JP2002102339A - 過酸化脂質吸着材 - Google Patents
過酸化脂質吸着材Info
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- JP2002102339A JP2002102339A JP2000298992A JP2000298992A JP2002102339A JP 2002102339 A JP2002102339 A JP 2002102339A JP 2000298992 A JP2000298992 A JP 2000298992A JP 2000298992 A JP2000298992 A JP 2000298992A JP 2002102339 A JP2002102339 A JP 2002102339A
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- lipid peroxide
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- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】過酸化脂質を吸着除去できる過酸化脂質吸着材
を提供する。 【解決手段】比表面積が０．１ｍ2／ｇ以上の支持体に
カチオン性ポリマーが付与されていることを特徴とする
過酸化脂質吸着材。
を提供する。 【解決手段】比表面積が０．１ｍ2／ｇ以上の支持体に
カチオン性ポリマーが付与されていることを特徴とする
過酸化脂質吸着材。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、過酸化脂質吸着材
に関する。
に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来より、心疾患をもつ患者や人工透析
患者は動脈硬化を呈している場合が多く、血中の過酸化
脂質濃度が増大している。
患者は動脈硬化を呈している場合が多く、血中の過酸化
脂質濃度が増大している。
【０００３】過酸化脂質の中でも、特に酸化低密度リポ
蛋白（以下、ＬＤＬという）は様々な生物作用をもって
おり、内皮細胞から一酸化窒素（ＮＯ）産生を抑制する
などの作用以外にも、単球を内皮下に遊送、集積させ、
そのものをマクロファージとさせ、酸化ＬＤＬそれ自身
を取り込み泡沫細胞とさせ、動脈壁のプラーク形成を促
進するほか、内皮細胞や平滑筋細胞傷害を促進するな
ど、動脈硬化の発症、進展に重要な役割を果たしてい
る。従って、血中から過酸化脂質、特に酸化ＬＤＬを除
去することが望まれている。これまで血中の過酸化脂質
濃度を低下させる有効な手段はなかった。
蛋白（以下、ＬＤＬという）は様々な生物作用をもって
おり、内皮細胞から一酸化窒素（ＮＯ）産生を抑制する
などの作用以外にも、単球を内皮下に遊送、集積させ、
そのものをマクロファージとさせ、酸化ＬＤＬそれ自身
を取り込み泡沫細胞とさせ、動脈壁のプラーク形成を促
進するほか、内皮細胞や平滑筋細胞傷害を促進するな
ど、動脈硬化の発症、進展に重要な役割を果たしてい
る。従って、血中から過酸化脂質、特に酸化ＬＤＬを除
去することが望まれている。これまで血中の過酸化脂質
濃度を低下させる有効な手段はなかった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、かか
る従来技術の欠点を改良し、特に、過酸化脂質を吸着除
去できる吸着材を提供することにある。
る従来技術の欠点を改良し、特に、過酸化脂質を吸着除
去できる吸着材を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するた
め、本発明は次の構成を有する。「比表面積が０．１ｍ
2／ｇ以上の支持体にカチオン性ポリマーが付与されて
いることを特徴とする過酸化脂質吸着材。」
め、本発明は次の構成を有する。「比表面積が０．１ｍ
2／ｇ以上の支持体にカチオン性ポリマーが付与されて
いることを特徴とする過酸化脂質吸着材。」
【０００６】
【発明の実施の形態】本発明の過酸化脂質吸着材は、比
表面積が０．１ｍ2／ｇ以上の支持体にカチオン性ポリ
マーが付与されていることを特徴とする。支持体の比表
面積が０．１ｍ2／ｇ以上であることにより、効率的に
過酸化脂質を除去することができる。比表面積がそれ以
下の支持体では効率的に過酸化脂質を除去できない。
表面積が０．１ｍ2／ｇ以上の支持体にカチオン性ポリ
マーが付与されていることを特徴とする。支持体の比表
面積が０．１ｍ2／ｇ以上であることにより、効率的に
過酸化脂質を除去することができる。比表面積がそれ以
下の支持体では効率的に過酸化脂質を除去できない。
【０００７】カチオン性ポリマーとしては、１級、２
級、３級アミノ基、４級アンモニウム塩を有するアミノ
基含有ポリマー、アジリジン（エチレンイミン）化合物
を有するポリマー、キチン、キトサン、アクリルアミド
系ポリマー、およびこれらの共重合体またはノニオン、
アニオン性化合物との共重合体などが挙げられる。ま
た、該ポリマーは直鎖状、分岐状、環状、いずれであっ
てもよい。また、分子量は６００以上の化合物のことを
いう。
級、３級アミノ基、４級アンモニウム塩を有するアミノ
基含有ポリマー、アジリジン（エチレンイミン）化合物
を有するポリマー、キチン、キトサン、アクリルアミド
系ポリマー、およびこれらの共重合体またはノニオン、
アニオン性化合物との共重合体などが挙げられる。ま
た、該ポリマーは直鎖状、分岐状、環状、いずれであっ
てもよい。また、分子量は６００以上の化合物のことを
いう。
【０００８】アミノ基含有ポリマーの例として、ポリア
ルキレンイミン、ポリアリルアミン、ポリビニルアミ
ン、ジエチルアミノエチルデキストランおよびそれらに
置換基の導入されたもの、およびこれらの構成するモノ
マー単位からなる共重合体などが挙げられる。
ルキレンイミン、ポリアリルアミン、ポリビニルアミ
ン、ジエチルアミノエチルデキストランおよびそれらに
置換基の導入されたもの、およびこれらの構成するモノ
マー単位からなる共重合体などが挙げられる。
【０００９】ポリエチレンイミン誘導体としては、ポリ
エチレンイミンをアルキル化、カルボキシル化、フェニ
ル化、リン酸化、スルホン化など種々の割合で誘導体化
したものが上げられる。
エチレンイミンをアルキル化、カルボキシル化、フェニ
ル化、リン酸化、スルホン化など種々の割合で誘導体化
したものが上げられる。
【００１０】ポリエチレンイミンには、分子量６００以
上の直鎖状、分岐状のものが用いられる。
上の直鎖状、分岐状のものが用いられる。
【００１１】カチオン性ポリマーの中でも毒性の低さ、
入手のしやすさ、取り扱いのしやすさなどから分岐状の
ポリエチレンイミンが好適に用いられる。
入手のしやすさ、取り扱いのしやすさなどから分岐状の
ポリエチレンイミンが好適に用いられる。
【００１２】付与されるカチオン性ポリマーの量は、過
酸化脂質の除去量を増やすためにできるだけ多いことが
好ましい。支持体におけるカチオン性ポリマーの含有量
は、該支持体を、酸性染料の染色液を用いて染色した場
合の染料の吸着量と比例する。５×１０-2ｍＭのアシッ
ドオレンジ７染色液（ｐＨ３）を、支持体表面積１ｃｍ
2あたり１．２５ｍｌ用い、その中に支持体を３７℃で
５時間浸漬する。染色液の４７５ｎｍにおける吸光度を
測定して、染色操作前後の溶液中のアシッドオレンジ７
の量を定量することにより、その減少量から支持体に吸
着したアシッドオレンジ７量を算出できる。支持体表面
積１ｍ2あたりの血漿量が３．３×１０2ｍｌ／ｍ2であ
る条件で吸着操作を施したときに、該血漿中に含まれて
いる初期濃度２μｇ／ｍｌの酸化低密度リポ蛋白の吸着
除去率が４５％以上の吸着材を得るためには、上記の染
色量は、支持体表面積あたり１２ｎｍｏｌ／ｃｍ2以上
であることが望ましい。
酸化脂質の除去量を増やすためにできるだけ多いことが
好ましい。支持体におけるカチオン性ポリマーの含有量
は、該支持体を、酸性染料の染色液を用いて染色した場
合の染料の吸着量と比例する。５×１０-2ｍＭのアシッ
ドオレンジ７染色液（ｐＨ３）を、支持体表面積１ｃｍ
2あたり１．２５ｍｌ用い、その中に支持体を３７℃で
５時間浸漬する。染色液の４７５ｎｍにおける吸光度を
測定して、染色操作前後の溶液中のアシッドオレンジ７
の量を定量することにより、その減少量から支持体に吸
着したアシッドオレンジ７量を算出できる。支持体表面
積１ｍ2あたりの血漿量が３．３×１０2ｍｌ／ｍ2であ
る条件で吸着操作を施したときに、該血漿中に含まれて
いる初期濃度２μｇ／ｍｌの酸化低密度リポ蛋白の吸着
除去率が４５％以上の吸着材を得るためには、上記の染
色量は、支持体表面積あたり１２ｎｍｏｌ／ｃｍ2以上
であることが望ましい。
【００１３】本発明の支持体の素材としては、医療用に
用いられている素材が好ましく、例えば、ポリ塩化ビニ
ル、セルロース系ポリマー、ポリスチレン、ポリメチル
メタクリレート、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポ
リウレタンなどが挙げられる。この中でも特にポリスル
ホンは成形が容易であるため、好適に用いられる。
用いられている素材が好ましく、例えば、ポリ塩化ビニ
ル、セルロース系ポリマー、ポリスチレン、ポリメチル
メタクリレート、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポ
リウレタンなどが挙げられる。この中でも特にポリスル
ホンは成形が容易であるため、好適に用いられる。
【００１４】本発明で用いられるポリスルホンは、主鎖
に芳香環、スルフォニル基およびエーテル基をもつもの
で、例えば、次式（１）、（２）の化学式で示されるポ
リスルホンが好適に使用されるが、本発明ではこれらに
限定されない。式中のｎは、５０〜８０の整数である。
に芳香環、スルフォニル基およびエーテル基をもつもの
で、例えば、次式（１）、（２）の化学式で示されるポ
リスルホンが好適に使用されるが、本発明ではこれらに
限定されない。式中のｎは、５０〜８０の整数である。
【００１５】
【化１】
【００１６】ポリスルホンの具体例としては、”ユーデ
ル”Ｐ−１７００、Ｐ−３５００（テイジンアモコ社
製）、”ウルトラソン”Ｓ３０１０、Ｓ６０１０（ＢＡ
ＳＦ社製）、ビクトレックス（住友化学）、レーデルＡ
（テイジンアモコ社製）、”ウルトラソン”Ｅ（ＢＡＳ
Ｆ社製）等のポリスルホンが挙げられる。また、本発明
で用いられるポリスルホンは上記式（１）および／また
は（２）で表される繰り返し単位のみからなるポリマー
が好適ではあるが、本発明の効果を妨げない範囲で他の
モノマーと共重合していても良い。他の共重合モノマー
は１０重量％以下であることが好ましい。
ル”Ｐ−１７００、Ｐ−３５００（テイジンアモコ社
製）、”ウルトラソン”Ｓ３０１０、Ｓ６０１０（ＢＡ
ＳＦ社製）、ビクトレックス（住友化学）、レーデルＡ
（テイジンアモコ社製）、”ウルトラソン”Ｅ（ＢＡＳ
Ｆ社製）等のポリスルホンが挙げられる。また、本発明
で用いられるポリスルホンは上記式（１）および／また
は（２）で表される繰り返し単位のみからなるポリマー
が好適ではあるが、本発明の効果を妨げない範囲で他の
モノマーと共重合していても良い。他の共重合モノマー
は１０重量％以下であることが好ましい。
【００１７】本発明においては、本来除去すべきでない
酸化されていない正常な脂質の除去を抑制し、過酸化脂
質のみを選択的に除去するという観点から、親水性高分
子をブレンドすることが好ましい。親水性高分子として
は、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン等
が、血液適合性の点で好ましい。また、親水性高分子に
ついては、カチオン性ポリマーと放射線架橋できるもの
であるとより好ましい。ポリスルホンとの相溶性から、
特にポリビニルピロリドンが好ましい。
酸化されていない正常な脂質の除去を抑制し、過酸化脂
質のみを選択的に除去するという観点から、親水性高分
子をブレンドすることが好ましい。親水性高分子として
は、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン等
が、血液適合性の点で好ましい。また、親水性高分子に
ついては、カチオン性ポリマーと放射線架橋できるもの
であるとより好ましい。ポリスルホンとの相溶性から、
特にポリビニルピロリドンが好ましい。
【００１８】ポリビニルピロリドンは、支持体となる素
材と積層されていても良いが、混合ないしは相溶されて
いる方が好ましい。
材と積層されていても良いが、混合ないしは相溶されて
いる方が好ましい。
【００１９】ポリビニルピロリドンとしては、市販され
ている重量平均分子量３６万、１６万、４万、１万のも
のが好適に用いられるが、もちろんそれ以外の分子量の
ものを使用してもかまわない。ポリビニルピロリドンの
重量平均分子量は２０００〜２００００００が好まし
く、１００００〜１５０００００がより好ましい。な
お、前記分子量は原料段階での分子量であり、最終製品
においては、放射線架橋などにより分子量は前記値より
遙かに大きなものとなっている場合もある。また、本発
明で用いられるポリビニルピロリドンは、支持体となる
素材とブレンドして用いる場合、ホモポリマーが好適で
はあるが、本発明の効果を妨げない範囲で他のモノマー
と共重合していても良い。他の共重合モノマーは１０重
量％以下であることが好ましい。
ている重量平均分子量３６万、１６万、４万、１万のも
のが好適に用いられるが、もちろんそれ以外の分子量の
ものを使用してもかまわない。ポリビニルピロリドンの
重量平均分子量は２０００〜２００００００が好まし
く、１００００〜１５０００００がより好ましい。な
お、前記分子量は原料段階での分子量であり、最終製品
においては、放射線架橋などにより分子量は前記値より
遙かに大きなものとなっている場合もある。また、本発
明で用いられるポリビニルピロリドンは、支持体となる
素材とブレンドして用いる場合、ホモポリマーが好適で
はあるが、本発明の効果を妨げない範囲で他のモノマー
と共重合していても良い。他の共重合モノマーは１０重
量％以下であることが好ましい。
【００２０】なお、前記以外のポリマーなどが、本発明
の効果を妨げない範囲で混合されていても良いが、その
ようなその他の素材は、支持体全重量中、１０重量％以
下であることが好ましい。
の効果を妨げない範囲で混合されていても良いが、その
ようなその他の素材は、支持体全重量中、１０重量％以
下であることが好ましい。
【００２１】支持体はポリスルホンとポリビニルピロリ
ドン（重量比率２０：１〜１：５が好ましく、５：１〜
１：１がより好ましい）を良溶媒（Ｎ，Ｎ−ジメチルア
セトアミド、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムア
ミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジオキサンなどが好まし
い）または良溶媒を含む混合溶液に溶解させた原液（濃
度は、１０〜３０重量％が好ましく、１５〜２５重量％
がより好ましい）を成形することにより得られる。
ドン（重量比率２０：１〜１：５が好ましく、５：１〜
１：１がより好ましい）を良溶媒（Ｎ，Ｎ−ジメチルア
セトアミド、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムア
ミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジオキサンなどが好まし
い）または良溶媒を含む混合溶液に溶解させた原液（濃
度は、１０〜３０重量％が好ましく、１５〜２５重量％
がより好ましい）を成形することにより得られる。
【００２２】支持体形状は、平膜、中空糸膜、繊維状、
粒状などどういう形状であってもよいが、支持体が多孔
性材料の場合、表面積を有効にするためには孔径が３０
ｎｍ以上であることが望ましい。
粒状などどういう形状であってもよいが、支持体が多孔
性材料の場合、表面積を有効にするためには孔径が３０
ｎｍ以上であることが望ましい。
【００２３】支持体が多孔性材料および凹凸のある材料
の場合の比表面積は、水銀圧入法により得られる水銀圧
入曲線から計算によって求めることができる。市販の人
工透析膜のような内表面の膜の孔径が小さい中空糸膜の
場合、内表面しか有効に使用できないため、実際に有効
となる比表面積は内表面積の大きさ／支持体の重量から
算出される値が実際の比表面積となり、０．１ｍ2／ｇ
を下回り、満足できる吸着性能が得られず好ましくな
い。
の場合の比表面積は、水銀圧入法により得られる水銀圧
入曲線から計算によって求めることができる。市販の人
工透析膜のような内表面の膜の孔径が小さい中空糸膜の
場合、内表面しか有効に使用できないため、実際に有効
となる比表面積は内表面積の大きさ／支持体の重量から
算出される値が実際の比表面積となり、０．１ｍ2／ｇ
を下回り、満足できる吸着性能が得られず好ましくな
い。
【００２４】本発明の過酸化脂質吸着材は、前記支持体
とカチオン性ポリマーの共存下で放射線照射または加熱
処理することにより製造することができる。これにより
支持体表面積１ｍ2あたりの血漿量が３．３×１０2ｍｌ
／ｍ2である条件で吸着操作を施したときに、該血漿中
に含まれている初期濃度２μｇ／ｍｌの酸化ＬＤＬの吸
着除去率が４５％以上達成できることを見いだした。た
だし、ここでいう支持体表面積とは、支持体の細孔部分
や凹凸を含めない表面積のことをいう。
とカチオン性ポリマーの共存下で放射線照射または加熱
処理することにより製造することができる。これにより
支持体表面積１ｍ2あたりの血漿量が３．３×１０2ｍｌ
／ｍ2である条件で吸着操作を施したときに、該血漿中
に含まれている初期濃度２μｇ／ｍｌの酸化ＬＤＬの吸
着除去率が４５％以上達成できることを見いだした。た
だし、ここでいう支持体表面積とは、支持体の細孔部分
や凹凸を含めない表面積のことをいう。
【００２５】支持体にカチオン性ポリマーを付与させる
には、製造時に支持体を構成する素材にカチオン性ポリ
マーを混合させたり、支持体を成形後、カチオン性ポリ
マーの溶液に浸漬させたりする方法などがある。この中
で、支持体を成形後、カチオン性ポリマー溶液に浸漬さ
せる方法は、容易に生産に適用することができる利点が
ある。
には、製造時に支持体を構成する素材にカチオン性ポリ
マーを混合させたり、支持体を成形後、カチオン性ポリ
マーの溶液に浸漬させたりする方法などがある。この中
で、支持体を成形後、カチオン性ポリマー溶液に浸漬さ
せる方法は、容易に生産に適用することができる利点が
ある。
【００２６】支持体とカチオン性ポリマーの共存下で放
射線照射または加熱処理する方法としては、支持体をカ
チオン性ポリマー溶液に浸漬した状態で放射線照射また
は加熱処理する方法、支持体をカチオン性ポリマー溶液
に浸漬させた後、溶液を除去し、湿潤状態で放射線照射
または加熱処理する方法、支持体をカチオン性ポリマー
溶液に浸漬させ、溶液を水洗除去し、カチオン性ポリマ
ーを支持体に吸着させた状態で放射線照射または加熱処
理する方法などが挙げられる。
射線照射または加熱処理する方法としては、支持体をカ
チオン性ポリマー溶液に浸漬した状態で放射線照射また
は加熱処理する方法、支持体をカチオン性ポリマー溶液
に浸漬させた後、溶液を除去し、湿潤状態で放射線照射
または加熱処理する方法、支持体をカチオン性ポリマー
溶液に浸漬させ、溶液を水洗除去し、カチオン性ポリマ
ーを支持体に吸着させた状態で放射線照射または加熱処
理する方法などが挙げられる。
【００２７】支持体を浸漬するカチオン性ポリマー溶液
の濃度はカチオン性ポリマーの固定化量および酸化ＬＤ
Ｌの吸着除去率から０．０５ｗｔ％以上であることが望
ましい。
の濃度はカチオン性ポリマーの固定化量および酸化ＬＤ
Ｌの吸着除去率から０．０５ｗｔ％以上であることが望
ましい。
【００２８】以下、本発明の過酸化脂質吸着材の性能測
定条件を記載する。 （１）抗酸化ＬＤＬ抗体の作製 板部らが作製したものを用いた（Ｈ．Ｉｔａｂｅ ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：１５２７
４、１９９４）。すなわち、ヒト粥状硬化病巣ホモジェ
ネートをマウスに注射して免疫、そのマウスの脾臓から
ハイブリドーマを作製し、硫酸銅処理ＬＤＬと反応する
ものを選別した。抗体クラスは、マウスＩｇＭで、未処
理ＬＤＬ、アセチルＬＤＬ、マロンジアルデヒドＬＤＬ
とは反応しない。フォスファチジルコリンのアルデヒド
誘導体やヒドロペルオキシドを含めていくつかのフォス
ファチジルコリン過酸化反応生成物と反応する。１５０
ｍＭのＮａＣｌを含む１０ｍＭほう酸緩衝液（ｐＨ８．
５）に溶解したものを用いた（蛋白濃度０．６０ｍｇ／
ｍｌ）。 （２）酸化ＬＤＬの調製 市販のＬＤＬ（フナコシ製）を脱塩した後、０．２ｍｇ
／ｍｌとなるようにリン酸緩衝液（以下ＰＢＳという）
で希釈後、０．５ｍＭ硫酸銅水溶液を１ｗｔ％添加し、
３７℃で１６時間反応させた。２５ｍＭのエチレンジア
ミン四酢酸（以下ＥＤＴＡという）を１ｗｔ％、１０ｗ
ｔ％アジ化ナトリウムを０．０２ｗｔ％となるように添
加したものを酸化ＬＤＬ標品とした。 （３）吸着操作 健常者血漿（日本人、３０歳）に上記酸化ＬＤＬを２μ
ｇ／ｍｌとなるように添加した。
定条件を記載する。 （１）抗酸化ＬＤＬ抗体の作製 板部らが作製したものを用いた（Ｈ．Ｉｔａｂｅ ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：１５２７
４、１９９４）。すなわち、ヒト粥状硬化病巣ホモジェ
ネートをマウスに注射して免疫、そのマウスの脾臓から
ハイブリドーマを作製し、硫酸銅処理ＬＤＬと反応する
ものを選別した。抗体クラスは、マウスＩｇＭで、未処
理ＬＤＬ、アセチルＬＤＬ、マロンジアルデヒドＬＤＬ
とは反応しない。フォスファチジルコリンのアルデヒド
誘導体やヒドロペルオキシドを含めていくつかのフォス
ファチジルコリン過酸化反応生成物と反応する。１５０
ｍＭのＮａＣｌを含む１０ｍＭほう酸緩衝液（ｐＨ８．
５）に溶解したものを用いた（蛋白濃度０．６０ｍｇ／
ｍｌ）。 （２）酸化ＬＤＬの調製 市販のＬＤＬ（フナコシ製）を脱塩した後、０．２ｍｇ
／ｍｌとなるようにリン酸緩衝液（以下ＰＢＳという）
で希釈後、０．５ｍＭ硫酸銅水溶液を１ｗｔ％添加し、
３７℃で１６時間反応させた。２５ｍＭのエチレンジア
ミン四酢酸（以下ＥＤＴＡという）を１ｗｔ％、１０ｗ
ｔ％アジ化ナトリウムを０．０２ｗｔ％となるように添
加したものを酸化ＬＤＬ標品とした。 （３）吸着操作 健常者血漿（日本人、３０歳）に上記酸化ＬＤＬを２μ
ｇ／ｍｌとなるように添加した。
【００２９】容積２．０ｃｃのポリプロピレン製の遠心
管（エッペンドルフ）に表面積が９ｃｍ2の本発明の吸
着材を５ｍｍ角にきざんで入れ、上記血漿０．３ｍｌを
添加して吸着材に血漿を浸漬し、３７℃で４時間静置し
た（支持体表面積１ｍ2あたりの血漿量は３．３×１０2
ｍｌ／ｍ2）。
管（エッペンドルフ）に表面積が９ｃｍ2の本発明の吸
着材を５ｍｍ角にきざんで入れ、上記血漿０．３ｍｌを
添加して吸着材に血漿を浸漬し、３７℃で４時間静置し
た（支持体表面積１ｍ2あたりの血漿量は３．３×１０2
ｍｌ／ｍ2）。
【００３０】吸着前後の血漿中の酸化ＬＤＬ濃度を定量
することにより、吸着除去率を下記式により算出した。
することにより、吸着除去率を下記式により算出した。
【００３１】吸着除去率（％）＝１００×（吸着前の濃
度−吸着後の濃度）／吸着前の濃度 （４）酸化ＬＤＬ濃度の測定 抗酸化ＬＤＬ抗体をＰＢＳで５μｇ／ｍｌに希釈し、９
６穴のプレートに１００μｌ／ウェルずつ分注し、室温
で２時間震盪した後、４℃にて一晩以上壁に吸着させ
た。
度−吸着後の濃度）／吸着前の濃度 （４）酸化ＬＤＬ濃度の測定 抗酸化ＬＤＬ抗体をＰＢＳで５μｇ／ｍｌに希釈し、９
６穴のプレートに１００μｌ／ウェルずつ分注し、室温
で２時間震盪した後、４℃にて一晩以上壁に吸着させ
た。
【００３２】ウェル中の抗体溶液を捨て、１ｗｔ％Ｂｏ
ｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ Ａｌｂｍｉｎ（ＢＳＡ、”フラ
クションＶ”、生化学工業）を含むトリス−塩酸緩衝液
（ｐＨ８．０）を２００μｌ／ウェルずつ分注し、室温
で２時間震盪して壁をブロッキングした後、ウェル中の
ＢＳＡ溶液を捨て、酸化ＬＤＬを含んだ血漿および検量
線作成用のスタンダード（０〜２μｇ／ｍｌの酸化ＬＤ
Ｌを含むＰＢＳ緩衝液）を１００μｌ／ウェルずつ分注
した。その後、室温で３０分震盪した後、４℃で一晩放
置した。
ｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ Ａｌｂｍｉｎ（ＢＳＡ、”フラ
クションＶ”、生化学工業）を含むトリス−塩酸緩衝液
（ｐＨ８．０）を２００μｌ／ウェルずつ分注し、室温
で２時間震盪して壁をブロッキングした後、ウェル中の
ＢＳＡ溶液を捨て、酸化ＬＤＬを含んだ血漿および検量
線作成用のスタンダード（０〜２μｇ／ｍｌの酸化ＬＤ
Ｌを含むＰＢＳ緩衝液）を１００μｌ／ウェルずつ分注
した。その後、室温で３０分震盪した後、４℃で一晩放
置した。
【００３３】室温に戻し、ウェル中の溶液を捨て、０．
０５ｗｔ％”トゥイーン−２０”（片山化学）を含むト
リス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）でウェルを３回洗浄し
た。洗浄したウェルにＰＢＳで２０００倍に希釈したヒ
ツジ抗アポＢ抗体（ＴＨＥＢＩＮＤＩＮＧ ＳＩＴＥ）
を１００μｌ／ウェルずつ分注し、室温で２時間震盪し
た後、ウェル中の抗アポＢ抗体を捨て、０．０５ｗｔ
％”トゥイーン−２０”を含むトリス−塩酸緩衝液（ｐ
Ｈ８．０）でウェルを３回洗浄した。洗浄したウェルに
２ｗｔ％”ブロックエース”（大日本製薬）を含むトリ
ス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）で２０００倍に希釈した
アルカリ性フォスファターゼ標識ロバ抗ヒツジＩｇＧ抗
体（ＣＨＥＭＩＣＯＮ）を１００μｌ／ウェルずつ分注
し、室温で２時間震盪した。その後、ウェル中の標識抗
体を捨て、０．０５ｗｔ％トゥイーン−２０を含むトリ
ス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）でウェルを３回洗浄し、
さらにトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）で２回洗浄し
た。続いて、ｐ−ニトロフェニルリン酸（Ｂｏｅｈｒｉ
ｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ ＧｍｂＨ）の１ｍｇ／ｍ
ｌ溶液（０．０００５Ｍ ＭｇＣｌ2、１Ｍジエタノー
ルアミン緩衝液、ｐＨ９．８）を１００μｌ／ウェルず
つ分注し、適当な時間室温で反応させた後、４１５ｎｍ
の吸光度をプレートリーダーで測定した。スタンダード
の結果から検量線を引き、酸化ＬＤＬ濃度を決定した。
０５ｗｔ％”トゥイーン−２０”（片山化学）を含むト
リス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）でウェルを３回洗浄し
た。洗浄したウェルにＰＢＳで２０００倍に希釈したヒ
ツジ抗アポＢ抗体（ＴＨＥＢＩＮＤＩＮＧ ＳＩＴＥ）
を１００μｌ／ウェルずつ分注し、室温で２時間震盪し
た後、ウェル中の抗アポＢ抗体を捨て、０．０５ｗｔ
％”トゥイーン−２０”を含むトリス−塩酸緩衝液（ｐ
Ｈ８．０）でウェルを３回洗浄した。洗浄したウェルに
２ｗｔ％”ブロックエース”（大日本製薬）を含むトリ
ス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）で２０００倍に希釈した
アルカリ性フォスファターゼ標識ロバ抗ヒツジＩｇＧ抗
体（ＣＨＥＭＩＣＯＮ）を１００μｌ／ウェルずつ分注
し、室温で２時間震盪した。その後、ウェル中の標識抗
体を捨て、０．０５ｗｔ％トゥイーン−２０を含むトリ
ス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）でウェルを３回洗浄し、
さらにトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）で２回洗浄し
た。続いて、ｐ−ニトロフェニルリン酸（Ｂｏｅｈｒｉ
ｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ ＧｍｂＨ）の１ｍｇ／ｍ
ｌ溶液（０．０００５Ｍ ＭｇＣｌ2、１Ｍジエタノー
ルアミン緩衝液、ｐＨ９．８）を１００μｌ／ウェルず
つ分注し、適当な時間室温で反応させた後、４１５ｎｍ
の吸光度をプレートリーダーで測定した。スタンダード
の結果から検量線を引き、酸化ＬＤＬ濃度を決定した。
【００３４】
【実施例】実施例１ ポリスルホン（テイジンアモコ社製”ユーデル”Ｐ−３
５００）１８重量部、ポリビニルピロリドン（ＢＡＳＦ
社製Ｋ３０）９重量部をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
７２重量部、水１重量部に加え、９０℃１４時間加熱溶
解した。この溶液を０．１ｍｍスペーサー付きのガラス
板に塗布し、ドクターブレードにて溶液を引き延ばした
ものを水中にいれて、凝固させ、ポリスルホン／ポリビ
ニルピロリドンブレンドからなる平膜状の支持体を作成
した。この支持体の比表面積は１１．９ｍ2／ｇであっ
た。
５００）１８重量部、ポリビニルピロリドン（ＢＡＳＦ
社製Ｋ３０）９重量部をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
７２重量部、水１重量部に加え、９０℃１４時間加熱溶
解した。この溶液を０．１ｍｍスペーサー付きのガラス
板に塗布し、ドクターブレードにて溶液を引き延ばした
ものを水中にいれて、凝固させ、ポリスルホン／ポリビ
ニルピロリドンブレンドからなる平膜状の支持体を作成
した。この支持体の比表面積は１１．９ｍ2／ｇであっ
た。
【００３５】上記、ポリスルホン／ポリビニルピロリド
ンブレンド支持体を十分水洗した後、１ｗｔ％のポリエ
チレンイミン（分子量１万、和光純薬製）水溶液に浸漬
して、２５ｋＧｙにてγ線照射した。放射線処理した支
持体は、十分水洗した後、吸着実験に供した。
ンブレンド支持体を十分水洗した後、１ｗｔ％のポリエ
チレンイミン（分子量１万、和光純薬製）水溶液に浸漬
して、２５ｋＧｙにてγ線照射した。放射線処理した支
持体は、十分水洗した後、吸着実験に供した。
【００３６】実施例２ 実施例１と同様にしてポリスルホン／ポリビニルピロリ
ドンブレンド支持体を作成し、０．１ｗｔ％のポリエチ
レンイミン水溶液に浸漬して、２５ｋＧｙにてγ線照射
したものを作成した。
ドンブレンド支持体を作成し、０．１ｗｔ％のポリエチ
レンイミン水溶液に浸漬して、２５ｋＧｙにてγ線照射
したものを作成した。
【００３７】比較例１ 実施例１と同様にしてポリスルホン／ポリビニルピロリ
ドンブレンド支持体を作成し、１ｗｔ％のポリエチレン
イミン水溶液の代わりに水を充填して、２５ｋＧｙにて
γ線照射したものを作成した。
ドンブレンド支持体を作成し、１ｗｔ％のポリエチレン
イミン水溶液の代わりに水を充填して、２５ｋＧｙにて
γ線照射したものを作成した。
【００３８】実施例３ 実施例１と同様にしてポリスルホン／ポリビニルピロリ
ドンブレンド支持体を作成し、１ｗｔ％のポリエチレン
イミン水溶液に浸漬した後、水溶液を抜き出し、窒素ガ
スを容器内に充填し、支持体は濡れた状態で、２５ｋＧ
ｙにてγ線照射したものを作成した。
ドンブレンド支持体を作成し、１ｗｔ％のポリエチレン
イミン水溶液に浸漬した後、水溶液を抜き出し、窒素ガ
スを容器内に充填し、支持体は濡れた状態で、２５ｋＧ
ｙにてγ線照射したものを作成した。
【００３９】実施例４ 実施例１と同様にしてポリスルホン／ポリビニルピロリ
ドンブレンド支持体を作成し、１ｗｔ％のポリエチレン
イミン水溶液に浸漬した後、水溶液を抜き出し、支持体
を水洗した後、水を充填し、ポリエチレンイミンを支持
体に吸着させた状態で、２５ｋＧｙにてγ線照射したも
のを作成した。
ドンブレンド支持体を作成し、１ｗｔ％のポリエチレン
イミン水溶液に浸漬した後、水溶液を抜き出し、支持体
を水洗した後、水を充填し、ポリエチレンイミンを支持
体に吸着させた状態で、２５ｋＧｙにてγ線照射したも
のを作成した。
【００４０】実施例５ 実施例１と同様にしてポリスルホン／ポリビニルピロリ
ドンブレンド支持体を作成し、０．０１ｗｔ％のポリエ
チレンイミン水溶液に浸漬して、２５ｋＧｙにてγ線照
射したものを作成した。
ドンブレンド支持体を作成し、０．０１ｗｔ％のポリエ
チレンイミン水溶液に浸漬して、２５ｋＧｙにてγ線照
射したものを作成した。
【００４１】実施例６ 実施例１と同様にしてポリスルホン／ポリビニルピロリ
ドンブレンド支持体を作成し、１ｗｔ％のポリエチレン
イミン水溶液に浸漬した後、水溶液を抜き出し、そのま
まポリエチレンイミン溶液で濡れた状態で、１４０℃で
２時間加熱処理したものを作成した。
ドンブレンド支持体を作成し、１ｗｔ％のポリエチレン
イミン水溶液に浸漬した後、水溶液を抜き出し、そのま
まポリエチレンイミン溶液で濡れた状態で、１４０℃で
２時間加熱処理したものを作成した。
【００４２】実施例１〜６および比較例における酸化Ｌ
ＤＬの吸着除去率の結果を表１に示した。
ＤＬの吸着除去率の結果を表１に示した。
【００４３】
【表１】
【００４４】
【発明の効果】本発明により、血液浄化器などの用途に
用いられ、特に心疾患患者や透析患者において動脈硬化
の進展を予防したり、その発症を未然に防ぐような場合
に好適に用いられる過酸化脂質吸着材を提供することが
できる。
用いられ、特に心疾患患者や透析患者において動脈硬化
の進展を予防したり、その発症を未然に防ぐような場合
に好適に用いられる過酸化脂質吸着材を提供することが
できる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０８Ｌ 81/06 Ｃ０８Ｌ 81/06 101/00 101/00 101/02 101/02 Ｆターム(参考） 4C077 AA12 BB03 EE01 KK11 KK13 MM04 MM05 MM06 NN04 NN07 PP09 PP13 PP15 4G066 AC31C AC33C AD10B AE05C AE10B BA03 BA26 BA36 CA20 DA12 FA12 FA14 FA31 FA40 4J002 AB01W AB05X AB05Y BC02W BD04W BG06W BJ00X BJ00Y CG00W CK02W CM01X CM01Y CN03W GB01
Claims (8)
- 【請求項１】 比表面積が０．１ｍ2／ｇ以上の支持体
にカチオン性ポリマーが付与されていることを特徴とす
る過酸化脂質吸着材。 - 【請求項２】 請求項１記載のカチオン性ポリマーがア
ミノ基含有ポリマーであることを特徴とする過酸化脂質
吸着材。 - 【請求項３】 請求項２記載のアミノ基含有ポリマーが
ポリエチレンイミンまたはその誘導体であることを特徴
とする過酸化脂質吸着材。 - 【請求項４】 支持体表面積１ｃｍ2あたり、５×１０
-2ｍＭの酸性染料の染色液を１．２５ｍｌ用い、ｐＨ
３、温度３７℃、５時間という条件下で該支持体を染色
したとき、該支持体に吸着した染料の量が１２ｎｍｏｌ
／ｃｍ2以上であることを特徴とする請求項１〜３のい
ずれかに記載の過酸化脂質吸着材。 - 【請求項５】 支持体表面積１ｍ2あたりの血漿量が
３．３×１０2ｍｌ／ｍ 2である条件で吸着操作を施した
ときに、該血漿中に含まれている初期濃度２μｇ／ｍｌ
の酸化低密度リポ蛋白の吸着除去率が４５％以上である
ことを特徴とする過酸化脂質吸着材。 - 【請求項６】 支持体の素材がポリスルホンであること
を特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の過酸化脂
質吸着材。 - 【請求項７】 支持体に親水性高分子がブレンドされた
素材からなることを特徴とする請求項１〜６のいずれか
に記載の過酸化脂質吸着材。 - 【請求項８】 親水性高分子がポリビニルピロリドンで
あることを特徴とする請求項７記載の過酸化脂質吸着
材。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000298992A JP4843841B2 (ja) | 2000-09-29 | 2000-09-29 | 酸化低密度リポ蛋白吸着用吸着材 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000298992A JP4843841B2 (ja) | 2000-09-29 | 2000-09-29 | 酸化低密度リポ蛋白吸着用吸着材 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002102339A true JP2002102339A (ja) | 2002-04-09 |
| JP4843841B2 JP4843841B2 (ja) | 2011-12-21 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000298992A Expired - Fee Related JP4843841B2 (ja) | 2000-09-29 | 2000-09-29 | 酸化低密度リポ蛋白吸着用吸着材 |
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|---|---|
| JP (1) | JP4843841B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005230408A (ja) * | 2004-02-23 | 2005-09-02 | Toray Ind Inc | 基材の処理方法および該方法を用いた分離膜の製造方法 |
| US7470368B2 (en) | 2001-10-04 | 2008-12-30 | Toray Industries, Inc. | Hydrophilic substance and a production method thereof |
| JP2011139805A (ja) * | 2010-01-07 | 2011-07-21 | Pharmit Co Ltd | 生体内塩基性物質を利用した体液浄化装置 |
| JP2011139806A (ja) * | 2010-01-07 | 2011-07-21 | Pharmit Co Ltd | 生物由来塩基性物質およびその誘導体を利用した体液浄化装置 |
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|---|---|---|---|---|
| JPS5616187B2 (ja) * | 1977-07-11 | 1981-04-15 | ||
| JPS60246766A (ja) * | 1984-05-23 | 1985-12-06 | 東レ株式会社 | 血液処理剤 |
| JPH0340940A (ja) * | 1989-06-27 | 1991-02-21 | Ciba Geigy Ag | ガラス繊維の染色または捺染方法 |
| JPH0436300A (ja) * | 1990-05-28 | 1992-02-06 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 変性ｌｄｌの吸着体およびそれを用いる変性ｌｄｌの除去装置 |
| JPH05176994A (ja) * | 1991-12-17 | 1993-07-20 | Toyobo Co Ltd | 低比重リポ蛋白吸着材 |
| JPH05285381A (ja) * | 1992-04-06 | 1993-11-02 | Toyobo Co Ltd | 低比重リポタンパク質吸着材 |
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| JPH06269500A (ja) * | 1992-05-14 | 1994-09-27 | Wr Grace & Co Connecticut | 低密度リポタンパク質−コレステロールの除去に適した微孔性ポリスルホン担体 |
| JPH0724066A (ja) * | 1993-07-15 | 1995-01-27 | Asahi Medical Co Ltd | 白血球選択捕捉器及び白血球捕捉装置 |
| JPH07136256A (ja) * | 1993-11-17 | 1995-05-30 | Asahi Medical Co Ltd | 血管閉塞性疾患血漿の血漿粘度低下方法及びその装置 |
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| JPH11300169A (ja) * | 1998-04-17 | 1999-11-02 | Terumo Corp | エンドトキシン吸着能を有する血液透析膜及びそれを用いた透析器 |
-
2000
- 2000-09-29 JP JP2000298992A patent/JP4843841B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| JP2011139806A (ja) * | 2010-01-07 | 2011-07-21 | Pharmit Co Ltd | 生物由来塩基性物質およびその誘導体を利用した体液浄化装置 |
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