IT202000029948A1 - Metodo per la diagnosi di tumore alla prostata in pazienti in differente fascia di età - Google Patents
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Description
Titolo: ?Metodo per la diagnosi di tumore alla prostata in pazienti in differente fascia di et??
DESCRIZIONE
Campo della tecnica dell?invenzione
La presente invenzione trova applicazione nel campo medico e, in particolare, nel campo della diagnosi del carcinoma alla prostata.
Stato dell?arte
Il carcinoma della prostata (PCa) ? la patologia pi? comune e la seconda causa di morte legata a tumori per gli uomini in tutto il mondo.
Attualmente, una diagnosi di carcinoma della prostata ? dichiarata dopo analisi istologica su tessuto prostatico prelevato tramite biopsia.
A sua volta, la biopsia prostatica ? effettuata dopo aver valutato i livelli dell?antigene specifico della prostata (PSA) unitamente all?esplorazione digito rettale (DRE).
PSA e DRE sono quegli esami preliminari condotti allo scopo di individuare quei soggetti che con maggiore probabilit? hanno sviluppato un tumore alla prostata.
La biopsia prostatica ? eseguita per confermare o smentire le evidenze cliniche; tuttavia, a causa della limitata accuratezza di questi saggi, si riscontra un numero elevato di sovra-diagnosi e di conseguenza sovratrattamenti.
Mediamente, infatti, per ogni quattro pazienti che si sottopongono ad una biopsia della prostata, dopo opportuna selezione per livelli di PSA sospetti, un solo individuo risulta effettivamente affetto da carcinoma della prostata; inoltre, molti dei carcinomi prostatici diagnosticati hanno un decorso molto lento e possono non dare sintomi per tutta la vita del paziente.
Dato che ? impossibile distinguere i tumori sovradiagnosticati dagli altri, alla maggior parte dei pazienti trovati positivi alla biopsia viene proposto il trattamento chirurgico.
E? noto, tuttavia, che tale trattamento spesso causa effetti avversi, come: disfunzione erettile, incontinenza urinaria, infezioni e presenta pertanto un forte impatto sulla qualit? della vita.
Oltre al disagio per i pazienti, si deve considerare l?impatto economico sul sistema sanitario causato da una cos? alta percentuale di saggi che, alla fine, risultano essere stati condotti inutilmente.
Analisi economiche e statistiche hanno concluso che, sull?intera popolazione, i costi legati al processo che si avvia una volta effettuato il saggio del PSA (dovuti a biopsie, trattamenti, eventuali danni conseguenti) superano i benefici, quantificati economicamente.
Alla luce di quanto sopra esposto, ? chiara la necessit? impellente di sviluppare metodologie diagnostiche pi? precise per poter individuare pazienti a rischio di sviluppare un carcinoma prostatico.
Riassunto dell?invenzione
Gli inventori della presente domanda di brevetto hanno sorprendentemente trovato che ? possibile effettuare una diagnosi del tumore alla prostata con particolare precisione a seconda della fascia di et? del soggetto analizzando la presenza di marcatori presenti nell?urina.
Breve descrizione delle figure
La Figura 1 rappresenta la curva ROC (receiver operating characteristic) per il valore della concentrazione di uPSA a diverse fasce di et?.
La Figura 2 rappresenta la curva ROC per il valore della concentrazione di zinco a diverse fasce di et?.
Oggetto dell?invenzione
Un primo oggetto della presente invenzione ? rappresentato da un metodo per la prognosi del tumore alla prostata in un soggetto che ? stato precedentemente sottoposto ad esame e ha ricevuto un?indicazione per biopsia prostatica.
Descrizione dettagliata dell?invenzione
Per gli scopi della presente invenzione, con ?valore del marcatore di PSA in un campione di urina? (uPSA) si intende la concentrazione di tale marcatore in un campione di urina.
Per gli scopi della presente invenzione, con ?valore di zinco in un campione di urina? (uZn) si intende la concentrazione di zinco in un campione di urina.
La presente invenzione trova uguale applicazione anche per altri tipi di campioni biologici rappresentati da sperma e secrezione prostatica; pertanto, nel prosieguo della descrizione, laddove si fa riferimento a ?urina? si intende ugualmente sperma o secrezione prostatica.
Secondo un primo oggetto della presente invenzione ? descritto un metodo in vitro per la diagnosi del tumore alla prostata in un soggetto.
Secondo un aspetto della presente invenzione, nel metodo in vitro descritto il campione di urina ? ottenuto dopo un massaggio prostatico della durata di circa 10-120 secondi e, preferibilmente, di 30 secondi.
In particolare, il metodo descritto comprendente l?analisi dei valori del marcatore PSA o del valore di zinco, o di entrambi, in un campione di urina di detto soggetto.
Una volta effettuata la determinazione della concentrazione del marcatore di PSA o dello zinco, o di entrambi, nel campione di urina, una diagnosi di positivit? al tumore prostatico ? dichiarata, in funzione dell?et? del soggetto, laddove i valori di AUC sono i seguenti:
et?: < 60 anni PSA zinco PSA+Zn Intervallo Confidenza 95% 0,537-0,889 0,591-0,922 0,590-0,923
Valore 0,741 0,790 0,790
et?: > 60 anni PSA zinco PSA+Zn Intervallo Confidenza 95% 0,730-0,861 0,590-0,744 0,721-0,855
Valore 0,801 0,670 0,792
et?: > 70 anni PSA PSA+Zn PSA+Zn Intervallo Confidenza 95% 0,777-0,942 0,620-0,838 0,620-0,838
Valore 0,876 0,739 0,875 Come sopra indicato, la diagnosi ? effettuata sulla base di uno solo dei valori di uPSA o di uZn o di entrambi.
Per gli scopi della presente invenzione, il metodo descritto comprende la determinazione del valore del marcatore PSA in detto campione di urina tramite un saggio scelto fra: ELISA, immunodosaggio, metodo immunochimico, spettrometrico, spettrofotometrico, colorimetrico, elettroforetico, complessometrico, amperometrico; e, preferibilmente, mediante ELISA.
Sempre per gli scopi della presente invenzione, il metodo descritto comprende la determinazione del valore di zinco in detto campione di urina con un saggio scelto fra: saggio colorimetrico, ELISA, immunodosaggio, metodo immunochimico, spettrometrico, spettrofotometrico, elettroforetico, complessometrico, amperometrico, spettroscopia di assorbimento atomico, spettroscopia di emissione atomica; e, preferibilmente, mediante saggio colorimetrico.
Per gli scopi della presente invenzione, i metodi descritti comprendono la determinazione del valore del marcatore PSA in detto campione di urina tramite un saggio scelto fra: ELISA, immunodosaggio, metodo immunochimico, spettrometrico, spettrofotometrico, colorimetrico, elettroforetico, complessometrico, amperometrico; e preferibilmente, mediante ELISA.
Sempre per gli scopi della presente invenzione, il metodo descritto comprende la determinazione del valore di zinco in detto campione di urina con un saggio scelto fra: saggio colorimetrico, ELISA, immunodosaggio, metodo immunochimico, spettrometrico, spettrofotometrico, elettroforetico, complessometrico, amperometrico, spettroscopia di assorbimento atomico, spettroscopia di emissione atomica; e, preferibilmente, mediante saggio colorimetrico.
L?invenzione verr? ulteriormente descritta con riferimento ai seguenti esempi non limitativi della presente invenzione.
Determinazione PSA urinario mediante ELISA (R&D System) secondo le indicazioni del produttore.
Il valore di PSA urinario viene ricavato confrontando l?assorbanza nel campione di urina rispetto alla curva preparata usando molecola ricombinante PSA a concentrazioni scalari note.
Metodi
Determinazione zinco urinario mediante saggio colorimetrico (Sigma Aldrich) secondo le indicazioni del produttore.
Il valore di zinco urinario viene ricavato confrontando l?assorbanza nel campione di urina rispetto alla curva preparata usando molecola Zinco a concentrazioni scalari note.
Esempi
Sono stati raccolti campioni di urina da 186 soggetti di et? compresa tra 50 e 87 anni con indicazione di biopsia prostatica per un sospetto di tumore alla prostata.
I campioni di urina sono stati raccolti dopo massaggio prostatico per una durata di 30 secondi. Il campione ? stato agitato e congelato in tubi Falcon a -80?C entro 30 minuti dalla raccolta.
Ad ogni soggetto sono stati prelevati inoltre 12 campioni bioptici, utilizzati per la normale procedura diagnostica da parte della sezione di anatomia patologica. La valutazione istologica ha rilevato la presenza di cellule neoplastiche in 98 soggetti (PCa), mentre 92 soggetti sono risultati liberi da malattia tumorale.
Dei 98, in 18 ? stato riscontrato un tumore di basso grado, in 28 un tumore di grado intermedio favorevole, in 24 un tumore di grado intermedio sfavorevole, in 24 un tumore di alto grado.
Le urine sono state scongelate e la presenza dei biomarcatori PSA urinario (uPSA) e Zinco urinario ? stata quantificata tramite saggio ELISA e test colorimetrico, rispettivamente.
Sulla popolazione totale, i valori di uPSA correlano con la presenza di tumore con un AUC di 0.803.
Limitando l?analisi ai soggetti con un?et? inferiore a 60 anni, superiore a 60 anni e superiore a 70 anni i valori di uPSA correlano con la presenza di tumore con un AUC di 0,741, 0,801, 0,876 rispettivamente (si veda la Figura 1).
I valori di Zinco urinario correlano con la presenza di tumore con un AUC di 0.689.
Limitando l?analisi ai soggetti con un?et? inferiore a 60 anni, superiore a 60 anni e superiore a 70 anni i valori di uPSA correlano con la presenza di tumore con un valore di AUC di 0.790, 0.670, 0.739 rispettivamente (si veda la Figura 2).
I valori di combinati di uPSA e Zinco urinario correlano con la presenza di tumore con un AUC di 0.797.
Limitando l?analisi ai soggetti con un?et? inferiore a 60 anni, superiore a 60 anni e superiore a 70 anni i valori di uPSA e Zinco urinario correlano con la presenza di tumore con un AUC di 0.790, 0.792, 0.875 rispettivamente (si veda la Figura 3).
Dalla descrizione sopra fornita risulteranno evidenti alla persona esperta nel settore i numerosi vantaggi offerti dalla presente invenzione.
Innanzitutto, l?analisi in campioni di urina dei valori di singoli biomarcatori PSA e Zinco presenti nell?urina permette di discriminare soggetti sani da pazienti con tumore alla prostata in modo sorprendentemente pi? efficiente rispetto ai parametri standard comunemente impiegati attualmente.
L?analisi contemporanea di due biomarcatori, in accordo con la presente invenzione, consente di identificare i pazienti con carcinoma della prostata in modo ancor pi? affidabile.
L?analisi in campioni di urina dei valori dei biomarcatori uPSA e Zinco permette di discriminare soggetti sani da pazienti con tumore alla prostata in maniera pi? efficiente rispetto ai parametri standard, in maniera particolare in specifiche fasce di et?.
Il metodo secondo la presente invenzione rappresenta, pertanto, uno strumento rapido ed economico per ottenere una diagnosi affidabile, evitando procedure invasive.
Dal punto di vista economico, il metodo della presente invenzione consente una migliore gestione delle risorse economiche a disposizione del servizio sanitario.
Claims (8)
1. Un metodo per la diagnosi del tumore alla prostata in un soggetto che ? stato precedentemente sottoposto ad esame e ha ricevuto un?indicazione per biopsia prostatica, detto metodo comprendente l?analisi dei valori del marcatore PSA o del valore di zinco, o di entrambi, in un campione di un fluido biologico di detto soggetto.
2. Il metodo secondo la rivendicazione precedente, in cui detto campione ? ottenuto dopo un massaggio prostatico della durata di circa 10-120 secondi e, preferibilmente, di 30 secondi.
3. Il metodo secondo la rivendicazione 1 o 2, in cui detto soggetto ha un?et? inferiore a 60 anni o preferibilmente superiore a 60 anni o ancora pi? preferibilmente superiore a 70 anni e il valore di detto marcatore PSA in detto campione ? correlato con una diagnosi di positivit? al tumore prostatico con un valore di AUC rispettivamente di 0.537-0.889, 0.730-0.861, 0.777-0.942.
4. Il metodo secondo la rivendicazione 1 o 2, in cui detto soggetto ha un?et? superiore a 60 anni o preferibilmente superiore a 70 anni o ancora pi? preferibilmente inferiore a 60 anni e il valore di detto zinco in detto campione ? correlato con una diagnosi di positivit? al tumore prostatico con un valore di AUC rispettivamente di 0.591-0.922, 0.590-0.744, 0.620-0.838.
5. Il metodo secondo la rivendicazione 3 e 4, in cui detto soggetto ha un?et? inferiore a 60 anni o preferibilmente superiore a 60 anni o ancora pi? preferibilmente superiore a 70 anni e il valore combinato di detto zinco e PSA in detto campione ? correlato con una diagnosi di positivit? al tumore prostatico con un valore di AUC rispettivamente di 0.590-0.923, 0.721-0.855 e 0.620-0.838.
6. Il metodo secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui il valore del marcatore PSA in detto campione ? analizzato tramite un saggio scelto fra: ELISA, immunodosaggio, metodo immunochimico, spettrometrico, spettrofotometrico, colorimetrico, elettroforetico, complessometrico, amperometrico.
7. Il metodo secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui il valore di zinco in detto campione ? analizzato con saggio scelto fra: colorimetrico, ELISA, immunodosaggio, metodo immunochimico, spettrometrico, spettrofotometrico, elettroforetico, complessometrico, amperometrico, spettroscopia di assorbimento atomico, spettroscopia di emissione atomica.
8. Il metodo secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui detto campione biologico ? rappresentato da sperma, secrezione prostatica o urina.
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