JP2002504928A - Ｌｄｌの酸化を防止するための天然組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 リコピンとビタミンＥを含む相乗作用混合物およびＬＤＬ酸化防止におけるその使用。リコピンは合成品、あるいは天然原料由来である。さらに、アテローム性動脈硬化の進行を抑制する医薬組成物および食物組成物の調製について述べる。

Description

【発明の詳細な説明】 ＬＤＬの酸化を防止するための天然組成物 発明の分野 本発明は、リコピンとビタミンＥを含む組成物に関する。 本発明は、特に、リコピンとビタミンＥの相乗作用混合物およびＬＤＬ酸化防 止におけるその使用、ならびにアテローム性動脈硬化の進行を抑制する医薬組成 物および食物組成物の調製に関する。発明の背景 アテローム性動脈硬化は、西洋社会における主な単一死因である。全死因の５ ０％にまで達すると推定される（Ｄａｖｉｅｓ ＭＪ，ａｎｄ Ｗｏｏｌｆ Ｎ ．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：ｗｈａｔ ｉｓ ｉｔ ａｎｄ ｗｈｙ ｄｏｅｓ ｉｔ ｏｃｃｕｒ？ Ｂｒ Ｈｅａｒｔ Ｊ ６９：Ｓ３，１９９３ ）。その上、狭心症、心筋梗塞、虚血性心筋症、心臓性突然死、脳血管性アクシ デント、及び末梢血管性疾患等の重大な心臓疾患を引き起こす。様々な疫学的研 究により、冠動脈性心臓病（ＣＨＤ）と、動脈性高血圧、喫煙、高脂血症等の危 険因子との関連性に確実な証拠が得られている。このように立証済みの危険因子 すべての中で、脂質障害がアテローム硬化型血管性疾患、特にＣＨＤの病因にお いて鍵となる役割を果たしている。多くの疫学的および臨床試験によって、高脂 血症とＣＨＤの高い発症率との強い関連性が示されている。フラミンガム心臓研 究（Ｃａｓｔｅｌｌｉ ＷＰ．，Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｋ．，Ｗｉｌｓｏｎ ＰＷ ．，Ｌｅｖｙ Ｄ．Ｌｉｐｉｄｓ ａｎｄ ｒｉｓｋ ｏｆ ｃｏｒｏｎａｒｙ ｈｅａｒｔ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｔｈｅ Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍ Ｓｔｕｄｙ． Ａｎｎ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ ２（１−２）：２３−２８，１９９２）は１９８ ４年から継続しているものだが、それにより、高コレステロール血症がＣＨＤ発 症の主な原因であることが示された。数々の臨床試験により、アテローム性動脈 硬化とコレステロールとの関連性が確認されている。 脂肪は、血液の水溶溶媒には不溶性である。したがって、脂質トリグリセリド 、リン脂質、及びコレステロールの輸送は、脂質−タンパク質複合体であるリポ タンパク質を経由してのみ行われる。リポタンパク質は、キロミクロン、超低密 度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）、及 び高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）の大きく四つのクラスに分類でき、組成物、 大きさ、及びアテローム生成の可能性が異なる。 血漿中の総コレステロール量の測定は、個々のリポタンパク質で輸送されるコ レステロールの総量を反映する。しかし、ＬＤＬとＨＤＬが血漿中の主なコレス テロールキャリアであり、ほんの一部のコレステロールのみがＶＬＤＬやキロミ クロンにより輸送される。アテローム性動脈硬化は漸進的な病理学的過程であり 、脂質を満たしたマクロファージ（泡沫細胞）が蓄積し、平滑筋細胞が増殖し、 動脈が肥厚し硬化する障害を起こすことを特徴とする。泡沫細胞へのコレステロ ール蓄積の主な原因は、循環ＬＤＬである。多数の疫学的および臨床学的研究か ら、ＬＤＬは血漿中総コレステロールの約７０％を輸送するキャリアとして、最 も強力なアテローム生成リポタンパク質であることが立証された。ＬＤＬコレス テロールの上昇は特にアテローム硬化のリスクを高め、低下はリスクを減少させ る。脂質研究クリニックの冠動脈初期防止試験（ＬＲＣ−ＣＰＰＴ）により、ヒ トにおけるＬＤＬコレステロール量の低下が心筋梗塞の発症率および梗塞による 死亡率を減少させるという確かな証 拠が初めて示された。 マクロファージを含むほとんど全ての細胞が、ＬＤＬ受容体を介して外因性の コレステロールを取り込む。しかし、細胞のコレステロール含量が増加するとＬ ＤＬ受容体数のダウンレギュレーションが起こり、これにより細胞はこの経路に よる過度のコレステロール蓄積から保護される。ＬＤＬの酸化を含む化学的ある いは生物学的修飾が起こると、スカベンジャー受容体と名付けられた他の細胞表 面受容体による修飾リポタンパク質の取り込みが増加することが示された。これ らの受容体は、マクロファージおよび内皮細胞上に存在する。 ＬＤＬの酸化修飾は、アテローム性動脈硬化の原因的役割を果たすと考えられ る（例えば、Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇ Ｄ．，Ｐａｒｔｈａｓａｒａｔｈｙ Ｓ．， Ｃａｒｅｗ Ｔ．Ｅ．，Ｋｈｏｏ Ｊ．Ｃ．ａｎｄ Ｗｉｔｚｔｕｍ Ｊ．Ｌ， “Ｂｅｙｏｎｄ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ：ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｌｏｗ−ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｔｈａｔ ｉｎｃｒｅａ ｓｅ ｉｔｓ ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃｉｔｙ”，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ． １９８９；３２０：９１５−９２４；Ｈａｂｅｒｌａｎｄ Ｍ． Ｅ．ａｎｄ Ｆｏｇｅｌｍａｎ Ａ．Ｍ．，“Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ａｌｔ ｅｒｅｄ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉ ｓ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ”，Ａｍ．Ｈｅａｒｔ．Ｊ．１９８ ７；１１３：５７３−５７７；ａｎｄ Ｗｉｔｚｔｕｍ Ｊ．Ｌ．，“Ｔｈｅ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏ ｓｉｓ”，Ｌａｎｃｅｔ．１９９４；３４４，７９３を参照）。したがって、抗 酸化剤を用いてＬＤＬ酸化を防止することにより、アテローム性動脈硬化の進行 が抑えられると考えられる。Ａｖｉｒａｍ Ｍ．Ｂｅｙｏｎｄ ｃｈｏｒｅｓｔ ｅｒｏｌ：Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｎ ｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃｉｔｙ．Ｉｎ Ａｈｅｒｏｓ ｃｌｅｒｏｓｉｓ，ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ （Ｇ．Ｇ．Ｎｅｒｉ Ｓｅｒｎｅｒｉ，Ｇ．Ｆ．Ｇｅｎｓｉｎｉ，Ｒ．Ａｂｂａ ｔｅ ａｎｄ Ｄ．Ｐｒｉｓｃｏ ｅｄｓ）−Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｅｓｓ −Ｆｌｏｒｅｎｃｅ，Ｉｔａｌｙ，ｐｐ：１５−３６，１９９３． アテローム硬化型障害の進行を妨げる能力は、公衆衛生と大きな関連性がある 。よって、コレステロールを低下し酸化修飾を阻害するというような複数の効果 を有する治療薬を使用することにより、他の個々の薬剤を超える有益な効果がも たらされる。 カロチノイドは親油性の性質を有する色素であり、果物や野菜に広く存在し（ 例えば、ニンジンのβ−カロチンやトマトのリコピン）、いくらかの抗酸化性を 有する（例えば、Ｂｕｒｔｏｎ Ｇ．Ｗ．，“Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔ ｉｏｎ ｏｆ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ，”１９８９；Ｊ．Ｎｕｔｒ．１１９： １０９−１１１ ａｎｄ Ｋｒｉｎｓｋｙ Ｎ．Ｉ.，“Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎ ｔ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ”，Ｆｒｅｅ Ｒａｄ ｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１９８９，７：６１７−６３５（９−１３）を参照） 。カロチノイドは循環リポタンパク質内に輸送され、ＬＤＬを酸化修飾から保護 する反応にあずかると想定される。 以前の疫学的研究では、カロチノイドの消費は心血管性死亡率の減少と関連性 があることが示された（例えば、Ｋｏｈｌｍｅｉｅｒ Ｌ．ａｎｄ Ｈａｓｔｉ ｎｇ Ｓ．Ｂ．， “Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ａｒｏｌｅ ｏｆ ｃａｒｏｅｎｏｉｄｓ ｉｎ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ”，Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．１９９５；６２： １３７Ｓ−１４６Ｓを参照）が、最近のデータによると同様の有益な効果は見ら れていない（例えば、Ｈｅｎｎｅｋｅｎｓ Ｃ．Ｈ．，Ｂｕｒｉｎｇ Ｊ．Ｅ． ，Ｍａｎｓｏｎ Ｊ．Ｅ．，Ｓｔａｍｐｆｅｒ Ｍ.，Ｒｏｓｉｅｒ Ｂ.，Ｃｏ ｏｋ Ｎ．Ｒ．，Ｂｅｌａｎｇｅｒ Ｃ．，ＬａＭｏｔｔｅ Ｆ．，Ｇａｚｉａ ｎｏ Ｊ．Ｍ．，Ｒｉｄｋｅｒ Ｐ．Ｍ．，Ｗｉｌｌｅｔｔ Ｗ．ａｎｄ Ｐｅ ｔｏ Ｒ．，“Ｌａｃｋ ｏｆ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ ｓ ｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｂｅｔａ ｃａｒｏｔｅｎ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｎｅｏｐｌａｓｍｓ ａｎｄ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｎ．Ｅｎｇｌ． Ｊ．Ｍｅｄ．１９９６；３３４：１１４５−１１４９を参照）。 最近、血漿脂質過酸化の減少がトマトの消費増加と関連していることが示され た。血漿カロテイノイド量が低量であること と心筋梗塞のリスクの高さに関連性があることが示され、近年、β−カロチンと 急性心筋梗塞の関係が多価不飽和脂肪酸の状態に依存し、コレステロールを餌と しているラットにβ−カロチンの全トランス形異性体を与えるとｅｘ ｖｉｖｏ でのＬＤＬ酸化には影響を及ぼさすアテローム性動脈硬化の程度を減じることが 実証された。ｉｎ ｖｉｔｒｏあるいはｉｎ ｖｉｖｏにおいてβ−カロチンを 補充するとＬＤＬを酸化から保護できるという能力に関するデータには矛盾があ り、いくつかの研究ではβ−カロチンの補充のＬＤＬ酸化への阻害効果が認めら れているが、他の多くの研究ではそのような効果は認められていない。 リコピンはβ−カロチンの開放鎖（ｏｐｅｎ ｃｈａｉｎ）状類似体であり、 伸張した共役二重結合を有する類似の構造を共有する。ヒトの血漿内では、リコ ピンとβ−カロチンは量的に主要なカロチノイドである。リコピンは、様々なカ ロチノイドの中でも一重項酸素をクエンチする非常に高い能力を有することが示 され（ＤｉＭａｓｃｉｏ Ｐ．，Ｋａｉｓｅｒ Ｓ．＆ Ｓｉｅｓ Ｈ．，“Ｌ ｙｃｏｐｅｎｅ ａｓ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｂｉｏｌｏｇ ｉｃａｌ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ ｓｉｎｇｌｅｔ ｏｘｙｇｅｎ ｑｕｅｎｃｈｅｒ，” Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，１９８９，２７４：５３２−５ ３８）、ＮＯ₂ラジカルによる損傷から血液リンパ球を保護する上で、β−カロ チンに比べ少なくとも二倍の抗酸化効果を有することが示された（Ｂｏｈｍ Ｆ ．，Ｔｉｎｋｌｅｒ Ｊ．Ｈ．，ａｎｄ Ｔｒｕｓｃｏｔｔ Ｔ．Ｇ．，“Ｃａ ｒｏｔｅｎｏｉｄｓ ｐｒｏｔｅｃｔ ａｇａｉｎｓｔ ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒ ａｎｅ ｄａｍａｇｅ ｂｙ ｔｈｅ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｄｉｏｘｉｄｅ ｒ ａｄｉｃａｌ”，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９９５，２：９８−９９ ）。 我々は最近、ＬＤＬの酸化修飾に対するトマトリコピンの保護効果を示した。 リコピンによるこのＬＤＬの保護効果はβ−カロチンによって示される保護効果 を超え、高いビタミンＥ含量とでＬＤＬのみに選択的であり、カロチンがビタミ ンＥと共存するときに見られた（例えば、Ｆｕｈｒｍａｎ Ｂ，Ｂｅｎ Ｙａｉ ｓｈ Ｌ，Ａｔｔｉａｓ Ｊ．Ｈａｙｅｋ Ｔ．Ａｖｉｒａｍ Ｍ．Ｔｏｍａｔ ｏｅｓ ｌｙｃｏｐｅｎｅ ａｎｄ β−ｃａｒｏｔｅｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔ ｌｏｗ ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈ ｉｓ ｅｆｆｅｃｔ ｄｅｐｅｎｄｓ ｏｎ ｔｈｅ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｃｏｎｔｅｎｔ．Ｎｕｔｒ Ｍｅｔａｂ．Ｃａｒｄｉｏ ｖａｓｃ．Ｄｉｓ ７：４３３−４４３，１９９７を参照）。さらに我々はまた 、リコピンの食物補充が細胞のコレステロール合成に阻害効果を示すことから穏 やかな低コレステロール血症剤として働くことを示した（例えば、Ｆｕｈｒｍａ ｎ Ｂ．，Ｅｌｉｓ Ａ．，Ａｖｉｒａｍ Ｍ．，Ｈｙｐｏｃｈｏｌｅｓｔｅｒ ｏｌｅｍｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｌｙｃｏｐｅｎｓ ａｎｄ β−ｃａｒｏ ｔｅｎｅ ｉｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｈ ｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ＬＤＬ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｍａｃｒｏｐｈ ａｇｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２３３： ６５８−６６２，１９９７を参照）。 最近出願されたイスラエル特許出願番号第１２３，１３２号は、リコピンとニ ンニク混合物のＬＤＬ酸化防止への使用を包 含する。目的 本発明の目的は、リコピンとビタミンＥの新規混合物を提供することである。 本発明の目的は、ＬＤＬの酸化および／またはアテローム性動脈硬化を遮断する ことに活性なリコピンとビタミンＥの相乗作用混合物を提供すること、および血 漿中のコレステロール量を減少することである。本発明のさらなる目的は、アテ ローム性動脈硬化の進行を抑制する医薬組成物あるいは食物組成物を調製するた めの上述した混合物の使用である。本発明のさらなる目的は、許容可能で且つ有 害な食物を除去した産物を実質的に含む、アテローム性動脈硬化の進行を抑制す る組成物を提供することである。発明の要約 本発明は、ＬＤＬ酸化の防止においてリコピンとビタミンＥに意外な驚くべき 相乗効果があるという発見に基づく。リコピンは天然産物であり様々な濃度でト マトに存在するが、真菌、藻類により、あるいは遺伝的に修飾した有機体（ＧＭ Ｏ）での発酵により、あるいは合成的方法により生産できる。リコピンを含む組 成物およびその使用は本発明に包含される。広く使用 されるビタミンＥ原料はダイズ留出物である。 よって、本発明はリコピンとビタミンＥの組み合わせである組成物を提供する 。 組成物は、添加剤、賦形剤、結合剤、コーティング等の他の食物成分、あるい はＬＤＬ酸化の防止に重要な効果をもたない他の化合物を含んでもよい。本発明 による組成物は、その目的から見て医薬組成物である。しかしながら、これらの 成分はそれぞれヒトの食物として許容可能な成分であり、事実個々に食品中に存 在するので、食物あるいは健康補助剤として考え使用してもよい。 ＬＤＬ酸化を防止するための医薬品、医薬組成物、あるいは食物、健康組成物 の成分としての該化合物の組み合わせの使用も本発明の様態である。 ＬＤＬ酸化を防止するためのトマトオレオレジンの使用は本発明の特有の様態 である。 本発明による組成物はリコピンとビタミンＥをモル比で１：４００から１０： １、好ましくは１：８０から５：１含む。錠剤やソフトゲルカプセル剤といった 単位組成物中のリコピン量は、１〜４ｍｇ、好ましくは約２〜３ｍｇの範囲、最 高で１５ ｍｇまででなくてはならない。 本発明はＬＤＬ酸化を防止する方法、従ってアテローム性動脈硬化の進行を抑 制する方法を含み、それは患者に該相対的な量のリコピンとビタミンＥを投与す ることを含む。好ましい実施形態の詳細な説明 本発明を実施する好適方法および後に説明する実施例では、リコピンはトマト オレオレジンから得られる。オレオレジンはＬｙｃｏＲｅｄ−Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｌｔｄ，Ｂｅｅｒ Ｓｈｅｖａ，Ｉ ｓｒａｅｌにより供給された。オレオレジンは、トマトの脂質相に懸濁された結 晶リコピン（６．０％）からなる。トリグリセリドのような脂肪酸がオレオレジ ンの主な部分（７２％）を構成するが、１９％は６．０％リコピン、０．１％β −カロチン、及び１％ビタミンＥを含む非けん化物質である。残りは水と水溶性 物質から成る。使用したリコピンは主に全トランス形構造で抽出され精製された 。リコピンは、特許番号ＷＯ ９７／４８２８７に記述されたようにトマトオレ オレジンから抽出できる。 ビタミンＥは製薬市場で容易に入手可能である。 該成分は、オレオレジンの形態であるいはビードレット（ｂ ｅａｄｌｅｔ）のような固形形態で好都合に入手可能で使用できる。材料 ヒトＬＤＬへのリコピンの補充 １ｍＭ精製リコピンあるいは１０ｍｇ／ｍｌトマトオレオレジンの原液は、テ トラヒドロフラン（ＴＨＦ、ＨＰＬＣグレード）で調製した。手順はすべて薄明 かりの下で実施した。ＬＤＬはそれぞれの濃度のトマトオレオレジンあるいは３ μＭリコピン（３μｌ／ｍｌ ＴＨＦ、１ｍＭ原液由来）と暗下で３７℃、３０ 分間インキュベートした。ＴＨＦのみとインキュベートしたＬＤＬを対照とした 。ＬＤＬ酸化 ＬＤＬの酸化は、プラスチックチューブ（直径１ｃｍ）内で通気下、３７℃の 振盪ウォーターバスにて実施した。ＬＤＬの金属イオン依存性酸化については、 新たに調製したＣｕＳＯ₄（５μＭ）と共に３７℃で４時間インキュベートした 。 ＬＤＬの酸化は、チオバルビツール酸反応性物質（ＴＢＡＲＳ）の量を測定す ることにより（Ｂｕｅｇｅ Ｊ．Ａ．ａｎｄ Ａｕｓｔ Ｓ．Ｄ．Ｍｉｃｒｏｓ ｏｍａｌ ｌｉｐｉｄ ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．１９７８；５２ ：３０２−３１０を参照）、および市販のキットを使用して脂質過酸化物形成に より定量した。ＬＤＬ酸化に対するリコピンあるいはビタミンＥ単独での効果 ＬＤＬ（１００μｇタンパク質／ｍｌ）をビタミンＥあるいは様々な形態のリ コピンと３７℃で３０分間プレインキュベートした。ＬＤＬの酸化は５μＭ Ｃ ｕＳＯ₄を添加することにより誘導し、３７℃で３０分間プレインキュベートし た。ＬＤＬの酸化は、ＴＢＡＲＳアッセイにより、あるいは脂質過酸化物の形成 阻害を測定することにより測定した。図１にビタミンＥによる阻害、図２に結晶 リコピンを示した。図３にはトマトオレオレジンの効果を、比較のために図４に は天然に存在するビタミンＥを抽出したトマトオレオレジンの結果を示した。ＬＤＬ酸化に対するリコピンとビタミンＥとの組み合わせでの効果 ＬＤＬ酸化に対するビタミンＥとリコピンの組み合わせでの抗酸化効果は、図 ５から７に示した方法で評価し、個々の抗酸化剤によるＬＤＬ酸化の阻害程度は 縦座標に示される。 先に示した試験は、銅誘導酸化中にビタミンＥとリコピンを 共にＬＤＬに添加した時に相乗効果が起こることを示している。このＬＤＬ酸化 への相乗阻害効果は、おそらくビタミンＥとリコピンの異なる抗酸化メカニズム への寄与に関連していると考えられる。ビタミンＥは鎖状切断剤であり、フリー ラジカルスカベンジャーとして働くが、リコピンは酸素クエンチャーでもあり強 力なフリーラジカルスカベンジャーでもある。それゆえ、ビタミンＥとリコピン のようなＬＤＬ酸化への相乗阻害効果をもつ二つの抗酸化剤を組み合わせて投与 することは、個々の抗酸化剤を別々に投与するより有効である。このことは、抗 酸化剤の組み合わせを含むトマトオレオレジンのＬＤＬ酸化阻害効果によりさら に証明される。 文献に発表されたいくつかの事例では、ビタミンＥ単独ではＬＤＬ酸化を効果 的に低下させない。それにもかかわらず、リコピンあるいはトマトのオレオレジ ンをビタミンＥに添加すると、ＬＤＬ酸化を低下させる顕著な相乗効果が起こる 。実施例 一般 図１：ビタミンＥはＴＢＡＲＳ(Ａ)あるいは脂質過酸化物(Ｂ)形成によって測定 されるように、ＣｕＳＯ₄誘導ＬＤＬ酸化に対 して依存的阻害をする。ビタミンＥはテトラヒドロフランに溶解し、ＴＢＡＲＳ 阻害および脂質過酸化物形成阻害のＩＣ₅₀はそれぞれ６μＭ、６．５μＭである 。 図２：銅イオン誘導ＬＤＬ酸化に対する結晶リコピンによる阻害。用いた最高濃 度（５０μＭ）では、ＴＢＡＲＳにおいても過酸化脂質形成においても５０％の 阻害を達成しなかった。 図３：銅イオン誘導ＬＤＬ酸化に対するＬＹＣ−Ｏ−ＭＡＴＯ（６％）(ＬＹＣ −Ｏ−ＭＡＴＯは天然トマトオレオレジンのＬｙｃｏｒｅｄ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄでの商品名である)による阻 害。ＴＢＡＲＳ阻害のＩＣ₅₀は７.８μＭである。使用した最高濃度(１２μＭ) では、過酸化脂質形成において５０％の阻害を達成しなかった。 図４：ビタミンＥを含まないＬＹＣ−Ｏ−ＭＡＴＯ（６％）(ビタミンＥは抽出 し、その物質はＬＹＣ−Ｏ−ＭＡＴＯ（ＤＷ）と命名する)の銅イオン誘導ＬＤ Ｌ酸化に対する阻害。ＴＢＡＲＳ阻害のＩＣ₅₀は７．８μＭである。使用した最 高濃度（１２μＭ）では、過酸化脂質形成において５０％の阻害を達成しなかっ た。 トマトオレオレジン中に天然で１％存在するビタミンＥ濃度は、０.２１３μ ＭビタミンＥに等しく、該オレオレジンは６％のリコピンを含む。したがって、 図６での真のビタミンＥ濃度は表記濃度プラス０．２１３μＭである。図５はビ タミンＥを含まない結晶リコピンを使用したデータである。同様に、図７では、 ビタミンＥおよび他のワックスを除去したトマトオレオレジンを使用した。実施例１ 銅イオン誘導ＬＤＬ酸化に対するビタミンＥと結晶リコピンの組み合わせでの 相乗効果について検討した。表１に詳細を示す。相乗効果を計算するのに用いた コルビー式の個々の成分は以下の通りである。 Ａ ＋ Ｂ − （ＡＢ／１００） ＝ 期待対照値 式中、Ａ ＝ ビタミンＥ単独でのパーセント対照値 Ｂ ＝リコピン単独でのパーセント対照値 相乗効果 ＝ Ｉ_F／Ｉ_E 式中、Ｉ_F ＝ 実際のパーセント対照値 Ｅ ＝ 期待パーセント対照値 Ｉ_F／Ｉ_E比が明らかに１より大きければ相乗効果が証明され る。結果を表１および図５に示す。実施例２ 実施例１の方法にしたがって、ビタミンＥとＬＹＣ−Ｏ−ＭＡＴＯ（リコピン ６％）の相乗効果を測定した。結果を表１と図６に示す。実施例３ 実施例１の方法にしたがって、ビタミンＥとビタミンＥを抽出したＬＹＣ−Ｏ −ＭＡＴＯ（リコピン６％）の相乗効果を測定した。結果を表１と図７に示す。 表１：コルビー式に適用される実験１〜３のデータ（％） ^aＡ＝ビタミンＥ；、^aＢ＝リコピン^b １μＭＡ ＆ １μＭＢ^c １μＭＡ ＆ ６μＭＢ^d ＴＢＡＲＳの阻害^e 脂質過酸化物の阻害^f １μＭＡ ＆ ５μＭＢ 本発明の実施例および実験データを図示したが、本発明はそれに限らず、その 精神から逸脱せずまた特許請求の範囲を超えずに多くの修飾、変更、適応と共に 実施してもよいことを理解されたい。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 9/10 Ａ６１Ｐ 9/10 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ， ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，Ｌ Ｓ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ， ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，Ｅ Ｅ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ， ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，Ｍ Ｄ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ， ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，Ｕ Ｚ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 フルマン，ビアンカ イスラエル国、32983・ハイフア、イガ ル・アロン・26 (72)発明者 アビラム，ミカエル イスラエル国、26253・キリアト・ハイム、 ハプルゴト・59 (72)発明者 ニル，ゾハル イスラエル国、85025・メイタル、ピー・ オー・ボツクス・767、イエリム・27 (72)発明者 ゼルカ，モリス イスラエル国、84965・オーメル、ハダ ル・10

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．リコピンとビタミンＥから成る相乗作用医薬組成物あるいは食物組成物。 ２．リコピンがトマトオレオレジン、藻類、発酵、真菌及び遺伝的に修飾した有 機体（ＧＭＯ）由来のリコピン、合成リコピン、並びにそれらの混合物から成る グループから選択される、請求項１に記載の組成物。 ３．ビタミンＥの濃度が０．０２５μＭから５０μＭ、好ましくは０．１μＭか ら２０μＭ、最も好ましくは０．５μＭから５μＭの範囲である、請求項１に記 載の組成物。 ４．リコピンの濃度が０．０２５μＭから５０μＭ、好ましくは０．１μＭから ２０μＭ、最も好ましくは１μＭから１０μＭの範囲である、請求項１に記載の 組成物。 ５．リコピンとビタミンＥのモル比が１：４００から１０：１、好ましくは１： ８０から５：１である、請求項３又は４に記載の組成物。 ６．組成物が食物成分、添加物、賦形剤、結合剤、コーティング剤、保存剤、及 びそれらの混合物から成るグループから選択 される化合物を含む、請求項１から５のいずれかに記載の組成物。 ７．リコピンとビタミンＥ混合物が錠剤、カプセル、ベジキャップ、及びハード シェルゼラチンカプセルから成るグループから選択される剤形に含まれる、請求 項１から６のいずれかに記載の組成物。 ８．アテローム性動脈硬化の進行抑制用医薬組成物あるいは食物組成物調製のた めのリコピンとビタミンＥを含む、相乗作用組成物の使用。 ９．リコピンがトマト、藻類、発酵、真菌及び遺伝的に修飾した有機体（ＧＭＯ ）由来のリコピン、合成リコピン、並びにそれらの混合物から成るグループから 選択される、請求項８に記載の使用。 １０．ビタミンＥの濃度が０．０２５μＭから５０μＭ、好ましくは０．１μＭ から２０μＭ、最も好ましくは０．５μＭから５μＭの範囲である、請求項８に 記載の使用。 １１．リコピンの濃度が０．０２５μＭから５０μＭ、好ましくは０．１μＭか ら２０μＭ、最も好ましくは０．５μＭから１０μＭの範囲である請求項８又は ９に記載の使用。 １２．リコピンとビタミンＥのモル比が１：４００から１０：１、好ましくは１ ：８０から５：１である、請求項８から１１のいずれかに記載の使用。 １３．組成物が食物成分、添加物、賦形剤、結合剤、コーティング剤、保存剤、 及びそれらの混合物から成るグループから選択される化合物を含む請求項８から １２のいずれかに記載の使用。 １４．リコピンとビタミンＥ混合物が錠剤、カプセル、ベジキャップ、ハードシ ェルゼラチンカプセルから成るグループから選択される剤形に含まれる請求項８ から１３に記載の使用。 １５．血清を、リコピンとビタミンＥから成る相乗作用組成物に接触させること を含む、血清中のＬＤＬ酸化を遮断する方法。 １６．リコピンがトマトオレオレジン、藻類、発酵、真菌及び遺伝的に修飾した 有機体（ＧＭＯ）由来のリコピン、合成リコピン、並びにそれらの混合物から成 るグループから選択される、請求項１５に記載の方法。 １７．ビタミンＥの濃度が０．０２５μＭから５０μＭ、好ましくは０．１μＭ から２０μＭ、最も好ましくは０．５μＭから５μＭの範囲である、請求項１５ 又は１６のいずれかに記載 の方法。 １８．リコピンの濃度が０．０２５μＭから５０μＭ、好ましくは０．１μＭか ら２０μＭ、最も好ましくは０．５μＭから１０μＭの範囲である請求項１５又 は１６のいずれかに記載の方法。 １９．リコピンとビタミンＥのモル比が１：４００から１０：１、好ましくは１ ：８０から５：１である請求項１７又は１８のいずれかに記載の方法。 ２０．組成物が食物成分、添加物、賦形剤、結合剤、コーティング剤、保存剤、 及びそれらの混合物から成るグループから選択される化合物を含む、請求項１５ から１９のいずれかに記載の方法。 ２１．リコピンとビタミンＥの混合物が錠剤、カプセル、ベジキャップ、ハード シェルゼラチンカプセルから成るグループから選択される剤形に含まれる請求項 １５から２０のいずれかに記載の方法。 ２２．アテローム性動脈硬化の進行抑制用医薬組成物あるいは食物組成物調製へ のトマトのオレオレジンの使用。 ２３．血清をトマトオレオレジンに接触させることを含む血清 中のＬＤＬ酸化を遮断する方法。 ２４．組成物が食物成分、添加物、賦形剤、結合剤、コーティング剤、保存剤、 それらの混合物から成るグループから選択される化合物を含む請求項２３に記載 の方法。 ２５．トマトオレオレジンが錠剤、カプセル、ベジキャップ、ハードシェルゼラ チンカプセルから成るグループから選択される剤形に含まれる請求項２３又は２ ４のいずれかに記載の組成物。