DK166806B1 - Anvendelse af plantepollenekstrakter til fremstilling af farmaceutiske, tumorcellevaeksthaemmende praeparater - Google Patents
Anvendelse af plantepollenekstrakter til fremstilling af farmaceutiske, tumorcellevaeksthaemmende praeparater Download PDFInfo
- Publication number
- DK166806B1 DK166806B1 DK445686A DK445686A DK166806B1 DK 166806 B1 DK166806 B1 DK 166806B1 DK 445686 A DK445686 A DK 445686A DK 445686 A DK445686 A DK 445686A DK 166806 B1 DK166806 B1 DK 166806B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- pollen
- cells
- amino acids
- peptides
- extracts
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 83
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 18
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 title description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 94
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 29
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 24
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 20
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 15
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims abstract description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims abstract description 10
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 18
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 11
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 claims description 9
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 7
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 6
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 5
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 claims description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 3
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 3
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010023825 Laryngeal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 claims description 2
- 206010023841 laryngeal neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 claims 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 claims 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 claims 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 claims 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 claims 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 abstract description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 abstract description 4
- 239000000470 constituent Substances 0.000 abstract description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 abstract description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 description 18
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 241000235395 Mucor Species 0.000 description 5
- 229950006790 adenosine phosphate Drugs 0.000 description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 2
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 2
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000009422 growth inhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000002332 leydig cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000005267 prostate cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 240000000724 Berberis vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 241001117491 Mucor brunneogriseus Species 0.000 description 1
- 241001169397 Mucor corticola Species 0.000 description 1
- 241000114093 Mucor flavus Species 0.000 description 1
- 241000907556 Mucor hiemalis Species 0.000 description 1
- 241000025769 Mucor luteus Species 0.000 description 1
- 241001149951 Mucor mucedo Species 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 244000082988 Secale cereale Species 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 229930003537 Vitamin B3 Natural products 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000007933 aliphatic carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000003563 glycoside group Chemical group 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 201000004962 larynx cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 230000017095 negative regulation of cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000017066 negative regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N nicotinic acid amide Natural products NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 208000017497 prostate disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000019164 vitamin B2 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011716 vitamin B2 Substances 0.000 description 1
- 235000019160 vitamin B3 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011708 vitamin B3 Substances 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
DK 166806 B1
Opfindelsen angår anvendelsen af pollen-ekstrakter til fremstilling af farmaceutiske præparater, der hæmmer væksten af tumorceller samtidig med, at de stimulerer stofskifteprocesser i sunde celler.
5 I faglitteraturen er beskrevet et stort antal ak tive stoffer, der hæmmer væksten af tumorceller eller dræber tumorceller eller leukæmiceller. Disse aktive stoffer fører imidlertid i almindelighed også hos sunde celler til en vis hæmning af væksten, idet dog denne 10 væksthæmning er betydeligt mindre end væksthæmningen hos kræftcellerne.
Den foreliggende opfindelse har haft til opgave at tilvejebringe et farmaceutisk præparat, der hæmmer væksten af tumorceller, samtidigt med at det stimulerer 15 stofskifteprocesserne i sunde celler.
Det viste sig overraskende, at ekstrakter vundet fra plantepollen med vandige ekstraktionsmidler, eller på aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer berigede fraktioner af disse pollenekstrakter 20 hæmmer væksten af tumorceller og samtidigt stimulerer stofskifteprocesserne i sunde celler.
I litteraturen er beskrevet et stort antal cyto-statica, og nogle af disse produkter er også tidligere benyttet til kemoterapeutisk behandling af tumorer. Der 25 kan i denne sammenhæng henvises til publikationen af Pirwitz "Grundlagen und Praxis chemischer Tumorbehand-lungen", Berlin, Springer, 1954.
En væsentlig ulempe ved de fleste hidtil kendte, til kræftbehandling anvendte midler består i, at de ikke 30 blot hæmmer væksten af kræftcellerne, men også virker toxisk på sunde celler. Der er tidligere gennemført mange arbejder med henblik på til kemoterapi af tumorer at finde midler, der ikke udviser nævnte ulempe. Eksempelvis er der i publikationen af B. Kellner et al., 35 "Naturwissenschaft", 1955, side 582 og 583, beskrevet DK 166806 B1 2 cytostatiske midler, der er baseret på allerede tidligere til kemoterapi af tumorer anvendte midler, såsom på nitrogen-sennepsgas, idet toxiciteten af disse midler er formindsket ved en kemisk binding til sukker, såsom til 5 D-mannit. I rødderne af visse berberisvækster er fundet mitosehæmmende stoffer, der er opbygget af glycosidrest-er og en flerkernet aglucon udvisende aromatiske rester og cycloaliphatiske rester. Der kan i denne sammenhæng henvises til publikationen af A. Stoll et al., Helv.
10 Chirn. Acta Nr. 37, side 1747-1762, 1954.
Endvidere kendes fremgangsmåder til fremstilling af ekstrakter af plantepollen, og der kan i denne sammenhæng for eksempel henvises til i tysk patentskrift nr. 1 467 750 og østrigsk patentskrift nr. 255 643 be-15 skrevne fremgangsmåder. Ifølge disse fremgangsmåder er det lykkedes at vinde pollenekstrakter, der er frie eller i det væsentlige frie for højmolekylære proteiner fra pollenkappen, der kan fremkalde allergier. Ved de beskrevne fremgangsmåder blev pollen ekstraheret med et 20 vandigt ekstraktionsmiddel, derefter blev der podet med en svamp af slægten Mucor, og i nærværelse af denne svamp blev de høj molekylære proteiner nedbrudt til lavmolekylære proteiner eller aminosyrer. Endelig blev det vandige medium fraskilt og tørret, og pollenresten blev 25 ekstraheret yderligere med et ikke-vandigt medium, og også denne anden ekstrakt blev udvundet.
De ved disse kendte fremgangsmåder med det vandige ekstraktionsmiddel og det ikke-vandige ekstraktionsmiddel vundne pollenekstrakter og også blandinger 30 deraf er kommercielt tilgængelige, og de benyttes som styrkende midler, til behandling af prostatalidelser, til fremme af sårheling og knoglebrudsheling og som betændelseshæmmende middel.
I den ikke til teknikkens stade hørende europæi-35 ske patentansøgning 86-106 017.6 (svarende til europæisk offentliggørelsesskrift nr. 201.053) er endvidere be- DK 166806 B1 3 skrevet en fremgangsmåde til fremstilling af et farmaceutisk præparat til forebyggende behandling af allergier, hvilket præparat som aktivt stof indeholder en med vandige ekstraktionsmidler eller med ikke-vandige eks-5 traktionsmidler vundet pollenekstrakt.
Det har nu overraskende vist sig, at en med et vandigt ekstraktionsmiddel vundet ekstrakt fra plante-pollen hæmmer væksten af tumorceller og samtidigt stimulerer stofskifteprocesserne i sunde celler.
10 Den foreliggende opfindelse angår anvendelse af plantepollenekstrakter til fremstilling af farmaceutiske præparater, der hæmmer væksten af tumorceller samtidig med, at de stimulerer stofskifteprocesserne i sunde celler, hvorhos denne anvendelse er ejendommelig ved, at 15 der anvendes en med vandige ekstraktionsmidler fra plan-tepollen vundet ekstrakt, hvorhos denne ekstrakt højst indeholder 5 vægt% højmolekylære proteiner eller er fri for sådanne.
Foretrukne ekstrakter, der ifølge opfindelsen an-20 vendes til fremstilling af de farmaceutiske præparater til bekæmpelse af tumorceller, er tørre ekstrakter, der udviser et vandindhold på under 12 vægt% baseret på ekstraktens totalvægt, og som indeholder mindst 70 vægt% carbonhydrater, 5-12 vægt% aminosyrer og/eller peptider 25 samt vandopløselige vitaminer fra B-gruppen.
Til testning af den hæmmende virkning, som plan-tepollenekstrakterne udøver på kræftceller, blev der udtaget et stort antal celler, såsom humane strubehovedkræftceller, humane leverkræftceller, blærekræftceller, 30 prostatakræftceller, testikelkræftceller og humane brystkræftceller, og der blev også testet leukæmiceller. Cellernes overlevelsesrate blev bestemt ved en tælling af cellerne ved kulturens start og efter en bestemt dyrkningsfase.
35 Ved forsøgene til brug ved sammenligning blev de pågældende cellekulturer dyrket uden tilsætning af de DK 166806 B1 4 med vandige ekstraktionsmidler vundne plantepolleneks-trakter.
Ved forsøgene til bestemmelse af hæmningen af tumorcellernes vækst blev der efter en indledende dyrk-5 ningsfase tilsat den med de vandige ekstraktionsmidler vundne plantepollenekstrakt.
I alle tilfælde blev der før tællingerne foretaget farvninger med trypanblåt, hvorved de døde celler blev farvet.
10 Det viste sig overraskende, at der ved nogle ar ter af de testede kræftceller straks efter tilsætningen af de ifølge opfindelsen ud fra plantepollenekstrakter fremstillede præparater blev konstateret en ringe stigning i celletallet for kræftcellerne. I disse tilfælde 15 fulgte imidlertid efter en fortsat behandling på to eller flere dage der-efter et fald i antallet af de levende kræftceller i kulturen. Hos nogle af de testede kræftceller fulgte straks efter tilsætningen af de ifølge opfindelsen ud fra plantepollenekstrakter fremstille-20 de præparater et fald i antallet af de levende kræftceller sammenlignet med kontrolforsøgene, der blev dyrket videre uden tilsætning af disse ekstrakter.
Særligt stærkt viste den væksthæmmende virkning af de ifølge opfindelsen ud fra plantepollenekstrakter 25 fremstillede præparater sig at være på væksten af leukæmiceller. I dette tilfælde blev i kulturerne straks efter tilsætningen af de ifølge opfindelsen ud fra plantepollenekstrakter fremstillede præparater væksten af leukæmicellerne hæmmet, og fra den anden dag af behandlin-30 gen kunne der ikke længere påvises levende leukæmiceller.
Ved de øvrige testede celler kunne der konstateres en tydelig hæmning af cellevæksten ved tilsætning af de ifølge opfindelsen ud fra plantepollenekstrakter 35 fremstillede præparater. Resultaterne for de øvrige testede kræftceller var nogenlunde de samme, dvs. der kun- DK 166806 B1 5 ne overalt konstateres tydelige væksthæmninger, men en øjeblikkelig dræbning af alle levende kræftceller allerede på den anden dag efter behandlingen kunne kun konstateres ved leukæmiceller.
5 Det kunne endvidere påvises, at tilsvarende cel lekulturer, der indeholdt sunde humane celler, for eksempel sunde humane prostataceller eller sunde humane brystceller, ved tilsætning af de ifølge opfindelsen ud fra pollenekstrakter fremstillede præparater, ikke blev 10 hæmmet i deres vækst, og at der endog kunne konstateres en forøget vækst sammenlignet med tilsvarende kontrolprøver uden tilsætning af pollenekstrakter.
Af disse forsøgsresultater fremgår således, at de med vandige ekstraktionsmidler vundne plantepolleneks-15 trakter indeholder aktive stoffer, der specifikt hæmmer væksten af kræftceller, men stimulerer stofskifteprocesserne i sunde celler, og at disse pollenekstrakter er særligt aktive over for leukæmiceller, idet de i løbet af kort tid fører til en dræbning af samtlige leukæmi-20 celler.
Plantepollenekstrakten vindes fortrinsvis ved, at tørrede plantepollen ekstraheres med et vandigt ekstraktionsmiddel indeholdende vand og et med vand blandbart organisk opløsningsmiddel, og de tilstedeværende højmo-25 lekylære proteiner derefter ved indvirkning af mikroorganismer nedbrydes, fuldstændigt eller indtil et maksimalindhold på 5 vægt% baseret på tørvægten, til lavmolekylære proteiner eller aminosyrer, hvorefter det vandige medium fraskilles fra pollenresten og inddampes i vaku-30 um, således at den aktive stofblanding bliver tilbage i form af et gullighvidt produkt.
De ved denne fremgangsmåde vundne, i fast form foreliggende produkter udviser i almindelighed et vandindhold på under 12 vægt%, og de indeholder, baseret på 35 totalvælgten, mindst 70% carbonhydrater og 5-12% aminosyrer, peptider eller proteinagtige stoffer, samt endvi- DK 166806 B1 6 dere vandopløselige vitaminer fra B-gruppen. Askeindholdet i disse præparater er relativt højt og tyder på et stort indhold af mineralstoffer.
Den kemiske undersøgelse af typiske, på denne 5 måde vundne præparater gav følgende værdier:
Bestanddel_Mængde i væqt%_
Vand 5 - 10
Nitrogen 2,5 10 Aske 4,5
Aminosyrer, proteiner og pro- inagtige stoffer 6 - 9
Frit phosphat 0,8 - 1,4
Carbonhydrater 78 15 Sukkerbestanddele_5 - 10_ Tørproduktet indeholdt endvidere 7,5 yg vitaminer B2 pr. gram og 60 yg vitamin B3 pr. gram.
Undersøgelsen af de mineralske bestanddele i de 20 med de vandige ekstraktionsmidler ved den omhandlede fremgangsmåde vundne ekstrakter gav følgende værdier:
Bestanddel_Mængde i ppm_
Ca 56 25 P 58
Mg 11
Na 250
Fe 18
Zn 2,3 30 Cu 5
Al_12_
Også ekstrakternes sukkerbestanddele blev undersøgt nærmere, og der kunne deri konstateres arabinose, 35 galactose, mannose og glucose, alle i mængder fra spormængder op til 4% eller mere.
7 DK 166306 ΒΊ
Aktiviteten af de med de vandige ekstraktionsmidler vundne pollenekstrakter, der stimulerer stofskifteprocesserne i sunde celler, blev bestemt ved hjælp af in vitro-forsøg. Hertil blev den cycliske adenosin-mono-5 phosphat-test, forkortet c-AMP-test, gennemført. Til denne test blev benyttet høj rensede Leydigceller i en koncentration på 105 celler/ml. c-AMP-testen udgør en deficitmodel, ved hvilken forud ældede celler, i dette tilfælde 24 timer ved 6°C, stimuleres med et peptidhor-10 mon, HCG, og c-AMP-produktionen undersøges radioimmunologisk. Hvis der ved tilførslen af det substrat, der skal undersøges, sker en stimulation af c-AMP-produktionen, må dette substrat indeholde stoffer, der ophæver deficiter fremkommet gennem ældningsprocessen og således 15 bevirker en stimulation af cellestofskiftet.
Det viste sig, at de ved den omhandlede fremgangsmåde til fremstilling af farmaceutiske præparater anvendte pollenekstrakter fremkalder en tydelig akkumulering af c-AMP-produktionen sammenlignet med tilsvaren-20 de teste, hvortil der ikke er benyttet sådanne pollenekstrakter.
Den nævnte test blev også, i stedet for på høj-rensede Leydigceller, foretaget på tilsvarende prostata-celler, og i dette tilfælde kunne der konstateres analo-25 ge resultater.
De vandige ekstraktionsmidler, der anvendes til fremstilling af pollenekstrakterne, er fortrinsvis blandet med en vægtmæssig mindre andel af et fuldstændigt vandblandbart organisk opløsningsmiddel. Eksempler på 30 sådanne opløsningsmidler er lavere alkoholer eller lavere ketoner, såsom ethanol eller acetone. Det anvendte vandige ekstraktionsmiddel udviser i almindelighed et indhold på 2-30% af det med vand blandbare organiske opløsningsmiddel, idet resten til 100 vægt% består af 35 vand, fortrinsvis af destilleret vand.
Som eksempler på godt egnede vandige ekstraktionsmidler kan nævnes en 20%'s vandig opløsning af ethanol eller en 5%'s vandig opløsning af acetone.
DK 166806 B1 8
Efter denne forekstraktionsbehandling tilsættes mikroorganismer, og pollen'et får lov at forblive i det vandige ekstraktionsmiddel under omrøring i yderligere 36-60 timer ved en temperatur på 15-35°C. I løbet af 5 dette tidsrum foregår fermenteringen af de ydre pollenkapper. Mikroorganismerne nedbryder de højmolekylære proteiner til lavmolekylære proteiner eller frie aminosyrer.
Som allergen virkende bestanddele, der kan være 10 indeholdt i de som udgangsmateriale anvendte pollen, er højmolekylære proteiner. Disse bliver ved nævnte indvirkning af mikroorganismerne i det mindste nedbrudt så vidt, at det efter fermentationen vundne produkt ikke viser nogen allergen aktivitet.
15 Som mikroorganismer anvendes til gennemførelse af fermentationen med fordel svampe. Svampe, der er velegnede til denne fermentation, er svampe af slægten Mucor.
Som eksempel på sådanne svampe, der bevirker nedbrydning af de højmolekylære proteiner, kan nævnes Mucor glome-20 rata, Mucor luteus, Mucor mucedo, Mucor flavus, Mucor corticolus, Mucor brunneus, Mucor hiemalis eller Mucor alpinus.
Efter denne fermentationsbehandling gennemføres en filtrering. Filtratet er en klar opløsning. Fra •25 dette filtrat afdampes det vandige medium i vakuum, hvorved vindes en tilsvarende pollenekstrakt i form af et gullighvidt produkt. Denne aktive stofblanding, der i almindelighed har den ovenfor nævnte sammensætning, benyttes ifølge opfindelsen til fremstilling af det 30 farmaceutiske præparat, dér hæmmer væksten af tumorceller og stimulerer stofskiftet i sunde celler. Hvad angår valg af plantepollen og yderligere enkeltheder ved fremgangsmåden til fremstilling af den med vandige ekstraktionsmidler vundne pollenekstrakt skal henvises til, 35 hvad der allerede findes angivet i det tyske offentliggørelsesskrift nr. 1 467 750 og det østrigske patent- DK 166806 B1 9 skrift nr. 255 643. Endvidere er der også i den ikke til teknikkens stade hørende europæiske patentansøgning 86-106 017.6 (svarende til europæisk offentliggørelses- . skrift nr. 201.053) en nærmere omtale af fremgangsmåden 5 til fremstilling af pollenekstrakter under anvendelse af vandige ekstraktionsmidler, og deri er også beskrevet en fremgangsmåde til fremstilling af pollenekstrakter under anvendelse af ikke-vandige ekstraktionsmidler. Det skal imidlertid bemærkes, at kun de med de vandige ekstrak-10 tionsmidler vundne pollenekstrakter indeholder aktive stoffer, der hæmmer væksten af tumorcellerne, hvorimod en sådan aktivitet ikke har kunnet påvises hos de med de ikke-vandige ekstraktionsmidler vundne pollenekstrakter.
Ud fra de med de vandige ekstraktionsmidler frem-15 stillede pollenekstrakter, der vandtes i form af det gullighvide produkt, blev der derefter fremstillet fraktioner, der var beriget på aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer.
Et særligt fordelagtigt præparat er derfor en på 20 aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer beriget fraktion fra en med vandige ekstraktionsmidler vundet pollenekstrakt, hvilken fraktion højst indeholder 5 vægt% højmolekylære proteiner eller er fri for sådanne.
25 Især foretrækkes en på de proteinagtige stoffer, peptiderne eller aminosyrer beriget fraktion ud fra pollenekstrakten, hvor det gullighvide pulver først opløstes i et egnet opløsningsmiddel, fortrinsvis i vand eller en blanding af vand og et med vand blandbart opløs-30 ningsmiddel, og denne opløsning blev derefter underkastet søjlechromatografisk opdeling. Det blev tilsigtet at opfange de fraktioner, hvori der ved ninhydrin-testen blev påvist tilstedeværelse af aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer.
35 Den søjlechromatografiske opdeling kan med fordel gennemføres under anvendelse af en med Sephadex® fyldt søjle.
DK 166806 B1 10 I stedet for søjlechromatografi blev der udviklet en yderligere fremgangsmåde til ud fra de omhandlede vandige pollenekstrakter at fremstille en fraktion, der er beriget på peptider og/eller proteinagtige stoffer 5 og/eller aminosyrer. Ved denne udførelsesform for den omhandlede fremgangsmåde bliver det gullighvide produkt opløst i vand, der tilsættes et med vand blandbart organisk opløsningsmiddel og eventuelt yderligere en organisk syre, hvorved opløseligheden af peptiderne og/eller 10 proteinagtige stoffer og/eller aminosyrer i det flydende medium formindskes, og disse stoffer udfælder. Det således vundne bundfald isoleres og tørres.
Som med vand blandbart organisk opløsningsmiddel anvendes til gennemførelse af denne fremgangsmåde med 15 fordel'en lavere alkohol eller en lavere keton. Som organisk syre kan anvendes en aliphatisk carboxylsyre eller en aromatisk carboxylsyre, såsom benzoesyre.
Ifølge en speciel udførelsesform for denne fremgangsmåde blev der til den vandige opløsning af det gul-20 lighvide produkt, der blev vundet ud fra plantepollen ved ekstrationen med de vandige opløsningsmidler, sat acetone og yderligere benzoesyre. Herved dannedes et på proteiner, peptider og aminosyrer beriget bundfald.
Endvidere blev ved en mikrogradient-gelelektro-25 forese af den på aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer berigede fraktion isoleret et pep-tidholdigt produkt, hvis molekylvægt ligger i området 650-750. Det kan antages, at dette produkt er opbygget af 6-8 aminosyrer. Ved denne mikrogradientelektroforese 30 blev der endvidere isoleret en spids, der svarede til en molekylvægt på ca. 700, og det antages, at det pågældende protein er et heptapeptid.
Disse på aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer berigede fraktioner af de med de 35 vandige ekstraktionsmidler vundne pollenekstrakter bliver nu undersøgt nærmere for deres farmakologiske aktivitet.
DK 166806 B1 11
Opfindelsen beskrives nærmere gennem følgende eksempler. Samtlige teste, der blev gennemført på kræftceller, gennemførtes med den ved fremgangsmåden ifølge Eksempel 1 fremstillede plantepollenekstrakt eller med 5 plantepollenekstrakter, der var vundet ved lignende fremgangsmåder. De på proteiner berigede fraktioner, der blev fremstillet ved fremgangsmåden ifølge Eksemplerne 2 og 3, er hidtil ukendte produkter, der imidlertid endnu ikke har kunnet testes tilsvarende for deres 10 kræfthæmmende aktiviteter.
Eksempel l 120 kg Pollen fra rug med den latinske betegnelse 15 Secale cereale blev behandlet med 600 kg af en 20 mol% opløsning af ethanol i vand. Dette pollen blev omrørt 48 timer ved en temperatur på 30-32°C. Efter denne forbehandling blev der tilsat Mucor alpinus og omrørt ved 30°C i 20-30 timer.
2Ό Det vandige medium blev filtreret fra pollen.
Det udgjorde en klar opløsning. Denne klare opløsning blev sterilfiltreret, og opløsningsmidlet blev derefter afdampet i vakuum. Der vandtes herved en tørret plantepollenekstrakt. Denne udgjorde et gullighvidt pulver.
25 Dette gullighvide pulver blev ifølge opfindelsen anvendt til fremstilling af det farmaceutiske præparat, der hæmmer væksten af tumorceller og stimulerer stofskifteprocesserne i sunde celler.
30
Eksempel 2
Det ved fremgangsmåden ifølge Eksempel 1 vundne produkt blev opløst i vand, indtil der var opnået en fuldstændig opløsning. Derefter blev der tilsat acetone 35 og benzoesyre. Acetonen blev tilsat dråvevis, hvorved der dannedes et bundfald, og tilsætningen af acetone fo- DK 166806 B1 12 regik, indtil der ikke udfældede mere materiale. Det dannede bundfald blev fjernet fra det flydende medium, for eksempel ved filtrering eller frasugning af opløsningsmidlet. Derefter blev det tørret.
5 Det således vundne tørprodukt blev isoleret i en mængde på ca. 60 vægt%, baseret på de 100 vægt% af den i dette eksempel anvendte oprindelige ekstrakt ifølge eksempel i.
Moderluden, der blev bortkastet, var fuldstændigt 10 fri for proteinagtige materialer eller peptider eller i det væsentlige fri for disse produkter. Heraf fremgår, at der i det vundne tørrede bundfald havde fundet en berigelse sted på peptider og proteinagtige komponenter sammenlignet med den oprindelige ekstrakt.
15
Eksempel 3
Den ved fremgangsmåden ifølge eksempel 2 vundne, på peptider og proteinagtige materialer samt aminosyrer 20 berigede fraktion blev underkastet mikrogradient-gel-elektroforese. Spidsen med en molekylvægt på ca. 700.
Der blev isoleret, og mængden af det deri indeholdte peptid androg 1 vægt% beregnet på den ifølge Eksempel 1 fremstillede tørrede ekstrakt.
25
Eksempel 4 I dette eksempel blev den væksthæmmende virkning på leukæmiceller testet.
30 Cellekulturerne indeholdt ved testens start 4 x 104 leukæmiceller pr. ml. Ved de til sammenligning anvendte cellekulturer, til hvilke der ikke blev sat nogen med vandige ekstraktionsmidler vundet pollenekstrakt, var antallet af levende leukæmiceller indtil den fjerde 35 dyrkningsdag steget til 5,2 x 105 celler pr. ml.
Hos de kulturer, til hvilke pollenekstrakten blev tilsat i en mængde på 1 mg/ml kultur, var ved afslutnin- DK 166806 B1 13 gen af den første dag af behandlingen antallet af levende leukæmiceller faldet fra 4 x 104 levende celler til 4 x 103 levende celler, og fra den anden dag kunne der ikke længere konstateres nogen levende celler.
5 Ved en yderligere række af cellekulturer blev der til de levende leukæmiceller sat pollenekstrakten i en mængde på 4 mg/ml cellekultur. I dette tilfælde var allerede ved afslutningen af den første behandlingsdag antallet af levende leukæmiceller faldet fra 4,0 x 104 10 celler pr. ml til 2 x 103 celler pr. ml, og på den anden dag kunne der ikke længere konstateres nogen levende celler.
De opnåede resultater er samlet i nedenstående tabel: 15
Dage efter be- Antal levende leukæmiceller pr. ml handlingens efter tilsætning af pollenekstrakten start i en mængde på: 20 _0_1 mg/ml_4 mg/ml 1 4,0 X 104 4 x 103 2 x 103 2 6,0 x 104 0 0 3 2,2 x 105 0 0 25 4 5,2 X 105 0 0
Under de samme betingelser som leukæmicellerne blev normale humane hvide blodlegemer dyrket. Også i dette tilfælde blev der ved de til sammenligning benyt-30 tede cellekulturer dyrket videre i tre dage uden tilsætning af pollenekstrakt. En række kulturer blev dyrket videre under tilsætning af pollenekstrakten i en mængde på 1 mg/ml kultur, og en anden række af kulturer under tilsætning af pollenekstrakten i en mængde på 4 mg/ml.
35 I samtlige kulturer og også i sammenligningskulturen kunne der under de tre dages dyrkning konstateres et DK 166806 B1 14 ringe fald i celletallene. Der kunne imidlertid ikke konstateres nogen drastisk forskel mellem de behandlede kulturer og de ikke behandlede kulturer.
Af disse resultater fremgår, at de ifølge opfin-5 delsen ud fra pollenekstrakter fremstillede præparater selektivt dræber leukæmicellerne, men ikke hindrer væksten af de sunde hvide blodlegemer.
Eksempel 5 10 I dette eksempel blev cellekulturer af humane prostatakræftceller og humane testikelkræftceller undersøgt. Også i dette tilfælde blev der hos cellekulturerne til sammenligningsformål dyrket videre uden tilsætning af den med vandige ekstraktionsmidler vundne pol-15 lenekstrakt, medens en række cellekulturer blev dyrket videre under tilsætning af pollenekstrakten i en mængde på 1 mg/ml kultur og en yderligere række under tilsætning af pollenekstrakten i en mængde på 4 mg/ml kultur.
Ved de tilsvarende kulturer af prostatakræftcel-20 ler kunne der i gruppen til sammenligningsformål konstateres en tydelig stigning i antallet af levende kræftceller fra oprindeligt 4,4 x 104 celler pr. ml til 1,2 x 105 celler pr. ml. på den fjerde dyrkningsdag.
Hos de kulturer, hvor der blev dyrket videre un-25 der tilsætning af pollenekstrakter i en mængde på 1 mg/ ml, var stigningen i levende kræftceller tydeligt mindre dvs. celletallet var steget fra 4,4 x 104 celler pr. ml til 7,6 x 104 celler pr. ml på den fjerde dag.
Hos de kulturer, hvor der blev tilsat 4 mg/ml af 30 den med vandige ekstraktionsmidler vundne pollenekstrakt, indtrådte et tydeligt fald i celletallene, idet nemlig antallet af levende prostatakræftceller var sunket fra 4,4 x 104 celler pr. ml ved behandlingens start til 6,0 x 103 levende celler på den fjerde behandlings-35 dag. De opnåede resultater er samlet i nedenstående tabel.
Claims (8)
1. Anvendelse af plantepollenekstrakter til fremstilling af farmaceutiske præparater, der hæmmer 35 væksten af tumorceller samtidig med, at de stimulerer stofskifteprocesserne i sunde celler, kendeteg- DK 166806 B1 net ved, at der anvendes en fra plantepollen med et vandigt ekstraktionsmiddel vundet ekstrakt, der højst indeholder 5 vægt% af højmolekylære proteiner eller er fri for sådanne.
2. Anvendelse ifølge krav 1, kendeteg net ved, at ekstrakten anvendes til fremstilling af et farmaceutisk præparat, der hæmmer væksten af kræftceller efter udløbet af en startfase, eller hæmmer væksten af leukæmiceller straks fra behandlingens start og 10 fuldstændigt dræber disse celler.
3. Anvendelse ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at der til fremstilling af det farmaceutiske præparat anvendes en tør ekstrakt, der udviser et vandindhold på under 12% beregnet på ekstraktens to- 15 talvægt, og som indeholder mindst 70 vægt% carbonhydra-ter, 5-12 vægt% aminosyrer og/eller peptider, samt vandopløselige vitaminer fra B-gruppen.
4. Anvendelse ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at der til fremstilling af det farma- 20 ceutiske præparat anvendes en på aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer beriget fraktion af pollenekstrakten.
5. Anvendelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at plantepollenekstrakten vindes ved at tør- 25 rede plantepollen ekstraheres med et vandigt ekstraktionsmiddel indeholdende vand og et med vand blandbart organisk opløsningsmiddel, og de tilstedeværende højmo-lekylkære proteiner derefter ved indvirkning af mikroorganismer nedbrydes, fuldstændigt eller indtil et maksi- 30 malindhold på 5 vægt% beregnet på tørvægten, til lavmolekylære proteiner eller aminosyrer, hvorefter det vandige medium skilles fra pollenresten og inddampes i vakuum, således at den aktive stofblanding bliver tilbage i form af et gullighvidt produkt.
6. Anvendelse ifølge krav 5, kendeteg ne t ved, at der ud fra det gullighvide produkt fremstilles en på aminosyrer og/eller peptider beriget DK 166806 B1 fraktion, idet det gullighvide produkt opløses i vand, der tilsættes et med vand blandbart organisk opløsningsmiddel, såsom en lavere alkohol eller en lavere keton og eventuelt en organisk syre, hvorved aminosyrer, peptider 5 og/eller proteinagtige stoffer udfældes, hvorefter bundfaldet isoleres og tørres.
7. Anvendselse ifølge krav 6, kendetegnet ved, at fældningen af aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer gennemføres ved til 10 den vandige opløsning at sætte acetone og benzoesyre.
8. Anvendelse ifølge krav 5, kendetegnet ved, at der ud fra det gullighvide produkt fremstilles en på aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer beriget fraktion, idet nævnte pro- 15 dukt underkastes en søjlechromatografisk opdeling, såsom ved anvendelse af en med Sephadex fyldt søjle, og de fraktioner opsamles, i hvilke der ved ninhydrin-testen kan påvises tilstedeværelse af aminosyrer og/eller peptider og/eller proteinagtige stoffer, og der ud fra dis-20 se fraktioner ved fordampning af opløsningsmidlet fremstilles en aktiv tørrest.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH408985 | 1985-09-20 | ||
| CH408985 | 1985-09-20 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK445686D0 DK445686D0 (da) | 1986-09-17 |
| DK445686A DK445686A (da) | 1987-03-21 |
| DK166806B1 true DK166806B1 (da) | 1993-07-19 |
Family
ID=4269616
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK445686A DK166806B1 (da) | 1985-09-20 | 1986-09-17 | Anvendelse af plantepollenekstrakter til fremstilling af farmaceutiske, tumorcellevaeksthaemmende praeparater |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4952399A (da) |
| EP (1) | EP0220453B1 (da) |
| AT (1) | ATE74761T1 (da) |
| DE (1) | DE3684868D1 (da) |
| DK (1) | DK166806B1 (da) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030148933A1 (en) * | 1990-10-01 | 2003-08-07 | Pharma Mar S.A. | Derivatives of dehydrodidemnin B |
| EP0757055B1 (de) * | 1995-06-30 | 1999-10-27 | Cerbios-Pharma S.A. | Glykoside, deren zuckerfreie Abbauprodukte und Derivate derselben |
| US6440448B1 (en) | 1998-03-16 | 2002-08-27 | Joseph Intelisano | Food supplement/herbal composition for health enhancement |
| EP1229922B1 (en) * | 1999-11-15 | 2007-06-06 | Pharma Mar, S.A. | Aplidine treatment of cancers |
| WO2004080421A2 (en) * | 2003-03-12 | 2004-09-23 | Pharma Mar, S.A. | Improved antitumoral treatments |
| FR2881649B1 (fr) * | 2005-02-10 | 2007-04-06 | Du Sert Patrice Percie | Procede d'extraction de pollen frais, extrait lipidique obtenu et applications associees |
| WO2006136871A1 (en) * | 2005-06-21 | 2006-12-28 | Codex V S.R.L. | Use of pollen extracts to treat infections, neoplasms and to balance the immune response |
| MX2008010999A (es) * | 2006-02-28 | 2008-09-08 | Pharma Mar Sa | Tratamientos anti-tumor mejorados. |
| EP2205263A1 (en) * | 2007-10-19 | 2010-07-14 | Pharma Mar, S.A. | Improved antitumoral treatments |
| CN101965191A (zh) * | 2008-03-07 | 2011-02-02 | 法马马有限公司 | 改善的抗癌治疗 |
| TWI807411B (zh) | 2017-04-27 | 2023-07-01 | 西班牙商瑪製藥股份有限公司 | 抗腫瘤化合物 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE1025574B (de) * | 1955-02-10 | 1958-03-06 | Jean D Albret S A R L Soc | Verfahren zur Herstellung von Koerperpflegemitteln, insbesondere Hautpflegemitteln |
| SE307063B (da) * | 1963-07-30 | 1968-12-16 | Cernelle Ab | |
| FR1575114A (da) * | 1968-07-24 | 1969-07-18 | ||
| FR2142194A5 (en) * | 1971-06-16 | 1973-01-26 | Socibre | Allergen-free pollen extracts - stabilized by freeze-drying |
| CH663900A5 (de) * | 1985-05-06 | 1988-01-29 | Cernitin Sa | Pharmazeutisches praeparat zur prophylaktischen behandlung von allergien und verfahren zur herstellung dieses praeparates. |
-
1986
- 1986-09-13 AT AT86112691T patent/ATE74761T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-09-13 EP EP86112691A patent/EP0220453B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-09-13 DE DE8686112691T patent/DE3684868D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1986-09-17 DK DK445686A patent/DK166806B1/da not_active IP Right Cessation
-
1989
- 1989-07-20 US US07/384,054 patent/US4952399A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK445686D0 (da) | 1986-09-17 |
| EP0220453A3 (en) | 1988-03-23 |
| DE3684868D1 (de) | 1992-05-21 |
| EP0220453B1 (de) | 1992-04-15 |
| EP0220453A2 (de) | 1987-05-06 |
| US4952399A (en) | 1990-08-28 |
| DK445686A (da) | 1987-03-21 |
| ATE74761T1 (de) | 1992-05-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK166806B1 (da) | Anvendelse af plantepollenekstrakter til fremstilling af farmaceutiske, tumorcellevaeksthaemmende praeparater | |
| EA016246B1 (ru) | Способ выделения секоизоларицирезинола и дигидрокверцетина из древесины | |
| EP0030812B1 (en) | A process for preparing substances having interferon inducing activity and interferon inducers | |
| KR101385191B1 (ko) | 치커리 추출물의 근육 손상 예방, 치료 또는 개선을 위한 용도 | |
| EP0035102A1 (de) | Aus gesunden weissen Blutkörperchen beziehungsweise Granulozyten isolierbares, das Wachstum beziehungsweise die Vermehrung von normalen und leukämischen myeloiden Zellen selektiv hemmendes Oligopeptid, Verfahren zu dessen Herstellung und dieses enthaltende Arzneimittel | |
| CN117503661B (zh) | 刺梨提取物的制备方法及其冻干粉在化妆品中的应用 | |
| US3394120A (en) | Process of extracting protein from mistletoe and resultant product | |
| EP0027514B1 (en) | Antitumor substance and its production | |
| SU871721A3 (ru) | Способ получени биологически активного вещества,обладающего способностью усиливать секрецию инсулина и улучшать глюкозную толерантность | |
| CN118620098A (zh) | 一种刺梨多糖用于制备抗血管钙化的药物的用途 | |
| Hassan et al. | Antileishmanial effect of berberine and extracts of Berberis vulgaris on the growth of leishmanial species | |
| CN101708202B (zh) | 一种抑制血管舒张的药物 | |
| DE19543628A1 (de) | Humanes, im Blut zirkulierendes Peptid mit insulinotroper Wirkung (GCAP-II-(89-112), (Guanylyl Cyclase C Aktivierendes Peptid II) und seine GCAP-Analoga, insbesondere das GCAP-I-(99-115), seine Anwendung als pharmakologischer Wirkstoff und Benutzung seines Wirkungsprinzipes zur Bereitstellung neuer GC-C-abhängiger insulinotroper Wirkstoffe | |
| Tshilanda et al. | In vitro antioxidant activity of essential oil and polar and non-polar extracts of Ocimum canum from Mbuji-Mayi (DR Congo) | |
| RU2794783C1 (ru) | Применение спиртового экстракта березового гриба чага в качестве ростстимулирующего средства для томатов | |
| EP0934746A1 (en) | Substance in the form of an aqueous extract of vegetal raw material for treating oncological diseases, and method for producing the same | |
| CN103285000B (zh) | 瘤果黑种草籽中具有骨架类型ⅰ和ⅱ生物碱的用途 | |
| RU2236247C2 (ru) | Иммунотропный препарат "витулин а" | |
| JP6969041B2 (ja) | 血管内皮型一酸化窒素合成酵素産生促進剤及び経口用組成物 | |
| US2541676A (en) | Thromboplastic preparation | |
| RU2241476C2 (ru) | Иммунотропный препарат "витулин д" | |
| US4041022A (en) | Process for the manufacture of thyrocalcitonin | |
| PS et al. | Phytochemical and Pharmacological Studies of Different Extracts of Stem Bark and Leaf of Flueggea leucopyrus Willd. | |
| Park et al. | Microsorum membranaceum (D. Don) Ching protected dexamethasone-induced sarcopenia by targeting protein degradation and synthesis pathway in C2C12 cells and C57BL/6 mice | |
| Couch | Rutin for the capillaries |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| AHS | Application shelved for other reasons than non-payment | ||
| B1 | Patent granted (law 1993) | ||
| PBP | Patent lapsed |