JP2002510756A

JP2002510756A - ペクチン分解酵素によるデニム織物の処理

Info

Publication number: JP2002510756A
Application number: JP2000542517A
Authority: JP
Inventors: カルム，リスベス; コングガールトアンデルセン，ベンテ
Original assignee: ノボザイムスアクティーゼルスカブ
Priority date: 1998-04-03
Filing date: 1999-03-31
Publication date: 2002-04-09
Also published as: WO1999051808A1; ATE333529T1; EP1066422A1; ES2270589T3; DE69932420D1; AU3026199A; EP1066422B1

Abstract

(57)【要約】染色されたデニム織物または衣服の表面に、色密度のむらのある局部的な領域を導入する方法であって、その方法が織物または衣服と、好ましくはペクチンリアーゼ（ＥＣ４．２．２．１０）、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．１．８９）、アラビナナーゼ（ＥＣ３．２．１．９９）、ペクチンエステラーゼ（ＥＣ３．１．１．１１）、マンナナーゼ（ＥＣ３．２．１．７８）、ポリガラクツロナーゼ（ＥＣ３．２．１．１５）、およびペクチン酸リアーゼ（ＥＣ４．２．２．２）からなる群から選択された有効量のペクチン分解酵素を含む水性組成物とを、水性組成物のｐＨが３と１１の間、温度９０℃以下で接触させることを含む方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（発明の分野）本発明は、ペクチン分解酵素によるデニム織物の処理方法、より具体的にはデ
ニム織物または衣服の表面に酵素によりストーンウォッシュ仕上を導入する方法
、デニムの従来の酵素によるストーンウォッシュ加工を改良する方法、および従
来の仕上工程の間にペクチン分解酵素を用いてデニム織物から裏側に染みついた
染料を除去する方法に関する。

【０００２】（発明の背景）デニム織物の人気は、あらゆる年代層の消費者の間で世界中の多くの国々にお
ける売上によりよく記録が採られている。デニムのほとんどは綿布である。デニムの従来の染料は独特の青色を有するイ
ンジゴ染料であり、インジゴで染色したデニム布は、普通に摩耗し、引き裂かれ
たときデニムに青色の上に白色の外観を与える、染めらされた糸が白い糸に変わ
る好ましい特性を有する。

【０００３】デニムの人気のファッションは、ストーンウォッシュ加工または着古した外観
である。デニムジーンズまたはその他の衣服をストーンウォッシュ加工すること
は昔からよく知られており（ＡｍｅｒｉｃａｎＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆ
ＴｅｘｔｉｌｅＣｈｅｍｉｓｔｓａｎｄＣｏｌｏｒｉｓｔｓ：「Ｇａｒ
ｍｅｎｔＷｅｔＰｒｏｃｅｓｓｉｎｇＴｅｃｈｎｉｃａｌＭａｎｕａｌ
」，ＮｏｒｔｈＣａｒｏｌｉｎａ，Ｕ．Ｓ．Ａ（１９９４））、それは製品を
小売店で販売する前に老化過程を加速させるために初めから研磨用の石による洗
濯を用いることによる、後にはこれらの洗浄技術に塩素漂白を導入することによ
る、またこの数年においてはセルロース分解酵素を単独または摩耗用の石と併用
すること（国際出願第９０／０２７９０号）によるものである。

【０００４】しかしながら、多くのセルラーゼは不溶性のセルロースに対する活性を有し、
当該セルロース織物の強度を低下させる結果となる可能性がある。したがって、
本発明の目的は、「ストーンウォッシュ加工」の外観、「着古した」外観、また
は色密度の局部的むらをもつ織物または衣服を提供することによる当業界で知ら
れている任意の他の流行の外観を備えた織物または衣類を製造するための酵素法
を創出することであって、用いられた酵素は不溶性セルロースに対して活性がな
いか、またはわずかなきわめて低い活性を有する。

【０００５】（発明の概要）染色されたデニム織物または衣服をペクチン分解活性を有する酵素による酵素
処理にかけることができ、それにより織物または衣服のストーンウォッシュ加工
の外観、または従来の酵素（セルロース分解）によるストーンウォッシュ工程を
改良することができ、あるいは従来のデニム仕上工程に適用した場合、織物また
は衣服から裏側に染みついた染料を除去することができることが分かった。

【０００６】したがって第一の態様において、本発明は染色されたデニム織物または衣服の
表面に、色密度のむらの局部的領域を導入する方法に関し、その方法は織物また
は衣服を有効量のペクチン分解酵素を含む水性組成物と接触させることを含む。
ペクチン分解酵素は、好ましくはペクチン酸リアーゼ、ペクチンリアーゼ、およ
びポリガラクツロナーゼからなる群から選択される。

【０００７】第二の態様において、本発明は染色されたデニム織物または衣服の改良された
酵素によるストーンウォッシュ加工の方法を提供し、その方法は織物または衣服
を、織物または衣服の酵素による摩耗を起こすのに有効な量のセルロース分解酵
素およびペクチン分解酵素を含む水性組成物と接触させることを含む。さらに進んだ態様において、本発明はまた仕上加工の間に織物または衣服から
裏側に染みついた染料を除去する方法を提供し、その方法は有効量のペクチン分
解酵素を含む水性組成物で衣服を処理することを含む。

【０００８】（発明の詳細な説明）織物：本発明はデニム織物（ｆａｂｒｉｃ）または衣服、すなわちセルロース繊維か
ら作られたデニム織物、特に綿の処理に関する。綿繊維は単一生体細胞である。細胞構造の層は、外側からジンシード、角皮、
一次壁、二次壁、および内腔がある。これらの層は構造的および化学的に異なっ
ている。第一および第二壁は異なる結晶化度ならびに異なる分子鎖配向を有する
。ろう、タンパク質、およびペクチンから構成される角皮は、繊維重量の２．５
％を占め、非晶質である。一次壁は繊維重量の２．５％を占め、結晶化度が３０
％で、セルロースから構成される。二次壁は繊維重量の９１．５％を占め、結晶
化度が７０％で、セルロースから構成される。内腔は原形質の残分から構成され
る。ろう状物質は主に原料綿の非吸収特性に対応していることが知られている。
またペクチンは、ペクチン中のカルボキシル基の８５％がメチル化されているた
め影響があるかも知れない（ＴｅｘｔｉｌｅＣｈｅｍｉｓｔｓａｎｄＣｏ
ｌｏｒｉｓｔｓ，１９９７，Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．８，ｐ．７１〜７６中のＬｉ
，Ｙ．およびＨａｒｄｅｎ，Ｉ．Ｒ．の論文）。この文脈において用語「ペクチ
ン」は、ペクチン酸エステル、ポリガラクツロン酸、および高度または低度にエ
ステル化されている可能性のあるペクチンを指す。

【０００９】好ましくは、デニムの糸、織物、または衣服の染色はリング染色である。本発
明の好ましい実施形態は、インジゴなどの建染染料、またはチオインジゴなどの
インジゴと同系の染料、またはイオウ染料、または直接染料、または反応性染料
、またはナフトールによる糸のリング染色である。また、糸を２種類以上の染料
、例えば始めにイオウ染料、次に建染染料、またはその逆で染めてもよい。イン
ジゴは、インジゴ植物原料、合成、またはＧｅｎｅｎｃｏｒＩｎｔｅｒｎａｔ
ｉｏｎａｌから入手可能の生合成インジゴから誘導することができる。経糸は、
当業界で既知の方法により、一般には糸は当該染料（例えば還元された（ロイコ
）形態のインジゴ）を含有する染料浴中に繰返し浸漬する連続工程を用いて染色
することができる。各浸漬に続いてインジゴを、酸素に糸を曝すことにより酸化
する（スカイングとして知られる工程）。別法では、インジゴを当業界で既知の
他の酸化剤により酸化してもよい。

【００１０】染色は下記の方法で行なうことができる。すなわち、初めに乾燥した経糸を、
一般に湿潤剤、キレート剤、および水酸化ナトリウムを含有する湿潤用混合物に
より予め湿潤させる。次いで経糸を染料浴に５〜６０秒間浸漬し、搾り、大気中で１〜３分間酸化す
る。処理は、当業界で知られている４回浸漬、８回浸漬、または他の処理回数と
して実施することができる。従来どおり染料浴は水、インジゴ染料、水酸化ナト
リウム、および任意選択でハイドロサルファイトまたは他のキレートもしくは湿
潤剤を含む。

【００１１】染色操作の後、任意選択で染色された糸は製織前に糊付けされる。本発明の方法に用いられるペクチン分解酵素の有効量は、ペクチナーゼの純度
および比活性、接触時間、ｐＨ、水性のプロセス媒体の温度、研磨剤（浮石（ｐ
ｕｍｉｃｅ）、パーライト（ｐｅｒｌｉｔｅ）、けいそう土（ｄｉａｔｏｍａｃ
ｅｏｕｓｅａｒｔｈ）、ＥＣＯの球）の存在、および織物（例えばデニム）の
湿潤処理に用いた装置を含む幾つかのよく知られた変数に応じて変わることにな
ることは当業技術者ならば理解するはずである。織物の湿潤処理装置：機械的作用は、織物、具体的にはデニムを加工する場合、所望の摩耗レベルを
得るために考慮しなければならないきわめて重要な変数である。機械の設計は所
望の摩耗レベルを得るために重要な役割を演じる。摩耗は織物対織物、織物対金
属、または織物対石／摩耗用の接触物により起こる。

【００１２】機械は主に洗濯機として機能する。デニムの加工は工業用の洗濯業者の中で始
まったので、ほとんどの装置は洗濯用の機械の手直しであった。今日、二つの主
なカテゴリーが存在する、すなわちウォッシャ・エクストラクタおよびバレルマ
シンである。ウォッシャ・エクストラクタは抽出を可能にする内部回転ドラムを
有することが特徴であり、ウォッシャ・エクストラクタには二つの基本設計、す
なわち前面装填型および横型の洗濯機である。シリンダの設計は広範囲に変わる
。前面装填ウォッシャ・エクストラクタのシリンダの直径は、一般にシリンダの
長さより大きい。それは水平な軸に沿って回転し、先端の開口部を通して装填さ
れる。側部装填型の機械は、基本設計原理では前面装填のものと似ているが、シ
リンダは直径より長く、水平軸に沿って回転し、側部の開口を通して装填される
。

【００１３】邪魔板がドラムの内側から突き出ており、より十分な摩耗のために衣服が移動
し続けるのを助ける。衣服は邪魔板の助けによりドラムの頂上まで持ち上げられ
、次いで洗浄液中に落とされる。バレル（または六角形）型洗濯機はただ１個のドラムにより設計される。この
機械は、特にストーンウォッシュ加工ジーンズ用に設計される。織物対織物およ
び織物対ドラムの接触の双方から得られる機械的効果がきわめて大きく、きわめ
て有効なストーンウォッシュ加工を与える。

【００１４】本発明によるとバレルウォッシャが好ましい。酵素：本明細書中に示される用語「ペクチン分解酵素」または「ペクチナーゼ」には
、当業技術により定義される任意のぺクチナーゼ酵素が含まれることを意図して
おり、ここでペクチナーゼはペクチン質、すなわち主にポリ−１，４−α−Ｄ−
ガラクツロニドおよびその誘導体（Ｓａｋａｉ等の論文、Ａｄｖａｎｃｅｓｉ
ｎＡｐｐｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙｖｏｌ．３９，１９９３中の
「Ｐｅｃｔｉｎ，ｐｅｃｔｉｎａｓｅａｎｄｐｒｏｐｅｃｔｉｎａｓｅ：ｐ
ｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ｓ」，ｐｐ２１３〜２９４を参照）のグリコシド結合を加水分解する酵素群の一
つであり、その酵素は成熟したタンパク質またはその前駆体形態あるいは本質的
に完全な長さの酵素の活性を有するその機能断片を含むと考えられる。さらに用
語「ペクチン分解」酵素には、そのような酵素の相同体または構造類似体が含ま
れることを意図している。

【００１５】好ましくは、本発明の方法に有用なペクチン分解酵素は、ポリ（１，４−α−
Ｄ−ガラクツロニド）リアーゼとしても知られ、またペクチン酸リアーゼとして
も知られる酵素分類ポリガラクツロン酸リアーゼ（ＥＣ４．２．２．２）（ＰＧ
Ｌ）などの、トランス位脱離によりポリガラクツロン酸とも呼ばれるペクチン酸
中のα−１，４−グリコシド結合のランダム分割を触媒するペクチナーゼ酵素で
ある。また好ましくは、エンド−ＰＭとしても知られる酵素分類ポリガラクツロ
ナーゼ（ＥＣ３．２．１．１５）（ＰＧ）などのペクチン酸のα−１，４−グリ
コシド結合のランダム加水分解を触媒するペクチナーゼ酵素である。また好まし
くは、エンド−ＰＭＧＬとしても知られ、またポリ（メチオキシガラクツロニド
）リアーゼとしても知られ、またペクチンのα−１，４−グリコシド結合のラン
ダム加水分解を触媒するペクチンリアーゼとしても知られる、ポリメチルガラク
ツロン酸リアーゼ（ＥＣ４．２．２．１０）（ＰＭＧＬ）などのペクチナーゼ酵
素である。その他の好ましいペクチナーゼには、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．
１．８９）、アラビナナーゼ（ＥＣ３．２．１．９９）、ペクチンエステラーゼ
（ＥＣ３．１．１．１１）、およびマンナナーゼ（ＥＣ３．２．１．７８）があ
る。

【００１６】本発明に有用な酵素の調製は、好ましくは微生物、好ましくは細菌、古細菌、
または真菌、特にＢａｃｉｌｌｕｓに属する細菌、好ましくはＢａｃｉｌｌｕｓ
ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ種および整列した１６５ｒＤＮＡ配列の基づいて
全ての種がＢａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓに少なくとも９０％
相同である高度に同族のＢａｃｉｌｌｕｓ種からなる群から選択される好アルカ
リ性Ｂａｃｉｌｌｕｓ株に属する細菌などの細菌から誘導される。このような種
の具体例には、Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌ
ｏｐｈｉｌｕｓ、およびＢａｃｉｌｌｕｓｃｌａｒｋｉｉがある。具体的なき
わめて好ましい例には、種ＢａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓＡ
ＴＣＣ１４５８０がある。その他の有用なペクチン酸リアーゼは、種Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ、特にＮＣＩＭＢ４０４８２として寄託さ
れた株から；また種Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓａｃｕｌｅａｔｕｓ、特にその全
体をここに参照として合体する国際出願第９４／１４９５２号および国際出願第
９４／２１７８６号に開示された株および酵素から；また種Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ
、Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｏｈｎｉｉ、Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｅｒｗｉｎｉａｓｐ
．９４８２、特に株ＦＥＲＭＢＰ−５９９４、およびＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌ
ｕｓｐｏｌｙｍｙｘａから誘導することができる。

【００１７】ペクチン分解酵素は、上記で確認したものを含む幾つかの異なるペクチン分解
酵素成分を大部分含む酵素系のような、所与の微生物により産生された酵素系の
中に現れる成分であってもよい。別法では、ペクチン分解酵素は単一成分、すなわち所与の微生物により産生さ
れた酵素系の中に現れる可能性がある他のペクチナーゼ酵素を本質的に含まない
成分であってもよく、一般にこの単一成分は、組換え成分、すなわちＤＮＡ配列
により形質転換され、宿主中に発現した単一成分、続いて細胞をコード化するＤ
ＮＡ配列のクローニングにより産生されたものである。このような有用な酵素、
特にペクチン酸リアーゼ、ペクチンリアーゼ、およびポリガラクツロナーゼは、
例えば出願人等の同時係属の国際出願番号ＤＫ９８／００５１４号およびＤＫ９
８／００５１５号に詳細に記載されており、これらは配列表を含めて全て参照に
よりここに合体される。宿主は、好ましくは非相同の宿主であるが、宿主はある
条件下においてはまた相同の宿主であってもよい。

【００１８】本発明の方法において用いられるペクチナーゼは任意の適切な技術を用いて微
生物から採取あるいは誘導することができる。例えばペクチナーゼの調製は、当
業界で既知の方法により発酵したブイヨンまたは微生物から調製することを含む
微生物の発酵とそれに続くペクチナーゼの単離により、しかしより好ましくは当
業界で既知の組換えＤＮＡの技術を使用することにより得ることができる。通常
このような方法は、酵素の発現および培養物から酵素の回収を可能にする条件下
の培地中において、当該ペクチナーゼをコード化するＤＮＡ配列を発現し、媒介
することができる組換えＤＮＡベクターで形質転換された宿主細胞を培養するこ
とを含む。また、本発明の酵素組成物で構成される成分は、酵素系の一部として
所与の微生物により産生するなど、従来の技術により産生することもできる。

【００１９】また、本発明に有用なペクチン減成酵素は、触媒ドメインを備える酵素コアに
加えてさらにセルロース結合ドメイン（ＣＢＤ）を備えてもよく、この酵素のセ
ルロース結合ドメインと酵素コア（触媒的に活性なドメイン）は動作可能に連結
している。セルロース結合ドメイン（ＣＢＤ）は、コード化された酵素の必須部
分として存在することができ、あるいは別の起源のＣＢＤをペクチン減成酵素に
導入して酵素の雑種を創出することもできる。この文脈において用語「セルロー
ス結合ドメイン」は、ＪｏｈｎＮ．ＳａｄｄｌｅｒおよびＭｉｃｈａｅｌＨ
．編「ＥｎｚｙｍａｔｉｃＤｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆＩｎｓｏｌｕｂｌ
ｅＣａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ」，ＡＣＳＳｙｍｐｏｓｉｕｍＳｅｒｉｅ
ｓ，Ｎｏ．６１８，１９９６の中のＰｅｔｅｒＴｏｍｍｅ等の論文「Ｃｅｌｌ
ｕｌｏｓｅ−ＢｉｎｄｉｎｇＤｏｍａｉｎｓ：Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ａｎｄＰｒｏｐｅｒｔｉｅｓ」により定義されているものと理解されること
を意図している。この定義は、１２０を超えるセルロース結合ドメインを１０類
（Ｉ−Ｘ）に分類し、ＣＢＤがセルラーゼ、キシラナーゼ、マンナナーゼ、アラ
ビノフラノシダーゼ、アセチルエステラーゼ、およびキチナーゼなどの様々な酵
素に見出され、またＣＢＳは藻類、例えば非加水分解性の多糖類結合タンパク質
としての赤藻Ｐｏｒｐｈｙｒａｐｕｒｐｕｒｅａにも見出されることを示して
おり、前掲引用書のＴｏｍｍｅ等の論文を参照されたい。しかしながら、大部分
のＣＢＤはセルラーゼおよびキシラナーゼ由来のものであり、ＣＢＤはタンパク
質のＮおよびＣ末端、またはその内部に見出される。酵素の雑種は当業界で知ら
れており、例えば国際出願第９０／００６０９号および第９５／１６７８２号に
見られるように、ペクチン減成酵素をコード化し、また融合遺伝子を発現させる
ために宿主細胞を増殖させるＤＮＡ配列に、リンカー付きまたは無しで結合した
セルロース結合ドメインをコード化するＤＮＡ断片を少なくとも含むＤＮＡ構築
物を宿主細胞に形質転換することにより調製することができる。酵素の雑種は下
記の式で表わすことができる。すなわち、ＣＢＤ−ＭＲ−Ｘ上式で、ＣＢＤは少なくともセルロース結合ドメインに対応するアミノ酸配列の
Ｎ末端またはＣ末端領域であり；ＭＲは中間領域（リンカー）であって、結合、
または好ましくは炭素原子約２から約１００個、より好ましくは炭素原子２から
４０個、あるいは好ましくはアミノ酸約２から約１００個、より好ましくはアミ
ノ酸２から４０個の短い連鎖群であり；Ｘは本発明のペクチン減成酵素のＮ末端
またはＣ末端領域である。

【００２０】本明細書の文脈において用語「セルロース」または「セルロース分解」酵素は
、セルロースのグルコース、セルビオース、トリオース、およびその他のセロ−
オリゴ糖への減成を触媒する酵素を意味し、その酵素は成熟タンパク質またはそ
の前駆体形態もしくは本質的に完全な長さの酵素の活性を有するその機能断片、
例えば触媒活性ドメイン含むと考えられる。さらに加えて用語「セルロース分解
」酵素は、相同体または構造類似体を含むことを意図している。

【００２１】セルロース分解酵素は所与の微生物により産生されたセルラーゼ系に発生する
成分であってもよく、このようなセルラーゼ系は大部分が、例えばセロビオハイ
ドロラーゼ、エキソ−セロビオハイドロラーゼ、エンドグルカナーゼ、β−グル
コシダーゼとして通常識別されるものを含む幾つかの異なるセルラーゼ酵素成分
を含む。

【００２２】別法では、セルロース分解酵素は単一成分、すなわち通常所与の微生物により
産生されるセルラーゼ系に発生する他のセルラーゼ酵素を本質的に含まない成分
であってもよく、その単一成分は一般に組換え成分、すなわちＤＮＡ配列により
形質転換され、宿主中に発現された単一成分とそれに続く細胞をコード化するＤ
ＮＡ配列のクローニングにより産生され、例えば国際出願第９１／１７２４３号
に記載されており、ここに参照として合体される。宿主は好ましくは非相同の宿
主であるが、ある条件下ではまた相同の宿主であってもよい。

【００２３】本発明の方法に用いられるセルラーゼは、任意の適切な技術により微生物から
採取または誘導することができる。例えばセルラーゼの調製は、当業界で既知の
方法により発酵したブイヨンまたは微生物からの調製を含む、微生物の発酵とそ
れに続くセルラーゼの単離により、しかしより好ましくは当業界で既知の組換え
ＤＮＡの技術を使用することにより得ることができる。通常このような方法は、
酵素の発現および培養物から酵素の回収を可能にする条件下の培地中において、
当該ペクチナーゼをコード化するＤＮＡ配列を発現し、媒介することができる組
換えＤＮＡベクターで形質転換された宿主細胞を培養することを含む。また、本
発明の酵素組成物で構成される成分は、セルラーゼ系の一部としての所与の微生
物により産生するなど、従来の技術により産生することもできる。

【００２４】本発明で用いられるセルラーゼは、酸性、中性、またはアルカリ性のいずれか
のｐＨ範囲でセルロース分解活性を有する任意のセルラーゼ成分であってよい。
好ましくは、成分は微生物の、好ましくは真菌または細菌起源のエンド−β−１
，４−グルカナーゼ（ＥＣ３．２．１．４）であり、セルロース分解酵素の産生
が可能なことが知られている微生物、例えば後述の属中の種から誘導または単離
し、精製することができる。誘導されたセルラーゼは相同または非相同のいずれ
のセルラーゼであってもよい。セルラーゼは好ましくは相同である。しかしなが
ら、特定の微生物から誘導され、また望ましい特性または特性群を有する高度に
精製してセルラーゼ成分を増加させた、抗体と免疫反応性を有する非相同成分も
また好ましい。

【００２５】本発明による有用な具体的なエンド−β−１，４−グルカナーゼの例には、真
菌の属のＡｃｒｅｍｏｎｉｕｍ、Ａｓｃｏｂｏｌｕｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
、Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ、Ｃｈａｅｔｏｓｔｙｌｕｍ、Ｃｌａｄｏｒｒｈｉｎｕ
ｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｒｉｃｈｕｍ、Ｃｏｎｉｏｔｈｅｃｉｕｍ、Ｃｏｐｒｉｎｕ
ｓ、Ｃｒｉｎｉｐｅｌｌｉｓ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎ、Ｄｉａｐｏｒｔ
ｈｅ、Ｄｉｐｌｏｄｉａ、Ｄｉｓｐｏｒｏｔｒｉｃｈｕｍ、Ｅｘｉｄｉａ、Ｆｏ
ｍｅｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ、Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ、
Ｈｕｍｉｃｏｌａ、Ｉｒｐｅｘ、Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ、Ｍｅｌａｎｏｃａ
ｒｐｕｓ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒｏｐｓｉｓ、Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ
、Ｎｅｃｔｉａ、Ｎｅｏｃａｌｌｉｍａｓｔｉｘ、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ、Ｎｏ
ｄｕｌｉｓｐｏｒｕｍ、Ｐａｎａｅｏｌｕｓ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｐｈａ
ｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ、Ｐｈｙｃｏｍｙｃｅｓ、Ｐｉｒｏｍｙｃｅｓ、Ｐｏｒｏ
ｎｉａ、Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ、Ｒｈｉｚｏｐｈｙｃｔｉｓ、Ｓａｃｃｏｂｏｌ
ｕｓ、Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ、Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍ、Ｓｏｒｄａｒｉ
ａ、Ｓｐｏｎｇｏｐｅｌｌｉｓ、Ｓｙｓｔａｓｐｏｓｐｏｒａ、Ｔｈｅｒｍｏｍ
ｙｃｅｓ、Ｔｈｉｅｌａｖｉａ、Ｔｒａｍｅｔｅｓ、Ｔｒｉｃｈｏｔｈｅｃｉｕ
ｍ、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ、Ｖｏｌｕｔｅｌｌａ、Ｕｌｏｓｐｏｒａ、Ｕｓｔ
ｉｌａｇｏ、Ｘｙｌａｒｉａのいずれかから誘導されたセルラーゼ；特に真菌の
種のＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｖｉｒ
ｉｄｅ、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｌｏｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍから誘導さ
れた酸セルラーゼ；真菌の種のＡｓｃｏｂｏｌｕｓｓｔｉｃｔｏｉｄｅｕｓ、
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓａｃｕｌｅａｔｕｓ、Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍｃｕｎ
ｉｃｕｌｏｒｕｍ、Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｅ、Ｃｈａｅ
ｔｏｍｉｕｍｍｕｒｏｒｕｍ、Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍｖｉｒｅｓｃｅｎｓ、
Ｃｈａｅｔｏｓｔｙｌｕｍｆｒｅｓｅｎｉｉ、Ｃｌａｄｏｒｒｈｉｎｕｍｆ
ｏｅｃｕｎｄｉｓｓｉｍｕｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｌａｇｅｎａｒ
ｉｕｍ、Ｃｏｐｒｉｎｕｓ、Ｃｒｉｎｉｐｅｌｌｉｓｓｃａｂｅｌｌａ、Ｃｙ
ｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅｓｙｎｇｅｎｅｓｉａ、Ｄｉ
ｐｌｏｄｉａｇｏｓｓｙｐｉｎａ、Ｅｘｉｄｉａｇｌａｎｄｕｌｏｓａ、Ｆ
ｏｍｅｓｆｏｍｅｎｔａｒｉｕｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍ、
Ｆｕｓａｒｉｕｍｐｏａｅ、Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｏｌａｎｉ、Ｆｕｓａｒｉ
ｕｍａｎｇｕｉｏｉｄｅｓ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ、Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ
ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ、Ｈｕｍｉｃｏｌａｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ、Ｈｕｍ
ｉｃｏｌａｇｒｉｓｅａ、Ｉｒｐｅｘ、Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａｐｈａｓ
ｅｏｌｉｎａ、Ｍｅｌａｎｏｃａｒｐｕｓａｌｂｏｍｙｃｅｓ、Ｍｉｃｒｏｓ
ｐｈａｅｒｏｐｓｉｓ、Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌ
ａ、Ｎｅｃｔｒｉａｐｉｎｅａ、Ｎｅｏｃａｌｌｉｍａｓｔｉｘｐａｔｒｉ
ｃｉａｒｕｍ、Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ、Ｎｏｄｕｌｉｓｐｏｒｕｍ、Ｐａｎａｅ
ｏｌｕｓｒｅｔｉｒｕｇｉｓ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃｈｒｙｓｏｇｅｎ
ｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓｕｍ、Ｐｈａｎｅｒｏｃ
ｈａｅｔｅ、Ｐｈｙｃｏｍｙｃｅｓｎｉｔｅｎｓ、Ｐｉｒｏｍｙｃｅｓ、Ｐｏ
ｒｏｎｉａｐｕｎｃｔａｔａ、Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒｐｕｓｉｌｌｕｓ、Ｒ
ｈｉｚｏｐｈｌｙｃｔｉｓｒｏｓｅａ、Ｓａｃｃｏｂｏｌｕｓｄｉｌｕｔｅ
ｌｌｕｓ、Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍｃｏｍｍｕｎｅ、Ｓｃｙｔａｌｉｄｉ
ｕｍｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ、Ｓｏｒｄａｒｉａｆｉｍｉｃｏｌａ、Ｓｏ
ｒｄａｒｉａｍａｃｒｏｓｐｏｒａ、Ｓｐｏｎｇｏｐｅｌｌｉｓ、Ｓｙｓｐａ
ｓｔｏｓｐｏｒａｂｏｎｉｎｅｎｓｉｓ、Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓｖｅｒｒ
ｕｃｏｓｕｓ、Ｔｈｉｅｌａｖｉａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ、Ｔｈｉｅｌａｖ
ｉａｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｔｒａｍｅｔｅｓｓａｎｇｕｉｎｅａ、Ｔｒｉ
ｃｈｏｔｈｅｃｉｕｍｒｏｓｅｕｍ、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａ
ｎｕｍ、Ｖｏｌｕｔｅｌｌａｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｏｉｄｅｓ、Ｕｌｏｓ
ｐｏｒａｂｉｌｇｒａｍｉｉ、Ｕｓｔｉｌａｇｏｍａｙｄｉｓ、Ｘｙｌａｒ
ｉａｈｙｐｏｘｙｌｏｎ、Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｏｐｈｉ
ｌａ、Ｈｕｍｉｃｏｌａｉｎｓｏｌｅｎｓ、Ｈｕｍｉｃｏｌａｌａｎｕｇｉ
ｎｏｓａ、Ｈｕｍｉｃｏｌａｇｒｉｓｅａから誘導されるセルラーゼ；および
Ｈｕｍｉｃｏｌａｉｎｓｏｌｅｎｓ、ＤＳＭ１８００から誘導され、高度に精
製して−４３ｋＤエンドグルカナーゼを増加させた、抗体と免疫反応性を有する
エンド−β−１，４−グルカナーゼ、あるいは国際出願第９１／１７２４３号に
開示されたアミノ酸配列を有し、ＳＥＱＩＤ＃２または変形態様が少なくとも
６０％、好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７５％、より好ましくは
少なくとも８０％、より好ましくは８５％、特に９０％それと相同であるアミノ
酸配列を有するエンドグルカナーゼなどのセルラーゼ活性を示す−４３ｋＤエン
ド−β−１，４−グルカナーゼの相同体または誘導体であるエンド−β−１，４
−グルカナーゼ；および細菌の属のＢａｃｉｌｌｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
、Ｓａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉｘ、Ｃｅｌｌｖｉｂｒｉｏ、Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏ
ｓｐｏｒａから誘導されるセルラーゼ；特にＢａｃｉｌｌｕｓｌｅｎｔｕｓ、
Ｂａｃｉｌｌｕｓａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｌｉｃｈ
ｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃｅｌｌｕｌｏｓａ、Ｓａｃｃ
ｈａｒｏｔｈｒｉｘａｕｓｔｒａｌｉｅｎｓｉｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉ
ｘｔｅｘａｓｅｎｓｉｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉｘｗａｙｗａｙａｎｄ
ｅｎｓｉｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉｘｃｒｙｏｐｈｉｌｉｓ、Ｓａｃｃｈ
ａｒｏｔｈｒｉｘｆｌａｖａ、Ｓａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉｘｃｏｅｒｕｌｅ
ｏｆｕｓｃａ、Ｓａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉｘｌｏｎｇｉｓｐｏｒａ、Ｓａｃｃ
ｈａｒｏｔｈｒｉｘｍｕｔａｂｉｌｉｓｓｓｐ．ｃａｐｒｅｏｌｕｓ、Ｓａ
ｃｃｈａｒｏｔｈｒｉｘａｅｒｏｃｏｌｏｎｉｇｅｎｅｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏ
ｔｈｒｉｘｍｕｔａｂｉｌｉｓｓｓｐ．ｍｕｔａｂｉｌｉｓ、Ｓａｃｃｈａ
ｒｏｔｈｒｉｘｓｙｒｉｎｇａｅ、Ｃｅｌｌｖｉｂｒｉｏｍｉｘｔｕｓ、Ｔ
ｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａｆｕｓｃａから誘導されるものがある。公開さ
れた国際出願第９４／０１５３２号、第９４／０１４９５３号、第９６／１１２
６２号、第９６／１９５７０号、および第９６／２９３９７号で言及されている
セルラーゼの詳細な開示が参照され、さらに例としては公開された欧州特許公開
番号Ａ２−２７１００４号に開示されたセルラーゼがある。

【００２６】本発明の方法に有用な市販のセルラーゼ酵素製品の例には、Ｃｅｌｌｕｓｏｆ
ｔ（登録商標）、Ｃｅｌｌｕｃｌａｓｔ（登録商標）、Ｄｅｎｉｍａｘ（登録商
標）Ａｃｉｄ、Ｄｅｎｉｍａｘ（登録商標）Ｕｌｔｒａ（全てＮｏｖｏＮｏｒ
ｄｉｓｋＡ／Ｓ，ＤＫ−２８８０Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋから
入手できる）；Ｉｎｄｉａｇｅ（登録商標）、Ｐｒｉｍａｆａｓｔ（登録商標）
（両方ともＧｅｎｅｎｃｏｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＩｎｃ．，ＵＳＡ
から入手できる）；Ｐｏｗｅｒｓｔｏｎｅ（登録商標）（Ｉｏｇｅｎ，Ｃａｎａ
ｄａから入手できる）；Ｅｃｏｓｔｏｎｅ（登録商標）（Ａｌｋｏ，Ｆｉｎｌａ
ｎｄから入手できる）；Ｒｏｃｋｓｏｆｔ（登録商標）（ＣＰＮ，ＵＳＡから入
手できる）、およびＳａｎｋｏＢｉｏ（登録商標）（Ｍｅｉｊｉ／Ｒａｋｕｔ
ｏＫａｓｅｉＬｔｄ．，Ｊａｐａｎから入手できる）がある。方法：第一の態様において本発明は、染色されたデニム織物または衣服の表面に色密
度の局部的なむらを導入する方法を提供し、その方法は織物または衣服を有効量
のペクチン分解酵素を含む水性組成物と接触させるステップを含む。

【００２７】第二の態様において、従来の酵素によるストーンウォッシュ法を、織物または
衣服を織物の摩耗させるのに有効な量のセルラーゼおよびペクチナーゼを含む水
性組成物で処理することにより改良することができる。第三の態様において本発明は、水性媒体中においてデニム織物または衣服を有
効量のペクチナーゼで処理することにより、仕上工程の間に織物または衣服から
裏側に染みついた染料を除去する方法を提供する。この理論に縛られることはな
いが、裏側の染みは綿繊維の角皮部分として存在するペクチン層の中にあるか、
綿繊維の角皮中にも存在する疎水性のろうの中に捕捉されたどちらかの不溶性の
インジゴ染料など不溶性染料の再付着によると考えられる。

【００２８】さらに、ペクチン分解酵素は綿繊維の角皮中に存在するペクチンを、経糸を染
色する前に除去するのに役立つと考えられる。現在、本発明の方法に用いられる好適な溶液／繊維の比は、約２０：１から約
１：１の範囲、好ましくは約１５：１から約２：１の範囲が推奨されている。従来の糊抜きおよび「ストーンウォッシュ」処理において、反応時間は通常約
１０分から約８時間の範囲にある。好ましくは反応時間は約１０分から約１２０
分の範囲内である。

【００２９】反応媒体のｐＨは当該酵素に大きく左右される。好ましくは本発明の方法は、
約ｐＨ３から約ｐＨ１１の範囲、好ましくは約ｐＨ４から約ｐＨ８の範囲、また
は約ｐＨ４．５から約ｐＨ５．５の範囲内のｐＨで実施される。反応媒体の温度もまた当該酵素に大きく左右される。通常、１０〜９０℃の範
囲の温度が用いられることになり、好ましくは９０℃未満の温度、より好ましく
は５０〜７５℃の範囲のような７５℃未満が用いられ、より好ましくは６０〜６
５℃の範囲のような６５℃未満の温度が用いられることになる。糊抜き工程およ
び摩耗工程で用いられる温度は時には同一であることもあるが、通常はこれらは
後記の実施例に示すように異なっている。

【００３０】本発明の方法によって使用されるペクチン分解酵素の有効量は多くの要因に左
右されるが、本発明によれば水性媒体中のペクチン分解酵素の濃度は織物１ｇ当
たり酵素タンパク質約０．０１から約１００００μｇ、好ましくは織物１ｇ当た
り酵素タンパク質０．１から１００００μｇ、より好ましくは織物１ｇ当たり酵
素タンパク質１から１０００μｇである。

【００３１】本発明の方法によって使用されるセルロース分解酵素の有効量は多くの要因に
左右されるが、本発明によれば水性媒体中のセルロース分解酵素の濃度は織物１
ｇ当たり酵素タンパク質０．００１から５０ｍｇ、好ましくは織物１ｇ当たり酵
素タンパク質０．００５から２５ｍｇ、より好ましくは織物１ｇ当たり酵素タン
パク質０．０１から５ｍｇである。

【００３２】本発明の方法において使用される水性組成物は、さらにプロテアーゼ、リパー
ゼ、クチナーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペクチナーゼ、アミラーゼ、オ
キシドレダクターゼ、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、およびトランスフェラー
ゼからなる群から選択された１または複数種の酵素を含んでもよい。また、水性の処理組成物に浮石を、従来のストーンウォッシュ処理において通
常浮石によるジーンズのストーンウォッシュ加工に用いられる量の０〜８０％量
を加えてもよい。

【００３３】水性組成物は使用される酵素の適切なｐＨを維持するために緩衝液を含んでも
よい。緩衝液は、好適にはリン酸塩、ホウ酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、アジピン
酸塩、トリエタノールアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、炭
酸塩（特にアルカリ金属またはアルカリ土類金属、具体的には炭酸ナトリウムま
たはカリウム、もしくはアンモニウムおよびＨＣｌ塩）、ジアミン、特にジアミ
ノエタン、イミダゾール、またはアミノ酸の緩衝液である。

【００３４】本発明の方法は、湿潤剤、ポリマー物質、界面活性剤／分散剤、キレート剤な
どを含む通常の繊維仕上剤の存在下で行なってもよい。通常の湿潤剤を、基体と処理に使用される酵素との間の接触を向上させるため
に用いてもよい。湿潤剤は非イオン性界面活性剤、例えばエトキシル化した脂肪
アルコールであってもよい。きわめて有効な湿潤剤は、Ｂｅｒｏｌ０８７（Ａ
ｋｚｏＮｏｂｅｌ，Ｓｅｗｄｅｎの製品）などのエトキシル化およびプロポキ
シル化した脂肪酸エステルである。

【００３５】好適なポリマーの例には、タンパク質（例えば、ウシの血清アルブミン、ホエ
ー、カゼイン、またはマメのタンパク質）、タンパク質の加水分解物（例えば、
ホエー、カゼイン、またはダイズのタンパク質の加水分解物）、ポリペプチド、
リグノスルホン酸エステル、多糖類およびその誘導体、ポリエチレングリコール
、ポリプロピレングリコール、ポリビニルピロリドン、エチレンまたはプロピレ
ンオキシドで縮合したエチレンジアミン、エトキシル化ポリアミン、またはエト
キシル化したアミンポリマーがある。

【００３６】分散剤は、好適には非イオン性、アニオン性、カチオン性、両性、または両性
イオンの界面活性剤から選択することができる。より具体的には、分散剤はカル
ボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、アルキルアリールス
ルホン酸エステル、長鎖アルコールの硫酸エステル（一級および二級アルコール
の硫酸エステル）、スルホン化オレフィン、硫酸化モノグリセリド、硫酸化エー
テル、硫コハク酸エステル、スルホン化メチルエーテル、アルカンスルホン酸エ
ステル、リン酸エステル、アルキルイソチオン酸エステル、アシルサルコシド、
アルキルタウリド、蛍光界面活性剤、脂肪アルコールとアルキルフェノールの縮
合物、脂肪酸の縮合物、エチレンオキシドとアミンの縮合物、エチレンオキシド
とアミドの縮合物、ショ糖のエステル、ソルビタンエステル、アルキロアミド、
脂肪アミンオキシド、エトキシル化モノアミン、エトキシル化ジアミン、エトキ
シル化アルコール、およびその混合物から選択することができる。きわめて有用
な分散剤は、Ｂｅｒｏｌ０８（ＡｋｚｏＮｏｂｅｌ，Ｓｗｅｄｅｎの製品）
などのエトキシル化アルコールである。

【００３７】本発明の別の態様において、組成物にキレート剤を添加することによる染色さ
れた織物の局部的な色むら生じさせるために、ペクチン分解酵素、特にペクチン
酸リアーゼおよびペクチンリアーゼの能力を改良することができる。キレート剤は、可溶性であって、酸性、中性またはアルカリ性のｐＨ値で二価
または三価のカチオン（カルシウムなど）の錯体を形成することができるもので
ある。キレート剤の選択は工程で使用されるセルラーゼに左右される。したがっ
て酸セルラーゼが含まれる場合は、キレート剤は可溶性であって、酸性のｐＨで
二価または三価のカチオンの錯体を形成することができるものであるべきである
。これに反して、セルラーゼが中性またはアルカリ性の場合は、キレート剤は可
溶性であって、中性またはアルカリ性のｐＨで二価または三価のカチオンの錯体
を形成することができるものであるべきである。

【００３８】キレート剤は、好適にはアミノカルボン酸；ヒドロキシアミノカルボン酸；ヒ
ドロキシカルボン酸；リン酸エステル、二リン酸エステル、トリポリリン酸エス
テル、より高級なポリリン酸エステル、ピロリン酸エステル；ゼオライト；ポリ
カルボン酸；多糖類を含む炭水化物；ヒドロキシピリジノン；カテコール基を備
える有機化合物；ヒドロキシメート基を備える有機化合物；ケイ酸エステル；ま
たはポリヒドロキシスルホン酸エステルから選択することができる。

【００３９】キレート剤がヒドロキシカルボン酸の場合、それは好適にはグルコン酸、クエ
ン酸、酒石酸、シュウ酸、ジグリコール酸、またはグルコヘプトネートから選択
することができる。キレート剤がポリアミノホスホン酸エステル、ポリヒドロキシホスホン酸エス
テル、またはポリホスホン酸エステルの場合、それは好適にはＰＢＴＣ（ホスホ
ノブタントリ酢酸エステル）、ＡＴＭＰ（アミノ−トリ（メチレンホスホン酸）
）、ＤＴＰＭＰ（ジエチレントリアミン−ペンタ（メチレンホスホン酸））、Ｅ
ＤＴＭＰ（エチレンジアミン−テトラ（メチレンホスホン酸））、ＨＤＴＭＰ（
ヒドロキシエチル−エチレンジアミン−トリ（メチレンホスホン酸））、ＨＥＤ
Ｐ（ヒドロキシエタンジホスホン酸）、またはＨＭＤＴＭＰ（ヘキサメチレン−
ジアミン−テトラ（メチレンホスホン酸））から選択することができる。

【００４０】本発明の方法において存在することのできる従来の仕上剤には、浮石および／
またはパーライトがあるがこれには限定されない。パーライトは天然に産出する
火山岩である。好ましくは熱で発泡させたパーライトが用いられる。本発明の好ましい実施形態において工程は複合工程であり、すなわち工程は糊
抜きおよび摩耗の複合工程である。ペクチン酸リアーゼ活性の定量：粘度検定ＡＰＳＵ：ＡＰＳＵ単位：ＡＰＳＵ単位検定はカルシウムを加えな
いポリガラクツロン酸基質を用いた粘度測定である。

【００４１】ポリガラクツロン酸のナトリウム塩（ＳｉｇｍａＰ−１８７９）の基質５％
をｐＨ１０の０．１Ｍグリシン緩衝液で可溶性にする。４ｍｌの基質を４０℃で
５分間前温置する。酵素を加え（体積２５０μｌ中に）、ミキサーにより最大速
度で１０秒間混合し、次いで４０℃で２０分間温置する。標準曲線用の、最低限
、１ｍｌ当たり１０から６０ＡＰＳＵの間の４つの濃度で、５ＡＰＳＵ／ｍｌか
ら１００ＡＰＳＵ／ｍｌ超までの範囲の酵素濃度の希釈液の２回の定量。粘度は
、Ｓｏｆｒａｓｅｒ，４５７００Ｖｉｌｌｅｍａｎｄｅｕｒ，Ｆｒａｎｃｅの
ＭＩＶＩ６００を用いて測定した。粘度は１０秒後にｍＶとして測定される。

【００４２】ＡＰＳＵ単位の計算には、上記の酵素の標準希釈液を標準曲線を得るために用
いた。ある一つの相を平衡状態を伴う指数関数的減衰に非線形適合させる方法を
用いる、ＧｒａｆｐａｄＰｒｉｓｍのプログラムを計算に使用した。平衡状態
に期間をプラスしたものが酵素なしで得られたｍＶである。平衡状態は１００Ａ
ＰＳＵを超えるｍＶであり、両試料の粘度の半減は標準誤差１．５ＡＰＳＵを伴
って１２ＡＰＳＵであることが分かった。

【００４３】リアーゼの検定（２３５ｎｍにおける）： βの除去の定量のために、ｐＨ１
０の０．１Ｍグリシン緩衝液で可溶性にした０．１％ポリガラクツロン酸のナト
リウム塩（ＳｉｇｍａＰ−１８７９）の基質を用いて、２３５ｎｍの吸収の増
加を測定する検定を行なった。触媒速度の計算に関しては、毎分２３５単位で吸
収度５．２の増加が、１μモルの不飽和生成物の形成に対応する（Ｎａｓｕｎａ
およびＳｔａｒｒの論文、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ２４１，ｐ．５２９
８〜５３０６，１９６６ならびにＢａｒｔｌｉｎｇ、Ｗｅｇｅｎｅｒ、およびＯ
ｌｓｅｎの論文、ＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＶｏｌ．１４１，ｐ．８７３〜８
８１，１９９５）。

【００４４】２３５ｎｍにおける吸収度の連続測定を伴う、温度制御されたキュベットホル
ダ中のＨＰダイオード列の分光光度計上の１ｃｍの光路をもつ０．５ｍｌキュベ
ットを用いた定常状態の条件。定常状態の間、速度の計算には少なくとも２００
秒間の直線的増加が用いられた。これは毎分μモル単位の生成物を形成するよう
に転換させるのに用いられた。

【００４５】セルラーゼ活性の定量：セルロース分解活性は、カルボキシメチルセルロー
ス（ＣＭＣ）の溶液粘度を減少させる酵素の能力を測定することによりエンド−
セルラーゼ単位（ＥＣＵ）で定量することができる。ＥＣＵ検定は、カルボキシ
メチルセルロース（ＣＭＣ）の溶液粘度を減少させる酵素の能力を測定すること
により試料中に存在する触媒活性量を定量する。検定は、ＣＭＣ基質（Ｈｅｒｃ
ｕｌｅｓ７ＬＦＤ）、酵素濃度約０．１５ＥＣＵの粘度を減少させるための相
対的酵素標準を用いて、４０℃、ｐＨ７．５、０．１Ｍリン酸塩緩衝液、時間３
０分で、振動粘度計（例えば、Ｓｏｆｒａｓｅｒ, Ｆｒａｎｃｅから入手できるＭＩＶＩ３０００）で行なわれる。主標準は８２００ＥＣＵ／ｇに対して規
定される。

【００４６】１ＥＣＵは、これらの条件下で粘度が２分の１まで減少させる酵素の量である
。下記の非限定的な実施例により本発明を説明する。（実施例）材料および方法：反射の測定：本発明による織物の外観を規定する反射の測定は、直径の寸法２
７ｍｍの測定用ダイアフラムを有する反射計（ＤａｔａｃｏｌｏｒＩｎｔｅｒ
ｎａｔｉｏｎａｌから入手可能のＴｅｘｆｌａｓｈ２０００、光源Ｄ６５）を
用いて、波長２０ｎｍで行なった。反射の測定は全て白色の標準（反射１００％
）に対する％で表わされる。使用される白色の標準は、ＤａｔａｃｏｌｏｒＩ
ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌのセリアル番号２１１８の白色の検量用標準である。
検量の目的には、黒色の標準も用いられた（番号ＴＬ−４−４０５）。数値が大
きいほど色は明るい。経糸（ｗａｒｐ）または緯糸（ｗｅｆｔ）の引裂き強さ：落下ペンジュラム式
エルメンドルフ型装置、ＡＳＴＭＤ１４２４による製織された織物の引裂き抵
抗の標準試験法、これにはＴｗｉｎｇ−ＡｌｂｅｒｔＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔ
Ｃｏ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＵＳＡ１９１５４製のエルメンドルフ式
引裂き試験機を用いた。しかしながら、デニム織物のきわめて高い強度により裁
断用ダイの寸法は１０２ｍｍ×５５ｍｍに減らした。織物のコンディショニング
は、試験の前２４時間、２０℃および６０％ＲＨで行なった。裏側の染み：裏側の染みは、直径の寸法２７ｍｍの測定用ダイアフラムを有す
る反射計（ＤａｔａｃｏｌｏｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌから入手可能のＴ
ｅｘｆｌａｓｈ２０００、光源Ｄ６５）を用いて、デニムのパネルの反対側で
測定した。裏側の染みは、ＣＩＥＬＡＢ（−ｂ＊）座標を用いて表わした。実施例１、Ｌａｕｎｄｅｒ−Ｏ−ｍｅｔｅｒによるペクチン酸リアーゼの評価：デニム織物の糊抜き：装置：洗浄機は、ＷａｓｃａｔｏｒＦＯＭ７１ｌａｂ（Ｅｌｅｃｔｒ
ｏｌｕｘ）。

【００４７】織物：１．５×１．６５ｍの織物２枚、ブルーのデニムＤＡＫＯＴＡ、１
４１／２オンス、スイフト、綿１００％。洗浄手順：糊抜き：７５℃の脱イオン水２０ｌで２５分；Ｔｅｒｍａｍｙｌ１２０
Ｌ（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋＡ／Ｓから入手できるアミラーゼ）６７ｇ、Ｎ
ｏｖｏｚｙｍ７３５（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋＡ／Ｓから入手できるリパ
ーゼ）１０ｇ、ＫＨ₂ＰＯ₄６．７ｇ、Ｎａ₂ＨＰＯ₄・２Ｈ₂Ｏ２０ｇ、ＣａＣｌ₂ ・２Ｈ₂Ｏ０．４ｇ、ＫｉｅｒａｌｏｎＣＤ（ＢＡＳＦ）１０ｇ、次いで排水。

【００４８】水洗い１：８０℃の水道水２０ｌで１５分；Ｎａ₂ＣＯ₃２６．７ｇ、次いで排水。水洗い２：５５℃の水道水２０ｌで５分、次いで排水。水洗い３：１５℃の脱イオン水２０ｌで５分、次いで排水、抽出、タンブル乾燥。

【００４９】糊抜きしたデニム織物を１３×２３ｃｍ布片に裁断し、管を形成するように縫
い合わせた。Ｌａｕｎｄｅｒ−Ｏ−ｍｅｔｅｒによる評価：装置：Ｌａｕｎｄｅｒ−Ｏ−ｍｅｔｅｒＬＰ２（ＡｔｌａｓＥｌｅｃｔ
ｒｉｃＤｅｖｉｃｅｓＣｏｍｐａｎｙ）。

【００５０】織物：糊抜きしたデニムの管を、経糸（前）が内部に面するように、Ｌａｕ
ｎｄｅｒ−Ｏ−ｍｅｔｅｒのビーカー中に１つのビーカー当たり１布片を配置し
た。１布片は約１４ｇ。緩衝液：ｐＨ７．５の５０ｍＭトリエタノールアミン＋１０ｍＭＣａＣｌ₂ 、５０ｍｌを各ビーカーに加えた。

【００５１】酵素：Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、バッチ９６４３か
ら得られたペクチン酸リアーゼ。セルラーゼはＤｅｎｉｍａｘＵｌｔｒａ（Ｎ
ｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋＡ／Ｓの市販品）、バッチＥＤ−９７１３９２４。酵
素は、実験の概要に従って投与された。時間：６０分。

【００５２】温度：６０℃。研磨補助：鉄製ナット（径１６ｍｍ）３０個、鉄製ナット（径１０ｍｍ）１
０個、星形磁石（５ｇ）１０個を各ビーカーに加え、織物の管の内側に配置した
。水洗い：布片を５ｌのＬＡＳＮａｎｓａ１１６９（Ａｌｂｒｉｇｈｔ＆Ｗｉｌｓｏｎ）０．５ｇ／ｌに５分間移し、続いてＷａｓｃａｔｏｒＦ
Ｌ１２０（Ｅｌｅｃｔｒｏｌｕｘ）の洗浄手順に従った。すなわち脱イオン水
３２ｌ、５５℃の温水による水洗い５分間、脱イオン水３２ｌ、１５℃の冷水
による水洗い５分間を２回。布片をタンブル乾燥し、縫い目の近くを切り開いた
。

【００５３】評価：摩耗状態は、Ｌａｕｎｄｅｒ−Ｏ−ｍｅｔｅｒのビーカーの内部に面
する織物側（上述のとおり反射として定量される）で、布片当たり６回測定され
た。実験の概要：

【００５４】

【表１】

【００５５】結果：上記の実験の結果を下記の表に示した。セルラーゼ（ＤｅｎｉｍａｘＵｌｔｒａ）と組み合わせたペクチン酸リアー
ゼの摩耗レベル

【００５６】

【表２】

【００５７】この実験は、本発明による酵素の一つ、すなわちペクチン酸リアーゼ単独およ
びセルラーゼとの組み合せを用いる効果を説明する。摩耗レベルの増加は、織物
をペクチン酸リアーゼで処理した場合に得られ、ペクチンがデニム織物上に存在
したことを実証した。セルラーゼとの組み合せで評価した場合、驚くべきことに
相乗効果的な摩耗の増加が見られ、ペクチンの除去がセルラーゼのアクセスし易
さを向上させる結果になったと推定される。実施例２、Ｗａｓｃａｔｏｒによるペクチンリアーゼの評価：装置：洗濯機は、ＷａｓｃａｔｏｒＦＯＭ７１ｌａｂ（Ｅｌｅｃｔｏ
ｒｏｌｕｘ）。

【００５８】織物：１．１ｋｇデニム織物、ＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ、スイフト、３
／１綾織、リング／オープンエンド精紡、綿１００％。洗浄手順：糊抜き：７０℃の脱イオン水１２ｌで１０分間；Ａｑｕａｚｙｍｅ１２００Ｌ（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋＡ／Ｓから入手できるアミラーゼ）５ｍｌ、ＫＨ₂ＰＯ₄１４ｇ＋Ｎａ₂ＨＰＯ₄・２Ｈ₂Ｏ６ｇ。

【００５９】水洗い：５０℃の水道水２０ｌで５分間。摩耗：５０℃、ｐＨ６．５の脱イオン水２０ｌで２時間；ＫＨ₂ＰＯ₄１２ｇ＋Ｎａ₂ＨＰＯ₄・２Ｈ₂Ｏ８ｇ。酵素：Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓａｃｕｌｅａｙｕｓ、ＳＰ５７１、バッチ
ＰＰＪ４２５１から得られたペクチンリアーゼで、純度は製品１ｇ当たり酵素
タンパク質２７％。セルラーゼ：ＤｅｎｉｍａｘＵｌｔｒａ（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋＡ／
Ｓの市販品）、バッチＥＤ−９６１３７７５。

【００６０】酵素は、実験の概要に従って投与された。水洗い１：８０℃の水道水２０ｌで１５分間；Ｎａ₂ＣＯ₃４０ｇ。水洗い２および３：冷水道水中で５分間の水洗いを２回繰り返した。評価：摩耗（反射として２０回の測定の平均値を用いて決定された）、経糸お
よび緯糸の引裂き強さ、および裏側の染み。

【００６１】実験の概要：

【００６２】

【表３】

【００６３】結果：上記の実験の結果は下記の表に一覧表示した。セルラーゼ７．５ＥＣＵ／繊維ｇ（ＤＵと略記）と組み合わせたペクチンリア
ーゼ（ＰＬと略記）で処理したデニムの摩耗レベル、引裂き強さ（ＴＳ）、およ
び裏側の染み

【００６４】

【表４】

【００６５】ペクチンリアーゼはセルラーゼ（ＤｅｎｉｍａｘＵｌｔｒａ）との組み合わ
せで評価された。結果は、セルラーゼをペクチナーゼと組み合わせた場合、摩耗
量が増すことをはっきり示している。本発明のもう一つの範囲は、デニムの織物
および／または衣服の裏側の染みにおよぼすペクチナーゼの効果である。驚くべ
きことに、ペクチンリアーゼをセルラーゼと組み合わせた場合、裏側の染みが著
しく減少することが観察された。セルラーゼ（ＤｅｎｉｍａｘＵｌｔｒａ）と
組み合わせたペクチンリアーゼは、等値の摩耗レベルでセルラーゼ（Ｄｅｎｉｍ
ａｘＵｌｔｒａ）と比べた場合、経糸および緯糸のどちらの方向も過度の引裂
き強さの低下を起こさなかった。実施例３、Ｗａｓｃａｔｏｒによるペクチン酸リアーゼの評価：装置：洗濯機は、ＷａｓｃａｔｏｒＦＯＭ７１ｌａｂ（Ｅｌｅｃｔｏ
ｒｏｌｕｘ）。

【００６６】織物：１．１ｋｇデニム織物、ＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ、スイフト、３
／１綾織、リング／オープンエンド精紡、綿１００％。洗浄手順：糊抜き：７０℃の脱イオン水１２ｌで１０分間；Ａｑｕａｚｙｍｅ１２００Ｌ（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋＡ／Ｓから入手できるアミラーゼ）５ｍｌ、ＫＨ₂ＰＯ₄１４ｇ＋Ｎａ₂ＨＰＯ₄・２Ｈ₂Ｏ６ｇ。

【００６７】水洗い：５０℃の水道水２０ｌで５分。摩耗：６０℃、ｐＨ７．５の脱イオン水２０ｌで２時間；２５ｍＭトリエタノールアミン。酵素：ＢａｃｉｌｌｕｓＬｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、バッチ９６４３か
ら得られたペクチン酸リアーゼ。セルラーゼは、ＤｅｎｉｍａｘＵｌｔｒａ（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋＡ／
Ｓ）、バッチＥＤ−９７１３９２７。

【００６８】酵素は実験の概要に従って投与された。水洗い１：８０℃の水道水２０ｌで１５分間；Ｎａ₂ＣＯ₃４０ｇ。水洗い２および３：冷水道水中で５分間の水洗いを２回繰り返した。評価：摩耗（反射として２０回の測定の平均値を用いて決定された）。実験の概要：

【００６９】

【表５】

【００７０】結果：上記の実験の結果は下記の表に一覧表示した。セルラーゼ８ＥＣＵ／繊維ｇ（ＤＵと略記）と組み合わせたペクチン酸リアー
ゼ（ＰＬと略記）で処理したデニムの摩耗レベル、引裂き強さ、および裏側の染
み

【００７１】

【表６】

【００７２】Ｌａｕｎｄｅｒ−Ｏ−ｍｅｔｅｒで評価したペクチン酸リアーゼを、より大規
模のＷａｓｃａｔｏｒによる実験においてセルラーゼ（ＤｅｎｉｍａｘＵｌｔ
ｒａ）と組み合わせて評価した。結果から、セルラーゼをペクチナーゼと組み合
わせた場合に、摩耗が著しく増加することがはっきり裏付けられた。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷＦターム(参考） 3B154 AB20 BA51 BB32 BD03 BD18 BD20 BE09 BF01 BF12 BF25 DA13 4H003 DA01 DB01 EA08 EC01 EC02 EC03 FA28 FA47 4L031 AA02 AB32 BA39 DA09

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】染色されたデニム織物または衣服（ｆａｂｒｉｃｏｒｇ
ａｒｍｅｎｔ）の表面に、色密度のむらのある局部的な領域を導入する方法であ
って、前記方法が織物または衣服と有効量のペクチン分解酵素を含む水性組成物
とを接触させることを含む、方法。
【請求項２】ペクチン分解酵素が、ペクチンリアーゼ（ＥＣ４．２．２．
１０）、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．１．８９）、アラビナナーゼ（ＥＣ３．
２．１．９９）、ペクチンエステラーゼ（ＥＣ３．１．１．１１）、マンナナー
ゼ（ＥＣ３．２．１．７８）、ポリガラクツロナーゼ（ＥＣ３．２．１．１５）
、およびペクチン酸リアーゼ（ＥＣ４．２．２．２）からなる群から選択される
、請求項１に記載の方法。
【請求項３】ペクチン分解酵素が微生物、好ましくは細菌、古細菌、また
は真菌、特に細菌から誘導される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】細菌がＢａｃｉｌｌｕｓ、好ましくは好アルカリ性のＢａｃ
ｉｌｌｕｓ株に属する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】細菌が、種、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓ
ｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈ
ｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・クラーキ（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｌａｒｋｉ
ｉ）、バチルス・ステアロサーモフィラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｔｅａｒｏｔ
ｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、バチルス・アルカロフィラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、バチルス・プミラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｕｍ
ｉｌｕｓ）、バチルス・コーニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｏｈｎｉｉ）、バチル
ス・シュードアルカロフィラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｏ
ｐｈｉｌｕｓ）、バチルス・アガラデレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｇａｒａｄ
ｈａｅｒｅｎｓ）、エルウィニア・エスピー（Ｅｒｗｉｎｉａｓｐ.）９４８２、およびペニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｐｏｌｙ
ｍｙｘａ）からなる群、好ましくは株のＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、ＡＴ
ＣＣ１４５８０、Ｅｒｗｉｎｉａｓｐ.９４８２（ＦＥＲＭＢＰ−５９９４）、およびＢ．ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ、ＮＣＩＭＢ４０４８２からなる群
から選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】水性組成物中のペクチン分解酵素の量が、繊維１ｇ当たり酵
素タンパク質約０．１μｇから繊維１ｇ当たり酵素タンパク質約１００００μｇ
までの範囲にある、請求項１ないし５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】水性組成物のｐＨが３から１１、好ましくは４から８、より
好ましくは４．５から７の範囲にあり、かつ水性組成物の温度が９０℃以下、好
ましくは７５℃以下、より好ましくは６５℃以下である、請求項１ないし６のい
ずれかに記載の方法。
【請求項８】染色されたデニム織物または衣服がインジゴ染めである、請
求項１ないし７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】水性組成物がさらに、プロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ
、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペクチナーゼ、アミラーゼ、オキシドレダクタ
ーゼ、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、およびトランスフェラーゼからなる群か
ら選択された１または複数種の酵素を含む、請求項１ないし８のいずれかに記載
の方法。
【請求項１０】浮石を、従来のストーンウォッシュ処理において浮石でジ
ーンズをストーンウォッシュ加工するために通常用いられる量に対して０〜８０
％の量で水性の処理組成物に加える、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】水性組成物がさらに界面活性剤を含む、請求項１ないし１
０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】水性組成物がさらに緩衝液を含む、請求項１ないし１１の
いずれかに記載の方法。
【請求項１３】水性組成物がさらにポリマーを含む、請求項１ないし１２
のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】染色されたデニム織物または衣服の改良されたストーンウ
ォッシュ加工の方法であって、前記方法が織物または衣服の酵素による摩耗をも
たらすために織物または衣服と有効量のセルロース分解酵素およびペクチン分解
酵素を含む水性組成物とを接触させることを含む、方法。
【請求項１５】ペクチン分解酵素が、ペクチンリアーゼ（ＥＣ４．２．２
．１０）、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．１．８９）、アラビナナーゼ（ＥＣ３
．２．１．９９）、ペクチンエステラーゼ（ＥＣ３．１．１．１１）、マンナナ
ーゼ（ＥＣ３．２．１．７８）、ポリガラクツロナーゼ（ＥＣ３．２．１．１５
）、およびペクチン酸リアーゼ（ＥＣ４．２．２．２）からなる群から選択され
る、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】ペクチン分解酵素が微生物、好ましくは細菌、古細菌（ａ
ｒｃｈｅａ）、または真菌（ｆｕｎｇｕｓ）、特に細菌から誘導される、請求項
１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】細菌がＢａｃｉｌｌｕｓ、好ましくは好アルカリ性のＢａ
ｃｉｌｌｕｓ株に属する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】細菌が、種のＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｌａｒｋｉ
ｉ、Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓ、Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓｃｏｈｎｉｉ、Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｏｐｈ
ｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ、Ｅｒｗｉｎｉａ
ｓｐ.９４８２、およびＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｐｏｌｙｍｙｘａからなる群、好ましくは株のＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、ＡＴＣＣ１４５８０、
Ｅｒｗｉｎｉａｓｐ.９４８２（ＦＥＲＭＢＰ−５９９４）、およびＢ．ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ、ＮＣＩＭＢ４０４８２からなる群から選択される、
請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】水性組成物中のペクチン分解酵素の量が、繊維１ｇ当たり
酵素タンパク質約０．０１μｇから繊維１ｇ当たり酵素タンパク質約１００００
μｇまでの範囲にある、請求項１４ないし１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】水性組成物のｐＨが３から１１、好ましくは４から８、よ
り好ましくは４．５から７の範囲にあり、かつ水性組成物の温度が９０℃以下、
好ましくは７５℃以下、より好ましくは６５℃以下である、請求項１４ないし１
９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】染色されたデニム織物または衣服がインジゴ染めである、
請求項１４ないし２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】水性組成物がさらに、プロテアーゼ、リパーゼ、クチナー
ゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペクチナーゼ、アミラーゼ、オキシドレダク
ターゼ、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、およびトランスフェラーゼからなる群
から選択された１または複数種の酵素を含む、請求項１４ないし２１のいずれか
に記載の方法。
【請求項２３】セルロース分解酵素が微生物、好ましくは細菌、古細菌、
または真菌から誘導される、請求項１４または２２に記載の方法。
【請求項２４】セルロース分解酵素が単成分セルラーゼ、好ましくは単成
分エンド−β−１，４−グルカナーゼ（ＥＣ３．２．１．４）である、請求項２
３に記載の方法。
【請求項２５】セルロース分解酵素が、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ、Ｈｕｍ
ｉｃｏｌａ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ、Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ、Ｔｈｉｅｌａ
ｖｉａ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓからなる属の群に属する真菌；好ましくはＴｒ
ｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ、Ｈｕｍｉｃｏｌａｉｎｓｏｌｅｎｓ、Ｆ
ｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍ、Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅ
ｒｍｏｐｈｉｌａ、Ｔｈｉｅｌａｖｉａｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ａｓｐｅｒｇ
ｉｌｌｕｓａｃｕｌｅａｔｕｓ、およびＭｅｌａｎｏｃａｒｐｕｓａｌｂｏ
ｍｙｃｅｓからなる種の群；特にＴｈｉｅｌａｖｉａｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、
ＮＲＲＬ８１２６、Ｈｕｍｉｃｏｌａｉｎｓｏｌｅｎｓ、ＤＳＭ１８００、Ｔ
ｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉの株から誘導される、または誘導すること
ができる、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】エンド−β−１，４−グルカナーゼが、Ｂａｃｉｌｌｕｓ
、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｃｅｌｌｖｉｂｒｉｏ、Ｓａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉ
ｘ、Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａからなる属の群に属する細菌から、好まし
くはＢａｃｉｌｌｕｓａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ、Ｃｅｌｌｖｉｂｒｉｏ
ｍｉｘｔｕｓ、およびＳａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉｘａｕｓｔｒａｌｉｅｎｓｉ
ｓの種から誘導される、または誘導することができる、請求項２４に記載の方法
。
【請求項２７】エンド−β−１，４−グルカナーゼが、触媒性のコアドメ
イン（ＣＡＤ）、およびコアドメインと動作可能に連結した、あるいは２つ以上
のセルロース結合ドメイン（ＣＢＤ）の場合にはセルロース結合ドメインと動作
可能に連結した１つまたは複数のセルロース結合ドメインを含む、請求項２４な
いし２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】セルロース分解酵素の量が、織物または衣服１ｇ当たり０
．１〜１００００μｇの濃度に対応する、請求項２４ないし２７のいずれかに記
載の方法。
【請求項２９】浮石を、従来のストーンウォッシュ処理において浮石でジ
ーンズをストーンウォッシュ加工するために通常用いられる量に対して０〜８０
％の量で水性組成物に加える、請求項１４に記載の方法。
【請求項３０】水性組成物がさらに界面活性剤を含む、請求項１ないし２
９のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】水性組成物がさらに緩衝液を含む、請求項１ないし３０の
いずれかに記載の方法。
【請求項３２】水性組成物がさらに緩衝液を含む、請求項１ないし３１の
いずれかに記載の方法。
【請求項３３】仕上工程の間にデニムの織物または衣服から裏側に染みた
染料を除去する方法であって、前記方法が織物または衣服を有効量のペクチン分
解酵素を含む水性組成物で処理することを含む、方法。