JP2002105017A

JP2002105017A - 新規肝障害抑制剤

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Publication number: JP2002105017A
Application number: JP2000299966A
Authority: JP
Inventors: Yasushi Arimoto; 靖有本; Hiroyuki Suganuma; 大行菅沼; Takahiro Inaguma; 隆博稲熊; Kimio Sugiyama; 公男杉山; Hiroaki Ka; 普明何; Hirokazu Kawagishi; 洋和河岸
Original assignee: Kagome Co Ltd
Current assignee: Kagome Co Ltd
Priority date: 2000-09-29
Filing date: 2000-09-29
Publication date: 2002-04-10
Anticipated expiration: 2020-09-29
Also published as: JP4406503B2

Abstract

(57)【要約】【課題】肝障害抑制剤および、肝障害抑制剤の有効
成分として使用できる新規化合物を提供することを課題
とする。【解決手段】下記の式１で表される不飽和脂肪酸誘導体
を、肝障害抑制剤の有効成分として配合する。【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、肝障害抑制剤およ
び、肝障害抑制剤の有効成分として使用できる新規化合
物に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】肝障害のうち急性肝障害についてはある
程度研究も進み種々の治療が行われているが、慢性肝障
害については原因等、不明な点が多く効果的な治療方法
は確立されていない。この慢性肝障害は免疫系を介する
肝障害であると考えられている。

【０００３】このような慢性肝障害に対しては漢方薬を
用いた治療が行われている。この漢方療法においては、
大柴胡湯、小柴胡湯、柴胡桂枝湯、柴胡桂姜湯、四逆散
等が用いられている（「一般用漢方処方（漢方２１０処
方）」日本製薬団体連合会漢方専門委員会（１９７
５）、「漢方概論」藤平健、小倉重成著、創元社（１９
７９）」）。これらの漢方薬に含まれている生薬の有効
成分については不明な点が多いが、例えば三七人参につ
いては、その成分に肝保護作用が認められている（特願
平８−４６１５４）。また、これらの生薬は、副作用が
少ないというメリットが知られている。

【０００４】しかし、これらの生薬は、海外に原料を依
存するものが多いため入手が困難であり、且つ野生のも
のを採取するものもあり作用が一定ではない（「生薬学
第４版」北川勲ら著（廣川書店）ｐ．３８４−３８７
（１９９２））、「漢方薬の評価と開発技術」東京生薬
研究会編（（株）シーエムシー）ｐ．３５３−３５４
（１９８３））という問題がある。このため、漢方薬は
一般的に高価であり、日常的な摂取が困難であるという
デメリットがある。

【０００５】また、野菜を原料に、肝障害抑制作用を有
する有効成分の抽出も試みられている。野菜では、ニン
ニク(Kagawa, K. et al. Japan. J. Pharmacol.,Vol. 4
2, p.19-26(1986), Nakagawa, S. et al. Hiroshima J.
Med. Sci., Vol. 34, p.303-309(1985))、人参(Bishay
ee, A. et al. J. Ethnopharmacl., Vol.47, p.69-74(1
995)、オオヒジキ(САРТИКОВ, А.С.et al. Kh
im. Farm. Zh., Vol.24, p.38-40(1990)）が急性肝障害
抑制効果を示す事が知られているが、慢性肝障害抑制効
果を示すものは知られていなかった。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、肝障害抑制
剤および、肝障害抑制剤の有効成分として使用できる新
規化合物を提供することを課題とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者等は、上記課題
を解決するため精鋭探索したところ、アボガド植物中の
リノール酸誘導体及びオレイン酸誘導体に優れた肝障害
抑制作用があることを見出し、肝障害抑制作用を示す化
合物を単離、精製したところ、新規な化合物が含まれる
ことを同定し、本発明を完成するに至った。

【０００８】すなわち、本発明は、以下に示すものであ
る。（１）下記の式１で表されるリノール酸誘導体。

【０００９】

【化６】（２）下記の式２で表されるリノール酸誘導体。

【００１０】

【化７】（３）下記の式３で表されるオレイン酸誘導体。

【００１１】

【化８】（４）前記（１）〜（３）の化合物または下記の式４も
しくは５で表されるリノール酸誘導体を有効成分として
含有する肝障害抑制剤。

【００１２】

【化９】

【００１３】

【化１０】（５）前記（４）の肝障害抑制剤を含有する、肝障害抑
制用医薬用組成物。（６）前記（４）の肝障害抑制剤を含有する、肝障害抑
制用食品用組成物。

【００１４】

【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。

【００１５】本発明は、肝障害抑制剤および、肝障害抑
制剤の有効成分として使用できる新規化合物に関するも
のである。

【００１６】本発明の肝障害抑制剤の有効成分として使
用できる化合物には、式１または２で表される新規リノ
ール酸誘導体、式３で表される新規オレイン酸誘導体お
よび、式４または５で表されるリノール酸誘導体が含ま
れ、式１〜３の化合物を「新規不飽和脂肪酸誘導体」、
式１〜５の化合物を「不飽和脂肪酸誘導体」呼び、以下
説明する。

【００１７】＜１＞本発明の肝障害抑制剤まず、肝障害抑制剤の有効成分として使用できる新規不
飽和脂肪酸誘導体について説明する。本発明の新規不飽
和脂肪酸誘導体は、上記の式１〜３の構造を有する化合
物である。すなわち、式１で表される化合物１（分子量
３１８：Ｃ₂₁Ｈ ₃₄Ｏ₂）は、（２Ｅ，５Ｅ，１２Ｚ，１
５Ｚ）−１−ヒドロキシヘンイコサ−２，５，１２，１
５−テトラエン−４−オンであり、式２で表される化合
物２（分子量３２０：Ｃ₂₁Ｈ₃₆Ｏ₂）は、（２Ｅ，１２
Ｚ，１５Ｚ）−１−ヒドロキシヘンイコサ−２，１２，
１５−トリエン−４−オンであり、式３で表される化合
物３（分子量３８０：Ｃ₂₃Ｈ₄₀Ｏ₄）は、（５Ｅ，１２
Ｚ）−１−（アセチルオキシ）−２−ヒドロキシヘンイ
コサ−５，１２−ジエン−４−オンである。式１〜３の
不飽和脂肪酸誘導体は、本発明により初めて単離精製、
同定された新規化合物であり、優れた肝障害抑制作用、
特に慢性肝障害抑制作用を有する。

【００１８】また、式４の化合物４及び式５の化合物５
で表される不飽和脂肪酸誘導体は、アボガドから単離さ
れた既知物質であるが、上記式１〜３で表される化合物
と一緒に、肝障害抑制作用を示す化合物として、単離精
製された。

【００１９】式４の化合物４については、ＮＯ，Ｏ₂ ^-の
産生抑制作用があることが報告がされている(BIO INDUS
TRY,Vol.15,No8,p.34-40(1998))。また、式５の化合物
５は、別名ｐｅｒｓｉｎとも呼ばれ、ＮＯ，Ｏ₂ ^-の産生
抑制作用の他、各種の成長阻害作用が認められ、その生
理的作用が研究されている(Journal of Natural Produc
ts,Vol.61,No.9,p.1168-1170(1998), Natural Toxins,
3,p.344-349(1995), BIO INDUSTRY,Vol.15,No8,p.34-40
(1998),WO 95/22696)。しかしながら、式４及び５の化
合物の肝障害抑制作用については報告はなく、本発明に
おいて初めて、これらの化合物が優れた肝障害抑制作
用、特に慢性肝障害抑制作用を有することが明らかにな
った。

【００２０】このように上記の式１〜５で表される不飽
和脂肪酸誘導体は、いずれも肝障害抑制作用が認められ
る分子量が３００〜４００の常温で無色油状の化合物で
あり、ヘキサンや酢酸エチル等の各種の溶媒に溶解する
ため、例えば、常温で液体の各種脂肪酸等の脂溶性の物
質と適宜混合して使用することができる。

【００２１】上記の式１〜５の不飽和脂肪酸誘導体は、
アボガド植物から下記に示す方法により、溶媒抽出して
単離精製することにより得てもよいし、化学的に合成し
てもよい。

【００２２】化学的合成方法としては、例えば、Natura
l Toxins,3,p.344-349(1995)に記載されているように、
アルデヒド誘導体とメチルケトンをアルドール縮合する
ことにより（Paterson I,Goodman JM, Lister MA, Schu
mann RC, McClure CK, Norcross RD,Tetrahedron 46,p.
4663-4684(1990)）、また、適宜、公知の方法を組み合
わせることにより合成することができる。また、国際公
開ＷＯ９５／２２９６９に記載の方法又はその方法に適
宜変更を加えて合成してもよい。

【００２３】また、本発明の肝障害抑制作用を有する式
１〜５の不飽和脂肪酸誘導体は、例えば、アボガド植物
から以下のような方法を経て、単離精製することができ
る。

【００２４】本発明において用いるアボガド植物はクス
ノキ科ワニナシ、アボガド属（M. shearei, Persea）に
属する植物である。ワニナシ、アボガド属としては、ア
メリカナ（P. americana）、メキシコ系（Mexican rac
e）、ガテマラ系（Guatemalanrace）、西インド諸島系
（Indian race）等が挙げられ、特にアメリカナ（P. am
ericana）が好ましい。

【００２５】本発明の肝障害抑制作用を有する不飽和脂
肪酸誘導体は、アボガド植物の果肉、果皮、種子、葉、
葉柄、枝等、並びにそれらを粉砕、乾燥、濃縮等を行っ
た処理物に含まれているが、特に該物質は果肉、果皮に
多く含まれているため、それら組織およびそれら組織の
処理物から抽出することが好ましい。

【００２６】アボガド植物の抽出処理は、連続式、バッ
チ式等の方法で、常法により冷浸または温浸にて任意の
時間行う。例えば、アボガド植物の乾燥粉末を、細かく
粉砕し、抽出溶媒に、室温で１〜４８時間、浸漬及び又
は振とうして行う。その後、抽出液から抽出残渣を除い
て、減圧または限外濾過を行い抽出物を濃縮する。さら
に、必要に応じて溶媒を留去する。

【００２７】このような抽出に用いる溶媒としては、有
機溶媒が好ましく、より好ましくは無極性有機溶媒であ
り、具体的には、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、ベン
ゼン、四塩化炭素等が挙げられ、中でもｎ−ヘキサンが
好ましい。

【００２８】本発明の肝障害抑制作用を有する物質の抽
出例を以下に例示するが、本発明はこの抽出例に限定さ
れるものではない。まず、アボガド植物を凍結乾燥し、
この乾燥粉末に非水溶性の無極性有機溶媒であるｎ−ヘ
キサンを加え、この溶媒に可溶性の成分を抽出する。ア
ボガド植物に加える溶媒の量は、乾燥粉末１ｇ当たり、
１〜２００ｍｌであるのが好ましく、５〜５０ｍｌであ
るのが更に好ましい。操作はアボガド植物にこの溶媒を
加えた後、スターラー等でよく攪拌し、無極性有機溶媒
に可溶性の画分を抽出する。この操作は、通常２回〜５
回繰り返すのが好ましい。この様にして得られた抽出画
分の溶媒を除去することにより油状の抽出物が得られ
る。溶媒の除去方法としては、常圧または減圧条件下で
溶媒を蒸発させる等の、通常に用いられる各種の除去方
法により行うことができる。

【００２９】さらに、上述した抽出物を吸着クロマトグ
ラフィー、分配クロマトグラフィー等の各種クロマトグ
ラフィーを単独あるいは組み合わせて使用してクロマト
グラフ分画することによりさらに分離・精製を行い、か
かる分画により得られた肝障害抑制作用を有する物質を
含む分画物から、本発明の肝障害抑制剤に含有させる式
１〜５の不飽和脂肪酸誘導体を単離精製することが好ま
しい。ここで、肝障害抑制作用を有する物質を含む分画
物（すなわち、不飽和脂肪酸誘導体を含む画分）は、薄
層クロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０、展
開溶媒；ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）におけるＲｆ
値が０．１９〜０．２５の範囲内の値であるといった特
徴を有しているため、これを指標として分画物の選別を
行うことができる。

【００３０】本発明の肝障害抑制作用を有する物質のク
ロマトグラフ分画の例を以下に例示するが、これらに限
定されるものではない。

【００３１】上述した抽出物を溶出力の低い溶出液に溶
解し、吸着クロマトグラフィーとしてシリカゲルカラム
に供する。溶出力を段階的に高くした溶出液で溶出さ
せ、経時的に溶出液を採取することにより分画して分離
・精製する。この分画した画分中の溶媒を除去し、肝障
害抑制作用を有する物質を含む分画物を得ることができ
る。溶媒の除去方法としては、常圧または減圧条件下で
溶媒を蒸発させる等の、通常に用いられる各種の除去方
法により行うことができる。また、分画物の選別は上述
した方法により行うことができる。

【００３２】また、上述した抽出物および分画物に肝障
害抑制作用を有する物質が含まれているか否かを判断す
る方法としては、公知の肝障害作用を検定する方法を用
いることができる。例えば、マウス等のモデル動物に、
かかる抽出物または分画物を一定期間投与した群と、投
与しなかった群とを作製し、これら各群にＤ−ガラクト
サミン等の肝障害を誘発する物質を投与し、各群のモデ
ル動物におけるＧＴＰ、ＧＯＰ等を測定する。かかる測
定値を肝障害の指標として効果の有無を判別し、肝障害
抑制作用を有する物質が含まれているか否かを判断する
ことができる。

【００３３】そして、肝障害抑制作用を有する物質を含
む分画物を、例えば、溶出液の組成を適宜変更させた条
件で、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によ
り、更に分画して、本願発明の新規化合物１〜３およ
び、肝障害抑制作用を有する化合物４及び５を得ること
ができる。分画により単離精製した化合物の同定は、¹
Ｈ-ＮＭＲ、¹³Ｃ-ＮＭＲ、ＩＲスペクトル、ＵＶスペク
トル等の定法に従って測定した値により確認すればよ
い。

【００３４】本発明の肝障害抑制剤は、上記の式１〜５
の化合物を肝障害を抑制する有効成分として含有するこ
とを特徴とするが、これらの式１〜５の化合物は単独で
配合しても良いし、２種類以上を組み合わせて使用して
もよい。

【００３５】＜２＞本発明の肝障害抑制剤を含有する肝
障害抑制用医薬用組成物本発明の医薬用組成物は、上記の肝障害抑制剤を、常法
にしたがって配合したものであり、肝障害抑制作用が期
待できるものであれば特に限定されるものではない。

【００３６】本発明の医薬組成物の剤型は、特に限定さ
れないが、一般に製剤上許容される１または２種類以上
の担体、賦形剤、統合剤、防腐剤、安定剤、香味剤等と
共に混合して、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、水薬、ドリ
ンク剤等の内服剤型とすることが好ましい。このような
製剤化は、通常、医薬の製造に用いられる方法にしたが
って製剤化することができる。

【００３７】上記医薬用組成物の投与量としては、疾患
の種類、症状、患者の年齢、体重等に異なるが、成人１
日当たり、１〜１００ｍｇを、１回ないし数回に分けて
経口投与するのが好ましい。

【００３８】＜３＞本発明の肝障害抑制剤を含有する肝
障害抑制用食品用組成物本発明の食品用組成物は、上記の肝障害抑制剤を、常法
にしたがって配合したものである。

【００３９】本発明の食品用組成物としては、上記の肝
障害抑制剤を含有するものであれば特に限定されるもの
ではないが、種々の食品に、食品として通常用いられて
いる任意成分とともに、食品原料に抽出物を所要量配合
することができる。この抽出物を配合する際に特に留意
するすることはなく、通常の製造方法により加工製造す
ることにより、健康食品、機能性食品を製造することが
できる。配合量は、食品の種類のより異なるが、食品の
味を損なわず、且つ十分な肝障害抑制効果を得るために
は、食品全量に対して、０．００１〜１重量％の割合で
配合するのが好ましい。

【００４０】

【実施例】以下実施例により、本発明を更に具体的に説
明する。

【００４１】

【実施例１】＜本発明の不飽和脂肪酸誘導体の単離精製
＞アボガドの果肉部分を凍結乾燥し、乾燥粉末を得た。
この乾燥粉末を、以下の図１に示す流れに従って分画
し、後の評価に使用した。

【００４２】（ａ）ヘキサンによる分画アボガドの果肉部分を凍結乾燥して得た乾燥粉末１００
ｇに１Ｌのｎ−ヘキサンを加え十分に攪拌後、残渣を取
り除いた上清をヘキサン抽出液として得た。この操作を
更に２回繰り返し、計３回の操作により、３０００ｍｌ
のヘキサン抽出液を得た。この抽出液をエバポレーター
を用いて濃縮させることにより、５８．６ｇの油状濃縮
物がヘキサン画分から得られた。

【００４３】（ｂ）酢酸エチルによる分画次に上記の操作（ａ）の残渣４１．４ｇに酢酸エチル１
Ｌを加え十分に攪拌後、残渣を取り除いた上清を酢酸エ
チル抽出液として得た。この操作を更に２回繰り返し、
計３回の操作により、３０００ｍｌの酢酸エチル抽出液
を得た。この抽出液をエバポレーターを用いて濃縮乾固
させることにより、０．８ｇの固形物が酢酸エチル画分
から得られた。

【００４４】（ｃ）７０％エタノールによる分画次に上記の操作（ｂ）の残渣４０．６ｇに７０％エタノ
ール１Ｌを加え十分に攪拌後、残渣を取り除いた上清を
７０％エタノール抽出液として得た。この操作を更に４
回繰り返し、計５回の操作により、５０００ｍｌの７０
％エタノール抽出液を得た。この抽出液をエバポレータ
ーを用いて濃縮乾固させることにより１６．０ｇの固形
物が７０％エタノール画分から得られた。また、操作
（ｃ）により、２４．６ｇのエタノール残渣が得られ
た。

【００４５】（ｄ）ブチルアルコール（ブタノール）に
よる分画次に上記の操作（ｃ）による濃縮乾固物１６．０ｇを５
００ｍｌの蒸留水に溶解させた。そして、この溶液に５
００ｍｌのｎ−ブタノールを加え十分に攪拌後、分液ロ
ートを用いた向流分配によりブタノール層を抽出した。
残った水層には、更に５００ｍｌのｎ−ブチルアルコー
ルを加え十分に攪拌後、ｎ−ブチルアルコールによる抽
出を行った。この抽出を更に３回繰り返し、計５回の抽
出操作により、２５００ｍｌのブチルアルコール抽出液
を得た。このブチルアルコール抽出液をエバポレーター
を用いて濃縮乾固させることにより２．８ｇの固形物が
ブチルアルコール画分から得られた。

【００４６】また、操作（ｄ）で水層部分の溶液を凍結
乾燥装置を用いて濃縮乾固させることにより１３．２ｇ
の固形物が水溶性画分から得られた。

【００４７】上記の操作による分画により得られた各分
画への分配率（重量％）を表１に示す。ここで、分配率
とは、各分画から得られた固形物の重量を、分画開始前
の重量（１００ｇ）で除した値に１００を乗じて％表示
したものである。

【００４８】

【表１】

【００４９】（ｅ）ヘキサン画分のシリカゲルカラムに
よる分画再び操作（ａ）と同様の操作を規模拡大して行い、ヘキ
サン画分の油状濃縮物を得た。得られた乾燥固形物１０
０ｇを、ヘキサン／酢酸エチル混合溶媒（５／１）５０
０ｍｌに再溶解し、シリカゲルカラム（メルク社製シリ
カゲル６０、８×７３ｃｍ）に供し、組成を変化させた
溶媒をにより溶出させた。ここで使用した溶出溶媒は、
ヘキサン/酢酸エチル（5/1）、ヘキサン/酢酸エチル（4/1）、ヘキサン/酢
酸エチル（3/2）、ヘキサン/酢酸エチル（2/3）、酢酸エチル、メタノ
ールであり、この順にカラムに供し、溶出液を経時的に
採取することにより分画した。これらの抽出物について
薄層クロマトグラフィー（メルク社製シリカゲル６０、
展開溶媒；ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）を行い、紫
外吸収を有するバンドが確認できなくなった時点で、次
の溶出溶媒に変更した。これら分画された溶出液の分画
物について薄層クロマトグラフィー（メルク社製シリカ
ゲル６０、展開溶媒；ヘキサン/酢酸エチル＝4/1）を行い、こ
のＲｆ値の結果を指標として、最終的に７画分に分け
た。それぞれの画分の収量は、画分は８４．１ｇ、画
分は１．２ｇ、画分は１．８ｇ、画分は７．１
ｇ、画分は１．９ｇ、画分は１．５ｇ、画分は
２．４ｇであった。各画分の薄層クロマトグラフィーに
おけるＲｆ値、分配率および溶出溶媒の組成は表２に示
す通りである。

【００５０】

【表２】次に、上記の分画の後、画分をアセトニトリル：水混
合溶媒（９８：２）に再溶解し、ＯＤＳカラム（Wakosi
l-II 5C18HG Prep,和光純薬工業（株）製）を用いた高
速液体クロマトグラフィー（アセトニトリル：水＝９
８：２、UV/VIS検出器:220nm）に供し、５つの化合物を
得た。

【００５１】これらの各化合物の収量は以下の表３の通
りである。

【００５２】

【表３】ここで、収率とは、得られた各化合物の重量を、分画開
始前の重量（ＯＤＳカラムへの供試重量：１０．４５
ｇ）で除した値に１００を乗じて％表示したものであ
る。そして、上記の化合物１〜５について、物質の同定
を行ったところ、それぞれ以下のような結果を得た。

【００５３】（１）化合物１分子量３１８（Ｃ₂₁Ｈ₃₄Ｏ₂）赤外線吸収スペクトル：3420, 1740, 1667, 1616 cm
^-1 核磁気共鳴スペクトル(¹H-NMR,δ)：0.87(3H,t,J=6.
9), 1.27(4H,m), 1.34(6H,m), 1.47(2H,m), 2.05(4H,
m), 2.23(2H,dt,J=7.0,6.4), 2.75(2H,dd,J=6.1,6.1),
4.38(2H,br,s), 5.30(2H,m), 5.34(2H,m), 6.29(1H,dt,
J=14.3,1.2), 6.62(1H,dt,J=15.4,2.1), 6.91(1H,m),
6.93(1H,m) 核磁気共鳴スペクトル(¹³C-NMR,δ)：14.0, 22.5, 2
5.6, 27.1, 27.2, 28.0,28.8, 29.3, 29.4, 31.5, 32.
7, 62.2, 126.3, 127.8, 128.3, 129.2, 129.8, 130.3,
144.8, 148.7, 189.2. 色および性状：無色油状以上の分析結果から、化合物１は下記の式１の構造式を
有する新規リノール酸誘導体と同定した。

【００５４】

【化１１】

【００５５】（２）化合物２分子量３２０（Ｃ₂₁Ｈ₃₆Ｏ₂）赤外線吸収スペクトル：3430, 1668cm^-1 核磁気共鳴スペクトル(¹H-NMR,δ)：0.86(3H,t,J=6.
8), 1.27(14H,m), 1.57(2H,m), 2.02(4H,m), 2.51(2H,
t,J=7.5), 2.78(2H,t,J=6.6), 4.3(2H,m), 5.32(4H,m),
6.33(1H,ddd,J=15.9,3.1,2.1), 6.85(1H,dt,J=15.9,4.
0) 核磁気共鳴スペクトル(¹³C-NMR,δ)：13.9, 22.4, 2
4.0, 25.5, 27.0, 29.0,29.1, 29.2, 29.5, 31.4, 40.
0, 61.6, 127.76, 127.84, 127.9, 129.8, 130.0,145.
1, 201.0, 189,2 色および性状：無色油状以上の分析結果から、化合物２は下記の式２の構造式を
有する新規リノール酸誘導体と同定した。

【００５６】

【化１２】

【００５７】（３）化合物３分子量３８０（Ｃ₂₃Ｈ₄₀Ｏ₄）赤外線吸収スペクトル：3454, 1741, 1667cm^-1 核磁気共鳴スペクトル(¹H-NMR,δ)：0.84(3H,t,J=6.
9), 1.22(16H,m), 1.43(2H,m), 2.00(4H,m), 2.06(3H,
s), 2.19(2H,m), 2.73(2H,d,J=6.1), 4.05(1H,dd,J=11.
3,6.1), 4.10(1H,dd,J=11.3,4.1), 4.30(1H,ddt,J=4.1,
6.1,6.1), 5.31(2H,m), 6.07(1H,d,J=15.9), 6.85(1H,d
t,J=15.9,7.0) 核磁気共鳴スペクトル(¹³C-NMR,δ)：14.0, 22.6, 2
7.1, 27.9, 29.1, 29.28,29.31, 29.4, 29.56, 29.58,
29.6, 31.9, 32.5, 42.3, 66.1, 67.3, 130.2, 149.5,
171.0, 199.6 色および性状：無色油状以上の分析結果から、化合物３は下記の式３の構造式を
有する新規オレイン酸誘導体と同定した。

【００５８】

【化１３】

【００５９】（４）化合物４ＩＲ、ＮＭＲにより化合物１〜３と同様に化合物４を同
定したところ、下記の式４の構造式を有する、リノール
酸誘導体（分子量３７８（Ｃ₂₃Ｈ₃₈Ｏ₄）、無色液状物
質、Bio Industry,15,8.p.34-40(1998)に記載）である
ことを確認した。

【００６０】

【化１４】

【００６１】（５）化合物５ＩＲ、ＮＭＲにより化合物１〜３と同様に化合物５を同
定したところ、下記の式４の構造式を有する、リノール
酸誘導体（分子量３８０（Ｃ₂₃Ｈ₄₀Ｏ₄）、無色液状物
質、Natural Toxins,3,p.344-349(1995)に記載）である
ことを確認した。

【００６２】

【化１５】

【００６３】

【実施例２】次に、上記の化合物１〜５の慢性肝炎に対
する肝保護作用を、ラットを用いたＤ−ガラクトサミン
誘導性の肝障害モデルにより評価した。＜肝障害抑制効果の評価＞四塩化炭素誘導性の肝障害モ
デルが急性毒性的な肝障害モデルであるのに対して、こ
のＤ−ガラクトサミン誘導性の肝障害モデルは、免疫系
を介しての肝障害作用が示唆される慢性肝炎のモデルと
されており、臨床試験での評価結果と相関性が高い。

【００６４】評価には、６週齢の雄性ウィスター系ラッ
トを用いた。１０日間の予備飼育の後、各群の平均体重
がほぼ等しくなるように各群７匹として群分けを行っ
た。そして、上記の各化合物１〜５をアボガド油（アボ
ガド果肉部をヘキサンで抽出し、抽出物をシリカゲルク
ロマトグラフィーに供し、トリグリセライド画分を回収
したもの）に溶解させ（濃度：１００ｍｇ／０．３ｍ
ｌ）、ラット体重１ｋｇあたり１００ｍｇとなるよう
に、カテーテルを用いてラットの胃の中へ注入した。

【００６５】なお、偽薬処理群およびコントロール群に
は、アボガド油のみを、カテーテルを用いてラットの胃
の中へ注入した。

【００６６】上記の化合物投与の４時間後に、肝障害を
誘発するＤ−ガラクトサミンを、ラットの体重１ｋｇあ
たり３５０ｍｇとなるように腹膜内投与し、その２２時
間後に採血を行った。なお、偽薬処理群では、生理食塩
水をを腹内投与した後、同様の条件で採血を行った。

【００６７】次に、この採血した血液を用いて、肝細胞
の脱落により血中濃度が上昇することが知られている酵
素、すなわち、ＡＬＴ：アラニンアミノトランスフェ
ラーゼ（ＧＰＴ）活性と、ＡＳＴ：アスパラギン酸ア
ミノトランスフェラーゼ（ＧＯＴ）活性を市販の測定キ
ット（和光純薬工業（株）製）により測定した。そし
て、この酵素活性の増減を肝障害の指標とした。酵素活
性の増減の結果を図２および３にそれぞれ示す。

【００６８】図２に示したとおり、コントロールでは顕
著に両酵素の活性値が上昇しており、肝細胞の壊死がお
きていることが示唆された。一方、化合物１〜５を投与
した群では、全ての群で明かな肝障害抑制作用が観察さ
れた。

【００６９】尚、図２中に示しているアルファベット
（ａ，ｂ，ｃ，ｄ）は、共通するアルファベットを有し
ていない群間で、危険率５％未満で、統計的に有意な差
があることを示す（分散分析後、事後検定法としてＤｕ
ｎｃａｎ法で検定）。

【００７０】

【発明の効果】本発明の新規不飽和脂肪酸誘導体は優れ
た肝障害抑制効果を有するため、肝障害抑制剤の有効成
分として使用することができる。また、本発明の不飽和
脂肪酸誘導体を有効成分として含有する肝障害抑制剤
は、優れた肝障害抑制効果、特に慢性肝障害抑制効果を
有する。更に、本発明の肝障害抑制剤は植物由来である
ため安全であり、且つその抽出が容易であるため、処方
が容易な、該肝障害抑制剤を含む医薬用または食品用組
成物を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】アボガドから肝障害抑制作用を有する、不飽
和脂肪酸誘導体を抽出する一例を示す図である。

【図２】薬物投与２２時間後のＡＬＴ（ＧＰＴ）活性
及びＡＳＴ（ＧＯＴ）活性値を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者稲熊隆博栃木県那須郡西那須野町西富山17 カゴメ株式会社総合研究所内 (72)発明者杉山公男静岡県清水市船越東町180−８ (72)発明者何普明静岡県静岡市大谷836静岡大学宿舎236号 (72)発明者河岸洋和静岡県静岡市大谷836静岡大学宿舎213号Ｆターム(参考） 4B018 MD10 MD52 ME14 MF01 MF06 4C206 AA01 AA02 AA03 DB07 MA01 MA04 NA14 ZA75 4H006 AA01 AB27 BN10 BR10

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記の式１で表されるリノール酸誘導
体。【化１】
【請求項２】下記の式２で表されるリノール酸誘導
体。【化２】
【請求項３】下記の式３で表されるオレイン酸誘導
体。【化３】
【請求項４】請求項１〜３の化合物または下記の式４
もしくは５で表されるリノール酸誘導体を有効成分とし
て含有する肝障害抑制剤。【化４】【化５】
【請求項５】前記請求項４に記載の肝障害抑制剤を含
有する、肝障害抑制用医薬用組成物。
【請求項６】前記請求項４に記載の肝障害抑制剤を含
有する、肝障害抑制用食品用組成物。