JP2001519660A

JP2001519660A - 心臓血管の状態を評価するための方法およびそれを用いるための組成物

Info

Publication number: JP2001519660A
Application number: JP54253098A
Authority: JP
Inventors: トルビョルンノルベーグ，レイフ; クリスティーナアンデルソン，マリア; ハリールトガーリントシュトレーム，ペール
Original assignee: ユーロナメディカルアーベー
Priority date: 1997-04-04
Filing date: 1998-04-01
Publication date: 2001-10-23
Also published as: WO1998045477A2; CY1106158T1; ATE335844T1; AU6632998A; CA2285671A1; WO1998045477A3; IL132099A0; NZ337878A; DE69835509T2; US6197505B1; EP0972075B1; ES2270510T3; AU741750B2; DE69835509D1; DK0972075T3; EP0972075A2

Abstract

(57)【要約】本発明は、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）、アンギオテンシノゲン（ＡＧＴ）、および／または１型アンギオテンシンIIレセプター（ＡＴ１）をコードするヒト遺伝子内の一つ以上の多型部位における配列を決定することを含む、個人の心臓血管状態を評価する方法を提供する。また、本発明は、ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１多型性をコードする単離された核酸、多型部位にハイブリダイズする核酸プローブ、心臓血管状態の予測のためのキット、および候補の心臓血管剤を同定する際に用いられる核酸およびペプチドターゲットも提供する。

Description

【発明の詳細な説明】心臓血管の状態を評価するための方法およびそれを用いるための組成物本願は、１９９７年４月３日に出願された、米国仮出願シリアル番号６０／０４２９３０に基づいて米国特許法第１１９条の下に優先権を主張する。発明の分野本発明は、ヒトの心臓血管の状態を評価するために用いられる遺伝的多型に関する。発明の背景レニン−アンギオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）は、哺乳動物の心臓血管生理学において重要な役割を演じる。特に、ＲＡＡＳは、塩−水ホメオスタシスおよび血管の正常状態の維持を制御する。このシステムの刺激または阻害は、それぞれ血圧を上昇または低下させ、このシステムにおける障害は、例えば、高血圧、発作および心筋梗塞の病因と関連しうる。また、ＲＡＡＳ系は、例えば、細胞成長の制御のような別の機能をも有するかもしれない。レニン−アンギオテンシン系は、少なくともレニン、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）、アンギオテンシノゲン（ＡＧＴ）、１型アンギオテンシンIIレセプター（ＡＴ１）および２型アンギオテンシンIIレセプター（ＡＴ２）を含む。ＡＧＴは、レニン、アスパルチルプロテアーゼの特異的な基質である。ヒトＡＧＴ遺伝子は、５つのエキソンと１３Ｋｂにおよぶ４つのイントロンを含む（Ga illardら，DNA 8:87-99，1989;Fukamizuら，J.Biol.Chem.265:7576-7582，1990 ）。最初のエキソン（３７ｂｐ）はｍＲＮＡの５’非翻訳領域をコードする。第二のエキソンはシグナルペプチドと、成熟タンパクの最初の２５２アミノ酸をコードする。エキソン３および４はより短く、それぞれ９０および４８アミノ酸をコードする。エキソン５は、短いコード配列（６２アミノ酸）と３’−非翻訳領域を含む。血漿ＡＧＴは、主に肝臓において合成され、その発現は、エストロゲン、グルココルチコイド、甲状腺ホルモンおよびアンギオテンシンII（ＡｎｇII）によって正の制御を受ける（Clauserら，Am.J.Hypertension 2:403-410，1989）。レ二ンによるＡＧＴのアミノ末端セグメントの切断により、デカペプチドプロホルモン、アンギオテンシン−Ｉが放出され、これは、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）と称されるジペプチジルカルボキシペプチダーゼによって、活性なオクタペプチドアンギオテンシンIIへとさらに処理される。レニンによるＡＧＴの切断は、レニン−アンギオテンシン系の活性化の律速段階である。いくつかの疫学的観察は、血圧制御におけるＡＧＴの可能性のある役割を示唆する。血漿ＡＧＴ濃度と血圧との間の非常に意義深い関係が、疫学的研究において見出された（Walkerら，J．Hypertension 1:287-291，1979）。興味深いことに、多数の対立遺伝子の二型性がＡＧＴ遺伝子に同定された。それらの少なくとも二つ（１７４Ｍと２３５Ｔ）の頻度は、部分的に特徴が決定され、一部の集団では、高血圧患者において顕著に増大されていることが示された（Jeunemaitre ら，Cell 71:169-180，1992）。さらに、特定の多型性である２３５Ｔは、冠状アテローム硬化症に直接関連すると示唆されている（Ishigamiら，Circulation 91:951-4，1995）。さらに、ＡＧＴ制御領域の部位１２１８におけるＡまたはＧの存在が、この遺伝子のインビトロ転写能力における差異と関連づけられた（In uoeら，J．Clin．Invest．99:1786，1997）。また、ヒトＡＣＥ遺伝子は、高血圧および心筋梗塞のマーカーの候補である。ＡＣＥインヒビターは、ヒト高血圧のコントロールにおいて重要かつ効果的な治療的アプローチを構成する（Sassahoら，Am．J．Med．83:227-235，1987）。血漿中および内皮細胞の表面において、ＡＣＥは不活性なアンギオテンシンＩ分子（ＡｎｇＩ）を活性なアンギオテンシンII（ＡｎｇII）に変換する（Bottariら，Front.Neuroendocrinology 14:123-171，1993）。その他のＡＣＥ基質は、潜在的な血管拡張薬であり平滑筋細胞増殖のインヒビターであるブラジキニンであり、これはＡＣＥによって不活性化される（Ehlersら，Biochemistry 28:5311-5 318，1989;Erdos，E.G.，Hypertension 16:363-370，1990;Johnston，C.I．Drug s（補足1）39:21-31，1990）。ＡＣＥのレベルは、個人内では非常に安定であるが、個人間では大きく異なる。血漿ＡＣＥレベルは、ＡＣＥ遺伝子内またはその近くに位置する、二対立遺伝子(diallelic)多型性の結果として遺伝学的に調べられることが示唆された。本発明の前には、多型性と高血圧または血圧との間に決定的な関連性は示されなかった。しかしながら、心筋梗塞の大きな危険性が、ＡＣＥ−ＤＤと称されるＡＣＥ多型性を有する一群の患者において同定され（Cambienら，Nature 359:641-64 4，1992）、心筋梗塞の１２倍大きな危険性が、ＡＣＥ多型性ＡＣＥ−ＤＤと上記ＡＧＴ多型性の一つ（２３５Ｔ）の組み合わせを有する患者のサブグループに同定された（Kamitaniら，Hypertension 24:381，1994）。最近になって、６つのＡＣＥ多型性が同定され、特徴が決定されている（Villardら，Am．J．Human Genet．58:1268-1278，1996）。ＡｎｇIIの血管収縮、細胞成長促進および塩保存作用は、アンギオテンシンレセプターに対する結合およびその活性化を介して媒介され、そのうちの少なくとも二つのタイプがクローン化された（ＡＴ１およびＡＴ２）。Ｇタンパク結合型膜７回貫通ドメインタンパクである１型ＡｎｇIIレセプター（ＡＴ１）は、体中に広く分布し、ほぼ全てが解明されたＡｎｇII効果を媒介する（Fyhrquistら，J ．Hum．Hypertension 5:519-524，1995）。いくつかの多型性が、ＡＴ１レセプター遺伝子に同定された。当初の研究は、それらの少なくとも一つが高血圧患者に頻繁に見られることを示唆した（ＡＴ¹¹ ⁶⁶ Ｃ）（Bonnardeauxら，Hypertension 24:63-69，1994）。この多型性は、ＡＣＥ−ＤＤ多型性と組み合わせて、心筋梗塞の危険性と強く関連することが示された（Tiretら，Lancet 344:910-913，1994）。心臓血管の疾患に関連する高い罹患率および死亡率が、心臓血管疾患の患者に最も絶対的な治療結果をもたらす治療方法の決定および／または予測を可能にする方法および組成物の当該技術分野における必要性を示している。これは、例えば、心臓血管疾患を治療するために通常用いられる特定の薬剤を含めた特定の治療方法に対して、多少敏感な個人の同定を含む。また、早期介入および疾患予防を容易にするために、例えば、心筋梗塞、高血圧症、アテローム硬化症および発作のような心臓血管疾患に対する疾病素質を有する個人の同定を可能にする方法および組成物に関する当該技術分野における要求も存在する。発明の概要本発明は、ヒト個人の心臓血管の状態を評価する方法を提供する。心臓血管の状態とは、一つ以上の状態マーカーに反映される心臓血管システムの生理的状態である。状態マーカーは、非限定的に、例えば血圧または心電図プロフィールのような臨床パラメーター、並びに、急性心筋梗塞、無症状心筋梗塞、発作およびアテローム硬化症のような熟練した医師によってなされた心臓血管状態の診断を含む。また、状態マーカーの時間変化も、心臓血管状態の評価に含まれる。本発明の方法は、以下の工程：（i）個人の多型パターンを確立するために、その個人のアンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）、アンギオテンシノグン（ＡＧＴ）、および１型アンギオテンシンIIレセプター（ＡＴ１）をコードする一つ以上の遺伝子内の一つ以上の多型部位の配列を調べ；かつ、（ii）（i）において確立された多型パターンを、心臓血管状態の所定のマーカーを示す個人の多型パターンと比較することによって行われる。その個人の多型パターンは、特定の状態マーカー、心臓血管症候群、および／または治療的介入に対する応答の特定のパターンを示す個人の多型パターンと、好ましくは高度に類似、最も好ましくは同一である。例えば、個人の多型パターンと、特定の治療的介入に対し異なる反応を示す個人の多型パターンとの比較は、そのような介入に対する個人の反応性の程度を予想するために用いることができる。同様に、本発明の方法は、種々の心臓血管症候群に対する疾病素質を予想するために用いることができる。また、本発明は、少なくとも一つの多型部位を含む個人のＡＣＥ、ＡＧＴ、およびＡＴ１をコードする単離された核酸を提供する。好ましい実施態様では、多型部位は、単独で、あるいはヒトＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１の配列中の、または一つ以上の別のヒト遺伝子中の、別の多型部位と組み合わせて、所定の治療に対する反応性の特定レベルを予想し、かつ／または心臓血管疾患に関連する一つ以上の臨床的症候群に対する疾病素質を示す。本発明に係る単離された核酸（以下の表１に示された番号を用いて記載されている）は、非限定的に以下を含む。（i）５１０６と番号が付された制御領域中の部位；３７５、５８２、７３１、１０６０、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたコード領域中の部位；および、GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付された部位１４５１に、一つ以上の多型部位を有するＡＣＥをコードする核酸。好ましい実施態様では、ＡＣＥ制御領域における多型部位の配列は、一つ以上の５１０６Ｃおよび５１０６Ｔであり；かつ、コード領域における多型部位の配列は、一つ以上の３７５Ａ、３７５Ｃ、５８２Ｃ、５８２Ｔ、７３１Ａ、７３１Ｇ、１０６０Ｇ、１０６０Ａ、２７４１Ｇ、２７４１Ｔ、３１３２Ｃ、３１３２Ｔ、３３８７Ｔ、３３８７Ｃ、３５０３Ｇ、３５０３Ｃ、３９０６Ｇ、および３９０６Ａである。また、本発明は、GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたヌクレオチド１４５１−１７８３の欠失をコードする核酸を包含する。（ii）３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２および１２０４と番号が付された制御領域中の部位；２７３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたコード領域中の部位；および、Genb ankエントリーＭ２４６８８において番号が付された部位４９に、一つ以上の多型部位を有するＡＧＴをコードする核酸。好ましい実施態様でば、ＡＧＴ制御領域における多型部位の配列は、一つ以上の３９５Ｔ、３９５Ａ、４１２Ｃ、４１２Ｔ、４３２Ｇ、４３２Ａ、４４９Ｔ、４４９Ｃ、６９２Ｃ、６９２Ｔ、８３９Ｇ、８３９Ａ、１００７Ｇ、１００７Ａ、１０７２Ｇ、１０７２Ａ、１２０４Ｃおよび１２０４Ａであり；コード領域における多型部位の配列は、一つ以上の２７３Ｃ、２７３Ｔ、９１２Ｃ、９１２Ｔ、９９７Ｇ、９９７Ｃ、１１１６Ｇ、１１１６Ａ、１１７４Ｃおよび１１７４Ａであり；また、GenbankエントリーＭ２４６８８の４９位の配列がＡまたはＧである。（iii）１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号が付された制御領域中の部位；および４４９と番号が付されたコード領域中の部位に一つ以上の多型部位を有するＡＴ１をコードする核酸。好ましい実施態様では、ＡＴ１制御領域における多型部位の配列は、一つ以上の１４２７Ａ、１４２７Ｔ、１７５６Ｔ、１７５６Ａ、１８５３Ｔ、１８５３Ｇ、２０４６Ｔ、２０４６Ｃ、２３５４Ａ、２３５４Ｃ、２３５５Ｇ、２３５５Ｃ、２４１５Ａおよび２４１５Ｇであり；かつ、コード領域における多型部位の配列は、一つ以上の４４９Ｇ、４４９Ｃ、６７８Ｔ、６７８Ｃ、１１６７Ａ、１１６７Ｇ、１２７１Ａおよび１２７１Ｃである。また、本発明は、単離された核酸配列のライブラリーを含み、ライブラリーの各配列は、非限定的に、ここに開示された多型部位と配列を含めた、ヒトＡＣＥ、ＡＧＴ、またはＡＴ１をコードする遺伝子に一つ以上の多型部位を含む。また、同定された多型部位に特異的にハイブリダイズする核酸ブローブ；多型部位を含むペプチドおよびポリペプチド；および多型性特異的抗体、すなわちＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１ポリペプチドの多型変異体に特異的に結合し、好ましくは特定の多型変異体を同定するために使用することができる配列特異的抗体も提供する。別の態様では、本発明は、個人のＡＣＥ、ＡＧＴ、および／またはＡＴ１遺伝子における多型パターンの測定のためのキットを提供する。このキットは、非限定的に、多型部位あるいはその近くにハイブリダイズするオリゴヌクレオチドプローブおよび多型性特異的抗体を含む、多型配列を検出するための手段を含む。さらに別の態様では、本発明は、候補の心臓血管剤を同定するための選別方法において使用される核酸およびポリペプチドターゲットを提供する。核酸ターゲットは、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡであってもよく、好ましくは少なくとも約１０、そして最も好ましくは少なくとも約１５残基の長さであり、一つ以上の多型部位を含む。ペプチドターゲットは、少なくとも約５アミノ酸の長さであり、全長のＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１ポリペプチドと同じかそれより大きくてもよい。発明の詳細な説明ここに引用されている全ての特許、特許出願、刊行物およびその他の資料の全体を、参照としてここに含める。矛盾する場合には、定義を含む本願の記載が優先する。定義：１．ここで用いられる“多型性”とは、個人の遺伝子の配列における変化を示す。“多型部位”とは、多型性が位置する、遺伝子の配列中の所定のヌクレオチド部位またはポリペプチドの配列中の所定のアミノ酸部位である。特定の多型性の個人の“ホモ接合”は、遺伝子の両方のコピーが多型部位において同じ配列を含むものである。特定の多型性の個人の“ヘテロ接合”は、遺伝子の二つのコピーが多型部位において異なる配列を含むものである。２．ここに用いられる“多型性パターン”は、一つ以上の多型性のセットを示し、単一の遺伝子または複数の遺伝子の配列に含まれてもよい。多型性パターンは、ヌクレオチドまたはアミノ酸多型性を含んでもよい。３．ここで用いられる“核酸”または“ポリヌクレオチド”は、あらゆる長さのプリン−およびビリミジン含有ポリマー、ポリリボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチド、もしくは混合されたポリリボ−ポリデオキシリボヌクレオチドを指す。核酸は、非限定的に、一本鎖および二本鎖分子、すなわちＤＮＡ−ＤＮＡ、ＤＮＡ−ＲＮＡおよびＲＮＡ−ＲＮＡハイブリッド、並びに、アミノ酸骨格に塩基を結合することによって形成された“タンパク核酸”（ＰＮＡ）を含む。また、修飾された塩基を含む核酸を含む。４．ここで用いられる“単離された”核酸またはポリペプチドは、起源の環境から除去された核酸またはポリペプチドを指す（例えば、それが天然に生じるのであれば、その天然環境）。単離された核酸またはポリペプチドは、本来的に結合していた細胞性成分の約５０％未満、好ましくは約７５％末満、最も好ましくは約９０％末満を含む。５．指定された配列“から誘導された”核酸またはポリペプチド配列は、指定された配列の領域に対応する配列を指す。核酸配列について、これは、配列に相同または相補的な配列を含む。６．“ブローブ”は、ターゲットの核酸の配列と、プローブの少なくとも一つの配列との相補性により、ターゲットの核酸の配列とハイブリッド構造を形成する核酸またはオリゴヌクレオチドを指す。７．核酸は、核酸の少なくとも一つの鎖が、所定の厳密な条件下で別の核酸鎖にアニールすることができる場合に、互いに“ハイブリダイズ可能”である。ハイブリダイゼーションの厳密性は、例えば、ａ）ハイブリダイゼーションおよび／または洗浄が行われる温度、ｂ）ハイブリダイゼーションおよび洗浄溶液のイオン強度および極性（例えばホルムアミド）、およびその他のパラメーターによって決定される。ハイブリダイゼーションは、二つの核酸が実質的に相補的な配列を含むことを必要とする；ハイブリダイゼーションの厳密性に依存して、ミスマッチが寛容されてもよい。核酸をハイブリダイズさせるための適切な厳密性は、当該技術分野において周知の変数である、核酸の長さおよび相補性の程度に依存する。例えば、ここで用いられる“高度の厳密性”は、０．２ＸＳＳＣ中６８ ℃、５０％ホルムアミド、４ＸＳＳＣ中４２℃、あるいは、これら二つの条件のいずれかにおいて観察されたものと等価のハイブリダイゼーションレベルを示す条件下における、ハイブリダイゼーションおよび／または洗浄を指す。８．ここで用いられた特定のタンパクの“遺伝子”とは、（i）エキソン（すなわち、ポリペプチド配列をコードする配列または“タンパクコード配列”）、イントロン、およびエキソンとイントロンの間の接続部の配列を含む“コード領域”；並びに（ii）コード領域の５’および３’末端の両方に隣接する制御配列を含む、ゲノムに存在する配列に対応する隣接する核酸配列を指す。例えば、ここで用いられる“ＡＣＥ遺伝子”は、アンギオテンシン変換酵素をコードするヒト遺伝子の制御およびコード領域を含む。同様に、“ＡＧＴ遺伝子”は、アンギオテンシノゲンをコードするヒト遺伝子の制御およびコード領域を含み、“ＡＴ１遺伝子”は１型アンギオテンシンIIレセプターをコードするヒト遺伝子の制御およびコード領域を含む。通常、本発明に係る制御配列は、コード領域セグメントの５’（すなわち上流）に位置する。Genbankから入手され、本発明を実施する際に用いられる参照配列は、表１に記載されている。本願発明者らは、単独または組み合わせて、心臓血管状態を評価するために用いることができる、ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１をコードするヒト遺伝子内の遺伝的多型性の存在を、驚くべきことに、そして予期せぬことに知見した。本発明によれば、個人のＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１配列の多型パターンは、特定の治療的介入に対する個人の反応を予想することができ、種々の形態の心臓血管疾患に対する疾病素質の指標として利用することができる。本発明は、個人における多型パターンを検出することによって心臓血管状態を評価する方法を提供する。また、本発明は、多型部位に特異的にハイブリダイズするプローブを含む、上記の多型性を含むＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１遺伝子から誘導された単離された核酸；多型残基を含む単離されたポリペプチドおよびペプチド；および、一つ以上の多型アミノ酸を含むＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１ポリペプチドを特異的に認識する抗体を提供する。心臓血管状態を評価する方法本発明は、ヒト個人の心臓血管状態を評価する診断方法を提供する。ここで用いられる心臓血管状態とは、一つ以上のマーカーまたは指標に反映されるような個人の心臓血管システムの生理学的状態を指す。状態マーカーは、非限定的に、例えば血圧、心電図プロフィール、並びに、分化型血流分析のような臨床的測定値を含む。本発明に係る状態マーカーは、例えば、高血圧、急性心筋梗塞、無症状心筋梗塞、発作およびアテローム硬化症のような一つ以上の心臓血管症候群の診断を含む。医師によってなされた心臓血管症候群の診断は、臨床的測定値および医学的判断を含むと解される。本発明に係る状態マーカーは、当該技術分野で周知の慣例的な方法を用いて評価される。心臓血管状態の評価には、例えば、特定の治療方法に対する患者の反応の測定において用いられるような、時間に伴った状態マーカーの定性または定量的な変化も含まれる。この方法は、以下の工程：（i）個人の多型パターンを確立するために、個人のアンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）、アンギオテンシノゲン（ＡＧＴ）、および１型アンギオテンシン IIレセプター（ＡＴ１）をコードする一つ以上の遺伝子内の一つ以上の多型部位の配列を決定する工程；および、（ii）（i）において確立された多型パターンを、心臓血管状態の種々のマーカーを示すヒトの多型パターンと比較する工程によって行われる。個人の多型パタ一ンは、特定の状態マーカー、心臓血管症候群、および／または治療的介入に対する応答の特定のパターンを示す個人の多型パターンと、好ましくは高度に類似、最も好ましくは同一である。また、多型パターンは、ＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１における一つ以上の多型部位と組み合わせて、特定の状態マーカーの存在と関連することが示されている別の遺伝子の多型部位を含んでもよい。一つの実施態様では、この方法は、個人の多型パターンを、特定の治療方法に肯定的または否定的に反応することが示された個人の多型パターンと比較することを含む。ここで用いられる治療方法は、心臓血管疾患と関連する症状および事象の除去または改善を目的とした治療に関する。係る治療は、非限定的に、食事、ライフスタイルおよび運動療法における一つ以上の変更；アテレクトミー、血管形成および冠状動脈バイパス手術のような侵襲性または非侵襲性の外科的技術；並びに、ＡＣＥインヒビター、アンギオテンシンIIレセプターアンタゴニスト、利尿薬、アルファーアドレノレセプターアンタゴニスト、強心配糖体、ホスホジエステラーゼインヒビター、ベーターアドレノレセプターアンタゴニスト、カルシウムチャネルブロッカー、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼインヒビター、イミダゾリンレセプターブロッカー、エンドセリンレセプターブロッカー、および有機的亜硝酸塩の投与のような薬学的介入を含む。活性が心臓血管疾患に関連する特定の多型パターンと関連することが末知の薬剤を用いた介入も含まれる。本願発明者らは、特定の多型パターンがＡＣＥインヒビターに対する個人の反応性と関連することを見出した（例えば、以下の実施例３参照）。例えば、特定の治療方法の候補である患者が、その特定の治療法に対する反応性と関連する多型パターンについて選別されることが考えられる。好ましい実施態様においては、ＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、およびＡＴ１１１６７Ａ／Ａ（以下参照）を含む多型パターンの個人における存在または不在が、ＡＣＥインヒビターに対する個人の反応性を同定するために調べられる。別の実施態様では、この方法は、個人の多型パターンを、例えば、高血圧症、異常心電図波形プロフィール、心筋梗塞、発作またはアテローム硬化症のような心臓血管疾患の一つ以上のマーカーを示す、または示していた個人の多型パターンと比較することを含む（例えば、以下の実施例２参照）。本発明の方法を実施する際に、個人の多型パターンは、個人からＤＮＡを得ること、および、上述したようなＡＣＥ、ＡＧＴ、およびＡＴ１の所定の多型部位の配列を決定することによって確立することができる。ＤＮＡは、あらゆる細胞源から得ることができる。臨床的に入手できる細胞源の非限定的な例は、血液細胞、頬の細胞、腟頸管動脈細胞、尿中の上皮細胞、胎児細胞またはバイオプシーによって得られた組織中に存在するあらゆる細胞を含む。細胞は、非限定的に、血液、唾液、汗、尿、脳脊髄液、糞便、および感染または炎症部位における組織滲出液を含む体液からも得ることができる。ＤＮＡは、当該技術分野において標準的な多数の方法のいずれかを用いて細胞源または体液から抽出される。ＤＮＡを抽出するために用いられる特定の方法は、起源の性質に依存すると解される。ＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１遺伝子における多型部位における抽出されたＤＮＡの配列の決定は、直接的配列決定、対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーション、対立遺伝子特異的ＰＣＲ、リガーゼＰＣＲ、ＨＯＴ切断、変性勾配ゲル電気泳動（ＤＤＧＥ）、および一本鎖コンホメーション多型性（ＳＳＣＰ）を含むが、これらに限定されない当該技術分野において知られたあらゆる手段によって達成される。直接的配列決定は、非限定的に、マクサム−ギルバート法を用いた化学的配列決定；サンガー法を用いた酵素学的配列決定；質量分析配列決定；およびチップベース技術(chip-based technology)を用いた配列決定を含むあらゆる方法によって達成されてもよい。例えば、Little ら，Genet．Anal．6:151，1996参照。好ましくは、患者のＤＮＡは、最初に、特異的な増幅プライマーを用いてポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって増幅される。別の実施態様では、バイオプシー組織が患者から得られる。異なる多型形態ＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１間を区別することができる抗体は、抗体によって特定された多型形態の存在または不在を調べるために組織のサンプルに適用される。抗体はポリクローナルまたはモノクローナルであってもよいが、好ましくはモノクローナルである。細胞に結合する特異的抗体の測定は、例えば、定量的フローサイトメトリー、もしくは酵素結合または蛍光結合イムノアッセイのような既知の方法によって達成されてもよい。特定の多型性または多型パターンの存在または不在、およびその対立遺伝子分布（すなわち、ホモ接合対ヘテロ接合）は、患者から得られた値と、既知の多型パターンを備える患者の集団から確立された標準とを比較することによって調べられる。別の実施態様では、ＲＮＡは、グアニジウムチオシアナート−フェノール−クロロホルム抽出（Chomocyznskiら，1987，Anal．Biochem.，162:156）のような当業者に周知の標準的な方法を用いてバイオプシー組織から単離される。単離されたＲＮＡは、特定のオリゴヌクレオチドプライマーを用いて、ポリメラーゼ連鎖反応による組み合わされた逆転写および増幅（ＲＴ−ＰＣＲ）が行われる。プライマーアニーリングの条件は、確実に特異的逆転写および増幅するように選択され；増幅産物の出現は、特定の対立遺伝子の存在の特徴である。別の実施態様では、ＲＮＡは、逆転写および増幅され、その後に増幅配列が例えば直接的配列決定によって同定される。本発明を実施する際に、心臓疾患状態の特定のマーカーを示す多数の個人の多型パターンの分布が、上記方法のいずれかによって調べられ、かつ、年齢、人種的起源、および／または別のあらゆる統計的または医学的関連パラメーターが適合し、質的または量的に種々の状態マーカーを示す患者の多型パターンの分布と比較される。対比は、名目上の論理的回帰または標準最小二乗回帰分析を含む、当該技術分野において知られたあらゆる方法を用いて達成される。この方法では、特定の多型パターンと特定の心臓血管状態との間の、統計学的に重要な相関関係を確立することが可能である。さらに、特定の多型パターンと、例えば、特定の治療方法から生じるような心臓血管状態における変化との間の統計学的に重要な相関関係を確立することも可能である。この方法では、多型パターンと、特定の治療に対する反応性とを相関させることが可能である。ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１をコードする遺伝子における多型部位本発明に含まれるＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１をコードする遺伝子の多型部位は、集団の個人の多型性におけるＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１遺伝子の全てまたは一部のＤＮＡ配列を決定することによって同定される。ＤＮＡ配列の決定は、例えば化学的または酵素学的配列決定を含むあらゆる慣例的な方法を用いて達成されてもよい。本発明の多型部位は、非限定的に、以下に記載されたものを含み、付された番号は表１に掲載されたGenbank配列に対応する。（i）ＡＣＥ：５１０６、５３４９、および５４９６と番号が付された制御領域の部位（ＡＣＲと称する）；３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたコード領域中の部位（ＡＣＥと称する）；および、GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付された部位１４５１。（ii）ＡＧＴ：３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２、１２０４および１２１８と番号が付された制御領域中の部位（ＡＧＲと称する）；２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたコード領域中の部位（ＡＧＴと称する）；および、Genban kエントリーＭ２４６８８において番号が付された部位４９。（iii）ＡＴ１：１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号が付された制御領域中の部位（ＡＴＲと称する）；および４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたコード領域中の部位（ＡＴ１と称する）。好ましい実施態様では、上記多型部位のそれぞれの配列は、以下を含む。（i）ＡＣＥ制御領域：５１０６Ｃ、５１０６Ｔ、５３４９Ａ、５３４９Ｔ、５４９６Ｔ、および５４９６Ｃ；（ii）ＡＣＥコード領域：３７５Ａ、３７５Ｃ、５８２Ｃ、５８２Ｔ、７３１Ａ、７３１Ｇ、１０６０Ｇ、１０６０Ａ、１２１５Ｃ、１２１５Ｔ、２１９３Ｇ、２１９３Ａ、２３２８Ａ、２３２８Ｇ、２７４１Ｇ、２７４１Ｔ、３１３２Ｃ、３１３２Ｔ、３３８７Ｔ、３３８７Ｃ、３５０３Ｇ、３５０３Ｃ、３９０６Ｇ、および３９０６Ａ；および、GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたヌクレオチド１４５１−１７８３の欠失；（iii）ＡＧＴ制御領域：３９５Ｔ、３９５Ａ、４１２Ｃ、４１２Ｔ、４３２Ｇ、４３２Ａ、４４９Ｔ、４４９Ｃ、６９２Ｃ、６９２Ｔ、８３９Ｇ、８３９Ａ、１００７Ｇ、１００７Ａ、１０７２Ｇ、１０７２Ａ、１２０４Ｃ、１２０４Ａ、１２１８Ａ、１２１８Ｇ；（iv）ＡＧＴコード領域：２７３Ｃ、２７３Ｔ、６２０Ｃ、６２０Ｔ、８０３Ｔ、８０３Ｃ、９１２Ｃ、９１２Ｔ、９９７Ｇ、９９７Ｃ、１１１６Ｇ、１１１６Ａ、１１７４Ｃおよび１１７４Ａ；GenbankエントリーＭ２４６８８の４９位のＡまたはＧ；（v）ＡＴ１制御領域：１４２７Ａ、１４２７Ｔ、１７５６Ｔ、１７５６Ａ、１８５３Ｔ、１８５３Ｇ、２０４６Ｔ、２０４６Ｃ、２３５４Ａ、２３５４Ｃ、２３５５Ｇ、２３５５Ｃ、２４１５Ａおよび２４１５Ｇ；かつ、（vi）ＡＴ１コード領域：４４９Ｇ、４４９Ｃ、６７８Ｔ、６７８Ｃ、１１６７Ａ、１１６７Ｇ、１２７１Ａおよび１２７１Ｃ。個人は、特定の多型部位のホモ接合またはヘテロ接合であってもよい（例えば、以下の表６を参照）。本発明に係るＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１遺伝子における一つ以上の多型性を含む多型パターンの非限定的な例は、ＡＣＲ５３４９Ａ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＲ５４９６Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＲ５４９６Ｃ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ｃ、ＡＣＥ２３２８Ｇ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ；ＡＣＥ１２１５Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＣＥ３９０６Ａ／Ｇ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＴ１６７８Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１６７８Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２１８Ａ、ＡＧＴ８０３Ａ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＲ１２０４Ｃ；およびＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ａを含み、これらは心臓血管疾患の臨床的徴候の増大した原因と相関する。単離された多型核酸、プローブおよびベクター本発明は、ヒトＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１遺伝子に関する上記多型部位を含む単離された核酸；当該核酸を含むベクター；および当該ベクターを含むトランスフォームされた宿主細胞を提供する。また、本発明は、これらの多型性を検出するために用いられるプローブを提供する。本発明を実施する際に、分子生物学、微生物学、および組み換えＤＮＡにおける多くの慣例的な技術が用いられる。このような技術は、周知であり、例えば、 Sambrookら，1989，Holecular Cloning:A Laboratory Manual，Second Edition ，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，New York;DNAC loning:A Practical Approach，Volumes IとII，1985（D．N．Glover ed．）;Ol igonucleotide Synthesis，1984，(M.L.Gait ed.);Nucleic Acid Hybridization ，1985，(HamesとHiggins);Ausubelら，Current Protocols in MolecularBiolog y，1997，(John WileyとSons);およびHethods in Enzymology Vol．1 54とVol.155(それぞれ、WuとGrossman，およびWu，eds.)に完全に説朋されている。ベクターへの本発明の配列を含む核酸（通常はＤＮＡ）の挿入は、ＤＮＡとベクターの両方の末端が適合する制限部位を有する場合に容易に行われる。もしこれを行うことができない場合には、平滑末端を生じるために、制限エンドヌクレアーゼ切断によって産生された一本鎖ＤＮＡオーバーハングを切断することによりＤＮＡおよび／またはベクターの末端を修飾する必要、または、適切なＤＮＡポリメラーゼで一本鎖末端を満たすことによって同じ結論を得る必要があるかもしれない。あるいは、所望のあらゆる部位が、例えば、末端にヌクレオチド配列（リンカー）をリゲートすることによって作製されてもよい。このようなリンカーは、所望の制限部位を定義する特定のオリゴヌクレオチド配列を含んでもよい。制限部位は、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）の使用によっても産生することができる。例えば、Saikiら，1988，Science 239:48を参照。切断されたベクターとＤＮＡフラグメントは、必要であればホモポリマーテーリングによって修飾されてもよい。核酸は細胞から直接単離されてもよく、既知の方法を用いて化学的に合成されてもよい。あるいは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）法は、鋳型として、化学的に合成された鎖またはゲノム物質を用いて本発明の核酸を産生するために用いられる。ＰＣＲに用いられるプライマーは、ここに記載された配列情報を用いて合成することができ、さらに、必要であれば組み換え発現用の所定のベクターへの取り込みを容易にするために、適切な新たな制限部位を導入するように設計することができる。本発明の核酸は、天然のＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子配列が隣接してもよく、プロモーター、エンハンサー、応答成分、シグナル配列、ポリアデニレーション配列、イントロン、５’−および３’−非コード領域等を含む異種配列と結合してもよい。核酸は、当該技術分野において知られた多くの手段によって修飾されてもよい。このような修飾の非限定的な例は、メチル化、“キャップ”、アナログを用いた一つ以上の天然に生じたヌクレオチドの置換、例えば非チャージ結合（例えば、メチルホスホナート、ホスホトリエステル、ホスホロアミダート、カルバマート等）およびチャージ結合（例えば、ホスホロチオアート、ホスホロジチオアート等）を有するもののようなヌクレオチド間修飾を含む。核酸は、例えば、タンパク（例えば、ヌクレアーゼ、トキシン、抗体、シグナルペプチド、ポリ−Ｌ−リシン等）、挿入剤（例えば、アクリジン、ソラレン等）、キレート剤（例えば、金属、放射性金属、鉄、酸化金属等）およびアルキル化剤のような一つ以上の付加的な共有結合分子を含んでもよい。ＰＮＡも含まれる。核酸は、メチルまたはエチルホスホトリエステルあるいはアルキルホスホルアミダート(phosphoramidate)結合の形成によって誘導されてもよい。さらに、本発明の核酸配列は、直接または間接的に検出可能なシグナルを提供することができるラベルで修飾されてもよい。典型的なラベルは、ラジオアイソトープ、蛍光分子、ビオチン等を含む。また本発明は、開示されたＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１誘導遺伝子配列もしくはその誘導体またはフラグメントを含む核酸ベクターを提供する。プラスミドと真菌のベクターを含む多数のベクターは、種々の原核性および真核性宿主における複製および／または発現について記載されており、遺伝子治療、並びに簡単なクローニングまたはタンパク発現のために用いられてもよい。適切なベクターの非限定的な例は、ここに記載または引用された方法もしくは関連する技術分野の当業者に知られた方法を用いて、ｐＵＣプラスミド、ｐＥＴプラスミド（Novage n，Inc.，Madison，WI）もしくは、ｐＲＳＥＴまたはｐＲＥＰ（Invitrogen，Sa n Diego，CA）、並びに多くの適切な宿主細胞を含む。ベクター／宿主の特定の選択は、本発明の実施に重要なものではない。適切な宿主細胞は、電気穿孔法、ＣａＣｌ₂媒介ＤＮＡ取り込み、真菌またはウイルス感染、微量注入、微量射出または他の確立された方法を含む適切なあらゆる方法によって適切にトランスフォーム／トランスフェクト／感染されてもよい。適切な宿主細胞は、細菌、原始細菌(archebacteria)、真菌、特に酵母、および植物および動物細胞、特に哺乳動物細胞を含む。多数の転写開始および終結制御領域が単離され、種々の宿主における異種タンパクの転写および翻訳に効果的であることが示された。これらの領域の例、単離方法、操作方法等は、当該技術分野において知られている。適切な発現条件下では、宿主細胞は、組み換えによって生成されたＡＣＥ−、ＡＧＴ−またはＡＴ１−誘導ペプチドおよびポリペプチドの出所として用いることができる。また、ＡＣＥ−、ＡＧＴ−またはＡＴ１−誘導遺伝子配列をコードする核酸が組み換えによって細胞中に導入されてもよい。例えば、このような配列を細胞に導入することができ、それによってその遺伝子と実質的に同じ内在性遺伝子の部位または配列において相同的組み換えが生じる。また、非相同的組み換えまたは相同的組み換えによる丙因性遺伝子の除去のような別の組み換えをベースとする方法が使用されてもよい。本発明の核酸は、遺伝的多型性の検出用プローブとしての使用、並びに、正常または変異体ＡＣＥ−、ＡＧＴ−、またはＡＴ１−誘導ペプチドまたはポリペプチドの組み換え生成のための鋳型としての使用を見出す。本発明に係るプローブは、非限定的に、約１０−１００ｂｐ、好ましくは１５ −７５ｂｐ、最も好ましくは１７−２５ｐｂの長さの単離された核酸を含み、このプローブは、高度の厳密（ストリンジェント）性で、ここに記載された一つ以上のＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子誘導多型配列、または多型部位に隣接する配列にハイブリダイズする。さらに、一部の実施態様において、全長の遺伝子配列がプローブとして用いられてもよい。一連の実施態様において、プローブは、上記ＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子の多型部位にまたがる。別の一連の実施態様においては、プローブは、多型部位に隣接する配列に対応する。多型ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１ポリペプチドおよび多型性特異的抗体本発明は、上記多型部位を含むＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１をコードする単離されたペプチドおよびポリペプチドを含む。好ましい実施態様においては、ペプチドおよびポリペプチドは、心臓血管剤を同定するための使用可能な選別ターゲットである。別の好ましい実施態様では、ペプチドおよびポリペプチドは、多型部位を含むポリペプチドと特異的に反応し、かつ、そのポリペプチドを前記部位に異なる配列を有する別のポリベブチドから区別する抗体を適切な宿主動物において誘導することができる。本発明に係るポリペプチドは、好ましくは少なくとも５残基以上の長さ、さらに好ましくは少なくとも１５残基である。これらのポリペプチドを得る方法は、以下に記載されている。タンパク生化学および免疫学における多くの慣例的な技術を用いることができる。係る技術は周知であり、Immunochemical Methods in Cell and Molecular Biology，1987(MayerとWaler，eds;Academic Press，Londo n);Scopes，1987，Protein Purification:Principles and Practice,Second Edi tion（Springer-Verlag，N.Y.）およびHandbook of Experimental Immunology， 1986，Volumes I-IV(WeirとBlackwell eds.)に説明されている。タンパクをコードする配列を含む核酸は、完全な細胞または細胞を含まない翻訳システムにおいてＡＣＥ−、ＡＧＴ、またはＡＴ１−誘導ポリペプチドの組み換え発現を指示するために用いることができる。所望により所定の宿主生物におけるより効率的な発現をするように設計された既知の遺伝コードは、所望のアミノ酸配列をコードするオリゴヌクレオチドを合成するために用いることができる。このポリペプチドは、適切なタンパクコード配列が導入および発現されたヒト細胞、または異種生物または細胞（細菌、真菌、昆虫、植物および哺乳動物細胞を含むが、これらに限定されない）から単離されてもよい。さらに、ポリペプチドは組み換え融合タンパクの一部であってもよい。ペプチドおよびポリペプチドは、非限定的に、排除的固相合成法、部分的固相法、断片濃縮または古典的溶液合成を含む商業的に入手できる自動化された方法によって化学的に合成されてもよい。ポリペプチドは、好ましくはMerrifield， 1963，J．Am．Chem．Soc．85:2149に記載された固相ペブチド合成によって調製される。ポリペプチド精製の方法は、当該技術分野において周知であり、非限定的に、調製用ディスクーゲル電気泳動、等電点電気泳動、ＨＰＬＣ、逆相ＨＰＬＣ、ゲルろ過、イオン交換および分配クロマトグラフィー、および向流分配を含む。一部の目的のために、タンパクが、非限定的に、ポリヒスチジン配列のような精製を容易にする付加的配列タグを含むような組み換えシステムにおいて、ポリペプチドを生成することが好ましい。ポリペプチドは、適切な固相マトリックスにおけるクロマトグラフィーによって宿主細胞の粗製の溶解物から精製することができる。あるいは、ＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１、もしくはこれらから誘導されたペプチドに対して生成された抗体は、精製試薬として使用することができる。別の精製方法も可能である。本発明は、ポリペプチドの誘導体および相同体も含む。一部の目的のために、ペプチドをコードする核酸配列は、機能的に等価な分子、すなわち機能保存変異体を提供する置換、付加、または欠失によって変更されてもよい。例えば、配列内部の一つ以上のアミノ酸残基は、例えば正に帯電したアミノ酸（アルギニン、リシン、およびヒスチジン）；負に帯電したアミノ酸（アスパラギン酸塩およびグルタミン酸塩）；極性中性アミノ酸；および非極性アミノ酸のような類似した特性の別のアミノ酸によって置換することができる。単離されたポリペプチドは、例えば、リン酸化、硫酸化、アシル化または別のタンパク修飾によって修飾されてもよい。また、非限定的に、ラジオアイソトープおよび蛍光化合物を含む、直接または間接的に検出可能なシグナルを提供することができるラベルを用いて修飾されてもよい。また、本発明は、本発明の多型部位を特異的に認識し、その部位に異なる配列を含むものから特定の多型性を含むペプチドまたはポリペプチドを区別する抗体を含む。このような本発明に係る多型部位特異的抗体は、ポリクローナルおよびモノクローナル抗体を含む。抗体は、ＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１誘導免疫原性成分を用いて免疫することにより動物宿主中に誘導されてもよく、また、免疫細胞のインビトロにおける免疫によって形成されてもよい。抗体を誘導するために用いられる免疫原性成分は、ヒト細胞から単離されてもよく、また組み換えシステムにおいて産生されてもよい。抗体は、適切な抗体をコードするＤＮＡを用いてプログラムされた組み換えシステムにおいて産生されてもよい。あるいは、抗体は、精製された重鎖および軽鎖の生化学的再構成によって構成されてもよい。この抗体は、ハイブリッド抗体（すなわち、二つのセットの重鎖／軽鎖の組み合わせを含み、それぞれが異なる抗原を認識する）、キメラ抗体（すなわち、重鎖、軽鎖、あるいはその両方が融合タンパクである）、および一価抗体（すなわち、第二重鎖の定常領域に結合した重鎖／軽鎖複合体からなる）を含む。抗体のＦａｂ’およびＦ（ａｂ）₂フラグメントを含むＦａｂフラグメントも含まれる。全ての上記のタイプの抗体および誘導体の産生方法は、当該技術分野において周知であり、以下により詳細に記載する。例えば、ポリクローナル抗血清を産生および処理するための技術は、MayerとWalker，1987，Immunochemical Methods in C ell and Molecular Biology，(Academic Press，London)に記載されている。ハイブリドーマによるモノクローナル抗体の作製のための一般的な方法は周知である。不死の抗体産生細胞系は、細胞融合によって、並びに、腫瘍ＤＮＡを用いたＢリンパ球の直接的トランスフォーメーション、またはエプスタイン-バーウイルスを用いたトランスフェクションのような別の技術によって製造することができる。例えば、Schreierら，1980，Hybridoma Techniques;U.S.Patent Nos．434 1761;4399121;4427783;4444887;4466917;4472500;4491632;および4493890を参照。ＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１−誘導エピトープに対して産生された一群のモノクローナル抗体は、種々の特性、すなわちアイソタイプ、エピトープ親和性等について選別することができる。本発明の抗体は、非限定的に、調製用ディスクーゲル電気泳動、等電点電気泳動、ＨＰＬＣ、逆相ＨＰＬＣ、ゲルろ過、イオン交換および分配クロマトグラフィー、および向流分配を含む標準的な方法によって精製することができる。抗体の精製方法は、例えば、The Artof Antibody Purification，1989，Amicon Divi sion，W.R．Grace & Co.に開示されている。一般的なタンパク精製法は、Protei n Purification:Principles and Practice，R.K.Scopes，Ed.，1987，Springer- Verlag，New York，NYに記載されている。開示された配列の免疫原性能、および得られた配列特異的抗体と免疫細胞の特徴を調べる方法は、当該技術分野において周知である。例えば、特定の多型配列を含むペプチドに応答して誘導された抗体は、多型配列を特異的に認識する能力、すなわち、多型配列を含むペプチドまたはポリペプチドに特異的に結合し、かくして同じ部位に異なる配列を含む類似のペプチドまたはポリペプチドからそれを区別する能力について試験することができる。診断方法およびキット本発明は、個人のＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１遺伝子内の多型部位における配列を決定するためのキットを提供する。このキットは、一つ以上の多型部位における配列を決定するための手段を含み、多型パターンの分析のためのデータを任意に含んでもよい。配列決定のための手段は、適切な核酸をベースとする免疫学的試薬を含んでもよい（以下参照）。好ましくは、このキットは、適切なバッファー、適切なコントロール試薬、多型部位の配列を調べるための説明書も含む。このキットは、特定の多型パターンと望ましい処置法または別の指標との関係に関するデータも含む。核酸をベースとする診断方法およびキット：本発明は、生物学的サンプルにおける多型パターンを検出するための核酸をベースとする方法を提供する。ＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１をコードする遺伝子の特定の多型部位における配列は、非限定的に、多型性特異的プローブを用いたハイブリダイゼーションと直接的配列決定を含む、当該技術分野において知られたあらゆる適切な手段を用いて調べられる。また、本発明は、核酸をベースとする診断的適用に適したキットを提供する。ある実施態様では、診断キットは、以下の成分を含む：（i）プローブＤＮＡ：プローブＤＮＡは、予め標識されていてもよく、また、プローブＤＮＡは末標識であって、標識化のための成分がそのキットの別個の容器中に含まれていてもよい；および（ｉｉ）ハイブリダイゼーション試薬：このキットは、適切であれば固相マトリックスおよび標準を含む、特定のハイブリダイゼーションプロトコルに必要な別の適切に収容された試薬および材料を含んでもよい。別の実施態様では、診断キットは、（i）配列決定プライマー：配列決定プライマーは、予め標識されていても、親和的精製または付着分子を含んでいてもよい；および（ii）配列決定試薬：を含む。このキットは、特定の配列決定プロトコルに必要な別の適切に収容された試薬および物質を含んでもよい。好ましい実施態様の一つでは、このキットは、ＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ａの多型部位に隣接する配列に対応する一群の配列決定プライマー、並びに、各多型配列の存在を検出するための手段を含む。抗体をベースとする診断方法およびキット：本発明は、生物学的サンプルにおける多型パターンを検出するための抗体をベースとする方法も提供する。この方法は、（i）安定な抗原−抗体複合体が抗体とサンプル中の抗原性成分との間に形成される条件下で、各抗体調製物がＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１の特定の多型形態に特異的である一つ以上の抗体調製物とサンプルとを接触させる工程；および（ii）複合体の検出がサンプルにおける特定の多型形態の存在を示す、当該技術分野で知られたあらゆる適切な手段を用いて工程（i）で形成された抗原−抗体複合体を検出する工程を含む。典型的に、イムノアッセイは、標識された抗体か標識された抗原性成分（例えば、抗体に対する結合についてサンプル中の抗原と競合するもの）のいずれかを用いる。適切な標識は、非限定的に、酵素をベースとする、蛍光、化学発光、放射活性または染料分子を含む。例えば、ビオチンとアビジンを利用するもの、およびＥＬＩＳＡアッセイのような酵素標識イムノアッセイのような、プローブからのシグナルを増幅するアッセイも知られている。また、本発明は、抗体をベースとする診断的適用に適したキットを提供する。診断キットは、典型的に以下の一つ以上の成分を含む：（i）多型性特異的抗体：抗体は、予め標識されていてもよく、また、抗体は未標識であって、標識化のための成分がキットの別個の容器中に含まれてもよく、あるいは、第二の標識化抗体が提供される；および（ii）反応成分：このキットは、適切であれば固相マトリックスおよび標準を含む、特定のイムノアッセイプロトコルに必要な別の適切に収容された試薬および物質を含んでもよい。上記のキットは、試験を行うための説明書を含んでもよい。さらに、好ましい実施態様においては、診断キットは高処理能力および／または自動操作に適合するものである。薬剤ターゲットおよび選別方法本発明に従って、ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１をコードする遺伝子から誘導されたヌクレオチド配列と、ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１ポリベブチドから誘導されたペプチド配列、特に一つ以上の多型配列を含むものは、心臓血管剤、すなわち心臓血管疾患の一つ以上の臨床的徴候を処置するのに効果的な化合物を同定するのに使用できるターゲットを含む。薬剤ターゲットは、非限定的に、（i）ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１をコードする遺伝子から誘導された単離された核酸、および（ii）ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１ポリペプチドから誘導された単離されたペプチドおよびポリペプチドを含み、いずれも一つ以上の多型部位を含む。インビトロ選別方法：一連の実施態様において、一つ以上の多型部位を含む単離された核酸は、配列特異的に試験化合物を結合する能力についてインビトロで試験される。この方法は：（i）多型部位に特定の配列を含む第一の核酸と、前記多型部位の異なる配列を除いて第一の核酸の配列と同一である第二の核酸とを提供し：（ii）結合に適した条件下で、当該核酸と多数の試験化合物とを接触させ；かつ（iii）第一または第二の核酸配列に選択的に結合する化合物を同定することを含む。ここで用いられる選択的結合は、例えば、結合親和性、結合能力等のような結合のあらゆるパラメーターにおけるあらゆる測定可能な差異を指す。別の一連の実施態様では、一つ以上の多型部位を含む単離されたペプチドまたはポリペプチドは、配列特異的な方法で試験化合物を結合する能力についてインビトロで試験される。配列決定方法は、（i）多型部位において特定の配列を含む第一のペプチドまたはポリペプチドと、前記多型部位の異なる配列を除いて配列が第一のペプチドまたはポリペプチドと同一である第二のペプチドまたはポリペプチドを提供し；（ii）結合に適した条件下で、前記ポリペプチドと多数の試験化合物とを接触させ；かつ、（iii）核酸配列の一つに選択的に結合する化合物を同定することを含む。好ましい実施態様において、高処理能力選別プロトコルは、配列特異的に上記遺伝子またはペプチドを結合する能力について、大量の試験化合物を調べるために用いられる。試験化合物は、合成または天然の化合物の巨大なライブラリーから選別される。現在、多数の手段が、糖、ペプチドおよび核酸をベースとする化合物のランダムおよび方向性のある合成のために用いられている。合成化合物ライブラリーは、Maybridge Chemical Co．(Trevillet，Cornwall，UK)，Comgenex(Princeton， NJ)，Brandon Associates(Merrimack，NH)およびMicrosource(New Milford，CT) から商業的に入手できる。微量化学ライブラリーは、Aldrich(Hilwaukee，WI)から入手できる。あるいは、細菌、真菌、植物および動物抽出物の形態の天然化合物のライブラリーは、例えばPan Laboratories(Bothell，WA)またはMycoSearch( NC)から入手することができ、あるいは容易に製造できる。さらに、天然および合成により製造されたライブラリーおよび化合物は、慣例的な化学的、物理的および生化学的手段を介して容易に修飾される。インビボ選別方法：ＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１をコードする遺伝子の多型変異体を発現する完全な細胞または完全な動物は、候補の心臓血管剤を同定する選別方法において用いることができる。一連の実施態様では、永久細胞系は、特定の多型パターンを示す個人から確立される。あるいは、細胞（非限定的に、哺乳動物、昆虫、酵母または細菌細胞を含む）は、適切なＤＮＡの導入により一つ以上の多型配列を含む遺伝子を発現するようにプログラムされる。候補化合物の同定は、非限定的に、（i）ＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１の特定の多型変異体に対する試験化合物の選択的結合を測定するアッセイ；（ii）ＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１の測定可能な活性または機能を修正（すなわち、阻害または増強）する試験化合物の能力を測定するアッセイ；および（iii）ＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子のプロモーター（すなわち、制御）領域から誘導された配列の転写活性を修正（すなわち、阻害または増強）する化合物の能力を測定するアッセイを含む、あらゆる適切なアッセイを用いて行うことができる。別の一連の実施態様では、（i）特定の多型部位において異なる配列を有する一つ以上のヒトＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子がトランスジェニック動物のゲノムに安定に挿入された；および／または（ii）内在性ＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１遺伝子が特定の多型部位において異なる配列を有するヒトＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１遺伝子を用いて不活性化および置換された、トランスジェニック動物が産生される。例えば、Coffman，Semin．Nephrol．17:404 ，1997;Estherら，Lab．Invest．74:953，1996;Murakamiら，Blood Press．Supp l．2:36，1996を参照。このような動物は、候補化合物を用いて処理することができ、心臓血管の状態の一つ以上の臨床的なマーカーについて観察することができる。実施例１：ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１をコードするヒト遺伝子の多型部位の同定方法以下の研究は、ヒトＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１をコードする遺伝子内の多型残基を同定するために行われた。ＤＮＡサンプルは、２７７人から得られた。これらの個人は、１９２０年から１９２４年の間にスウェーデンのウプサラで生まれたカフカス人男性であった。個人は、身体歴に基づいてテスト集団に選択され、すなわち、それぞれ（i）健康、心臓血管疾患の徴候がない者（１００）；または（ii）急性心筋梗塞（６８）、無症状心筋梗塞（３４）、発作（１８）、発作および急性心筋梗塞（１９）、あるいは５０歳で高血圧症（３９）の一つを有する者のいずれかに選択された。ＤＮＡサンプルは各個人から得られた。（i）ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を用いてＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１遺伝子のいずれかの短いフラグメントを増幅すること、および（ii）増幅されたフラグメントを配列決定することによって、ＤＮＡ配列分析を行った。各個人から得られた配列を、既知のＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１ゲノム配列と比較した（表１参照）。（i）増幅：ＰＣＲ反応は、以下の表２に示されたプライマーを用いた。記載されている場合には、プライマーは以下の一つで修飾された：（i）ビオチン分子が記載された配列の５’末端に結合されている（Ｂ）；（ii）Ｍ１３から誘導されたヌクレオチドの配列、５’−ＣＡＧＧＡＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＡＣＴ−３’が記載された配列の５’末端に付加されている（ＭＴ）；あるいは、（ iii）配列５’−ＡＧＴＣＡＣＧＡＣＧＴＴＧＴＡＡＡＡＣＧＡＣＧＧＣＣＡＧＴ−３’が記載された配列の５’末端に付加されている（Ｔ＝テール）。ヌクレオチドは、表１に記載されたGenbank配列に従って番号が付されている。関連する配列が公然と入手できない場合には、以下の例のように番号付けした：記載“ ｉ−４：１−２００”は、プライマー配列が、エキソン４の最初のコードヌクレオチドのすぐ上流のヌクレオチドを含み、かつその２００ｂｐ上流に延びる配列内に位置することを示す。同様に、記載“ｉ＋４：１−２００”は、プライマー配列が、エキソン４の最後のコードヌクレオチドのすぐ下流に位置するヌクレオチドから２００ｂｐ延びる配列内に位置することを示す。いずれの場合にも、プライマー配列の特定の位置が、表２の“ヌクレオチド”と記載された欄に記載されている。ＰＣＲに用いられた反応成分が、以下の表３に記載されている。全てのＰＣＲ産物（フラグメントＡＣＥＤＩ、ＡＴ１−spec.１およびＡＴ１ −spec.２を除く）を、Pharmacia Biotechから商業的に入手できるプロトコルに従って固相配列決定した。配列決定反応は、表２に記載された“テール”配列に相補的な配列を有する配列決定プライマーを用いて行われる。この配列決定プライマーのヌクレオチド配列は、５’−ＣＧＡＣＧＴＴＧＴＡＡＡＡＣＧＡＣＧＧＣＣＡＧＴ−３’であり、このプライマーは５’−ヌクレオチドにＣｙ−５−分子を用いて蛍光標識された。遺伝的変異を有する部位は、Pharmacia Biotechから商業的に入手できるALFexpress^TMシステムの使用によってヌクレオチド配列の決定により同定された。フラグメントＡＣＥＤＩの検出は、増幅されたフラグメントの大きさをゲル電気泳動によって分析することによって行われ、短いＰＣＲ産物（１９２塩基対）の存在は、Ｄ−対立遺伝子を示し、長いＰＣＲ産物（４７９塩基対）はＩ−対立遺伝子を示した。両方のバンドの存在は、二つの対立遺伝子のヘテロ接合体を示した。部位ＡＴ１−１２７１の対立遺伝子特異的反応の検出は、別個に、同一のサンプルに対して二つの並行ＰＣＲ反応を行い、増幅されたフラグメントの大きさを比較することによって行われた。５０１塩基対のＰＣＲ産物が、両方の並行反応における対照として常に存在すべきであるが、ＡＴ１−spec.１と称される反応における３７８塩基対のＰＣＲ産物の存在が、この部位におけるＡの存在を示した。ＡＴ１−spec.２と称される反応における３７８塩基対のＰＣＲ産物の存在は、この部位にＣを示した。短いＰＣＲ産物が両方の反応に存在する場合には、その個人はＡとＣのヘテロ接合体である。結果：上記分析は、ＡＣＥ、ＡＧＴおよびＡＴ１をコードするヒト遺伝子の制御およびコード／イントロンセグメント内の多型部位の同定を可能にした。多型部位、各部位に見出された変異ヌクレオチド、および多型性が同定されたＰＣＲフラグメントが、以下の表６に示されている。９０人の集団における各遺伝子型の頻度も示されており、その遺伝子型を有する研究集団のパーセントとして示されている。ＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１に選択的なアミノ酸を生じる多型性も示されている。以下に用いるように、名称“ＡＧＲ”、“ＡＣＲ”および“ＡＴＲ”は、それぞれ、ヒトＡＧＴ、ＡＣＥ、およびＡＴ１遺伝子の制御領域を指し、名称“ ＡＧＴ”、“ＡＣＥ”および“ＡＴ１”は、ＡＧＴ、ＡＣＥおよびＡＴ１遺伝子のコード領域を指す。これらの多型部位のサブセットは、さらなる１８７人においてさらに分析された。表７は、土記実施例１に記載された２７７人の集団における、多型部位、これらの部位における配列、および各部位の遺伝子型頻度を示す。実施例２：多型パターンと心臓血管疾患との関係実施例１に同定された多型部位を、研究集団：心筋梗塞（ＭＩ）；発作；および高血圧に存在する心臓血管状態の以下のマーカーと相関させた。これらのマーカーの一つ以上と統計学的に有意の相関関係を示す多型パターン、すなわち特定の多型部位における配列の組み合わせが、以下に示されている。先の三つの多型パターンの概要（同じ多型部位を含む）：先の二つの多型パターンの概要：先の三つの多型パターンの概要：先の二つの多型パターンの概要：実施例３：特異的多型パターンと治療反応との間の関係以下の研究は、心臓血管疾患の治療の効力を予想する、ヒトＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１遺伝子における多型パターンを定義するために行われた。第一のグループは４１人、第二のグループは２０人である、二つのグループの高血圧症の患者を研究した。このグループを、独立および組み合わせて分析したこの集団の患者は、以下の５つのＡＣＥインヒビター：カプトプリル、トランドラプリル(Trandolapril)、リジノプリル、フォジノブリル(Fosinopril)またはエナラブリルの一つを用いてそれぞれ処置された。平均動脈血圧に対する薬剤の効果を定量した。平均動脈血圧は、拡張期血圧の２／３＋収縮期血圧の１／３として定義された。また、個人は、“高反応者”、すなわちＡＣＥインヒビター薬剤を用いた治療の間に１６mmHgより多くの低減を示す者、および“低反応者”、すなわち１６mmHgより多くの低減を示さない者として分類された。第一の研究集団の５１％に存在するある特定の多型パターン、ＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ａは、高反応者と低反応者とを区別した。２０人の第二のグループでは、このパターンは優勢でなかったが（２５％）、低減された血圧との相関は明白であった。この多型パターンを有する者（以下“１”と称する）は、この多型パターンを欠失した者（以下“０”と称する）よりも、より大きな血圧の低減を示した。さらに、高反応者と低反応者の配分（定義は上述）は以下の通りであった：これらをまとめると、二つのグループの結果は、この多型パターンの存在が、この多型パターンを持たない個人と比較して６．４−７．３mmHgの増分低減と関係することを示す。この多型パターンの普及率は、この高血圧集団の４１％であった。これは、高血圧患者におけるこの多型パターンについて試験し、この多型パターンを有する患者にのみＡＣＥインヒビターを処方することが、本発明の方法に従って選択された高血圧集団において４３％（一般における高血圧集団の）から７６％まで反応率を増加することができたことを示唆する。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１１年５月２４日（１９９９．５．２４）【補正内容】請求の範囲１．個人の一つ以上のＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子内の一つ以上の多型部位において確立された多型パターンと、心臓血管の治療方法に対して既知の反応を示すヒトの前記と同じ多型部位の多型パターンとを比較することを含む、ヒト個人の心臓血管症候群の治療方法に対する反応性を評価する方法。２．治療方法が、食事、ライフスタイル、および／または運動における変更；侵襲性または非侵襲性の外科的技術；もしくは、薬学的介入である、請求項１記載の方法。３．前記症候群が、心筋梗塞、高血圧、アテローム硬化症および発作からなる群から選択された、請求項１記載の方法。４．前記治療方法が薬学的介入である、請求項２記載の方法。５．前記治療方法が、ＡＣＥインヒビター、アンギオテンシンIIレセプターアンタゴニスト、利尿薬、アルファーアドレノレセプターアンタゴニスト、強心配糖体、ホスホジエステラーゼインヒビター、ベータ−アドレノレセプターアンタゴニスト、カルシウムチャネルブロッカー、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼインヒビター、イミダゾリンレセプターブロッカー、エンドセリンレセプターブロッカー、および有機亜硝酸塩からなる群から選択された心臓血管剤の投与を含む、請求項４記載の方法。６．前記多型部位が、ＡＣＥ２１９３、ＡＧＲ１０７２およびＡＴ１１１６７を含む、請求項５記載の方法。７．前記多型パターンが、ＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／ＧおよびＡＴ１１１６７Ａ／Ａを含む、請求項６記載の方法。８．（ａ）コード領域の部位２１９３におけるＡＣＥ遺伝子；（ｂ）制御領域の部位１０７２におけるＡＧＴ遺伝子；コード領域の部位１１６７におけるＡＴ１遺伝子の配列を決定することによって確立された多型パターンと、ＡＣＥインヒビターに対して種々の反応性を示すヒトの前記多型パターンとを比較することを含む、ＡＣＥインヒビターを用いて処置するために、心臓血管症候群の患者の反応を予測するための、請求項１記載の方法。９．前記多型パターンが、ＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ａを含む、請求項８記載の方法。１０．多型部位が、５１０６、５３４９、および５４９６と番号が付されたＡＣＥ制御領域の部位；３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中の部位；および、GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたＡＣＥ遺伝子の部位１４５１；３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２、１２０４および１２１８と番号が付されたＡＧＴ制御領域中の部位；２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたＡＧＴコード領域中の部位；Genb ankエントリーＭ２４６８８において番号が付されたＡＧＴ遺伝子の部位４９；１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号が付されたＡＴ１制御領域中の部位；４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたＡＴ１コード領域中の部位；並びに土記いずれかの組み合わせからなる群から選択された、請求項１記載の方法。１１．多型パターンが、ＡＣＥ５３４９Ａ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＥ５４９６Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ５４９６Ｃ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ｃ、ＡＣＥ２３２８Ｇ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ；ＡＣＥ１２１５Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＣＥ３９０６Ａ／Ｇ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＴ１６７８Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１６７８Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２１８Ａ，ＡＧＴ８０３Ａ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＲ１２０４Ｃ；およびＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ａからなる群から選択された、請求項１０記載の方法。１２．核酸が多型部位を含み、前記多型部位の存在から、単独で、あるいはヒトＡＣＥの配列または一つ以上の別のヒト遺伝子における別の多型部位と組み合わせて、心臓血管症候群の治療方法に対する個人の反応性を予測する、個人においてＡＣＥをコードする単離された核酸。１３．核酸が多型部位を含み、前記多型部位の存在から、単独で、あるいはヒトＡＧＴの配列または一つ以上の別のヒト遺伝子における別の多型部位と組み合わせて、心臓血管症候群の治療方法に対する個人の反応性を予測する、個人においてＡＧＴをコードする単離された核酸。１４．核酸が多型部位を含み、前記多型部位の存在から、単独で、あるいはヒトＡＴ１の配列または一つ以上の別のヒト遺伝子における別の多型部位と組み合わせて、心臓血管症候群の治療方法に対する個人の反応性を予測する、個人においてＡＴ１をコードする単離された核酸。１５．５１０６と番号が付された制御領域中の部位；３７５、５８２、７３１、１０６０、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたコード領域中の部位；および上記いずれかの組み合わせからなる群から選択された多型部位を含む、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）をコードするヒト遺伝子から誘導された単離された核酸。１６．制御領域における多型部位の配列が、５１０６Ｃおよび５１０６Ｔからなる群から選択され；かつ、コード領域における多型部位の配列が、GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付された、３７５Ａ、３７５Ｃ、５８２Ｃ、５８２Ｔ、７３１Ａ、７３１Ｇ、１０６０Ｇ、１０６０Ａ、２７４１Ｇ、２７４１Ｔ、３１３２Ｃ、３１３２Ｔ、３３８７Ｔ、３３８７Ｃ、３５０３Ｇ、３５０３Ｃ、３９０６Ｇ、３９０６Ａからなる群から選択された、請求項１５記載の核酸。１７．請求項１５に記載された多型部位に高い厳密性でハイブリダイズするプローブ。１８．３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２および１２０４と番号が付された制御領域中の部位；２７３、９１２、９９７、１１１６、１１７４と番号が付されたコード領域中の部位、および、Genbank エントリーＭ２４６８８の部位４９；並びに上記のいずれかの組み合わせからなる群から選択された多型部位を含む、アンギオテンシノゲン（ＡＧＴ）をコードするヒト遺伝子を含む単離された核酸。１９．制御領域における多型部位の配列が、３９５Ｔ、３９５Ａ、４１２Ｃ、４１２Ｔ、４３２Ｇ、４３２Ａ、４４９Ｔ、４４９Ｃ、６９２Ｃ、６９２Ｔ、８３９Ｇ、８３９Ａ、１００７Ｇ、１００７Ａ、１０７２Ｇ、１０７２Ａ、１２０４Ｃおよび１２０４Ａからなる群から選択され；コード領域における多型部位の配列が、２７３Ｃ、２７３Ｔ、９１２Ｃ、９１２Ｔ、９９７Ｇ、９９７Ｃ、１１１６Ｇ、１１１６Ａ、１１７４Ｃおよび１１７４Ａからなる群から選択され、Ge nbankエントリーＭ２４６８８の４９位がＡまたはＧである、請求項１８記載の核酸。２０．請求項１８に記載された多型部位に高い厳密性でハイブリダイズするプローブ。２１．１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号が付された制御領域中の部位；４４９と番号か付されたコード／イントロン領域中の部位；およびこれらの組み合わせからなる群から選択された多型部位を含む、Ｉ型アンギオテンシンIIレセプター（ＡＴ１）をコードするヒト遺伝子を含む単離された核酸。２２．制御領域における多型部位の配列が、１４２７Ａ、１４２７Ｔ、１７５６Ｔ、１７５６Ａ、１８５３Ｔ、１８５３Ｇ、２０４６Ｔ、２０４６Ｃ、２３５４Ａ、２３５４Ｃ、２３５５Ｇ、２３５５Ｃ、２４１５Ａおよび２４１５Ｇからなる群から選択され；かつ、コード／イントロン領域における多型部位の配列が、４４９Ｇおよび４４９Ｃからなる群から選択される、請求項２１記載の核酸。２３．請求項２１に記載された多型部位に高い厳密性でハイブリダイズするプローブ。２４．多型部位が、GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたＡＣＥ遺伝子の、５１０６、５３４９、および５４９６と番号が付されたＡＣＥ制御領域中の部位；３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中の部位からなる群から選択された、ヒトＡＣＥ遺伝子内の一つ以上の多型部位を含む核酸のライブラリー。２５．制御領域における多型部位の配列が、５１０６Ｃ、５１０６Ｔ、５３４９Ａ、５３４９Ｔ、５４９６Ｔおよび５４９６Ｃからなる群から選択され；かつ、コード領域における多型部位の配列が、３７５Ａ、３７５Ｃ、５８２Ｃ、５８２Ｔ、７３１Ａ、７３１Ｇ、１０６０Ｇ、１０６０Ａ、１２１５Ｃ、１２１５Ｔ、２１９３Ｇ、２１９３Ａ、２３２８Ａ、２３２８Ｇ、２７４１Ｇ、２７４１Ｔ、３１３２Ｃ、３１３２Ｔ、３３８７Ｔ、３３８７Ｃ、３５０３Ｇ、３５０３Ｃ、３９０６Ｇ、３９０６Ａ、およびGenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたヌクレオチド１４５１−１７８３の欠失からなる群から選択される、請求項２４記載のライブラリー。２６．多型部位が、３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２、１２０４および１２１８と番号が付された制御領域中の部位；２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたコード領域中の部位、および、GenbankエントリーＭ２４６８８において番号が付されたＡＧＴ遺伝子の部位４９からなる群から選択される、ヒトＡＧＴ遺伝子内の一つ以上の多型部位を含む核酸のライブラリー。２７．制御領域における多型部位の配列が、３９５Ｔ、３９５Ａ、４１２Ｃ、４１２Ｔ、４３２Ｇ、４３２Ａ、４４９Ｔ、４４９Ｃ、６９２Ｃ、６９２Ｔ、８３９Ｇ、８３９Ａ、１００７Ｇ、１００７Ａ、１０７２Ｇ、１０７２Ａ、１２０４Ｃ、１２０４Ａ、１２１８Ａ、１２１８Ｇからなる群から選択され；かつ、コード領域における多型部位の配列が、２７３Ｃ、２７３Ｔ、６２０Ｃ、６２０Ｔ、８０３Ｔ、８０３Ｃ、９１２Ｃ、９１２Ｔ、９９７Ｇ、９９７Ｃ、１１１６Ｇ、１１１６Ａ、１１７４Ｃ、１１７４Ａ、およびGenbankエントリーＭ２４６８８の４９位のＡまたはＧからなる群から選択される、請求項２６記載のライブラリー。２８．多型部位が、１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号が付された制御領域中の部位；および４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたコード領域中の部位からなる群から選択される、ヒトＡＴ１遺伝子内の一つ以上の多型部位を含む核酸のライブラリー。２９．制御領域における多型部位の配列が、１４２７Ａ、１４２７Ｔ、１７５６Ｔ、１７５６Ａ、１８５３Ｔ、１８５３Ｇ、２０４６Ｔ、２０４６Ｃ、２３５４Ａ、２３５４Ｃ、２３５５Ｇ、２３５５Ｃ、２４１５Ａおよび２４１５Ｇからなる群から選択され；かつ、コード領域における多型部位の配列が、４４９Ｇ、４４９Ｃ、６７８Ｔ、６７８Ｃ、１１６７Ａ、１１６７Ｇ、１２７１Ａ、および１２７１Ｃからなる群から選択される、請求項２８記載のライブラリー。３０．ＡＣＥ５３４９Ａ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＥ５４９６Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ５４９６Ｃ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ｃ、ＡＣＥ２３２８Ｇ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ；ＡＣＥ１２１５Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＣＥ３９０６Ａ／Ｇ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＴ１６７８Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１６７８Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２１８Ａ、ＡＧＴ８０３Ａ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＲ１２０４Ｃ；およびＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ａからなる群から選択されたメンバーを含む、ヒトＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１遺伝子における多型パターンのライブラリー。３１．多型部位が、３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中のヌクレオチド部位からなる群から選択されたヌクレオチドにコードされる、ＡＣＥポリペプチド配列における一つ以上の多型部位を含む単離されたペプチドを含む、心臓血管剤のターゲットのライブラリー。３２．多型部位が、２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたヌクレオチド部位からなる群から選択されたヌクレオチドにコードされる、ＡＧＴポリペプチドにおける一つ以上の多型部位を含む単離されたペプチドを含む、心臓血管剤のターゲットのライブラリー。３３．多型部位が、４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたヌクレオチド部位からなる群から選択されたヌクレオチドにコードされる、ＡＴ１ポリペプチドにおける一つ以上の多型部位を含む単離されたペプチドを含む、心臓血管剤のターゲットのライブラリー。３４．（i）配列決定プライマー、および（ii）配列決定試薬を含み、前記プライマーが、ヒトＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子の多型部位にハイブリダイズするプライマー；およびヒトＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子の多型部位に隣接してハイブリダイズするプライマーからなる群から選択され、前記多型部位が心臓血管症候群の心臓血管治療方法に対する個人の反応性を予測するものである、心臓血管症候群の治療方法に対する個人の反応性を評価するためのキット。３５．多型部位が、５１０６、５３４９、および５４９６と番号が付されたＡＣＥ制御領域の部位；３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中の部位；GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたＡＣＥ遺伝子の部位１４５１；３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２、１２０４および１２１８と番号が付されたＡＧＴ制御領域中の部位；２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたＡＧＴコード領域中の部位；GenbankエントリーＭ２４６８８において番号が付されたＡＧＴ遺伝子の部位４９；１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号が付されたＡＴ１制御領域中の部位；４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたＡＴ１コード領域中の部位；並びに上記いずれかの組み合わせからなる群から選択された、請求項３４記載のキット。３６．ヒトＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１ポリペプチド内の多型部位に特異的な一つ以上の抗体を含む、心臓血管状態を評価するためのキット。３７．多型部位が、３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中のヌクレオチド部位；２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたＡＧＴコード領域中のヌクレオチド部位；４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたＡＴ１コード領域中の部位；並びに上記いずれかの組み合わせからなる群から選択されたヌクレオチドによってコードされる、請求項３６記載のキット。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 9/12 Ａ６１Ｐ 9/12 Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡＣ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＹ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者リントシュトレーム，ペールハリールトガースウェーデン国エス―756 53 ウップサラスヴァンケールスヴェーゲン 26 アー

Claims

【特許請求の範囲】１．（i）個人の多型パターンを確立するためにその個人の一つ以上のＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子内の一つ以上の多型部位の配列を決定し、かつ（ii）（i）で確立された多型パターンを、心臓血管状態の所定のマーカーを示すヒトの多型パターンと比較することを含む、ヒト個人の心臓血管状態を評価する方法。２．前記所定の状態マーカーが、血圧、心電図プロフィール、および心臓血管症候群の診断からなる群から選択された、請求項１記載の方法。３．前記症候群が、心筋梗塞、高血圧、アテローム硬化症および発作からなる群から選択された、請求項２記載の方法。４．前記所定の状態マーカーが、心臓血管治療方法に対する応答を示す、請求項２記載の方法。５．前記治療方法が、ＡＣＥインヒビター、アンギオテンシンIIレセプターアンタゴニスト、利尿薬、アルファ−アドレノレセプターアンタゴニスト、強心配糖体、ホスホジエステラーゼインヒビター、ベーターアドレノレセプターアンタゴニスト、カルシウムチャネルブロッカー、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼインヒビター、イミダゾリンレセプターブロッカー、エンドセリンレセプターブロッカー、および有機亜硝酸塩からなる群から選択された心臓血管剤の投与を含む、請求項４記載の方法。６．前記一つ以上の多型部位が、ＡＣＥ２１９３、ＡＧＲ１０７２およびＡＴ１１１６７を含む、請求項５記載の方法。７．前記多型パターンが、ＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／ＧおよびＡＴ１１１６７Ａ／Ａを含む、請求項６記載の方法。８．（i）個人の多型パターンを確立するために、（ａ）コード領域における部位２１９３におけるＡＣＥ遺伝子；（ｂ）制御領域における部位１０７２におけるＡＧＴ遺伝子；および（ｃ）コード領域における部位１１６７におけるＡＴ１遺伝子の配列を決定し；かつ、（ii）（i）で確立された多型パターンを、前記ＡＣＥインヒビターに対して種々の反応性を示すヒトの多型パターンと比較することを含む、ＡＣＥインヒビターを用いた治療に対する、心臓血管症候群患者の反応を予測する方法。９．前記多型パターンが、ＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ａを含む、請求項８記載の方法。１０．多型部位が、５１０６、５３４９、および５４９６と番号が付されたＡＣＥ制御領域の部位；３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中の部位；および、GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたＡＣＥ遺伝子の部位１４５１；３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２、１２０４および１２１８と番号が付されたＡＧＴ制御領域中の部位；２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたＡＧＴコード領域中の部位；Genb ankエントリーＭ２４６８８において番号が付されたＡＧＴ遺伝子の部位４９；１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号が付されたＡＴ１制御領域中の部位；４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたＡＴ１コード領域中の部位；並びに上記いずれかの組み合わせからなる群から選択された、請求項１記載の方法。１１．多型パターンが、ＡＣＲ５３４９Ａ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＲ５４９６Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＲ５４９６Ｃ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ｃ、ＡＣＥ２３２８Ｇ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ；ＡＣＥ１２１５Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＣＥ３９０６Ａ／Ｇ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＴ１６７８Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１６７８Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２１８Ａ、ＡＧＴ８０３Ａ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＲ１２０４Ｃ；およびＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ａからなる群から選択された、請求項１０記載の方法。１２．核酸が多型部位を含み、前記多型部位の存在から、単独で、あるいはヒトＡＣＥの配列または一つ以上の別のヒト遺伝子における別の多型部位と組み合わせて、個人の心臓血管状態を予測する、個人においてＡＣＥをコードする単離された核酸。１３．核酸が多型部位を含み、前記多型部位の存在から、単独で、あるいはヒトＡＧＴの配列または一つ以上の別のヒト遺伝子における別の多型部位と紐み合わせて、個人の心臓血管状態を予測する、個人においてＡＧＴをコードする単離された核酸。１４．核酸が多型部位を含み、前記多型部位の存在から、単独で、あるいはヒトＡＴ１の配列または一つ以上の別のヒト遺伝子における別の多型部位と組み合わせて、個人の心臓血管状態を予測する、個人においてＡＴ１をコードする単離された核酸。１５．５１０６と番号が付された制御領域中の部位；３７５、５８２、７３１、１０６０、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたコード領域中の部位；GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付された部位１４５１；および上記いずれかの組み合わせからなる群から選択された多型部位を含む、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）をコードするヒト遺伝子から誘導された単離された核酸。１６．制御領域における多型部位の配列が、５１０６Ｃおよび５１０６Ｔからなる群から選択され；かつ、コード領域における多型部位の配列が、３７５Ａ、３７５Ｃ、５８２Ｃ、５８２Ｔ、７３１Ａ、７３１Ｇ、１０６０Ｇ、１０６０Ａ、２７４１Ｇ、２７４１Ｔ、３１３２Ｃ、３１３２Ｔ、３３８７Ｔ、３３８７Ｃ、３５０３Ｇ、３５０３Ｃ、３９０６Ｇ、３９０６Ａ、およびGenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたヌクレオチド１４５１−１７８３の欠失からなる群から選択される、請求項１５記載の核酸。１７．請求項１５に記載された多型部位に高い厳密性でハイブリダイズするプローブ。１８．３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２および１２０４と番号が付された制御領域中の部位；２７３、９１２、９９７、１１１６、１１７４と番号が付されたコード領域中の部位、および、Genbank エントリーＭ２４６８８の部位４９；並びに上記のいずれかの組み合わせからなる群から選択された多型部位を含む、アンキオテンシノゲン（ＡＧＴ）をコードするヒト遺伝子を含む単離された核酸。１９．制御領域における多型部位の配列が、３９５Ｔ、３９５Ａ、４１２Ｃ、４１２Ｔ、４３２Ｇ、４３２Ａ、４４９Ｔ、４４９Ｃ、６９２Ｃ、６９２Ｔ、８３９Ｇ、８３９Ａ、１００７Ｇ、１００７Ａ、１０７２Ｇ、１０７２Ａ、１２０４Ｃおよび１２０４Ａからなる群から選択され；コード領域における多型部位の配列が、２７３Ｃ、２７３Ｔ、９１２Ｃ、９１２Ｔ、９９７Ｇ、９９７Ｃ、１１１６Ｇ、１１１６Ａ、１１７４Ｃおよび１１７４Ａからなる群から選択され、Ge nbankエントリーＭ２４６８８の４９位がＡまたはＧである、請求項１８記載の核酸。２０．請求項１８に記載された多型部位に高い厳密性でハイブリダイズするブローブ。２１．１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号が付された制御領域中の部位；４４９と番号が付されたコード／イントロン領域中の部位；およびこれらの組み合わせからなる群から選択された多型部位を含む、Ｉ型アンギオテンシンIIレセプター（ＡＴ１）をコードするヒト遺伝子を含む単離された核酸。２２．制御領域における多型部位の配列が、１４２７Ａ、１４２７Ｔ、１７５６Ｔ、１７５６Ａ、１８５３Ｔ、１８５３Ｇ、２０４６Ｔ、２０４６Ｃ、２３５４Ａ、２３５４Ｃ、２３５５Ｇ、２３５５Ｃ、２４１５Ａおよび２４１５Ｇからなる群から選択され；かつ、コード／イントロン領域における多型部位の配列が、４４９Ｇおよび４４９Ｃからなる群から選択される、請求項２１記載の核酸。２３．請求項２１に記載された多型部位に高い厳密性でハイブリダイズするプローブ。２４．多型部位が、５１０６、５３４９、および５４９６と番号が付されたＡＣＥ制御領域中の部位；３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中の部位；並びにGenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたＡＣＥ遺伝子の部位１４５１からなる群から選択された、ヒトＡＣＥ遺伝子内の一つ以上の多型部位を含む核酸のライブラリー。２５．制御領域における多型部位の配列が、５１０６Ｃ、５１０６Ｔ、５３４９Ａ、５３４９Ｔ、５４９６Ｔおよび５４９６Ｃからなる群から選択され；かつ、コード領域における多型部位の配列が、３７５Ａ、３７５Ｃ、５８２Ｃ、５８２Ｔ、７３１Ａ、７３１Ｇ、１０６０Ｇ、１０６０Ａ、１２１５Ｃ、１２１５Ｔ、２１９３Ｇ、２１９３Ａ、２３２８Ａ、２３２８Ｇ、２７４１Ｇ、２７４１Ｔ、３１３２Ｃ、３１３２Ｔ、３３８７Ｔ、３３８７Ｃ、３５０３Ｇ、３５０３Ｃ、３９０６Ｇ、３９０６Ａ、およびGenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたヌクレオチド１４５１−１７８３の欠失からなる群から選択される、請求項２４記載のライブラリー。２６．多型部位が、３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２、１２０４および１２１８と番号が付された制御領域中の部位；２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたコード領域中の部位、および、GenbankエントリーＭ２４６８８において番号が付されたＡＧＴ遺伝子の部位４９からなる群から選択される、ヒトＡＧＴ遺伝子内の一つ以上の多型部位を含む核酸のライブラリー。２７．制御領域における多型部位の配列が、３９５Ｔ、３９５Ａ、４１２Ｃ、４１２Ｔ、４３２Ｇ、４３２Ａ、４４９Ｔ、４４９Ｃ、６９２Ｃ、６９２Ｔ、８３９Ｇ、８３９Ａ、１００７Ｇ、１００７Ａ、１０７２Ｇ、１０７２Ａ、１２０４Ｃ、１２０４Ａ、１２１８Ａ、１２１８Ｇからなる群から選択され；かつ、コード領域における多型部位の配列が、２７３Ｃ、２７３Ｔ、６２０Ｃ、６２０Ｔ、８０３Ｔ、８０３Ｃ、９１２Ｃ、９１２Ｔ、９９７Ｇ、９９７Ｃ、１１１６Ｇ、１１１６Ａ、１１７４Ｃ、１１７４Ａ、およびGenbankエントリーＭ２４６８８の４９位のＡまたはＧからなる群から選択される、請求項２６記載のライブラリー。２８．多型部位が、１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号か付された制御領域中の部位；および４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたコード領域中の部位からなる群から選択される、ヒトＡＴ１遺伝子内の一つ以上の多型部位を含む核酸のライブラリー。２９．制御領域における多型部位の配列が、１４２７Ａ、１４２７Ｔ、１７５６Ｔ、１７５６Ａ、１８５３Ｔ、１８５３Ｇ、２０４６Ｔ、２０４６Ｃ、２３５４Ａ、２３５４Ｃ、２３５５Ｇ、２３５５Ｃ、２４１５Ａおよび２４１５Ｇからなる群から選択され；かつ、コード領域における多型部位の配列が、４４９Ｇ、４４９Ｃ、６７８ＴＮ６７８Ｃ、１１６７Ａ、１１６７Ｇ、１２７１Ａ、および１２７１Ｃからなる群から選択される、請求項２８記載のライブラリー。３０．ＡＣＲ５３４９Ａ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＲ５４９６Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＲ５４９６Ｃ／Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ｃ、ＡＣＥ２３２８Ｇ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２１８Ａ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ；ＡＣＥ１２１５Ｃ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＣＥ３９０６Ａ／Ｇ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１ＡＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ、ＡＴ１６７８Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１１２７１Ａ／Ｃ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ｇ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１１２７１Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ、ＡＴ１６７８Ａ、ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ａ／Ｔ；ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ、ＡＴ１６７８Ｃ／Ｔ；ＡＴ１１１６７Ａ、ＡＧＲ３９５Ｔ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＲ１２１８Ａ、ＡＧＴ８０３Ａ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＴ６２０Ｃ／Ｔ；ＡＣＥ３３８７Ｔ、ＡＧＲ１２０４Ａ／Ｃ；ＡＣＥ２１９３Ａ、ＡＣＥ２３２８Ｇ、ＡＧＲ１２０４Ｃ；およびＡＣＥ２１９３Ａ／Ｇ、ＡＧＲ１０７２Ｇ／Ｇ、ＡＴ１１１６７Ａ／Ａからなる群から選択されたメンバーを含む、ヒトＡＣＥ、ＡＧＴおよび／またはＡＴ１遺伝子における多型パターンのライブラリー。３１．多型部位が、３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中のヌクレオチド部位からなる群から選択されたヌクレオチドにコードされる、ＡＣＥポリペプチド配列における一つ以上の多型部位を含む単離されたペプチドを含む、心臓血管剤のターゲットのライブラリー。３２．多型部位が、２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたヌクレオチド部位からなる群から選択されたヌクレオチドにコードされる、ＡＧＴポリペプチドにおける一つ以上の多型部位を含む単離されたペプチドを含む、心臓血管剤のターゲットのライブラリー。３３．多型部位が、４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたヌクレオチド部位からなる群から選択されたヌクレオチドにコードされる、ＡＴ１ポリペプチドにおける一つ以上の多型部位を含む単離されたペプチドを含む、心臓血管剤のターゲットのライブラリー。３４．（i）配列決定プライマー、および（ii）配列決定試薬を含み、前記プライマーが、ヒトＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子の多型部位にハイブリダイズするプライマー；およびヒトＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１遺伝子の多型部位に隣接してハイブリダイズするプライマーからなる群から選択される、心臓血管状態を評価するためのキット。３５．多型部位が、５１０６、５３４９、および５４９６と番号が付されたＡＣＥ制御領域の部位；３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中の部位；GenbankエントリーＸ６２８５５において番号が付されたＡＣＥ遺伝子の部位１４５１；３９５、４１２、４３２、４４９、６９２、８３９、１００７、１０７２、１２０４および１２１８と番号が付されたＡＧＴ制御領域中の部位；２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたＡＧＴコード領域中の部位；GenbankエントリーＭ２４６８８において番号が付されたＡＧＴ遺伝子の部位４９；１４２７、１７５６、１８５３、２０４６、２３５４、２３５５および２４１５と番号が付されたＡＴ１制御領域中の部位；４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたＡＴ１コード領域中の部位；並びに上記いずれかの組み合わせからなる群から選択された、請求項３４記載のキット。３６．ヒトＡＣＥ、ＡＧＴまたはＡＴ１ポリペプチド内の多型部位に特異的な一つ以上の抗体を含む、心臓血管状態を評価するためのキット。３７．多型部位が、３７５、５８２、７３１、１０６０、１２１５、２１９３、２３２８、２７４１、３１３２、３３８７、３５０３および３９０６と番号が付されたＡＣＥコード領域中のヌクレオチド部位；２７３、６２０、８０３、９１２、９９７、１１１６および１１７４と番号が付されたＡＧＴコード領域中のヌクレオチド部位；４４９、６７８、１１６７および１２７１と番号が付されたＡＴ１コード領域中の部位；並びに土記いずれかの組み合わせからなる群から選択されたヌクレオチドによってコードされる、請求項３６記載のキット。