JP2002051768A - キメラ酵素及び洗浄剤組成物 - Google Patents
キメラ酵素及び洗浄剤組成物Info
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- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
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- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を
有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分に対する親
和性を有する酵素とを結合させてなることを特徴とする
キメラ酵素及びこのキメラ酵素を含む洗浄剤組成物。 【効果】 本発明によれば、繊維上の汚れやしみに対し
て優れた洗浄力を有するキメラ酵素及びこのキメラ酵素
を含む洗浄剤組成物が得られる。
有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分に対する親
和性を有する酵素とを結合させてなることを特徴とする
キメラ酵素及びこのキメラ酵素を含む洗浄剤組成物。 【効果】 本発明によれば、繊維上の汚れやしみに対し
て優れた洗浄力を有するキメラ酵素及びこのキメラ酵素
を含む洗浄剤組成物が得られる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、キメラ酵素及び洗
浄剤組成物に関し、更に詳述すると、汚れ成分又は繊維
成分に親和性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維
成分に親和性を有する酵素とを結合させてなる優れた洗
浄効果をもたらすことのできるキメラ酵素及びこのキメ
ラ酵素を含む洗浄剤組成物に関する。
浄剤組成物に関し、更に詳述すると、汚れ成分又は繊維
成分に親和性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維
成分に親和性を有する酵素とを結合させてなる優れた洗
浄効果をもたらすことのできるキメラ酵素及びこのキメ
ラ酵素を含む洗浄剤組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】繊維織
物製品には皮脂や蛋白質などの人体に由来する汚れだけ
でなく、食物や生活環境に由来する様々な汚れが付着
し、これら汚れの除去を目的として、様々な洗浄剤組成
物及び酵素が開発されている（上島孝之著、「産業用酵
素」、丸善株式会社発行（１９９５））。
物製品には皮脂や蛋白質などの人体に由来する汚れだけ
でなく、食物や生活環境に由来する様々な汚れが付着
し、これら汚れの除去を目的として、様々な洗浄剤組成
物及び酵素が開発されている（上島孝之著、「産業用酵
素」、丸善株式会社発行（１９９５））。
【０００３】この場合、繊維織物製品への洗浄力を向上
させるため、洗浄剤組成物中にプロテアーゼ、リパー
ゼ、アミラーゼ、セルラーゼなどの酵素を配合すること
が広く行われている（上島孝之著、「産業用酵素」、丸
善株式会社発行（１９９５））。更に洗浄力を向上させ
るため、比活性の高い酵素の開発や、洗浄剤組成物中の
酵素の増量、汚れの構成成分に適した酵素の開発などが
行われている。
させるため、洗浄剤組成物中にプロテアーゼ、リパー
ゼ、アミラーゼ、セルラーゼなどの酵素を配合すること
が広く行われている（上島孝之著、「産業用酵素」、丸
善株式会社発行（１９９５））。更に洗浄力を向上させ
るため、比活性の高い酵素の開発や、洗浄剤組成物中の
酵素の増量、汚れの構成成分に適した酵素の開発などが
行われている。
【０００４】しかしながら、繊維に固着している汚れや
しみの除去は未だ充分なものではない。これは、洗浄中
の酵素は洗浄液中に分散しているので、汚れに対して効
率的に作用しにくく、酵素による洗浄力を向上させるた
めには汚れに配向する酵素濃度が低いのがその理由の一
つである。
しみの除去は未だ充分なものではない。これは、洗浄中
の酵素は洗浄液中に分散しているので、汚れに対して効
率的に作用しにくく、酵素による洗浄力を向上させるた
めには汚れに配向する酵素濃度が低いのがその理由の一
つである。
【０００５】かかる課題の解決策の一つとして、セルラ
ーゼのセルロース結合ドメインが保有する繊維に対する
親和性を酵素に付与する方法が提案されている（ＵＳＰ
６０１５７８３号公報）。
ーゼのセルロース結合ドメインが保有する繊維に対する
親和性を酵素に付与する方法が提案されている（ＵＳＰ
６０１５７８３号公報）。
【０００６】このセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢ
Ｄと略記する）は、そのアミノ酸配列の特徴から複数の
ファミリーが提唱されている（Ｐ．Ｔｏｍｍｅら、Ａｄ
ｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，３７，１
−８１（１９９５））。
Ｄと略記する）は、そのアミノ酸配列の特徴から複数の
ファミリーが提唱されている（Ｐ．Ｔｏｍｍｅら、Ａｄ
ｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，３７，１
−８１（１９９５））。
【０００７】洗浄剤へのＣＢＤの応用については、ＣＢ
ＤファミリーＩ，ＩＩ，ＶＩのキメラ酵素に関してＵＳ
Ｐ６０１５７８３号公報に提案されているが、それらの
洗浄力特性については明らかにされていない。また、セ
ルロモナス・フィミ（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ ｆｉ
ｍｉ）のファミリーＩＩに分類されるセルラーゼのＣＢ
Ｄは、セルロース繊維を破壊することが報告されており
（Ｎ．Ｄｉｎら、Ｂｉｏ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，９，
１０９６−１０９８（１９９１））、繊維製品へダメー
ジを与えることが懸念されるので、ＣＢＤファミリーＩ
Ｉは洗浄剤に用いるＣＢＤとしては適当なものではな
い。
ＤファミリーＩ，ＩＩ，ＶＩのキメラ酵素に関してＵＳ
Ｐ６０１５７８３号公報に提案されているが、それらの
洗浄力特性については明らかにされていない。また、セ
ルロモナス・フィミ（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ ｆｉ
ｍｉ）のファミリーＩＩに分類されるセルラーゼのＣＢ
Ｄは、セルロース繊維を破壊することが報告されており
（Ｎ．Ｄｉｎら、Ｂｉｏ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，９，
１０９６−１０９８（１９９１））、繊維製品へダメー
ジを与えることが懸念されるので、ＣＢＤファミリーＩ
Ｉは洗浄剤に用いるＣＢＤとしては適当なものではな
い。
【０００８】また、上記ファミリー間のアミノ酸配列の
特徴が異なることから、ＣＢＤのセルロースに対する結
合特性がファミリーの種類により異なり、セルロースを
含む製品の洗浄用に適するものと適しないものとが存在
することが予想されるが、これまでに、１０タイプのＣ
ＢＤファミリーＩ〜Ｘの洗浄剤への応用可能性を比較評
価した事例は無く、セルロース繊維上の汚れの除去に適
したＣＢＤについてはこれまで未知であった。
特徴が異なることから、ＣＢＤのセルロースに対する結
合特性がファミリーの種類により異なり、セルロースを
含む製品の洗浄用に適するものと適しないものとが存在
することが予想されるが、これまでに、１０タイプのＣ
ＢＤファミリーＩ〜Ｘの洗浄剤への応用可能性を比較評
価した事例は無く、セルロース繊維上の汚れの除去に適
したＣＢＤについてはこれまで未知であった。
【０００９】更に、獣毛繊維上の汚れの除去について
も、酵素成分などに獣毛繊維に対する親和性を付与する
ことができれば、より優れた洗浄効果が期待できる。
も、酵素成分などに獣毛繊維に対する親和性を付与する
ことができれば、より優れた洗浄効果が期待できる。
【００１０】一方、従来から、生体に由来する汚れ
（汗、皮脂、垢、血液、唾液、粘液等）、飲食物に由来
する汚れ（果物、野菜、ソース、醤油、スパイス類、コ
ーヒー、茶、澱粉質、肉汁、油等）、及び生活環境に由
来する汚れ（草木、泥、塵、排気ガス、油類等）が繊維
上に残留して、十分に洗浄できないという問題がある。
そのため、汚れ除去効果を担う酵素に汚れ成分に対する
親和性を付与することができれば、より優れた洗浄効果
が期待できる。
（汗、皮脂、垢、血液、唾液、粘液等）、飲食物に由来
する汚れ（果物、野菜、ソース、醤油、スパイス類、コ
ーヒー、茶、澱粉質、肉汁、油等）、及び生活環境に由
来する汚れ（草木、泥、塵、排気ガス、油類等）が繊維
上に残留して、十分に洗浄できないという問題がある。
そのため、汚れ除去効果を担う酵素に汚れ成分に対する
親和性を付与することができれば、より優れた洗浄効果
が期待できる。
【００１１】以上の状況から、汚れやしみの除去に適し
たキメラ酵素を調製するために必要となる汚れ成分に対
する親和性を有するポリペプチド、及び繊維成分に対す
る親和性を有するポリペプチドを見出すことが強く望ま
れていた。
たキメラ酵素を調製するために必要となる汚れ成分に対
する親和性を有するポリペプチド、及び繊維成分に対す
る親和性を有するポリペプチドを見出すことが強く望ま
れていた。
【００１２】本発明は、上記事情に鑑みなされたもの
で、汚れ成分又は繊維成分に親和性を有するポリペプチ
ドと汚れ成分又は繊維成分に親和性を有する酵素とを結
合させてなる優れた洗浄効果をもたらすことのできるキ
メラ酵素及びこのキメラ酵素を含む洗浄剤組成物を提供
することを目的とする。
で、汚れ成分又は繊維成分に親和性を有するポリペプチ
ドと汚れ成分又は繊維成分に親和性を有する酵素とを結
合させてなる優れた洗浄効果をもたらすことのできるキ
メラ酵素及びこのキメラ酵素を含む洗浄剤組成物を提供
することを目的とする。
【００１３】
【課題を解決するための手段及び発明の実施の形態】本
発明者は、上記課題の解決に向けて鋭意研究を重ねた結
果、驚くべきことに、セルロース繊維に対する親和性
は、セルラーゼやキシラナーゼ等のＣＢＤを持つ酵素だ
けでなく、ムタナーゼ、アミラーゼやグルコシルトラン
スフェラーゼ（以下、ＧＴＦと略記する）等の本来セル
ロース繊維を基質としない酵素及びグルカン結合蛋白質
なども有しており、これらもセルロース繊維に対する優
れた結合力を有することを知見した。
発明者は、上記課題の解決に向けて鋭意研究を重ねた結
果、驚くべきことに、セルロース繊維に対する親和性
は、セルラーゼやキシラナーゼ等のＣＢＤを持つ酵素だ
けでなく、ムタナーゼ、アミラーゼやグルコシルトラン
スフェラーゼ（以下、ＧＴＦと略記する）等の本来セル
ロース繊維を基質としない酵素及びグルカン結合蛋白質
なども有しており、これらもセルロース繊維に対する優
れた結合力を有することを知見した。
【００１４】また、ＣＢＤのファミリーＩ〜Ｘの中で利
用できるポリサッカライド親和性ポリペプチドの例とし
ては、繊維の破壊や洗浄時の親和性などの問題から、優
れた洗浄力をもつキメラ酵素を構成するのに適したＣＢ
ＤのタイプはファミリーＩ，ＩＩ，ＶＩ以外のファミリ
ーＩＩＩ，ＩＶ，Ｖ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，Ｘであ
ることを知見した。
用できるポリサッカライド親和性ポリペプチドの例とし
ては、繊維の破壊や洗浄時の親和性などの問題から、優
れた洗浄力をもつキメラ酵素を構成するのに適したＣＢ
ＤのタイプはファミリーＩ，ＩＩ，ＶＩ以外のファミリ
ーＩＩＩ，ＩＶ，Ｖ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，Ｘであ
ることを知見した。
【００１５】更に、獣毛由来の繊維に対する親和性の観
点から鋭意検討を重ねた結果、獣毛由来の繊維に付着し
た汚れやしみに対して、蛋白質（特にケラチン）に対し
て親和性のあるポリペプチドを構成成分としたキメラ酵
素が、優れた洗浄効果を有することを知見した。
点から鋭意検討を重ねた結果、獣毛由来の繊維に付着し
た汚れやしみに対して、蛋白質（特にケラチン）に対し
て親和性のあるポリペプチドを構成成分としたキメラ酵
素が、優れた洗浄効果を有することを知見した。
【００１６】一方、各種の汚れ成分に対する親和性の観
点から、更に鋭意検討を重ねたところ、皮脂や蛋白質や
澱粉などの多糖に対して親和性のあるポリペプチドを構
成成分としたキメラ酵素が、繊維上の汚れやしみに対し
て優れた洗浄効果を有することを知見した。
点から、更に鋭意検討を重ねたところ、皮脂や蛋白質や
澱粉などの多糖に対して親和性のあるポリペプチドを構
成成分としたキメラ酵素が、繊維上の汚れやしみに対し
て優れた洗浄効果を有することを知見した。
【００１７】そして、本発明者が、上記知見に基づき更
に鋭意検討を進めた結果、汚れ成分又は繊維成分に対す
る親和性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分
に対する親和性を有する酵素とを結合させてなるキメラ
酵素が、洗浄中において繊維成分又は汚れ成分に対して
効果的に結合し得、汚れに配向する酵素濃度を高めるこ
とができ、今までにない高い洗浄力を有することを見出
し、本発明をなすに至った。
に鋭意検討を進めた結果、汚れ成分又は繊維成分に対す
る親和性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分
に対する親和性を有する酵素とを結合させてなるキメラ
酵素が、洗浄中において繊維成分又は汚れ成分に対して
効果的に結合し得、汚れに配向する酵素濃度を高めるこ
とができ、今までにない高い洗浄力を有することを見出
し、本発明をなすに至った。
【００１８】即ち、本発明は、下記のキメラ酵素及び洗
浄剤組成物を提供する。 請求項１：汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有す
るポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分に対する親和性
を有する酵素とを結合させてなることを特徴とするキメ
ラ酵素。 請求項２：上記汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を
有するポリペプチドが、ポリサッカライドに対する親和
性を有するポリペプチド、蛋白質に対する親和性を有す
るポリペプチド及び脂質に対する親和性を有するポリペ
プチドから選ばれる１種又は２種以上である請求項１記
載のキメラ酵素。 請求項３：上記ポリサッカライドに対する親和性を有す
るポリペプチドが、ムタナーゼのムタン結合ドメイン、
アミラーゼファミリーの澱粉結合ドメイン、β−グルコ
シダーゼのグルカン結合領域、グルコシルトランスフェ
ラーゼのグルカン結合領域を含むポリペプチド、グルカ
ン結合タンパク質、キチン結合蛋白質、β−１，３−グ
ルカン結合蛋白質、セルロース結合蛋白質、レクチン類
等のポリペプチド、セルラーゼ、キシラナーゼ、マンナ
ナーゼ、キチナーゼ等のポリサッカライド分解酵素の有
するセルロース結合ドメインを含むポリペプチド及びフ
ァミリーＩＩＩ，ＩＶ，Ｖ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，
Ｘに分類されるセルロース結合ドメインを含むポリペプ
チドから選ばれる１種又は２種以上である請求項２記載
のキメラ酵素。 請求項４：上記脂質に対する親和性を有するポリペプチ
ドが、脂質類の合成・運搬・代謝・分解に関与する蛋白
質及び酵素の脂質結合領域、又は疎水性ペプチドを含む
ものであると共に、上記蛋白質に対する親和性を有する
ポリペプチドが、ケラチンの生合成・分解に関与する蛋
白質、又は酵素のケラチン結合領域を含むものである請
求項２記載のキメラ酵素。 請求項５：上記汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を
有する酵素が、蛋白質分解酵素、リパーゼ、アミラーゼ
ファミリー、ペクチン質分解酵素及び酸化還元酵素から
選ばれる１種又は２種以上である請求項１乃至４のいず
れか１項記載のキメラ酵素。 請求項６：請求項1乃至５のいずれか１項記載のキメラ
酵素を含む洗浄剤組成物。
浄剤組成物を提供する。 請求項１：汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有す
るポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分に対する親和性
を有する酵素とを結合させてなることを特徴とするキメ
ラ酵素。 請求項２：上記汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を
有するポリペプチドが、ポリサッカライドに対する親和
性を有するポリペプチド、蛋白質に対する親和性を有す
るポリペプチド及び脂質に対する親和性を有するポリペ
プチドから選ばれる１種又は２種以上である請求項１記
載のキメラ酵素。 請求項３：上記ポリサッカライドに対する親和性を有す
るポリペプチドが、ムタナーゼのムタン結合ドメイン、
アミラーゼファミリーの澱粉結合ドメイン、β−グルコ
シダーゼのグルカン結合領域、グルコシルトランスフェ
ラーゼのグルカン結合領域を含むポリペプチド、グルカ
ン結合タンパク質、キチン結合蛋白質、β−１，３−グ
ルカン結合蛋白質、セルロース結合蛋白質、レクチン類
等のポリペプチド、セルラーゼ、キシラナーゼ、マンナ
ナーゼ、キチナーゼ等のポリサッカライド分解酵素の有
するセルロース結合ドメインを含むポリペプチド及びフ
ァミリーＩＩＩ，ＩＶ，Ｖ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，
Ｘに分類されるセルロース結合ドメインを含むポリペプ
チドから選ばれる１種又は２種以上である請求項２記載
のキメラ酵素。 請求項４：上記脂質に対する親和性を有するポリペプチ
ドが、脂質類の合成・運搬・代謝・分解に関与する蛋白
質及び酵素の脂質結合領域、又は疎水性ペプチドを含む
ものであると共に、上記蛋白質に対する親和性を有する
ポリペプチドが、ケラチンの生合成・分解に関与する蛋
白質、又は酵素のケラチン結合領域を含むものである請
求項２記載のキメラ酵素。 請求項５：上記汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を
有する酵素が、蛋白質分解酵素、リパーゼ、アミラーゼ
ファミリー、ペクチン質分解酵素及び酸化還元酵素から
選ばれる１種又は２種以上である請求項１乃至４のいず
れか１項記載のキメラ酵素。 請求項６：請求項1乃至５のいずれか１項記載のキメラ
酵素を含む洗浄剤組成物。
【００１９】本発明によれば、繊維上の汚れやしみに対
する酵素の作用性を画期的に向上させることができるキ
メラ酵素及びこのキメラ酵素を含む洗浄剤組成物が得ら
れるものである。
する酵素の作用性を画期的に向上させることができるキ
メラ酵素及びこのキメラ酵素を含む洗浄剤組成物が得ら
れるものである。
【００２０】なお、本発明において、「親和性」という
言葉は、結合性、吸着性、相互作用性、吸脱着性、又は
基質としての認識性を意味する。
言葉は、結合性、吸着性、相互作用性、吸脱着性、又は
基質としての認識性を意味する。
【００２１】即ち、汚れ成分又は繊維成分に対する親和
性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分に対す
る親和性を有する酵素とを結合させてなるキメラ酵素
が、洗浄中において繊維成分又は汚れ成分に対して効果
的に結合し得、また、汚れ成分に効率的に作用して繊維
上の生体に由来する汚れ（汗、皮脂、垢、血液、唾液、
粘液等）、飲食物に由来する汚れ（果物、野菜、ソー
ス、醤油、スパイス類、コーヒー、茶、澱粉質、肉汁、
油等）、及び生活環境に由来する汚れ（草木、泥、塵、
排気ガス、油類等）に対して今までにない高い洗浄力を
有するものである。
性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分に対す
る親和性を有する酵素とを結合させてなるキメラ酵素
が、洗浄中において繊維成分又は汚れ成分に対して効果
的に結合し得、また、汚れ成分に効率的に作用して繊維
上の生体に由来する汚れ（汗、皮脂、垢、血液、唾液、
粘液等）、飲食物に由来する汚れ（果物、野菜、ソー
ス、醤油、スパイス類、コーヒー、茶、澱粉質、肉汁、
油等）、及び生活環境に由来する汚れ（草木、泥、塵、
排気ガス、油類等）に対して今までにない高い洗浄力を
有するものである。
【００２２】以下、本発明について更に詳しく説明す
る。本発明のキメラ酵素は、汚れ成分又は繊維成分に対
する親和性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維成
分に対する親和性を有する酵素とを結合させてなるもの
である。
る。本発明のキメラ酵素は、汚れ成分又は繊維成分に対
する親和性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維成
分に対する親和性を有する酵素とを結合させてなるもの
である。
【００２３】ここで、上記汚れ成分又は繊維成分に対す
る親和性を有するポリペプチドとしては、ポリサッカラ
イドに対する親和性を有するポリペプチド、蛋白質に対
する親和性を有するポリペプチド、脂質に対する親和性
を有するポリペプチド及び澱粉質に対して親和性を有す
るポリペプチドから選ばれる１種又は２種以上であるこ
とが好ましい。なお、本発明で利用可能な汚れ成分又は
繊維成分に親和性を有するポリペプチドは、その機能を
有する酵素や蛋白質などのポリペプチド全体、汚れ成分
又は繊維成分に親和性を有する部分を含んだポリペプチ
ドの一部分、或いは前述のポリペプチドに対して化学修
飾、糖鎖修飾、アミノ酸配列の変更や削除又は追加など
の操作を行ったもの、及び合成ポリペプチドも含まれ
る。
る親和性を有するポリペプチドとしては、ポリサッカラ
イドに対する親和性を有するポリペプチド、蛋白質に対
する親和性を有するポリペプチド、脂質に対する親和性
を有するポリペプチド及び澱粉質に対して親和性を有す
るポリペプチドから選ばれる１種又は２種以上であるこ
とが好ましい。なお、本発明で利用可能な汚れ成分又は
繊維成分に親和性を有するポリペプチドは、その機能を
有する酵素や蛋白質などのポリペプチド全体、汚れ成分
又は繊維成分に親和性を有する部分を含んだポリペプチ
ドの一部分、或いは前述のポリペプチドに対して化学修
飾、糖鎖修飾、アミノ酸配列の変更や削除又は追加など
の操作を行ったもの、及び合成ポリペプチドも含まれ
る。
【００２４】上記ポリサッカライドに対する親和性を有
するポリペプチド（ポリサッカライド親和性ポリペプチ
ド）の具体的な例としては、ムタナーゼ、アミラーゼ、
セルラーゼ、キシラナーゼ、マンナナーゼ、アラビノフ
ラノシダーゼ、アセチルエステラーゼ、キチナーゼ、セ
ルロース結合蛋白質、キチン結合蛋白質、β−1，３−
グルカン結合蛋白質、α-グルコシダーゼ、β-グルコシ
ダーゼ、グルコシルトランスフェラーゼ、グルカン結合
タンパク質、ポリサッカライド輸送蛋白質、ポリサッカ
ライド生合成蛋白質、レクチン類などが挙げられる。
するポリペプチド（ポリサッカライド親和性ポリペプチ
ド）の具体的な例としては、ムタナーゼ、アミラーゼ、
セルラーゼ、キシラナーゼ、マンナナーゼ、アラビノフ
ラノシダーゼ、アセチルエステラーゼ、キチナーゼ、セ
ルロース結合蛋白質、キチン結合蛋白質、β−1，３−
グルカン結合蛋白質、α-グルコシダーゼ、β-グルコシ
ダーゼ、グルコシルトランスフェラーゼ、グルカン結合
タンパク質、ポリサッカライド輸送蛋白質、ポリサッカ
ライド生合成蛋白質、レクチン類などが挙げられる。
【００２５】また、ポリサッカライドに対する親和性を
有するポリペプチドの一部分を用いることも可能であ
る。例えば、ムタナーゼのムタン結合ドメイン（ＭＢ
Ｄ）、アミラーゼの澱粉結合ドメイン（ＳＢＤ）、セル
ラーゼ、キシラナーゼ、マンナナーゼ、キチナーゼなど
に含まれるセルロース結合ドメイン（ＣＢＤ）のうち繊
維の破壊や洗浄時の親和性などの問題から、ファミリー
Ｉ，ＩＩ，ＶＩ以外のファミリーＩＩＩ，ＩＶ，Ｖ，Ｖ
ＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，Ｘに分類されるもの、セルロー
ス結合蛋白質（ＣＢＰ）、β−グルコシダーゼの基質結
合領域、グルコシルトランスフェラーゼのグルカン結合
領域、レクチンの認識領域などを利用することもでき
る。
有するポリペプチドの一部分を用いることも可能であ
る。例えば、ムタナーゼのムタン結合ドメイン（ＭＢ
Ｄ）、アミラーゼの澱粉結合ドメイン（ＳＢＤ）、セル
ラーゼ、キシラナーゼ、マンナナーゼ、キチナーゼなど
に含まれるセルロース結合ドメイン（ＣＢＤ）のうち繊
維の破壊や洗浄時の親和性などの問題から、ファミリー
Ｉ，ＩＩ，ＶＩ以外のファミリーＩＩＩ，ＩＶ，Ｖ，Ｖ
ＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，Ｘに分類されるもの、セルロー
ス結合蛋白質（ＣＢＰ）、β−グルコシダーゼの基質結
合領域、グルコシルトランスフェラーゼのグルカン結合
領域、レクチンの認識領域などを利用することもでき
る。
【００２６】上記蛋白質に対する親和性を有するポリペ
プチド（蛋白質親和性ポリペプチド）の一例としては、
ケラチンに対する親和性を有するポリペプチドが挙げら
れる。例えば、角化関連蛋白質、ケラチンの生合成や分
解に関わる蛋白質や酵素、疎水性の強い蛋白質などが挙
げられる。より具体的には、ケラチン分解酵素、トラン
スグルタミナーゼ、トリコヒアリンなどのアミノ酸配列
上で蛋白質に親和性を有する領域を含んでなるポリペプ
チドの利用も可能である。
プチド（蛋白質親和性ポリペプチド）の一例としては、
ケラチンに対する親和性を有するポリペプチドが挙げら
れる。例えば、角化関連蛋白質、ケラチンの生合成や分
解に関わる蛋白質や酵素、疎水性の強い蛋白質などが挙
げられる。より具体的には、ケラチン分解酵素、トラン
スグルタミナーゼ、トリコヒアリンなどのアミノ酸配列
上で蛋白質に親和性を有する領域を含んでなるポリペプ
チドの利用も可能である。
【００２７】上記脂質に対する親和性を有するポリペプ
チド（脂質親和性ポリペプチド）の一例としては、脂質
類の合成・運搬・代謝・分解などに関与する蛋白質や酵
素などが挙げられる。より具体的には、脂肪酸合成酵
素、トリアシルグリセロール合成酵素、脂肪酸アシルＣ
ｏＡ合成酵素、脂肪酸輸送蛋白質、アポリポ蛋白質、ア
ルブミン、チロクロムＰ４５０、ホスホリパーゼ、リパ
ーゼ、ジアシルグリセロールキナーゼ、脂肪酸結合蛋白
質及びそのファミリー、又は各種の膜蛋白質の膜結合領
域のアミノ酸配列上において、脂質結合に関与する領域
の利用も可能である。更に、疎水性ペプチドの利用も可
能である。
チド（脂質親和性ポリペプチド）の一例としては、脂質
類の合成・運搬・代謝・分解などに関与する蛋白質や酵
素などが挙げられる。より具体的には、脂肪酸合成酵
素、トリアシルグリセロール合成酵素、脂肪酸アシルＣ
ｏＡ合成酵素、脂肪酸輸送蛋白質、アポリポ蛋白質、ア
ルブミン、チロクロムＰ４５０、ホスホリパーゼ、リパ
ーゼ、ジアシルグリセロールキナーゼ、脂肪酸結合蛋白
質及びそのファミリー、又は各種の膜蛋白質の膜結合領
域のアミノ酸配列上において、脂質結合に関与する領域
の利用も可能である。更に、疎水性ペプチドの利用も可
能である。
【００２８】上記澱粉質に対する親和性を有するポリペ
プチドの例としては、前述のポリサッカライド親和性ポ
リペプチドと同じものが挙げられる。
プチドの例としては、前述のポリサッカライド親和性ポ
リペプチドと同じものが挙げられる。
【００２９】なお、本発明で利用できる獣毛繊維に対す
る親和性を有するポリペプチドの例としては、上記ケラ
チンの生合成や分解に関わる蛋白質や酵素が挙げられ
る。
る親和性を有するポリペプチドの例としては、上記ケラ
チンの生合成や分解に関わる蛋白質や酵素が挙げられ
る。
【００３０】以下、本発明での好適なポリペプチドの由
来の事例を示すが、本発明で利用できるポリペプチド
は、下記の事例及びそれらの由来に限定されるものでは
ない。
来の事例を示すが、本発明で利用できるポリペプチド
は、下記の事例及びそれらの由来に限定されるものでは
ない。
【００３１】ムタナーゼ及びムタナーゼのムタン結合
ドメイン：ムタナーゼの由来する属の一例としては、バ
チルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、トリコデルマ（Ｔｒｉ
ｃｈｏｄｅｒｍａ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ）属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ）属、スピカリア（Ｓｐｉｃａｒｉａ）属、クラドス
ポリウム（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）属、クロディウ
ム（Ｃｈｌｏｄｉｕｍ）属、フラボバクテリウム（Ｆｌ
ａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、シュードモナス（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅ
ｒｏｉｄｅｓ）属などが挙げられる。更に種の一例とし
ては、バチルス・エスピー・ＲＭ１（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｓｐ．ＲＭ１）、トリコデルマ・ハージアナム（Ｔｒ
ｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、ペニシリ
ウム・パープロゲナム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｐｕ
ｒｐｕｒｏｇｅｎｕｍ）、バチルス・サーキュランス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、トリコデ
ルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｉｄ
ｅ）、ペニシリウム・フニキュロサム（Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ ｆｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍ）、ペニシリウム・
ワートマニー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｏｒｔｍａ
ｎｎｉｉ）、ペニシリウム・ヴァーミキュラタム（Ｐｅ
ｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｖｅｒｍｉｃｕｌａｔｕｍ）、ア
スペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｎｉｄｕｌａｎｓ）、スピカリア・ビオラセア（Ｓｐ
ｉｃａｒｉａ ｖｉｏｌａｃｅａ）、クラドスポリウム
・レジーナ（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ ｒｅｓｉｎａ
ｅ）、クロディウム・ビリデ（Ｃｈｌｏｄｉｕｍ ｖｉ
ｒｉｄｅ）、ストレプトマイセス・ウェランシス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｗｅｒｒａｅｎｓｉｓ）、スト
レプトマイセス・シャトレウシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ ｃｈａｒｔｒｅｕｓｉｓ）、バクテロイデス・
オラリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｏｒａｌｉｓ）な
どが挙げられる。
ドメイン：ムタナーゼの由来する属の一例としては、バ
チルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、トリコデルマ（Ｔｒｉ
ｃｈｏｄｅｒｍａ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ）属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ）属、スピカリア（Ｓｐｉｃａｒｉａ）属、クラドス
ポリウム（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）属、クロディウ
ム（Ｃｈｌｏｄｉｕｍ）属、フラボバクテリウム（Ｆｌ
ａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、シュードモナス（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅ
ｒｏｉｄｅｓ）属などが挙げられる。更に種の一例とし
ては、バチルス・エスピー・ＲＭ１（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｓｐ．ＲＭ１）、トリコデルマ・ハージアナム（Ｔｒ
ｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、ペニシリ
ウム・パープロゲナム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｐｕ
ｒｐｕｒｏｇｅｎｕｍ）、バチルス・サーキュランス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、トリコデ
ルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｉｄ
ｅ）、ペニシリウム・フニキュロサム（Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ ｆｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍ）、ペニシリウム・
ワートマニー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｏｒｔｍａ
ｎｎｉｉ）、ペニシリウム・ヴァーミキュラタム（Ｐｅ
ｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｖｅｒｍｉｃｕｌａｔｕｍ）、ア
スペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｎｉｄｕｌａｎｓ）、スピカリア・ビオラセア（Ｓｐ
ｉｃａｒｉａ ｖｉｏｌａｃｅａ）、クラドスポリウム
・レジーナ（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ ｒｅｓｉｎａ
ｅ）、クロディウム・ビリデ（Ｃｈｌｏｄｉｕｍ ｖｉ
ｒｉｄｅ）、ストレプトマイセス・ウェランシス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｗｅｒｒａｅｎｓｉｓ）、スト
レプトマイセス・シャトレウシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ ｃｈａｒｔｒｅｕｓｉｓ）、バクテロイデス・
オラリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｏｒａｌｉｓ）な
どが挙げられる。
【００３２】アミラーゼファミリー及びそれらの澱粉
結合ドメイン：α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、α−
１，４−グルカナーゼ及びシクログルカントランスフェ
ラーゼの由来する属の一例としては、シュードモナス
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ）属、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａ
ｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、アスペルギルス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、ニューロスポラ（Ｎｅｕｒｏｓ
ｐｏｒａ）属、ホルモコニス（Ｈｏｒｍｏｃｏｎｉｓ）
属、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属、リゾパ
ス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属、クリプトコッカス（Ｃｒｙ
ｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、コーティシウム（Ｃｏｒｔｉ
ｃｉｕｍ）属、サーモモノスポラ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎ
ｏｓｐｏｒａ）属、フミコーラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）
属、パイロコッカス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ）属などが
挙げられる。更に種の一例としては、シュードモナス・
サッカロフィア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓａｃｃｈ
ａｒｏｐｈｉｌａ）、シュードモナス・ステュツエリ
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、バチ
ルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）バ
チルス・マセランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａ
ｎｓ）、バチルス・アミロリクファシエンス（Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バ
チルス・サーキュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃ
ｕｌａｎｓ）、バチルス・ブレビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｂｒｅｖｉｓ）、バチルス・オーベンシス（Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｏｈｂｅｎｓｉｓ）、バチルス・リヘニホル
ミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉ
ｓ）、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕ
ｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・ステアロサーモフィリス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉ
ｌｕｓ）、サーモアナエロバクター・サーモスルフロゲ
ネス（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｔｈｅ
ｒｍｏｓｕｌｆｕｒｏｇｅｎｅｓ）、ホルモコニス・レ
ジーナ（Ｈｏｒｍｏｃｏｎｉｓ ｒｅｓｉｎａｅ）、ク
レブシエラ・ニューモニア（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐ
ｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、アスペルギルス・ニガー（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルス・
アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒ
ｉ）、アスペルギルス・オリザ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ ｏｒｙｚａｅ）、アスペルギルス・シロウサミ（Ａ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｈｉｒｏｕｓａｍｉ）、アス
ペルギルス・カワチ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｋａｗ
ａｃｈｉｉ）、ストレプトマイセス・グリセウス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）、ストレプト
マイセス・アルビドフラバス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ ａｌｂｉｄｏｆｌａｖｕｓ）、ストレプトマイセス
・リビダンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄ
ａｎｓ）、ストレプトマイセス・ビオラセウス（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｏｌａｃｅｕｓ）、ストレプ
トマイセス・ベネズエラ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｖｅｎｅｚｕｅｌａｅ）、サーモモノスポラ・クルバー
タ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｃｕｒｖａｔ
ａ）、リゾパス・オリザ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｏｒｙｚａ
ｅ）、ニューロスポラ・クラッサ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒ
ａ ｃｒａｓｓａ）、フミコーラ・グリサ（Ｈｕｍｉｃ
ｏｌａ ｇｒｉｓｅａ）、コーティカム・ロルフシ（Ｃ
ｏｒｔｉｃｉｕｍ ｒｏｌｆｓｉｉ）、パイロコッカス
・フリオサス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕ
ｓ）、パイロコッカス・ウーセイ（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｗｏｅｓｅｉ）、パイロコッカス・アビシ（Ｐｙｒ
ｏｃｏｃｃｕｓ ａｂｙｓｓｉ）などが挙げられ、更に
はヒトや動物又は植物に由来するものも利用可能であ
る。
結合ドメイン：α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、α−
１，４−グルカナーゼ及びシクログルカントランスフェ
ラーゼの由来する属の一例としては、シュードモナス
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ）属、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａ
ｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、アスペルギルス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、ニューロスポラ（Ｎｅｕｒｏｓ
ｐｏｒａ）属、ホルモコニス（Ｈｏｒｍｏｃｏｎｉｓ）
属、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属、リゾパ
ス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属、クリプトコッカス（Ｃｒｙ
ｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、コーティシウム（Ｃｏｒｔｉ
ｃｉｕｍ）属、サーモモノスポラ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎ
ｏｓｐｏｒａ）属、フミコーラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）
属、パイロコッカス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ）属などが
挙げられる。更に種の一例としては、シュードモナス・
サッカロフィア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓａｃｃｈ
ａｒｏｐｈｉｌａ）、シュードモナス・ステュツエリ
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、バチ
ルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）バ
チルス・マセランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａ
ｎｓ）、バチルス・アミロリクファシエンス（Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バ
チルス・サーキュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃ
ｕｌａｎｓ）、バチルス・ブレビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｂｒｅｖｉｓ）、バチルス・オーベンシス（Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｏｈｂｅｎｓｉｓ）、バチルス・リヘニホル
ミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉ
ｓ）、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕ
ｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・ステアロサーモフィリス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉ
ｌｕｓ）、サーモアナエロバクター・サーモスルフロゲ
ネス（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｔｈｅ
ｒｍｏｓｕｌｆｕｒｏｇｅｎｅｓ）、ホルモコニス・レ
ジーナ（Ｈｏｒｍｏｃｏｎｉｓ ｒｅｓｉｎａｅ）、ク
レブシエラ・ニューモニア（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐ
ｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、アスペルギルス・ニガー（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルス・
アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒ
ｉ）、アスペルギルス・オリザ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ ｏｒｙｚａｅ）、アスペルギルス・シロウサミ（Ａ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｈｉｒｏｕｓａｍｉ）、アス
ペルギルス・カワチ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｋａｗ
ａｃｈｉｉ）、ストレプトマイセス・グリセウス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）、ストレプト
マイセス・アルビドフラバス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ ａｌｂｉｄｏｆｌａｖｕｓ）、ストレプトマイセス
・リビダンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄ
ａｎｓ）、ストレプトマイセス・ビオラセウス（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｏｌａｃｅｕｓ）、ストレプ
トマイセス・ベネズエラ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｖｅｎｅｚｕｅｌａｅ）、サーモモノスポラ・クルバー
タ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｃｕｒｖａｔ
ａ）、リゾパス・オリザ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｏｒｙｚａ
ｅ）、ニューロスポラ・クラッサ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒ
ａ ｃｒａｓｓａ）、フミコーラ・グリサ（Ｈｕｍｉｃ
ｏｌａ ｇｒｉｓｅａ）、コーティカム・ロルフシ（Ｃ
ｏｒｔｉｃｉｕｍ ｒｏｌｆｓｉｉ）、パイロコッカス
・フリオサス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕ
ｓ）、パイロコッカス・ウーセイ（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｗｏｅｓｅｉ）、パイロコッカス・アビシ（Ｐｙｒ
ｏｃｏｃｃｕｓ ａｂｙｓｓｉ）などが挙げられ、更に
はヒトや動物又は植物に由来するものも利用可能であ
る。
【００３３】グルコシルトランスフェラーゼ類（ＧＴ
Ｆ−Ｓ、ＧＴＦ−Ｉ、ＧＴＦ−ＳＩ）及びそれらのグル
カン結合領域：ＧＴＦ類の由来する属の一例としては、
ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）
属、リューコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属
などが挙げられる。更に種の一例としては、ストレプト
コッカス・ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｍｕｔａｎｓ）、ストレプトコッカス・ソブリナス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｏｂｒｉｎｕｓ）、
ストレプトコッカス・ダウネイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｄｏｗｎｅｉ）、ストレプトコッカス・クリセ
ティ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｉｃｅｔ
ｉ）、ストレプトコッカス・サリバリウス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、ストレプ
トコッカス・サンギス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｓａｎｇｕｉｓ）、ストレプトコッカス・ミティス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｉｔｉｓ）、リューコノ
ストック・メセンテロイズ（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ
ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）などが挙げられる。
Ｆ−Ｓ、ＧＴＦ−Ｉ、ＧＴＦ−ＳＩ）及びそれらのグル
カン結合領域：ＧＴＦ類の由来する属の一例としては、
ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）
属、リューコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属
などが挙げられる。更に種の一例としては、ストレプト
コッカス・ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｍｕｔａｎｓ）、ストレプトコッカス・ソブリナス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｏｂｒｉｎｕｓ）、
ストレプトコッカス・ダウネイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｄｏｗｎｅｉ）、ストレプトコッカス・クリセ
ティ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｉｃｅｔ
ｉ）、ストレプトコッカス・サリバリウス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、ストレプ
トコッカス・サンギス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｓａｎｇｕｉｓ）、ストレプトコッカス・ミティス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｉｔｉｓ）、リューコノ
ストック・メセンテロイズ（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ
ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）などが挙げられる。
【００３４】グルカン結合蛋白質：グルカン結合タン
パク質の由来する属の一例として、ストレプトコッカス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属などが挙げられる。
種の一例としては、ストレプトコッカス・ミュータンス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ）、スト
レプトコッカス・ソブリナス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ ｓｏｂｒｉｎｕｓ）、ストレプトコッカス・クリ
セタス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｉｃｅｔｕ
ｓ）などが挙げられる。
パク質の由来する属の一例として、ストレプトコッカス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属などが挙げられる。
種の一例としては、ストレプトコッカス・ミュータンス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ）、スト
レプトコッカス・ソブリナス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ ｓｏｂｒｉｎｕｓ）、ストレプトコッカス・クリ
セタス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｉｃｅｔｕ
ｓ）などが挙げられる。
【００３５】β−１，３−グルカン結合蛋白質：β−
１，３−グルカン結合タンパク質の一例としては、ザリ
ガニ類、エビ類、カニ類等の甲殻類や微生物由来のもの
などが挙げられる。
１，３−グルカン結合タンパク質の一例としては、ザリ
ガニ類、エビ類、カニ類等の甲殻類や微生物由来のもの
などが挙げられる。
【００３６】セルロース結合蛋白質：セルロース結合
タンパク質の由来する属の一例としては、ディスコステ
リウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍ）属、ルミノコッ
カス（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ）属、メロイドギン
（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ）属、ストレプトマイセス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、クロストリディウム
（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、ポルフィラ（Ｐｏｒｐ
ｈｙｒａ）属、フィブロバクター（Ｆｉｂｒｏｂａｃｔ
ｅｒ）属などが挙げられる。更に種の一例としては、デ
ィスコステリウム・ディスコイデウム（Ｄｉｃｔｙｏｓ
ｔｅｌｉｕｍ ｄｉｓｃｏｉｄｅｕｍ）、ルミノコッカ
ス・アルブス（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ａｌｂｕ
ｓ）、メロイドギン・インコグニータ（Ｍｅｌｏｉｄｏ
ｇｙｎｅ ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）、ストレプトマイセス
・レティキュリ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｒｅｔｉ
ｃｕｌｉ）、ストレプトマイセス・ハルステディ（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈａｌｓｔｅｄｉｉ）、ストレ
プトマイセス・コエリカラー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）、ストレプトマイセス・ビリ
ドスポラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｒｉｄｏ
ｓｐｏｒｕｓ）、ストレプトマイセス・オリバセオビリ
ディス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｏｌｉｖａｃｅｏ
ｖｉｒｉｄｉｓ）、クロストリディウム・サーモセラム
（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕ
ｍ）、クロストリディウム・セルロリティカム（Ｃｌｏ
ｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕｌｏｌｙｔｉｃｕｍ）、
クロストリディウム・セルロボランス（Ｃｌｏｓｔｒｉ
ｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕｌｏｖｏｒａｎｓ）、フィブロバ
クター・スクシノゲネス（Ｆｉｂｒｏｂａｃｔｅｒ ｓ
ｕｃｃｉｎｏｇｅｎｅｓ）、ポルフィラ・パープレア
（Ｐｏｒｐｈｙｒａ ｐｕｒｐｕｒｅａ）などが挙げら
れる。その他、セルロース成長特異的タンパク質（ｃｅ
ｌｌｕｌｏｓｅ−ｇｒｏｗｔｈ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐ
ｒｏｔｅｉｎ）も利用可能である。なお、アガリクス
（Ａｇａｒｉｃｕｓ）属などに由来するものも一例に挙
げられる。
タンパク質の由来する属の一例としては、ディスコステ
リウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍ）属、ルミノコッ
カス（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ）属、メロイドギン
（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ）属、ストレプトマイセス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、クロストリディウム
（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、ポルフィラ（Ｐｏｒｐ
ｈｙｒａ）属、フィブロバクター（Ｆｉｂｒｏｂａｃｔ
ｅｒ）属などが挙げられる。更に種の一例としては、デ
ィスコステリウム・ディスコイデウム（Ｄｉｃｔｙｏｓ
ｔｅｌｉｕｍ ｄｉｓｃｏｉｄｅｕｍ）、ルミノコッカ
ス・アルブス（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ａｌｂｕ
ｓ）、メロイドギン・インコグニータ（Ｍｅｌｏｉｄｏ
ｇｙｎｅ ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）、ストレプトマイセス
・レティキュリ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｒｅｔｉ
ｃｕｌｉ）、ストレプトマイセス・ハルステディ（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈａｌｓｔｅｄｉｉ）、ストレ
プトマイセス・コエリカラー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）、ストレプトマイセス・ビリ
ドスポラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｒｉｄｏ
ｓｐｏｒｕｓ）、ストレプトマイセス・オリバセオビリ
ディス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｏｌｉｖａｃｅｏ
ｖｉｒｉｄｉｓ）、クロストリディウム・サーモセラム
（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕ
ｍ）、クロストリディウム・セルロリティカム（Ｃｌｏ
ｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕｌｏｌｙｔｉｃｕｍ）、
クロストリディウム・セルロボランス（Ｃｌｏｓｔｒｉ
ｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕｌｏｖｏｒａｎｓ）、フィブロバ
クター・スクシノゲネス（Ｆｉｂｒｏｂａｃｔｅｒ ｓ
ｕｃｃｉｎｏｇｅｎｅｓ）、ポルフィラ・パープレア
（Ｐｏｒｐｈｙｒａ ｐｕｒｐｕｒｅａ）などが挙げら
れる。その他、セルロース成長特異的タンパク質（ｃｅ
ｌｌｕｌｏｓｅ−ｇｒｏｗｔｈ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐ
ｒｏｔｅｉｎ）も利用可能である。なお、アガリクス
（Ａｇａｒｉｃｕｓ）属などに由来するものも一例に挙
げられる。
【００３７】キチン結合蛋白質：キチン結合タンパク
質の由来する属の一例としては、シュードモナス（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属などが挙げられる。更に種の一
例としては、シュードモナス・アエルギノーサ（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、ストレプ
トマイセス・コエリカラー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）、ストレプトマイセス・テン
ダ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｔｅｎｄａｅ）、スト
レプトマイセス・レティキュリ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ ｒｅｔｉｃｕｌｉ）、ストレプトマイセス・オリ
バセオビリディス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｏｌｉ
ｖａｃｅｏｖｉｒｉｄｉｓ）、セラチア・マレッセンス
（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）などが挙
げられる。
質の由来する属の一例としては、シュードモナス（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属などが挙げられる。更に種の一
例としては、シュードモナス・アエルギノーサ（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、ストレプ
トマイセス・コエリカラー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）、ストレプトマイセス・テン
ダ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｔｅｎｄａｅ）、スト
レプトマイセス・レティキュリ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ ｒｅｔｉｃｕｌｉ）、ストレプトマイセス・オリ
バセオビリディス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｏｌｉ
ｖａｃｅｏｖｉｒｉｄｉｓ）、セラチア・マレッセンス
（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）などが挙
げられる。
【００３８】β-グルコシダーゼ及びそれらの基質結
合ドメイン：β-グルコシダーゼの由来する属の一例と
しては、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）
属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、サーモアナエロ
バクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）
属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ス
トレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、ニ
ューロスポラ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）属、サーモモノ
スポラ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ）属、フミコ
ーラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属、パイロコッカス（Ｐｙｒ
ｏｃｏｃｃｕｓ）属、ファネロケート（Ｐｈａｎｅｒｏ
ｃｈａｅｔｅ）属などが挙げられる。更に種の一例とし
ては、シュードモナス・サッカロフィア（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ ｓａｃｃｈａｒｏｐｈｉｌａ）、シュード
モナス・ステュツエリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔ
ｕｔｚｅｒｉ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕ
ｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・マセランス（Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）、バチルス・アミロリク
ファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕ
ｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・サーキュランス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、バチルス・ブレ
ビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｂｒｅｖｉｓ）、バチルス・オ
ーベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｈｂｅｎｓｉｓ）、
バチルス・リヘニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃ
ｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・ズブチリス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・ステア
ロサーモフィリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔ
ｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、サーモアナエロバクター・
サーモスルフロゲネス（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａ
ｃｔｅｒ ｔｈｅｒｍｏｓｕｌｆｕｒｏｇｅｎｅｓ）、
アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎ
ｉｇｅｒ）、アスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇ
ｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）、アスペルギルス・オリ
ザ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）、アスペ
ルギルス・シロウサミ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｈ
ｉｒｏｕｓａｍｉ）、アスペルギルス・カワチ（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｋａｗａｃｈｉｉ）、ストレプトマ
イセス・グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒ
ｉｓｅｕｓ）、ストレプトマイセス・アルビドフラバス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｌｂｉｄｏｆｌａｖｕ
ｓ）、ストレプトマイセス・リビダンス（Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄａｎｓ）、ストレプトマイセ
ス・ビオラセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｏ
ｌａｃｅｕｓ）、ストレプトマイセス・ベネズエラ（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｖｅｎｅｚｕｅｌａｅ）、サー
モモノスポラ・クルバータ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐ
ｏｒａ ｃｕｒｖａｔａ）、ニューロスポラ・クラッサ
（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｃｒａｓｓａ）、フミコーラ
・グリサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｇｒｉｓｅａ）、パイロ
コッカス・フリオサス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒ
ｉｏｓｕｓ）、ファネロケート・クリソスポリウム（Ｐ
ｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕ
ｍ）などが挙げられる。
合ドメイン：β-グルコシダーゼの由来する属の一例と
しては、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）
属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、サーモアナエロ
バクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）
属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ス
トレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、ニ
ューロスポラ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）属、サーモモノ
スポラ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ）属、フミコ
ーラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属、パイロコッカス（Ｐｙｒ
ｏｃｏｃｃｕｓ）属、ファネロケート（Ｐｈａｎｅｒｏ
ｃｈａｅｔｅ）属などが挙げられる。更に種の一例とし
ては、シュードモナス・サッカロフィア（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ ｓａｃｃｈａｒｏｐｈｉｌａ）、シュード
モナス・ステュツエリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔ
ｕｔｚｅｒｉ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕ
ｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・マセランス（Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）、バチルス・アミロリク
ファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕ
ｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・サーキュランス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、バチルス・ブレ
ビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｂｒｅｖｉｓ）、バチルス・オ
ーベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｈｂｅｎｓｉｓ）、
バチルス・リヘニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃ
ｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・ズブチリス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・ステア
ロサーモフィリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔ
ｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、サーモアナエロバクター・
サーモスルフロゲネス（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａ
ｃｔｅｒ ｔｈｅｒｍｏｓｕｌｆｕｒｏｇｅｎｅｓ）、
アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎ
ｉｇｅｒ）、アスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇ
ｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）、アスペルギルス・オリ
ザ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）、アスペ
ルギルス・シロウサミ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｈ
ｉｒｏｕｓａｍｉ）、アスペルギルス・カワチ（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｋａｗａｃｈｉｉ）、ストレプトマ
イセス・グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒ
ｉｓｅｕｓ）、ストレプトマイセス・アルビドフラバス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｌｂｉｄｏｆｌａｖｕ
ｓ）、ストレプトマイセス・リビダンス（Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄａｎｓ）、ストレプトマイセ
ス・ビオラセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｏ
ｌａｃｅｕｓ）、ストレプトマイセス・ベネズエラ（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｖｅｎｅｚｕｅｌａｅ）、サー
モモノスポラ・クルバータ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐ
ｏｒａ ｃｕｒｖａｔａ）、ニューロスポラ・クラッサ
（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｃｒａｓｓａ）、フミコーラ
・グリサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｇｒｉｓｅａ）、パイロ
コッカス・フリオサス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒ
ｉｏｓｕｓ）、ファネロケート・クリソスポリウム（Ｐ
ｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕ
ｍ）などが挙げられる。
【００３９】セルロース結合ドメイン（ＣＢＤ）を有
する酵素（セルラーゼ、β−１，４−グルカナーゼ、β
−１，４−セロビオシダーゼ、β−グルカナーゼ、エン
ドグルカナーゼ、キシラナーゼ、マンナナーゼ、キチナ
ーゼ、アラビノフラノシダーゼ、アセチルエステラーゼ
など）及びそれらのＣＢＤ：セルロース結合ドメイン
（ＣＢＤ）を有する酵素としてセルラーゼ、β−１，４
−グルカナーゼ、β−１，４−セロビオシダーゼ、β−
グルカナーゼ、エンドグルカナーゼ、キシラナーゼ、マ
ンナナーゼ、キチナーゼ、アラビノフラノシダーゼ、ア
セチルエステラーゼの有する各種タイプのＣＢＤのう
ち、Ｉ，ＩＩ，ＶＩ以外のファミリーIII，ＩＶ，Ｖ，
ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，ＩＸ，Ｘに分類されるＣＢＤ
が好適であり、それらのＣＢＤを有する酵素又はそれら
のポリペプチドの一部分も利用可能である。これらの中
でも特に好ましいＣＢＤファミリーはファミリーＩＩ
Ｉ，ＩＶ，ＩＸである。
する酵素（セルラーゼ、β−１，４−グルカナーゼ、β
−１，４−セロビオシダーゼ、β−グルカナーゼ、エン
ドグルカナーゼ、キシラナーゼ、マンナナーゼ、キチナ
ーゼ、アラビノフラノシダーゼ、アセチルエステラーゼ
など）及びそれらのＣＢＤ：セルロース結合ドメイン
（ＣＢＤ）を有する酵素としてセルラーゼ、β−１，４
−グルカナーゼ、β−１，４−セロビオシダーゼ、β−
グルカナーゼ、エンドグルカナーゼ、キシラナーゼ、マ
ンナナーゼ、キチナーゼ、アラビノフラノシダーゼ、ア
セチルエステラーゼの有する各種タイプのＣＢＤのう
ち、Ｉ，ＩＩ，ＶＩ以外のファミリーIII，ＩＶ，Ｖ，
ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，ＩＸ，ＩＸ，Ｘに分類されるＣＢＤ
が好適であり、それらのＣＢＤを有する酵素又はそれら
のポリペプチドの一部分も利用可能である。これらの中
でも特に好ましいＣＢＤファミリーはファミリーＩＩ
Ｉ，ＩＶ，ＩＸである。
【００４０】なお、以下に一例を挙げた属や種以外に由
来するＣＢＤであっても、アミノ酸配列の類似性により
ファミリーＩＩＩ，ＩＶ，Ｖ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，Ｉ
Ｘ，Ｘに分類されるＣＢＤであれば、利用することがで
きる。
来するＣＢＤであっても、アミノ酸配列の類似性により
ファミリーＩＩＩ，ＩＶ，Ｖ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，Ｉ
Ｘ，Ｘに分類されるＣＢＤであれば、利用することがで
きる。
【００４１】（ｉ）上記ファミリーＩＩＩのＣＢＤを持
つ酵素が由来する属の一例としては、バチルス（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ）属、クラドセラム（Ｃｌａｄｏｃｅｌｌｕ
ｍ）属、セルロモナス（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ）
属、クロストリディウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）
属、エルヴィニア（Ｅｒｗｉｎｉａ）属、ピロマイセス
（Ｐｉｒｏｍｙｃｅｓ）属などが挙げられる。更に種の
一例としては、バチルス・ロータス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｌａｕｔｕｓ）、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、クラドセラム・サッカロ
リティカム（Ｃｌａｄｏｃｅｌｌｕｍ ｓａｃｃｈａｒ
ｏｌｙｔｉｃｕｍ）、セルロモナス・フィミ（Ｃｅｌｌ
ｕｌｏｍｏｎａｓ ｆｉｍｉ）、クロストリディウム・
セルロリティカム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌ
ｕｌｏｌｙｔｉｃｕｍ）、クロストリディウム・セルロ
バンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕｌｏｖｏ
ｒａｎｓ）、クロストリディウム・スタコラリウム（Ｃ
ｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｔｅｒｃｏｒａｒｉｕｍ）、
クロストリディウム・サーモセラム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄ
ｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ）、エルヴィニア・
カロトボラ（Ｅｒｗｉｎｉａ ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ）
などが挙げられる。
つ酵素が由来する属の一例としては、バチルス（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ）属、クラドセラム（Ｃｌａｄｏｃｅｌｌｕ
ｍ）属、セルロモナス（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ）
属、クロストリディウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）
属、エルヴィニア（Ｅｒｗｉｎｉａ）属、ピロマイセス
（Ｐｉｒｏｍｙｃｅｓ）属などが挙げられる。更に種の
一例としては、バチルス・ロータス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｌａｕｔｕｓ）、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、クラドセラム・サッカロ
リティカム（Ｃｌａｄｏｃｅｌｌｕｍ ｓａｃｃｈａｒ
ｏｌｙｔｉｃｕｍ）、セルロモナス・フィミ（Ｃｅｌｌ
ｕｌｏｍｏｎａｓ ｆｉｍｉ）、クロストリディウム・
セルロリティカム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌ
ｕｌｏｌｙｔｉｃｕｍ）、クロストリディウム・セルロ
バンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕｌｏｖｏ
ｒａｎｓ）、クロストリディウム・スタコラリウム（Ｃ
ｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｔｅｒｃｏｒａｒｉｕｍ）、
クロストリディウム・サーモセラム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄ
ｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ）、エルヴィニア・
カロトボラ（Ｅｒｗｉｎｉａ ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ）
などが挙げられる。
【００４２】（ｉｉ）上記ファミリーＩＶのＣＢＤを持
つ酵素が由来する属の一例としては、セルロモナス（Ｃ
ｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ）属、クロストリディウム（Ｃ
ｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、サーモモノスポラ（Ｔｈｅ
ｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ）属などが挙げられる。更に
種の一例としては、セルロモナス・フィミ（Ｃｅｌｌｕ
ｌｏｍｏｎａｓ ｆｉｍｉ）、クロストリディウム・セ
ルロリティカム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕ
ｌｏｌｙｔｉｃｕｍ）、ストレプトマイセス・レティキ
ュリ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｒｅｔｉｃｕｌ
ｉ）、サーモモノスポラ・フコサ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎ
ｏｓｐｏｒａ ｆｕｃｏｓａ）などが挙げられる。
つ酵素が由来する属の一例としては、セルロモナス（Ｃ
ｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ）属、クロストリディウム（Ｃ
ｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、サーモモノスポラ（Ｔｈｅ
ｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ）属などが挙げられる。更に
種の一例としては、セルロモナス・フィミ（Ｃｅｌｌｕ
ｌｏｍｏｎａｓ ｆｉｍｉ）、クロストリディウム・セ
ルロリティカム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕ
ｌｏｌｙｔｉｃｕｍ）、ストレプトマイセス・レティキ
ュリ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｒｅｔｉｃｕｌ
ｉ）、サーモモノスポラ・フコサ（Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎ
ｏｓｐｏｒａ ｆｕｃｏｓａ）などが挙げられる。
【００４３】（ｉｉｉ）上記ファミリーＶのＣＢＤを持
つ酵素が由来する属の一例としては、エルヴィニア（Ｅ
ｒｗｉｎｉａ）属などが挙げられ、種の一例としてはエ
ルヴィニア・クリサンテミ（Ｅｒｗｉｎｉａ ｃｈｒｙ
ｓａｎｔｈｅｍｉ）などが挙げられる。
つ酵素が由来する属の一例としては、エルヴィニア（Ｅ
ｒｗｉｎｉａ）属などが挙げられ、種の一例としてはエ
ルヴィニア・クリサンテミ（Ｅｒｗｉｎｉａ ｃｈｒｙ
ｓａｎｔｈｅｍｉ）などが挙げられる。
【００４４】（ｉｖ）上記ファミリーＶＩＩのＣＢＤを
持つ酵素が由来する属の一例として、クロストリディウ
ム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属などが挙げられ、種の
一例としてクロストリディウム・サーモセラム（Ｃｌｏ
ｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ）などが
挙げられる。
持つ酵素が由来する属の一例として、クロストリディウ
ム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属などが挙げられ、種の
一例としてクロストリディウム・サーモセラム（Ｃｌｏ
ｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ）などが
挙げられる。
【００４５】（ｖ）上記ファミリーＶＩＩＩのＣＢＤを
持つ酵素が由来する属の一例として、ディクチオステリ
ウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍ）属などが挙げら
れ、種の一例としてディクチオステリウム・ディスコイ
デウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍ ｄｉｓｃｏｉｄ
ｅｕｍ）などが挙げられる。
持つ酵素が由来する属の一例として、ディクチオステリ
ウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍ）属などが挙げら
れ、種の一例としてディクチオステリウム・ディスコイ
デウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍ ｄｉｓｃｏｉｄ
ｅｕｍ）などが挙げられる。
【００４６】（ｖｉ）上記ファミリーＩＸのＣＢＤを持
つ酵素が由来する属の一例としては、クロストリディウ
ム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、サーモアナエロバク
テリウム（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ）属、サーモトガ（Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇａ）属などが
挙げられる。更に種の一例としては、クロストリディウ
ム・サーモセラム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒ
ｍｏｃｅｌｌｕｍ）、サーモアナエロバクテリウム・サ
ッカロリティカム（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｍ）、サー
モトガ・マリティマ（Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇａ ｍａｒｉ
ｔｉｍａ）、サーモトガ・ナポリターナ（Ｔｈｅｒｍｏ
ｔｏｇａ ｎｅａｐｏｌｉｔａｎａ）などが挙げられ
る。
つ酵素が由来する属の一例としては、クロストリディウ
ム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、サーモアナエロバク
テリウム（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ）属、サーモトガ（Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇａ）属などが
挙げられる。更に種の一例としては、クロストリディウ
ム・サーモセラム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒ
ｍｏｃｅｌｌｕｍ）、サーモアナエロバクテリウム・サ
ッカロリティカム（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｍ）、サー
モトガ・マリティマ（Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇａ ｍａｒｉ
ｔｉｍａ）、サーモトガ・ナポリターナ（Ｔｈｅｒｍｏ
ｔｏｇａ ｎｅａｐｏｌｉｔａｎａ）などが挙げられ
る。
【００４７】（ｖｉｉ）上記ファミリーＸのＣＢＤを持
つ酵素が由来する属の一例としては、シュードモナス
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属などが挙げられ、種の一
例としては、シュードモナス・フルオレセンス（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）などが挙
げられる。
つ酵素が由来する属の一例としては、シュードモナス
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属などが挙げられ、種の一
例としては、シュードモナス・フルオレセンス（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）などが挙
げられる。
【００４８】なお、その他以下の属や種に由来する酵素
の基質結合ドメイン又は酵素についても利用可能であ
る。例えばクラディバチルス（Ｃａｌｄｉｂａｃｉｌｌ
ｕｓ）属、ドウワニエラ（Ｄｏｏｈｗａｎｉｅｌｌａ）
属、ジャンチノバクテリウム（Ｊａｎｔｈｉｎｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ）属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌ
ｌｕｓ）属、エマリセラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属、
カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属などの属に由来するキチ
ナーゼ；クラディバチルス・セルロボランス（Ｃａｌｄ
ｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｌｌｕｌｏｖｏｒａｎｓ）、
ドウワニエラ・キチナシゲンス（Ｄｏｏｈｗａｎｉｅｌ
ｌａ ｃｈｉｔｉｎａｓｉｇｅｎｓ）、ジャンチノバク
テリウム・リビダム（Ｊａｎｔｈｉｎｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ ｌｉｖｉｄｕｍ）、アスペルギルス・ニデュラン
ス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）、エ
マリセラ・ニデュランス（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ ｎｉ
ｄｕｌａｎｓ）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉ
ｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）などの種に由来するキチナー
ゼなどが挙げられる。
の基質結合ドメイン又は酵素についても利用可能であ
る。例えばクラディバチルス（Ｃａｌｄｉｂａｃｉｌｌ
ｕｓ）属、ドウワニエラ（Ｄｏｏｈｗａｎｉｅｌｌａ）
属、ジャンチノバクテリウム（Ｊａｎｔｈｉｎｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ）属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌ
ｌｕｓ）属、エマリセラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属、
カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属などの属に由来するキチ
ナーゼ；クラディバチルス・セルロボランス（Ｃａｌｄ
ｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｌｌｕｌｏｖｏｒａｎｓ）、
ドウワニエラ・キチナシゲンス（Ｄｏｏｈｗａｎｉｅｌ
ｌａ ｃｈｉｔｉｎａｓｉｇｅｎｓ）、ジャンチノバク
テリウム・リビダム（Ｊａｎｔｈｉｎｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ ｌｉｖｉｄｕｍ）、アスペルギルス・ニデュラン
ス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）、エ
マリセラ・ニデュランス（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ ｎｉ
ｄｕｌａｎｓ）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉ
ｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）などの種に由来するキチナー
ゼなどが挙げられる。
【００４９】なお、レクチン類についてもポリサッカラ
イドに親和性を持つポリペプチドであれば利用可能であ
る。
イドに親和性を持つポリペプチドであれば利用可能であ
る。
【００５０】本発明の汚れ成分又は繊維成分に対する親
和性を有するポリペプチドの遺伝子は、一般的に行われ
ている方法により取得することができる。例えば、微生
物や植物や動物の染色体ＤＮＡを調製して、ｃＤＮＡラ
イブラリーを作製する。この作製したｃＤＮＡライブラ
リーを含んだ微生物の形質転換体を作製して、それらの
ポリサッカライド、脂質又は蛋白質に対する親和性を評
価することにより、目的のポリペプチドをコードする遺
伝子を持つクローンを見出すことができる。
和性を有するポリペプチドの遺伝子は、一般的に行われ
ている方法により取得することができる。例えば、微生
物や植物や動物の染色体ＤＮＡを調製して、ｃＤＮＡラ
イブラリーを作製する。この作製したｃＤＮＡライブラ
リーを含んだ微生物の形質転換体を作製して、それらの
ポリサッカライド、脂質又は蛋白質に対する親和性を評
価することにより、目的のポリペプチドをコードする遺
伝子を持つクローンを見出すことができる。
【００５１】この場合、汚れ成分又は繊維成分に対する
親和性を有するポリペプチドに関するアミノ酸配列や遺
伝子のデータベース情報などを基にして、放射性化合物
（ＲＩ）や蛍光物質や酵素などでラベル化したオリゴヌ
クレオチドプローブを作製し、このプローブと相補的な
遺伝子を持つクローンを見出すことにより、目的の遺伝
子を取得することもできる。
親和性を有するポリペプチドに関するアミノ酸配列や遺
伝子のデータベース情報などを基にして、放射性化合物
（ＲＩ）や蛍光物質や酵素などでラベル化したオリゴヌ
クレオチドプローブを作製し、このプローブと相補的な
遺伝子を持つクローンを見出すことにより、目的の遺伝
子を取得することもできる。
【００５２】他の方法としては、汚れ成分又は繊維成分
に対する親和性を有するポリペプチドのＤＮＡ配列を含
む染色体、ＲＮＡ、プラスミド、又はｃＤＮＡライブラ
リーから、ＰＣＲ等により目的のＤＮＡ領域を選択的に
増幅して取得するか、適当な制限酵素を用いて切り出す
ことによっても、目的の遺伝子を取得することができ
る。
に対する親和性を有するポリペプチドのＤＮＡ配列を含
む染色体、ＲＮＡ、プラスミド、又はｃＤＮＡライブラ
リーから、ＰＣＲ等により目的のＤＮＡ領域を選択的に
増幅して取得するか、適当な制限酵素を用いて切り出す
ことによっても、目的の遺伝子を取得することができ
る。
【００５３】また別の方法としては、予め微生物などに
より生産した「汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を
有するポリペプチド」を用いても良い。この場合、汚れ
成分又は繊維成分に親和性を有するポリペプチドを蛋白
質分解酵素などで限定分解して生じたポリペプチドを用
いることもできる。更には、汚れ成分又は繊維成分に対
する親和性を有するポリペプチドをコードする遺伝子が
市販されている場合には、それを用いてキメラ酵素の遺
伝子を構築しても構わない。
より生産した「汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を
有するポリペプチド」を用いても良い。この場合、汚れ
成分又は繊維成分に親和性を有するポリペプチドを蛋白
質分解酵素などで限定分解して生じたポリペプチドを用
いることもできる。更には、汚れ成分又は繊維成分に対
する親和性を有するポリペプチドをコードする遺伝子が
市販されている場合には、それを用いてキメラ酵素の遺
伝子を構築しても構わない。
【００５４】次に、本発明のキメラ酵素の洗浄又は漂白
を担う領域の成分となる「汚れ成分又は繊維成分に対す
る親和性を有する酵素」としては、蛋白質分解酵素、リ
パーゼ、アミラーゼファミリー、ペクチン質分解酵素、
及びペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、オキシダーゼ類
（例えばグルコースオキシダーゼ、コレステロールオキ
シダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ））などの酸化還
元酵素から選ばれる１種又は２種以上を用いることが好
ましい。なお、対象となる汚れやしみの成分にあわせ
て、対象成分の分解や漂白に関わる酵素であれば、上記
の酵素以外であっても利用することができる。
を担う領域の成分となる「汚れ成分又は繊維成分に対す
る親和性を有する酵素」としては、蛋白質分解酵素、リ
パーゼ、アミラーゼファミリー、ペクチン質分解酵素、
及びペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、オキシダーゼ類
（例えばグルコースオキシダーゼ、コレステロールオキ
シダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ））などの酸化還
元酵素から選ばれる１種又は２種以上を用いることが好
ましい。なお、対象となる汚れやしみの成分にあわせ
て、対象成分の分解や漂白に関わる酵素であれば、上記
の酵素以外であっても利用することができる。
【００５５】上記酵素ＤＮＡ又は酵素ポリペプチドの取
得源については、動物、植物、カビやバクテリアなどの
微生物に由来するものが適当である。また、ここで用い
る酵素には、既知の酵素又は市販されている酵素を用い
ることもできる。更には、本発明で利用できる酵素に
は、化学修飾や遺伝子工学的な修飾を施した酵素も含ま
れる。
得源については、動物、植物、カビやバクテリアなどの
微生物に由来するものが適当である。また、ここで用い
る酵素には、既知の酵素又は市販されている酵素を用い
ることもできる。更には、本発明で利用できる酵素に
は、化学修飾や遺伝子工学的な修飾を施した酵素も含ま
れる。
【００５６】以下、本発明の好適な酵素の種類及び由来
の事例を示すが、本発明で利用できる酵素は、下記の事
例及びそれらの由来に限定されるものではない。
の事例を示すが、本発明で利用できる酵素は、下記の事
例及びそれらの由来に限定されるものではない。
【００５７】蛋白質分解酵素：本発明で用いる蛋白質
分解酵素（Ｅ．Ｃ．３．４）の種類や由来は限定されな
い。好適な蛋白質分解酵素の由来の例としては、微生
物、動物、植物が挙げられるが、特に微生物（バクテリ
ア又はカビ）由来のプロテアーゼが好ましい。各種のタ
イプのプロテアーゼが利用できるが、Ｅ．Ｃ．３．４．
２１のセリンプロテアーゼが好適であり、中でも、アル
カリプロテアーゼが好適である。好ましい酵素の一例と
しては、バチルス(Ｂａｃｉｌｌｕｓ)属に由来するアル
カリプロテアーゼが挙げられる。有用な酵素の一例とし
ては、ズブチリシン、Ｙａ酵素（霜垣ら、Ａｇｒｉｃ．
Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，５５，２２５１−２２５８（１
９９１））、などが挙げられる。
分解酵素（Ｅ．Ｃ．３．４）の種類や由来は限定されな
い。好適な蛋白質分解酵素の由来の例としては、微生
物、動物、植物が挙げられるが、特に微生物（バクテリ
ア又はカビ）由来のプロテアーゼが好ましい。各種のタ
イプのプロテアーゼが利用できるが、Ｅ．Ｃ．３．４．
２１のセリンプロテアーゼが好適であり、中でも、アル
カリプロテアーゼが好適である。好ましい酵素の一例と
しては、バチルス(Ｂａｃｉｌｌｕｓ)属に由来するアル
カリプロテアーゼが挙げられる。有用な酵素の一例とし
ては、ズブチリシン、Ｙａ酵素（霜垣ら、Ａｇｒｉｃ．
Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，５５，２２５１−２２５８（１
９９１））、などが挙げられる。
【００５８】アミラーゼファミリー：本発明で利用で
きるアミラーゼの種類や由来は限定されない。Ｅ．Ｃ．
３．２．１．１のα−アミラーゼ、Ｅ．Ｃ．３．２．
１．２のβ−１，３−アミラーゼ、及びＥ．Ｃ．３．
２．１．３のエキソ−α−１，４−グルコシダーゼ、エ
ンド−α−１，４−グルコシダーゼが好ましく、特に微
生物（バクテリア又はカビ）に由来するものが好まし
い。有用なアミラーゼの一例としては、バチルス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ）属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌ
ｌｕｓ）属、リゾパス（Ｒｈｙｚｏｐｕｓ）属、パイロ
コッカス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ）属などに由来するも
のが挙げられる。
きるアミラーゼの種類や由来は限定されない。Ｅ．Ｃ．
３．２．１．１のα−アミラーゼ、Ｅ．Ｃ．３．２．
１．２のβ−１，３−アミラーゼ、及びＥ．Ｃ．３．
２．１．３のエキソ−α−１，４−グルコシダーゼ、エ
ンド−α−１，４−グルコシダーゼが好ましく、特に微
生物（バクテリア又はカビ）に由来するものが好まし
い。有用なアミラーゼの一例としては、バチルス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ）属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌ
ｌｕｓ）属、リゾパス（Ｒｈｙｚｏｐｕｓ）属、パイロ
コッカス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ）属などに由来するも
のが挙げられる。
【００５９】リパーゼ：本発明で利用できるリパーゼ
（Ｅ．Ｃ．３．１．１）の種類や由来は限定されない。
Ｅ．Ｃ．３．１．１３のトリアシルグリセロールリパー
ゼ、Ｅ．Ｃ．３．１．１．１３のコレステロールエステ
ラーゼ、Ｅ．Ｃ．３．１．２３のモノアシルグリセロー
ルリパーゼ、Ｅ．Ｃ．３．１．１．３４のリポプロティ
ンリパーゼが好ましく、それら由来は限定されないが、
特に微生物（バクテリア又はカビ）に由来するものが好
ましい。有用なリパーゼの一例としては、フミコーラ
（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉ
ｕｍ）属、リゾパス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属、バチルス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属などに由来するものが挙げられ
る。
（Ｅ．Ｃ．３．１．１）の種類や由来は限定されない。
Ｅ．Ｃ．３．１．１３のトリアシルグリセロールリパー
ゼ、Ｅ．Ｃ．３．１．１．１３のコレステロールエステ
ラーゼ、Ｅ．Ｃ．３．１．２３のモノアシルグリセロー
ルリパーゼ、Ｅ．Ｃ．３．１．１．３４のリポプロティ
ンリパーゼが好ましく、それら由来は限定されないが、
特に微生物（バクテリア又はカビ）に由来するものが好
ましい。有用なリパーゼの一例としては、フミコーラ
（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉ
ｕｍ）属、リゾパス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属、バチルス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属などに由来するものが挙げられ
る。
【００６０】ペルオキシダーゼ：本発明で利用できる
ペルオキシダーゼ（Ｅ．Ｃ．１．１１）の種類や由来は
限定されないが、Ｅ．Ｃ．１．１１．７のペルオキシダ
ーゼが好ましく、特に植物又は微生物（バクテリア、担
子菌類、又はカビなど）に由来するものが好ましい。有
用なペルオキシダーゼの一例としては、植物由来では、
西洋わさび、大豆などに由来するもの、微生物由来で
は、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、シュードモナス
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、フミコーラ（Ｈｕｍｉ
ｃｏｌａ）属、コプリナス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）属など
に由来するものが挙げられる。
ペルオキシダーゼ（Ｅ．Ｃ．１．１１）の種類や由来は
限定されないが、Ｅ．Ｃ．１．１１．７のペルオキシダ
ーゼが好ましく、特に植物又は微生物（バクテリア、担
子菌類、又はカビなど）に由来するものが好ましい。有
用なペルオキシダーゼの一例としては、植物由来では、
西洋わさび、大豆などに由来するもの、微生物由来で
は、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、シュードモナス
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、フミコーラ（Ｈｕｍｉ
ｃｏｌａ）属、コプリナス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）属など
に由来するものが挙げられる。
【００６１】ラッカーゼ：本発明で利用できるラッカ
ーゼ（ＥＣ１．１０．３．２）の種類や由来は限定され
ないが、植物又は微生物（バクテリア、カビ、又は担子
菌類など）に由来するものが好ましい。有用なラッカー
ゼの一例としては、植物由来では、ウルシなどの樹木や
野菜類に由来するもの、微生物由来では、アスペルギル
ス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ニューロスポラ（Ｎ
ｅｕｒｏｓｐｏｒ）属、コプリナス（Ｃｏｐｒｉｎｕ
ｓ）属、コリオラス（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ）属などに由来
するものが挙げられる。
ーゼ（ＥＣ１．１０．３．２）の種類や由来は限定され
ないが、植物又は微生物（バクテリア、カビ、又は担子
菌類など）に由来するものが好ましい。有用なラッカー
ゼの一例としては、植物由来では、ウルシなどの樹木や
野菜類に由来するもの、微生物由来では、アスペルギル
ス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ニューロスポラ（Ｎ
ｅｕｒｏｓｐｏｒ）属、コプリナス（Ｃｏｐｒｉｎｕ
ｓ）属、コリオラス（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ）属などに由来
するものが挙げられる。
【００６２】オキシダーゼ：本発明で利用できるオキ
シダーゼの種類や由来は限定されない。Ｅ．Ｃ．１．
１．３．４のグルコースオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．１．
１．３．５のヘキソースオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．１．
１．３．６のコレステロールオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．
１．１．３．１０のピラノースオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．
１．１．３．１３のアルコールオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．
１．１．３．９のガラクトースオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．
１．１０．３．１のカテコールオキシダーゼが好適であ
る。これらの酵素は動物、植物、及び微生物から得るこ
とができるが、微生物（バクテリア、カビ、又は担子菌
類など）由来のものが好適である。有用なオキシダーゼ
の一例としては、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ）属、ポリポラス（Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ）属、バチ
ルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属などに由来するものが挙げ
られる。
シダーゼの種類や由来は限定されない。Ｅ．Ｃ．１．
１．３．４のグルコースオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．１．
１．３．５のヘキソースオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．１．
１．３．６のコレステロールオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．
１．１．３．１０のピラノースオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．
１．１．３．１３のアルコールオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．
１．１．３．９のガラクトースオキシダーゼ、Ｅ．Ｃ．
１．１０．３．１のカテコールオキシダーゼが好適であ
る。これらの酵素は動物、植物、及び微生物から得るこ
とができるが、微生物（バクテリア、カビ、又は担子菌
類など）由来のものが好適である。有用なオキシダーゼ
の一例としては、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ）属、ポリポラス（Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ）属、バチ
ルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属などに由来するものが挙げ
られる。
【００６３】ペクチン酸分解酵素：本発明で利用でき
るペクチン酸分解酵素の種類や由来は限定されない。
Ｅ．Ｃ．３．２．１５のペクチナーゼ、Ｅ．Ｃ．４．
２．２．２のペクチン酸リアーゼが好適である。植物や
微生物から得ることができるが、由来は限定されない。
アルカリ領域で活性の高い酵素も好適に用いられる。好
ましいペクチン酸分解酵素としては、微生物由来の酵素
が挙げられ、一例としてバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）
属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属など
に由来するものが挙げられる。
るペクチン酸分解酵素の種類や由来は限定されない。
Ｅ．Ｃ．３．２．１５のペクチナーゼ、Ｅ．Ｃ．４．
２．２．２のペクチン酸リアーゼが好適である。植物や
微生物から得ることができるが、由来は限定されない。
アルカリ領域で活性の高い酵素も好適に用いられる。好
ましいペクチン酸分解酵素としては、微生物由来の酵素
が挙げられ、一例としてバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）
属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属など
に由来するものが挙げられる。
【００６４】なお、その他の種類の酵素であっても、汚
れ成分の分解に関わる酵素であれば利用することが可能
である。
れ成分の分解に関わる酵素であれば利用することが可能
である。
【００６５】本発明の汚れ成分又は繊維成分に対する親
和性を有するポリペプチドを有するキメラ酵素は、遺伝
子工学的な手法、又は化学的な架橋方法などによって得
ることができる。
和性を有するポリペプチドを有するキメラ酵素は、遺伝
子工学的な手法、又は化学的な架橋方法などによって得
ることができる。
【００６６】この場合、汚れ成分又は繊維成分に対する
親和性を有するポリペプチドと酵素との連結部分につい
ては、直接連結してもよいし、リンカーを介して連結す
ることもできる。
親和性を有するポリペプチドと酵素との連結部分につい
ては、直接連結してもよいし、リンカーを介して連結す
ることもできる。
【００６７】本発明でいうリンカーとは、ポリサッカラ
イドを分解する各種の酵素に良く見られるような、触媒
活性領域と基質結合ドメインとの間をつなぐ領域として
存在するペプチドである（Ｐ．Ｔｏｍｍｅら、Ａｄｖ．
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，３７，１−８
１（１９９５））。目的に応じて各種のリンカーが利用
でき、酵素や蛋白質に由来するリンカーやその誘導体、
人工的に設計したポリペプチドなどを用いることができ
る。
イドを分解する各種の酵素に良く見られるような、触媒
活性領域と基質結合ドメインとの間をつなぐ領域として
存在するペプチドである（Ｐ．Ｔｏｍｍｅら、Ａｄｖ．
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，３７，１−８
１（１９９５））。目的に応じて各種のリンカーが利用
でき、酵素や蛋白質に由来するリンカーやその誘導体、
人工的に設計したポリペプチドなどを用いることができ
る。
【００６８】リンカーの長さは０〜４００アミノ酸が適
当であり、より好ましくは０〜１００アミノ酸である。
また、リンカーの分解が懸念される場合には、プロテア
ーゼに感受性の低いアミノ酸配列のリンカーを用いた
り、リンカーのアミノ酸配列をプロテアーゼが認識しに
くく変更したり、リンカーを糖鎖により修飾することが
できる。また、酵素領域を離脱する目的でキメラ酵素を
作製する場合は、リンカー部分にプロテアーゼ切断部位
のアミノ酸配列を挿入して、系中に存在するプロテアー
ゼ、又は後で添加したプロテアーゼなどにより、リンカ
ーを分解させることも可能である。
当であり、より好ましくは０〜１００アミノ酸である。
また、リンカーの分解が懸念される場合には、プロテア
ーゼに感受性の低いアミノ酸配列のリンカーを用いた
り、リンカーのアミノ酸配列をプロテアーゼが認識しに
くく変更したり、リンカーを糖鎖により修飾することが
できる。また、酵素領域を離脱する目的でキメラ酵素を
作製する場合は、リンカー部分にプロテアーゼ切断部位
のアミノ酸配列を挿入して、系中に存在するプロテアー
ゼ、又は後で添加したプロテアーゼなどにより、リンカ
ーを分解させることも可能である。
【００６９】また、汚れ成分又は繊維成分に対する親和
性を有するポリペプチドと酵素とのつなぎ方について
は、化学的な結合、イオン結合、ジスルフィド結合、疎
水結合、水素結合、ｐＨ感受性の結合、又は金属イオン
を媒介とした結合などを利用することもできる。
性を有するポリペプチドと酵素とのつなぎ方について
は、化学的な結合、イオン結合、ジスルフィド結合、疎
水結合、水素結合、ｐＨ感受性の結合、又は金属イオン
を媒介とした結合などを利用することもできる。
【００７０】汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有
するポリペプチドは、それらを含む蛋白質や酵素の種類
によって、ポリペプチド上の存在位置がＮ末端側、Ｃ末
端側、内側のものがあり、様々である。しかしながら、
キメラ酵素の作製においては、キメラ酵素のアミノ酸配
列上において、ポリペプチド上の本来の存在位置に依存
せず、Ｎ末端側、Ｃ末端側又は内側の任意の位置に組み
込むことが可能である。
するポリペプチドは、それらを含む蛋白質や酵素の種類
によって、ポリペプチド上の存在位置がＮ末端側、Ｃ末
端側、内側のものがあり、様々である。しかしながら、
キメラ酵素の作製においては、キメラ酵素のアミノ酸配
列上において、ポリペプチド上の本来の存在位置に依存
せず、Ｎ末端側、Ｃ末端側又は内側の任意の位置に組み
込むことが可能である。
【００７１】キメラ酵素の構成は、汚れ成分又は繊維成
分に対する親和性を有するポリペプチドを複数、或いは
汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有する酵素を複
数組み合わせることも可能である。例えば、一つの汚れ
成分又は繊維成分に対する親和性を有するポリペプチド
をキメラ酵素の内側に位置させて、その両側に同一又は
異なる酵素を連結することも可能である。
分に対する親和性を有するポリペプチドを複数、或いは
汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有する酵素を複
数組み合わせることも可能である。例えば、一つの汚れ
成分又は繊維成分に対する親和性を有するポリペプチド
をキメラ酵素の内側に位置させて、その両側に同一又は
異なる酵素を連結することも可能である。
【００７２】また、リンカーを汚れ成分又は繊維成分に
対する親和性を有するポリペプチドと酵素の連結部分に
用いることも可能である。更に、汚れ成分又は繊維成分
に対する親和性を有するポリペプチドに複数の酵素をつ
なぎ合わせた多機能キメラ酵素などの作製も可能である
し、汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有するポリ
ペプチドを各種複数連結したキメラ酵素などの作製も可
能である。
対する親和性を有するポリペプチドと酵素の連結部分に
用いることも可能である。更に、汚れ成分又は繊維成分
に対する親和性を有するポリペプチドに複数の酵素をつ
なぎ合わせた多機能キメラ酵素などの作製も可能である
し、汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有するポリ
ペプチドを各種複数連結したキメラ酵素などの作製も可
能である。
【００７３】具体的には、遺伝子工学的手法により、汚
れ成分又は繊維成分に対する親和性を有するポリペプチ
ドの遺伝子配列と洗浄や漂白を担う酵素の遺伝子配列を
融合することにより、キメラ酵素の遺伝子を得ることが
できる。また、キメラ酵素の遺伝子配列中にリンカー領
域のアミノ酸配列をコードする遺伝子を融合しても良
い。
れ成分又は繊維成分に対する親和性を有するポリペプチ
ドの遺伝子配列と洗浄や漂白を担う酵素の遺伝子配列を
融合することにより、キメラ酵素の遺伝子を得ることが
できる。また、キメラ酵素の遺伝子配列中にリンカー領
域のアミノ酸配列をコードする遺伝子を融合しても良
い。
【００７４】更にもう一つの方法として、汚れ成分又は
繊維成分に対する親和性を有するポリペプチドのアミノ
酸配列と洗浄や漂白を担う酵素のアミノ酸配列を、化学
的な架橋結合、イオン結合、ジスルフィド結合、疎水結
合、水素結合、ｐＨ感受性の結合、又は金属イオンを媒
介とした結合などを利用して連結しても良い。この場合
にもリンカー領域を含むことができる。
繊維成分に対する親和性を有するポリペプチドのアミノ
酸配列と洗浄や漂白を担う酵素のアミノ酸配列を、化学
的な架橋結合、イオン結合、ジスルフィド結合、疎水結
合、水素結合、ｐＨ感受性の結合、又は金属イオンを媒
介とした結合などを利用して連結しても良い。この場合
にもリンカー領域を含むことができる。
【００７５】本発明の洗浄剤組成物は、上記のようにし
て得られる汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有す
るポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分に対する親和性
を有する酵素とを結合させてなるキメラ酵素を含むもの
である。
て得られる汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有す
るポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分に対する親和性
を有する酵素とを結合させてなるキメラ酵素を含むもの
である。
【００７６】この場合、洗浄剤組成物中のキメラ酵素の
配合量は０．００１〜２０質量％、好ましくは０．０１
〜１０質量％、より好ましくは０．１〜１０質量％であ
る。キメラ酵素の配合量が少なすぎると十分な洗浄力が
得られない場合があり、一方、多すぎると配合量に見合
った洗浄力が期待できない場合がある。
配合量は０．００１〜２０質量％、好ましくは０．０１
〜１０質量％、より好ましくは０．１〜１０質量％であ
る。キメラ酵素の配合量が少なすぎると十分な洗浄力が
得られない場合があり、一方、多すぎると配合量に見合
った洗浄力が期待できない場合がある。
【００７７】本発明の洗浄剤組成物には、キメラ酵素以
外にも、一般に洗浄剤に使用される界面活性剤等の洗浄
成分を併用することができる。
外にも、一般に洗浄剤に使用される界面活性剤等の洗浄
成分を併用することができる。
【００７８】界面活性剤としては、直鎖アルキルベンゼ
ンスルホン酸塩及び／又はアルキル硫酸塩を含有するも
のが好ましい。これらの具体例としては、平均炭素数１
０〜１６のアルキル基を有する直鎖アルキルベンゼンス
ルホン酸塩、平均炭素数１０〜２０のアルキル基を有す
るアルキル硫酸塩などが挙げられる。
ンスルホン酸塩及び／又はアルキル硫酸塩を含有するも
のが好ましい。これらの具体例としては、平均炭素数１
０〜１６のアルキル基を有する直鎖アルキルベンゼンス
ルホン酸塩、平均炭素数１０〜２０のアルキル基を有す
るアルキル硫酸塩などが挙げられる。
【００７９】本発明の洗浄剤組成物中に使用される界面
活性剤の配合量は、一般的には５〜４０質量％、好まし
くは１５〜４０質量％である。界面活性剤の配合量が少
なすぎると洗浄力が不足する場合があり、一方、多すぎ
ると洗剤製造性が悪化する場合があり、好ましくない。
活性剤の配合量は、一般的には５〜４０質量％、好まし
くは１５〜４０質量％である。界面活性剤の配合量が少
なすぎると洗浄力が不足する場合があり、一方、多すぎ
ると洗剤製造性が悪化する場合があり、好ましくない。
【００８０】上記界面活性剤としては、直鎖アルキルベ
ンゼンスルホン酸塩及び／又はアルキル硫酸塩の含有物
以外にも、必要に応じて、他の界面活性剤を配合するこ
とができる。具体的には、平均炭素数１０〜２０の直鎖
又は分岐鎖のアルキル基を有し、分子中に平均０．１５
〜８モルのエチレンオキサイドを付加したアルキルエト
キシ硫酸塩、平均１０〜２０の炭素原子を１分子中に有
するオレフィンスルホン酸塩、平均１０〜２０の炭素原
子を１分子中に有するα−スルホ脂肪酸メチルエステル
塩、平均炭素数８〜２０高級脂肪酸塩等の他のアニオン
性界面活性剤；平均炭素数１０〜２０のアルキル基を有
し、分子中に平均１〜２０モルのアルキレンオキサイド
を付加したポリオキシアルキレンアルキルエーテル、高
級脂肪酸アルカノールアミド又はそのアルキレンオキサ
イド付加物等の非イオン性界面活性剤；その他べタイン
型両性界面活性剤、スルホン酸型両性界面活性剤、リン
酸エステル系界面活性剤、カチオン性界面活性剤などを
含有してもよい。
ンゼンスルホン酸塩及び／又はアルキル硫酸塩の含有物
以外にも、必要に応じて、他の界面活性剤を配合するこ
とができる。具体的には、平均炭素数１０〜２０の直鎖
又は分岐鎖のアルキル基を有し、分子中に平均０．１５
〜８モルのエチレンオキサイドを付加したアルキルエト
キシ硫酸塩、平均１０〜２０の炭素原子を１分子中に有
するオレフィンスルホン酸塩、平均１０〜２０の炭素原
子を１分子中に有するα−スルホ脂肪酸メチルエステル
塩、平均炭素数８〜２０高級脂肪酸塩等の他のアニオン
性界面活性剤；平均炭素数１０〜２０のアルキル基を有
し、分子中に平均１〜２０モルのアルキレンオキサイド
を付加したポリオキシアルキレンアルキルエーテル、高
級脂肪酸アルカノールアミド又はそのアルキレンオキサ
イド付加物等の非イオン性界面活性剤；その他べタイン
型両性界面活性剤、スルホン酸型両性界面活性剤、リン
酸エステル系界面活性剤、カチオン性界面活性剤などを
含有してもよい。
【００８１】その他、本発明の洗浄剤組成物には以下の
成分を必要に応じて用いることができる。 １）アクリル酸とマレイン酸の共重合体 ２）無機ビルダー Ａ型ゼオライト、Ｐ型ゼオライト、Ｘ型ゼオライト、非
晶質アルミノケイ酸塩、結晶性ケイ酸ナトリウム、トリ
ポリリン酸ナトリウム、ピロリン酸ナトリウムなどが挙
げられる。 ３）２価金属イオン捕捉剤 アミノ酸誘導体（アミノ酸骨格としてグリシン、セリ
ン、アスパラギン酸、グルタミン酸から誘導される−Ｃ
ＯＯＸ基を分子内に３〜４個持つキレート剤であり、Ｘ
は水素、又はアルカリ金属塩、特にナトリウム塩が好ま
しい。具体的には、グリシン２酢酸塩、セリン２酢酸
塩、アスパラギン酸２酢酸塩、グルタミン酸２酢酸塩、
イミノジコハク酸塩、ヒドロキシイミノジコハク酸塩な
ど）、オルソリン酸塩、ピロリン酸塩、トリポリリン酸
塩、ニトリル三酢酸塩、エチレンジアミン四酢酸塩、ク
エン酸塩、イソクエン酸塩、ポリアクリル酸、ポリアセ
タールカルボン酸塩などが挙げられる。 ４）アルカリ剤及び無機塩 ケイ酸塩、炭酸塩、セスキ炭酸塩、硫酸塩、塩化ナトリ
ウムなどが挙げられる。 ５）再汚染防止剤 ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリ
ビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースなどが
挙げられる。 ６）漂白剤、漂白活性化剤、蛍光剤等 漂白剤として過炭酸ソーダ、過ホウ酸ソーダ、硫酸ナト
リウムや塩化ナトリウムの過酸化水素付加物などが挙げ
られ、漂白活性化剤としては、特開平８−１５７８７６
号公報記載のものなど、また、増白剤として市販染料の
他、香料、青味付剤なども必要に応じて配合することが
できる． ７）キャリーオーバー成分 原料の不純物は、性能等に悪影響を及ぼさない限り、含
有することができる。α−スルホ脂肪酸メチルエステル
塩に含有されるメチル硫酸ナトリウム、メタンスルホン
酸ナトリウム、α−スルホ脂肪酸塩、アクリル酸とマレ
イン酸の共重合体（塩）に含有されるアクリル酸やマレ
イン酸のモノマー又はその塩、高級アルコールのエチレ
ンオキサイド付加物に含有される高級アルコール、ポリ
エチレングリコールなどが挙げられる。
成分を必要に応じて用いることができる。 １）アクリル酸とマレイン酸の共重合体 ２）無機ビルダー Ａ型ゼオライト、Ｐ型ゼオライト、Ｘ型ゼオライト、非
晶質アルミノケイ酸塩、結晶性ケイ酸ナトリウム、トリ
ポリリン酸ナトリウム、ピロリン酸ナトリウムなどが挙
げられる。 ３）２価金属イオン捕捉剤 アミノ酸誘導体（アミノ酸骨格としてグリシン、セリ
ン、アスパラギン酸、グルタミン酸から誘導される−Ｃ
ＯＯＸ基を分子内に３〜４個持つキレート剤であり、Ｘ
は水素、又はアルカリ金属塩、特にナトリウム塩が好ま
しい。具体的には、グリシン２酢酸塩、セリン２酢酸
塩、アスパラギン酸２酢酸塩、グルタミン酸２酢酸塩、
イミノジコハク酸塩、ヒドロキシイミノジコハク酸塩な
ど）、オルソリン酸塩、ピロリン酸塩、トリポリリン酸
塩、ニトリル三酢酸塩、エチレンジアミン四酢酸塩、ク
エン酸塩、イソクエン酸塩、ポリアクリル酸、ポリアセ
タールカルボン酸塩などが挙げられる。 ４）アルカリ剤及び無機塩 ケイ酸塩、炭酸塩、セスキ炭酸塩、硫酸塩、塩化ナトリ
ウムなどが挙げられる。 ５）再汚染防止剤 ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリ
ビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースなどが
挙げられる。 ６）漂白剤、漂白活性化剤、蛍光剤等 漂白剤として過炭酸ソーダ、過ホウ酸ソーダ、硫酸ナト
リウムや塩化ナトリウムの過酸化水素付加物などが挙げ
られ、漂白活性化剤としては、特開平８−１５７８７６
号公報記載のものなど、また、増白剤として市販染料の
他、香料、青味付剤なども必要に応じて配合することが
できる． ７）キャリーオーバー成分 原料の不純物は、性能等に悪影響を及ぼさない限り、含
有することができる。α−スルホ脂肪酸メチルエステル
塩に含有されるメチル硫酸ナトリウム、メタンスルホン
酸ナトリウム、α−スルホ脂肪酸塩、アクリル酸とマレ
イン酸の共重合体（塩）に含有されるアクリル酸やマレ
イン酸のモノマー又はその塩、高級アルコールのエチレ
ンオキサイド付加物に含有される高級アルコール、ポリ
エチレングリコールなどが挙げられる。
【００８２】
【発明の効果】本発明によれば、汚れ成分又は繊維成分
に対する親和性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊
維成分に対する親和性を有する酵素とを結合させてなる
キメラ酵素及びこのキメラ酵素を含む洗浄剤組成物によ
り、洗浄中において繊維成分又は汚れ成分に対して結合
し得、汚れに配向する酵素濃度を高めることができ、今
までにない高い洗浄力を有するものである。
に対する親和性を有するポリペプチドと汚れ成分又は繊
維成分に対する親和性を有する酵素とを結合させてなる
キメラ酵素及びこのキメラ酵素を含む洗浄剤組成物によ
り、洗浄中において繊維成分又は汚れ成分に対して結合
し得、汚れに配向する酵素濃度を高めることができ、今
までにない高い洗浄力を有するものである。
【００８３】
【実施例】以下、製造例、調製例、実施例及び比較例を
示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記実施
例によって限定されるものではない。なお、製造例中の
操作は特に断らない限り、「Ｍａｎｉａｔｉｓら、Ｍｏ
ｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄ
ｉｔｉｏｎ」に記載されている方法に従い行った。
示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記実施
例によって限定されるものではない。なお、製造例中の
操作は特に断らない限り、「Ｍａｎｉａｔｉｓら、Ｍｏ
ｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄ
ｉｔｉｏｎ」に記載されている方法に従い行った。
【００８４】〔製造例１〕 ムタナーゼのムタン結合ド
メイン（以下、ＭＢＤと略記する）遺伝子の取得 ムタナーゼのＭＢＤ遺伝子配列を以下のようにして取得
した。特開平１０−２０１４８３号公報に記載のプラス
ミドｐＲＭ１ＳＫを鋳型として、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー1（配列番号１）及びＰｓｔＩ部位を有
する下記プライマー２（配列番号２）を用いてＰＣＲを
行った。 プライマー１：配列番号１ gccctaggac cgaatctcac プライマー２：配列番号２ accctaggac cgtgatttgg
メイン（以下、ＭＢＤと略記する）遺伝子の取得 ムタナーゼのＭＢＤ遺伝子配列を以下のようにして取得
した。特開平１０−２０１４８３号公報に記載のプラス
ミドｐＲＭ１ＳＫを鋳型として、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー1（配列番号１）及びＰｓｔＩ部位を有
する下記プライマー２（配列番号２）を用いてＰＣＲを
行った。 プライマー１：配列番号１ gccctaggac cgaatctcac プライマー２：配列番号２ accctaggac cgtgatttgg
【００８５】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＭＢＤ遺伝子配列
の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニングサ
イトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択して、
ＭＢＤ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＭＢＤを得
た。
ン社製）にクローニングし、導入したＭＢＤ遺伝子配列
の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニングサ
イトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択して、
ＭＢＤ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＭＢＤを得
た。
【００８６】〔製造例２〕 アミラーゼの澱粉結合ドメ
イン（以下、ＳＢＤと略記する）の取得 アミラーゼのＳＢＤ遺伝子配列を以下のようにして取得
した。「生物化学実験講座２：核酸の化学I、日本生化
学会編、東京化学同人発行」記載の方法によりバチルス
・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）の染色
体ＤＮＡを調製した。
イン（以下、ＳＢＤと略記する）の取得 アミラーゼのＳＢＤ遺伝子配列を以下のようにして取得
した。「生物化学実験講座２：核酸の化学I、日本生化
学会編、東京化学同人発行」記載の方法によりバチルス
・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）の染色
体ＤＮＡを調製した。
【００８７】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号ＡＢ０２４５１９を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有
する下記プライマー３，４（配列番号３及び４）を作製
し、ＰＣＲを行った。 プライマー３：配列番号３ aagatttcct aggtgtaacc プライマー４：配列番号４ ttacctagga cttgtatgag
番号ＡＢ０２４５１９を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有
する下記プライマー３，４（配列番号３及び４）を作製
し、ＰＣＲを行った。 プライマー３：配列番号３ aagatttcct aggtgtaacc プライマー４：配列番号４ ttacctagga cttgtatgag
【００８８】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＳＢＤ遺伝子配列
の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニングサ
イトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｓ
ＢＤ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＳＢＤを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＳＢＤ遺伝子配列
の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニングサ
イトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｓ
ＢＤ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＳＢＤを得た。
【００８９】〔製造例３〕 セルロース結合蛋白質（以
下、ＣＢＰと略記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＰ遺伝子配列を以下のように
して取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、
日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法により
ストレプトマイセス・ハルステディ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓｈａｌｓｔｅｄｉｉ）の染色体ＤＮＡを調製し
た。
下、ＣＢＰと略記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＰ遺伝子配列を以下のように
して取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、
日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法により
ストレプトマイセス・ハルステディ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓｈａｌｓｔｅｄｉｉ）の染色体ＤＮＡを調製し
た。
【００９０】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｕ５１２２２を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー５，６（配列番号５及び６）を作製し、
ＰＣＲを行った。 プライマー５：配列番号５ atggcctagg caaaagactt g プライマー６：配列番号６ ccgcctagga gattgttgc
番号Ｕ５１２２２を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー５，６（配列番号５及び６）を作製し、
ＰＣＲを行った。 プライマー５：配列番号５ atggcctagg caaaagactt g プライマー６：配列番号６ ccgcctagga gattgttgc
【００９１】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＰ遺伝子配列
の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニングサ
イトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｃ
ＢＰ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢＰを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＰ遺伝子配列
の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニングサ
イトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｃ
ＢＰ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢＰを得た。
【００９２】〔製造例４〕 ファミリーIに分類される
セルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−Ｉと略記す
る）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−Ｉ遺伝子配列を以下のよ
うにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化学
Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」に記載の方法
によりフミコーラ・グリサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｇｒｉ
ｓｅａ）の染色体ＤＮＡを調製した。
セルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−Ｉと略記す
る）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−Ｉ遺伝子配列を以下のよ
うにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化学
Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」に記載の方法
によりフミコーラ・グリサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｇｒｉ
ｓｅａ）の染色体ＤＮＡを調製した。
【００９３】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｘ１７２５８を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー７，８（配列番号７及び８）を作製し、
エクソン領域に存在するＣＢＤ−Ｉ領域をＰＣＲにより
増幅した。 プライマー７：配列番号７ cggcaacaac ctaggcaacc プライマー８：配列番号８ ttcctaggca ctgagagtac c
番号Ｘ１７２５８を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー７，８（配列番号７及び８）を作製し、
エクソン領域に存在するＣＢＤ−Ｉ領域をＰＣＲにより
増幅した。 プライマー７：配列番号７ cggcaacaac ctaggcaacc プライマー８：配列番号８ ttcctaggca ctgagagtac c
【００９４】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−Ｉ遺伝子
配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニン
グサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−Ｉ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢ
Ｄ−Ｉを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−Ｉ遺伝子
配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニン
グサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−Ｉ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢ
Ｄ−Ｉを得た。
【００９５】〔製造例５〕 ファミリーＩＩに分類され
るセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＩＩと略記
する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＩＩ遺伝子配列を以下の
ようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化
学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法
によりセルロモナス・フィミ（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａ
ｓ ｆｉｍｉ）の染色体ＤＮＡを調製した。
るセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＩＩと略記
する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＩＩ遺伝子配列を以下の
ようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化
学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法
によりセルロモナス・フィミ（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａ
ｓ ｆｉｍｉ）の染色体ＤＮＡを調製した。
【００９６】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｍ１５８２４を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
プライマー９，１０（配列番号９及び１０）を作製し、
ＰＣＲを行った。 プライマー９：配列番号９ atggaggccc taggcgcgag プライマー１０：配列番号１０ tcagcctagg gtgcagggcg
番号Ｍ１５８２４を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
プライマー９，１０（配列番号９及び１０）を作製し、
ＰＣＲを行った。 プライマー９：配列番号９ atggaggccc taggcgcgag プライマー１０：配列番号１０ tcagcctagg gtgcagggcg
【００９７】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＩＩ遺伝
子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニ
ングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−ＩＩ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７Ｃ
ＢＤ−ＩＩを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＩＩ遺伝
子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニ
ングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−ＩＩ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７Ｃ
ＢＤ−ＩＩを得た。
【００９８】〔製造例６〕 ファミリーＩＩＩに分類さ
れるセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＩＩＩと
略記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＩＩＩ遺伝子配列を以下
のようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の
化学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方
法によりバチルス・ロウタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａ
ｕｔｕｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
れるセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＩＩＩと
略記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＩＩＩ遺伝子配列を以下
のようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の
化学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方
法によりバチルス・ロウタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａ
ｕｔｕｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
【００９９】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｍ７６５８８を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー１１，１２（配列番号１１及び１２）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー１１：配列番号１１ ttaccaccta ggtctgaaag プライマー１２：配列番号１２ catctcctag ggtcgattcc
番号Ｍ７６５８８を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー１１，１２（配列番号１１及び１２）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー１１：配列番号１１ ttaccaccta ggtctgaaag プライマー１２：配列番号１２ catctcctag ggtcgattcc
【０１００】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＩＩＩ遺
伝子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクロー
ニングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選
択し、プラスミドｐＴ７ＣＢＤ−ＩＩＩを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＩＩＩ遺
伝子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクロー
ニングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選
択し、プラスミドｐＴ７ＣＢＤ−ＩＩＩを得た。
【０１０１】次に、ｐＵＣ１１８をＢａｍＨＩ及びＳｐ
ｈＩで切断したものに、ｐＴ７ＣＢＤ−ＩＩＩのＢａｍ
ＨＩ及びＳｐｈＩ断片を連結し、プラスミドｐＵＣＣＢ
Ｄ−ＩＩＩを作製した。ＣＢＤ−ＩＩＩ遺伝子配列内部
に存在するＰｓｔＩ部位をアミノ酸配列を変えずに消失
させるために、ＬＡ ＰＣＲ ｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｍｕ
ｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ（宝酒造社製）用いて、ｐ
ＵＣＣＢＤ−ＩＩＩを鋳型として下記ＰｓｔＩ消失プラ
イマー１３（配列番号１３）を用い、ＣＢＤ−ＩＩＩ遺
伝子内部のＰｓｔＩ部位を消失させたプラスミドｐＵＣ
ＣＢＤ−ＩＩＩ−Ｅを作製した。 プライマー１３：配列番号１３ ttcatcgccg cagagctgtc これにより、ＣＢＤ−ＩＩＩ遺伝子配列を含むプラスミ
ドｐＵＣＣＢＤ−ＩＩＩ−Ｅを得た。
ｈＩで切断したものに、ｐＴ７ＣＢＤ−ＩＩＩのＢａｍ
ＨＩ及びＳｐｈＩ断片を連結し、プラスミドｐＵＣＣＢ
Ｄ−ＩＩＩを作製した。ＣＢＤ−ＩＩＩ遺伝子配列内部
に存在するＰｓｔＩ部位をアミノ酸配列を変えずに消失
させるために、ＬＡ ＰＣＲ ｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｍｕ
ｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ（宝酒造社製）用いて、ｐ
ＵＣＣＢＤ−ＩＩＩを鋳型として下記ＰｓｔＩ消失プラ
イマー１３（配列番号１３）を用い、ＣＢＤ−ＩＩＩ遺
伝子内部のＰｓｔＩ部位を消失させたプラスミドｐＵＣ
ＣＢＤ−ＩＩＩ−Ｅを作製した。 プライマー１３：配列番号１３ ttcatcgccg cagagctgtc これにより、ＣＢＤ−ＩＩＩ遺伝子配列を含むプラスミ
ドｐＵＣＣＢＤ−ＩＩＩ−Ｅを得た。
【０１０２】〔製造例７〕 ファミリーＩＶに分類され
るセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＩＶと略記
する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＩＶ遺伝子配列を以下の
ようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化
学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法
によりクロストリディウム・セルロリティカム（Ｃｌｏ
ｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕｌｏｌｙｔｉｃｕｍ）の
染色体ＤＮＡを調製した。
るセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＩＶと略記
する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＩＶ遺伝子配列を以下の
ようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化
学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法
によりクロストリディウム・セルロリティカム（Ｃｌｏ
ｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕｌｏｌｙｔｉｃｕｍ）の
染色体ＤＮＡを調製した。
【０１０３】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｍ８７０１８を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー１４，１５（配列番号１４及び１５）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー１４：配列番号１４ catatgccct aggaacatat aac プライマー１５：配列番号１５ tgcagatcct aggaagctgc
番号Ｍ８７０１８を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー１４，１５（配列番号１４及び１５）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー１４：配列番号１４ catatgccct aggaacatat aac プライマー１５：配列番号１５ tgcagatcct aggaagctgc
【０１０４】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＩＶ遺伝
子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニ
ングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−ＩＶ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７Ｃ
ＢＤ−ＩＶを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＩＶ遺伝
子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニ
ングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−ＩＶ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７Ｃ
ＢＤ−ＩＶを得た。
【０１０５】〔製造例８〕 ファミリーＶに分類される
セルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−Ｖと略記す
る）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−Ｖ遺伝子配列を以下のよ
うにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化学
Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法に
よりエルヴィニア・クリサンテミ（Ｅｒｗｉｎｉａ ｃ
ｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ）の染色体ＤＮＡを調製した。
セルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−Ｖと略記す
る）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−Ｖ遺伝子配列を以下のよ
うにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化学
Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法に
よりエルヴィニア・クリサンテミ（Ｅｒｗｉｎｉａ ｃ
ｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ）の染色体ＤＮＡを調製した。
【０１０６】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｙ００５４０を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー１６，１７（配列番号１６及び１７）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー１６：配列番号１６ ttgacgaacc taggacaacc プライマー１７：配列番号１７ agggctgcaa tcctaggctg
番号Ｙ００５４０を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー１６，１７（配列番号１６及び１７）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー１６：配列番号１６ ttgacgaacc taggacaacc プライマー１７：配列番号１７ agggctgcaa tcctaggctg
【０１０７】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−Ｖ遺伝子
配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニン
グサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−Ｖ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢ
Ｄ−Ｖを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−Ｖ遺伝子
配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニン
グサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−Ｖ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢ
Ｄ−Ｖを得た。
【０１０８】〔製造例９〕 ファミリーＶＩに分類され
るセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＶＩと略記
する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＶＩ遺伝子配列を以下の
ようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化
学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法
によりクロストリディウム・サーモセラム（Ｃｌｏｓｔ
ｒｉｄｉｕｍｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ）の染色体ＤＮ
Ａを調製した。
るセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＶＩと略記
する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＶＩ遺伝子配列を以下の
ようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化
学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法
によりクロストリディウム・サーモセラム（Ｃｌｏｓｔ
ｒｉｄｉｕｍｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ）の染色体ＤＮ
Ａを調製した。
【０１０９】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｍ２２６２４を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー１８，１９（配列番号１８及び１９）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー１８：配列番号１８ ctccctaggt gactggatcg プライマー１９：配列番号１９ tcacccctag gtgaggctc
番号Ｍ２２６２４を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー１８，１９（配列番号１８及び１９）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー１８：配列番号１８ ctccctaggt gactggatcg プライマー１９：配列番号１９ tcacccctag gtgaggctc
【０１１０】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＶＩ遺伝
子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニ
ングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−ＶＩ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７Ｃ
ＢＤ−ＶＩを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＶＩ遺伝
子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニ
ングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−ＶＩ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７Ｃ
ＢＤ−ＶＩを得た。
【０１１１】〔製造例１０〕 ファミリーＶＩＩに分類
されるセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＶＩＩ
と略記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＰ−ＶＩＩ遺伝子配列を以下
のようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の
化学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方
法によりクロストリディウム・サーモセラム（Ｃｌｏｓ
ｔｒｉｄｉｕｍｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ）の染色体Ｄ
ＮＡを調製した。
されるセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＶＩＩ
と略記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＰ−ＶＩＩ遺伝子配列を以下
のようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の
化学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方
法によりクロストリディウム・サーモセラム（Ｃｌｏｓ
ｔｒｉｄｉｕｍｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ）の染色体Ｄ
ＮＡを調製した。
【０１１２】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｍ２２７５９を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー２０，２１（配列番号２０及び２１）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー２０：配列番号２０ ctcttatcct aggtgccggc プライマー２１：配列番号２１ ccctaggtca tggtaagtcc
番号Ｍ２２７５９を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー２０，２１（配列番号２０及び２１）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー２０：配列番号２０ ctcttatcct aggtgccggc プライマー２１：配列番号２１ ccctaggtca tggtaagtcc
【０１１３】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＶＩＩ遺
伝子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクロー
ニングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選
択し、ＣＢＤ−ＶＩＩ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ
７ＣＢＤ−ＶＩＩを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＶＩＩ遺
伝子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクロー
ニングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選
択し、ＣＢＤ−ＶＩＩ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ
７ＣＢＤ−ＶＩＩを得た。
【０１１４】〔製造例１１〕 ファミリーＶＩＩＩに分
類されるセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＶＩ
ＩＩと略記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＶＩＩＩ遺伝子配列を以
下のようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸
の化学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の
方法によりディクティオステリウム・ディスコイディウ
ム（Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍ ｄｉｓｃｏｉｄｅｕ
ｍ）のｃＤＮＡライブラリーを調製した。
類されるセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＶＩ
ＩＩと略記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＶＩＩＩ遺伝子配列を以
下のようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸
の化学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の
方法によりディクティオステリウム・ディスコイディウ
ム（Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍ ｄｉｓｃｏｉｄｅｕ
ｍ）のｃＤＮＡライブラリーを調製した。
【０１１５】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｍ３３８６１を参考にして、オリゴヌクレオチドプ
ローブを作製し、形質転換した大腸菌の中からＣｅｌＡ
遺伝子を持つクローンｐＣｅｌＡを検出した。このｐＣ
ｅｌＡをプラスミド鋳型として、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー２２，２３（配列番号２２及び２３）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー２２：配列番号２２ tgttcattcc taggaaatgc プライマー２３：配列番号２３ agcgtatcct aggtttgaag
番号Ｍ３３８６１を参考にして、オリゴヌクレオチドプ
ローブを作製し、形質転換した大腸菌の中からＣｅｌＡ
遺伝子を持つクローンｐＣｅｌＡを検出した。このｐＣ
ｅｌＡをプラスミド鋳型として、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー２２，２３（配列番号２２及び２３）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー２２：配列番号２２ tgttcattcc taggaaatgc プライマー２３：配列番号２３ agcgtatcct aggtttgaag
【０１１６】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、ＣＢＤ−ＶＩＩＩ遺伝子配
列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢＤ−ＶＩＩＩを得た。
ン社製）にクローニングし、ＣＢＤ−ＶＩＩＩ遺伝子配
列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢＤ−ＶＩＩＩを得た。
【０１１７】〔製造例１２〕 ファミリーＩＸに分類さ
れるセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＩＸと略
記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＩＸ遺伝子配列を以下の
ようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化
学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法
により、サーモトガ・マリティマ（Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇ
ａ ｍａｒｉｔｉｍａ）の染色体ＤＮＡを調製した。
れるセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−ＩＸと略
記する）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−ＩＸ遺伝子配列を以下の
ようにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化
学Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法
により、サーモトガ・マリティマ（Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇ
ａ ｍａｒｉｔｉｍａ）の染色体ＤＮＡを調製した。
【０１１８】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｚ４６２６４を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー２４，２５（配列番号２４及び２５）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー２４：配列番号２４ ggtcctaggt ggagagatag プライマー２５：配列番号２５ tgagcctagg gttaccgaac
番号Ｚ４６２６４を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
下記プライマー２４，２５（配列番号２４及び２５）を
作製し、ＰＣＲを行った。 プライマー２４：配列番号２４ ggtcctaggt ggagagatag プライマー２５：配列番号２５ tgagcctagg gttaccgaac
【０１１９】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＩＸ遺伝
子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニ
ングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−ＩＸ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７Ｃ
ＢＤ−ＩＸを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−ＩＸ遺伝
子配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニ
ングサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−ＩＸ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７Ｃ
ＢＤ−ＩＸを得た。
【０１２０】〔製造例１３〕 ファミリーＸに分類され
るセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−Ｘと略記す
る）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−Ｘ遺伝子配列を以下のよ
うにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化学
Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法に
より、シュードモナス・フルオレセンス（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）の染色体ＤＮＡを
調製した。
るセルロース結合ドメイン（以下、ＣＢＤ−Ｘと略記す
る）の取得 セルロース結合蛋白質ＣＢＤ−Ｘ遺伝子配列を以下のよ
うにして取得した。「生物化学実験講座２：核酸の化学
Ｉ、日本生化学会編、東京化学同人発行」記載の方法に
より、シュードモナス・フルオレセンス（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）の染色体ＤＮＡを
調製した。
【０１２１】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｘ１５４２９を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
プライマー２６，２７（配列番号２６及び２７）を作製
し、ＰＣＲを行った。 プライマー２６：配列番号２６ gcacacctag gaacttgcag プライマー２７：配列番号２７ accctaggtt ggcattccag
番号Ｘ１５４２９を参考にして、ＢｌｎＩ部位を有する
プライマー２６，２７（配列番号２６及び２７）を作製
し、ＰＣＲを行った。 プライマー２６：配列番号２６ gcacacctag gaacttgcag プライマー２７：配列番号２７ accctaggtt ggcattccag
【０１２２】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−Ｘ遺伝子
配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニン
グサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−Ｘ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢ
Ｄ−Ｘを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＣＢＤ−Ｘ遺伝子
配列の５’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニン
グサイトのＢａｍＨＩ部位が存在するクローンを選択
し、ＣＢＤ−Ｘ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＣＢ
Ｄ−Ｘを得た。
【０１２３】〔製造例１４〕 脂肪酸結合蛋白質（以
下、ＦＡＢＰと略記する）遺伝子の取得 脂肪酸結合蛋白質ＦＡＢＰ遺伝子配列を以下のようにし
て取得した。ＱｕｉｃｋＰｒｅｐ ｍＲＮＡ ｐｕｒｉ
ｆｉｃａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（アマシャム・ファルマシア
社製）により、ヒト皮膚由来ケラチノサイトのｍＲＮＡ
を調製した。
下、ＦＡＢＰと略記する）遺伝子の取得 脂肪酸結合蛋白質ＦＡＢＰ遺伝子配列を以下のようにし
て取得した。ＱｕｉｃｋＰｒｅｐ ｍＲＮＡ ｐｕｒｉ
ｆｉｃａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（アマシャム・ファルマシア
社製）により、ヒト皮膚由来ケラチノサイトのｍＲＮＡ
を調製した。
【０１２４】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号ＭＮ００１４４４を参考にして、ＢｌｎＩ部位を含
む下記プライマー２８，２９（配列番号２８及び２９）
を作製し、ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ（ＡＭＶ) Ｖｅ
ｒ．２．１（宝酒造社製）を用いてＲＴ−ＰＣＲを行っ
た。 プライマー２８：配列番号２８ ggacagccta ggctttgatg プライマー２９：配列番号２９ catagatcct aggacaggtg
番号ＭＮ００１４４４を参考にして、ＢｌｎＩ部位を含
む下記プライマー２８，２９（配列番号２８及び２９）
を作製し、ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ（ＡＭＶ) Ｖｅ
ｒ．２．１（宝酒造社製）を用いてＲＴ−ＰＣＲを行っ
た。 プライマー２８：配列番号２８ ggacagccta ggctttgatg プライマー２９：配列番号２９ catagatcct aggacaggtg
【０１２５】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＦＡＢＰのＤＮＡ
配列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニン
グサイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、
ＦＡＢＰ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＦＡＢＰを
得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＦＡＢＰのＤＮＡ
配列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニン
グサイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、
ＦＡＢＰ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＦＡＢＰを
得た。
【０１２６】〔製造例１５〕 ケラチナーゼ（以下、Ｋ
ＥＲと略記する）遺伝子の取得 「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、日本生化学会
編、東京化学同人発行」記載の方法によりバチルス・リ
ヘニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏ
ｒｍｉｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
ＥＲと略記する）遺伝子の取得 「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、日本生化学会
編、東京化学同人発行」記載の方法によりバチルス・リ
ヘニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏ
ｒｍｉｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
【０１２７】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｓ７８１６０を参考にして、ＢｌｎＩ部位を含む下
記プライマー３０，３１（配列番号３０及び３１）を作
製し、ＰＣＲを行った。 プライマー３０：配列番号３０ taagcctagg agtgaaaacc プライマー３１：配列番号３１ cggcacctag gacattgatc
番号Ｓ７８１６０を参考にして、ＢｌｎＩ部位を含む下
記プライマー３０，３１（配列番号３０及び３１）を作
製し、ＰＣＲを行った。 プライマー３０：配列番号３０ taagcctagg agtgaaaacc プライマー３１：配列番号３１ cggcacctag gacattgatc
【０１２８】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＫＥＲのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンｐＴ７ＫＥＲ
を選択した。
ン社製）にクローニングし、導入したＫＥＲのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンｐＴ７ＫＥＲ
を選択した。
【０１２９】次に、ｐＵＣ１１８をＢａｍＨＩ及びＳｐ
ｈＩで切断したものに、ｐＴ７ＫＥＲのＢａｍＨＩ及び
ＳｐｈＩ断片を連結し、プラスミドｐＵＣＫＥＲを作製
した。ＫＥＲの活性中心のアミノ酸を変異して加水分解
活性を消失させるために、ＬＡ ＰＣＲ ｉｎ ｖｉｔ
ｏｒｏ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ（宝酒造社
製）用いて、ｐＵＣＫＥＲを鋳型として下記ＨＩＳ消失
プライマー３２（配列番号３２）を用い、活性中心のヒ
スチジンをアラニンに変換したＫＥＲの遺伝子配列を持
つプラスミドｐＵＣＫＥＲＡを作製した。 プライマー３２：配列番号３２ accattgccg ttccgttcaa tg これにより、不活性ＫＥＲ遺伝子配列を含むプラスミド
ｐＵＣＫＥＲＡを得た。
ｈＩで切断したものに、ｐＴ７ＫＥＲのＢａｍＨＩ及び
ＳｐｈＩ断片を連結し、プラスミドｐＵＣＫＥＲを作製
した。ＫＥＲの活性中心のアミノ酸を変異して加水分解
活性を消失させるために、ＬＡ ＰＣＲ ｉｎ ｖｉｔ
ｏｒｏ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ（宝酒造社
製）用いて、ｐＵＣＫＥＲを鋳型として下記ＨＩＳ消失
プライマー３２（配列番号３２）を用い、活性中心のヒ
スチジンをアラニンに変換したＫＥＲの遺伝子配列を持
つプラスミドｐＵＣＫＥＲＡを作製した。 プライマー３２：配列番号３２ accattgccg ttccgttcaa tg これにより、不活性ＫＥＲ遺伝子配列を含むプラスミド
ｐＵＣＫＥＲＡを得た。
【０１３０】〔製造例１６〕 プロテアーゼ遺伝子の取
得 アルカリプロテアーゼＹａ酵素（以下、ＡＬＰと略記す
る）（特開平４−１９７１８２号公報）を含む遺伝子配
列を以下の方法により調製した。
得 アルカリプロテアーゼＹａ酵素（以下、ＡＬＰと略記す
る）（特開平４−１９７１８２号公報）を含む遺伝子配
列を以下の方法により調製した。
【０１３１】まず、特開平４−１９７１８２号公報記載
のプラスミドｐＴＢＥ３ＥＳを鋳型として、ＥｃｏＲＩ
部位を含む下記プライマー３３（配列番号３３）及びＢ
ｌｎＩ部位を含む下記プライマー３４（配列番号３４）
を用いてＰＣＲを行った。 プライマー３３：配列番号３３ gatgaggaat tcaggagaaa tgaag プライマー３４：配列番号３４ atgtacgata cctagggaga aacgc
のプラスミドｐＴＢＥ３ＥＳを鋳型として、ＥｃｏＲＩ
部位を含む下記プライマー３３（配列番号３３）及びＢ
ｌｎＩ部位を含む下記プライマー３４（配列番号３４）
を用いてＰＣＲを行った。 プライマー３３：配列番号３３ gatgaggaat tcaggagaaa tgaag プライマー３４：配列番号３４ atgtacgata cctagggaga aacgc
【０１３２】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＡＬＰのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ａ
ＬＰ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＡＬＰを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＡＬＰのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ａ
ＬＰ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＡＬＰを得た。
【０１３３】〔製造例１７〕 アミラーゼ（以下、ＡＭ
Ｙと略記する）遺伝子の取得 「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、日本生化学会
編、東京化学同人発行」記載の方法によりバチルス・リ
ヘニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏ
ｒｍｉｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
Ｙと略記する）遺伝子の取得 「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、日本生化学会
編、東京化学同人発行」記載の方法によりバチルス・リ
ヘニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏ
ｒｍｉｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
【０１３４】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｘ６７１３３を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
る下記プライマー３５（配列番号３５）及びＢｌｎＩ部
位を含む下記プライマー３６（配列番号３６）を作製
し、ＰＣＲを行った。 プライマー３５：配列番号３５ ggaattcaaa aggaggaaac atg プライマー３６：配列番号３６ tcgcctaggt gaatgtcgac c
番号Ｘ６７１３３を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
る下記プライマー３５（配列番号３５）及びＢｌｎＩ部
位を含む下記プライマー３６（配列番号３６）を作製
し、ＰＣＲを行った。 プライマー３５：配列番号３５ ggaattcaaa aggaggaaac atg プライマー３６：配列番号３６ tcgcctaggt gaatgtcgac c
【０１３５】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＡＭＹのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ａ
ＭＹ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＡＭＹを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＡＭＹのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ａ
ＭＹ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＡＭＹを得た。
【０１３６】〔製造例１８〕 リパーゼ（以下、ＬＩＰ
と略記する）の遺伝子の取得 「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、日本生化学会
編、東京化学同人発行」記載の方法によりバチルス・サ
ーモカテヌロウタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｅｒｍｏ
ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
と略記する）の遺伝子の取得 「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、日本生化学会
編、東京化学同人発行」記載の方法によりバチルス・サ
ーモカテヌロウタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｅｒｍｏ
ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
【０１３７】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｘ９５３０９を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
る下記プライマー３７（配列番号３７）及びＢｌｎＩ部
位を含む下記プライマー３８（配列番号３８）を作製
し、ＰＣＲを行った。 プライマー３７：配列番号３７ aagaattcgt tatgtgaggg プライマー３８：配列番号３８ gcaaataaaa gcctaggata tc
番号Ｘ９５３０９を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
る下記プライマー３７（配列番号３７）及びＢｌｎＩ部
位を含む下記プライマー３８（配列番号３８）を作製
し、ＰＣＲを行った。 プライマー３７：配列番号３７ aagaattcgt tatgtgaggg プライマー３８：配列番号３８ gcaaataaaa gcctaggata tc
【０１３８】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＬＩＰのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｌ
ＩＰ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＬＩＰを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＬＩＰのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｌ
ＩＰ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＬＩＰを得た。
【０１３９】〔製造例１９〕 ペクチナーゼ（以下、Ｐ
ＥＣと略記する）遺伝子の取得 「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、日本生化学会
編、東京化学同人発行」記載の方法によりシュードモナ
ス・マルギナリス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍａｒｇ
ｉｎａｌｉｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
ＥＣと略記する）遺伝子の取得 「生物化学実験講座２：核酸の化学Ｉ、日本生化学会
編、東京化学同人発行」記載の方法によりシュードモナ
ス・マルギナリス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍａｒｇ
ｉｎａｌｉｓ）の染色体ＤＮＡを調製した。
【０１４０】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｄ３２１２２を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
る下記プライマー３９（配列番号３９）及びＢｌｎＩ部
位を含む下記プライマー４０（配列番号４０）を用いて
ＰＣＲを行った。 プライマー３９：配列番号３９ aactgaattc aatcaaggat c プライマー４０：配列番号４０ tcctttccct aggacgtcc
番号Ｄ３２１２２を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
る下記プライマー３９（配列番号３９）及びＢｌｎＩ部
位を含む下記プライマー４０（配列番号４０）を用いて
ＰＣＲを行った。 プライマー３９：配列番号３９ aactgaattc aatcaaggat c プライマー４０：配列番号４０ tcctttccct aggacgtcc
【０１４１】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＰＥＣのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｐ
ＥＣ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＰＥＣを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＰＥＣのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｐ
ＥＣ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＰＥＣを得た。
【０１４２】〔製造例２０〕 ラッカーゼ（以下、ＬＡ
Ｃと略記する）遺伝子の取得 ＱｕｉｃｋＰｒｅｐ ｍＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉ
ｏｎ Ｋｉｔ（アマシャム・ファルマシア社製）によ
り、オイスターマッシュルーム（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ
ｏｓｔｒｅａｔｕｓ）のｍＲＮＡを調製した。
Ｃと略記する）遺伝子の取得 ＱｕｉｃｋＰｒｅｐ ｍＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉ
ｏｎ Ｋｉｔ（アマシャム・ファルマシア社製）によ
り、オイスターマッシュルーム（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ
ｏｓｔｒｅａｔｕｓ）のｍＲＮＡを調製した。
【０１４３】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｚ３４８２７を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
る下記プライマー４１（配列番号４１）及びＢｌｎＩ部
位を含む下記プライマー４２（配列番号４２）を作製
し、ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ(ＡＭＶ) Ｖｅｒ．２．１
（宝酒造社製）を用いてＲＴ−ＰＣＲを行った。 プライマー４１：配列番号４１ cagaattcgt atgtttccag g プライマー４２：配列番号４２ taacctaggc cacctttgtc
番号Ｚ３４８２７を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
る下記プライマー４１（配列番号４１）及びＢｌｎＩ部
位を含む下記プライマー４２（配列番号４２）を作製
し、ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ(ＡＭＶ) Ｖｅｒ．２．１
（宝酒造社製）を用いてＲＴ−ＰＣＲを行った。 プライマー４１：配列番号４１ cagaattcgt atgtttccag g プライマー４２：配列番号４２ taacctaggc cacctttgtc
【０１４４】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＬＡＣのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｌ
ＡＣ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＬＡＣを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＬＡＣのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｌ
ＡＣ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＬＡＣを得た。
【０１４５】〔製造例２１〕 ペルオキシダーゼ（以
下、ＰＯＤと略記する）遺伝子の取得 ＱｕｉｃｋＰｒｅｐ ｍＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉ
ｏｎ Ｋｉｔ（アマシャム・ファルマシア社製）によ
り、西洋わさび（Ａｒｍｏｒａｃｉａ ｒｕｓｔｉｃａ
ｎａ）のｍＲＮＡを調製した。
下、ＰＯＤと略記する）遺伝子の取得 ＱｕｉｃｋＰｒｅｐ ｍＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉ
ｏｎ Ｋｉｔ（アマシャム・ファルマシア社製）によ
り、西洋わさび（Ａｒｍｏｒａｃｉａ ｒｕｓｔｉｃａ
ｎａ）のｍＲＮＡを調製した。
【０１４６】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｘ５７５６４を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位とｐＫ
Ｋ２２３−３のリボソーム結合部位を有するように設計
した下記プライマー４３（配列番号４３）及びＢｌｎＩ
部位を含む下記プライマー４４（配列番号４４）を作製
し、ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ（ＡＭＶ） Ｖｅｒ．２．
１（宝酒造社製）を用いてＲＴ−ＰＣＲを行った。 プライマー４３：配列番号４３ caaggaattc aggaaatgaa aacac プライマー４４：配列番号４４ ctccattccc taggcttccc
番号Ｘ５７５６４を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位とｐＫ
Ｋ２２３−３のリボソーム結合部位を有するように設計
した下記プライマー４３（配列番号４３）及びＢｌｎＩ
部位を含む下記プライマー４４（配列番号４４）を作製
し、ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ（ＡＭＶ） Ｖｅｒ．２．
１（宝酒造社製）を用いてＲＴ−ＰＣＲを行った。 プライマー４３：配列番号４３ caaggaattc aggaaatgaa aacac プライマー４４：配列番号４４ ctccattccc taggcttccc
【０１４７】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＰＯＤのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｐ
ＯＤ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＰＯＤを得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＰＯＤのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択し、Ｐ
ＯＤ遺伝子配列を含むプラスミドｐＴ７ＰＯＤを得た。
【０１４８】〔製造例２２〕 オキシダーゼ遺伝子の取
得 グルコースオキシダーゼ（以下、ＧＯＤと略記する）の
取得方法を以下に記す。ＱｕｉｃｋＰｒｅｐ ｍＲＮＡ
Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（アマシャム・フ
ァルマシア社製）により、アスペルギルス・ニガー（Ａ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）のｍＲＮＡを調製
した。
得 グルコースオキシダーゼ（以下、ＧＯＤと略記する）の
取得方法を以下に記す。ＱｕｉｃｋＰｒｅｐ ｍＲＮＡ
Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（アマシャム・フ
ァルマシア社製）により、アスペルギルス・ニガー（Ａ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）のｍＲＮＡを調製
した。
【０１４９】まず、ＧｅｎｅＢａｎｋデータベース登録
番号Ｊ０５２４２を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
るように設計した下記プライマー４５（配列番号４
５）、及びＢｌｎＩ部位を含む下記プライマー４６（配
列番号４６）を作製し、ＲＮＡＰＣＲ Ｋｉｔ（ＡＭ
Ｖ） Ｖｅｒ．２．１（宝酒造社製）を用いてＲＴ−Ｐ
ＣＲを行った。 プライマー４５：配列番号４５ cctcatctgg aattcatgca gactc プライマー４６：配列番号４６ aatctcctag gatagcatcc
番号Ｊ０５２４２を参考にして、ＥｃｏＲＩ部位を有す
るように設計した下記プライマー４５（配列番号４
５）、及びＢｌｎＩ部位を含む下記プライマー４６（配
列番号４６）を作製し、ＲＮＡＰＣＲ Ｋｉｔ（ＡＭ
Ｖ） Ｖｅｒ．２．１（宝酒造社製）を用いてＲＴ−Ｐ
ＣＲを行った。 プライマー４５：配列番号４５ cctcatctgg aattcatgca gactc プライマー４６：配列番号４６ aatctcctag gatagcatcc
【０１５０】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＧＯＤのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択して、
ｐＴ７ＧＯＤを得た。次に、ｐＵＣ１１８をＢａｍＨＩ
及びＳｐｈＩで切断したものに、ｐＴ７ＧＯＤのＢａｍ
ＨＩ及びＳｐｈＩ断片を連結し、プラスミドｐＵＣＧＯ
Ｄを作製した。
ン社製）にクローニングし、導入したＧＯＤのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択して、
ｐＴ７ＧＯＤを得た。次に、ｐＵＣ１１８をＢａｍＨＩ
及びＳｐｈＩで切断したものに、ｐＴ７ＧＯＤのＢａｍ
ＨＩ及びＳｐｈＩ断片を連結し、プラスミドｐＵＣＧＯ
Ｄを作製した。
【０１５１】ＧＯＤ遺伝子配列内部に存在するＥｃｏＲ
Ｉ部位のアミノ酸配列を変えずに消失させるために、Ｌ
Ａ ＰＣＲ ｉｎｖｉｔｏｒ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ
Ｋｉｔ（宝酒造社製）用いて、ｐＵＣＧＯＤを鋳型と
して下記ＥｃｏＲＩ消失プライマー４７（配列番号４
７）にて、ＧＯＤ遺伝子内部のＥｃｏＲＩ部位を消失さ
せたプラスミドｐＵＣＧＯＤＥを作製した。 プライマー４７：配列番号４７ tgccaaattc cacgccaacg
Ｉ部位のアミノ酸配列を変えずに消失させるために、Ｌ
Ａ ＰＣＲ ｉｎｖｉｔｏｒ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ
Ｋｉｔ（宝酒造社製）用いて、ｐＵＣＧＯＤを鋳型と
して下記ＥｃｏＲＩ消失プライマー４７（配列番号４
７）にて、ＧＯＤ遺伝子内部のＥｃｏＲＩ部位を消失さ
せたプラスミドｐＵＣＧＯＤＥを作製した。 プライマー４７：配列番号４７ tgccaaattc cacgccaacg
【０１５２】更に、ＧＯＤ遺伝子配列内部に存在するＰ
ｓｔＩ部位もアミノ酸配列を変えずに消失させるため
に、ＬＡ ＰＣＲ ｉｎｖｉｔｒｏ Ｍｕｔａｇｅｎｅ
ｓｉｓＫｉｔ（宝酒造社製）用いて、ｐＵＣＧＯＤＥを
鋳型として下記ＰｓｔＩ消失プライマー４８（配列番号
４８）を用いて、ＧＯＤ遺伝子内部のＰｓｔＩ部位を消
失させたプラスミドｐＵＣＧＯＤＥＰを作製した。 プライマー４８：配列番号４８ ctggtcctga aggttcaagc これにより、ＧＯＤ遺伝子配列を含むプラスミドｐＵＣ
ＧＯＤＥＰを得た。
ｓｔＩ部位もアミノ酸配列を変えずに消失させるため
に、ＬＡ ＰＣＲ ｉｎｖｉｔｒｏ Ｍｕｔａｇｅｎｅ
ｓｉｓＫｉｔ（宝酒造社製）用いて、ｐＵＣＧＯＤＥを
鋳型として下記ＰｓｔＩ消失プライマー４８（配列番号
４８）を用いて、ＧＯＤ遺伝子内部のＰｓｔＩ部位を消
失させたプラスミドｐＵＣＧＯＤＥＰを作製した。 プライマー４８：配列番号４８ ctggtcctga aggttcaagc これにより、ＧＯＤ遺伝子配列を含むプラスミドｐＵＣ
ＧＯＤＥＰを得た。
【０１５３】
【表１】
【０１５４】
【表２】
【０１５５】<キメラ酵素の調製方法>表１に示した製造
例１６〜２２に記載の方法又はこれらに準拠した方法で
取得した各種の酵素をコードするＤＮＡを含むプラスミ
ド群（Ａ１〜Ａ１３）のＢｌｎＩ部位に、表２に示した
製造例１〜１５に記載の方法又はこれらに準拠した方法
で取得した汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有す
るポリペプチドをコードするＤＮＡを含むプラスミド群
（Ｂ１〜Ｂ２５）のＢｌｎＩ消化断片（汚れの成分又は
繊維成分に対する親和性を有するポリペプチドをコード
するＤＮＡ配列を含む断片）を組み込み、キメラ酵素Ｄ
ＮＡを調製した。
例１６〜２２に記載の方法又はこれらに準拠した方法で
取得した各種の酵素をコードするＤＮＡを含むプラスミ
ド群（Ａ１〜Ａ１３）のＢｌｎＩ部位に、表２に示した
製造例１〜１５に記載の方法又はこれらに準拠した方法
で取得した汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を有す
るポリペプチドをコードするＤＮＡを含むプラスミド群
（Ｂ１〜Ｂ２５）のＢｌｎＩ消化断片（汚れの成分又は
繊維成分に対する親和性を有するポリペプチドをコード
するＤＮＡ配列を含む断片）を組み込み、キメラ酵素Ｄ
ＮＡを調製した。
【０１５６】具体的には、Ａ群のプラスミドをＢｌｎＩ
にて消化した後、アルカリフォスファターゼ処理して、
Ｂ群のプラスミドのＢｌｎＩ断片（汚れの成分又は繊維
成分に対する親和性を有するポリペプチドをコードする
ＤＮＡ配列を含む断片）を連結した。その際、Ａ群に含
まれる酵素のＤＮＡ配列により翻訳される蛋白質配列の
Ｃ末端側にＢ群に含まれるポリペプチド遺伝子配列によ
り翻訳される蛋白質配列のＮ末端側が連結される向きで
ＤＮＡ配列を連結した。更に必要に応じて、１〜１００
アミノ酸配列のリンカーをコードする遺伝子配列をＡ群
の遺伝子配列とＢ群の遺伝子配列の連結部分に挿入する
ことができる。
にて消化した後、アルカリフォスファターゼ処理して、
Ｂ群のプラスミドのＢｌｎＩ断片（汚れの成分又は繊維
成分に対する親和性を有するポリペプチドをコードする
ＤＮＡ配列を含む断片）を連結した。その際、Ａ群に含
まれる酵素のＤＮＡ配列により翻訳される蛋白質配列の
Ｃ末端側にＢ群に含まれるポリペプチド遺伝子配列によ
り翻訳される蛋白質配列のＮ末端側が連結される向きで
ＤＮＡ配列を連結した。更に必要に応じて、１〜１００
アミノ酸配列のリンカーをコードする遺伝子配列をＡ群
の遺伝子配列とＢ群の遺伝子配列の連結部分に挿入する
ことができる。
【０１５７】表３，４に示した各種のＡ群のＤＮＡ配列
と各種のＢ群のＤＮＡ配列の組み合わせについて、前記
の方法と同様な操作を行い、各種のキメラ酵素のＤＮＡ
配列を構築した。また、Ａ群とＢ群とを組み合わせたキ
メラ酵素のＤＮＡ配列を含むプラスミドのＥｃｏＲＩ及
びＰｓｔＩ消化断片を、ｐＫＫ３２２（アマシャム・フ
ァルマシア社製）のＥｃｏＲＩ及びＰｓｔＩ部位に挿入
したプラスミドを作製し、このプラスミドによる形質転
換体を一夜培養した後、１ｍＭのＩＰＴＧを添加し、更
に４時間培養することにより、表３，４に示したキメラ
酵素を得た。
と各種のＢ群のＤＮＡ配列の組み合わせについて、前記
の方法と同様な操作を行い、各種のキメラ酵素のＤＮＡ
配列を構築した。また、Ａ群とＢ群とを組み合わせたキ
メラ酵素のＤＮＡ配列を含むプラスミドのＥｃｏＲＩ及
びＰｓｔＩ消化断片を、ｐＫＫ３２２（アマシャム・フ
ァルマシア社製）のＥｃｏＲＩ及びＰｓｔＩ部位に挿入
したプラスミドを作製し、このプラスミドによる形質転
換体を一夜培養した後、１ｍＭのＩＰＴＧを添加し、更
に４時間培養することにより、表３，４に示したキメラ
酵素を得た。
【０１５８】〔調製例１〕表３のキメラ酵素Ｈ１の調製
例を代表例として記載する。製造例１６に記載のｐＴ７
ＡＬＰをＢｌｎＩで切断した後、アルカリフォスファタ
ーゼ処理したものに対して、製造例１記載のｐＴ７ＭＢ
ＤのＢｌｎＩ断片を連結して、大腸菌を形質転換し、Ａ
ＬＰ遺伝子配列に対してＭＢＤ遺伝子配列が順方向に連
結されたクローンを選抜し、ｐＴ７ＡＬＰ−ＭＢＤを得
た。
例を代表例として記載する。製造例１６に記載のｐＴ７
ＡＬＰをＢｌｎＩで切断した後、アルカリフォスファタ
ーゼ処理したものに対して、製造例１記載のｐＴ７ＭＢ
ＤのＢｌｎＩ断片を連結して、大腸菌を形質転換し、Ａ
ＬＰ遺伝子配列に対してＭＢＤ遺伝子配列が順方向に連
結されたクローンを選抜し、ｐＴ７ＡＬＰ−ＭＢＤを得
た。
【０１５９】また、このクローンに由来するキメラ酵素
を大腸菌で発現するために、ｐＴ７ＡＬＰ−ＭＢＤをＥ
ｃｏＲＩ及びＰｓｔＩにて消化し、その断片をＥｃｏＲ
Ｉ及びＰｓｔＩで切断したｐＫＫ３２２（アマシャム・
ファルマシア社製）に連結した。このキメラ酵素の遺伝
子配列を含むプラスミドｐＫＫ−ＡＬＰ−ＭＢＤで大腸
菌ＪＭ１０５を形質転換して、その形質転換体を一夜培
養した後に、１ｍＭのＩＰＴＧを添加して更に４時間培
養することにより、ＡＬＰとＭＢＤから成るキメラ酵素
Ｈ１を得た。
を大腸菌で発現するために、ｐＴ７ＡＬＰ−ＭＢＤをＥ
ｃｏＲＩ及びＰｓｔＩにて消化し、その断片をＥｃｏＲ
Ｉ及びＰｓｔＩで切断したｐＫＫ３２２（アマシャム・
ファルマシア社製）に連結した。このキメラ酵素の遺伝
子配列を含むプラスミドｐＫＫ−ＡＬＰ−ＭＢＤで大腸
菌ＪＭ１０５を形質転換して、その形質転換体を一夜培
養した後に、１ｍＭのＩＰＴＧを添加して更に４時間培
養することにより、ＡＬＰとＭＢＤから成るキメラ酵素
Ｈ１を得た。
【０１６０】〔調製例２〕 ３種類のポリペプチドを含
むキメラ酵素 表５のキメラ酵素３Ｈ１の調製例を代表例として記載す
る。キメラ酵素の調製例１に記載のｐＴ７ＡＬＰ−ＭＢ
ＤのＥｃｏＲＩ及びＰｓｔＩ部位の断片をｐＵＣ１１８
のＥｃｏＲＩ及びＰｓｔＩ部位を切断したものに連結
し、ｐＵＣＡＬＰ−ＭＢＤを作製した。
むキメラ酵素 表５のキメラ酵素３Ｈ１の調製例を代表例として記載す
る。キメラ酵素の調製例１に記載のｐＴ７ＡＬＰ−ＭＢ
ＤのＥｃｏＲＩ及びＰｓｔＩ部位の断片をｐＵＣ１１８
のＥｃｏＲＩ及びＰｓｔＩ部位を切断したものに連結
し、ｐＵＣＡＬＰ−ＭＢＤを作製した。
【０１６１】ＡＬＰとＭＢＤの連結部分のＢｌｎＩ部位
を消失させるために、ＬＡ ＰＣＲｉｎ ｖｉｔｏｒｏ
Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ（宝酒造社製）用い
て、ｐＵＣＡＬＰ−ＭＢＤを鋳型として下記ＢｌｎＩ消
失プライマー４９（配列番号４９）を用いて、ＡＬＰと
ＭＢＤの連結部分のＢｌｎＩ部位を消失させたプラスミ
ドｐＵＣＡＬＰ−ＭＢＤＢを作製した。 プライマー４９：配列番号４９ ttcggtccta gtgagaaacg
を消失させるために、ＬＡ ＰＣＲｉｎ ｖｉｔｏｒｏ
Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ（宝酒造社製）用い
て、ｐＵＣＡＬＰ−ＭＢＤを鋳型として下記ＢｌｎＩ消
失プライマー４９（配列番号４９）を用いて、ＡＬＰと
ＭＢＤの連結部分のＢｌｎＩ部位を消失させたプラスミ
ドｐＵＣＡＬＰ−ＭＢＤＢを作製した。 プライマー４９：配列番号４９ ttcggtccta gtgagaaacg
【０１６２】一方、ＬＩＰの成熟体のＮ端側の遺伝子配
列にＢｌｎＩ部位を作製するために、製造例１８に記載
のｐＴ７ＬＩＰを鋳型として下記ＢｌｎＩ部位作製プラ
イマー５０（配列番号５０）とＲ−２０ｍｅｒプライマ
ー（ノバジェン社製）を用いて、ＰＣＲを行った。 プライマー５０：配列番号５０ tccctaggcg ccaatgatgc
列にＢｌｎＩ部位を作製するために、製造例１８に記載
のｐＴ７ＬＩＰを鋳型として下記ＢｌｎＩ部位作製プラ
イマー５０（配列番号５０）とＲ−２０ｍｅｒプライマ
ー（ノバジェン社製）を用いて、ＰＣＲを行った。 プライマー５０：配列番号５０ tccctaggcg ccaatgatgc
【０１６３】増幅した断片をｐＴ７Ｂｌｕｅ（ノバジェ
ン社製）にクローニングし、導入したＬＩＰのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択してｐ
Ｔ７ＬＩＰ２を得た。
ン社製）にクローニングし、導入したＬＩＰのＤＮＡ配
列の３’末端側にｐＴ７Ｂｌｕｅのマルチクローニング
サイトのＰｓｔＩ部位が存在するクローンを選択してｐ
Ｔ７ＬＩＰ２を得た。
【０１６４】このｐＴ７ＬＩＰ２のＢｌｎＩ消化断片
を、ｐＵＣＡＬＰ−ＭＢＤをＢｌｎＩ切断し、アルカリ
フォスファターゼ処理したものに連結して、ＡＬＰ−Ｍ
ＢＤ遺伝子配列に対してＬＩＰ遺伝子配列が順方向に連
結されたクローンを選抜し、ＡＬＰ及びＭＢＤ及びＬＩ
Ｐの遺伝子が連結されたプラスミドｐＵＣＡＬＰ−ＭＢ
Ｄ−ＬＩＰを作製した。
を、ｐＵＣＡＬＰ−ＭＢＤをＢｌｎＩ切断し、アルカリ
フォスファターゼ処理したものに連結して、ＡＬＰ−Ｍ
ＢＤ遺伝子配列に対してＬＩＰ遺伝子配列が順方向に連
結されたクローンを選抜し、ＡＬＰ及びＭＢＤ及びＬＩ
Ｐの遺伝子が連結されたプラスミドｐＵＣＡＬＰ−ＭＢ
Ｄ−ＬＩＰを作製した。
【０１６５】得られたｐＵＣＡＬＰ−ＭＢＤ−ＬＩＰを
ＥｃｏＲＩ及びＰｓｔＩにて消化し、その断片をＥｃｏ
ＲＩ及びＰｓｔＩで切断したｐＫＫ３２２（アマシャム
・ファルマシア社製）に連結した。
ＥｃｏＲＩ及びＰｓｔＩにて消化し、その断片をＥｃｏ
ＲＩ及びＰｓｔＩで切断したｐＫＫ３２２（アマシャム
・ファルマシア社製）に連結した。
【０１６６】このようにして作製したＡＬＰ−ＭＢＤ−
ＬＩＰキメラ酵素の遺伝子配列を含むプラスミドｐＫＫ
−ＡＬＰ−ＭＢＤ−ＬＩＰで大腸菌ＪＭ１０５を形質転
換して、その形質転換体を一夜培養した後に、１ｍＭの
ＩＰＴＧを添加した。更に、４時間培養することによ
り、ＭＢＤにＡＬＰとＬＩＰの２つの酵素を連結したキ
メラ酵素３Ｈ１を得た。
ＬＩＰキメラ酵素の遺伝子配列を含むプラスミドｐＫＫ
−ＡＬＰ−ＭＢＤ−ＬＩＰで大腸菌ＪＭ１０５を形質転
換して、その形質転換体を一夜培養した後に、１ｍＭの
ＩＰＴＧを添加した。更に、４時間培養することによ
り、ＭＢＤにＡＬＰとＬＩＰの２つの酵素を連結したキ
メラ酵素３Ｈ１を得た。
【０１６７】
【表３】
【０１６８】
【表４】
【０１６９】
【表５】
【０１７０】〔実施例１〜７５、比較例１〜１６〕表３
〜５の各種キメラ酵素を、表６に示した組成１〜４の洗
浄剤組成物に含まれるように調製し、これら洗浄剤組成
物を用いて各種の洗浄力試験を下記方法に従って行っ
た。結果を表７，８に示す。
〜５の各種キメラ酵素を、表６に示した組成１〜４の洗
浄剤組成物に含まれるように調製し、これら洗浄剤組成
物を用いて各種の洗浄力試験を下記方法に従って行っ
た。結果を表７，８に示す。
【０１７１】<洗浄力試験方法> （１）顔垢汚れ試験 顔垢汚れ布の作製方法 顔面の垢を均一に擦り付けた綿布（顔垢布）を分割して
各試験汚染布とした。 洗浄力試験 Ｕ．Ｓ．Ｔｅｓｔｉｎｇ社（米国）のＴｅｒｇ−０−ｔ
ｏｍｅｔｅｒを使用し、これに上記汚垢布１０枚とメリ
ヤス布を入れて浴比を３０倍に合わせ、上記洗剤溶液に
て、３０℃、１２０ｒｐｍ、１０分間洗浄した。その
後、すすぎ、乾燥工程終了後、反射率を測定し洗浄力を
求めた。この場合、洗浄液は、洗浄剤濃度０．０６６％
のもの９００ｍｌを用い、すすぎは９００ｍｌの水で３
分間洗浄した。使用水は硬度３°ＤＨで、塩素濃度１ｐ
ｐｍのものを用いた。
各試験汚染布とした。 洗浄力試験 Ｕ．Ｓ．Ｔｅｓｔｉｎｇ社（米国）のＴｅｒｇ−０−ｔ
ｏｍｅｔｅｒを使用し、これに上記汚垢布１０枚とメリ
ヤス布を入れて浴比を３０倍に合わせ、上記洗剤溶液に
て、３０℃、１２０ｒｐｍ、１０分間洗浄した。その
後、すすぎ、乾燥工程終了後、反射率を測定し洗浄力を
求めた。この場合、洗浄液は、洗浄剤濃度０．０６６％
のもの９００ｍｌを用い、すすぎは９００ｍｌの水で３
分間洗浄した。使用水は硬度３°ＤＨで、塩素濃度１ｐ
ｐｍのものを用いた。
【０１７２】（２）食品汚れ試験 食品汚れ汚染布の作製方法 森永ミルクココア（森永製菓製）を牛乳に分散・溶解さ
せた液に、綿布を浸漬し乾燥した後、ブラッシングして
過剰に付着した汚れを脱落させた。この布を５ｃｍ×５
ｃｍに裁断して試験布に供した。 洗浄力試験 Ｕ．Ｓ．Ｔｅｓｔｉｎｇ社（米国）のＴｅｒｇ−０−ｔ
ｏｍｅｔｅｒを使用し、これに試験布１０枚とメリヤス
布を入れて浴比を３０倍にあわせ、１２０ｒｐｍで１０
分間洗浄した。その後、すすぎ、乾燥工程終了後、反射
率を測定し洗浄力を求めた。この場合、洗浄液は、洗浄
剤濃度０．０６６％のもの９００ｍｌを用い、すすぎは
９００ｍｌの水で３分間洗浄した。使用水は硬度３°Ｄ
Ｈで、塩素濃度１ｐｐｍのものを用いた。
せた液に、綿布を浸漬し乾燥した後、ブラッシングして
過剰に付着した汚れを脱落させた。この布を５ｃｍ×５
ｃｍに裁断して試験布に供した。 洗浄力試験 Ｕ．Ｓ．Ｔｅｓｔｉｎｇ社（米国）のＴｅｒｇ−０−ｔ
ｏｍｅｔｅｒを使用し、これに試験布１０枚とメリヤス
布を入れて浴比を３０倍にあわせ、１２０ｒｐｍで１０
分間洗浄した。その後、すすぎ、乾燥工程終了後、反射
率を測定し洗浄力を求めた。この場合、洗浄液は、洗浄
剤濃度０．０６６％のもの９００ｍｌを用い、すすぎは
９００ｍｌの水で３分間洗浄した。使用水は硬度３°Ｄ
Ｈで、塩素濃度１ｐｐｍのものを用いた。
【０１７３】（３）油汚れ試験 油汚れ汚垢布の作製方法（泥／トリオレイン汚垢布） 結晶性鉱物であるカオリナイト、バーミキュライトなど
を主成分とする粘土を２００℃で３０時間乾燥したもの
を無機汚垢として使用した。９００ｍｌの水に無機汚垢
５０gを加えてポリトロンで分散させながらトリオレイ
ン３０ｇを加えて安定な汚垢浴を作った。この汚垢浴中
に１０ｃｍ×２０ｃｍの綿布を浸漬した後、ゴム製２本
ロールで水を絞り、汚垢の付着量を均一化した。この汚
垢布を１０５℃で３０分乾燥した後、汚垢布の両面を左
右２５回づつラビングした。これを５ｃｍ×５ｃｍに裁
断して泥／トリオレイン汚垢布を作製した。 洗浄力試験 Ｕ．Ｓ．Ｔｅｓｔｉｎｇ社（米国）のＴｅｒｇ−０−ｔ
ｏｍｅｔｅｒを使用し、これに上記汚垢布１０枚とメリ
ヤス布を入れて浴比を３０倍に合わせ、３０℃で３０分
間浸漬した後、１２０ｒｐｍ、１０分間洗浄した。その
後、すすぎ、乾燥工程終了後、反射率を測定し洗浄力を
求めた。この場合、洗浄液は、洗浄剤濃度０．０６６％
のもの９００ｍｌを用い、すすぎは９００ｍｌの水で３
分間洗浄した。使用水は硬度３°ＤＨで、塩素濃度１ｐ
ｐｍのものを用いた。
を主成分とする粘土を２００℃で３０時間乾燥したもの
を無機汚垢として使用した。９００ｍｌの水に無機汚垢
５０gを加えてポリトロンで分散させながらトリオレイ
ン３０ｇを加えて安定な汚垢浴を作った。この汚垢浴中
に１０ｃｍ×２０ｃｍの綿布を浸漬した後、ゴム製２本
ロールで水を絞り、汚垢の付着量を均一化した。この汚
垢布を１０５℃で３０分乾燥した後、汚垢布の両面を左
右２５回づつラビングした。これを５ｃｍ×５ｃｍに裁
断して泥／トリオレイン汚垢布を作製した。 洗浄力試験 Ｕ．Ｓ．Ｔｅｓｔｉｎｇ社（米国）のＴｅｒｇ−０−ｔ
ｏｍｅｔｅｒを使用し、これに上記汚垢布１０枚とメリ
ヤス布を入れて浴比を３０倍に合わせ、３０℃で３０分
間浸漬した後、１２０ｒｐｍ、１０分間洗浄した。その
後、すすぎ、乾燥工程終了後、反射率を測定し洗浄力を
求めた。この場合、洗浄液は、洗浄剤濃度０．０６６％
のもの９００ｍｌを用い、すすぎは９００ｍｌの水で３
分間洗浄した。使用水は硬度３°ＤＨで、塩素濃度１ｐ
ｐｍのものを用いた。
【０１７４】（４）評価方法 下記数式１で表されるクベルカムンク式により洗浄力
（％）を求めた。なお、洗浄力の評価は、試験布１０枚
の平均値で行った。
（％）を求めた。なお、洗浄力の評価は、試験布１０枚
の平均値で行った。
【０１７５】
【数１】
【０１７６】
【表６】
【０１７７】表６中の略号の意味及び詳細は以下の通り
である。なお、ＥＯｐはエチレンオキサイドの平均付加
モル数を、また、ＰＯｐはプロピレンオキサイドの平均
付加モル数を示す。 （１）アニオニン界面活性剤 α−ＳＦ：α-スルホ脂肪酸（Ｃ14〜Ｃ16）メチルエス
テルナトリウム ＡＯＳ：Ｃ14〜Ｃ18α-オレフィンスルホン酸ナトリウ
ム ＡＥＳ：Ｃ12〜Ｃ18アルキルエーテル（ＥＯｐ＝３）硫
酸ナトリウム ＡＳ：Ｃ12〜Ｃ14硫酸ナトリウム ＬＡＳ：Ｃ10〜Ｃ14直鎖アルキルベンゼンスルホン酸ナ
トリウム ＡＥ：Ｃ12アルコールエトキシレート（ＥＯｐ＝１２） ＡＥＰ：Ｃ13アルコールのＥＯ，ＰＯ付加物（ＥＯｐ＝
１２、ＰＯｐ＝３） 石けん：Ｃ12〜Ｃ18パーム油由来脂肪酸ナトリウム コポリマー：アクリル酸とマレイン酸のモル比６０：４
０、平均分子量５０，０００の共重合体のナトリウム
塩、独国；ＢＡＳＦ社製、商品名ソカランＣＰ７ ゼオライト：４Ａ型ゼオライト（平均粒子径１．２μ
ｍ） ＰＥＧ：ポリエチレングリコール（平均分子量６００
０） 蛍光剤：４．４−ビス（スルホスチリル）ビフェニル２
ナトリウム／４．４−ビス｛（4−アニリノ−６−モノ
ホリノ−１，３，５−トリアジン−２イル）アミノ｝ス
チルペン−２，２−ジスルホン２ナトリウム＝１／１の
混合物（商品名チノパールＣＢＳ／商品名チノパールＡ
ＭＳ） 酵素：プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、セルラー
ゼ、ペクチナーゼ、プルラナーゼのそれぞれ１：１：
１：１：０．５：０．５の割合の混合物
である。なお、ＥＯｐはエチレンオキサイドの平均付加
モル数を、また、ＰＯｐはプロピレンオキサイドの平均
付加モル数を示す。 （１）アニオニン界面活性剤 α−ＳＦ：α-スルホ脂肪酸（Ｃ14〜Ｃ16）メチルエス
テルナトリウム ＡＯＳ：Ｃ14〜Ｃ18α-オレフィンスルホン酸ナトリウ
ム ＡＥＳ：Ｃ12〜Ｃ18アルキルエーテル（ＥＯｐ＝３）硫
酸ナトリウム ＡＳ：Ｃ12〜Ｃ14硫酸ナトリウム ＬＡＳ：Ｃ10〜Ｃ14直鎖アルキルベンゼンスルホン酸ナ
トリウム ＡＥ：Ｃ12アルコールエトキシレート（ＥＯｐ＝１２） ＡＥＰ：Ｃ13アルコールのＥＯ，ＰＯ付加物（ＥＯｐ＝
１２、ＰＯｐ＝３） 石けん：Ｃ12〜Ｃ18パーム油由来脂肪酸ナトリウム コポリマー：アクリル酸とマレイン酸のモル比６０：４
０、平均分子量５０，０００の共重合体のナトリウム
塩、独国；ＢＡＳＦ社製、商品名ソカランＣＰ７ ゼオライト：４Ａ型ゼオライト（平均粒子径１．２μ
ｍ） ＰＥＧ：ポリエチレングリコール（平均分子量６００
０） 蛍光剤：４．４−ビス（スルホスチリル）ビフェニル２
ナトリウム／４．４−ビス｛（4−アニリノ−６−モノ
ホリノ−１，３，５−トリアジン−２イル）アミノ｝ス
チルペン−２，２−ジスルホン２ナトリウム＝１／１の
混合物（商品名チノパールＣＢＳ／商品名チノパールＡ
ＭＳ） 酵素：プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、セルラー
ゼ、ペクチナーゼ、プルラナーゼのそれぞれ１：１：
１：１：０．５：０．５の割合の混合物
【０１７８】
【表７】
【０１７９】
【表８】
【０１８０】〔実施例７５〜１３１、比較例１７〕次
に、表９〜１４に示した組成の洗浄剤組成物を調製し、
上記と同様に食物汚れの洗浄力評価を行った。結果を表
９〜１４に示す。
に、表９〜１４に示した組成の洗浄剤組成物を調製し、
上記と同様に食物汚れの洗浄力評価を行った。結果を表
９〜１４に示す。
【０１８１】
【表９】
【０１８２】
【表１０】
【０１８３】
【表１１】
【０１８４】
【表１２】
【０１８５】
【表１３】
【０１８６】
【表１４】
【０１８７】
【配列表】 ＳＥＱＵＥＮＣＥ ＬＩＳＴＩＮＧ <１１０>Ｌｉｏｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ <１２０>Ｃｈｉｍｅｒａ ｅｎｚｙｍｅ ａｎｄ Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ ｃｏｍ ｐｏｓｉｔｉｏｎ <１３０>１２３６４ <１６０>１ <２１０>１ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１ gccctaggac cgaatctcac 20 <２１０>２ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２ accctaggac cgtgatttgg 20 <２１０>３ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３ aagatttcct aggtgtaacc 20 <２１０>４ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４ ttacctagga cttgtatgag 20 <２１０>５ <２１１>２１ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>５ atggcctagg caaaagactt g 21 <２１０>６ <２１１>１９ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>６ ccgcctagga gattgttgc 19 <２１０>７ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>７ cggcaacaac ctaggcaacc 20 <２１０>８ <２１１>２１ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>８ ttcctaggca ctgagagtac c 21 <２１０>９ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>９ atggaggccc taggcgcgag 20 <２１０>１０ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１０ tcagcctagg gtgcagggcg 20 <２１０>１１ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１１ ttaccaccta ggtctgaaag 20 <２１０>１２ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１２ catctcctag ggtcgattcc 20 <２１０>１３ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１３ ttcatcgccg cagagctgtc 20 <２１０>１４ <２１１>２３ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１４ catatgccct aggaacatat aac 23 <２１０>１５ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１５ tgcagatcct aggaagctgc 20 <２１０>１６ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１６ ttgacgaacc taggacaacc 20 <２１０>１７ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１７ agggctgcaa tcctaggctg 20 <２１０>１８ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１８ ctccctaggt gactggatcg 20 <２１０>１９ <２１１>１９ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>１９ tcacccctag gtgaggctc 19 <２１０>２０ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２０ ctcttatcct aggtgccggc 20 <２１０>２１ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２１ ccctaggtca tggtaagtcc 20 <２１０>２２ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２２ tgttcattcc taggaaatgc 20 <２１０>２３ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２３ agcgtatcct aggtttgaag 20 <２１０>２４ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２４ ggtcctaggt ggagagatag 20 <２１０>２５ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２５ tgagcctagg gttaccgaac 20 <２１０>２６ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２６ gcacacctag gaacttgcag 20 <２１０>２７ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２７ accctaggtt ggcattccag 20 <２１０>２８ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２８ ggacagccta ggctttgatg 20 <２１０>２９ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>２９ catagatcct aggacaggtg 20 <２１０>３０ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３０ taagcctagg agtgaaaacc 20 <２１０>３１ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３１ cggcacctag gacattgatc 20 <２１０>３２ <２１１>２２ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３２ accattgccg ttccgttcaa tg 22 <２１０>３３ <２１１>２５ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３３ gatgaggaat tcaggagaaa tgaag 25 <２１０>３４ <２１１>２５ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３４ atgtacgata cctagggaga aacgc 25 <２１０>３５ <２１１>２３ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３５ ggaattcaaa aggaggaaac atg 23 <２１０>３６ <２１１>２１ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３６ tcgcctaggt gaatgtcgac c 21 <２１０>３７ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３７ aagaattcgt tatgtgaggg 20 <２１０>３８ <２１１>２２ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３８ gcaaataaaa gcctaggata tc 22 <２１０>３９ <２１１>２１ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>３９ aactgaattc aatcaaggat c 21 <２１０>４０ <２１１>１９ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４０ tcctttccct aggacgtcc 19 <２１０>４１ <２１１>２１ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４１ cagaattcgt atgtttccag g 21 <２１０>４２ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４２ taacctaggc cacctttgtc 20 <２１０>４３ <２１１>２５ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４３ caaggaattc aggaaatgaa aacac 25 <２１０>４４ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４４ ctccattccc taggcttccc 20 <２１０>４５ <２１１>２５ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４５ cctcatctgg aattcatgca gactc 25 <２１０>４６ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４６ aatctcctag gatagcatcc 20 <２１０>４７ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４７ tgccaaattc cacgccaacg 20 <２１０>４８ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４８ ctggtcctga aggttcaagc 20 <２１０>４９ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>４９ ttcggtccta gtgagaaacg 20 <２１０>５０ <２１１>２０ <２１２>ＤＮＡ <２１３>Ａｒｔｉｆｉｃｃｉａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ <４００>５０ tccctaggcg ccaatgatgc 20
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｎ 9/04 Ｃ１２Ｎ 9/04 Ｄ ４Ｈ０４５ 9/08 9/08 9/20 9/20 9/26 9/26 Ｚ 9/28 9/28 9/30 9/30 9/52 9/52 9/54 9/54 9/56 9/56 // Ｃ０７Ｋ 14/195 Ｃ０７Ｋ 14/195 14/21 14/21 14/225 14/225 14/27 14/27 14/32 14/32 14/33 14/33 14/36 14/36 14/37 14/37 14/375 14/375 14/38 14/38 14/385 14/385 14/415 14/415 14/82 14/82 Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ Ｃ１２Ｐ 21/02 (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:19） Ｃ１２Ｒ 1:19） Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ Ｆターム(参考） 4B024 AA03 BA11 BA12 BA13 BA14 BA80 CA02 CA07 DA06 EA04 GA11 HA01 4B050 CC05 DD02 DD03 DD04 DD05 DD13 EE01 LL04 4B064 AG01 CA02 CA19 CC01 CC24 DA19 4B065 AA15Y AA16Y AA23Y AA25Y AA26X AA41Y AA43Y AA50Y AA62Y AA63Y AA67Y AA71Y AA93Y AB01 AC14 BA02 BC01 CA24 CA28 CA31 CA32 CA33 CA57 4H003 AB03 AB15 AB19 AB21 AB27 AB31 AC08 AC23 DA01 EA12 EA15 EA16 EA28 EB22 EB32 EB36 EC01 EC02 EC03 ED02 FA47 4H045 AA10 AA20 AA30 BA41 CA11 CA15 CA30 DA89 EA36 FA74
Claims (6)
- 【請求項１】 汚れ成分又は繊維成分に対する親和性を
有するポリペプチドと汚れ成分又は繊維成分に対する親
和性を有する酵素とを結合させてなることを特徴とする
キメラ酵素。 - 【請求項２】 上記汚れ成分又は繊維成分に対する親和
性を有するポリペプチドが、ポリサッカライドに対する
親和性を有するポリペプチド、蛋白質に対する親和性を
有するポリペプチド及び脂質に対する親和性を有するポ
リペプチドから選ばれる１種又は２種以上である請求項
１記載のキメラ酵素。 - 【請求項３】 上記ポリサッカライドに対する親和性を
有するポリペプチドが、ムタナーゼのムタン結合ドメイ
ン、アミラーゼファミリーの澱粉結合ドメイン、β−グ
ルコシダーゼのグルカン結合領域、グルコシルトランス
フェラーゼのグルカン結合領域を含むポリペプチド、グ
ルカン結合タンパク質、キチン結合蛋白質、β−１，３
−グルカン結合蛋白質、セルロース結合蛋白質、レクチ
ン類等のポリペプチド、セルラーゼ、キシラナーゼ、マ
ンナナーゼ、キチナーゼ等のポリサッカライド分解酵素
の有するセルロース結合ドメインを含むポリペプチド及
びファミリーＩＩＩ，ＩＶ，Ｖ，ＶＩＩ，ＶＩＩＩ，Ｉ
Ｘ，Ｘに分類されるセルロース結合ドメインを含むポリ
ペプチドから選ばれる１種又は２種以上である請求項２
記載のキメラ酵素。 - 【請求項４】 上記脂質に対する親和性を有するポリペ
プチドが、脂質類の合成・運搬・代謝・分解に関与する
蛋白質及び酵素の脂質結合領域、又は疎水性ペプチドを
含むものであると共に、上記蛋白質に対する親和性を有
するポリペプチドが、ケラチンの生合成・分解に関与す
る蛋白質、又は酵素のケラチン結合領域を含むものであ
る請求項２記載のキメラ酵素。 - 【請求項５】 上記汚れ成分又は繊維成分に対する親和
性を有する酵素が、蛋白質分解酵素、リパーゼ、アミラ
ーゼファミリー、ペクチン質分解酵素及び酸化還元酵素
から選ばれる１種又は２種以上である請求項１乃至４の
いずれか１項記載のキメラ酵素。 - 【請求項６】 請求項1乃至５のいずれか１項記載のキ
メラ酵素を含む洗浄剤組成物。
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| JP2000244723A JP4557108B2 (ja) | 2000-08-11 | 2000-08-11 | キメラ酵素及び洗浄剤組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
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|---|---|
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|---|---|---|---|
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Citations (4)
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| JPH09506514A (ja) * | 1993-12-17 | 1997-06-30 | ジェネンカー インターナショナル，インコーポレイティド | 新規のセルラーゼ酵素及びその発現のための系 |
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-
2000
- 2000-08-11 JP JP2000244723A patent/JP4557108B2/ja not_active Expired - Fee Related
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