JP2000329767A - 酵素免疫測定装置及び該装置を用いる測定法 - Google Patents
酵素免疫測定装置及び該装置を用いる測定法Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 簡易型ＥＩＡ装置において、装置の展開器材
に設けた検出ゾーンのソグナルから検体中の抗原又は抗
体を感度よく測定する。 【解決手段】 展開液によって展開器材を展開した酵素
標識試薬が充分に反応させた後、糖又は水溶性高分子化
合物にて基質を遅延展開させる手段をもつ装置を提供す
る。
に設けた検出ゾーンのソグナルから検体中の抗原又は抗
体を感度よく測定する。 【解決手段】 展開液によって展開器材を展開した酵素
標識試薬が充分に反応させた後、糖又は水溶性高分子化
合物にて基質を遅延展開させる手段をもつ装置を提供す
る。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、酵素標識試薬を充分に
反応させた後に基質が反応するように、糖又は水溶性高
分子化合物にて基質を遅延展開させる手段をもつ簡易型
酵素免疫測定装置、及び該装置を用いる酵素免疫測定法
（ＥＩＡ）に関する。
反応させた後に基質が反応するように、糖又は水溶性高
分子化合物にて基質を遅延展開させる手段をもつ簡易型
酵素免疫測定装置、及び該装置を用いる酵素免疫測定法
（ＥＩＡ）に関する。
【０００２】
【従来の技術】輸液可能なメンブレンを利用した簡易型
ＥＩＡが知られている。この方法では基質を展開液に溶
解しておくか又はメンブレン上に点着しておく。基質
は、添加された検体を伴い展開液とともに移動し、陽性
検体では、酵素との反応により検出ゾーンでの発色が観
察される。基質を展開液に含む時には保存中に基質の分
解を起こしやすい。そこで、メンブレン上に基質を点着
する方法が基質を安定に保てるため、現在では主流とな
っている（例えば、特開平９−１３３６８１号参照）。
ＥＩＡが知られている。この方法では基質を展開液に溶
解しておくか又はメンブレン上に点着しておく。基質
は、添加された検体を伴い展開液とともに移動し、陽性
検体では、酵素との反応により検出ゾーンでの発色が観
察される。基質を展開液に含む時には保存中に基質の分
解を起こしやすい。そこで、メンブレン上に基質を点着
する方法が基質を安定に保てるため、現在では主流とな
っている（例えば、特開平９−１３３６８１号参照）。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、基質を
メンブレン上に点着する方法では、陽性検体の場合に観
察される発色が明瞭でなく、正確な判定が行いずらかっ
た。従って、本発明は、検出ゾーンで生ずるシグナルを
明瞭に観察し得る方法及び装置を提供することを課題と
した。
メンブレン上に点着する方法では、陽性検体の場合に観
察される発色が明瞭でなく、正確な判定が行いずらかっ
た。従って、本発明は、検出ゾーンで生ずるシグナルを
明瞭に観察し得る方法及び装置を提供することを課題と
した。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者は、鋭意研究を
行った結果、検体と反応した酵素標識試薬が充分に検出
ゾーンで反応した後に基質が反応するように、糖又は水
溶性高分子化合物にて基質を遅延展開させる手段をもつ
簡易型ＥＩＡ及び装置を見出し本発明を完成した。
行った結果、検体と反応した酵素標識試薬が充分に検出
ゾーンで反応した後に基質が反応するように、糖又は水
溶性高分子化合物にて基質を遅延展開させる手段をもつ
簡易型ＥＩＡ及び装置を見出し本発明を完成した。
【０００５】本発明のＥＩＡ装置は、展開器材の一端に
展開液と接触する展開液供給ゾーン、他の一端に展開液
吸収ゾーンを付設し、該展開器材には拡散的に添加した
酵素標識試薬、展開器材に非拡散的に結合した抗原又は
抗体からなる検出ゾーン、検体点着ゾーンを設け、更に
糖又は水溶性高分子化合物からなる基質展開を遅延させ
る物質と基質とを拡散的に添加した基質ゾーンを設ける
ことができる。この装置では、検体点着ゾーンに検体を
添加し、各試薬が添加された展開器材に展開液を供給す
るだけで免疫測定を行うことができる。基質ゾーンに
は、基質に添加する糖又は水溶性高分子化合物は基質と
混合して添加することができる。また、糖又は水溶性高
分子化合物は、展開器材の基質上又は基質の近傍に添加
することができる。本発明に用いる糖又は水溶性高分子
化合物は、展開器材上の展開液による基質の展開を遅延
させる物質であり、例えば糖、水溶性高分子化合物等を
使用することができる。糖としては、単糖、オリゴ糖又
は多糖であってよく、例えばショ糖、トレハロース、ラ
クトース、マンノース、グルコース、アラビノース、キ
シロース、マルトース、デキストラン、アミロースデン
プン等を挙げることができる。水溶性高分子化合物とし
ては、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ
ビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリグルタミン酸、ポリ
ビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリアスパラギン酸、ポ
リ乳酸、ポリエチレンイミン、カゼイン、アルカリ処理
カゼイン、アルブミン、オボアルブミン、ゼラチン等を
挙げることができる。本発明の糖又は水溶性高分子化合
物は、以下に示す使用量の範囲において水に溶解する化
合物であれば各種分子量のものを用いることができる。
展開液と接触する展開液供給ゾーン、他の一端に展開液
吸収ゾーンを付設し、該展開器材には拡散的に添加した
酵素標識試薬、展開器材に非拡散的に結合した抗原又は
抗体からなる検出ゾーン、検体点着ゾーンを設け、更に
糖又は水溶性高分子化合物からなる基質展開を遅延させ
る物質と基質とを拡散的に添加した基質ゾーンを設ける
ことができる。この装置では、検体点着ゾーンに検体を
添加し、各試薬が添加された展開器材に展開液を供給す
るだけで免疫測定を行うことができる。基質ゾーンに
は、基質に添加する糖又は水溶性高分子化合物は基質と
混合して添加することができる。また、糖又は水溶性高
分子化合物は、展開器材の基質上又は基質の近傍に添加
することができる。本発明に用いる糖又は水溶性高分子
化合物は、展開器材上の展開液による基質の展開を遅延
させる物質であり、例えば糖、水溶性高分子化合物等を
使用することができる。糖としては、単糖、オリゴ糖又
は多糖であってよく、例えばショ糖、トレハロース、ラ
クトース、マンノース、グルコース、アラビノース、キ
シロース、マルトース、デキストラン、アミロースデン
プン等を挙げることができる。水溶性高分子化合物とし
ては、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ
ビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリグルタミン酸、ポリ
ビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリアスパラギン酸、ポ
リ乳酸、ポリエチレンイミン、カゼイン、アルカリ処理
カゼイン、アルブミン、オボアルブミン、ゼラチン等を
挙げることができる。本発明の糖又は水溶性高分子化合
物は、以下に示す使用量の範囲において水に溶解する化
合物であれば各種分子量のものを用いることができる。
【０００６】また、本発明の基質ゾーンには、発色基
質、蛍光基質、発光基質等を用いることができる。発色
基質は、標識酵素のアルカリ性ホスファーゼの測定には
５−ブロモ−４−クロロ−インドリルリン酸二ナトリウ
ム（ＢＣＩＰ）、５−ブロモ−６−クロロ−インドリル
リン酸二ナトリウム、ｐ−ニトロフェニルリン酸等、β
−ガラクトシダーゼの測定には、５−ブロモ−４−クロ
ロ−インドリル−β−ガラクトピラノシド、５−ブロモ
−６−クロロ−インドリル−β−ガラクトピラノシド、
ｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド等、
パーオキシダーゼの測定には、例えば１，２−フェニレ
ンジアミン、３，３’，５，５’−テトラメチルベンチ
ジン、２，２’−アジノビス−（３−エチルベンゾチア
ゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）等を用いること
ができる。蛍光基質は、アルカリ性ホスファターゼの測
定には４−メチルウムベリフェリル・ホスフェート、β
−ガラクトシダーゼの測定には、４−メチルウムベリフ
ェリル・β−Ｄ−ガラクトシド等を用いることができ
る。発光基質は、アルカリ性ホスファーゼの測定には３
−（２’−スピロアダマンタン）−４−メトキシ−４−
（３”−ホスフォリルオキシ）フェニル−１，２−ジオ
キセタン 二ナトリウム塩（ＡＭＰＰＤ）、３−（４−
クロロ−２’−スピロアダマンタン）−４−メトキシ−
４−（３”−ホスフォリルオキシ）フェニル−１，２−
ジオキセタン 二ナトリウム塩（ＣＳＰＤ）等、β−ガ
ラクトシダーゼの測定には、３−（２’−スピロアダマ
ンタン）−４−メトキシ−４−（３”−β−Ｄ−ガラク
トピラノシル）フェニル−１，２−ジオキセタン等を挙
げることができる。
質、蛍光基質、発光基質等を用いることができる。発色
基質は、標識酵素のアルカリ性ホスファーゼの測定には
５−ブロモ−４−クロロ−インドリルリン酸二ナトリウ
ム（ＢＣＩＰ）、５−ブロモ−６−クロロ−インドリル
リン酸二ナトリウム、ｐ−ニトロフェニルリン酸等、β
−ガラクトシダーゼの測定には、５−ブロモ−４−クロ
ロ−インドリル−β−ガラクトピラノシド、５−ブロモ
−６−クロロ−インドリル−β−ガラクトピラノシド、
ｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド等、
パーオキシダーゼの測定には、例えば１，２−フェニレ
ンジアミン、３，３’，５，５’−テトラメチルベンチ
ジン、２，２’−アジノビス−（３−エチルベンゾチア
ゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）等を用いること
ができる。蛍光基質は、アルカリ性ホスファターゼの測
定には４−メチルウムベリフェリル・ホスフェート、β
−ガラクトシダーゼの測定には、４−メチルウムベリフ
ェリル・β−Ｄ−ガラクトシド等を用いることができ
る。発光基質は、アルカリ性ホスファーゼの測定には３
−（２’−スピロアダマンタン）−４−メトキシ−４−
（３”−ホスフォリルオキシ）フェニル−１，２−ジオ
キセタン 二ナトリウム塩（ＡＭＰＰＤ）、３−（４−
クロロ−２’−スピロアダマンタン）−４−メトキシ−
４−（３”−ホスフォリルオキシ）フェニル−１，２−
ジオキセタン 二ナトリウム塩（ＣＳＰＤ）等、β−ガ
ラクトシダーゼの測定には、３−（２’−スピロアダマ
ンタン）−４−メトキシ−４−（３”−β−Ｄ−ガラク
トピラノシル）フェニル−１，２−ジオキセタン等を挙
げることができる。
【０００７】展開器材に添加する基質量は、特に限定さ
れず、各測定物質によっても異なるが、通常水又は緩衝
液に５〜４０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１０〜３０ｍｇ／
ｍｌの濃度で溶解した溶液を展開器材に２〜１０μｌ添
加される。本発明の糖又は水溶性高分子化合物は、基質
溶液に対し、１〜１５％、好ましくは３〜１０％添加す
ることができる。また、展開器材に添加した基質は、０
℃〜５０℃又は凍結乾燥によって乾燥することが好まし
い。
れず、各測定物質によっても異なるが、通常水又は緩衝
液に５〜４０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１０〜３０ｍｇ／
ｍｌの濃度で溶解した溶液を展開器材に２〜１０μｌ添
加される。本発明の糖又は水溶性高分子化合物は、基質
溶液に対し、１〜１５％、好ましくは３〜１０％添加す
ることができる。また、展開器材に添加した基質は、０
℃〜５０℃又は凍結乾燥によって乾燥することが好まし
い。
【０００８】本発明の展開器材は、展開液を輸液可能な
矩形のメンブレン等であり、この材質は免疫測定に用い
られるセルロース、ニトロセルロース等のセルロース又
はセルロース誘導体、ガラス繊維等から構成された多孔
質膜であることが好ましい。この展開器材の一端部に
は、展開液供給ゾーン、他の一端には展開液吸収ゾーン
を設けることができる。
矩形のメンブレン等であり、この材質は免疫測定に用い
られるセルロース、ニトロセルロース等のセルロース又
はセルロース誘導体、ガラス繊維等から構成された多孔
質膜であることが好ましい。この展開器材の一端部に
は、展開液供給ゾーン、他の一端には展開液吸収ゾーン
を設けることができる。
【０００９】本発明の展開器材に拡散的に添加される標
識試薬は、測定物質と免疫反応する抗原又は抗体を酵素
で標識して製造され、ＥＩＡで用いられる周知の酵素標
識抗体又は酵素標識抗原を使用することができる。ま
た、展開器材の設けられる検出ゾーンには、測定物質の
抗体又は抗原と反応する抗原又は抗体が展開器材に物理
吸着又は化学結合により非拡散的に結合される。さら
に、検出ゾーンは、ゼラチン粒子等の粒子に抗原又は抗
体を結合させた感作粒子を展開器材に添加して形成する
こともできる。
識試薬は、測定物質と免疫反応する抗原又は抗体を酵素
で標識して製造され、ＥＩＡで用いられる周知の酵素標
識抗体又は酵素標識抗原を使用することができる。ま
た、展開器材の設けられる検出ゾーンには、測定物質の
抗体又は抗原と反応する抗原又は抗体が展開器材に物理
吸着又は化学結合により非拡散的に結合される。さら
に、検出ゾーンは、ゼラチン粒子等の粒子に抗原又は抗
体を結合させた感作粒子を展開器材に添加して形成する
こともできる。
【００１０】本発明のＥＩＡ装置の断面図を図１に例示
する。本発明のＥＩＡ装置１では、メンブレン２に前記
糖又は水溶性高分子化合物と基質との混合物を含有した
基質ゾーン３、メンブレンの一方の端部に設けた展開液
供給ゾーン４、酵素標識試薬ゾーン５、検体点着ゾーン
６、検出ゾーン７及びメンブレンの他方の端部に展開液
吸収ゾーン８を設けることができる。基質ゾーン３は、
メンブレンの展開液供給ゾーンから輸液方向の下流側、
且つ酵素標識試薬ゾーンの上流側に設けることが好まし
い。酵素標識試薬ゾーン５には、酵素で標識された抗体
又は抗原が展開液よって移動可能な状態で前記メンブレ
ン上に設けたパッドに含有される。また、検出ゾーン７
では、前記メンブレンには検体中の測定対象物質と免疫
反応する抗原又は抗体がメンブレンにライン状に結合し
ている。展開液１１は破壊可能なシール部材１２によっ
て密封され、ＥＩＡ装置の端部に付設された展開液槽１
０から展開液供給ゾーン４を通ってメンブレン２に展開
液１１を供給することができる。展開液吸収ゾーン８は
吸水性の不織布で構成される。展開液吸収ゾーンは通常
メンブレンよりも厚く形成されるが、このことは必須で
はない。展開液供給ゾーン４は、前記展開液吸収ゾーン
８の吸水性の不織布と同じ不織布をメンブレンに重ね合
わせて構成することもできる。
する。本発明のＥＩＡ装置１では、メンブレン２に前記
糖又は水溶性高分子化合物と基質との混合物を含有した
基質ゾーン３、メンブレンの一方の端部に設けた展開液
供給ゾーン４、酵素標識試薬ゾーン５、検体点着ゾーン
６、検出ゾーン７及びメンブレンの他方の端部に展開液
吸収ゾーン８を設けることができる。基質ゾーン３は、
メンブレンの展開液供給ゾーンから輸液方向の下流側、
且つ酵素標識試薬ゾーンの上流側に設けることが好まし
い。酵素標識試薬ゾーン５には、酵素で標識された抗体
又は抗原が展開液よって移動可能な状態で前記メンブレ
ン上に設けたパッドに含有される。また、検出ゾーン７
では、前記メンブレンには検体中の測定対象物質と免疫
反応する抗原又は抗体がメンブレンにライン状に結合し
ている。展開液１１は破壊可能なシール部材１２によっ
て密封され、ＥＩＡ装置の端部に付設された展開液槽１
０から展開液供給ゾーン４を通ってメンブレン２に展開
液１１を供給することができる。展開液吸収ゾーン８は
吸水性の不織布で構成される。展開液吸収ゾーンは通常
メンブレンよりも厚く形成されるが、このことは必須で
はない。展開液供給ゾーン４は、前記展開液吸収ゾーン
８の吸水性の不織布と同じ不織布をメンブレンに重ね合
わせて構成することもできる。
【００１１】更に、本発明のＥＩＡ装置は、試薬類が添
加された前記展開器材を例えば特開平１０−１０４２３
６号に記載されたプラスチック製のカセットに載置し、
測定に用いることが好ましい。
加された前記展開器材を例えば特開平１０−１０４２３
６号に記載されたプラスチック製のカセットに載置し、
測定に用いることが好ましい。
【００１２】本発明では、測定物質の抗原又は抗体を含
むを思われる検体を前記ＥＩＡ装置の検体点着ゾーンに
点着した後、水又は緩衝液からなる展開液を展開液供給
ゾーンに供給することにより測定を開始することができ
る。検体点着ゾーンに添加された検体は、酵素標識試薬
と反応をした後、展開液により展開して検出ゾーンで充
分に反応が行われて結合する。次いで糖又は水溶性高分
子化合物によって基質が遅延して展開し、検出ゾーンに
到達して酵素との反応が起こる。検体中に測定物質が含
まれない場合には、酵素標識試薬は検出ゾーン留まらず
に展開液吸収ゾーンに吸収されてしまい、検出ゾーンの
発色、蛍光、発光等のシグナルは観察されない。検体中
の測定物質の測定は、展開液を前記ＥＩＡ試薬の展開液
供給ゾーンに供給後、通常１０〜２０分後にカセットに
開けられた窓から検出ゾーンのシグナルを測定すること
により行うことができる。また、前記展開液には、所望
により更に発色、蛍光又は発光の増幅物質、安定化剤、
防腐剤などを添加することもできる。
むを思われる検体を前記ＥＩＡ装置の検体点着ゾーンに
点着した後、水又は緩衝液からなる展開液を展開液供給
ゾーンに供給することにより測定を開始することができ
る。検体点着ゾーンに添加された検体は、酵素標識試薬
と反応をした後、展開液により展開して検出ゾーンで充
分に反応が行われて結合する。次いで糖又は水溶性高分
子化合物によって基質が遅延して展開し、検出ゾーンに
到達して酵素との反応が起こる。検体中に測定物質が含
まれない場合には、酵素標識試薬は検出ゾーン留まらず
に展開液吸収ゾーンに吸収されてしまい、検出ゾーンの
発色、蛍光、発光等のシグナルは観察されない。検体中
の測定物質の測定は、展開液を前記ＥＩＡ試薬の展開液
供給ゾーンに供給後、通常１０〜２０分後にカセットに
開けられた窓から検出ゾーンのシグナルを測定すること
により行うことができる。また、前記展開液には、所望
により更に発色、蛍光又は発光の増幅物質、安定化剤、
防腐剤などを添加することもできる。
【００１３】
【実施例】以下実施例及び比較例により本発明をさらに
詳細に説明する。 実施例１ ＨＢｓ抗原の測定 ５ｍｍ×５０ｍｍのニトロセルロース（ミリポア社製）
からなるメンブレンの両端に、吸水性の不織布からなる
展開液供給ゾーン及び展開液吸水ゾーンを設けた。メン
ブレンに付設した展開液吸収ゾーンから展開液の展開方
向の上流側の部分に、抗ＨＢｓ抗体を塗布乾燥して検出
ゾーンとした。次いで、メンブレンの検出ゾーンの上流
側にアルカリ性ホスファターゼ標識抗ＨＢｓ抗体を含む
吸水性不織布からなるパッドを重ね酵素標識試薬ゾーン
とし、該ゾーン上を検体点着ゾーンとした。また、酵素
標識試薬ゾーンの上流側には、下記表１に示す糖又は水
溶性高分子化合物を５％含む２０ｍｇ／ｍｌの５−ブロ
モ−４−クロロ−インドリルリン酸二ナトリウム（ＢＣ
ＩＰ）溶液５μｌを添加し、３７℃で風乾し基質ゾーン
とした。このメンブレンを、特開平１０−１０４２３６
号に記載の展開液槽と展開液供給手段を持つ反応カセッ
ト内に納めて免疫測定装置とした。
詳細に説明する。 実施例１ ＨＢｓ抗原の測定 ５ｍｍ×５０ｍｍのニトロセルロース（ミリポア社製）
からなるメンブレンの両端に、吸水性の不織布からなる
展開液供給ゾーン及び展開液吸水ゾーンを設けた。メン
ブレンに付設した展開液吸収ゾーンから展開液の展開方
向の上流側の部分に、抗ＨＢｓ抗体を塗布乾燥して検出
ゾーンとした。次いで、メンブレンの検出ゾーンの上流
側にアルカリ性ホスファターゼ標識抗ＨＢｓ抗体を含む
吸水性不織布からなるパッドを重ね酵素標識試薬ゾーン
とし、該ゾーン上を検体点着ゾーンとした。また、酵素
標識試薬ゾーンの上流側には、下記表１に示す糖又は水
溶性高分子化合物を５％含む２０ｍｇ／ｍｌの５−ブロ
モ−４−クロロ−インドリルリン酸二ナトリウム（ＢＣ
ＩＰ）溶液５μｌを添加し、３７℃で風乾し基質ゾーン
とした。このメンブレンを、特開平１０−１０４２３６
号に記載の展開液槽と展開液供給手段を持つ反応カセッ
ト内に納めて免疫測定装置とした。
【００１４】前記免疫測定装置の検体点着ゾーンに検体
液として、濃度７．５ｎｇ／ｍｌのＨＢｓ抗原を含む陽
性血清２５μｌ加え、反応カセットの展開液槽から展開
液をメンブレンに供給し、測定を開始した。展開液供給
後、１５分経過後の検出ゾーンの発色強度を目視で測定
した。同一の陽性検体で３回ずつ測定した結果を表１に
示す。また、陰性検体を用いて１５分後、３０分後の測
定結果を表１に示す。更に、ＢＣＩＰ溶液に糖又は水溶
性高分子化合物を含有しない基質ゾーンを設けた装置に
よる測定結果（無添加；比較例）を表１に示す。
液として、濃度７．５ｎｇ／ｍｌのＨＢｓ抗原を含む陽
性血清２５μｌ加え、反応カセットの展開液槽から展開
液をメンブレンに供給し、測定を開始した。展開液供給
後、１５分経過後の検出ゾーンの発色強度を目視で測定
した。同一の陽性検体で３回ずつ測定した結果を表１に
示す。また、陰性検体を用いて１５分後、３０分後の測
定結果を表１に示す。更に、ＢＣＩＰ溶液に糖又は水溶
性高分子化合物を含有しない基質ゾーンを設けた装置に
よる測定結果（無添加；比較例）を表１に示す。
【００１５】尚、表１中の記号は、検出ゾーンにおい
て、−：ラインが認められない、±：青色が認められる
がラインとして認められない、＋：青色のラインが認め
られる、＋＋：濃く鮮明な青色ラインが認めれることを
示す。
て、−：ラインが認められない、±：青色が認められる
がラインとして認められない、＋：青色のラインが認め
られる、＋＋：濃く鮮明な青色ラインが認めれることを
示す。
【００１６】
【表１】
【００１７】実施例２ 抗ＨＢｓ抗体の測定 実施例１記載の免疫測定装置において、抗ＨＢｓ抗体と
アルカリ性ホスファターゼ標識抗ＨＢｓ抗体の代わりに
それぞれＨＢｓ抗原とアルカリ性ホスファターゼ標識Ｈ
Ｂｓ抗原を用いて抗ＨＢｓ抗体測定用の装置を製造し
た。
アルカリ性ホスファターゼ標識抗ＨＢｓ抗体の代わりに
それぞれＨＢｓ抗原とアルカリ性ホスファターゼ標識Ｈ
Ｂｓ抗原を用いて抗ＨＢｓ抗体測定用の装置を製造し
た。
【００１８】前記免疫測定装置の検体点着ゾーンに検体
液として、濃度１６ｍＩＵ／ｍｌの抗ＨＢｓ抗体を含む
陽性血清２５μｌ加え、反応カセットの展開液槽から展
開液をメンブレンに供給し、測定を開始した。展開液供
給後１５分後の検出ゾーンの発色強度を目視で測定し
た。同一の陽性検体で３回ずつ測定した結果を表２に示
す。また、陰性検体を用いて１５分後、３０分後の測定
結果を表２に示す。更に、ＢＣＩＰ溶液に糖又は水溶性
高分子化合物を含有しない基質ゾーンを設けた装置によ
る測定結果（無添加；比較例）を表２に示す。
液として、濃度１６ｍＩＵ／ｍｌの抗ＨＢｓ抗体を含む
陽性血清２５μｌ加え、反応カセットの展開液槽から展
開液をメンブレンに供給し、測定を開始した。展開液供
給後１５分後の検出ゾーンの発色強度を目視で測定し
た。同一の陽性検体で３回ずつ測定した結果を表２に示
す。また、陰性検体を用いて１５分後、３０分後の測定
結果を表２に示す。更に、ＢＣＩＰ溶液に糖又は水溶性
高分子化合物を含有しない基質ゾーンを設けた装置によ
る測定結果（無添加；比較例）を表２に示す。
【００１９】尚、表２中の記号は、前記表１と同じであ
る。
る。
【００２０】
【表２】
【００２１】
【発明の効果】本発明の測定装置では、陽性の検体であ
れば検出ゾーンに明瞭なシグナルが認められる。従っ
て、この装置で測定すると、検出ゾーンのシグナルから
極めて容易に判定を行うことができる。
れば検出ゾーンに明瞭なシグナルが認められる。従っ
て、この装置で測定すると、検出ゾーンのシグナルから
極めて容易に判定を行うことができる。
【図１】本発明の装置例を模式的に示す断面図である。
１ ＥＩＡ装置 ２ メンブレン ３ 基質ゾーン ４ 展開液供給ゾーン ５ 酵素標識試薬ゾーン ６ 検体点着ゾーン ７ 検出ゾーン ８ 展開液吸収ゾーン １０ 展開液槽 １１ 展開液 １２ シール部材
Claims (5)
- 【請求項１】 酵素標識試薬を充分に反応させた後に基
質が反応するように、糖又は水溶性高分子化合物にて基
質を遅延展開させる手段をもつ簡易型酵素免疫測定装
置。 - 【請求項２】 糖又は水溶性高分子化合物と、基質との
混合物が添加された請求項１記載の測定装置。 - 【請求項３】 糖が、ショ糖、トレハロース、ラクトー
ス、マンノース、グルコース、アラビノース、キシロー
ス、マルトース、デキストラン又はアミロースデンプン
である請求項１又は２記載の測定装置。 - 【請求項４】 水溶性高分子化合物が、ポリエチレング
リコール、ポリビニルアルコール、ポリグルタミン酸、
ポリビニルピロリドン、ポリアスパラギン酸、ポリ乳酸
又はポリエチレンイミンカゼイン、アルカリ処理カゼイ
ン、アルブミン、オボアルブミン又はゼラチンである請
求項１又は２記載の測定装置。 - 【請求項５】 請求項１ないし４のいずれか１項に記載
の測定装置を用いる免疫測定法。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| WO2012018057A1 (ja) | 2010-08-03 | 2012-02-09 | 田中貴金属工業株式会社 | イムノクロマトグラフィー用試薬組成物およびそれを用いた測定方法 |
-
1999
- 1999-05-21 JP JP14131699A patent/JP3539277B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| WO2005007697A1 (ja) * | 2003-07-23 | 2005-01-27 | Fujirebio Inc. | 抗インフルエンザａ型ウイルスモノクローナル抗体及び該抗体を用いる免疫測定器具 |
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