HU221407B1 - Ektodermális eredetû szövetekben fellépõ tumoros burjánzást gátló hatóanyag és készítmény, valamint eljárás elõállításukra - Google Patents
Ektodermális eredetû szövetekben fellépõ tumoros burjánzást gátló hatóanyag és készítmény, valamint eljárás elõállításukra Download PDFInfo
- Publication number
- HU221407B1 HU221407B1 HU9701165A HUP9701165A HU221407B1 HU 221407 B1 HU221407 B1 HU 221407B1 HU 9701165 A HU9701165 A HU 9701165A HU P9701165 A HUP9701165 A HU P9701165A HU 221407 B1 HU221407 B1 HU 221407B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- rna
- supernatant
- active ingredient
- proliferation
- fish
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title description 4
- 210000003981 ectoderm Anatomy 0.000 title 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 31
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 29
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 239000008188 pellet Substances 0.000 claims abstract description 13
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 239000012134 supernatant fraction Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 9
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- FGUUSXIOTUKUDN-IBGZPJMESA-N C1(=CC=CC=C1)N1C2=C(NC([C@H](C1)NC=1OC(=NN=1)C1=CC=CC=C1)=O)C=CC=C2 Chemical compound C1(=CC=CC=C1)N1C2=C(NC([C@H](C1)NC=1OC(=NN=1)C1=CC=CC=C1)=O)C=CC=C2 FGUUSXIOTUKUDN-IBGZPJMESA-N 0.000 claims abstract description 4
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 4
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 claims description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 11
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 abstract description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 abstract description 2
- 241000237536 Mytilus edulis Species 0.000 abstract 1
- 230000003288 anthiarrhythmic effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000003416 antiarrhythmic agent Substances 0.000 abstract 1
- 235000020638 mussel Nutrition 0.000 abstract 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 abstract 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 241001519451 Abramis brama Species 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 241000252233 Cyprinus carpio Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- 241000579185 Bucerotidae Species 0.000 description 2
- 241001459819 Carassius gibelio Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 241000270942 Rana pipiens Species 0.000 description 2
- 241001125862 Tinca tinca Species 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000594015 Alburnoides bipunctatus Species 0.000 description 1
- 241000531888 Alburnus Species 0.000 description 1
- 206010002199 Anaphylactic shock Diseases 0.000 description 1
- 241000410759 Aspius aspius Species 0.000 description 1
- 241000010972 Ballerus ballerus Species 0.000 description 1
- 241000010970 Ballerus sapa Species 0.000 description 1
- 241000124892 Barbus Species 0.000 description 1
- 241000124815 Barbus barbus Species 0.000 description 1
- 241000593992 Blicca bjoerkna Species 0.000 description 1
- 241001663206 Buceros hydrocorax Species 0.000 description 1
- 241000252229 Carassius auratus Species 0.000 description 1
- 241001609213 Carassius carassius Species 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 240000003538 Chamaemelum nobile Species 0.000 description 1
- 235000007866 Chamaemelum nobile Nutrition 0.000 description 1
- 241000511343 Chondrostoma nasus Species 0.000 description 1
- 244000045195 Cicer arietinum Species 0.000 description 1
- 235000010523 Cicer arietinum Nutrition 0.000 description 1
- 241000252231 Cyprinus Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241001125879 Gobio Species 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 241000269321 Leuciscus Species 0.000 description 1
- 241000594011 Leuciscus leuciscus Species 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 206010064912 Malignant transformation Diseases 0.000 description 1
- 235000007232 Matricaria chamomilla Nutrition 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001316066 Pelecus cultratus Species 0.000 description 1
- 241000500086 Pseudorasbora parva Species 0.000 description 1
- 241000287531 Psittacidae Species 0.000 description 1
- 241000612182 Rexea solandri Species 0.000 description 1
- 241000391503 Rhodeus amarus Species 0.000 description 1
- 241000015453 Romanogobio uranoscopus Species 0.000 description 1
- 241001303601 Rosacea Species 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 241000231739 Rutilus rutilus Species 0.000 description 1
- 241000005674 Rutilus virgo Species 0.000 description 1
- 241000593989 Scardinius erythrophthalmus Species 0.000 description 1
- 241000269319 Squalius cephalus Species 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000006161 blood agar Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000005202 decontamination Methods 0.000 description 1
- 230000003588 decontaminative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036212 malign transformation Effects 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011206 morphological examination Methods 0.000 description 1
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 244000062645 predators Species 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 201000004700 rosacea Diseases 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000005082 stem growth Effects 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/56—Materials from animals other than mammals
- A61K35/57—Birds; Materials from birds, e.g. eggs, feathers, egg white, egg yolk or endothelium corneum gigeriae galli
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/56—Materials from animals other than mammals
- A61K35/65—Amphibians, e.g. toads, frogs, salamanders or newts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
A találmány szerinti, ektodermális szövetekben fellépő tumorosburjánzás gátlására szolgáló hatóanyag RNS-t tartal- maz, és hal vagykétéltű megtermékenyített ovumából van kivonva. A találmány tárgyatovábbá eljárás ektodermális szövetekben fellépő tumoros burjánzástgátló, RNS-tartalmú hatóanyag előállítására. Az eljárás során a)halból vagy kétéltűből származó megtermékenyített ovumot keverés útjánsejtfalroncsolásnak vetnek alá, b) az a) lépésben kapott anyagotcentrifugálva proteineket és szénhidrátokat tartalmazó üledéket ésRNS-t tartalmazó felülúszót képeznek, és az RNS-t tartalmazófelülúszót kinyerik, c) az üledéket homogenizálják, és a homogenizáltüledéket tovább ultracentrifugálva RNS-t tartalmazó további fe-lülúszót kapnak, d) a b) és c) lépésben kapott felülúszó frakciókategyesítik, és az egyesített felülúszó frakciót percenként 8000–15 000fordulattal centrifugálva RNS-tartalmú végső felülúszót kapnak, e) azRNS-tartalmú végső felülúszót elválasztjuk, fiziológiás sóoldattalhígítva tumoros burjánzást gátló, RNS-- tartalmú hatóanyagot kapnak,f) a tumoros burjánzást gátló, RNS-tartalmú hatóanyagotszennyeződésektől elválasztják, és g) a f) lépésben szennyeződésekbőlelválasztott RNS-tartalmú hatóanyagot gélszűrőkön legalább kétszerszűrik, és h) az RNS-tartalmú szűrt hatóanyagot liofilizálják. Atalálmány tárgyköréhez tartozik továbbá a fenti hatóanyagot tartalmazókészítmény és eljárás előállítására. ŕ
Description
KIVONAT
A találmány szerinti, ektodermális szövetekben fellépő tumoros buijánzás gátlására szolgáló hatóanyag RNS-t tartalmaz, és hal vagy kétéltű megtermékenyített ovumából van kivonva.
A találmány tárgya továbbá eljárás ektodermális szövetekben fellépő tumoros buijánzást gátló, RNS-tartalmú hatóanyag előállítására. Az eljárás során
a) halból vagy kétéltűből származó megtermékenyített ovumot keverés útján sejtfalroncsolásnak vetnek alá,
b) az a) lépésben kapott anyagot centrifugálva proteineket és szénhidrátokat tartalmazó üledéket és RNSt tartalmazó felülúszót képeznek, és az RNS-t tartalmazó felülúszót kinyerik,
c) az üledéket homogenizálják, és a homogenizált üledéket tovább ultracentrifugáivá RNS-t tartalmazó további felülúszót kapnak,
d) a b) és c) lépésben kapott felülúszó frakciókat egyesítik, és az egyesített felülúszó frakciót percenként 8000-15 000 fordulattal centrifugálva RNS-tartalmú végső felülúszót kapnak,
e) az RNS-tartalmú végső felülúszót elválasztjuk, fiziológiás sóoldattal hígítva tumoros burjánzást gátló, RNS-tartalmú hatóanyagot kapnak,
f) a tumoros buijánzást gátló, RNS-tartalmú hatóanyagot szennyeződésektől elválasztják, és
g) a f) lépésben szennyeződésekből elválasztott RNS-tartalmú hatóanyagot gélszűrőkön legalább kétszer szűrik, és
h) az RNS-tartalmú szűrt hatóanyagot liofilizálják.
A találmány tárgyköréhez tartozik továbbá a fenti hatóanyagot tartalmazó készítmény és eljárás előállítására.
A leírás terjedelme 6 oldal
HU 221 407 B1
HU 221 407 Bl
A találmány tárgya ektodermális eredetű szövetekben fellépő tumoros burjánzást gátló hatóanyag és készítmény, valamint eljárás előállításukra.
A 20. század egyik legkomolyabb gondot okozó betegsége a rák. Számos kísérleti munka foglalkozik azzal, hogy kiderítse a tumoros szövetszaporodás kialakulásának okait. A tumoros sejtek kialakulását, az ilyen sejtek tulajdonságait a szakirodalom tárgyalja [Cancer Rés. 47, 1473 (1987); European Journal of Cancer 15, 585 (1979); Science 197, 893 (1977); Int. Rév. Exp. Pathol. 16, 207 (1976)].
Sok olyan gyógyszer és készítmény ismert, amelyek gátolják a tumor burjánzását. A készítmények hatóanyaga lehet természetes eredetű vagy szintetikusan előállított. Tanulmányozták számos növényi eredetű, természetes hatóanyag tumorgátló hatását [Ukrain J. Cell. Biochem. Supl. 11 A: 53 (1987); és J. Tumor Marker Oncol., 3, 463-465 (1988)].
Kutatómunkánk során feltételeztük, hogy az ektodermális eredetű, differenciált szövetből kialakuló sejtburjánzásnak oka abban keresendő, hogy az addig elnyomott ősi szaporodási kód felszabadulása miatt a fiatal sejtek végtelen szaporodásba kezdenek. A szaporodó fiatal sejtek halmazt (daganatszövetet) képeznek, és metalloproteináz enzimjük segítségével feloldják a környező szöveteket. így diffúz módon növekednek haladnak előre környezetükben, illetve erodálják az ereket, és bejutnak a nyirokrendszerbe, valamint a vérkeringésbe. A leszakadt sejtek áttételeket képezhetnek a primer tumortól távol eső testrészekben is.
Ez a sejtszaporodási séma megfelel a törzsfejlődés kezdeti szakaszában a sejtek végtelen szaporodási kód szerinti rohamos szaporodásának. Az ősi időkben ahhoz, hogy az amorf sejthalmaz helyett szervezett felépítésű szervezet jöjjön létre, szükséges volt a végtelen szaporodási kód elnyomása és helyette a sejtbe olyan kód beépítése, amely az adott szervezet kialakulását és működését biztosítja.
Ismeretes, hogy a szervezetek kialakulásának és működésének kódrendszerét az állatvilágban - beleértve a humanoidokat is - a DNS tartalmazza. Kutatásaink során felismertük, hogy a DNS szintjén történik az az alapvető esemény, amely az addig differenciáltan működő sejt malignus átalakulását okozza.
Célul tűztük ki olyan hatóanyag előállítását, amely tartalmazza azokat a kódokat, amelyek a végtelen és rohamos sejtszaporodást meg tudják gátolni. Kísérleti munkánk során az tapasztaltuk, hogy a megtermékenyített ovumból nyerhető ki az a hatóanyag, amely ezt a genetikai kódot tartalmazza - feltételezésünk szerint az RNS-hez kapcsolva.
A találmány szerinti hatóanyag előállításánál kiindulási anyagként állati eredetű, halaktól vagy kétéltűektől származó megtermékenyített ovumot használunk.
Kiindulási anyagként előnyösen az alábbi halfajták megtermékenyített ovuma alkalmazható: ponty - Cyprinus caprio, compó - Tinca tinca, fenékjáró küllő - Gobio gobio, felpillantó küllő - Gobio uranoscopus, rózsás máma - Barbus barbus, magyar máma - Barbus meridionalispetenyii, fehér busa - Hypophthalmichthys molitrix, pettyes busa - Aristichtys nobilis, kárász Carassius carassius, ezüst kárász vagy kövi kárász Carassius auratus gibelio, vaskos csabak - Leuciscus sonffia agassizi, paduc vagy vésettajkú paduc Chondrostoma nasus, razbora - Pseudorasbora parva, jászkeszeg vagy ónos keszeg - Leuciscus idus, fehér amur - Ctenopharyngodon idella, domolykó vagy fejes domolykó - Leuciscus cephalus, kele vagy pirosszemű kele - Scardinius erythrophthalmus, nyúldomolykó Leuciscus leuciscus, leányhal - Leuciscus virgo, koncér vagy veresszámyú koncér - Rutilus rutilus, fürge cselle - Phoxinus phoxinus, mocsári cselle - Phoxinus percnurus, kurta baing - Leucaspius delineatus, szivárványos ökle - Rhodeus sericeus amarus, garda Pelecus cultratus, balin vagy ragadozó ön - Aspius aspius, állas küsz - Albumus mentő, küsz vagy szélhajtó küsz - Albumus alburnus, sujtásos küsz Alburnoides bipunctatus, szilvaorrú keszeg vagy Éva keszeg - Vimba vimba, karika keszeg - Blicca bjoerkna, dévérkeszeg - Abramis brama, lapos keszeg - Abramis ballerus, bagolykeszeg - Abramis sapa, aranykárász Carassius auratus.
Amennyiben kétéltű eredetű megtermékenyített ovumot használunk, a kiindulási anyag célszerűen béka, így Rana pipiens eredetű.
A megtermékenyítést mesterséges úton végezzük, és az embrionális fejlődést olyan stádiumban szakítjuk meg, amelynél a végtelen szaporodási folyamat leállt, és helyette differenciált fejlődés indult meg. A megtermékenyítést ezért legfeljebb 24 óra, előnyösen 14-16 óra időtartamig végezzük. Az így keletkezett megtermékenyített ovumot dolgozzuk fel a találmány értelmében. A megtermékenyítést előnyösen 12-14 °C hőmérsékleten folytatjuk le.
Fentiek alapján a találmány eljárás ektodermális szövetekben fellépő tumoros burjánzást gátló, RNStartalmú hatóanyag előállítására, amelynek során megtermékenyített ovumból kivonást végzünk, amelynek során
a) halból vagy kétéltűből származó megtermékenyített ovumot keverés útján sejtfalroncsolásnak vetünk alá,
b) az a) lépésben kapott anyagot centrifugálva proteineket és szénhidrátokat tartalmazó üledéket és RNSt tartalmazó felülúszót képezünk, és az RNS-t tartalmazó felülúszót kinyerjük,
c) az üledéket homogenizáljuk, és a homogenizált üledéket tovább ultracentrifugálva RNS-t tartalmazó további felülúszót kapunk,
d) a b) és c) lépésben kapott felülúszó frakciókat egyesítjük, és az egyesített felülúszó frakciót percenként 8000-15 000 fordulattal centrifugálva RNStartalmú végső felülúszót kapunk,
e) az RNS-tartalmú végső felülúszót elválasztjuk, fiziológiás oldattal hígítva tumoros burjánzást gátló, RNS-tartalmú hatóanyagot kapunk,
f) a tumoros burjánzást gátló, RNS-tartalmú hatóanyagot szennyeződésektől elválasztjuk, és
g) a f) lépésben szennyeződésektől elválasztott RNS-tartalmú hatóanyagot gélszűrőkön legalább kétszer szűrjük, és
h) az RNS-tartalmú szűrt hatóanyagot liofilizáljuk.
HU 221 407 Bl
A megtermékenyített és sejtfalroncsolásnak alávetett ovumot a végleges feldolgozásig mélyhűtőben, célszerűen -70 °C hőmérsékleten tárolhatjuk. A feldolgozás előtt a mélyhűtött anyagot 20-25 °C hőmérsékletű vízfürdőben engedjük fel 2-3 óra alatt.
A megtermékenyített, sejtfalroncsolásnak alávetett ovumot percenként 25 000-30 000 fordulattal ultracentrifugáljuk, majd az RNS-t tartalmazó felülúszót elkülönítjük az üledéktől, amely főképpen nagy molekulatömegű fehéijéket és szénhidrátokat tartalmaz. Az üledéket ezután ismét ultracentrifugálással kezeljük annak érdekében, hogy az RNS-tartalmú felülúszót tökéletesebben elkülönítsük a nagy molekulatömegű fehérje- és szénhidráttartalmú frakciótól.
A hatóanyagtartalmú egyesített felülúszó frakciókat a tökéletes elválasztás céljából ismét centrifugáljuk, majd az így nyert felülúszót végső fehéijementesítés, illetve baktériummentesítés céljából többszöri gélszűrésnek vetjük alá.
Az előállított hatóanyag liofilizálható, illetve fiziológiás oldatokkal elegyítve készítménnyé alakítható. A készítményben a hatóanyag és a fiziológiás oldat egymáshoz viszonyított tömegaránya tetszőleges lehet, előnyösen olyan oldatot állítunk elő, amelyben a hatóanyag és az adalék tömegaránya 1:2.
A liofilizált hatóanyag korlátlan ideig tárolható, a fiziológiás sóoldattal vagy dextrózoldattal hígított készítmény -15 °C hőmérsékleten 4 évig tárolható.
Feltételezésünk szerint a megtermékenyített ovum felülúszójában lévő RNS-t választjuk el a szénhidrátoktól és nagy molekulatömegű proteinektől.
A találmány szerinti készítmény tumorgátló hatóanyagként intravénásán, kúraszerűen alkalmazandó. Egy 70 kg-os humán betegnek olyan készítményt adunk be, amely 1,5 ml hatóanyagot tartalmaz 10 ml térfogatra hígítva - célszerűen fiziológiás sóoldattal.
A kezelést az úgynevezett Besredka módszerrel ajánlatos végezni. Ennek során úgy járunk el, hogy a kúra megkezdése előtt a betegnek 0,1 ml hatóanyagtartalmú oldatot adunk be fiziológiás sóoldattal 10 ml térfogatra hígítva. Amennyiben érzékenység, úgynevezett anaphylaxiás sokk tapasztalható, a hatóanyagtartalmat 14 nap alatt növeljük fokozatosan 1,5 ml mértékig. Elvégzett kísérleteink során ilyen érzékenység nem volt tapasztalható.
Egy kúra 14 napig tart, ennek során az 1,5 ml hatóanyagot fiziológiás sóoldattal 10 ml térfogatra hígítva naponta intravénásán beadjuk (70 kg testtömegű betegre vonatkoztatva). Ezt követően újabb 14 napon keresztül másnaponta adjuk be a fenti készítményt.
Fél év elteltével kontrollt végzünk, és ha a tumorgátló hatás nem volt elégséges, úgy egy további 14-napos kúrát alkalmazunk naponta történő intravénás beadással.
A következőkben a találmány szerinti hatóanyagot és készítményt, illetve annak előállítási eljárását példákkal mutatjuk be.
1. példa
Édesvízi ponty (Cyprinus Carpio) nőstény és hím egyedeit elkülönítjük. A nőstény egyedekből ikrát, míg a hím egyedekből haltejet fejünk le. Az ikrát a haltejjel lombikban összekeverve mesterséges megtermékenyítést végzünk.
A megtermékenyített ovumot 14 °C hőmérsékleten 14 órán át állni hagyjuk. Ezután a megtermékenyített ovumot nátrium-citrát pufferoldattal homogenizáljuk, majd az elegyet sejtfalroncsolás céljából 10 percig kevertetjük. Az így kapott anyagot ezután mélyhűtőben -70 °C hőmérsékleten megfagyasztjuk, és feldolgozásig ott tároljuk. Feldolgozás előtt a mélyhűtőből kivett anyagot 27 °C hőmérsékletű vízfürdőben 2 óra alatt felengedjük, majd percenként 30 000 fordulattal 4 órán keresztül ultracentrifugáljuk.
A felülúszót elkülönítjük, ebben a frakcióban található az RNS-tartalmú céltermékünk. Az üledéket 2 órán át ismét ultracentrifugálással kezeljük, ezúttal percenként 35 000 fordulattal. A felülúszót elkülönítjük, és az összes felülúszó frakciót egyesítjük. Az összegyűjtött felülúszó frakciót percenként 10 000 fordulattal 1 órán át ismét centrifugáljuk, a felülúszót elkülönítjük, majd 1 tömegrész felülúszót 2 tömegrész fiziológiás sóoldattal elegyítünk.
A terméket több fokozatban különböző pórusátmérőjű gélszűrőn át szűrjük. A gélszűrők pórusátmérői az alábbiak: 8 pm, 0,8 pm, 0,45 pm és 0,22 pm. Ezután az előbbi szűrési sorozatot megismételjük, majd a leszűrt anyagot steril, desztillált vízzel háromszoros térfogatra hígítjuk, és baktériumszint meghatározást végzünk. A meghatározást úgy folytatjuk le, hogy az előállított termékből vett mintát véres agar táptalajra szélesztjük, és a táptalajt 24 órán át inkubáljuk. 24 óra elteltével baktériumtenyészet nem volt észlelhető, így megállapítottuk, hogy a termék baktériummentes.
A készítményt endotoxin vizsgálatnak vetettük alá. A vizsgálat során meghatározott endotoxin érték 3E/ml. A készítmény endotoxin szintje megfelelő.
A készítményt ampullákba szereljük ki. A készítmény -18 °C hőmérsékleten tárolva 2 évig felhasználható.
2. példa
Az 1. példa szerinti, hígítás nélküli hatóanyagot HPLC kromatográfiás eljárással vizsgáljuk. A kromatográfiás vizsgálat azt mutatja, hogy a hatóanyagra jellemző csúcsok a 4000-10 000 molekulatömeg közötti területen jelennek meg. A hatóanyag a fenti tartományban megjelenő csúcsokkal azonosítható.
3. példa
Az 1. példát ismételjük meg azzal az eltéréssel, hogy kiindulási egyedként pettyes busát (Aristichtys nobilis) alkalmazunk. A továbbiakban mindenben az 1. példa szerint járunk el, azonban a gélszűrőkön átszűrt anyagot liofilizáljuk. A liofilizált anyagot ampullázva tároljuk.
4. példa
Az 1. példát ismételjük meg, azonban kiindulási egyedként Rana pipiensí alkalmazunk. A nőstény egyedek hypophyses-ét progreszteronnal injekciózzuk az ovuláció elősegítésére.
HU 221 407 BI
A nőstényekből származó petéket és a hímekből származó spermát 10 cm3 desztillált vizet tartalmazó petricsészében elegyítjük a mesterséges megtermékenyítés céljából. A továbbiakban mindenben az 1. példa szerint járunk el, azonban a hatóanyagot fiziológiás sóoldat helyett 5 dextrózoldattal hígítjuk 1:2 tömegarányban (1 tömegrész hatóanyaghoz 2 tömegrész dextrózoldatot keverünk).
5. példa - Hatástani vizsgálat
Az 1. példa szerinti hatóanyag hatásosságát in vitro 10 kísérletben MCF-7 humán tüdőrákszöveten vizsgáltuk. Az MCF-7 rákos szövet a budapesti Onkológiai Intézetből származott.
A rákos szövet sejtszáma 7 x1ο4 sejt/ml. A tenyésztést 2 tömeg%-os tehénszérummal kiegészített RPMI 15 táptalajon végezzük Greiner lemezeken.
Az 1. számú kísérletben 200 ml közeghez 300 ml 1. példa szerinti hatóanyagot, a 2. számú kísérletben 850 ml közeghez 150 ml 1. példa szerinti hatóanyagot és a 3. számú kísérletben 970 ml közeghez 30 ml hatóanyagot adagolunk. Kontrollként olyan kísérletet végzünk, amelynél a tenyésztési közeghez hatóanyag helyett desztillált vizet adagolunk. Minden kísérletet 33 párhuzamos méréssel végzünk.
Megfigyeléseket 24, 48 és 72 óra elteltével végzünk, meghatározzuk a sejtszámot, valamint az életképes (viabilis) sejtek %-os arányát - metilénkékkel végzett festési módszerrel.
A vizsgálat eredményeit az alábbi táblázat tartalmazza.
| kísérlet | sejtszám* 24 h múlva | viabilitási % | sejtszám* 48 h múlva | viabilitási % | sejtszám* 72 h múlva | viabilitási % j |
| kontroll | 0,81±0,13 | 99±2 | 2,90±0,62 | 100±0 | 4,27 ±1,03 | 96±7 |
| 1. | 0,65 ±0,02 | 97±3 | l,33±0,49 | 95±5 | 0,80±0,17 | 47±36 |
| 2. | 0,89±0,05 | 93±3 | l,73±0,55 | 95±5 | l,60±0,70 | 65±13 |
| 3. | 0,91 ±0,20 | 97±1 | 2,87±0,83 | 93 ±6 | l,67±0,35 | 52±4 |
* 105/ml
Az elvégzett vizsgálatok eredményeiből kitűnik, hogy a találmány szerinti készítmény már a legkisebb vizsgált dózisban is erőteljesen gátolja az MCF-7 tu- 30 moros szövet proliferációját. A vizsgálat azt mutatja, hogy a gátló hatás maximumát 72 óra elteltével éri el.
A tenyészetet morfológiai vizsgálatoknak is alávetjük oly módon, hogy egy kontrollközeget és kezelt közeget vizsgálunk. A kontroll esetén a hatóanyag helyett desztillált vizet adagolunk a közeghez. Mind a kontroll, mind a kezelt tenyészet mutat mitotikus és apoptikus aktivitást.
Azt tapasztaltuk, hogy az 1-3. számú kísérletben a hatóanyaggal történő kezelést követően a 48-72 óra közötti időszakban az apoptozis meghaladja a mitozis mér-
Claims (10)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás ektodermális szövetekben fellépő tumoros burjánzást gátló, RNS-tartalmú hatóanyag előállítására, amelynek során megtermékenyített ovumból kivonást végzünk, azzal jellemezve, hogya) halból vagy kétéltűből származó megtermékenyített ovumot keverés útján sejtfalroncsolásnak vetünk alá,b) az a) lépésben kapott anyagot centrifugálva proteineket és szénhidrátokat tartalmazó üledéket és RNSt tartalmazó felülúszót képezünk, és az RNS-t tartalmazó felülúszót kinyerjük,c) az üledéket homogenizáljuk, és a homogenizált üledéket tovább ultracentrifugálva RNS-t tartalmazó további felülúszót kapunk,d) a b) és c) lépésben kapott felülúszó frakciókat egyesítjük, és az egyesített felülúszó frakciót percenként 8000-15 000 fordulattal centrifugálva RNStartalmú végső felülúszót kapunk,e) az RNS-tartalmú végső felülúszót elválasztjuk, fiziológiás sóoldattal hígítva tumoros burjánzást gátló, RNS-tartalmú hatóanyagot kapunk,f) a tumoros burjánzást gátló, RNS-tartalmú hatóanyagot szennyeződésektől elválasztjuk, ésg) az f) lépésben szennyeződésekből elválasztott RNS-tartalmú hatóanyagot gélszűrőkön legalább kétszer szűrjük, ésh) az RNS-tartalmú szűrt hatóanyagot liofilizáljuk.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az a) lépés szerinti sejtfalroncsolást a megtermékenyítést követő 24 órán belül, előnyösebben 14-16 óra múlva folytatjuk le.
- 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az e) lépésben a kapott felülúszót 1:2 tömegarányban hígítjuk a fiziológiás sóoldattal.
- 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a b) lépés szerinti centrifügálást percenként 25 000-30 000 fordulattal folytatjuk le.
- 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a g) lépésben a hatóanyagot egymást követően 8 μιη, 0,8 pm, 0,45 pm és 0,22 pm pórusátmérőjű gélszűrőn keresztül szüljük.
- 6. Hatóanyag ektodermális szövetekben fellépő tumoros burjánzás gátlására, amely hal vagy kétéltű meg4HU 221 407 Bl termékenyített ovumából származó, az 1. igénypont szerinti eljárással előállított RNS-t tartalmaz.
- 7. Készítmény ektodermális szövetekben fellépő tumoros burjánzás gátlására, amely a 6. igénypont szerinti hatóanyag gyógyászatilag hatásos mennyiségét 5 tartalmazza gyógyászatilag elfogadható hordozók mellett.
- 8. A 7. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, amely gyógyászatilag elfogadható hordozóként hígítót tartalmaz.
- 9. Eljárás ektodermális szövetekben fellépő tumoros burjánzást gátló gyógyászati készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy a 6. igénypont szerinti, RNS-tartalmú hatóanyag gyógyászatilag hatásos mennyiségét gyógyászatilag elfogadható hígítóval keverjük.
- 10. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hígítóként fiziológiás sóoldatot, dextrózoldatot vagy steril desztillált vizet alkalmazunk a hatóanyagra10 vonatkozóan 1:2 tömegarányban.
Priority Applications (17)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU9701165A HU221407B1 (hu) | 1997-03-28 | 1997-05-09 | Ektodermális eredetû szövetekben fellépõ tumoros burjánzást gátló hatóanyag és készítmény, valamint eljárás elõállításukra |
| AT98913971T ATE272649T1 (de) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Aktive substanz für inhibierung von tumoröse proliferation im geweben aus der ektoderm |
| JP54132398A JP2001518091A (ja) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | 外胚葉誘導組織における腫瘍増殖を阻害する活性物質及び組成物 |
| DK98913971T DK0975665T3 (da) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Aktivt stof og præparat, der inhiberer tumorös proliferation i ektodermalt afledte væv |
| US09/381,894 US6372263B1 (en) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Active substance and composition inhibiting tumorous proliferation in ectoderm derived tissues |
| CNB988044560A CN1222538C (zh) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | 抑制外胚层衍生组织中肿瘤增殖的活性物质和组合物 |
| PT98913971T PT975665E (pt) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Substancia activa e composicao de proliferacao tumorosa em tecidos derivados de ectoderme |
| ES98913971T ES2226119T3 (es) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Sustancia activa y composicion que inhibe la proliferacion tumoral en tejidos derivados del ectodermo. |
| PCT/HU1998/000031 WO1998043996A1 (en) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Active substance and composition inhibiting tumorous proliferation in ectoderm derived tissues |
| CA002284863A CA2284863C (en) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Active substance and composition inhibiting tumorous proliferation in ectoderm derived tissues |
| EP98913971A EP0975665B1 (en) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Active substance and composition inhibiting tumorous proliferation in ectoderm derived tissues |
| DE69825433T DE69825433T2 (de) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Aktive substanz für inhibierung von tumoröse proliferation im geweben aus der ektoderm |
| BR9808631-6A BR9808631A (pt) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Substância ativa e composição inibindo proliferação de tumor em tecidos derivados de ectoderma |
| SI9830701T SI0975665T1 (en) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Active substance and composition inhibiting tumorous proliferation in ectoderm derived tissues |
| AU68483/98A AU740247B2 (en) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Active substance and composition inhibiting tumorous proliferation in ectoderm derived tissues and process for producing thereof |
| IL13209598A IL132095A0 (en) | 1997-03-28 | 1998-03-24 | Active substance and composition inhibiting tumorous poliferation in ectoderm derived tissues and process for production thereof |
| IL132095A IL132095A (en) | 1997-03-28 | 1999-09-27 | Active substance and composition inhibiting tumorous proliferation in ectoderm derived tissues and process for production thereof |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU9700673A HU9700673D0 (en) | 1997-03-28 | 1997-03-28 | Method for preparing pharmaceutical composition having an effect on tumourous growth in ectodermal tissues |
| HU9701165A HU221407B1 (hu) | 1997-03-28 | 1997-05-09 | Ektodermális eredetû szövetekben fellépõ tumoros burjánzást gátló hatóanyag és készítmény, valamint eljárás elõállításukra |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9701165D0 HU9701165D0 (en) | 1997-09-29 |
| HUP9701165A2 HUP9701165A2 (hu) | 1999-03-29 |
| HUP9701165A3 HUP9701165A3 (en) | 2000-08-28 |
| HU221407B1 true HU221407B1 (hu) | 2002-09-28 |
Family
ID=89995339
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9701165A HU221407B1 (hu) | 1997-03-28 | 1997-05-09 | Ektodermális eredetû szövetekben fellépõ tumoros burjánzást gátló hatóanyag és készítmény, valamint eljárás elõállításukra |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6372263B1 (hu) |
| EP (1) | EP0975665B1 (hu) |
| JP (1) | JP2001518091A (hu) |
| CN (1) | CN1222538C (hu) |
| AT (1) | ATE272649T1 (hu) |
| AU (1) | AU740247B2 (hu) |
| BR (1) | BR9808631A (hu) |
| CA (1) | CA2284863C (hu) |
| DE (1) | DE69825433T2 (hu) |
| DK (1) | DK0975665T3 (hu) |
| ES (1) | ES2226119T3 (hu) |
| HU (1) | HU221407B1 (hu) |
| IL (2) | IL132095A0 (hu) |
| PT (1) | PT975665E (hu) |
| SI (1) | SI0975665T1 (hu) |
| WO (1) | WO1998043996A1 (hu) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4882421A (en) * | 1982-09-23 | 1989-11-21 | Alfacell Corporation | Pharmaceutical for treating tumors and method for making it |
| KR970006154B1 (ko) | 1987-07-06 | 1997-04-24 | 루이지아나 스테이트 유니버시티 아그리컬춰럴 앤드 메카니칼 컬리지 | 용해성 펩티드에 의한 진핵 병원체와 신생물의 억제 및 섬유아세포와 임파구의 자극 |
| US5728805A (en) * | 1988-04-06 | 1998-03-17 | Alfacell Corp. | Pharmaceuticals and method for making them |
| WO1991007435A1 (en) * | 1989-11-13 | 1991-05-30 | Alfacell Corporation | Purified protein and bioactive pharmaceutical |
| CA2293664A1 (en) | 1997-06-04 | 1998-12-10 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Fsh-releasing peptides |
-
1997
- 1997-05-09 HU HU9701165A patent/HU221407B1/hu active IP Right Revival
-
1998
- 1998-03-24 ES ES98913971T patent/ES2226119T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-03-24 CA CA002284863A patent/CA2284863C/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-03-24 JP JP54132398A patent/JP2001518091A/ja not_active Ceased
- 1998-03-24 DK DK98913971T patent/DK0975665T3/da active
- 1998-03-24 BR BR9808631-6A patent/BR9808631A/pt not_active Application Discontinuation
- 1998-03-24 DE DE69825433T patent/DE69825433T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1998-03-24 SI SI9830701T patent/SI0975665T1/xx unknown
- 1998-03-24 AU AU68483/98A patent/AU740247B2/en not_active Ceased
- 1998-03-24 AT AT98913971T patent/ATE272649T1/de not_active IP Right Cessation
- 1998-03-24 IL IL13209598A patent/IL132095A0/xx active IP Right Grant
- 1998-03-24 US US09/381,894 patent/US6372263B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-03-24 PT PT98913971T patent/PT975665E/pt unknown
- 1998-03-24 EP EP98913971A patent/EP0975665B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-03-24 CN CNB988044560A patent/CN1222538C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1998-03-24 WO PCT/HU1998/000031 patent/WO1998043996A1/en active IP Right Grant
-
1999
- 1999-09-27 IL IL132095A patent/IL132095A/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU740247B2 (en) | 2001-11-01 |
| CN1253566A (zh) | 2000-05-17 |
| DE69825433T2 (de) | 2005-09-15 |
| ATE272649T1 (de) | 2004-08-15 |
| CA2284863C (en) | 2007-07-31 |
| AU6848398A (en) | 1998-10-22 |
| CN1222538C (zh) | 2005-10-12 |
| DK0975665T3 (da) | 2004-12-06 |
| IL132095A0 (en) | 2001-03-19 |
| SI0975665T1 (en) | 2005-02-28 |
| PT975665E (pt) | 2004-12-31 |
| WO1998043996A1 (en) | 1998-10-08 |
| HUP9701165A3 (en) | 2000-08-28 |
| JP2001518091A (ja) | 2001-10-09 |
| HU9701165D0 (en) | 1997-09-29 |
| US6372263B1 (en) | 2002-04-16 |
| EP0975665A1 (en) | 2000-02-02 |
| BR9808631A (pt) | 2000-05-16 |
| IL132095A (en) | 2006-12-10 |
| ES2226119T3 (es) | 2005-03-16 |
| EP0975665B1 (en) | 2004-08-04 |
| HUP9701165A2 (hu) | 1999-03-29 |
| CA2284863A1 (en) | 1998-10-08 |
| DE69825433D1 (de) | 2004-09-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kumari et al. | Invitro anti-inflammatory and anti-artheritic property of Rhizopora mucronata leaves | |
| DE69723092T2 (de) | Zubereitungen aus immunogenen molekülen, die granulozyten-makrophagen-stimulierenden faktor als adjuvans enthalten | |
| US20210346455A1 (en) | Pharmaceutical composition comprising purple corn extract for prevention or treatment of skin disease | |
| JP2023509687A (ja) | 羊膜上皮細胞由来のエクソソームを有効成分として含有する眼球疾患の予防または治療用組成物 | |
| KR101779480B1 (ko) | 펩톤발효물을 포함하는 탈모의 예방, 치료, 또는 발모촉진용 조성물, 및 이의 제형 | |
| DE69908509T2 (de) | Antibakterielle Peptide und diese als wirksamen Bestandteil enthaltende antibakterielle Mittel | |
| EP1244462B1 (de) | Pharmazeutische zusammensetzung aus spinnengiften sowie deren herstellung und verwendung zur behandlung von tumorerkrankungen | |
| DK166806B1 (da) | Anvendelse af plantepollenekstrakter til fremstilling af farmaceutiske, tumorcellevaeksthaemmende praeparater | |
| HU221407B1 (hu) | Ektodermális eredetû szövetekben fellépõ tumoros burjánzást gátló hatóanyag és készítmény, valamint eljárás elõállításukra | |
| KR20140065583A (ko) | 항생제저항성 유해균의 생장 억제용 조성물 | |
| US8945635B2 (en) | Formulations comprising extracts from primitive plant species (mosses, ferns and lichens) to treat and prevent cancers | |
| KR100573375B1 (ko) | 으름덩굴 종자 추출물을 포함하는 항암 조성물 및 그의제조방법 | |
| DE60207257T2 (de) | Heterocarpin, ein protein, das humanes ghrh bindet | |
| KR100646078B1 (ko) | 광나무 추출물을 함유하는 퇴행성 뇌신경계 질환의 예방 및 치료용 조성물 | |
| KR20190115226A (ko) | 봉독을 포함하는 유단백 합성 촉진용 조성물 | |
| KR100335578B1 (ko) | 겨우살이 추출물을 유효성분으로 하는 발암예방용 조성물 | |
| US20230310513A1 (en) | Method for feeding a flatworm and flatworm extract free of human-pathogenic microorganisms | |
| KR102543076B1 (ko) | Dna 구성성분을 포함하는 특정 유전자 발현 억제, 후성유전학적 변이 조절 피부 상태 개선용 조성물 및 이의 제조방법 | |
| KR102642293B1 (ko) | 거문도닥나무 추출물을 포함하는 피부질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| CN116003558B (zh) | 一种抑菌抗氧化辣木籽多肽及其应用 | |
| DE3236298C2 (hu) | ||
| RU2197253C2 (ru) | Способ повышения половой активности | |
| EP1196439A2 (de) | Verbindungen mit antibiotischer wirkung | |
| EP1133990A1 (en) | Anti-tumor composition consisting of a fraction of gravid uterus or mammalian placenta | |
| JPH107544A (ja) | 皮膚外用剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FH91 | Appointment of a representative |
Free format text: FORMER REPRESENTATIVE(S): DR. VITALIS LASZLO, DANUBIA SZABADALMI ES VEDJEGY IRODA KFT., HU Representative=s name: S.B.G.& K. SZABADALMI UEGYVIVOEI IRODA SZENTPE, HU |
|
| MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees | ||
| NF4A | Restoration of patent protection | ||
| MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees | ||
| NF4A | Restoration of patent protection | ||
| FH92 | Termination of representative |
Representative=s name: DR. VITALIS LASZLO, DANUBIA SZABADALMI ES VEDJ, HU |
|
| HC9A | Change of name, address |
Owner name: MAGVASI GYULA, HU Free format text: FORMER OWNER(S): MAGVASI GYULA, HU |