JP2002012670A - マイクロスフェアの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 水混和性の有機溶媒を用いて、マイクロスフ
ェアを調製する方法を提供する。 【解決手段】 薬物、生体内分解性ポリマーおよび水と
混和する前記ポリマーの良溶媒（溶媒Ａ）を含むポリマ
ー溶液を、溶媒Ａと混和する前記ポリマーの貧溶媒（溶
媒Ｂ）と溶媒Ａと混和しない前記ポリマーの貧溶媒（溶
媒Ｃ）を含む均一混合液中に添加して乳化することによ
りポリマー溶液が分散相、均一混合液が連続相を形成す
るエマルションを調製し、分散相から溶媒Ａを除去する
ことにより、マイクロスフェアを得ることができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、水混和性有機溶媒
を用いたマイクロスフェアの製法に関する。

【０００２】

【従来の技術】ポリ乳酸、乳酸−グリコール酸共重合体
等の水難溶性の生体内分解性ポリマー中に薬物を含有さ
せたマイクロスフェア製剤を、皮下、筋肉等の生体組織
内に投与することにより、１回の投与で長期間にわたる
薬物治療が可能となる。

【０００３】かかるマイクロスフェア製剤は、例えば、
薬物をポリマーの有機溶媒溶液に溶解或いは分散し、こ
れを水相中に乳化後、水相中で有機溶媒を除去し、ポリ
マーを固化することにより調製されている（特開昭６１
−６３６１３、特開昭６３−１２２６２０、特開平４−
４６１１６など）。

【０００４】この調製法では、従来、ポリマーを溶解
し、かつ、水非混和性である有機溶媒を使用することが
重要であると考えられており、ジクロロメタン、クロロ
ホルム等のハロゲン化脂肪族炭化水素系溶媒が一般に使
用されている。

【０００５】しかし、これら溶媒は人体に対する毒性が
高く、マイクロスフェア中の残存量が厳しく規制される
ことになっている（日米ＥＵ医薬品規制整合化国際会議
（ＩＣＨ）で合意され、１９９８年３月３０日に公表さ
れた「医薬品の残留溶媒ガイドライン」）。また、ハロ
ゲン化脂肪族炭化水素系溶媒はオゾン層破壊、環境ホル
モンとして作用する危険性のため、製造装置から環境へ
の排出に対しても規制が設けられつつある（例えば、１
９９９年７月１３日公布された特定化学物質の環境への
排出量の把握及び管理の改善の促進に関する法律、並び
に２０００年３月２９日公布されたその施行令）。

【０００６】一方、日本特許第２５６４３８６号、ドラ
ッグ デベロプメント アンド インダストリアル フ
ァーマシー（Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎ
ｄＩｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ），２４
（１２），１１１３−１１２８，１９９８）には、人
体、環境への悪影響が少なく、水混和性であるアセトン
にポリマーを溶解させ、無機電解質などの溶質を高濃度
に含む水溶液をこのポリマー溶液に添加し、転相させて
Ｏ／Ｗエマルションを調製し、更に、このエマルション
に水を添加してアセトンを抽出してナノスフェアを製造
する方法が記載されている。

【０００７】しかし、この方法では、ポリマー溶液を乳
化する際の溶媒としては水のみを使用しており、水に溶
解する溶質の具体例も塩析を生じさせるための無機塩基
に限られている。またこの方法は、脂溶性薬物にしか適
用できないとも記載されている。

【０００８】なお、日本特許第２６０８２４２号には、
Ｏ／Ｗエマルションを糖類等を含む水溶液に分散させて
Ｗ／Ｏ／Ｗエマルションを調製後、水中乾燥することに
よりマイクロスフェアを製造する方法が記載されている
が、Ｏ／Ｗエマルションに用いる有機溶媒は、塩化メチ
レン等の水非混和性溶媒であり、糖類等は、内水相から
水溶性薬物が漏出するのを抑制するための浸透圧調節剤
として水に添加されている。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、水混和性の
有機溶媒を用い、水溶性薬物、脂溶性薬物の何れにも適
用可能なマイクロスフェアの製法を提供することにあ
り、特に、アセトンやテトラヒドロフランなど人体、環
境への悪影響が少ない水混和性有機溶媒を用いたマイク
ロスフェアの製法を提供することにある。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明の発明者らは、鋭
意研究の結果、次の（１）、（２）の媒体の組合せを使
用すれば、優れた特性を有するマイクロスフェアを効率
的に製造することができ、しかもこの製法が水溶性薬
物、脂溶性薬物の何れにも適用できることを見出して本
発明を完成した。 （１）生体内分解性ポリマーを溶解する水混和性の有機
溶媒（水と混和する生体内分解性ポリマーの良溶媒：溶
媒Ａ）。 （２）溶媒Ａと混和性の前記ポリマー非溶解性溶媒（溶
媒Ａと混和する前記ポリマーの貧溶媒：溶媒Ｂ）及び溶
媒Ａと非混和性の前記ポリマー非溶解性溶媒（溶媒Ａと
混和しない前記ポリマーの貧溶媒：溶媒Ｃ）を含む均一
混合液。

【００１１】すなわち本発明は、薬物、生体内分解性ポ
リマーおよび溶媒Ａを含むポリマー溶液を、溶媒Ｂと溶
媒Ｃを含む均一混合液中に添加して乳化することによ
り、ポリマー溶液が分散相、均一混合液が連続相を形成
するエマルションを調製し、分散相から溶媒Ａを除去す
ることを特徴とするマイクロスフェアの製法に関する。

【００１２】

【発明の実施の形態】本発明を実施するにあたっては、
まず、薬物、生体内分解性ポリマーおよび水と混和する
前記ポリマーの良溶媒（溶媒Ａ）を含むポリマー溶液を
調製する。

【００１３】薬物は、特に限定されず、水溶性、脂溶性
に関わらず、好適に実施可能である。

【００１４】薬物の具体例としては、例えば、抗腫瘍
剤、生理活性ペプチド、抗生物質、解熱・鎮痛・消炎
剤、鎮咳去痰剤、鎮静剤、筋弛緩剤、抗てんかん剤、抗
潰瘍剤、抗うつ剤、抗アレルギー剤、強心剤、不整脈治
療剤、血管拡張剤、降圧利尿剤、糖尿病治療剤、抗脂血
症剤、抗凝血剤、止血剤、抗結核剤、ホルモン剤、麻薬
拮抗剤、骨吸収抑制剤、骨形成促進剤、血管新生抑制
剤、抗嘔吐剤、ビタミン剤などが挙げられる。

【００１５】抗腫瘍剤としては、たとえばパクリタキセ
ル、ブレオマイシン、メトトレキセート、アクチノマイ
シンＤ、マイトマイシンＣ，硫酸ビンブラスチン、硫酸
ビンクリスチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ネ
オカルチノスタチン、シトシンアラビノシド、フルオロ
ウラシル、テトラヒドロフリル−５−フルオロウラシ
ル、クレスチン、ピシバニール、レンチナン、タモキシ
フェン、レバミゾール、ベスタチン、アジメキソン、グ
リチルリチン、シスプラチン、カルボプラチン、塩酸イ
リノテカンなどが挙げられる。

【００１６】生理活性ペプチドとしては、インスリン、
ソマトスタチン、サンドスタチン、成長ホルモン、プロ
ラクチン、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、ＡＣＴ
Ｈ誘導体、メラノサイト刺激ホルモン（ＭＳＨ）、甲状
腺ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）およびその誘導体
（例えば、タルチレリンなど）、甲状腺刺激ホルモン
（ＴＳＨ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）、黄体形成ホル
モン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）およびその誘導体（例え
ば、酢酸リュープロレリンなど）、卵胞刺激ホルモン
（ＦＳＨ）、バソプレッシン、デスモプレシン、オキシ
トシン、カルシトニン、エルカトニン、副甲状腺ホルモ
ン（ＰＴＨ）、グルカゴン、ガストリン、セクレチン、
パンクレイオザイミン、コレシストキニン、アンジオテ
ンシン、ヒト胎盤ラクトーゲン、ヒト絨毛性ゴナドトロ
ピン（ＨＣＧ）、エンケファリン、エンケファリン誘導
体、エンドルフィン、キョウトルフィン、インターフェ
ロン類（例えば、α、β、γ型等）、インターロイキン
類（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１
０、１１、１２等）、タフトシン、サイモポイエチン、
サイモシン、サイモスチムリン、胸腺液性因子（ＴＨ
Ｆ）、血中胸腺因子（ＦＴＳ）およびその誘導体、およ
びその他の胸腺因子、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、ケモカ
イン類およびその誘導体、ミニサイトカイン類およびそ
の誘導体、コロニー誘発因子（ＣＳＦ、ＧＣＳＦ、ＧＭ
ＣＳＦ、ＭＣＳＦ等）、モチリン、ダイノルフイン、ボ
ムベシン、ニューロテンシン、セルレイン、ブラジキ
ン、ウロキナーゼ、アスパラキナーゼ、カリクレイン、
サブスタンスＰ、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−Ｉ、
ＩＧＦ−ＩＩ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、細胞増殖因
子（ＥＧＦ、ＴＧＦ−α、ＴＧＦ−β、ＰＤＧＦ、塩酸
ＦＧＦ、塩基性ＦＧＦ等）、骨形成因子（ＢＭＰ）、神
経栄養因子（ＮＴ−３、ＮＴ−４、ＣＮＴＦ、ＧＤＮ
Ｆ、ＢＤＮＦ等、血液凝固因子の第ＶＩＩＩ因子、第Ｉ
Ｘ因子、塩化リゾチーム、ポリミキシンＢ、コリスチ
ン、グラミシジン、バシトラシン、エリスロポエチン
（ＥＰＯ）、トロンボポエチン（ＴＰＯ）等が挙げられ
る。

【００１７】抗生物質としては、例えばゲンタマイシ
ン、ジベカシン、カネンドマイシン、リビドマイシン、
トブラマイシン、アミカシン、フラジオマイシン、シソ
マイシン、塩酸テトラサイクリン、塩酸オキシテトラサ
イクリン、ロリテトラサイクリン、塩酸ドキシサイクリ
ン、アンピシリン、ピペラシリン、チカルシリン、アス
ポキシシリン、セファロチン、セファロリジン、セフォ
チアム、セフスロジン、セフメノキシム、セフメタゾー
ル、セファゾリン、セフォタキシム、セフォペラゾン、
セフチゾキシム、モキサラクタム、チエナマイシン、ス
ルファゼシン、アズスレオナム等が挙げられる。

【００１８】解熱・鎮痛・消炎剤としては、例えばサリ
チル酸、スルピリン、フルフェナム酸、ジクロフェナッ
ク、インドメタシン、モルヒネ、塩酸ペチジン、酒石酸
レボルファノール、オキシモルフォン等が挙げられる。

【００１９】鎮咳去痰剤としては、例えば塩酸エフェド
リン、塩酸メチルエフェドリン、塩酸ノスカピン、リン
酸コデイン、リン酸ジヒドロコデイン、塩酸アロクラマ
イド、塩酸クロフェダノール、塩酸ピコペリダミン、ク
ロペラスチン、塩酸プロトキロール、塩酸イソプロテレ
ノール、硫酸サルブタモール、硫酸テレブタリン等が挙
げられる。

【００２０】鎮静剤としては、例えばクロルプロマジ
ン、プロクロルペラジン、トリフロペラジン、硫酸アト
ロピン、臭化メチルスコポラミン等が挙げられる。

【００２１】筋弛緩剤としては、例えばメタンスルホン
酸プリジノール、塩化ツボクラリン、臭化パンクロニウ
ム等が挙げられる。

【００２２】抗てんかん剤としては、例えばフェニトイ
ン、エトサクシミド、アセタゾラミドナトリウム、クロ
ルジアゼポキシド等が挙げられる。

【００２３】抗潰瘍剤としては、例えばメトクロプロミ
ド、塩酸ヒスチジン等が挙げられる。

【００２４】抗うつ剤としては、例えばイミプラミン、
クロミプラミン、ノキシプチリン、硫酸フェネルジン等
が挙げられる。

【００２５】抗アレルギー剤としては、例えば塩酸ジフ
ェンヒドラミン、マレイン酸クロルフェニラミン、塩酸
トリペレナミン、塩酸メトジラミン、塩酸クレミゾー
ル、塩酸ジフェニルペラリン、塩酸メトキシフェナミン
等が挙げられる。

【００２６】強心剤としては、例えばトランスパイオキ
ソカンファー、テオフィロール、アミノフィリン、塩酸
エチレフリン等が挙げられる。

【００２７】不整脈治療剤としては、例えばアジミライ
ド、プロプラノロール、アルプレノロール、ブフェトロ
ール、オキシプレノロール等が挙げられる。

【００２８】血管拡張剤としては、例えば塩酸オキシフ
ェドリン、塩酸ジルチアゼム、塩酸トラゾリン、ヘキソ
ベンジン、硫酸バメタン等が挙げられる。

【００２９】降圧利尿剤としては、例えばヘキサメトニ
ウムブロミド、ペントリニウム、塩酸メカミルアミン、
塩酸エカラジン、クロニジン等が挙げられる。

【００３０】糖尿病治療剤としては、例えばグリミジン
ナトリウム、グリピザイド、塩酸フェンフォルミン、塩
酸ブフォルミン、メトフォルミン等が挙げられる。

【００３１】抗脂血症剤としては、例えばメバロチン、
プラバスタチンナトリウム、シンバスタチン、クリノフ
ィブラート、クロフィブラート、シンフィブラート、ベ
ザフィブラート等が挙げられる。

【００３２】抗凝血剤としては、例えばヘパリンナトリ
ウム等が挙げられる。

【００３３】止血剤としては、例えばトロンボプラスチ
ン、トロンビン、メナジオン亜硫酸水素ナトリウム、ア
セトメナフトン、ε−アミノカプロン酸、トラネキサム
酸、カルバゾクロムスルホン酸ナトリウム、アドレノク
ロムモノアミノグアニジンメタンスルホン酸塩等が挙げ
られる。

【００３４】抗結核剤としては、例えばイソニアジド、
エタンブトール、パラアミノサリチル酸等が挙げられ
る。

【００３５】ホルモン剤としては、例えばプレドニゾロ
ン、リン酸ナトリウムプレドニゾリゾロン、デキサメタ
ゾン塩酸ナトリウム、リン酸ヘキセストロール、メチマ
ゾール、エストロン等が挙げられる。

【００３６】麻薬拮抗剤としては、例えば酒石酸レバロ
ルファン、塩酸ナロルフィン、塩酸ナロキソン等が挙げ
られる。

【００３７】骨吸収抑制剤としては、例えばイプリフラ
ボン等が挙げられる。

【００３８】骨形成促進剤としては、例えばＢＭＰ、Ｐ
ＴＨ、ＴＧＦ−β、ＩＧＦ−Ｉなどのポリペプチド等が
挙げられる。

【００３９】血管新生抑制剤としては、例えば血管新生
抑制ステロイド、フマギリン、フマギロール誘導体、ア
ンジオスタチン、エンドスタチン等が挙げられる。

【００４０】抗嘔吐剤としては、オンダンセトロン、ト
ロピセトロンなどの５−ヒドロキシトリプタミンタイプ
３受容体拮抗薬、ニューロキニン１受容体拮抗薬等があ
げられる。ビタミン剤としては、ビタミンＡ，β−カロ
チン、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ナイアシン、ニコ
チン酸アミド、パントテン酸、パントテン酸カルシウ
ム、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、葉酸、イノシトー
ル、パラアミノ馬尿酸、ビオチン、ビタミンＣ、ビタミ
ンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ等があげられる。

【００４１】上記薬物は、遊離のものであっても、その
薬理学的に許容される塩であってもよい。例えば、薬物
がアミノ基等の塩基性基を有する化合物である場合、無
機酸（例えば、塩酸、硫酸、硝酸等）または有機酸（例
えば、炭酸、コハク酸等）との塩の形で用いることもで
きる。また、薬物がカルボキシル基等の酸性基を有する
場合、無機塩基（例えば、ナトリウム、カリウム等のア
ルカリ金属）または有機塩基化合物（例えば、トリエチ
ルアミン等の有機アミン類、アルギニン等の塩基性アミ
ノ酸類）との塩の形で用いることもできる。

【００４２】また、薬物が塩を形成しているためにマイ
クロスフェアへの取込率が低い場合には、遊離の形に変
換して用いてもよい。遊離の形に変換するには、酸付加
塩の場合には、塩基性水溶液（例えば、炭酸水素アルカ
リ金属水溶液、炭酸アルカリ金属水溶液、水酸化アルカ
リ金属、リン酸アルカリ金属、リン酸水素アルカリ金属
水溶液、弱塩基性緩衝液など）で処理した後、有機溶媒
で抽出すればよく、塩基付加塩の場合には、弱酸性水溶
液（例えば、塩化アンモニウム水溶液、弱酸性緩衝液な
ど）で処理したのち、有機溶媒で抽出すればよい。抽出
液からは、慣用の方法で溶媒を留去すれば遊離の形の薬
物を得ることができる。

【００４３】ポリマー溶液中の薬物濃度は、０．００１
〜９０重量％、好ましくは、０．０１〜５０重量％であ
る。

【００４４】ポリマー溶液中で薬物は、溶解状態であっ
ても、分散状態であってもよい。分散状態とする場合に
は、薬物は事前に微粒子化しておくことが好ましい。微
粒子化は、粉砕法、晶析法、スプレードライ法など、慣
用の微粒子化法を適宜使用すればよい。

【００４５】粉砕法で行う場合には、ジェットミル、ハ
ンマーミル、回転ボールミル、振動ボールミル、ビーズ
ミル、シェーカーミル、ロッドミル、チューブミルなど
の粉砕機により、物理的に粉砕すればよい。

【００４６】晶析法で行う場合には、薬物を一旦適当な
溶媒に溶解させた後、ｐＨ調製、温度変化、溶媒組成の
変更等を行って薬物を晶析させ、濾過、遠心分離などの
方法で回収すればよい。

【００４７】スプレードライ法で行う場合には、薬物を
適当な溶媒に溶解させ、これをスプレーノズルを用いて
スプレードライヤーの乾燥室内に噴霧し、きわめて短時
間に噴霧液滴内の溶媒を揮発させればよい。

【００４８】また、薬物としてポリペプチドを用いる場
合には、ポリペプチドおよびポリエチレングリコールの
混合水溶液を凍結乾燥し、得られた固形物に、ポリペプ
チドは溶解しえないがポリエチレングリコールは溶解し
うる有機溶媒を添加することによっても（特開平１１−
３０２１５６）、微粒子化できる。

【００４９】生体内分解性ポリマーとしては、製剤分野
で一般に使用される生体内分解性ポリマーをいずれも使
用することができるが、とりわけ、ヒドロキシ脂肪酸の
ポリエステルがとりわけ好ましい。該ヒドロキシ脂肪酸
のポリエステルの好ましい平均分子量は約２０００〜約
８０００００の範囲内であり、より好ましくは約５００
０〜約２０００００の範囲内である。

【００５０】また、前記ヒドロキシ脂肪酸のポリエステ
ルのうち、更に好ましいのは、ポリ乳酸、乳酸−グリコ
ール酸共重合体、２−ヒドロキシ酪酸−グリコール酸共
重合体である。乳酸−グリコール酸共重合体における乳
酸／グリコール酸のモル比は、好ましくは９０／１０〜
３０／７０、より好ましくは８０／２０〜４０／６０で
ある。一方、２−ヒドロキシ酪酸−グリコール酸共重合
体における２−ヒドロキシ酪酸／グリコール酸のモル比
は、好ましくは９０／１０〜３０／７０、より好ましく
は８０／２０〜４０／６０である。

【００５１】ポリマー溶液中の生体内分解性ポリマー濃
度は、ポリマーの種類、分子量などによって変動する
が、通常１〜８０重量％、好ましくは、２０〜６０重量
％である。

【００５２】水と混和する生体内分解性ポリマーの良溶
媒（溶媒Ａ）としては、生体内分解性ポリマー１ｇを完
全に溶解するのに要する量が２５ｇ未満であり、水と完
全に混和する性質のものであれば特に限定されず、例え
ば、アセトン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、
ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジオキ
サン、ジグリム、エチレングリコールジメチルエーテル
などがあげられる。中でも、毒性の点から、アセトン、
テトラヒドロフランが好ましく、アセトンが最も好まし
い。これら溶媒は、１種のみならず、２種以上を混合し
て用いてもよい。

【００５３】ポリマー溶液は、溶媒Ａに生体内分解性ポ
リマーを溶解させ、薬物を溶解もしくは分散させて調製
すればよく、薬物、生体内分解性ポリマーの添加順序
は、特に限定されない。

【００５４】また、ポリマー溶液中には、溶媒Ａと混和
する生体内分解性ポリマーの貧溶媒（溶媒Ｂ）が少量含
まれていてもよい。

【００５５】ポリマー溶液中に含まれる溶媒Ｂの量は、
生体内分解性ポリマーが析出してしまわない程度の量で
あることが好ましく、例えば、ポリマー溶液に対して
０．００１〜５０重量％、好ましくは０．０１〜２０重
量％である。

【００５６】次いで、調製したポリマー溶液を、溶媒Ａ
と混和する生体内分解性ポリマーの貧溶媒（溶媒Ｂ）と
溶媒Ａと混和しない生体内分解性ポリマーの貧溶媒（溶
媒Ｃ）を含む均一混合液中に添加して乳化することによ
り、ポリマー溶液が分散相、均一混合液が連続相を形成
するエマルションを調製する。

【００５７】溶媒Ｂとしては、生体内分解性ポリマー１
ｇを完全に溶解するのに２５ｇ以上要し、溶媒Ａと完全
に混和するようなものであれば特に制限はなく、具体例
としては、水、炭素数１〜４の１価アルコールがあげら
れ、アルコールの具体例としては、メタノール、エタノ
ール、ｎ−プロパノール、ｉ−プロパノール、ｎ−ブタ
ノール、ｉ−ブタノール、ｓｅｃ−ブタノールまたはｔ
ｅｒｔ−ブタノールなどがあげられる。これらのうち、
水、エタノールが好ましく、とりわけ水が好ましい。

【００５８】また、溶媒Ｃとしては、生体内分解性ポリ
マー１ｇを完全に溶解するのに２５ｇ以上要し、溶媒Ｃ
１００重量部に混和する溶媒Ａが２５重量部以下であ
り、溶媒Ｂと完全に混和して均一な混合液を形成するよ
うなものであれば特に制限はなく、具体例としては、グ
リセリンがあげられる。

【００５９】好ましい溶媒Ａ、Ｂ、Ｃの組合せを非限定
的に例示するとすれば、溶媒Ａとしてアセトン、溶媒Ｂ
として水、溶媒Ｃとしてグリセリンの組合せ、溶媒Ａと
してアセトン、溶媒Ｂとしてエタノール、溶媒Ｃとして
グリセリンの組合せ、溶媒Ａとしてテトラヒドロフラ
ン、溶媒Ｂとして水、溶媒Ｃとしてグリセリンの組合
せ、溶媒Ａとしてアセトン、溶媒Ｂとして水−エタノー
ル混液、溶媒Ｃとしてグリセリンの組合せ、溶媒Ａとし
てアセトン、溶媒Ｂとしてｎ−プロパノール、溶媒Ｃと
してグリセリンの組合せ、溶媒Ａとしてアセトン、溶媒
Ｂとしてｎ−ブタノール、溶媒Ｃとしてグリセリンの組
合せ、溶媒Ａとしてアセトン、溶媒Ｂとしてｉ−プロパ
ノール、溶媒Ｃとしてグリセリンの組合せ、などが考え
られる。中でも、溶媒Ａとしてアセトン、溶媒Ｂとして
水、溶媒Ｃとしてグリセリンの組合せが最も好ましい。

【００６０】均一混合液における溶媒Ｂと溶媒Ｃとの重
量比は、生体内分解性ポリマーの種類、選択する溶媒
Ａ、Ｂ、Ｃの組合せにもよるが、５：９５〜７５：２５
の範囲内であれば、好適にマイクロスフェアが得られ
る。とりわけ、凝集物の形成を防止し、薬物取込率を向
上させる上で、１０：９０〜５０：５０の範囲内が好ま
しく、２０：８０〜４０：６０の範囲内が最も好まし
い。

【００６１】また、該均一混合液には、乳化安定剤を含
んでいてもよく、乳化安定化剤としては、例えば、ポリ
ビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセル
ロース、ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアゴ
ム、キトサン、ゼラチン、血清アルブミン、界面活性剤
などがあげられ、中でも、ポリビニルアルコール、ポリ
ビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロ
ピルセルロースが好ましい。乳化安定剤の混合液中の濃
度は、０．００１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜
２重量％である。

【００６２】溶媒Ａは、溶媒Ｂと溶媒Ｃを含む均一混合
液と部分的に混和するが、混和する速度が制限されてい
るため、薬物、生体内分解性ポリマー及び溶媒Ａを含む
ポリマー溶液が分散相、均一混合液が連続相を形成する
エマルションを形成することができる。そして、エマル
ション形成と同時に、もしくはエマルション形成と平行
して、溶媒Ａが、ポリマー溶液から均一混合液へ徐々に
除去され、マイクロスフェア形成も開始される。

【００６３】ポリマー溶液中の溶媒Ａの均一混合液への
混和速度は、均一混合液における溶媒Ｂと溶媒Ｃの重量
比を変えることにより調節でき、溶媒Ｃの比率を高くす
るほど混和速度は遅くなり、低くするほど速くなる。

【００６４】また、均一混合液中に予め少量の溶媒Ａを
含有させておくことによっても、ポリマー溶液中の溶媒
Ａの均一混合液への混和速度を遅くすることが可能であ
り、均一混合液中に含有させる溶媒Ａの量としては、均
一混合液中に均一に混和する量であれば特に制限はない
が、好ましくは３０重量％以下、特に好ましくは２０重
量％以下である。

【００６５】ポリマー溶液と均一混合液との重量比は、
均一混合液における溶媒Ｂと溶媒Ｃの重量比等により変
動するが、１：１〜１：１０００の範囲内、好ましくは
１：２〜１：２００の範囲内、とりわけ好ましくは１：
３〜１：７５の範囲内である。

【００６６】さらに、乳化後、分散相からの溶媒Ａ除去
効率の面からは、ポリマー溶液中の溶媒Ａの量が、均一
混合液と混和可能な最大量以下、とりわけ、最大量の１
〜８０重量％程度であるのが好ましい。

【００６７】乳化時の温度は特に限定されないが、薬物
が熱に対して不安定な場合は、より低温で行うことが好
ましい。乳化を低温下（とりわけ０℃以下）で行う場合
には、エマルション形成より先に生体内分解性ポリマー
が析出してしまうことを避けるため、ポリマー溶液に対
する均一混合液の重量比を前記の範囲内で低くするか、
或いは均一混合液中に溶媒Ａを予め少量添加しておくこ
とが好ましい。とりわけ、均一混合液中に溶媒Ａを予め
少量添加しておくことが好ましく、溶媒Ａの添加量は前
記の範囲内とすればよい。

【００６８】ポリマー溶液の均一混合液への乳化は、プ
ロペラ式攪拌機、タービン型乳化機、高圧乳化機、超音
波分散装置、スタティックミキサーなどの既知の乳化装
置による攪拌下、ポリマー溶液を均一混合液中に添加す
ることにより容易に実施可能である。乳化に要する時間
は、用いる乳化装置、液量などによって異なるが、１〜
１０分間程度である。

【００６９】また、乳化は、膜乳化、噴霧などの方法に
よっても好適に実施することが出来る。

【００７０】膜乳化により乳化を行うには、ポリマー溶
液と均一混合液との間に多孔質膜を設け、ポリマー溶液
を加圧して多孔質膜の細孔からポリマー溶液を均一混合
液中に押出せばよく、必要に応じ、均一混合液を攪拌し
てもよい。多孔質膜の形状としては、平板状、チューブ
状、球状などに成型したもの使用することができ、例え
ばチューブ状多孔質膜を使用する場合には、（ｉ）チュ
ーブ状多孔質膜の内側空洞部分に導通したポリマー溶液
を、チューブ状多孔質膜の外側の均一混合液に押出す方
法、及び（ｉｉ）チューブ状多孔質膜の外側のポリマー
溶液を、チューブ状多孔質膜の内側空洞部分に導通した
均一混合液に押出す方法（例えば、ジャーナル オブ
マイクロエンカプスレーション（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ），１１
（２），１７１−１７８，１９９４記載の方法）のいず
れも使用することができる。

【００７１】多孔質膜としては、多孔質セラミックス、
多孔質ガラスなどを好適に使用することができ、多孔質
セラミックスとしては、アルミナ、ジルコニア、ゼオラ
イトなどがあげられ、多孔質ガラスとしては、米国特許
第２１０６７４４号、米国特許第２２１５０３９号記載
の多孔質シリカガラス、米国特許第４６５７８７５号記
載のシラス多孔質ガラスなどがあげられる。これらのう
ち、多孔質ガラスを用いることが特に好ましい。

【００７２】多孔質膜は、表面化学修飾により、表面を
親水化したり疎水化したり、種々の官能基が導入されて
いてもよく、具体的には、オクタデシルトリクロロシラ
ンおよびトリメチルシランによって疎水化された多孔質
ガラスなどがあげられる。

【００７３】多孔質膜の細孔径は、０．２〜３００μｍ
のものから選択すればよく、とりわけ、４〜５０μｍの
ものから選択することが好ましい。

【００７４】均一混合液中へのポリマー溶液の押出速度
は、ポリマー溶液中の生体内分解性ポリマーの種類およ
び濃度、均一混合液の組成、多孔質膜の細孔径などによ
っても変動するが、あえて例示するとすれば、多孔質膜
１ｍ^２におけるポリマー溶液の押出量が、１時間あたり
５〜５００ｍｌとなるようにすることが好ましい。

【００７５】また、噴霧により乳化を行う場合には、既
知の噴霧装置を用い、ポリマー溶液を、均一混合液に噴
霧すればよい。この際、必要に応じ、均一混合液を攪拌
してもよい。噴霧装置としては、例えば、空気ノズル、
圧力ノズル、超音波ノズル、ロータリーアトマイザーな
どがあげられる。

【００７６】本発明の方法では、ポリマー溶液を均一混
合液に添加して乳化するため、均一混合液をポリマー溶
液に添加して転相させる場合と比べて、マイクロスフェ
アの生成率が高いだけでなく、マイクロスフェア製造時
の薬物取込率を向上させ、また、生成するマイクロスフ
ェアからの初期バーストを抑制することができる。

【００７７】乳化後、得られたエマルションを適当な方
法で流動させ、分散相より残りの溶媒Ａを除去する。こ
れにより、分散相の溶媒Ａが連続相へ除去され、分散相
の生体内分解性ポリマーが完全に固化し、マイクロスフ
ェアが得られる。

【００７８】流動の方法は、循環または攪拌によって行
うことができる。循環は、ポンプを用いて、エマルショ
ンの下部よりエマルションの一部を吸引し、パイプを通
してこれをエマルションの上部に戻すことにより行うこ
とが出来る。また、攪拌は、攪拌翼、マグネチックスタ
ーラーなどの通常の攪拌手段により行うことができる。

【００７９】また、乳化後、一旦形成されたエマルショ
ンの連続相を増量すれば、分散相からの溶媒Ａの除去を
促進でき、また、増量により、乳化中に連続相へ除去さ
れた溶媒Ａを希釈できるため、連続相中の溶媒Ａが形成
段階のマイクロスフェアに悪影響を及ぼすことも防止で
きる。

【００８０】連続相の増量は、エマルションを別途用意
した増量用溶媒と混合することによって行うことができ
る。

【００８１】増量用溶媒としては、溶媒Ｂ又は溶媒Ｂと
溶媒Ｃの混合液を用いることができ、増量用溶媒に用い
られる溶媒Ｂ、溶媒Ｃの種類は、均一混合液に使用可能
なものであれば特に限定されず、必ずしも、均一混合液
に用いられた溶媒Ｂ、溶媒Ｃと同一種である必要はな
い。増量用溶媒に用いる溶媒Ｂ、Ｃを非限定的に例示す
るとすれば、溶媒Ｂとして、エタノールなどの炭素数１
〜４の１価アルコール、水などがあげられ、溶媒Ｃとし
ては、グリセリンなどがあげられる。薬物が熱に対して
不安定な場合には、増量用溶媒に用いる溶媒Ｂとして、
エタノールなどの炭素数１〜４の１価アルコールを用い
れば、低温下（例えば０℃以下）でも効率的に溶媒Ａの
除去が可能である。

【００８２】増量の方法としては、別途用意した増量用
溶媒をエマルションに添加して行ってもよく、逆に、別
途用意した増量用溶媒にエマルションを添加して行って
もよい。

【００８３】また、増量は１回で行っても、複数回に分
けて行ってもよく、更に、連続的に徐々に増量すること
もできる。

【００８４】増量による分散相からの溶媒Ａの除去促進
効果を増大させるためには、増量後のエマルションの連
続相における溶媒Ｂの割合が、増量前のエマルションに
おける溶媒Ｂの割合よりも大きくなるように増量するの
が好ましく、増量前の割合よりも０〜７０％大きくする
のがとりわけ好ましい。また、増量後の連続相の体積が
増量前の２〜１００倍となるようにするのが好ましい。

【００８５】乳化後、溶媒Ａの除去に要する時間は、１
２時間以内であり、エマルションの連続相を増量すれ
ば、時間を短縮することも可能である。

【００８６】また、エマルションの分散相から残った溶
媒Ａを除去する際、加温、減圧等を行えば、溶媒Ａの除
去を更に促進することができる。加温はエマルションの
温度を３０〜７０℃とすればよく、温度は一定である必
要はなく、例えば、徐々に昇温することも、段階的に昇
温することもできる。また、減圧は適当な減圧装置を用
いて、５〜８０ｋＰａとなるまでエマルションを減圧す
ればよい。

【００８７】本発明のマイクロスフェア製法は、エマル
ションの分散相に含まれる溶媒Ａが連続相に除去される
ため、（ａ）分散相から連続相に除去された溶媒Ａがマ
イクロスフェア製造装置外へ蒸散可能な開放系、（ｂ）
マイクロスフェア製造装置外への蒸散できない密閉系の
何れでも行うこともできるが、溶媒Ａの環境への悪影響
を防止し、溶媒Ａを回収・再利用しやすい点で、密閉系
で溶媒Ａの除去を行うのが好ましい。

【００８８】密閉系でマイクロスフェアを製造する場合
には、連続相から留去される溶媒Ａをトラップして回収
するのが好ましく、溶媒Ａの回収は、溶媒Ａを含む気体
を冷却して液化するか、又は多孔性粒子に導通して溶媒
Ａを吸着させるなどの方法によって容易に行うことがで
きる。

【００８９】得られたマイクロスフェアは遠心分離また
はフィルターによる濾取などの方法により分取し、必要
に応じ水などで洗浄を行い、風乾、真空乾燥、凍結乾燥
などの乾燥手段により水分を除去し、回収することがで
きる。

【００９０】また、マイクロスフェア中に残存する溶媒
Ａの量を極力低減させたい場合（例えばマイクロスフェ
ア重量に対して５０００ｐｐｍ以下まで）には、分取し
たマイクロスフェアを水中に再分散させて３分〜１２時
間、好ましくは５分〜５時間攪拌し、その後、再度マイ
クロスフェアを分取し、必要に応じ洗浄を行い、乾燥さ
せればよい。

【００９１】剤形によっては、洗浄後のマイクロスフェ
アを適当な溶液に懸濁し、凍結乾燥により最終製剤の形
に調製する。

【００９２】以上の方法で得られるマイクロスフェアの
粒子径は、平均粒子径として１〜１０００μｍである。
とりわけ、粒子径２０〜１５０μｍのマイクロスフェア
が７０％以上を占めるマイクロスフェアが容易に得られ
る。

【００９３】このようにして得られたマイクロスフェア
は、薬物の種類に関わらず、取り込み率が高く、また、
実施例にも示すように溶出パターンは零次放出型とする
ことができる。

【００９４】本発明の方法により得られたマイクロスフ
ェアは、そのまま筋肉内、皮下、血管、臓器、あるいは
関節腔、腹腔、腫瘍などの病巣に容易に注射剤、埋め込
み剤として投与することができる。また、種々の製剤を
製造する際の原料としても用いることができ、そのよう
な製剤としては、例えば、注射剤、経口投与剤、経皮投
与剤、坐剤、経鼻投与剤、経肺投与剤、口腔投与剤、眼
内投与剤などがあげられる。

【００９５】以下に実施例、比較例により、更に本発明
を詳細に説明する。

【００９６】

【実施例】実施例１ 乳酸−グリコール酸コポリマー（乳酸とグリコール酸の
モル比が５０：５０、分子量２万、和光純薬製）（以
下、ＰＬＧＡ５０２０と略す）４８７．５ｍｇ、予めジ
ェットミル（セイシン企業製）で粉砕したビタミンＢ１
２ １２．５ｍｇにアセトン８００ｍｇを加え、ポリマ
ー溶液（ビタミンＢ１２は分散状態）を調製した。室温
において攪拌下（プロペラ式攪拌機、スリーワンモータ
ーＢＬ３０００、ヘイドン社製、回転数：１５００ｒｐ
ｍ）、ポリビニルアルコール（１．０重量％）を含有さ
せたグリセリン−水混合液（グリセリンと水の重量比が
７０：３０）４ｇにパスツールピペットを用いてポリマ
ー溶液を添加して３分間乳化し、ポリマー溶液を分散
相、グリセリン−水混合液を連続相とするエマルション
を得た。このエマルションをグリセリン−水混合液（グ
リセリンと水の重量比が７０：３０）１４ｇ中に添加し
て密栓を施した後、マグネチックスターラーにて３時間
撹拌を行い、アセトンをエマルションの分散相から除去
し、マイクロスフェアの分散液を得た。この分散液を１
５０μｍのフィルターで濾過し、さらに２０μｍのフィ
ルターでマイクロスフェアを濾取した後、凍結乾燥を行
い、マイクロスフェアを回収した。マイクロスフェアの
回収率（仕込んだポリマーと薬物量に対する回収したマ
イクロスフェア量の割合）は、７９．５％であった。

【００９７】得られたマイクロスフェアの平均粒子径
は、４７．０μｍであり、薬物取込率は、８１．０％で
あった（ビタミンＢ１２の定量は、分光光度計（ＳＨＩ
ＭＡＤＺＵ ＵＶ−２５００ＰＣ）にて行った）。

【００９８】このマイクロスフェアについてｉｎ ｖｉ
ｔｒｏ溶出試験を行ったところ（溶出液：９．６ｍＭリ
ン酸緩衝化生理食塩水（ｐＨ７．４）、溶出試験機：タ
イテック製回転培養機ＲＴ５０（攪拌強度：２５ｒｐ
ｍ）、３７℃）、２１日間にわたってビタミンＢ１２が
一定の速度で放出された。また、初期バースト率（試験
開始１時間後における溶出率）は、わずか５．２％であ
った（図１）。

【００９９】比較例１ 実施例１と同様の操作を行ってポリマー溶液を得た。室
温において攪拌下（プロペラ式攪拌機、スリーワンモー
ターＢＬ３０００、ヘイドン社製、回転数：１５００ｒ
ｐｍ）、ポリマー溶液中に、ポリビニルアルコール
（１．０重量％）を含有させたグリセリン−水混合液
（グリセリンと水の重量比が７０：３０）４ｇをパスツ
ールピペットを用いて添加して３分間乳化した。エマル
ションの転相が生じ、最終的には、ポリマー溶液を分散
相、グリセリン−水混合液を連続相とするエマルション
を得た。このエマルションをグリセリン−水混合液（グ
リセリンと水の重量比が７０：３０）１４ｇ中に添加し
て密栓を施した後、マグネチックスターラーにて３時間
撹拌を行い、アセトンをエマルションの分散相から除去
し、マイクロスフェアの分散液を得た。この分散液を１
５０μｍのフィルターで濾過し、さらに２０μｍのフィ
ルターでマイクロスフェアを濾取した後、凍結乾燥を行
い、マイクロスフェアを回収した。

【０１００】得られたマイクロスフェアの平均粒子径
は、３７．７μｍであり、薬物取込率は、わずか２７．
７％であった。

【０１０１】このマイクロスフェアについてｉｎ ｖｉ
ｔｒｏ溶出試験を行ったところ、わずか１時間でほとん
どの薬物が放出され、初期バースト率は、７４．１％に
も達した（図１）。

【０１０２】以上より、乳化に際し、ポリマー溶液中に
グリセリン−水混合液を添加すると、薬物取込率が低下
し、初期バースト率も増大することが判明した。

【０１０３】比較例２ 実施例１と同様の操作を行ってポリマー溶液を得た。室
温において攪拌下（プロペラ式攪拌機、スリーワンモー
ターＢＬ３０００、ヘイドン社製、回転数：１５００ｒ
ｐｍ）、ポリビニルアルコール（１．０重量％）を含有
させた飽和ショ糖水溶液（ショ糖濃度：約６５重量％）
４ｇにパスツールピペットを用いてポリマー溶液を添加
して３分間乳化し、ポリマー溶液を分散相、飽和ショ糖
水溶液を連続相とするエマルションを得た。このエマル
ションをグリセリン−水混合液（グリセリンと水の重量
比が５０：５０）１４ｇ中に添加して密栓を施した後、
マグネチックスターラーにて３時間撹拌を行い、アセト
ンをエマルションの分散相から除去し、微粒子の分散液
を得た。この分散液を１５０μｍのフィルターで濾過
し、さらに２０μｍのフィルターで微粒子を濾取した
後、凍結乾燥を行い、微粒子を回収した。

【０１０４】しかしながら、この微粒子は繊維状で、球
状のマイクロスフェアではなく、回収率も僅か３．５％
に過ぎなかった。

【０１０５】したがって、ポリマー溶液を飽和糖（ショ
糖）水溶液中に乳化しても、マイクロスフェアは得られ
ないことが判明した。

【０１０６】比較例３ 比較例２において、ポリビニルアルコール（１．０重量
％）を含有させた飽和ショ糖水溶液（ショ糖濃度：約６
５重量％）にかえて、ポリビニルアルコール（１．０重
量％）を含有させた飽和グルコース水溶液（グルコース
濃度：約５０重量％）を用いた以外は同様の操作を行
い、微粒子を得た。

【０１０７】しかしながら、この微粒子は繊維状で、球
状のマイクロスフェアではなく、回収率も僅か５．１％
に過ぎなかった。

【０１０８】したがって、ポリマー溶液を飽和糖（グル
コース）水溶液中に乳化しても、マイクロスフェアは得
られないことが判明した。

【０１０９】比較例４ 比較例２において、ポリビニルアルコール（１．０重量
％）を含有させた飽和ショ糖水溶液（ショ糖濃度：約６
５重量％）にかえて、ポリビニルアルコール（１．０重
量％）を含有させた飽和マンニトール水溶液（マンニト
ール濃度：約１５重量％）を用いた以外は同様の操作を
行い、微粒子を得た。

【０１１０】しかしながら、この微粒子は繊維状で、球
状のマイクロスフェアではなく、回収率も僅か０．７％
に過ぎなかった。

【０１１１】したがって、ポリマー溶液を飽和糖（マン
ニトール）水溶液中に乳化しても、マイクロスフェアは
得られないことが判明した。

【０１１２】実施例２ ＰＬＧＡ５０２０ ４８７．５ｍｇ、予めジェットミル
（セイシン企業製）で粉砕したビタミンＢ１２ １２．
５ｍｇにアセトン８００ｍｇを加え、ポリマー溶液（ビ
タミンＢ１２は分散状態）を調製した。１５℃において
攪拌下（乳化機、商品名：ポリトロン、キネマティカ・
アーゲー・リタウ社製、回転数：２５００ｒｐｍ）、ポ
リビニルアルコール（０．３重量％）を含有させたグリ
セリン−水混合液（グリセリンと水の重量比が７０：３
０）６ｇにパスツールピペットを用いてポリマー溶液を
添加して３分間乳化し、ポリマー溶液を分散相、グリセ
リン−水混合液を連続相とするエマルションを得た。こ
のエマルションをグリセリン−水混合液（グリセリンと
水の重量比が５０：５０）１４ｇ中に添加してマグネチ
ックスターラーにて２．５時間撹拌し、さらに水１０ｍ
ｌを添加して０．５時間攪拌を行い、アセトンをエマル
ションの分散相から除去し、マイクロスフェアの分散液
を得た。この分散液を１５０μｍのフィルターで濾過
し、さらに２０μｍのフィルターでマイクロスフェアを
濾取した後、凍結乾燥を行い、マイクロスフェアを回収
した。

【０１１３】得られたマイクロスフェアの平均粒子径６
２．７μｍであり、薬物取込率は、６１．３％であっ
た。

【０１１４】このマイクロスフェアについてｉｎ ｖｉ
ｔｒｏ溶出試験（溶出液：９．６ｍＭリン酸緩衝化生理
食塩水（ｐＨ７．４）、３７℃）を行ったところ、１４
日間にわたってビタミンＢ１２を放出した（図２）。

【０１１５】実施例３ 特開平１１−３０２１５６記載の方法に従い、ウシ血清
アルブミン（シグマ社製、以下ＢＳＡと略す）１ｇ、ポ
リエチレングリコール６０００（和光純薬製）２ｇを水
１００ｍｌに溶解した溶液を凍結乾燥し、得られた固形
物を、アセトン−塩化メチレン混液（アセトンと塩化メ
チレンの体積比が３：１）で洗浄してポリエチレングリ
コールを除去した後、１時間減圧乾燥して平均粒子径１
μｍのＢＳＡ微粒子を得た。

【０１１６】予め粉砕したビタミンＢ１２にかえて上記
微粒子化したＢＳＡを用いてポリマー溶液（ＢＳＡは分
散状態）を調製し、２０μｍのフィルターでマイクロス
フェアを濾取する代わりに遠心分離（２０００ｒｐｍ、
５分間）を２回繰返してマイクロスフェアを集めた以外
は実施例２と同様の操作を行い、マイクロスフェアを得
た。

【０１１７】得られたマイクロスフェアの平均粒子径
は、１４．３μｍであり、薬物取り込み率は、７４．８
％であった（ＢＳＡの定量は、ミクロＢＣＡタンパク定
量キット（ＰＩＥＲＣＥ）にて測定した）。

【０１１８】実施例４ 予め粉砕したビタミンＢ１２にかえてエストロンを用い
てポリマー溶液（エストロンは溶解状態）を調製し、２
０μｍのフィルターでマイクロスフェアを濾取する代わ
りに遠心分離（２０００ｒｐｍ、５分間）を２回繰返し
てマイクロスフェアを集めた以外は実施例２と同様の操
作を行い、マイクロスフェアを得た。

【０１１９】得られたマイクロスフェアの平均粒子径
は、２２．４μｍ、薬物取り込み率は、ぼぼ１００％で
あった（エストロンの定量は、ＨＰＬＣ法にて測定し
た）。

【０１２０】実施例５ ポリビニルアルコール（０．３重量％）を含有させたグ
リセリン−水混合液（グリセリンと水の重量比が７０：
３０）にかえてヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ
−Ｌ、日本曹達製）（１重量％）を含有させたグリセリ
ン−エタノール混合液（グリセリンとエタノールの重量
比が８０：２０）用い、ポリトロンの回転数を４０００
ｒｐｍとした以外は実施例２と同様の操作を行い、平均
粒子径５０．８μｍのマイクロスフェアを得た。

【０１２１】実施例６ アセトンにかえてテトラヒドロフランを用いてポリマー
溶液（ビタミンＢ１２は分散状態）を調製し、２０μｍ
のフィルターでマイクロスフェアを濾取する代わりに遠
心分離（２０００ｒｐｍ、５分間）を２回繰返してマイ
クロスフェアを集めた以外は実施例２と同様の操作を行
い、平均粒子径１３．８μｍのマイクロスフェアを得
た。

【０１２２】実施例７ ＰＬＧＡ５０２０にかえてポリ乳酸（分子量：２０００
０、和光純薬製）、ビタミンＢ１２にかえて特開平１１
−３０２１５６記載の方法により微粒子化したＢＳＡを
用いてポリマー溶液（ＢＳＡは分散状態）を調製し、ポ
リトロンにかえてプロペラ式攪拌機（スリーワンモータ
ーＢＬ３０００、ヘイドン社製、回転数：１５００ｒｐ
ｍ）を用いた以外は実施例２と同様の操作を行い、マイ
クロスフェアを得た。

【０１２３】得られたマイクロスフェアの平均粒子径
は、７６．１μｍであり、薬物取込率は、７８．９％で
あった。

【０１２４】また、このマイクロスフェアのｉｎ ｖｉ
ｔｒｏ溶出試験の結果を図３に示した。

【０１２５】実施例８ ＰＬＧＡ５０２０ ４８７．５ｍｇ、タルチレリン水和
物１２．５ｍｇにアセトン７００ｍｇ、水１００ｍｇを
加え、ポリマー溶液（タルチレリン水和物は溶解状態）
を調製した。室温において攪拌下（プロペラ式攪拌機、
スリーワンモーターＢＬ３０００、ヘイドン社製、回転
数：１５００ｒｐｍ）、ポリビニルアルコール（１．０
重量％）を含有させたグリセリン−水混合液（グリセリ
ンと水の重量比が７０：３０）４ｇにパスツールピペッ
トを用いてポリマー溶液を添加して３分間乳化し、ポリ
マー溶液を分散相、グリセリン−水混合液を連続相とす
るエマルションを得た。このエマルションをグリセリン
−水混合液（グリセリンと水の重量比が７０：３０）１
４ｇ中に添加し、マグネチックスターラーにて３時間撹
拌を行い、アセトンをエマルションの分散相から除去
し、マイクロスフェアの分散液を得た。この分散液を１
５０μｍのフィルターで濾過し、さらに２０μｍのフィ
ルターでマイクロスフェアを濾取した後、凍結乾燥を行
い、マイクロスフェアを回収した。

【０１２６】得られたマイクロスフェアの平均粒子径
は、７６．０μｍ、薬物取込率は、４６．１％であった
（タルチレリンの定量は、ＨＰＬＣにて行った）。

【０１２７】このマイクロスフェアについてｉｎ ｖｉ
ｔｒｏ溶出試験の結果を図４に示した。

【０１２８】実施例９ ＰＬＧＡ５０２０ ４８７．５ｍｇ、予めジェットミル
（セイシン企業製）で粉砕したビタミンＢ１２ １２．
５ｍｇにアセトン８００ｍｇを加え、ポリマー溶液（ビ
タミンＢ１２は分散状態）を調製した。室温において攪
拌下（ラモンドスターラーＳＴ０２型、ＥＳＴ環境科学
工業製、回転数：５００ｒｐｍ）、ポリビニルアルコー
ル（０．５重量％）を含有させたグリセリン−水混合液
（グリセリンと水の重量比が７０：３０）４ｇにパスツ
ールピペットを用いてポリマー溶液を添加して３分間乳
化し、ポリマー溶液を分散相、グリセリン−水混合液を
連続相とするエマルションを得た。このエマルションを
グリセリン−水混合液（グリセリンと水の重量比が５
０：５０）１４ｇ中に添加してマグネチックスターラー
にて０．５時間撹拌し、さらに５０℃に加温して２．５
時間攪拌を行い、アセトンをエマルションの分散相から
除去し、マイクロスフェアの分散液を得た。この分散液
を１５０μｍのフィルターで濾過し、さらに２０μｍの
フィルターでマイクロスフェアを濾取した後、凍結乾燥
を行い、マイクロスフェアを回収した。

【０１２９】得られたマイクロスフェアの平均粒子径
は、５５．１μｍ、薬物取込率は、７７．４％であっ
た。

【０１３０】このマイクロスフェアについてｉｎ ｖｉ
ｔｒｏ溶出試験の結果を図５に示した。

【０１３１】実施例１０ ＢＳＡ１ｇ、ＰＥＧ６０００（ポリエチレングリコール
６０００、片山化学製）３ｇを水２００ｍｌに溶解した
溶液を−２０℃で凍結させ、得られた凍結物にアセトン
５００ｍｌを添加し、プロペラ式撹拌機（スリーワンモ
ーターＢＬ３０００、ヘイドン社製、回転数：５００ｒ
ｐｍ）を用いて撹拌を行い、ＰＥＧ６０００および氷を
アセトン中に溶解させ、ＢＳＡ微粒子分散液を得た。遠
心分離（２０００ｒｐｍ、５分間）を行い上清を除去
し、アセトン５０ｍｌでＢＳＡ微粒子を２回洗浄した
後、一晩減圧乾燥し、平均粒子径３．７２μｍのＢＳＡ
微粒子を得た。

【０１３２】得られたＢＳＡ微粒子２５ｍｇ、Ｒｅｓｏ
ｍｅｒＲＧ５０３Ｈ（乳酸−グリコール酸コポリマー、
乳酸とグリコール酸のモル比が５０：５０、分子量３万
３千、ベーリンガー社製）４７５ｍｇ、アセトン１５０
０ｍｇを加え、ポリマー溶液（ＢＳＡは分散状態）を調
製した。−２０℃において攪拌下（プロペラ式攪拌機、
スリーワンモーターＢＬ３０００、ヘイドン社製、回転
数：５００ｒｐｍ）、ポリビニルアルコール（０．５重
量％）を含有させたグリセリン−水混合液（グリセリン
と水の重量比が７０：３０）８ｇとアセトン１ｇとの混
合液にパスツールピペットを用いてポリマー溶液を添加
して３分間乳化し、ポリマー溶液を分散相、グリセリン
−水混合液を連続相とするエマルションを得た。このエ
マルションを−２０℃のエタノール３０ｍｌ中に添加し
て密栓を施した後、マグネチックスターラーにて３時間
撹拌を行い、アセトンをエマルションの分散相から除去
し、マイクロスフェアの分散液を得た。この分散液を１
５０μｍのフィルターで濾過し、さらに２０μｍのフィ
ルターでマイクロスフェアを濾取し、水で洗浄後、凍結
乾燥を行い、マイクロスフェアを回収した。マイクロス
フェアの回収率は、７４．５％であった。

【０１３３】得られたマイクロスフェアの薬物取り込み
率は、６８．６％であった。

【０１３４】実施例１１ 実施例１０と同様の操作を行い得られたマイクロスフェ
ア分散液を、１５０μｍのフィルターで濾過し、さらに
２０μｍのフィルターでマイクロスフェアを濾取した
後、水１０ｍｌ中に再分散し、室温にて密閉下、２．５
時間攪拌した。攪拌終了後、再度２０μｍのフィルター
でマイクロスフェアを濾取し、凍結乾燥を行い、マイク
ロスフェアを回収した。

【０１３５】得られたマイクロスフェアをジオキサンに
溶解し、ガスクロマトグラフィーにてマイクロスフェア
中に残存していたアセトン量を測定したところ、５００
ｐｐｍ以下であった。

【０１３６】実施例１２ ＢＳＡ２ｇ、ＰＥＧ２００００（ポリエチレングリコー
ル２００００、片山化学製）６ｇを水２００ｍｌに溶解
した溶液を−８０℃で凍結させ、得られた凍結物にアセ
トン５００ｍｌを添加し、プロペラ式撹拌機（スリーワ
ンモーターＢＬ３０００、ヘイドン社製、回転数：５０
０ｒｐｍ）を用いて撹拌を行い、ＰＥＧ２０００および
氷をアセトン中に溶解させ、ＢＳＡ微粒子分散液を得
た。遠心分離（２０００ｒｐｍ、５分間）を行い上清を
除去し、アセトン５０ｍｌでＢＳＡ微粒子を２回洗浄し
た後、一晩減圧乾燥し、平均粒子径２．０４μｍのＢＳ
Ａ微粒子を得た。

【０１３７】得られたＢＳＡ微粒子１２．５ｍｇ、ＰＬ
ＧＡ５０２０ ４８７．５ｍｇ、アセトン８００ｍｇを
加え、ポリマー溶液（ＢＳＡは分散状態）を調製した。
−２０℃において攪拌下（プロペラ式攪拌機、スリーワ
ンモーターＢＬ３０００、ヘイドン社製、回転数：５０
０ｒｐｍ）、ポリビニルアルコール（０．５重量％）を
含有させたグリセリン−水混合液（グリセリンと水の重
量比が７０：３０）４ｇとアセトン０．５ｇとの混合液
にパスツールピペットを用いてポリマー溶液を添加して
３分間乳化し、ポリマー溶液を分散相、グリセリン−水
混合液を連続相とするエマルションを得た。このエマル
ションを−２０℃のエタノール７．５ｍｌ中に添加して
密栓を施した後、マグネチックスターラーにて１５分撹
拌を行い、アセトンをエマルションの分散相から除去
し、マイクロスフェアの分散液を得た。この分散液を１
５０μｍのフィルターで濾過し、さらに２０μｍのフィ
ルターでマイクロスフェアを濾取した後、水１０ｍｌ中
に再分散し、室温にて密閉下、１時間攪拌した。攪拌終
了後、再度２０μｍのフィルターでマイクロスフェアを
濾取し、凍結乾燥を行い、マイクロスフェアを回収し
た。

【０１３８】実施例１３ 実施例１２において、ポリビニルアルコール（０．５重
量％）を含有させたグリセリン−水混合液（グリセリン
と水の重量比が７０：３０）４ｇとアセトン０．５ｇと
の混合液にかえて、ポリビニルアルコール（０．５重量
％）を含有させたグリセリン−水混合液（グリセリンと
水の重量比が７０：３０）４ｇとテトラヒドロフラン
０．５ｇとの混合液を用いた以外は同様の操作を行い、
マイクロスフェアを得た。

【０１３９】実施例１４ 実施例１２において、ポリビニルアルコール（０．５重
量％）を含有させたグリセリン−水混合液（グリセリン
と水の重量比が７０：３０）４ｇとアセトン０．５ｇと
の混合液にかえて、ポリビニルアルコール（０．５重量
％）を含有させたグリセリン−水混合液（グリセリンと
水の重量比が７０：３０）４ｇとアセトニトリル０．５
ｇとの混合液を用いた以外は同様の操作を行い、マイク
ロスフェアを得た。

【０１４０】実施例１５ 実施例１２と同様の操作を行い得られたマイクロスフェ
ア分散液を、１５０μｍのフィルターで濾過し、さらに
２０μｍのフィルターでマイクロスフェアを濾取した
後、水１ｍｌ中に再分散し、４℃にて密閉下、１時間攪
拌した。攪拌終了後、凍結乾燥を行い、マイクロスフェ
アを回収した。

【０１４１】

【発明の効果】本発明の方法によれば、水混和性の有機
溶媒、特に、人体、環境への悪影響が少ないアセトンや
テトラヒドロフランなどを用いてマイクロスフェアを調
製することができる。

【０１４２】また、本方法によれば、水溶性薬物、脂溶
性薬物の何れであっても、高い取込率でマイクロスフェ
ア中に包含することが可能である。

【図面の簡単な説明】

【図１】 均一混合液中にポリマー溶液を添加した場合
（実施例１）とポリマー溶液中に均一混合液を添加した
場合（比較例１）の、得られたビタミンＢ１２含有マイ
クロスフェアの溶出特性の比較を示すグラフである。

【図２】 ビタミンＢ１２含有マイクロフェア（実施例
２）のｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出試験結果を示すグラフであ
る。

【図３】 ウシ血清アルブミン含有マイクロスフェア
（実施例７）のｉｎｖｉｔｒｏ溶出試験結果を示すグラ
フである。

【図４】 タルチレリン含有マイクロスフェア（実施例
８）のｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出試験結果を示すグラフであ
る。

【図５】 ビタミンＢ１２含有マイクロフェア（実施例
９）のｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出試験結果を示すグラフであ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０８Ｌ 101/16 ＺＢＰ Ｃ０８Ｌ 101/16 ＺＢＰ // Ｂ０１Ｊ 13/02 Ｂ０１Ｊ 13/02 Ｚ Ｆターム(参考） 4C076 AA67 EE24 FF21 FF31 GG07 GG26 4F070 AA47 AA71 AB12 AC31 AE00 DA31 DC16 FA04 FA05 FB10 4G005 AA01 BA14 BB06 BB08 DA09W DB21X DB22X DB24X DC11W DC15W DC18W DD27Z DD57Z DD58Z EA03 4J002 AA001 CF181 CF191 FD206

Claims (26)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 薬物、生体内分解性ポリマーおよび水と
   混和する前記ポリマーの良溶媒（溶媒Ａ）を含むポリマ
   ー溶液を、溶媒Ａと混和する前記ポリマーの貧溶媒（溶
   媒Ｂ）と溶媒Ａと混和しない前記ポリマーの貧溶媒（溶
   媒Ｃ）を含む均一混合液中に添加して乳化することによ
   りポリマー溶液が分散相、均一混合液が連続相を形成す
   るエマルションを調製し、分散相から溶媒Ａを除去する
   ことを特徴とするマイクロスフェアの製法。
2. 【請求項２】 生体内分解性ポリマーが、ヒドロキシ脂
   肪酸のポリエステルである請求項１記載の製法。
3. 【請求項３】 生体内分解性ポリマーが、ポリ乳酸、乳
   酸−グリコール酸共重合体および２−ヒドロキシ酪酸−
   グリコール酸共重合体から選択される１種または２種以
   上である請求項１記載の製法。
4. 【請求項４】 溶媒Ａが、アセトン、テトラヒドロフラ
   ン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチル
   スルホキシド、ジオキサン、ジグリムおよびエチレング
   リコールジメチルエーテルからなる群より選択される１
   種または２種以上であり、溶媒Ｂが、水および炭素数１
   〜４の１価アルコールからなる群より選択される１種ま
   たは２種以上であり、溶媒Ｃが、グリセリンである請求
   項１〜３のいずれか１項記載の製法。
5. 【請求項５】 炭素数１〜４の１価アルコールが、メタ
   ノール、エタノール、ｎ−プロパノール、ｉ−プロパノ
   ール、ｎ−ブタノール、ｉ−ブタノール、ｓｅｃ−ブタ
   ノールまたはｔｅｒｔ−ブタノールである請求項４記載
   の製法。
6. 【請求項６】 溶媒Ａがアセトン、溶媒Ｂが水、溶媒Ｃ
   がグリセリンである請求項４項記載の製法。
7. 【請求項７】 均一混合液の溶媒Ｂと溶媒Ｃの重量比
   が、５：９５〜７５：２５の範囲内である請求項１〜６
   のいずれか１項記載の製法。
8. 【請求項８】 溶媒Ａの量が、溶媒Ｂと溶媒Ｃとの均一
   混合液に混和可能な溶媒Ａの最大量以下である請求項１
   〜７のいずれか１項記載の製法。
9. 【請求項９】 ポリマー溶液が、溶媒Ｂを含有する請求
   項１〜８のいずれか１項記載の製法。
10. 【請求項１０】 ポリマー溶液における溶媒Ｂの含有率
    が、０．００１〜５０重量％である請求項９記載の製
    法。
11. 【請求項１１】 均一混合液が、乳化安定剤を含有する
    請求項１〜１０のいずれか１項記載の製法。
12. 【請求項１２】 均一混合液が、溶媒Ａを含有する請求
    項１〜１１のいずれか１項記載の製法。
13. 【請求項１３】 乳化が０℃以下で行われる請求項１２
    記載の製法。
14. 【請求項１４】 ポリマー溶液と均一混合液との重量比
    が、１：１〜１：１０００の範囲内である請求項１〜１
    ３のいずれか１項記載の製法。
15. 【請求項１５】 乳化後、得られたエマルションと別途
    用意した増量用溶媒とを混合することにより連続相を増
    量し、溶媒Ａを除去する請求項１〜１４のいずれか１項
    記載の製法。
16. 【請求項１６】 増量用溶媒が、溶媒Ｂ又は溶媒Ｂと溶
    媒Ｃの混合液である請求項１５記載の製法。
17. 【請求項１７】 増量用溶媒に用いる溶媒Ｂが、水およ
    び炭素数１〜４の１価アルコールからなる群より選択さ
    れる１種または２種以上であり、増量用溶媒に用いる溶
    媒Ｃがグリセリンである請求項１６記載の製法。
18. 【請求項１８】 増量用溶媒に用いる溶媒Ｂが、炭素数
    １〜４の１価アルコールであり、溶媒Ａの除去が０℃以
    下で行われる請求項１６記載の製法。
19. 【請求項１９】 増量後のエマルションの連続相におけ
    る溶媒Ｂの割合が、増量前と同一または増量前よりも大
    きい請求項１５〜１８のいずれか１項記載の製法。
20. 【請求項２０】 増量後の連続相の体積が増量前の２〜
    １００倍である請求項１５〜１９のいずれか１項記載の
    製法。
21. 【請求項２１】 エマルションを加温し、溶媒Ａを除去
    する請求項１〜１２、１４〜１７、１９、２０のいずれ
    か１項記載の製法。
22. 【請求項２２】 加温条件が３０〜７０℃の範囲内であ
    る請求項２１記載の製法。
23. 【請求項２３】 エマルションを減圧し、溶媒Ａを除去
    する請求項１〜２２のいずれか１項記載の製法。
24. 【請求項２４】 減圧後の圧力が５〜８０ｋＰａの範囲
    内である請求項２３記載の製法。
25. 【請求項２５】 溶媒Ａの除去が、密閉下に行われる請
    求項１〜２４のいずれか１項記載の製法。
26. 【請求項２６】 請求項１〜２５のいずれか１項記載の
    製法より得られたマイクロスフェアを水中に再分散して
    攪拌することを特徴とするマイクロスフェア中に残存す
    る溶媒Ａの除去方法。