量を有する。本発明の範囲内の結合手プラットフォーム分子の
例は、ポリマーである（か、またはポリマーから構成される）（例えば、ポリエ
チレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ−Ｄ−リジン、ポリビニルアルコール、ポリ
ビニルピロリドン、Ｄ−グルタミン酸、およびＤ−リジン（３：２の比で））。
好ましいポリマーは、約２００から約８，０００の分子量を有するポリエチレン
グリコール（ＰＥＧ）に基づく。本発明の結合体における使用のための他の適切
なプラットフォーム分子は、アルブミンおよびＩｇＧである。
【００４２】 本発明の範囲内の使用に適切な好ましい結合手プラットフォーム分子には、共
有に係る米国特許第５，５５２，３９１号に開示される化学的に規定された、非
ポリマー性の、結合手プラットフォーム分子の例が含まれる。本発明の範囲内で
の使用に適切な特に好ましい均一の化学的に規定された結合手プラットフォーム
分子の例は、誘導体化２，２’−エチレンジオキシジエチルアミン（ＥＤＤＡ）
およびトリエチレングリコール（ＴＥＧ）である。
【００４３】 さらに適切な結合手プラットフォーム分子には、テトラアミノベンゼン、ヘプ
タアミノβシクロデキストリン、テトラアミノペンタエリスリトール、１，４，
８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（Ｃｙｃｌａｍ）、および１，４，７
，１０−テトラアザシクロドデカン（Ｃｙｃｌｅｎ）が含まれるが、これらに限
定されない。
【００４４】 他の実施形態において、テトラ−ブロモアセチルプラットフォームＰＩＺ／Ｉ
ＤＡ／ＴＥＧプラットフォームが使用される。ＰＩＺ／ＩＤＡ／ＴＥＧ（ＰＩＴ
Ｇ）プラットフォームの誘導体は、以下に示すように調製され得る。適切なプラ
ットフォームのその他の例については、ＰＣＴ／ＵＳ９７／１００７５およびＰ
ＣＴ／ＵＳ９６／０９９７６を参照のこと。
【００４５】 ＰＩＴＧプラットフォームに関する適合性架橋基の例。
【００４６】
【化１】 本発明の方法において使用される結合体の実施形態の例示として、ポリペプチ
ドエピトープがチオールリンカーを用いて、Ｎ末端に、化学的もしくは酵素的合
成によって、または組換え法によって調製される。リンカーは、システインまた
はＳＨ含有部分であり得る。次いで、改変されたエピトープは、適切に誘導体化
されたプラットフォーム（例えば、ブロモアセチルもしくはヨードアセチル）に
よってアルキル化され得る。
【００４７】 一般に、上記のプラットフォームは、標準的な化学合成技術によって作製され
る。ＰＥＧは、誘導体化され、そして多価にされ得、これは、標準的な技術を使
用して達成される。結合体合成のために適切ないくつかの物質（例えば、ＰＥＧ
、アルブミン、およびＩｇＧ）が、市販されている。
【００４８】 他の実施形態において、結合手プラットフォームが、使用され得、これは、結
合体化された場合に、平均の結合価（すなわち、これらのプラットフォームは、
それらの結合価に関して、化学的に規定されない）を提供する。このようなプラ
ットフォームの例は、直鎖のＰＥＧ；分枝ＰＥＧ；星形（ｓｔａｒ）ＰＥＧ；ポ
リアミノ酸（例えば、ＤＥＫ）；ポリリジン；タンパク質；アミノ官能化可溶性
ポリマーのようなポリマーである。
【００４９】 結合手プラットフォーム分子のようなキャリアを有するエピトープの共有結合
は、一般に、標準的な化学技術を使用して行われる。以下は、使用され得る標準
的な化学の例である：１）チオール置換；２）チオールＭｉｃｈａｅｌ付加；３
）アミノアルキル化；４）ジスルフィド結合形成。図４および図５は、一般的な
、例示的結合ストラテジーを提供する。
【００５０】 エピトープの結合手プラットフォーム分子への結合体化は、任意の多数の様式
（代表的には、１つ以上の架橋剤および官能基をエピトープおよび結合手プラッ
トフォーム分子上に含む）でもたらされ得る。プラットフォームおよびエピトー
プは、適切な連結基を有さなければならない。連結基は、標準的な合成化学技術
を使用してプラットフォームに添加される。連結基は、標準的な固相合成技術ま
たは組換え技術のいずれかを使用してαＧａｌエピトープに添加され得る（もし
、例えば、αＧａｌエピトープがペプチドである場合）。組換えアプローチは、
リンカーを結合するために、翻訳後修飾を必要とし得、このような方法は、当該
分野で公知である。
【００５１】 さらなる例として、エピトープがポリペプチドである場合、ポリペプチドは、
そのポリペプチドをプラットフォームに結合するための部位として機能するアミ
ノ基、カルボキシル基、またはスルフヒドリル基のような官能基を含有するアミ
ノ酸側鎖部分を含有する。このような官能基を有する残基は、そのポリペプチド
がこれらの基をすでに有しているのでない限り、そのポリペプチドに添加され得
る。このような残基は、固相合成技術または組換え技術（これらのいずれも、ペ
プチド合成の分野で周知である）によって組み込まれ得る。そのポリペプチドが
炭水化物側鎖を有する場合、官能性のアミノ基、スルフヒドリル基、および／ま
たはアルデヒド基は、従来の化学によって、そこに組み込まれ得る。例えば、一
級アミノ基は、シアノ水素化ホウ素ナトリウムの存在下でエチレンジアミンとの
反応によって組み込まれ得、スルフヒドリル基は、システアミンジヒドロクロリ
ドの反応、その後の標準的なジスルフィド還元剤での還元によって導入され得、
一方、アルデヒド基は、過ヨウ素酸酸化後に生成され得る。類似の様式で、結合
手プラットフォーム分子はまた、それが適切な官能基を既に有さない場合には、
官能基を含有するように誘導体化され得る。
【００５２】 可変長の親水性リンカーは、エピトープを結合手プラットフォーム分子に結合
するために有用である。適切なリンカーは、エチレングリコールの直鎖オリゴマ
ーまたはポリマーを含む。このようなリンカーには、式Ｒ1Ｓ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n ＣＨ2ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2）mＣＯ2Ｒ2を有するリンカーが含まれ、ここで、ｎ＝０〜
２００、ｍ＝１または２、Ｒ1＝Ｈまたは保護基（例えば、トリチル）、Ｒ2＝Ｈ
またはアルキルもしくはアリール（例えば、４−ニトロフェニルエステル）であ
る。これらのリンカーは、ハロアセチル、マレインアミドなどのようなチオール
基を含有する分子を、アミド結合を介してアミノ基を含有する第２の分子に、チ
オエーテルを介して、結合するために有用である。これらのリンカーは、結合の
順序に関してフレキシブルである。すなわち、チオエーテルが最初または最後に
形成され得る。
【００５３】 特定の結合体は、実施例２に記載され、そして図６〜１５に示され、従って、
これは、本発明の実施形態として提供される。
【００５４】 上記の考察が好ましい実施態様（すなわち、結合手プラットフォーム分子を利
用するもの）を例示するのに対し、本発明において使用されるキャリアが、その
他の多数の部分のいずれかであり得、そして上記の原理の多くが他のタイプのキ
ャリアに同様に適用されることが明らかである。
【００５５】 例として、リポソームが使用され得る。リポソーム技術は、当該分野で公知で
あり、そして本明細書中で詳細に記載される必要はない。簡単な要約として、エ
ピトープは、リポソーム中に適切に挿入され（すなわち、その結合部分が抗体へ
の結合のために利用可能であるように挿入され（これは挿入のために「テイル」
をエピトープに結合することを含み得る））、このリポソームは、サイズが多様
であり得る。Ｍａｈａｔｏら（１９９７）Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１４：８５３−
８５９。リポソーム調製物には、サイトフェクチン、多層小胞、および単層小胞
が含まれるが、これらに限定されない。ポリマー性リポソームは、米国特許第５
，５１２，２９４号に記載される。
【００５６】 別の例として、多抗原ペプチド（ＭＡＰ）が使用され得る。Ｐｏｓｎｅｔｔら
（１９８８）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６３：１７１９−１７２５；Ｔａｍ（
１９８９）Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚ．１６８：７−１５。ＭＡＰは、放射状に枝
分かれしたリジン樹状（それに対してポリペプチドエピトープが結合され得る）
を有する小さい免疫学的に不活性なコアを有する。ＭＡＰは、当該分野で公知の
方法（例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄら（１９６３）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏ
ｃ．８５：２１４９において記載されるような固相法）を使用して合成され得る
。
【００５７】 （エピトープ） 任意のエピトープまたは抗体結合部分が使用され得る。エピトープは、ポリペ
プチド、有機分子、または無機分子であり得る。このような抗体結合部分は、当
該分野で公知であり、および／または当該分野の標準的な方法およびアッセイ（
例えば、抗体結合アッセイ）を使用して開発され得る。エピトープを試験および
／または開発するためのアッセイに使用される抗体はまた、当該分野で標準的な
アッセイ（例えば、アフィニティー精製）を使用して得られ得る（または場合に
よっては、市販されていることもある）。推定エピトープまたは抗原が必要とさ
れる結合活性を示すか否かを決定するために使用され得るアッセイには、繊維状
ファージランダムペプチドライブラリーおよびスクリーニング（例えば、バイオ
パニング、マイクロパニング、ファージ捕捉ＥＬＩＳＡ、ファージＥＬＩＳＡ、
コロニーブロット、ペプチドＥＬＩＳＡ、競合結合ペプチドＥＬＩＳＡによる）
が含まれるが、これらに限定されない。
【００５８】 適切なエピトープの例には、狼蒼抗ＤＮＡ抗体（米国特許第５，１６２，５１
５号；同第５，３９１，７８５号；同第５，２７６，０１３号；５，７８６，５
１２号；同第５，７２６，３２９号；同第５，５５２，３９１号；同第５，２６
８，４５４号を参照のこと）；抗ガラクトースα１，３ガラクトシル（αＧａｌ
）抗体；抗カルジオリピン抗体；抗リン脂質抗体；ＩｇＥ抗体；抗第ＶＩＩＩ因
子抗体；抗第ＩＸ因子抗体；抗β２ＧＰＩ抗体（特に、ドメイン１）；抗血小板
抗体；特発性血小板減少症紫斑症（ＩＴＰ）に関連する抗体；抗アデノウイルス
抗体（アデノウイルスが治療剤として投与された場合に問題であり得る）；抗ア
デノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）抗体（ＡＡＶが治療剤として投与される場合、問題
であり得る）；抗α鎖アセチルコリンレセプター（重症筋無力症）；抗ＲｈＤ抗
原抗体（すなわち、Ｒｈ疾患）；抗甲状腺抗体（例えば、自己免疫甲状腺炎）、
に結合するエピトープが含まれるが、これらに限定されない。
【００５９】 特に興味深いのは、同種移植または異物移植を妨害し得る任意の所望でない血
液群抗体に結合するエピトープである。例えば、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４
ＧｌｃＮＡｃβ１-３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃβ１−構造に結合する抗体は、本願
明細書の他の箇所に記載されるαＧａｌエピトープを使用することによって除去
され得る。同様にして、多糖上の抗原部位に抗原的に類似し、そして他の炭水化
物に基づく血液群抗原（ＡＢＯシステム、ＭＮシステム、Ｌｅｗｉｓシステム、
およびＢｏｍｂａｙ表現型のものに対する抗原が含まれるが、これらに限定され
ない）に対する抗体を除去するために適切であるエピトープが設計され得る。
【００６０】 全身性紅斑性狼瘡において生じる抗ポリヌクレオチド（特に、抗二本鎖ＤＮＡ
）抗体に結合するエピトープもまた興味深い。このようなエピトープについての
好ましいプラットフォームは、テトラブロモアセチル化合物および他の四価およ
び八価の結合価のプラットフォーム分子である。Ｄ．Ｊｏｎｅｓら（１９９５）
Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３８：２１３８−２１４４；および上記の米国特許。本
発明者らは、ヒトにおけるこのような狼瘡結合体の投与が、抗ｄｓＤＮＡ抗体の
循環の減少を生じることを観察した。Ｊｏｎｅｓ（１９９５）；Ｗｅｉｓｍａｎ
ら（１９９７）Ｊ．Ｒｈｅｎｕｍ．２４：３１４−３１８；Ｉｖｅｒｓｏｎら（
１９９８）Ｌｕｐｕｓ ７（補遺２）：Ｓ１６６−Ｓ１６９。
【００６１】 本発明による抗体を除去することについての特定のエピトープの適切さは、経
験的に確認し得る。例えば、特定の自己免疫疾患についての免疫原性エピトープ
を模倣すると考えられる最適なエピトープを薬物低分子のライブラリーから選択
するために、その候補の各々が同様のキャリア分子またはプラットフォーム上に
交互に提示されるキャリアのファミリーが構築され得る。次いで、その組成物を
、効力について試験する。例えば、インビボ使用のために、所望でないタイプの
循環する抗体が存在する動物モデルを使用する。その動物は、必要であれば、抗
体応答を開始するために、適切な抗原で免疫され得る。次いで、キャリア上にア
センブリされた試験候補を使用して、意図される目的に従って、投与によってか
、またはエキソビボでの使用によってかのいずれかで、別々の動物を処置する。
その動物を処置の前および後に出血させ、そして血漿中のその抗体レベルを、特
定の抗体について適切なように、標準的なイムノアッセイによって決定する。次
いで、その候補の効力を、抗体レベルにおける減少の相対的程度に従って評価す
る。
【００６２】 いくつかの実施形態において、使用されたエピトープはＴ細胞エピトープを欠
く。Ｔ細胞エピトープを検出するための方法は、当該分野で周知である。例えば
、Ｔ細胞増殖を検出するための種々のアッセイ（例えば、チミジン組み込み）が
使用され得る。Ｔ細胞エピトープの存在もまた、Ｔ細胞由来のリンホカインの分
泌を当該分野で周知の方法によって測定することによって決定され得る。バック
グラウンドを超えるチミジンの統計学的に有意な組み込み（すなわち、標準的な
統計学的方法を使用する、一般に０．０５未満のｐ）を誘導しない抗原は、一般
に、Ｔ細胞エピトープを欠くことが考えられるが、チミジン組み込みの定量的な
量は、試験されるポリペプチドに依存して様々であり得ることが理解される。一
般に、約２〜３より低い刺激指標、より好ましくは、約１未満の刺激指標は、Ｔ
細胞エピトープの欠失を示す。Ｔ細胞エピトープの位置および含有量は、経験的
に決定される。
【００６３】 （生物学的流体からのエキソビボでの抗体の除去） 本発明はさらに、個体の生物学的流体における疾患に関連する抗体のレベルを
減少させるための方法を含み、この方法は、その流体を、抗体をキャリア上のエ
ピトープに結合させる条件下でエピトープ提示キャリアとエキソビボで接触させ
る工程を包含する。適切な体液には、血液、血漿、リンパのような個体に戻し得
る体液が含まれる。
【００６４】 アフィニティー吸着アフェレーシスは、一般に、Ｎｉｌｓｓｏｎら（１９８１
）Ｂｌｏｏｄ ５８（１）：３８−４４；Ｃｈｒｉｓｔｉｅら（１９９３）Ｔｒ
ａｎｓｆｕｓｉｏｎ ３３：２３４−２４２；Ｒｉｃｈｔｅｒら（１９９７）Ａ
ＳＡＩＯ Ｊ．４３（１）：５３−５９；Ｓｕｚｕｋｉら（１９９４）Ａｕｔｏ
ｉｍｍｕｎｉｔｙ １９：１０５−１１２；米国特許第５，７３３，２５４号；
Ｒｉｃｈｔｅｒら（１９９３）Ｍｅｔａｂｏｌ．Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．４２：８８
８−８９４；Ｒｉｃｈｔｅｒら（１９９７）ＡＳＡＩＯ Ｊ．４３（１）：５３
−５９；およびＷａｌｌｕｋａｔら（１９９６）Ｉｎｔ’ｌ Ｊ．Ｃａｒｄ．５
４：１９１−１９５。
【００６５】 従って、本発明は、個体中の疾患に関連する抗体のレベルを減少させる方法が
含まれる。この方法は、個体の血液（抗体を含むその任意の成分）を体外にて（
すなわち、体外またはエキソビボで）、エピトープ提示キャリアを、抗体がエピ
トープに結合する条件下で使用して処置する工程；抗体エピトープ提示キャリア
複合体を除去する（もしあれば）工程；およびその血液を個体に戻す工程を含む
。
【００６６】 本発明の方法において、体液は、本発明のエピトープ提示キャリアへの体外結
合のために個体から除去される。例えば、血液を除去しそしてそれをその構成成
分へと分離するための装置および方法は、当該分野で公知である（例えば、米国
特許第４，０８６，９２４号；米国特許第４，２２３，６７２号を参照のこと）
。次いで、その血液または部分を、キャリアに曝露する。そのキャリアは、所望
でない抗体を中和（すなわち、結合）し、次いでその血液成分を、その個体に戻
す。
【００６７】 好ましい技術において、抗体−キャリア複合体は、その液体がその個体に戻さ
れる前に除去される。例えば、これは、固相に結合させたキャリアを使用するこ
とによって、または可溶性キャリアを使用し、そして選択的にその複合体を処理
された溶液から除去することによって行われ得る。
【００６８】 固相を作製するために、そのキャリアを適合させて、不溶性にする。例えば、
そのキャリアが、上記の好ましいプラットフォームの１つである場合、そのプラ
ットフォームは、合成の間に化学的に適合され得、コア構造中にさらなる反応基
を含み得る。例えば、さらなる結合が、コアに存在するエチレングリコール構造
に付加され得る。次いで、その結合は、プラットフォームを不溶性の構造（例え
ば、ポリスチレンまたはポリエチレンビーズ、ポリセルロース膜、またはその他
の所望の構造）に結合させるために使用される。市販のマトリックスには、アガ
ロース（一般にＤ−ガラクトースおよび改変された３，６−無水ガラクトース残
基から構成される中性の直線状多糖（例えば、ＳｅｐｈａｒｏｓｅTM、Ｐｈａｒ
ｍａｃｉａ）、活性化ゲル、ニトロセルロース、ホウケイ酸塩、ガラス繊維フィ
ルター、シリカ、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、およびジアゾ化した紙が含ま
れる。ペプチドペプチド結合体を調製するための方法は、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，
Ｇ．Ｔ．「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ」、Ａｃａｄｅｍ
ｉｃ Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９９６；および「Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｒｏｓｓ−ｌｉ
ｎｋｉｎｇ」、Ｓ．Ｓ．Ｗｏｎｇ、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、１９９３に記載される
。処置されるべき生物学的流体は、固相と接触され、そしてその流体中の抗体が
その固相と複合体形成する。次いで、上清液を固相から除去し、個体に戻す。場
合によっては、固相はまた、適切な洗浄を使用することによる反復的使用のため
に抗体から明澄化され得る（エピトープおよびキャリアの両方が、その洗浄溶液
に対して抵抗性である場合）。適切な洗浄溶液は、０．１Ｍのグリシン緩衝液（
ｐＨ２．４）、希酢酸、または１Ｍ ＫＳＣＮ（約ｐＨ７に緩衝化したもの）を
含み得る。
【００６９】 そのキャリアが固相の一部でない場合、抗体キャリア複合体は、任意の他の適
切な方法（マイクロフィルトレーション、抗体捕捉、または沈降が含まれるが、
これらに限定されない）によって液体から除去され得る。複合体の沈降を引き起
こすのに適切な溶液は、その複合体の可溶性に依存し、そして硫酸アンモニウム
またはポリエチレングリコールを含み得る。その流体がその個体に戻される場合
、次いで、その沈降溶液は、その流体中に残存するものが有害な反応を個体にお
いて引き起こさないように選択されるべきである。
【００７０】 本明細書に記載されるインビボおよびエキソビボの方法が、互いに組み合わせ
て使用され得ることが理解される。
【００７１】 本発明はまた、本発明のエピトープ提示キャリアを使用して、生物学的流体に
おいて抗体のレベルを減少させるために使用され得るデバイスを意図する。代表
的には、そのデバイスは、フローシステムであり、以下のエレメントを含む：ａ
）生物学的流体をそのデバイスへ流すことを可能にするポート；ｂ）その流体が
エピトープ結合キャリアと（必要に応じて固相において）接触することを可能に
されるチャンバ；ｃ）処理された流体がデバイスから流れ出ることを可能にする
ポート。このようなデバイスは、連続流システムとして、および引き続く時点で
の分析または再投与の目的で個体からの単一のサンプルの処理を可能にするシス
テムとして設計され得る。
【００７２】 （投与および処方） エピトープ提示キャリアの種々の処方物は、投与のために使用され得る。いく
つかの実施形態において、エピトープ提示キャリアは、きちんと整えられて（ｎ
ｅａｔ）投与され得る。好ましくは、エピトープ提示キャリアは、エピトープ提
示キャリアおよび薬学的に受容可能な賦形剤を含む組成物中にあり、そして種々
の処方物中であり得る。薬学的に受容可能な賦形剤は、当該分野で公知であり、
そして薬理学的に有効な物質の投与を容易にする比較的不活性な物質である。例
えば、賦形剤は、形態または一貫性を付与し得るか、または希釈剤として作用し
得る。適切な賦形剤には、安定化剤、湿潤剤、および乳化剤、浸透圧を変化させ
る塩、カプセル化剤、緩衝剤、および皮膚透過促進剤が含まれるが、これらに限
定されない。賦形剤ならびに非経口および非非経口薬物送達のための処方物は、
Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 第
１９版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ（１９９５）に示される。
【００７３】 一般に、これらの組成物は、注射による投与（例えば、腹腔内、静脈内、皮下
、筋肉内など）のために処方される。従って、これらの組成物は、好ましくは、
生理食塩水、Ｒｉｎｇｅｒ溶液、デキストロース溶液などのような薬学的に受容
可能なビヒクルと組み合わせられる。一般に、エピトープ提示キャリアは、実際
的、経験的な考慮（例えば、可溶性および浸透圧）に起因して、処方物の約０．
０１重量％〜１０重量％を構成する。特定の投薬量レジメン（すなわち、用量、
タイミング、および反復）は、とりわけ、臨床的な徴候および特定の個体および
その個体の病歴に依存する。一般に、約１μｇ〜約１００ｍｇの結合体／ｋｇ体
重、好ましくは、約１００μｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは、約５０μ
ｇ〜約５ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは、約１μｇ〜約１ｇ結合体／ｋｇ体重、好
ましくは、約５μｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇ体重が投与される。経験的な考慮（例
えば、半減期）は、一般に、投薬量を決定することに寄与する。エピトープ提示
キャリアは、毎日投与され得、その後より頻繁でない（例えば、週２回、週１回
、またはさらにより頻繁でなく）投与が続く。他の実施形態において、エピトー
プ提示キャリアは、より頻繁でなく（すなわち、隔週、毎週、１０日に一回、ま
たは２週間おきに）投与される。投与の頻度は、治療の経過にわたって決定され
得、そして調整され得、そして所望の抗体のレベルを維持することに基づく。他
の適切な投薬スケジュールは、個体または疾患状態に依存して、毎日または週に
３回の用量の頻度であり得、または週に１回の用量、または２〜４週間に１回の
用量、または月に１回の用量、またはより頻繁でないスケジュールであり得る。
反復投与は、所望のレベルの抗体を達成するためおよび／または維持するために
必要とされ得る。あるいは、組成物の徐放処方物は、適切であり得る。徐放を達
成するための種々の処方物およびデバイスは、当該分野で公知である。他の処方
物には、経口投与に適切なものが含まれ、これらは、エピトープ提示キャリアが
粘膜を通過することができれば、適切であり得る。同様に、エアロゾル処方物が
適切であり得る。
【００７４】 いくつかの実施形態において、１つより多いエピトープ提示キャリアが組成物
中に存在し得る。このような組成物は、少なくとも１つの、少なくとも２つの、
少なくとも３つの、少なくとも４つの、少なくとも５つの異なる結合体を含み得
る。このような「カクテル」は、それらがしばしば当該分野で表示されるように
、より広い範囲の個体の集団を処置するために特に有用であり得る。それらはま
た、たった１つの（またはカクテルに含まれるよりも少ない）エピトープ提示キ
ャリアを使用するより有効であるにおいて有用であり得る。
【００７５】 その組成物は、単独で、またはエピトープ提示キャリアの効力を促進および／
または補充するように作用する薬剤の他の形態との組み合わせで投与され得る。
さらに、またはあるいは、投薬量レジメンは、１つのエピトープ提示キャリアで
開始され得、次いで、別のものにスイッチされ得る。
【００７６】 エピトープ提示キャリア（またはエピトープ提示キャリアを含む組成物）の投
与に適切な個体は、所望でないレベルの疾患に関連する抗体（例えば、上記のも
の）を示すものである。疾患に関連する抗体のレベルは、ＥＬＩＳＡのような当
該分野で標準的なアッセイを使用して決定され得る。好ましくは、個体はヒトで
ある。測定可能な循環レベルの疾患関連抗体は、検出可能である必要はなく、こ
のような抗体が産生されることが（例えば、危険因子；遺伝的因子；環境因子；
および他の公知の病因のために）予測可能であり得る。従って、本発明の方法は
また、予防的効果が予測される場合に関連する。
【００７７】 好ましい実施態様において、エピトープ提示キャリア（例えば、結合手プラッ
トフォーム結合体）が、その効果の持続時間が、その他のエピトープ提示キャリ
アと比較した場合よりも長くなるように、投与される。この傾向において、（ａ
）使用される特定のキャリア；（ｂ）結合価；（ｃ）エピトープのタイプ；（ｄ
）投薬量レジメン；および（ｅ）投与の手段のような考慮は、この持続時間を生
成する要因となり得る。上記の任意の１つ以上の因子は、効果の持続時間の程度
（すなわち、抗体が減少される時間の長さ）のための基礎を提供し得る。同様に
、上記の因子の任意の１つ以上は、抗体の減少の迅速さのための基礎を提供し得
る。
【００７８】 （本発明の方法と組み合わせて使用するためのキット） 本発明はまた、本明細書中に記載される組み合わせて使用するためのキットを
含む。いくつかの実施形態において、このキットは、循環する抗体レベル（すな
わち、疾患関連抗体）のインビボでの減少をもたらす。他の実施形態において、
そのキットは、免疫吸着抗ウイルス抗体複合体の体外での選択的形成および／ま
たは除去（すなわち、エキソビボ除去）をもたらす。これらのキットは、除去の
ために標的化されたいかなる抗体についても特異的な成分を含む。他の実施形態
において、キットおよび組成物は、減少されるべき抗体の検出における使用のた
めに提供される。これらのキットは、（ａ）個体が疾患に関連する抗体の選択的
除去のために指示されるか否かを評価すること（例えば、力価が必要な閾値より
上であると考えられる場合）；（ｂ）処置（すなわち、選択的除去）の後に個体
をモニターして、さらなる充分な除去が生じたか否か、および／またはさらに指
示されるか否か（例えば、ある時間の期間が除去後に経過して、そして抗ウイル
ス抗体の力価が上昇してしまった場合、または必要な閾値を通過してしまった場
合、およびウイルス治療剤での処置がなお指示される場合）を決定すること；（
ｃ）どの抗体を、個体が産生しているか（これは、どの抗体（単数または複数）
が選択的に除去されるべきかを示す）を評価するのを補助する。これらのキット
は、減少および／または除去のため、検出および／またはモニタリングの補助の
ために標的化された抗体に特異的な成分を含有する。
【００７９】 これらのキット（特に、抗体の選択的除去をもたらすために使用されるもの）
がまた、「システム」として示され得ることが理解される。
【００８０】 本発明のキットは、適切なパッケージングにおいて除去されるべき特異的に結
合するエピトープ提示キャリア（好ましくは、キャリアが結合手プラットフォー
ム分子である）を含む。好ましくは、そのキットはまた、その使用のための説明
書を含む。適切なキャリア（エピトープに結合体化したものを含む）は、上記で
考察されている。
【００８１】 本発明のキットはさらに、モニタリング目的のために有用である、減少および
／または除去のために標的化された抗体の存在（および／または抗体のレベル）
を試験するための試薬を含み得る。
【００８２】 以下の実施例は、例示するために提供されるが、本発明を限定するためではな
い。
【００８３】 （実施例） （実施例１：αＧａｌエピトープの合成） 本開示において使用される一般的な分析方法および特徴づけの技術は、以下の
通りである。ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＣ３００分光計によって、 1 Ｈについては３００ＭＨｚ、13Ｃについては７５ＭＨｚで記録した。ケミカル
シフトは、ＴＭＳ（すなわち、テトラメチルシラン、δ＝０．０ｐｐｍ）または
重水素化された溶媒の残留シグナル（クロロホルム（1Ｈではδ＝７．２７ｐｐ
ｍ；13Ｃではδ＝７７．２３ｐｐｍ）、メタノール（1Ｈではδ＝４．８７ｐｐ
ｍ；13Ｃではδ＝４９．１５ｐｐｍ）、およびＤ2Ｏ（1Ｈではδ＝４．８０（Ｄ
ＳＳ）ｐｐｍ））に対して１００万分率（δ）で記録した。結合定数（Ｊ）は、
ヘルツで記録した。分析用ＨＰＬＣの分析は、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８カラム（４．
６×２５０ｍｍ、５μｍの微粒子サイズ）を備えたＨｅｗｌｅｔｔ Ｐａｃｋａ
ｒｄ 液体クロマトグラフィー ＨＰ １０９０機器で行った。分取用ＨＰＬＣ
は、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８カラム（２２×２５０ｍｍ、１０μｍの微粒子サイズ）
を備えたＤｙｎａｍａｘ ＳＤ ２００システムで行った。マススペクトルは、
Ｆｉｎｎｉｇａｎ ＬＣＱ質量分析計で記録した。
【００８４】 （αＧａｌエピトープ、２−［２−（２−チオエトキシ）エトキシ］エチル３
−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシドの酵素合
成）合成の反応スキームの図解を、図１に示す。
【００８５】 （化合物２） Ｓ−２−［２−（２−ヒドロキシルエトキシ）エトキシ］エチルチオベンゾエ
ート ２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エタノール、化合物１（２０ｇ
、０．１２ｍｏｌ）およびチオ安息香酸（１６．４ｇ、０．１２ｍｏｌ）の混合
物に、１２ｇのトリエチルアミンを室温で添加した。次いで、この混合物を９０
℃で１時間攪拌した。室温まで冷却した後、この反応混合物に酢酸エチル（１０
０ｍＬ）を添加し、そして濾過した。この濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグ
ラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、１：１）を通して精製し、化合物２（３０．
６ｇ、９５％）を橙色シロップとして得た。
【００８６】
【数１】 （化合物４） ２−［２−（２−ベンゾイルチオエトキシ）エトキシ］エチル２，３，４，６
−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド 化合物２（７．７９ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）およびアセトブロモ−α−Ｄ−ガ
ラクトース、化合物３（１７．８０ｇ、４３．２８ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ2Ｃｌ2 （１００ｍＬ）溶液に、Ａｇ2ＣＯ3（９．２７ｇ、３６．１ｍｍｏｌ）および活
性化した４Åのモレキュラーシーブ（粉末、１０ｇ）を０℃で添加した。室温で
３日間攪拌した後、この反応混合物をセライトを通して濾過し、そしてこの濾液
を濃縮し、そしてシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、４：
１）を通して精製し、化合物４（１２．２９ｇ、７１％）を無色シロップとして
得た。
【００８７】
【数２】 （化合物６） ２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブチルジチオエトキシ）エトキシ］エチルβ−Ｄ
−ガラクトピラノシド メタノール（１５ｍＬ）中の化合物４（３．４７ｇ、５．７７ｍｍｏｌ）の攪
拌溶液に、ＮａＯＣＨ3（０．５０ｇ、９．２８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。
３時間後、ジエチル１−（ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−１，２−ヒドラジンジカル
ボキシレート（ｄｉｅｔｈｙｌ １−（ｔｅｒｔ−ｂｙｔｙｌｔｈｉｏ）−１，
２−ｈｙｄｒｚａｉｎｅｄｉｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）、化合物５（２．２ｇ、
８．３ｍｍｏｌ）（これは、（Ｗｕｎｓｃｈ，Ｅ．ら、Ｈｏｐｐｅ−Ｓｅｙｌｅ
ｒ’ｓ Ｚ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９８２）３６３：１４６１−１４
６４）に記載のように調製した）を添加した。この反応混合物を、室温でさらに
２時間攪拌した。次いで、この溶液を中和するためにＤｏｗｅｘ ５０Ｘ２−４
００樹脂を添加し、そして濾過した。この濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグ
ラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ、９：１）を通して精製し、化合物６（１．２
２ｇ、５１％）を白色固体として得た。
【００８８】
【数３】 （化合物７および８） ２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブチルジチオエトキシ）エトキシ］エチル３−Ｏ
−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（７） ２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブチルジチオエトキシ）エトキシ］エチル３−Ｏ
−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（８）： 化合物６（２．８７ｇ、６．８９ｍｍｏｌ）およびｐ−ニトロフェニルα−Ｄ
−ガラクトピラノシド（２００ｍｇ）の、１０ｍＬのリン酸ナトリウム緩衝液（
５０ｍＭ、ｐＨ６．５）溶液に、２０ｍｇのコーヒー豆α−ガラクトシダーゼを
添加した。この反応を、室温で、３００ｍＭのｐ−ニトロフェノールが生成する
まで（３ｄ）、ドナーを徐々に添加して進行させた。この反応混合物を凍結乾燥
し、そしてこの残渣をメタノールに懸濁させ、濾過し、そして濃縮した。未反応
の出発物質（２．５ｇ）をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯ
Ｈ、９５：５〜７０：３０）によって回収した。生成物を、Ｐ２ゲル濾過カラム
で、水で溶出して第１精製を行い、ついで逆相ＨＰＬＣカラムを行い、化合物７
（８０ｍｇ、２．０％）および化合物８（１０６ｍｇ、２．６％）を白色固体と
して得た。化合物７について：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍＬ／分の流速において
、ｔR８．４９分、Ｈ2Ｏ中２５〜３０％ＡＣＮの勾配、純度１００％。
【００８９】
【数４】 化合物８について：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍＬ／分の流速において、ｔR７．
１４分、Ｈ2Ｏ中２５〜３０％ＡＣＮの勾配、純度１００％。
【００９０】
【数５】 これらの２つの二糖を、ピリジン中、Ａｃ2Ｏを用いて室温で一晩アセチル化
した後、さらに特徴付けた：アセチル化した化合物７について：
【００９１】
【数６】 そしてアセチル化した化合物８について：
【００９２】
【数７】 （αＧａｌエピトープ、２−［２−（２−チオエトキシ）エトキシ］エチル３
−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシドの化学合
成）この反応を図解する反応スキームを、図２に示す。
【００９３】 （化合物１０） ２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エチル２，３，４，６−テトラ
−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ガラクトースペンタアセテート、化合物９（７０ｇ、１７９ｍｍｏｌ）、２−
［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エタノール（４５．４ｇ、２７０ｍｍ
ｏｌ）および活性化された４Åのモレキュラーシーブ（２０ｇ）の乾燥ＣＨ2Ｃ
ｌ2（５００ｍＬ）の混合物に、ＢＦ3Ｅｔ2Ｏ（５２ｇ、３７０ｍｍｏｌ）を、
室温で３時間滴下した。２日間攪拌した後、この懸濁液をセライトを通して濾過
し、この濾液を、氷浴で冷却された３００ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ3水溶液に注い
だ。この有機相を分離し、そして水相をＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。合わせた有機相
をブラインで洗浄し、乾燥し、そして濃縮した。この残渣を、シリカゲルクロマ
トグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、１：１）を通して精製し、化合物１０（
６７ｇ、７５％）を無色油状物として得た。
【００９４】
【数８】 （化合物１１） ２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エチルβ−Ｄ−ガラクトピラノ
シド ２００ｍＬのメタノールおよび２５０ｍＬの１Ｍ Ｋ2ＣＯ3水溶液中の化合物
１０（６７ｇ、１３４ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩攪拌した。この反応混合
物を、氷水浴で冷却した７００ｍＬのメタノールに注いだ。この沈殿を、セライ
トを通して濾過し、メタノールで洗浄した。この濾液を合わせ、そしてＤｏｗｅ
ｘ樹脂（Ｈ形態）を用いてｐＨ６まで中和した。この樹脂を濾過し、水で洗浄し
た。この濾液を濃縮し、そして凍結乾燥して、化合物１１（３７ｇ、８３％）を
無色油状物として得た。
【００９５】
【数９】 （化合物１２） ２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エチル３−Ｏ−ｐ−メトキシベ
ンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド 乾燥ＭｅＯＨ（３００ｍＬ）中の、化合物１１（３７ｇ、１１２ｍｍｏｌ）お
よび酸化ジブチルスズ（４６ｇ、２１０ｍｍｏｌ）の混合物を、透明になるまで
窒素下で還流した（１０時間）。この反応混合物を濃縮し、そして残渣を真空下
で乾燥した。この残渣を８００ｍＬのジオキサンに溶解させ、そして８０ｍＬの
ＤＭＦおよびｐ−メトキシベンジルクロリド（３２ｇ、２８ｍｌ、０．２０ｍｏ
ｌ）を添加した。この得られた混合物を１００℃で１０時間攪拌して、沈殿を有
する茶色がかった溶液を得た。室温まで冷却した後、この沈殿をセライトを通し
て濾過によって取り除き、ジオキサン（１００ｍＬ）およびクロロホルム（１０
０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機相を濃縮し、そしてシリカゲルクロマトグラ
フィー（酢酸エチル）によって精製して、化合物１２（３０ｇ、６０％）を無色
油状物として得た。
【００９６】 （化合物１３） ２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エチル２，４，６−トリ−Ｏ−
アセチル−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド 化合物１２（３０ｇ、６６．５ｍｍｏｌ）を、ピリジン（１５０ｍＬ）中、Ｄ
ＭＡＰ（１２０ｍｇ）によって触媒して、Ａｃ2Ｏ（１５０ｍＬ）を用いてアセ
チル化した。５時間攪拌した後、この反応混合物を濃縮した。この残渣をクロロ
ホルム（３００ｍＬ）に溶解し、そしてＨＣｌ溶液（０．５Ｍ）、水、飽和水性
ＮａＨＣＯ3およびブラインで洗浄した。この有機相を無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し
、そして濃縮して、化合物１３（３４ｇ、８９％）を無色油状物として得た。
【００９７】
【数１０】 （化合物１４） ２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エチル２，４，６−トリ−Ｏ−
アセチルβ−Ｄ−ガラクトピラノシド ３００ｍＬのＣＨ3ＣＮ／水（９：１）中の化合物１３（３４ｇ、５９ｍｍｏ
ｌ）の溶液に、ＣＡＮ（６４ｇ、１２０ｍｍｏｌ）を０℃で３時間かけてゆっく
りと添加した。添加後、この混合物を同じ温度で３時間攪拌した。次いで、この
反応混合物を濃縮し、２５０ｍＬの水で希釈して、そしてクロロホルムで抽出し
た。この有機抽出液を、飽和水性ＮａＨＣＯ3およびブラインで洗浄し、無水Ｎ
ａ2ＳＯ4で乾燥し、そして濃縮した。この残渣をフラッシュカラムクロマトグラ
フィー（ヘキサン／酢酸エチル、３：１〜２：３）を通して精製し、化合物１４
（２０．４ｇ、７６％）を無色油状物として得た。
【００９８】
【数１１】 （化合物１６） ２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エチル３−Ｏ−（２，３，４，
６−テトラ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２，４，６−トリ
−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド 乾燥エーテル（３００ｍＬ）中の、化合物１４（１０ｇ、２２ｍｍｏｌ）、化
合物１５（２５．４ｇ、４５ｍｍｏｌ）、４−メチル−２，６−ジ−ｔ−ブチル
ピリジン（６．８ｇ、３３ｍｍｏｌ）、および活性化した４Åのモレキュラーシ
ーブ（１０ｇ）の混合物に、エーテル（５０ｍＬ）中のメチルトリフレート（７
．２ｍＬ）の溶液を、シリンジポンプを通して２４時間かけて滴下した。室温で
３６時間攪拌した後、この反応混合物をセライトを通して濾過した。この濾液を
濃縮し、そしてシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、４：１
〜１：１）を通して精製して、化合物１６（１７．３ｇ、８１％）を黄色がかっ
た油状物として得た。
【００９９】
【数１２】 （化合物１７） ２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エチル３−Ｏ−α−Ｄ−ガラク
トピラノシル−２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ３００ｍＬのメタノールおよび１．５ｍＬの酢酸中の、化合物１６（１８．１
ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（２０％、３ｇ）の混合物を、室温、水
素圧力下（５０ｐｓｉ）で９時間振盪した。この反応混合物をセライトを通して
濾過し、そして濃縮した。酢酸の除去を補助するために水（１０ｍＬ）をこの残
渣に添加し、そして粗生成物を、精製なしで次の反応に直接使用した。
【０１００】
【数１３】 （化合物１８） ２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エチル３−Ｏ−α−Ｄ−ガラク
トピラノシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ４０ｍＬの１Ｍ ＮａＯＨおよび３００ｍＬのメタノール中の、化合物１７の
溶液を、室温で６時間攪拌した。この反応混合物をＤｏｗｅｘ樹脂（Ｈ形態）を
用いてｐＨ６まで中和し、濾過し、凍結乾燥して化合物１８（８．９ｇ、９７％
）を白色固体として得た。
【０１０１】
【数１４】 （化合物１９） ２−［２−（２−アセチルチオエトキシ）エトキシ］エチル３−Ｏ−（α−Ｄ
−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド １００ｍＬの１Ｍ チオ酢酸カリウム中の化合物１８（８．９ｇ、１８．１ｍ
ｍｏｌ）の溶液を、窒素下、９５℃で３６時間攪拌した。この反応混合物を冷却
し、そしてＤｏｗｅｘイオン交換樹脂（Ｈ形態、１００ｇ）を充填したカラムに
ロードし、水で溶出した。この水溶液をＤｏｗｅｘ Ｍａｒａｔｈｏｎ ＷＢＡ
アニオン交換樹脂（ｐＨ２〜５）を用いて中和し、濾過し、そして凍結乾燥して
化合物１９（７．５ｇ、７８％）をオフホワイトの固体として得た。
【０１０２】
【数１５】 （化合物２０） ２−［２−（２−チオエトキシ）エトキシ］エチル３−Ｏ−（α−Ｄ−ガラク
トピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ５０ｍＬのメタノール中の、化合物１９（６５０、１．２２ｍｍｏｌ）および
予めメタノール洗浄した４ｇのＤＯＷＥＸ ５５０Ａ ＯＨアニオン交換樹脂の
混合物を、室温で一晩攪拌した。この反応混合物を濾過し、そしてこの樹脂を、
５％の酢酸を含むメタノールで洗浄した。この濾液を濃縮して、化合物２０（５
７８ｍｇ、９７％）を白色固体として得た。
【０１０３】
【数１６】 樹脂上に合成的に調製されたαＧａｌエピトープは、正常なアカゲザルまたは
ヒトの血清から９５％より多くの抗αＧａｌ Ｉｇを取り除くその能力（ＦＡＣ
Ｓによって測定）によって実証されたように、抗原性活性であった。
【０１０４】 （化合物２２） ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル−α−Ｄ−ガラクト
ピラノシド αＧａｌエピトープ、ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
ル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（２２）の化学酵素的合成を図解する反応スキ
ームを、図３に示す。ｐ−ニトロフェニル３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル
−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物２１）を、Ｎｉｌｓｓｏｎ（Ｔｅｔｒａ
ｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．（１９９７）３８：１３３−１３６）に記載のように
酵素的に調製した。メタノール（４ｍＬ）中の、ｐ−ニトロフェニル３−Ｏ−α
−ガラクトピラノシル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（７０ｍｇ、０．１５ｍｍ
ｏｌ）および１０ｍｇのＰｄ／Ｃ（１０％）の混合物を水素下、室温で一晩攪拌
した。次いで、この反応混合物をセライトを通して濾過し、そしてこの濾液を真
空下で濃縮して、黄色がかった固体（５０ｍｇ）として得た。
【０１０５】
【数１７】 （実施例２：結合手プラットフォームの合成） （化合物２３の合成） 水／ジオキサン、１／１中の１，４−ジアミノブタンおよびＮａＨＣＯ3の溶
液を、無水ブロモ酢酸で処理した。この混合物をＣＨ2Ｃｌ2で抽出し、このＣＨ 2 Ｃｌ2層を乾燥させ、そして濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルクロマト
グラフィーで精製して、化合物２３を得た。
【０１０６】 （化合物２４の合成） 水／ジオキサン、１／１中の４，７，１０−トリオキサ−１，３−トリデカン
ジアミンおよびＮａＨＣＯ3の溶液を、無水ブロモ酢酸で処理した。この混合物
をＣＨ2Ｃｌ2で抽出し、このＣＨ2Ｃｌ2層を乾燥させ、そして濃縮して粗生成物
を得、これをシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、化合物２４を得た。
【０１０７】 （化合物２９の合成） 化合物２９の合成のためのストラテジーを、図２４に示す。
【０１０８】 化合物Ａ：水性ジオキサン中の１，３−ジアミノ−２−ヒドロキシプロパンの
溶液を、ジ−ｔ−ブチルジカーボネートおよびＮａ2ＣＯ3で処理した。この混合
物をＣＨ2Ｃｌ2で抽出し、そしてこのＣＨ2Ｃｌ2層を乾燥し、そして濃縮して粗
生成物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｂを得た
。
【０１０９】 化合物Ｂを、ピリジン中、ｐ−トルエンスルホン酸塩化物で処理した。この混
合物をＨＣｌ水溶液で酸性化し、そしてＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。このＣＨ2Ｃｌ2 層を乾燥し、そして濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィ
ーで精製して、化合物Ｃを得た。
【０１１０】 適切な溶媒中の化合物Ｃの溶液を、チオ安息香酸および適切な塩基で処理した
。この混合物をＣＨ2Ｃｌ2で抽出し、そしてこのＣＨ2Ｃｌ2層を乾燥し、そして
濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、化合
物Ｄを得た。
【０１１１】 ＭｅＯＨ中の化合物Ｄの溶液を、チオベンゾエートエステルが加水分解される
のをＴＬＣで確認するまで、１当量のＮａＯＨを用いて処理する。得られた混合
物に、０．２５当量の化合物２６を添加する。反応の完了をＴＬＣで確認するま
で、この混合物を攪拌する。この混合物をＨ2ＳＯ4水溶液で酸性化し、そしてＣ
Ｈ2Ｃｌ2で抽出する。このＣＨ2Ｃｌ2層を乾燥させ、そして濃縮して粗生成物を
得、これをシリカゲルクロマトグラフィーで精製して化合物Ｅを得る。
【０１１２】 化合物Ｅを、トリフルオロ酢酸で処理して、ＢＯＣ保護基を取り除く。この混
合物を濃縮し、そしてこの残渣を、１／１ ジオキサン／水中のＮａＨＣＯ3溶
液に溶解する。この得られた溶液に、８当量の無水ブロモ酢酸を添加する。この
混合物を、反応の完了をＴＬＣで確認するまで攪拌する。この混合物を、Ｈ2Ｓ
Ｏ4水溶液で酸性化し、そしてＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。このＣＨ2Ｃｌ2層を乾燥
し、濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィーで精製して化
合物２９を得る。
【０１１３】 （化合物３０の合成） ＨＥＧＡ／ＴＥＧの８量体の調製のための化学スキームを、図２６Ａおよび２
６Ｂに示す。化合物３０。ビス−ヘキサエチレングリコールアミン（化合物４’
）を、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートと反応させ、Ｎ−ＢＯＣ化合物（化
合物８’）を得、次いでこれをパラ−ニトロフェニルクロロホルメートと反応さ
せ、パラ−ニトロフェニルカーボネート化合物（化合物９’）を得た。次いで、
このパラ−ニトロフェニルカーボネート（ＰＮＰ）基を、モノ−ＣＢＺ−保護ピ
ペラジンとの反応によってカルバメート基に変換し、化合物１０’を得た。この
ＢＯＣ基を、トリフルオロ酢酸を用いて除去し、化合物１１’を得た。次いで、
化合物９’および１１’を共に反応させ、「片方だけの」樹状化合物（化合物１
２’）を形成した。再び、このＢＯＣ基を、トリフルオロ酢酸を用いて除去し、
化合物１３’を得た。次いで、化合物１３’を、トリエチレングリコール ビス
クロロホルメート（これから「コア」が誘導される）と反応させ、「両方が」樹
状の化合物（化合物１４’）を得た。次いで、末端のＣＢＺ保護されたアミノ基
を、アミノ基の臭化水素酸塩に変換し、そしてさらに無水ブロモ酢酸と反応して
、化合物３０の各々の末端に、反応性ブロモアセチル基を得た。
【０１１４】 （化合物３１および３２の合成） 化合物３１および３２の合成のためのストラテジーを、図２５に示す。
【０１１５】 テトラアミノプラットフォームである化合物Ｆを、
【０１１６】
【化２】 のＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステルと水／アセトニトリル溶液（Ｎａ2
ＣＯ3を含む）中で反応させた。このアセトニトリルを真空下で除去し、生成物
を沈殿させた。この沈殿を水で洗浄し、そしてアセトニトリルから再結晶してＧ
を得た。
【０１１７】 ＣＢＺ基を、１０％炭素担持Ｐｄを用いるエタノール中の触媒水素化によって
、化合物Ｇから除去した。この混合物を濾過し、そしてこの濾液を濃縮して、オ
クタアミンの化合物Ｈを褐色油状物として得た。
【０１１８】 化合物Ｈを、メタノール／アセトニトリル中、室温で一晩無水クロロ酢酸と反
応させた。この粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、
化合物３１を得た。
【０１１９】 （化合物３２） 化合物Ｈの溶液を、適切な塩基の存在下で、アクリロイルクロリドまたは無水
アクリル酸と反応させた。この溶媒を除去し、そしてこの粗生成物を、シリカゲ
ルクロマトグラフィーによって精製して、化合物３２を得た。
【０１２０】 （実施例３：αＧａｌ結合体の合成） （化合物３３） （単量体αＧａｌ結合体の合成） １ｍＬの水／ＡＣＮ（１：１）中のＮａ2ＣＯ3（１０ｍｇ／ｍＬ）溶液中のα
Ｇａｌ ２０（１００ｍｇ、０．２０４ｍｍｏｌ）、クロロアセトアミド（３８
ｍｇ、０．４０８ｍｍｏｌ）、およびトリブチルホスフィン（１０μＬ）の混合
物を、室温にて一晩攪拌した。有機溶媒の除去後、残りの水溶液を、アセトニト
リル−水（５％〜１５％）の４０分間にわたる勾配で、１０ｍＬ／分で溶出して
逆相ＨＰＬＣカラムで精製して、３３（９６．３ｍｇ、８６％）を白色固体とし
て得た：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍＬ／分の流速でのＨ2Ｏ中の５％〜２０％
ＡＣＮの勾配を用いてｔR４．７８分。純度、１００％；ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／
ｅ（Ｍ＋Ｎａ+） Ｃ20Ｈ37ＮＯ14ＳＮａについての計算値：５７０．２、実測
値：５７０．３。
【０１２１】 （化合物３４） （二量体αＧａｌ結合体の合成） １ｍＬのＮａ2ＣＯ3（２０ｍｇ／ｍＬ）水溶液中のαＧａｌ ２０（６５ｍｇ
、０．１３３ｍｍｏｌ）の混合物を、室温にて一晩攪拌した。この溶液を、アセ
トニトリル−水（１０％〜２５％）の４０分間にわたる勾配を用いて１０ｍＬ／
分で溶出して逆相ＨＰＬＣカラムで精製して、３４（３１．３ｍｇ、４８％）を
白色固体として得た：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍＬ／分の流速でのＨ2Ｏ中の５
％〜３０％ ＡＣＮの勾配を用いてｔR ９．９６分。純度、１００％；ＭＳ（
ＥＳＩ）：ｍ／ｅ（Ｍ＋Ｎａ+）Ｃ36Ｈ66ＮＯ26Ｓ2Ｎａについての計算値：１０
０１．３、実測値：１００１．３。
【０１２２】 （化合物３５） （二量体αＧａｌ結合体の合成） ３ｍＬのＮａ2ＣＯ3溶液（２０ｍｇ／ｍＬ）および２ｍＬのＡＣＮ中のαＧａ
ｌ １９（３０ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）、二量体プラットフォーム２３（９
．３ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）、およびトリブチルホスフィン（０．０３０ｍ
Ｌ）の混合物を、Ｎ2下で室温にて一晩攪拌した。有機溶媒を除去した後、残り
の水溶液を、アセトニトリル−水（５％〜１５％）の４０分間にわたる勾配を用
いて１０ｍＬ／分で溶出して逆相ＨＰＬＣカラムで精製して、３５（１０ｍｇ、
３１％）を白色固体として得た：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍＬ／分の流速でＨ2
Ｏ中の５％〜３０％ ＡＣＮの勾配を用いてｔR ８．６９分。純度、９７．９
％；1Ｈ ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ５．０９（ｄ，Ｊ＝３．５，２Ｈ）、４．３９（
ｄ，Ｊ＝７．３，２Ｈ）、４．２１（ｔ，Ｊ＝６．５，２Ｈ）、４．１０（ｄ，
Ｊ＝２．５，２Ｈ）、４．０５（ｍ，２Ｈ）、３．９６（ｄ，Ｊ＝２．６，２Ｈ
）、３．８８（ｄ，Ｊ＝２．５，２Ｈ）、３．８５（ｄ，Ｊ＝３．０，２Ｈ）、
３．８２−３．５７（ｍ，３２Ｈ）、３．２７（ｓ，４Ｈ）、３．２３（ｓ，４
Ｈ）、２．７９（ｔ，Ｊ＝６．５，４Ｈ）、１．５６（ｂｒｓ，４Ｈ）；13Ｃ
ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ１７３．１、１０５．６、１０３．４、９８．２、９６．
０、８０．２、７８．３、７７．２、７５．３、７３．１６、７１．８、７１．
３、７０．９、６９．８、６９．４、６９．１、６５．４、３２．４、４０．５
、３６．５、３４．６、３２．８；ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ（Ｍ＋Ｎａ+） Ｃ4 4 Ｈ80Ｎ2Ｏ28Ｓ2Ｎａについての計算値：１１７１．４、実測値：１１７２．５
． （化合物３６） （二量体αＧａｌ結合体の合成） この化合物を、化合物３５について上記の手順に従って調製した。化合物１９
（３０ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）を、二量体プラットフォーム２４（１３．０
ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）と結合体化させて、３６を白色固体として得た：分
析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍＬ／分の流速でのＨ2Ｏ中の５％〜３０％ ＡＣＮの勾
配を用いてｔR １１．３分。純度、９７．４％；1Ｈ ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ５
．１９（ｄ，Ｊ＝３．５，２Ｈ）、４．５３（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ）、４．２
２（ｔ，Ｊ＝３．９，４Ｈ）、４．１３（ｍ，２Ｈ）、４．０５−３．９８（ｍ
，２Ｈ）、３．９１（ｄ，Ｊ＝２．７，２Ｈ）、３．８８−３．６６（ｍ，４２
Ｈ）、３．６３（ｔ，Ｊ＝６．５，４Ｈ）、３．３５（ｔ，Ｊ＝７．２，８Ｈ）
、２．８４（ｔ，Ｊ＝６．４，４Ｈ）、１．８１（ｍ，４Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）
：ｍ／ｅ（Ｍ＋Ｎａ+） Ｃ50Ｈ92Ｎ2Ｏ3lＳ2Ｎａについての計算値：１３０３
．５、実測値：１３０３．４。
【０１２３】 （化合物３７） （四量体αＧａｌ結合体の合成） αＧａｌ ７（３０ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブチルチオ保護
基を、５ｍＬの水中でトリブチルホスフィン（２５μＬ）を用いて室温にて一晩
還元することにより除去した。反応混合物を、高減圧下で一晩、濃縮および乾燥
して、全ての残りのｔｅｒｔ−ブチルチオールを除去した。残渣を、５ｍＬの水
／ＡＣＮ（１：１）中のＮａ2ＣＯ3（１０ｍｇ／ｍＬ）溶液中に溶解した。四量
体プラットフォーム２５（５．０ｍｇ、０．００７４ｍｍｏｌ）を添加し、そし
て得られた溶液を室温にて一晩攪拌した。有機溶媒を除去した後、残りの水溶液
を、アセトニトリル−水（２０％〜２５％）の４０分間にわたる勾配を用いて１
０ｍＬ／分で溶出して逆相ＨＰＬＣカラムで精製して、凍結乾燥後に３７（９．
６ｍｇ、５６％）を白色固体として得た：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ（Ｍ／２＋Ｎ
ａ+） Ｃ47Ｈ79Ｏ28Ｓ2Ｎａについての計算値：１１７８．４、実測値：１１７
８．４。
【０１２４】 （化合物３８） （四量体αＧａｌ結合体の合成） この化合物を、化合物３７についての上記の手順に従って調製した。化合物７
（２２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）を、プラットフォーム２６（７．０ｍｇ、０
．００５７ｍｍｏｌ）を用いて結合体化した。生成物を、アセトニトリル−水（
１５％〜２０％）の４０分間にわたる勾配を用いて逆相ＨＰＬＣカラムで精製し
て、３８（１３ｍｇ、８０％）を白色固体として得た：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１
ｍＬ／分の流速でのＨ2Ｏ中の１５％〜２０％ ＡＣＮの勾配を用いてｔR ５．
２４分、純度、１００％；ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ（Ｍ／２＋Ｎａ+） Ｃ56Ｈ9 6 Ｎ5Ｏ33Ｓ2Ｎａについての計算値：１４５４．６、実測値：１４５４．５。
【０１２５】 （化合物３９） （四量体αＧａｌ結合体の合成） この化合物を、化合物３８についての上記の手順に従って調製した。化合物７
（２２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）のプラットフォーム２７（６．０ｍｇ、０．
００４８ｍｍｏｌ）との結合体化は、３９（１２ｍｇ、９３％）を白色固体とし
て生じた：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍＬ／分の流速でのＨ2Ｏ中の１５％〜２０
％ ＡＣＮの勾配を用いてｔR １１．３２分、純度、１００％；ＭＳ（ＥＳＩ
）：ｍ／ｅ（Ｍ／２＋Ｎａ+） Ｃ53Ｈ87Ｎ4Ｏ32Ｓ2Ｎａについての計算値：１
３７９．１、実測値：１３７９．１。
【０１２６】 （化合物４０） （四量体αＧａｌ結合体の合成） この結合体を、αＧａｌ ７およびプラットフォーム２８を用いて、化合物３
８についての上記の手順に従って調製する。
【０１２７】 （化合物４１） （四量体αＧａｌ結合体４１の合成） ０．１５ｍＬのＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（１：１）中のｐ−アミノフェニル３−Ｏ−
α−Ｄ−ガラクトピラノシル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド２２（１１ｍｇ、０
．０２５ｍｍｏｌ）、四量体プラットフォーム２８、およびＮａＨＣＯ3（３ｍ
ｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）の混合物を、１時間にわたって軽く振盪した。０．１
５ｍＬのＨ2Ｏの添加後、反応混合物を、室温にて２日間設定し、そしてアセト
ニトリル−水（０％〜３０％）の１５分間にわたる勾配を用いて１ｍＬ／分で溶
出して逆相ＨＰＬＣカラムで精製して、４１（４．６ｍｇ、４０％）を白色固体
として得た：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ（Ｍ／２＋１） Ｃ60Ｈ95Ｎ7Ｏ29につい
ての計算値：１３７７．６ 実測値：１３７７．９。
【０１２８】 （化合物４２） （四量体αＧａｌ結合体の合成） ５ｍＬの水／ＡＣＮ（１：１）中のＮａ2ＣＯ3（１０ｍｇ／ｍＬ）溶液中のα
Ｇａｌ ７，２−［２−（２−チオエトキシ）エトキシ］エチル３−Ｏ−（β−
Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（３０ｍｇ、０．０６
１ｍｍｏｌ）、プラットフォーム２５（５ｍｇ、０．００７４ｍｍｏｌ）、およ
びトリブチルホスフィン（０．１０ｍＬ）のβ異性体の溶液を、室温にて一晩攪
拌した。有機溶媒を除去した後、残りの水溶液を、アセトニトリル−水（２０％
〜２５％）の４０分間にわたる勾配を用いて１０ｍＬ／分で溶出して逆相ＨＰＬ
Ｃカラムで精製して４２（２．４ｍｇ、１４％）を白色固体として得た：ＭＳ（
ＥＳＩ）：ｍ／ｅ（Ｍ／２＋Ｎａ+） Ｃ47Ｈ79Ｏ28Ｓ2Ｎａについての計算値：
１１７８．４、実測値：１１７９．０。
【０１２９】 （化合物４３） （四量体αＧａｌ結合体の合成） この結合体を、化合物３８についての上記の手順に従って調製した。化合物８
（２５ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）とプラットフォーム２７（６．０ｍｇ、０．
００４８ｍｍｏｌ）との結合体化は、４３（８．８ｍｇ、６８％）を白色固体と
して生じた：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍＬ／分の流速でＨ2Ｏ中で１５％〜２０
％ ＡＣＮの勾配を用いてｔR ６．８４分、純度、１００％；ＭＳ（ＥＳＩ）
：ｍ／ｅ（Ｍ／２＋Ｎａ+） Ｃ53Ｈ87Ｎ4Ｏ32Ｓ2Ｎａについての計算値：１３
７９．４、実測値：１３７９．１。
【０１３０】 （化合物４４） （八量体αＧａｌ結合体の合成） ２ｍＬの水／ＡＣＮ（１：１）中のＮａ2ＣＯ3（１０ｍｇ／ｍＬ）溶液中のα
Ｇａｌ １９（２３ｍｇ、０．４２９ｍｍｏｌ）およびプラットフォーム２９（
１０ｍｇ、０．００４３ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ2下で室温にて一晩攪拌した。
反応混合物を濃縮し、そしてアセトニトリル−水（１０％〜３０％）の４０分間
にわたる勾配を用いて１０ｍＬ／分で溶出して逆相ＨＰＬＣカラムで精製して、
４４（８．５ｍｇ、３７％）を白色固体として得た。
【０１３１】 （化合物４５） （八量体αＧａｌ結合体の合成） この化合物を、化合物４４についての上記の手順に従って調製した。化合物１
９（５０ｍｇ、０．０９４ｍｍｏｌ）を、プラットフォーム３０（１０ｍｇ、０
．００１８ｍｍｏｌ）を用いて結合体化した。生成物を、アセトニトリル−水（
１０％〜５０％）の４０分間の勾配を用いて逆相ＨＰＬＣカラムで精製して、４
５（１０．８ｍｇ、６７％）を白色固体として得た：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍ
Ｌ／分の流速でＨ2Ｏ中の５％〜７０％ ＡＣＮの勾配を用いてｔR １１．１６
分、純度、１００％。
【０１３２】 （化合物４６） （八量体αＧａｌ結合体の合成） この化合物を、化合物４４についての上記の手順に従って調製した。化合物１
９（６９１ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を、プラットフォーム３１（２８０ｍｇ、
０．１４１ｍｍｏｌ）を用いて結合体化した。生成物を、アセトニトリル−水（
１９．５％）を４０分間にわたって用いて逆相ＨＰＬＣカラムで精製して、４６
（６０４ｍｇ、７６％）を白色固体として得た：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍＬ／
分の流速でＨ2Ｏ中の１５％〜２５％ ＡＣＮの勾配を用いてｔR ９．１６分、
純度、１００％；1Ｈ ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ５．１３（ｄ，Ｊ＝３．８，８Ｈ）
、４．４７（ｄ，Ｊ＝７．８，８Ｈ）、４．１２−４．１６（ｍ，２４Ｈ）、４
．１２−４．０５（ｍ，８Ｈ）、４．００（ｄ，Ｊ＝０．８，８Ｈ）、３．９９
−３．９２（ｍ，８Ｈ）、３．８６−３．６４（ｍ，１４４Ｈ）、３．３９−３
．３４（ｍ，２４Ｈ）、３．２８（Ｓ，８Ｈ）、３．２２−３．１１（ｍ，１６
Ｈ）、２．７９（ｄｄ，Ｊ＝６．１、１０．６，１６Ｈ），２．２０（ｔ、Ｊ＝
７．１，８Ｈ），１．８２−１．６８（ｍ、８Ｈ），１．５９−１．２０（ｍ、
４０Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ１７８．５、１７８．４、１７５．１、
１７４．２、１７４．０、１５９．３、１０４．４、９７．０、７８．９、７６
．６、７２．５、７１．４、７１．３、７１．１、７１．０、７０．９、７０．
８、７０．３、６９．９、６６．５、６２．６、５５．９、４８．５、４８．１
、４１．１、４０．８、３９．１、３８．９、３７．４、３７．０、３６．５、
３３．０、３２．９、３２．６、２９．８、２９．６、２７．４、２６．７、２
４．３；ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ（Ｍ／３＋Ｎａ+） （Ｃ224Ｈ400Ｎ18Ｏ126Ｓ 8 ）／３＋Ｎａについての計算値：１８９５．７、実測値：１８９５．３。
【０１３３】 （化合物４７） （八量体αＧａｌ結合体の合成） この化合物を、化合物４４についての上記の手順に従って調製した。化合物１
９（２９ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）を、プラットフォーム３２（１０ｍｇ、０
．００５５ｍｍｏｌ）を用いて結合体化した。生成物を、アセトニトリル−水（
１５％〜２０％）の４０分間にわたる勾配を用いて逆相ＨＰＬＣカラムで精製し
て４７（２０ｍｇ、６５％）を白色固体として得た：分析ＲＦ−ＨＰＬＣ：１ｍ
Ｌ／分の流速でＨ2Ｏ中の１５％〜２５％ ＡＣＮの勾配を用いてｔR １１．３
５分。純度、８２％；ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｅ（Ｍ／３＋Ｎａ+） （Ｃ232Ｈ41 6 Ｎ18Ｏ126Ｓ8）／３＋Ｎａについての計算値：１９３３．１、実測値：１９３
２．１。
【０１３４】 （実施例４：αＧａｌ結合体のインビトロでの特徴付け） （材料および方法） 抗体。血液を、健常な正常ボランティアから採血した。血漿を、遠心分離によ
って分離し、そして凝固させた。フィブリンを除去し、そして血漿を、直ちに使
用したかまたはアリコートにして−７０℃にて保存した。アカゲザル血清（Ｃａ
ｌｉｆｏｒｎｉａ Ｒｅｇｉｏｎａｌ Ｐｒｉｍａｔｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃ
ｅｎｔｅｒ，Ｄａｖｉｓ，ＣＡ）を、バキュテーナー（ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ）
チューブに採血した血液から入手し、そして凝固させた。血清を遠心分離によっ
て分離した後、これをプールし、アリコートに分け、そして−２０℃または−７
０℃で保存した。いくつかの実験では、血清を５６℃にて３０分間熱非働化して
補体溶血活性を破壊した。αＧａｌエピトープに対する抗体を、αＧａｌ−Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅカラムでアフィニティー精製した。このカラムは、１０ｍｇ／ｍ
Ｌ樹脂でのＭｉｃｈａｅｌ付加化学によって、αＧａｌ−ＳＨをマレイミド−Ｓ
ｅｐｈａｒｏｓｅ（Ｐｉｅｒｃｅ）へとカップリングすることにより調製した。
２０ｍＬまでのプールしたＮＨＳ（またはＮＭＳ）正常サル血清を、２ｍＬ容量
の充填したαＧａｌ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅに適用した。フロースルーを収集した
後、このカラムを１０〜２０カラム容量で洗浄するか、またはＡ280がベースラ
イン値に近づくまで洗浄し、そして０．１Ｍトリエタノールアミン（ｐＨ１１．
５）を用いて、１Ｍ Ｔｒｉｓ、ｐＨ８．０を含有するチューブ中に溶出した。
このカラムを、１０〜２０容量のリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）を用いて直
ちに洗浄した。画分を、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイによってタンパク質濃度につ
いて評価した。ピーク画分をプールし、ＰＢＳに対して透析した。アフィニティ
ー精製した抗αＧａｌ Ｉｇを、ＩｇＭ抗αＧａｌ抗体を除去した、ＭＢＰカラ
ム（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）での精製によってＩｇＧについて
ネガティブ選択した。ＩｇＭ抗αＧａｌを、ＩｇＧ抗αＧａｌ抗体を除去した、
プロテインＧ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラム（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈ
ｅｉｍ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）での精製によってネガティブ選択し
た。αＧａｌアフィニティーカラム由来の抗αＧａｌ Ｉｇの溶出プロフィール
を図１６に示す。
【０１３５】 ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび免疫ブロック分析。抗体含有画分およびプールを、４
％〜１２％ ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（Ｎｏｖｅｘ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）によ
って分離した。タンパク質を、ＰＲＯＴＲＡＮTM純ニトロセルロースメンブレン
（Ｓｃｈｌｅｉｃｈｅｒ ａｎｄ Ｓｃｈｕｅｌｌ，Ｋｅｅｎｅ，ＮＨ）へとＸ
ＣＥＬＬ ＩＩTM Ｂｌｏｔ Ｍｏｄｕｌｅブロットシステム（Ｎｏｖｅｘ）を
用いて電気泳動によって転写した。メンブレンを、ＰＢＳ中の２％脱脂粉乳（Ｎ
ＦＤＭ）を用いてブロックし、アルカリホスファターゼにカップリングした抗ヒ
トＩｇＧもしくはＩｇＭ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗ
ｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）、またはアルカリホスファターゼにカップリングし
た抗サルＩｇＧもしくはＩｇＭ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍ Ｔｅｃｈ，Ｌｏ
ｕｉｓｖｉｌｌｅ，ＫＹ）でプローブした。第２工程の抗体を、アルカリホスフ
ァターゼについてのＷｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｕｅ Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｓｕｂ
ｓｔｒａｔｅ（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗ
Ｉ）を用いて発色させた。
【０１３６】 抗αＧａｌ抗体についてのＥＬＩＳＡ。αＧａｌ−ＳＨを、製造業者のプロト
コルに従って、マレイミド−ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）（Ｐｉｅｒｃｅ）へ
と２：１の比（ｗ／ｗ）でカップリングした。αＧａｌ分子の、ＢＳＡ１分子あ
たりに結合した比は、１０〜１２：１または２５：１であった。あるいは、αＧ
ａｌ−ＢＳＡまたはαＧａｌ−ＨＡＳ（ヒト血清アルブミン）を、Ｃ３リンカー
基またはＣ１４リンカー基（Ｄｅｘｔｒａ，Ｒｅｄｄｉｎｇ，Ｅｎｇｌａｎｄ）
と共に購入した。αＧａｌ−ＢＳＡ（ＰＢＳ中５μｇ／ｍＬにて１００μｌ）を
、９６ウェルプレートに４℃にて１８時間吸着した。プレートを、使用前にＰＢ
Ｓ中の２％ ＮＦＤＭを用いて４℃にて少なくとも４８時間ブロックした。プレ
ートは、少なくとも３ヶ月にわたって安定であった。新たなロットのプレートを
、プールした標準血清を用いて元のロットの結合効力と比較した。プールした標
準血清、個々の血清またはアフィニティー精製した抗αＧａｌ Ｉｇを力価測定
した。血清（１００μＬのニート〜ＨＢＳＡ中の１／２５６希釈物）またはアフ
ィニティー精製した抗αＧａｌ ＩｇＧ（Ｃａ+2もＭｇ+2も含まないＨａｎｋ平
衡塩溶液（ＨＢＳＡ）中での２ｍｇ／ｍＬ〜１μｇ／ｍＬの連続２倍希釈物１０
０μＬ）を、αＧａｌ−ＢＳＡでコーティングしたウェル中で２０℃にて６０分
間インキュベートした。洗浄後、抗αＧａｌ Ｉｇを、所定の飽和濃度（１００
μＬ、通常１：１０００希釈）のアルカリホスファターゼにカップリングした抗
サルＩｇＧもしくはＩｇＭまたは抗ヒトＩｇＧもしくはＩｇＭで２０℃にて６０
分間発色させた。ウェルを、洗浄緩衝液（ＰＢＳ中で１％ Ｔｗｅｅｎ ２０）
で５回洗浄した後、２０℃にて５〜２０分間、１００μＬ ＰＰＭＰ（フェノー
ルフタレインモノホスフェート）（Ｓｉｇｍａ）を用いてプレートを発色させた
。反応を、１００ｕＬ ０．２Ｍ Ｎａ2ＨＰＯ4の添加によって停止させた。そ
してプレートを、Ａ550（Ｐｏｗｅｒ Ｗａｖｅ ３４０ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔ
ｅ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ，Ｂｉｏ−Ｔｅｋ，Ｗｉｎｏｏｓｋｉ
，Ｖｅｒｍｏｎｔ）で読み取った。
【０１３７】 αＧａｌ結合体。αＧａｌ（ガラクトース（ａ１，３、ガラクトース）エピト
ープを、実施例１に記載されたように数グラム（ｍｕｌｔｉｇｒａｍ）の規模で
合成し、そして実施例２に記載されるように充分に規定された有機プラットフォ
ームにカップリングさせた。
【０１３８】 競合ＥＬＩＳＡ。血清またはアフィニティー精製した抗αＧａｌ Ｉｇ調製物
を、ＥＬＩＳＡによって力価測定し、そして５０％結合濃度を決定した。血清に
ついては、５０％結合点は、約１：５の血清希釈で達成され、一方、アフィニテ
ィー精製されたＩｇについては、５０％希釈結合濃度は、約１２．５μｇ／ｍＬ
であった。血清またはＩｇ（５０μＬ）を、４ｍｇ／ｍＬ〜１０μｇ／ｍＬの２
倍の様式で連続希釈したインヒビターを含有する等しい容量のＨＢＳＡ、または
緩衝液単独と共に２０℃にて６０分間インキュベートした。次いで、抗αＧａｌ
Ｉｇまたは血清±インヒビターを、αＧａｌ−ＢＳＡでコーティングしたプレ
ートとへ添加し、そしてＩｇ結合を記載される通りに評価した。抗ｄｉＧａｌ結
合の阻害パーセントを、以下の通りに算出した：［（ＯＤ550 Ｉｇ供給源＋Ｉ
ＮＨ）−ＯＤ550 ブランク／（ＯＤ550 Ｉｇ供給源−ＩＮＨ）−ＯＤ550 ブ
ランク］×１００。（ＩＮＨ＝インヒビター）。
【０１３９】 ＥＬＩＳｐｏｔアッセイ。正常なアカゲザル由来の脾臓を細かく切り刻み、そ
してまくれを取り除いた（ｄｅｂｕｒｒｅｄ）すりガラススライドを用いて単細
胞懸濁物として調製した。夾雑している赤血球を、低張で溶解し、そして単核細
胞（ＭＮＣ）をＦｉｃｏｌｌ−ｈｙｐａｑｕｅ密度勾配遠心によって単離した。
ＭＮＣ（１００μＬ）を、１０4／細胞／ｍＬ〜５×１０2細胞／ｍＬの連続２倍
希釈物中で、αＧａｌ−ＢＳＡまたは抗サルＩｇＧもしくは抗サルＩｇＭを保有
するＥＬＩＳＡプレートに４連で添加した。プレートを、５％ ＣＯ2で加湿雰
囲気下で３７℃にて一晩インキュベートし、次いで洗浄した。αＧａｌ−ＢＳＡ
に結合した分泌抗αＧａｌ Ｉｇのフットプリントを、ビオチンにカップリング
したヤギ抗サルＩｇＧまたはヤギ抗サルＩｇＭ（Ａｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴ
ｅｃｈ）を用いて３７℃にて６０分間インキュベートし、続いてＥｘｔｒＡｖｉ
ｄｉｎ−アルカリホスファターゼ（Ｓｉｇｍａ）を付加することにより発色させ
た。アルカリホスファターゼ基質Ｂ（１：１００希釈での１００μＬ、Ｂｉｏ−
Ｒａｄ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ）を添加し、そして２０℃にて一晩インキュベ
ーションを続けた。総Ｉｇ産生細胞を、同様に決定した。フットプリントを、Ｍ
ｉｃｒｏｔｅｋ ＳｃａｎＭａｋｅｒ ＩＩＩ平床スキャナーおよびＩｍａｇｅ
−Ｐｒｏイメージングソフトウェア（Ｍｅｄｉａ Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ，Ｕ
ｎｉｖ．Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｈｏｏｌ，Ｒｏｃｈｅｓｔ
ｅｒ，ＮＹ）を利用するパーソナルコンピュータを用いて定量した。抗αＧａｌ
ＩｇＧ産生細胞または抗αＧａｌ ＩｇＭ産生細胞／総ＩｇＧ産生細胞または
総ＩｇＭ産生細胞の比を算出した。
【０１４０】 細胞傷害性アッセイ。ブタ腎臓上皮細胞株ＰＫ−１５およびブタ大動脈内皮細
胞 （ＰＡＥＣ）（ＡＴＣＣ，１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｌｖｄ．
，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ ２０１１０−２２０９）を、指示されたように培養
した。このアッセイのために、細胞を、トリプシン−ＥＤＴＡを用いて取り出し
、そして９６ウェルプレート中でまたは２４ウェルプレート中のカバーグラス上
でサブコンフルエントに再度プレーティングした。依然としてサブコンフルエン
トなまま（再プレーティングから２日以内）、細胞を、細胞傷害性アッセイに用
いた。ニートな、補体が充分な血清を、インヒビターと共に上記のように４℃に
て６０分間インキュベートした。次いで、血清を、サブコンフルエントな細胞を
含むウェルに添加した（血清の添加の直前にこのウェルから培地を吸引した）。
ウェルを、血清±インヒビターと共に３７℃にて６０〜９０分間インキュベート
した。ウェルをリンスし、そして細胞死を、Ｌｉｖｅ／Ｄｅａｄキット（Ｍｏｌ
ｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）を用いて可視化し、そして
１０高倍率の視野で、または２５０細胞を計数することによって顕微鏡で定量し
た。いくつかの実験では、細胞を、細胞解離溶液（Ｓｉｇｍａ）を用いてフラス
コから非酵素的に取り出し、そして単細胞懸濁物を調製した。細胞傷害性をＢｅ
ｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ＦＡＣＳｃａｌｉｂｕｒでのフローサイトメト
リーによって定量したこと以外は、接着細胞についての通りにアッセイを行った
。
【０１４１】 （結果） （αＧａｌエピトープの抗原性活性） 合成的に調製されたαＧａｌエピトープ（図２）は、（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅに
カップリングした場合に）抗αＧａｌ Ｉｇを、ＦＡＣＳによって測定した場合
に正常アカゲザル血清またはヒト血清から９５％を超えて除去する能力によって
実証されるように、抗原として活性であった。
【０１４２】 四量体結合体の活性。本発明者らは、実施例２に記載されるようにＰＩＴＧプ
ラットフォーム（化合物（ｃｐｄ）３８）およびＢＭＴＧ（ｃｐｄ ３７）プラ
ットフォームを含むαＧａｌ四量体プラットフォーム構築物を試験し、そしてこ
れらは、ＥＬＩＳＡにおいてＡｂがαＧａｌエピトープに結合することを阻害す
る能力において等価であることが見出された。Ｃｐｄ ３８（ＬＪＰ７１２）は
、抗αＧａｌ Ｉｇに結合し、そしてαＧａｌ発現ブタ腎臓上皮細胞株ＰＫ−１
５に対するＩｇＧ 抗αＧａｌの結合、および約１ｍＭでＥＬＩＳＡウェル上に
吸着されたＢＳＡ−αＧａｌに対するＩｇＧ 抗αＧａｌの結合を阻害した。ア
フィニティー精製されたＩｇＭ抗αＧａｌの結合は、ＩｇＧ 抗αＧａｌよりも
ｃｐｄ ３８によって１０００倍少なく阻害された。
【０１４３】 八量体結合体の活性。八量体結合体（実施例２に記載された通り）を試験した
。八量体結合体ｃｐｄ ４４（ＬＪＰ ７１９とも呼ばれる）を、ＢＳＡ−αＧ
ａｌに対する抗αＧａｌ ＩｇＭ結合を血清中で阻害する能力についてインビト
ロで試験した。ＥＬＩＳＡ分析は、図１８に示されるように、αＧａｌエピトー
プが、プラットフォーム上に八量体として提示された場合、血清中のＩｇＧ抗α
ＧａｌおよびＩｇＭ抗αＧａｌの両方がＢＳＡ−αＧａｌに、またはαＧａｌ発
現ブタ腎臓上皮細胞株ＰＫ−１５に結合するのを阻害すること、およびｄｉＧａ
ｌエピトープに対するＩｇＭ抗ｄｉＧａｌ結合を阻害するのに５〜１０倍効率的
であることを示した。このことは、寛容原の結合価が、より低い親和性のＩｇＭ
分子を結合する際に非常に重要であるという本発明者らの仮説を支持した。
【０１４４】 （実施例５：結合体のインビボ評価） 寛容原のインビボ効力を、四量体または八量体の寛容原または緩衝液でＩＶ処
置したアカゲザルにおける用量漸増研究において試験した。
【０１４５】 ６匹の雄性アカゲザル（３．５〜４ｋｇ）を、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ Ｒｅｇ
ｉｏｎａｌ Ｐｒｉｍａｔｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ（ＣＲＰＲＣ）
，Ｄａｖｉｓ，ＣＡで飼育した。全ての実験プロトコルは、ＣＲＰＲＣ ＩＡＣ
ＵＣ（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ
Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）の標準を満たした。サルを、ベースライン臨床値および
抗αＧａｌ抗体のレベルについてのために採血した。サルを、ベースライン臨床
値のために採血した。４匹のサルを、２〜２０ｍｇ／ｋｇの４結合手プラットフ
ォームＬＪＰ ７１２（ｃｐｄ ３８）で１日ＩＶ処置した。２匹のサルは、コ
ントロールとしてＰＢＳを静脈内で（ＩＶ）単独で受けた。サルを、２ｍｇ／ｋ
ｇのＬＪＰ ７１２で６０日間処置した動物におけるＩＶ注射の直前に毎週採血
した（５ｍＬ）。サルが１０ｍｇ／ｋｇもしくは２０ｍｇ／ｋｇの四量体ＬＪＰ
７１２または２０ｍｇ／ｋｇの八量体ＬＪＰ ９２０（ｃｐｄ ４６）を受け
た場合、処置は５〜７日間であり、そして動物を２〜３日毎に３ｍＬづつ採血し
た。血清サンプルを、ＥＬＩＳＡによって抗αＧａｌ ＩｇＧおよび抗αＧａｌ
ＩｇＭについて分析した。１つの実験では、２匹のサルを、１０日間にわたっ
て毎日、２０ｍｇ／ｋｇの八量体プラットフォームＬＪＰ ７１９でＩＶ処置し
た。別の実験では、サルを、２０ｍｇ／ｋｇで八量体ＬＪＰ ９２０で毎日ＩＶ
処置した。
【０１４６】 四量体結合体。ＬＪＰ ７１２のインビボ効力を試験するために、αＧａｌに
特異的である循環している抗体のうちの１％に基づく血漿中の抗αＧａｌ抗原に
対してモル過剰の寛容原を作製するに充分に高い用量で四結合価寛容原を用いて
サルを処置した。サルを、２ｍｇ／ｋｇのＬＪＰ ７１２（ｎ＝４）または緩衝
液（ＰＢＳ）（ｎ＝２）で毎日、６０日間にわたって上記のようにＩＶ処置した
。血液を毎週採血し、そして血清をＥＬＩＳＡによってＩｇＧ抗αＧａｌおよび
ＩｇＭ抗αＧａｌについて試験した。ＬＪＰ ７１２は充分に寛容化され、そし
てそれぞれ、図２０および図２１に示すように、古典的補体経路または第二補体
経路のいずれもインビトロで活性化しなかった。抗αＧａｌ Ｉｇ応答の統計学
的に有意な低減は存在しなかった。
【０１４７】 本発明者らは次に、より高い用量のＬＪＰ ７１２が、より短期のＩＶ投与形
式を用いて循環からの抗αＧａｌ Ａｂの効果的なクリアランスをもたらし得る
か否かを決定しようと努めた。用量を１０ｍｇ／ｋｇ ＬＪＰ ７１２まで増加
させた場合、ＩｇＧ抗αＧａｌまたはＩｇＭ抗αＧａｌのいずれの低減もほとん
ど観察されなかった。対照的に、２０ｍｇ／ｋｇ ＬＪＰ ７１２を用いた毎日
のＩＶ処置は、図１９に示すように、処置８日目による２４％（ｐ＜０．０５）
までの抗αＧａｌ ＩｇＧ応答の低減および抗αＧａｌ ＩｇＭレベルの１２％
（ｐ＝ＮＳ）までの低減をもたらした。
【０１４８】 （八量体結合体） 本発明者らは次いで、八量体寛容原ＬＪＰ ９２０を用いた７日間のアカゲザ
ルの処置が、抗αＧａｌ Ａｂの血清レベルの低減をもたらすか否かを決定した
。２匹のサルを、ＰＢＳで毎日ＩＶ処置し、そして２匹を２０ｍｇ／ｋｇ（四量
体寛容原が循環しているＩｇＧ抗αＧａｌの低減を示すがＩｇＭ抗αＧａｌの低
減を示さない用量）でＬＪＰ ９２０（ｃｐｄ ４６）で毎日ＩＶ処置した。血
清サンプルを、０日目（採血前）ならびに３日目および６日目（薬物投与後２４
時間）に薬物またはコントロールの投与の直前に採血した血液から調製した。血
清をまた、その後の投与が投与されていない８日目に、最後の用量の２４時間後
に調製した。ＬＪＰ ９２０（ｃｐｄ ４６）は、獣医学スタッフによって観察
された場合、都合の悪い効果を有さずに、処置動物において充分に寛容化された
。８日目に、ＩｇＧ抗αＧａｌレベルは、四量体を用いた場合に見られたレベル
と同様に１１％減少した。コントロールの動物は、ほとんど変化を示さなかった
（図２２Ａ）。同様に、１匹のサルではＩｇＭ抗αＧａｌレベルにおける１８％
の低減が存在し、そして反復動物では５％の低減が存在した。対照的に、図２２
Ｂに示すように、コントロール動物におけるＩｇＭ抗αＧａｌレベルは、１匹の
動物において変化せず、そして反復動物では増加した。この八量体が、ＩｇＭ抗
αＧａｌを浄化する際に四量体よりも効率的であることを図２３に示す。これら
のデータは、増加した結合価が、より有効な分子をインビトロだけでなく、イン
ビボでももたらすことを示す。
【０１４９】 上記の発明を、理解の明快さの目的のために例示および例としていくらか詳細
に記載してきたが、特定の変更および改変が実施されることが当業者に明らかで
ある。それゆえ、説明および例は、本発明の範囲を限定すると解釈されるべきで
ない。本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって描写される。
【図面の簡単な説明】
【図１】 図１は、αＧａｌエピトープ、２−［２−（２−チオエトキシ）エトキシ］エ
チル３−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシドの
、酵素学的合成を図示している反応模式図である。
【図２】 図２は、αＧａｌエピトープ、２−［２−（２−チオエトキシ）エトキシ］エ
チル３−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシドの
、化学合成を図示している反応模式図である。
【図３】 図３は、αＧａｌエピトープ、ｐ−アミノフェニル ３−Ｏ−α−Ｄ−ガラク
トピラノシル−α−Ｄ−ガラクトピラノシドの、化学酵素的合成を図示している
反応模式図である。
【図４】 図４は、結合化学（ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）に関する
、２つの一般的な合成戦略を図示する。
【図５】 図５は、結合化学に関する、３番目の一般的な合成戦略を図示する。
【図６】 図６は、２つの二量体プラットホームおよび４つの四量体プラットホームを図
示する。
【図７】 図７は、４つの八量体プラットホームを図示する。
【図８】 図８は、単量体αＧａｌ結合体および３つの二量体αＧａｌ結合体を図示する
。
【図９】 図９は、実施例３に記載したような２つの四量体αＧａｌ結合体を図示する。
【図１０】 図１０は、実施例３に記載したような２つの四量体αＧａｌ結合体を図示する
。
【図１１】 図１１は、実施例３に記載したような、２つのαＧａｌアイソマーの２つの四
量体結合体を図示する。
【図１２】 図１２は、実施例３に記載したような、八量体αＧａｌ結合体を図示する。
【図１３】 図１３は、実施例３に記載したような、八量体αＧａｌ結合体を図示する。
【図１４】 図１４は、実施例３に記載したような、八量体αＧａｌ結合体を図示する。
【図１５】 図１５は、実施例３に記載したような、八量体αＧａｌ結合体を図示する。
【図１６】 図１６は、分画番号に対するＯＤ５５０のグラフであり、そして抗αＧａｌの
αＧａｌアフィニティーカラムからの溶出プロフィールを示す。
【図１７Ａ】 図１７Ａは、ＰＫ１５細胞に対するアフィニティー精製されたＩｇＧ（１７Ａ
）の抗αＧａｌ結合を示しているグラフである。フローサイトメトリー分析の結
果を、アフィニティー精製されたＩｇＧ（黒丸）、あるいはカラムを流れ通った
ＩｇＧの（白四角）用量（μｇ／ｍｌ）に対する中間蛍光強度（ＭＦＩ）として
示す。
【図１７Ｂ】 図１７Ｂは、ＰＫ１５細胞に対するアフィニティー精製されたＩｇＭ（１７Ｂ
）の抗αＧａｌ結合を示しているグラフである。フローサイトメトリー分析の結
果を、アフィニティー精製されたＩｇＭ（黒丸）、あるいはカラムを流れ通った
ＩｇＭの（白四角）用量（μｇ／ｍｌ）に対する中間蛍光強度（ＭＦＩ）として
示す。
【図１８】 図１８は、抗αＧａｌ結合の阻害に対する寛容原（ｔｏｌｅｒａｇｅｎ）のα
Ｇａｌ結合価の効果を示しているグラフであり、実施例４に記載のようにＥＬＩ
ＳＡで測定した。インヒビターの記号は以下のようである：白丸は、αＧａｌ単
量体；白四角、点線は、ＬＪＰ７２４（三糖類単量体）；白四角、点線は、ＬＪ
Ｐ７２５（五糖類単量体）；黒丸、実線は、αＧａｌ二量体；黒四角、実線は、
ＬＪＰ７１２ 四量体；黒三角、実線は、ＬＪＰ７１９ 八量体；白三角、点線
は、ＬＪＰ７２８（１１マー五糖類−ＢＳＡ）；黒三角、点線は、ＬＪＰ７２６
（１１マー三糖類［３−炭素リンカー］−ＨＳＡ）；黒四角、点線は、ＬＪＰ７
２７（１１マー三糖類［１４−炭素リンカー］−ＨＳＡ）。
【図１９】 図１９は、実施例５に記載するように、ＬＪＰ７１２で処置をした後の、％血
漿抗αＧａｌ ＩｇＧの棒グラフである。
【図２０】 図２０は、実施例５に記載するように、種々の物質による古典的補体経路の活
性化を示すグラフである。記号は以下のようである：白丸は、ＬＪＰ７１２；白
四角はコブラ毒因子（ＣＶＦ）；黒三角は、凝集したヒトγグロブリン（ＡＨＧ
）。点線は、緩衝液単独で得られた結果を示す。
【図２１】 図２１は、実施例５に記載したように、種々の物質による代替的補体経路の活
性化を示すグラフである。記号は以下のようである；白丸は、ＬＪＰ７１２；白
四角は、ＣＶＦ；黒三角は、ＡＨＧ。
【図２２Ａ】 図２２Ａは、実施例５で記載したように、ＰＢＳ（四角）と比較した、八量体
ＬＪＰ９２０（ｃｐｄ４６）（丸）で処置した後の血漿抗αＧａｌ ＩｇＧ（２
２Ａ）の減少を示しているグラフである。
【図２２Ｂ】 図２２Ｂは、実施例５で記載したように、ＰＢＳ（四角）と比較した、八量体
ＬＪＰ９２０（ｃｐｄ４６）（丸）で処置した後の血漿抗αＧａｌ ＩｇＭ（２
２Ｂ）の減少を示しているグラフである。
【図２３】 図２３は、実施例５に記載したように、四量体ＬＪＰ７１２（白丸）と八量体
ＬＪＰ９２０（黒丸）との、％血漿抗αＧａｌ ＩｇＭに対する効果を比較して
いるグラフである。ＰＢＳ（黒四角）をネガティブコントロールとして含めた。
【図２４】 図２４は、化合物２９の合成に関する戦略を示す。
【図２５】 図２５は、化合物３１および３２の合成に関する戦略を示す。
【図２６Ａ】 図２６Ａは、化合物３０の合成を示す。
【図２６Ｂ】 図２６Ｂは、化合物３０の合成を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ジョーンズ， デイビッド エス． アメリカ合衆国 カリフォルニア 92121， サン ディエゴ， フロリンド ロード 11265 (72)発明者 ユ， リン アメリカ合衆国 カリフォルニア 92128， サン ディエゴ， ツリー ホロー レ ーン 11597 (72)発明者 イングル， スティーブン ビー． アメリカ合衆国 カリフォルニア 92014， デル マー， カミニート ローレン 14820 Ｆターム(参考） 4C085 AA02 BB24 CC33 DD36 DD52 4C086 AA01 AA02 EA05 EA07 MA01 MA04 NA14 ZA51 ZB08 4C087 AA01 AA02 BB34 DA03 DA05 NA14 ZA51 ZB08

Claims (6)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 個体における循環している疾患関連抗体のレベルを減少させ
    るための方法であって、有効量のエピトープ提示キャリアを該個体に投与する工
    程を包含する、方法。
  2. 【請求項２】 前記エピトープ提示キャリアが、結合手プラットフォーム分
    子を含む、請求項１に記載の方法。
  3. 【請求項３】 前記結合手プラットフォーム分子の集団が、実質的に単分散
    分子量を有する、請求項２に記載の方法。
  4. 【請求項４】 個体における疾患関連抗体のレベルを減少させる方法であっ
    て、該個体の血液を、エピトープ提示キャリアを用いて、該抗体が該エピトープ
    に結合するのを可能にする条件下で体外で処理する工程；存在した場合、抗体−
    エピトープ提示キャリア複合体を除去する工程；および該血液を該個体に戻す工
    程、を包含する、方法。
  5. 【請求項５】 前記エピトープ提示キャリアが、結合手プラットフォーム分
    子を含む、請求項４に記載の方法。
  6. 【請求項６】 前記結合手プラットフォーム分子の集団が、実質的に単分散
    分子量を有する、請求項５に記載の方法。
JP2000586377A 1998-12-09 1999-12-09 循環している抗体を減少させるための方法および処方物 Withdrawn JP2002531531A (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US11163998P 1998-12-09 1998-12-09
US60/111,639 1998-12-09
US45787599A 1999-12-08 1999-12-08
US09/457,875 1999-12-08
PCT/US1999/029336 WO2000033887A2 (en) 1998-12-08 1999-12-09 Methods and formulations for reducing circulating antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2002531531A true JP2002531531A (ja) 2002-09-24

Family

ID=26809097

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000586377A Withdrawn JP2002531531A (ja) 1998-12-09 1999-12-09 循環している抗体を減少させるための方法および処方物

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP1135167A2 (ja)
JP (1) JP2002531531A (ja)
AU (1) AU2173500A (ja)
CA (1) CA2353620A1 (ja)
WO (1) WO2000033887A2 (ja)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001041813A2 (en) 1999-11-28 2001-06-14 La Jolla Pharmaceutical Company Methods of treating lupus based on antibody affinity and screening methods and compositions for use thereof
WO2006115509A2 (en) 2004-06-24 2006-11-02 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Small molecule immunopotentiators and assays for their detection
CN106103461B (zh) 2014-03-13 2019-05-10 巴塞尔大学 结合抗髓鞘相关糖蛋白的IgM抗体的碳水化合物配体
AU2016323377B2 (en) 2015-09-16 2021-04-15 Universität Basel Carbohydrate ligands that bind to antibodies against glycoepitopes of glycosphingolipids
US11986536B2 (en) 2019-03-23 2024-05-21 Ablevia Biotech Gmbh Compound for the sequestration of undesirable antibodies in a patient
EP3715376A1 (en) 2019-03-23 2020-09-30 Ablevia biotech GmbH Compound for the prevention or treatment of myasthenia gravis
EP3715374A1 (en) 2019-03-23 2020-09-30 Ablevia biotech GmbH Compound for the sequestration of undesirable antibodies in a patient
EP3715375A1 (en) 2019-03-23 2020-09-30 Ablevia biotech GmbH Compound for the prevention or treatment of pre-eclampsia
TW202228784A (zh) 2020-09-23 2022-08-01 奧地利商艾柏力維亞生技有限公司 用以於一患者中螯合非預期的抗ｐｅｇ抗體的化合物
US20230355784A1 (en) 2020-09-23 2023-11-09 Ablevia Biotech Gmbh Compound for the prevention or treatment of autoantibody-mediated conditions
US20230381334A1 (en) 2020-09-23 2023-11-30 Ablevia Biotech Gmbh Compound for the sequestration of undesirable antibodies in a patient
WO2022063892A1 (en) 2020-09-23 2022-03-31 Ablevia Biotech Gmbh Compound for increasing efficacy of viral vectors
JP2023542388A (ja) 2020-09-23 2023-10-06 アブレヴィア バイオテック ゲーエムベーハー 第ｖｉｉｉ因子補充療法の有効性を増加させるための化合物
WO2022063880A1 (en) 2020-09-24 2022-03-31 Ablevia Biotech Gmbh Compound for the prevention or treatment of myasthenia gravis
WO2023180502A1 (en) 2022-03-24 2023-09-28 Ablevia Biotech Gmbh Compound for increasing efficacy of oncolytic viruses

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5782792A (en) * 1986-11-21 1998-07-21 Cypress Bioscience, Inc. Method for treatment of rheumatoid arthritis
US5552391A (en) * 1990-01-16 1996-09-03 La Jolla Pharmaceutical Company Chemically-defined non-polymeric valency platform molecules and conjugates thereof
JP3201523B2 (ja) * 1991-08-23 2001-08-20 アルバータ リサーチ カウンスル ヒト受容体における抗体−仲介異種移植拒絶を弱めるための方法および組成物
CA2284729A1 (en) * 1997-04-18 1998-10-29 Novartis Ag Neoglycoproteins
AU761831B2 (en) * 1998-04-15 2003-06-12 Bioscience 2002 Llc Inhibition of xenoreactive antibodies

Also Published As

Publication number Publication date
AU2173500A (en) 2000-06-26
EP1135167A2 (en) 2001-09-26
WO2000033887A3 (en) 2000-08-17
WO2000033887A2 (en) 2000-06-15
CA2353620A1 (en) 2000-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20050220785A1 (en) Methods and formulations for reducing circulating antibodies
US6399578B1 (en) Conjugates comprising galactose α1,3 galactosyl epitopes and methods of using same
KR101854943B1 (ko) 소수성 부분을 통해 변형된 펩티드를 포함하는 리포솜 기반 구조체
JP2002531531A (ja) 循環している抗体を減少させるための方法および処方物
AU2003219922B2 (en) Compositions for delivery of therapeutics and other materials, and methods of making and using the same
Katopodis et al. Removal of anti-Galα1, 3Gal xenoantibodies with an injectable polymer
JP6836500B2 (ja) 自己免疫状態および炎症状態を治療するための方法および組成物
US20070191297A1 (en) Methods of treating and monitoring systemic lupus erythematosus in individuals
JP2001500528A (ja) 新規糖タンパク質
JPH11504516A (ja) 修飾抗−ｉｃａｍ−１抗体および炎症の処置におけるそれらの使用
EP2041175A1 (en) Targeted immune conjugates
US20060241022A1 (en) Selectin targeting bioconjugates
CA2326618A1 (en) Inhibition of xenoreactive antibodies
WO2023122599A1 (en) Glycosylated dendrimers for targeted intracellular delivery
US20060217333A1 (en) Methods of treating systemic lupus erythematosus in individuals having significantly impaired renal function
Pignatto et al. Optimized avidin nucleic acid nanoassemblies by a tailored PEGylation strategy and their application as molecular amplifiers in detection
US20030124742A1 (en) Conjugates targeted to target receptors
AU3970201A (en) Methods of treating lupus based on antibody affinity and screening methods and compositions for use thereof
US20220023421A1 (en) Methods for eliciting selective humoral responses
EP4245764A1 (en) New carbohydrate derivatives as mimetics of blood group a and b antigens
CA2121990A1 (en) Antibody-drug conjugates
CN116669771A (zh) 用于隔离患者体内不需要的抗peg抗体的化合物
JP2023542392A (ja) 患者における好ましくない抗ｐｅｇ抗体を隔離するための化合物
Rihova et al. HPMA-Anticancer Drug Conjugates
JPH0653682B2 (ja) ヒト免疫グロブリン結合抗腫瘍剤

Legal Events

Date Code Title Description
A300 Withdrawal of application because of no request for examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300

Effective date: 20070306