JP2002503674A - βシート模倣物およびその使用に関する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 β−シート模倣物およびそれらに関する方法が開示される。β−シート模倣物は、プロテアーゼおよびキナーゼインヒビター、ならびに転写因子およびタンパク質−タンパク質結合相互作用のインヒビターとして有用性を有する。本発明の方法は、β−シート模倣物の投与、あるいは標的のプロテアーゼ、キナーゼ、転写因子および／またはタンパク質−タンパク質結合相互作用に関連した種々の状態の処置のための薬剤の製造に関するβ−シート模倣物の使用を含む。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 （技術分野） 本発明は、一般にβシート模倣物に関し、より詳細には生物学的活性ペプチド
およびタンパク質を阻害するβシート模倣物に関する。

【０００２】 （発明の背景） βシートコンホメーション（β鎖コンホメーションともいう）は、多くのポリ
ペプチド中に存在する２次構造である。βシートコンホメーションは、隣接する
アミノ酸間の軸距離が約３．５Åで、ほぼ完全に伸張している。βシートは、異
なるポリペプチド鎖中のＮＨ基とＣＯ基との間の水素結合により安定化される。
さらに、ペプチド結合の双極子は、βシートに本質的な安定性を与える鎖にそっ
て交互になる。βシート中の隣接する鎖は、同一方向に伸び得る（すなわち、平
行βシート）か、または反対方向に伸び得る（すなわち、逆平行βシート）。２
つの形態は二面角がわずかに異なるが、両方とも立体的には好ましい。βシート
コンホメーションの伸張したコンホメーションにより、βシートの交互の面に突
き出るアミノ酸側鎖が生じる。

【０００３】 ペプチドおよびタンパク質におけるβシートの重要性は、十分に確立されてい
る（例えば、Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ２６８：４９５−４９９，
１９９７；Ｈａｌｖｅｒｓｏｎら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１３：６７
０１−６７０４，１９９１；Ｚｈａｎｇ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６：１
５５９１−１５５９６，１９９１；Ｍａｄｄｅｎら、Ｎａｔｕｒｅ，３５３：３
２１−３２５，１９９１）。βシートは、多くの生物学的なタンパク質−タンパ
ク質認識事象において重要であり（これには、プロテアーゼとそれらの基質との
間の相互作用、プロテインキナーゼとそれらの基質またはインヒビターとの間の
相互作用、タンパク質を含有するＳＨ２ドメインの、タンパク質標的を含むそれ
らの同属ホスホチロシンへの結合、ファルネシルトランスフェラーゼのそのタン
パク質基質への結合、ならびにＭＨＣ ＩおよびＩＩとそれらの抗原性ペプチド
との間の相互作用が挙げられる）、そして多くの疾患状態に関係している。

【０００４】 生物学的に活性なタンパク質またはペプチドのβシート構造を模倣するインヒ
ビターは、幅広い種々の状態の処置に効用を有する。例えば、ｒａｓ癌遺伝子の
タンパク質産物であるＲａｓは、細胞分裂および細胞増殖を調節するシグナル伝
達に関与する膜結合タンパク質である。ｒａｓ遺伝子の変異は、ヒトの癌と関連
する最も一般的な遺伝的異常である（Ｂａｒｂａｃｉｄ，Ｍ．「ｒａｓ ｇｅｎ
ｅｓ」５６：７７９〜８２７、１９８７）。これらの変異は、常に「オン」とな
る増殖シグナルとなり、癌性の細胞に至る。細胞膜に限局化するため、Ｒａｓは
、そのＣ末端ＣａａＸ配列内のシステインのファルネシルトランスフェラーゼ（
ＦＴａｓｅ）によるプレニル化を必要とする。（配列ＣａａＸにおいて、「ａ」
は疎水性側鎖を有するアミノ酸、そして「Ｘ」は別のアミノ酸として定義される
。）この翻訳後修飾は、その活性に重要である。配列ＣａａＸを有するＦＴａｓ
ｅのペプチドインヒビターは、細胞培養および動物全体において腫瘍の増殖を遮
断するかまたは遅延させることが示された（Ｋｏｈｌら、「Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ
ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｓ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｔｒａｎｓｆｏ
ｒｍａｔｉｏｎ ｂｙ ａ ｆａｒｎｅｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ｉｎｈ
ｉｂｉｔｏｒ」Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６０：１９３４〜１９３７、１９９３；Ｂｕ
ｓｓ，Ｊ．Ｅ．＆Ｍａｒｓｔｅｒｓ，Ｊｒ．Ｊ．Ｃ．「Ｆａｒｎｅｓｙｌ ｔｒ
ａｎｓｆｅｒａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：ｔｈｅ ｓｕｃｃｅｓｓｅｓ ａ
ｎｄ ｓｕｒｐｒｉｓｅｓ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｃｌａｓｓ ｏｆ ｐｏｔｅｎ
ｔｉａｌ ｃａｎｃｅｒ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」Ｃｈｅｍｉｓ
ｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２：７８７〜７９１、１９９５）。

【０００５】 起源的にＰＴＫのｓｒｃサブファミリーにおいて同定されたＳＨ２ドメインは
、非触媒配列であり、そして種々のシグナル変換タンパク質の中に保存される約
１００アミノ酸からなる（Ｃｏｈｅｎら、Ｃｅｌｌ ８０：２３７〜２４８、１
９９５）。ＳＨ２ドメインは、ホスホチロシン結合モデュールとして機能し、そ
して重要なタンパク質−タンパク質会合を媒介する（Ｐａｗｓｏｎ、Ｎａｔｕｒ
ｅ ５７３〜５８０、１９９５）。特に、ＳＨ２ドメインの役割は、チロシンキ
ナーゼレセプターのための重要なシグナル変換器として明確に規定される（ＥＧ
Ｆ−Ｒ、ＰＤＧＦ、インシュリンレセプターなどのようなＲＴＫ）。自己リン酸
化ＲＴＫ上のホスホチロシン含有部位はＳＨ２−タンパク質のための結合部位と
して役立ち、そしてこれにより、生化学的シグナル経路の活性化を媒介する（Ｃ
ａｒｐｅｎｔｅｒ，Ｇ．，ＦＡＥＳＥＢ Ｊ．６：３２８３〜３２８９、１９９
２；Ｓｉｅｒｋｅ，Ｓ．およびＫｏｌａｎｄ，Ｊ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：１
０１０２〜１０１０８、１９９３）。ＳＨ２ドメインは、活性化された増殖因子
レセプターの細胞応答への結合について担当し、これには遺伝子発現、細胞増殖
、細胞骨格構造および代謝における変化が挙げられる。

【０００６】 少なくとも２０のサイトゾルタンパク質が、ＳＨ２ドメインを含有し、そして
細胞内シグナル伝達に機能することが確認された。ＳＨ２ドメインのこの分布は
、特定のタンパク質ファミリーに限定されず、幾つかのクラスのタンパク質、プ
ロテインキナーゼ、脂質キナーゼ、タンパク質ホスファターゼ、ホスホリパーゼ
、Ｒａｓ制御タンパク質および幾つかの転写因子において見出される。多くのＳ
Ｈ２含有タンパク質は、公知の酵素活性を有するが、他のもの（Ｇｒｂ２および
Ｃｒｋ）は、細胞表面レセプターと下流のエフェクター分子との間の「リンカー
」および「アダプター」として機能する（Ｍａｒｅｎｇｅｒｅ，Ｌ．ら、Ｎａｔ
ｕｒｅ ３６９：５０２〜５０５、１９９４）。シグナル変換において活性化さ
れる酵素活性を有するＳＨ２ドメインを含有するタンパク質の例には、タンパク
質チロシンキナーゼのｓｒｃサブファミリー（ｓｒｃ（ｐｐ６０^c-src）、ａｂ ｌ、ｌｃｋ、ｆｙｎ、ｆｇｒなど）、ホスホリパーゼＣ−γ（ＰＬＣ−γ）、ホ
スファチジルイノシトール ３−キナーゼ（ｐｌ−３−キナーゼ）、ｐ２１−ｒ
ａｓ ＧＴＰａｓｅ活性化タンパク質（ＧＡＰ）およびＳＨ２含有タンパク質チ
ロシンホスファターゼ（ＳＨ−ＰＴＰａｓｅ）が挙げられるが、これらに限定さ
れない（Ｓｏｎｇｙａｎｇら、Ｃｅｌｌ ７２：７６７〜７７８、１９９３）。
細胞内チロシンは、表面レセプターが、増殖因子レセプター、サイトカインレセ
プター、インスリンレセプター、およびＴまたはＢ細胞レセプターを介する抗原
媒介シグナル伝達のための多様なリガンドに連動する場合に、リン酸化される。
タンパク質のチロシン残基でのリン酸化は、細胞シグナル変換、腫瘍性形質転換
、および細胞周期の制御において重要である。これらの種々のＳＨ２−タンパク
質が、活性化細胞表面レセプターからさらなる分子相互作用（これは、細胞応答
を究極的に規定する）のカスケードへのシグナル伝達を占めるという中心的な役
割のため、特定のＳＨ−２タンパク質結合を遮断するインヒビターは、種々の潜
在的治療用途のための薬剤として望まれ得る。

【０００７】 チロシンリン酸化およびＳＨ２結合の阻害が薬物開発のための標的となる疾患
領域には、以下のものが挙げられる。

【０００８】 癌： シグナル伝達を媒介するＳＨ２ドメインは明らかに、癌遺伝子およびプ
ロト癌遺伝子チロシンキナーゼ活性ならびに細胞増殖の調節における重要な要素
である（Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ、Ｆｅｄ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｊ．
６：３２８３〜３２８９、１９９２）。ＳＨ２ドメインは、重要なセットの基質
を規定し（これにより、活性化ＲＴＫはシグナル伝達を媒介し、そして非レセプ
ターチロシンキナーゼはＲＴＫと会合する）、それゆえ、抗癌剤開発のための標
的である。ＲＴＫとＳＨ２含有基質との相互作用を、模倣性インヒビターを使用
して遮断する能力は、シグナル伝達を阻害しそしてこれにより発癌活性を取り除
く手段を提供する。生物学的重要性はまた、ほぼ完全にＳＨドメインから構成さ
れるタンパク質であるｖ−ｃｒｋ癌遺伝子（これは、ホスホチロシン含有タンパ
ク質と相互作用することにより、細胞の形質変換を引き起こし得る）により示さ
れる。上記のように、ＳＨ２ドメインを介した他のタンパク質へのｖ−ｃｒｋの
結合を遮断するインヒビターの能力は、抗癌剤として有効であると期待される。

【０００９】 免疫調節：多くの免疫応答の調節は、ＳＨ２ドメインを含有するチロシンキナ
ーゼを通してシグナルを伝達するレセプターにより媒介される。特異的抗原Ｔ細
胞レセプター（ＴＣＲ）を介するＴ細胞の活性化は、リンフォカイン分泌および
細胞増殖に至るシグナル伝達カスケードを開始させる。ＴＣＲ活性化に続く最も
早い生化学的応答のひとつは、チロシンキナーゼ活性の増加である。特に、Ｔ細
胞の活性化および増殖は、ｐ５６^lckおよびｐ５９^fynチロシンキナーゼ、ならび
にＺＡＰ−７０およびＳｙｋ（ＷｅｉｓｓおよびＬｉｔｍａｎ、Ｃｅｌｌ ７６
：２６３〜２７４、１９９４）（これらは、ＳＨ２ドメインを含有する）の活性
化を媒介するＴ細胞レセプターにより制御される。さらなる証拠は、いくつかの
ｓｒｃファミリーキナーゼ（ｌｃｋ、ｂｌｋ、ｆｙｎ）が、Ｂ細胞抗原レセプタ
ーから至るシグナル伝達に関与し、それゆえ、いくつかの独立したレセプター構
造から受容した刺激を統合するのに役立ち得るということを示す。従って、これ
らのＳＨ２ドメインキナーゼとそれらの同属レセプターとの相互作用を遮断する
インヒビターは、自己免疫疾患、移植の拒絶に効能を有する免疫抑制剤、または
リンパ性白血病の場合には抗炎症剤ならびに抗癌剤として役立ち得る。

【００１０】 さらに、ＳＨ２ドメインを含有する非膜貫通ＰＴＰａｓｅが公知であり、専門
用語は、それらをＳＨ−ＰＴＰ１およびＳＨ−ＰＴＰ２と称する（Ｎｅｅｌ、Ｃ
ｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ４：４１９〜４３２、１９９３）。ＳＨ−ＰＴＰ１は
、ＰＴＰ１Ｃ、ＨＣＰまたはＳＨＰと同一でありそしてＳＨ−ＰＴＰ２はまた、
ＰＴＰ１ＤまたはＰＴＰ２Ｃとして公知である。ＳＨ−ＰＴＰ１は、全ての系統
および分化の全ての段階の造血系細胞において高レベルで発現される。ＳＨ−Ｐ
ＴＰ１遺伝子は、虫食い（ｍｏｔｈｅａｔｅｎ（ｍｅ））マウス表現型の原因と
して同定されたので、これは、その細胞基質との相互作用を遮断するインヒビタ
ーの効果を予測するための基礎を提供する。従って、ＳＨ−ＰＴＰ１機能の阻害
は、上に記載したような潜在的治療用途を有する、マイトジェン刺激に対するＴ
細胞の応答の低下、ＮＫ細胞機能の減少、およびＢ細胞前駆体の枯渇になると期
待される。

【００１１】 糖尿病： ２型（非インスリン依存性）糖尿病において、チロシンホスファタ
ーゼ（ＳＨ−ＰＴＰ２）は、活性化インスリンレセプターキナーゼの効果を相殺
し、重要な薬物の標的となり得る。インビトロ実験は、ＰＴＰａｓｅの注入が、
内因性タンパク質上のチロシン残基のインスリン刺激のリン酸化を遮断すること
を示す。従って、インヒビターは、糖尿病におけるインスリン作用を調節するの
に役立ち得る。

【００１２】 神経再生： グリア増殖因子は、チロシンリン酸化およびＳｃｈｗａｎｎ細胞
のマイトジェン応答を促進するｅｒｂ−Ｂ２レセプターチロシンキナーゼ（ｐ１
８５^erbB2）の特異的アクチベーターであるリガンドである。その結果、神経障 害に続くＳｃｈｗａｎｎ細胞の活性変化によるチロシンリン酸化の調節は、重要
な治療的戦略であり得る。ｅｒｂ−Ｂ２シグナル伝達活性のインヒビターは、グ
リア細胞起源の腫瘍の処置に重要な役割を有し得る。

【００１３】 別のクラスのβ−シート模倣物は、プロテインキナーゼのインヒビターであり
、これには、タンパク質チロシンキナーゼおよびセリン／スレオニンキナーゼが
挙げられる。

【００１４】 固有のチロシンキナーゼ活性を有するポリペプチド増殖因子レセプターのため
の幅広い種々の細胞基質が、ここで特徴付けられる。多数のレセプターチロシン
キナーゼ（ＲＴＫ）ファミリーのメンバーの中には途方もなく大きな多様性があ
るが、これらのレセプターにより使用されるシグナル伝達機構は、多くの共通の
特徴を共有する。生化学的および分子遺伝学的研究は、ＲＴＫの細胞外ドメイン
に対するリガンドの結合が、細胞内ドメインの固有のチロシンキナーゼ触媒活性
を迅速に活性化することを示した。増加した活性は、共通の配列モチーフを含む
多数の細胞内基質のチロシン特異的リン酸化となる。その結果、これは、多数の
下流のシグナル伝達分子および細胞内経路のカスケードの活性化を引き起こし、
リン脂質代謝、アラキドン酸代謝、タンパク質リン酸化（他のプロテインキナー
ゼを含む）、カルシウムの移動および転写調節を調節する。ＲＴＫ細胞質ドメイ
ンの増殖因子依存チロシンキナーゼ活性は、複数の細胞応答を開始する細胞内シ
グナルの生成のための主要な機構である。それゆえ、代替基質として役立つイン
ホビターまたはチロシンキナーゼ活性のインヒビターは、このシグナル伝達を遮
断する可能性を有する。

【００１５】 ＲＴＫサブファミリーの多くは、触媒ドメインの構造的類似性ならびに細胞外
のリガンド結合性領域における特徴的なモチーフを基礎にして認識可能である。
これらの構造的考察に基づいて、ＲＴＫのいくつかのサブファミリー（各々、い
くつかのメンバーを含む）を規定する命名が発展した（Ｈａｎｋｓ、Ｃｕｒｒ．
Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃ．Ｂｉｏｌ．１：３６９〜３８３、１９９１；Ｕｌｌｒｉ
ｃｈ、Ａ．およびＳｃｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒ、Ｊ．Ｃｅｌｌ ６１：２０３〜２
１２、１９９０）。それらのプロトタイプメンバーに基づいて称されるレセプタ
ーサブファミリーの例には、ＥＧＦレセプター、インスリンレセプター、血小板
由来増殖因子（ＰＤＧＦレセプター）、線維芽細胞増殖因子レセプター（ＦＧＦ
Ｒ）、ＴＲＫレセプターおよびＥＰＨ／ＥＣＫレセプターが挙げられる。これら
のサブファミリーの各々のメンバーは、チロシンキナーゼ活性を遮断しそして細
胞内シグナル伝達を阻害する模倣物インヒビターの開発のための分子標的となる
。これらの標的が価値を有するいくつかの治療領域が、以下に特定される。

【００１６】 癌： 正常の細胞増殖を媒介することに加えて、ＲＴＫのＥＧＦＲファミリー
のメンバーは、種々の急速進行性上皮癌においてしばしば過剰発現しており、そ
してこれは、悪性腫瘍の発達に直接寄与すると考えられている。多数の研究が、
ＥＧＦＲがしばしば、特定の種類の腫瘍（グリア芽細胞腫、扁平上皮癌、および
脳腫瘍を含む）において増幅されていることを示した（Ｗｏｎｇら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８４：６８９９〜６９０３、１９８７）
。さらに、ＨＥＲ２／ｐ１８５^erbB2（あるいは、ラットでは「ｎｅｕ」と称さ れる）、ＨＥＲ３／ｐ１６０^erbB3、ＨＥＲ４／ｐ１８０^erbB4（Ｐｌｏｗａｎ，
Ｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：１７４６〜１７
５０（１９９３））は、ＥＧＦＲに対して広範なアミノ酸配列相同性を有する３
種のＲＴＫである。ＨＥＲ２／ｐ１８５^erbB2はしばしば、ヒト乳癌および卵巣 癌において増幅され、そして過剰発現しており（Ｗｏｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：６８９９〜６９０３、１９８７）、そし
てこの増幅は、患者の予後の悪さと相関している。ｐ１８５^neuおよびＥＧＦＲ の同時過剰発現は、げっ歯類の線維芽細胞を相乗的に形質変換させ、この状態は
しばしば、ヒトの癌において観察される。最後に、ＨＥＲ３の発現は、種々のヒ
ト腺癌において増幅されている。ＥＧＦＲに対してインビトロの阻害活性を示し
、ＥＧＦ依存細胞増殖を阻害するいくつかのインヒビターが公知であり、これは
、この活性を有する化合物の治療的可能性を示す。さらに、ヒト慢性骨髄性白血
病では、増大したチロシンキナーゼ活性が、細胞のｃ−ａｂｌプロト癌遺伝子の
活性化の結果としてこの疾患の根底にある。インヒビターは、抗癌剤として機能
する。

【００１７】 血管新生： 多様な範囲の生物学的応答（これには、血管新生を誘起する可能
性が含まれる）を媒介する少なくとも７つのＦＧＦＲメンバーが存在する。さら
に、別個のサブファミリーを示す７つのｌｇＬを有するＲＴＫのグループが提案
された。その公知メンバーであるＦＬＴ１、ＦＬＫ１およびＦＬＴ４は、構造お
よび発現の類似性を示す。これらのレセプターは、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ
）の作用を媒介する。いくつかの証拠は、この増殖因子レセプターのサブファミ
リーが血管の形成に重要な役割を果たすことを示す。血管形成は、腫瘍細胞に酸
素を供給するため、腫瘍により再活性化されるプロセスであるので、これらの増
殖因子のキナーゼ活性を阻害するβ−鎖模倣物は、血管新生の阻害を通して腫瘍
増殖を抑制するのに役立ち得る。

【００１８】 再狭窄： ＰＤＧＦレセプターは、環状血管分野における阻害のための標的と
して大きな関心を集めているが、これは、ＰＤＧＦレセプターが、環状動脈バル
ーン血管形成後の再狭窄、そしてまたアテローム性動脈硬化において重要な役割
を果たすと考えられているためである。血管の損傷表面での血小板によるＰＤＧ
Ｆの放出は、血管平滑筋細胞のＰＤＧＦレセプターの刺激、およびその結果生じ
る新生内膜肥厚の原因となる。キナーゼ活性の模倣物インヒビターは、増殖を予
防し、そしてこの手術の手順からより大きな好結果を導く。

【００１９】 シグナル変換経路の多くの要素は、タンパク質基質のセリン／スレオニン（ｓ
ｅｒ／ｔｈｒ）残基のリン酸化を含む。これらの基質のいくつかは、プロテイン
キナーゼ自身であり、その活性はリン酸化により調節される。２つの重要なｓｅ
ｒ／ｔｈｒ特異的プロテインキナーゼが、シグナル変換：サイクリックＡＭＰ依
存プロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）およびプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣファミ
リー）において中心的役割を果たす。多数の他のセリン／スレオニン特異的キナ
ーゼ（マイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼのファミリーを含む）
は、増殖因子レセプターまたはサイトカインレセプターシグナル伝達のいずれか
で活性化される重要なシグナル変換タンパク質として役立つ。細胞内シグナル伝
達のため重要な他のタンパク質ｓｅｒ／ｔｈｒキナーゼは、カルシウム依存プロ
テインキナーゼ（ＣａＭ−キナーゼＩＩ）およびｃ−ｒａｆプロト癌遺伝子であ
る。

【００２０】 ＰＫＣは、種々の生理学的プロセスを制御するための細胞表面シグナル変換に
おいて重要な役割を果たし（Ｎｉｓｈｉｚｕｋａ、Ｎａｔｕｒｅ ３３４：６６
１〜６６５、１９８８）、大きなアイソザイムのファミリーを表し、これらは、
種々の組織ならびにそれらの基質特異性におけるそれらの構造および発現が異な
る（ＨｕｇおよびＳａｒｒｅ、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．２９１：３２９〜３４３，
１９９３）。分子のクローニングは、少なくとも８つのアイソザイムを立証した
。この多様性および差次的発現のため、個々のアイソザイムの活性化は、異なる
細胞特異的応答：増殖の刺激、分化の阻害、または分化の誘導を生じる。細胞増
殖を刺激するその能力のため、それは、抗癌剤開発のための標的となる（Ｐｏｗ
ｉｓ、Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１２：１８８〜１９４、１９
９１）。哺乳動物細胞におけるＰＫＣアイソザイムの過剰発現は、ｃ−ｊｕｎ、
ｃ−ｆｏｓ、ｃ−ｍｙｃのような初期のプロト癌遺伝子の増大した発現と相関が
あり、そして一つの過剰発現細胞系は、ヌードマウスにおいて腫瘍を引き起こす
。

【００２１】 免疫調節の領域における治療的適用は、抗原によるＴ−細胞の活性化がＰＫＣ
の活性化を含むので明らかである。引き続いて、活性化されたＰＫＣは、ＮＦ−
κＢの転写性活性化、ＩＬ−２の生成、および究極的には、Ｔ−細胞の増殖に必
要なシグナルカスケードの分枝を活性化する。この分枝経路を介するシグナル伝
達をブロックするインヒビターは、Ｔ−細胞活性化を阻止することを示した。従
って、Ｔ−細胞におけるＰＫＣのインヒビターとして機能し得る模倣物は、シグ
ナル伝達をブロックし、そして移殖の拒絶において有用な免疫抑制剤として、あ
るいは、リンパ性白血病の抗ガン剤として役立ち得る。ＰＫＣの活性化剤は、マ
ウスの皮膚における浮腫および炎症を起こし（Ｈｅｎｎｉｎｇｓら、Ｃａｒｃｉ
ｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ８：１３４２−１３４６，１９８７）、従って、インヒビ
ターはまた、強力な抗炎症性化合物として役立つことも期待される。このような
抗炎症性活性薬は、喘息、関節炎および他の炎症媒介プロセスにおける使用を見
出す。さらに、スタウロスポリンおよびそのアナログ、ＵＣＮ０１およびＣＧＰ
４１２５（こららは、インビトロにおいて、強力なＰＫＣインヒビターとして特
徴付けられた）は、動物モデルにおいて抗腫瘍活性を有し（Ｐｏｗｉｓ，Ｔｒｅ
ｎｄｓ ｉｎ Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１２：１８８−１９４，１９９１）、そし
て関連化合物は臨床試験が考慮されている。

【００２２】 プロテアーゼ阻害に関して、カテプシンＢは、通常、プロ酵素処理およびタン
パク質代謝回転に関係するリソソーム性システインプロテアーゼである。活性レ
ベルの上昇は、腫瘍転移（Ｓｌｏａｎｅ， Ｂ．Ｆ．ら、「カテプシンＢおよび
その内因性インヒビター：腫瘍悪性度におけるその役割」Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔ
ａｓｔａｓｉｓ Ｒｅｖ．９：３３３−３５２，１９９０）、慢性関節リウマチ
（Ｗｅｒｂ，Ｚ．「プロテイナーゼおよびマトリクス分解」Ｔｅｘｔｂｏｏｋ
ｏｆ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｋｅｌｌｅｒ，Ｗ．Ｎ．；Ｈａｒｒｉｓ，Ｗ
．Ｄ．；Ｒｕｄｄｙ，Ｓ．；Ｓｌｅｄｇｅ，Ｃ．Ｓ．編、１９８９，Ｗ．Ｂ．Ｓ
ａｕｎｄｅｒ Ｃｏ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ，３００−３２１頁）
、および筋ジストロフィー（Ｋａｔｕｎｕｍａ Ｎ．およびＫｏｍｉｎａｍｉ
Ｅ．，「筋肉消耗性疾患におけるリソソーム性システインプロテイナーゼの異常
発現」Ｒｅｖ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１０８
：１−２０，１９８７）に関係している。

【００２３】 カルパインは、細胞質ゾル性または膜結合性のＣａ＋＋活性化プロテアーゼで
あり、これは細胞内のカルシウムレベルの変化に応答して細胞骨格タンパク質の
分解を担う。これらは、関節炎および筋ジストロフィーにおける組織分解に寄与
する（Ｗａｎｇ Ｋ．Ｋ．およびＹｕｅｎ Ｐ．Ｗ．，「カルパイン阻害：その
治療上の可能性の概要」Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．１５：４
１２−４１９，１９９４を参照のこと）。

【００２４】 インターロイキン変換酵素（ＩＣＥ）は、プロＩＬ−１βを炎症の鍵メディエ
イターであるＩＬ−１βに切断し、それゆえＩＣＥのインヒビターは関節炎の処
置に有用であると証明され得る（例えば、Ｍｉｌｌｅｒ Ｂ．Ｅ．ら、「マウス
マクロファージにおける成熟ＩＬ−１β産生物の阻害およびＷＩＮ ６７６９４
による炎症のマウスモデル、ＩＬ−１β変換酵素のインヒビター」Ｊ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．１５４：１３３１−１３３８，１９９５を参照のこと）。ＩＣＥまたは
ＩＣＥ様プロテアーゼもまた、アポトーシス（計画された細胞死）において作用
し得、それゆえガン、ＡＩＤＳ、アルツハイマー病、および不規則性（ｄｉｓｒ
ｅｇｕｌａｔｅｄ）アポトーシスが関係する他の疾患において役割を果たす（Ｂ
ａｒｒ，Ｐ．Ｊ．；Ｔｏｍｅｉ，Ｌ．Ｄ．，「ヒト疾患におけるアポトーシスお
よびその役割」Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１２：４８７−４９３，１９９４を参照
のこと）。

【００２５】 ＨＩＶプロテアーゼは、ＨＩＶ（ＡＩＤＳウイルス）のライフサイクルにおい
て鍵となる役割を果たす。ウイルス成熟の最終段階において、ＨＩＶプロテアー
ゼは、ポリタンパク質前駆体を切断し、ビリオンコアの機能酵素および構造タン
パク質にする。ＨＩＶプロテアーゼインヒビターは、ＡＩＤＳに対する優れた治
療標的として迅速に同定され（Ｈｕｆｆ，Ｊ．Ｒ．，「ＨＩＶプロテアーゼ：Ａ
ＩＤＳに対する新規な化学療法の標的」Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ． ３４：２３０
５−２３１４を参照のこと）、そしてリトナビル（ｒｉｔｏｎａｖｉｒ）、クリ
クシバン（Ｃｒｉｘｉｖａｎ）、およびサクイナビル（ｓａｑｕｉｎａｖｉｒ）
の近年のＦＤＡ認可により証明されるように、既にその処置において有用である
と証明されている。

【００２６】 アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）は、血圧の調節において中心的役割を果
たすレニン−アンジオテンシン系の一部である。ＡＣＥは、アンジオテンシンＩ
を、その血管収縮活性に起因する、強力な昇圧剤であるオクタペプチドアンジオ
テンシンＩＩに切断する。ＡＣＥの阻害は、高血圧の処置において治療的に有用
であると証明された（Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｇ．Ｈ．，「高血圧の処置における変
換酵素インヒビター」Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３１９：１５１７−１５２５
， １９８９）。

【００２７】 Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）は、今日、世界中で、非Ａ非Ｂ肝炎の主な原因で
ある。５，０００万人もの人々が感染していると見積られる。現在、この消耗性
疾患の進行を停止するための利用できる、満足のいく処置は存在しない。ウイル
スのライフサイクルの間、約３０００個のアミノ酸を有するポリタンパク質が産
生され、そして、宿主およびウイルス性プロテアーゼによってタンパク質分解的
に切断され、成熟ウイルスの遺伝子産物を産生する。ＨＣＶ ＮＳ３タンパク質
内に位置したセリンプロテイナーゼは、ウイルス複製に必須であると考えられる
非構造タンパク質を産生する４つの特異的な部位で切断する。従って、ＨＣＶプ
ロテアーゼのインヒビターは、薬物設計の魅力的な標的であり、そして優れた治
療的有用性を有し得る（Ｎｅｄｄｅｒｍａｎｎら、Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．３７８
：４６９−４７６，１９９７）。

【００２８】 コラーゲナーゼは、細胞外マトリクス（例えば、結合組織、皮膚、血管）の主
要な構成要素であるコラーゲンを切断する。コラーゲナーゼ活性の上昇は、関節
炎（Ｋｒａｎｅ Ｓ．Ｍ．ら、「慢性関節リウマチにおけるマトリクス分解の機
構」 Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．５８０：３４０−３５４，１９９０
）、腫瘍転移（Ｆｌｕｇ Ｍ．およびＫｏｐｆ−Ｍａｉｅｒ Ｐ．，「基底膜お
よびそのガン細胞浸潤における関与」Ａｃｔａ Ａｎａｔ．Ｂａｓｅｌ １５２
：６９−８４，１９９５）、および結合組織の分解に関係する他の疾患に寄与す
る。

【００２９】 トリプシン様セリンプロテアーゼは、止血／凝固（Ｄａｖｉｅ，Ｅ．Ｗ．およ
びＫ．Ｆｕｊｉｋａｗａ，「血液凝固における基礎的機構」Ａｎｎ．Ｒｅｖ．７
９９−８２９，１９７５）および補体活性化（Ｍｕｌｌｅｒ−Ｅｂｅｒｈａｒｄ
， Ｈ．Ｊ．，「補体」Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．４４：６９７−７２
４， １９７５）に関係する大きくかつ高度に選択的な酵素のファミリーを形成
する。これらのプロテアーゼの配列決定は、特異性を改変するアミノ酸挿入を有
する相同のトリプシン様コアの存在を示し、これは一般に他の高分子成分との相
互作用の原因である（Ｍａｇｎｕｓｓｏｎら、「タンパク質分解および生理学的
調節」 Ｍｉａｍｉ Ｗｉｎｔｅｒ Ｓｙｍｐｏｓｉａ １１：２０３−２３９
，１９７６）。

【００３０】 トリプシン様セリンプロテアーゼであるトロンビンは、フィブリノーゲンから
のフィブリンの産生および血小板レセプターの活性化の両方において限定された
タンパク質分解を提供するように作用し、従って血栓症および止血において重要
な役割を果たす（Ｍａｎｎ，Ｋ．Ｇ．，「膜上における血液凝固複合体のアセン
ブリ」Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．１２：２２９−２３３，１９８
７）。トロンビンは、フィブリノーゲンにおける１８１個のＡｒｇ−またはＬｙ
ｓ−Ｘａａの配列のうちのわずか２個のＡｒｇ−Ｇｌｙ結合の選択的切断を介す
るフィブリノーゲンのフィブリノペプチドＡおよびＢの除去において顕著な特異
性を示す（Ｂｌｏｍｂａｃｋ，Ｈ．，Ｂｌｏｏｄ Ｃｌｏｔｔｉｎｇ Ｅｎｚｙ
ｍｏｌｏｇｙ，Ｓｅｅｇｅｒ，Ｗ．Ｈ．（編）、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ
，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９６７，１４３−２１５頁）。

【００３１】 多くの重大な疾患状態は、急性冠状動脈症候群（ｃｏｒｏｎａｒｙ ｓｙｎｄ
ｒｏｍｅ）を含む異常止血に関する。アスピリンおよびヘパリンは、急性冠状動
脈症候群を有する患者の処置に広く使用される。しかし、これらの薬剤は、いく
つかの固有の制限を有する。例えば、アテローム硬化プラークの破裂を併発する
血栓症は、アスピリンおよびヘパリンによる阻害に対して比較的耐性であるトロ
ンビン媒介の血小板依存的プロセスである傾向がある（Ｆｕｓｔｅｒら、「冠状
動脈疾患の病原および急性冠状動脈症候群」Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ． ３２
６：２４２−５０，１９９２）。

【００３２】 トロンビンインヒビターは、インビボでの血管損傷部位での血栓形成を防止す
る。さらに、トロンビンはまた、冠状動脈における機械的損傷部位での平滑筋細
胞増殖を開始する強力な増殖因子でもあるので、インヒビターは、この増殖性の
平滑筋細胞応答をブロックし、そして再狭窄を減少させる。トロンビンインヒビ
ターはまた、血管壁細胞における炎症性応答を減少させる（Ｈａｒｋｅｒら、Ａ
ｍ．Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ、７５：１２Ｂ−１６Ｂ，１９９５）。

【００３３】 さらに、少なくとも２つの、十分に規定された転写因子、核因子（ＮＦ）κＢ
および活性化タンパク質（ＡＰ）−１は、細胞内酸化還元（ｒｅｄｏｘ）状態に
よって調節される。酸化還元状態による遺伝子発現の調節は、有望な治療的意味
合いを有する。例えば、酸化還元調節された転写因子ＮＦ−κＢおよびＡＰ−１
の結合部位は、疾患の病因（例えば、ＡＩＤＳ、ガン、アテローム硬化症および
糖尿病合併症）と直接的に関連する多くの遺伝子のプロモーター領域に位置され
る（ＳｅｎおよびＰａｃｋｅｒ、ＦＡＳＥＢ Ｊｏｕｒｎａｌ １０：７０９−
７２０、１９９６）。より詳細には、ＤＮＡ上のコンセンサス部位に対するＮＦ
−κＢおよびＡＰ−１のおよびＡＰ−１のような転写因子の結合は、酸化剤−還
元剤ホメオスタシスによって、特に、チオール−ジスルフィド平衡によって推進
される。

【００３４】 ＮＦ−κＢの場合、ＮＦ−κＢ機能の調節において重要な役割を担う生理学的
に関連のあるチオールは、還元チオレドキシンである。チオレドキシンは、抗酸
化機能を有する重要なタンパク質オキシドリダクターゼである。チオレドキシン
は、活性化されたＮＦ−κＢのＤＮＡ結合をアップレギュレートすることが見出
され、従って、遺伝子発現を増大させる（Ｓｃｈｅｎｋら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ
．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：１６７２−１６７６、１９９４）。チオレ
ドキシンは、活性化された細胞質ゾルのＮＦ−κＢの還元と関連付け（詳細には
、ｃｙｓ−６２の還元）、従ってこれは、核転座およびＤＮＡ結合（Ｈａｙａｓ
ｈｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：１１３８０−１１３８８、１９９３
）に寄与し得る。

【００３５】 ＡＰ−１複合体におけるＦｏｓおよびＪｕｎのＤＮＡ結合活性はまた、酸化還
元状態によって調節されることが発見された（Ａｂａｔｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ
２４９：１１５７−１１６２、１９９０）。各タンパク質は、そのＤＮＡ結合ド
メインにおいて単一の保存システイン（リジンおよびアルギニンによって隣接し
た）を含む。このチオールは、ジスルフィド結合の部分が見受けられず、その酸
化された形態であるスルフェン酸またはスルフィン酸として存在し得る。Ｒｅｆ
−１（エンドヌクレアーゼＤＮＡ修復活性をまた有する二官能性核タンパク質）
は、この調節システインの還元によってＡＰ−１ＤＮＡ結合を刺激する。この重
要なシステインがセリンと置換されたＦｏｓミュータントは、ＡＰ−１ＤＮＡ結
合活性において３倍増加を誘発し、もはや酸化還元コントロール（ｒｅｄｏｘ
ｃｏｎｔｒｏｌ）を受けなかった（Ｏｋｕｎｏら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ８：６９
５−７０１、１９９３）。従って、ｆｏｓファミリーのうち少なくとも４つのメ
ンバー、ｊｕｎファミリーのうち３つ、そしてＡＴＦ／ＣＲＥＢファミリーのう
ち少なくとも４つの転写因子の全ては、この保存システインを含むので、転写因
子の酸化還元コントロールは広範に見える。

【００３６】 上述のように、ＮＦ−κＢおよびＡＰ−１のような転写因子の調節は、重要な
治療的意味を有する。例えば、ＡＰ−１は、腫瘍産生の重要なメディエーターで
ある（Ｙｏｓｈｉｏｋａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ
９２：４９７２−４９７６、１９９５）。従って、ＡＰ−１転写活性を抑制する
化合物は、ガンの処置における有用性を有する。さらに、炎症性サイトカインお
よびエンドトキシンに対する応答を調節における直接的な役割によって、ＮＦ−
κＢの活性化が慢性関節リウマチのような慢性疾患および敗血症性ショックのよ
うな急性症状の進展において重要な役割を担う。自己免疫性疾患、例えば、全身
性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、およびアルツハイマー疾患はまた、ＮＦ−κＢ
の活性化に関連すると考えられる。同様に、ＮＦ−κＢは、ＨＩＶ遺伝子発現の
活性化において重要な役割を担う。さらに、ＮＦ−κＢに関すると考えられる症
状は、インフルエンザ、アテローム硬化症、腫瘍形成および毛細管拡張性運動失
調（ＡＴ）を含む。

【００３７】 ＰＤＺドメインを含むタンパク質は、β−シート模倣物に対してさらなる可能
性を有する標的を構成する。８０−１００個のアミノ酸残基を有するこれらのド
メインは、タンパク質のカルボキシル末端における、コンセンサス（ｃｏｎｓｅ
ｎｓｕｓ）Ｘ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−Ｘ−Ｖａｌ配列への結合によるタンパク質−タ
ンパク質相互作用を媒介する。また、内部（または、Ｃ−末端でない）のＰＤＺ
ドメインを介するタンパク質相互作用も説明される。配位されたおよび配位され
ていないＰＤＺドメインの結晶構造が決定され、そして、６つのβ−鎖および２
つのα−ヘリクスを有する構造を示し、この構造は、β−シート配座を介して認
識ポリぺプチド配列と結合する。従って、適切なβ−シート模倣物のスクリーニ
ングによって、ＰＤＺドメイン含有タンパク質を標的とする、有効な戦略が証明
されるべきである。標的のＰＤＺドメイン含有タンパク質はさまざまであるが、
シグナル変換において重要である。ＰＳＤ−９５（膜会合グアニル酸キナーゼ）
は、３つのＰＤＺドメインを含み、そのうち２つは、Ｓｈａｋｅｒ型Ｋ⁺チャネ ルおよびＮ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）レセプターを標的とし、
それらの機能が必要とされるクラスター形成を生じる。ＰＴＰＬ１／ＦＡＰ１（
タンパク質チロシンホスファターゼ）は、５つのＰＤＺドメインを有し、そのう
ち２つは、腫瘍壊死因子レセプターファミリーの膜貫通タンパク質であるＦａｓ
（これは、多くの細胞型におけるアポトーシスを媒介する）と相互作用する。従
って、ＰＤＺドメインを含むタンパク質を標的とする化合物は、抗ガン剤として
の有用性を証明し得る。

【００３８】 トリプターゼ（ｔｒｙｐｔａｓｅ）（肥満細胞において独占的に発見されたト
リプシン様セリンプロテアーゼ）は、炎症のメディエーターとして可能性のある
役割のためにかなりの関心が寄せられる。例えば、肺トリプターゼは、吸入され
た抗原の、細胞表面ＩｇＥレセプターへの結合に対する応答において、炎症の他
のメディエーターと共に放出される（ＩｓｈｉｚａｋａおよびＩｓｈｉｚａｋａ
、Ｐｒｏｇ．Ａｌｌｅｒｇｙ ３４：１８８−２３５、１９８４）。トリプター
ゼはまた、インビトロにおける、血管作用性腸ぺプチドを切断することが示され
た（Ｃａｕｇｈｅｙら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２４４：
１３３−１３７，１９８８：ＴａｍおよびＣａｕｇｈｅｙ、Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐ
ｉｒ．Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３：２７−３２，１９９０）。これらの結
果は、トリプターゼが喘息患者において、気管支拡張ぺプチドのタンパク質分解
を経由して気管支収縮を増加させ得ることを示唆する。現在の発見（アレルギー
性のヒツジにおいて、合成トリプターゼインヒビターが気道応答をブロックした
）は、この仮説と一貫性する（Ｃｌａｒｋら、Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉ
ｔ．Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．１５２：２０７６−２０８３、１９９５）。

【００３９】 トリプターゼは、細胞外マトリクス分解タンパク質プロストロメライシン（ｐ
ｒｏ−ＭＭＰ−３）およびＭＭＰ−３を介するプロコラーゲナーゼ（ｐｒｏ−Ｍ
ＭＰ−１）を活性化し、組織再構築および炎症（Ｇｒｕｂｅｒら、Ｊ．Ｃｌｉｎ
．Ｉｎｖｅｓｔ．８４：８１５４−８１５８、１９８９）、従って、おそらく慢
性関節リウマチにおける酵素の役割を示唆する。さらに、プロストロメライシン
は、活性化された場合、アテローム硬化のプラークの周囲の細胞外マトリクスを
分解することが示された。異常に高いレベルのトリプターゼ含有肥満細胞が、冠
状動脈アテローマにおいて発見されたので、トリプターゼは、アテロームの破裂
（血栓の放出）、冠状アテローム性動脈硬化症の最終イベントにおける役割を担
い得る（Ｋａａｒｔｉｎｅｎら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ９０：１６６９−１
６７８、１９９４）。

【００４０】 トリプターゼの他の活性は、以下を含む。トリプターゼは、フィブリノーゲン
を切断するが、内因性のプロテイナーゼインヒビターの存在下では、不活性化さ
れず（Ｓｃｈｗａｒｔｚら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３５：２７６２−２７６７
、１９８５；Ｒｅｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５９：３５４０−３５４８、１
９９７）、そして局所抗凝固薬として機能し得る。線維芽細胞に対して強力なマ
イトジェンであること、および肺線維症および間質性肺疾患に関与し得ることが
示された（Ｒｕｏｓｓら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．８８：４９３−４９９
、１９９１）。トリプターゼはまた、内皮細胞およびケラチノサイトのＰＡＲ−
２（プロテイナーゼ活性化レセプター−２）の活性化に応答性を有し得る（Ｍｏ
ｌｉｎｏら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：４０４３−４０４９、１９９７
）。

【００４１】 アレルギー応答および炎症応答における肥満細胞の中心的な役割が与えられた
場合、トリプターゼの阻害は、有意な治療効果をもたらし得る。トリプターゼの
インヒビターは、以下の予防または処置に有用であり得る：喘息、肺線維症およ
び間質性肺炎、腎炎、肝線維症、肝炎、肝硬変、水腫、乾癬、アトピー性皮膚炎
、慢性関節リウマチ、インフルエンザ、クーロン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾
患、鼻アレルギー、およびアテローム性動脈硬化症。

【００４２】 カイメースは、肥満細胞からまた放出されるキモトリプシン様プロテアーゼで
ある。アンギオテンシン−Ｉ（ａｎｇ−Ｉ）をアンギオテンシン−ＩＩ（ａｎｇ
−ＩＩ）へと切断し、アンギオテンシン−Ｉ変換酵素（ＡＣＥ）よりも優れた有
効性および選択性を有することが示された（Ｏｋｕｎｉｓｈｉら、Ｊ．Ｈｙｐｅ
ｒｔｅｎｓｉｏｎ ２：２２７−２８４、１９８４；Ｕｒａｔａら、Ｃｉｒｃ．
Ｒｅｓ．６６：８８３−８９０、１９９０）。心臓組織において、カイメースは
、ａｎｇ−Ｉからのａｎｇ−ＩＩの主要な供給源であることが示された（Ｄｅｌ
ｌ’Ｉｔａｌｉａら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．（Ｈｅａｒｔ Ｃｉｒｃ．Ｐ
ｈｙｓｉｏｌ．３８）２６９：Ｈ２０６５−Ｈ２０７３、１９９６）。さらに、
増加したカイメース活性は、イヌにおけるバルーン損傷誘発血管肥厚において示
された（Ｓｈｉｏｔａら、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．３２３：２３９−２４２、１９
９３）。このような証拠によって、カイメースの阻害が、高血圧、虚血性心臓疾
患、およびうっ血性心不全に対する治療となり得ることが示唆される。

【００４３】 ウロキナーゼ型プラスミノゲン活性因子（ｕＰＡ）は、フィブリン溶解性の系
の一部として、プラスミノゲンをプラスミンへ転換する、トリプシン様セリンプ
ロテイナーゼである。これは、急性大量肺閉塞症（ａｃｕｔｅ ｍａｓｓｉｖｅ
ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｅｍｂｏｌｉｓｍ）における血栓溶解に長く使用されて
いる。他の研究によって、ｕＰＡがまた、細胞侵襲性に関する細胞外タンパク質
分解性カスケードの鍵イニシエーターであることが示された（Ｍｕｌｌｉｎｓお
よびＲｏｈｌｉｃｈ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ ６９５：１
７７−２１４、１９８３；ＴｅｓｔａおよびＱｕｉｇｌｙ、Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅ
ｔａｓｔ．Ｒｅｖ．９：３５３−３６７、１９９０）。さらに、ｕＰＡは、その
増殖因子ドメインを介してｕＰＡレセプター（ｕＰＡＲ）と結合し、さらに、細
胞遊走に関する他のタンパク質の活性を調節する。ｕＰＡの過剰発現は、ガン侵
襲性および転移において役割を担うようである；高レベルのｕＰＡ、ＰＡＩ−１
（プラスミノゲン活性化因子インヒビター−１）、およびｕＰＡＲは、乏しい患
者の予後に相関する。種々のモデル系における多数の研究によって、ｕＰＡのイ
ンヒビターが腫瘍細胞の侵襲性および転移を減少させることが示される（Ｔｅｓ
ｔａおよびＱｕｉｇｌｙ、同上；Ａｎｄｒｅａｓｅｎら、Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃ
ｅｒ ７２：１−２２、１９９７）。従って、ｕＰＡの阻害は、以下の処置に有
用であり得る：乳ガン、前立腺ガン、卵巣ガン、ヒト腎臓ガン、胃ガンおよび肺
ガン。最近の証拠によって、ｕＰＡのインヒビターはまた、再狭窄の予防に有用
であり得ることが示される（Ｌｏｓｋｕｔｏｆｆ、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ９
６：２７７２−２７７４、１９９７）。

【００４４】 βシートが果たす重要な生物学的役割の観点から、天然に存在するか、または
合成のペプチド、タンパク質または分子の固有のβシート構造を安定化し得る化
合物が当該分野で必要とされる。安定なβシート構造の作製、ならびにこのよう
な安定化された構造を使用してβシート構造に関する生物学的認識事象をもたら
すか、または改変することもまた当該分野で必要とされる。本発明は、これらの
必要を満たし、そしてさらなる関連した利点を提供する。

【００４５】 （発明の要旨） 簡潔に述べると、本発明はβシート模倣物およびその使用に関し、これは１つ
以上のプロテアーゼ阻害、キナーゼ阻害、転写因子の調節によって、および／ま
たはタンパク質−タンパク質結合相互作用の阻害による、温血動物における治療
効果を達成するための医薬の製造に関する使用を含む。この治療効果は、温血動
物への治療的有効量のβシート模倣物（二環式環系を含む）の投与に起因する。
ここで、βシート模倣物は、一般構造（Ｉ）（その薬学的に受容可能な塩を含む
）を有し：

【００４６】

【化１５】

【００４７】 ここで、 Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ₂）_0-4−、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ₂）_1-3−、−
（ＣＨ₂）_1-2Ｏ−および−（ＣＨ₂）_1-2Ｓ−から選択され； Ｂは、ＮおよびＣＨから選択され； Ｃは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ₂）_1-3−、−（ＣＨ₂）_0-3−、−
Ｏ−、−Ｓ−、−Ｏ−（ＣＨ₂）_1-2−および−Ｓ（ＣＨ₂）_1-2−から選択され； Ｄは、ＮおよびＣ（Ｒ₄）から選択され； Ｅは、

【００４８】

【化１６】

【００４９】 から選択され； Ｆは、任意のカルボニル部分であり； Ｒ₁およびＲ₄は、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体から独立して選択され； Ｒ₂およびＲ₂’は、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体からそれぞれ選択され
る１個以上の環置換基を表すか、あるいはＲ₂はＣまたはＹと一緒になって、縮 合した置換または非置換の単素環式環または複素環式環を形成し； Ｒ₃は、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体から選択されるか、あるいはＣと 一緒になって、−（ＣＨ₂）_1-2−、−Ｏ−および−Ｓ−から選択される架橋部分
を形成し； ＹおよびＺは、分子の残余を表し；そして 二環式環の任意の２個の隣接するＣＨ基は、二重結合を形成し得る。

【００５０】 Ｆ（すなわち、任意のカルボニル部分）が存在し、そしてＥが−Ｎ（Ｚ）−で
ある１つの実施態様において、本発明の化合物は、以下の構造（ＩＩ）を含む：

【００５１】

【化１７】

【００５２】 ここで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｒ₂、Ｒ₂’、Ｒ₃、ＹおよびＺは、構造（Ｉ）に関し て上記で定義したとおりである。

【００５３】 本実施態様の好ましい局面において、以下の構造（ＩＩａ）および（ＩＩｂ）
：

【００５４】

【化１８】

【００５５】 で表されるように、Ａは−Ｃ（＝Ｏ）−または−（ＣＨ₂）−のいずれかであり 、そしてＣは−（ＣＨ₂）₂−である。本実施態様において、６員環は飽和であっ
ても良く、または不飽和（芳香族を含む）であっても良い。例えば、構造（ＩＩ
ａ）および（ＩＩｂ）のＢおよびＤが両方とも−ＣＨ−である場合（従って、二
重結合を形成し得る隣接するＣＨ基を構成する）、本発明の化合物は、以下の芳
香族構造（ＩＩｃ）および（ＩＩｄ）を含む：

【００５６】

【化１９】

【００５７】 同様に、以下の構造（ＩＩｅ）および（ＩＩｆ）：

【００５８】

【化２０】

【００５９】 を有する不飽和の化合物がまた、構造（ＩＩａ）および（ＩＩｂ）の化合物の代
表となる。

【００６０】 Ｆが存在し、そしてＥが−Ｃ（Ｒ₁）（ＮＨＺ）−である別の実施態様におい て、本発明の化合物は、以下の構造（ＩＩＩ）を含む：

【００６１】

【化２１】

【００６２】 ここで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₂’、Ｒ₃、ＹおよびＺは、構造（Ｉ）に
関して上記で定義したとおりである。

【００６３】 本実施態様の好ましい局面において、以下の構造（ＩＩＩａ）および（ＩＩＩ
ｂ）：

【００６４】

【化２２】

【００６５】 で表されるように、Ａは−Ｃ（＝Ｏ）−または−（ＣＨ₂）−のいずれかであり 、そしてＣは−（ＣＨ₂）₂−である。本実施態様において、６員環は飽和であっ
ても良く、または不飽和（芳香族を含む）であっても良い。例えば、構造（ＩＩ
Ｉａ）および（ＩＩＩｂ）のＢおよびＤが両方とも−ＣＨ−である場合（従って
、二重結合を形成し得る隣接するＣＨ基を構成する）、本発明の化合物は、以下
の芳香族構造（ＩＩＩｃ）および（ＩＩＩｄ）を含む：

【００６６】

【化２３】

【００６７】 同様に、以下の構造（ＩＩＩｅ）および（ＩＩＩｆ）：

【００６８】

【化２４】

【００６９】 を有する不飽和の化合物がまた、構造（ＩＩＩａ）および（ＩＩＩｂ）の化合物
の代表となる。

【００７０】 Ｆが存在し、そしてＥが−Ｃ（Ｒ₁）（Ｚ）−であるさらなる実施態様におい て、本発明の化合物は、以下の構造（ＩＶ）を含む：

【００７１】

【化２５】

【００７２】 ここで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₂’、Ｒ₃、ＹおよびＺは、構造（Ｉ）に
関して上記で定義したとおりであるが、但し、ＺはＲ₁置換基を有する炭素原子 に結合した−ＮＨ−部分を含まない（従って、上記の構造（ＩＩＩ）の化合物と
は区別される）。

【００７３】 本実施態様の好ましい局面において、以下の構造（ＩＶａ）および（ＩＶｂ）
：

【００７４】

【化２６】

【００７５】 で表されるように、Ａは−Ｃ（＝Ｏ）−または−（ＣＨ₂）−のいずれかであり 、そしてＣは−（ＣＨ₂）₂−である。

【００７６】 本実施態様において、６員環は飽和であっても良く、または不飽和（芳香族を
含む）であっても良い。例えば、構造（ＩＶａ）および（ＩＶｂ）のＢおよびＤ
が両方とも−ＣＨ−である場合（従って、二重結合を形成し得る隣接するＣＨ基
を構成する）、本発明の化合物は、以下の芳香族構造（ＩＶｃ）および（ＩＶｄ
）を含む：

【００７７】

【化２７】

【００７８】 同様に、以下の構造（ＩＶｅ）および（ＩＶｆ）：

【００７９】

【化２８】

【００８０】 を有する不飽和の化合物がまた、構造（ＩＶａ）および（ＩＶｂ）の化合物の代
表となる。

【００８１】 Ｆが存在せず、そしてＥが−Ｎ（Ｚ）−、−Ｃ（Ｒ₁）（ＮＨＺ）−または− Ｃ（Ｒ₁）（Ｚ）−のいずれかであるさらなる実施態様において、本発明の化合 物は、以下の構造（Ｖ）、（ＶＩ）および（ＶＩＩ）を含む：

【００８２】

【化２９】

【００８３】 ここで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₂’、Ｒ₃、ＹおよびＺは、構造（Ｉ）に
関して上記で定義したとおりである。

【００８４】 Ｒ₃がＣと一緒になって、架橋部分を形成するなおさらなる実施態様において 、本発明の化合物は、以下の構造（ＶＩＩＩ）を含む：

【００８５】

【化３０】

【００８６】 ここで、Ｘは−（ＣＨ₂）_1-2−、−Ｏ−および−Ｓ−から選択される架橋部分で
あり、そしてＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｒ₂、Ｒ₂’、ＹおよびＺは、構造（Ｉ）
に関して上記で定義したとおりである。

【００８７】 Ｆが存在し、Ａが−Ｃ（＝Ｏ）−であり、Ｃが−（ＣＨ₂）₂−であり、そして
Ｅが−Ｎ（Ｚ）−または−Ｃ（Ｒ₁）（ＮＨＺ）−のいずれかである本実施態様 の１つの局面において、本発明の化合物は、以下の構造（ＶＩＩＩａ）および（
ＶＩＩＩｂ）を含む：

【００８８】

【化３１】 。

【００８９】 Ｆが存在するなおさらなる実施態様において、Ｒ₂はＣと一緒になって、以下 の構造（ＩＸ）および（Ｘ）：

【００９０】

【化３２】

【００９１】 で表されるような置換または非置換の単素環式環または複素環式縮合環を形成す
る。ここで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｒ₂、Ｒ₂’、Ｒ₃およびＹは上記で定義した とおりであり、そしてＲ’は１個以上の任意の環置換基である。

【００９２】 構造（ＩＸ）の１つの局面において、Ｒ₂およびＣは一緒になって、以下の構 造（ＩＸａ）および（ＩＸｂ）：

【００９３】

【化３３】

【００９４】 で表されるような縮合した５員環、６員環、７員環または８員環を形成する。こ
こで、Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅ、Ｒ₂、Ｒ₂’、Ｒ₃、Ｒ’およびＹは上記で定義したとお りである。

【００９５】 構造（Ｘ）の１つの局面において、Ｒ₂およびＣは一緒になって、以下の構造 （Ｘａ）および（Ｘｂ）：

【００９６】

【化３４】

【００９７】 で表されるような縮合した５員環、６員環、７員環または８員環を形成する。こ
こで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｙ、Ｒ₂、Ｒ₂’、Ｒ₃およびＲ’は上記で定義した とおりであり、そしてＸは−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−、−ＮＲ’−、−Ｏ−およ
び−Ｓ−から選択される。

【００９８】 Ｆが存在するなおさらなる実施態様において、Ｒ₂はＹと一緒になって、以下 の構造（ＸＩ）：

【００９９】

【化３５】

【０１００】 で表されるような置換または非置換の単素環式環または複素環式縮合環を形成す
る。ここで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｒ₂、Ｒ₂’およびＲ₃は上記で定義したとお りである。

【０１０１】 本実施態様の１つの局面において、Ｒ₂およびＹは一緒になって、以下の構造 （ＸＩａ）および（ＸＩｂ）：

【０１０２】

【化３６】

【０１０３】 で表されるような縮合した５員環、６員環、７員環または８員環を形成する。こ
こで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｒ₂、Ｒ₂’およびＲ’は上記で定義したとおりであ
り、Ｒ’は任意の置換基であり、そしてＸは−ＮＨ−、−ＮＲ’−、−Ｏ−およ
び−Ｓ−から選択される。

【０１０４】 本発明のこれらのおよび他の局面は、以下の詳細な説明を参照することにより
明確となる。

【０１０５】 （発明の詳細な説明） 上記のように、β−シートは、多くの生物学的認識事象に重要な構造的構成要
素である。本発明のβ−シート模倣物は、天然または合成のペプチド、タンパク
質、あるいは分子のβ−シート構造の付与、および／または安定化するために役
立ち、特に、コンホメーションの安定性について役立つ。さらに、本発明のβ−
シート模倣物は、タンパク質分解性の分解に、より抵抗性であり、したがって、
ペプチド、タンパク質、またはこれらを含む分子を分解に対してより抵抗性にす
る。β−シート模倣物は、タンパク質、ペプチドまたは分子のＣ−末端またはＮ
−末端のいずれかに位置され得る。あるいは、β−シート模倣物は、タンパク質
、ペプチドまたはその分子自身の内部に配置され得る。そして、１個以上の本発
明のβ−シート模倣物が、タンパク質、ペプチドまたは分子に組み込まれ得る。

【０１０６】 本発明のβ−シート模倣物は、一般的に、上記の構造（Ｉ）、ならびに構造（
ＩＩ）〜（ＸＩ）により表されるより特定の実施態様により表される。本発明の
β−シート模倣物は、天然に存在するＬ−アミノ酸からなるβ−シートの３次元
構造、ならびに１個以上のＤ−アミノ酸からなるβ−シートの構造を模倣するよ
うに構成され得る。従って、構造（Ｉ）のβ−シート模倣物の全ての立体構造は
、本発明の範囲内である。

【０１０７】 例えば、構造（ＩＩ）のβ−シート模倣物は、以下の構造（ＩＩ’）および（
ＩＩ”）：

【０１０８】

【化３７】

【０１０９】 を含む。同様に、構造（ＩＩＩ）のβ−シート模倣物は、以下の構造（ＩＩＩ’
）〜（ＩＩＩ””）：

【０１１０】

【化３８】 を含む。

【０１１１】 構造（ＩＶ）のβ−シート模倣物は、これらの同様の立体構造を含むが、構造
（ＩＩＩ’）〜（ＩＩＩ””）の「Ｚ−ＮＨ」部分は、「Ｚ」部分で置換されて
いる。

【０１１２】 本明細書で用いられるように、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₂’、Ｒ₃およびＲ₄部分を規定す るために使用される用語「アミノ酸側鎖部分」は、天然に存在するタンパク質中
にある任意のアミノ酸側鎖部分を表し、以下の表１で確認される天然に存在する
アミノ酸側鎖部分を含む（しかし、これらに限定されない）。本発明の他の天然
に存在する側鎖部分には、フェニルグリシン、３，５−ジブロモチロシン、３，
５−ジヨードチロシン、ヒドロキシリジン、ナフチルアラニン、チエニルアラニ
ン、γ−カルボキシグルタメート、ホスホチロシン、ホスホセリン、およびグリ
コシル化アミノ酸（例えば、グリコシル化セリン、アスパラギン、およびトレオ
ニン）の側鎖部分が含まれる（しかし、これらに限定されない）。

【０１１３】

【表１】

【０１１４】 天然に存在するアミノ酸側鎖部分の他に、本発明のアミノ酸側鎖部分はまた、
それらの種々の誘導体を含む。本明細書で用いられるように、アミノ酸側鎖部分
の「誘導体」には、天然に存在するアミノ酸側鎖部分へのすべての改変および／
または変更が含まれる。例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、
フェニルグリシン、およびフェニルアラニンのアミノ酸側鎖部分は、一般的に低
級鎖アルキル、アリール、またはアラルキル部分として分類され得る。アミノ酸
側鎖部分の誘導体には、他の直鎖または分岐、環式または非環式、置換または非
置換、飽和または不飽和の、低級鎖アルキル、アリール、またはアラルキル部分
が含まれる。

【０１１５】 本明細書で用いられるように、「低級鎖アルキル部分」は１〜１２個の炭素原
子を含み、「低級鎖アリール部分」は６〜１２個の炭素原子を含み、そして「低
級鎖アラルキル部分」は７〜１２個の炭素原子を含む。したがって、１つの実施
態様において、アミノ酸側鎖誘導体は、Ｃ_1-12アルキル、Ｃ_6-12アリール、およ
びＣ_7-12アラルキルから選択され、そしてより好ましい実施態様では、Ｃ_1-7ア ルキル、Ｃ_6-10アリール、およびＣ_7-11アラルキルから選択される。

【０１１６】 本発明のアミノ酸側鎖誘導体は、さらに、低級鎖アルキル、アリール、および
アラルキル部分の置換された誘導体を含む。ここで、置換基は以下の化学部分の
１個以上から選択される（しかしこれらに限定されない）：−ＯＨ、−ＯＲ、−
ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＲ、−ＣＯＮＨ₂、−ＮＨ₂、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ、−ＳＨ、
−ＳＲ、−ＳＯ₂Ｒ、−ＳＯ₂Ｈ、−ＳＯＲ、およびハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、
およびＩを含む）、ここで、Ｒの各存在は独立して低級鎖アルキル、アリール、
またはアラルキル部分から選択される。さらに、本発明の環式低級鎖アルキル、
アリール、およびアラルキル部分には、ナフタレンならびに複素環式化合物（例
えば、チオフェン、ピロール、フラン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾー
ル、ピラゾール、３−ピロリン、ピロリジン、ピリジン、ピリミジン、プリン、
キノリン、イソキノリン、およびカルバゾール）が含まれる。アミノ酸側鎖誘導
体は、さらに、低級鎖アルキルおよびアラルキル部分のアルキル部分のヘテロア
ルキル誘導体を含み、アルキルおよびアラルキルのホスホネートおよびシランを
含む（しかしこれらに限定されない）。

【０１１７】 本発明の状況で用いられるように、用語「分子の残り」（ＹおよびＺにより表
されるような）は、任意の化学部分であり得、アミノ酸側鎖部分および上記で定
義したようなその誘導体を含む（がこれらに限定されない）。例えば、β−シー
ト模倣物がペプチドまたはタンパク質の長さの範囲内に位置する場合、Ｙおよび
Ｚは、ペプチドまたはタンパク質のアミノ酸を表し得る。あるいは、２以上のβ
−シート模倣物が連結される場合、第１のβ−シート模倣物のＹ部分は、第２の
β−シート模倣物を表し得るが、一方、逆に、第２のβ−シート模倣物のＺ部分
は、第１のβーシート模倣物を表す。

【０１１８】 β−シート模倣物がペプチドまたはタンパク質の末端に位置する場合、または
β−シート模倣物がペプチドまたはタンパク質と関連していない場合、Ｙおよび
／またはＺは適切な終結部分を表し得る。例えば、Ｚ部分についての代表的な終
結部分は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、および−ＳＯ₂Ｒ（ここで、 Ｒは、低級鎖アルキル部分、低級鎖アリール部分、および低級鎖アラルキル部分
から選択される）を含む（がこれらに限定されない）か、またはタンパク質合成
に関する適切な保護基（例えば、ＢＯＣ、ＦＭＯＣ、およびＣＢＺ（すなわち、
それぞれ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカル
ボニル、およびベンジルオキシカルボニル））であり得る。

【０１１９】 同様に、Ｙ部分についての代表的な終結部分は、

【０１２０】

【化３９】

【０１２１】 （ここで、Ｘ’は、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、またはＩであり、そしてＲの各存在は独立
して、低級鎖アルキル部分、低級鎖アリール部分、および低級鎖アラルキル部分
から選択される）、または複素環式部分（例えば、ピリジン、ピラン、チオファ
ン、ピロール、フラン、チオフェン、チアゾール、ベンズチアゾール、オキサゾ
ール、ベンズオキサゾール、イミダゾール、およびベンズイミダゾール）を含む
（がこれらに限定されない）。

【０１２２】 より詳細には、本発明の適切なＺおよびＹ終結部分は、以下の基を含む：

【０１２３】

【化４０】

【０１２４】 ここで、 Ｘは、必要に応じて存在し、そして直鎖または分岐、環式または非環式、飽和
または不飽和の、Ｃ_1-12アルキルから選択され、このＣ_1-12アルキルは必要に応
じて、ハロゲン、＝Ｏ、ＯＲ、ＯＮＲＲ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＣＮ、Ｏ
Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ、Ｃ（Ｏ）ＮＲＯＲ、ＮＨ₂、ＮＯ₂、ＮＨＯＲ、Ｃ
（ＮＲ）、ＮＨＲ、Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ、ＮＨＣ（ＮＲ）ＮＨＲ、Ｐ（ＯＲ）₃およ びＳｉＲＲＲから選択される１以上の置換基によって置換され； Ｒ⁶は、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ₂、ＳｉＲＲＲ、およびＰ（ＯＲ）₃から選択され； Ｒ⁷は、Ｃ_5-14アリール、Ｃ_4-13ヘテロアリール、Ｃ_3-14シクロアルキル、Ｃ_{5 -14} シクロアルキレン、およびＣ_2-13ヘテロシクロアルキルから選択され、この 各々は、必要に応じて、Ｘ、ハロゲン、ＯＲ、ＯＮＲＲ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）
ＯＲ、ＣＮ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＲ₂、Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ、Ｃ（Ｏ）ＮＲＯＲ、ＮＲ Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（ＮＲ）ＮＨＲ、ＮＨＣ（ＮＲ）ＮＨＲ、ＮＯ₂、ＳＯ₂Ｒ、ＳＯ ₂ ＮＲＲ、ＳｉＲＲＲ、ＯＰ（ＯＲ）₃、ＣＨ₂Ｐ（ＯＲ）₃およびＣＦ₂Ｐ（ＯＲ ）₃から選択される１以上の置換基で置換され得； Ｒ⁸は、各存在において独立して、Ｈ、Ｘ、Ｒ⁷、ハロゲン、ＯＲ、＝Ｃ＝Ｏ、
Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＣＮ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＲ₂、Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ、Ｎ ＲＣ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（ＮＲ）ＮＨＲ、ＮＯ₂、ＳＯ₂Ｒ、ＳＯ₂ＮＲＲ、ＳｉＲＲＲ 、およびＰ（ＯＲ）₃から選択されるか、または一緒になって、飽和もしくは不 飽和のＣ_2-14シクロアルキルを形成し得、このＣ_2-14シクロアルキルは、必要に
応じて、＝Ｏ、Ｘ、Ｒ⁷、ハロゲン、ＯＲ、＝Ｃ＝Ｏ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）Ｏ Ｒ、ＣＮ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＲ₂、Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ、ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（ＮＲ ）ＮＨＲ、ＮＯ₂、ＳＯ₂Ｒ、ＳＯ₂ＮＲＲ、ＳｉＲＲＲ、およびＰ（ＯＲ）₃から
選択される１以上の置換基で置換され； Ｒ⁹は、Ｈ、Ｘ、Ｒ⁷、ハロゲン、Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＣＮ、ＮＲ₂、 Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ、ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（ＮＲ）ＮＨＲ、ＮＯ₂、ＳＯ₂Ｒ、ＳＯ₂ ＮＲＲ、ＳｉＲＲＲ、およびＰ（ＯＲ）₃から選択され、ここでＰ＝０〜２であ り； Ｒ¹⁰は、Ｈ、Ｘ、Ｒ⁷、ハロゲン、ＯＲ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＣＮ、 ＮＲ₂、およびＣ（Ｏ）ＮＲＲから選択され；そして Ｒ⁶〜Ｒ¹⁰の上記定義におけるＲの各存在は、独立して、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル、
Ｃ_3-14シクロアルキル、Ｃ_5-14シクロアルキレン、Ｃ_6-14アリール、Ｃ_4-13ヘテ
ロアリール、およびＣ_2-13ヘテロシクロアルキルから選択されるか、または２つ
のＲ基が存在する場合、一緒になって飽和または不飽和のＣ_2-8シクロアルキル を形成する。

【０１２５】 プロテアーゼインヒビターの状況では、Ｙ終結部分はさらに以下の基を含む： −Ｎ（｛Ｃ（Ｒ¹¹）₂Ｃ（Ｏ）−Ｔ_m｝_n−Ｗ_k−Ｒ¹²）₂ ここで、 ｍ＝０〜１； ｎ＝０〜２０； ｋ＝０〜１； Ｒ¹¹は各存在で、独立して、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体から選択され
； Ｔは各存在で、独立して、Ｃ＝Ｏ、Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ¹²）、およびＮ（Ｒ¹²）
から選択され； Ｗは各存在で、独立して、Ｃ_2-14複素環から選択され；そして Ｒ¹²は各存在で、独立して、Ｈ、Ｘ、Ｘ−Ｒ⁶、Ｘ−Ｒ⁷、Ｘ−Ｎ（Ｒ⁸）₂、Ｘ
−Ｏ−Ｒ⁹、Ｘ−Ｓ（Ｏ）_pＲ¹⁰、およびＰ（ＯＲ）₃から選択されるか、または 一緒になって、飽和または不飽和の、Ｃ_2-14シクロアルキルを形成し得、このＣ _2-14 シクロアルキルは必要に応じて、ハロゲン、＝Ｏ、ＯＲ、ＯＮＲＲ、Ｃ（Ｏ
）Ｒ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＣＮ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ、Ｃ（Ｏ）ＮＲＯＲ
、ＮＨ₂、ＮＯ₂、ＮＨＯＲ、Ｃ（ＮＲ）ＮＨＲ、ＮＨＣ（ＮＲ）ＮＨＲ、Ｐ（Ｏ
Ｒ）₃およびＳｉＲＲＲから選択される１以上の置換基によって置換され；そし て Ｒ、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｘ、およびｐは、すぐ上で定義した通りであ
り； ただし、ｎ＝０の場合、Ｒ¹²の各々は、両方ともがハロゲンであることはない
。

【０１２６】 上記の構造（Ｉ）の状況では、二環式環の任意の２つの隣接するＣＨ基は、二
重結合を形成し得る。このような二重結合は、孤立して、または２以上のさらな
る二重結合（芳香族環系を含む）と連続して存在し得る。例えば、代表的な孤立
二重結合は、上記の構造（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩＩｅ）、（ＩＩＩｆ）
、（ＩＶｅ）、（ＩＶｆ）、（ＶＩＩＩａ）、および（ＶＩＩＩｂ）の化合物を
含む。共役二重結合から得られる代表的な芳香族化合物は、上記の構造（ＩＩｃ
）、（ＩＩｄ）、（ＩＩＩｃ）、（ＩＩＩｄ）、（ＩＶｃ）および（ＩＶｄ）に
より表される。

【０１２７】 本発明の特定の実施態様では、上記の構造（ＩＩ）を有するβ−シート模倣物
が開示され、ここで、Ａは−Ｃ（＝Ｏ）−であり、ＢはＮであり、Ｃは−（ＣＨ ₂ ）₂−または−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₂−であり、ＤはＮであり、そして必要に応じて カルボニル部分Ｆが存在し、これは、以下の構造（ＩＩｇ）、（ＩＩｈ）、およ
び（ＩＩｈ’）により表される：

【０１２８】

【化４１】

【０１２９】 同様に、ＢおよびＤが両方ともＣＨである場合、本発明の代表的なβ−シート模
倣物は、以下の構造（ＩＩｉ）、（ＩＩｊ）、および（ＩＩｊ’）の化合物を含
む：

【０１３０】

【化４２】

【０１３１】 本発明の別の特定の実施態様では、上記の構造（ＩＩＩ）を有するβ−シート
模倣物が開示される。この実施態様の１つの局面では、ＤはＮであり、そしてこ
の化合物は以下の構造（ＩＩＩｉ）を有する：

【０１３２】

【化４３】

【０１３３】 ここで、Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ₂）_0-4−、および−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ ₂ ）_1-3−から選択され；Ｂは、ＮおよびＣＨから選択され；Ｃは−Ｃ（＝Ｏ）−
および−（ＣＨ₂）_0-3−から選択され；そして二環式環系は、飽和している（す
なわち、二環式環系の隣接するＣＨ基の間に二重結合を含まない）。

【０１３４】 ＢがＣＨであり、そしてＲ₃が水素であるこの実施態様では、以下の構造（Ｉ ＩＩｊ）、（ＩＩＩｋ）、および（ＩＩＩｌ）を有する化合物が開示される：

【０１３５】

【化４４】

【０１３６】 ＢがＮであり、そしてＲ₃が水素である構造（ＩＩＩｉ）の１つの実施態様で は、以下の構造（ＩＩＩｍ）、（ＩＩＩｎ）、および（ＩＩＩｏ）を有する化合
物が開示される：

【０１３７】

【化４５】

【０１３８】 本発明のこの局面の好ましい実施態様では、以下の構造（ＩＩＩｐ）、（ＩＩ
Ｉｑ）、（ＩＩＩｒ）および（ＩＩＩｒ’）を有する化合物が開示される：

【０１３９】

【化４６】

【０１４０】 上記の構造（ＩＩＩｉ）の別の実施態様では、以下の構造（ＩＩＩｓ）を有す
る化合物が開示される：

【０１４１】

【化４７】

【０１４２】 ここで、Ａは、−（ＣＨ₂）_0-4−、−（ＣＨ₂）_1-2Ｏ−、および−（ＣＨ₂）_1-2 Ｓ−から選択され；Ｃは、−（ＣＨ₂）_0-3−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｏ（ＣＨ₂）_{1 -2} −および−Ｓ（ＣＨ₂）_1-2−から選択され；そして二環式環系は飽和している
。

【０１４３】 Ａが−（ＣＨ₂）_0-4−である構造（ＩＩＩｓ）の１つの実施態様では、以下の
構造（ＩＩＩｔ）を有する化合物が開示される：

【０１４４】

【化４８】

【０１４５】 Ａが−（ＣＨ₂）_1-2Ｏ−または−（ＣＨ₂）_1-2Ｓ−である構造（ＩＩＩｓ）の
１つの実施態様では、以下の構造（ＩＩＩｕ）および（ＩＩＩｖ）を有する化合
物が開示される：

【０１４６】

【化４９】

【０１４７】 Ｃが−（ＣＨ₂）_1-3−である構造（ＩＩＩｓ）の１つの実施態様では、以下の
構造（ＩＩＩｗ）を有する化合物が開示される：

【０１４８】

【化５０】

【０１４９】 ここで、Ａは、−（ＣＨ₂）_1-4−、−（ＣＨ₂）_1-2Ｏ−、および−（ＣＨ₂）_1-2 Ｓ−から選択される。

【０１５０】 Ｃが−Ｏ−または−Ｓ−である構造（ＩＩＩｓ）の１つの実施態様では、以下
の構造（ＩＩＩｘ）および（ＩＩＩｙ）を有する化合物が開示される：

【０１５１】

【化５１】

【０１５２】 Ｃが−Ｏ（ＣＨ₂）_1-2−または−Ｓ（ＣＨ₂）_1-2−である構造（ＩＩＩｓ）の
１つの実施態様では、以下の構造（ＩＩＩｚ）および（ＩＩＩｚａ）を有する化
合物が開示される：

【０１５３】

【化５２】

【０１５４】 本発明のさらなる実施態様では、上記の構造（ＩＶ）を有するβ−シート模倣
物が開示される。この実施態様の１つの局面では、Ａは−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
ＢはＣＨまたはＮであり、Ｃは−（ＣＨ₂）₂−または−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₂−であ り、ＤはＮであり、そして必要に応じてカルボニル部分が存在し、以下の構造（
ＩＶｇ）、（ＩＶｇ’）、（ＩＶｈ）、および（ＩＶｈ’）により表される通り
である：

【０１５５】

【化５３】

【０１５６】 Ｆが存在しない本発明の実施態様では、構造（Ｖ）、（ＶＩ）、および（ＶＩ
Ｉ）を有する化合物が開示される。構造（Ｖ）の化合物に関しては、Ａが−Ｃ（
＝Ｏ）−であり、ＢおよびＤが両方ともＣＨまたはＮであり、そしてＣが−（Ｃ
Ｈ₂）₂−である場合、本発明の代表的な化合物は、以下の構造（Ｖａ）、（Ｖｂ
）、および（Ｖｃ）を含む：

【０１５７】

【化５４】

【０１５８】 同様に、構造（ＶＩ）では、Ａが−Ｃ（＝Ｏ）−であり、ＢおよびＤが両方と
もＣＨまたはＮであり、そしてＣが−（ＣＨ₂）₂−である場合、本発明の代表的
な化合物は、以下の構造（ＶＩａ）、（ＶＩｂ）、および（ＶＩｃ）を含む：

【０１５９】

【化５５】

【０１６０】 構造（ＶＩＩ）に関しては、Ａが−Ｃ（＝Ｏ）−であり、ＢおよびＤが両方と
もＣＨまたはＮであり、そしてＣが−（ＣＨ₂）₂−である場合、本発明の代表的
な化合物は、以下の構造（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩｂ）、および（ＶＩＩｃ）を含
む：

【０１６１】

【化５６】

【０１６２】 構造（ＶＩＩＩ）の化合物に関しては、構造（ＶＩＩＩａ）および（ＶＩＩＩ
ｂ）のＢおよびＤが両方ともＣＨまたはＮであり、そしてＸが−Ｓ−、−Ｏ−、
または−（ＣＨ₂）₂−である１つの実施態様では、構造（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩ
ＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｅ）、および（ＶＩＩＩｆ）の化合物を得る：

【０１６３】

【化５７】

【０１６４】 構造（ＩＸ）の１つの実施態様では、Ａが−Ｃ（＝Ｏ）−であり、ＢおよびＤ
が両方ともＮであり、Ｅが−Ｎ（Ｚ）−、−Ｃ（Ｒ₁）（ＮＨＺ）−、または− Ｃ（Ｒ₁）（Ｚ）−であり、そしてＦが存在する場合、本発明の化合物は、構造 （ＩＸｃ）〜（ＩＸｈ）を含む：

【０１６５】

【化５８】

【０１６６】 構造（Ｘ）の１つの実施態様では、Ａが−Ｃ（＝Ｏ）−であり、ＢがＮであり
、ＤがＮであり、そしてＥがＺ−Ｎである場合、本発明の化合物は、構造（Ｘｃ
）および（Ｘｄ）を含む：

【０１６７】

【化５９】

【０１６８】 構造（ＸＩ）の１つの実施態様では、Ａが−Ｃ（＝Ｏ）−であり、ＢがＮであ
り、Ｃが−ＣＨ₂Ｃ（＝Ｏ）−であり、ＤがＮであり、そしてＥがＺ−Ｎである 場合、本発明の化合物は、構造（ＸＩｃ）を含む：

【０１６９】

【化６０】

【０１７０】 本発明のβ−シート模倣物は、当業者によって、公知の有機合成技術により合
成され得る。例えば、構造（Ｉ）の種々の実施態様は、以下の反応スキームに従
って合成され得る。

【０１７１】 構造（ＩＩＩ）の代表的化合物は、以下の反応スキームにより合成され得る（
ここで、ｎ＝０〜４、ｐ＝０〜３、およびｍ＝０〜２）： （反応スキーム（１））

【０１７２】

【化６１】

【０１７３】 （反応スキーム（２）） 構造（ＩＩＩｋ）は以下の反応スキームにより合成され得る：

【０１７４】

【化６２】

【０１７５】 （反応スキーム（３）） 構造（ＩＩＩｌ’）を有する構造（ＩＩＩｌ）の代表的化合物は、以下の反応
スキームにより合成され得、ここで、スキーム（３）における構造（ＩＩＩｌ’
’）は二環式環系中に二重結合を有する本発明の代表的構造である：

【０１７６】

【化６３】

【０１７７】 さらに、構造（ＩＩＩｌ’’’）を有する構造（ＩＩＩｌ）の代表的化合物は
、以下の反応スキームにより合成され得、そして、構造（ＩＩＩｌ）のＡが−Ｃ
（＝Ｏ）（ＣＨ₂）_1-3−である場合、関連化合物（以下で（ＩＩＩｉ’）と命名
される）は以下の反応スキームにより合成され得る：

【０１７８】

【化６４】

【０１７９】 （反応スキーム（４）） 以下の構造（ＩＩＩｍ’）および（ＩＩＩｍ’’）（ここでＲ₃は水素である ）を有する構造（ＩＩＩｍ）の代表的化合物は、以下の反応スキームにより合成
され得る（ＨｏｌｍｅｓおよびＮｅｅｌ、Ｔｅｔ． Ｌｅｔｔ． ３１：５５６
７−７０， １９９０を参照のこと）：

【０１８０】

【化６５】

【０１８１】 構造（ＩＩＩｉ）の代表的化合物（ここでＲ₃はアミノ酸側鎖部分またはその 誘導体である）はまた、上記のスキーム（４）に従って調製され得る。

【０１８２】 （反応スキーム（５）） 構造（ＩＩＩｎ’）を有する構造（ＩＩＩｎ）の代表的化合物は、以下の反応
スキームにより合成され得る：

【０１８３】

【化６６】

【０１８４】 （反応スキーム（６）） 構造（ＩＩＩｏ）は、以下の反応スキームにより合成され得る：

【０１８５】

【化６７】

【０１８６】 （反応スキーム（７）） 以下に示される構造（ＩＩＩｐ’）および（ＩＩＩｐ’’）を有する構造（Ｉ
ＩＩｐ）の代表的化合物は、以下の反応スキームにより合成され得る：

【０１８７】

【化６８】

【０１８８】 （反応スキーム（８）） 構造（ＩＩＩｑ’）および（ＩＩＩｑ’’）を有する構造（ＩＩＩｑ）の代表
的化合物は、以下の反応スキームにより合成され得る（Ｊｕｎｇｈｅｉｍおよび
Ｓｉｇｍｕｎｄ、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５２：４００７−４０１３，
１９８７を参照のこと）：

【０１８９】

【化６９】

【０１９０】 （反応スキーム（９）） 構造（ＩＩＩｒ）は、以下の反応スキームにより合成され得る（Ｐｅｒｋｉｎ
、Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｐｅｒｋ． Ｔｒａｎｓ． １：１５５−１６
４， １９８４を参照のこと）：

【０１９１】

【化７０】

【０１９２】 （反応スキーム（１０）） 構造（ＩＩＩｔ）は、以下の反応スキームにより合成され得る：

【０１９３】

【化７１】

【０１９４】 （反応スキーム（１１）） 構造（ＩＩＩｕ）および（ＩＩＩｖ）は、以下の反応スキームにより合成され
得る：

【０１９５】

【化７２】

【０１９６】 （反応スキーム（１２）） 構造（ＩＩＩｗ）は、以下の反応スキームにより合成され得る：

【０１９７】

【化７３】

【０１９８】 （反応スキーム（１３）） 構造（ＩＩＩｘ）および（ＩＩＩｙ）は、以下の反応スキームにより合成され
得る：

【０１９９】

【化７４】

【０２００】 （反応スキーム（１４）） 構造（ＩＩＩｚ）および（ＩＩＩｚａ）は、以下の反応スキームにより合成さ
れ得る：

【０２０１】

【化７５】

【０２０２】 上記構造（Ｉ）の定義によれば、二環式環系は隣接するＣＨ基を含み得る（す
なわち、二環式環系は、少なくとも一部は−ＣＨ−ＣＨ−基により形成され得る
）。このような−ＣＨ−ＣＨ−基が−Ｃ＝Ｃ−に置換される化合物もまた、構造
（Ｉ）の範囲内に含まれる（すなわち、二環式環の任意の２つの隣接するＣＨ基
が一緒に二重結合を形成し得る）。

【０２０３】 反応スキーム（１５）、（１６）、および（１７）は、構造（ＩＩＩ）の代表
的化合物を調製するためのさらなる合成方法論を説明する。

【０２０４】 （反応スキーム（１５））

【０２０５】

【化７６】

【０２０６】 （反応スキーム（１６））

【０２０７】

【化７７】

【０２０８】 （反応スキーム（１７））

【０２０９】

【化７８】

【０２１０】 構造（ＩＶ）の代表的化合物は、以下の反応スキーム（１８）〜（２１）によ
り調製され得る。

【０２１１】 （反応スキーム（１８））

【０２１２】

【化７９】

【０２１３】 （反応スキーム（１９）） ＭｉｌｌｅｒおよびＷａｔｋｉｎｓ、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９０：１
５１５、１９７６の方法による出発物質。

【０２１４】

【化８０】

【０２１５】 あるいは、構造（ＩＶｃ）および（ＩＶｄ）は、反応スキーム（１９−１）に
よって作製され得る。

【０２１６】 （反応スキーム（１９−１））

【０２１７】

【化８１】

【０２１８】 （反応スキーム（２０））

【化８２】

【０２１９】 （反応スキーム（２１））

【化８３】

【０２２０】 あるいは、構造（ＩＶｆ）は、以下の反応スキーム（２１−１）によって作製
され得る。

【０２２１】 （反応スキーム（２１−１）

【０２２２】

【化８４】

【０２２３】 構造（ＶＩＩＩ）の代表的化合物は、反応スキーム（２２）および（２３）に
より、ウラゾールまたはピラゾリジンジオンのどちらかから合成され得る。

【０２２４】 （反応スキーム（２２）） 構造（ＶＩＩＩｃ）は、以下の反応スキームによってウラゾールから合成され
得る：

【０２２５】

【化８５】

【０２２６】 （反応スキーム（２３）） 構造（ＶＩＩＩｄ）は、以下の反応スキームにより、ピラゾリジンジオンから
合成され得る：

【０２２７】

【化８６】

【０２２８】 あるいは、ピラゾリジンジオン出発物質は、以下の反応スキームによって合成
され得る：

【０２２９】

【化８７】

【０２３０】 構造（ＩＩ）の代表的化合物は、以下の反応スキーム（２４）によって合成さ
れ得る： （反応スキーム（２４））

【０２３１】

【化８８】

【０２３２】 構造（ＩＩ）のさらに代表的化合物は、以下の反応スキーム（２５）により、
作製され得る： （反応スキーム（２５））

【０２３３】

【化８９】

【０２３４】 構造（ＩＩＩ）のさらに代表的な化合物は、以下の反応スキーム（２６）によ
って作製され得る。

【０２３５】 （反応スキーム（２６））

【０２３６】

【化９０】

【０２３７】 構造（Ｖ）、（ＶＩ）および（ＶＩＩ）の化合物は、代表的な前駆体中間体が
、位置Ｆにカルボニル部分を含まないことを除いて、構造（ＩＩ）、（ＩＩＩ）
および（ＩＶ）の化合物について上記に開示したのと同じ一般的な技術によって
作製され得る。

【０２３８】 さらに、構造（ＩＸ）の化合物は、反応スキーム（２７）に従って調製され得
る： （反応スキーム（２７））

【０２３９】

【化９１】

【０２４０】 構造（ＩＩｅ）の代表的化合物は、以下の反応スキーム（２８）によって、作
製され得る： （反応スキーム（２８））

【０２４１】

【化９２】

【０２４２】 構造（Ｘ）の代表的化合物は、以下の反応スキーム（２９）によって、作製さ
れ得る： （反応スキーム（２９））

【０２４３】

【化９３】

【０２４４】 構造（ＸＩｃ）の代表的化合物は、以下の反応スキーム（３０）によって、作
製され得る： （反応スキーム（３０））

【０２４５】

【化９４】

【０２４６】 構造（ＸＩｄ）の代表的な化合物は、以下の反応スキーム（３１）によって、
作製され得る： （反応スキーム（３１））：

【０２４７】

【化９５】

【０２４８】 構造（ＩＩｈ’）の代表的な化合物は、以下の反応スキーム（３２）および（
３３）によって、作製され得る： （反応スキーム（３２））：

【０２４９】

【化９６】

【０２５０】 （反応スキーム（３３））：

【０２５１】

【化９７】

【０２５２】 本発明のβ−シート模倣物の１実施態様において、Ｙ基は、以下の構造：

【０２５３】

【化９８】

【０２５４】 を有し、ここで好ましい立体配置は以下：

【０２５５】

【化９９】 である。

【０２５６】 好ましいＲ₄基は、約２〜約１０個の炭素原子および少なくとも１つの窒素原 子を有する有機アミン（ｏｒｇａｎｏａｍｉｎｅ）部分である。適切な有機アミ
ン部分は化学式Ｃ_2-10Ｈ_4-20Ｎ_1-6Ｏ_0-2を有し；そして、好ましくは、化学式Ｃ _3-7 Ｈ_7-14Ｎ_1-4Ｏ_0-1を有する。本発明の例示的な有機アミン部分は以下のもの である（ここで、Ｒは、水素、ハロゲン（例えば、フッ素）、低級鎖アルキル（
例えば、メチル）、およびヒドロキシ低級鎖アルキル（例えば、ヒドロキシメチ
ル）から選択され；そしてＸは、ＣＨ₂、ＮＨ、ＳおよびＯから選択される）：

【０２５７】

【化１００】

【０２５８】 上記の構造において、Ｒ₅は、以下から選択される：（ａ）１〜約１２個の炭 素原子のアルキル（必要に応じて１〜４のハライド、Ｃ_1-5アルコキシ、および ニトロで置換されている）、（ｂ）−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−Ｃ_1-5アルキル（ここで 、このアルキル基は必要に応じてハライドまたはＣ_1-5アルコキシで置換されて いる）、（ｃ） −Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−Ｃ_1-10アラルキル（ここで、このアリール
基は、ニトロ、ハライド、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）Ｃ_1-5アルキル、−ＮＨ−（Ｃ＝ Ｏ）Ｃ_6-10アリール、Ｃ_1-5アルキル、およびＣ_1-5アルコキシから独立して選択
される５つまでの基で必要に応じて置換され得る）、および（ｄ）４〜約１１個
の環原子の単環式および二環式ヘテロアリール（ここで、この環原子は炭素およ
びヘテロ原子（酸素、窒素、および硫黄）から選択され、そしてヘテロアリール
環は、約４つまでのハライド、Ｃ_1-5アルキル、Ｃ_1-5アルコキシ、−Ｃ（＝Ｏ）
ＮＨＣ_1-5アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣ_6-10アリール、アミノ、−Ｃ（＝Ｏ） ＯＣ_1-5アルキル、および−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ_6-10アリールで必要に応じて置換さ れ得る）。

【０２５９】 好ましいＲ₅基は、以下のものであり：

【０２６０】

【化１０１】

【０２６１】 ここで、Ｒ₆は、水素、ニトロ、ハライド、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ_1-5アルキル、
ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ_6-10アリール、Ｃ_1-5アルキル、およびＣ_1-5アルコキシで
あり；

【０２６２】

【化１０２】

【０２６３】 ここでＸはハライドであり；

【０２６４】

【化１０３】

【０２６５】 ここで、Ｅは、−Ｏ−、−ＮＨ−、または−Ｓ−であり、そしてＲ₇およびＲ₈は
、水素、Ｃ_1-5アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ_1-5アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ_6-10 アリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣ_1-5アルキル、および−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣ_6-10ア リールから独立して選択され；そして

【０２６６】

【化１０４】

【０２６７】 ここで、ＥおよびＲ₆は、すでに定義されているとおりである。

【０２６８】 本発明のβ−シート模倣物は、自動化固相ペプチド合成を含む標準的なペプチ
ド合成プロトコルに使用され得る。ペプチド合成は、段階的プロセスであり、こ
こでペプチドは単一のアミノ酸の段階的付加によるペプチド鎖の伸長によって形
成される。アミノ酸はペプチド（アミド）結合の形成によりペプチド鎖に連結さ
れる。ペプチド連結は、ペプチドのアミノ基をアミノ酸のカルボン酸基に結合す
ることにより形成される。このように、ペプチドはカルボキシル末端からアミノ
末端へと合成される。アミノ酸付加の個々の工程は、所望の長さおよびアミノ酸
配列のペプチド（またはタンパク質）が合成されるまで繰り返される。

【０２６９】 上記のようなペプチド（あるいはタンパク質または分子）合成を完了するため
に、ペプチドに付加すべきアミノ酸のアミノ基は、アミノ酸とペプチドとの間の
ペプチド結合形成（すなわち、アミノ酸のカルボキシル基の、ペプチドのアミノ
基への結合）を妨害すべきではない。このような妨害を防ぐために、ペプチド合
成に使用されるアミノ酸のアミノ基は適切な保護基で保護される。代表的なアミ
ノ保護基は、例えば、ＢＯＣ基およびＦＭＯＣ基を含む。従って、本発明の１つ
の実施態様では、本発明のβ−シート模倣物は、遊離のカルボン酸基および保護
されたアミノ基を有し、従って、標準的な合成技法によるペプチドへの組み込み
に適切である。

【０２７０】 本発明のβ−シート模倣物は、典型的に適切なリンカーを介して、固体支持体
上で合成され得る。次いで、β−シート模倣物は、例えば、アミノ分解によって
固体支持体から切断され得、そして例えば色素生産性の基質であるＢＡＰＮＡ（
ベンゾイルアルギニンパラニトロアニリド（ａｎａｌｉｄｅ））のような適切な
試剤に対する競合的基質としてスクリーニングされ得る（Ｅｉｃｈｌｅｒおよび
Ｈｏｕｇｈｔｅｎ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３２：１１０３５−１１０４１
、１９９３を参照のこと）（参考として本明細書中で援用される）。あるいは、
適切なリンカー部分を用いることで、このようなスクリーニングは、β−シート
模倣物を依然として固体支持体に付着させたままで、実施され得る。

【０２７１】 上記速度論的分析により基質が選択されると、β−シート模倣物は、Ｃ末端へ
の改変により（すなわち、Ｙ部分への改変により）インヒビターへ変換され得る
。例えば、末端Ｙ部分は、−ＣＨ₂Ｃｌ、−ＣＦ₃、−Ｈ、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ
Ｒで置換され得る。適切なＲ部分は、基質のライブラリーを用いて、あるいは、
ＷａｓｓｅｒｍａｎおよびＨｏの手順の改変版を用いて生成されるインヒビター
のライブラリーを用いて選択され得る（Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５９：４
３６４−４３６６， １９９４）（本明細書に参考として援用される）。

【０２７２】 β鎖テンプレートを含む化合物のライブラリーは、基質認識または結合に対す
る最適配列を決定するために構築され得る。このようなライブラリーを使用する
ための代表的な方策を以下に議論する。

【０２７３】 代表的なβ−シート模倣物基質ライブラリーは以下のように構築され得る。以
下が、β−シート模倣物基質ライブラリーを調製するために使用され得る方法論
の例示であること、および他のライブラリーが類似の様式で調製され得ることが
理解されるべきである。

【０２７４】 第１の工程において、以下のタイプのライブラリー：

【０２７５】

【化１０５】

【０２７６】 Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ＝アミノ酸側鎖部分またはその誘導体； Ｙ＝Ｈ、Ａｃ、ＳＯ₂Ｒ；そして、丸で囲まれた「Ｐ」は固体支持体を表す 。 が固体支持体上で構築され得る（ＰＥＧＡ樹脂、Ｍｅｌｄａｌ， Ｍ．、Ｔｅｔ
ｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． ３３：３０７７−８０， １９９２；制御され
た細孔ガラス、Ｓｉｎｇｈら、Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ３８：２１７−１
９， １９９５）。次いで、固体支持体は、適切な緩衝液中で酵素（例えばプロ
テアーゼ）とともに透析バッグ中（Ｂｅｄｎａｒｓｋｉら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅm ．Ｓｏｃ．１０９：１２８３−５、１９８７）に置かれ得る。次いで、このバッ
グは大量の緩衝液とともにビーカー中に置かれる。酵素反応はＨＰＬＣによって
時間の関数としてモニターされ、そしてポリマーから切断された物質はＭＳ／Ｍ
Ｓにより分析される。この方策は、特定の標的物に対する最良の基質に関する情
報を提供する。

【０２７７】 β−シート模倣物の合成は次に示すレトロ合成手順により説明される：

【０２７８】

【化１０６】

【０２７９】 この技法により生成されるライブラリーの複雑性は、（Ｒ₁）（Ｒ₃）（Ｒ）（
Ｙ）である。Ｒ₁、Ｒ₃、およびＲが天然に存在するアミノ酸側鎖部分から選択さ
れ、ｎは一定であり、そして、Ｙは上で定義したようにＨ、Ａｃ、または−ＳＯ ₂ Ｒであると仮定すると、約２４，０００メンバーを有するライブラリー［（２ ０）（２０）（２０）（３）］が生成される。

【０２８０】 特定の標的物（例えば、酵素）に対してライブラリーをスクリーニングした後
、次いでライブラリーは、回収され、そして第２の標的物などでスクリーニング
され得る。

【０２８１】 さらに、インヒビターのライブラリーは、標準的な色素生産性アッセイにおい
て構築され、そしてスクリーニングされ得る。例えば、ライブラリーは以下のよ
うに構築され得る。ここで、以下の実施例は、以下に提供される特定の実施例に
類似の様式で調製され得るインヒビターライブラリーの代表例にすぎない。

【０２８２】

【化１０７】

【０２８３】 （Ｗａｓｓｅｒｍａｎら、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５９：４３６４−６，
１９９４を参照のこと）。

【０２８４】 さらなる代替的な方策は、以下に示すように側鎖Ｒ基を介してライブラリーを
連結することである。

【０２８５】

【化１０８】

【０２８６】 以下の例示の構造を有するアスパラギン酸プロテアーゼインヒビターのライブ
ラリーが、構築され得、そして次いで樹脂から切断され得、そしてスクリーニン
グされ得る：

【０２８７】

【化１０９】

【０２８８】 同様に、メタロプロテアーゼについては、以下に示す例示の構造を有するライ
ブラリーが構築され得、次いで樹脂から切断されてヒドロキサム酸のライブラリ
ーを提供し得る：

【０２８９】

【化１１０】

【０２９０】 本発明のβ−シート模倣物の活性は、多数の生物学的に活性なペプチドを挙げ
る表２を参照することによりさらに説明され得る。特に、表２のペプチドは基質
またはインヒビターとしての生物学的活性を有することが公知である。

【０２９１】 （表２） （生物学的活性ペプチド）

【０２９２】

【表２】

【０２９３】 より一般的には、本発明のβ−シート模倣物は、Ｒ₂、Ｒ₁’、Ｒ₃、Ｆ、Ｙお よびＺ部分（ならびに、構造（Ｉ）自体のＡ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥ部分）の適切
な選択により、任意の数の生物学的活性ペプチドを模倣するために合成され得る
。これはさらに、表３により説明される。表３は、生物学的に活性な化合物を得
るために構造（Ｉ）のβ−シート模倣物に作成され得る種々の改変を開示する。
表３において、Ｒ₂およびＲ₃は、「Ｒ₂／Ｒ₃」カラムに基づいて示される原子ま
たは基の中から独立して選択される。

【０２９４】 （表３） （生物学的に活性な化合物を得るための構造（Ｉ）への改変）

【０２９５】

【化１１１】

【０２９６】

【表３】

【０２９７】 本発明のβ−シート模倣物が生物学的に活性なペプチドの１つ以上のアミノ酸
に対して置換される場合、得られるβ−シート改変ペプチドの構造（ＰＡＭのよ
うな固体支持体からの切断の前）は以下の図式により表され得、ここでＡＡ₁か らＡＡ₃は同じまたは異なるアミノ酸を表す：

【０２９８】

【化１１２】

【０２９９】 正確なβ−シート模倣物は、コンピュータモデリングを含む任意の種々の技法、
無作為化技法（ｒａｎｄｏｍｉｚａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）、および／
または天然基質選択アッセイを用いることにより選択され得る。β−シート模倣
物はまた、β−シート模倣物のライブラリーを合成し、そしてこのようなライブ
ラリーメンバーをスクリーニングして上で開示したように活性なメンバーを同定
することにより生成され得る。

【０３００】 一旦、最適化されたβ−シート模倣物が選択されると、次いで、改変がそこに
付着した種々のアミノ酸に対して行われ得る。種々のアミノ酸置換を有する一連
のβ−シート改変ペプチドは、次いで、固体支持体から切断され、そして好まし
い基質を同定するためにアッセイされる。このような基質の生成は多くのβ−シ
ート改変ペプチドの合成およびスクリーニングを含み得ることが理解されるべき
である。ここで、各β−シート改変ペプチドは、種々の異なるβ−シート模倣物
と組み合わせた種々のアミノ酸置換を有する。さらに、固体支持体からのβ−シ
ート改変ペプチドの切断の後、上記図式においてＺ部分がＡＡ₃でありそしてＹ 部分がＡＡ₂およびＡＡ₁であることもまた認識されるべきである。（この図式は
例示のために示されるが、付加的またはより少数のアミノ酸がβ−シート模倣物
に連結され得る−すなわち、ＡＡ₃は存在し得ないかあるいは付加的なアミノ酸 がそこに連結され得る；そしてＡＡ₂および／またはＡＡ₁は省略され得るかある
いは付加的なアミノ酸はそこに連結され得る。） 一旦、好ましい基質が上で開示された手順により同定されると、基質は公知の
技法によって、容易にインヒビターに変換され得る。例えば、Ｃ末端アミノ酸（
この場合にはＡＡ₁）は、基質に対するインヒビター活性を与えることが公知で ある多くの部分の付加により改変され得る。これには、−ＣＦ₃（公知の可逆的 セリンプロテアーゼインヒビター）、−ＣＨ₂Ｃｌ（公知の非可逆的セリンプロ テアーゼインヒビター）、−ＣＨ₂Ｎ₂および−ＣＨ₂Ｓ（ＣＨ₃）₂ ⁺（公知のシス
テイニルプロテアーゼインヒビター）、−ＮＨＯＨ（公知のメタロプロテアーゼ
インヒビター）、

【０３０１】

【化１１３】

【０３０２】 （公知のシステイニルプロテーゼインヒビター）、ならびに

【０３０３】

【化１１４】

【０３０４】 （公知のアスパルチルプロテアーゼインヒビター）を含む（しかしこれらに限定
されない）。

【０３０５】 本発明のβ−シート模倣物の有用性は特定の実施態様に関して開示されている
が、広範な種類およびタイプの化合物が本発明のβ−シート模倣物を含むように
作成され得ることが理解される。例えば、本発明のβ−シート模倣物はペプチド
またはタンパク質の２つ以上のアミノ酸に置換され得る。ペプチドまたはタンパ
ク質のβ−シート構造を改善および／または改変することに加えて、特にコンフ
ォメーションの安定性に関して、本発明のβ−シート模倣物はまたタンパク質分
解性の分解を阻害するために役立つ。これにより、本発明のβ−シート模倣物の
組み込みのため、タンパク質分解性の分解がより少なくなる傾向があるペプチド
またはタンパク質の付加された有利点が生じる。

【０３０６】 より詳細には、本発明のβ−シート模倣物は、天然に存在するペプチドまたは
合成ペプチド、タンパク質および分子において広く利用性を有する。例えば、ペ
プチド、タンパク質および分子。例えば、本明細書中に開示されるβ−シート模
倣物は、キナーゼおよびプロテアーゼのインヒビターとして活性を有し、ならび
にＭＨＣ ＩＩインヒビターとしての有用性を有する。例えば、本発明のβ−シ
ート模倣物は、Ｐ’置換基として好ましいアルギニンまたはリジンを含む、トリ
プシン様セリンプロテアーゼの大ファミリーのインヒビターとしての活性を有す
る。これらの酵素は、止血に関与し、そして第ＶＩＩａ因子、第ＩＸａ因子、第
Ｘａ因子、第ＸＩａ因子、トロンビン、カリクレイン、ウロキナーゼ（これはま
た、ガンの転移に関与する）およびプラスミンが挙げられる（しかし、これらに
限定されない）。関連酵素であるトリプターゼ（ｔｒｙｐｔａｓｅ）は、炎症応
答に関与する。従って、これらの酵素を選択的に阻害する能力は、循環器病、炎
症性疾患、および腫瘍学に関与する治療学的用途において広範な有用性を有する
。

【０３０７】 例えば、以下の構造の化合物は、第ＶＩＩａ因子およびトロンビンインヒビタ
ーの文脈において本発明のさらなる実施態様を示す。

【０３０８】 （第ＶＩＩａインヒビター）

【０３０９】

【化１１５】

【０３１０】 （トロンビンインヒビター）

【０３１１】

【化１１６】

【０３１２】 別の局面では、本発明は、貯蔵または投与のために調製された薬学的組成物を
包含し、この組成物は、薬学的に受容可能なキャリア中に、治療的有効量の本発
明のβ−シート模倣物または化合物を含む。抗凝固療法は、種々の血栓症状態、
特に冠動脈および脳血管疾患の処置および予防が必要とされる。当業者は、抗凝
固療法を必要とする状況に容易に気づく。

【０３１３】 本発明の化合物の「治療的有効量」は、投与経路、処置される温血動物のタイ
プ、および検討中の特定の動物の肉体的特徴に依存する。この量を決定するため
のこれらの因子およびそれらの関連は、医療分野の当業者に周知である。この量
および投与方法は、最適の有効性を達成するために適合され得るが、体重、食餌
、併用薬物のような因子、および医療分野の有名な当業者が認識するような他の
因子に依存する。

【０３１４】 本発明の化合物の「治療的有効量」は、所望の影響および治療徴候に依存する
広い範囲をとり得る。代表的には、用量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と１００
ｍｇ／ｋｇ体重との間、好ましくは約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と１０ｍｇ／ｋｇ
体重との間である。

【０３１５】 治療的使用のための「薬学的に受容可能なキャリア」は、薬学の分野で周知で
あり、そして、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ． （Ａ．Ｒ．
Ｇｅｎｎａｒｏ編、１９８５）に記載されている。例えば、滅菌生理食塩水お
よび生理学的ｐＨのリン酸緩衝化生理食塩水が使用され得る。保存剤、安定化剤
、染料、および着香剤（ｆｌａｖｏｒｉｎｇ ａｇｅｎｔ）さえも薬学的組成物
中に提供され得る。例えば、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、およびｐ−ヒド
ロキシ安息香酸エステルが保存剤として添加され得る。さらに、抗酸化剤および
懸濁剤が使用され得る。

【０３１６】 トロンビン阻害は、血栓症状態を有する個体の抗凝固療法に有用であるだけで
なく、貯蔵した全血の凝固を防止するためおよびテストまたは貯蔵用の他の生物
学的試料中の凝固を防止するためのような、血液凝固の阻害が必要とされるとき
はいつでも有用である。したがって、トロンビンインヒビターは、トロンビンを
含むまたは含むことが疑われる任意の媒体に添加または接触され得、そしてその
媒体中で血液凝固が阻害されることが所望される（例えば、血管移植片、幹、整
形外科的補綴物、心臓補綴物、および体外循環系からなる群より選択される物質
に哺乳動物の血液を接触させる場合）。

【０３１７】 トロンビンインヒビターは、種々の血管病理の処置における相乗的効果を達成
するために適切な抗凝固剤または血栓溶解剤（例えば、プラスミノーゲンアクチ
ベーターまたはストレプトキナーゼ）とともに同時投与され得る。例えば、トロ
ンビンインヒビターは、組織プラスミノーゲンアクチベーター媒介血栓溶解性再
灌流の効能を増強する。トロンビンインヒビターは、血栓形成後に最初に投与さ
れ得、そしてその後、組織プラスミノーゲンアクチベーターまたは他のプラスミ
ノーゲンアクチベーターが投与される。それらはまた、ヘパリン、アスピリン、
またはワルファリンと組み合わされ得る。

【０３１８】 本発明のトロンビンインヒビターは、錠剤、カプセル剤（それぞれは持続放出
処方または時間放出（ｔｉｍｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ）処方を含む）、丸剤、粉剤
、顆粒剤、エリキシル剤（ｅｌｉｘｅｒ）、チンキ剤、懸濁剤、シロップ剤、お
よび乳剤のような経口形態で投与され得る。同様に、それらは、静脈内（ボーラ
スまたは注入）、腹腔内、皮下、または筋肉内形態で投与され得、これらはすべ
て薬学の分野の当業者に周知の形態を用いて投与され得る。有効であるが無毒性
の量の所望の化合物は、抗凝集剤としてまたはフィブリンから構築される眼を処
置するように用いられ得る。これらの化合物は、眼内にまたは局所的に、ならび
に経口または非経口で投与され得る。

【０３１９】 トロンビンインヒビターは、蓄積注入または移植調製物の形態で投与され得る
。これらは、活性成分の持続放出を可能にするような様式で処方され得る。活性
成分は、ペレットまたは小シリンダー中に圧縮され得、そして蓄積注入または移
植物として皮下または筋肉内に移植され得る。移植物は、生分解性ポリマーまた
は合成シリコーンのような不活性物質（例えば、Ｓｉｌａｓｔｉｃ、シリコーン
ゴム、またはＤｏｗ−Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎにより製造され
た他のポリマー）を使用し得る。

【０３２０】 トロンビンインヒビターはまた、小さなユニラメラ小胞、大きなユニラメラ小
胞、およびマルチラメラ小胞のようなリポソーム送達システムの形態で投与され
得る。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジ
ルコリンのような種々のリン脂質から形成され得る。

【０３２１】 トロンビンインヒビターはまた、化合物分子が結合されている個々のキャリア
としてのモノクローナル抗体の使用により送達され得る。トロンビンインヒビタ
ーはまた、標的可能な薬物キャリアとしての可溶性ポリマーに結合され得る。こ
のようなポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロ
キシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルタル
ニドフェノール（ｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ−ａｓｐａｒｔａｒｎｉｄ
ｅ−ｐｈｅｎｏｌ）、パルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシドポリ
リジンが含まれ得る。さらに、トロンビンインヒビターは、薬物の制御された放
出を達成するために有用な生分解性ポリマーのクラスに結合され得る。例えば、
ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポ
リε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタ
ール、ポリジヒドロピラン（ｐｏｌｙｄｉｂｙｄｒｏｐｙｒａｎ）、ポリシアノ
アクリレート、および架橋したまたは両親媒性のヒドロゲルのブロックコポリマ
ーが挙げられる。

【０３２２】 投与量および投与の方法は、最適効能を達成するように適合され得るが、体重
、食餌、併用薬物のような因子、および医療分野の当業者が認識するような他の
因子に依存する。投与が日常の基礎に基づいて非経口（例えば、静脈内）である
べき場合、注入可能な薬学的組成物は、液体の溶液または懸濁液のいずれかの通
常の形態として、注入前の液体中での溶液または懸濁液に適切な固体形態として
、あるいは乳剤として調製され得る。

【０３２３】 本発明の活性化合物の経口投与に適切な錠剤は、以下のように調製され得る： 量−ｍｇ 活性化合物 ２５．０ ５０．０ １００．０ 微晶質セルロース ３７．２５ １００．０ ２００．０ 改変食用コーンスターチ ３７．２５ ４．２５ ８．５ ステアリン酸マグネシウム ０．５０ ０．７５ １．５ 。

【０３２４】 すべての活性化合物、セルロース、およびコーンスターチの一部を混合し、そ
して１０％コーンスターチペーストに顆粒状化する。得られた顆粒をふるいにか
け、乾燥し、そして残りのコーンスターチおよびステアリン酸マグネシウムと混
合する。次いで、得られた顆粒を、１錠剤につきそれぞれ２５．０、５０．０、
および１００．０ ｍｇの活性成分を含む錠剤に圧縮する。

【０３２５】 上に示した活性化合物の静脈内投与形態は、以下のように調製され得る： 活性化合物 ０．５〜１０．０ｍｇ クエン酸ナトリウム ５〜５０ｍｇ クエン酸 １〜１５ｍｇ 塩化ナトリウム １〜８ｍｇ 注入用水（ＵＳＰ） １ｍｌまで適量。

【０３２６】 上記の量を利用すると、活性化合物は、注入用水中の塩化ナトリウム、クエン
酸、およびクエン酸ナトリウムの予め調製された溶液に、室温で溶解される（Ｕ
ＳＰ、Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ／Ｎａｔｉｏ
ｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ ｆｏｒ １９９５、Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ
Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ．， Ｒｏｃ
ｋｖｉｌｌｅ， Ｍａｒｙｌａｎｄにより出版、１９９４の版権の１６３６ペー
ジを参照のこと）。

【０３２７】 本発明の化合物は、開示されたように作成および選択された場合、インビトロ
およびインビボでトロンビンの強力なインヒビターとして有用である。このよう
に、これらの化合物は、血液の凝固を防止するためのインビトロ診断試薬として
、および異常血栓症により特徴づけられる症状を有すると疑われる哺乳動物にお
ける血栓症を予防するためのインビボ診断剤として有用である。

【０３２８】 本発明の化合物は、血液吸引チューブ中の凝血を阻害するためのインビトロ診
断剤として有用である。静脈穿刺により得られた血液をチューブ中に吸引する手
段として、その中が真空である、栓をしたテストチューブを使用することは、医
療分野では周知である（Ｋａｓｔｅｎ， Ｂ．Ｌ．、「Ｓｐｅｃｉｍｅｎ Ｃｏ
ｌｌｅｃｔｉｏｎ」、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｔｅｓｔ Ｈａｎｄｂｏｏｋ、第
２版、Ｌｅｘｉ−Ｃｏｍｐ Ｉｎｃ．，Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ ｐｐ．１６−１７
、Ｊａｃｏｂｓ， Ｄ．Ｓ．ら編、１９９０）。血液からの、哺乳動物の血清の
単離に有用である場合、このような真空チューブは凝血阻害添加剤を含んでいな
くてもよい。血液からの、哺乳動物の血漿の単離に有用である場合、これらは凝
血阻害添加物（例えば、ヘパリン塩、ＥＤＴＡ塩、クエン酸塩、またはシュウ酸
塩）をその代わりに含んでいてもよい。本発明の化合物は、第Ｘａ因子またはト
ロンビンの強力なインヒビターであり、そしてこのように、血液採取チューブに
吸引する哺乳動物の血液の凝血を防止するために、血液採取チューブに組み入れ
られ得る。

【０３２９】 本発明の化合物は、血液採取チューブ中で、単独で、本発明の他の化合物と組
み合わせて、または他の公知の凝血のインヒビターと組み合わせて使用される。
このようなチューブに添加すべき量は、哺乳動物の血液がチューブ中に吸引され
るときに凝血の形成を阻害するに十分な量である。このようなチューブへの化合
物の添加は、それらの液体組成物の導入によるような当該分野で周知の方法によ
り、それらの固体組成物として、または固体へ凍結乾燥される液体組成物として
達成され得る。本発明の化合物は、２〜１０ｍＬの哺乳動物の血液と合わされた
ときにこのような化合物の濃度が血塊形成を阻害するに十分である量で血液採取
チューブに添加される。代表的には、必要とされる濃度は、約１〜１０，０００
ｎＭであり、１０〜１０００ｎＭが好ましい。

【０３３０】 転写因子の調節に関して、本発明の化合物は、転写因子（このＤＮＡに結合す
る能力は細胞オキシドレダクターゼによるシステイン残基の還元によって制御さ
れる）を調節する。１つの実施態様において、転写因子はＮＦ−κＢである。こ
の実施態様において、本発明の化合物は、免疫および／または炎症性応答のメデ
ィエイタとしての活性を有するか、あるいは細胞増殖を制御するのに役立つ。別
の実施態様において、転写因子は、ＡＰ−１であり、そして細胞オキシドレダク
ターゼはＲｅｆ−１である。この実施態様において、本発明の化合物は、抗炎症
性および／または抗ガン剤としての活性を有する。なおさらなる実施態様におい
て、転写因子は、Ｍｙｂおよびグルココルチコイドレセプターから選択される。
本発明の文脈内で調節され得る他の転写因子としてはまた以下が挙げられる：Ｒ
ｅｌ−Ａ、ｃ−Ｒｅｌ、Ｒｅｌ−Ｂ、ｐ５０およびｐ５２のようなＮＦκＢファ
ミリーのようなもの；Ｆｏｓ、ＦｏｓＢ、Ｆｒａ−１、Ｆｒａ−２、Ｊｕｎ、Ｊ
ｕｎＢおよびＪｕｎＤのようなＡＰ−１ファミリーのようなもの；ＡＴＦ；ＣＲ
ＥＢ；ＳＴＡＴ−１、−２、−３、−４、−５および−６；ＮＦＡＴ−１、−２
および−４；ＭＡＦ；甲状腺因子；ＩＲＦ；Ｏｃｔ−１および−２；ＮＦ−Ｙ；
Ｅｇｒ−１；ならびにＵＳＦ−４３。

【０３３１】 本発明の方法の実施において、本発明の化合物の治療的有効量は、それを必要
とする温血動物に投与される。例えば、本発明の化合物は、以下から選択される
状態で診断を受けているか、またはその発症の危険性がある温血動物に投与され
得る：クローン病、喘息、慢性関節リウマチ、虚血、再灌流障害、対宿主性移植
片病（ＧＶＨＤ）、筋萎縮側索硬化症（ＡＬＳ）、アルツハイマー病、同種移植
拒絶および成人Ｔ細胞白血病。

【０３３２】 以下の実施例は例示のために提供されるが、限定のために提供されるものでは
ない。

【０３３３】 （実施例） （実施例１） （代表的なβシート模倣物の合成） 本実施例は、本発明の代表的なβシート模倣物の合成を例示する。

【０３３４】 （構造（１）の合成：）

【０３３５】

【化１１７】

【０３３６】 フェニルアラニンベンズアルドイミン（構造（１））を、次のようにして合成
した。室温のＣＨ₂Ｃｌ₂（１５０ｍｌ）中で攪拌したＬ−フェニルアラニンメチ
ルエステルヒドロクロリド（７．１９ｇ，３３．３ｍｍｏｌ）とベンズアルデヒ
ド（３．４ｍｌ，３３．５ｍｍｏｌ）との混合物に、トリエチルアミン（７．０
ｍｌ，５０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液に無水硫酸マグネシウム（２ｇ）
を加え、その混合物を１４時間攪拌した後、セライトの１インチパッドを通して
ＣＨ₂Ｃｌ₂で濾過した。その濾液を減圧下で最初の容積の約半分まで濃縮した後
、等容積のヘキサンで希釈した。その混合物を飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液、Ｈ₂Ｏお
よびブラインで２回抽出し、次いで、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、そして濾過した
。その濾液を真空下で濃縮して、無色の油状物８．３２ｇ（収率９３％）を得た
。¹Ｈ ＮＭＲ分析は、ほぼ純粋（＞９５％）なフェニルアラニンベンズアルド イミンを示した。その粗生成物をさらに精製することなく使用した。

【０３３７】 （構造（２）の合成：）

【０３３８】

【化１１８】

【０３３９】 α−アリルフェニルアラニンベンズアルドイミン（構造（２））を、次のよう
にして合成した。−７８℃のＴＨＦ（１５０ｍＬ）中で攪拌したジイソプロピル
アミン（４．３ｍｌ，３３ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎ−ブチルリチウムの溶液（２
．５Ｍヘキサン溶液１３ｍｌ，３３ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた溶液を２０
分間攪拌し、次いで、ＴＨＦ（３０ｍｌ）中のフェニルアラニンベンズアルドイ
ミン（７．９７ｇ，２９．８ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと加えた。得られた暗
赤橙色溶液を１５分間攪拌し、次いで、臭化アリル（３．１ｍｌ，３６ｍｍｏｌ
）を加えた。その淡黄色溶液を−７８℃で３０分間攪拌した後、室温に加温し、
さらに１時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、その混合物を酢酸
エチルに注いだ。有機相を分離し、水およびブラインで洗浄し、次いで、無水硫
酸ナトリウムで乾燥し、そして濾過した。その濾液を真空下で濃縮して、粘稠な
黄色油状物８．５４ｇを得た。カラムクロマトグラフィーによる精製で、α−ア
リルフェニルアラニンベンズアルドイミン７．９３ｇ（８７％）を粘稠な無色油
状物として得た。

【０３４０】 （構造（３）の合成：）

【０３４１】

【化１１９】

【０３４２】 α−アリルフェニルアラニンヒドロクロリド（構造（３））を、次のようにし
て合成した。メタノール（５０ｍｌ）中で攪拌したα−アリルフェニルアラニン
ベンズアルドイミン（５．９４ｇ，１９．３ｍｍｏｌ）の溶液に、５％塩酸水溶
液（１０ｍｌ）を加えた。その溶液を室温で２時間攪拌し、次いで、真空下で濃
縮して、橙褐色のカラメル質にした。その粗生成物をＣＨＣｌ₃（１０ｍｌ）に 溶解し、その溶液を加熱沸騰させた。ヘキサン（約１５０ｍｌ）を加え、わずか
に濁ったその混合物を冷却させた。結晶化した固体から液体をデカンテーション
して取り除き、次いで、その固体をヘキサンでリンスし、そして回収した。残存
溶媒を真空下で除去して、純粋なα−アリルフェニルアラニンヒドロクロリド３
．５６ｇ（７２％）を白色結晶性固体として得た。

【０３４３】

【数１】

【０３４４】 （構造（４）の合成：）

【０３４５】

【化１２０】

【０３４６】 Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−α−アリルフェニルアラニン（構造
（４））を、次のようにして合成した。ＴＨＦ（１５ｍｌ）と水（５ｍｌ）との
混合物中で攪拌したＤ，Ｌα−アリルフェニルアラニンヒドロクロリド（５６５
ｍｇ，２．２１ｍｍｏｌ）の溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートを加
え、続いて固形重炭酸ナトリウムを注意深く少しずつ添加した。得られた二相混
合物を室温で２日間激しく攪拌し、次いで、酢酸エチルで希釈した。その有機相
を分離し、水およびブラインで洗浄し、次いで、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、
そして濾過した。濾液を真空下で濃縮して無色の油状物を得て、それをカラムク
ロマトグラフィー（ヘキサン中の５〜１０％ＥｔＯＡｃ勾配で溶出）で精製する
ことにより、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−α−アリルフェニルアラ
ニン５９６ｍｇ（８６％）を得た。

【０３４７】

【数２】

【０３４８】 （構造（５）の合成：）

【化１２１】

【０３４９】 構造（５）のアルデヒドを、次のようにして合成した。ＣＨ₂Ｃｌ₂（５０ｍｌ
）とメタノール（１５ｍｌ）の混合物中−７８℃で攪拌した構造（４）のオレフ
ィン２．１０ｇ（６．５７ｍｍｏｌ）の溶液に、その溶液がはっきりと青色にな
るまでオゾンを吹き込んだ。その溶液をさらに１５分間攪拌し、次いで、硫化ジ
メチルをゆっくりと加えた。得られた無色の溶液を−７８℃で１０分間攪拌し、
次いで、室温に加温し、そして６時間攪拌した。その溶液を真空下で濃縮して、
粘稠な淡黄色油状物２．７２ｇを得、それをカラムクロマトグラフィー（ヘキサ
ン中の１０〜２０％ＥｔＯＡｃ勾配で溶出）で精製することにより、純粋なアル
デヒド１．６３ｇを粘稠な無色油状物として得た。

【０３５０】

【数３】

【０３５１】 （構造（６）の合成：）

【化１２２】

【０３５２】 構造（６）のヒドラゾンを、次のようにして合成した。室温のＴＨＦ（５０ｍ
ｌ）中で攪拌した構造（５）のアルデヒド（１．６２ｇ，５．０３ｍｍｏｌ）の
溶液に、ヒドラジン水和物（０．３２ｍｌ，６．５ｍｍｏｌ）を加えた。得られ
た溶液を室温で１０分間攪拌し、次いで、３日間加熱還流した。その溶液を室温
に冷却させ、次いで、真空下で濃縮して、１．５９ｇ（粗収率１０５％）の無色
泡状物にした。このヒドラゾン粗生成物（構造（６））を精製することなく使用
した。

【０３５３】

【数４】

【０３５４】 （構造（７）の合成：）

【化１２３】

【０３５５】 構造（７）の環状ヒドラジドを、次のようにして合成した。構造（６）の粗ヒ
ドラゾン（５５ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）と酸化白金（５ｍｇ，０．０２ｍｍｏ
ｌ）とをメタノール中に取り、そのフラスコに、ゴム風船を付けた三方コックを
装着した。そのフラスコに水素ガスを３回フラッシュし、風船を水素で膨らませ
、その混合物を水素雰囲気下で１７時間、激しく攪拌した。その混合物をセライ
トを通して酢酸エチルで濾過し、その濾液を真空下で濃縮して、白色泡状物にし
た。その白色泡状物をフラッシュクロマトグラフィーで精製して、構造（７）の
純粋な環状ヒドラジド４４ｍｇを得た（８０％）。

【０３５６】

【数５】

【０３５７】 （構造（８）の合成：）

【化１２４】

【０３５８】 構造（８）を次のようにして合成した。９０℃のアクリル酸エチル（２００ｍ
ｌ）中で攪拌した構造（７）の環状ヒドラジド（４．０７ｇ，１３．３２ｍｍｏ
ｌ）の溶液に、ホルムアルデヒド（３７％水溶液１．２ｍＬ）を加えた。その混
合物を１５時間加熱還流し、次いで、室温に冷却し、真空下で濃縮して白色泡状
物にした。その生成物をカラムクロマトグラフィー（５％アセトン／クロロホル
ム、次いで、１０％アセトン／クロロホルム）で分離することにより、二環式エ
ステルの最も極性の低いジアステレオマー（構造（８ｂ））０．８５１ｇと、よ
り極性の高いジアステレオマー（８ａ）とを得た。不純な画分を第２のクロマト
グラフィーにかけて、より純粋な構造（８ｂ）を得た（合計の収率２５％）。

【０３５９】

【数６】

【０３６０】

【化１２５】

【０３６１】 （構造（９ｂ）の合成：）

【０３６２】

【化１２６】

【０３６３】 構造（９ｂ）を次のようにして合成した。ＴＨＦ（１ｍｌ）中で攪拌した最も
極性の低いエチルエステル（すなわち構造（８ｂ））（３１ｍｇ，０．０７４ｍ
ｍｏｌ）の溶液に、水酸化リチウム水溶液（１Ｍ，０．１５ｍｌ）を加えた。得
られた混合物を室温で２時間攪拌し、次いで、反応物を５％クエン酸水溶液でク
エンチした。その混合物を酢酸エチル（２×）で抽出し、次いで、合わせた抽出
物を水およびブラインで洗浄した。その有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、
濾過し、真空下で濃縮して無色のガラス状物にした。その粗製酸（構造（９ｂ）
）をさらに精製することなく以降の実験に使用した。

【０３６４】 （構造（１０ｂ）の合成：）

【０３６５】

【化１２７】

【０３６６】 構造（１０ｂ）の化合物を次のようにして合成した。構造（９ｂ）の粗製酸（
３０ｍｇ，０．０７４ｍｍｏｌ）、ＨＡｒｇ（ＰＭＣ）ｐＮＡ（４１ｍｇ，０．
０７４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１５ｍｇ，０．０９８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（
１ｍｌ）に溶解し、次いで、ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍｌ，０
．１５ｍｍｏｌ）を加え、その後、ＥＤＣ（１６ｍｇ，０．０８４ｍｍｏｌ）を
加えた。得られた混合物を室温で４時間攪拌し、次いで、酢酸エチルで希釈し、
５％クエン酸水溶液、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、水およびブラインで抽出し
た。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして真空下で濃縮して、
淡黄色ガラス状物５４ｍｇを得た。生成物をカラムクロマトグラフィーで分離す
ることにより、カップリングした（すなわち保護された）生成物（構造（１０ｂ
））のジアステレオマーの混合物３３ｍｇ（５０％）を得た。ＭＳ（ＣＩ＋，Ｎ
Ｈ₃）ｍ／ｚ ５６６．６（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０３６７】 （構造（１１ｂ）の合成：）

【化１２８】

【０３６８】 構造（１１ｂ）のβシート模倣物を次のようにして合成した。ＴＦＡ（５ｍｌ
）中のＨ₂Ｏ（０．２５ｍｌ）、１，２−エタンジチオール（０．１２５ｍｌ） およびフェノール（３６０ｍｇ）の溶液を調製し、この溶液（２ｍｌ）に構造（
１０ｂ）の保護生成物（３３ｍｇ，０．０３５ｍｍｏｌ）を溶解した。得られた
溶液を室温で３時間攪拌し、次いで、減圧下で濃縮した。その濃縮物にエーテル
を加え、得られた沈殿物を遠心分離によって集めた。その沈殿物をエーテルで粉
末化し、さらに２回遠心分離し、次いで、真空デシケーター中で１４時間乾燥し
た。その粗生成物（１４ｍｇ）をＨＰＬＣクロマトグラフィーで精製することに
より、構造（１１ｂ）のβシート模倣物を得た。ＭＳ（ＣＩ＋，ＮＨ₃）ｍ／ｚ ９５４．８（Ｍ＋Ｎａ⁺）。

【０３６９】 （構造（１２ｂ）の化合物の合成：）

【化１２９】

【０３７０】 構造（１２ｂ）を次のようにして合成した。−５０℃のＴＨＦ（１ｍｌ）中で
攪拌した構造（９ｂ）の粗製酸（２４ｍｇ，０．０６２ｍｍｏｌ）とＮ−メチル
モルホリン（０．００８ｍｌ）との溶液に、クロロギ酸イソブチルを加えた。得
られた濁った混合物を１０分間攪拌し、次いで、Ｎ−メチルモルホリン０．０１
６ｍｌ（０．１４ｍｍｏｌ）を加え、続いて、ＴＨＦ（０．５ｍｌ）中のＨＡｒ
ｇ（Ｍｔｒ）ＣＨ₂Ｃｌ（５０ｍｇ，０．０６８ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。そ の混合物を２０分間、−５０℃で維持し、次いで、１時間で室温まで加温させた
。その混合物を酢酸エチルで希釈し、５％クエン酸水溶液、飽和重炭酸ナトリウ
ム水溶液およびブラインで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾
過し、真空下で濃縮して、４９ｍｇの無色ガラス状物（構造（１２））を得た。
カラムクロマトグラフィーによる分離で、より極性の低いジアステレオマー１２
ｍｇと、より極性の高いジアステレオマー１６ｍｇとを得た。

【０３７１】

【数７】

【０３７２】 （構造（１３ｂ）の合成：）

【化１３０】

【０３７３】 構造（１３ｂ）のβシート模倣物を次のようにして合成した。構造（１２ｂ）
のより極性の高いジアステレオマー（１６ｍｇ，０．０２１ｍｍｏｌ）を９５％
ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ（１ｍｌ）に溶解し、得られた溶液を室温で６時間攪拌し、次 いで、真空下で濃縮して１１ｍｇの粗製物を得た。その粗生成物をエーテルで粉
末化し、沈殿物をエーテルで２回洗浄し、次いで、高真空下で１４時間乾燥した
。¹Ｈ ＮＭＲ分析は、完全に脱保護された生成物とＭｔｒ保護基を含有する生 成物との１：１混合物を示した。その混合物を９５％ ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏに溶解し 、２日間攪拌し、生成物を上記のようにして回収した。ＨＰＬＣによる生成物の
精製で、構造（１３ｂ）の純粋な化合物５ｍｇを得た。ＭＳ（ＥＩ＋）ｍ／ｚ
４７７．９（Ｍ⁺）。

【０３７４】 （実施例２） （代表的なβシート模倣物の合成） 本実施例は、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の合成を例示する。

【０３７５】 （構造（１４）の合成：）

【０３７６】

【化１３１】

【０３７７】 ヒドロキサム酸Ｎ，Ｏ−ジメチル（構造（１４））を以下のように合成した。
周囲温度のＴＨＦ（１５０ｍｌ）中で撹拌したＢｏｃ−Ｎ^g−４−メトキシ−２ ，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル−Ｌ−アルギニン（８．２６ｇ，１４
．３８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミンヒドロクロリド（２．
７８ｇ，２８．５ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（
２．４５ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルア
ミン（７．５ｍｌ，４３ｍｍｏｌ）を添加し、次いで固体ＥＤＣ（３．０１ｇ，
１５．７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１６時間撹拌し、次いで、酢酸
エチル（２００ｍｌ）で希釈し、５％クエン酸水溶液、飽和重炭酸ナトリウム水
溶液、水およびブラインで順次抽出した。この有機溶液を無水硫酸ナトリウムで
乾燥し、そして濾過した。この濾液を真空下で濃縮して白色泡状物７．４１２ｇ
を得た。

【０３７８】

【数８】

【０３７９】 （構造（１５）の合成：）

【０３８０】

【化１３２】

【０３８１】 構造（１５）を以下のように合成した。室温のジクロロメタン（１５０ｍｌ）
中で撹拌したアルギニンアミド（７．４１２ｇ，１３．９９ｍｍｏｌ）の溶液に
、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．９ｍｌ，１７ｍｍｏｌ）を添加し
、次いでジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（３．５ｍｌ，１５．４ｍｍｏｌ
）およびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（０．１７５ｇ，１．４３ｍｍｏｌ）
を添加した。得られた溶液を１．５時間撹拌し、次いで、水に注いだ。水相を分
離し、ジクロロメタン各１００ｍｌで２回抽出した。合わせた抽出物をブライン
と共に振とうし、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濾過した。濾液を
真空下で濃縮して白色泡状物を得、それをフラッシュクロマトグラフィーで精製
して白色泡状物８．３７２ｇを得た。

【０３８２】

【数９】

【０３８３】 （構造（１６）の合成：）

【０３８４】

【化１３３】

【０３８５】 アルギナール（構造（１６））を次のようにして合成した。乾燥アルゴン雰囲
気下−７８℃のトルエン中で撹拌したアルギニンアミド（構造（１５））の溶液
に、水素化ジイソブチルアルミニウムのトルエン溶液（１．０Ｍ，７．３ｍｌ）
を１５分間かけて滴下した。得られた溶液を３０分間撹拌し、次いでさらに水素
化ジイソブチルアルミニウム（３．５ｍｌ）を添加し、撹拌を１５分間続けた。
メタノール（３ｍｌ）を滴下し、この溶液を−７８℃で１０分間撹拌し、次いで
、室温まで加温した。この混合物を酢酸エチル（１００ｍｌ）で希釈し、飽和酒
石酸カリウムナトリウム水溶液５０ｍｌと共に２．５時間激しく撹拌した。水相
を分離し、そして酢酸エチル（２×１００ｍｌ）で抽出した。この抽出物を元の
有機溶液と合わせ、ブラインと共に振とうし、次いで、無水硫酸ナトリウムで乾
燥し、そして濾過した。この濾液を真空下で濃縮して白色泡状物を得、それをフ
ラッシュクロマトグラフィーで分離することにより、上記アルデヒド１．６１７
ｇを白色泡状物として得た。

【０３８６】

【数１０】

【０３８７】 （構造（１７）の合成：）

【０３８８】

【化１３４】

【０３８９】 ヒドロキシベンゾチアゾール（構造（１７））を次のようにして合成した。乾
燥アルゴン雰囲気下−７８℃の無水ジエチルエーテル（６０ｍｌ）中で撹拌した
ベンゾチアゾール（１．５５ｍｌ，１４ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎ−ブチルリチウ
ム溶液（ヘキサン中２．５Ｍ，５．６ｍｌ，１４ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴
下した。得られた橙色溶液を４５分間撹拌し、次いで、ジエチルエーテル（５ｍ
ｌ）中のアルギナール（構造（１６））（１．６０９ｇ，２．８１９ｍｍｏｌ）
の溶液をゆっくりと添加した。この溶液を１．５時間撹拌し、次いで、飽和塩化
アンモニウム水溶液を添加し、この混合物を室温まで加温させた。この混合物を
酢酸エチル（３×１００ｍｌ）で抽出し、そして合わせた抽出物を水およびブラ
インで抽出し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濾過した。この濾液
を真空下で濃縮して黄色油状物を得、それをフラッシュクロマトグラフィー（溶
離液、３０％酢酸エチル／ヘキサン、次いで４０％酢酸エチル／ヘキサン）で精
製し、ヒドロキシベンゾチアゾール（ジアステレオマーの約２：１混合物）１．
２２ｇを白色泡状物として得た。

【０３９０】 このヒドロキシベンゾチアゾールの混合物（１．００３ｇ，１．４１４ｍｍｏ
ｌ）を室温のＣＨ₂Ｃｌ₂（１２ｍｌ）中で撹拌し、そしてトリフルオロ酢酸（３
ｍｌ）を添加した。得られた溶液を１．５時間撹拌し、次いで、減圧下で濃縮し
て、ベンゾチアゾリルアルギノールトリフルオロ酢酸塩１．２２ｇを黄色泡状物
として得た。

【０３９１】 ＭＳ（ＥＩ＋）：ｍ／ｚ ５０６．２（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０３９２】 （構造（１８ｂ）の合成：）

【０３９３】

【化１３５】

【０３９４】 二環式化合物（構造（１８ｂ））を以下のように合成した。実施例１で得た構
造（９ｂ）の二環式酸（１５１ｍｇ，０．３８７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ水和
物（７１ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍｌ）に溶解し、そして、ジイ
ソプロピルエチルアミン（０．３４ｍｌ，１．９ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＥ
ＤＣ（８９ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）を添加した。１０分間撹拌した後、ＴＨＦ
（１ｍｌ）中のベンゾチアゾリルアルギノールトリフルオロ酢酸塩（構造（１７
））（２７３ｍｇ，０．３７２ｍｍｏｌ）の溶液を、ＴＨＦ（０．５ｍｌ）すす
ぎ液と共に添加した。この混合物を室温で１５時間撹拌し、次いで酢酸エチルで
希釈し、５％クエン酸水溶液、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、水およびブライン
で順次抽出した。この有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして
真空下で濃縮して、２９７ｍｇの黄色ガラス状物とした。¹Ｈ ＮＭＲ分析は、 構造（１８ｂ）を含む４つのジアステレオ異性アミドの混合物を示した。

【０３９５】 ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ ８７７（Ｍ⁺）。

【０３９６】 （構造（１９ｂ）の合成：）

【化１３６】

【０３９７】 構造（１９ｂ）を次のようにして合成した。粗ヒドロキシベンゾチアゾール（
２４７ｍｇ，０．２８２ｍｍｏｌ）をＣＨ₂Ｃｌ₂（５ｍｌ）に溶解し、Ｄｅｓｓ
−Ｍａｒｔｉｎ ペルヨージナン（ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）（２４１ｍｇ，０
．５８８ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で６時間撹拌し、次いで酢酸
エチルで希釈し、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液と共に１０分間激しく撹拌し
た。有機溶液を分離し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、水およびブラインで抽出
し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濾過した。この濾液を真空下で
濃縮して黄色ガラス状物２５２ｍｇを得た。¹Ｈ ＮＭＲ分析は、構造（１９ｂ ）を含む２つのジアステレオ異性ケトベンゾチアゾールの混合物を示した。

【０３９８】 （構造（２０ｂ）の合成：）

【化１３７】

【０３９９】 ケトベンゾチアゾール（構造（２０））を以下のように合成した。ケトベンゾ
チアゾール（１９）（４１ｍｇ，０．０４７ｍｍｏｌ）を９５％トリフルオロ酢
酸水溶液（０．９５ｍｌ）に溶解し、チオアニソール（０．０５ｍｌ）を添加し
た。得られた暗色溶液を室温で３０時間撹拌し、次いで、真空下で濃縮して暗褐
色ゴム状物にした。このゴム状物をジエチルエーテルで粉末化し、遠心分離した
。この溶液を除去し、残った固体をさらに２回、上記のように粉末化し、そして
回収した。この黄色固体を真空デシケーターで２時間乾燥し、次いで、ＨＰＬＣ
（Ｖｙｄａｃ逆相Ｃ−４カラム（２２×２５０ｍｍ ＩＤ））で精製した。移動
相：Ａ＝水中、０．０５％ ＴＦＡ；Ｂ＝アセトニトリル中、０．０５％ ＴＦ
Ａ。流速は１０．０ｍＬ／分とした。使用した勾配は２５分間で８％ Ｂから２
２％ Ｂまでであり、その後、２２％の無勾配溶離とした。目的のピーク（構造
（２０ｂ））は４２分に溶出し、脱保護された生成物（構造（２０ｂ））２．５
ｍｇが得られた。

【０４００】 ＭＳ（ＥＳ＋）：５６３．５（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０４０１】 （実施例３） （代表的なβシート模倣物のタンパク質加水分解基質としての活性） この実施例では、本発明の代表的なβシート模倣物がトロンビンおよび第ＶＩ
Ｉ因子の基質として選択的に役立つ能力を例示する。上記構造（１１ｂ）のβシ
ート模倣物を、実施例１に開示した手順に従って合成し、さらに修飾することな
くこの実験で使用した。

【０４０２】 この実験のトロンビンアッセイおよび第ＶＩＩ因子アッセイは共に、Ｈｉｔａ
ｃｈｉ ＵＶ／Ｖｉｓ分光光度計（モデルＵ−３０００）を使用して３７℃で行
なった。構造（１１ｂ）を脱イオン水に溶解した。濃度は３４２ｎｍでの吸光度
から決定した。８２７０リットル／ｍｏｌ／ｃｍの吸光係数を用いた。反応緩衝
液に関して、構造（１１ｂ）の加水分解速度は、９９２０リットル／ｍｏｌ／ｃ
ｍというｐ−ニトロアニリンの吸光係数を用い、４０５ｎｍにおける吸光度の変
化から決定した。初速度は反応進行曲線の最初の直線部分から計算した。速度論
的パラメーターは、ＧｒａＦｉｔ（バージョン３．０， Ｅｒｉｔｈａｃｕｓ
Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ）を用いて、実験データに対する簡単なミカ
エリス−メンテンの式の非加重非線形最小二乗フィッティングによって決定した
。

【０４０３】 トロンビンアッセイについては、ｐＨ８．４トリス緩衝液（トリス，０．０５
Ｍ；ＮａＣｌ，０．１５Ｍ）中で実験を行なった。６．４ ＮＩＨ単位のウシト
ロンビン（Ｓｉｇｍａ製）を１０ｍｌのアッセイ緩衝液に溶解して１０ｎＭトロ
ンビン溶液を得た。ＵＶキュベットに１３０〜１４８μｌの緩衝液および１００
μｌのトロンビン溶液を添加し、３７℃で２分間プレインキュベートし、そして
最後に２〜２０マイクロリットル（最終容積を２５０μｌにする量）の０．２４
ｍＭ構造（１１ｂ）溶液を添加して反応を開始した。この反応の最初の二分間を
初速度測定のために記録した。８つの構造（１１ｂ）濃度点を集めて速度論的パ
ラメーターを得た。ｋ_catとＫ_Mは、それぞれ５０ｓ^-1および３μＭと計算された
。ｋ_cat／Ｋ_Mは１．６７×１０⁷Ｍ^-1ｓ^-1であることが分かった。

【０４０４】 第ＶＩＩ因子アッセイには、ｐＨ８．０トリス緩衝液（０．０５Ｍ トリス，
５ｍＭ ＣａＣｌ₂，０．１５Ｍ ＮａＣｌ，０．１％ ＴＷＥＥＮ ２０，０ ．１％ ＢＳＡ）を使用した。１０μｌの２０μＭヒト第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩ
Ｉａ）および２２μＭヒト組織因子（ＴＦ）をアッセイ緩衝液に入れて、それぞ
れ１６０ｎＭ ＦＶＩＩａおよびＴＦ溶液を作製した。４０〜４８μｌの緩衝液
、２５μｌのＦＶＩＩａおよび２５μｌ ＴＦ溶液をキュベットに添加し、３７
℃で５分間インキュベートし、次いで、２〜１０μｌの２．４ｍＭ構造（１１ｂ
）溶液をこのキュベットに添加して反応を開始した（最終容積は１００ｍｌであ
った）。最初の３分間の反応進行曲線を記録した。５つの構造（１１ｂ）濃度点
を集めた。この初速度を、ＧｒａＦｉｔを用いて、構造（１１ｂ）の濃度に対し
て線形最小二乗フィッティングした。ｋ_cat／Ｋ_Mをその傾きから計算し、１７，
５００Ｍ^-1ｓ^-1であることがわかった。

【０４０５】 この実験のトロンビンアッセイおよび第ＶＩＩ因子アッセイではどちらの場合
も、（Ｄ）ＦＰＲ−ＰＮＡをコントロールとして実施した。このコントロールと
比較した構造（１１ｂ）の活性は、トロンビンおよび第ＶＩＩ因子について、そ
れぞれ０．７６および１．３８であった（第ＶＩＩ因子：Ｋ_cat／Ｋ_M＝１．２７
×１０⁴Ｍ^-1ｓ^-1；トロンビン：Ｋ_cat／Ｋ_M＝２．２０×１０⁷Ｍ^-1ｓ^-1）。

【０４０６】 （実施例４） （代表的なβシート模倣物のプロテアーゼインヒビターとしての活性） この実施例は、トロンビン、第ＶＩＩ因子、第Ｘ因子、ウロキナーゼ、組織プ
ラスミノーゲンアクチベーター（ｔ−ＰＡ）、プロテインＣ、プラスミンおよび
トリプシンのプロテアーゼインヒビターとして機能する、本発明の代表的なβシ
ート模倣物の能力を例示する。上記構造（１３ｂ）のβシート模倣物を、実施例
１に開示した手順に従って合成し、この実験で使用した。

【０４０７】 この実験の阻害アッセイは全て、Ｂｉｏ−Ｒａｄマイクロプレートリーダー（
モデル３５５０）を用いて、９６ウェルマイクロプレート中、室温で行なった。
０．２９ｍｇの構造（１３ｂ）を２００ｍｌの０．０２Ｎ塩酸の脱イオン水溶液
に溶解した。この溶液（２．０５ｍＭ）を、全ての阻害アッセイ用のストック溶
液とした。発色基質の加水分解を４０５ｎｍでモニターした。典型的には３０秒
〜２分間隔で９０回プレートを読み取ることにより、反応進行曲線を記録した。
ＧｒａＦｉｔにおける、一次反応に対する非加重非線形最小二乗フィッティング
により、初速度を決定した。次いで、決定した初速度を、ＧｒａＦｉｔを用いて
構造（１３ｂ）の濃度に対して非線形最小二乗フィッティングすることによりＩ
Ｃ₅₀を得た。典型的には、ＩＣ₅₀を決定するために８つの構造（１３ｂ）濃度点
を使用した。

【０４０８】 トロンビンアッセイについては、基質として、Ｎ−ｐ−トシル−Ｇｌｙ−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ−ｐＮＡ（Ｓｉｇｍａ製）を、１％ＤＭＳＯ（ｖ／ｖ）、ｐＨ８．４
トリス緩衝液中、０．５ｍＭ濃度で使用した。構造（１３ｂ）ストック溶液から
２段階の希釈を行なった。先ず、０．０２Ｎ塩酸塩溶液中に１：２０００希釈、
次いで、ｐＨ８．４トリス緩衝液中に１：１００希釈。この構造（１３ｂ）の最
終希釈液を第１点（１０ｎＭ）とした。この第１点から、希釈率２で、７つの連
続希釈液を作成した。各反応ウェルに１００μｌの１０ｎＭトロンビン溶液およ
び５０μｌの構造（１３ｂ）溶液を添加した。酵素およびインヒビターの混合物
を２０分間インキュベートし、次いで、１００μｌの０．５ｍＭ基質溶液を添加
して反応を開始させた。トロンビンに対する構造（１３ｂ）のＩＣ₅₀は１．２±
０．２ｎＭであることがわかった。

【０４０９】 第ＶＩＩ因子アッセイでは、基質として、Ｓ−２２８８（Ｐｈａｒｍａｃｉａ
製）Ｄ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐＮＡを脱イオン水中２０μＭで使用した。
構造（１３ｂ）のストックから、ｐＨ８．０トリス緩衝液中に１：１００希釈液
を作成した。この希釈液をこのインヒビターの第１点（２０μＭ）とした。この
濃度点から、希釈率２で、さらに６つの連続希釈液を作成した。５０μｌの１６
ｎＭ ＦＶＩＩａおよびＴＦ複合体溶液および４０μｌのインヒビター溶液を各
ウェルに添加し、この混合物を２０分間インキュベートした後、１０μｌの２０
ｍＭ Ｓ−２２８８を添加した。第ＶＩＩ因子に対する構造（１３ｂ）のＩＣ₅₀ は１４０±３ｎＭであることがわかった。

【０４１０】 第Ｘ因子アッセイにおいて、緩衝液および基質は、トロンビンアッセイに使用
したものと同じである。ｐＨ８．４トリス緩衝液中に１：１００希釈液を作って
、これを第１点とした。希釈率２で、７つの希釈液を作成した。アッセイプロト
コルは、トロンビンの代わりにｐＨ８．４トリス緩衝液中の２５ｎＭウシの第Ｘ
ａ因子（Ｓｉｇｍａ製）を使用した点以外は、トロンビンの場合と同じである。
第Ｘ因子に対する構造（１３ｂ）のＩＣ₅₀は３８５±１７ｎＭであることがわか
った。

【０４１１】 ウロキナーゼアッセイにおいて、緩衝液は、脱イオン水中のｐＨ８．８ ０．
０５Ｍトリスおよび０．０５Ｍ ＮａＣｌであった。水中０．５ｍＭのＳ−２４
４４（Ｓｉｇｍａ製）、ｐｙｒｏＧｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐＮＡを基質として
使用した。第ＶＩＩ因子および第Ｘ因子の場合と同じ希釈手順を用いた。アッセ
イプロトコルは、１８．５ｎＭのヒトウロキナーゼ（Ｓｉｇｍａ製）を使用した
点以外は、トロンビンの場合と同じである。ＩＣ₅₀は９２７±１３８ｎＭである
ことが分かった。

【０４１２】 組織プラスミノーゲンアクチベーター（ｔ−ＰＡ）：緩衝液、基質および構造
（１３ｂ）の希釈スキームは、第ＶＩＩ因子アッセイに利用したものと同じであ
った。

【０４１３】 活性化プロテインＣ（ａＰＣ）：緩衝液はトロンビンアッセイで使用したもの
と同じであった。アッセイ緩衝液中の１．２５ｍＭ Ｓ−２３６６を基質として
利用した。構造（１３ｂ）の希釈はウロキナーゼアッセイの場合と同じであった
。

【０４１４】 プラスミン：緩衝液（トロンビンアッセイを参照のこと）；アッセイ緩衝液中
１．２５ｍＭのＳ−２５５１（Ｐｈａｒｍａｃｉａ製）、Ｄ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−
Ｌｙｓ−ｐＮＡを基質として使用した。構造（１３ｂ）の希釈についてはウロキ
ナーゼアッセイを参照のこと。

【０４１５】 トリプシンアッセイでは、ｐＨ７．８トリス（０．１０Ｍ トリスおよび０．
０２Ｍ ＣａＣｌ₂）を緩衝液として利用した。基質として、ＢＡＰＮＡ（Ｓｉ ｇｍａ製）を、１％ＤＭＳＯ（ｖ／ｖ）脱イオン水溶液中、１ｍｇ／ｍｌで使用
した。第ＶＩＩ因子アッセイの場合と同じ構造（１３ｂ）の希釈液を作成した。
４０μｌの５０μｇ／ｍｌウシトリプシン（Ｓｉｇｍａ製）および２０μｌの構
造（１３ｂ）溶液を反応ウェルに添加し、この混合物を５分間インキュベートし
た後、４０μｌの１ｍｇ／ｍｌ ＢＡＰＮＡを添加して反応を開始させた。トリ
プシンに対する構造（１３ｂ）のＩＣ₅₀は１６０±８ｎＭであることがわかった
。

【０４１６】 前記のアッセイでは、（Ｄ）ＦＰＲ−ＣＨ₂Ｃｌ（「ＰＰＡＣＫ」）をコント ロールとして実施した。このコントロールと比較して構造（１３ｂ）の活性は高
かった（表４参照）。

【０４１７】

【表４】

【０４１８】 プロトロンビン時間（ＰＴ）については、１００μｌのコントロール血漿（Ｓ
ｉｇｍａ製）を１〜５μｌの緩衝液（０．０５Ｍトリス，０．１５Ｍ ＮａＣｌ
，ｐＨ＝８．４）または試験化合物（すなわちＰＰＡＣＫまたは構造（１３ｂ）
）と共に緩衝液中でインキュベート（３７℃で３０分間）することにより、これ
を決定した。次いで、予め温めておいた（３７℃で約１０分間）カルシウム入り
トロンボプラスチン（Ｓｉｇｍａ製）２００μｌを、前記血漿試料にすばやく添
加した。血塊が形成するのに要する時間をストップウォッチを用いて手動で記録
し（表５参照）、ＰＰＡＣＫに匹敵することがわかった。

【０４１９】

【表５】

【０４２０】 （実施例５） （代表的なβシート模倣物のプロテアーゼインヒビターとしての活性） この実施例では、トロンビン、第ＶＩＩ因子、第Ｘ因子、ウロキナーゼ、組織
プラスミノーゲンアクチベーター、活性化プロテインＣ、プラスミン、トリプタ
ーゼおよびトリプシンのインヒビターとして機能する、本発明のさらなる代表的
なβシート模倣物の能力を例示する。前記構造（２０ｂ）のβシート模倣物を実
施例２に開示した手順に従って合成し、この実験に使用した。

【０４２１】 Ｂｉｏ−Ｒａｄマイクロプレートリーダー（モデル３５５０）を用いて、全て
の阻害アッセイを９６ウェルマイクロプレート中、室温で行なった。構造（２０
ｂ）の１ｍＭ水溶液を、全ての阻害アッセイ用のストック溶液とした。発色基質
の加水分解を４０５ｎｍでモニターした。代表的には３０秒〜２分間隔で６０回
プレートを読み取ることにより、反応進行曲線を記録した。ＧｒａＦｉｔ（Ｅｒ
ｉｔｈａｃｕｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ， Ｌｏｎｄｏｎ， Ｅｎ
ｇｌａｎｄ）における、一次反応に対する非加重非線形最小二乗フィッティング
により、初速度を決定した。次いで、決定した初速度を、ＧｒａＦｉｔを用いて
構造（２０ｂ）の濃度に対して非線形最小二乗フィッティングすることにより、
Ｋｉを得た。これらアッセイの一般的形式は次の通りである：１００ｍｌの基質
溶液および１００ｍｌの構造（２０ｂ）溶液をマイクロプレートウェルに添加し
、次いで５０ｍｌの酵素溶液を添加して反応を開始させた。通常、Ｋｉの決定に
は、８つの構造（２０ｂ）濃度点を使用した。９種類のセリンプロテアーゼに対
する構造（２０ｂ）のＫｉ値を表６に示す。

【０４２２】 トロンビン：基質として、Ｎ−ｐ−トシル−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐＮＡ
（Ｓｉｇｍａ製）を１％ＤＭＳＯ（ｖ／ｖ）のｐＨ８．０トリス緩衝液（トリス
，５０ｍＭ、Ｔｗｅｅｎ ２０、０．１％、ＢＳＡ，０．１％、ＮａＣｌ，０．
１５Ｍ、ＣａＣｌ₂，５ｍＭ）中、０．５ｍＭ濃度で使用した。構造（２０ｂ） ストック溶液から２段階の希釈を行なった。先ず水中の１：１００希釈液を作り
、次いでｐＨ８．０トリス緩衝液中の１：５０希釈液を作って、それを第１点（
２００ｎＭ）とした。その第１点から、アッセイ用に、７つの連続希釈液を作成
した。

【０４２３】 第ＶＩＩ因子：ｐＨ８．０トリス緩衝液（トロンビンアッセイを参照のこと）
中２．０５ｍＭのＳ−２２８８（Ｐｈａｒｍａｃｉａ製）、Ｄ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ
−Ａｒｇ−ｐＮＡを使用した。構造（２０ｂ）のストックから、１：１００希釈
液をトリス緩衝液中に作成した。この濃度点から、アッセイ用に、さらに７つの
連続希釈液を作成した。

【０４２４】 第Ｘ因子：緩衝液および基質はトロンビンアッセイに用いたものと同じとした
。ｐＨ８．０トリス緩衝液中に１：１００希釈液を作成し、それを第１点とした
。その第１点から、アッセイ用に、さらに７つの希釈液を作成した。

【０４２５】 ウロキナーゼ：緩衝液，５０ｍＭトリス、５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ＝８．８
。緩衝液中０．２５ｍＭのＳ−２４４４（Ｓｉｇｍａ製）、ｐｙｒｏＧｌｕ−Ｇ
ｌｙ−Ａｒｇ−ｐＮＡを基質として利用した。構造（２０ｂ）のストックから、
第１点として、緩衝液中に１：１０希釈液を作成し、その第１点からアッセイ用
に、さらに７つの希釈液を作成した。

【０４２６】 組織プラスミノーゲンアクチベーター（ｔ−ＰＡ）：緩衝液、基質および構造
（２０ｂ）の希釈スキームは、第ＶＩＩ因子アッセイに用いたものと同じとした
。

【０４２７】 活性化プロテインＣ（ａＰＣ）：緩衝液はトロンビンアッセイで用いたものと
同じとした。アッセイ緩衝液中１．２５ｍＭのＳ−２３６６を基質として利用し
た。構造（２０ｂ）の希釈液はウロキナーゼアッセイの場合と同じとした。

【０４２８】 プラスミン：緩衝液（トロンビンアッセイを参照のこと）；アッセイ緩衝液中
１．２５ｍＭのＳ−２２５１（Ｐｈａｒｍａｃｉａ製）、Ｄ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−
Ｌｙｓ−ｐＮＡを基質として利用した。構造（２０ｂ）の希釈についてはウロキ
ナーゼアッセイを参照のこと。

【０４２９】 トリプターゼ：０．１Ｍトリス、０．２Ｍ ＮａＣｌ、０．１ｍｇ／ｍｌ ヘ
パリン、ｐＨ＝８．０を緩衝液として利用した。緩衝液中の０．５ｍＭ Ｓ−２
３６６（Ｐｈａｒｍａｃｉａ製）、Ｌ−ｐｙｒｏＧｌｕ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐＮ
Ａを基質として使用した。構造（２０ｂ）の１ｍＭストックから、水中に１０ｍ
Ｍ溶液を作成し、次いでこの１０ｍＭ溶液から緩衝液中に１ｍＭ溶液を作成し、
それを第１濃度点とした。この点から、アッセイ用に、さらに７つの希釈液を作
成した。

【０４３０】 トリプシン：緩衝液、基質および構造（２０ｂ）の希釈スキームは、トロンビ
ンに使用したものと同じであった。

【０４３１】

【表６】

【０４３２】 前記表６に示すデータによって例示されるように、構造（２０ｂ）は、繊維素
溶解酵素に対して良好な特異性を持つ良好なトロンビンインヒビターとして機能
した。

【０４３３】 （実施例６） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例では、下記の構造（２１）を有する本発明の代表的なβシート模倣
物の合成を例示する。

【０４３４】

【化１３８】

【０４３５】 構造（２１）を次のように合成した。ＣＨ₂Ｃｌ₂ ０．４３ｍＬ中のＮ^a−ＦＭ
ＯＣ−Ｎ^e−Ｃｂｚ−ａ−エタナール−Ｌｙｓ−Ｏｍｅ［Ｐｈｅ−ＯＭｅから構 造（５）を調製するために使用した方法と同じ方法によって、Ｎ^e−Ｃｂｚ−Ｌ ｙｓ−ＯＭｅから合成したもの］４８ｍｇ（０．８５９ｍｍｏｌ）、Ｃｙｓ−Ｏ
Ｅｔ．ＨＣｌ １５．９ｍｇ（０．０８５９ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ １３．２
μＬ（０．０９４５ｍｍｏｌ）の溶液をＡｒ下に室温で２時間撹拌した。ビス（
ビス（トリメチルシリル）アミノ）スズ（ＩＩ）（３９．８μＬ）を添加し、こ
の反応系を一晩撹拌した。この反応溶液を１０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、各６
ｍＬの１０％クエン酸、水およびブラインで洗浄した。この有機層をＮａ₂ＳＯ₄ で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。得られた残渣を、４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキ
サンを用いるシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、真
空乾燥後に、無色の油状物１２．９ｍｇ（２３％）をジアステレオマーの混合物
（¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）による）として得た。ＭＳ ＥＳ（＋）ｍ／ｚ ６
５８．２（ＭＨ⁺，３０），６７５．３（Ｍ＋Ｎａ⁺，１００），６９６．１（Ｍ
＋Ｋ⁺，４５）。

【０４３６】 （実施例７） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例では、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の合成を例示する
。

【０４３７】 （構造（２２）の合成：）

【０４３８】

【化１３９】

【０４３９】 構造（２２）を次のように合成した。ジクロロメタン（１００ｍｌ）中のＤＭ
ＡＰ（２７０ｍｇ）およびメタノール（３ｍｌ）と共に撹拌したＣｂｚ−Ｇｌｕ
（ＯＢｎ）−ＯＨ（５ｇ，１３．５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＥＤＣＩ（３ｇ
）を添加した。０℃で３時間撹拌した後、この溶液を室温（ｒｔ）で一夜撹拌し
た。濃縮後、この残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）および１Ｎ ＨＣｌ（１００
ｍｌ）に取り出した。水相を分離し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）で抽出した。合
わせた有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ₃（１００ｍｌ）、ブライン（１００ｍｌ） で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、シリカゲルの短いパッドに通し、濃縮して、 ４．９５ｇの油状物（９５％）を得た。この生成物は、さらに精製しなくても次
の反応に使用できるほど純粋だった。

【０４４０】

【数１１】

【０４４１】 （構造（２３）の合成：）

【０４４２】

【化１４０】

【０４４３】 構造（２３）を次のように合成した。１，４−ジオキサン（４０ｍｌ）および
Ｈ₂Ｏ（２０ｍｌ）中でトリエチルアミン（８．４ｍｌ，６０ｍｍｏｌ）と共に 撹拌したＬ−Ｇｌｕ−ＯＨ（４．４１ｇ，３０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｂｏｃ₂Ｏ （７ｇ，３２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。１．５時間撹拌した後、この溶液を
６Ｎ ＨＣｌ（ｐＨ２）で酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍｌ）で抽出した
。合わせた有機抽出物をＨ₂Ｏ（１００ｍｌ）、ブライン（５０ｍｌ）で洗浄し 、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、そして濃縮して、油状物（９．５ｇ）を得た。さらに
精製することなく、この油状物を次の反応に使用した。

【０４４４】 １，２−ジクロロエタン（２００ｍｌ）中の前記油状物（９．５ｇ）とパラホ
ルムアルデヒド（５ｇ）およびｐ−ＴｓＯＨ・Ｈ₂Ｏ（４００ｍｇ）との混合物 を、モレキュラーシーブ４Ａを満たしたＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ冷却器を用いて６
時間加熱還流した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）および飽和ＮａＨＣＯ₃（５０ｍ ｌ）を添加した後、この溶液を飽和ＮａＨＣＯ₃（３×５０ｍｌ）で抽出した。 合わせた水性抽出物を６Ｎ ＨＣｌ（ｐＨ２）で酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×１
００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１００ｍｌ）で洗浄し
、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、そして濃縮して油状物を得た。この粗製油状物をフラ
ッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝８０：２０から７０：３０
から６０：４０）で精製することにより、油状物（４．０４ｇ，５２％）を得た
。この油状物は静置するとゆっくりと固化した。

【０４４５】

【数１２】

【０４４６】 （構造（２４）の合成：）

【０４４７】

【化１４１】

【０４４８】 構造（２４）を次のように合成した。ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の１，１，１，３
，３，３−ヘキサメチルジシラザン（２．１ｍｌ，１０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に
０℃でｎ−ＢｕＬｉ（４ｍｌの２．５Ｍヘキサン溶液，１０ｍｍｏｌ）を添加し
た。得られた溶液を同じ温度で３０分間撹拌した。−７８℃に冷却した後、この
撹拌溶液にＴＨＦ（１０ｍｌ）中のカルボン酸（２３）（１．０２ｇ，３．９４
ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、続いてこの添加注射器をＴＨＦ ５ｍｌでリンスし
た。得られた溶液を−７８℃で１時間撹拌し、ＰｈＣＨ₂Ｂｒ（０．４６ｍｌ， ３．９ｍｍｏｌ）を添加した。−３０℃で３時間撹拌した後、この溶液に１Ｎ
ＨＣｌ（５０ｍｌ）を添加し、得られた溶液をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）で抽出
した。この有機抽出物をブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し
、そして濃縮して油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー
（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝８０：２０から６０：４０から５０：５０）で精製す
ることにより、泡状の固体（１．３５ｇ，９８％）を得た。

【０４４９】

【数１３】

【０４５０】 （構造（２５）の合成：）

【化１４２】

【０４５１】 構造（２５）の合成を次のように行なった。乾燥ＴＨＦ（５ｍｌ）中のカルボ
ン酸（２４）（１．０５ｇ，３．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、室温で１，１’−
カルボニルジイミダゾール（５００ｍｇ，３．１ｍｍｏｌ）を添加した。得られ
た溶液を室温で３０分間撹拌した。このアシルイミダゾールの溶液を精製するこ
となく次の反応に使用した。

【０４５２】 一方、ＴＨＦ（５ｍｌ）中の１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザ
ン（１．６ｍｌ，７．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にｎ−ＢｕＬｉ（３ｍｌの２．５
Ｍヘキサン溶液，７．５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。同じ温度で３０分間撹拌
した後、この溶液を−７８℃まで冷却した。この撹拌溶液に、ＴＨＦ（５ｍｌ）
中のＣｂｚ−Ｇｌｕ（ＯＢｎ）−ＯＭｅ（１．１６ｇ，３ｍｍｏｌ）の溶液を添
加し、続いてこの添加注射器をＴＨＦ ２ｍｌでリンスした。得られた溶液を同
じ温度で１５分間撹拌した。この撹拌溶液に、ＴＨＦ ３ｍｌ中の前記アシルイ
ミダゾールを添加した。−７８℃で３０分間撹拌した後、この溶液に飽和ＮＨ₄ Ｃｌ（５０ｍｌ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（２×７５ｍｌ）で抽出した。合わせた
有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ₃（５０ｍｌ）、ブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、 乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、シリカゲルの短いパッドに通し、濃縮して油状物を得た
。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝９０
：１０から８０：２０から７０：３０から６０：４０）で精製することにより、
油状物（１．４８ｇ，６９％）を得た：ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ７３４．４（Ｍ
＋ＮＨ₄ ⁺）。

【０４５３】 （構造（２６ａ）の合成：）

【化１４３】

【０４５４】 構造（２６ａ）を次のように合成した。ＥｔＯＨ／ＡｃＯＨ（１０／１ｍｌ）
中の前記出発ケトエステル（２５）（５３０ｍｇ，０．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液
を、２０ａｔｍのＨ₂圧下、１０％Ｐｄ／Ｃ（約１００ｍｇ）で２日間処理した 。セライトの短いパッドを通して濾過した後、この濾液を濃縮して、ＥｔＯＡｃ
（５０ｍｌ）に溶解した。この溶液を１Ｎ ＨＣｌ（３０ｍｌ）、飽和ＮａＨＣ
Ｏ₃（３０ｍｌ）、ブライン（３０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、そ して濃縮して油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘ
キサン：ＥｔＯＡｃ＝８０：２０から６０：４０から５０：５０から２０：８０
から０：１００）で精製することにより、泡状の固体（９５ｍｇ，３４％）を得
た。

【０４５５】

【数１４】

【０４５６】 立体化学は２Ｄ ＮＭＲで割り当てた。

【０４５７】 （構造（２７ａ）の合成：）

【化１４４】

【０４５８】 構造（２７ａ）を次のように合成した。室温のＴＨＦ １ｍｌ中で撹拌した二
環式エステル（２６ａ）２８ｍｇ（０．０７０ｍｍｏｌ）の溶液に、１．０Ｍ水
酸化リチウム水溶液０．１４ｍｌを添加した。この混合物を２０時間激しく撹拌
し、次いで５％クエン酸水溶液（１ｍｌ）でクエンチした。この混合物を酢酸エ
チル（３×２５ｍｌ）で抽出し、次いで合わせた抽出物を水とブラインで洗浄し
、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過と、真空下にこの濾液を濃縮することに
より、白色泡状物２６ｍｇを得て、それをさらに精製することなく使用した。

【０４５９】 （構造（２８ａ）の合成：）

【０４６０】

【化１４５】

【０４６１】 構造（２８ａ）を以下のように合成した。二環式酸（２７ａ）（２６ｍｇ，０
．０６７ｍｍｏｌ）、ベンゾチアゾリルアルギノールトリフルオロ酢酸塩（構造
（１７）６１ｍｇ，０．０８３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（２１ｍｇ，０．１１ｍｍｏ
ｌ）およびＨＯＢｔ水和物（１６ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍｌ）
に溶解し、そして、ジイソプロピルエチルアミン（０．３４ｍｌ，１．９ｍｍｏ
ｌ）を添加した。この混合物を室温で１５時間撹拌し、次いで酢酸エチルで希釈
し、そして５％クエン酸水溶液、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、水およびブライ
ンで順次抽出した。この有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そし
て真空下で濃縮して、６０ｍｇの黄色ガラス状物とした。¹Ｈ ＮＭＲ分析によ り、４つのジアステレオマーアミドの混合物が示された。ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／
ｚ ８９８（Ｍ＋Ｎａ⁺）。

【０４６２】 （構造（２９ａ）の合成：）

【化１４６】

【０４６３】 構造（２９ａ）のβシート模倣物を以下のように合成した。粗ヒドロキシベン
ゾチアゾール（２８ａ）（６０ｍｇ，０．０６８ｍｍｏｌ）をＣＨ₂Ｃｌ₂（２ｍ
ｌ）に溶解し、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（５８ｍｇ，０．１４ｍ
ｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で６時間撹拌し、次いで酢酸エチルで希
釈し、そして１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液と共に１０分間激しく撹拌した。
この有機溶液を分離し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、水およびブラインで抽出
し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濾過した。この濾液を真空下で
濃縮することによって、４２ｍｇの黄色ガラス状物を得た。¹Ｈ ＮＭＲ分析に より、２つのジアステレオマーのケトベンゾチアゾールの混合物が示された。

【０４６４】 このケトベンゾチアゾール（４２ｍｇ，０．０４８ｍｍｏｌ）を９５％トリフ
ルオロ酢酸水溶液（０．９５ｍｌ）に溶解し、そしてチオアニソール（０．０５
ｍｌ）を添加した。得られた濃色溶液を室温で１８時間撹拌し、次いで真空下で
濃縮して濃褐色ゴム状物とした。このゴム状物をジエチルエーテルで粉末化し、
そして遠心分離した。溶液を除去し、残った固体をさらに２回、上記のように粉
末化し、そして回収した。黄色固体を真空デシケーター中で２時間乾燥し、次い
でＨＰＬＣにより精製して、１．４ｍｇの脱保護された生成物を得た。ＭＳ（Ｅ
Ｓ＋）：５６２．４（Ｍ＋Ｈ⁺）。ＨＰＬＣ：（ｔ_R＝２１．１７分）。

【０４６５】 （構造（２６ｂ）の合成：）

【化１４７】

【０４６６】 構造（２６ｂ）を以下のように合成した。ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ（１０／１ｍｌ
）中の上記出発ケトエステル（２５）（６１５ｍｇ，０．８６ｍｍｏｌ）の撹拌
溶液を、３日間２０ａｔｍのＨ₂圧下で、１０％Ｐｄ／Ｃ（約６０ｍｇ）で処理 した。Ｃｅｌｉｔｅの短いパッドを通して濾過した後、この濾液を濃縮して油状
物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡ
ｃ＝８０：２０から６０：４０から５０：５０から０：１００）により精製して
、より極性の高い画分（５０ｍｇ）を回収した。Ｒｆ ０．１２（ヘキサン：Ｅ
ｔＯＡｃ＝６０：４０）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ４３３（Ｍ＋Ｈ＋）。

【０４６７】 上記油状物を、２日間還流温度で１，２−ジクロロエタン（１０ ｍｌ）中ｐ
−ＴｓＯＨ・Ｈ₂Ｏ（５ｍｇ）で処理した。濃縮後、油状生成物を分取ＴＬＣ（ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝８０：２０から６０：４０）により精製して、油状物（
１０ｍｇ）を得た。ＴＬＣ Ｒｆ ０．３６（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝６０：４
０）

【０４６８】

【数１５】

【０４６９】 立体化学は２Ｄ ＮＭＲにより割り当てた。

【０４７０】 （構造（２８ｂ）の合成：）

【化１４８】

【０４７１】 構造（２８ｂ）を以下のように合成した。室温でＴＨＦ １ｍｌ中で撹拌した
二環式エステル（２６ｂ）１２ｍｇ（０．０３０ｍｍｏｌ）の溶液に、０．０６
０ｍｌの１．０Ｍ水酸化リチウム水溶液を添加した。この混合物を２５時間激し
く撹拌し、次いで５％クエン酸水溶液（１ｍｌ）でクエンチした。この混合物を
酢酸エチル（３×２５ｍｌ）で抽出し、次いで合わせた抽出物を水およびブライ
ンで洗浄し、そして無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濾液の真空下で
の濃縮により、１９ｍｇの白色泡状物を得た。

【０４７２】 この泡状物、ベンゾチアゾリルアルギノールトリフルオロ酢酸塩（３０ｍｇ，
０．０４１ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１０ｍｇ，０．０５２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢ
ｔ水和物（９ｍｇ，０．０５９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍｌ）中に溶解し、そし
て、ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍｌ，０．１５ｍｍｏｌ）を添加
した。この混合物を室温で３０時間撹拌し、次いで酢酸エチルで希釈し、そして
５％クエン酸水溶液、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、水およびブラインで順次抽
出した。この有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空下で濃縮し
て２８ｍｇの黄色ガラス状物とした。¹Ｈ ＮＭＲ分析により、４つのジアステ レオマーアミドの混合物が示された。ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ ８９８（Ｍ＋Ｎ
ａ⁺）。

【０４７３】 （構造（２９ｂ）の合成：）

【化１４９】

【０４７４】 構造（２９ｂ）を以下のように合成した。粗ヒドロキシベンゾチアゾール（２
８ｂ）（２８ｍｇ）をＣＨ₂Ｃｌ₂（２ｍｌ）に溶解し、そしてＤｅｓｓ−Ｍａｒ
ｔｉｎペルヨージナン（２９ｍｇ，０．０７１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合
物を室温で１８時間撹拌し、次いで酢酸エチルで希釈し、そして１０％チオ硫酸
ナトリウム水溶液と共に１０分間激しく撹拌した。この有機溶液を分離し、飽和
重炭酸ナトリウム水溶液、水およびブラインで抽出し、次いで無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥し、そして濾過した。この濾液の真空下での濃縮により、３２ｍｇの黄
色ガラス状物を得た。¹Ｈ ＮＭＲ分析により２つのジアステレオマーケトベン ゾチアゾールの混合物が示された。

【０４７５】 このケトベンゾチアゾール（３２ｍｇ）を９５％トリフルオロ酢酸水溶液（０
．９５ｍｌ）に溶解し、そしてチオアニソール（０．０５ｍｌ）を添加した。得
られた濃色溶液を室温で２０時間撹拌し、次いで真空下で濃縮して濃褐色ゴム状
物とした。このゴム状物をジエチルエーテルで粉末化し、そして遠心分離した。
溶液を除去し、残った固体をさらに２回、上記のように粉末化し、そして回収し
た。黄色固体を真空デシケーター中で２時間乾燥し、次いでＨＰＬＣにより精製
して、１．３ｍｇの脱保護された生成物を得た。ＭＳ（ＦＢ＋）：５６２．３６
（Ｍ＋Ｈ⁺）；ＨＰＬＣ：ｔ_R＝２１．５１分（勾配 ４０分間にわたって０から
９０％ ＣＨ₃ＣＮ中の０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ中の０．１％ＴＦＡ）。

【０４７６】 （実施例８） （代表的なβシート模倣物のプロテアーゼインヒビターとしての活性） この実施例は、トロンビン、第ＶＩＩ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子およびトリ
プシンのインヒビターとして機能する、本発明のさらなる代表的なβシート模倣
物の能力を例示する。上記構造（２９ａ）および（２９ｂ）のβシート模倣物を
実施例７に開示した手順に従って合成し、そしてこの実験で使用した。

【０４７７】 プロテイナーゼインヒビターアッセイは、第ＸＩ因子について以下に記載した
以外は、実施例５に記載したように行なった。結果を表７に示す。

【０４７８】 第ＸＩ因子。このアッセイにおいては、トロンビンアッセイと同じ緩衝液を利
用した。１ｍＭ Ｓ−２３６６（Ｐｈａｒｍａｃｉａ製）、Ｌ−ｐｙｒｏＧｌｕ
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐＮＡ水溶液を、基質として用いた。構造（２９ａ）または
（２９ｂ）の１ｍＭストック水溶液から、緩衝液中の１：１０希釈液を作製した
。この１００μＭ溶液から、アッセイ用緩衝液中の７つの連続１：５希釈液を作
製した。

【０４７９】

【表７】

【０４８０】 （実施例９） （代表的なβシート模倣物のプロテアーゼインヒビターとしての活性） この実施例は、トロンビン、第ＶＩＩ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子、トリプタ
ーゼ、ａＰＣ、プラスミン、ｔＰＡ、ウロキナーゼおよびトリプシンのインヒビ
ターとして機能する、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の能力を例示す
る。上記構造（２０）および（２９ｂ）のβシート模倣物をそれぞれ実施例２お
よび７に開示した手順に従って合成し、そしてこの実験に使用した。

【０４８１】 プロテイナーゼインヒビターアッセイは、第ＸＩ因子について実施例８に記載
したように行った以外は、実施例５に記載されているように行なった。結果を表
８に示す。

【０４８２】

【表８】

【０４８３】 ＊選択性はトロンビンのＫｉに対する酵素のＫｉの比率である。

【０４８４】 （実施例１０） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例は、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の合成を例示する。

【０４８５】 （構造（３０）の合成：）

【化１５０】

【０４８６】 構造（３０）を以下のように合成した。ｎ−ブチルリチウム（７００μＬ，１
．７５ｍｍｏｌ，ヘキサン中２．５Ｍ）を、−７８℃のＴＨＦ（１ｍｌ）中のト
リス（メチルチオ）メタン（２５６μＬ，１．９５ｍｍｏｌ）の溶液に５分間に
わたって添加した。この混合物を４０分間撹拌し、次いで２ｍｌのＴＨＦ中のビ
ス−Ｂｏｃ−アルギニナール（実施例２の構造（１６））（１００ｍｇ，１．７
５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して５分間にわたって処理した。１．５時間撹拌した
後、反応系を飽和ＮＨ₄Ｃｌ溶液でクエンチし、そして室温まで戻した。層を分 離し、そして水層をＥｔＯＡｃで抽出し（３×）、ブラインで洗浄し（１×）、
乾燥し（Ｎａ₂ＳＯ₄）、そして濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ
ＯＡｃ：ヘキサン １：４）による精製により、９３ｍｇ（７３％）のオルトチ
オメチルエステル（構造（３０））および８ｍｇの回収アルデヒド（構造（１６
））を得た。

【０４８７】

【数１６】

【０４８８】 （構造（３１）の合成：）

【０４８９】

【化１５１】

【０４９０】 構造（３１）を以下のように合成した。２．５ｍｌの１２：１メタノール／水
中の７７ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）のオルトチオメチルエステル（構造（３０）
）、１１７ｍｇ（０．４３ｍｍｏｌ）の塩化第二水銀および３９ｍｇ（０．１８
ｍｍｏｌ）の酸化第二水銀の混合物を室温で４時間撹拌した。この混合物をセラ
イトを通して濾過し、そして残渣をＥｔＯＡｃで洗浄した（３×）。濾液を水で
希釈し、そしてＥｔＯＡｃで抽出した（３×）。有機層を７５％ＮＨ₄ＯＡｃ／ ＮＨ₄Ｃｌで２回洗浄し、次いでＮＨ₄Ｃｌで洗浄し、そして乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）
した。溶媒を真空下で除去し、そして残渣をフラッシュクロマトグラフィー（Ｅ
ｔＯＡｃ／Ｈｅｘ，１：３）により精製して、４８ｍｇ（７２％）の構造（３１
）の２つのジアステレオマーを１：２．７の比率で得た。

【０４９１】

【数１７】

【０４９２】 （構造（３２）の合成：）

【０４９３】

【化１５２】

【０４９４】 構造（３２）を以下のように合成した。ＴＨＦ／水（４ｍｌ，１：３）中の３
２ｍｇのメチルエステル（構造（３１））（０．０５１ｍｍｏｌ）の溶液を５ｍ
ｇ（０．１１９ｍｍｏｌ）のＬｉＯＨ・Ｈ₂Ｏで処理した。４５分間撹拌した後 、反応物を５％クエン酸で希釈し、そして酢酸エチルで抽出した（３×）。合わ
せた抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、そして濃縮して、３０ｍ
ｇ（９６％）の構造（３２）を白色固体として得た。この生成物をさらに精製す
ることなく使用した。

【０４９５】

【数１８】

【０４９６】 （構造（３３）の合成：）

【０４９７】

【化１５３】

【０４９８】 構造（３３）を以下のように合成した。ＴＨＦ（５ｍｌ）中の構造（３２）の
化合物（２９ｍｇ，０．０４７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８ｍｇ，０．０５６ｍｍ
ｏｌ）およびＥＤＣ（１１ｍｇ，０．０５６ｍｍｏｌ）の溶液に、フェネチルア
ミン（７ｍｌ，０．０５６ｍｍｏｌ）を添加し、続いてジイソプロピルエチルア
ミン（１２μＬ，０．０７１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で一
晩撹拌し、そして５％クエン酸で希釈した。有機層を分離し、そして水相をＥｔ
ＯＡｃで抽出した（３×）。合わせた抽出物をＮａＨＣＯ₃の飽和溶液、ブライ ンで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、そして濾過した。濃縮後、粗生成物をクロマ
トグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ，１：１）で２段階で精製して、２６ｍｇ（
７７％）の構造（３３）を得た。

【０４９９】

【数１９】

【０５００】 （構造（３４）の合成：）

【０５０１】

【化１５４】

【０５０２】 構造（３４）を以下のように合成した。ＴＨＦ（５ｍｌ）中のフェネチルアミ
ド（構造（３３），２５ｍｇ，０．０３５ｍｍｏｌ）の溶液に、１８ｍｇのｐ−
トルエンスルホン酸一水和物（０．０９３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合
物を室温で一晩撹拌して、ＴＬＣによるベースラインスポットを得た。この溶液
を真空下で濃縮し、そして残渣をエーテルで２回洗浄して過剰のｐＴｓＯＨを除
去して、構造（３４）を黄白色固体として得、これをさらに精製することなく使
用した。¹Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ₃）は予想された生成物と一致
したが、個々のピークの割り当てはブロードになったため困難であった。ＭＳ（
ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５２０．４（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０５０３】 構造（３４）を実施例１の構造（９ａ）と反応させ（構造（１８）の合成につ
いて実施例２において記載した手順と類似の方法で）、続いて酸化および脱保護
を行なって（それぞれ構造（１８）および（１９）の酸化および脱保護に関して
記載した方法と類似の方法で）、下記表９に示す構造（３５）を得た。

【０５０４】 （実施例１１） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例は、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の合成を例示する。

【０５０５】 （構造（３６）の合成：）

【０５０６】

【化１５５】

【０５０７】 構造（３６）を、ベンジルアミンおよび構造（３２）から出発して、化合物（
３４）と類似の方法で合成した。¹Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）は予
想された生成物と一致したが、個々のピークの割り当てはブロードになったため
困難であった。ＭＳ（ＦＡＢ＋）ｍ／ｚ ５０６．４（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０５０８】 構造（３６）を実施例１の構造（９ａ）と反応させ（構造（１８）の合成につ
いて実施例２において記載した手順と類似の方法で）、続いて酸化および脱保護
を行なって（それぞれ構造（１８）および（１９）の酸化および脱保護に関して
記載した方法と類似の方法で）、下記表９に示す構造（３７）を得た。

【０５０９】 （実施例１２） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例は、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の合成を例示する。

【０５１０】 （構造（３８）の合成：）

【０５１１】

【化１５６】

【０５１２】 構造（３８）を、ｐ−クロロフェネチルアミンおよび構造（３２）から出発し
て、構造（３４）と類似の方法で合成した。¹Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ Ｃｌ₃）は予想された生成物と一致したが、個々のピークの割り当てはブロード なため困難であった。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５５４．５（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０５１３】 構造（３８）を実施例１の構造（９ａ）と反応させ（構造（１８）の合成につ
いて実施例２において記載した手順と類似の方法で）、続いて酸化および脱保護
を行なって（それぞれ構造（１８）および（１９）の酸化および脱保護に関して
記載した方法と類似の方法で）、下記表９に示す構造（３９）を得た。

【０５１４】 （実施例１３） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例では、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の合成を例示する
。

【０５１５】 （構造（４０）の合成：）

【０５１６】

【化１５７】

【０５１７】 構造（４０）を、ｐ−メトキシフェネチルアミンおよび構造（３２）を用いて
、化合物（３４）と類似の方法で合成した。¹Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ Ｃｌ₃）は予想された生成物と一致したが、個々のピークの割り当てはブロード なため困難であった。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５５０．５（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０５１８】 構造（４０）を、実施例１の構造（９ａ）と反応させ（構造（１８）の合成に
ついて実施例２において記載した手順と類似の方法で）、続いて酸化および脱保
護を行なって（それぞれ構造（１８）および（１９）の酸化および脱保護に関し
て記載した方法と類似の方法で）、下記表９に示す構造（４１）を得た。

【０５１９】 （実施例１４） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例では、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の合成を例示する
。

【０５２０】 （構造（４２）の合成：）

【０５２１】

【化１５８】

【０５２２】 構造（４２）を次のように調製した。１０ｍｌ丸底フラスコにＣＨ₂Ｃｌ₂（１
０ｍｌ）、２，３−ジメチルアミノプロピオン酸メチル二塩酸塩（１９．９ｍｇ
，０．１０３ｍｍｏｌ，１．５当量）およびジイソプロピルエチルアミン（５３
ｍｌ，０．３０４ｍｍｏｌ，４．４当量）を添加した。この懸濁液を室温で１時
間マグネチックで撹拌した時点で、構造（３０）の化合物（５０ｍｇ，０．０６
８ｍｍｏｌ，１当量）、塩化水銀（ＩＩ）（８２．４ｍｇ，０．３０４ｍｍｏｌ
，４．４当量）および酸化水銀（ＩＩ）（２５．７ｍｇ，０．１２０ｍｍｏｌ，
１．７当量）を添加した。得られた黄色懸濁液を１６．５時間撹拌した。この間
に懸濁液は灰色に変色した。この反応物をＣＨ₂Ｃｌ₂（５０ｍｌ）で希釈し、飽
和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液（５ｍｌ）、飽和ＮａＣｌ水溶液（５ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ₂ ＳＯ₄で乾燥した。この濁った懸濁液を濾過し、そして溶媒を真空下で除去した 。この白色固体を分取薄層クロマトグラフィーで精製することにより、イミダゾ
リン構造（４２）（２５．３ｍｇ，収率５２％）を透明な非晶質固体として得た
。

【０５２３】

【数２０】

【０５２４】 （構造（４３）の合成：）

【０５２５】

【化１５９】

【０５２６】 構造（４３）を次のように合成した。２５ｍｌ丸底フラスコに、構造（４２）
の化合物（２３０ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）、ＣＨＣｌ₃（５ｍｌ）およびＭｎ Ｏ₂（５００ｍｇ，５．７５ｍｍｏｌ，１７．４当量）を入れた。５時間撹拌し た後、この懸濁液を濾過し、固体をメタノールで洗浄した。溶媒を真空下で除去
し、残渣を酢酸エチル（５ｍｌ）およびメタノール（１ｍｌ）に溶解し、新たな
ＭｎＯ₂（５００ｍｇ）を入れて、この反応系を室温で１５時間撹拌した。固体 を濾過し、溶媒を真空下で除去した。この残渣をシリカゲルによるカラムクロマ
トグラフィー（１：１酢酸エチル：ヘキサンで溶出し、次いで純粋な酢酸エチル
で溶出し、次いで１：９メタノール：酢酸エチルで溶出）で精製することにより
、所望の生成物（構造（４３），１９０ｍｇ，収率８３％）を非晶質固体として
得た。

【０５２７】

【数２１】

【０５２８】 （構造（４４）の合成：）

【０５２９】

【化１６０】

【０５３０】 構造（４４）を、構造（３３）から構造（３４）への構築に使用した方法と同
じ方法によって合成した。この生成物をさらに精製することなくカップリングに
使用した。

【０５３１】 構造（４４）を実施例１の構造（９ａ）と（構造（１８）の合成について実施
例２に記述した手順と類似の方法で）反応させた後、（それぞれ構造（１９）の
脱保護に関して記載した方法と類似の方法で）脱保護を行なうことにより、下記
表９に示す構造（４５）を得た。構造（４５）の調製では、このカップリング段
階を、類似のヒドロキシ化合物ではなく構造（４４）のカルボニル化合物で行な
った。

【０５３２】 （実施例１５） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例では、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の合成を例示する
。

【０５３３】 （構造（４６）の合成：）

【０５３４】

【化１６１】

【０５３５】 構造（４６）を、構造（１６）およびチアゾールから出発して、構造（１７）
と類似の様式で合成した。この化合物をさらに精製することなくカップリング段
階に使用した。

【０５３６】 構造（４６）を実施例１の構造（９ａ）と（構造（１８）の合成について実施
例２に記述した方法と類似の方法で）反応させた後、（それぞれ構造（１８）お
よび（１９）の酸化および脱保護に関して記載した方法と類似の方法で）酸化お
よび脱保護を行なうことにより、下記表９に示す構造（４７）を得た。

【０５３７】 （実施例１６） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例では、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物の合成を例示する
。

【０５３８】 （構造（４８）の合成：）

【０５３９】

【化１６２】

【０５４０】 −２５℃のＴＨＦ（５ｍｌ）中で撹拌したα−Ｂｏｃ−β−Ｆｍｏｃ−２，３
−ジアミノプロピオン酸（８１８ｍｇ，１．９２ｍｍｏｌ）の溶液に、４−メチ
ルモルホリン（０．２３ｍｌ，２．１ｍｍｏｌ）を添加し、続いてクロロギ酸イ
ソブチル（０．２５ｍｌ，１．９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁液を５分
間撹拌し、次いで５ｍｌのＴＨＦを使って濾過した。この濾液を氷／水浴で冷却
し、次いで、水（２．５ｍｌ）に溶解したホウ水素化ナトリウム（１５２ｍｇ，
０．４０ｍｍｏｌ）を滴下した。この混合物を１５分間撹拌し、次いで、水（５
０ｍｌ）を添加し、この混合物をＣＨ₂Ｃｌ₂（３×５０ｍｌ）で抽出した。合わ
せた抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液
を真空下で濃縮することにより、淡黄色固体を得、それをフラッシュクロマトグ
ラフィー（５０％酢酸エチル／ヘキサン溶離液）で精製して、５９６ｍｇのアル
コールを白色固体として得た。

【０５４１】 このアルコール（２２４ｍｇ，０．５４３ｍｍｏｌ）を塩化メチレンに溶解し
、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（２６２ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）を
添加した。この混合物を室温で１時間撹拌し、次いで酢酸エチル（５０ｍｌ）で
希釈し、１０％Ｎａ₂Ｓ₂Ｏ₃水溶液、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液およびブラインで順
次抽出した。この有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空下で濃
縮して白色固体を得た。この固体をフラッシュクロマトグラフィーで精製するこ
とにより、１６９ｍｇのアルデヒド構造（４８）を白色固体として得た。

【０５４２】 （構造（４９）の合成：）

【０５４３】

【化１６３】

【０５４４】 構造（４９）を、構造（４８）およびベンゾチアゾールから出発して、構造（
１７）と類似の様式で合成した。この化合物を、ジアステレオマーの１：１混合
物として、さらに精製することなくカップリング段階（下記）に使用した。ＭＳ
（ＥＩ＋）：ｍ／ｚ ４４６．４（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０５４５】 （構造（５０）の合成：）

【０５４６】

【化１６４】

【０５４７】 構造（４９）および二環式酸構造（９ａ）（２７ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ）
およびＨＯＢｔ水和物（７１ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１ｍｌ）に溶
解し、ジイソプロピルエチルアミン（０．０．０５９ｍｌ，０．３４ｍｍｏｌ）
を添加し、続いてＥＤＣ（１９ｍｇ，０．０９９ｍｍｏｌ）を添加した。この混
合物を室温で２０時間撹拌し、次いで、酢酸エチルで希釈し、５％クエン酸水溶
液、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、水およびブラインで順次抽出した。この有機
溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空下で濃縮して黄色泡状物６１
ｍｇを得た。¹Ｈ ＮＭＲ分析は、ジアステレオマーアミドの混合物を示した。

【０５４８】 この泡状物をＣＨ₃ＣＮに溶解し、ジエチルアミンを添加した。この溶液を室 温で３０分間撹拌し、次いで、真空下で濃縮して黄色泡状物を得た。この泡状物
をヘキサンでリンスし、ＤＭＦ（０．５ｍｌ）に溶解した。別のフラスコで、カ
ルボニルジイミダゾール（１６ｍｇ，０．９９ｍｍｏｌ）およびグアニジンヒド
ロクロリド（１０ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍｌ）に溶解し、ジイ
ソプロピルエチルアミン（０．０３５ｍｌ，０．２０ｍｍｏｌ）を添加し、続い
てＤＭＡＰ（１ｍｇ）を添加した。この溶液を室温で１．５時間撹拌し、次いで
、前記アミンの溶液を添加し、撹拌を１６時間続けた。この溶液を真空下で濃縮
し、次いでこの残渣に水を添加し、この混合物を酢酸エチル（３×２５ｍｌ）で
抽出した。合わせた抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、
そして濾過した。濾液を真空下で濃縮して、５８ｍｇの構造（５０）を黄色泡状
物として得た。ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ ６８０．６（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０５４９】 構造（５０）を酸化して、構造（５１）の対応するケトンを得た。

【０５５０】 （実施例１７） （代表的なβシート模倣物のプロテアーゼインヒビターとしての活性） この実施例では、本発明のさらなる代表的なβシート模倣物がトロンビン、第
ＶＩＩ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子、トリプターゼ、ａＰＣ、プラスミン、ｔＰ
Ａ、ウロキナーゼ、トロンビン−トロンボモジュリン複合体およびトリプシンの
インヒビターとして機能する能力を例示する。表９に挙げる構造のβシート模倣
物は表１０に示す阻害活性を有した。

【０５５１】 プロテイナーゼインヒビターアッセイは実施例９に記述したように行なった。
トロンビン−トロンボモジュリン複合体に関するアッセイは、インヒビターおよ
び基質の添加の前に、トロンビンを４ｎＭトロンボモジュリンと共に室温で２０
分間プレインキュベートした点を除き、トロンビンの場合と同様に行なった。

【０５５２】

【表９】

【０５５３】 δ Ｂ＝ＣＨに関するテンプレートの立体化学は、注記する場合を除き（脚
注εを参照）、（３Ｒ，６Ｒ，９Ｓ）である。

【０５５４】 ε テンプレート立体化学は（３Ｓ，６Ｒ，９Ｓ）である。

【０５５５】 ★ ＨＰＬＣは、０〜９０％アセトニトリル／水、０．１％ＴＦＡの勾配を
用い、逆相Ｃ−１８カラムで行なった。

【０５５６】

【表１０】

【０５５７】 （実施例１８） （血管移植片における血小板沈着に対する代表的なβシート模倣物の効果） 血管移植片における血小板沈着に対する本発明化合物の効果を、Ｋｅｌｌｙら
，Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．， ＵＳＡ ８９：６０４０
−６０４４（１９９２）に記述されているようにシャントに対して近位に化合物
を導入した点を除き、Ｈａｎｓｏｎら「合成抗トロンビンＤ−フェニルアラニル
−Ｌ−プロリル−Ｌ−アルギニルクロロメチルケトンによる急性血小板依存性血
栓症の妨害」Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．， ＵＳＡ ８５
：３１４８−３１８８（１９８８）の手順に従って測定した。その結果を構造（
２０ｂ）、（３９）および（２９ｂ）について、それぞれ図１、２および３に示
す。

【０５５８】 （実施例１９） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例では、下記の構造を有する本発明のさらなる代表的なβシート模倣
物の合成を例示する。

【０５５９】

【化１６５】

【０５６０】 構造（５２）を、実施例２の中間体（１６）の代わりに下記中間体（５３）を
用いることによって合成し得る：

【０５６１】

【化１６６】

【０５６２】 中間体（５３）を、次の反応スキームに従って合成し得る：

【０５６３】

【化１６７】

【０５６４】 あるいは、中間体（５３）を、下記反応スキームに従って合成し得る：

【０５６５】

【化１６８】

【０５６６】 （実施例２０） （ＭＨＣ ＩおよびＭＨＣ ＩＩに結合する代表的なβシート模倣物） 以下の構造（５４）、（５５）および（５６）を、本明細書中で開示された技
術により合成した。

【０５６７】 構造（５４）および（５５）がＭＨＣ Ｉ分子に結合する能力は、Ｅｌｌｉｏ
ｔら（Ｎａｔｕｒｅ ３５１：４０２−４０６，１９９１）により記載されるよ
うに、本質的に証明され得る。同様に、構造（５６）がＭＨＣ ＩＩ分子に結合
する能力は、Ｋｗｏｋら（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：２４６８−２４７６，
１９９５）の手順によって証明され得る。

【０５６８】

【化１６９】

【０５６９】 （実施例２１） （ＳＨ２ドメインに結合する代表的なβシート模倣物） 以下の構造（５７）を、本明細書中に開示された技術により合成し、そして構
造（５８）を合成し得る。

【０５７０】

【化１７０】

【０５７１】 ＭＳ ＥＳ（−）１０４．３（Ｍ−Ｈ⁺）^-；ＨＰＬＣ Ｒ_t １７．２８’（０ −９０％ アセトニトリル／Ｈ₂Ｏ，０．１％ ＴＦＡ）。

【０５７２】

【化１７１】

【０５７３】 構造（５８）がＳＴＡＴ６のＳＨ２ドメインに結合する能力、または構造（５
７）がタンパク質チロシンホスファターゼＳＨ−ＰＴＰ１のＳＨ２ドメインに結
合する能力は、Ｐａｙｎｅら（ＰＮＡＳ ９０：４９０２−４９０６，１９９３
）により開示された手順によって証明され得る。ＳＨ２結合模倣物のライブラリ
ーを、Ｓｏｎｇｙａｎｇら（Ｃｅｌｌ ７２：７６７−７７８，１９９３）の手
順によってスクリーニングし得る。

【０５７４】 （実施例２２） （タンパク質キナーゼに結合する代表的なβシート模倣物） 以下の構造（５９）を、本明細書中に開示された技術により合成し得る。

【０５７５】

【化１７２】

【０５７６】 構造（５９）がタンパク質キナーゼの基質またはインヒビターとして働く能力
を、Ｓｏｎｇｙａｎｇら（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｌｏｇｙ ４：９７３−９８
２，１９９４）の手順により証明し得る。

【０５７７】 （実施例２３） （代表的なβシート模倣物の合成） 本実施例は以下の構造（６０）〜（６３）を有する本発明の代表的なβシート
模倣物の合成を例示し、ここで、ＢはＮまたはＣＨである：

【０５７８】

【化１７３】

【０５７９】 （構造（６０）の合成：）

【０５８０】

【化１７４】

【０５８１】 （構造（６１）の合成：）

【０５８２】

【化１７５】

【０５８３】 （構造（６１）の代替合成：）

【０５８４】

【化１７６】

【０５８５】 （構造（６２）の合成：）

【０５８６】

【化１７７】

【０５８７】 （構造（６２）の代替合成：）

【０５８８】

【化１７８】

【０５８９】 （構造（６３）の合成：）

【０５９０】

【化１７９】

【０５９１】 （実施例２４） （代表的なβシート模倣物のバイオアベイラビリティー） 本実施例は、上記実施例２で合成され、そして上記実施例９で報告される生物
活性を有する構造（２０ｂ）の化合物のバイオアベイラビリティーを説明する。

【０５９２】 詳細には、構造体（２０ｂ）の薬力学的および薬物動態学的な研究を、オスの
Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットで行った。ラットに、静脈内（ＩＶ）に４
ｍｇ／ｋｇ、または経口的（ＰＯ）に１０ｍｇ／ｋｇの構造（２０ｂ）の生理食
塩水溶液を投与した。ラット群（ｎ＝３または４）を、投薬の後０．２５、０．
５、１、２、４および８時間で屠殺し、そして瀉血した。有効性のパラメータ（
ａＰＴＴおよびＴＴ）をそれぞれの血漿試料について測定した。血漿中の構造（
２０ｂ）の濃度を、トリプシン阻害アッセイにより測定した。この実験の結果を
、４ｍｇ／ｋｇ ＩＶ投薬および１０ｍｇ／ｋｇ ＰＯ投薬について、図４Ａお
よび４Ｂにそれぞれ示す。図４Ａおよび図４Ｂに示されるデータは、ＩＶおよび
ＰＯ投与の両方による構造（２０ｂ）のインビボの有効性を示す。平均構造（２
０ｂ）濃度値の非コンパートメント薬物動態学分析は、７．５時間（ＩＶ）およ
び４．５時間（ＰＯ）の終端の（ｔｅｒｍｉｎａｌ）半減期を示す。経口的に投
与された構造（２０ｂ）のバイオアベイラビリティーは、約２７％である。

【０５９３】 （実施例２５） （代表的なβシート模倣物の合成） この実施例は、さらに、以下に示す構造を有する本発明の代表的なβシート模
倣物の合成を示す。

【０５９４】 （構造（６４）の合成：）

【０５９５】

【化１８０】

【０５９６】 構造（６４）を以下のように合成した。１５０ｍｌ丸底フラスコに、５．１９
ｇ（２４．７ｍｍｏｌ）の１，２，３−ベンゼントリカルボン酸、７５ｍｌのト
ルエン、および３．３ｍＬ（２４．７ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを入れた。
反応系を、水を共沸除去しながら３時間加熱還流した。この時、２．０７ｍｌの
アニリンを加え、そして反応系を再び、水を共沸除去しながら、６時間還流した
。反応溶液を冷却すると、結晶性の生成物が形成され、濾別した（４．６８ｇ）
。この溶液を次いでＮａＨＣＯ₃および酢酸エチルで抽出し、重炭酸塩層を酸性 化し、第２のＥｔＯＡｃ洗浄で再び抽出した。有機層を、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、
濾過し、そしてこの溶媒を除去して、さらに１．２４ｇの生成物を得た。総収量
は、５．９２ｇ（８２％）であった。

【０５９７】

【数２２】

【０５９８】 （構造（６５）の合成：）

【０５９９】

【化１８１】

【０６００】 構造（６５）を、以下のように合成した。ＴＨＦ（２ｍｌ）中の構造（６４）
のイミド−酸（５３．４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を、−４０℃まで冷却し、そし
て２４．２μｌ（０．２２ｍｍｏｌ）のＮＭＭおよび２８．２μｌのＩＢＣＦ（
０．２２ｍｍｏｌ）で処理した。反応系を、３分間攪拌し、そして次いで、０．
６９ｍｌ（０．６９ｍｍｏｌ）の１Ｍのジアゾメタンのエーテル溶液を加えた。
温度をゆっくり−２０℃まで上げ、そしてこの反応系を２時間この温度で攪拌し
た。この反応系を、０℃に温め、さらに３時間攪拌した。

【０６０１】 この反応系を、ＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ）で希釈し、そして有機相を５％クエン
酸、ＮａＨＣＯ₃、および飽和ＮａＣｌで洗浄した。次いで、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥 し、そして濃縮して、６２．４ｍｇの残渣を得た。この粗生成物をＴＨＦに溶解
し、−４０℃まで冷却し、そして７４ｕｌの４ＭのＨＣｌのジオキサン溶液で処
理した。この反応系を−２０℃まで温め、そして１時間攪拌した。続いて、この
反応系を２時間０℃で攪拌した。この時反応混合物のＴＬＣは、出発のジアゾケ
トンの消失を示した。この溶媒を除去し、そしてこの生成物を分取用ＴＬＣ（Ｅ
ｔＯＡｃ／ヘキサン、７／３）で精製し、２２．６ｍｇ（３８％）の純粋なクロ
ロメチルケトンを得た。

【０６０２】

【数２３】

【０６０３】 （構造（６６）の合成：）

【０６０４】

【化１８２】

【０６０５】 構造（６６）を、以下のように合成した。９１０ｍｇ（５．１４ｍｍｏｌ）の
４−フェニルウラゾールの塩化メチレン（５０ｍｌ）の攪拌懸濁液に、１．６５
４ｇ（５．１４ｍｍｏｌ）のヨードベンゼンジアセテートを加えた。深紅色が現
れ、攪拌して、全ての物質が溶液になった。室温で１５分間攪拌した後に、５６
０ｍｇの９０％純粋な２，４−ペンタジエン酸（ｐｅｎａｔｄｉｅｎｏｉｃ ａ
ｃｉｄ）を加え、そしてこの色が次第に薄くなり、白色固体が形成された。１５
分後、さらに７０ｍｇのペンタジエン酸を加えた。室温で２時間攪拌した後、こ
の塩化メチレンを減圧下で除去した。エーテル（２５ｍｌ）を加え、そして得ら
れた懸濁液を、−２０℃まで冷却し、そして固体物質（１．４１ｇ、１００％）
を濾別した。この生成物を、ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサンから再結晶化し得た。

【０６０６】

【数２４】

【０６０７】 （構造（６７）の合成：）

【０６０８】

【化１８３】

【０６０９】 構造（６７）を、以下のように合成した。構造（６６）のディールス−アルダ
ー付加物（４３２ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（５０ｍｌ）中の１０
％Ｐｄ／Ｃ（１５０ｍｇ）と混合した。この反応系を、水素雰囲気下（水素風船
）で一晩攪拌した。１８時間後、アリコート（１ｍｌ）を取り除き、そしてこの
溶媒を減圧下でエバポレートした。残渣の¹Ｈ ＮＭＲは、飽和生成物への９５ ％より多い変換を示した。この反応混合物を、セライトを通して濾過し、そして
この溶媒をロータリーエバポレーターにより除去し、４２４ｍｇの結晶性生成物
を得た。

【０６１０】

【数２５】

【０６１１】 （構造（６８）の合成：）

【０６１２】

【化１８４】

【０６１３】 構造（６８）を以下のように合成した。４５０ｍｇ（１．６４ｍｍｏｌ）の（
６７）の塩化メチレン（４０ｍｌ）溶液に、１４２μＬの塩化オキサリル（１．
６４ｍｍｏｌ）および一滴のＤＭＦを加えた。この反応系を、室温で一晩Ａｒ下
で攪拌した。この塩化メチレンをロータリーエバポレーターにより除去し、ＴＨ
Ｆ（３０ｍｌ）を加えた。この溶液を−２０℃まで冷却し、２ｍｌの１Ｍのジア
ゾメタンのエーテル溶液を加えた。次第に室温まで温めながら、これを４時間攪
拌した。この反応系を、次いで−７８℃まで冷却し、そして５００ｕＬの４Ｍの
ＨＣｌのジオキサン溶液を加えた。次第に室温まで温めながら、この反応系を再
びＡｒ下で攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、クロロメチルケトンおよびメチル
エステルの混合物（¹Ｈ ＮＭＲ分析による）を得た。これをシリカゲルのクロ マトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）を行い、１８５ｍｇ（３６％）のクロロメチルケ
トンを得た。

【０６１４】

【数２６】

【０６１５】 （構造（６９）の合成：）

【０６１６】

【化１８５】

【０６１７】 構造（６９）を以下のように合成した。６０ｍｌの塩化メチレン中の４−フェ
ニルウラゾール（１．１７９ｇ、６．６５ｍｍｏｌ）に、２．１４ｇのヨードベ
ンゼンジアセテート（６．６４ｍｍｏｌ）を加え、そしてこの反応混合物を室温
で攪拌した。全ての固体が次第に溶解するにつれて、深紅色が現れた。約１５分
後、１０ｍｌ塩化メチレン中の６４０ｍｇのソルビナール（６．６６ｍｍｏｌ）
を、反応フラスコに加え、そしてこの深紅色がゆっくり薄くなった。２時間後、
この塩化メチレンを減圧下で除去した。エーテル（３０ｍｌ）を得られた残渣に
加え、そして一晩−２０℃まで冷却した。この形成した固体物質（１．５５ｇ、
収率８６％）を、ろ紙上に集めた。

【０６１８】

【数２７】

【０６１９】 （構造（７０）の合成：）

【０６２０】

【化１８６】

【０６２１】 １００ｍｌ丸底フラスコ中の０．７８ｇ（３．０ｍｍｏｌ）の構造（６４）の
酸に、２０ｍｌのＴＨＦを加え、そしてこの反応混合物を−２０℃まで冷却した
。４−メチルモルホリン（０．３４ｍｌ、３．０ｍｍｏｌ）を加え、そして続い
て０．４２ｍｌ（３．３ｍｍｏｌ）のイソブチルクロロホルメートを加えた。得
られた懸濁液を、５分間攪拌し、そして次いで０．９ｍｌの水中の０．３４ｇ（
９．０ｍｍｏｌ）の水素化ホウ素ナトリウムの懸濁液を、手早く加えた。４〜５
分後、４０ｍｌの水を加え、そしてこの懸濁液を１２５ｍｌの酢酸エチルで抽出
した。ＥｔＯＡｃ層を、次いで水およびブラインで洗浄し、そしてＭｇＳＯ₄で 乾燥した。濾過し、そして溶媒をエバポレートして粗製のアルコールを得た。

【０６２２】 この粗製のアルコールを、４０ｍｌのジクロロメタンに溶解し、２．０ｇ（４
．７ｍｍｏｌ）のＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎパーヨージナン（ｐｅｒｉｏｄｉｎａ
ｎｅ）試薬を室温で加えた。この反応系を２時間攪拌し、４０ｍｌのジクロロメ
タンで希釈し、そして３×２０ｍｌの１：１（体積）１０％重炭酸ナトリウム溶
液および１０％チオ硫酸ナトリウム溶液、１×４０ｍｌの水、１×４０ｍｌのブ
ラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、溶媒をエバポレートし
、そして３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィー
を行い、純粋なアルデヒドを得た（０．５ｇ、６７％ ２工程）。

【０６２３】

【数２８】

【０６２４】 （構造（７１）の合成）

【０６２５】

【化１８７】

【０６２６】 ２５ｍｌ丸底フラスコ中の３ｍｌテトラヒドロフランに、０．０６６ｍｌ（０
．６９ｍｍｏｌ）のプロピオル酸メチルを加え、そしてこの溶液を−７８℃まで
冷却した。ｎ−ブチルリチウム（０．２８ｍｌ、０．６９ｍｍｏｌ）を滴下し、
そしてこの反応系を７〜１０分間攪拌し、この時点で、０．１５ｇ（０．６ｍｍ
ｏｌ）の構造（７０）のアルデヒドの３ｍｌジクロロメタン溶液を、手早く加え
た。この反応系を、−７８℃で３５〜４５分間攪拌し、次いで、１．５ｍｌの飽
和塩化アンモニウム溶液でクエンチした。この有機溶媒を減圧下で除去し、そし
て水層を２４ｍｌのＥｔＯＡｃで抽出し、次にブラインで洗浄した。この有機層
を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、そして減圧下で溶媒をエバポレートして、
粗生成物を得た。４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いる分取用ＴＬＣ精製を行い
、生成物（１０７ｍｇ、４７％）を得た。

【０６２７】

【数２９】

【０６２８】 （実施例２６） （代表的なβ−シート模倣物の活性） この実施例において、実施例２５の化合物を、ヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥ
Ｃ）におけるＴＮＦ誘導性Ｖ−ＣＡＭ発現の阻害についてアッセイした。炎症性
サイトカインでの刺激の際に、ＨＵＶＥＣは細胞表面接着分子（これは、Ｅ−セ
レクチン、Ｖ−ＣＡＭおよびＩ−ＣＡＭを含む）を発現する。プロテアソームア
ンタゴニストは、これらの接着分子のＴＮＦα誘導性発現を阻害し、このことに
よって白血球接着および炎症応答を調節する機構を提供する。

【０６２９】 より詳細には、化合物（６５）、（６８）、（６９）および（７１）を、テト
ラメチルベンジジンをｏ−フェニレンジアミン−ペルオキシドの代わりに使用す
ること以外はＤｅｉｓｈｅｒ，ＫａｕｓｈａｎｓｋｙおよびＨａｒｌａｎにより
記載される手順（「Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ
ＩＩ Ｐｒｅｖｅｎｔ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ−Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｅｘｐｒｅｓｓ
ｉｏｎ ｏｆ Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ａｄｈｅｓｉｏｎ Ｍｏｌｅｃｕ
ｌｅ−１， Ｗｈｉｌｅ Ａｕｇｍｅｎｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏ
ｎ ｏｆ Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ａｄｈｅｓｉｏｎ
Ｍｏｌｅｃｕｌｅ−１ ｏｎ Ｈｕｍａｎ Ｕｍｂｉｌｉｃａｌ Ｖｅｉｎ Ｅ
ｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｃｅｌｌｓ」Ｃｅｌｌ Ａｄｈｅｓｉｏｎ Ｃｏｍｍｕ
ｎ．１：１３３〜４２，１９９３）（本明細書中に参考として援用される）によ
りアッセイした。

【０６３０】 この実験の結果は以下の通りである：化合物（６５）、９．６±０．１μＭ；
化合物（６８）、１４．２±０．８μＭ；化合物（６９）、３２．４±１．７μ
Ｍ；および化合物（７１）、４．９±０．１８μＭ。

【０６３１】 （実施例２７） （β−シート模倣物の固相合成で使用される代表的なリンカーの合成） この実施例は、β−シート模倣物の固相合成で使用されるリンカーの合成を例
示する。

【０６３２】

【化１８８】

【０６３３】 （構造（７２）の合成）

【０６３４】

【化１８９】

【０６３５】 ５００ｍＬの丸底フラスコに、トリス（メチルチオ）メチルアルギノール（３
０）（１０．７０ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）およびＣＨ₂Ｃｌ₂（２０ｍＬ）を磁気
スターラーと共に入れた。１２５ｍＬのエルレンマイヤーフラスコにシステイン
メチルエステル塩酸塩（３．８１ｇ、２２．２ｍｍｏｌ）、ＣＨ₂Ｃｌ₂（５０ｍ
Ｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（８．５ｍＬ、６．３ｇ、４８．７ｍ
ｍｏｌ）を入れた。この混合物をシステインメチルエステルが溶解するまで撹拌
し（２５分）、そしてこの溶液はジイソプロピルエチルアミン塩酸塩のわずかに
曇った懸濁液として観察された。この懸濁液を、アルギノールを含むフラスコに
添加し、そしてさらなるＣＨ₂Ｃｌ₂（１００ｍＬ）を反応物に添加した。ＨｇＣ
ｌ₂（１７．７ｇ、６５．１ｍｍｏｌ）およびＨｇＯ（５．４６ｇ、２５．２ｍ ｍｏｌ）を反応混合物に添加し、そして懸濁液を水銀塩が懸濁されたままになる
ように十分に速く撹拌した。このフラスコを、光学的にキャップし、そして室温
で２２時間撹拌した（この時間までに、開始物質は消失した）。黄色の溶液を飽
和塩化アンモニウムでクエンチし、そしてＣＨ₂Ｃｌ₂で希釈した。この層を分離
し、そして水層を２回ＣＨ₂Ｃｌ₂で抽出した。合わせた有機層をＮａ₂ＳＯ₄／Ｍ
ｇＳＯ₄で乾燥し、そしてシリカゲルパッドでろ過した。この溶媒を減圧下で取 り除き、そして残渣を連続して２回シリカゲルで精製した。最初の時には７：３
の酢酸エチル／へキサンで溶出し、そして２回目の時には１：１の酢酸エチル／
へキサン、次いで７：３の酢酸エチル／へキサンで溶出した。合わせた精製物は
、７．９７ｇ（収率７５％）のＮα，Ｎ_G−ビスＢｏｃ−Ｎ_G’−Ｍｔｒ−１−［
（４’−カルボキシメチル）チアゾリン−２−イル］アルギノールを淡黄色泡状
体として得た。

【０６３６】

【数３０】

【０６３７】 ＣαＨは観察されない。

【０６３８】 （構造（７３）の合成）

【０６３９】

【化１９０】

【０６４０】 ３００ｍＬの丸底フラスコにクロロホルム（２０ｍＬ）およびアルギノール（
７２）（７．９７ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）を充填し、そして磁気スターラーを配
備した。二酸化マンガン（ＩＶ）（９．６５ｇ、１１１ｍｍｏｌ、１０当量）を
添加し、そしてフラスコに栓をした。追加のクロロホルム（１０ｍＬ）を添加し
、そしてこの懸濁液を８時間、室温で激しく撹拌し、この後、シリカゲルでろ過
し、酢酸エチルでリンスした。この溶媒を減圧下で除去し、そしてこの残渣をシ
リカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製して（４５：５５ ＥｔＯＡｃ／へ
キサン）、Ｎα，Ｎ_G−ビスＢｏｃ−Ｎ_G’−Ｍｔｒ−１−［（４’−カルボキシ
メチル）チアゾール−２−イル］アルギノール（４．８３ｇ、収率６１％）淡黄
色非晶質固体として得、そして１．８９ｇ（２４％）の出発物質を回収した。

【０６４１】

【数３１】

【０６４２】 （構造（７４）の合成）

【０６４３】

【化１９１】

【０６４４】 Ｈ₂Ｏ（１ｍＬ）を含む２５ｍＬのコニカルフラスコに２．０ＮのＬｉＯＨ（ ０．２５ｍＬ、０．５０ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＮα，Ｎ_G−ビスＢｏｃ −Ｎ_G’−Ｍｔｒ−１−［（４’−カルボキシメチル）チアゾール−２−イル］ アルギノール（２３８ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ溶液（１ｍＬ）として
添加した。第２の部のＴＨＦ（１ｍＬ）を使用してアルギノールを含むフラスコ
をリンスし、そしてこの反応系に添加した。均質な混合物を室温で６．５時間、
磁気で撹拌し、この時点で５％ ＨＣｌ（０．３４ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）お
よび酢酸エチル（１０ｍＬ）を添加した。有機層を分離し、そして水層を２×１
０ｍＬ酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌで洗浄し、そして
Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を取り除いて２１２ｍｇ（収率９２％）のＮα，Ｎ _G −ビスＢｏｃ−Ｎ_G’−Ｍｔｒ−１−［（４’−カルボン酸）チアゾール−２−
イル］アルギノールを淡黄色泡状体として得た。

【０６４５】

【数３２】

【０６４６】 （構造（７５）の合成）

【０６４７】

【化１９２】

【０６４８】 磁気スターラーを備えた２５０ｍＬの丸底フラスコにＣＨ₂Ｃｌ₂（１０ｍＬ）
、酸（７４）（３．４０ｇ、４．８６ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（２ｍ
Ｌ）を充填した。１．５時間後、反応は不完全であった。追加のトリフルオロ酢
酸（５ｍＬ）を添加し、この溶液をさらに４時間撹拌した。この溶媒を減圧下で
除去し、そして残渣をＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解した。飽和ＮａＨＣＯ₃溶液（ ５０ｍＬ）を添加し（ｐＨ約７〜８）、続けてＴＨＦ（２０ｍＬ）中の９−フル
オレニルメチル（ｆｌｕｏｒｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌ）−Ｎ−スクシンイミジルカ
ーボネート（１．９７ｇ、５．８３ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。１６時
間室温で撹拌した後、開始物質はなお存在し、そしてｐＨ＝７．０であった。２
ＭのＮａ₂ＣＯ₃溶液（約３ｍＬ）を添加し（ｐＨ＝８．５）、続けて第２の部の
ＦｍｏｃＯＮＳｕ（３２８ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加した。
この溶液を室温でさらに２時間撹拌する。この反応混合物を２×１００ｍＬへキ
サンで洗浄した。酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加し、そして反応混合物を６Ｎ
ＨＣｌでｐＨ＝０まで酸性化した。この有機層を分離し、そして水層を２×１
００ｍＬ酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌで洗浄し、そし
てＮａ₂ＳＯ₄で乾燥した。この溶媒を除去して粗Ｆｍｏｃ酸を褐色泡状体として
得た。この泡状体を最小の酢酸エチルに溶解してエチルエーテル（２５０ｍＬ）
にピペットで移した。この沈殿物を遠心分離し、そして回収した。この上清を濃
縮してエチルエーテル（５０ｍＬ）に滴下した。白色沈殿物を遠心分離し、そし
て合わせた沈殿物を減圧下で乾燥して３．４２ｇ（収率９８％）のＮα−Ｆｍｏ
ｃ−Ｎ_G’−Ｍｔｒ−１−［（４’−カルボン酸）チアゾール−２−イル］アル ギノールを白色粉末として得た。

【０６４９】

【数３３】

【０６５０】 （構造（７６）の合成）

【０６５１】

【化１９３】

【０６５２】 アルギノールエステル誘導体（４２）（１．３５ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を７
０ｍｌのＥｔＯＡｃに室温で溶解した。この溶液に二酸化マンガン（ＩＶ）（５
ｇ、８９．２ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの懸濁液を室温で５時間、激しく撹
拌した後、シリカゲルを通してろ過した。この溶媒を除去し、そして残渣をフラ
ッシュクロマトグラフィー（３０％ へキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製して所
望のアルコール（７６）（０．２３ｇ、１８％）およびケトン（０．１５３ｇ、
１１．５％）を得た。

【０６５３】

【数３４】

【０６５４】 （構造（７７）の合成）

【０６５５】

【化１９４】

【０６５６】 エステル（７６）（７０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）および
水（１０ｍＬ）の混合物に溶解した。この溶液にＬｉＯＨ（１８ｍｇ、４．３ｍ
ｍｏｌ）を添加し、そしてこの溶液を７時間加熱還流した。得られた溶液をエバ
ポレートした。この残渣を水に溶解し、そしてエーテルで抽出した。水層をエバ
ポレートした。得られた残渣をＭｅＯＨに溶解し、そしてＤｏｗｅｘ樹脂（５０
Ｗ×８、Ｈ⁺形態）を添加してこの溶液を酸性化した。この樹脂をろ過して取り 除き、そしてろ液をエバポレートして酸を得た（３５ｍｇ、６０％）。

【０６５７】

【数３５】

【０６５８】 （構造（７８）の合成）

【０６５９】

【化１９５】

【０６６０】 ＣＨ₃ＣＮ／ＤＭＦ（８０ｍＬ：８０ｍＬ）中の４−（クロロエチル）安息香 酸（８．０ｇ、０．０４６ｍｏｌ）にＮａＮ₃（６．０ｇ、０．０９２ｍｏｌ） 、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムアジド（触媒）、ヨウ化テトラ−ｎ−ブチル
アンモニウム（触媒）を添加し、そして反応系を７〜９時間の間、穏やかな還流
で加熱し、その時点で反応混合物は１つの固体ブロック（ｏｎｅ ｓｏｌｉｄ
ｂｌｏｃｋ）に変化した。水（３５０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を
添加し、そして水層をＥｔＯＡｃ（２×４００ｍＬ）で抽出した。有機層をＨ₂ Ｏ（２５０ｍＬ）、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、そしてＮａ₂ＳＯ₄で乾燥
した。ろ過および溶媒のエバポレーションにより黄色がかった固体（９．４ｇ）
を得た。これは次の工程での使用に十分純粋であった。ＩＲ（ＣＤＣｌ₃）ｖ^-1 ２１１１。

【０６６１】 （構造（７９）の合成）

【０６６２】

【化１９６】

【０６６３】 （７８）（９．４ｇ、０．０５３ｍｏｌ）のＴＨＦ／ＤＭＥ溶液（１７５ｍＬ
：６０ｍＬ）にトリフェニルホスフィン（１５．２ｇ、０．０５８ｍｏｌ）を添
加し、そして反応系を１０分の間、撹拌した。Ｈ₂Ｏ（１．２ｍＬ）を添加し、 そして反応系を室温で２２〜２４時間激しく撹拌し、その時点で溶液は濃い懸濁
液に変化した。オフホワイトの固体をろ過し、そしてＴＨＦ（３×４０ｍＬ）で
洗浄し、乾燥後に１６．４ｇの純粋なイミノホスホランを得た。ＭＳ（ＥＳ＋）
（Ｍ＋Ｈ⁺）４２６．１。

【０６６４】 （構造（８０）の合成）

【０６６５】

【化１９７】

【０６６６】 イミノホスホラン（７９）をＴＨＦ／Ｈ₂Ｏ（３２０ｍＬ：１９０ｍＬ）中で 懸濁し、そして２Ｎ ＨＣｌ（６４ｍＬ）を添加し、そして反応系を５時間加熱
還流した。濃ＨＣｌ（１１ｍＬ）を添加し、還流をさらに２０時間、続けた。溶
媒を真空中で除去し、そして得られたオフホワイトの固体を高真空下で２時間乾
燥し（１８．０ｇ）、そしてさらに精製すること無く次の工程に使用した。

【０６６７】 （構造（８１）の合成）

【０６６８】

【化１９８】

【０６６９】 ４−（アミノエチル）安息香酸・ＨＣｌ（８０）（９．０ｇ、０．０１９ｍｏ
ｌ、理論値）のＣＨ₃ＣＮ（３２０ｍＬ）中の懸濁液にＴＥＡ（７．７ｍＬ、０ ．０５３ｍｏｌ）を添加し、そして懸濁液を０℃まで冷却した。Ｆｍｏｃ−ＯＮ
Ｓｕ（９．３ｇ、０．０２６ｍｏｌ）を一度に添加し、そして反応系を室温まで
１時間かけて加温し、そしてさらに１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、そ
して残渣をＥｔＯＡｃ（１２００ｍＬ）に溶解し、そして１０％クエン酸（２２
０ｍＬ）およびブライン（２２０ｍＬ）で洗浄してＮａ₂ＳＯ₄で乾燥した。ろ過
および溶媒のエバポレーションによって粗生成物を得、これを８％ ＭｅＯＨ／
ＣＨＣｌ₃を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して純粋な 生成物を得た（２．４ｇ）。

【０６７０】

【数３６】

【０６７１】

【化１９９】

【０６７２】 （構造（８２）の合成）

【０６７３】

【化２００】

【０６７４】 窒素下で２．２０ｇ（８．４ｍｍｏｌ）の４−ヨード−メチルベンゾエートに
１．９５ｇ（１２．２６ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−プロパルギルアミン、０．３３ｇ
（１．２６ｍｍｏｌ）のトリフェニルフォスフィン、０．０８ｇ（０．４２ｍｍ
ｏｌ）のヨウ化銅（Ｉ）、２．１１ｍＬ（１５．１ｍｍｏｌ）のトリエチルアミ
ン、および２５０ｍＬのＤＭＦを添加した。この溶液を撹拌し、そして窒素で１
５分間、脱気し、続けて０．１０ｇ（０．４２ｍｍｏｌ）の酢酸パラジウム（Ｉ
Ｉ）を添加して室温で１８時間撹拌した。この溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、そし
て５％クエン酸（４×）、ブライン（２×）で洗浄し、そしてＭｇＳＯ₄で乾燥 した。カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、９：１ へキサン／ＥｔＯＡｃ
）により精製して橙色固体としてエステル（８２）（２．３７ｇ、９８％）を得
た。

【０６７５】

【数３７】

【０６７６】 （構造（８３）の合成）

【０６７７】

【化２０１】

【０６７８】 １ａｔｍのＨ₂下で２．８６ｇ（９．８８ｍｍｏｌ）のアルキン（８２）に４ ０ｍＬの無水ジエチルエーテルおよび触媒量の酸化白金（ＩＶ）を添加した。反
応系をＴＬＣによりモニターし、そして１３時間後に完了した。この混合物をＣ
ｅｌｉｔｅのパッドを通してろ過し、ジエチルエーテルで洗浄し、そして溶媒を
真空下で除去してエステル（８３）を橙色油状物として得た（２．７２ｇ ９４
％）。

【０６７９】

【数３８】

【０６８０】 （構造（８４）の合成）

【０６８１】

【化２０２】

【０６８２】 ２．７２ｇ（９．２７ｍｍｏｌ）のエステル（８３）に１．１７ｇ（２７．１
８ｍｍｏｌ）の水酸化リチウム一水和物、５０ｍＬのＴＨＦおよび５０ｍＬのＨ ₂ Ｏを添加した。この溶液を室温で１６時間撹拌し、そして５％クエン酸でクエ ンチした。この反応系をＥｔＯＡｃ（４×）で抽出し、そして合わせた抽出物を
ブラインで洗浄し、そしてＭｇＳＯ₄で乾燥した。溶媒の除去により酸（８４） （２．３８ｇ、９２％）を淡黄色固体として得た。

【０６８３】

【数３９】

【０６８４】 （構造（８５）の合成）

【０６８５】

【化２０３】

【０６８６】 ２．３８ｇの酸（８４）へ、２０ｍＬのジクロロメタンおよび２０ｍＬのＴＦ
Ａを添加した。この溶液を２時間室温で攪拌し、そして溶媒を減圧下で除去して
、アミノ酸（８５）（３．５７ｇ）を淡橙色の固体として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ ＣＤ₃ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ１．９８（ｍ，２Ｈ），２．７９（ｍ，２Ｈ）， ２．９５（ｍ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．９７（ｄ，Ｊ＝
８．０Ｈｚ）。

【０６８７】 （構造（８６）の合成）

【０６８８】

【化２０４】

【０６８９】 ３．５７ｇ（１２．２０ｍｍｏｌ）のアミノ酸（８５）へ、７０ｍＬの１，４
ジオキサン、７０ｍＬのＨ₂Ｏ、１．２９ｇ（１２．２０ｍｍｏｌ）、および４ ．９３ｇ（１４．６ｍｍｏｌ）のＮ−（９−フルオレニルメトキシカルボニルオ
キシ）スクシンイミドを添加した。この濁った混合物を４８時間攪拌し、大量の
ＥｔＯＡｃで希釈し、そして飽和塩化アンモニウムで洗浄した。この混合物をＥ
ｔＯＡｃ（×３）で抽出し、そして合わせた有機物を飽和重炭酸塩、ブラインで
洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を除去し、淡黄色固体を得、
これをエーテルで洗浄して酸（８６）を白色粉末として得た（２．８５ｇ ５８
％；（７５）に基づいて８３％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ
１．８１（ｍ，２Ｈ），２．６８（ｍ，２Ｈ），３．１２（ｍ，２Ｈ），４．３
７（ｍ，２Ｈ），７．３０（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｍ，２Ｈ），７．６５（ｄ
，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．９２
（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ４０２（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０６９０】

【化２０５】

【０６９１】 （構造（８７）の合成）

【０６９２】

【化２０６】

【０６９３】 シアノメチルトリフェニルホスホニウムクロリド（ＣＭＴＰＰ）（８．２ｇ、
２４ｍｍｏｌ）の溶液を７５ｍＬのジクロロメタン中で調製し、そして１０分間
攪拌した。Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（１０ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）、１−（
ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（ＥＤＣ
Ｉ）（４．９ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭ
ＡＰ）（２．２ｍｍｏｌ）を添加しながら、この反応容器をシールし、そして１
２時間室温で攪拌した。溶媒を減圧下で濃縮し、そして油状物を得、これを３０
０ｍＬの酢酸エチルおよび１００ｍＬの１Ｎ ＨＣｌ中に攪拌しながら溶解した
。層を分離し、そして有機相を２×５０ｍＬのブラインで抽出した。酢酸エチル
を硫酸マグネシウムで乾燥し、そして濃縮して固体を得た。この物質をさらなる
精製をせずに使用した。ＭＳ（ＥＳ＋）７５２（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０６９４】 （構造（８８）の合成）

【０６９５】

【化２０７】

【０６９６】 構造（８７）の化合物（１６ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのＭｅＯＨ
に溶解し、そして−７８℃に冷却した。オゾンをこの反応溶液を通して３時間ガ
スディスパージョンチューブを用いてバブリングした。この生成物を減圧下でＭ
ｅＯＨの除去によって単離し、そして酢酸エチル／ヘキサン（３：７）の移動相
中で平衡化したシリカゲルカラム（２００ｇ乾燥重量）上で精製した。この生成
物を酢酸エチル／ヘキサン（４：６）で溶出して、そして乾燥後５．１ｇを得た
（２個の工程について４７％）。ＭＳ（ＥＳ＋）５１１（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０６９７】 （構造（８９）の合成）

【０６９８】

【化２０８】

【０６９９】 ケトエステル（８８）（５．１ｇ、９．８ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのＴＨＦ中
に溶解した。水素化ホウ素テトラメチルアンモニウム（１．４ｇ、１１．８ｍｍ
ｏｌ）をこの溶液へ添加した後、この容器をシールし、そして４時間攪拌した。
反応はこの時点で不完全であり、そしてさらなる水素化ホウ素物（０．２１ｇ、
２．４ｍｏｌ）を添加し、そしてさらに１時間攪拌を続けた。反応混合物を減圧
下で油状物まで濃縮し、そして平衡化したシリカゲルカラム（１５０ｇ乾燥重量
）に適用し、そして酢酸エチル／ヘキサン（４：６）で溶出し、２．７ｇの生成
物を得た（５３％）。ＭＳ（ＥＳ＋）５１３（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０７００】 （構造（９０）の合成）

【０７０１】

【化２０９】

【０７０２】 ヒドロキシエステル（８９）（２．７ｇ、５．３ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのＴ
ＨＦ中に溶解しそして０℃〜５℃へ冷却した。０．２Ｎ ＬｉＯＨ（６６．５ｍ
Ｌ、１３．３ｍｍｏｌ）を冷却した溶液へ添加し、そして３０分間攪拌した。反
応はこの時点で不完全であり、そしてさらなる０．２Ｎ ＬｉＯＨ（１０．４ｍ
Ｌ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応系をさらに３０分間攪拌し、次いで
３００ｍＬの酢酸エチル／０．２Ｎ ＨＣｌ（２：１）でクエンチした。この水
相を分離し、１００ｍＬの酢酸エチルで洗浄し、そして合わせた有機抽出物を硫
酸マグネシウムで乾燥し、そして濾過した。この濾液を油状物まで減圧下でエバ
ポレートして、そして固体まで乾燥した（２．０ｇ、７８％）。ＣＤＣｌ₃δ１ ．２−１．８（ｍ，１５Ｈ），３．１（ｍ，２Ｈ），４．１−４．５（ｍ，５Ｈ
），４．６（ｍ，１Ｈ），５．４（ｍ，１Ｈ），７．２（ｍ，２Ｈ），７．４（
ｍ，２Ｈ），７．６（ｍ，２Ｈ），７．８（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）５０１
（Ｍ＋Ｈ⁺）。

【０７０３】 （構造（９１）の合成） 構造（９１）を以下のスキームで示すような標準的手順によって合成した。

【０７０４】

【化２１０】

【０７０５】 （実施例２８） （β−シート模倣物の固相合成のための代表的成分の合成） （ウラゾール（ｕｒａｚｏｌｅ）合成） 以下の合成は、本発明のβ−シート模倣物の固相合成において使用される、ウ
ラゾール成分を調製するために使用される代表的手順である。

【０７０６】 （構造（９２）の合成）

【０７０７】

【化２１１】

【０７０８】 構造（９２）を、ＣｏｏｋｓｏｎおよびＧｕｐｔｅ（Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈｅｓ
ｅｓ，第ＶＩ巻（１９８８），９３６）の方法の少しの改変によって合成した。
１６０ｍＬのＥｔＯＡｃ中の２−ｎ−ブチルアニリン（１２．０ｍＬ、７６．６
ｍｍｏｌ）を、添加漏斗を介して、３２４ｍＬの２０％ホスゲン（トルエン中）
へ室温で３０分かけて添加した。この溶液を３０分間還流し、溶媒を蒸留によっ
て除去した。この残渣の油状物を７５ｍＬのクロロホルムに溶解し、そして添加
漏斗を介して１５分かけてトルエン中のメチルヒドラジノカルボキシレート（６
．９０ｇ、７６．６ｍｍｏｌ）の懸濁液へ室温で添加した。この混合物を１．５
時間還流し、そしてこの間に固体全てが溶解した。室温まで冷却すると、沈殿が
形成し、そして真空濾過によって回収した。これをトルエンで洗浄し、そして減
圧下で乾燥して１８．１７ｇのオフホワイトの粉末を得た（８９％）。この生成
物をさらなる精製なしで次の工程において使用した。ＴＬＣ（ＣＨ₂Ｃｌ₂／Ｍｅ
ＯＨ、９５／５）Ｒ_f０．１２；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ０．９４（ｔ，３ Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．３９（ｍ，２Ｈ），１．５６（ｍ，２Ｈ），２．６
１（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），７．０９−７．２１（ｍ，４Ｈ）；Ｍ
Ｓ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２６５．８（Ｍ＋Ｈ^-，１００）。

【０７０９】 （構造（９３）の合成）

【０７１０】

【化２１２】

【０７１１】 構造（９２）の化合物（１８．０３ｇ、６８．０ｍｍｏｌ）を、１９０ｍＬの
４Ｎ ＫＯＨ中に懸濁し、そして２時間加熱還流した。冷却して、この透明なピ
ンク色の溶液をエーテル（６×）で抽出し、そして濃ＨＣｌで酸性化した。この
沈殿物を真空濾過によって回収し、水およびＥｔＯＡｃで洗浄し、そして減圧下
で一晩乾燥させて１４．００ｇの白色固体を得た（８８％）。［必要ならば、ウ
ラゾールはＭｅＯＨまたは別の適切な溶媒系から再結晶し得る。］ＴＬＣ（ＣＨ ₂ Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ，９４／４／２）Ｒ_f０．６３；ＵＶによる純度★ ；³９７％；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ０．８９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ ），１．３２（ｍ，２Ｈ），１．５１（ｍ，２Ｈ），７．１８−７．４２（ｍ，
４Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ−）ｍ／ｚ ２３２（Ｍ−Ｈ⁺）。注：ウラゾールは一般的 に弱い質量スペクトルを与える。 ★純度のおおまかなチェックは、以下のように、ウラゾールの酸化から誘導され
たトリアゾリンのＵＶ吸光度を測定することによって得られ得る。ウラゾール（
５−１０ｍｇ）およびビス（トリフルオロアセトキシ）ヨードベンゼン（４０ｍ
ｇ）をＤＭＦ中に溶解してメスフラスコ中で５ｍＬにした。このピンク色の溶液
の吸光度を、ＤＭＦブランクに対して、１ｃｍ光路長を有するキュベット内で、
５２０ｎｍ（ε＝１７７）で測定する。これらの条件下で、もとのウラゾールの
純度を以下の方程式によって得る：純度＝２．８２（Ａ）（ＭＷ）／（ｍ）、こ
こでＡは吸光度、ＭＷはウラゾールの分子量、そしてｍはサンプルのウラゾール
の重量（ｍｇ）である。

【０７１２】 （構造（９４）の合成）

【０７１３】

【化２１３】

【０７１４】 ４−（フルオロメチル）−ベンジルアミン（４．１ｍＬ、２８．５ｍｍｏｌ）
を、ＴＨＦ（２５ｍＬ）中のメチルヒドラジノカルボキシレート（２．５６ｇ、
２８．５ｍｍｏｌ）および１，１’−カルボニルジイミダゾール（４．６２ｇ、
２８．５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液へ添加した。この溶液を１８時間室温で攪拌した
。形成した白色沈殿物を真空濾過によって回収し、冷ＴＨＦで洗浄し、そして減
圧下で乾燥して３．２２ｇの（９４）を得た（３９％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳ Ｏ−ｄ₆）δ３．５７（ｓ，３Ｈ），４．２６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）， ７．４４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ
）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２９２（Ｍ＋Ｈ⁺，１００）。

【０７１５】 （構造（９５）の合成）

【０７１６】

【化２１４】

【０７１７】 構造（９４）の化合物（３．２２ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの４Ｎ
ＫＯＨに懸濁し、そして３時間加熱還流した。冷却の際に、この溶液を濃ＨＣｌ
で酸性化した。白色沈殿が形成し、そして真空濾過によって回収し、冷水で洗浄
し、そして減圧下で一晩乾燥して、２．４５ｇの白色固体を得た（８６％）。Ｕ
Ｖによる純度：³８３％；¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ４．６２（ｓ，２Ｈ），７
．４６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．７０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）
，１０．２９（ｂｓ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ−）ｍ／ｚ ２５８（Ｍ−Ｈ⁺，１０ ０）。

【０７１８】 （ジエン合成） 以下の合成は、本発明のβ−シート模倣物の固相合成において使用される、ジ
エン成分を調製するために使用する手順の代表である。

【０７１９】 （構造（９５）の合成）

【０７２０】

【化２１５】

【０７２１】 １５０ｍＬの乾燥ジクロロメタン中のメタクロレイン（７．０１ｇ、１００ｍ
ｍｏｌ）およびメチル（トリフェニルホスホルアニリデン）アセテート（３５．
１１ｇ、１０５ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気下で２時間還流した。溶媒を減
圧下でエバポレートし、そしてこの生成物を短いシリカゲルカラムでのクロマト
グラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘキサン、１：９）によって精製した。生成物含有画
分のエバポレート後、化合物（９５）を透明な油状物として得た（８．７１ｇ、
６９％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ−ヘキサン、１：４）Ｒ_f０．５９ ¹Ｈ ＮＭＲ
（ＣＤＣｌ₃）δ１．８９（ｓ，３Ｈ），３．７６（ｓ，３Ｈ），５．３３−５ ．３７（ｍ，２Ｈ），５．８７（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ
＝１６Ｈｚ，１Ｈ）。

【０７２２】 （構造（９６）の合成）

【０７２３】

【化２１６】

【０７２４】 化合物（９６）を、Ｋ．Ｓａｔｏら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．３２：１７７，
１９６７）の手順の改変によって合成した。窒素雰囲気下で０℃に冷却した、２
５ｍＬの乾燥ＴＨＦ中のＮａＨ（鉱物油中６０％、０．４０ｇ、１０ｍｍｏｌ）
の懸濁液へ、トリエチルホスホノクロトネート（２．５０ｇ、１０ｍｍｏｌ）を
攪拌しながら滴下した。添加後、この溶液を１．５時間０℃で攪拌した。この赤
褐色の溶液（０℃に維持した）へ、３，３−ジメチルブチルアルデヒド（１．０
０ｇ、１０ｍｍｏｌ）を滴下した。この溶液を室温まで加温し、そして１時間室
温で攪拌した。この混合物を酢酸エチル（７５ｍＬ）および水（７５ｍＬ）で希
釈し、そしてこの２個の層を分離した。この有機層を水（２×５０ｍＬ）および
ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、そして硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧
下で除去し、そしてシリカのフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキ
サン、１：９）によって１．００ｇの（９６）を淡黄色の固体として得た（５１
％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：９）Ｒ_f０．６０ ¹Ｈ ＮＭＲ（Ｃ
ＤＣｌ₃）δ０．９０（ｓ，９Ｈ），１．２９（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），２． ０４（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，２Ｈ），４．１９（ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），５．８０
（ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，１Ｈ），６．１３−６．１７（ｍ，２Ｈ），７．２４
−７．３９（ｍ，２Ｈ）。

【０７２５】 （構造（９７）の合成）

【０７２６】

【化２１７】

【０７２７】 メタノール（１５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中のメチル７，７−ジメチル−２
，４−オクタジエノエート（９６）（０．９９ｇ、５ｍｍｏｌ）および水酸化ナ
トリウム（０．６０ｇ、１５ｍｍｏｌ）の溶液を、３０分間還流した。室温まで
冷却後、溶媒を減圧下で除去し、そしてこの残渣を水（３０ｍＬ）に溶解した。
得られた溶液を濃ＨＣｌでｐＨ２まで酸性化し、そしてこの沈殿物を濾過によっ
て回収し、水（１０ｍＬ）で洗浄し、そして減圧下で乾燥して０．８４ｇの酸を
白色固体として得た（９９％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ０．９２（ｓ，３
Ｈ），２．０７（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），５．８０（ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈ
ｚ，１Ｈ），６．１９−６．２３（ｍ，２Ｈ），７．３４−７．４０（ｍ，２Ｈ
）。

【０７２８】 （実施例２９） （代表的なβ−シート模倣物の固相合成） この実施例は、代表的なβ−シート模倣物（１００）〜（２７７）（表１１−
１５）の固相合成を例示する。この実施例の化合物を、以下の反応スキームに従
って合成した。

【０７２９】

【化２１８】

【０７３０】 一般的な手順：β−ストランド模倣物の合成を、ＤＭＦ中２５％のピペリジン
を使用する、ＦｍｏｃＰＡＬ樹脂の脱保護によって開始した。ＤＭＦを用いる過
度の洗浄に続いて、この樹脂を、Ｋａｉｓｅｒ試験が陰性になるまで、ＤＭＦ中
で、酸フッ化物のＮ−Ｆｍｏｃ−４−アミノメチル安息香酸、または（８１）ま
たは（８６）およびのＨｕｎｉｇｓ’塩基で処理した。あるいは、Ｆｍｏｃ−保
護されたチアゾールベースの（７５）またはイミダゾールベースの（７７）リン
カーを、ＢＯＰ、ＨＯＢｔおよびＤＩＥＡを使用して、この樹脂に結合した。い
くつかの例において、同一の方法によるトリアゾールベースの（７５）またはイ
ミダゾールベースの（７７）リンカーの前に、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕまたは別のアミ
ノ酸をこの樹脂に結合させた。構造（２１７）−（２２１）の場合は、イソシア
ネート（９１）を、ジクロロメタン中の触媒ＨＣｌの存在下、一晩、Ｗａｎｇ樹
脂へ結合させた。全てのＦｍｏｃ−保護リンカーの脱保護を、ＤＭＦ中２５％の
ピペリジンでの処理によって実施し、そしてＢｏｃ−保護リンカー（７７）の脱
保護を、ジクロロメタン中のＴＭＳ−Ｃ１（１Ｍ）およびフェノール（３Ｍ）に
よって３０分間実施した。リジノール（ｌｙｓｉｎｏｌ）誘導体（９０）を、陰
性のＫａｉｓｅｒ試験が達成されるまで、ＤＭＦ中で、ＰｙＢＯＰ、ＨＯＢｔお
よびＨｕｎｉｇｓ’塩基を使用して、樹脂結合リンカーである、Ｎ−Ｆｍｏｃ−
４−アミノメチル安息香酸、（８１）、または（８６）へ結合した。次いで、Ｄ
ＭＦ中２５％のピペリジンでこの樹脂を処理して、ＦＭＯＣ基を切断した。ＤＭ
Ｆで洗浄することに続いて、ジエン酸（ｄｉｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ）を、Ｋａｉ
ｓｅｒ試験の結果が陰性になるまで、ＤＭＦ中で、ＰｙＢＯＰ、ＨＯＢｔおよび
Ｈｕｎｉｇｓ’塩基を使用して、樹脂結合リンカーへ結合させた。この付加環化
を、ピラゾリジンジオン（示されず）またはウラゾールのＤＭＦ溶液を［ビス（
トリフルオロアセトキシ）ヨード］ベンゼンのＤＭＦ溶液で前処理することによ
って、実施した。ポリマー支持ジエンを得られた溶液で２〜１６時間処理した。
次いで、この樹脂をＤＭＦおよびＣＨ₂Ｃｌ₂で洗浄した。ケトアミドへの酸化を
、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペリオジナン（ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）のＤＭＳＯ
溶液でこの樹脂を６０分間処理することによって、実施した。この樹脂をＣＨ₂ Ｃｌ₂で洗浄し、そしてこの生成物を、９５：５のＴＦＡ：Ｈ₂Ｏでのこの樹脂を
１〜１２時間処理することによって、この樹脂から切断した。上澄み液を回収し
、そしてこの樹脂をさらなるＴＦＡで洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮し
た。この残渣をジエチルエーテルで沈殿させ、そしてこのエーテルをデカントし
た。得られた固体を１：１のＣＨ₃ＣＮ：Ｈ₂Ｏで再構成し、凍結乾燥させた。表
１１〜１５の化合物（１００）〜（２２７）の各々は、ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）へあ
てると、予想された（Ｍ＋Ｈ⁺）ピークを提供した。これらの化合物を、ジアス テレオマーの混合物として凝固酵素の阻害についてアッセイした。

【０７３１】 表１１〜１５に記載の全ての化合物は、トロンビンインヒビターとしてＫｉ＜
１００ｎＭを有するか、または第ＶＩＩａ因子インヒビター（表１５）としての
活性を有した。表１１〜１５中の「★」を有する化合物は、トロンビンインヒビ
ターとしてＫｉ＜１０ｎＭを有し、そして好ましい実施態様を表す。

【０７３２】 （表１１）

【０７３３】

【化２１９】

【０７３４】

【表１１】

【０７３５】 （表１２）

【０７３６】

【化２２０】

【０７３７】

【表１２】

【０７３８】

【０７３９】 （表１３）

【０７４０】

【化２２１】

【０７４１】

【表１３】

【０７４２】 （表１４）

【０７４３】

【化２２２】

【０７４４】

【表１４】

【０７４５】 （表１５）

【０７４６】

【化２２３】

【０７４７】

【表１５】

【０７４８】 （実施例３０） （代表的なβ−シート模倣物の合成） 本実施例は、本発明の代表的なβ−シート模倣物の合成をさらに示す。

【０７４９】

【化２２４】

【０７５０】 （構造（２２８）の合成）

【０７５１】

【化２２５】

【０７５２】 メチル−２，４−ジオキソ−ペンタノエート（１４．４ｇ、０．１０ｍｏｌ）
および１０．６ｇのトリメチルオルトアセテートを、１００ｍＬのメタノールに
溶解し、次いで３００μＬの塩化アセチルを添加した。この溶液を、次いで、室
温で６時間撹拌した。次いで、アリコートを取り、その溶媒をロータリーエバポ
レーターを用いて除去した。その残渣の¹Ｈ ＮＭＲ分析により、メチルエノー ルエーテルへの完全な転換が示唆された。この反応溶液を真空下でエバポレート
した。¹Ｈ ＮＭＲによれば、純度は９０％であり、この材料を精製せずに次の 工程に使用した。

【０７５３】 ２−メトキシ−４−オキソ−２−ペンテノン（１．５８ｇ、１０ｍｍｏｌ）お
よび１．６３ｇのｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（１１ｍｍｏｌ）を、１５
ｍＬのＤＭＦに溶解した。トリエチルアミン（１．５５３ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）
を添加し、この反応系を一晩、アルゴン下にて室温で撹拌した。明朝、５０ｍＬ
のヘキサンを添加し、この反応系を冷ＮａＨＣＯ₃溶液で抽出した。このヘキサ ン層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、ヘキサンを真空下で除去して、２．０１ｇのジエン
を油状物として得た（７８％）。これを、さらに精製することなく使用した。

【０７５４】

【数４０】

【０７５５】 （構造（２２９）の合成）

【０７５６】

【化２２６】

【０７５７】 ＣＨ₂Ｃｌ₂（５ｍＬ）中の４−フェニルウラゾール（１７７ｍｇ、１ｍｍｏｌ
）およびヨードベンゼンジアセテート（３２２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の混合物に、
ジエン（２２８）（２６９ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂溶液を添加し
た。この反応混合物を３０分間撹拌し、次いで０℃に冷却した。ＢＦ₃・ＯＥｔ₂ （１４１ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を滴下して加え、この反応系を３０分間撹拌して、
ＣＨ₂Ｃｌ₂（５０ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ₃溶液（２×１５ｍＬ）、水（１ ５ｍＬ）、およびブラインで洗浄して、乾燥し、そしてエバポレートした。粗生
成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：３
、ｖ／ｖ）によって精製し、純粋な生成物を得た（９７ｍｇ、３２％）。

【０７５８】

【数４１】

【０７５９】 （実施例３１） （代表的なβ−シート模倣物の合成） 本実施例は、本発明の代表的なβ−シート模倣物の合成をさらに示す。

【０７６０】 （構造（２４）の合成）

【０７６１】

【化２２７】

【０７６２】 火炎乾燥した（ｆｌａｍｅ−ｄｒｉｅｄ）２５０ｍＬの丸底フラスコに、１３
０ｍＬの乾燥ＴＨＦを加えた。このフラスコをアルゴン雰囲気下で−７８℃に冷
却し、そして１０ｍＬの２．５Ｍ ｎ−ＢｕＬｉを、次いで５．３ｍＬのヘキサ
メチルジシラザンを、添加した。この溶液を−７８℃で３０分間撹拌し、次いで
２．２ｍＬのメチルプロピオレートを添加した。−７８℃で５０分間撹拌した後
に、２．５ｍＬ（２２ｍｍｏｌ）のヘキサジエナールを添加した。この反応系を
次いで、４時間かけて徐々に−３０℃まで加温した。−３０℃で１時間経った後
、酒石酸水溶液の添加により、この反応系をクエンチした。この反応混合物を次
いで、ＥｔＯＡｃと水との間で分配し、そしてその水層をさらなる酢酸エチルで
洗浄した。合わせた有機層を次いで飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナト
リウムで乾燥して、濃縮し、約４．１ｇの赤色がかった油状物を得た。シリカゲ
ルを通すフラッシュクロマトグラフィー（２０％酢酸エチル／８０％ヘキサン）
により、３．１ｇの黄色がかった油状物を得た（７８％）。

【０７６３】

【数４２】

【０７６４】 （構造（２５）の合成）

【０７６５】

【化２２８】

【０７６６】 ５００ｍＬの丸底フラスコに、フェニルウラゾール（４．９１ｇ）および１５
０ｍＬの塩化メチレンを入れた。ヨードベンゼンジアセテート（８．９４ｇ）を
このフラスコに添加し、この反応系を１０分間撹拌して、深赤色となった。次い
で、５．０ｇの化合物（２３０）を５０ｍＬの塩化メチレンに溶解した溶液を添
加すると、この反応系は瞬時に脱色された。この反応系を室温でさらに３時間撹
拌した。溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、その残渣を高真空下に一晩
置いた。その残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯ
Ａｃ／ヘキサン）によって精製し、エピマーアルコールの約６０／４０ジアステ
レオマー混合物を８．３ｇ得た（８４％）。

【０７６７】

【数４３】

【０７６８】 （構造（２６）の合成）

【０７６９】

【化２２９】

【０７７０】 １．０ｇの（２３１）（ジアステレオマー混合物として）のアセチレンアルコ
ール溶液を、４０ｍＬのＭｅＯＨに溶解して、氷浴中で０℃に冷却した。この反
応混合物に、８０ｍｇ（約３当量の水素化物）の粉末状水素化ホウ素ナトリウム
を、撹拌しながら添加した。０℃で１時間経った後、この反応系を室温まで加温
し、さらに１時間撹拌した。１００ｍＬのＥｔＯＡｃおよび６０ｍＬの水を添加
することによって、この反応系をクエンチした。これらの層を分液漏斗によって
分離し、その水相をさらなるＥｔＯＡｃで２回、抽出した。合わせた有機相を次
いで塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。有機溶媒を
ロータリーエバポレーターによって除去し、その残渣をフラッシュクロマトグラ
フィー（４０／６０ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、６３０ｍｇの
ジアステレオマーアルコールの混合物を得た（約６３％）。

【０７７１】

【数４４】

【０７７２】 （構造（２７）の合成）

【０７７３】

【化２３０】

【０７７４】 ３５７ｍｇの化合物（２３１）（ジアステレオマー混合物として）の、５０ｍ
Ｌの塩化メチレン中の溶液に、４２４ｍｇの粉末状のＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試
薬を添加した。この反応系を室温で６時間撹拌した。これを次いで、チオ硫酸ナ
トリウム溶液と共に５分間撹拌して、炭酸水素塩水溶液で抽出した。有機相を塩
化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。塩化メチレン
をロータリーエバポレーションによって除去し、３４８ｍｇの固体残渣を得た（
９７％）。

【０７７５】

【数４５】

【０７７６】 （構造（２８）の合成）

【０７７７】

【化２３１】

【０７７８】 １００ｍＬの丸底フラスコに、３５７ｍｇの化合物（２３２）（アルコールの
異性体混合物として）および２５ｍＬのＴＨＦを入れた。この反応溶液を０℃に
冷却し、その反応系を室温まで昇温させて、さらに１時間撹拌した。これを次い
で、４０ｍＬのＥｔＯＡｃおよび３０ｍＬの水で抽出した。水相を１ｍｍｏｌの
酒石酸で酸性化し、そして４０ｍＬの新しいＥｔＯＡｃで再抽出した。有機相を
無水ＮａＳＯ₄で乾燥し、濾過して、溶媒をロータリーエバポレーターで除去し 、３２８ｍｇの固体残渣を得た。

【０７７９】

【数４６】

【０７８０】 （実施例３２） この実施例において、実施例３１の化合物（２３１）および（２３３）を、チ
オレドキシンによるインシュリンジスルフィド還元をブロックする能力について
アッセイした。チオレドキシンは、ＮＦ−ｋＢのｐ５０サブユニットのＣｙｓ６
２に関与するジスルフィド結合の還元によるＤＮＡ結合についてＮＦ−ｋＢを上
方制御することが示されている。チオレドキシンはまた、低分子量チオールに比
べて１０⁴倍速くインシュリンのジスルフィド結合を還元することでもまた公知 である（Ｈｏｌｍｇｒｅｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５４：９６２７−９６
３２、１９７９）（本明細書中で参考として援用される）。従って、ＮＦ−ｋＢ
活性化のインヒビターがチオレドキシンの阻害によって作用している場合、チオ
レドキシンによるインシュリンの還元を阻止することもまた可能であるべきであ
る。以下のアッセイは、そのジスルフィド結合がチオレドキシンの存在下で還元
される場合の６５０ｎｍにおけるインシュリンの増加する濁度を分光学的に測定
する。

【０７８１】 Ｈｏｌｍｇｒｅｎの方法のわずかな改変が使用された。９６ウェルマイクロタ
イタープレート上で、０．１Ｍリン酸カリウムｐＨ６．５緩衝液中のチオレドキ
シンの溶液を、０．３３ｍＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）および２ｍＭ ＥＤ
ＴＡの存在下で１５分間予備活性化した。基質およびインヒビターの溶液を添加
し、８μＭのチオレドキシン、０．１３ｍＭのインシュリン、および０〜１００
μＭの化合物（２３１）または（２３３）のいずれかの最終濃度とした。溶液の
濁度をＳｐｅｃｔｒａ Ｍａｘ ２５０吸光度プレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）上で６０分間の経過にわたって６５０ｎＭにて測定し
た。この結果は、化合物（２３１）または（２３３）の濃度の増加と共に濁度が
減少することを証明する。

【０７８２】 ネガティブコントロールとして、ＤＴＴおよびＥＤＴＡの存在下でのインヒビ
ターは、チオレドキシンの存在なしで、濁度を示さなかった（ＤＴＴは、実験を
行った期間に渡ってはチオレドキシンを減少させなかった）。ポジティブコント
ロールとして、構造的に関連した天然の産物であるパルセノリド（ｐａｒｔｈｅ
ｎｏｌｉｄｅ）およびサントニンを、インヒビターに代えて上記のアッセイで試
験した。パルセノリド（これは不飽和のエキソメチレンラクトンを含み、濃度に
依存する様式でＮＦ−ｋＢ活性化を阻害するものとして公知である（Ｂｏｒｋら
、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ． ４０２： ８５〜９０，１９９７））は、同様にイン
シュリンのチオレドキシンが誘発する濁度をブロックした。サントニン（これは
飽和したラクトン基を含み、ＮＦ−ｋＢ活性化を阻害しない）は、インシュリン
のチオレドキシンが誘発する濁度をブロックしなかった。まとめると、これらの
結果は、化合物（２３１）および（２３３）が、チオレドキシンの阻害によって
ＮＦ−ｋＢ活性化を防止する証拠である。

【０７８３】 （実施例３３） （プロテアーゼインヒビターとしての例示的なβ−シート模倣物の活性）

【０７８４】

【化２３２】

【０７８５】 本実施例は、メタロプロテイナーゼロイシンアミノペプチダーゼＭおよびサー
モリシンのインヒビターとしての構造（２３４）のβ−シート模倣物（反応スキ
ーム２０で開示された方法により調製される）の活性をさらに例示する。この方
法は、Ｓｐｕｎｇｉｎ−Ｂｉａｌｉｋら、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．（１９９６）３
８０，７９〜８２の方法の改変である。

【０７８６】 以下のプロトコルを使用した：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−Ｃｌ、１００ｍＭ Ｎａ
Ｃｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ₂、０．００５％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含む緩 衝溶液（ｐＨ＝７．５）を調製する。第２の緩衝溶液（ＥＤＴＡ中の４０ｍＭ）
を第１の緩衝溶液から調製する。基質（Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−ｐＮ
Ａ）の７５０μＭの溶液を５０ｍＭのストック溶液（ＤＭＳＯ）から水中で調製
する。サーモリシンの１５ｎＭの溶液を緩衝液で、２０％グリセロール／Ｈ₂Ｏ 中の２００μＭのサーモリシンストック溶液を希釈することにより調製する。市
販のＬｅｕｃｉｎｅ Ａｍｉｎｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ Ｍの溶液（Ｓｉｇｍａ，
水中の２．６ｍｇ／ｍｌストック）を、緩衝液で５０μｇ／ｍｌまで希釈する。
５０％ＥｔＯＨ／Ｈ₂Ｏ中のインヒビターを水で希釈して所望の濃度レベルの３ 倍とした。ウェル（９６ウェルマイクロタイタープレート）あたり５０μｌの酵
素、基質、およびインヒビターを、所望の数のマイクロタイターストリップに添
加する。これにより、サーモリシンについて５ｎＭ、そして基質について２５０
μＭの最終濃度を得る。次いで、このウェルを室温で２０分間インキュベートす
る。２０分後、緩衝溶液中のＥＤＴＡを全てのウェルに、ウェルあたり５０μｌ
で添加する。そして同時に、ウェルあたり５０μｌでウェルに添加する。これに
より、１０μｇ／ｍｌの最終濃度を得る。このプレートを１００倍で４０５ｎｍ
で、２１秒間隔で読み取る。Ｋ_i値を先のようにして（実施例５）計算した。化 合物（２３４）について得られたＫ_iの値は、サーモリシンおよびロイシンアミ ノペプチダーゼＭについて、それぞれ６μＭおよび１１μＭであった。これらの
結果は、本発明のβ−シート模倣物が、メタロプロテイナーゼインヒビターとし
て機能し得ることを実証する。

【０７８７】 （実施例３４） （プロテアーゼインヒビターとしての例示的なβ−シート模倣物の活性）

【０７８８】

【化２３３】

【０７８９】 本実施例は、システインプロテイナーゼ、パパインのインヒビターとしての構
造（２３５）のβ−シート模倣物（反応スキーム１５で開示された方法により調
製される）の活性をさらに例示する。このアッセイ方法は、Ｍｅｌｌｏｒら、Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．（１９９３）２９０，２８９の方法の改変である。

【０７９０】 このアッセイを、実施例４のようにマイクロタイタープレート中で行った。以
下のプロトコルを使用した：０．０５Ｍ クエン酸ナトリウム、０．１５Ｍ Ｎ
ａＣｌ、２ｍＭ ＤＴＴ、１ｍＭ ＥＤＴＡを含む緩衝液（ｐＨ＝６．５）を調
製する。基質（Ａｃ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ｐＮＡ）の２ｍＭのストック溶液を緩衝
液中で２００μＭに希釈する。インヒビターの５ｍＭストック溶液（５０％Ｅｔ
ＯＨ／Ｈ₂Ｏ中）を緩衝液中で５００μＭに希釈し、６個の連続する１：５希釈 物を作製する。ウェルあたり、各緩衝液、基質およびインヒビターの１００μＬ
のアリコートを（適切な濃度で）、８個のウェルマイクロタイターストリップへ
と添加する。パパインの１．０ｍＭストック溶液を緩衝液中で２００μＭに希釈
し、そして５分間インキュベートし、その後１００μＬのアリコートをアッセイ
ウェルに添加する。このプレートを１００倍で４０５ｎｍで、２１秒間隔で読み
取るべきである。ＩＣ₅₀値を以前のようにして（実施例４）計算した。化合物（
２３４）は、８μＭのＩＣ₅₀値を示した。この結果は、本発明のβ−シート模倣
物がシステインプロテイナーゼインヒビターとして機能し得ることを実証する。

【０７９１】 （実施例３５） （抗血栓剤としての例示的なβ−シート模倣物の活性） 本実施例は、抗血栓剤としての表１４の構造（２２１−１４）および（２２１
−２１）のβ−シート模倣物の活性を示す。ラット（Ｓｐｌａｇｕｅ Ｄａｗｌ
ｅｙ）を一晩絶食させ、ペントバルビタールの麻酔下で使用した。５ｃｍの絹糸
を含むポリエチレンチューブを右カルチド（ｃａｒｔｉｄ）動脈および左ジャン
グラー（ｊｕｎｇｌａｒ）静脈の間に設置した。（２０ｍｇ／ｍｌで５０％プロ
ピレングリコールで溶解し、そして５ｍｌ／ｋｇで経口投与した）上記の化合物
の１つの１００ｍｇ・ｋｇの経口投与の３０分後、またはアルガトロバン（０．
３ｍｇ／ｋｇ）の静脈内投与の１分後に、血液をチューブを介して７分間循環し
た。循環の終わりにおいて、チューブを取り除き、血栓のウェット重量および血
栓のタンパク質含有量を測定した。血液をまた腹腔動脈から抜き出し、そしてＡ
ＰＴＴを測定した。

【０７９２】 これらの実験の結果を図５Ａおよび５Ｂに示す。これらは、ネガティブコント
ロール（化合物の添加なし）、化合物２２１〜１４（図５Ａ）または２２１〜２
１（図５Ｂ）、およびアルガトロバン（ポジティブコントロール）のそれぞれに
ついて血栓タンパク質（μｇ／血栓）をプロットする。これらの結果は、試験し
た化合物の両方が血栓形成を顕著に阻害することを示す。

【０７９３】 以上より、本発明の特定の実施態様が本明細書中で例示の目的で記載されてき
たが、本発明の意図および範囲から逸脱することなく種々の改変がなされ得るこ
とが理解される。従って、本発明は添付の特許請求の範囲による以外は限定され
ない。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１は、血管移植片中の血小板沈殿物の構造（２０ｂ）の種々の濃度の効果を
示すプロットである。

【図２】 図２は、血管移植片中の血小板沈殿物の構造（３９）の種々の濃度の効果を示
すプロットである。

【図３】 図３は、血管移植片中の血小板沈殿物の構造（２９ｂ）の種々の濃度の効果を
示すプロットである。

【図４Ａ】 図４Ａは、静脈内投与および経口投与の両方による構造（２０ｂ）のバイオア
ベイラビリティを示す。

【図４Ｂ】 図４Ｂは、静脈内投与および経口投与の両方による構造（２０ｂ）のバイオア
ベイラビリティを示す。

【図５Ａ】 図５Ａは、抗血栓剤として作用する構造（２２１−５）の性能を示す。

【図５Ｂ】 図５Ｂは、抗血栓剤として作用する構造（２２１−６）の性能を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｄ 209/48 Ｃ０７Ｄ 487/04 １３７ ４Ｈ００６ 471/04 １０４ １４１ ４Ｈ０４５ 487/04 １３７ １４５ １４１ 487/18 １４５ 498/04 487/18 513/04 498/04 ３２５ 513/04 Ａ６１Ｋ 37/02 ３２５ Ｃ０７Ｄ 209/48 Ｚ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，Ｍ Ｗ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，Ｆ Ｉ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ， ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，Ｍ Ｋ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ， ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，Ｙ Ｕ，ＺＷ (72)発明者 カーン， マイケル エス． アメリカ合衆国 ワシントン 98034， カークランド， 80ティーエイチ プレイ ス エヌ．イー． 10916 (72)発明者 トゥリンスキー， ジョン イー． アメリカ合衆国 ワシントン 98119， シアトル， ４ティーエイチ アベニュー ダブリュー． 625， アパートメント 103 (72)発明者 マシュー， ジェシーモル アメリカ合衆国 ワシントン 98004， ベレブー， エヌ．イー． 33アールディ ー プレイス ナンバーエイ11 110052 Ｆターム(参考） 4C050 AA01 BB05 BB06 CC05 CC08 EE02 EE03 FF03 GG03 GG04 HH01 HH03 HH04 4C065 AA03 BB04 CC01 DD01 EE02 HH02 JJ06 KK08 LL01 PP06 4C072 AA01 BB02 CC01 CC11 CC16 EE03 EE13 FF03 GG09 HH02 UU01 4C084 AA02 AA07 BA01 BA14 BA16 BA17 BA32 DC32 DC34 DC35 DC36 DC44 NA14 ZA162 ZA362 ZA392 ZA532 ZA592 ZA662 ZA942 ZB112 ZB152 ZB262 ZB272 ZC202 4C204 BB01 CB04 DB30 EB03 FB24 GB21 4H006 AA01 AB99 4H045 AA10 BA11 BA51 DA56 EA22 HA02

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 以下の構造を有する化合物およびその薬学的に受容可能な塩
   ： 【化１】 ここで、 Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ₂）_0-4−、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ₂）_1-3−、−
   （ＣＨ₂）_1-2Ｏ−および−（ＣＨ₂）_1-2Ｓ−から選択され； Ｂは、ＮおよびＣＨから選択され； Ｃは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ₂）_1-3−、−（ＣＨ₂）_0-3−、−
   Ｏ−、−Ｓ−、−Ｏ−（ＣＨ₂）_1-2−および−Ｓ（ＣＨ₂）_1-2−から選択され； Ｄは、ＮおよびＣ（Ｒ₄）から選択され； Ｅは、 【化２】 から選択され； Ｆは、任意のカルボニル部分であり； Ｒ₁、Ｒ₃およびＲ₄は、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体から独立して選択 され； Ｒ₂およびＲ₂’は、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体からそれぞれ選択され
   る１個以上の環置換基を表し、ここで、少なくとも１個のＲ₂はＣと一緒になっ て、縮合した置換または非置換の単素環式環または複素環式環を形成し； Ｒ’は、環置換基であり； ＹおよびＺは、分子の残余を表し；そして 二環式環の任意の２個の隣接するＣＨ基は、二重結合を形成し得る。
2. 【請求項２】 Ｅが、 【化３】 である、請求項１に記載の化合物。
3. 【請求項３】 Ｅが、 【化４】 である、請求項１に記載の化合物。
4. 【請求項４】 Ｅが、 【化５】 であるが、但し、ＺはＲ₁置換基を有する炭素原子に結合した−ＮＨ−部分を含 まない、請求項１に記載の化合物。
5. 【請求項５】 以下の構造を有する請求項１に記載の化合物： 【化６】 。
6. 【請求項６】 以下の構造を有する請求項１に記載の化合物： 【化７】 ここで、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−、−ＮＲ’−、−Ｏ−および−Ｓ−
   から選択される。
7. 【請求項７】 以下の構造を有する化合物およびその薬学的に受容可能な塩
   ： 【化８】 ここで、 Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ₂）_0-4−、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ₂）_1-3−、−
   （ＣＨ₂）_1-2Ｏ−および−（ＣＨ₂）_1-2Ｓ−から選択され； Ｂは、ＮおよびＣＨから選択され； Ｃは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ₂）_1-3−、−（ＣＨ₂）_0-3−、−
   Ｏ−、−Ｓ−、−Ｏ−（ＣＨ₂）_1-2−および−Ｓ（ＣＨ₂）_1-2−から選択され； Ｄは、ＮおよびＣ（Ｒ₄）から選択され； Ｅは、 【化９】 から選択され； Ｆは、任意のカルボニル部分であり； Ｒ₁、Ｒ₃およびＲ₄は、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体から独立して選択 され； Ｒ₂およびＲ₂’は、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体からそれぞれ選択され
   る１個以上の環置換基を表し、ここで、少なくとも１個のＲ₂はＣと一緒になっ て、縮合した置換または非置換の単素環式環または複素環式環を形成し； Ｒ’は、環置換基であり； ＹおよびＺは、分子の残余を表し；そして 二環式環の任意の２個の隣接するＣＨ基は、二重結合を形成し得る。
8. 【請求項８】 Ｅが、 【化１０】 である、請求項７に記載の化合物。
9. 【請求項９】 Ｅが、 【化１１】 である、請求項７に記載の化合物。
10. 【請求項１０】 Ｅが、 【化１２】 であるが、但し、ＺはＲ₁置換基を有する炭素原子に結合した−ＮＨ−部分を含 まない、請求項７に記載の化合物。
11. 【請求項１１】 以下の構造を有する請求項７に記載の化合物： 【化１３】 。
12. 【請求項１２】 以下の構造を有する請求項７に記載の化合物： 【化１４】 ここで、Ｘは、−ＮＨ−、−ＮＲ’−、−Ｏ−および−Ｓ−から選択され、Ｘ
    を有する前記環は、５員環、６員環、７員環または８員環である。