JP2001322942A - 免疫賦活剤 - Google Patents

免疫賦活剤

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Abstract

(57)【要約】 【課題】 経口摂取することにより生体の免疫力を活性
化する作用を有するトウモロコシ外皮由来の免疫賦活剤
を提供する。 【解決手段】 トウモロコシ外皮から得られたヘミセル
ロース及び/又はその部分分解物を主成分として含有さ
せることにより、免疫賦活剤を得る。上記ヘミセルロー
スが、トウモロコシ外皮から澱粉質及び蛋白質を除去し
た残部をアルカリ抽出して得られたものであることが好
ましい。また、前記ヘミセルロースの部分分解物が、ト
ウモロコシ外皮から澱粉質及び蛋白質を除去した残部を
アルカリ抽出して得られたヘミセルロースを、さらにキ
シラナーゼで処理したものであることが好ましく、その
平均分子量が2万〜20万であることがより好ましい。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、トウモロコシ外皮
を原料とする免疫賦活剤に関する。
【0002】
【従来の技術】免疫系は、外来のウイルスや微生物など
の侵入、癌細胞等の異物を排除し、生体の恒常性を維持
するために重要な生体の防御機構の一つであり、加齢、
ストレス、疲労や環境因子などの要因により、免疫機能
が低下した場合、各種の疾病や感染症が引き起こされや
すくなると考えられている。
【0003】従って、生体の防御機能である免疫力を強
化することは、生体の恒常性の維持に重要であり、免疫
系を活性化する免疫賦活物質は、食品や薬品として広い
用途がある。
【0004】従来、免疫賦活物質やその製造方法として
様々なものが提案されており、その一つに米糠のヘミセ
ルロースの部分分解物が知られている。
【0005】例えば、特許公報2532899号(特開
平1−153701号公報)には、米糠からアルカリ抽
出して得られるヘミセルロースを糸状菌で資化させて免
疫賦活作用を有するヘミセルロースの製造方法が記載さ
れており、特開平9−23895号公報には、植物組織
水溶性多糖体を調製して糸状菌の菌体外酵素で反応させ
て免疫力増強物質を生成する方法が記載されている。
【0006】
【発明が解決しようとする課題】しかし、上記の製造方
法により得られる米糠由来の免疫賦活作用を有するヘミ
セルロースや免疫力増強物質の免疫賦活効果は、in vit
roでナチュラルキラー細胞(NK−細胞)の増加、活性
効果を測定しているだけであり、実際に経口摂取した場
合にも免疫賦活作用があるかどうかは定かではなかっ
た。
【0007】また、特に前者の製造方法では、一定の品
質の反応生成物を得ることが難しく、さらに、糸状菌の
培養に15日間もかかるため、工業的に製造する場合に
は好ましい方法とは言えなかった。
【0008】そして、トウモロコシ外皮から調製される
ヘミセルロース及びその部分分解物が免疫賦活作用を有
するかどうかについてはこれまで知られていなかった。
【0009】従って、本発明の目的は、経口摂取するこ
とにより生体の免疫力を活性化する作用を有するトウモ
ロコシ外皮由来の免疫賦活剤を提供することにある。
【0010】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成するために鋭意研究した結果、トウモロコシ外皮
から調製されたヘミセルロース及びその部分分解物が免
疫賦活作用を有することを見出し、本発明を完成するに
至った。
【0011】すなわち、本発明の免疫賦活剤は、トウモ
ロコシ外皮から得られたヘミセルロース及び/又はその
部分分解物を有効成分とすることを特徴とする。
【0012】本発明によれば、安全で、経口摂取するこ
とにより免疫力を活性化できる免疫賦活剤を提供でき
る。
【0013】
【発明の実施の形態】本発明の免疫賦活剤の有効成分で
あるトウモロコシ外皮から得られるヘミセルロース及び
その部分分解物の調製方法は、特に制限はなく、公知の
方法を採用できる。
【0014】例えば、トウモロコシ外皮からヘミセルロ
ースを抽出する方法としては、アルカリ又は酸による抽
出、エクストルーダーやオートクレーブによる加圧、熱
水抽出、セルラーゼ等の酵素剤を用いた抽出、あるいは
これらを適宜組み合わせた方法を採用することができ
る。本発明においては、ヘミセルロースをより高純度に
得るために、トウモロコシ外皮から澱粉質、蛋白質、更
に必要に応じて脂質、無機質等を除去した残部をアルカ
リ抽出してヘミセルロースを調製することが好ましい。
【0015】トウモロコシ外皮から澱粉質、蛋白質、更
に必要に応じて脂質、無機質等を除去する方法として
は、酵素処理、化学的処理、物理的処理のいずれを採用
してもよく、あるいはこれらを適宜組み合わせてもよ
い。酵素処理は、例えばα−アミラーゼ、グルコアミラ
ーゼ等の澱粉分解酵素、プロテアーゼ等の蛋白分解酵
素、リパーゼ等の脂質分解酵素、セルラーゼ等の繊維素
分解酵素を、pH3〜9、温度30〜100℃の条件下
に添加、作用させて処理することにより行われる。ま
た、化学的処理は、例えばトウモロコシ外皮に鉱酸,有
機酸の水溶液を添加し、pH2〜5の条件下で加熱する
か、又は食品用界面活性剤を添加し、pH3〜8の条件
下で熱処理することにより行われる。更に物理的処理
は、例えばトウモロコシ外皮をホモゲナイザー、ハンマ
ーミル等の粉砕機で粉砕した後、篩別することにより行
われる。
【0016】また、ヘミセルロースを部分分解する方法
としては、上記のようにして調製したヘミセルロース
を、繊維素分解酵素、特に好ましくはキシラナーゼで処
理する方法が好ましく採用される。
【0017】本発明で用いられるヘミセルロースは、例
えば以下のようにして調製することができる。
【0018】好ましくは上記前処理をしたトウモロコシ
外皮5〜20質量部に、水80〜95質量部を添加し、
アルカリ化合物を添加してpH10〜13に調整し、8
0〜140℃で0.5〜10時間撹拌混合して、ヘミセ
ルロースを抽出する。アルカリ化合物としては、特に制
限はなく、例えば水酸化カルシウムや水酸化ナトリウム
が挙げられる。なお、アルカリ化合物は予め水溶液にし
て加えてもよい。
【0019】次いで、この溶液を濾過して、濾液を回収
し、この抽出液を酸で中和する。酸としては、特に制限
はなく、有機酸や無機酸を用いることができる。
【0020】この中和液は、脱色、脱塩してそのまま、
あるいは濃縮して、又はさらに噴霧乾燥や凍結乾燥によ
り粉末化することによりヘミセルロース粗精製物として
用いることができる。
【0021】またさらに、上記中和液から、中和によっ
て沈殿した蛋白質を遠心分離などの手段で分離除去し、
必要に応じてその上澄液を透析、イオン交換樹脂処理、
イオン交換膜処理、限外濾過膜処理、アルコール精製、
濾剤処理等の単独又は適宜組み合わせで処理することに
より、任意の純度のヘミセルロースを得ることができ
る。
【0022】また、本発明で用いられるヘミセルロース
の部分分解物は、例えば以下のようにして調製すること
ができる。
【0023】上記のようにトウモロコシ外皮をアルカリ
抽出して得られた抽出液を、清澄濾過した後、pH調整
し、50〜60℃の温度下にキシラナーゼを添加して反
応させる。キシラナーゼの添加量は、抽出物の固形分1
g当たりに対して、0.0001〜10単位程度が好ま
しく、反応時間は3〜96時間程度が好ましい。
【0024】なお、キシラナーゼの力価の測定は、トウ
モロコシ外皮からアルカリ抽出して得たヘミセルロース
を基質として、pH7、60℃の反応条件下で、1分間
に1μmolのキシロースに相当する還元糖を生成する
酵素量を1単位とすることにより行った。
【0025】また、キシラナーゼとしては、糖化型のも
のより、液化型のものが好ましく、カビ起源のもので
も、バクテリア起源のものでも使用できるが、バクテリ
ア起源のキシラナーゼの方が純度が高いので好ましい。
特に好ましい例としては、特公昭50−13357号公
報に記載されたアルカリ側に至適pHを有するアルカリ
キシラナーゼが挙げられる。
【0026】次いで、加熱等により酵素を失活させた
後、反応液を、脱色、脱塩処理し、濃縮、あるいはさら
に乾燥することにより、ヘミセルロースの部分分解物を
得ることができる。
【0027】また、前記のようにして精製したヘミセル
ロースを3〜30質量%含有する溶液を調製して、必要
に応じてpH調整し、上記と同様にして酵素反応を行な
い、酵素を失活させた後、遠心分離等により固液分離
し、上澄液を濃縮、乾燥してもよい。
【0028】なお、上記のような方法でトウモロコシ外
皮から調製されたヘミセルロースの部分分解物は、「セ
ルエース」(商品名、日本食品化工株式会社製)として
市販されている。
【0029】本発明において、トウモロコシ外皮由来の
ヘミセルロースの部分分解物は、その平均分子量が2万
〜20万であることが好ましい。このような平均分子量
を有するヘミセルロースの部分分解物は、その5質量%
水溶液の粘度が3〜20cps(B型粘度計、60rp
m、25℃)と低粘度であり、飲食品等の原料に添加し
たときに、飲食品等の食感や風味を良好に保つことがで
きる。ヘミセルロースの部分分解物の平均分子量が20
万を超えると、粘度が高くなりすぎて、飲食品の原料等
に添加しにくくなり、2万未満であると、食物繊維とし
ての生理活性効果が失われる虞があるため好ましくな
い。
【0030】本発明の免疫賦活剤は上記ヘミセルロース
及び/又はその部分分解物を主成分として含有し、例え
ば上記ヘミセルロース及び/又はその部分分解物を含む
水溶液、濃縮液あるいは乾燥粉末などとして製品化する
ことができる。なお、上記ヘミセルロース及び/又はそ
の部分分解物の他に、除去しきれなかった澱粉質、蛋白
質や、若干のリグニン、セルロース、灰分等が含有され
ていてもよい。
【0031】本発明の免疫賦活剤は、乾燥粉末とした場
合でも容易に水に溶けるので、そのまま健康飲食品、医
薬品として利用可能である。また、飲食品に少量添加す
ることにより、飲食品の風味、食感を害することなく免
疫賦活効果を付与することができる。
【0032】本発明の免疫賦活剤を飲食品に添加する場
合、飲食品の食感を害することなく免疫賦活効果を期待
できる添加量としては、0.1〜10質量%が好まし
い。また、本発明の免疫賦活剤の摂取量は、免疫賦活作
用を発現するためには1〜10g/日が好ましく、3〜
5g/日が特に好ましい。
【0033】
【実施例】以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明
する。 実施例 トウモロコシ外皮100質量部に、水1000質量部、
水酸化カルシウム1質量部を加え、85℃で3時間加熱
した。この反応液を60℃まで冷却した後、硫酸を添加
してpH7に調整した。
【0034】そして、特公昭50−13357号公報に
記載された方法で調製したアルカリキシラナーゼ(商品
名「セルザイム」、日本食品化工株式会社製)を、この
反応液の固形分1g当たり0.01単位添加して、60
℃で48時間反応させた。酵素反応終了後、90℃で3
0分間加熱して酵素を失活させた後、濾過して濾液を回
収し、さらに清澄濾過、脱色、脱塩を行ない精製した
後、スプレードライヤーで噴霧乾燥してトウモロコシ外
皮由来のヘミセルロースの部分分解物の粉末を得た。
【0035】試験例1 4週齢の雌マウス(C3H/Hej)12匹を、7日間
の予備飼育を行なった後、2群(1群6匹)に分けて、
試験群には上記実施例1で製造したトウモロコシ外皮由
来のヘミセルロースの部分分解物を蒸留水で溶解したも
のを、胃ゾンデを用いて28日間連続経口投与(1回当
たり50mg/kg)した。また、対照群には蒸留水を
同様にして投与した。なお、試験期間中の摂餌及び摂水
は自由とした。
【0036】そして、毎日9:00〜10:00に症状
観察及び体重等を測定した。試験期間中の体重推移、摂
餌及び摂水量についての結果を表1、2に示す。
【0037】
【表1】
【0038】
【表2】
【0039】表1、2の結果から、トウモロコシ外皮由
来のヘミセルロースの部分分解物の摂取による体重等へ
の影響はないことが分かる。なお、試験期間中の動物の
一般症状は良好であり、途中、死亡又は切迫屠殺状況の
動物は認められなかった。
【0040】そして、28日間の試験終了後、供試され
たマウスをネンブタール麻酔下において開腹し、腹部大
静脈より採血を行ない、脾臓を摘出した。なお、解剖時
の剖検において、トウモロコシ外皮由来のヘミセルロー
スの部分分解物の投与に起因するような変化は確認され
なかった。
【0041】摘出した脾臓から、常法により脾臓細胞を
調製し、10(v/v)%FCS添加RPMI−164
0培地で脾臓細胞の細胞数を調整して、24穴プレート
に2×106/ml/ウェルになるように分注した。
【0042】そして、ConA(50μg/ml)を1
00μl加え、最終濃度5μg/mlとし、37℃、5
%CO2インキュベーター内で24時間培養した。
【0043】培養後、各ウェルの細胞浮遊液を0.45
μmシリンジフィルターで濾過し、その濾過液を、IL
−2、INF−γ及びIL−4活性測定用サンプルとし
た。
【0044】各種サイトカインの濃度の測定は、BIOSOU
RCE社Cytoscreeenキットを使用し、プレートリーダーシ
ステムにて行なった。
【0045】各測定値は、平均値±標準偏差で表し、有
意差検定はstudent’st-testにより、p<0.05、p
<0.01の危険率で有意差の有無を判定した。その結
果を表3に示す。
【0046】
【表3】
【0047】表3から分かるように、トウモロコシ外皮
由来のヘミセルロースの部分分解物の投与群において、
脾臓細胞のConA刺激に対するサイトカイン(IL−
2及びIFN−γ及びIL−4)産生能の明らかな上昇
促進作用が示され、IL−2及びIFN−γについては
対照群に対して有意差(p<0.01)が認められた。
【0048】これらの結果から、トウモロコシ外皮由来
のヘミセルロースの部分分解物の摂取は、通常の生活に
おいては生体に抗原性等の反応を引き起こすことなく、
また、感染やストレスを受けた際には免疫機能を充分に
促進させる作用があることが確認された。
【0049】
【発明の効果】以上説明したように、本発明によれば、
トウモロコシ外皮由来の安全で、経口摂取することによ
り免疫力を活性化できる免疫賦活剤を提供できる。
【0050】本発明の免疫賦活剤を摂取することによ
り、免疫力が低下し、種々の疾患に罹病し易くなった人
の免疫力の強化をすることができる。
【0051】また、本発明の免疫賦活剤は、医薬品、飲
食品、あるいはそれらへの添加物として、安心して長期
にわたり継続して摂取することができ、さらに、ヘミセ
ルロースの部分分解物は低粘度であるため、飲食品等の
原料に添加したとき飲食品等の食感や風味を良好に保つ
ことができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 FI テーマコート゛(参考) A61P 37/04 A61P 37/04 43/00 107 43/00 107 Fターム(参考) 4B018 MD35 MD49 MD90 ME07 MF01 MF12 4C086 AA01 AA02 EA20 MA01 MA04 MA52 NA14 ZB09 ZB22 4C088 AB78 AC04 BA12 BA26 BA27 CA02 CA05 CA11 CA12 CA14 CA17 CA23 CA25 MA01 MA52 NA14 ZB09 ZB22

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 トウモロコシ外皮から得られたヘミセル
    ロース及び/又はその部分分解物を有効成分とすること
    を特徴とする免疫賦活剤。
  2. 【請求項2】 前記ヘミセルロースが、トウモロコシ外
    皮から澱粉質及び蛋白質を除去した残部をアルカリ抽出
    して得られたものである請求項1に記載の免疫賦活剤。
  3. 【請求項3】 前記ヘミセルロースの部分分解物が、請
    求項2に記載のヘミセルロースを、さらにキシラナーゼ
    で処理したものである請求項1記載の免疫賦活剤。
  4. 【請求項4】 前記ヘミセルロースの部分分解物の平均
    分子量が2万〜20万である請求項3記載の免疫賦活
    剤。
  5. 【請求項5】 経口投与によりサイトカイン産生促進作
    用を有する請求項1〜4のいずれか一つに記載の免疫賦
    活剤。
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