JP2000516586A - ３―ピロリン―２―カルボン酸誘導体の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、式（Ｉ）［式中、Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、ベンジル、フェニル上で置換されたベンジル、アリルオキシカルボニル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル（ここで、ベンジル基はＯＣＨ₃−基により置換されていてよい）、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルカルボニルを表わすか、又はＲ¹は、窒素上でアルキル化又はアシル化されていてよいアミノ酸のＣ−末端を介して結合した基を表わし、Ｒ²は、ＯＨ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルオキシ、ベンジルオキシ又はＮＲ³Ｒ⁴−基（ここで、Ｒ³及びＲ⁴は相互に無関係に、Ｈ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキル、ベンジル、フェニル又はピリジルを表わし、その際、Ｒ³及びＲ⁴中の芳香族は、メチル、メトキシ、ヒドロキシ、シアノ又はハロゲンから成る群から選択した３個までの同一又は異なる置換基により置換されていてよい）である］の３−ピロリン−２−カルボン酸誘導体の製法を記載しており、これは式（ＩＩ）［式中、Ｒ¹及びＲ²は前記したものを表わし、Ｒ⁵は、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、ベンジル、トリフルオルメチル、ナフチル又はフェニル（これは場合により、メチル、ニトロ、ハロゲンの群から成る基で置換されていてよい）を表わす］の化合物から塩基を用いてスルホン酸基を除去することを特徴とする。

Description

【発明の詳細な説明】 ３−ピロリン−２−カルボン酸誘導体の製法 詳細な説明 本発明は、ピロリン−２−カルボン酸誘導体の新規製法に関する。 生物学的活性ペプチド又はペプチド類似物中でプロリンを３，４−デヒドロプ ロリンにより変えることによって、活性が失われることは希である［Ａ．Ｍ．Ｆ ｅｌｉｘその他、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔ．Ｒｅｓ．第１０巻、２９９ 頁（１９７７年）；Ｃ．Ｒ．Ｂｏｔｏｓその他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．第２２ 巻、９２６頁（１９７９年）；Ｇ．Ｈ．Ｆｉｓｈｅｒ、Ｗ．Ｒｙａｎ、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．第１０７巻、２７３頁（１９７９年）］だけでなく、作用が高まり 、同時に毒性が減少する場合もある［Ｇ．Ｈ．Ｆｉｓｈｅｒ、Ｗ．Ｒｙａｎ、Ｆ ＥＢＳ Ｌｅｔｔ．第１０７巻、２７３頁（１９７９年）；Ｓ．Ｎａｔａｒａｊ ａｎその他、ｉｎ Ｐｅｐｔｉｄｅ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏ ｇｉｃａｌ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ、Ｅ．Ｇｒｏｓｓ、Ｊ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ、 Ｅｄｓ．、Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、１９７９年、４ ６３頁］。 文献から公知の方法による工業的規模でのＮ−保護 ３，４−デヒドロプロリンの合成には、例えばツガエフ（Ｔｃｈｕｇａｅｆｆ） によるヒドロプロリンからのＳ−メチル−キサントゲネートの熱によるシス−除 去が示すように、多大な費用が必要である。この方法の欠点は、多量の沃化メチ ルを使用することであり、かつ、メチルメルカプタン及び酸硫化炭素が生成する ことである［Ｊ．−Ｒ．Ｄｏｒｍａｙその他、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．第９２巻 、７６１頁（１９８０年）；Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｉｌ、Ｍｅｔｈｏｄｅｎ ｄｅ ｒ Ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ、第５／１ｂ巻、１２６頁（１９７ ２年）］。 発煙沃化水素酸中での沃化ホスホニウムを用いるピロール−２−カルボン酸の 還元も、大過剰のガス状沃化水素の取り扱い並びに著しい収量減少及び大量の反 応で重合開始のために問題がある［Ｊ．Ｗ．Ｓｃｏｔｔその他、Ｓｙｎｔｈ．Ｃ ｏｍｍｕｎ．第１０（７）巻、５２９頁（１９８０年）］。これに対して、著し く温和な条件下では、Ｂｏｃ−保護４−フェニルセレニニルプロリンメチルエス テルの脱離が起こる［Ｊ．−Ｒ．Ｄｏｒｍａｙ、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第９巻、 ７５３頁（１９８２年）］。この脱離は室温で起こり、高い選択性で△³−オレ フィンが生じる。熱によるシス−脱離は、著しい割合の異性体△⁴−オレフィン を生じる。しかし酸化セレンの脱離も、工業的規模の反応で除去に費用がかかる 有毒なセレン含有残分が 生成する故に不利であり、時期尚早に脱離する亜セレン酸が二重結合に付加する ことは、特に、非常に少量でもセレン含有化合物が有毒特性を生じる医薬作用物 質の場合には、不利である。 Ｎ−置換３−メチルスルホニルオキシ−ピロリジンから、少量の３−ピロリン を得ることができた［Ｔ．Ｕｎｏその他、Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ ．第２４巻、１０２５頁（１９８７年）］。３−ピロリン−２−カルボン酸誘導 体を製造するためにスルホン酸塩、例えばスルホン酸メチルを脱離することはこ れまで記載されていない。 ３−ピロリン−２−カルボン酸誘導体を製造するための前記文献から公知の方 法は、工業的合成のためには適さない。 本発明は、式Ｉ ［式中、Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、ベンジル、フェニル上で置換された ベンジル、アリルオキシカルボニル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシカルボニル、ベ ンジルオキシカルボニル（ここで、ベンジル基はＯＣＨ₃−基により置換されて いてよい）又はＣ₁〜Ｃ₄−アルキルカルボニルを表わすか、又はＲ¹は、窒素上 でアルキル化又はアシル化されていてよいアミ ノ酸のＣ−末端を介して結合した基を表わし、Ｒ²は、ＯＨ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキ ルオキシ、ベンジルオキシ又はＮＲ³Ｒ⁴−基（ここで、Ｒ³及びＲ⁴は相互に無関 係に、Ｈ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキル、ベンジル、フェニル又はピリジルを表わし、そ の際、Ｒ³及びＲ⁴中の芳香族は、メチル、メトキシ、ヒドロキシ、シアノ又はハ ロゲンから成る群から選択した３個までの同一又は異なる置換基により置換され ていてよい）である］の３−ピロリン−２−カルボン酸誘導体の製法に関し、こ れは、式ＩＩ ［式中、Ｒ¹及びＲ²は前記したものを表わし、Ｒ⁵は、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、ベ ンジル、トリフルオルメチル、ナフチル又はフェニル（これは場合により、メチ ル、ニトロ、ハロゲンの群からの基で置換されていてよい）を表わす］のスルホ ン酸塩からスルホン酸基を塩基を用いて除去することを特徴とする。 基Ｒ¹としては、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルカルボニル、ベンジル、フェニル上で置 換されたベンジル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシカルボニル及びベンジルオキ シカルボニルが有利である。ベンジルオキシカルボニル基がＯＣＨ₃により置換 されている場合には、それは、ｐ位にメトキシ基を有するのが有利である。特に Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシカルボニル基が有利である。 有利な基Ｒ²は、ＯＨ及びＣ₁〜Ｃ₄−アルコキシである。 有利な基Ｒ⁵は、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル及びベンジル、特にＣ₁〜Ｃ₄−アルキル である。 化合物Ｉは不斉Ｃ原子１個を、化合物ＩＩは不斉Ｃ原子２個を、５員環中に有 する。式ＩＩの化合物は、ラセミ体、ジアステレオマー混合物、ジアステレオマ ー的に純粋な及びエナントマー的に純粋な化合物として使用することもできる。 従って化合物Ｉは、出発物質として使用される化合物ＩＩの立体化学構造及び反 応条件により、ラセミ体として又は光学活性形で得ることができる。 式ＩＩの化合物は文献から公知の方法により製造することができる［例えばＤ ．Ｊ．Ａｂｒａｈａｍ、Ｍ．Ｍｏｋｏｔｏｆｆ、Ｌ．Ｓｈｅｈ、Ｊ．Ｅ．Ｓｉｍ ｍｏｎｓ、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．第２６（４）巻、５４９頁（１９８３年）］ 。 スルホン酸基、即ち−Ｏ−ＳＯ₂−Ｒ⁵−基の式ＩＩの光学活性化合物からの除 去は、Ｒ²がＣ₁〜Ｃ₄−アルコキシ又はベンジルオキシである場合には、ラ セミ体化を伴って起こる。従って３，４−デヒドロプロリンのラセミ体エステル が得られ、これを次の酵素によるラセミ体分割によりＤ−及びＬ−３，４−デヒ ドロプロリン誘導体にすることができる（方法Ａ）：方法Ａ： （Ｒ^５=ＣＨ₃、Ｒ²=ＯＣＨ₃） この方法の特に有利な１態様により、式中Ｒ²がＯＨであり、カルボン酸基の 絶対配置が確定されている式ＩＩの化合物を使用する場合には、これはＲ−又は Ｓ−配置のいずれかに相応し、式Ｉの相応するカルボン酸がラセミ体化なしに得 ることができる。（方法Ｂ）： 方法Ｂ： （Ｒ⁵=ＣＨ₃、Ｒ²=ＯＨ） 除去反応Ａ及びＢのためには、非プロトン性溶剤、 特にＤＭＦ、ジオキサン、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ＤＭＳＯ、ＣＨ₃ＣＮが好適であり 、その際、溶剤は場合により少量の水又はアルコールを含有してもよい。 方法に応じて、１．０〜１．５当量の塩基（方法Ａ）又は２．０〜３．０当量 の塩基（方法Ｂ）が使用され、その際、塩基としてリチウム、ナトリウム、カリ ウム、ルビジウム、セシウム、カルシウム又はマグネシウムの水素化物、アミド 及びアルコラートが挙げられるが、ナトリウム及びカリウムの水素化物、アミド 及びアルコラートが有利である。塩基としてナトリウムアルコラートを使用する のが有利であるが、その際、アルコラート基として第一、第二及び第三アルコー ルが挙げられる。ジオール、トリオール、トリ−、ジ−又はモノエチレングリコ ールモノエーテルの型のエーテルアルコール又はアミノアルコールを使用するこ ともできる。有利には下記のものが挙げられる：トリエチレングリコールモノメ チルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル又はエチレングリコー ルモノメチルエーテル、ジメチルアミノエタノール又は２−［２−（ジメチルア ミノ）−エトキシ］−エタノール。 スルホネート基の除去は温度−２０℃で既に行われる。この反応は、通常は温 度−２０〜＋１００℃で行うことができる。温度−１０〜６０℃で行うのが有利 である。方法Ａによる相応するエステルからのスルホ ネート基の除去は、その際生じる３，４−デヒドロプロリンエステルのα−炭素 原子上で既に−２０℃で、ラセミ体化を伴って起こる。 意外にも、式中のＲ²がＯＨであり、カルボン酸基がＲ−又はＳ−配置である 式ＩＩの出発物質を用いる方法Ｂの特に有利な変法により、この方法は殆どラセ ミ体化を起こさずに実施することができる。塩基として、この変法では水素化物 、第一アルコラート、第一エーテルアルコラート又は第一アミノアルコラートを 使用するのが有利である。２−メトキシエタノレート、２−（２−メトキシエト キシ）−エタノレート又は２−［２−（ジメチルアミノ）−エトキシ］−エタノ レートを使用するのが特に有利である。出発生成物１当量当たり、２．０〜２． ５当量の塩基を使用するのが有利である。方法Ｂによる反応のための有利な温度 範囲は、−１０〜＋２５℃である。 除去のために使用される塩基は、固体形で反応混合物中に装入することができ るが、それは、反応前にその場で製造するこもできる。例えば除去のために使用 される塩基がナトリム−２−メトキシエタノレートである場合には、相応するア ルコールをより強い塩基のナトリウム塩、例えば水素化ナトリウム、ナトリウム −ｔ−ブチラート又はナトリウムービス−（トリメチルシリル）−アミドの溶液 又は懸濁液に滴加する場合に、これらの塩基を有利にはその場で製造することが できる。反応はセミバッチ方法で、塩基溶液を溶解した式ＩＩの出発物質に供給 するか又は有利には出発物質ＩＩの溶液を予め装入された塩基溶液又は塩基懸濁 液に供給して行うことができる。 反応混合物の後処理は、蒸留、抽出、結晶化、クロマトグラフィー又はこれら の組み合わせにより行うことができる。 ラセミ性の３，４−デヒドロプロリンから（＋）−又は（−）−酒石酸を用い て所望のエナントマーを単離することができ［Ｊ．ｗ．Ｓｃｏｔｔその他、Ｓｙ ｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ第１０巻、５２９頁（１９８０ 年）又はＵ．Ｓ．４１１１９５１参照］又はＢｏｃ−保護アミノ酸の製造後にラ セミ体分割を光学活性の１−（４−ニトロフェニル）−エチルアミンを用いて行 うことができる［Ｕ．Ｓ．４０６６６５８、Ｊ．−Ｕ．Ｋａｈｌ、Ｔ．Ｗｉｅｌ ａｎｄ、Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．第８巻、１４４５（１９８１年） ］。 有利な方法Ｂによりラセミ体化なしに製造されたＮ−保護３，４−デヒドロプ ロリンは、有利には結晶化によりアキラルなアミンとのアンモニウム塩として精 製することができる。特にＬ−Ｂｏｃ−３，４−デヒドロプロリンをジエチルア ンモニウム塩として純粋な形で得ることができる。 従って、本発明の目的は、式ＩＶ［式中、Ｒ⁶はアミノ保護基であり、アミンはモノ−、ジ−又はトリアルキルア ミンであり、その際、アルキル基はＣ原子１〜４個を含有し、Ｃ₅〜Ｃ₇−シクロ アルキル基により置換されていてよい］の化合物及びその光学活性のＤ−及びＬ −形である。Ｒ⁶は有利にはＢｏｃ−保護基を表わし、“アミン”は有利にはジ エチルアミン又はジシクロヘキシルアミンを表わす。 方法Ａにより得られたエステルは、非常に良好に部分的に酵素、例えばリパー ゼ、エステラーゼ及びプロテアーゼを用いて分割させることができ、その際、遊 離酸の対掌体が生じ、他方その他の対掌体がエステルの形で残留する。 加水分解酵素として、前記方法で多数の酵素を使用することができる。プロテ アーゼ、エステラーゼ及び特にリパーゼを使用するのが有利である。リパーゼと しては、例えば酵母又は細菌から単離することができる、微生物リパーゼが特に 好適である。その他の特に好適な加水分解酵素は、Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ（ Ｅｎｚｙｍｅ Ｔｏｏｌｂｏｘ）から市販の酵素、特にリパーゼＳＰ５２３、Ｓ Ｐ５２４；ＳＰ５２５、Ｓ Ｐ５２６及びＲＮｏｖｏｚｙｍ４３５である。 更に、市販（Ｂｏｅｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ）されているリパーゼ“ Ｃｈｉｒａｚｙｍｅ Ｌ１〜Ｌ８”が本発明による方法に有利に使用することが できる。 エステラーゼ（例えば豚肝臓エステラーゼ）を使用することもできる。 酵素はそのまま又は不動化された形で使用することができる。 このエステル分割は緩衝剤中でｐＨ６〜８で有利には室温で実施される。 この新規方法は、非常に簡単な方法で化合物Ｉの製造を可能にする。これはこ れまで非常に困難かつ部分的に悪い収率で製造することができたにすぎないデヒ ドロプロリン誘導体を製造するために特に重要である。 新規方法により光学活性のＮ−保護３−ピロリン−２−カルボン酸誘導体が遊 離酸としてか又はエステルの形で得られ、これから遊離酸を有利には酵素により 遊離させることができることは特に有利である。 酵素により光学活性の酸をエステルから製造する場合には、通常はエステルの 対掌体が不変形で残留する。これを例えば塩基を用いてラセミ体化し、再び酵素 により分割することができる。 本発明による利点は、温和でかつ同時に環境に優し い反応条件下で立体的に純粋な形で工業的規模でも３，４−デヒドロプロリン− 誘導体を製造することが初めて可能になったことである。スルホン酸基の除去を 既に低い温度で行うことができることは意外である。 この新規方法により製造された物質は非常に重要である。この物質は例えば、 プロリン基がデヒドロプロリン基により置換されている、トロンビン阻害性低分 子ペプチド誘導体を製造するための重要な中間体である（ＷＯ９４／２９３３６ 参照）。更に３，４−デヒドロプロリンがコラーゲン合成を抑制するために使用 可能な薬剤であることが見出された（ＵＳ４０６６６５８）。 更に加工するために、本発明による方法により得られた粗生成物を更に精製せ ずに反応させて、ペプチド誘導体のための次の中間体を製造する（これ自体は非 常に簡単に精製することができる）ことが特に有利である。これらの中間体は、 式 ［式中、Ｒ¹は前記したものを表わし、Ｘは、 （Ｒ⁶=Ｈ、ＣＨ₃、ＯＣＨ₃、ＯＨ又はハロゲン） を表わす］を有する。 これらは、化合物Ｉから、塩基、例えばトリエチルアミン又はジイソプロピル エチルアミン及び縮合剤、例えばＰＰＡ、塩化ピバロイル又はジシクロヘキシル カルボジイミド／ヒドロキシスクシンイミドの存在下で活性化し、引き続き、Ｈ₂ Ｎ−ＣＨ₂−Ｘと結合させて式ＩＩＩの化合物にすることによって製造すること ができる。この反応は有利には溶剤、例えばジクロルメタン、ＴＨＦ、ジオキサ ン、ｔ−ブチルメチルエーテル、ＤＭＥ又はアセトニトリル中で行われ、−２０ 〜＋３０℃で実施される。 実施例 実施例中、下記の略語を使用する： Ｂｎｓ=ベンジルスルホニル Ｂｏｃ=ｔ−ブチルオキシカルボニル ＤＩＰＥＡ=ジイソプロピルエチルアミン ＤＭＥ=ジメトキシエタン ＤＭＦ=ジメチルホルムアミド ＫＯｔＢｕ=カリウム−ｔ−ブチレート Ｍｓ=メチルスルホニル ＰＰＡ=無水プロピルホスホン酸 Ｐｒｏ=プロリン Ｐｙｒ=３，４−デヒドロプロリン ＲＴ=室温 ＴＨＦ=テトラヒドロフラン Ａ．出発物質の製造 ａ）Ｂｏｃ−（Ｌ）−（４−ＭｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＣＨ₃及びＢｏｃ−（Ｌ）− （４−ＢｎｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＣＨ₃： （４Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−４−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン−メチルエステル を塩化メチルスルホニルと反応させて、（４Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−４−メチルスル ホニルオキシ−（Ｌ）−プロリン−メチルエステルにした［Ｄ．Ｊ．Ａｂｒａｈ ａｍ、Ｍ．Ｍｏｋｏｔｏｆｆ、Ｌ．Ｓｈｅｈ、Ｊ．Ｅ．Ｓｉｍｍｏｎｓ、Ｊ．Ｍ ｅｄ．Ｃｈｅｍ．第２６（４）巻、５４９頁（１９８３年）］。塩化メチルスル ホニルを用いる反応と同様にして、塩化ベンジルスルホニルを用いてエタノール から晶出させた後に、（４Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−４−ベンジルスルホニルオキシ− （Ｌ）−プロリン−メチルエステルが収率７６％で得られた。¹H-NMR(CDCl₃，δ ｂ）（４Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−（４−ＭｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＨ： メチルエステルＢｏｃ−（Ｌ）−（４ＭｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＣＨ₃１８６ｇ（ ５７５ミリモル）を０℃でジオキサン５００ｍｌ及び１ＮＮａＯＨ１１５０ｍｌ 中で２．５時間加水分解させた。エーテルで抽出後、 水相を２Ｎ塩酸を用いてｐＨ３に調整し、生成物を酢酸エステルで抽出した。Ｎ ａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、溶剤を完全に抽出した後、帯黄色油状物１６３ｇ（９２ ％）が純度９４％で得られた。生成物は徐々に固化して固体になった； Ｂ．最終生成物の製造 例１ Ｂｏｃ−（Ｄ／Ｌ）−Ｐｙｒ−ＯＣＨ₃の製造： ａ）Ｂｏｃ−（Ｌ）−（４−ＭｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＣＨ₃１００ｇ（３０９ミリ モル）を無水ＤＭＦ６００ｍｌ中に溶解させた。０〜５℃で１時間以内に無水Ｄ ＭＦ３００ｍｌ中のＫＯｔＢｕ３６．４５ｇ（３２５ミリモル）から成る溶液を 滴加し、更に３０分間０〜５℃で、２時間室温で撹拌した。引き続き混合物を氷 水上に注ぎ、エーテル／酢酸エステル５：１で３回抽出し、有機相をもう一度水 で洗浄した。Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させた後、溶剤を３５℃で完全に抽出した。粗 製エステル６８ｇが得られ、これを１．７ミリバール及び１００〜１０２℃で蒸 留させた。こうして得た無色油状物は固化して、固体になった（収率５６％）。 ｂ）同じ化合物［Ｂｏｃ−（Ｄ／Ｌ）−Ｐｙｒ−ＯＣＨ３］が、ベンジルスルホ ネートＢｏｃ−（Ｌ）−（４−ＢｎｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＣＨ₃からも得られた。 無水ＤＭＦ５０ｍｌ中の前記ベンジルスルホネート５ｇ（１２．５ミリモル）か ら、これを−１０℃で無水ＤＭＦ１０ｍｌ中のＮａＨ０．５ｇ（１２．５ミリモ ル）の懸濁液に滴加し、引き続き室温で１晩攪拌して、ａ）によるメシレートの 除去と同様に後処理した後、粗製エステル２．２ｇが得られた。この生成物はシ リカゲルを用いてカラムクロマトグラフィーにより精製できた（移動相：酢酸エ ステル／ヘキサン２：３）。しかし弱い発色団の故に蒸留を行うのが有利である 。 例２ Ｂｏｃ−（Ｌ）−Ｐｙｒ−ＯＨの製造 ａ）ＤＭＥ４００ｍｌ中の５５〜６５重量％のＮａＨ１４．５ｇ（約３６４ミリ モル）に室温で、ＤＭＥ６５０ｍｌ（水２５ミリモルに添加した）中に溶解させ た、Ｂｏｃ−（Ｌ）−０（４−ＭｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＨ５０．０ｇ（１６１．６ ミリモル）を４５分間で滴加したが、その際、温度は付加的に冷却しないで約３ ０℃に上昇した。混合物を更に室温で１５時間、次いで ５０℃で１時間攪拌し、引き続き氷水上に注ぎ、エーテル／酢酸エーテル２：１ で３回洗浄した。水相を２Ｎ塩酸で酸性にしてｐＨ２にし、生成物を酢酸エステ ルで抽出した。Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、溶剤を完全に抽出した後、粗生成物３ ６ｇが帯黄色油状物として得られ、この中に生成物が７０％含有されていた。生 成物−／出発物質−比９７：３［ＨＰＬＣ：水／アセトニトリル８：２＋０．１ ％ＴＦＡ；Ｍｅｒｋ（Ｒ）Ｐｕｒｏｓｐｈｅｒ ＲＰ−１８ｅ；２１０．４ｎｍ で検出］及びエナントマー比（Ｌ）：（Ｄ）９０：１０が検出された。エナント マー比は、酸基と３−ピコリルアミン誘導体とのカップリング後に相応するＢｏ ｃ−３，４−デヒドロプロリル−（３−ピコリル）−アミドとしてキラルＨＰＬ Ｃ−カラムで検出された。前記試験により、カップリング自体はほぼラセミ体化 なしに行われることが実証された。 同様ではあるが、ＮａＨ３当量及び室温で攪拌時間４時間を用いて反応させた 後に、生成物６５％が得られた［生成物：出発物=９４：６；（Ｌ）：（Ｄ）=９ ６：４］。 古典的なラセミ分割の方法により、Ｂｏｃ−３，４−デヒドロプロリン及び（ ＋）−デヒドロアビエチル アミンをアセトンから晶出させて、相応するアンモニウム塩にし、更に再結晶さ せずにアミンを脱離させた後、Ｂｏｃ−（Ｌ）−３，４−デヒドロプロリンが純 度８５％及びエナントマー比（Ｌ）：（Ｄ）=９６：４で単離された。 ｂ）ナトリウム−ｔ−アミラート４６．２ｇ（３９８．５ミリモル）をＴＨＦ１ ５０ｍｌ中に予め装入した。引き続き１０℃で２−メトキシエタノール３２．９ ｇ（４２９．５ミリモル）を添加した。その後、ＴＨＦ１００ｍｌ中のＢｏｃ− （Ｌ）−（４−ＭｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＨ５０ｇ（１５９．４ミリモル）の溶液を 、内部温度が８〜１０℃を越えないように滴加した。この滴加終了後に、１０℃ で２０時間後攪拌した。氷水３００ｍｌを５〜１０℃で添加した後に、メチル− ｔブチルエーテル５０ｍｌで１回抽出し、引き続き塩酸で酸化してｐＨ２にした 。粗生成物は塩化メチレンで抽出し、溶剤を蒸発除去した後、黄色油状物として 単離された。 収量は４０．９ｇであり、この中、Ｂｏｃ−（Ｌ）−３，４−デヒドロプロリ ンは１８ｇであった［外部標準を用いて検量したＨＰＬＣ分析により測定（初期 濃度 水（０．１％Ｈ₃ＰＯ₄）／アセトニトリル７０：３０；カラム：Ｐｒｏｄ ｉｇｙ（ＯＤＳ３）１００Ａ；２１０ｎｍで検出）］。エナンチオマー比（Ｌ） ：（Ｄ）９９：１も同じくＨＰＬＣ分析（ヘキサン ／イソプロパノール８．７５：１．２５、ＨＣＯＯＨ０．１％；カラム：Ｃｈｉ ｒａｃｅｌ ＯＤ；２３０ｎｍで検出）により検出された。 同様の条件下で実施したバッチ中で、Ｂｏｃ−（Ｌ）−（４−ＭｓＯ）−Ｐｒ ｏ−ＯＨ７０ｇ（２２４ミリモル）を反応させた。塩化メチレンを用いる抽出の 後に、粗生成物を蒸留による溶剤交換によってメチル−ｔ−ブチルエーテル２２ ０ｍｌ中に移し、引き続きその中に含有されたＢｏｃ−（Ｌ）−３，４−ジヒド ロプロリンをジエチルアミン１６．５ｇ（２２４ミリモル）の添加によりジエチ ルアンモニウム塩として沈澱させた。 塩２３．８ｇが得られた。前記ＨＰＬＣ分析法により、こうして沈澱した生成 物中で（Ｄ）−エナントマーは検出されなかった。 融点：１３０〜１３３℃ ｃ）ビス−（トリメチルシリル）−ナトリウムアミド１０．５２ｇ（５７．４ミ リモル）をＴＨＦ２５ｍｌ中に予め装入し、ＴＨＦ１５ｍｌ中の２−［２−（ジ メチルアミノ）−エトキシ］−エタノール８．２５ｇ（６２ミリモル）を１５分 間かかって冷却下で滴加し、室温で３０分間攪拌した。引き続きＴＨＦ１５ｍｌ 中に溶解させたＢｏｃ−（Ｌ）−（４−ＭｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＨ７．１ｇ（２３ ．０ミリモル）を−５℃で２０分間かかって滴加し、−５℃で１時間、０℃で２ 時間、室温で１晩攪拌した。その後、バッチを氷水１２５ｇ上に注ぎ、メチル− ｔ−ブチルエーテルで４回抽出し、水相を１０％クエン酸６０ｍｌで酸性にして ｐＨ２．２にし、室温で１晩攪拌した。反応溶液をメチル−ｔ−ブチルエーテル で３回抽出した後、集めた有機相を水、飽和食塩水及び水で順次に洗浄し、硫酸 マグネシウム上で乾燥させ、真空中で濃縮させた。Ｂｏｃ−（Ｌ）−３，４−デ ヒドロプロリン４．１ｇが粗生成物として得られ、これを引き続きメチル−ｔ− ブチルエーテル２０ｍｌ中に溶解させ、メチル−ｔ−ブチルエーテル１０ｍｌ中 のジエチルアミン１．３５ｇ（１８．５２ミリモル）の溶液を加えた。塩沈澱を 完結させるために、石油エーテルを添加した。生成物を吸引濾過し、乾燥させた 後、Ｂｏｃ−（Ｌ）−３，４−デヒドロプロリン４．０ｇが得られた。母液から 付加的に第二結晶が０．３ｇで得られ、これによって所望の生成物の総収率は６ ６％となった。 例３ Ｂｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−Ｐｙｒ−ＯＨの製造： ＤＭＥ１５０ｍｌ中の６０％ＮａＨ８ｇ（２００ミリモル）に、冷却下でイソ プロパノール１３ｇ（２１５ミリモル）を滴加した。Ｈ₂−発生完了後に、０℃ でＤＭＥ１００ｍｌ中のＢｏｃ−（Ｌ）−（４−ＭｓＯ）−Ｐｒｏ−ＯＨ２５ｇ （８０ミリモル）の溶液を添加した。０℃で１時間後に、２０℃に２０時間加温 し、引き続き水１５０ｍｌを添加した。メチル−ｔ−ブチルエーテルで１回抽出 の後に、塩酸で酸性にしてｐＨ２にし、塩化メチレンで抽出した。収量は１７ｇ であった。エナントマー比（Ｌ）：（Ｄ）は、ＨＰＬＣ分析（ヘキサン／イソプ ロパノール８．７５：１．２５、０．１％ＨＣＯＯＨ；カラム：Ｃｈｉｒａｃｅ ｌ ＯＤ；２３０ｎｍで検出）により測定し、５７：４３であった。 例４ Ｂｏｃ−（Ｌ）−Ｐｙｒ−ＯＨへのＢｏｃ−（Ｄ／Ｌ）−Ｐｙｒ−ＯＣＨ₃の酵 素による分割： Ｂｏｃ−（Ｄ／Ｌ）−Ｐｙｒ−ＯＣＨ３５．６８ｇ（２５ミリモル）を燐酸塩 緩衝剤（ｐＨ７．０）１００ｍｌ及びＴＨＦ１５ｍｌ中でＲＮｏｖｏｚｙｍ４５ ３ ３．１２ｇと一緒に室温で２４時間振り混ぜた。その際、１ＮのＮａＯＨの 添加によってｐＨ値を最初の値に調整し直した。水酸化ナトリウム溶液の使用量 で反応の経過を観察した。固体を濾別し、濾液を１ＮのＮａＯＨを用いてｐＨ１ ０に調整した。反応しなかった対掌体Ｂｏｃ−（Ｄ）−Ｐｙｒ−ＯＣＨ₃を酢酸 エステル／エーテル１：１で抽出した。水相を１Ｎ塩酸でｐＨ１に調整し、生成 物であるＢｏｃ−（Ｌ）− ＯＨを酢酸エステルで３回抽出した。生成物２．１４ｇが得られ、これをトルエ ン／ヘキサン又はエーテル／ヘキサンから晶出させた。晶出後に、生成物は旋光 度［α］_D ²²=−２７３．８°（ｃ=１．０３；メタノール）を示した。｛文献： ［α］_D ²⁵=−２７２°（ｃ＝１．０；メタノール）Ｊ．Ｕ．Ｋａｈｌ、Ｔ．Ｗｉ ｅｌａｎｄ、Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．第８巻、１４４５頁（１９８ １年）｝。 使用例１ Ｈ−（Ｌ）−Ｐｙｒ−（６−カルボシキアミド）−３−ピコリルアミド ジヒド ロクロリドの製造： ジクロルメタン３０ｍｌ中の例２からの粗Ｂｏｃ−Ｐｙｒ−ＯＨ１．５ｇに− １０℃でＤＩＰＥＡ５．３ｍｌ（３０．３ミリモル）を滴加し、５分後に（６− カルボシアミド）−３−ピコリルアミンジヒドロクロリド１．５８ｇ（７．０ミ リモル）を、かつ、更に５分後にジクロルメタン５ｍｌ中のＰＰＡ（酢酸エステ ル中の５０％溶液）５．７ｍｌ（７．９ミリモル）を添加した。反応混合物を１ 時間の間に−１０℃から０℃まで加温し、次いでジクロルメタンで希釈し、飽和 ＮａＨＣＯ₃溶液、５％クエン酸及び飽和食塩水溶液で順次洗浄した。有機相を Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、溶剤を完全に抽出した後に、粗Ｂｏｃ−（Ｌ）−Ｐｙ ｒ−（６−カルボキシアミド）−３−ピコリルアミド１．８ｇが得られ、これを ０．９モルのイソプロパ ノール性ＨＣｌ３０ｍｌ中で５０℃で５０分間攪拌した。その際生じた沈澱を吸 引濾過器を用いて分離し、少量のメタノール中に溶解させ、イソプロパノールで 沈澱させ、新たに分離させた。真空中で４５℃で乾燥させた後に、Ｈ−（Ｌ）− Ｐｙｒ−（６−カルボキシアミド）−３−ピコリルアミド ジヒドロクロリド２ ．０ｇが白色粉末として得られた（純度９５％）；（Ｌ）：（Ｄ）＞９９：１。 使用例２ Ｈ−（Ｌ）−Ｐｙｒ−（４−ＣＮ）−ベンジルアミド ヒドロクロリドの製造： 粗Ｂｏｃ−Ｐｙｒ−ＯＨ１０．０ｇを、使用例１と同様にしてｐ−シアノ−ベ ンジルアミン６．２ｇと反応させた。後処理の後に、粗Ｂｏｃ−（Ｌ）−Ｐｙｒ −（４−ＣＮ）−ベンジルアミド１４．７ｇが得られ、これを１モルのイソプロ パノール性ＨＣｌ ２３０ｍｌ中で５０℃で２時間攪拌した。溶液を室温まで冷 却した後に、固体が徐々に沈澱し始めた。固体を吸引濾過器を用いて分離させた 。Ｈ−（Ｌ）−Ｐｙｒ−（４−ＣＮ）−ベンジルアミド ヒドロクロリド３．７ ｇが白色粉末として得られた（純度９６％）；（Ｌ）：（Ｄ）＞９９：１。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＵ ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ， ＪＰ，ＫＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，Ｒ Ｏ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＲ，ＵＡ，ＵＳ (72)発明者 ヴェルナー ザイツ ドイツ連邦共和国 Ｄ―68723 プランク シュタット ビスマルクシュトラーセ 22 ベー (72)発明者 トーマス ツィールケ ドイツ連邦共和国 Ｄ―67459 ベール― イゲルハイム アカーツィエンシュトラー セ 12 (72)発明者 フリートヘルム バルケンホール ドイツ連邦共和国 Ｄ―67117 リムブル ガーホーフ キルヒェンシュトラーセ 22 (72)発明者 ウド ランゲ ドイツ連邦共和国 Ｄ―67063 ルートヴ ィッヒスハーフェン シュテルンシュトラ ーセ 17

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式Ｉ ［式中、Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、ベンジル、フェニル上で置換された ベンジル、アリルオキシカルボニル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシカルボニル、ベ ンジルオキシカルボニル（ここで、ベンジル基はＯＣＨ₃−基により置換されて いてよい）又はＣ₁〜Ｃ₄−アルキルカルボニルを表わすか、又はＲ¹は、窒素上 でアルキル化又はアシル化されていてよいアミノ酸のＣ−末端を介して結合した 基を表わし、Ｒ²は、ＯＨ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルオキシ、ベンジルオキシ又はＮ Ｒ³Ｒ⁴−基（ここで、Ｒ³及びＲ⁴は相互に無関係に、Ｈ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキル、 ベンジル、フェニル又はピリジルを表わし、その際、Ｒ³及びＲ⁴中の芳香族は、 メチル、メトキシ、ヒドロキシ、シアノ又はハロゲンから成る群から選択された ３個までの同一又は異なる置換基により置換されていてよい）である］の３−ピ ロリン−２−カルボン酸誘導体を製造するに当たり、式ＩＩ ［式中、Ｒ¹及びＲ²は前記したものを表わし、Ｒ⁵は、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、ベ ンジル、トリフルオルメチル、ナフチル又はフェニル（これは場合により、メチ ル、ニトロ、ハロゲンの群からの基で置換されていてよい）を表わす］の化合物 から、塩基を用いてスルホン酸基を除去することを特徴とする、３−ピロリン− ２−カルボン酸誘導体の製法。 ２．光学活性の３−ピロリン−２−カルボン酸を製造するために、式中のＲ¹ 及びＲ⁵が前記したものを表わし、Ｒ²がＣ₁〜Ｃ₄−アルキルオキシ又はベンジル である式ＩＩの化合物から塩基を用いてスルホン酸基を除去し、こうして得られ たラセミ性のエステルから酵素により光学活性の遊離酸を遊離させ、これを場合 によりアンモニウム塩の形で単離させすることを特徴とする、光学活性の３−ピ ロリン−２−カルボン酸を製造するための請求項１に記載の方法。 ３．光学活性の３−ピロリン−２−カルボン酸を製造するために、式中のカル ボン酸基が（Ｒ）−又は（Ｓ）−配位であり、Ｒ¹及びＲ⁵が前記したものを表わ し、Ｒ²がＯＨである式ＩＩの化合物から塩基を用 いてスルホン酸基を除去し、所望によりこうして得られた生成物を精製及び単離 のためにアンモニウム塩に変えることを特徴とする、光学活性の３−ピロリン− ２−カルボン酸を製造するための請求項１に記載の方法。 ４．式ＩＩＩ ［式中、Ｒ¹は前記したものを表わし、Ｘは、 （Ｒ⁶=Ｈ、ＣＨ₃、ＯＣＨ₃、ＯＨ又はハロゲン）を表わす］の化合物の製造のた めの、請求項１から３までのいずれかの方法で製造された化合物の使用。 ５．式ＩＶ［式中、Ｒ¹は、アリルオキシカルボニル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシカルボニ ル、ベンジルオキシカルボニル又はＣ₁〜Ｃ₄−アルキルカルボニルから選択され たアミノ保護基であり、アミンはモノ−、ジ−又 はトリアルキルアミンであり、その際、アルキル基はＣ原子１〜４個を含有し、 Ｃ₅〜Ｃ₇−シクロアルキル基により置換されていてよい］の化合物。 ６．式中のＲ¹がＢｏｃ−保護基を表わし、アミンがジエチルアミン又はジシ クロヘキシルアミンを表わす、請求項５に記載の式ＩＶの化合物。 ７．Ｄ−形の請求項５又は６に記載の化合物。 ８．Ｌ−形の請求項５又は６に記載の化合物。