JP2000501433A

JP2000501433A - ペスチウイルス感染および関連疾患の予防および処置方法

Info

Publication number: JP2000501433A
Application number: JP10536935A
Authority: JP
Inventors: ペビア，ダニエル・シー; ニッツ，セオドア・ジェイ; セイペル，マーティン
Original assignee: バイロファーマ・インコーポレイテッド
Priority date: 1997-02-21
Filing date: 1998-02-23
Publication date: 2000-02-08
Also published as: NZ332364A; AU748836B2; CA2251646A1; KR100356443B1; KR20000064959A; WO1998036752A1; US5830894A; AU8836598A; BR9804769A; EP0921803A4; EP0921803A1

Abstract

(57)【要約】トリアジノインドール誘導体は、ペスチウイルス感染およびペスチウイルス感染に関連する疾患の予防および処置において有用である。

Description

【発明の詳細な説明】ペスチウイルス感染および関連疾患の予防および処置方法発明の分野本発明は、ウイルス感染およびそれに関連した疾患、特に、フラビウイルス科（Ｆlaviviridae family）のウイルス、特にペスチウイルスに起因するこれらの感染および関連疾患の予防および処置方法に関する。発明の背景ウイルスのフラビウイルス科は、３つの属からなる：ペスチウイルス、アラビウイルスおよびヘパシウイルス（hepacivirus）(Ｃ型肝炎ウイルス)。ペスチウイルス属は、原型メンバーであるウシウイルス性下痢性ウイルス(ＢＶＤＶ)、古典的ブタ熱ウイルス（ＣＳＦＶ、豚コレラウイルスとも称する)）およびヒツジ国境病ウイルス（ＢＤＶ）からなる。ヒトペスチウイルスは、動物ペスチウイルスほど広範囲には特徴付けられなかった。しかしながら、:血清学的調査により、ヒトにおける相当なペスチウイルス暴露が示される。ヒトにおけるペスチウイルス感染は、限定されないが、先天性脳損傷、乳児胃腸炎およびヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）陽性患者の慢性下痢を含む数種類の疾患に関係していた。M．Giangaspero ら，Arch．Virol．Suppl.，7:53-62(1993); M．Giangasper oら，Int．J．STD．AIDS，4(5):300-302(1993); R.Yolken ら，Lancet，1(8637) :517-20(1989); C．R．Wilks ら，Lancet，1(8629): 107(1989); M．Giangasper oら，Lancet，2: 110(1988); B．J．Potts ら，Lancet，1(8539): 972-973(1987 )。家畜（ウシ、ブタおよびヒツジ）のペスチウイルス感染は、世界的な重大な経済的損失を引き起こす。ＢＶＤＶは、遍在しており、流産、奇形発生、呼吸問題、慢性の消耗病、免疫系機能不全ならびに二次的ウイルスおよび細菌感染に対する疾病素質を含む臨床的発現の範囲を引き起こす。ＢＶＤＶ株は、１７％〜３２％の死亡率を有する急性の致命的疾患を引き起こすことが可能である。ＢＶＤＶは、妊娠の１５０日前に感染した胎児において持続感染を確立することもできる。出生時に、これらの持続感染（ＰＩ）動物は、感染しているＢＶＤＶ株に対して免疫耐性があり、一生を通じてウイルス血症のままである。ＰＩ動物は、アメリカ合衆国においてウシの個体数の１％〜２％を構成しており、ウイルス保有体および群れにおけるウイルス蔓延の連続供給源として供する。ＰＩ動物は、また、密接に関係しているが異なるＢＶＤＶウイルス株による重複感染による致命的粘膜病で死亡することもある。ＣＳＦＶは、アメリカ合衆国およびカナダからは撲滅されたが、ヨーロッパおよび世界の他の地域では広汎性疾患を生じている。フラビウイルスおよびヘパシウイルスは、ヒトの重要な病原体を代表し、また、世界中で流行している。デング熱ウイルス、黄熱病ウイルスおよび日本脳炎ウイルスを含むヒトの疾患に関連する３８種類のフラビウイルスがある。フラビウイルスは、急性発熱疾患ならびに脳炎性および出血性疾患の範囲を引き起こす。ヘパシウイルスは、現在、世界の人口の約１％に感染しており、慢性の肝臓疾患、肝硬変、肝細胞癌および肝不全に導く持続感染を引き起こす。現在、ペスチウイルスまたはフラビウイルスを予防または処置するための抗ウイルス薬剤はない。ヘパシウイルス（Ｃ型肝炎ウイルス）感染については、アルファーインターフェロン（ＩＦＮ）は、現在、アメリカ合衆国における唯一の認可薬である。ＩＮＦ処置は、患者の２０％〜４０％における症状を改善することが報告されたが、残りは、ＩＦＮ処置に対して順調には反応していない。反応している患者については、肝機能の持続改善は、伝えるところによれば、患者の１０％〜２０％だけで見られる；患者の大多数は、ＩＦＮ処置の中止の後に再発する。したがって、ＩＦＮは、Ｃ型肝炎の処置においてある程度の有用性を有することを示したが、その効力は限定されており、その治癒率は低い。発明の概要一の態様によると、本発明は、哺乳動物宿主におけるペスチウイルス感染の予防および処置ならびにペスチウイルス感染に関連する疾患の予防および処置のための方法であって、下記構造式：［式中、Ａは、（ａ）ＮＲ₁Ｒ₂（ここで、Ｒ₁およびＲ₂は、独立して、Ｈ、直鎖状または分枝鎖状アルキル基(Ｃ₁−Ｃ₆)、置換または非置換アリール基、置換または非置換アラルキル基(ここで、アルキル基は、Ｃ₁−Ｃ₆である)、アルコキシ基(Ｃ₁−Ｃ₆) 、アシル基(Ｃ₁−Ｃ₇)、置換または非置換カルボアルコキシ基（Ｃ₁−Ｃ₆アルコキシ）からなる群から選択された基であるか、または、Ｒ₁およびＲ₂は、それらを結合している窒素原子と一緒になって、ベンゾピリダジン、インドール、ベンゾトリアゾール、ヘキサメチレンイミン、イミダゾール、イソオキサゾール、モルホリン、フタルイミド、ピペリジン、ピペラジンおよびピロリジンからなる群から選択される置換または非置換複素環を表す）；（ｂ）ピリジン、ベンゾイミダゾール、ベンゾジオキサン、ベンゾフラザン、インドール、ベンゾチオフェン、クマリン、フラン、ヘキサメチレンイミン、イソオキサゾール、オキサジアゾール、ピペラジン、ピペリジン、ピリジン、ピリミジン、ピロリジン、キノリン、キヌクリジン、テトラヒドロピランおよびチアゾールからなる群から選択される置換または非置換複素環基；（ｃ）置換または非置換フェニル基；および（ｄ）ＯＲ₃（ここで、Ｒ₃は、Ｈ、直鎖状もしくは分枝鎖状アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆ )基、置換もしくは非置換フェニル基、置換もしくは非置換フェニルアルキル基 (ここで、アルキル基は、Ｃ₁−Ｃ₆である)、または置換もしくは非置換テトラヒドロピランからなる群から選択される基を表す）からなる群から選択される置換基を表し；Ｑは、−[(Ａ')_n−(ＣＯ)]_p−、 −Ｓ−、−(ＳＯ)−、−(ＳＯ₂)−または一価の結合からなる群から選択される連結基（ここで、Ａ’は、−ＮＲ_a−または−Ｏ−であり、Ｒ_aは、Ｈまたはアルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)である）を表し；Ｒ_b、Ｒ_cおよびＲ_dは、独立して、Ｈ、アルキル(Ｃ₁−Ｃ₄)、置換もしくは非置換フェニルまたはＣＯＯＲ（ここで、Ｒは、水素またはアルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)である）を表し；ｍは、０〜６の整数であり；ｎおよびｐは、独立して、ｏまたは１を表し；ｑおよびｒは、独立して、０〜４の整数を表し；フェニル、アリール、アラルキル、カルボアルコキシおよび複素環置換基ならびにＷ、Ｘ、ＹおよびＺ置換基は、Ｈ、アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、置換または非置換アリール(Ｃ₆−Ｃ₁₅)、置換または非置換アラルキル(Ｃ₇−Ｃ₁₅)、ハロゲン、ＣＦ₃、ＣＮ、Ｏ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、アシルオキシ(Ｃ₁−Ｃ₆アシル) 、Ｓ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、ＳＯ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、ＳＯ₂−アルキル(Ｃ₁ −Ｃ₆)、ＮＨ₂ＳＯ₂、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ＮＨＲ_'、ＮＲ'Ｒ″、アルキルＣＯＯＲ' 、ＣＯＯＲ'、アルキルＣＯＮＲ'Ｒ″、ＣＯＮＲ'Ｒ″、（ここで、Ｒ'およびＲ″は、独立して、水素またはアルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)からなる群から選択される）からなる群から選択される］で示される化合物ならびに該化合物の異性体および医薬上許容される塩の治療有効量をペスチウイルス感染に罹患し易いかまたはかかる感染に罹患している哺乳動物宿主に投与することによる方法を提供するものである。発明の詳細な説明本発明の方法で用いた化合物は、好都合には、以下に説明する一般的な合成スキームに従って公知の出発物質から製造することができる。本発明の範囲内の抗ペスチウイルス化合物の特定の具体例を以下に例示する。一般的な合成スキームでは、チオセミカルバジドをイサチンと反応させて５Ｈ −１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール−３(２Ｈ)−チオンを形成する。この生成物を適切なハロ誘導体でアルキル化して最終生成物において望まれる硫黄−置換基を得る。Ｒ_varは、式Ｉで示される化合物について前記した種々の硫黄置換基のいずれかを意味する。 in vitro研究を行って、本明細書に記載の化合物のペスチウイルスに対する抗ウイルス薬としての有用性を示す。抗ウイルス活性は、細胞培養アッセイでウシウイルス性下痢性ウイルス（ＢＶＤＶ）に対する活性に基づいて測定した。ペスチウイルスに対する抗ウイルス活性の特性もまた細胞培養で示した。動物安全性および生物学的利用能研究もまた行った。本発明の方法で用いた化合物の抗ウイルス活性の生物学的研究は、また、以下の実施例に記載する。異性体形を含む特定の利用性を有する化合物は、式：［式中、Ｒ₁およびＲ₂は、同一または異なる直鎖状または分枝鎖状アルキル基( Ｃ₁−Ｃ₆)であるか、または、Ｒ₁およびＲ₂は、それらを結合している窒素原子と一緒になって、窒素が環における唯一のヘテロ原子である５〜９個の環原子を有する置換または非置換複素環を形成し、該複素環置換基は、水素、アルキル( Ｃ₁−Ｃ₆)、ハロゲン、ＣＦ₃、ＣＮおよびＯ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)からなる群から選択され、ｍは、１−６の整数であり、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｗ、Ｘ、Ｙ、Ｚ、ｂ、ｃおよびｑは、式Ｉについての前記定義と同じである］で示される化合物およびかかる化合物の医薬上許容される塩である。本発明の方法を行うのに有用な特に好ましい化合物は、以下の化合物：３−[( ２−ピリジルメチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[２−(４−モルホリノ)エチルチオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５, ６−ｂ]インドール、３−[４−((６,７−ジメトキシ−２−オキソ−２Ｈ−１ −ベンゾピラニル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(４−(１−エチルピペリジニル)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２ ,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−((４−ベンゾジオキサニル ))メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[( ４−(２,６−ジクロロピリジル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５ ,６−ｂ]インドール、３−[４−(((２−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラニル)オキシ) ブチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールならびにこれらの化合物の異性体および医薬上許容される塩である。前記のとおり、前記式Ｉで示される化合物およびそれらの医薬上許容される塩は、ペスチウイルスに対する抗ウイルス活性を示す。本発明の方法は、家畜産業においてペスチウイルス感染（および疾患）を処置および予防するのに特に有用であり、ウシ、ブタおよびヒツジまたはペスチウイルス感染に罹患し易い他の動物を処置するのに用いてもよい。本発明の化合物は、同様に、ヒトにおいてペスチウイルス感染を処置および予防するのに有用である。さらにまた、本発明の方法および化合物は、ペスチウイルスに関連するウイルス、特に、フラビウイルスおよびヘパシウイルスによる哺乳動物種の感染および疾患の処置および予防における用途を有する。本明細書に記載の化合物は、細胞培養物、組織培養物および他の in vitro 用途でペスチウイルス感染を予防または消散するのにも有用である。例えば、細胞または組織培養増殖培地および細胞または組織培養成分において供給物としての本発明の化合物の封入体は、ペスチウイルスに予め感染していない培養物のペスチウイルス感染を予防するであろう。前記化合物は、また、当業者により決定されるようなかなり多数の処置条件下、適切な処置期間後、ペスチウイルスに感染している培地からペスチウイルスを除去するために用いてもよい。本発明のこの態様は、ウシ血清または他の哺乳動物血清からなる細胞培養物を処置するのに役立つように用いてもよい。例えば、ウシ血清は、ＢＶＤＶ、古典的ブタ熱ウイルス（豚コレラウイルス）および国境病ウイルスを含むペスチウイルスで汚染されていてもよく、本発明の方法は、、ウシ血清を用いる場合の用途においてこれらのウイルスの増殖を阻害するために用いることができる。本発明の化合物のかかる in vitro 用途における利用性は、範囲が広いであろうし、限定されないが、調査および診断研究における本発明化合物の使用ならびに獣医学用およびヒト用の診断生成物、ワクチン生成物および治療生成物の製造における使用が挙げられるであろう。本発明の方法で用いた化合物は、例えば、塩酸、臭化水素酸塩およびメチルスルホン酸を含む無機酸および有機酸と有用な塩を形成することができる。式Ｉで示される化合物の医薬上許容される塩は、当業者によく知られている以下の方法で製造される。本発明の方法で用いる抗ウイルス医薬組成物は、医薬上許容される担体または補助剤と合わせて活性成分として前記式Ｉで示される化合物１以上を含有してなる。該組成物は、錠剤、カプレット、丸剤または糖衣剤を含む種々の投与形態で製造されてよいか、または、カプセルなどの適切な容器中に充填することができ、懸濁液剤の場合、ビンに充填することができる。本明細書で用いる場合、「医薬上許容される担体」としては、望ましい特定の投与形態に適するような全ての溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散もしくは懸濁助剤、界面活性剤、等張化剤、増粘剤もしくは乳化剤、保存剤、固体結合剤、滑沢剤などが挙げられる。 Remington's Pharmaceutical Sciences,Fifteenth Edition,E.W.Martin（Mack P ublishing Co.，Easton，PA，1975）には、医薬組成物を処方するのに用いられる種々の担体およびその調製のための公知技術が開示されている。慣用の担体が望ましくない生物学的効果を生じることまたは該医薬組成物の他の成分と有害な方法で相互に作用し合うことによるなど本発明の抗ウイルス性化合物と不適合である場合を除いて、その使用は本発明の範囲内であると考えられる。本発明の医薬組成物では、活性な薬剤は、含有されているとすれば担体および／または補助剤を含む組成物の全重量に基づいて少なくとも０.５％の量で、一般に、９０重量％以下の量で存在してよい。好ましくは、活性な薬剤の割合は、該組成物の５−５０重量％に及ぶ。腸内投与または非経口投与に適している医薬上の有機または無機の固体または液体担体を用いて該組成物を調製することができる。ゼラチン、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物および動物脂肪および油、ガム、ポリアルキレングリコール、または他の公知の医薬用担体は、全て、担体として適している。本発明の化合物は、ペスチウイルスの感染力を弱めるのに有効な投与量および投与経路を用いて投与される。したがって、本明細書で用いる場合、「ペスチウイルスの感染力を弱めるのに有効な量」なる表現は、ウイルス感染の所望の処置を与えるための該抗ウイルス剤の非毒性であるが充分な量を意味する。正確な必要量は、対象の種、年齢および健康状態、感染の重篤度、特定の抗ウイルス剤およびその投与形態などに応じて、対象により変化する。抗ペスチウイルス性化合物は、好ましくは、投与の容易さおよび投薬の均一さのために投与単位形態に処方される。本明細書で用いる場合、投与単位形態は、処置される患者に適している抗ウイルス剤の物理的に別々の単位を表す。各投薬は、そのままでまたは選択された医薬担体と配合して所望の治療効果を生じるように計算された活性物質の量を含有すべきである。典型的には、本発明の抗ウイルス性化合物は、抗ウイルス剤約０.１mg〜約５０mgを含有する投与単位で投与されるであろうし、好ましくは、約１mg〜約２５mgの範囲である。本発明化合物は、処置される感染の性質および重篤度に応じて、筋肉内注射、腹腔内注射、エーロゾル、静脈内輸液などにより、経口、非経口投与される。本発明化合物は、所望の治療効果を得るために、１日あたり対象の体重kgにつき約０.０１〜約１０００mg、好ましくは、約１〜約１００mgの投与レベルで、１日１回以上経口または非経口投与される。本明細書に記載のトリアジノインドール誘導体は、ペスチウイルス感染に罹患し易いいずれの宿主にも投与することができるが、該化合物は、哺乳動物宿主、特に家畜およびヒトの処置用である。本発明化合物は、典型的には、前記日用量を送達するように１日１〜４回投与されるであろう。しかしなが、本明細書に記載の化合物および組成物の投与のための正確な方針は、必ず、処置される個々の宿主の要求、投与される処置のタイプおよびかかりつけの獣医の判断に依るであろう。本発明の方法で用いた化合物により生成された細胞培養物中でのペスチウイルスの複製に対する阻害効果の点で、ペスチウイルス感染の治療的処置のためだけではなく、ペスチウイルス予防のためにも有用であろうということが予想される。以下の実施例は、さらに詳細に本発明を記載するために挙げられる。今、本発明を行おうとしている好ましいモードを記載したこれらの実施例は、本発明を説明しようとするものであり、本発明を限定しようとするものではない。実施例１は、本発明の方法で用いられる化合物の一の化学合成を説明する。実施例１３−[((２−ジプロピルアミノ)エチル)チオ]−５Ｈ− １,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールの製造例５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール−３(２Ｈ)−チオンイサチン７.３６ｇ(５０.０ミリモル)、水２５０ml、チオセミカルバジド５. ０１ｇ（５５.０ミリモル）および炭酸カリウム１０.４ｇ（７５.０ミリモル）の混合物を加熱還流させた。３０分後、得られた赤い溶液を室温に冷却させ、セライトを介して濾過した。氷酢酸でｐＨを４.５に調節し、得られた黄色固体を回収し、熱エタノールで洗浄した。乾燥後、物質８.０４ｇを得た。(J．Medicinal Chemistry，15:277(1972))。ｂ．３−[((２−ジプロピルアミノ)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール−３(２Ｈ)−チオン２２２mg(１.１０ミリモル)、炭酸カリウム粉末３４０mg（２.５ミリモル）および乾燥ジメチルスルホキシド２.５mlの混合物にジプロピルアミノエチルクロリド２００mg（１.００ミリモル）を添加した。該混合物を１２時間攪拌し、次いで、濾過により回収し、水で洗浄し、乾燥させて、分析により標記化合物であることが判明した黄色の固体２５８mgを得た。所望の硫黄置換基を得るのに適している特定のハロ誘導体の選択により、本発明の範囲内の他の生成物は、同様の反応により製造することができる。特に好ましくは、下記表に示されている構造を有する反応物である。本発明化合物は、また、好都合には、下記の別の合成スキームに従って、公知の出発物質から製造することができる。適切なアルコールを用いて所望の硫黄置換基を得る別の合成スキームは、対応するハロ誘導体が入手可能ではない場合に用いられる。別の合成では、５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール −３(２Ｈ)−チオールをアゾジカルボン酸ジエチルの存在下で反応させて、所望の生成物の形成においてアルコール反応物のカップリングを行う。該反応から得られる酸素は、酸素脱除剤であるトリフェニルホスフェンにより吸収して、トリフェニルホスフェンオキシドを形成する。実施例２８は、実施例１で製造した化合物の合成のための別の合成方法を説明する。実施例２８３−[((２−ジプロピルアミノ)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４− トリアジノ[５,６−ｂ]インドールの別の製造例５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール−３−チオール５０６mg( ２.５ミリモル)、乾燥ジメチルホルムアミド２０ml、トリフェニルホスフェン７２１mg（２.７ミリモル）および２−ジプロピルアミノエタノール３９９mg（２. ７５ミリモル）の懸濁液にアゾジカルボン酸ジエチル４３ml（２.８６ミリモル）の乾燥ジメチルホルムアミド５ml中溶液を滴下した。３０分後、完全な溶液が生じた。該溶液を室温で１２時間撹拌し、次いで、水５０ml中に注いだ。得られた固体を濾過により回収し、水で洗浄し、酢酸エチル５０mlに溶解させ、分液漏斗に移した。該溶液を２５mlの１Ｎ塩酸および水で３回洗浄した。合わせた水性相をセライトを介して濾過し、次いで、１５％水酸化ナトリウムで塩基性にした。分離した固体を回収し、水で洗浄し、乾燥させて、分析により標記化合物であることが判明した黄色固体４５７mgを得た。実施例２９は、細胞培養物中でのＢＶＤＶのウイルス複製の阻害における本発明の方法で用いた化合物の効力を説明する。実施例２９ペスチウイルス複製の阻害についての細胞培養物アッセイ多くのウイルスの複製は、種々の細胞または組織培養物系で研究室において定量的に評価される。かかる in vitro 培養法は、いくつかのペスチフイルスおよびフラビウイルスの複製の定量的測定のために当業者により入手可能かつ利用可能である。ＢＶＤＶ複製の in vitro 定量的指標のために以下の方法を用いた。この実施例に記載した方法を用い、本発明の方法で用いた化合物を、細胞培養物におけるウイルスの複製を阻害する能力について評価した。種々の濃度の化合物を培養培地に添加することにより、ウイルス複製に対する化合物の用量応答効果を測定することができる。このアッセイにおけるＢＶＤＶ複製の阻害の定量的指標は、細胞培養物中でのウイルス複製を化合物の不在下で観察したウイルス複製と比較して５０％阻害する該化合物の濃度である(５０％阻害濃度、ＩＣ₅₀)。本発明の方法で用いた抗ペスチウイルス性化合物を、細胞培養物アッセイにおいてマディン・ダービー（Madin Darby）種ウシの腎臓（ＭＤＢＫ）細胞上でＢＶＤＶに対する抗ウイルス活性についてスクリーンした。標準的な９６−ウエル培養プレートに、５％ウマ血清で補足したダルベッコ修飾イーグル培地２００μ Ｌ中ＭＤＢＫ細胞１〜２×１０⁴個を接種して、集密度６０％で細胞の単層を得た。６時間後、該培地を除去し、各ウエルにおける細胞単層を、予め力価測定した２％ウマ血清で補足したＤＭＥＭ中のＢＶＤＶ（ＮＡＤＬ株）（M．S．Collett ら，Virology 165:191-199(1988)）の溶液１５０μＬで感染させて、感染後３６ −４０時間後の細胞単層の８５−１００％の分解（細胞変性効果）を得た。この実験の被験化合物のＩＣ₅₀値を測定するために、最高の最終試験濃度のために望ましい濃度の２００倍の化合物濃度でＤＭＳＯ溶媒中で試験化合物の１０種類の連続二倍希釈液を調製した。試験化合物−ＤＭＳＯ溶液を２％ウマ血清を含有するＤＭＥＭ中で５０倍希釈した。この希釈液５０μＬをウイルス感染プレートのウエル中に存在する１５０μＬ容量に添加して、各ウエル中の最終ＤＭＳＯ濃度０.５％を得た。ウイルス対照体（ＶＣ；試験化合物を含まない）および細胞培養物対照体（ＣＣ；ウルイスも試験化合物も含まない）のウエルが各９６ウエルプレートに含まれた。アッセイポイントは、反復で、通常四重反復で、処理された。次いで、プレートを２.５％二酸化炭素を含有する増湿雰囲気で３７℃ で３６−４０時間インキュベートした。インキュベーション期間の終わりに、グルタルアルデヒドの水中５％溶液１００μＬを各ウエルに添加し、該ウエルを室温で１時間インキュベートした。固定剤を除去し、細胞をクリスタルバイオレットの０.１％水溶液で１５−３０分間染色した。プレートを洗浄および乾燥させた後、５７０nmでウエルの光学濃度を測定した（ＯＤ₅₇₀)。試験化合物についてのＩＣ₅₀値を決定するために、プレート上の全てのウエルのＯＤ₅₇₀測定値からプレート上のウイルス対照ウエル（ＶＣ）のＯＤ₅₇₀測定値の平均値を引いた。次いで、下記式：［式中、Ｙは、２で割った細胞対照ウエル（ＣＣ）の平均ＯＤ₅₇₀値を表し；Ｂは、Ｙに最も近くかつＹ未満の化合物希釈のウエルの平均ＯＤ₅₇₀値を表し；Ａは、Ｙに最も近くかつＹを超える化合物希釈のウエルの平均ＯＤ₅₇₀値を表し；Ｌは、Ｂでの化合物濃度を表し、Ｈは、Ａでの化合物濃度を表す］に従って、ＩＣ₅₀値を算出した。本発明の方法で用いた化合物についてのＢＶＤＶ複製の阻害についての細胞培養アッセイの結果を表２に示す。細胞培養物中でウイルス複製の５０％阻害を達成するのに必要な薬物化合物の低い濃度は、本発明の方法で用いた薬物化合物がペスチウイルス複製プロセスの阻害時に有効であることを示す。実施例３０は、本発明の方法で用いるための好ましい化合物の一によるペスチウイルス複製の特異性を説明する。実施例３０ペスチウイルス複製の阻害薬の特異性についてのアッセイ治療的に有用なウイルス複製の阻害薬について、それらは、それらの作用において明らかな特異性を示さなければならない。すなわち、該阻害薬は、それらが関連のないウイルスを阻害するかまたは細胞の健康に必須の活性を阻害するような非特異的であってはならない。本明細書に記載の化合物の特異性および選択性を示すために、本発明の方法で用いた化合物を、パラミクソウイルス(ＲＳウイルス)、オルソミクソウイルス( インフルエンザウイルス)、ピコルナウイルス（コクサッキーＢ３ウイルス）およびヘルペスウイルス（II型単純疱疹ウイルス）を含むペスチウイルスに関連のないいくつかのウイルスの細胞培養複製を阻害する能力について評価した。実施例１、７および９で製造した化合物を用いる特異性アッセイの結果を表３に示す。実施例１、７および９で製造した化合物は、低濃度で、ＢＶＤＶ複製を阻害するのに充分であった；しかしながら、これらの化合物は、非常に高い濃度でさえ、該アッセイで試験した関連のないウイルスを阻害しなかった。表３における結果は、実施例１、７および９で製造した化合物がペスチウイルスを選択的に阻害し、かつ、試験した用量で関連のないウイルスに対して活性を示さなかったことを示す。実施例３１は、細胞生存能を測定することにより本発明の化合物が正常な細胞の健康に有毒または有害ではないことを示す。実施例３１ＭＴＴ細胞毒性アッセイ本発明の化合物が正常な細胞の健康に有害ではないかまたは障害を及ぼさないことを示すために、本発明の方法で用いた化合物を in vitro 細胞毒性アッセイで評価した。細胞の増殖に対する化合物の細胞毒性効果を測定するための一の有用なアッセイは、テトラゾリウムをベースとした比色測定法である(PauwelsらJ ．Virol．Methods 20: 309-321 (1988))。このアッセイは、生存可能な細胞による３−(４,５−ジメチルチアゾール−２−イル)−２,５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）の in situ還元を定量的に検出することにより、細胞生存能、したがって、細胞毒性を測定する。ウエルにつき細胞４×１０³個の密度で２％ウマ血清を含有するＤＭＥＭ中で細胞を９６ウエルプレートに接種する。３７℃および５％ＣＯ₂で４時間インキュベートした後、１％ＤＭＳＯ中の化合物の２倍連続希釈液（または溶媒単独）を四重反復ウエルに添加し、該プレートを３７℃および５％ＣＯ₂でさらに６８時間インキュベートした。これは、３〜４細胞倍化（cell doubling）と等価である。培養培地を除去し、細胞をリン酸塩緩衝化生理食塩水（pＨ７.２）中１mg／mlのＭＴＴで３７℃および５％ＣＯ₂で４時間処理する。未反応ＭＴＴの除去後、生存可能な細胞により産生された還元ブルーホルマザン結晶をイソプロパノール中０.０４ＮＨＣｌの添加により可溶化する。適切なマイクロプレートリーダーを用いて各ウエルの５７０nmでの吸光度（Ａ₅₇₀）を測定する。溶媒単独で処理した対照ウエルの光学濃度に対する化合物で処理した細胞の光学濃度のパーセンテージとして細胞生存能を表す。対照の≧７５％の光学濃度を生じる最高の化合物濃度を細胞性細胞毒性値（ＣＣ₇₅）と表す。実施例１、７および９で製造した化合物を用いるＭＴＴ細胞毒性アッセイの結果を表４に示す。表４に示すとおり、細胞性細胞毒性値（ＣＣ₇₅）は、これらの化合物についての抗ウイルス値（ＩＣ₅₀）よりもかなり高い。この結果は、本発明化合物が非常に選択であり、治療上有効な用量で、該化合物が正常な細胞の健康に有害に影響を及ぼさないことを示す。この選択性の指標は、高い選択的インデックス値（ＳＩ）により示される。このＳＩは、ＣＣ₇₅／ＩＣ₅₀と定義される。実施例３２および３３は、動物の安全性試験および生物学的利用能試験の結果を示す。実施例３２動物の安全性試験生物におけるペスチウイルス病原体の感染の予防および処置に有用な細胞培養物中のペスチウイルス複製の阻害剤について、該阻害剤は、生物において安全でなければならない。最大耐量（ＭＴＤ）として知られている化合物の安全性の一の有用な指標は、実験動物に投与した場合に該動物が耐える化合物の最高用量と定義される。このレベルを超える用量は、明白に、該動物に有毒であるかまたは致命的である。本発明の方法を行うのに有用な経口製剤または組成物は、以下の方法に従って調製された。沸騰水１リットルにメチルセルロース７.５gを添加することによりメチルセルロースの０.７５％溶液を調製した。該溶液を室温にし、メチルセルロースが完全に溶解するまで連続して攪拌しつつ４℃にした。すりガラスホモジナイザー中で０.７５％メチルセルロース溶液の所望の最終容量の半分に本発明の方法で用いた化合物の適切な量を添加した。均質化により該化合物およびメチルセルロース溶液の均質な懸濁液を調製した。均質化した懸濁液を分離容器に移した。ホモジナイザーを０.７５％メチルセルロース溶液の残り半分ですすいだ。該洗液を均質化した懸濁液と合わせ、この合わせた溶液を渦巻攪拌することにより該溶液の完全な均質性を確実にした。該懸濁液を４℃で貯蔵した。本発明の化合物の安全性を評価するために、本発明の方法で用いた化合物のメチルセルロース製剤を実験マウスに投与した。０.５mＬ容量中の各化合物の単回投与量を、各グループが８〜９週齢の体重２５〜３０ｇの雌性スイス・ウエブスター種マウス５匹からなる試験動物のグループに経口栄養法により投与した。化合物の増加する用量を投与し、７日間にわたって生存している動物を評価することによりＭＴＤを決定した。表５は、本発明の方法で用いた３つの化合物を含むこの実験による結果を示す。表５で得られた結果は、実施例１および７の化合物が試験した最高用量よりも大きいかまたは該最高用量と等しいＭＴＤを有するので、これらの化合物が試験した全ての用量で安全であったことを示している。実施例９で製造した化合物のＭＴＤは、２１４mg／kgであることが決定された。実施例３３生物学的利用能実験有用な阻害性化合物は、生物学的に利用可能でなければならない。このことは、生物へのかかる阻害薬の投与後、該阻害薬が、ウイルス複製が生じる体液または組織中に存在し利用可能でなければならないことを意味する。典型的には、化合物が投与された生物の血漿または血清中の化合物レベルの測定は、化合物の生物学的利用能の指標を提供する。本発明の化合物の生物学的利用能を評価するために、前記実施例３２におけると同様に製造した化合物のメチルセルロース処方を２種類の用量：２１mg／kgおよび２１４mg／kgで前記した実験マウスに投与した。経口栄養法による化合物の投与の３０分後および９０分後にマウス５匹のグループを心臓穿刺により瀉血し、それらの血液をプールし、血清を調製した。次いで、以下のとおり、血清の抗ウイルス性効力の生物学的評価により、これらの血清中の化合物のレベルを測定した。正常なマウス血清に既知量の試験下化合物を添加することにより、各試験化合物についての濃度曲線標準を確立した。これらのスパイクされた参照血清および試験化合物を投与したマウス由来の血清の連続希釈液を２％ウマ血清で補足したＤＭＥＭ中で調製した。これらの希釈液を実施例２９において前記した９６ウエルプレート上で平板培養したＢＶＤＶ感染ＭＤＢＫ細胞の培地に添加した。次いで,該プレートを２.５％二酸化炭素を含有する増湿雰囲気で３７℃でインキュベートした。インキュベーション機間の終わりに、細胞単層をグルタルアルデヒドで固定し、該細胞を実施例２９に記載したと同様にクリスタルバイオレットで染色した。ウエルの光学濃度を５７０nmで測定した。ウイルス感染細胞変性効果から細胞単層の５０％を保護した参照化合物の濃度を決定した。これらの値を用いて、経口投与したマウスの血清中の化合物の濃度を推断した。例えば、スパイクしたマウス参照血清で評価した実施例１で調製した化合物についてのＩＣ₅₀値を０.００４μＭであると決定した。このＩＣ₅₀値は、３１４倍に希釈した実施例１で調製した化合物を用量２１４mg／kgで投与してから３０分後のマウス由来の血清で得られた。参照血清ＩＣ₅₀値に試験血清希釈因子をかけることにより_、試験血清中の化合物濃度を１.１μＭであると決定した。表６に示すとおり、試験した３つの化合物の各々の有意なレベルがマウス血清中に見られた。細胞培養物中で測定されたこれらの化合物についてのＩＣ₅₀値に基づいて(実施例１で製造した化合物については０.００６μＭ、実施例７で製造した化合物については０.０６μＭ、実施例９で製造した化合物については０.０３μＭ)、化合物をマウスに経口投与した後に血清中で、３つの化合物の全てのベルが in vitro 効果を示すものよりも過剰であった。これらの結果は、本発明化合物の相当な生物学的利用能を示す。in vitro 効力と合わせて、実施例２９− ３２で示した化合物の選択性および安全性などの生物学的利用能データは、本発明の方法で用いた化合物の受容者における抗ウイルス治療効力を予想させる。特定の好ましい具体例により本発明を記載し例示したが、他の具体例は、当業者に明白であろう。例えば、別の試験は、動物およびヒトの両方におけるフラビウイルスおよびヘパシウイルス感染の予防および処置における本発明の方法の有用性を示す。したがって、本発明は、記載され例示された特定の具体例に限定されず、その全体的な範囲が添付した請求の範囲により明確に記載された本発明の精神から逸脱することなく修飾または変更することができる。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９９年２月１２日（１９９９．２．１２）【補正内容】（１）明細書の記載を以下のとおり補正する。（ｉ）第１頁下から１４行、「：」とあるを削除する。（ii）第３頁６行（構造式(Ｉ)を１行とする）、「Ｃ₆」とあるを「Ｃ₈」と補正する。（iii）第１９頁１１行、「ペスチフイルス」とあるを「ペスチウイルス」と補正する。（iv）第２６頁１７行、「インキュベーション機間」とあるを「インキュベーション期間」と補正する。（２）請求の範囲を別紙のとおり補正する。補正した請求の範囲１．ペスチウイルスに感染しているかまたは感染し易い哺乳動物宿主におけるペスチウイルス感染の予防または治療用化合物であって、下記式：［式中、Ａは、（ａ）ＮＲ₁Ｒ₂（ここで、Ｒ₁およびＲ₂は、独立して、Ｈ、直鎖状または分枝鎖状アルキル基(Ｃ₁−Ｃ₆)、置換または非置換アリール基、置換または非置換アラルキル基（ここで、アルキル基は、Ｃ₁−Ｃ₆である）、アルコキシ基(Ｃ₁−Ｃ₆ )、アシル基(Ｃ₁−Ｃ₇)、置換または非置換カルボアルコキシ基（Ｃ₁−Ｃ ₈ アルコキシ）からなる群から選択された基であるか、または、Ｒ₁およびＲ₂は、それらを結合している窒素原子と一緒になって、ベンゾピリダジン、インドール、ベンゾトリアゾール、ヘキサメチレンイミン、イミダゾール、イソオキサゾール、モルホリン、フタルイミド、ピペリジン、ピペラジンおよびピロリジンからなる群から選択される置換または非置換複素環を表す）；（ｂ）ピリジン、ベンゾイミダゾール、ベンゾジオキサン、ベンゾフラザン、インドール、ベンゾチオフェン、クマリン、フラン、ヘキサメチレンイミン、イソオキサゾール、オキサジアゾール、ピペラジン、ピペリジン、ピリジン、ピリミジン、ピロリジン、キノリン、キヌクリジン、テトラヒドロピランおよびチアゾールからなる群から選択される置換または非置換複素環基；（ｃ）置換または非置換フェニル基；および（ｄ）ＯＲ₃（ここで、Ｒ₃は、Ｈ、直鎖状もしくは分枝鎖状アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆ )基、置換もしくは非置換フェニル基、置換もしくは非置換フェニルアルキル基（ここで、アルキル基は、Ｃ₁−Ｃ₆である）、または置換もしくは非置換テトラヒドロピランからなる群から選択される基を表す）からなる群から選択される置換基を表し；Ｑは、−[(Ａ')_n−(ＣＯ)]_p−、−Ｓ −、−(ＳＯ)−、−(ＳＯ₂)−または一価の結合からなる群から選択される連結基を表し（ここで、Ａ’は、−ＮＲ_a−または−Ｏ−であり、Ｒ_aは、Ｈまたはアルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)である）；Ｒ_b、Ｒ_cおよびＲ_dは、独立して、Ｈ、アルキル(Ｃ₁ −Ｃ₄)、置換もしくは非置換フェニルまたはＣＯＯＲを表し（ここで、Ｒは、水素またはアルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)である）；ｍは、０〜６の整数であり；ｎおよびｐは、独立して、０または１を表し；ｑおよびｒは、独立して、０〜４の整数を表し；フェニル、アリール、アラルキル、カルボアルコキシおよび複素環置換基ならびにＷ、Ｘ、ＹおよびＺ置換基は、Ｈ、アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、置換または非置換アリール(Ｃ₆−Ｃ₁₅)、置換または非置換アラルキル(Ｃ₇−Ｃ₁₅)、ハロゲン、ＣＦ₃、ＣＮ、Ｏ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、アシルオキシ(Ｃ₁−Ｃ₆アシル)、Ｓ −アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、ＳＯ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、ＳＯ₂−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆ )、ＮＨ₂ＳＯ₂、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ＮＨＲ'、ＮＲ'Ｒ″、アルキルＣＯＯＲ'、ＣＯＯＲ'、アルキルＣＯＮＲ'Ｒ″、ＣＯＮＲ'Ｒ″、（ここで、Ｒ'およびＲ″は、独立して、水素またはアルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)からなる群から選択される）からなる群から選択される］で示される化合物ならびに該化合物の異性体および医薬上許容される塩。２．ＡがＮＲ₁Ｒ₂を表し、Ｒ₁およびＲ₂が同一または異なる直鎖状または分枝鎖状アルキル基(Ｃ₁−Ｃ₆)を表すか、または、Ｒ₁およびＲ₂がそれらを結合している窒素原子と一緒になって、窒素が環中の唯一のヘテロ原子である５〜９個の環原子を有する置換または非置換複素環であり、該複素環置換基が水素、アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、ハロゲン、ＣＦ₃、ＣＮおよびＯ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)からなる群から選択され、ｍが１−６の整数である請求項１記載の化合物。３．化合物が３−[(２−ピリジルメチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ [５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(４−モルホリノ)エチル)チオ]−５Ｈ−１, ２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[４−((６,７−ジメトキシ−２ −オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラニル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−４−(１−エチルピペリジニル)エチル) チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(ベンゾジオキサニル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(４−(２,６−ジクロロピリジル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４− トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[４−(((２−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラニル)オキシ)ブチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールおよび８−メトキシ-３−[(２−(４−モルホリノ)エチル)チオ]−５Ｈ−１, ２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]−インドールからなる群から選択される請求項１記載の化合物。４．化合物が３−[(２−ジエチルアミノエチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−ジイソプロピルアミノエチル)チオ] −５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(１−メチル−２ −ジメチルアミノエチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−ジメチルアミノエチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ [５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(１−ピロリジニル)エチル)チオ]−５Ｈ− １,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(１−ピペリジニル) エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(３ −(１−ピペリジニル)プロピル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ ]インドール、３−[(２−(１−ヘキサメチレンイミノ)エチル)チオ]−５Ｈ−１, ２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(４−ピリジニルメチル)チオ] −５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(４−モルホリニル)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３ −[(２−ジブチルアミノエチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ ]インドール、３−[４−((６,７−ジメトキシ−２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラニル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[２−(１−(４−(シアノピペリジニル))エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(４−(１−エチルピペリジニル)) エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[((２ −ベンゾジオキサニル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ] インドール、３−[(４−(２,６−ジクロロピリジル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２ ,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(４−(２−(テトラヒドロ−２Ｈ −ピラニル)オキシ)ブチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ−[５,６−ｂ] インドール、３−[(２−ジプロピルアミノエチル)チオ]−８−メチル−５Ｈ−１ ,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(１−ヘキサメチレンイミノ)エチル)チオ]−８−メチル−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(１−ピペリジニル)エチル)チオ]−８−ブロモ−５Ｈ−１, ２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(１−ヘキサメチレンイミノ)エチル)チオ]−８−ブロモ−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(１−ヘキサメチレンイミノ)エチル)チオ)−８−フルオロ− ５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(１−ピペリジニル)エチル)チオ]−８−メチル−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、８−フルオロ−３−[(２−(１−ピペリジニル)エチル)チオ]−５Ｈ−１ ,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールおよび３−[((２−ジプロピルアミノ )エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールからなる群から選択される請求項１記載の化合物。５．化合物が３−[(２−ジプロピルアミノエチル)チオ]−８−メチル−５Ｈ− １,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の化合物。６．化合物が３−[(２−(１−ヘキサメチレンイミノ)エチル)チオ]−８−メチル−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]−インドールである請求項１記載の化合物。７．化合物が３−[((２−ジプロピルアミノ)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４− トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の化合物。８．活性成分としてペスチウイルスの感染力を弱めるかまたは抑制するのに有効な量の請求項１〜７のいずれか１項記載の化合物、および医薬上許容される媒質を含有してなる、ペスチウイルスに感染しているかまたは感染し易い哺乳動物における該感染の治療または予防のための処置用組成物。９．活性成分および医薬上許容される賦形剤を含有してなる固体形態の請求項８記載の医薬組成物。１０．活性成分および医薬上許容される希釈剤を含有してなる液体形態の請求項８記載の医薬組成物。１１．単位当たり活性成分約０．１〜約５０mgを含有してなる投与単位形態の請求項８記載の組成物。１２．ペスチウイルスによる感染に罹患し易いかまたはペスチウイルスに感染している培養物中の哺乳動物細胞の処置方法であって、請求項１〜７いずれか１項記載の化合物の有効量を該培養物に投与することからなることを特徴とする方法。１３．ペスチウイルスによる感染に罹患し易いかまたはペスチウイルスに感染している生物学的材料のイン・ビトロ処置方法であって、請求項１〜７いずれか１項記載の化合物の有効量を該材料に投与することからなることを特徴とする方法。１４．ペスチウイルス感染およびペスチウイルス感染に関連している疾患の治療のための請求項１〜７いずれか１項記載の化合物。１５．ペスチウイルス感染およびペスチウイルス感染に関連している疾患の予防のための請求項１〜７いずれか１項記載の化合物。１６．ペスチウイルス感染およびペスチウイルス感染に関連している疾患の治療薬の製造のための請求項１〜７いずれか１項記載の化合物の使用。１７．ペスチウイルス感染およびペスチウイルス感染に関連している疾患の予防薬の製造のための請求項１〜７いずれか１項記載の化合物の使用。１８．ヒト以外のペスチウイルス感染に罹患しているかまたは罹患し易い哺乳動物宿主におけるペスチウイルス感染の治療方法または予防方法であって、請求項１記載の化合物の治療有効量を該宿主に投与することを特徴とする方法。

Claims

【特許請求の範囲】１．ペスチウイルスに感染しているかまたは感染し易い哺乳動物宿主におけるペスチウイルス感染の予防方法または処置方法であって、下記式：［式中、Ａは、（ａ）ＮＲ₁Ｒ₂（ここで、Ｒ₁およびＲ₂は、独立して、Ｈ、直鎖状または分枝鎖状アルキル基(Ｃ₁−Ｃ₆)、置換または非置換アリール基、置換または非置換アラルキル基(ここで、アルキル基は、Ｃ₁−Ｃ₆である)、アルコキシ基(Ｃ₁−Ｃ₆) 、アシル基(Ｃ₁−Ｃ₇)、置換または非置換カルボアルコキシ基(Ｃ₁−Ｃ₆アルコキシ)からなる群から選択された基であるか、または、Ｒ₁およびＲ₂は、それらを結合している窒素原子と一緒になって、ベンゾピリダジン、インドール、ベンゾトリアゾール、ヘキサメチレンイミン、イミダゾール、イソオキサゾール、モルホリン、フタルイミド、ピペリジン、ピペラジンおよびピロリジンからなる群から選択される置換または非置換複素環を表す）；（ｂ）ピリジン、ベンゾイミダゾール、ベンゾジオキサン、ベンゾフラザン、インドール、ベンゾチオフェン、クマリン、フラン、ヘキサメチレンイミン、イソオキサゾール、オキサジアゾール、ピペラジン、ピペリジン、ピリジン、ピリミジン、ピロリジン、キノリン、キヌクリジン、テトラヒドロピランおよびチアゾールからなる群から選択される置換または非置換複素環基；（ｃ）置換または非置換フェニル基；および（ｄ）ＯＲ₃（ここで、Ｒ₃は、Ｈ、直鎖状もしくは分枝鎖状アルキル(Ｃ₁− Ｃ₆)基、置換もしくは非置換フェニル基、置換もしくは非置換フェニルアルキル基(ここで、アルキル基は、Ｃ₁−Ｃ₆である)、または置換もしくは非置換テトラヒドロピランからなる群から選択される基を表す）からなる群から選択される置換基を表し；Ｑは、−[(Ａ')_n−(ＣＯ)]_p−、−Ｓ −、−(ＳＯ)−、−(ＳＯ₂)−または一価の結合からなる群から選択される連結基を表し(ここで、Ａ’は、−ＮＲ_a−または−Ｏ−であり、Ｒ_aは、Ｈまたはアルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)である)；Ｒ_b、Ｒ_cおよびＲ_dは、独立して、Ｈ、アルキル(Ｃ₁ −Ｃ₄)、置換もしくは非置換フェニルまたはＣＯＯＲを表し(ここで、Ｒは、水素またはアルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)である)；ｍは、０〜６の整数であり；ｎおよびｐは、独立して、０または１を表し；ｑおよびｒは、独立して、０〜４の整数を表し；フェニル、アリール、アラルキル、カルボアルコキシおよび複素環置換基ならびにＷ、Ｘ、ＹおよびＺ置換基は、Ｈ、アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、置換または非置換アリール(Ｃ₆−Ｃ₁₅)、置換または非置換アラルキル(Ｃ₇−Ｃ₁₅)、ハロゲン、ＣＦ₃、ＣＮ、Ｏ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、アシルオキシ(Ｃ₁−Ｃ₆アシル)、Ｓ− アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、ＳＯ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、ＳＯ₂−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆) 、ＮＨ₂ＳＯ₂、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ＮＨＲ'、ＮＲ'Ｒ″、アルキルＣＯＯＲ'、ＣＯＯＲ'、アルキルＣＯＮＲ'Ｒ″、ＣＯＮＲ'Ｒ″、（ここで、Ｒ'およびＲ″は、独立して、水素またはアルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)からなる群から選択される）からなる群から選択される］で示される化合物ならびに該化合物の異性体および医薬上許容される塩の治療有効量を該哺乳動物宿主に投与することからなることを特徴とする方法。２．ＡがＮＲ₁Ｒ₂を表し、Ｒ₁およびＲ₂が同一または異なる直鎖状または分枝鎖状アルキル基(Ｃ₁−Ｃ₆)を表すか、または、Ｒ₁およびＲ₂がそれらを結合している窒素原子と一緒になって、窒素が環中の唯一のヘテロ原子である５〜９個の環原子を有する置換または非置換複素環であり、該複素環置換基が水素、アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)、ハロゲン、ＣＦ₃、ＣＮおよびＯ−アルキル(Ｃ₁−Ｃ₆)からなる群から選択され、ｍが１−６の整数である請求項１記載の方法。３．化合物が３−[(２−ピリジルメチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ [５,６−ｂ]インドール、３−[２−(４−モルホリノ)エチルチオ]−５Ｈ−１,２, ４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[４−((６,７−ジメトキシ−２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラニル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[ ５,６−ｂ]インドール、３−[(２−４−(１−エチルピペリジニル)エチル)チオ] −５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(２−(ベンゾジオキサニル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドール、３−[(４−(２,６−ジクロロピリジル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールおよび３−[４−(((２−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラニル)オキシ)ブチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールからなる群から選択される請求項１記載の方法。４．化合物が３−[(２−ジエチルアミノエチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。５．化合物が３−[(２−ジイソプロピルアミノエチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４ −トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。６．化合物が３−[(１−メチル−２−ジメチルアミノエチル)チオ]−５Ｈ−１ ,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。７．化合物が３−[(２−ジメチルアミノエチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。８．化合物が３−[(２−(１−ピロリジニル)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４− トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。９．化合物が３−[(２−(１−ピペリジニル)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４− トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１０．化合物が３−[(３−(１−ピペリジニル)プロピル)チオ]−５Ｈ−１,２, ４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１１．化合物が３−[(２−(１−ヘキサメチレンイミノ)エチル)チオ]−５Ｈ− １,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１２．化合物が３−[(４−ピリジニルメチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１３．化合物が３−[(２−(４−モルホリニル)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４ −トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１４．化合物が３−[(２−ジブチルアミノエチル)チオ]−５Ｈ-１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１５．化合物が３−[４−((６,７−ジメトキシ−２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラニル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１６．化合物が３−[２−(１−(４−(シアノピペリジニル))エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１７．化合物が３−[(２−(４−(１−エチルピペリジニル))エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１８．化合物が３−[((２-ベンゾジオキサニル)メチル)チオ]−５Ｈ−１,２, ４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。１９．化合物が３−[(４−(２,６−ジクロロピリジル)メチル)チオ]−５Ｈ− １,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２０．化合物が３−[(４−(２−(テトラヒドロ−２Ｈ−ピラニル)オキシ)ブチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ−[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２１．化合物が３−[(２−ジプロピルアミノエチル)チオ]−８−メチル−５Ｈ −１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２２．化合物が３−[(２−(１−ヘキサメチレンイミノ)エチル)チオ]−８−メチル−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２３．化合物が３−[(２−(１−ピペリジニル)エチル)チオ]−８−ブロモ−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２４．化合物が３−[(２−(１−ヘキサメチレンイミノ)エチル)チオ]−８−ブロモ−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２５．化合物が３−[(２−(１−ヘキサメチレンイミノ)エチル)チオ)−８−フルオロ−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２６．化合物が３−[(２−(１−ピペリジニル)エチル)チオ]−８−メチル−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２７．化合物が８−フルオロ−３−[(２−(１−ピペリジニル)エチル)チオ]− ５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２８．化合物が３−[((２−ジプロピルアミノ)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４ −トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。２９．化合物が８−アミノ−３−[((２−ジプロピルアミノ)エチル)チオ]−５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。３０．化合物が８−メトキシ−３−[(２−(４−モルホリニル)エチル)チオ]− ５Ｈ−１,２,４−トリアジノ[５,６−ｂ]インドールである請求項１記載の方法。３１．ペスチウイルス感染がウシウイルス性下痢性ウイルスまたはウシウイルス性下痢性ウイルスの株、変種、血清型もしくは表現型に起因する請求項１記載の方法。３２．ペスチウイルス感染が古典的ブタ熱ウイルス（豚コレラウイルス）または古典的ブタ熱ウイルスの株、変種、血清型もしくは表現型に起因する請求項１記載の方法。３３．ペスチウイルス感染が国境病ウイルスまたは国境病ウイルスの株、変種、血清型もしくは表現型に起因する請求項１記載の方法。３４．ペスチウイルスがヒトペスチウイルスまたはヒトペスチウイルスの株、変種、血清型もしくは表現型に起因する請求項１記載の方法。３５．感染がペスチウイルスに分類学的に関係しているウイルスに起因する請求項１記載の哺乳動物宿主における感染の予防方法または処置方法。３６．感染がフラビウイルスに起因する請求項１記載の哺乳動物宿主における感染の予防方法または処置方法。３７．感染がヘパシウイルスに起因する請求項１記載の哺乳動物宿主における感染の予防または処置方法。３８．化合物が１日あたり宿主の体重１キログラムにつき化合物約１〜約１００mgを含有する単位投与量形態で投与される請求項１記載の方法。３９．単位投薬が医薬上許容される担体を含有する請求項３８記載の方法。４０．化合物が非経口投与される請求項１記載の方法。４１．化合物が経口投与される請求項１記載の方法。４２．化合物がペスチウイルス感染の開始前に投与される請求項１記載の方法。４３．化合物がペスチウイルス感染の開始後に投与される請求項１記載の方法。４４．ペスチウイルスによる感染に罹患し易いかまたはペスチウイルスに感染している培養物中の哺乳動物細胞の処置方法であって、請求項１記載の化合物の有効量を該培養物に投与することからなることを特徴とする方法。４５．ペスチウイルスによる感染に罹患し易いかまたはペスチウイルスに感染している生物学的材料中の哺乳動物細胞の処置方法であって、請求項１記載の化合物の有効量を該培養物に投与することからなることを特徴とする方法。