JP2001500428A

JP2001500428A - 放射性核種類の溶液から▲上２１３▼Ｂｉを分離する方法

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Publication number: JP2001500428A
Application number: JP10532242A
Authority: JP
Inventors: ブレイ，レイン・エイ; デス・チャン，ジャケッタ・アール
Original assignee: バッテル・メモリアル・インスティチュート
Priority date: 1997-01-28
Filing date: 1998-01-28
Publication date: 2001-01-16
Also published as: AU6046398A; EP0969908A2; CA2277926C; CA2277926A1; WO1998032513A2; WO1998032513A3; US5749042A

Abstract

(57)【要約】²¹³ Ｂｉを放射性核種類の溶液から分離する方法において、この溶液は、塩化物錯体の形成を可能にするように調節されたある濃度の塩化物イオンと水素イオンとを含む。次に溶液を陰イオン交換樹脂に接触させ、その結果²¹³Ｂｉは溶液から吸収され、塩化物錯体中で陰イオン交換樹脂の上に付着する。他の非吸収放射性核種類、例えば²²⁵Ｒａ、²²⁵Ａｃ及び²²¹Ｆｒを、ＨＣｌと共に、スクラブ溶液を用いて陰イオン交換樹脂から除去する。²¹³Ｂｉを陰イオン交換樹脂から取り出すために、ストリッピング溶液を用いて陰イオン交換樹脂を洗浄する。塩化物イオンを含まず、水素イオン濃度の低下したストリッピング溶液は、塩化物陰イオン錯体を破壊し、²¹³Ｂｉを陽イオンとして遊離させる。本発明の好適な実施例においては、陰イオン交換樹脂は、²¹³Ｂｉの極めて迅速な付着とストリッピングとを可能にする薄膜として提供される。医療用途において使用するための²¹³Ｂｉの精製のための好ましいストリッピング溶液としては、酢酸ナトリウム、pH５．５が挙げられる。²¹³Ｂｉが陰イオン交換樹脂から遊離するにつれて、²¹³Ｂｉを受け取るための、生体内で二官能キレート化剤と結合しているタンパク質及びＮａＯＡｃ。

Description

【発明の詳細な説明】放射性核種類の溶液から²¹³Ｂｉを分離する方法発明の分野本発明は一般に、放射性核種類の溶液を精製する方法に関し、特に²²⁵Ａｃ、² ²⁵ Ｒａ、²¹³Ｂｉ及びこれらから生じた娘核類を含む放射性核種類の溶液または混合物から²¹³Ｂｉを分離する方法に関する。発明の背景癌のような望まれていない細胞増殖を殺すかまたは中和するために放射線を使用することが広く認められるようになったため、放射性核種類の様々な種に対する関心が高まっている。特に考察の対象となるのは、²¹³Ｂｉのようにアルファ放射線を放射する放射性核種類、すなわちアルファ放射体であり、というのはこうした放射性核種類が放射したアルファ放射線は組織内に深く浸透しないからである。²¹³Ｂｉは通常、²²⁹Ｔｈの娘核種として生成する（ｔ_1/2＝７，３００年）。²¹³Ｂｉが見い出されるような放射性崩壊系列は周知であり、すなわち、²³³ Ｕ（ｔ_1/2＝１．６２×１０⁵年）→²²⁹Ｔｈ（ｔ_1/2＝７，３００年）→²²⁵Ｒａ（ｔ_1/2＝１４．８日）→²²⁵Ａｃ（ｔ_1/2＝１０日）→²¹³Ｂｉ（ｔ_1/2＝４６分）である。生物学的用途のために考察の対象となる娘核類としては、²²⁵Ｒａ（ｔ_1/2＝１４．８日）が挙げられ、これは崩壊して²²⁵Ａｃ（ｔ_1/2＝１０．０日）になる。そして次に²²⁵Ａｃは一連の段階を通って崩壊して、²¹³Ｂｉ（ｔ_1/2 ＝４６分）になる。従ってＢｉジェネレータの出発物質としては、親核類から分離した²²⁵Ａｃか、または²²⁵Ｒａ／²²⁵Ａｃの混合物が可能である。出発物質として²²⁵Ｒａを使用することには、利益と不利益とがある。²²⁵Ｒａが²²⁵Ａｃから分離されない場合、時間の関数としての利用可能な放射能の点から見ると、Ａｃの量は非常に大きくなる。しかしながら、²²⁵Ｒａがわずかの²²⁴Ｒａをも含む場合、というのは、最初のトリウム「カウ」が²²⁹Ｔｈと低いパーセントの²²⁸Ｔｈ／²²⁴Ｒａとの両方を含むので、ラジウムを除去するための分離は望ましいことがある。²²⁴Ｒａの娘核類には、患者の生物学的見地からは望ましくないことがある²¹²Ｂｉと²⁰⁸Ｔ１とが含まれる。簡単に述べると、腫瘍のような望まれていない細胞増殖に隣接させてアルファ放射体を置くことによって、腫瘍をアルファ放射線にさらすことができ、しかも周囲の健康な組織は不適切にさらされることがない。多くのそのような方式において、アルファ放射体を腫瘍部位に隣接させて置くためには、アルファ放射体をキレート化合物に結合し、そして次にキレート化合物をモノクローナル抗体に結合させ、この抗体は体内の腫瘍部位を捜し出す。あいにく多くの場合に、キレート化合物はまた、所望のアルファ放射体以外の諸金属（Ｆｅ，Ｃｒ、ＲＥ’ｓ）とも結合する。腫瘍においては、モノクローナル抗体との結合にとって利用可能な部位の数が限定されていることがあるので、所望のアルファ放射体以外の諸金属に結合したモノクローナル抗体の数は最小にするのが望ましい。従って、アルファ放射体を他の金属陽イオン類から高度に精製することが望ましい。加えて、²¹³ Ｂｉ（ｔ_1/2＝４６分）のようなアルファ放射体類は、非常に短い半減期を有する。従って、こうした半減期の短い放射性核種類を医療用途において有効に利用するためには、これを他の諸金属または汚染物から短時間の間に効果的に分離することで、利用可能なアルファ放射体の量を最大にしなければならない。そのような放射性核種類の使用に関するより詳細な説明は、以下の論文に見い出される。“Alpha-emitting bullet targets leukemia cells”，Nuclear News，June 1996，pp 47-48，（Dr．David Scheinberg，Memorial Sloan Kettering Cancer Center，New York，NY);and Pippin，C．Greg，Otto A．Gansow，Martin W．Br echbiel，Luther Koch，R．Molinet，Jaques van Geel，C．Apostolidis，Mauri tsW．Geerlings，and David A．Scheinberg，1995;“Recovery of Bi-213 from an Ac-225 Cow:Application to the Radiolabeling of Antibodies with Bi-213 ”，Chemists' Views of Imaging Centers，Edited by A．M．Emran，Pleaum Pr ess，New York，NY。ビスマスを他の放射性核種類から分離するための様々な方法が、最近数年にわたって開発されてきた。しかしながら、ますます多量のアルファ放射放射性核種類が必要となるにつれ、より良好なジェネレータの設計が必要であると認識されている（Scheinbergを参照されたい）。Ｂｉジェネレータを開発するよう計画された最近の研究は、アクチニウムローディング済み有機陽イオン交換樹脂の使用に集中しており、以下に説明されている。PiPPin，C．Greg，OttO A．Gansow，M artin W．Brechbiel，Luther Koch，R．Molinet，Jaques van Geel，C．Apostol idis，Maurits W．Geerlings，and David A．Scheinberg，1995，“Recovery of Bi-213 from an Ac-225 Cow:Application to the Radiolabeling of Antibodies with Bi-213”，Chemists' Views of Imaging Centers，Edited by A．M．Emra n，Pleaum Press，New York，NY.；Wu，C.，M．W．Brechbiel，and O．A．Ganso w，1996，An Improved Generator for the Production of Bi-213 from Ac-225, American Chemical Society Meeting，Orlando，Fl，August，1996;and Mirzade h，Saed and Stephen J，Kennel，1996，Optimization of Radiolabeling ofImm unoproteins with Bi-213 ，American Chemical Society Meeting，Orlando,Fl， August，1996。こうした有機陽イオン交換方法に関する主な問題は、より多量の「²²⁵Ａｃカウ」（１〜２０mCi）の必要性に伴い、アルファ放射線損傷にさらされる（通常その使用最中の２０日間）アクチニウムローディング済み有機陽イオン交換樹脂の早期破壊によって、ジェネレータが制約される点である。この破壊を最小にするための試みを、アメリカ国立衛生研究所のDr．Wuが用いている（Wuを参照されたい）。このタイプの手法の下では、アタチニウムはバッチモードで有機樹脂のわずかな部分の上に吸収される。次に、Ｂｉ分離のために使用するイオン交換カラム中に置く際に、ローディング済みイオン交換ビーズを非ローディング済みビーズと混合して、破壊的影響を「希釈する」。しかしながらこの手法の下では、Ｂｉの有機樹脂からの分離には、少なくとも二回のローディングと溶離の段階を必要とし、総分離時間は１時間を超える。別の無機イオン交換「ジェネレータ」の概念は、Gary Strathearn，Isotope P roducts Laboratories，Burbank，CAによって開発され、Ramirez Ana.R．and Ga ry E．Strathearn，1996，Generator System Development of Ra-223 ，Bi-212,a nd Bi-214 Therapeutic Alpha-Emitting Radionuclides ，American Chemical So ciety Meeting，Orlando，Fl，August，1996、に説明されている。この手法においては、無機多官能性陽イオン交換体を使用することで、強いアルファ衝撃からの損傷を回避している。Ａｌｐｈａｓｅｐｔ−１^TMのカラムは、硝酸（ＨＮＯ₃ ）を用いて前処理し、次に１ＭＨＮＯ₃流入液中の²²⁵Ａｃをカラムの上にローディングし、そして²¹³Ｂｉ生成物を１MＨＮＯ₃と共に溶離させる。生成物のＨＮＯ₃を次に蒸発乾固させて、硝酸を除去しなければならない。次にこれを適切な緩衝化溶液を用いて溶液に戻して、アルファ放射体とキレート化合物及びモノクローナル抗体との最終的な結合を作製する。蒸発段階によって、最終生成物を作製するために必要な時間が長くなり、従ってこの手法の有用性を制限してしまう。従って、²²⁵Ａｃ、²²⁵Ｒａ、²¹³Ｂｉ及びこれらから生じた娘核類を含む放射性核種類の溶液または混合物から、高純度²¹³Ｂｉを高速分離する方法が依然として要望されている。発明の要約本発明は従って、新²¹³Ｂｉジェネレータ系である。この新ジェネレータ系の幾つかの目標としては、²²⁵Ａｃ「カウ」からの強いアルファ衝撃に対する耐性、最小限の²²⁵Ａｃのイオン交換カラムブレークスルーで²¹³Ｂｉの高い回収率を得ること、放射性医薬品を得るために必要な段階と時間との最小化、モノクローナル抗体系に容易にかつ再現可能なように連結できる高純度²¹³Ｂｉ（「スマートブリット（smart bullets）」）、及び放射性薬剤学の技術者が容易に取り扱うことができる系が挙げられる。本発明は、「²²⁵Ａｃカウ」から²¹³Ｂｉを吸着するための、有機陰イオン交換樹脂の使用に依拠する。²¹³Ｂｉの使用と陽イオン樹脂からのミルキングとの最中の従来技術の分離方式において一般的なように、陽イオン樹脂表面に〜２０日間²²⁵Ａｃを貯蔵する代りに、「²²⁵Ａｃカウ」を酸性溶液中に貯蔵してから、陰イオン交換樹脂、好ましくは薄膜または「ウェブ」中に結合した陰イオン交換樹脂を迅速に通過させることで、必要な時に²¹³Ｂｉを集める。これは分離と精製の処理を非常に加速し、²¹³Ｂｉの分離と精製を６分未満で行えることを証明した。ビスマスを陰イオンとして、ＨＣｌ濃度の関数として抽出できることは周知であり、以下に説明されている。Kraus，K．A．andF．Nelson，1955，Proceedin gs of the International Conference on the Peaceful Uses of Atomic Energy ，Nuclear Chemistry and the Effect of Irradiation，Vol．VII，P/837，“Ad sorptionof the elements from hydrochloric acld”，１９５５年８月８〜２０日にジュネーブで開催。簡単に述べると、ＨＣｌ中の塩化ビスマス錯体陰イオンに関する分配は、酸濃度の低下と共に増加し、一方、Ｆｅに関する分配は酸濃度と共に増加する。他の考察の対象となるキレート化合物妨害イオン類、すなわち、希土類、ラジウム（Ｒａ）、フランシウム（Ｆｒ）、及びアクチニウム（Ａｃ）は、陰イオン交換樹脂を使用して塩化物陰イオン類として抽出されない。従って、陰イオン交換樹脂を使用することで、陰イオン交換樹脂を使用して塩化物陰イオン類として抽出されないこれら及び他の妨害イオン類から、²¹³Ｂｉを有効に取り出すことが可能になる。ビスマス（III）は、大部分の諸溶液中で陽イオンである。しかしながら、塩化物イオン（Ｃｌ^-）を含む溶液中に置くと、Ｂｉを適正な条件下で陰イオン錯体として溶液から吸収できる。吸収の効率は水素イオン濃度によって決まる。従って本発明によれば、²²⁵Ａｃカウは最初に塩酸溶液中に含まれており、この溶液中で塩化物イオンと水素イオンとの濃度は、塩化物錯体の形成を可能にするレベルに調節される。好ましくはＨＣｌ濃度は、塩化物錯体の吸収を最大にするレベル、すなわち、約０．２５Mと約１Mとの間である。はるかに高い濃度で確かに吸収は可能であるが、分配レベルは最適未満である。次にカウ溶液を陰イオン交換樹脂に接触させ、その結果²²⁵Ａｃの娘核種である²¹³Ｂｉはカウ溶液から吸収され、塩化物錯体中で陰イオン交換樹脂の上に付着する。有機陰イオン交換樹脂を使用することで、ビスマス抽出分配比は酸濃度の低下と共に増加する。当業者には了解されるように、広く様々な陰イオン交換樹脂として、限定されるものではないが、Sarasep Corp.，Santa Clara，Caが製造するＡｎｅｘや、Dow Chemic al Companyが製造するＤｏｗｅｘ−１が挙げられるが、本発明の実施に適しており、樹脂の特色の選択は、個々の使用者の必要性または都合によって決まる。本発明により実施されるように、陰イオン交換樹脂は、²¹³Ｂｉの迅速な付着とストリッピングとを可能にするように構成され、それによって²¹³Ｂｉの分離と精製とに必要な時間を最小にする。本発明の好適な実施例においては、陰イオン交換樹脂は、²¹³Ｂｉの迅速な付着とストリッピングとを可能にする薄膜として提供される。いったん²¹³Ｂｉを含む塩化物錯体が陰イオン交換樹脂表面に吸収されたなら、次に樹脂を洗浄して、陰イオン交換樹脂から痕跡の「²²⁵Ａｃカウ」と酸とを除去し、塩化物錯体として付着した精製済み²¹³Ｂｉを有する陰イオン交換樹脂を残す。最後に、²¹³Ｂｉを陰イオン交換樹脂から取り出すために、ストリッピング溶液を用いて陰イオン交換樹脂を洗浄する。塩化物イオンを含まず、溶液中の水素イオン濃度の低下したストリッピング溶液は、塩化物陰イオン錯体を破壊し、²¹³ Ｂｉを陽イオンとして遊離させる。再度当業者には認識できるように、広く様々なストリッピング溶液が、塩化物錯体の破壊と²¹³Ｂｉの遊離とに適している。ストリッピング溶液の選択は従って、²¹³Ｂｉのその後の使用を考慮して行う。一般に、中性［pH４〜１０］範囲のpH、より好ましくは約２を超えるpHを有する溶離溶液で、実質的に塩化物イオンを含まないものが有効である。従って適切なストリッピング剤としては、水、ＤＴＰＡのような錯体生成剤類（complexants ）、及び酢酸ナトリウム（ＮａＯＡｃ）が挙げられる。例として、医療用途において使用するために、²¹³Ｂｉの精製用に好ましい溶離液は、²¹³Ｂｉをキレート化合物とモノクローナル抗体とに付加させかつ連結させる溶液としてよい。ストリッピング溶液は従ってまた、²¹³Ｂｉが陰イオン交換樹脂から遊離するにつれて、²¹³Ｂｉを受け取るための、生体内で二官能キレート化剤と結合（conjugate d）しているタンパク質を含み、それによって患者が受け入れる前に連結を作製するための合計時間を短縮する。目的従って、本実施例の一つにおける本発明の目的は、放射性核種類の溶液から²¹ ³ Ｂｉを分離し及び精製する方法を提供することにある。本実施例の一つにおける本発明のさらなる目的は、放射化学的²²⁵Ａｃと塩酸とを含む溶液を陰イオン交換樹脂と組合せ、その結果²²⁵Ａｃ、²¹³Ｂｉの娘核種は「カウ」溶液から吸収され、塩化物錯体として陰イオン交換樹脂の上に付着することにある。本実施例の一つにおける本発明のさらなる目的は、陰イオン交換樹脂から痕跡の²²⁵Ａｃカウと酸とを除去し、²¹³Ｂｉを陰イオン交換樹脂に付着させるような塩化物錯体を残すことにある。本実施例の一つにおける本発明のさらなる目的は、塩化物錯体を壊れやすくするかまたは破壊し、それによって²¹³Ｂｉを陰イオン交換樹脂から遊離させるストリッピング溶液を提供することにある。本実施例の一つにおける本発明のさらなる目的は、²¹³Ｂｉを陰イオン交換樹脂から吸収、洗浄及びストリッピングするために必要な時間を最小にするような形状の陰イオン交換樹脂を提供することにある。本実施例の一つにおける本発明のさらなる目的は、²¹³Ｂｉを陰イオン交換樹脂から付着させ及びストリッピングするために必要な時間を最小にするため、薄膜として陰イオン交換樹脂を提供することにある。本実施例の一つにおける本発明のさらなる目的は、白血病または他の形態の癌患者の治療のために、モノクローナル抗体の最終的な作製と、分離しかつ精製済みの²¹³Ｂｉとモノクローナル抗体との結合とを可能にする溶液として、ストリッピング溶液を提供することにある。本実施例の一つにおける本発明のさらなる目的は、生体内での連結過程の開始を可能にするため、²¹³Ｂｉが陰イオン交換樹脂から遊離するにつれて²¹³Ｂｉを受け取るための、二官能キレート化剤と結合したタンパク質を含むストリッピング溶液を提供することにある。本発明の主題を本明細書の結びの部分で特に指摘し、かつ明確に請求する。しかしながらその構成と作動方法とは、そのさらなる利益と目的と共に、以下の説明を添付の図面と併せて検討することによって最も良く理解されよう。なお、類似の参照符号は類似の要素を意味する。図面の簡単な説明図１ａは、²¹³Ｂｉを含む溶液の抽出の開始時に、シリンジと一直線に並んで置かれたカートリッジ内部に含まれる、陰イオン交換樹脂の薄膜の形状を示す。図１ｂは、²¹³Ｂｉを含む溶液の抽出を示す。図１ｃは、抽出後の陰イオン交換樹脂表面の²¹³Ｂｉの付着を示す。図１ｄは、²¹³Ｂｉの抽出後の²²⁵Ａｃ「カウ」の回収を示す。図２ａは、好適な実施例において利用される洗浄溶液を示す。図２ｂは、好適な実施例の洗浄段階を示す。図２ｃは、好適な実施例において実施される、洗浄溶液の回収を示す。図３ａは、好適な実施例のストリッピング段階において利用される溶離溶液を示す。図３ｂは、好適な実施例のストリッピング段階における、ストリッピング溶液のローディングを示す。図３ｃは、好適な実施例のストリッピング段階における、ストリッピング溶液への²¹³Ｂｉの回収を示す。好適な実施例の説明本発明の実施は、三段階の処理において優先的に成し遂げられる。すなわち抽出段階、洗浄段階及びストリッピング段階である。本発明の好適な実施例において、抽出段階は、図１ａ、１ｂ、１ｃ及び１ｄに示すように、有機陰イオン交換樹脂２を含むカートリッジホルダー１を利用して成し遂げられる。本発明の好適な実施例において実施されるように、樹脂２は薄い「ウェブ」膜として構成され、3M，St．Paul，MNが製造するものである。陰イオン交換樹脂２は、好ましくはＡｎｅｘ^TMとして選択し、これはSarasep Corp.，Santa Clara，CAから入手できる。樹脂２をまず粉砕して微細粉末にし、次にＰＴＦＥ（ポリトリフルオロエチレン）「ウェブ」膜中に固定する。これは、本明細書において参考のために引用する米国特許第5,071,610号に説明する方法に従ったものである。ウェブ形態の樹脂２とカートリッジ１とを、シリンジ３と一直線に並べて置く。最初にカートリッジ１を通して０．５MＨＣｌを引くことで、樹脂２を濡らし、かつ、樹脂２が塩化物形態になることを確実にする。当業者には明瞭なように、カートリッジサイズと、使用される陰イオン交換樹脂のタイプと、「ウェブ」構造の化学とは、生成対象となる²¹³Ｂｉの量によって変化することがある。次に、²²⁵Ａｃの試料を０．５MＨＣｌの溶液中に加え、塩化物錯体形成済み溶液４を形成する。好ましくは²²⁵Ａｃはまず、METHODS 0F SEPARATING AND PURIFYING SHORT HALF-LIFE RADIONUCLIDES FR0M A MIXTURE OF RADIONUCLIDESと称する、出願番号08/766,684、出願日12/13/96の同時係属米国特許出願に説明される方法によって作製する。図１ｂと１ｃに示すように、次に樹脂２を通して²²⁵Ａｃ／² ¹³ Ｂｉ塩化物錯体形成済み溶液４を引き、その結果溶液中の陰イオン²¹³Ｂｉ錯体は樹脂２表面に吸収される。図１ｃに示すように、残りの溶液７と²²⁵Ａｃとは樹脂２を通過してシリンジに入る。次に図１ｄに示すように、カートリッジ１を取り除くことにより、²²⁵Ａｃは、²¹³Ｂｉの貯蔵と将来の「内部成長」とのために、最初の「カウ」容器に戻すことができる。図２ａに示すように、次に、好適な実施例の洗浄段階を成し遂げるために、洗浄溶液９を供給する。樹脂２表面に吸収された²¹³Ｂｉを含むカートリッジ１を再度シリンジ３と一直線に並べて置く。本発明の好適な実施例においては、図２ｂに示すように、樹脂２を通して０．００５MＨＣｌの洗浄溶液９を引くことで、樹脂２の間隙表面に付着していることがある痕跡の²²⁵ＡｃとＨＣｌとを塩化物錯体形成済み溶液４から除去する。洗浄段階の後では、精製済み²¹³Ｂｉを樹脂２に結合させたままにする。図２ｃに示すように、カートリッジ１を再度取り除き、洗浄溶液９をシリンジ３から排出させる。当業者には明瞭なように、塩化物錯体形成済み溶液４と洗浄溶液９とは樹脂２を通して同じ方向に引く必要はないが、²¹³Ｂｉの回収率を最大にするために、これらを同じ方向に引くのが好ましい。図３ａに示すように、次に、好適な実施例のストリッピング段階を成し遂げるために、ストリッピング溶液１０を供給する。図３ｂに示すように、カートリッジ２を取り除いた状態で、約２を超えるpHを有しかつ実質的にＣｌ^-イオンを含まないストリッピング溶液１０を引いてシリンジ３の中に入れる。いったんシリンジ３にストリッピング溶液１０を充填させたなら、樹脂２表面に吸収された²¹ ³ Ｂｉを含むカートリッジ１を再度、シリンジ３と一直線に並べて置く。ストリッピング溶液１０を次に、シリンジ３から押出し、樹脂２を通し、そして回収容器１１の中に入れる。このようにして、この時点で精製済みの²¹³Ｂｉを樹脂２から取り出す。図３ｃに示すように、ストリッピング溶液１０中の精製済み²¹³ Ｂｉはこうしてさらなる使用のために利用可能となる。当業者には明瞭なように、ストリッピング溶液１０を、塩化物錯体形成済み溶液４と洗浄溶液９とを引く方向とは正反対の方向に、樹脂２を通して押す必要はないが、²¹³Ｂｉの回収率を最大にするために、ストリッピング溶液１０を正反対の方向に押すのが好ましい。また、当業者には明瞭なように、流れの相対方向を逆にしてもよいが、流入液と洗浄液とはウェブを通して一方向に送り、かつ、溶離した生成物は正反対の方向にするべきである。好ましいストリッピング溶液１０としては、約０．０１M と約０．２Mの間のＮａＯＡｃが挙げられるが、限定されるものではない。好ましいストリッピング溶液は、０．０５MＮａＯＡｃ、pH５．５；または二官能キレート化剤（例えばＤＴＰＡ）と結合した適切なタンパク質を含むＮａＯＡｃ、pH５．５である。実験例本発明の好適な実施例の有効性を証明するために、一連の実験に着手した。それらの実験では、以下の手順に従った。「Ｂｉジェネレータ」から²¹³Ｂｉを「ミルキング」するために使用した全ての酸類、塩類または塩基類を作るために、「ＵＬＴＲＥＸ^TM」の純度または同等物を使用して、最終²¹³Ｂｉ生成物中の陽イオン不純物を取り除いた。抽出段階１．瓶または適切な容器中に貯蔵された「Ｂｉジェネレータ」を得る。放射化学の内容物は、²²⁵Ａｃと娘核とからなり、一時的な貯蔵または敷地外への出荷のために、ＨＣｌ中で乾燥させて塩化物塩を形成する。２．３Ｍ陰イオン交換円板を得る。０．５MＨＣｌを用いて円板を前処理するために、酸をシリンジ中に置き、円板をシリンジに係止または取り付け、シリンジプランジャーを押し下げ、膜を通して酸を押す。前洗浄の酸を捨てる。この段階により、陰イオン樹脂が確実に塩化物形態になる。３．既知の体積の０．５MＨＣｌをピペッターに取る。４．「Ｂｉジェネレータ」からねじ蓋を外す。ＨＣｌを「カウ」貯蔵瓶中に排出し、²²⁵Ａｃを溶液中に溶解させる。５．前処理済み３Ｍフィルターをシリンジの出口に、また、適切なプラスチック針または先端を３Ｍフィルターの出口側に取り付ける。同じプラスチック先端または針を用いて、²²⁵Ａｃとその娘核を含む（²¹³Ｂｉを含む）溶解させた「カウ」を、３Ｍ陰イオン交換フィルターを通して引き上げ、シリンジ胴部の中に入れる。６．プラスチック先端または針を外し、Ｂｉローディング済み３Ｍ陰イオン交換円板を取り除き、²²⁵Ａｃ−０．５MHＣｌ溶液を排出する。洗浄段階７．²¹³Ｂｉ生成物はこの時点で陰イオン交換円板の上に、わずかな痕跡の²²⁵ＡｃとＨＣｌ（樹脂の間隙表面に付着している）と共に吸収されている。８．使用済みシリンジとプラスチック針または先端を交換して、痕跡の²²⁵Ａｃと酸を取り除く。新たなシリンジを²¹³Ｂｉ「ローディング済み」陰イオン交換円板に取り付け、円板を通して０．００５MＨＣｌ洗浄溶液を引き上げる。次に円板を取り除いて、痕跡の間隙「カウ」溶液を含む酸洗浄液を廃棄物瓶の中に追い出す。「廃」ＨＣｌを捨てる。他の酸濃度（０．００１〜０．５MＨＣｌ）を使用できる。０．００５MＨＣｌを選択した。というのはこれは効果的な洗浄液となり、しかもＢｉ生成物の大きな損失が無く、同時に、０．０５MＮａＯＡｃ生成物中の目標pH値５．５を得る妨げとなる０．５MＨＣｌを除去するからである。 ²¹³ Ｂｉ生成物の溶離９．²¹³Ｂｉ「ローディング済み」３Ｍ円板、間隙²²⁵Ａｃと流入液ＨＣｌとを含まない、を下降流で、選択した幾つかの溶液の一つと共に溶離させた。この溶離溶液を清潔なシリンジ中に置き、²¹³Ｂｉローディング済み円板を通して押し、生成物瓶の中に入れる。（任意）上記段階を繰り返して、最大生成物を得る。選択した試験結果の要約 ²¹³Ｂｉローディング、洗浄及び溶離の実験を実行して以下を決定した。１）０．５MＨＣｌ流入溶液からの²¹³Ｂｉの最大ローディング；２）²²⁵Ａｃ汚染を除去しかつ酸濃度を低減するための陰イオン交換円板洗浄最中の、Ｂｉの損失；及び３）次に直接使用して、モノクローナル抗体の最終作製と結合とを可能にすることができる溶離溶液を用いて、精製済みＢｉ生成物を取り出すための最も効果的な方法を開発することである。結果（表１）によると、²¹³Ｂｉ抽出と回収のジェネレータ系は、０．０５MＮａＯＡｃ（pH５．５）中の²¹³Ｂｉの８５〜９３％を回収し、他の全ての放射性核種類を含まないことが示される。示されていないが、抽出、洗浄及びストリッピング作業全体には、約６分を要する。「ウェブ」円板からのビスマスの三回の溶離を試験毎に実行し、第一の「生成物」溶離の効率を示した。第二と第三の溶離は、さらに最終生成物の４〜７％を回収する。円板からの²¹³Ｂｉの取り出しに適した溶液としては、１）０．０５MＮａＯＡｃ；または２）二官能キレート化剤（例えばＤＴＰＡ）と結合した適切なタンパク質を含むＮａＯＡｃが挙げられる。ＮａＯＡｃの濃度はまた変えてよく、すなわち０．０１〜０．２Mとしてよい。上記溶液のいずれでも用いてローディングされかつ溶離される²¹³Ｂｉのパーセントを改良するためには、一方向にのみローディングし、ローディング段階と同じ方向に洗浄し、及びローディングと正反対の方向に溶離する。流入、洗浄及び溶離溶液を、最初の調査の場合４ミリリットルに維持した（２０mCi²²⁵Ａｃ「カウ」の場合の５mCi毎mLに基づいて）。こうした体積を最適化するための試みは行わなかった。抽出段階陰イオン交換「系」は、有機イオン交換媒質の紙の薄いシートであるが、最初の「ウェブ」ローディング表面は標準的なイオン交換カラムの上部のように働き、裏面は最上部ローディングカラムの底部として働く。加えて、流入「カウ」溶液は、交換体の上にローディング対象として何グラムかのビスマスを含むのではなく、わずか約５．３×１０^-8mgＢｉ毎ミリキュリー（１から２０mCiの²²⁵Ａｃ「カウ」が提案されている）を含むことは認識できるはずである。従ってローディング実験によると、ローディング溶液をジェネレータ貯蔵容器から引き、交換体を通し（上昇流）及び次に逆方向で瓶に戻す場合、²¹³Ｂｉの流出液への損失は２〜５％である（１３ＡとＢ）ことが示される。ローディング流入液が陰イオン交換媒質を一方向にのみ通過する場合、流出液への損失は＜０．１％（１３Ｃ及びＤ、１６Ａ）である。最初の二つの方向の流れは、最も迅速な経路によって²²⁵ Ａｃ「カウ」が遮蔽された容器へ戻ることを可能にすると考えられた。しかしながら、流入液が「ウェブ」を通って流れる場合、Ｂｉは前面上に吸収されるが、しかし方向を逆にすることは０．５MＨＣｌを「取り除き」、それによりわずかな部分のＢｉを表面から「蹴って」、最初の「ジェネレータ」瓶に戻す。洗浄段階洗浄溶液の目的は、イオン交換媒質に接触しなかった痕跡の残留流入溶液を除去すること（間隙²²⁵Ａｃ／Ｒａを取り除くこと）と、イオン交換媒質中の酸濃度を低減することである。その目標は、二官能キレート化剤（例えばＤＴＰＡ）と結合した適切なタンパク質と²¹³Ｂｉとを連結するのに必要なpH（〜５．５）で、²¹³Ｂｉ生成物を溶離することである。上昇流と下降流の洗浄溶液の組合せは、²¹³Ｂｉ損失〜３．６％（１３Ａ−Ｄ）を与えた。洗浄溶液を流入液と正反対の方向にのみ通過させた場合、損失は１３〜１７％だった（１２Ｃ）。洗浄溶液を流入液の流れと同じ方向に通過させた場合、洗浄損失は＜１％に低減した（１６Ａ）。生成物の溶離段階幾つかのタイプの溶離液を試験し、これは０．０５MＮａＯＡｃと０．０５MＮａＯＡｃ＋０．００１MＤＴＰＡとを含んだ。これらは、二官能キレート化剤（例えばＤＴＰＡ）と結合した適切なタンパク質と共に使用するための周知の緩衝溶液に基づいて選択した。大きな相違は認められなかった（１３Ａ、Ｄ及び１３Ｂ、Ｃ）。本発明の好適な実施例を示しかつ説明してきたが、当業者であれば、本発明のより広い態様において、本発明から逸脱することなく多くの変更及び修正を施し得ることは明瞭であろう。従って添付の請求の範囲は、本発明の真の精神と範囲内に存在する全てのそのような変更及び修正を含むものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｇ２１Ｇ 4/08 Ｇ２１Ｇ 4/08 Ｚ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者デス・チャン，ジャケッタ・アールアメリカ合衆国ワシントン州99301，パスコ，ジェイク・ロード 221

Claims

【特許請求の範囲】１． ²¹³Ｂｉを放射性核種類の溶液から分離する方法であって：（ａ）²¹³Ｂｉを含む放射性核種類の前記溶液が、塩化物錯体の形成を可能にする濃度でＨＣｌをさらに含むことを確実にする段階と、（ｂ）前記溶液を陰イオン交換樹脂にさらし、それによって²¹³Ｂｉを前記溶液から陰イオン錯体として吸収させ、かつ、該陰イオン錯体中の該²¹³Ｂｉを前記樹脂に付着させる段階と、（ｃ）前記陰イオン錯体中の前記付着した²¹³Ｂｉを有する前記樹脂を、前記溶液から分離する段階と、（ｄ）前記樹脂と前記陰イオン錯体中の前記付着した²¹³Ｂｉとをストリッピング溶液にさらし、それによって前記²¹³Ｂｉを前記樹脂から取り出し、かつ、前記²¹³Ｂｉを前記トリッピング溶液の中に移動させる段階と、を含む方法。２．前記ストリッピング溶液は、水、錯体生成剤類、及び酢酸ナトリウム及びこれらの組合せを含む群から選択される、請求項１に記載の方法。３．前記ストリッピング溶液は、２を超えるpHを有するように選択される、請求項１に記載の方法。４．前記ストリッピング溶液は、二官能キレート化剤類と結合したタンパク質類を含む、請求項１に記載の方法。５．前記陰イオン交換樹脂は薄膜で提供される、請求項１に記載の方法。６．前記薄膜はポリトリフルオロエチレンとして提供される、請求項５に記載の方法。７．前記ストリッピング溶液を提供する前に前記陰イオン交換樹脂を洗浄する段階をさらに含む、請求項１に記載の方法。