JP2001504573A - 導電バリアを用いる対置成分アッセイ装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 生物学的に問題とする分析対象物の高速で便利なアッセイを行なえその場で抽出を行なえ、別に抽出容器を用意しないで済むイムノアッセイで用いるクロマトグラフィ・アッセイ装置である。本装置は広いダイナミックレンジを有し粒子または有色成分による干渉を受けない。１つの態様に置いて、本装置は、アッセイしようとする検体を受け入れるのに適した検体調製ゾーン１８を含む第１の対置コンポーネント１２、クロマトグラフィ媒体２０を含む第２の対置コンポーネント１４、および第２の対置コンポーネントに添付される導電バリア１６を含む。第１と第２の対置コンポーネントは検体調製ゾーンが被験検体をクロマトグラフィ媒体に塗布できるように対抗させることができる。望ましくは分析対象物を視覚的に検出可能なラベルで検出する。本装置の他の変化はコンポーネント構成を変化させて多様な分析対象物で最適なクロマトグラフィを提供する。本装置は検査キットに含めることができ、本装置を用いるアッセイ法特にサンドイッチ法イムノアッセイも開示する。

Description

【発明の詳細な説明】 導電バリアを用いる対置成分アッセイ装置 発明の背景 本発明は検体特性の判定用検査ストリップ、一体化されたハウジング、および 当該検査ストリップを含むキット、ならびに当該検査ストリップを用いて検体の 特性を判定する方法に関する。 分析対象物特に生物学的に問題とされる分析対象物の検出および／または判定 に用いられる多くの分析システムにはクロマトグラフィ・アッセイ系がある。 当該クロマトグラフィ系は医師や技師が各種条件や疾病の迅速診断および治療 モニタに繁用している。また患者自身によるこうした条件や疾病の在宅モニタ用 にも使用が増加しでいる。 こうしたシステムで最も重要なものに、薄層システムがあり、これは溶媒が薄 く平坦な吸収剤媒体を横断して移動するものである。 当該薄層システムで行なうことのできる検査の最も重要なものとして、抗原ま たはハプテンとこれに対応する抗体の間の特異的作用に依存したイムノアッセイ がある。臨床的に重要な分子の存在および／または量を検査する手段としてのイ ムノアッセイの使用は近年では公知である。１９５６年に早くも、J.M.Singerは リュウマチ因子検出のための免疫法ラテックス凝集検査の使用を報告している(S inger et al.,Am.J.Med.22:888-892(1956))。 イムノアッセイと関連して使用されるクロマトグラフィ技術にはイムノクロマ トグラフィとして知られる手順がある。 イムノクロマトグラフィ・アッセイは、検出しようとする抗原抗体複合体の性 質と複合体を作成するのに必要とされる反応順序によって、大きくサンドイッチ 法と競合法の２つのカテゴリに分けられる。一般に、サンドイッチ法イムノクロ マトグラフィでは検定しようとする分析対象物を含むと思われる検体とその分析 対象物に対する抗体とを混合する必要がある。これらの抗体は易動性で代表的に はラベルまたは標識試薬たとえば染色ラテックス、コロイド金属ゾル、またはラ ジオアイソトープなどと結合しておく。混合物はバンドまたはゾーンを含むクロ マトグラフィ媒体に塗布する。このバンドまたはゾーンには問題の分析対象物に 対して不動化した抗体が含まれる。クロマトグラフィ媒体は検査テープに似たス トリップの形状を取ることが多い。検定しようとする分子複合体と標識抗体がク ロマトグラフィ媒体上で不動化した抗体のゾーンに達すると、結合が起り結合し た標識抗体はそのゾーンに集結する。これで検定しようとする分子の存在が明ら かになる。この技術は定量または半定量的結果を得るためにも使用可能である。 検査ストリップで行なうサンドイッチ法イムノアッセイの例としては、Grubb et al.の米国特許第４，１６８，１４６号、Tom et al.の米国特許第４，３６６ ，２４１号に記載があり、両方とも本明細書で参照に含まれる。 イムノクロマトグラフィ・アッセイに加えて、酵素法クロマトグラフィ・アッ セイを用いることも公知になっている。これらの技術はイムノクロマトグラフィ ・アッセイとほぼ類似しているが、抗原抗体反応の代わりに酵素触媒反応を使用 する。酵素触媒反応は検出可能な生成物を産生することが多い。他の類似のクロ マトグラフィ・アッセイも公知である。 検査ストリップを用いる現在利用可能なクロマトグラフィ技術は有用であるが 多数の欠点を含んでいる。多数の検体、たとえば便検体は、クロマトグラフィ媒 体の穴を塞栓するような粒子を含み、イムノクロマトグラフィ処理を大幅に阻害 する。他の検体、たとえば血液などは検査結果を読み難くしてしまうような細胞 成分や有色成分を含んでいる。検体が干渉を発生させなくとも、既存のクロマト 検査装置で検体をクロマトグラフィ媒体に塗布して検体界面が均一にクロマトグ ラフィ媒体中を移動し均一な直線状に結合を発生させる領域まで検体が到達でき るようにするのは難しいことが多い。 検体の調製と廃棄物生成はイムノクロマトグラフィで現在利用可能な装置およ び技術の別の問題の発生源である。感染血液および血液分画を介して拡散する疾 病たとえばＡＩＤＳや肝炎の発病率増加はこの問題を悪化させて来た。検体（た とえば糞便）またはサンプリング器具（たとえば咽頭スワブ）を直接クロマトグ ラフィ媒体に塗布するのはほとんど不可能である。検体をクロマトグラフィ媒体 に塗布する前に幾つかの抽出および前処理反応が必要とされることが多い。この ような反応は、検査を行なう医師や技師が、小さい数個の容器たとえば試験管や 微量遠沈管内で行なうのが普通で、移し換え器具たとえばピペットを用いる必要 がある。このような器具の各々が汚染されるので特に注意して用意する必要があ り、作業員や廃棄物と不意に接触することのある人が汚染されないようにしなけ ればならない。 したがって、イムノクロマトグラフィ・アッセイまたはその他の類似アッセイ を施行するためのクロマト装置の改良が必要とされる。このような装置は恐らく 汚染されている検体または検体調製器具を直接受け入れて抽出容器や移し換え器 具を必要としないようにできるべきである。このような装置は、検査ストリップ の形が望ましく、有色検体または粒子を含む検体で干渉を起こさずにイムノクロ マトグラフィ・アッセイを施行できなければならず、またクロマトグラフィ媒体 へ検体を均一にかつ均等に供給して検査の正確度および精密度を改善できるべき である。アッセイ装置改良のこの側面は偽陰性および偽陽性の防止として特に重 要である。 開示 上述の必要性に適合し生物学的に問題となる分析対象物の改良アッセイを提供 しつつ、アッセイの施行を簡略化して汚染を防止するアッセイ装置を開発した。 本装置はサンドイッチ法イムノアッセイ、競合法イムノアッセイ、両原理を組み 合せて用いるアッセイを含め、全ての種類のイムノアッセイを実行できる。本装 置は検出しようとする抗原それ自体が抗体たとえばＨ．ピロリ抗体などの血清学 アッセイを実行できる。本装置は検出しようとする抗原が分析対象物に対する第 １抗体に結合する標識第２抗体を用いて間接的に検出されるアッセイを実行可能 である。これらのアッセイ装置はどれも、少なくとも２個の対置成分を含む装置 の対置成分に取り付けた導電バリアを含む。 本発明によるアッセイ装置は液圧で一方の対置成分から他方の対置成分へ液体 を移動させ、液体をクロマトグラフィ媒体中に浸透させる。液圧は装置の動作を 加速するものではないが、追加ステップたとえば抽出ステップなどを実行して単 一装置内で粒子成分の干渉を除去できる。圧力は係合装置たとえば対置成分の各 々に設けたインターロック部材などで対置成分を相互に保持することにより発生 する。望ましくは、所定圧力を加えてアッセイ法の各ステップの最適性能を保証 す る。 さらに、本装置は他の種類の特異的結合アッセイも実行できる。たとえば（１ ）特異的リガンドに対する特異的結合蛋白たとえばレクチン、ホルモン受容体、 ウィルス受容体の親和性に基づくアッセイ、（２）酵素のそれに対応する基質ま たはインヒビタ（阻害剤）に対する親和性に基づくアッセイ、または（３）ワト ソン−クリック（Watson-Crick）の配位理論に基づいて拡散（ＤＮＡまたはＲＮ Ａ）セグメントの相補的核酸セグメントに対する親和性に基づくアッセイ。 一般に、本発明によるアッセイ装置は、 （１）アッセイしようとする液状検体を受け入れるのに適した検体調製手段を 含む第１の対置成分、 （２）前記クロマトグラフィ媒体上の検出ゾーンに結合されて検出しようとす る分析対象物に特異的に結合する少なくとも１種類の試薬を有するクロマトグラ フィ媒体を含み、前記第１の対置成分に取り付けられる第２の対置成分、 （３）前記第２の対置成分に取り付けられる導電バリアを含む。 第１と第２の対置成分は対置されないで検体調製手段から検査しようとする液 状検体を導電バリアを通してクロマトグラフィ媒体に添加しクロマトグラフィ媒 体中を流せるようにする位置から対置位置に移動させることができる。クロマト グラフィ・アッセイはクロマトグラフィ媒体内部を検体が移動した結果実行され て検出しようとする分析対象物に特異的結合する標識試薬の結合による移動の結 果としてクロマトグラフィ媒体内部で分析対象物が検出されるようになる。分析 対象物は検体がクロマトグラフィ媒体に添加された位置とは異なる位置で検出さ れる。分析対象物は検出ゾーンに結合されている分析対象物に標識試薬が結合す ることで移動後にクロマトグラフィ媒体上で検出される。 代表的には、検体調製手段は検体をクロマトグラフィ媒体に添加する前に検体 処理のために少なくとも１種類の試薬を含む。検体処理用試薬は検体から分析対 象物を抽出するための抽出試薬であり得る。 一般に、検出ゾーンはクロマトグラフィ媒体より実質的に小さい。この構成で は、検出ゾーンは不動化した分析対象物に対して第１の特異的結合するパートナ ーを含むことができる。分析対象物が抗原またはハプテンの場合、第１の特異的 結合パートナーは抗原またはハプテンに対する抗体であり得る。１つの特に好適 な代替例において、分析対象物はヒトヘモグロビンであり第１の特異的結合パー トナーは抗ヒトヘモグロビン抗体である。 これ以外に、分析対象物を抗体として第１の特異的結合パートナーを抗体によ り特異的に結合できるハプテンまたは抗原とすることができる。 代表的に、クロマトグラフィ媒体はさらにクロマトグラフィ媒体より実質的に 小さな対照ゾーンを含む。代表的に、対照ゾーンはこれに不動化した分析対象物 を含む。 クロマトグラフィ・アッセイ装置はクロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作 的に接触する吸収手段をさらに含むことができる。 代表的に、検体調製手段は検体調製手段へ液体の追加により溶解できる形で検 出可能な標識によって標識した分析対象物のための特異的結合パートナーをさら に含む。一般に、液体には検体から分析対象物を抽出するための抽出試薬を含ま れるが、その他の液体も使用できる。 代表的には、本発明によるアッセイ装置では、第１と第２の対置成分が対置し ていない位置から直接手動的に閉じることで第１と第２の対置成分を対置させる ことができる。 本発明の別の側面は分析対象物の検出および判定のための検査キットである。 検査キットは、別々にパッケージされて （１）前述したクロマトグラフィ・アッセイ装置と、 （２）検出可能な標識で標識された分析対象物のための、クロマトグラフィ・ アッセイ装置で使用する特異的結合パートナーと、 を含むことができる。 本発明によるその他の装置も検査キットに含めることができ、別々にパッケー ジされて、検出可能な標識で標識された分析対象物のための特異的結合パートナ ーまたは装置に含まれる溶解可能な標識特異的結合パートナーを溶解するための 液体のどちらかと併せて当該装置を含む。場合によって、検査キットは検査カー ドまたは検体から分析対象物を抽出するための抽出試薬を含むことができる。 本発明のさらに別の側面は同一装置で同時に多数のアッセイを実行できる複合 装置である。一般に本装置は、 （１）各々がアッセイしようとする検体を受け入れるのに適した複数の横方向 に離れた検体調製手段を含む第１の対置成分と、 （２）前記第１の対置成分に取り付けることができ第１の対置成分上の各検体 調製手段のために横方向にきりはなされているクロマトグラフィ媒体を含む第２ の対置成分と、 （３）それぞれが第２の対置成分に取り付けてあり各クロマトグラフィ媒体に １つづつの複数の導電バリアと を含む。 本装置において、第１と第２の対置成分を対置させて、各検体調製手段に検査 しようとする各検体をこれに対応する導電バリアを介して対応するクロマトグラ フィ媒体へ適用させるようにできる。 この複合装置では、少なくとも１つの検体調製手段は検体を含む装置を受け入 れるのに好適な折り畳み可能なウェルを含む。折り畳みウェルが含まれる場合第 １の対置成分はさらにヒンジで折り曲げられる羽根を含むことができ第１の対置 成分と第２の対置成分を対置する際に第２の対置成分の上に折り畳まれる。 本発明による複合アッセイ装置の別の実施態様は検査カードを受け入れるのに 適する。本実施態様は、 （１）複数の横方向に分離された試薬パッドを含む第１の対置成分と、 （２）複数の乾燥試料を含む検査カードを受け入れるのに適した第２の対置成 分とを含み、第２の対置成分には （ａ）第１の対置成分上の各検体調製手段用に横方向に分離され各々が第１ と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、 （ｂ）各クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触し検査カードを 第２の対置成分に挿入した時に検査カードの各乾燥試料と動作的に接触する導電 手段と、 （ｃ）各クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段と を含み、 （３）各々が第２の対置成分に取り付けられ各クロマトグラフィ媒体に１つづ つ備える複数の導電バリアと、 を含む。 本発明による複合アッセイ装置の本実施態様において、第１と第２の対置成分 は各試薬パッドに対応する導電バリアを介して対応する乾燥試料を添着させられ るように対置できる。 本実施態様において、各試薬パッドは試薬パッドへ水性試薬の追加により溶解 できる形で検出可能な標識により標識された分析対象物に対する特異的結合パー トナーを含むことができる。本実施態様の１つの特に好適なバージョンでは、分 析対象物はヒトヘモグロビンであり特異的結合パートナーは抗ヒトヘモグロビン 抗体である。 本発明の別の実施態様は、クロマトグラフィ媒体と同じ対置成分上に検体調製 手段が配置されるアッセイ装置である。本装置は、 （１）(ａ)検体調製手段と （ｂ）検体調製手段と動作的に接触するクロマトグラフィ媒体と を含む第１の対置成分と、 （２）第１の対置成分に取り付けでき添着手段へ液体の追加により溶解可能な 形で検出可能な標識で標識された分析対象物に対する特異的結合パートナーを含 む添着手段を含む第２の対置成分と、 （３）第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと を含む。 本装置において、第１と第２の対置成分を対置させることで添着手段を導電バ リアと接触させて分析対象物に対する標識された特異的結合パートナー導電バリ アを透過した液体により溶解されるようにする。クロマトグラフィ媒体はクロマ トグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する導電手段を有する第１と第２の 端部を有することができ、この構成で第１の対置成分はさらにクロマトグラフィ 媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段をさらに含むことができる。 本発明の別の実施態様はクロマトグラフィ媒体を含まない対置成分上に２つの 添着手段を有する。 本実施態様は、 （１）(ａ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、 （ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する導電手段 と、 （ｃ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段 と、 を含む第１の対置成分と、 （２）(ａ)第１の添着手段と、 （ｂ）第２の添着手段と、 を含む第２の対置成分と、 （３）第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと、 を含む。 第１と第２の添着手段は第１と第２の対置成分が対置していない場合には動作 的に接触しないように第２の対置成分上に配置される。第１と第２の対置成分を 対置させると導電手段が導電バリアを介して第１の添着手段と動作的に間接的に 接触し、第２の添着手段と導電手段を動作的に接触させることで、第１と第２の 添着手段が互いに動作的に接触する。 代表的には、本実施態様において、第１の添着手段は検体添着パッドを含み、 第２の添着手段は検出器添着パッドを含み、これに検出試薬を添着することがで きるので、第１と第２の対置成分を対置させた時に、検体添着パッドと検出器添 着パッドの内容が導電バリアを介して導電手段に適用される。一般に、検出器添 着パッドは検出器添着パッドへの液体の添加により溶解することのできる形で分 析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含み、第１の特異的結合パート ナーは検出可能な標識で標識され、クロマトグラフィ媒体はさらにクロマトグラ フィ媒体より面積的に実質的に小さい検出ゾーンを含み、検出ゾーンは不動化し てある分析対象物に対する第２の特異的結合パートナーを含み、分析対象物が検 体中に存在する場合には第１の特異的結合パートナーと分析対象物と第２の特異 的結合パートナーを含む３重複合体（即ちサンドイッチ法複合体）が検出ゾーン に形成されるようにしてある。 本発明によるアッセイ装置の別の実施態様は対置成分上に検出器添着パッドを 有し、さらにクロマトグラフィ媒体と検体添着パッドを他方の対置成分に有する 。本実施態様は、 （１）(ａ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、 （ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する導電手段 と、 （ｃ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段 と、 （ｄ）導電手段と直接接触しクロマトグラフィ媒体の第１の端部と間接 的に接触するように配置した検出器添着パッドと、 を含む第１の対置成分と、 （２）検体添着パッドを含む第２の対置成分と、 （３）第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと、 を含む。 本実施態様において、第１と第２の対置成分を対置させることで検体添着パッ ドが検査しようとする検体を導電バリア経由で検出器添着パッドに添着させ、さ らに導電手段経由でクロマトグラフィ媒体の第１の端部に添着させる。 本発明のさらに別の実施態様は、 （１）(ａ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、 （ｂ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段 と、 （ｃ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と直接接触する検出器添着パ ッドと、 を含む第１の対置成分と、 （２）検体添着パッドを含む第２の対置成分と、 （３）第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと、 を含む。 本実施態様において、第１と第２の対置成分が対置された時、検出器添着パッ ドと検体添着パッドはクロマトグラフィ媒体の第１の端部に直接隣接している検 出器添着パッドの領域以外で導電バリアを介して間接的に接触する。第１と第２ の対置成分を対置させることで検体添着パッドは検査しようとする検体を検出器 添着パッドに添着ざせさらにクロマトグラフィ媒体の第１の端部に添着させる。 本発明によるアッセイ装置のさらに別の実施態様は、 （１）(ａ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、 （ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する検出器添 着パッドであって分析対象物の検出用に少なくとも１種類の試薬を含むパッドと 、 （ｃ）検出器添着パッドと動作的に接触しクロマトグラフィ媒体の第１ の端部と間接的に接触し液体を通過させられる導体と、 （ｄ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触して液体を吸 収するためのアブソーバと、 を含む第１の対置成分と、 （２）検査しようとする検体を受け入れるための検体調製ゾーンを含み第１の 対置成分に取り付けることができ第１と第２の対置成分を対置させ液体を第２の 対置成分から第１の対置成分へ移動させられるようにしてある第２の対置成分、 （３）第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと、 を含む。 本実施態様において、第１と第２の対置成分は、第１と第２の対置成分が対置 していない時に第２の対置成分上の検体調製ゾーンに検体を添着でき、また第１ と第２の対置成分を対置させることで検体調製ゾーンが導体と間接的に接触して 検査しようとする検体をDB経由で導体に添着して導体を通って流れさらに検出器 添着パッドを経由してクロマトグラフィ媒体の第１の端部へ添着されて検体に対 する分析対象物の検出用の試薬を追加できるようにしてある。導体から検出器添 着パッドを通ってクロマトグラフィ媒体の第１の端部への流れはアブソーバによ る液体の吸収で補助される。 望ましくは、検出器添着パッドは前述したように分析対象物に対する第１の特 異的結合パートナーを含み、クロマトグラフィ媒体はさらに前述のように検出ゾ ーンを含む。 本発明によるアッセイ装置の別の実施態様は２種類の標識特異的結合パートナ ーを含む。本実施態様は、 （１）(ａ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、 （ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触し、液体の添 加により溶解することのできる形で、検出可能な標識で標識してある分析対象物 に対する第１の特異的結合パートナーを含む第１の検出器添着パッドと、 （ｃ）第１の検出器添着パッドと動作的に接触して液体を通過させるこ とができ、第１の検出器添着パッドが導体とクロマトグラフィ媒体の第１の端部 とを架橋して導体から第１の検出器添着パッドを介してクロマトグラフィ媒体の 第１の端部へ液体を流せるようにしてある導体と、 （ｄ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触して液体を吸 収するアブソーバと、 を含む第１の対置成分と、 （２）第１の対置成分に取り付けることができ、第１と第２の対置成分が対置 されて液体が第２の対置成分から第１の対置成分へ移し換えられるようにしてあ る第２の対置成分であって、 （ａ）アッセイしようとする検体を受け入れるための検体調製ゾーンと 、 （ｂ）検体調製ゾーンと動作的に接触し、検体調製ゾーンへの検体の添 加により溶解することのできる形で分析対象物に対する第２の特異的結合パート ナーを含み、第２の特異的結合パートナーは検出可能なラベルで標識され、第２ の対置成分上の検体調製ゾーンに隣接して配置して検体調製ゾーンへの検体の添 着で第２の特異的結合パートナーを溶解し検体調製ゾーンが検体と第２の特異的 結合パートナーの混合物を含むようにする第２の検出器添着パッドと、 を含む第２の対置成分と、 （３）第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと、 を含む。 第１と第２の対置成分は第１と第２の対置成分が対置していない時に検体を第 ２の対置成分上の検体調製ゾーンに添着できるように構成する。第１と第２の対 置成分を対置させると第２の対置成分上の検体調製ゾーンが第１の対置成分上の 導体と導電バリアを介して動作的に間接的に接触するので検査しようとする検体 と第２の特異的結合パートナーを導体を介して流れるように導体に添着させ、さ らに第１の検出器添着パッドを介してクロマトグラフィ媒体の第１の端部へ添着 させて第１の特異的結合パートナーを検体と第２の特異的結合パートナーに加え ることができるようにしてある。導体から第１の検出器添着パッドを経由してク ロマトグラフィ媒体の第１の端部への流れはアブソーバによる液体の吸収で補助 される。 本発明によるアッセイ装置のさらに別の実施態様は２つのセクタに分割された アプリケータを有する。本実施態様は、 （１）(ａ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、 （ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触して液体を通 過させることのできる導体と、 （ｃ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触して液体を吸 収するアブソーバと、 を含む第１の対置成分と、 （２）第１の対置成分に取り付けることができ第１と第２の対置成分を対置さ せ第２の対置成分から第１の対置成分へ液体を移し換えることができるようにし てあり、第１と第２の対置成分を対置させた時に第１の対置成分上の導体に液体 を添加するためのアプリケータを含む第２の対置成分であって、アプリケータが 、 （ａ）第１と第２の対置成分が対置されていない時にアプリケータへの液体 の添加により溶解できるような形で分析対象物に対する第１の特異的結合パート ナーを含み、第１の特異的結合パートナーは検出可能な標識で標識してある第１ のセクタと、 （ｂ）分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーの欠如した第２のセ クタの２つのセクタに分割してある第２の対置成分と、 （３）第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと を含む。 本実施態様において、第１と第２の対置成分は、第１と第２の対置成分を対置 させた時に第２の対置成分上のアプリケータの第２のセクタを除く第１のセクタ が導電バリアを介して第１の対置成分上の導体と間接的に接触し、アプリケータ の第２のセクタは第１のセクタを介して導体と間接的に接触するように構成して ある。これによりアプリケータの第１のセクタの内容がクロマトグラフィ媒体に 添着され、続けて、アプリケータの第１のセクタの内容をクロマトグラフィ媒体 に添着してからアプリケータの第２のセクタの内容をクロマトグラフィ媒体へ添 着する。アブソーバはクロマトグラフィ媒体から液体を吸収して導体およびクロ マトグラフィ媒体を通るアプリケータからの液体の流れを補助する。 図面の簡単な説明 本発明の前述のおよびその他の特徴、態様、利点は以下の詳細な説明と、付属 の請求項と、添付の図面とを参照してより良く理解される。図面において、 図１Ａは本発明による導電バリアを用いる２成分クロマトグラフィ・アッセイ 装置の１つのバージョンの略図である、 図１Ｂは図１Ａの２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置の図面で２成分が対 置された状態で図示してある。 図１Ｃは図１Ａおよび図１Ｂの装置の側面図で検体調製ゾーン、導電バリア、 導体の関連を示す。 図２は本発明による導電バリアを備えた２成分クロマトグラフィ・アッセイ装 置の１つのバージョンの略図で、第１の対置成分は検体調製ゾーンを含む。 図３は本発明による導電バリアを備えた２成分アッセイ装置の別のバージョン の略図で同一の対置成分上に２個のアプリケータを備える。 図４Ａは本発明による導電バリアを備えた２成分アッセイ装置の別のバージョ ンの略図でクロマトグラフィ媒体と同一の対置成分上に標識特異的結合パートナ ーのためのパッドを、また他方の対置成分上に検体調製ゾーンを含む。 図４Ｂは図４Ａの２成分アッセイ装置の後面断面図でクロマトグラフィ媒体、 第１と第２の対置成分、導電バリアの詳細を示す。 図５は図４Ａおよび図４Ｃに図示した２成分アッセイ装置の変化の略図で第２ の対置成分上のアブソーバを備える。 図６Ａは本発明による２成分アッセイ装置のさらに別のバージョンの略図で、 一般に図４Ａおよび図４Ｂのバージョンと類似しているが、クロマトグラフィ媒 体と直接接触する検出器添着パッドを備える。 図６Ｂは図６Ａの２成分アッセイ装置の後面断面図で対置した成分の詳細を示 す。 図７は本発明による導電バリアを用いる２成分アッセイ装置のさらに別のバー ジョンの略図で、検出器添着パッドは第１の対置成分上にありクロマトグラフィ 媒体と導体の間に配置される。 図８は本発明による導電バリアを用いる２成分アッセイ装置のさらに別のバー ジョンの略図で、洗浄用の２−１７クタアプリケータを用いる。 図９は本発明による導電バリアを用いる２成分アッセイ装置のさらに別のバー ジョンの略図で、各々の対置成分に１つづつ２個の検出器添着パッドを備える。 図１０は本発明による複合アッセイ装置の略図で、１つまたはそれ以上の検体 の同時アッセイに適した装置を示す。 図１１Ａは本発明による複合アッセイ装置の別のバージョンの略図で、検体を 受け入れる折り畳み式ウェルを含む。 図１１Ｂは図１１Ａと同様の複合アッセイ装置のバージョンの略図で、ガスケ ットをヒンジで折り曲げられる羽根で置き換えている点が異なる。 図１２は検査カードを受け入れるのに適した本発明による複合アッセイ装置の 別のバージョンの略図である。 図１３は例１で構成したストレプトコッカス（Streptococcus）Ａ抗原の検出 用に設計されスワブまたは同様のサンプリング器具を受け入れるのに適した本発 明によるアッセイ装置の略図である。 説明 定義 本開示の状況で、以下の術語が特に断らない限り以下のように定義される。 特異的結合パートナー：関係する分子の三次元構造に依存する特異的非共有反 応によって相互作用する分子対の構成要素である。特異的結合パートナーの代表 的な対は、抗原−抗体、ハプテン−抗体、ホルモン−受容器、核酸ストランド− 相補的核酸ストランド、基質−酵素、インヒビタ−酵素、炭化水素−レクチン、 ビオチン−アビジン、ウィルス−細胞受容体などがある。 動作的接触：２つの成分の一方から他方へ、実質的に中断なしで、毛細管また は何らかにより液体が流れられるような方法で２つの固形成分が直接的または間 接的に接触する場合、２つの固形成分は動作的に接触すると言う。「直接接触」 は、２つの成分が物理的に、たとえば端端または前後で接触することを表わす。 「間接接触」は２つの成分が物理的に接触していないが、１つまたはそれ以上の 導電手段により架橋されることを表わす。１つまたはそれ以上の導電手段による 架橋は平坦な成分の退避によるなどの端端または前後いずれかの架橋とすること ができる。 導電バリア：術語「導電バリア」は本明細書において液体および液体に含まれ る溶質を導電することができる一方で、粒子に対してはバリアとして働き一方の 成分から他方へ導電バリアを通る以外の液体の流れを阻止する成分を記述するた めに用いている。後述のように、このようなバリアは紙などのセルローズから作 成できる。 有限容量：吸収手段が配置されている装置内で通常のアッセイ実行中に吸収手 段が飽和した場合吸収手段は有限容量であるという。この点で、吸収手段は吸収 した余分な液体を放出して少なくとも部分的に導電性になることができる。 分析対象物：術語「分析対象物」は、アッセイしようとする実際の分子および 類似物とこれの誘導体などが分析対象物それ自体と実質的に透過な方法でアッセ イに用いられる別の分子に結合する場合に、これらの類似物や誘導体の両方を含 む。 抗体：術語「抗体」は適当な特異性の抗体分子それ自体と、抗体フラグメント （Ｆａｂ、Ｆ(ａｂ')、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントも含む）ならびに化学的に 改編した本来の抗体分子ならびに抗体フラグメントを含み、in vitro（試験管内 ）でのサブユニット再結合により構成したハイブリッド抗体も含まれる。ポリク ローナルおよびモノクローナル両方の抗体が特に指定しない限り含まれるものと する。 第２の特異的結合パートナー：特異的結合パートナー対が相互作用する時に特 異的結合パートナーの対の構成要素に結合する追加の特異的結合パートナーは、 第２の特異的結合パートナーと呼ばれる。たとえば、特異的結合パートナーの対 はジアルジア抗原とウサギ抗ジアルジア抗原の両方を含むことができる。この場 合、第２の特異的結合パートナーはヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体であり得る。第２の 特異的結合パートナーは、これの結合する抗体特異的結合パートナーの種、クラ ス、サブクラスに対して特異的なことがある。これ以外に、特異的結合パートナ ーの一方がビオチン標識されている場合、第２の特異的結合パートナーはアビジ ンに結合した分子を含むことができる。 Ｉ．クロマトグラフィ・アッセイ装置 本発明の１つの態様は生物学的検体中の分析対象物のアッセイに特に有用なク ロマトグラフィ・アッセイ装置を含む。本装置は予備的抽出ステップなしに生物 検体の直接添着に適し、粒子または有色検体に起因するアッセイ結果との相互作 用を最小限に押えるように構成される。 本装置は、対置成分の一方に取り付けて、一方の対置成分から他方の対置成分 へ移動する材料のさらに均等な流れを提供するために用いられる導電バリアを含 む。これは一層再現性の高いアッセイを提供し偽陰性または偽陽性の発生確率を 減少する。 本装置は少なくとも実質的に平坦な対置成分を有する。実質的に平坦な成分の 一方はその表面にクロマトグラフィ媒体を有する。 ２個の対置成分がある場合、対置成分の一方は第１の対置成分、また他方は第 ２の対置成分と呼ばれる。この呼称は任意であり、説明の便宜上のものである。 対置成分各々の役割はこれに設けた成分または成分群によって決まる。 本装置は対置成分を対置させるためとこれに圧力を印加するための手段も有す る。対置成分は直接用手的に閉じることで、即ち操作員による操作で、対置して いない位置から対置させることができる。印加圧力は一方の対置成分から他方の 対置成分へ対置成分に実質的に直交する方向に液体を流して検体が分析対象物の 検出および／または判定のためのクロマトグラフィ媒体に適用されるのに十分な ものとする。この圧力はクロマトグラフィ媒体を通して液体を流してクロマトグ ラフィ処理を加速し、少ない時間で検出可能な結果をもたらす。さらに、この圧 力により装置内でのたとえば抽出ステップなどのステップの実行が可能になり、 アブソーバによるクロマトグラフィ媒体からの過剰な液体の排除を行なってアッ セイのバックグラウンドを減少させるためにも使用できる。この圧力は対置成分 を対置させ、ロックまたはクランプなどの係合装置により成分どうしを対置させ て保持することにより維持される。 本発明による装置はサンドイッチ法または競合法アッセイの実行用に製造でき る。 本発明による装置が特に有用なアッセイの種類はサンドイッチ法イムノアッセ イである。本明細書で用いているように、術語「イムノアッセイ」は特異的結合 アッセイを含むように用いられるのが一般的で、特に指定しない限り、特異的結 合パートナーが抗体であるようなアッセイに必ずしも制限される必要はない。 Ａ．本発明による装置および方法の原理 本発明による装置の全部はクロマトグラフィ媒体を有し導電バリアによりクロ マトグラフィ媒体への液体の添着が調節される。バリアは一層スムーズな流れを 提供し、クロマトグラフィ開始時にクロマトグラフィ媒体上の特定位置における 分析対象物の高度に局部的な集中や、または場合によって標識特異的結合パート ナーの集中を防止する。これによりクロマトグラフィの均等な進行を保証し、分 析対象物の集中の結果としてクロマトグラフィ・レートの遅延を防止する。 本発明の基本原理は単一成分アッセイ装置に使用できるが、ヒンジまたはその 他の接続により接続される２つまたはそれ以上の対置成分を含みロックなどの係 合装置により締結可能なアッセイ装置を構成するのに一般に適したものである。 これにより成分上に圧力をかけて１つの成分から別の成分へ液体を流し、フロー レートを加速することができる。使用される圧力の度合は、クロマトグラフィ媒 体、分析対象物、ラベルの特性に対して最適になるように調節できる。 Ｂ．本発明による装置で共通の成分 本発明によるアッセイ装置で多数の成分が共通でありここで便宜を計るために 説明する。 １．クロマトグラフィ媒体 クロマトグラフィ媒体はストリップである。代表的には、ストリップは実質的 に平坦だが、全ての用途で必要とされるものではない。代表的には長方形で、第 １と第２の端部を有し、第１と第２の表面を有する。本明細書を通して、術語「 第１の端部」は液体をクロマトグラフィ媒体に第１に添着する端部またはその付 近を表わし、術語「第２の端部」はクロマトグラフィ媒体の対抗する端部に適用 する。クロマトグラフィ媒体の第１の端部またはその付近に添着される液体は、 必ずではないが、検体または処理済み検体であり得る。クロマトグラフィ媒体は 分析対象物および分析対象物−抗体結合体の薄層クロマトグラフィ用媒体として 好適な材料たとえばニトロセルロース、ナイロン、レーヨン、セルロース、紙、 またはシリカから構成する。クロマトグラフィ媒体は必要に応じて前処理または 改良できる。代表的にはクロマトグラフィ媒体は透明としてこれに出現する有色 ゾーンをいずれかの側面から観察できるようにする。 ２．導電バリア 導電バリアは線維性、多孔性材料たとえばヤルロース（即ち紙）または液体に 対して湿潤性があり、添着された液体を実質的に吸収しないニトロセルロースな どが代表的である。代表的には、導電バリアは長方形または正方形である。導電 バリアはアッセイ装置内に配置し導電バリアの一側面が装置の対向成分の一方と 直接接触し他方の側面は装置の第２の対置成分と直接接触する。導電バリアは導 電バリアの一側面に添着された液体が他側面に浸透する特性を有している。 ３．アブソーバ 本発明による多数の装置で、アブソーバ（吸収層）はクロマトグラフィ媒体の 一端または両端と動作的に接触する。アブソーバは十分な液体を保持するような 何らかの吸水性材料から作成して液体がクロマトグラフィ媒体から排水されアブ ソーバ内に溜るようにする。代表的な材料として、これに制限されないが、ろ紙 が挙げられる。 ４．その他の液体担送成分 後述のように、本発明による特定の装置で、検体調製ゾーン、アプリケータ、 拡散膜および／または導体としてその他の液体担送成分を用いることができる。 これらの成分は実質的に吸収することなく液体を通すような親水性材料から調製 する。このような材料は従来技術で周知である。場合によって、これらの成分は 成分に液体を添加して溶解することのできる乾燥した形で成分を含むことができ る。 ５．対置成分 本発明によるアッセイ装置の実施態様の多くは２個の対置成分を含む。対置成 分の本体は湿気に対して十分な耐水性があり本装置で行なうアッセイの実行に関 係する液体を含むことができるような積層厚紙から作成するのが望ましい。その 他のセルロース基材たとえば板紙やソリッドブリーチサルファイト（ＳＢＳ）も 使用できる。これ以外に、対置成分の本体は湿気を通さないプラスチックから作 成できる。好適なプラスチックはレクサンTMなどのポリカーボネート・プラスチ ックである。 対置成分は液体に耐水性のある材料たとえばプラスチックから作成するのが望 ましく第１と第２の対置成分で用いられている材料と共通に接続できるかまたは 同一のヒンジによって接続する。 ６．標識成分 サンドイッチ法イムノアッセイを実行することを意図しているアッセイ装置で は、標識成分は分析対象物に対する標識特異的結合パートナーが代表的である。 この標識成分は代表的には易動性で、クロマトグラフィ媒体を通って自由にまた は分析対象物と結合して移動できる。標識は視覚的に検出できる標識、たとえば コロイド金属標識などが望ましい。望ましくは、コロイド金属標識は、金、銀、 青銅、鉄、またはスズで、最も望ましいのは金である。金標識抗体および抗原の 調製は、J.DeMey,“The Preparation and Use of Gold Probes,”in Immunocyto chemistry:Modern Methods and Applications(J.M.Polak and S.Van Noorden,ed s.,Wright,Bristol,1986)ch.8,pp.115-145に記載があり、本明 細書で参照として含まれる。コロイド金で標識した抗体は、たとえばシグマSigm a Chemical Company St.Louis,MOから入手できる。 これ以外に、他のコロイド標識たとえばコロイド硫黄標識または染料シリカ標 識も使用可能である。あまり好ましくない代替実施態様において、たとえば放射 性標識または酵素標識などの他の標識も使用することが可能である。 Ｃ．２成分装置の一般構成 一般に、本発明による２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置は、 （１）アッセイしようとする検体を受け入れるのに適した検体調製ゾーンを含 む第１の対置成分、 （２）クロマトグラフィ媒体を含む第２の対置成分、 （３）第２の対置成分に取り付けた導電バリア、 を含む。 この装置において、第１と第２の対置成分は装置を閉じて検体調製ゾーンがク ロマトグラフィ媒体へ検査しようとする検体を添着させられるように対置させる ことができる。使用において、第１と第２の対置成分は検出試薬を検体調製ゾー ンに添着した後で対置させるのが代表的である。第１と第２の対置成分を対置さ せた時、検体調製ゾーンは検体と検出試薬を導電バリア経由でクロマトグラフィ 媒体に添着させ、検体と検出試薬の組み合せが導電バリア内部を拡散してからク ロマトグラフィ媒体に添着されるようにする、検体と検出試薬がクロマトグラフ ィ媒体の少なくとも一部を横断した後、検出試薬が分析対象物の有無および／ま たは量の検出可能な表示をもたらし、クロマトグラフィ媒体の少なくとも一部で 検出試薬を観察および／または測定してこの表示を得ることができる。これによ って分析対象物の検出および／または判定を得ることができる。 この基本装置の構造の詳細の説明は、可能な限り本発明による他の２成分アッ セイ装置へも適用される。 検出試薬は前述の分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含み、さ らに成分を含むことがある。 この処理では検出ゾーン内の第２の特異的結合パートナーの濃度と検出ゾーン のサイズによっては分析対象物の定性的および／または定量的表示を行なうこと ができる。 代表的には、結果を得るために、アッセイには、検体調製ゾーン上での検体の インキュベーション時間、ならびにクロマトグラフィそれ自体に必要な時間を含 めて３０秒から１０分、さらに代表的には１ないし５分間を必要とする。代表的 には、アッセイは室温で行なうが、分析対象物と特異的結合パートナーの性質に よっては４℃から３７℃、または場合によってはもっと高温で行なうこともでき る。場合により、低温でアッセイを実行する方が変性を制限するのに望ましいこ とがあるが、別の場合には適当な分析対象物と特異的結合パートナーによりもっ と高温で実行する方がアッセイを高速化できることもある。 本発明による装置では、検体をクロマトグラフィ媒体に添着すると分析対象物 の検出が検体と何らかの添加液体の接触なしに行なわれる。検体の洗浄を行なっ ている場合でもこれが当てはまる。言い換えれば、本装置は自己内蔵型で、検体 をクロマトグラフィ媒体へ添着すれば検体の希釈または追加の液体による標識は 必要とされない。これは検体と標識特異的結合パートナーを最大感度で最適な濃 度に提供するものである。 本発明による装置では、クロマトグラフィ・アッセイはクロマトグラフィ媒体 内部の検体の移動の結果として行なわれる。分析対象物は検体がクロマトグラフ ィ媒体に添着された位置とは異なる位置で検出される。 クロマトグラフィ・アッセイ装置の一般構成が図１Ａに図示してある。クロマ トグラフィ・アッセイ装置１０は第１の対置成分１２、第２の対置成分１４、お よび第２の対置成分１４に取り付けた導電バリア１６を有する。代表的には、導 電バリア１６は、たとえば導電バリア１６と第２の対置成分１４の相対移動がで きるようにする接着剤などで第２の対置成分１４に可撓的に取り付ける。図１Ａ およびその他の図面において、導電バリア１６は図示の便宜のために第２の対置 成分１４から分離して図示してあるが、クロマトグラフィ・アッセイ装置１０の 動作中は導電バリア１６は第２の対置成分１４と直接接触する。導電バリア１６ は導電バリア１６の端部で第２の対置成分１４に取り付けることができる。 第１の対置成分１２は検体調製ゾーン１８を含む。第２の対置成分１４はクロ マトグラフィ媒体２０を含む。クロマトグラフィ媒体２０は第１の端部２２と第 ２の端部２４とを有し、クロマトグラフィ媒体２０は検出ゾーン２６と対照ゾー ン２８とを含む第１の対置成分１２と第２の対置成分１４はヒンジ３０によって 接続する。第１の対置成分１２と第２の対置成分１４は第１と第２の対置成分を 対向して固定するための係合装置をさらに含むのが望ましい。係合装置は第１の 対置成分１２と第２の対置成分１４が対置された時に係合するロック３２と３４ のようなロックを含むことができる。ロック３２と３４の構造と寸法は対置成分 １２と１４に最適な度合の圧力をかけられるように変更できる。最適な圧力の度 合は、クロマトグラフィ媒体２０の厚みと構造、意図している検体量、およびそ の他の要因によって変化する。検体または試薬の漏洩を防止するには、封止リッ ジまたはガスケット３６を第１と第２の対置成分１２および１４の周辺部の周り に配置する。ロック３２と３４などの係合装置の使用と、封止リッジまたはガス ケット３６の使用は一般に好適であるが、これらの成分は本発明による基本装置 を製作する上で必須ではない。第２の対置成分１４は第１の窓３８を有し、オプ ションで、第１の対置成分１２はいずれかの側面からクロマトグラフィ媒体２０ を観察できるようにするための第２の窓４０を有することができる。第２の窓４ ０によって試薬が添着された表面に対向する側の表面からクロマトグラフィ媒体 ２０を観察できる。別のオプションとして、第１の窓３８を無くし、第２の窓４ ０をクロマトグラフィ媒体２０の観察に使用しても良い。これ以外にも、第１の および／または第２の対置成分１２と１４を透明または透光性の材料から作成し て、クロマトグラフィ媒体２０を別々の開口部または窓なしに観察できるように しても良い。 図１Ｂは第１の対置成分１２と第２の対置成分１４を対置させた後のクロマト グラフィ・アッセイ装置１０を示す。検出ゾーン２６と対照ゾーン２８を含むク ロマトグラフィ媒体２０は、窓３８から観察できる。検体調製ゾーン１８から導 電バリア１６を通る流れは第１の端部２２でまたはその付近でクロマトグラフィ 媒体２０と接触し、検体調製ゾーン１８の内容が、検出ゾーン２６と対照ゾーン ２８を含めクロマトグラフィ媒体２０を通って流れる。 アッセイ装置１０は、オプションとして、図１Ａに図示してあるようにクロマ トグラフィ媒体２０の第１の端部２２と動作的に接触する導体４２をさらに含む 。導体４２は実質的に液体を吸収することなく伝達できるセルロースまたはその 他の材料などの材料とすることができる。導体４２は界面活性剤処理してクロマ トグラフィ媒体２０へ試薬がさらに均等に添着できるようにしても良い。導体４ ２が存在する場合で導電バリア１６は第１と第２の対置成分１２および１４が対 置した時に、導体４２と接触するのが望ましい。 図１Ｃは第１と第２の対置成分１２および１４を対置させた後で導体４２を備 えたアッセイ装置１０の側面図をさらに詳細に示し、検体調製ゾーン１８，導電 バリア１６，導体４２の大まかな寸法上の関連性を示している。代表的には、導 電バリア１６のエッジは検体調製ゾーン１８のエッジを越えて延出し、さらに導 体４２のエッジは導電バリア１６のエッジを越えて延出する。これは、これらの エッジを越える望ましくない試薬の流れを最小限に抑さえるかまたは排除するた めである。図１Ｃの矢印は検体調製ゾーン１８，導電バリア１６，導体４２を通 る液体の流路を示す。 アッセイ装置１０はクロマトグラフィ媒体２０の第２の端部２４と動作的に接 触して第１の端部２２から第２の端部２４へ向かいクロマトグラフィ媒体２０を 通る、図１Ａに図示したような液体を吸い取る際の補助のためのアブソーバ４４ をさらに含むことができる。 検体調製ゾーン１８はたとえば、セルロース、紙、ナイロン、レーヨン、グラ スファイバー、羊毛、または合成不織布などの何らかの好適な材料から作成でき るが、これに制限されない。検体調製ゾーン１８の多孔性は、全血または便検体 などの検体中の細胞性または粒状物質を瀘過できるように選択する。検体調製ゾ ーン１８は導電バリア１６を介してクロマトグラフィ媒体２０に検体を添着する 前に検体の処理のために少なくとも１種類の試薬を含むことができる。検体調製 ゾーン１８は液状検体を受け入れるのに適している。本明細書で用いているよう に、術語「液状検体」はクロマトグラフィを実行できる十分な液体を有する検体 で、半固形検体および粒状物質を含む検体を含むものと定義される。 検体調製ゾーン１８に存在し得る試薬は、検体調製ゾーン１８に添着される検 体やアッセイしようとする分析対象物によって変化する。試薬には、ｐＨを調節 するための酸または塩基、ｐＨを安定させるための緩衝液、ＥＤＴＡまたはＥＧ ＴＡなどの金属をギレート化するためのキレート剤、動物細胞の細胞膜やバクテ リアの細胞壁を水解して分析対象物を開放するための水解酵素、酵素のための基 質または補酵素、その他を含むことができ、これに限定されない。特に有用な抽 出試薬の１つは窒素酸を生成するため窒化ナトリウムと酢酸を混合した混合物で ある。窒化ナトリウムは検体調製ゾーン１８上に乾燥した形で存在でき、酢酸は 検体追加後に検体調製ゾーン１８へ追加できる。 検体、またはオプションで、咽喉スワブなどのサンプリング器具または微孔フ ィルタを検体調製ゾーン１８に操作員が配置できる。必要であれば、他の試薬を 追加できる。 第１と第２の対置成分１２および１４の本体はアッセイの実行の際に関係する 液体を含むように湿気に対して十分な非透過性の積層厚紙から作成するのが望ま しい。その他のセルロース基材の材料、たとえば板紙やソリッドブリーチサルフ ァイト（ＳＢＳ）も使用できる。これ以外に、本体は湿気に対して非透過性のプ ラスチックから作成できる。好適なプラスチックは、レクサンなどのポリカーボ ネート・プラスチックである。 ヒンジ３０は液体に対して非透水性の材料、たとえば第１と第２の対置成分１ ２および１４の本体に使用される材料と接合性のあるまたは同一のプラスチック などから作成するのが望ましい。 代表的には、クロマトグラフィ媒体２０，アブソーバ４４，導体４２，導電バ リア１６およびその他の液体を受け入れる成分は接着剤で第１と第２の対置成分 １２および１４の本体に固定する。適当な接着剤は従来技術で周知である。その 他の接合方法、たとえばステープロ止めやタックも使用できる。 分析対象物は分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを用いて、または それ自身は標識していない分析対象物に対する特異的結合パートナーに対する標 識第２の特異的結合パートナーを用いて検出する。多くの場合、分析対象物に対 する標識特異的結合パートナーの使用が好適である。標識特異的結合パートナー の標識は前述したようにコロイド金属標識などの視覚的に検出可能な標識が望ま しい。 これ以外に、他のコロイド標識、たとえばコロイド硫黄標識または染料シリカ 標識も使用できる。あまり好適でない代替実施態様において、視覚的に検出可能 な標識は有色ラテックス標識である。他の標識、たとえば放射性標識の使用もま た可能である。 本発明の出願人はこの理論に必ずしも固執することを意図していないが、検体 を含む液体をコロイド金などのコロイド金属標識で標識してある溶解可能な特異 的結合パートナーに添加した場合、分析対象物と標識特異的結合パートナーの間 の反応速度はきわめて高速である。このような速い反応速度によって、分析対象 物と標識特異的結合パートナーの組み合せが導電バリア１６を介してクロマトグ ラフィ媒体２０に添着される前に分析対象物の完全な標識が実質的に行なえる。 つまり、本発明によるアッセイ装置で行なう一次元クロマトグラフィ法では、ク ロマトグラフィにかけるものがほとんど分析対象物とこれに対応する標識特異的 結合パートナーの２相性複合体である。これにより特異的結合パートナーを結合 しない汚染物質から複合体を分離できアッセイの精度を向上させられる。 本実施態様において、標識特異的結合パートナーは検体調製ゾーン１８へ液体 の添加により再溶解できる形で検体調製ゾーン１８上に存在するのが望ましい。 代表的には、液体は水性液体である。代表的には、液体は検体それ自体である。 場合によっては、特に小量の検体量を使用する場合、追加の緩衝液またはその他 の液体を検体調製ゾーンに追加するのが望ましい場合がある。 後述する他の実施態様において、標識特異的結合パートナーは検体調製ゾーン から分離されているがアッセイ実行中にはこれと接触するクロマトグラフィ・ア ッセイ装置の成分上に存在できる。これらの実施態様において、標識特異的結合 パートナーはこの成分上に再溶解可能な形で存在するのが望ましく、また検体が 成分と接触する時に溶解される。場合によっては標識特異的結合パートナーは、 検体とは別個の、違う液体を成分に追加して溶解できる。 第２の対置成分１４上のクロマトグラフィ媒体２０は平坦なストリップである 。代表的には、第１と第２の端部２２および２４を有する長方形である。本明細 書全体で、術語「第１の端部２２」は検体を添着するクロマトグラフィ媒体２０ の端部を表わし、術語「第２の端部２４」はこれに対向する端部を表わす。アッ セ イ実行中の検体の流れる方向はクロマトグラフィ媒体２０の第１の端部２２から 第２の端部２４に向かう方向である。クロマトグラフィ媒体２０は前述のように 分析対象物および分析対象物−抗体複合体の薄層クロマトグラフィのための媒体 として好適な材料から構成される。 用途によっては、クロマトグラフィ媒体２０の上部に第２の可撓性で透明な支 持を配置して、膜を通って流れる検体を調節し、膜最上部を越える移動を防止す るのが好ましい。適当な可撓性透明支持としては、ポリエチレン、ビニール、マ イラー、セロファンなどが挙げられる。 クロマトグラフィ・アッセイ装置１０をサンドイッチ法イムノアッセイなどの アッセイに使用する場合、クロマトグラフィ媒体２０は実質的にクロマトグラフ ィ媒体２０より小さい検出ゾーン２６をさらに含むことができる。検出ゾーン２ ６は拡散しないように不動化してある分析対象物に対する第２の特異的結合パー トナーを含むことができる。第２の特異的結合パートナーは共有または非共有手 段のどちらかでクロマトグラフィ媒体に結合できる。共有手段が一般に好適であ る。アッセイしようとする分析対象物が抗原またはハプテンの場合、第２の特異 的結合パートナーは抗原またはハプテンに対する抗体とすることができる。これ 以外に、分析対象物を抗体として、第２の特異的結合パートナーを抗体によって 特適に結合され得る抗原またはハプテンとすることができる。 クロマトグラフィ媒体２０はクロマトグラフィ媒体２０より実質的に小さく、 検出ゾーン２０から離れて対照ゾーン２８をさらに含むことができる、対照ゾー ン２８は三次元「サンドイッチ法」複合体の形成で検出ゾーン２６で結合されな かった標識抗体を結合するために拡散しないように不動化した分析対象物を含む ことができる。このような抗体はどれも対照ゾーン２８で不動化分析対象物によ って結合され対照ゾーン２８で検出可能領域またはバンドを形成する。これによ って後述するようにアッセイの動作と試薬の正しい結合についてのチェックを提 供する。検出ゾーン２６での第２の特異的結合パートナーと対照ゾーン２８での 分析対象物とを結合するために用いられる方法は従来技術で周知であり、これ以 上説明する必要はない。 これ以外に、分析対象物の種類によっては、たとえば炭化水素などで、分析対 象物をクロマトグラフィ媒体２０に安定に固定するのが困難または不可能なこと がある。このような場合、対照ゾーン２８は標識抗分析対象物抗体に特異的な抗 体を不動化したゾーンを含むことができる。たとえば、分析対象物がストレプト コッカスＡ特異性炭化水素で、ストレプトコッカスＡ抗原に特異性のある標識抗 体がウサギＩｇＧの場合、対照ゾーン２８はヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体を含むこと ができる。このような場合に、分析対象物濃度が高い検出ゾーン２６で標識抗分 析対象物抗体の完全な取り込みとこれに続く対照ゾーン２８からの標識抗分析対 象物抗体の消失を防止するため、分析対象物に対して非特異的で標識抗分析対象 物抗体以外の種の標識抗体を追加するのが望ましいことがある。このような抗体 は免疫学的に相違のない免疫グロブリンまたは被験検体に見付からない分析対象 物に対する抗体を構成し得る。対照ゾーン２８は被験検体に見付からない抗種抗 体または分析対象物を含むことになる。 本装置の幾つかの変化が可能である。１つの変化において、前述したように、 検体調製ゾーン１８は検体調製ゾーン１８への液体の添加により溶解できる形で 検出可能な標識により標識された分析対象物に対する特異的結合パートナーをさ らに含むことができる。液体は検体それ自体とすることができる。標識特異的結 合パートナーは凍結乾燥または可逆的に沈澱させ検体調製ゾーンへの検体の追加 により再溶解され易動性になるようにできる。この変化において、検体調製ゾー ン１８への検出試薬追加は、検出試薬が検体調製ゾーン１８への検体の添加によ り自動的に生成されるので、必要ではない。 別の変化において、第２の対置成分１４上のクロマトグラフィ媒体２０の第１ の端部２２と動作的に接触する導体４２を動作的に接触する有限容量のアブソー バ４２ａで置き換えられる。アブソーバ４２ａは第１と第２の対置成分１２およ び１４が対置された時に導電バリア１６と接触するように配置して、検体をアブ ソーバ４２ａに添加する。これはクロマトグラフィ媒体２０が過負荷にならない ようにクロマトグラフィ媒体２０への検体の流れを調節する際に有用である。 このバージョンで、アブソーバ４２ａは前述したように再溶解できる形で分析 対象物に対する標識特異的結合パートナーを含むことができる。この構成におい て、標識特異的結合パートナーは第１と第２の対置成分１２および１４を対置さ せた時に再溶解され、導電バリア１６を介してアブソーバ４２ａへ検体を添着す る。検体と再溶解した標識特異的結合パートナーの混合物が第１の端部２２から クロマトグラフィ媒体２０に入る。 本発明によるアッセイ装置での導電バリアの使用は、試薬の過剰に高濃度の局 部的集中を防止し、クロマトグラフィ媒体へまたこれを通る試薬の流れが実質的 に同期するように保証することで、クロマトグラフィの一層定常的で再現性のあ る処理を提供する。 Ｄ．２成分装置の別の構成 前述の図１Ａ、図１Ｂ、図１Ｃに図示した装置の構造の一般原理は、本発明に よる他の装置を製作するためにも使用できる。これらの装置の詳細を以下に説明 する。 １．第１の対置成分上に検体調製ゾーンを備える装置 本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置の別の実施態様は、第１の対置 成分上に、即ちクロマトグラフィ媒体が配置されている成分上に検体調製ゾーン を含む装置である。代表的には、本実施態様において、第２の対置成分は再溶解 できる形で分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含むアプリケータを 含む。本実施態様において、導電バリアは第１の対置成分に取り付けておきアプ リケータと検体調製ゾーンの間の動作的接触が導電バリア経由で行なわれるよう にする。 本実施態様において、第１と第２の対置成分を対置させることでアプリケータ は導電バリアを介して検体調製ゾーンと接触するようになり、分析対象物に対す る標識特異的結合パートナーが再溶解される。 望ましくは、第１の対置成分はさらに導体を含み、検体調製ゾーンとクロマト グラフィ媒体の間の動作的接触が検体調製ゾーンおよびクロマトグラフィ媒体両 者の導体との動作的な接触によって実現されるようにする。 望ましくは、第１の対置成分はさらにクロマトグラフィ媒体の第２の端部と動 作的に接触するアブソーバを含む。 クロマトグラフィ媒体は前述したように検出ゾーンおよび調製ゾーンを備えて 製作されるのが望ましい。 アッセイ装置の本実施態様を図２に図示してある。クロマトグラフィ・アッセ イ装置６０は第１の対置成分６２と第２の対置成分６４とを含む。０６２は検体 調製ゾーン６６、検体調製ゾーン６６と動作的に接触する導体６８、第１の端部 ７２と第２の端部７４とを有するクロマトグラフィ媒体７０を含む。クロマトグ ラフィ媒体７０は検出ゾーン７８と対照ゾーン８０とを含む。導電バリア８２は 第１の対置成分６２に取り付けられる。第２の対置成分６４は再溶解できる形で 標識特異的結合パートナーを含むのが望ましいアプリケータ８４を含む。第１の 対置成分６２と第２の対置成分６４はヒンジ８６によって接合される。第１の対 置成分６２はクロマトグラフィ媒体７０の少なくとも一部が観察できるようにす る窓８８を含む。第１の対置成分６２と第２の対置成分６４はロック９０および ９２などの係合装置を有し、ガスケット９４が第１と第２の対置成分６２および ６４を包囲する。 動作において、検体は検体調製ゾーン６６に添着され、前述の装置を運用でき る。 ２．同一の対置成分上に２個の別個のアプリケータを含む装置 本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置のさらに別の実施態様は、同一 の動作的に接触上に２個の別個のアプリケータを含む。これら２個のアプリケー タは、動作的接触が導電バリアによって行なわれる対置成分を対置させた時に対 置成分上の導体により架橋されるまで動作的に接触しない。 クロマトグラフィ・アッセイ装置の本実施態様が図３に図示してある。クロマ トグラフィ・アッセイ装置１００は第１の対置成分１０２と第２の対置成分１０ ４とを含む。第１の対置成分１０２は第１の端部１０８と第２の端部１１０とを 有するクロマトグラフィ媒体１０６、第１の端部１０８と動作的に接触する導体 １１２、およびクロマトグラフィ媒体１０６の第２の端部１１０と動作的に接触 するアブソーバ１１４を含む。クロマトグラフィ媒体１０６は検出ゾーン１１６ と対照ゾーン１１８を含む。導電バリア１２０は第１の対置成分１０２に取り付 けられる。第２の対置成分１０４は第１のアプリケータ（検体添着パッド）１２ ２と第２のアプリケータ（検出器添着パッド）１２４とを含む。第１のアプリケ ータ１２２と第２のアプリケータ１２４は第１の対置成分１０２と第２の対置成 分１０４が対置されるまで動作的に接触しない。第１の対置成分１０２と第２の 対置成分１０４とを対置すると、第１のアプリケータ１２２が導電バリア１２０ を介して導体１２２と動作的に接触するようになり、第２のアプリケータ１２４ は導体１２２とクロマトグラフィ媒体１０６の第１の端部１０８の両方に導電バ リア１２０を介して動作的に接触する。重複部分は数ミリメートル、即ち液体の 移し換えに十分な量が代表的である。これによって第１のアプリケータ１２２と 第２のアプリケータ１２４は導体１１２により架橋されて、第１のアプリケータ １２２と第２のアプリケータ１２４の内容が導電バリア１２０を通り、さらに導 体１１２を通ってクロマトグラフィ媒体１０６に添着される。第１の対置成分１ ０２と第２の対置成分１０４はヒンジ１２６によって接合される。第２の対置成 分１０４はクロマトグラフィ媒体１０６の観察ができるように窓１２８を含む。 第１と第２の対置成分１０２と１０４はロック１３０および１３２などの係合装 置とガスケット１３４も含む。 第１のアプリケータ１２２は検体添着パッドを含むことができ、第２のアプリ ケータ１２４は検出器添着パッドを含み、これに検出試薬を添着できる。術語「 検出器添着パッド」は、本明細書で用いているように、検出試薬、代表的には分 析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含む成分を表わす。術語「検出器 添着パッド」の使用はこの成分において検出を行なうことを意味するものではな く、代表的には検出はクロマトグラフィ媒体の検出ゾーンで行なわれる。 望ましくは、第２のアプリケータ１２４（検出器添着パッド）は、第２のアプ リケータ１２４への液体の添加により再溶解できる形で検出可能な標識により標 識された分析対象物に対する特異的結合パートナーを含む。液体は代表的には検 体それ自体であり、これが第１と第２の対置成分１０２および１０４を対置させ た時に標識特異的結合パートナーを溶解する。ある種のアッセイでは、検出器添 着パッドに別々に再構成する液体を添加するのが望ましいこともある。これ以外 にも、標識特異的結合パートナーは第２のアプリケータ１２４に液状で添着でき る。 ３．クロマトグラフィ媒体として同一対置成分上に標識特異的結合パートナー用 の備える装置 本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置のさらに別の実施態様は、クロ マトグラフィ媒体として同一対置成分上に標識特異的結合パートナー用のパッド を含む２成分装置である。本装置において、第２のアプリケータは他方の対置成 分上に配置される。 本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置の本実施態様は図４Ａに図示し てある。クロマトグラフィ・アッセイ装置１４０は第１の対置成分１４２と第２ の対置成分１４４とを有する。第１の対置成分１４２は第１の端部１４８と第２ の端部１５０とを有するクロマトグラフィ媒体１４６を有する。クロマトグラフ ィ媒体１４６は検出ゾーン１５２と、オプションで、サンドイッチ法イムノアッ セイに適したアッセイ装置の他の変化について前述したように、対照ゾーン１５ ４を有する。第１の対置成分１４２はクロマトグラフィ媒体１４６の第１の端部 １４８と動作的に接触する導体１５６と、クロマトグラフィ媒体１４６の第２の 端部１５０と動作的に接触するアブソーバ１５８も有する。第１の対置成分１４ ２は導体１５６と直接接触してクロマトグラフィ媒体１４６の第１の端部１４８ と間接的に接触するように配置された検出器添着パッド１６０も有する。第１の 対置成分１４２には導電バリア１６２が取り付けられている。第２の対置成分１ ４４は検体添着パッド１６４を有する。第１の対置成分１４２と第２の対置成分 １４４はヒンジ１６６によって接合される。第１の対置成分１４２と第２の対置 成分１４４を対置させた時、検体添着パッド１６４は導電バリア１６２を介して 検出器添着パッド１６０と動作的に接触するようになる。第２の対置成分１４４ はクロマトグラフィ媒体１４６を観察できるようにするための窓１６８を含む。 第１と第２の対置成分１４２と１４４はロック１７０および１７２などの係合装 置と、前述したようなガスケット１７４を含む。 装置１４０の断面後面図が図４Ｂに図示してある。図４Ｂに図示した断面は図 ４Ａの図面からみて、クロマトグラフィ媒体１４６とヒンジ１６６の間でヒンジ １６６に対向するエッジに向かって見たものである。図４Ｂでは第１の対置成分 １４２と第２の対置成分１４４を対向して図示しており、導電バリア１６２がこ の間にある。検体添着パッド１６４は導電バリア１６２を介して検出器添着パッ ド１６０と間接接触して図示してある。検出器添着パッド１６０は導体１５６と 接触し、これがさらにクロマトグラフィ媒体１４６の第１の端部１４８に接触す る。クロマトグラフィ媒体１４６の検出ゾーン１５２と対照ゾーン１５４が図示 してある。クロマトグラフィ媒体１４６の第２の端部１５０は、対照ゾーン１５ ４に近い方で、アブソーバ１５８と接触する。図４Ｂの矢印は検体添着パッド１ ６４、導電バリア１６２、検出器添着パッド１６０を通る液体の流路を示す。 第１と第２の対置成分１４２と１４４を対置させることで検体添着パッド１６ ４が導電バリア１６２を介して検出器添着パッド１６０に検査しようとする検体 を添着させ、さらに導体１５６を介してクロマトグラフィ媒体１４６の第１の端 部１４８に添着させる。 望ましくは、検出器添着パッド１６０は検出器添着パッド１６０への液体の添 加により再溶解可能な形で分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含 み、第１の特異的結合パートナーは検出可能なラベルで標識される。 望ましくは、検体を添着した後の検体添着パッド１６４の内容は液体を含み、 検出器添着パッド１６０へ添着された液体は検体添着パッドの内容を含む。この 構成において、標識特異的結合パートナーを再溶解するのには迫加の液体を必要 としない。 本装置の変化において、アブソーバは第１の対置成分上に配置されるのではな く、第２の対置成分上に配置されている。アブソーバは第２の対置成分上にこれ も配置されている検体添着パッドから分離され第１の対置成分と第２の対置成分 を対置させた時にクロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触するように 配置されている。装置のこの変化が図５に図示してある。図５において、アブソ ーバ１５８が第２の対置成分１４４上の再配置され、第１と第２の対置成分１４ ２と１４４が当接された時にクロマトグラフィ媒体１４６の第２の端部１５０と 動作的に接触することを除いて、装置の全ての成分は図４と同一である。これに より一層大きいアブソーバが使用できる。大きなアブソーバの利点は、多くの検 体量を使用でき、希釈検体を分析できるようになることを含むものである。これ はアッセイに大きなダイナミックレンジを提供できる。 ４．クロマトグラフィ媒体の第１の端部と直接接触する検出器添着パッドを備え た装置 本装置の更なる変化では、検出器添着パッドとクロマトグラフィ媒体の間の導 体を排除して、検出器添着パッドがクロマトグラフィ媒体の第１の端部と直接接 触する。この変化において、第１と第２の対置成分を対置させた時、検出器添着 パッドと検体添着パッドはクロマトグラフィ媒体の第１の端部に直接隣接してい る検出器添着パッドの領域を除いて導電バリアを介して動作的に接触する。検出 器添着パッドのこの領域には僅かなギャップまたはオフセットがあり、検体は検 体添着パッドまたは導電バリアからクロマトグラフィ媒体へ直接流れることがで きない。このギャップまたはオフセットは約０．５ミリメートルから約２ミリメ ートルが代表的で、約０．５ミリメートルから約１ミリメートルがさらに代表的 である。 この変化は大量の「フック」効果による偽陰性を発生することなく標識抗ヘモ グロビン抗体の使用による便潜血の検出に特に好適である。これは他の分析対象 物にも使用可能である。 この変化は図６Ａに図示してある。クロマトグラフィ・アッセイ装置２００は 第１の対置成分２０２と第２の対置成分２０４を有する。第１の対置成分２０２ は、第１の端部２０８と第２の端部２１０を有するクロマトグラフィ媒体２０６ を有する。クロマトグラフィ媒体２０６は検出ゾーン２１２と対照ゾーン２１４ を有する。第１の対置成分２０２はクロマトグラフィ媒体２０６の第２の端部２ １０と動作的に接触するアブソーバ２１６も有する。第１の対置成分２０２はク ロマトグラフィ媒体２０６の第１の端部２０８と直接接触する検出器添着パッド ２１８も有する。第１の対置成分２０２には導電バリア２２０が取り付けられて いる。 第２の対置成分２０４は検体添着パッド２２２を有する。第１の対置成分２０ ２と第２の対置成分２０４はヒンジ２２４によって接合される。第１の対置成分 ２０２と第２の対置成分２０６を対置させた時に、検体添着パッド２２２はクロ マトグラフィ媒体２０６の第１の端部２０８と接触する検出器添着パッド２１８ の端部にある狭いギャップまたはオフセット２２６を除き、導電バリア２２０を 介して検出器添着パッド２１８と接触するようになる。このギャップ２２６は検 体添着パッド２２２へ添着された検体がクロマトグラフィ媒体２０６へ直接流れ るのを防止する。第２の対置成分２０４はクロマトグラフィ媒体２０６を観察で きるように窓２２８を有する。第１と第２の対置成分２０２および２０４は、前 述のようにロック２３０および２３２などの係合装置とガスケット２３４を有す る。 図６Ａの装置２００の後面断面図が図６Ｂに図示してある。図６Ｂに図示した 断面図は図６Ａの図面からクロマトグラフィ媒体２０６とヒンジ２２４の間でヒ ンジ２２４に対向するエッジに向かってみたものである。図６Ｂでは第１の対置 成分２０２と第２の対置成分第２の端部２４を対置して示し、これらの間の導電 バリア２２０とヒンジ２２４を閉じた位置で示してある。検体添着パッド２２２ は、クロマトグラフィ媒体２０６に最も近い検出器添着パッド２１８の端部にあ る小さいギャップ２２６を除いて検出器添着パッド２１８と間接接触するように 図示してある。検出器添着パッド２１８はクロマトグラフィ媒体２０６の第１の 端部２０８と直接的に接触する。クロマトグラフィ媒体２０６の検出ゾーン２１ ２と対照ゾーン２１４が図示されている。クロマトグラフィ媒体２０６の、対照 ゾーン２１４に近い方の第２の端部２１０はアブソーバ２１６と接触している。 ５．第１の成分上に検出器添着パッドを備える装置 本発明による２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置の別の実施態様は、第１ の対置成分上に配置した検出器添着パッドと検体添着パッド上に配置したSZPを 有する。本装置において、検出器添着パッドはクロマトグラフィ媒体の第１の端 部と動作的に接触するように配置されている。検出器添着パッドは検出器添着パ ッドへの液体の添加により再溶解可能な形で分析対象物に対する標識特異的結合 パートナーを含むのが望ましい。本装置はさらに検出器添着パッドと動作的に接 触しクロマトグラフィ媒体の第１の端部と間接接触する導体、ならびにクロマト グラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触するアブソーバを含む。 本発明の装置の本実施態様の動作において、検体を第２の対置成分上の検体調 製ゾーンに添着してから第１と第２の対置成分を対置させる。これにより検体調 製ゾーンの内容を導電バリアを介して導体に添着し、さらに検出器添着パッドを 介してクロマトグラフィ媒体の第１の端部に添着する。検体が検出器添着パッド に達すると、検出器添着パッドの内容が溶解される。検出器添着パッドの内容が 分析対象物に対する特異的結合パートナーを含む場合、検出器添着パッドを介し ての検体の通過により検体中に存在するあらゆる分析対象物に特異的結合パート ナーが結合することになる。 本装置の実施態様が図７に図示してある。アッセイ装置２４０は第１の対置成 分２４２と第２の対置成分２４４とを有する。第１の対置成分２４２は第１の端 部２４８と第２の端部２５０とを有するクロマトグラフィ媒体２４６を含む。第 １の対置成分２４２はクロマトグラフィ媒体２４６の第１の端部２４８に動作的 に接触し、検出器添着パッド２５２と動作的に接触しクロマトグラフィ媒体２４ ６の第１の端部２４８と間接接触する検出器添着パッド２５２と、クロマトグラ フィ媒体２４６の第２の端部２５０と動作的に接触するアブソーバ２５６も含む 。クロマトグラフィ媒体２４６は検出ゾーン２５８と対照ゾーン２６０を含む。 第１の対置成分２４２には導電バリア２６２を取り付けてある。 第２の対置成分２４４は検体調製ゾーン２６４を含む。FSCC２４２および２４ ４はヒンジ２６６によって接合される。第２の対置成分２４４はクロマトグラフ ィ媒体２４６の少なくとも一部を観察できるようにするか移行部２６８を有する 。第１と第２の対置成分２４２および２４４は前述のように係合装置２７０およ び２７２とガスケット２７４を含む。 本実施態様の変化は第２の対置成分２４４上と第１の対置成分２４２上に再溶 解可能な形で分析対象物に対する特異的結合パートナーを含む。再溶解可能な特 異的結合パートナーが第２の対置成分２４４上に配置される場合、検体調製ゾー ン２６４それ自体に直接配置しないのが望ましい。むしろ、検体が第１に検体調 製ゾーン２６４を通過し、その後で検体調製ゾーン２６４を包囲する領域２７６ に移動して、特異的結合パートナーを再溶解するように領域２７６で検体調製ゾ ーン２６４を包囲するのが望ましい。たとえば、検体調製ゾーン２６４は第２の 対置成分２４４の表面に載置し接着剤または締結具によって接着され、また適当 に処理したろ紙片を含むことができる。これによって、溶解可能な特異的結合パ ートナーに検体が接触する前にたとえばｐＨの調節、完全な細胞の溶解、および ／または粒子の除去と言った検体処理を行なうことができる。本実施態様のこの 変化では、広いダイナミックレンジを提供でき、利用可能な抗体が低親和性の場 合、または低濃度の分析対象物を検出しようとする時に有用である。 ６．洗浄を提供するための２セクタ・アプリケータを備える装置 本発明による２成分アッセイ装置の別の実施態様は、検体と標識特異的結合パ ートナーの混合物がクロマトグラフィ媒体を通過した後で標識特異的結合パート ナーと反応しなかった検体の洗浄を提供するための２セクタ・アプリケータを有 する。本実施態様は一層はっきりしたバックグラウンドを提供し弱陽性の読取り を簡単にする利点を有している。 本実施態様において、第１の対置成分は第１の端部と第２の端部を有するクロ マトグラフィ媒体と、クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する導 体と、クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触するアブソーバとを含 む。第２の対置成分は２セクタに分割したアプリケータを含む。第１のセクタは 溶解可能な形で分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含み、第２のセ クタは標識特異的結合パートナーを欠如する。第１と第２の対置成分を対置させ ることで、アプリケータの第２のセクタではなく第１のセクタだけを導電バリア 経由で導体に間接接触させて、アプリケータの第１のセクタの内容を導体に添着 しさらにクロマトグラフィ媒体の第１の端部に添着させる。第２のセクタは導体 と間接接触して置かれ、第２のセクタの内容は第１のセクタを通って流れてから 導電バリア経由で導体に達する。つまり、アプリケータの第１のセクタの内容の 導体への添着に続けて、第２のセクタの内容が導体に添着される。検体を含むが 標識特異的結合パートナーを含まない第２のセクタの内容はクロマトグラフィ媒 体から未結合の標識特異的結合パートナーを洗い流すために用い、これによって クロマトグラフィ媒体に見られる視認可能な標識のバックグラウンドを減少し、 アッセイ装置の読みを改善する。これは弱陽性アッセイで特に有利である。 アッセイ装置の本実施態様が図８に図示してある。アッセイ装置３００は第１ の対置成分３０２と第２の対置成分３０４を有する。第１の対置成分３０２は第 １の端部３０８と第２の端部３１０を有するクロマトグラフィ媒体３０６、クロ マトグラフィ媒体３０６の第１の端部３０８と動作的に接触する導体３１２、ク ロマトグラフィ媒体３０６の第２の端部３１０と動作的に接触するアブソーバ３ １４を含む。第１の対置成分３０２には導電バリア３１６が取り付けてある。 第２の対置成分３０４は２つのセクタに分割されたアプリケータ３１８を有す る：第１と第２の対置成分３０２および３０４が対置されると導体３１２と直接 接触する第１のセクタ３２０、および第１と第２の対置成分３０２および３０４ が対置された時に導体３１２と間接接触する第２のセクタ３２２である。 クロマトグラフィ媒体３０６は検出ゾーン３２４と対照ゾーン３２６を有する 。第１と第２の対置成分３０２および３０４はヒンジ３２８で接合される。第２ の対置成分３０４はクロマトグラフィ媒体３０６の少なくとも一部を観察できる ようにするための窓３３０を有する。第１と第２の対置成分３０２および３０４ は前述したように係合装置３３２および３３４とガスケット３３６も含む。 ７．別の対置成分上に２個の検出器添着パッドを設けた装置 本発明による２成分アッセイ装置のさらに別の実施態様は別の対置成分上に２ 個の独立した検出器添着パッドを含む。この構造は比較的大量の標識特異的結合 パートナーを使用したい場合、たとえば標識抗体が希釈した形でのみ利用できる 場合や抗体を濃縮しようとすると変性させるかまたは不活化させてしまうような 場合に特に有用である。 ２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置の実施態様が図９に図示してある。ク ロマトグラフィ・アッセイ装置３５０は第１の対置成分３５２と第２の対置成分 ３５２をヒンジ３５６で接続してある。第１の対置成分３５２は第１の端部３６ ０と第２の端部３６２とを有するクロマトグラフィ媒体３５８を含む。クロマト グラフィ媒体３５８は検出ゾーン３６４と、オプションとして対照ゾーン３６６ を含む。 第１の対置成分３５２はクロマトグラフィ媒体３５８の第１の端部３６０と動 作的に接触する第１の検出器添着パッド３６８も有している。第１の検出器添着 パッド３６８は第１の検出器添着パッド３６８に液体の添加により再溶解可能な 形で分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含む。第１の対置成分３ ５２は第１の検出器添着パッド３６８と動作的に接触する導体３７０も有し、第 １の検出器添着パッド３６８がクロマトグラフィ媒体３５８の第１の端部３６０ と導体３７０を架橋するようにしてある。第１の対置成分３５２はクロマトグラ フィ媒体３５８の第２の端部３６２と動作的に接触するアブソーバ３７２も有す る。第１の対置成分３５２には導電バリア３７４が取り付けてある。 第２の対置成分３５４はアッセイしようとする検体を受け入れるための検体調 製ゾーン３７６を含む。第２の対置成分３５４は検体調製ゾーン３７６と動作的 に接触する第２の検出器添着パッド３７８も含み、検体調製ゾーン３７６は第２ の検出器添着パッド３７８上に配置される。検体調製ゾーン３７６と第２の検出 器添着パッド３７８は締結具または接着剤で互いに保持できる。第２の検出器添 着パッド３７８と検体調製ゾーン３７６は、検体調製ゾーン３７６に添着される 検体が第２の検出器添着パッド３７８に入る前に検体調製ゾーン３７６を通過し なければならないように配置してある。第２の検出器添着パッド３７８は検体調 製ゾーン３７６への検体の添加により再溶解可能な形で分析対象物に対する第２ の特異的結合パートナーを含む。第２の検出器添着パッド３７８は検体調製ゾー ン３７６への検体の添着で第２の特異的結合パートナーを溶解して、検体調製ゾ ーン３７６に検体と第２の特異的結合パートナーの混合物が含まれるように配置 してある。 第２の特異的結合パートナーは検出可能な標識で標識してある。望ましくは、 第１と第２の特異的結合パートナーが同一で、第１と第２の特異的結合パートナ ーを標識する検出可能なラベルを同一にする。 第２の対置成分３５２は検出ゾーン３６４と、存在するならば対照ゾーン３６ ６も含めてクロマトグラフィ媒体３５８の少なくとも一部を観察できるようにす るための開口部３８０も含む。第１と第２の対置成分３５２および３５４は導電 バリアを含む２成分装置で前述したようにロック３８２および３８４などの係合 装置とガスケット３８６も有する。 第１と第２の対置成分３５２および３５４を対置させると、検体調製ゾーン３ ７６が導電バリア３７４と対置されて、検体と第２の特異的結合パートナーを導 体３７０に、また導電バリア３７４を経由して第１の検出器添着パッド３６８を 通りクロマトグラフィ媒体３５８へ添着する。つまり、検体は第２の特異的結合 パートナーについで第１の特異的結合パートナーと順番に接触してからクロマト グラフィのためにクロマトグラフィ媒体３５８の第１の端部３６０へ添着される 。これによって一層大量の標識特異的結合パートナーが検体と接触することにな りアッセイの感度が増大する。 Ｅ．多重アッセイ装置 上記の装置の説明は一度に１つのアッセイを実行するアッセイ装置に関するも のである。しかし、本発明によるアッセイ装置は同時に多数のアッセイを実行で きるようにも製作できる。アッセイは同一の分析対象物または別個の分析対象物 に対して実行できる。一般に、前述の装置の全てのバージョンで、多数のクロマ トグラフィ媒体、検体調製ゾーン、導電バリア、アプリケータ、導体、アブソー バ、その他必要とされる成分に第１と第２の対置成分を提供することで多重使用 に適合する。本発明による多重装置の以下の説明は例示を目的としたものであっ て排他的なものではない。 １．基本的多重装置 本発明による多重アッセイ装置の１つのバージョンが図１０に図示してある。 アッセイ装置４００は第１の対置成分４０２と第２の対置成分４０４を有する。 第２の対置成分４０４はヒンジ４０６により第１の対置成分４０２へ蝶番式に取 り付けてある。第１の対置成分４０２は複数のクロマトグラフィ媒体４０８を含 む。クロマトグラフィ媒体４０８の各々は第１の端部４１０と第２の端部４１２ を有し、検出ゾーン４１４と対照ゾーン４１６を含む。各クロマトグラフィ媒体 ４０８の第２の端部４１２はアブソーバ４１８と動作的に接触して、クロマトグ ラフィ媒体４０８へ流れを導く。各クロマトグラフィ媒体４０８には別個のアブ ソーバ４１８を設ける。第１の対置成分４０２には複数の導電バリア４２０が取 り付けてある。導電バリア４２０は物理的に分離できるが、これ以外に、単一の 構造に組み合せておき実質的に防水性のバリアで機能的に分離することもできる 。 第２の対置成分４０４は各クロマトグラフィ媒体４０８に１つづつ、複数の検 体調製ゾーン４２２を含む。代表的には、各検体調製ゾーン４２２は検体調製ゾ ーン４２２への液状検体の添加により再溶解可能な形で検査しようとする分析対 象物に対する標識特異的結合パートナーを含む。これ以外にも、検体の添加の前 または後で液状の標識特異的結合パートナーを検体調製ゾーン４２２に添加でき る。第１と第２の対置成分４０２と４０４を対置させることで検体調製ゾーン４ ２２の各々を第１の端部４１０で対応するクロマトグラフィ媒体４０８に加えら れる。第２の対置成分４０４は各クロマトグラフィ媒体４０８に１つづつの、複 数の開口部４２４を含む。第１の対置成分４０２と第２の対置成分４０４は前述 のように係合装置４２６および４２８とガスケット４３０を含む。 この多重装置は、装置を用いようとするアッセイに合わせて、２ないし１２個 またはそれ以上の検体調製ゾーンとクロマトグラフィ媒体を含むことができる。 代表的には、本装置は２ないし５個の独立検体調製ゾーンおよびクロマトグラフ ィ媒体を含む。 本装置のこの実施態様は同一検体の異なる希釈倍率で多数の異なる分析対象物 をアッセイするために使用でき、または多数の異なる検体で同一分析対象物をア ッセイするために使用できる。後者のモードは同一症例から異なる時刻に採取し た検体を問題とする分析対象物について、たとえば便潜血について、アッセイし なければならないような条件でアッセイする場合に特に有用である。便潜血の存 在は１日１回またはそれ以外の間隔で所定の期間にわたって採取した一連の便検 体を用いて決定することが多い。これ以外に、アッセイの１つまたはそれ以上に コントロールまたは対照スタンダードを立てることができる。 ２．折り畳みウェルを設けた多重装置 多重装置のさらに別の変化において、少なくとも１つの検体調製ゾーンが折り 畳み式ウェルを含むことができ、ここに採取スワブまたはその他の検体を含む器 具を付加することができる。 多重装置のこの変化は図１１Ａに図示してある。装置４４０は第１の対置成分 ４４２と第２の対置成分４４４を有する。第２の対置成分４４４はヒンジ４４６ により第１の対置成分４４２へ蝶番式に取り付けてある。第１の対置成分４４２ は対照ウェル４４８と折り畳み式即ちスポンジ状材料から作成された検体ウェル ４５０とを有する。第２の対置成分４４４は本実施態様では２個の、複数の横方 向に分離されたクロマトグラフィ媒体４５２を有し、各々が第１の端部４５４と 第２の端部４５６を備える。クロマトグラフィ媒体４５２の各々は検出ゾーン４ ５８と対照ゾーン４６０を有する。第２の対置成分４４４には各クロマトグラフ ィ媒体４５２に対して１つづつの複数の導電バリア４６２が取り付けてある。 第１の対置成分は検出ゾーン４５８と対照ゾーン４６０を含めクロマトグラフ ィ媒体４５２の各々の一部を観察するための開口部４６４を有している。第１と 第２の対置成分４４２および４４４は係合装置４６６および４６８とガスケット ４７０を含む。第１の対置成分４４２と第２の対置成分４４４が対置されると、 対照ウェル４４８内と折り畳み式検体ウェル４５０内の検体がクロマトグラフィ のために導電バリア４６２を介して対応するクロマトグラフィ媒体４５２に添着 される。 折り畳み式ウェルが含まれる場合、第１の対置成分は、ガスケット４７０の代 わりに、第１の対置成分と第２の対置成分を対置させた時に第２の対置成分上に 折り曲げられる蝶番式に折り曲げられる羽根４７２を含むことができる。本発明 による多重アッセイ装置のこのバージョンは図１１Ｂに図示してある。 スワブの適用に適している本発明の本実施態様およびその他の実施態様におい て、装置はスワブに付着する液体量の大幅な変化に対応することができ、スワブ の過飽和が有害になることはない。本装置はスワブを包囲する周辺領域に移動す る液体が装置の動作に干渉しないように設計されている。 ３．検査カードを受け入れるのに適した多重装置 多重装置のさらに別の変化は便潜血中のＨｂ判定に特に有用である。本装置は 代表的には連続病日に採取される数個の乾燥便検体を含む検査カードを受け入れ るのに適している。 この変化が図１２に図示してある。アッセイ装置４８０は第１の対置成分４８ ２と第２の対置成分４８４とを有する。第２の対置成分４８４はヒンジ４８６に よって第１の対置成分４８２に蝶番式に取り付けられている。第１の対置成分４ ８２は複数の横方向に分離された試薬パッド４８８、即ちアプリケータを含む。 望ましくは、各アプリケータ４８８は溶解可能な形で分析対象物に対する標識特 異的結合パートナーを含む。 第２の対置成分４８４は第１の対置成分４８２上の各々の試薬パッド４８８に クロマトグラフィ媒体４９０を含む。クロマトグラフィ媒体４９０は横方向に分 離される。クロマトグラフィ媒体４９０の各々は第１の端部４９２と第２の端部 ４９４を有し、検出ゾーン４９６と対照ゾーン４９８を含む。各クロマトグラフ ィ媒体４９０の第１の端部４９２は導体５００と動作的に接触し、各クロマトグ ラフィ媒体４９０の第２の端部９４９はアブソーバ５０２と動作的に接触する。 各々のクロマトグラフィ媒体４９０には独立した導体５００とアブソーバ５０２ がある。第２の対置成分４８４は、たとえば第２の対置成分４８４の凹部５０８ によって各導体５００と動作的に接触するように配置された複数の乾燥試料を含 む検査カード５０４を受け入れるのに適している。 第２の対置成分４８４には各クロマトグラフィ媒体４９０毎に１つづつの複数 の導電バリア５１０が取り付けてある。 第２の対置成分４８２は各クロマトグラフィ媒体４８８に１つづつ、各クロマ トグラフィ媒体４８８を観察するための複数の開口部５１２を含む。第１と第２ の対置成分４８２および４８４は各々が検体と試薬を保持するための係合装置５ １４および５１６とガスケット５１８を含む。 使用において、緩衝液またはその他の液体を各アプリケータ１８８に添加して 標識特異的結合パートナーを再構成する。第１と第２の対置成分４８２および４ ８４を対置させることでアプリケータ４８８の各々を対応する乾燥試料５０６に 付着させて各々の乾燥試料５０６と各アプリケータ４８８の内容が各導電バリア ５１０へ、さらに導体５００へ、さらに各クロマトグラフィ媒体４９０の第１の 端部４９２へ添着されるようにする。検査カード５０４は試料５０６の各々を所 定位置に保持してアプリケータ４８８の内容を受け入れられるようにし、また試 料５０６の分析対象物が抽出され、標識特異的結合パートナーと反応し、導電バ リア５１０へさらには導体５００へ添着されるようにする。 本発明による検査装置のさらに別の変化も可能である。たとえば、前述の２成 分装置のいずれも対置成分の一方にカバーを蝶番式に取り付けることができる。 このカバーは開口部を設けてクロマトグラフィ媒体の少なくとも一部を観察でき るようにしてある。 ＩＩ．アッセイ装置で使用する分析対象物と抗体 本発明によるアッセイ装置での検出に適した分析対象物は、抗原、ハプテン、 抗体を含む。本装置で検出可能な抗原は、ヘモグロビン、ストレプトコッカス（ Streptococcus）ＡおよびＢ抗原、原虫寄生体ジアルジア特異性抗原、ＨＩＶ特 異性抗原や肝炎特異性オーストラリア抗原を含むウィルス抗原が挙げられる。ア ッセイ可能な抗体には、たとえばヘリコバクタ・ピロリなどの細菌やＨＩＶを含 むウィルスに対する抗体が挙げられる。検出可能なハプテンとしては、十分な特 異性を有する抗体を調製可能なハプテンが含まれる。 本発明による装置が特に適した２種類の抗原はヒトヘモグロビンとストレプト コッカスＡ抗原である。ヒトＨｂ検出は、糞便中のヒトＨｂの存在が小腸または 直腸からの出血のマーカーであり、消化器系腫瘍やその他病原性疾患の存在を示 唆するものであることから、臨床的に有意である、ストレプトコッカスＡ抗原の 検出は、ストレプトコッカス感染では転帰が速く致命的になり得ることから、こ れも臨床的に有意である。 分析対象物が抗原またはハプテンの場合で、サンドイッチ法を用いる場合、第 １と第２の特異的結合パートナーは抗体が望ましい。多くの用途で、第１と第２ の特異的結合パートナーは分析対象物の異なるエピトープに対する抗体とするの が望ましいが、これは必須ではない、抗体はポリクローナルまたはモノクローナ ルで良くＩｇＧ、ＩｇＭ、またはＩｇＡとすることができる。多くの用途では、 ポリクローナル抗体はその本来の変異性により抗原多形性が存在するか存在し得 るような系で一層正確な検出が期待し得ることから好適である。 分析対象物がハプテンでサンドイッチ法アッセイを用いる場合、第１と第２の 特異的結合パートナーを異なるエピトープに対する抗体とするのが強く推奨され る。それ以外に、標識特異的結合パートナーと分析対象物の複合体の不動化した 第２の特異的結合パートナーに対する結合で干渉するような望ましくない競合反 応を惹起することがある。全てのハプテンが１つ以上のエピトープに対応できる 程十分に大きくないことが分かっているが、ある種のハプテンは、それ自身を注 入した時に効率的な抗原形成を惹起するのに十分な程大きくないものの、１つ以 上のエピトープを保有するのに十分な大きさである。ハプテンの１つ以上のエピ トープに対する抗体を得られないような場合では、競合法アッセイが一般に好適 である。 分析対象物が抗体でサンドイッチ法アッセイを用いる場合、第１の特異的結合 パートナーは種、クラス、またはサブクラス（アイソタイプ）特異性に基づいて 分析対象物に結合する標識抗体が代表的である。干渉を防止するため、抗体分析 対象物に対する第１の特異的結合パートナーを抗体分析対象物の定常領域に結合 するのが高く推奨される。分析対象物が抗体の場合、第２の特異的結合パートナ ーは抗原分析対象物に特異的な抗原またはハプテンが望ましい。 ある種の用途では、間接標識法を用いるのが望ましい。たとえば、ジアルジア 抗原の検査で、ＩｇＭ抗体を使用することができるが直接標識するのが困難であ る。その場合、易動性の第１の特異的結合パートナーに特異的な第２の特異的結 合パートナーを標識することができる。代表的には、標識した第２の特異的結合 パートナーを種、クラス、またはサブクラス特異性に基づく第１の特異的結合パ ートナーである抗体に結合させる。 第２の特異的結合パートナーの使用に代わる方法として、第１の特異的結合パ ートナーをビオチンと共役させてアビジン共役標識を使用することができる。 サンドイッチ法イムノアッセイでの分析対象物、特異的結合パートナー、標識 の間の関連性を以下の表Ｉに要約した： 表Ｉ サンドイッチ法イムノアッセイの結合様式 分析１次ＳＢＰ２次ＳＢＰ２次形成される複合体 （易動性） （固定） Ａｇ＝抗原 Ｈ＝ハプテン Ａｂ＝抗体 Ａｂ１＝１次抗体 Ａｂ２＝２次抗 体 Ａbc，Ａbc1，Ａbc2＝別の抗体に特異性の抗体 Ｂｉ＝ビオチン Ａｖ＝ア ビジン Ｌ＝標識 ＊は標識成分を表わす。 （１）Ａｂ２とＡｂ１＊は異なるエピトープに結合するのが望ましい。全ての ハプテンがこのような別のエピトープを保有するとは限らない。 ＩＩＩ．検査キット 本発明の別の態様は特定の分析対象物の検出に使用可能な検査キットである。 検査キットは、別々の容器に、 （１）本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置、 （２）検体を処理または抽出するのに要求される必要なあらゆる試薬、 （３）オプションで、アッセイ装置が再溶解可能な形で分析対象物に対する標 識特異的結合パートナーを内包しない場合、要求される特異的結合パートナー を含む。 （２）と（３）に必要な成分は別々にパッケージし、液状または固形（凍結乾 燥、結晶化、沈降化、または凝集による）とすることができる。後者の場合、使 用者が代表的には蒸留水または純水、生食、または緩衝液で溶解する。 検体を処理または抽出するのに必要な試薬は前述したような試薬である。場合 によってはこれらの試薬は溶解可能な形で装置に含まれる試薬と反応することが ある。一例として窒化ナトリウムと酢酸またはその他の弱酸との反応による窒素 酸の生成がある。 場合によって、検査キットは溶解可能な形で特異的結合パートナーまたは分析 対象物類似のいずれかの装置上にある試薬の溶解液も含むことができる。特定の 例は各種の装置の動作の開示で前述した。 本発明は以下の例で図示される。実施例は開示を目的としたものであって何ら かの方法で本発明の範囲を制限するように構成されているものではない。 例 例１ ストレプトコッカス抗原検出用装置の構成 ストレプトコッカスＡ抗原に対する標識抗体を用いたストレプトコッカスＡ抗 体検出用装置を作成した。本装置は基本的に図１３に図示した通りに作成された 。 図１３では第１の対置成分５４２と、第１の対置成分５４２へヒンジ５４５に よって蝶番式に取り付けられた第２の対置成分５４４を備える本発明によるクロ マトグラフィ・アッセイ装置５４０を示す。第１の対置成分５４２は第１の端部 ５４８と第２の端部５５０を有するクロマトグラフィ媒体５４６、検出ゾーン５ ５２、対照ゾーン５５４を含む。第１の対置成分５４２はクロマトグラフィ媒体 ５４６の第１の端部５４８に接して溶解性抗ストレプトコッカスＡ抗体５５６の ゾーン（検出器添着パッド）も含む。第１の対置成分はクロマトグラフィ媒体５ ４６の第２の端部５５０に接してアブソーバ５５８も含む。第１の対置成分５４ ２には導電バリア５６０が取り付けてある。第２の対置成分５４４は咽喉スワブ を受け入れることのできるウェル５６２を含む。ウェル５６２は、スワブ挿入用 の第１の開口部５６６と、抽出検体の導電バリア５６０添着用の第２の開口部５ ６８との、２個の開口部をウェルの各端に１つづつ備える非透水性バリア５６４ で被覆される。第１の対置成分５４２は窓５７０を含む。 対置成分はポリカーボネートなどの硬質非透水性プラスチックで作成した。第 １と第２の対置成分は各々長さ約３インチ、第１の対置成分は幅約２．２５イン チ、第２の対置成分は各々幅約２．３７５インチとした。第２の対置成分はフォ ームラバー製受け口と揃えておき、これに涙滴状ウェルを開けてスワブまたはそ の他のサンプリング器具を受け入れるようにした。 クロマトグラフィ媒体は孔径８μｍ、長さ０．５インチのニトロセルロース・ ストリップ（ＭＳＩ社製、マサチューセッツ州ウェストボロー）で、両面テープ （３Ｍ社製、ミネソタ州ミネアポリス）でプラスチック製裏板に固定した。導電 バリアとアブソーバはセルロース・ストリップ（アールストローム・フィルトレ ーション社製、ペンシルバニア州ホリースプリングス）で、アブソーバは長さ１ ７／３２インチで、アールストローム・グレード９３９とし、導電バリアは長さ ０．２５インチでアールストローム・グレード１２８１を用いた。検出器添着パ ッドもアールストローム・グレード１２８１で、幅０．３７５インチとした。ク ロマトグラフィ媒体は第２の端部をアブソーバと僅かに重ねた。 必要な試薬は第１にクロマトグラフィ媒体と溶解性抗体のゾーンに含め、この あと両面テープを用いて成分を裏板に保持して装置を組み立てた。 検出ゾーンには０．００１モル／ｌリン酸バッファｐＨ７．２に２ｍｇ／ｍｌ でウサギ抗ストレプトコッカスＡ抗原を含めた。対照ゾーンは同じバッファに同 様の濃度でヤギ抗ウサギＩｇＧを含めた。抗体溶液をクロマトグラフィ媒体の適 当な領域に添着してから低湿度環境において１００°Ｆで乾燥した。クロマトグ ラフィ媒体は余剰阻止溶液（ＥＬＩＳＡ用ブロッキング試薬、ベーリンガーマン ハイム社製、ドイツ・マンハイム、０．２％Ｔｗｅｅｎ２０含有蒸留水で１：１ ０希釈）で湿潤させた後さらに１００°Ｆで乾燥した。 検出器添着パッドは４０ナノメートルコロイド金粒子で標識したウサギ抗スト レプトコッカス抗体を含めた。標識抗体を検出器添着パッドに添着するため、標 識抗体をＤＢＮ（１．５モル／ｌトリ-ＨＣｌ，ｐＨ７．４，１％（ｖ／ｖ）Ｔ ｗｅｅｎ２０，０．４％（ｖ／ｖ）Ｂｒｉｊ３５，０．０２％（ｗ／ｖ）アジ化 ナトリウム、３ｍｇ／ｍｌウサギＩｇＧ）で１：１．５に希釈した。１検査あた り、１５μ１の希釈標識抗体を検出器添着パッドに追加した。検出器添着パッド は１００°Ｆで３０分間乾燥させた。 例２ 例１の装置を用いたストレプトコッカス抗原の検出 例１の装置を用いてストレプトコッカスＡ抗原を検出した。様々な量でストレ プトコッカスＡ型菌を付着させた繊維状ダクロン・スワブを検体ウェルに挿入し た。抽出試薬Ａ（０．２５％酢酸，５％Ｔｗｅｅｎ２０）３滴と、抽出試薬Ｂ（ ２モル／ｌ窒化ナトリウム，５％Ｔｗｅｅｎ２０）３滴をスワブに添加し、ゆっ くりスワブを回転させて混和し、１分間インキュベートした。装置を閉じ、第１ と第２の対置成分を接触させた。２分から５分のインキュベーション時間の後で 結果を読み取った。クロマトグラフィ媒体の検出ゾーンにおけるピンク〜赤のバ ンドの発生でストレプトコッカスＡ抗原の検出が示された。 例１の装置は、２分間のインキュベーション後に１×１０５個のストレプトコ ッカスＡ菌体、また５分間のインキュベーション後に５×１０４個のストレプト コッカスＡ菌体を検出できた。比較対象として、ハイブリテック社（カリフォル ニア州ジョーラ）製コンサイスTM・イムノアッセイ装置は、５分間のインキュベ ーション後でのみ１×１０５個のストレプトコッカスＡ菌体を検出し、また２０ 分間のインキュベーション後でも５×１０４個のストレプトコッカスＡ菌体を検 出できなかった。同様に、ニューホライズン社製スマートTM・イムノアッセイ装 置は７分間のインキュベーション後でのみ１×１０５個のストレプトコッカスＡ 菌体を検出し、７分間のインキュベーション後に５×１０４個のストレプトコッ カスＡ菌体で不確実な結果となった。 例３ 便潜血中のヘモグロビン検出用装置 便潜血中のヘモグロビン検出用アッセイ装置を図４Ａおよび図４Ｂにしたがっ て作成し、材料と構造の細部は例１と同様にした。標識特異的結合パートナーは 溶解可能な形で検体添着パッドに添着した。標識特異的結合パートナーはコロイ ド金で標識したヤギ抗ヒト抗体とした。６０μｌの便検体を検体添着パッドに塗 抹し共役溶液と混和できるようにした。装置を閉じ便検体と溶解抗体の組み合せ を導体に接触させクロマトグラフィ媒体へ流した。クロマトグラフィは約１分間 から約５分間の期間にわたり進行させた。クロマトグラフィ媒体は不動化した抗 ヒトＨｂ抗体の検出ゾーンとウサギ抗ヤギＩｇＧ抗体を不動化した対照ゾーンを 含んでいた。 検出ゾーンと対照ゾーンの両方に見られた色は結果が陽性、即ち便検体中の潜 血の存在を示した。対照ゾーンに現われたが検出ゾーンに現われなかった色は、 便潜血の欠如と検査の正しい実施を表わしていた。 本装置は血液約０．２ｍｌ／便１００ｇから血液約１７ｍｌ／便１００ｇの濃 度範囲で便潜血中のＨｂを検出できる。本装置はペルオキシダーゼや摂食（非ヒ ト由来）ヘモグロビンによる干渉を受けない。 本発明の利点 本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置は対置成分から構成することに よる利点を提供する。対置成分の使用で、多数の異なったシーケンスにおける反 応を行なえるため多大な汎用性を提供する。当該対置成分の使用で検査ストリッ プまたはその他の反応成分の正確に画定された領域へ試薬を供給できるために可 能になっている。対置成分の使用はさらに装置の死腔内に留まることで試薬を無 駄にしないように保証することで試薬の最小限の消費で最適な測定を提供する。 最後に、対置成分の使用は、ＨＩＶまたは肝炎ウィルスを含む検体など、汚染さ れていると思われる血液検体の最適な収容を提供する。 本発明によるアッセイ装置の別の利点は圧力を用いて１つの対置成分から別の 対置成分へさらにクロマトグラフィ媒体を通して液体を移動させ、また実行しよ うとする各アッセイで最適になるように印加される圧力を制御する本装置の能力 による。これはアッセイ処理を加速しアッセイ装置内での抽出などの操作の実行 が可能になる。また成分内に残る試薬の死腔量を減少し、少量の検体と少量の高 価なまたは精製困難な試薬たとえば標識抗体を使用できるようになる。 本発明によるアッセイ装置の更に別の利点は流れを調節し特異的結合反応にお ける反応系の不均一な流れまたは高濃度の局在を防止する導電バリアの使用に由 来する。これは本発明によるアッセイ装置を使用するアッセイの実施で大きな再 現性と信頼性を提供する。 更に、本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置は、臨床的に重要な分析 対象物たとえばストレプトコッカスＡおよびＢ抗原、便潜血判定でのヘモグロビ ン、またヘリコバクタ・ピロリ抗体、ならびに臨床的に重要なハプテンの迅速で 正確な検出が行なえる。装置の構造はクロマトグラフィ媒体への検体の一層均等 な添着が行なえ他の方法では粒子または有色検体により導入されることのある干 渉を減少する。溶解可能な形でコロイド金属標識を使用することにより標識のき わめて迅速な反応を提供し、検体をクロマトグラフィ媒体へ添着する前に２相性 分析対象物−標識複合体の実質的に完全な形成を行なえる。これは汚染物質の分 離に役立ち、アッセイの能力を改善する。更に、装置ハウジングの構造と構成は 他の方法では干渉を発生させ得る過剰な免疫グロブリン含有検体の排出を保証す ることによりアッセイの性能を支援する。 血液、喀痰、便などの生物検体の柚出は装置内で直接実行可能で、破棄する必 要のある汚染材料の量を減少させ、また当該汚染材料による医師、技師、または 大衆の感染事故の発生確率を減少できる。更に、本装置は双方向クロマトグラフ ィを実行可能なため更に精度を向上させ干渉を減少できる。本発明による装置を 用いた検査法は広いダイナミックレンジを有し、他の検査法では高濃度の分析対 象物で発生し得る偽陰性が実質的に発生しない。 本発明の幾つかの好適バージョンを参照して相当詳細に説明したが、他のバー ジョンや実施態様が可能である。これらのバージョンは本明細書で説明した基本 原理で動作し、（ａ）検体のその場抽出；（ｂ）標識特異的結合パートナーの再 溶解と分析対象物への高速結合；（ｃ）他の方法では干渉を発生し得るような過 剰検体を除去するクロマトグラフィ媒体とアブソーバの構成、のいずれかを用い る２または３成分装置の他の構成を含む。これらのバージョンは競合法イムノア ッセイならびにサンドイッチ法イムノアッセイに適した各種構成のアッセイ装置 を含む。特に、本発明による装置は直線的な流れの代わりにクロマトグラフィ媒 体を通る放射方向または円周方向の流れを利用するのにも適している。本発明は 装置の２または３成分が永久固定構造に保持されないが、たとえば電力または磁 力により、またはたとえばベルクロTMなどのマジックテープなどの分離自在なフ ァスナーを使用することにより、アッセイを実行するために分離したり合わせた りできるような変化をさらに含む。したがって本発明の範囲は後述の請求項によ って決定される。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】平成８年１２月１７日（１９９６．１２．１７） 【補正内容】 【図１】

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．（ａ）アッセイしようとする液状検体を受け入れるのに適した検体調製手段 を含む第１の対置成分と； （ｂ）検出しようとする分析対象物に特異的に結合しクロマトグラフィ媒体上 の検出ゾーンに結合された少なくとも１種類の試薬を有する前記クロマトグラフ ィ媒体を含み前記第１の対置成分に取り付けられる第２の対置成分と； （ｃ）前記第２の対置成分に取り付けられた導電バリアとを含み、 前記第１と第２の対置成分をこれらが対置していない位置から対置させて前記 検体調製手段に検査しようとする前記液状検体を前記導電バリア経由で前記クロ マトグラフィ媒体へ添着できるようにしまた前記クロマトグラフィ媒体を通して 流すことができるようにし、クロマトグラフィ・アッセイが前記クロマトグラフ ィ媒体内部での前記検体の移動の結果として行なわれて、検出しようとする分析 対象物に特異的に結合する標識試薬の結合による前記移動の結果として前記分析 対象物が検出され、前記検体が前記クロマトグラフィ媒体に添着された位置とは 異なる位置で前記分析対象物が検出され、前記検出ゾーンに結合した前記分析対 象物に対する前記標識試薬の結合により移動後に前記クロマトグラフィ媒体上で 前記分析対象物が検出されるようにしてあることを特徴とするクロマトグラフィ ・アッセイ装置。 ２．前記検体調製手段は前記検体を前記クロマトグラフィ媒体に添着する前に前 記検体の処理用に少なくとも１つの試薬を含むことと、前記検体処理用の前記試 薬は前記検体から分析対象物を抽出する抽出試薬であることを特徴とする請求の 範囲１に記載の装置。 ３．前記検出ゾーンは前記クロマトグラフィ媒体より実質的に小さいことと、前 記検出ゾーンはこれに不動化した前記分析対象物に体する第１の特異的結合パー トナーを含むことを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグラフィ・アッセ イ装置。 ４．前記分析対象物は抗原またはハプテンであり、前記第１の特異的結合パート ナーは前記抗原またはハプテンに体する抗体であることを特徴とする請求の範囲 ３に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ５．前記分析対象物はヒトヘモグロビンであり前記第１の特異的結合パートナー は抗ヒトヘモグロビン抗体であることを特徴とする請求の範囲４に記載のクロマ トグラフィ・アッセイ装置。 ６．前記分析対象物は抗体であり前記第１の特異的結合パートナーは前記抗体に より特異的に結合され得るハプテンまたは抗原であることを特徴とする請求の範 囲３に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ７．前記クロマトグラフィ媒体はさらに前記クロマトグラフィ媒体より実質的に 小さい対照ゾーンを含むことを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグラフ ィ・アッセイ装置。 ８．前記対照ゾーンはこれに不動化した分析対象物を含むことを特徴とする請求 の範囲７に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ９．前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸収手段を さらに含むことを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグラフィ・アッセイ 装置。 １０．前記検体調製手段は前記検体調製手段へ液体の添加により再溶解可能な形 で検出可能な標識で標識した前記分析対象物に体する特異的結合パートナーをさ らに含むことを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装 置。 １１．前記第１と第２の対置成分はこれらが対置していない位置から直接用手的 に閉じることで対置させ得ることを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグ ラフィ・アッセイ装置。 １２．（ａ）請求の範囲１の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、 （ｂ）前記クロマトグラフィ・アッセイ装置で使用され、検出可能な標識で標 識され前記分析対象物に対する特異的結合パートナーと、 を別々のパッケージに含むことを特徴とする分析対象物の検出および／または 判定のための検査キット。 １３．（ａ）各々がアッセイしようとする検体を受け入れるのに適した横方向に 分離された複数の検体調製手段を含む第１の対置成分と、 （ｂ）前記第１の対置成分に取り付け可能で前記第１の対置成分上の各検体調 製手段用のクロマトグラフィ媒体を含み、前記クロマトグラフィ媒体が横方向に 分離されている第２の対置成分と、 （ｃ）各クロマトグラフィ媒体に１つづつ各々が前記第２の対置成分に取り付 けられた複数の導電バリアとを含み、 前記第１と第２の対置成分が各検体調製手段で検査しようとする各検体をこれ に対応する前記導電バリアを介してこれに対応する前記クロマトグラフィ媒体へ 添着するように対置できることを特徴とする少なくとも１つの分析対象物の検出 および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置。 １４．各クロマトグラフィ媒体はさらに前記クロマトグラフィ媒体より実質的に 小さい検出ゾーンを含むことと、各検出ゾーンはアッセイしようとする前記分析 対象物に対する第１の特異的結合パートナーをそのクロマトグラフィ媒体上に含 むことを特徴とする請求の範囲１３に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。 １５．少なくとも１つの検体調製手段は検体を含む器具を受け入れるのに適した 折り畳みウェルを含むことを特徴とする請求の範囲１３に記載のクロマトグラフ ィ・アッセイ装置。 １６．前記第１の対置成分は前記第１の対置成分と前記第２の対置成分を対置さ せた時に前記第２の対置成分上に折り曲がる蝶番式に折り曲げ自在な羽根をさら に含むことを特徴とする請求の範囲１５に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装 置。 １７．（ａ）請求の範囲１３記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、 （ｂ）各々の特異的結合パートナーが検出可能な標識で標識してあり、各々の 特異的結合パートナーは別々にパッケージされ、各々の特異的結合パートナーが 前記クロマトグラフィ・アッセイ装置で使用され、検査しようとする各分析対象 物のための特異的結合パートナーと、 を別々のパッケージに含むことを特徴とする少なくとも１つの分析対象物の検 出および／または判定のための検査キット。 １８．分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセ イ装置であって、 （ａ）(ｉ)検体調製手段と （ｉｉ）前記検体調製手段と動作的に接触するクロマトグラフィ媒体と を含む第１の対置成分と、 （ｂ）前記第１の対置成分に取り付け可能で、液体の添加により再溶解可能な 形で検出可能な標識により標識された前記分析対象物に対する特異的結合パート ナーを含む添着手段を含む第２の対置成分と、 （ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導電バリアとを含み、 前記第１と第２の対置成分を対置させることで前記添着手段を前記導電バリア と接触させ、前記分析対象物に対する前記標識特異的結合パートナーが前記導電 バリアを通る液体により溶解されることを特徴とするクロマトグラフィ・アッセ イ装置。 １９．前記第１の対置成分は導電手段をさらに含み、前記検体調製手段と前記ク ロマトグラフィ媒体の間の動作的接触が前記検体調製手段と前記クロマトグラフ ィ媒体の両方を前記導電手段と動作的に接触させることで実現することを特徴と する請求の範囲１８に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ２０．前記クロマトグラフィ媒体は第１と第２の端部を有し前記導電手段は前記 クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触し、前記第１の対置成分 は前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸収手段をさ らに含むことを特徴とする請求の範囲１９に記載のクロマトグラフィ・アッセイ 装置。 ２１．（ａ）請求の範囲１８記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、 （ｂ）前記検体調製手段上の前記検体の抽出に必要とされる少なくとも１種類 の試薬とを別々のパッケージに含み、前記試薬の少なくとも１種類が前記検体調 製手段に添着されることを特徴とする分析対象物の検出および／または判定のた めの検査キット。 ２２．分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセ イ装置であって、 （ａ）(ｉ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と （ｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触す る導電手段と （ｉｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触 する吸収手段と を含む第１の対置成分と、 （ｂ）(ｉ)第１の添着手段と （ｉｉ）第２の添着手段と を含む第２の対置成分と、 （ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと を含み、前記第１と第２の添着手段は前記第１と第２の対置成分が対置されて いない時に動作的に接触しないように前記第２の対置成分上に配置され、 前記第１と第２の対置成分を対置することで、前記導電手段を前記第１の添着 手段と前記導電バリア経由で動作的間接的に接触させ、また前記導電手段を前記 第２の添着手段と動作的に接触させることで前記第１と第２の添着手段を互いに 動作的に接触させることを特徴とするクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ２３．前記第１の添着手段は検体添着パッドを含み前記第２の添着手段は検出器 添着パッドを含み、これに検出試薬を添加できることで、前記第１と第２の対置 成分を対置させた時に、前記検体添着パッドと前記検出器添着パッドの内容が前 記導電バリアを介して前記導電手段に添着されることを特徴とする請求の範囲２ ２に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ２４．（ａ）請求の範囲２３記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、 （ｂ）前記クロマトグラフィ・アッセイ装置の前記第２の添着手段に適用され て検出可能な標識で標識した前記分析対象物に対する特異的結合パートナーと、 を別々のパッケージに含むことを特徴とする分析対象物の検出および判定のた めの検査キット。 ２５．（ａ）(ｉ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と （ｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触する導電 手段と （ｉｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸 収手段と （ｉｖ）前記導電手段と直接接触し前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端 部と間接接触するように配置された検出器添着パッドと を含む第１の対置成分と、 （ｂ）検体添着バッドを含む第２の対置成分と、 （ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと を含み、前記第１と第２の対置成分を対置させることで前記検体添着パッドに 検査しようとする前記検体を前記導電バリア経由で前記検出器添着パッドへさら に前記導電手段経由で前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部へ添着させる ことを特徴とする分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフ ィ・アッセイ装置。 ２６．（ａ）請求の範囲２５記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置と、 （ｂ）前記第２の添着手段に添着される、検出可能な標識で標識された前記分 析対象物のための特異的結合パートナーと、 を含むことを特徴とする分析対象物の検出および／または判定のための検査キ ット ２７．（ａ）(ｉ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と （ｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸収 手段と （ｉｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と直接接触する検出器 添着パッドと を含む第１の対置成分と、 （ｂ）検体添着パッドを含む第２の対置成分と、 （ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと、 を含み、前記第１と第２の対置成分を対置させた時に前記検出器添着パッドと 前記検体添着パッドが、前記クロマトグラフィ媒体の第１の端部に直接隣接する 前記検出器添着パッドの一部を除き、前記導電バリアを介して間接接触し、これ により前記第１と第２の対置成分を対置させることで前記検体添着パッドに検査 しようとする前記検体を前記検出器添着パッドへさらに前記クロマトグラフィ媒 体の前記第１の端部へ添着させることを特徴とする分析対象物検出および／また は判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ２８．（ａ）請求の範囲２７記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、 （ｂ）前記クロマトグラフィ・アッセイ装置の前記第２の添着手段に添着され て検出可能な標識で標識した前記分析対象物に対する特異的結合パートナーと、 を別々のパッケージに含むことを特徴とする分析対象物検出および／または判定 のための検査キット。 ２９．（ａ）複数の横方向に分離した試薬パッドを含む第１の対置成分と、 （ｂ）複数の乾燥試料を含む検査カードを受け入れるのに適した第２の対置成 分とを含み、前記第２の対置成分は、 （ｉ）横方向に分離され各々が第１と第２の端部を有し、前記第１の対置成 分上の各検体調製手段のためのクロマトグラフィ媒体と （ｉｉ）各クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触し前記検査カ ードを前記第２の対置成分に挿入した時に前記検査カードの各々の乾燥試料と動 作的に接触する導電手段と、 （ｉｉｉ）各クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸 収手段と を含み、 （ｃ）さらに前記第２の対置成分に各々が取り付けられ各クロマトグラフィ媒 体に１つづつの複数の導電バリアを含み、各試薬パッドをこれに対応する導電バ リア経由で対応する乾燥試薬に添着させるように前記第１と第２の対置成分を対 置させ得ることを特徴とする少なくとも１つの分析対象物の検出および／または 判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ３０．各試薬パッドは前記試薬パッドへ水性試薬の添加により再溶解可能な形で 検出可能な標識により標識された前記分析対象物に対する特異的結合パートナー を含むことを特徴とする請求の範囲２９に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装 置。 ３１．前記分析対象物はヒトヘモグロビンであり前記特異的結合パートナーは抗 ヒトヘモグロビン抗体であることを特徴とする請求の範囲３０に記載のクロマト グラフィ・アッセイ装置。 ３２．（ａ）請求の範囲２９記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と （ｂ）前記クロマトグラフィ・アッセイ装置へ挿入するための複数の乾燥試料 を含むことのできる検査カードと、 （ｃ）アッセイしようとする前記分析対象物について前記検査カードに添着さ れる抽出試薬とを別々のパッケージに含むことを特徴とする分析対象物の検出お よび／または判定のための検査キット。 ３３.検体中の分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ ・アッセイ装置であって、 （ａ）(ｉ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と （ｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触し 前記分析対象物の検出用に少なくとも１種類の試薬を含む検出器添着パッドと （ｉｉｉ）前記検出器添着パッドと動作的に接触し前記クロマトグラフ ィ媒体の前記第１の端部と間接接触して液体を通すことのできる導体と （ｉｖ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触し て液体を吸収するためのアブソーバと を含む第１の対置成分と、 （ｂ）検査しようとする検体を受け入れるための検体調製ゾーンを含む第２の 対置成分であって、前記第１と第２の対置成分が対置されて液体が前記第２の対 置成分から前記第１の対置成分へ移し換えられるように前記第１の対置成分に取 り付け自在にしてある第２の対置成分と、 （ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導電バリアとを含み、 前記第１と第２の対置成分が前記第１と第２の対置成分が対置されない時に前 記第２の対置成分上の前記検体調製ゾーンへ検体を添着できるように、また前記 第１と第２の対置成分を対置させることで前記検体調製ゾーンが前記導体と間接 接触して前記検査しようとする検体を前記導電バリア経由で前記導体へ添着させ て前記導体を通しさらに前記検出器添着パッド経由で前記クロマトグラフィ媒体 の前記第１の端部へ添着して前記検体に対して前記分析対象物の検出用試薬を追 加し、前記導体から前記検出器添着パッドを通り前記クロマトグラフィ媒体の前 記第１の端部への流れが前記アブソーバによる液体の吸収で支援されることを特 徴とするクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ３４．（ａ）請求の範囲３３記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と （ｂ）前記検出器添着パッドへ適用される検出可能な標識で標識された前記分 析対象物に対する特異的結合パートナーと を別々の容器に含むことを特徴とする検体中の分析対象物の検出および／また は判定のための検査キット ３５.検体中の分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ ・アッセイ装置であって、 （ａ）(ｉ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と （ｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触し 液体の添加により再溶解可能な形で前記分析対象物に対する第１の特異的結合パ ートナーを含み、前記第１の特異的結合パートナーを検出可能な標識で標識して ある第１の検出器添着パッドと （ｉｉｉ）前記第１の検出器添着パッドと動作的に接触して液体を通過 させる導体であって、前記第１の検出器添着パッドが前記導体と前記クロマトグ ラフィ媒体の前記第１の端部とを架橋して前記導体から前記第１の検出器添着パ ッドを通り前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部へ液体が流れるようにす るための導体と （ｉｖ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触し て液体を吸収するためのアブソーバと を含む第１の対置成分と、 （ｂ）前記第１と第２の対置成分を当接させて液体が前記第２の対置成分から 前記第１の対置成分へ移し換えるように前記第１の対置成分に取り付け自在な第 ２の対置成分であって、 （ｉ）アッセイしようとする検体を受け入れるための検体調製ゾーンと （ｉｉ）前記検体調製ゾーンと動作的に接触し、前記検体調製ゾーンへ 検体の添加により再溶解可能な形で前記分析対象物に対する第２の特異的結合パ ートナーを含み、前記第２の特異的結合パートナーを検出可能な標識で標識して あり、前記検体調製ゾーンへの前記検体の添加で前記第２の特異的結合パートナ ーを溶解できるように前記第２の対置成分上の前記検体調製ゾーンに隣接して配 置されて前記検体調製ゾーンが前記検体と前記第２の特異的結合パートナーの混 合物を含むようにずる第２の検出器添着パッドと、 （ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導電バリアと、 前記第１と第２の対置成分は前記第１と第２の対置成分が対置されていない時 に前記第２の対置成分上の前記検体調製ゾーンへ検体を添着でき、また前記第１ と第２の対置成分を対置させることによって前記第２の対置成分上の前記検体調 製ゾーンが前記導電バリアを介して前記第１の対置成分上の前記導体と動作的間 接的に接触して検査しようとする前記検体と前記第２の特異的結合パートナーを 前記導体に添着させ、前記導体経由でさらに前記第１の検出器添着パッドを通り 前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部へ流して前記第１の特異的結合パー トナーを前記検体と前記第２の特異的結合パートナーに追加し、前記導体から前 記第１の検出器添着パッド経由で前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部へ の流れが前記アブソーバによる液体の吸収によって支援されることを特徴とする クロマトグラフィ・アッセイ装置。 ３６．前記クロマトグラフィ媒体は前記クロマトグラフィ媒体より面積が実質的 に小さい検出ゾーンをさらに含み、前記検出ゾーンは不動化した前記分析対象物 に対する第３の特異的結合パートナーを含み、前記検体中に分析対象物が存在し ている場合に（１）前記第１と第２の特異的結合パートナーの一方と、（２）前 記分析対象物と、（３）前記不動化した第３の特異的結合パートナーとを含む三 次元複合体が前記検出ゾーンに形成されることを特徴とする請求の範囲３３に記 載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。 ３７．（ａ）請求の範囲３５記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、 （ｂ）前記分析対象物に対する前記第１の特異的結合パートナーと前記分析対 象物に対する前記第２の特異的結合パートナーの少なくとも一方を溶解し、前記 第１の対置成分上の前記第１の検出器添着パッドと前記第２の対置成分上の前記 第２の検出器添着パッドの少なくとも一方に添着される液体と を別々の容器に含むことを特徴とする検体中の分析対象物の検出および／また は判定のための検査キット。 ３８.検体中の分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ ・ アッセイ装置であって、 （ａ）(ｉ)第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と （ｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触し て液体を通過させる導体と （ｉｉｉ）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触 して液体を吸収するためのアブソーバと を含む第１の対置成分と、 （ｂ）前記第１の対置成分に取り付けられる第２の対置成分であって、前記第 １と第２の対置成分を対置させて液体を前記第２の対置成分から前記第１の対置 成分へ移し換えできるようにし、前記第１と第２の対置成分を対置させた時に前 記第１の対置成分上の前記導体へ液体を添着するためのアプリケータを含み、前 記アプリケータが、 （ｉ）前記第１と第２の対置成分が対置されていない時に前記アプリケータ へ液体の添加により再溶解可能な形で前記分析対象物に対する第１の特異的結合 パートナーを含み前記第１の特異的結合パートナーが検出可能な標識で標識され る第１のセクタと （ｉｉ）前記分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを欠如する第 ２のセクタと の２つのセクタに分割されている前記第２の対置成分と、 （ｃ）前記第１の対置成分に取り付けてある導電バリアと、 を含み、前記第１と第２の対置成分は前記第１と第２の対置成分を対置させる ことで前記第２の対置成分上の前記アプリケータの前記第２のセクタではなく前 記第１のセクタを前記導電バリア経由で前記第１の対置成分上の前記導体と間接 接触させ、前記アプリケータの前記第２のセクタは前記第１のセクタ経由で前記 導体と間接接触して、前記アプリケータの前記第１のセクタの内容を前記クロマ トグラフィ媒体に添着し、前記アプリケータの前記第１のセクタの内容の前記ク ロマトグラフィ媒体への添着に続けて、前記アプリケータの前記第２のセクタの 内容を前記クロマトグラフィ媒体へ添着させ、前記アブソーバが前記クロマトグ ラフィ媒体から液体を排出させて前記アプリケータから前記導体と前記クロマト グラフィ媒体を通る液体の流れを支援するようにしてあることを特徴とするクロ マトグラフィ・アッセイ装置。 ３９．前記クロマトグラフィ媒体は前記クロマトグラフィ媒体より面積が実質的 に小さい検出ゾーンをさらに含み、前記検出ゾーンはこれに不動化した前記分析 対象物に対する第２の特異的結合パートナーを含み、分析対象物が前記検体中に 存在する場合には前記第１の特異的結合パートナーと、前記分析対象物と、前記 第２の特異的結合パートナーとを含む三次元複合体が前記検出ゾーンに形成され ることを特徴とする請求の範囲２３，２５，２７，３３，または３８のいずれか １つに記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。