JP2001258586A - アンモニアの反応分離を利用したグリシンの微生物学的製造方法 - Google Patents
アンモニアの反応分離を利用したグリシンの微生物学的製造方法Info
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- JP2001258586A JP2001258586A JP2000083179A JP2000083179A JP2001258586A JP 2001258586 A JP2001258586 A JP 2001258586A JP 2000083179 A JP2000083179 A JP 2000083179A JP 2000083179 A JP2000083179 A JP 2000083179A JP 2001258586 A JP2001258586 A JP 2001258586A
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】 ＰＨを調整するための酸、アルカリまたは緩
衝液を添加しない反応条件下でグルシノニトリルからグ
リシンを製造する。 【解決手段】 グルシノニトリル水溶液にアシネトバク
ターｓｐ．あるいはロドコッカス マリスを作用させ、
反応液中に生成するアンモニアを分離させながら反応を
行う。アンモニアは減圧下あるいは不活性ガスの存在
下、反応蒸溜により分解する。
衝液を添加しない反応条件下でグルシノニトリルからグ
リシンを製造する。 【解決手段】 グルシノニトリル水溶液にアシネトバク
ターｓｐ．あるいはロドコッカス マリスを作用させ、
反応液中に生成するアンモニアを分離させながら反応を
行う。アンモニアは減圧下あるいは不活性ガスの存在
下、反応蒸溜により分解する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、グリシンの微生物
学的製造方法に関する。さらに詳しくは、ｐＨを調整し
ない反応条件下で、ホルムアルデヒド、青酸、およびア
ンモニアの反応で得られるグリシノニトリルを微生物の
作用による加水分解反応に付し、生成するアンモニアを
反応と同時に系外に分離することにより選択的にグリシ
ンを回収することを特徴とするグリシンの微生物学的製
造方法に関する。得られるグリシンは、食品添加物、洗
浄剤、医農薬合成原料として有用である。本発明の製造
法は、有用なグリシンを効率よく工業的に製造するため
利用することができる。
学的製造方法に関する。さらに詳しくは、ｐＨを調整し
ない反応条件下で、ホルムアルデヒド、青酸、およびア
ンモニアの反応で得られるグリシノニトリルを微生物の
作用による加水分解反応に付し、生成するアンモニアを
反応と同時に系外に分離することにより選択的にグリシ
ンを回収することを特徴とするグリシンの微生物学的製
造方法に関する。得られるグリシンは、食品添加物、洗
浄剤、医農薬合成原料として有用である。本発明の製造
法は、有用なグリシンを効率よく工業的に製造するため
利用することができる。
【０００２】
【従来の技術】グリシンは、従来、ホルムアルデヒド、
青酸、およびアンモニアからシュトレッカー法にて一旦
グリシノニトリルを合成し、これを苛性ソーダ等のアル
カリで加水分解し、グリシンソーダとアンモニアに変換
した後、硫酸等の酸で中和して製造されている。この
時、アンモニアはアルカリで加水分解される際、蒸発し
て回収され、グリシンは酸で中和後、晶析法で回収され
る（特開昭４３−２９９２９号、特開昭５１−１９７１
９号、特開昭４９−１４４２０号、特開昭４９−３５３
２９号）。このように従来法は、アルカリや酸を多量に
用いる欠点に加え、中和工程で塩類が多量に副成される
ため、廃棄物が多く環境負荷が大きい欠点があった。さ
らに、中和副成する塩類はグリシンに溶解度が酷似して
いるため、グリシンを精製回収するためには、晶析操作
を複数回繰り返したり、母液を循環する等の煩雑な操作
が必要であった（特開昭５１−３４１１３号）。
青酸、およびアンモニアからシュトレッカー法にて一旦
グリシノニトリルを合成し、これを苛性ソーダ等のアル
カリで加水分解し、グリシンソーダとアンモニアに変換
した後、硫酸等の酸で中和して製造されている。この
時、アンモニアはアルカリで加水分解される際、蒸発し
て回収され、グリシンは酸で中和後、晶析法で回収され
る（特開昭４３−２９９２９号、特開昭５１−１９７１
９号、特開昭４９−１４４２０号、特開昭４９−３５３
２９号）。このように従来法は、アルカリや酸を多量に
用いる欠点に加え、中和工程で塩類が多量に副成される
ため、廃棄物が多く環境負荷が大きい欠点があった。さ
らに、中和副成する塩類はグリシンに溶解度が酷似して
いるため、グリシンを精製回収するためには、晶析操作
を複数回繰り返したり、母液を循環する等の煩雑な操作
が必要であった（特開昭５１−３４１１３号）。
【０００３】一方、グリシノニトリルを酵素的に加水分
解してグリシンを得る方法も知られている。特公昭５８
−１５１２０号においては、ブレビバクテリウムＲ３１
２株を苛性カリ等でｐＨ８に調整した反応液に懸濁して
加水分解反応に用いる方法が、また、特開平３−６２３
９１号においては、コリネバクテリウム Ｎ−７７４株
をリン酸緩衝液でｐＨ７．７に調整した反応液に懸濁し
反応に用いる方法が開示されている。しかし、これらの
方法は、実施例によると、グリシンを得るためにはグリ
シン重量の１倍から１０倍に相当する多量の菌体を用い
る必要があり、さらに、反応液のｐＨを調整するため、
緩衝液が用いられる問題があった。すなわち、多量の菌
体を用いるため、培地や菌体を多量に浪費する欠点があ
り、また、ｐＨ調整剤として緩衝液を用いるため、緩衝
液消費や廃棄が避けられない欠点があった。さらに、緩
衝液はアンモニアを中和して塩を形成し、アンモニアの
回収を妨げる問題もある。ロドコッカス属、アルスロバ
クター属、カセオバクター属、シュードモナス属、エン
テロバクター属、アシネトバクター属、アルカリゲネス
属、コリネバクテイリア属、またはストレプトマイセス
属の微生物を用いる特開平３−２８０８８９号において
は、菌体使用量は生成グリシン重量の約２０分の１に改
良されているが、反応時間が約４０時間と長い欠点があ
る、さらに、緩衝液を反応に用いる問題は解決されてい
ない。
解してグリシンを得る方法も知られている。特公昭５８
−１５１２０号においては、ブレビバクテリウムＲ３１
２株を苛性カリ等でｐＨ８に調整した反応液に懸濁して
加水分解反応に用いる方法が、また、特開平３−６２３
９１号においては、コリネバクテリウム Ｎ−７７４株
をリン酸緩衝液でｐＨ７．７に調整した反応液に懸濁し
反応に用いる方法が開示されている。しかし、これらの
方法は、実施例によると、グリシンを得るためにはグリ
シン重量の１倍から１０倍に相当する多量の菌体を用い
る必要があり、さらに、反応液のｐＨを調整するため、
緩衝液が用いられる問題があった。すなわち、多量の菌
体を用いるため、培地や菌体を多量に浪費する欠点があ
り、また、ｐＨ調整剤として緩衝液を用いるため、緩衝
液消費や廃棄が避けられない欠点があった。さらに、緩
衝液はアンモニアを中和して塩を形成し、アンモニアの
回収を妨げる問題もある。ロドコッカス属、アルスロバ
クター属、カセオバクター属、シュードモナス属、エン
テロバクター属、アシネトバクター属、アルカリゲネス
属、コリネバクテイリア属、またはストレプトマイセス
属の微生物を用いる特開平３−２８０８８９号において
は、菌体使用量は生成グリシン重量の約２０分の１に改
良されているが、反応時間が約４０時間と長い欠点があ
る、さらに、緩衝液を反応に用いる問題は解決されてい
ない。
【０００４】このように、従来の微生物を用いたグリシ
ノニトリルからグリシンを生産する方法は、乾燥菌体当
たり、かつ単位時間当たりの活性が低いため、菌体や培
地を多量に消費し廃棄する欠点があった。さらに、反応
液のｐＨを調整するために緩衝液や酸またはアルカリを
消費し、シュトレッカー法と同様に、それらの廃棄が避
けられない欠点を持っていた。また、従来の微生物を用
いた方法ではアンモニアを回収する工夫は開示されてい
ないが、緩衝液や酸を用いると、緩衝液や酸がアンモニ
アを中和して塩を形成し、アンモニアの回収を妨げる問
題に加え、酸またはアルカリを使用すると、シュトレッ
カー法と同様に、グリシンの回収をを妨げることが予想
される。このように従来の微生物を用いる方法も、工業
的に実施できるものではなかった。
ノニトリルからグリシンを生産する方法は、乾燥菌体当
たり、かつ単位時間当たりの活性が低いため、菌体や培
地を多量に消費し廃棄する欠点があった。さらに、反応
液のｐＨを調整するために緩衝液や酸またはアルカリを
消費し、シュトレッカー法と同様に、それらの廃棄が避
けられない欠点を持っていた。また、従来の微生物を用
いた方法ではアンモニアを回収する工夫は開示されてい
ないが、緩衝液や酸を用いると、緩衝液や酸がアンモニ
アを中和して塩を形成し、アンモニアの回収を妨げる問
題に加え、酸またはアルカリを使用すると、シュトレッ
カー法と同様に、グリシンの回収をを妨げることが予想
される。このように従来の微生物を用いる方法も、工業
的に実施できるものではなかった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、微生物を用
いホルムアルデヒド、青酸、およびアンモニアとの反応
で得られるグリシノニトリルからグリシンを生産するに
当たり、乾燥菌体当たり、かつ単位時間当たり高活性で
あって、菌体や培地の多量廃棄を伴わず、反応液のｐＨ
を調整するための酸、アルカリまたは緩衝液の添加や廃
棄を伴わず、グリシンとアンモニアが定量的に生成し、
これらの分解および消費を伴わなず、グリシンとアンモ
ニアを別々に回収するグリシンの製造法を提供すること
を目的とする。
いホルムアルデヒド、青酸、およびアンモニアとの反応
で得られるグリシノニトリルからグリシンを生産するに
当たり、乾燥菌体当たり、かつ単位時間当たり高活性で
あって、菌体や培地の多量廃棄を伴わず、反応液のｐＨ
を調整するための酸、アルカリまたは緩衝液の添加や廃
棄を伴わず、グリシンとアンモニアが定量的に生成し、
これらの分解および消費を伴わなず、グリシンとアンモ
ニアを別々に回収するグリシンの製造法を提供すること
を目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者は、このような
工業的諸問題を解決するため、菌体当たり、かつ単位時
間当たり高い活性を持ち、反応系で生成したグリシンや
アンモニアを分解または消費せず、グリシンとアンモニ
アを別々に、定量的に、かつ容易に回収できる反応系を
構築すべく、適した微生物の探索と反応方法の検討を鋭
意行った。その結果、驚くべきことに、ｐＨを調整する
ための酸、アルカリまたは緩衝液の添加をしない反応条
件下で反応が進行し、単位時間当たり高い活性を持つ微
生物を見い出すことができた。さらに、こうした高活性
菌体の中に、減圧反応蒸留や不活性ガスを流通しながら
生成するアンモニアを、反応と同時に分離する条件下で
好ましく働く微生物を見い出すことができ、本発明を完
成するに至った。
工業的諸問題を解決するため、菌体当たり、かつ単位時
間当たり高い活性を持ち、反応系で生成したグリシンや
アンモニアを分解または消費せず、グリシンとアンモニ
アを別々に、定量的に、かつ容易に回収できる反応系を
構築すべく、適した微生物の探索と反応方法の検討を鋭
意行った。その結果、驚くべきことに、ｐＨを調整する
ための酸、アルカリまたは緩衝液の添加をしない反応条
件下で反応が進行し、単位時間当たり高い活性を持つ微
生物を見い出すことができた。さらに、こうした高活性
菌体の中に、減圧反応蒸留や不活性ガスを流通しながら
生成するアンモニアを、反応と同時に分離する条件下で
好ましく働く微生物を見い出すことができ、本発明を完
成するに至った。
【０００７】すなわち、本発明によれば、ｐＨを調整す
るための酸、アルカリまたは緩衝液を添加せず、減圧反
応蒸留や不活性ガスを流通しながら生成するアンモニア
を、反応と同時に系外に分離する反応条件下で、ホルム
アルデヒド、青酸、およびアンモニアとの反応で得られ
るグリシノニトリルの水溶液に微生物を作用させること
により、乾燥菌体当たり、かつ単位時間当たり高活性で
あって、菌体や培地の多量廃棄を伴わず、反応液のｐＨ
を調整するための酸、アルカリまたは緩衝液の添加や廃
棄を伴わず、グリシンとアンモニアが定量的に生成し、
これらの分解および消費を伴わなず、グリシンとアンモ
ニアを別々に回収するグリシンの製造法が提供される。
るための酸、アルカリまたは緩衝液を添加せず、減圧反
応蒸留や不活性ガスを流通しながら生成するアンモニア
を、反応と同時に系外に分離する反応条件下で、ホルム
アルデヒド、青酸、およびアンモニアとの反応で得られ
るグリシノニトリルの水溶液に微生物を作用させること
により、乾燥菌体当たり、かつ単位時間当たり高活性で
あって、菌体や培地の多量廃棄を伴わず、反応液のｐＨ
を調整するための酸、アルカリまたは緩衝液の添加や廃
棄を伴わず、グリシンとアンモニアが定量的に生成し、
これらの分解および消費を伴わなず、グリシンとアンモ
ニアを別々に回収するグリシンの製造法が提供される。
【０００８】
【発明の実施の形態】本発明について、以下具体的に説
明する。本発明に使用する微生物としては、例えば、ア
シネトバクター（Accinetobacter）属やロドコッカス
（Rhodococcus ）属に属する微生物が適していることが
新たに発見されたが、これに限定されるものではない。
本発明に適した微生物として選択されたアシネトバクタ
ーｓｐ．ＡＫ２２６株（Ａ．ｓｐ．ＡＫ２２６）（以
下、ＡＫ２２６と略称する）や、アシネトバクターｓ
ｐ．ＡＫ２２７株（Ａ．ｓｐ．ＡＫ２２７）（以下、Ａ
Ｋ２２７と略称する）は、１９８５年５月２８日に工業
技術院微生物工業技術研究所に寄託され、それぞれ微工
研菌寄第８２７１号と微工研菌寄第８２７２号の受託番
号を付与されており、微生物学的性質は表１〜３に示す
とおりである。
明する。本発明に使用する微生物としては、例えば、ア
シネトバクター（Accinetobacter）属やロドコッカス
（Rhodococcus ）属に属する微生物が適していることが
新たに発見されたが、これに限定されるものではない。
本発明に適した微生物として選択されたアシネトバクタ
ーｓｐ．ＡＫ２２６株（Ａ．ｓｐ．ＡＫ２２６）（以
下、ＡＫ２２６と略称する）や、アシネトバクターｓ
ｐ．ＡＫ２２７株（Ａ．ｓｐ．ＡＫ２２７）（以下、Ａ
Ｋ２２７と略称する）は、１９８５年５月２８日に工業
技術院微生物工業技術研究所に寄託され、それぞれ微工
研菌寄第８２７１号と微工研菌寄第８２７２号の受託番
号を付与されており、微生物学的性質は表１〜３に示す
とおりである。
【０００９】
【表１】
【００１０】
【表２】
【００１１】
【表３】
【００１２】菌株の同定に際しては、バージェイズ・マ
ニュアル・オブ・システマティク・バイオテリオロジー
（Bergy's Manual of Determinative Bacteriolog ）第
８版（１９７４）に従って分類した。また、本発明に適
した微生物として選択されたロドコッカス・マリスＢＰ
−４７９−９株は、１９９３年１１月２日に工業技術院
微生物工業技術研究所に原寄託され、１９９５年９月１
日に国際寄託に移管されてＦＥＲＭ ＢＰ−５２１９の
受託番号を付与されており、微生物学的性質は表４〜６
に示すとおりである。
ニュアル・オブ・システマティク・バイオテリオロジー
（Bergy's Manual of Determinative Bacteriolog ）第
８版（１９７４）に従って分類した。また、本発明に適
した微生物として選択されたロドコッカス・マリスＢＰ
−４７９−９株は、１９９３年１１月２日に工業技術院
微生物工業技術研究所に原寄託され、１９９５年９月１
日に国際寄託に移管されてＦＥＲＭ ＢＰ−５２１９の
受託番号を付与されており、微生物学的性質は表４〜６
に示すとおりである。
【００１３】
【表４】
【００１４】
【表５】
【００１５】
【表６】
【００１６】菌株の同定に際しては、バージェイズ・マ
ニュアル・オブ・システマティク・バイオテリオロジー
（Bergy's Manual of Determinative Bacteriolog ）第
２巻（１９８６）およびザ・プロカリオート（The Prok
aryotes ）第２版（１９９２）に従って分類した。次
に、本発明の一般的実施態様について説明する。本発明
に使用される微生物の培養には、通常用いられる炭素
源、例えば、グルコース、グリセリン、有機酸、デキス
トリン、マルトース等が用いられ、窒素源としてはアン
モニアとその塩類、尿素、硝酸塩および有機窒素源、例
えば、酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、肉エキス等
が用いられる。また、培地にはリン酸塩、ナトリウム、
カリウム、鉄、マグネシウム、コバルト、マンガン、亜
鉛等の無機栄養源が適宜添加される。培養はｐＨ５から
９、好ましくはｐＨ６から８、温度２０から３７℃、好
ましくは２７から３２℃で好気的に行われる。本発明の
微生物の培養において、上記の培地に酵素誘導剤を加え
てもよい、例えば、ラクタム化合物（γ−ラクタム、δ
−ラクタム、ε−カプロラクタム等）、ニトリル化合
物、アミド化合物等を用いてもよい。
ニュアル・オブ・システマティク・バイオテリオロジー
（Bergy's Manual of Determinative Bacteriolog ）第
２巻（１９８６）およびザ・プロカリオート（The Prok
aryotes ）第２版（１９９２）に従って分類した。次
に、本発明の一般的実施態様について説明する。本発明
に使用される微生物の培養には、通常用いられる炭素
源、例えば、グルコース、グリセリン、有機酸、デキス
トリン、マルトース等が用いられ、窒素源としてはアン
モニアとその塩類、尿素、硝酸塩および有機窒素源、例
えば、酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、肉エキス等
が用いられる。また、培地にはリン酸塩、ナトリウム、
カリウム、鉄、マグネシウム、コバルト、マンガン、亜
鉛等の無機栄養源が適宜添加される。培養はｐＨ５から
９、好ましくはｐＨ６から８、温度２０から３７℃、好
ましくは２７から３２℃で好気的に行われる。本発明の
微生物の培養において、上記の培地に酵素誘導剤を加え
てもよい、例えば、ラクタム化合物（γ−ラクタム、δ
−ラクタム、ε−カプロラクタム等）、ニトリル化合
物、アミド化合物等を用いてもよい。
【００１７】本発明の微生物は、そのまま工業使用でき
るが、適当な変異剤で突然変異を誘発する方法もしくは
遺伝子工学的手法により改良された変異株、例えば、酵
素を構成的に生産する変異株を育成して用いることもで
きる。本発明の菌体とは、培養液から採取した菌体また
は菌体処理物（菌体の破砕物、菌体破砕物より分離した
酵素、および菌体または菌体から分離抽出された酵素を
固定化した処理物）である。培養液からの菌体の採取は
公知の方法で行うことができる。本発明において用いる
グリシノニトリルは、公知の方法で合成することができ
る。例えば、ホルムアルデヒドと青酸およびアンモニア
から得る方法、あるいはホルムアルデヒドと青酸を反応
させ一旦グリコロニトリルを合成し、継いでアンモニア
を作用させて得る方法で合成される。どちらも、シュト
レッカー法として総称されている。
るが、適当な変異剤で突然変異を誘発する方法もしくは
遺伝子工学的手法により改良された変異株、例えば、酵
素を構成的に生産する変異株を育成して用いることもで
きる。本発明の菌体とは、培養液から採取した菌体また
は菌体処理物（菌体の破砕物、菌体破砕物より分離した
酵素、および菌体または菌体から分離抽出された酵素を
固定化した処理物）である。培養液からの菌体の採取は
公知の方法で行うことができる。本発明において用いる
グリシノニトリルは、公知の方法で合成することができ
る。例えば、ホルムアルデヒドと青酸およびアンモニア
から得る方法、あるいはホルムアルデヒドと青酸を反応
させ一旦グリコロニトリルを合成し、継いでアンモニア
を作用させて得る方法で合成される。どちらも、シュト
レッカー法として総称されている。
【００１８】本発明においては、上述の方法で分離した
菌体および菌体処理物は、ｐＨを調整しない反応条件下
でグリシノニトリル水溶液に懸濁することにより、速や
かに加水分解反応が進行し、生成するアンモニアを反応
と同時に分離することにより、グリシンを製造すること
ができる。すなわち、通常、前記微生物菌体または菌体
処理物を、例えば、０．０１から５重量％およびグリシ
ノニトリルを１から３０重量％含むｐＨを調整しない水
性懸濁液を、生成するアンモニアを反応分離する装置が
付属した反応容器に仕込み、温度として、例えば、０か
ら６０℃の条件、好ましくは１０から５０℃の条件を用
いて、反応時間を、例えば、１時間ないし２４時間、好
ましくは３時間から８時間反応させればよい。この場
合、グリシノニトリルを薄い濃度で仕込み経時的に追加
添加したり、反応温度を経時的に変化させてもよい。
菌体および菌体処理物は、ｐＨを調整しない反応条件下
でグリシノニトリル水溶液に懸濁することにより、速や
かに加水分解反応が進行し、生成するアンモニアを反応
と同時に分離することにより、グリシンを製造すること
ができる。すなわち、通常、前記微生物菌体または菌体
処理物を、例えば、０．０１から５重量％およびグリシ
ノニトリルを１から３０重量％含むｐＨを調整しない水
性懸濁液を、生成するアンモニアを反応分離する装置が
付属した反応容器に仕込み、温度として、例えば、０か
ら６０℃の条件、好ましくは１０から５０℃の条件を用
いて、反応時間を、例えば、１時間ないし２４時間、好
ましくは３時間から８時間反応させればよい。この場
合、グリシノニトリルを薄い濃度で仕込み経時的に追加
添加したり、反応温度を経時的に変化させてもよい。
【００１９】本発明において、生成するアンモニアの反
応分離方法は、反応蒸留法や不活性ガスの流通法で実施
することができる。反応蒸留を行う場合、加水分解反応
容器に、アンモニアと同伴する水を冷却回収する冷却器
の付いた単管搭、棚段搭または充填塔を備え、反応水溶
液の沸騰圧以上、例えば、６０℃で２０．０ｋＰａ以上
から０℃で０．６ｋＰａ以上の圧力条件下で、連続的に
または間欠的に減圧反応蒸留することが好ましい。さら
に好ましくは、１２．６ｋＰａから１．３ｋＰａの圧力
条件下で減圧反応蒸留することができる。不活性ガスを
流通する場合、不活性ガスの吹き込みノズルと、アンモ
ニアや同伴する水を不活性ガスから回収する冷却トラッ
プとを備え、微加圧から減圧条件下で連続的にまたは間
欠的にアンモニアを不活性ガスに同伴し、反応液から分
離することができる。さらに、アンモニア分離を促進す
るため、減圧反応蒸留を不活性ガス流通条件下で行うこ
ともできる。
応分離方法は、反応蒸留法や不活性ガスの流通法で実施
することができる。反応蒸留を行う場合、加水分解反応
容器に、アンモニアと同伴する水を冷却回収する冷却器
の付いた単管搭、棚段搭または充填塔を備え、反応水溶
液の沸騰圧以上、例えば、６０℃で２０．０ｋＰａ以上
から０℃で０．６ｋＰａ以上の圧力条件下で、連続的に
または間欠的に減圧反応蒸留することが好ましい。さら
に好ましくは、１２．６ｋＰａから１．３ｋＰａの圧力
条件下で減圧反応蒸留することができる。不活性ガスを
流通する場合、不活性ガスの吹き込みノズルと、アンモ
ニアや同伴する水を不活性ガスから回収する冷却トラッ
プとを備え、微加圧から減圧条件下で連続的にまたは間
欠的にアンモニアを不活性ガスに同伴し、反応液から分
離することができる。さらに、アンモニア分離を促進す
るため、減圧反応蒸留を不活性ガス流通条件下で行うこ
ともできる。
【００２０】かくして、グリシノニトリルは、ほぼ１０
０％のモル収率で加水分解し、生成するアンモニアの全
部または殆どは、反応蒸留法や不活性ガスの流通法で反
応液から分離し、冷却回収される。一方、反応液にはグ
リシンと場合によってはグリシンのアンモニウム塩を含
むグリシンの高濃度水溶液として、生成蓄積させること
ができる。もし、グリシンアミドが残存する場合は、グ
リシンアミドの加水分解活性をもつ菌体もしくは酵素を
追添加することにより、完全にグリシンおよびアンモニ
アに転換することも可能である。グリシンのアンモニウ
ム塩を含むグリシンの高濃度水溶液からのグリシンの回
収は、例えば、反応液から菌体を遠心濾過、膜分離等に
よって除いた後、グリシンは晶析法、イオン交換法また
は貧性溶媒による分別沈澱法にて回収することができ、
また、アンモニアは一部の水と一緒に蒸発後、蒸留や抽
出によって回収することができる。本発明を実施例に基
づいて説明する。
０％のモル収率で加水分解し、生成するアンモニアの全
部または殆どは、反応蒸留法や不活性ガスの流通法で反
応液から分離し、冷却回収される。一方、反応液にはグ
リシンと場合によってはグリシンのアンモニウム塩を含
むグリシンの高濃度水溶液として、生成蓄積させること
ができる。もし、グリシンアミドが残存する場合は、グ
リシンアミドの加水分解活性をもつ菌体もしくは酵素を
追添加することにより、完全にグリシンおよびアンモニ
アに転換することも可能である。グリシンのアンモニウ
ム塩を含むグリシンの高濃度水溶液からのグリシンの回
収は、例えば、反応液から菌体を遠心濾過、膜分離等に
よって除いた後、グリシンは晶析法、イオン交換法また
は貧性溶媒による分別沈澱法にて回収することができ、
また、アンモニアは一部の水と一緒に蒸発後、蒸留や抽
出によって回収することができる。本発明を実施例に基
づいて説明する。
【００２１】
【実施例１】（１）グリシノニトリルの合成 ホルマリンに等量の青酸をを作用させて、一旦生成した
グリコロニトリル水溶液に、過剰量のアンモニア水溶液
を添加して３０重量％グリシノニトリル水溶液を得た。 （２）菌体の培養 アシネトバクターＡＫ２２６を、下記の条件で培養し
た。 (1) 培地 フマル酸 １．０重量％ 肉エキス １．０ ペプトン １．０ 食塩 ０．１ ε−カプロラクタム ０．３ リン酸第一カリウム ０．２ 硫酸マグネシウム・７水塩 ０．０２ 塩化アンモニウム ０．１ 硫酸第二鉄・７水塩 ０．００３ 塩化マンガン・４水塩 ０．００２ 塩化コバルト・６水塩 ０．００２ ｐＨ ７．５ (2) 培養条件 ３０℃／１日
グリコロニトリル水溶液に、過剰量のアンモニア水溶液
を添加して３０重量％グリシノニトリル水溶液を得た。 （２）菌体の培養 アシネトバクターＡＫ２２６を、下記の条件で培養し
た。 (1) 培地 フマル酸 １．０重量％ 肉エキス １．０ ペプトン １．０ 食塩 ０．１ ε−カプロラクタム ０．３ リン酸第一カリウム ０．２ 硫酸マグネシウム・７水塩 ０．０２ 塩化アンモニウム ０．１ 硫酸第二鉄・７水塩 ０．００３ 塩化マンガン・４水塩 ０．００２ 塩化コバルト・６水塩 ０．００２ ｐＨ ７．５ (2) 培養条件 ３０℃／１日
【００２２】（３）グリシノニトリルの加水分解 菌体は、得られた培養液から遠心分離により集菌し、蒸
留水等で洗浄したものを反応に用いた。撹拌器の付いた
１０００ｍｌの恒温ジャケット槽型３つ口セパラブルフ
ラスコに、底部まで届く窒素ガスの吹き込みノズル、ド
ライアイストラップに接続したミストセパレーター、温
度計およびサンプリング管を備えた。このセパラブルフ
ラスコに乾燥菌体量として６９５ｍｇを仕込み、基質の
３０重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌと蒸留水１
７０ｍｌを調合した。ガス流量計を用いて少量の窒素ガ
スを１時間当たり３リットルフィードしながら、３０℃
にて反応を開始した。反応開始１時間後、この反応液を
液体クロマトグラフィー法で分析し、グリシノニトリル
はなくなり、グリシンが定量的に生成していた。そこ
で、基質の30重量%グリシノニトリル水溶液30mlを追加
添加した。この操作をさらに３回繰り返し、合計５時間
反応を行った。
留水等で洗浄したものを反応に用いた。撹拌器の付いた
１０００ｍｌの恒温ジャケット槽型３つ口セパラブルフ
ラスコに、底部まで届く窒素ガスの吹き込みノズル、ド
ライアイストラップに接続したミストセパレーター、温
度計およびサンプリング管を備えた。このセパラブルフ
ラスコに乾燥菌体量として６９５ｍｇを仕込み、基質の
３０重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌと蒸留水１
７０ｍｌを調合した。ガス流量計を用いて少量の窒素ガ
スを１時間当たり３リットルフィードしながら、３０℃
にて反応を開始した。反応開始１時間後、この反応液を
液体クロマトグラフィー法で分析し、グリシノニトリル
はなくなり、グリシンが定量的に生成していた。そこ
で、基質の30重量%グリシノニトリル水溶液30mlを追加
添加した。この操作をさらに３回繰り返し、合計５時間
反応を行った。
【００２３】ドライアイストラップには固体が１５ｇ回
収された。固体を５０ｍｌの水にとかしネスラー法によ
り定量したところ、アンモニアが１４ｇ回収されてい
た。反応液は３００ｇ回収された。この反応液のうち２
ｇを用い、生成したアンモニアをネスラー法により定量
し、原料のグリシノニトリルと生成したグリシンは、液
体クロマトグラフィー法で分析した。グリシノニトリル
はなくなり、グリシンが定量的に生成しトレース量のア
ンモニアが残存していた。乾燥菌体当たりのグリシンの
生成量は８７ｇ／ｇ乾燥菌体であり、グリシンの生成活
性は１７ｇ／ｇ・Ｈｒであった。残りの２９８ｇは遠心
濾過し菌体を取り除いた後、沸騰下で１／１０に濃縮し
て放冷し、５６ｇのグリシンを晶析回収した。
収された。固体を５０ｍｌの水にとかしネスラー法によ
り定量したところ、アンモニアが１４ｇ回収されてい
た。反応液は３００ｇ回収された。この反応液のうち２
ｇを用い、生成したアンモニアをネスラー法により定量
し、原料のグリシノニトリルと生成したグリシンは、液
体クロマトグラフィー法で分析した。グリシノニトリル
はなくなり、グリシンが定量的に生成しトレース量のア
ンモニアが残存していた。乾燥菌体当たりのグリシンの
生成量は８７ｇ／ｇ乾燥菌体であり、グリシンの生成活
性は１７ｇ／ｇ・Ｈｒであった。残りの２９８ｇは遠心
濾過し菌体を取り除いた後、沸騰下で１／１０に濃縮し
て放冷し、５６ｇのグリシンを晶析回収した。
【００２４】
【実施例２】実施例１で合成した３０重量％グリシノニ
トリル水溶液を用い、菌体と反応方式を代えて実施し
た。 （１）菌体の培養 ロドコッカス マリスＢＰ−４７９−９を、下記の条件
で培養した。 (1) 培地 フマル酸 １．０重量％ 肉エキス １．０ ペプトン １．０ 食塩 ０．１ ε−カプロラクタム ０．３ リン酸第一カリウム ０．２ 硫酸マグネシウム・７水塩 ０．０２ 塩化アンモニウム ０．１ 硫酸第二鉄・７水塩 ０．００３ 塩化マンガン・４水塩 ０．００２ 塩化コバルト・６水塩 ０．００２ ｐＨ ７．５ (2) 培養条件 ３０℃／１日
トリル水溶液を用い、菌体と反応方式を代えて実施し
た。 （１）菌体の培養 ロドコッカス マリスＢＰ−４７９−９を、下記の条件
で培養した。 (1) 培地 フマル酸 １．０重量％ 肉エキス １．０ ペプトン １．０ 食塩 ０．１ ε−カプロラクタム ０．３ リン酸第一カリウム ０．２ 硫酸マグネシウム・７水塩 ０．０２ 塩化アンモニウム ０．１ 硫酸第二鉄・７水塩 ０．００３ 塩化マンガン・４水塩 ０．００２ 塩化コバルト・６水塩 ０．００２ ｐＨ ７．５ (2) 培養条件 ３０℃／１日
【００２５】（２）グリシノニトリルの加水分解 菌体は、得られた培養液から遠心分離により集菌し、蒸
留水等で洗浄したものを反応に用いた。撹拌器の付いた
１０００ｍｌの恒温ジャケット槽型３つ口セパラブルフ
ラスコに、ドライアイストラップを経て減圧ポンプに接
続した単管型の蒸留塔、圧力センサー、温度計および液
送ポンプに接続したサンプリング管を備えた。このセパ
ラブルフラスコに乾燥菌体量として８５５ｍｇを仕込
み、基質の３０重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌ
と蒸留水１７０ｍｌを調合した。減圧ポンプでフラスコ
内の圧力を１０ｋＰａに調整し、３０℃にて反応を開始
した。反応開始１時間後、この反応液を液体クロマトグ
ラフィー法で分析したところ、グリシノニトリルが消失
し、グリシンが定量的に生成していた。そこで、基質の
３０重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌを追加添加
した。１時間毎にこの操作をさらに３回繰り返し、合計
５時間反応を行った。
留水等で洗浄したものを反応に用いた。撹拌器の付いた
１０００ｍｌの恒温ジャケット槽型３つ口セパラブルフ
ラスコに、ドライアイストラップを経て減圧ポンプに接
続した単管型の蒸留塔、圧力センサー、温度計および液
送ポンプに接続したサンプリング管を備えた。このセパ
ラブルフラスコに乾燥菌体量として８５５ｍｇを仕込
み、基質の３０重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌ
と蒸留水１７０ｍｌを調合した。減圧ポンプでフラスコ
内の圧力を１０ｋＰａに調整し、３０℃にて反応を開始
した。反応開始１時間後、この反応液を液体クロマトグ
ラフィー法で分析したところ、グリシノニトリルが消失
し、グリシンが定量的に生成していた。そこで、基質の
３０重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌを追加添加
した。１時間毎にこの操作をさらに３回繰り返し、合計
５時間反応を行った。
【００２６】ドライアイストラップには固体が２０ｇ回
収された。固体を５０ｍｌの水にとかしネスラー法によ
り定量したところ、アンモニアが１４ｇ回収されてい
た。反応液は３００ｇ回収された。この反応液のうち２
ｇを用い、生成したアンモニアをネスラー法により定量
し、原料のグリシノニトリルと生成したグリシンは液体
クロマトグラフィー法で分析した。グリシノニトリルは
なくなり、グリシンが定量的に生成し、トレース量のア
ンモニアが残存していた。乾燥菌体当たりのグリシンの
生成量は７０ｇ／ｇ乾燥菌体であり、グリシンの生成活
性は１４ｇ／ｇ・Ｈｒであった。残りの２９８ｇは遠心
濾過し菌体を取り除いた後、沸騰下で１／１０に濃縮し
て放冷し、５７ｇのグリシンを晶析回収した。
収された。固体を５０ｍｌの水にとかしネスラー法によ
り定量したところ、アンモニアが１４ｇ回収されてい
た。反応液は３００ｇ回収された。この反応液のうち２
ｇを用い、生成したアンモニアをネスラー法により定量
し、原料のグリシノニトリルと生成したグリシンは液体
クロマトグラフィー法で分析した。グリシノニトリルは
なくなり、グリシンが定量的に生成し、トレース量のア
ンモニアが残存していた。乾燥菌体当たりのグリシンの
生成量は７０ｇ／ｇ乾燥菌体であり、グリシンの生成活
性は１４ｇ／ｇ・Ｈｒであった。残りの２９８ｇは遠心
濾過し菌体を取り除いた後、沸騰下で１／１０に濃縮し
て放冷し、５７ｇのグリシンを晶析回収した。
【００２７】
【実施例３】実施例１で合成した３０重量％グリシノニ
トリル水溶液を用い、菌体と反応方式を代えて実施し
た。 （１）菌体の培養 アシネトバクターＡＫ２２７を、下記の条件で培養し
た。 (1) 培地 フマル酸 １．０重量％ 肉エキス １．０ ペプトン １．０ 食塩 ０．１ イソブチロニトリル ０．３ リン酸第一カリウム ０．２ 硫酸マグネシウム・７水塩 ０．０２ 塩化アンモニウム ０．１ 硫酸第二鉄・７水塩 ０．００３ 塩化マンガン・４水塩 ０．００２ 塩化コバルト・６水塩 ０．００２ ｐＨ ７．５ (2) 培養条件 ３０℃／１日
トリル水溶液を用い、菌体と反応方式を代えて実施し
た。 （１）菌体の培養 アシネトバクターＡＫ２２７を、下記の条件で培養し
た。 (1) 培地 フマル酸 １．０重量％ 肉エキス １．０ ペプトン １．０ 食塩 ０．１ イソブチロニトリル ０．３ リン酸第一カリウム ０．２ 硫酸マグネシウム・７水塩 ０．０２ 塩化アンモニウム ０．１ 硫酸第二鉄・７水塩 ０．００３ 塩化マンガン・４水塩 ０．００２ 塩化コバルト・６水塩 ０．００２ ｐＨ ７．５ (2) 培養条件 ３０℃／１日
【００２８】（２）グリシノニトリルの加水分解 菌体は、得られた培養液から遠心分離により集菌し、蒸
留水等で洗浄したものを反応に用いた。撹拌器の付いた
１０００ｍｌの恒温ジャケット槽型３つ口セパラブルフ
ラスコに、底部まで届く窒素ガスの吹き込みノズル、ド
ライアイストラップを経て減圧ポンプに接続した単管型
の蒸留塔、圧力センサー、温度計および液送ポンプに接
続したサンプリング管を備えた。このセパラブルフラス
コに乾燥菌体量として６７２ｍｇを仕込み、基質の３０
重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌと蒸留水１７０
ｍｌを調合した。ガス流量計を用いて少量の窒素ガスを
１時間当たり３リットルフィードしながら、減圧ポンプ
でフラスコ内の圧力を１０ｋＰａに調整し、３０℃にて
反応を開始した。反応開始１時間後、この反応液を液体
クロマトグラフィー法で分析したところ、グリシノニト
リルが消失し、グリシンが定量的に生成していた。そこ
で、基質の３０重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌ
を追加添加した。２時間毎にこの操作をさらに３回繰り
返し、合計５時間反応を行った。
留水等で洗浄したものを反応に用いた。撹拌器の付いた
１０００ｍｌの恒温ジャケット槽型３つ口セパラブルフ
ラスコに、底部まで届く窒素ガスの吹き込みノズル、ド
ライアイストラップを経て減圧ポンプに接続した単管型
の蒸留塔、圧力センサー、温度計および液送ポンプに接
続したサンプリング管を備えた。このセパラブルフラス
コに乾燥菌体量として６７２ｍｇを仕込み、基質の３０
重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌと蒸留水１７０
ｍｌを調合した。ガス流量計を用いて少量の窒素ガスを
１時間当たり３リットルフィードしながら、減圧ポンプ
でフラスコ内の圧力を１０ｋＰａに調整し、３０℃にて
反応を開始した。反応開始１時間後、この反応液を液体
クロマトグラフィー法で分析したところ、グリシノニト
リルが消失し、グリシンが定量的に生成していた。そこ
で、基質の３０重量％グリシノニトリル水溶液３０ｍｌ
を追加添加した。２時間毎にこの操作をさらに３回繰り
返し、合計５時間反応を行った。
【００２９】ドライアイストラップには固体が２５ｇ回
収された。固体を５０ｍｌの水にとかしネスラー法によ
り定量したところ、アンモニアが１４ｇ回収されてい
た。反応液は２９５ｇ回収された。この反応液のうち２
ｇを用い、生成したアンモニアをネスラー法により定量
し、原料のグリシノニトリルと生成したグリシンは、液
体クロマトグラフィー法で分析した。グリシノニトリル
はなくなり、グリシンが定量的に生成し、トレース量の
アンモニアが残存していた。乾燥菌体当たりのグリシン
の生成量は９０ｇ／乾燥菌体であり、グリシンの生成活
性は１８ｇ／ｇ・Ｈｒであった。残りの２９３ｇは遠心
濾過し菌体を取り除いた後、沸騰下で１／１０に濃縮し
て放冷し、５７ｇのグリシンを晶析回収した。
収された。固体を５０ｍｌの水にとかしネスラー法によ
り定量したところ、アンモニアが１４ｇ回収されてい
た。反応液は２９５ｇ回収された。この反応液のうち２
ｇを用い、生成したアンモニアをネスラー法により定量
し、原料のグリシノニトリルと生成したグリシンは、液
体クロマトグラフィー法で分析した。グリシノニトリル
はなくなり、グリシンが定量的に生成し、トレース量の
アンモニアが残存していた。乾燥菌体当たりのグリシン
の生成量は９０ｇ／乾燥菌体であり、グリシンの生成活
性は１８ｇ／ｇ・Ｈｒであった。残りの２９３ｇは遠心
濾過し菌体を取り除いた後、沸騰下で１／１０に濃縮し
て放冷し、５７ｇのグリシンを晶析回収した。
【００３０】
【発明の効果】本発明の製造方法は、ｐＨを調整するた
めの酸、アルカリまたは緩衝液を添加せず、減圧反応蒸
留や不活性ガスを流通しながら、生成するアンモニアを
反応と同時に系外に分離する反応条件下で、ホルムアル
デヒド、青酸、およびアンモニアとの反応で得られるグ
リシノニトリルの水溶液に微生物、好ましくはアシネト
バクター（Accinetobacter）属や、ロドコッカス（Rhod
ococcus ）属に属する微生物を作用させることにより、
乾燥菌体当たり、かつ単位時間当たり高活性であって菌
体や培地の多量廃棄を伴わず、反応液のｐＨを調整する
ための酸、アルカリまたは緩衝液の添加や廃棄を伴わ
ず、グリシンとアンモニアが定量的に生成し、これらの
分解および消費を伴わなず、グリシンとアンモニアを別
々に回収することができる効果を有する。
めの酸、アルカリまたは緩衝液を添加せず、減圧反応蒸
留や不活性ガスを流通しながら、生成するアンモニアを
反応と同時に系外に分離する反応条件下で、ホルムアル
デヒド、青酸、およびアンモニアとの反応で得られるグ
リシノニトリルの水溶液に微生物、好ましくはアシネト
バクター（Accinetobacter）属や、ロドコッカス（Rhod
ococcus ）属に属する微生物を作用させることにより、
乾燥菌体当たり、かつ単位時間当たり高活性であって菌
体や培地の多量廃棄を伴わず、反応液のｐＨを調整する
ための酸、アルカリまたは緩衝液の添加や廃棄を伴わ
ず、グリシンとアンモニアが定量的に生成し、これらの
分解および消費を伴わなず、グリシンとアンモニアを別
々に回収することができる効果を有する。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｒ 1:01） Ｃ１２Ｒ 1:01） Ｆターム(参考） 4B064 AE03 CA02 CA03 CC03 CD12 CE01 DA01 DA10 DA16 4B065 AA04X AA45X AC14 BA22 BB12 BC17 CA17 CA41 CA44
Claims (8)
- 【請求項１】 ｐＨを調整するための酸、アルカリまた
は緩衝液の添加をしない反応条件下でグリシノニトリル
の水溶液に微生物を作用させながら、反応液中に生成す
るアンモニアを反応液から分離することを特徴とするグ
リシンの製造方法。 - 【請求項２】 アンモニアを反応液から分離する方法が
反応蒸留であることを特徴とする請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 反応蒸留を減圧下で行うことを特徴とす
る請求項２記載の方法。 - 【請求項４】 反応蒸留を不活性ガスの存在下で行うこ
とを特徴とする請求項２または３記載の方法。 - 【請求項５】 微生物がアシネトバクター属の微生物で
あることを特徴とする請求項１ないし４のいずれかに記
載の方法。 - 【請求項６】 微生物がアシネトバクターｓｐ．ＡＫ２
２６株（微工研菌寄第８２７１号）およびアシネトバク
ターｓｐ．ＡＫ２２７株（微工研菌寄第８２７２号）で
あることを特徴とする請求項１ないし４のいずれかに記
載の方法。 - 【請求項７】 微生物がロドコッカス属の微生物である
ことを特徴とする請求項１ないし４のいずれかに記載の
方法。 - 【請求項８】 微生物がロドコッカス・マリスＢＰ−４
７９−９（ＦＥＲＭＢＰ−５２１９）であることを特徴
とする請求項１ないし４のいずれかに記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000083179A JP4497638B2 (ja) | 2000-03-24 | 2000-03-24 | アンモニアの反応分離を利用したグリシンの微生物学的製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000083179A JP4497638B2 (ja) | 2000-03-24 | 2000-03-24 | アンモニアの反応分離を利用したグリシンの微生物学的製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001258586A true JP2001258586A (ja) | 2001-09-25 |
| JP4497638B2 JP4497638B2 (ja) | 2010-07-07 |
Family
ID=18599862
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000083179A Expired - Lifetime JP4497638B2 (ja) | 2000-03-24 | 2000-03-24 | アンモニアの反応分離を利用したグリシンの微生物学的製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4497638B2 (ja) |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5225738A (en) * | 1975-08-07 | 1977-02-25 | Sun Ventures Inc | Method of hydrolysing aromatic nitriles to carboxylic acid |
| JPS61282089A (ja) * | 1985-06-07 | 1986-12-12 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 不飽和有機酸の微生物学的製造法 |
| JPH03280889A (ja) * | 1990-03-30 | 1991-12-11 | Nitto Chem Ind Co Ltd | グリシンの生物学的製造法 |
| JPH03280895A (ja) * | 1990-03-30 | 1991-12-11 | Nitto Chem Ind Co Ltd | Ｄ―α―フェニルグリシンの製造法 |
| JPH04304892A (ja) * | 1991-03-29 | 1992-10-28 | Nitto Chem Ind Co Ltd | グリシンの生物学的製造法 |
| JPH05310677A (ja) * | 1992-05-01 | 1993-11-22 | Asahi Chem Ind Co Ltd | カルバミン酸エステルの製造方法 |
| WO1997010355A1 (fr) * | 1995-09-13 | 1997-03-20 | Nagase & Company, Ltd. | Processus de production d'amide d'acide actif sur le plan optique |
| JPH10179183A (ja) * | 1996-12-20 | 1998-07-07 | Daicel Chem Ind Ltd | カルボン酸の製造方法 |
-
2000
- 2000-03-24 JP JP2000083179A patent/JP4497638B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5225738A (en) * | 1975-08-07 | 1977-02-25 | Sun Ventures Inc | Method of hydrolysing aromatic nitriles to carboxylic acid |
| JPS61282089A (ja) * | 1985-06-07 | 1986-12-12 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 不飽和有機酸の微生物学的製造法 |
| JPH03280889A (ja) * | 1990-03-30 | 1991-12-11 | Nitto Chem Ind Co Ltd | グリシンの生物学的製造法 |
| JPH03280895A (ja) * | 1990-03-30 | 1991-12-11 | Nitto Chem Ind Co Ltd | Ｄ―α―フェニルグリシンの製造法 |
| JPH04304892A (ja) * | 1991-03-29 | 1992-10-28 | Nitto Chem Ind Co Ltd | グリシンの生物学的製造法 |
| JPH05310677A (ja) * | 1992-05-01 | 1993-11-22 | Asahi Chem Ind Co Ltd | カルバミン酸エステルの製造方法 |
| WO1997010355A1 (fr) * | 1995-09-13 | 1997-03-20 | Nagase & Company, Ltd. | Processus de production d'amide d'acide actif sur le plan optique |
| JPH10179183A (ja) * | 1996-12-20 | 1998-07-07 | Daicel Chem Ind Ltd | カルボン酸の製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4497638B2 (ja) | 2010-07-07 |
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