JP2002142760A - ポリマーを含有するセルラーゼ調製物及び繊維処理方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 セルロースバインディングドメイン（Ｃ
ＢＤ）を有するエンドグルカナーゼと共に、テレフタル
酸−アルキレングリコールコポリマー又はテレフタル酸
−オリゴアルキレングリコールコポリマーの単独又は複
数を含有させてなることを特徴とする、セルラーゼ調製
物；該セルラーゼ調製物を洗剤成分に配合してなる、洗
剤組成物；該セルラーゼ調製物を、セルロース含有繊維
に作用させ、該繊維の性質を改善させることを特徴とす
る、繊維の処理方法。 【効果】 本発明によれば、テレフタル酸−アルキレン
グリコールコポリマー又はテレフタル酸−オリゴアルキ
レングリコールコポリマーを含有させることによって、
セルロースバインディングドメイン（ＣＢＤ）を有する
エンドグルカナーゼ活性を飛躍的に向上させたセルラー
ゼ調製物が提供される。当該セルラーゼ調製物をセルロ
ース含有繊維の毛羽立ちの低減、色の澄明化、色の局所
的変化などの繊維加工処理に用いることにより、より少
ない酵素量で各処理の実施が可能になり、大幅にコスト
が低減化される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、水可溶性又は水懸
濁性ポリマーを含有させることによってエンドグルカナ
ーゼの効果を向上させたセルラーゼ調製物、当該セルラ
ーゼ調製物を含有する洗剤、当該セルラーゼ調製物を用
いる繊維の処理方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】セルラーゼには、セルロースの固い結晶
領域を非還元末端からエキソ型に加水分解しセロビオー
スを生成するセロビオヒドロラーゼ活性、セルロースの
非結晶領域をエンド型に加水分解しセルロース分子の低
分子化と各種のセロオリゴ糖を生成するエンドグルカナ
ーゼ活性、セロビオースやセロオリゴ糖をグルコースに
分解するβ−グルコシダーゼ活性、の３種の酵素活性が
含まれている。このうち、エンドグルカナーゼが高活性
を発揮すると繊維処理に有利である。

【０００３】従来より、セルロース含有繊維に所望の特
性を与えるために、それをセルラーゼで処理することが
行われている。例えば、繊維業界においては、セルロー
ス含有繊維の肌触り及び外観を改善するために、あるい
は着色されたセルロース含有繊維にその色の局所的な変
化を提供する「ストーンウオッシュ」の外観を与えるた
めに、セルラーゼによる処理が行われている（ヨーロッ
パ特許第307,564号）。また、着色されたセルロース含
有繊維は繰り返し洗濯をすることによって毛羽が生じ、
着色生地の色を不鮮明にすることが知られている。そこ
で、洗剤中にセルラーゼを含ませることによって、毛羽
を除去し、着色生地の色を鮮明にする(色の澄明化)こと
から（ヨーロッパ特許第220,016号）、セルラーゼを含
んだ洗剤が欧米を中心に市販されている。

【０００４】かかる繊維加工においては、主に木材腐朽
菌であるトリコデルマ（Trichoderma）やフミコーラ（H
umicola）由来のセルラーゼが使用されている。従来、
セルラーゼはセルロース分解能を有する微生物を培養し
た培養ろ液を加工した複数のセルラーゼ成分を含む状態
で利用されていた。最近では経済性を高めるために、こ
れらセルラーゼ成分から繊維処理に高活性を有するエン
ドグルカナーゼのみを単離し、遺伝子工学的に増強した
セルラーゼ調製物が使用されている。例えば、繊維加工
用途においては、トリコデルマ・ロンジブラシアトゥム
(Trichoderma longibrachiatum)由来のＥＧＩＩＩ（特
表平８−５０７６９５号）、トリコデルマ・ビリデ(Tri
choderma viride)由来のＳＣＥ３（国際公開第ＷＯ９８
／５４３３２）、フミコーラ・インソレンス(Humicola
insolens)由来のＥＧIII(特表平５−５０９２２３号)や
ＮＣＥ４(ＷＯ９８／０３６４０)、リゾプス・オリゼー
(Rhizopus oryzae)由来のＲＣＥＩ、ＲＣＥＩＩ、ＲＣ
ＥＩＩＩ、ムコール・サーシネロイデス(Mucor circine
lloides)由来のＭＣＥＩ、ＭＣＥＩＩ、ファイコマイセ
ス・ニテンス(Phycomyces nitens)由来のＰＣＥＩ（国
際公開第ＷＯ００／２４８７９）などがある。

【０００５】一方、セルラーゼの効果を向上させるた
め、添加剤を併用することも今までに行われており、例
えば、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、
ポリアクリルアマイドなどの水溶性高分子がフミコーラ
・インソレンス由来のセルラーゼの効果を増強し、着色
生地の毛羽除去活性を向上させることが示されている
（特表平５−５０７６１５号）。また、トリコデルマ・
ビリデ（Trichoderma viride）の培養液のＣＭＣアーゼ
活性は、Tween20の添加によって向上することが知られ
ている（Ooshima, H. et al., Biotechnology and Bioe
ngineering 28:1727-1734, 1986）。しかしながら、上
記用途に使用されるセルラーゼはいずれもコストが高い
ため、工業的実用化レベルに見合うには、そのエンドグ
ルカーゼ活性をさらに向上させ、セルラーゼの有する上
記効果を効率的に発揮できる手段を提供することが望ま
れるところである。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明は、エ
ンドグルカナーゼ活性を向上させ、毛羽立ち除去などの
セルロース含有繊維改善を目的とした繊維処理を効率よ
くかつ安価に行うために好適に使用されうるセルラーゼ
調製物を提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、テレフタロイル基
などの芳香環を有する疎水基を分子内に有する水可溶性
又は水懸濁性ポリマーが、セルラーゼの効果向上作用を
有することが従来から知られていたポリエチレングリコ
ールよりもその効果が優れていることを見出し、本発明
を完成させるに至った。

【０００８】すなわち、本発明は、以下の（１）〜
（３）の発明に関する。 （１） セルロースバインディングドメイン（ＣＢＤ）
を有するエンドグルカナーゼと共に、一般式（Ｉ）：

【０００９】

【化２】

【００１０】（式中、ｎ，ｐは２から１０、ｍは０から
１０、ｏは、１から１０の整数を表す。）で示されるテ
レフタル酸−アルキレングリコールコポリマー又はテレ
フタル酸−オリゴアルキレングリコールコポリマーの単
独又は複数を含有させてなることを特徴とする、セルラ
ーゼ調製物。 （２） 上記セルラーゼ調製物を、洗剤成分に配合して
なる、洗剤組成物。 （３） 上記セルラーゼ調製物を、セルロース含有繊維
に作用させ、該繊維の性質を改善させることを特徴とす
る、繊維の処理方法。

【００１１】

【発明の実施の形態】[１] セルラーゼ調製物 本発明のセルラーゼ調製物は、セルロースバインディン
グドメイン（ＣＢＤ）を有するエンドグルカナーゼと、
テレフタル酸−アルキレングリコールコポリマー又はテ
レフタル酸−オリゴアルキレングリコールコポリマーの
単独又は複数を含んでなる。

【００１２】本発明において、エンドグルカナーゼとし
ては、セルラーゼ生産微生物により生産されるものであ
ればいずれも用いることが出来るが、これまでに明らか
にされているエンドグルカナーゼの一般的分子構造を元
に定義すれば、エンドグルカナーゼは反応に当りセルロ
ースと特異的に結合する部位であるセルロースバインデ
ィングドメイン（ＣＢＤと略記する）、セルロース分子
を加水分解する活性ドメイン（ＣＡＤと略記する）、Ｃ
ＢＤとＣＡＤをつなぐリンカー部分より構成される。糸
状菌のエンドグルカナーゼはＣＢＤを有するものとＣＢ
Ｄの無いものに分類することができる。本発明は、上記
ＣＢＤを有するエンドグルカナーゼを対象とし、トリコ
デルマ・ロンジブラシアトゥム由来のＥＧＩＩＩと称さ
れるエンドグルカナーゼに代表されるＣＢＤの無いセル
ラーゼには適用できない。本発明が適用されるセルラー
ゼの例としては、フミコーラ・インソレンス由来のＮＣ
Ｅ４、ＥＧＶ、トリコデルマ・レーセイ由来のＥＧＩ
Ｉ、トリコデルマ・ビリデ由来のＳＣＥ３を挙げること
が出来る。

【００１３】一方、本発明のセルラーゼ調製物に含有さ
せるテレフタル酸−アルキレングリコールコポリマー又
はテレフタル酸−オリゴアルキレングリコールコポリマ
ーとしては、具体的には、テレフタル酸ジエチレングリ
コールコポリマー、テレフタル酸トリエチレングリコー
ルコポリマー又はテレフタル酸テトラエチレングリコー
ルコポリマーで、平均分子量が500から10,000、好まし
くは1,000から5,000のものが挙げられる。かかるコポリ
マーは、単独で用いてもよいが、複数を混合して用いて
もよい。複数のコポリマーを用いる場合、コポリマーの
分子量、鎖長は異なってもよい。アルキレンとしては、
代表的にはエチレン、プロピレンが挙げられる。また、
コポリマーの末端は、部分的又は全てスルフォン酸化さ
れていてもよい。

【００１４】本発明のセルラーゼ調製物には、さらに無
機塩を５〜４０％添加してもよい。無機塩としては、リ
ン酸ナトリウム、リン酸カリウム、硫酸ナトリウムなど
が挙げられる。

【００１５】また、本発明のセルラーゼ調製物には、従
来からのセルラーゼ調製物に一般的に含まれている成
分、例えば賦形剤、防腐剤等を含有させることができ
る。また、セルラーゼ調製物の形態は、固形状であって
も液状であってもよく、具体的には粉剤、粒剤、顆粒
剤、非粉塵化顆粒剤、又は液体製剤が挙げられる。

【００１６】セルラーゼ調製物のひとつである非粉塵化
顆粒は、通常の乾式造粒法を用い製造することが可能で
ある。すなわち、粉末状態のセルラーゼ酵素を、硫酸ナ
トリウム、塩化ナトリウムなどの無機塩、ベントナイ
ト、モンモリナイトなどに代表される鉱物、及び澱粉、
粒状セルロースなどに代表される中性の有機物から選ば
れる１種又は複数に混合した後、上記のエンドグルカナ
ーゼの効果を向上させるテレフタル酸−アルキレングリ
コールコポリマー又はテレフタル酸−オリゴアルキレン
グリコールコポリマーの単独又は複数の粉末、あるいは
微細に懸濁された懸濁液を加え十分に混合又は混錬す
る。状況に応じ、固形物を結着させるポリエチレングリ
コールに代表される合成高分子やスターチなどの天然高
分子を適宜添加し更に混錬したのち、ディスクペレッタ
ーなどの押し出し成形造粒を行い、成形物をマルメライ
ザーにより球状に成形後、乾燥させることで非粉塵化顆
粒を製造することが可能である。もちろん、顆粒表面を
ポリマーなどでコーティングし酸素透過や水分透過をコ
ントロールすることも可能である。このとき、エンドグ
ルカナーゼの効果を向上させるテレフタル酸−アルキレ
ングリコールコポリマー又はテレフタル酸−オリゴアル
キレングリコールコポリマーの単独又は複数は、上記セ
ルラーゼ調製物に0.005〜10重量％、より好ましくは、
0.１〜５重量％添加する。

【００１７】一方、液状製剤は、セルラーゼ酵素溶液に
合成高分子や天然高分子などのエンドグルカナーゼ酵素
の安定化剤を配合し、必要に応じ無機塩類や合成防腐剤
を添加し調製することが可能である。このとき、エンド
グルカナーゼの効果を向上させるテレフタル酸−アルキ
レングリコールコポリマー又はテレフタル酸−オリゴア
ルキレングリコールコポリマーの単独又は複数を混合し
用いることが可能である。非粉塵化顆粒剤同様に、エン
ドグルカナーゼの効果を向上させるテレフタル酸−アル
キレングリコールコポリマー又はテレフタル酸−オリゴ
アルキレングリコールコポリマーの単独又は複数は上記
セルラーゼ調製物に0.005〜10重量％、より好ましく
は、0.1〜５重量％を添加する。

【００１８】[２] 洗剤組成物 上記の本発明によるセルラーゼ調製物は、公知の洗剤成
分、例えば、ビルダー、漂白剤、漂白活性剤、腐食防止
剤、金属イオン封鎖剤、汚れ解離ポリマー、香料、他の
酵素、酵素安定剤、製剤化補助剤、蛍光増白剤、発砲促
進剤等に配合して洗剤組成物とすることができる。本洗
剤組成物は、粒質土壌除去、色彩澄明化、脱毛羽立ち、
脱ピリング及び手粗さ軽減に関し、それらを改善するこ
とができる。

【００１９】[３] 繊維処理方法 本発明の繊維処理方法は、セルロースバインディングド
メイン（ＣＢＤ）を有するエンドグルカナーゼを、上記
のテレフタル酸−アルキレングリコールコポリマー又は
テレフタル酸−オリゴアルキレングリコールコポリマー
の存在下でセルロース含有繊維に作用させることにより
行う。本処理方法により改善されうる、セルロース含有
繊維の性質としては、以下のものが含まれる。 （１）毛羽の除去（毛羽立ち始める速度の低減、毛羽立
ちの低減） （２）着色セルロース含有繊維の色の局所的な変化の付
与、すなわち、着色セルロース含有繊維、代表的にはジ
ーンズへのストーンウオッシュ様の外観や風合いの付与 （３）着色セルロース含有繊維の色の澄明化

【００２０】上記の繊維処理方法は、典型的には洗濯中
に実施できるが、ソーキング又はすすぎ中に実施するこ
ともできる。本発明の繊維処理方法は、具体的には、繊
維が浸漬されているか又は浸漬されうる水に、本発明の
セルラーゼ調製物を添加することに行うことができる。

【００２１】接触温度、エンドグルカナーゼ活性を有す
る酵素の量などの条件は、他の種々の条件を勘案して適
宜決定されてよいが、例えばセルロース含有繊維の毛羽
立ち始める速度を低減するか又は毛羽立ちを低減する場
合、30〜60℃程度の温度で、1〜1,000 mg／Ｌのテレフ
タル酸−アルキレングリコールコポリマー又はテレフタ
ル酸−オリゴアルキレングリコールコポリマーと0.05〜
20mg/Ｌのタンパク濃度のエンドグルカナーゼ酵素を使
用することにより処理することができる。

【００２２】更に、着色セルロース含有繊維の色の局所
的な変化をもたらす場合、30〜60℃程度の温度で、1〜
1,000 mg／Ｌのテレフタル酸−アルキレングリコールコ
ポリマー又はテレフタル酸−オリゴアルキレングリコー
ルコポリマーと0.1〜20 mg／Ｌのタンパク濃度のエンド
グルカナーゼを使用することにより処理することができ
る。

【００２３】上記いずれの場合も、テレフタル酸−アル
キレングリコールコポリマー又はテレフタル酸−オリゴ
アルキレングリコールコポリマーの単独あるいは複数
は、水に溶解または懸濁した形で反応系に導入される。
ポリマーは水に完全に溶解されている必要はなく、部分
的に懸濁されていても効果を発揮できる。また、ポリマ
ーを添加した反応液に１〜100 mMの無機塩を添加するこ
とによりさらにセルラーゼ酵素の効果を増強できる。

【００２４】

【実施例】本発明を以下の実施例により更に詳細に説明
するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではな
い。以下において、「エンドグルカナーゼ活性」とは、
ＣＭＣアーゼ活性を意味する。さらに、「ＣＭＣアーゼ
活性」は、セルラーゼ酵素とカルボキシメチルセルロー
ス（ＣＭＣ、東京化成工業株式会社製）溶液を一定時間
インキュベーション後、遊離してくる還元糖量を測定
し、１分間に１μmolのグルコース相当の還元糖を生成
する酵素量を１単位と定義する。

【００２５】〔実施例１〕 （ポリマーによるセルラー
ゼのジーンズ脱色活性向上効果） ＮＣＥ４エンドグルカナーゼを、国際公開第ＷＯ98/036
40の記載に従い、フミコーラ・インソレンスＭＮ２００
−１に発現プラスミドｐＥＧＤ０１（図1）を導入する
ことによって得られた形質転換体を培養し、その培養上
清液を用いて、糊抜きした 12オンスのブルージーンズ
パンツの脱色処理を下記の条件にて行った。なお、上記
プラスミドｐＥＧＤ０１を導入した大腸菌（Escherichi
a coli/pEGD01）はＦＥＲＭ ＢＰ−５９７３（原寄託：
ＦＥＲＭ Ｐ−１５７２９、原寄託日：１９９６年７月
１２日）の受託番号のもと通商産業省工業技術院生命工
学工業技術研究所に寄託されている。また、上記フミコ
ーラ・インソレンスＭＮ２００−１は、ＦＥＲＭ ＢＰ
−５９７７（原寄託：ＦＥＲＭ Ｐ−１５７３６、原寄
託日：１９９６年７月１５日）の受託番号のもと通商産
業省工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託されてい
る。

【００２６】（試験条件） 処理液：水道水を用いて調製した6.7ｍＭリン酸緩衝液
(pH6.2)１５Ｌに、フミコーラ・インソレンス培養液
（ＮＣＥ４）、各種ポリマー、およびゴムボールを適当
量加えた。 試験機械：20kgワッシャー（三洋電機株式会社製 全自
動洗濯機 SCW5101） 温度：55℃ 時間：60分 pH：6.2 ポリマー添加量：各0.5ｇ ポリマーの種類：ポリエチレングリコール（分子量400
0、市販名：ＰＥＧ４０００、和光純薬製）、ポリエス
テル（テレフタル酸−テトラエチレングリコール共重合
体、市販名：ＦＲ５５０、互応化学社製）、ポリエーテ
ル（アルキルポリエチレングリコールエーテル、市販
名：ルテンソール、ＢＡＳＦ社製）

【００２７】（ジーンズ脱色活性評価方法）脱色度は分
光測色計（ミノルタ社製 ＣＭ−５２５１）を用い、Ｌ
ａｂ表示系のＬ値（明度）で評価した。コントロール
（脱色処理をしていない糊抜きブルージーンズパンツ）
に対する脱色処理後のブルージーンズパンツのＬ値の増
加（白色度の増加）＝ΔＬ値を求め、このΔＬ値により
脱色の度合いを評価した。すなわち、各試験区につき10
点のΔＬ値を測定し（ｎ＝１０）、その平均値を算出し
た。そして、ΔＬ値＝７となるのに必要なセルラーゼの
溶液量を基準に、セルラーゼ活性の向上率％を次のよう
にして算出した。まず、ポリマーを添加した場合としな
い場合について、ΔＬ値＝７となるために要するセルラ
ーゼ溶液量をそれぞれ求めた。次に、ポリマーを添加し
ない場合にΔＬ値＝７となるために要するセルラーゼ溶
液量を、ポリマーを添加した場合にΔＬ値＝７となるた
めに要するセルラーゼ溶液量で割った値に100を乗じた
値を、ポリマーによる脱色活性向上率とした。結果を表
１に示す。

【００２８】

【表１】

【００２９】表１に示されるように、ＮＣＥ４を用いた
ジーンズ脱色加工において、従来の知見でセルラーゼの
活性向上効果を示すとされているポリエチレングリコー
ル(PEG4000)とポリエーテル（ルテンソール）を添加し
た試験区では脱色活性向上効果はほとんどみられなかっ
たが、ポリエステル（テレフタル酸−テトラエチレング
リコール共重合体）に顕著なセルラーゼの脱色活性向上
効果が認められた。

【００３０】〔実施例２〕（ポリマーと無機塩併用によ
るセルラーゼのジーンズ脱色活性向上効果） 実施例１のデニム脱色活性測定において、ポリエステル
（テレフタル酸−テトラエチレングリコール共重合体、
市販名：ＦＲ５５０）を添加した反応液に無機塩として
20 mMリン酸ナトリウム(pH 6.2)、又は20 mM硫酸ナトリ
ウムを添加し、ジーンズ脱色活性への活性向上効果を調
べた。結果を表２に示す。

【００３１】

【表２】

【００３２】表２に示されるように、ジーンズ脱色加工
において、ポリエステル（テレフタル酸−テトラエチレ
ングリコール共重合体）を添加した反応液に無機塩を加
えると、さらにセルラーゼの脱色活性が向上することが
示された。

【００３３】〔実施例３〕（ポリマーによるセルラーゼ
のリヨセル毛羽除去活性効果） ＮＣＥ４エンドグルカナーゼを、国際公開第ＷＯ98/036
40の記載に従ってフミコーラ・インソレンスにて発現さ
せた。その培養上清液を用いて、大型ワッシャー内で毛
羽立たせたリヨセルニットの生地（豊島株式会社製 染
色生地 ９cm×10cm、重量２ｇ）の毛羽除去処理を下記
の条件にて行った。 （試験条件） 試験機械：洗濯堅牢度試験機 L-12（株式会社大栄科学
精器製作所製） 温度：55℃ 時間：60分 反応液量：40ml 反応pH：６（10mMリン酸緩衝液、脱イオン水を用いて調
製） ポリマーの種類及び添加量： ポリエチレングリコール
（分子量4000、市販名：ＰＥＧ４０００、和光純薬
製）、ポリエステル（テレフタル酸−テトラエチレング
リコール共重合体、市販名：ＦＲ５５０、互応化学社
製）、ポリエーテル（アルキルポリエチレングリコール
エーテル、市販名：ルテンソール、ＢＡＳＦ社製）各４
mg 処理液には、酵素溶液とともに、ゴムボールを適当量加
えた。

【００３４】ポリマーを添加した場合としない場合につ
いて、形成された毛羽が目視で完全に除去されるために
要するセルラーゼ溶液量をそれぞれ求めた。次に、ポリ
マーを添加しない場合に毛羽が完全に除去されるために
要するセルラーゼ溶液量を、ポリマーを添加した場合に
毛羽が完全に除去されるために要するセルラーゼ溶液量
で割った値に１００を乗じた値を、ポリマーによる毛羽
除去活性向上率とした。結果を表３に示す。

【００３５】

【表３】

【００３６】表３に示すように、リヨセルの毛羽取り加
工において、ポリエステル（テレフタル酸−テトラエチ
レングリコール共重合体）に顕著な毛羽除去活性向上効
果が認められた。

【００３７】〔実施例４〕 （ポリマーによる各種セル
ラーゼの活性向上効果） （１）セルロースバインディングドメイン（ＣＢＤ）が
ないエンドグルカナーゼＥＧＩＩＩの精製 市販セルラーゼ製剤であるＳｕｐｅｒＧＸ（Ｇｅｎｅｎ
ｃｏｒ社製）よりＥＧＩＩＩ成分の分画精製を行った。
ＳｕｐｅｒＧＸ製剤10ｇを200 mlの脱イオン水に懸濁し
30分間攪拌した。懸濁液全量を10,000 r.p.m.、30分間遠
心分離し、水不溶物を除去した。得られた水溶液に最終
濃度80 ％(V/V)となる様エタノールを添加し、析出した
沈殿物を10,000 r.p.m、30分間遠心分離することにより
集めた。沈殿全量を10 mlの50mM酢酸緩衝液（pH 4.
5）、１Ｍ硫酸アンモニウム溶液に溶解し、このうち0.5
mlを50mM酢酸緩衝液（pH 4.5）、１Ｍ硫酸アンモニウ
ム溶液で平衡化したButyl‐Toyopearl 650M（10 mm×10
cm）に供し、流速4.0 ml/min、50mM酢酸緩衝液（pH 4.
5）、脱イオン水、20 ％エタノールの順に溶離した。20
％エタノール溶離液に溶出した活性画分を集め凍結乾
燥し、１mgの蛋白を得た。活性画分は、以下に記載の綿
毛羽取り活性によって評価した。Ｎ末端近傍残基分析、
リシルエンドフラグメントの配列分析より、得られた蛋
白をＥＧＩＩＩと同定した。

【００３８】（２）セルロースバインディングドメイン
（ＣＢＤ）があるエンドグルカナーゼ 国際公開第ＷＯ98/54322の方法に従い、トリコデルマ・
ビリデＭＣ３００−１〔ＦＥＲＭ ＢＰ−６０４７（原
寄託：ＦＥＲＭ Ｐ−１５８４２、原寄託日：１９９６
年９月９日の受託番号のもと通商産業省工業技術院生命
工学工業技術研究所に寄託されている〕にて発現させ、
精製したＳＣＥ３、および国際公開第ＷＯ98/03640の記
載に従い、フミコーラ・インソレンスＭＮ２００−１に
発現プラスミドｐＥＧＤ０１（図１）を導入することに
よって得られた形質転換体にて発現させ、精製したＮＣ
Ｅ４を用いた。なお、ＳＣＥ３をコードする塩基配列を
配列番号１に、またＮＣＥ４をコードする塩基配列を配
列番号２にそれぞれ示す。

【００３９】（３） 綿毛羽除去活性測定 上記の各種精製エンドグルカナーゼ（ＳＣＥ３、ＥＧＩ
ＩＩ、ＮＣＥ４）を用い、ポリエステル（テレフタル酸
−テトラエチレングリコール共重合体、市販名：ＦＲ５
５０ （互応化学社製））によるセルラーゼ活性向上効
果を無染色の綿ニット生地（日東紡績株式会社製 綿ス
ムースニットNo.3900を大型ワッシャー中で毛羽立たせ
たもの、9cm×10cm）の毛羽除去処理を下記条件で行う
ことによって評価した。 （試験条件） 試験機械：洗濯堅牢度試験機 L-12（株式会社大栄科学
精器製作所製） 温度：55℃ 時間：120分 反応液量：40ｍｌ 反応pH：ＮＣＥ４、ＥＧＩＩＩはｐＨ６（５0mM酢酸緩
衝液）、 ＳＣＥ３はｐＨ 4.5（５0mM酢酸緩衝液） 緩衝液は、いずれも脱イオン水を用いて調製した。ポリ
マーの種類と添加量：ＦＲ５５０（互応化学社製）４ｍ
ｇ精製エンドグルカナーゼ酵素液とともにゴムボールを
適当量加えた。

【００４０】ＦＲ５５０を添加した場合としない場合に
ついて、形成された毛羽が目視で完全に除去されるため
に要するセルラーゼ溶液量をそれぞれ求めた。次に、Ｆ
Ｒ５５０を添加しない場合に毛羽が完全に除去されるた
めに要するセルラーゼ溶液量を、ＦＲ５５０を添加した
場合に毛羽が完全に除去されるために要するセルラーゼ
溶液量で割った値に１００を乗じた値を、ＦＲ５５０に
よる毛羽除去活性向上率とした。結果を表４に示す。

【００４１】

【表４】

【００４２】表４に示されように、ＣＢＤを有するＳＣ
Ｅ３、 ＮＣＥ４に関してはポリエステル（テレフタル
酸−テトラエチレングリコール共重合体）による活性向
上効果を観察できたが、ＣＢＤがないＥＧＩＩＩでは逆
効果であることが判明した。

【００４３】〔実施例５〕 （テレフタル酸−エチレン
グリコールコポリマー又はテレフタル酸−オリゴエチレ
ングリコールコポリマーを効果量含有する非粉塵性粒剤
セルラーゼ調製物の製造） 下記表５に示す原材料を混合後、10 ％の水を添加し混
錬する。混錬物をディスクペレッターに送り成形加工し
た。得られた射出物をマルメライザー（不二パウダル社
製）を用い粒状とし、乾燥、篩かけし造粒物を得た。

【００４４】

【表５】

【００４５】

【発明の効果】本発明によれば、テレフタル酸−アルキ
レングリコールコポリマー又はテレフタル酸−オリゴア
ルキレングリコールコポリマーを含有させることによっ
て、セルロースバインディングドメイン（ＣＢＤ）を有
するエンドグルカナーゼ活性を飛躍的に向上させたセル
ラーゼ調製物が提供される。当該セルラーゼ調製物をセ
ルロース含有繊維の毛羽立ちの低減、色の澄明化、色の
局所的変化などの繊維加工処理に用いることにより、よ
り少ない酵素量で各処理の実施が可能になり、大幅にコ
ストが低減化される。

【００４６】

【配列表】 SEQUENCE LISTING <110> MEIJI SEIKA KAISHA, LTD. <120> Cellulase preparations containing polymer and method for treating fabrics <130> P00-0836 <160> 2 <170> PatentIn Ver. 2.0 <210> 1 <211> 1720 <212> DNA <213> Trichoderma viride <220> <221> intron <222> (500)..(682) <400> 1 ggtgtgtcat ttctcctcaa catactgcct ttcaacaact ttcgcctcct ccctggcctg 60 atatcccaat atcagttttt cccaaagtag caagtcatca gtaaatctgc tcatctatca 120 ttaatcagtg cccatagtgt ctgtctgttg attgcctccc gccatacacg atgaacagga 180 ccatggctcc attgctgctt gcagcgtcga tactcttcgg gggcgctgct gcacaacaga 240 ctgtctgggg acagtgtgga ggtattggtt ggagcggacc tacgagttgt gctcctggat 300 cagcttgttc tactctcaat ccttattatg cgcaatgcat tccgggggcc actagtatca 360 ccacctcgac ccgacccccc tcgggtccaa ccaccaccac cagagccacc tcaacgacct 420 catctccgcc accgaccagc tctggagttc gatttgctgg cgttaacatc gcgggctttg 480 acttcggatg taccacagag tatgtcttca tgttgcatag tgttgctggc tgagtattct 540 gggcggatga tttatagctg tgcgggctgc aaaacaccgc cggtctgcca ctatcaaggc 600 atagttgata ggcggcggtg ttttcttcaa tcccctgatt acactctcaa gaatctagtg 660 gctgatggat gtatgattac agtggcactt gcgttacatc gaaggtttat cctccgttga 720 agaacttcac tggggcaaac aactacccgg acggtatcgg ccagatgcag cacttcgtca 780 acgatgatgg gatgactatt ttccgcctac ccgtcggatg gcagtacctc gtaaacaaca 840 atctgggtgg aactctcgat tccaccagta tctcgaagta tgatcagctc gttcaggggt 900 gcctgtctct cggtgtatac tgcatcatcg acatccacaa ttatgctcga tggaacggtg 960 gaatcattgg ccagggaggc cctacaaatg cccagtttac cagtctttgg tcgcagttgg 1020 catcgaagta cgcgtctcag tcgagggtgt ggttcggaat aatgaatgag ccccacgacg 1080 tgaacatcaa cacttgggct gccacggttc aagaggtcgt cactgcaatc cgcaacgccg 1140 gtgctacgtc gcaatacatt tctctgcctg gaaatgatta tcaatctgcg gcagctttta 1200 tttccgatgg cagtgcagcc gccctgtctc aggtaacgaa ccctgatgga tcaacaacga 1260 atctaatctt cgatgtccac aagtacttag actcggacaa ctccggtact cacgccgaat 1320 gcactacaaa caacatcgac ggcgcctttg ctcctctcgc cacttggctt cgacagaaca 1380 accgccaggc tattctgacg gaaaccggcg gtggcaatgt tcagtcctgc atccaagatt 1440 tgtgccaaca gatccagtac ctcaaccaga actcagatgt ctatcttggc tatgctggct 1500 ggggtgccgg ttcatttgat agcacttata ttctgacgga aacgcctact ggaagcggta 1560 actcgtggac ggacacatcc ctagttagct cgtgtctcgc caggaagtaa caccgaggtc 1620 gattgcagga gccttgtcaa tagcgatttc atcttgctgt acataattct tactctctga 1680 agccgcttgt tctgggtatg tgtcttgaca ggtttctaga 1720 <210> 2 <211> 1257 <212> DNA <213> Humicola insolens <220> <221> intron <222> (453)..(509) <400> 2 aatgacgggg caacctcccg cccgggccca actcttgggt ttggtttgac aggccgtctg 60 tctcttgcgt cctcttacta cgcctgcctg gaccctacgt ctcaactccg attcaagatg 120 cgttcctccc ctctcctccg ctccgccgtt gtggccgccc tgccggtgtt ggcccttgcc 180 gctgatggca agtccacccg ctactgggac tgctgcaagc cttcgtgcgg ctgggccaag 240 aaggctcccg tgaaccagcc tgtcttctcc tgcaacgcca acttccagcg tctcactgac 300 ttcgacgcca agtccggctg cgagccgggc ggtgtcgcct actcgtgcgc cgaccagacc 360 ccatgggctg tgaacgacga cttcgcgttc ggttttgctg ccacctctat tgccggcagc 420 aatgaggcgg gctggtgctg cgcctgctac gagtaagctt tggtcgcgtg tgtaacactg 480 tgcaggcata gcactaacca cctcccaggc tcaccttcac atccggtcct gttgctggca 540 agaagatggt cgtccagtcc accagcactg gcggtgatct tggcagcaac cacttcgatc 600 tcaacatccc cggcggcggc gtcggcatct tcgacggatg cactccccag ttcggcggtc 660 tgcccggcca gcgctacggc ggcatctcgt cccgcaacga gtgcgatcgg ttccccgacg 720 ccctcaagcc cggctgctac tggcgcttcg actggttcaa gaacgccgac aacccgagct 780 tcagcttccg tcaggtccaa tgcccagccg agctcgtcgc tcgcaccgga tgccgccgca 840 acgacgacgg caacttccct gccgtccaga tcccctccag cagcaccagc tctccggtcg 900 gccagcctac cagtaccagc accacctcca cctccaccac ctcgagcccg cccgtccagc 960 ctacgactcc cagcggctgc actgctgaga ggtgggctca gtgcggcggc aatggctgga 1020 gcggctgcac cacctgcgtc gctggcagca cctgcacgaa gattaatgac tggtaccatc 1080 agtgcctgta aacgcagggc agcctgagaa ccttactggt tgcgcaacga aatgacactc 1140 ccaatcactg tattagttct tgtacataat ttcgtcatcc ctccagggat tgtcacatat 1200 atgcaatgat gaatactgaa cacaaacctg gccgcttgaa ctggccgaag gaatgcc 1257

【００４７】

【図面の簡単な説明】

【図１】プラスミドｐＥＧＤ０１の構造を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｄ０６Ｌ 3/11 Ｄ０６Ｌ 3/11 Ｄ０６Ｍ 16/00 Ｄ０６Ｍ 16/00 Ａ // Ｃ１２Ｎ 9/42 Ｃ１２Ｎ 9/42 15/09 ＺＮＡ (Ｃ１２Ｎ 9/42 (Ｃ１２Ｎ 9/42 Ｃ１２Ｒ 1:645） Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｎ 9/42 (Ｃ１２Ｎ 9/42 Ｃ１２Ｒ 1:885） Ｃ１２Ｒ 1:885） Ｄ０６Ｍ 101:06 Ｄ０６Ｍ 101:06 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ (72)発明者 古賀 仁一郎 埼玉県坂戸市千代田５−３−１ 明治製菓 株式会社生物科学研究所内 (72)発明者 河野 敏明 埼玉県坂戸市千代田５−３−１ 明治製菓 株式会社生物科学研究所内 Ｆターム(参考） 4B024 AA20 BA12 CA01 DA11 EA04 GA11 4B050 CC03 CC07 DD03 GG03 HH04 KK02 KK16 LL04 4H003 DA01 EA07 EB38 EC03 FA21 4L031 BA39 DA00 DA01 DA09

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 セルロースバインディングドメイン（Ｃ
   ＢＤ）を有するエンドグルカナーゼと共に、一般式
   （Ｉ）： 【化１】 （式中、ｎ，ｐは２から１０、ｍは０から１０、ｏは、
   １から１０の整数を表す。）で示される、テレフタル酸
   −アルキレングリコールコポリマー又はテレフタル酸−
   オリゴアルキレングリコールコポリマーの単独又は複数
   を含有させてなることを特徴とする、セルラーゼ調製
   物。
2. 【請求項２】 コポリマーが、テレフタル酸−ジエチレ
   ングリコールコポリマー、テレフタル酸−トリエチレン
   グリコールコポリマー又はテレフタル酸−テトラエチレ
   ングリコールコポリマーである請求項１に記載のセルラ
   ーゼ調製物。
3. 【請求項３】 無機塩をさらに添加することを特徴とす
   る、請求項１又は２に記載のセルラーゼ調製物。
4. 【請求項４】 コポリマーの末端が、部分的又は全てス
   ルフォン酸化されていることを特徴とする、請求項１〜
   ３のいずれか一項に記載のセルラーゼ調製物。
5. 【請求項５】 コポリマーの平均分子量が500から10,00
   0である、請求項１〜４のいずれか一項に記載のセルラ
   ーゼ調製物。
6. 【請求項６】 コポリマーをセルラーゼ調製物に、0.1
   〜50重量％含有させる、請求項１〜５のいずれか一項に
   記載のセルラーゼ調製物。
7. 【請求項７】 飛散性のない顆粒状又は安定化された液
   体状である、請求項１〜６のいずれか一項に記載のセル
   ラーゼ調製物。
8. 【請求項８】 請求項１〜７のいずれか一項に記載のセ
   ルラーゼ調製物を、洗剤成分に配合してなる、洗剤組成
   物。
9. 【請求項９】 請求項１〜７のいずれか一項に記載のセ
   ルラーゼ調製物を、セルロース含有繊維に作用させ、該
   繊維の性質を改善させることを特徴とする、繊維の処理
   方法。
10. 【請求項１０】 繊維の性質の改善が、色の澄明化であ
    る、請求項９に記載の方法。
11. 【請求項１１】 繊維の性質の改善が、毛羽の除去であ
    る、請求項９に記載の方法。
12. 【請求項１２】 繊維の性質の改善が、ストーンウオッ
    シュ様外観や風合いの付与である、請求項９に記載の方
    法。
13. 【請求項１３】 テレフタル酸−アルキレングリコール
    コポリマー又はテレフタル酸−オリゴアルキレングリコ
    ールコポリマーの単独あるいは複数を、反応系において
    1〜1,000 mg／Ｌの濃度で存在させる、請求項９に記載
    の方法
14. 【請求項１４】 繊維の浸漬、洗濯、又はすすぎ工程で
    行うことを特徴とする、請求項９に記載の方法。