HU211612A9 - Somatostatine analogues - Google Patents
Somatostatine analogues Download PDFInfo
- Publication number
- HU211612A9 HU211612A9 HU95P/P00588P HU9500588P HU211612A9 HU 211612 A9 HU211612 A9 HU 211612A9 HU 9500588 P HU9500588 P HU 9500588P HU 211612 A9 HU211612 A9 HU 211612A9
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- phe
- cys
- thr
- trp
- mel
- Prior art date
Links
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical class C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 title description 24
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 48
- -1 aziridine-2-carbonyl Chemical group 0.000 claims abstract description 27
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 15
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims abstract description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 147
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 56
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 37
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 14
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 6
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 abstract description 19
- 239000010949 copper Substances 0.000 abstract description 16
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 abstract description 15
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 abstract description 7
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 abstract description 6
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 abstract description 6
- 239000002184 metal Substances 0.000 abstract description 6
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 abstract description 5
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 abstract description 3
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 abstract description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 abstract description 2
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 239000010936 titanium Substances 0.000 abstract description 2
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 abstract description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 abstract 4
- JYKHAJGLEVKEAA-UHFFFAOYSA-N AQ-CH2OH Natural products C1=CC=C2C(=O)C3=CC(CO)=CC=C3C(=O)C2=C1 JYKHAJGLEVKEAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 abstract 2
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 abstract 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 abstract 2
- BMTMWCVGAVWDRA-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxymethylanthraquinone Natural products O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)C2=C1C=CC=C2CO BMTMWCVGAVWDRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000001118 alkylidene group Chemical group 0.000 abstract 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 abstract 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 abstract 1
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 abstract 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 125000006501 nitrophenyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 abstract 1
- GPPXJZIENCGNKB-UHFFFAOYSA-N vanadium Chemical compound [V]#[V] GPPXJZIENCGNKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 31
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 31
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 28
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 description 24
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 18
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 18
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 17
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 16
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 15
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 15
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 15
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 13
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 13
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 13
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 13
- CTXPLTPDOISPTE-YPMHNXCESA-N (2s,3r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylmethoxybutanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)[C@@H](C)OCC1=CC=CC=C1 CTXPLTPDOISPTE-YPMHNXCESA-N 0.000 description 12
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 12
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 12
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 12
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 12
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 11
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 9
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 9
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 9
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 8
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 8
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 8
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical class [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 7
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 7
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 7
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 7
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 7
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 7
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 7
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 6
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 6
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- KGLGUDHEKBYBDR-UHFFFAOYSA-N 6-amino-N-[1-[[1-[[1-amino-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-sulfanylpropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-2-[[2-[[2-[[2-[(2-amino-3-phenylpropanoyl)amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(C(N)=O)NC(=O)C(CS)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(NC(=O)C(CS)NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=C(O)C=C1 KGLGUDHEKBYBDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 Chemical compound C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101710176384 Peptide 1 Proteins 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 4
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WXYGVKADAIJGHB-ZDUSSCGKSA-N (2s)-3-(1h-indol-2-yl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2NC(C[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)=CC2=C1 WXYGVKADAIJGHB-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 3
- CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 3
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 3
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 3
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 3
- XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N gonadorelin Chemical class C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 3
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 3
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- SGDBTWWWUNNDEQ-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-amino-3-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 2
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 2
- PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 3-aminoalanine Chemical compound [NH3+]CC(N)C([O-])=O PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010600 3H thymidine incorporation assay Methods 0.000 description 2
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 2
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 2
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 2
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- CIHWJRSPVJBHGT-UHFFFAOYSA-N benzhydrylazanium;chloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 CIHWJRSPVJBHGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 2
- OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L copper(ii) acetate Chemical compound [Cu+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 150000001923 cyclic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 208000015419 gastrin-producing neuroendocrine tumor Diseases 0.000 description 2
- 201000000052 gastrinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 2
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 206010022498 insulinoma Diseases 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 2
- 125000006178 methyl benzyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 2
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- SMQUZDBALVYZAC-UHFFFAOYSA-N salicylaldehyde Chemical compound OC1=CC=CC=C1C=O SMQUZDBALVYZAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 2
- ZYJPUMXJBDHSIF-NSHDSACASA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZYJPUMXJBDHSIF-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N (2s)-2-azanyl-5-[bis(azanyl)methylideneamino]pentanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N.OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N 0.000 description 1
- FHSGULRVYLHXFO-FFNFELIASA-N (3s,6s,9s,12r,15s,18s)-9-(4-aminobutyl)-3,15-dibenzyl-6-[(1r)-1-hydroxyethyl]-12-(1h-indol-3-ylmethyl)-1,4,7,10,13,16-hexazabicyclo[16.3.0]henicosane-2,5,8,11,14,17-hexone Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N1)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 FHSGULRVYLHXFO-FFNFELIASA-N 0.000 description 1
- DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N (4r,7s,10s,13r,16s,19r)-10-(4-aminobutyl)-19-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-16-benzyl-n-[(2r,3r)-1,3-dihydroxybutan-2-yl]-7-[(1r)-1-hydroxyethyl]-13-(1h-indol-3-ylmethyl)-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carboxa Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC1=O)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N 0.000 description 1
- KPYXMALABCDPGN-HYOZMBHHSA-N (4s)-5-[[(2s)-6-amino-1-[[(2s,3s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2r)-1-[[2-[[2-[[(1s)-3-amino-1-carboxy-3-oxopropyl]amino]-2-oxoethyl]amino]-2-oxoethyl]amino]-1-oxo-3-sulfanylpropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]a Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN)CC1=CC=C(O)C=C1 KPYXMALABCDPGN-HYOZMBHHSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(tritiooxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO[3H])O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 0.000 description 1
- DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBWRJAOOMGASJP-UHFFFAOYSA-N 2-(3,5-diphenyl-1h-tetrazol-1-ium-2-yl)-4,5-dimethyl-1,3-thiazole;bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1N1N(C=2C=CC=CC=2)N=C(C=2C=CC=CC=2)[NH2+]1 NBWRJAOOMGASJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000191291 Abies alba Species 0.000 description 1
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 1
- 102400000345 Angiotensin-2 Human genes 0.000 description 1
- 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 101800001982 Cholecystokinin Proteins 0.000 description 1
- 102100025841 Cholecystokinin Human genes 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 208000002699 Digestive System Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 206010018404 Glucagonoma Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N Ile(5)-angiotensin II Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=[NH2+])NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC([O-])=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 208000005016 Intestinal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229910020427 K2PtCl4 Inorganic materials 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 102000008238 LHRH Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010021290 LHRH Receptors Proteins 0.000 description 1
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-UHFFFAOYSA-N Merphalan Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 1
- GDFAOVXKHJXLEI-VKHMYHEASA-N N-methyl-L-alanine Chemical compound C[NH2+][C@@H](C)C([O-])=O GDFAOVXKHJXLEI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- YWMAPNNZOCSAPF-UHFFFAOYSA-N Nickel(1+) Chemical compound [Ni+] YWMAPNNZOCSAPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010029897 Obsessive thoughts Diseases 0.000 description 1
- 108010016076 Octreotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical group OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 102100024819 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 229910019032 PtCl2 Inorganic materials 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 101001075370 Rattus norvegicus Gamma-glutamyl hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 108010086019 Secretin Proteins 0.000 description 1
- 102100037505 Secretin Human genes 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 1
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 1
- 108050001286 Somatostatin Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000011096 Somatostatin receptor Human genes 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002253 Tannate Polymers 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 208000009311 VIPoma Diseases 0.000 description 1
- WPSXZFTVLIAPCN-WDSKDSINSA-N Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O WPSXZFTVLIAPCN-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 150000004075 acetic anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YBCVMFKXIKNREZ-UHFFFAOYSA-N acoh acetic acid Chemical compound CC(O)=O.CC(O)=O YBCVMFKXIKNREZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011360 adjunctive therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229950006323 angiotensin ii Drugs 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001262 anti-secretory effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-O aziridinium Chemical compound C1C[NH2+]1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 1
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940107137 cholecystokinin Drugs 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 150000004696 coordination complex Chemical class 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 150000004699 copper complex Chemical class 0.000 description 1
- GVPMWPVWXBCNPY-UHFFFAOYSA-N copper;2-hydroxybenzaldehyde Chemical compound [Cu].OC1=CC=CC=C1C=O.OC1=CC=CC=C1C=O GVPMWPVWXBCNPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N dTMP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N dcm dichloromethane Chemical compound ClCCl.ClCCl DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 1
- XWJDVNOOYSANGI-ATOGVRKGSA-N dihydrosomatostatin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 XWJDVNOOYSANGI-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical group C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N divinylbenzene Substances C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000004052 folic acid antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229920000370 gamma-poly(glutamate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- VANNPISTIUFMLH-UHFFFAOYSA-N glutaric anhydride Chemical compound O=C1CCCC(=O)O1 VANNPISTIUFMLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical class C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 1
- 230000009422 growth inhibiting effect Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003668 hormone analog Substances 0.000 description 1
- 201000010430 hormone producing pituitary cancer Diseases 0.000 description 1
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 201000009019 intestinal benign neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical class ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BCVXHSPFUWZLGQ-UHFFFAOYSA-N mecn acetonitrile Chemical compound CC#N.CC#N BCVXHSPFUWZLGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COTNUBDHGSIOTA-UHFFFAOYSA-N meoh methanol Chemical compound OC.OC COTNUBDHGSIOTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-UHFFFAOYSA-N methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002815 nickel Chemical class 0.000 description 1
- 229940006444 nickel cation Drugs 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002902 organometallic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 208000021255 pancreatic insulinoma Diseases 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000000885 phytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 201000005825 prostate adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000005267 prostate cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 125000001107 pteroylglutamyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002213 purine nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000000561 purinyl group Chemical class N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004053 quinones Chemical class 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940072272 sandostatin Drugs 0.000 description 1
- 229960002101 secretin Drugs 0.000 description 1
- OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N secretin human Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 229940075620 somatostatin analogue Drugs 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000010414 supernatant solution Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/655—Somatostatins
- C07K14/6555—Somatostatins at least 1 amino acid in D-form
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
A találmány tárgyát olyan új peptidek képezik, amelyek befolyásolják a humán rosszindulatú daganatok növekedését. Pontosabban a jelen találmány a szomatosztatin rövid ciklikus analógjait és ezek sóit öleli fel, amelyekhez citotoxikus csoportok kapcsolódnak, gá- 5 tolják a hipofízis növekedési hormon szekrécióját és tumorellenes hatásúak, továbbá vonatkozik ezen analógokat tartalmazó gyógyászati készítményekre és ezek felhasználási módjára.
Ez a bejelentés részben folytatólagos bejelentése a 07/404 867 számú, 1989. július 9-én benyújtott bejelentésnek.
Jelen találmány új ciklikus szomatosztatin analógokra vonatkozik, amelyek citotoxikus csoportokat tartalmaznak, befolyást gyakorolnak a hipofízis növekedési hormon felszabadulására emlősökben és tumorellenes hatásúak.
Az
Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 szerkezetű tetradekapeptid-szomatosztatin a növekedési hormon felszabadulását gátolja, később széles körű gátló tulajdonságúnak bizonyult, nevezetesen a hasnyálmirigy inzulinjára és glukanonjára vonatkozóan. A szomatosztatin analógok konformáció és szerkezetfunkció analízis vizsgálata azt mutatta, hogy a biológiai aktivitásért felelős szekvencia tartalmazza a β-turn fragment fenilalanin-tripszin-lizin-treonin részéi, ami a szomatosztaún 7-10 részének felel meg [D. Veber és mtsai, Natúré (London) 280, 512 (1979) és D. Veber és mtsai. Natúré (London) 292 55 (1981)] A szelektív, 25 fokozott és elhúzódó hatású vegyületek keresése során a szomatosztatinnak sok rövid ciklikus analógját fejlesztették ki.
Veber és mtsai ciklikus hexapeptid-analógok szintéziséi és jelentős gátló aktivitását ismertették, amit a 30 szomatosztatin 14 aminosavából 9-nek prolinnal vagy N-metil-alaninnal helyettesítésével kaptak (ciklo[ProPhe-D-Trp-Lys-Thr-Phe] és ciklo[N-MeAla-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe])-val való helyettesítésével nyertek. Továbbá ugyanezen csoport előállított egy új hexapep- 35 tidet a ciklo(N-MeAla-Tyr-D-Phe-Lys-Val-Phe), ami magas aktivitású [D. Veber és mtsai Life Sci. 34, 1371 (1984)]. Bauer és mtsai [Life Sci., 1, 1133 (1982)] a szomatosztatin más nagy hatású oktapeptid sorozatát állították elő. Legaktívabb analógjuk a D-Phe-Cys-D- 40 Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OL volt. Mi közel 300 oktapeptid-amid analógját fejlesztetük ki fenti vegyületüknek [R.-Z. Cai és mtsai Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83,
1896 (1986) és R.-Z. Cai és mtsai Proc. Natl. Acad.
Sci. USA 84, 2502 (1982)]. Ezek közül kettő [D-Phe- 45 Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 és D-Phe-CysTyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2] több mint százszor hatékonyabbnak bizonyult a szomatosztatinnál a növekedési hormon felszabadulás gátlása terén és elhúzódó aktivitást fejtett ki.
Különféle vizsgálatok igazolták a szomatosztatin gátló hatását agromegáliában, endokrin pankreász tumorban, mint például inzulinomában, glukagonomában, továbbá ektopiás tumorokban, mint például gasztrinomában és VIP termelő tumorban szenvedő betegeknél. Mindamellett a szomatosztatinnak csekély szerepe van a daganatterápiában, többirányú hatása és antiszekretoros hatásának rövid időtartama miatt; a keringésben a felezési ideje kb. 3 perc (A. V. Schally és mtsai, Annu. Rév. Biochem. 47, 89 (1978). Veber és mtársainak munkája (1979-1984) nyilvánvalóan az 1. típusú diabétesz terápiában alkalmazott analógok előállítását célozta és analógjaik nem eredményeztek tumorellenes hatást különböző állati tumormodelleken 984) [A. V. Schally és mtrsai, Proc. Soc. Exp, Bioi.
Med. 175 259 (1984)]. Bauer analógját (szandosztatin) óvatos klinikai vizsgálatoknak vetették alá [P. Marbach és mtsai, (1985) Proc. Symp. Somatostatin, Montreal, Canada, 1984, kiadó: Y. C. Patel & g. s. Tannenbaum, Elsevier, Amsterdam, 339. oldal]. Bíztatónak tűnik terápiás szerként való alkalmazása akromegália, metasztatikus endokrin pankreász és gasztrointesztinális tumor, úgy mint inzolinoma, glukagonoma, gasztrinoma, VIPoma és karcionid tumorok esetében (A. V. Schally és mtsai, „Neutral and Endocrine Peptides and Receptors”, kiadó: T. W. Moody, Plenum Publishing Corp., New York, 1986, 73. oldal).
A modern szomatosztatin analógok javalltak bizonyos tumorok kezelésében, illetve kiegészítő terápiaként LH-RH analógokkal emlőrák esetén [A. V. Schally, Cancer Rés., 48, 6977 (1988)].
Az ideális rákellenes szerek elvileg azok lennének, amelyek a ráksejteket a normális sejtek károsítása nélkül pusztítják el. A tumorellenes szert hordozó hormonok a receptort tartalmazó tumorok hatékonyabb célzott kemoterápiájának megvalósítása révén szolgálnák ezt a kérdést. Hormon analógok, amelyekben a hormon szekvenciában foglaltatik, vagy ahhoz kapcsolódik citotoxikus csoport, célzottak lehetnek, ezáltal szelektívebbek a hormonreceptort hordozó tumoros szövet elpusztításában.
A hormon-gyógyszer konjugátum ideális hatásmechanizmusa az lenne, ha a hibrid molekula a sejtmembrán receptorhoz kötődne, majd a sejtbe bekerülne a gyógyszer vagy biológiailag aktív származéka a vivő 50 hormonról endoszómákban vagy szekunder izoszómákban szabadulna fel. Azután a felszabadult hatóanyag a vezikumulok membránján át jutna a sejtplazmába és elérné a végső célpontját. Az így ható konjugátumok esetén a szer és a hormon közötti kapcsolódás 55 stabil kell legyen a konjugátumnak a céltumor sejtbe való bejutása előtt, de sejtbejutás után határozottan szét kell váljanak.
Nagy és kis affinitású szomatosztatin receptorokat találtak különböző normál, humán szövetekben, humán 60 agy és hipofízis tumorokban, hormontermelő gasztro2
HU 211 612 A9 intesztinális tumorokban, emlő-, hasnyálmirigy-, prosztata- és petefészekdaganatokban [D. Reichlin, N. Engl. J. Mec., 309, 1495 (1983), A. V. Schally, Cancer Rés., 48, 6977 (1988)]. Kimutatták, hogy a receptorhoz kötődő szomatosztatin a pankreász acinusok révén jut a sejtbe és kerül lebontásra [Viguerie, N. és mtsai, Am. J. Physiol. 252; G 535-542, (1987)].
E feltevésnek megfelelően a citotoxikus gyököt tartalmazó szomatosztatin analógok képesek kifejteni a szomatosztatin analógok direkt és indirekt tumorellenes hatásait és egyidejűleg a kemoterápiás szer vivőanyagául is szolgálnak. Mivel ilyen peptidek képesek kötődni a specifikus receptorokhoz, ez célszelektivitást biztosít a kemoterápiás vegyületnek, és így azt sejtspecifikussá teszi, ezzel csökkentve nemspecifikus toxicitását. A sejtbe való bejutás után ezek a hibrid vegyületek gátolják a sejtfolyamatokat és ezzel a sejt halálát okozzák.
Van néhány a klinikai használatban lévő tumorellenes szerek között, amelyek képesek kapcsolódni egy hordozó peptidmolekulával. A kapcsolódás a citoloxikus csoport megfelelően alakított funkcionális csoportja és a peptid szabad amino- vagy karboxilcsoportja között jöhet létre.
A tumorok kezelésében használt alkiláló szerek alapvetően nem szelektív hatásmechanizmusúak. Fitotoxikus hatásuk kifejtése az alkilcsoportjuk különböző sejtalkotókba való bejuttatása révén valósul meg. A DNA alkilálása a sejtmagban feltehetően reprezentálja a fő interakciót, ami a sejt elpusztulásához vezet. Fiziológiás körülmények között alkilálhatunk minden sejtmaghoz kötődő anyagot, mint például ionizált karboxil- és foszforsav-csoportokat, hidroxilcsoportot, tiolokat és töltéssel nem rendelkező nitrogéncsoportokat. A mustár-nitrogének (klórambucil, ciklofoszfamid, melfalán és mustár-nitrogén) a legrégibb daganatellenes szerek a klinikai gyakorlatban. Ezek spontán képeznek ciklikus aziridinium (etilénimónium) kationszármazékokat intramolekuláris cíklizáció révén, amelyek direkt vagy karbóniumionon keresztül transzferálnak egy alkilcsoportot egy sejtmaghoz kötődő vegyületre. Az aziridincsoport tartalmú szerek, mint a tio-ΤΕΡΑ ezen mechanizmus alapján hatnak.
Az angiotenzin II-be épített alkiláló melfalan (4[bisz{2-klór-etil}-amino]-fenilalanin) előállítása hatékony kompatitív antagonistához vezetett, ami világosan mutatja, hogy az analóg nem alkilálta a receptort. (K.-H. Hsieh és G. R. Marshall, J. Mec. Chem. 24 1304-1310, 1981).
A T-47D humán emlő karcinoma sejtvonal és az MT-4 és MT-5 patkány emlőtumor sejtvonal kultúrákon szignifikáns citotoxikus aktivitás ([3H]timidin beépítés gátlása) mutatkozott D-melfalant tartalmazó LHRH analógok esetén.
Majdnem minden klinikailag alkalmazott alkiláló szer kétféleképpen működhet. Képes keresztkötést kialakítani két különálló molekula között, vagy egy molekulának két különböző nukleofil csoportját alkilálhatja. Keresztkötések a DNS-sel létrejöhetnek egyszálú formában, két komplementer szálú között, vagy DNS és más molekulák, úgy mint proteinek között. Feltételezett, hogy az alkiláló szerek citotoxicilása összefüggésben van a keresztkötéseket kialakító képességekkel (J. J. Roberts és tsai, Adv. Radiat. Bioi. 7 211-435, 1978).
Ciszplatint (cisz-diamin-diklór-platinum) régóta alkalmazza a daganat-terápiában. Ciszplatinhoz hasonló struktúrájú oldalláncot tartalmazó LHRH analógok nagy affinitást mutatnak a patkány hipofízis membrán receptoraihoz és humán emlőrák sejtjekhez. (S. Bajusz és tsai., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86 6313-6317, 1989). Citotoxikus réz és nikkel komplexek beépítése megfelelően módosított LHRH analógokban a vegyületekben nagy hormonális aktivitást és affinitást eredményezett az LHRH receptorokhoz humán emlő karcinoma sejtmembránon. Néhány ezen metallopepúdek közül citotoxikus aktivitást fejtett ki humán emlő és prosztata sejtvonalakra in vitro. Például pGlu-His-TrpSer-Tyr-D-Lys[Ahx-A2bu(SAL)2(Cu)]-Leu-Arg-ProGly-NH gátolja a [3H]-timidin beépülését az MDAMB-231 humán emlő sejtvonal DNS-ébe 87%-os koncentrációnál 10 gg koncentrációban.
Néhány antimetabolit kemoterápiás szerként számíthat érdeklődésre, minthogy fontosak a sejt föl át metabolizmusában (I. D. Goldman és tsai., Eds. Folyl and Antifolyl Polyglutamates, Plenum Kiadó, New York, 1983). A metotrexát /N-(p[[(2,4-diamino-6-pteridinil)-metil]-metil-amino]-benzoil]-glutaminsav/ egy folsav antagonista, amelyik gátolja a dihidrofolát reduktáz funkcióját és ezáltal megakadályozza a timidilát és purin nukleotidok szintézisét, valamint a szerin és metionin aminosavakét, ezáltal gátolja a DNS, az RNS és a proteinek képződését.
A találmány tárgya tehát rövid ciklusos szomatosztatin analógok, melyek erős agonista aktivitással rendelkeznek és vagy a peptid szekvenciába beépített vagy a peptidlánchoz kapcsolt citotoxikus csoporttal rendelkeznek. Citotoxikus csoportokra példa a nitrogénmustár, antimetabolitok, háromtagú gyűrűs csoportok, kinonok, tumorellenes antibiotikumok, platinafém komplexek, vagy nem platina csoportbeli fémek komplexei, daganatellenes szerek, melyek lehetnek olyan szervetlen vagy fémorganikus vegyületek, amelyek átmeneti fémeket tartalmaznak, mint például titán, vanádium, vas, réz, kobalt és arany, illetve nikkel, kadmium és cink vagy egy citotoxikus vegyület, amely a fenti fémek komplexeként kerül beépítésre.
A találmány szerinti vegyületeket azt alábbi (I) általános képlet öleli fel
Q-R1-Cys-R3-D-Trp-Lys-R6-Cys-R8-NH2
-ahol
R1 jelentése L- vagy D-Phe, L- vagy D-Mel,
R3 jelentése Phe, ha R5 Thr vagy R3 jelentése Tyr, ha
R6Val,
R8 jelentése Thr vagy, és
Q jelentése hidrogénatom, L- és D-Mel, metotrexoilés AQ1 csoportok közül választott csoport, ahol A jelentése 2,3-diamino-propionil-csoport,
Q1 jelentése PtCl2 vagy Cu(B)2, és
HU 211 612 A9
B jelentése 2-0-1-benzilidenil- és 5-klór-2-O-lbenzilidenil-csoportok közül választott csoport, vagy gyógyászatilag elfogadható savakkal és bázisokkal képezett sóik, azzal a kikötéssel, hogy amikor Q jelentése hidrogénatom, akkor Rj jelentése D- vagy
L-Mel.
Az (I) általános képletű vegyületeket előállíthatjuk szilárd fázisú eljárással, vagy szilárd fázisú technikák és a klasszikus (oldószeres) szintézisek kombinálásával.
Az (I) általános képletű vegyületeket előnyösen az alábbi (Vlla) általános képletű intermedier peptidekből állíthatjuk elő:
X'-R1-Cys(X2)-R3(X3)-D-Trp-Lys(X5)-R6-Cys(X7)R8(X8)-NH-X9 ahol R1, R3, R6 és R8 jelentése a fentiekben megadott, X1 jelentése hidrogénatom vagy egy 2-5 szénatomos acilcsoport, feltételezve, hogy az (I) általános képletű vegyület egy oktapeptid vagy Mel, illetve Mel-Mel feltéve, hogy az (I) általános képletű vegyület nonapeptid, illetve dekapeptid, vagy A(X)2, ahol A jelentése a fentiekben megadott, és X jelentése aminosav-védőcsoport,
X2 és X7 jelentése hidrogénatom vagy egy Cys szulfhidrilcsoport védőcsoportja,
X3 jelentése hidrogénatom vagy a Tyr fenolos hidroxilcsoportjának védőcsoportja,
X5 jelentése hidrogénatom vagy a Lys ε-aminocsoportjának védőcsoportja,
Xs jelentése hidrogénatom vagy a Tyr fenolos hidroxilcsoportjának védőcsoportja,
X9 jelentése hidrogénatom vagy egy gyantába beépített benzhidrilcsoport.
A (VIIA) általános képletű vegyületek intermedierjei az (I) általános képletű ciklusos vegyületek előállítási eljárásának. Az 2. és 7. pozíció közötti híd egy diszulfid híd (-S-S-). A védőcsoport eltávolítása után végrehajtott ciklizálási reakció az alábbi (VIIB) és (VIHB) általános képletű vegyületeket eredményezi:
Ri-Cys-R3-D-Trp-Lys(X5)-R6-Cys-R8-NH2 (VIIB) és -1
A-Rl-Cys-R’-D-Trp-Lys(X5)-R6-Cys-R8-NH2 (VIIIB) ahol A, R1, R3, R5, R6 és R8 jelentése a fentiekben megadott
X5 jelentése hidrogénatom vagy a Lys oldallánc aminocsoportjának egy védőcsoportját jelöli.
Az (I) általános képletű metallopeptidek előállítása esetén egy (VIIIB) általános képletű peptidet (ahol X5 jelentése hidrogénatom) K2PtCl4-dal reagáltatjuk, és így citotoxikus csoportként Q1 jelentésében PtCl2 csoportot hordozó vegyületet kapunk, amelyet kívánt esetben ismert módon PtY2 csoportot hordozó vegyületté alakíthatunk.
Olyan (1) általános képletű vegyület előállítása esetén, ahol Q1 jelentése Cu(B)2 csoport, egy (VIIIB) általános képletű peptidet (ahol X5 jelentése hidrogénatom) in situ hidroxi-oxo Cu vegyületből és egy nem fémcsoportbeli fémből előállított komplexszel reagáltatunk.
Olyan (I) általános képletű vegyületek előállítása esetén, ahol Q jelentése metotrexoil-csoport, előállíthatjuk egy (VIIB) általános képletű vegyület (ahol X5 jelentése Boc vagy FMOC csoport) alkil- vagy alkanoil-halogeniddel vagy metotrexáttal végzett acilezésével.
Gyógyászati készítményeket állíthatunk elő az (I) vagy (II) általános képletű vegyületeknek gyógyszerkészítményeknek előállítása során általánosan használt hordozókkal való összekeverésével, a hordozók közé értve a késleltetett kibocsátású mikrokapszulákat (mikrogömböcskéket is).
A találmány szerinti citotoxikus vegyületek gátolják a növekedési hormon felszabadulását és hasonlóan a kiindulási peptidekhez feltehetően gátolják az inzulin, glukagon, gasztrin, szekretin és kolecisztokinin felszabadulását. Olyan esetekben, ahol a tumoros szövet növekedését befolyásolja a kiindulási peptidek egyike által szabályozott hormon, a peptidekbe beépített citotoxikus csoport növelte a következő hormonérzékeny rákok kezelésének hatékonyságát: prosztata adenokarcinőmák, emlőrákok, inzulinómák, gasztrinómák, kondroszarkómák, oszteoszarkómák, pankreászvezeték rákok, acinus tumorok, gyomorrákok, vastagbélrákok, bizonyos tüdőrákok és agydaganatok.
A találmány leírásának megkönnyítése végett az aminosavak, peptidek és származékaik szokásosan alkalmazott rövidítéseit alkalmazzuk, ahogy azok a peptid kémiában használatosak és az IUPAC-IUB biokémiai nómenklatúrával foglalkozó bizottság által meghatározott [European J. Biochem., 138. 9-37 (1984)].
Az egyes aminosavcsoportoknak a rövidítései a megfelelő aminosav triviális nevén alapszik, lásd pl. pGlu piroglutaminsavat, His hisztidint, Trp triptofánl. Ser szerint, Tyr tirozint, Lys lizint, Leu leucint, Arg arginint, Pro prolint, Gly glicint, Alá alanint és Phe fenil-alanint jelent. Ahol az aminosav-csoportok izomer formákkal rendelkeznek, az aminosav L-formájú, hacsak másképpen nincs jelölve.
A jelen találmányban alkalmazott nem szokásos aminosavaknak a rövidítése a következő:
Mel: 4-[bisz-(2-klór-etil)-amino]-D-fenilalanint,
A2pr: 2,3-diamino-propionsavat jelent.
A peptid szekvenciákat aszerint a megállapodás szerint jelöljük, hogy az N-terminális aminosav a bal oldalon, és a C-terminális a jobb oldalon helyezkedik el.
További rövidítések:
AcOH ecetsav
Ac2O ecetsavanhidrid
Boc terc-butoxi-karbonil
Bzl benzil
C1SAL 5-kJór-2-O-l-benzilidén
DCB 2,6-diklór-benzil
DCC N,N’-diciklohexil-karbodiimid
DCM diklór-metán
DIC N.N’-diizopropil-karbodiimid
DMF dimetil-formamid
FMOC 9-fluorenil-metil-oxi-karbonil
HU 211 612 A9
| HOBt | 1 -hidroxi-benzotriazol | TEA | trietil-amin |
| HPLC | nagyfelbontású folyadékkromatográfia | TFA | trifluor-ecetsav |
| MBzl | metil-benzil | Trt | tritil |
| MeCN | acetonitril | Z | benziloxi-karbonil |
| MeOH | metil-alkohol | 5 Z(2-Br) | 2-bróm-benziloxi-karbonil |
| MIT | mitomicin C | Z(2-C1) | 2-klór-benziloxi-karbonil. |
| MTX | metotrexát (ametopterin) | Az alábbi vegyületek megvalósítási formái a ta | |
| SÁL | 2-O-l-benzilidén | mánynak: | |
| 1. Mel | 1 1 -Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys· | -Thr-NH2 |
2. D-Mel-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NHj
I I . Mel-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2
4. Mel-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NHj
I I
5. Mel-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NHj
I I . Mel-D-phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NHj . [A2pr(PtCl2) 1 -D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NHj . [A2pr f PtCl2)]-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 . [A2pr(SÁL)2Cu]-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2
I I
10. [A2pr(ClSAL)2Cu]-D-Phe-Cys-Tyr-O-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 . MTX-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-HH2 . MTX-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2
Előnyös megvalósítási formák az 1., 2., 3., 5., 7., 9,, 11. és 12. peptidek.
Az összes fenti vegyület előállítható gyógyászatilag elfogadható szerves vagy szervetlen savak vagy bázisok addíciós sóiként is. Ásókra nem korlátozó jelleggel a következőket említjük: hidrogén-klorid, hidrogénbromid. szulfát, foszfát, fumarát, glukonát, tannát, maleál, acetát, citrát, benzoát, szukcinát, alginát, pamoát, maleát, aszkorbát, tartarát, és hasonlók, mint például alkáli- és alkáliföldfémsók.
Vizsgálati módszerek
A találmány szerinti vegyületek erősen befolyásolják a hipofízisnek növekedési hormon (angolul: growth hormoné, rövidítve: GH) kibocsátó képességét, tumoros sejtmembránokhoz kötődnek, gátolják a pHjtimidinnek a DNS-be való beépülését sejtkultúrákban, és bizonyos tumoros sejtek növekedését is gátolják.
a) Növekedési hormon kibocsátást gátló aktivitás
A vegyületeknek GH- és prolaktin kibocsátó képességét in vitro vizsgáltuk szuperfuzionált patkány hipofízis sejtrendszerekben [S. Vigh és A. V. Schally, Peptídes, 5. Suppl. 7, 241-247 (1984)].
A hormonkibocsátó hatás gátlásának a meghatározására minden egyes peptidet 3 percen át 20-500 pM koncentrációban áramoltattuk át sejteken (1 ml átáramoltatott folyadék) 1 nM GHRH-val együtt. A patkány GH-t az átáramoltatott folyadék alikvotjaiban mértük rádióimmunovizsgálati módszerrel (NIAMDDK-ból vett RIA-készlettel) és így határoztuk meg vagy a mi40 nimális vagy a gátolt kiválasztást. A peptidek aktivitását hasonló módon átáramoltatott 25 pM szomatosztatin (1-14) oldatokhoz hasonlítottuk.
b) Receptorkötődés
A vegyületeknek humán mellkasrák sejtmembránokhoz való affinitását 125l-címkézett (Tyrn)-szomatosztatin felhasználással határoztuk meg. A kötődési vizsgálatot az alábbi műben leírtakhoz hasonlóan végeztük: M. Fekete és tsai, J. Clin. Láb. Anal. 3, 13750 141, 1989.
c) Citotoxicitási teszt
A találmány szerinti vegyületek citotoxikus aktivitását in vitro határoztuk meg a Finlay és mtsai által kidolgozott félautomatikus eljárás módosításával [Anal. Biochem., 139, 727 (1984) és Dawson és mtsai, J. Interferon Rés., 6, 137 (1986)]. Különféle humán rákos sejtvonalakat tenyésztettünk RPMI-164 vagy Dulbecco-féle módosított Eagle közegben. A pepti60 deket 1-10 000 ng/ml koncentrációban adagoltuk és a
HU 211 612 A9 sejtek növekedésének gátló hatását (frakcionális százalékos túlélés) kvantitatív határoztuk meg a sejtek festésével, szolubilizálásával, majd az optikai sűrűség meghatározásával.
Az (I) általános képletű peptideknek a [3H]timidinnek a H-69 kissejtű tüdőrák sejtvonal és MiaPaCa sejtvonal egyrétegű kultúrájának DNS-ébe való beépülését a Kern és tsai által leírt módszenei vizsgáltuk [Caneer Rés.. 45, 5436 (1985)].
A peptidek előállítása
A találmány szerinti peptideket előállíthatjuk bármely, a peptid kémiában ismert módszer alkalmazásával. Ezen módszerek összefoglalása található a következő műben: M. Bodanszky, Principles of Peptide Synthesis, Springer Verlag, Heidelberg, 1984. A klaszszikus oldatos szintézist részletezi a következő mű: ,.Methoden dér Organische Chemie” (Houben-Weyl), 15. kötet, Synthese von Pepiiden, I. és II. rész, Georg Thieme kiadó, Stuttgart, 1974. A kifejezetten szilárd fázisú szintézis módszereket a következő könyv ismerteti: J. M. Stewart és J. D. Young, Solid Phase Peptide Synthesis, Pierce Chem. Co., Rockford, IL, 1984 (2. kiadás) és G. Bárány és tsai. Int. J. Peptide Protein Rés. 30. 705-739. 1987.
A találmány szerinti intermedier peptideket és a melfalant tartalmazó peptideket szilárd fázisú eljárással állítjuk elő. A szilárd fázisú szintézis során megfelelően védett aminosavakat (néha védett peptideket) adunk C —> N irányban lépésenként, miután a C-terminális aminosavat megfelelő módon rögzítünk egy szilárd hordozóhoz, például egy gyantához. A kapcsolási lépés teljessé válása után az N-terminális védőcsoportot eltávolítjuk az újonnan hozzáadott aminosav gyökről, majd a következő aminosavat, ami szintén megfelelően védett adagoljuk, stb. Miután az összes kívánt aminosavat a megfelelő sorrendben bekapcsoltuk, a pepiidet lehasítjuk a hordozóról és megszabadítjuk a még megmaradt védőcsoport(ok)tól olyan körülmények között, melyek legkevésbé roncsolóak a szekvenciára nézve. Ezt követően a terméket gondosan tisztítjuk, majd körültekintően jellemezzük a szintetizált terméket, hogy megbizonyosodhassunk, hogy a kívánt szerkezetet kaptuk.
Az előállítás előnyös megvalósításai
Az (I) általános képletű vegyületek előállítására egy különösen előnyös módszer a szilárd fázisú szintézis, pl. egy a O-pozícióban Mel-t tartalmazó peptidet előállíthatunk ilyen módszerrel és klasszikus eljárással is (az oktapeptid analógnak egy Boc-Mel vegyülettel oldószerben történő kapcsolásával).
Az (I) általános képletű peptideket előnyösen az alábbi (VIIA) általános képletű intermedier peptidekből állíthatjuk elő:
X1 -R1 -Cy s(X2)-R3(X3 )-D-Trp-Ly s(X5)-R6-Cy s(X7 )R8(X8)-NH-X9 ahol R', R3, R6, R8 és X1 jelentése a fentiekben megadott,
X2 és X7 jelentése a Cys szulfhidril csoportjának védésére szolgáló metil-benzil-csoport (MBzl),
X3 jelentése a Tyr fenolos hidroxilcsoportjának a védelmére szolgáló 2-bróm-benziloxi-karbonil [Z(2Br)J vagy 2,6-diklór-benzil (DCB),
X5 jelentése a Lys oldalláncban helyet foglaló aminocsoportjának a védelmére szolgáló [Z(2-C1)] vagy FMOC csoport,
X8 jelentése a Tyr fenolos hidroxilcsoportjának a védelmére szolgáló [Z(2-Br)] vagy DCB csoport,
X9 jelentése egy gyanta hordozóba beépített amid védő benzhidril vagy metil-benzhidril-csoport;
a peptidamidok előállítására előnyösen a kereskedelemből beszerezhető benzhidril-amino-polisztirén/2% divinil-benzol kopolimert alkalmazunk.
A diamino-acil-csoportot tartalmazó intermedier peptidek előállításának különösen előnyös módja a szilárd fázisú peptidszintézis. A vegyületeket a (VIIA) általános képletű peptidek (ahol X1 jelentése hidrogénatom) Boc2A2pr-vel való kapcsolásával, majd az ezt követő védőcsoport-mentesítéssel állítjuk elő. így kapjuk az alábbi képletű peptideket:
X2A2pr-D-Phe-Cys(X2)-Tyr(X3)-D-Trp-Lys(X5)Val-Cys(X7)-R8(X8)-X9 ahol R8, X2, X3. X5, X7, X8 és X9 jelentése a fentiekben megadott és X jelentése az A2pr aminocsoportjának a védelmére szolgáló Boc csoport.
A (VIIB) és (VIIIB) általános képletű ciklusos vegyületeknek az előállítására egy különösen előnyös eljárás az, amikor a risztéinek két szulfidilcsoportját savas oldatban oldott jóddal oxidáljuk.
A (VIIA) általános képletű peptidek szilárd fázisú szintézisét Boc-védett Thr vagy Trp benzhidril-amin gyantával való kapcsolódásával indítjuk elő CH2C12 közegben. A kapcsolódást DIC vagy DIC/HOBt alkalmazásával a környezet hőmérsékletén hajtjuk végre. A Boc csoport eltávolítása után az egymást követő védett aminosavak kapcsolását (mindegyiket háromszoros moláris feleslegben alkalmazzuk) CH2C12 vagy DMF/CH2CI2 keverékben hajtjuk végre a Boc-aminosav oldékonyságától függően. Minden fázisban a kapcsolódási reakció sikerességét előnyösen a ninhidrin teszttel követhetjük [lásd Kaiserés tsai Anal. Biochem. 34, 595 (1970)]. Amennyiben nem teljes a kapcsolódás a kapcsolási eljárást megismételjük azelőtt, hogy az alfa-amino védőcsoportol eltávolítanánk a következő aminosav reakciójához.
Miután a (VIIA) általános képletű intermedier pepiidnek kialakult a kívánt aminosavsorrendje, a peptidgyanta komplexet folyékony hidrogén-fluoriddal kezeljük anizol jelenlétében és így kapjuk azon (VIIA) általános képletú peptideket, amelyeknél X2, X3, X5, X7, X8 és X9 jelentése hidrogénatom.
A (VIIIB) általános képletű peptideket (I) általános képletű peptidekké (ahol Q jelentése AQ1 ahol Q1 jelentése PtCl2) alakíthatjuk át a kiindulási peptideknek ekvivalens mennyiségű vizes DMF-ben készült 6080%-os K2PlCl4 oldattal a környezet hőmérsékletén végzett reagáltatással, majd ezt követő HPLC tisztítással. A platinatartalmú vegyületeket kívánt esetben PtY2 képletű származékává, amely hasonló szubsztituenseket tartalmaz, alakíthatjuk ismert eljárásokkal.
HU 211 612 A9
Azon (I) általános képletű vegyületek előállítása esetén, melyeknél Q jelentése MTX, egy (VIIB) általános képletű vegyületet MTX-szel kapcsolunk karbodiimides eljárással.
Azon (I) általános képletű peptideket, ahol Q jelentése AQ1, ahol Q1 jelentése Cu(B)2 és amelyek nem plaúnafém csoportbeli fématomot hordoznak citotoxikus csoportként, a (VHIB) általános képletű intermedier peptidekből nyeljük úgy, hogy azt egy hidroxil-oxo vegyületnek réz vagy nikkel kation 60-80%-os vizes DMS-ben készült oldatával előre elkészített komplexével reagáltatjuk, majd a kívánt pepüd-fém komplexet HPLC módszenei izoláljuk.
Egy másik módszer szerint azon (I) általános képletű vegyületeket, ahol Q jelentése AQ1 jelentése, ahol Q1 jelentése Cu(b)2, előállíthatjuk a (VIIIB) általános képletű intermedier peptidekből (ahol X5 jelentése FMOC vedőcsoport) úgy, hogy a megfelelő hidroxiloxo vegyülettel reagáltatjuk, majd ezt követően egy gyógyászatilag elfogadható sav fémsójával előnyösen Cu++ acetátjával reagáltatjuk, majd ezt követően 3050%-os piperidin-oldattal védőcsoportmenlesítést hajtunk végre és végül a terméket HPLC módszerrel izoláljuk.
A peptidek tisztítása
Azon (VIIB) és (VIIIB) általános képletű intermedier peptideket, amelyeknél az összes védőcsoportot eltávolítottuk, két lépésben tisztítjuk. Először az oxidációs reakcióból kapott oldat liofilizátumát gélszűrésnek vetjük alá, amelyet egy Sephadex G15 oszlopon (1,2 x 100 cm) hajtunk végre, hogy eltávolítsuk a polimerizált termékeket, a szabad jódot és sókat 507-os ecetsavval végrehajtott eluálással. A második lépésben a gélszűréssel kapott Íiofilizátum (amely a kívánt peptidet tartalmazza) HPLC módszenei reverz fázisú oszlopon tisztítjuk. A félpreparatív HPLC tisztítást RAININ HPLC SYSTEM (RAININ Inc., Co., Woburn, MA) oszlopon hajtjuk végre, amely három Rainin Rabbit HP HPLC pumpát tartalmaz, a mérést APPLE MACINTOSH PLUS komputenel egy Rheodyne injektorral és egy KNAUER Model 87 különféle hullámhosszú UV monitorral követjük. A nyers peptideket DINAMAX makrooszlopon (21,2 x 250 mm) tisztítjuk, amely gömbalakú C18 szilikagéllel töltött (pórusméret 300 angström, részecskeméret 12 pm, Rainin Inc., Co., A jelű oszlop). Az oszlopot I jelű oldószenendszerrel eluáljuk, amely tartalmaz: A 0,1% vizes TFA-t és B 70%-os vizes acetonitrilben készült 0,1 %-os TFA-t. (A HPLC eluens előállításához az UV fokozatú acetonitrilt a Burdick & Jackson cégtől szereztük be, a TFA és az Ac OH HPLC/Spektro fokozatú (Pierce Chem.) és a vizet üvegen kétszer desztilláltuk és Milli-Q víztisztító rendszeren (Millipore) bocsátjuk keresztül.)
A melfalant tartalmazó (I) és (11) általános képletű peptideket szintén két lépésben tisztítjuk. A melfalan (és ennélfogva melfalan tartalmú peptidek is) könnyen bomlanak vizes oldatban, így a tisztítást a lehető legrövidebb idő alatt kell végrehajtani. Az oxidálódott polimerek a jód és a sók eltávolítására Sepahdex G15 oszlopot (0,6 x 10 cm) alkalmazunk. A bomlás minimalizálása érdekében a tisztítást 4 ’C-on hajtjuk végre. Az oszlopot 90%-os vizes AcOH oldattal eluáljuk. Az összegyűjtött oldatot azonnal liofilizáljuk és a pepüdeket HPLC módszerrel tisztítjuk. Egy VYDAC Protein & Peptíde C18 reverz fázisú oszlopot alkalmazunk (10 x 250 ml C18 szilikagéllel töltve, amelynek pórusmérete 300 angström, részecskenagysága 5 pm, gyártó: ALTECH, Deerfield, IL) (B jelű oszlop). Az oszlopot ii jelű oldószerrendszerrel eluáljuk, amely (A) 0,2%os vizes ecetsavat és (B) 70%-os vizes acetonitrilben készült 0,2%-os ecetsavat tartalmaz izokraükus és gradiens módszerrel kombinálva. Az oszlop eluenst 220 nm-en vizsgáljuk és a frakciókat jeges hűtés közben gyűjtjük.
A platinatartalmú peptideket egylépéses HPLC módszerrel tisztíthatjuk. A tisztítást 10 x 250 ml-es W-POREX C]8 oszlopon hajtjuk végre, amelynek pórusmérete 300 angström és részecskemérete 5 pm (Phenomenex, Rancho Pálos Verdes, CA, C jelű oszlop) és eluensként az i oldószert alkalmazzuk. A kromatografálást a környezet hőmérsékletén hajtjuk végre és az eluenst 220 nm-en vizsgáljuk.
A réz citotoxikus csoportokat tartalmazó pepúdeket enyhe körülmények között tisztíthatjuk HPLC módszerrel, mivel a fémkomplexek a savas oldatban instabilak. Az analógokat a B jelű oszlopon tisztítjuk, eluensként az iii jelű oldószerrendszert alkalmazva, amely (A) 0,1 mol/liter ammónium-acetát (pH = 7,0) és (B) 65%-os vizes MeCN-ben készült 0,1 mol/literes ammónium-acetát oldatból áll.
Analitikai HPLC
A nyers és üsztított peptideknek a minőségét és az eluens jellemzőit analitikus HPLC módszerrel állapítjuk meg, melyet egy Hewlett-Packard Model 1090 (1986) folyadékkromatográffal hajtunk végre, amely egy 220 és 280 nm-en érzékelő dióda detektorral van ellátva és egy 4,6 x 250 mm-es W-POREX C18 reverz fázisú oszloppal is rendelkezik, amelynek pórusmérete 300 angström, részecskemérete 5 pm, D jelű oszlop). Az i vagy iii oldószerrendszemek 1,2 ml/perces átfolyási sebességét tartjuk fenn és az elválasztást szobahőmérsékleten hajtjuk végre.
Aminosav-analízis
Aminosav-analízis céljából a peptídmintákat 110 ’C-on 20 órán át vákuum alatt lepecsételt tubusokban hidrolizáltuk, mely tubusok 4 mol/líter metán-szulfonsavat tartalmaztak. Az analízist Beckman 6300 aminosav-analizátorral hajtottuk végre.
Alkalmazási módozatok
A találmány szerinti peptidek készítmények előállítására is alkalmazhatók: amennyiben intramuszkuláris vagy szubkután injekciókat kívánunk előállítani, akkor poli(DL-laktid-koglikolidból előállított mikrokapszulákat vagy mikrorészecskéket alkalmazhatunk burkolás7
HU 211 612 A9 ra. Továbbá a peptideket alkalmazhatjuk intravénás adagolásra szánt készítményekben is, amikor izotóniás só, foszfátpuffer oldatokban és hasonlókban szerelhetjük ki.
Amikor a készítményt gyógyágyaszati alkalmazásra szánjuk, akkor a készítmény a peptideket más gyógyászatilag elfogadható hordozóval együtt tartalmazhatják. A dózisok 1-100 pg/testsúlykg között mozoghatnak, amikor intravénásán vagy intramuszkulárisan alkalmazzuk a peptideket.
A peptideket hasonló módon alkalmazhatjuk olyan készítmények előállítására, melyeket emlősöknek adagolhatunk intravénásán, szubkután, intramuszkulárisan, intranazálisan vagy intravaginálisan a kívánt tumorellenes hatás elérése érdekében. A hatásos dózis változik a különféle emlős egyedektől és az adagolás módozatától. Egy tipikus dozírozási forma az, amikor fiziológiai sóoldat tartalmazza a peptidet 0,1-2,5 mg/testsúlykg tartományban.
Habár találmányunkat az előnyös megvalósítási módozatokon keresztül ismertetjük, megjegyezzük, hogy a mellékelt oltalmi kör felöleli az átlagos szakember által végrehajtható változtatásokat és módosításokat is.
Alkalmazhatunk olyan ismert szubsztitúciókat is, melyek nem csökkentik szignifikánsan a találmány hatékonyságát.
I. előállítás
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 IA
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 IB
D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2 IC
Az IA előállítás során a peptideket lépésenként építjük fel egy kb. 0,55 miliekvivalens (továbbiakban: mekv) NH2/g tartalmú benzhidril-amin-HCl gyantán (Advanced Chem. Tech. Louisville, KY) egy szilárd fázisú szintézis manuális levezetésére alkalmas reakcióedényben. A 0,5 g benzhidril-aminHCl gyantát (kb. 0,27 mmol) CH2Cl2-ben készült 10%-os trietil-aminnal semlegesítjük két alkalommal 3-3 percen át, majd hatszor CH2Cl2-vel mossuk. A gyantái háromszoros moláris feleslegben vett BocThr(Bzl)-val (0,75 mmol) és DMF-ben készült HOBt-vel (0,82 mmol) keverjük össze 3 percen át. CH2Cl2-ben készült 5%-os dihidropropil-karbodiimid (0,82 mmol) oldatot adagolunk. A keveréket 90 percen át rázatjuk szobahőmérsékleten. A kapott gyantát hatszor mossuk DCM-mel, majd Kaiser-féle tesztnek vetjük alá [Kaiser és mtsai, Anal. Biochem. 34,595 (1970)].
A Boc-Thr(Bzl)-BHA gyantáról a Boc-csoportok eltávolítását (védőcsoportmentesítés) DCM-ben készült 1:1 arányú trifluor-ecetsav-oldattal hajtjuk végre 5 perc alatt, majd ezt követően szűrjük a gyantát, majd ismételten kezeljük 25 percen át, majd szűrjük a gyantát és DCM-mel mossuk hatszor.
A benzhidril-amin-gyantánál leírt módon eljárva semlegesítést hajtunk végre 10%-os trietil-amin-oldattal is.
Ezt követően a megfelelő aminosav-csoportokat (Boc-Cys(MBzl), Boc-Val, Boc-Lys(Z2-Cl), Boc-DTrp, BocTyr[Z(2-Br)], Boc-Cys(MBzl) és Boc-D-Phe) visszük be az egymást követő kapcsolási lépésekhez, melyeket a fentiekben leírt módon hajtunk végre. így kapjuk a következő szerkezetű peptidet: Boc-D-PheCys(MBzl)-Tyr[Z(2-Br)]-D-Trp-Lys[Z(2-Cl)]-Val-Cys(MBzl)-Thr(Bzl)-BHA gyanta.
A védőcsoportmentesítést a Boc-Thr(Bzl)-BHA gyantánál leírt módon hajtjuk végre. A Boc-D-Trp beépítése után 5%-os merkapto-etanolt adagolunk 50%os DCM-ben készült trifluor-ecetsav-oldathoz.
Végül a Boc védőcsoporttól mentesített peptid gyantát 3-3 alkalommal mossuk DCM-mel, metanollal és újra DCM-mel.
500 mg védett oktapeptid-BHA-gyantát 0,5 ml anizollal keverjük össze, majd a kapott anyagot 10 ml folyékony HF-fel 0 C-on 1 órán át. Miután vákuumban eltávolítjuk a HF-t, a peptid és gyanta keverékét száraz etil-acetáttal mossuk. Ezt követően a peptidet 30%-os AcOH-val extraháljuk, a gyantát szűréssel eltávolítjuk, majd liofilizálunk.
100 mg nyers, redukált peptidet 100 ml 95%-os vizes AcOH oldatban oldunk, majd ezt követően jégecetben készült 0,005 M-es jódoldatot csepegtetünk a keverékhez, amíg a sárga szín el nem múlik. Ecetsav lepárlása után a nyers diszulfid hidakat tartalmazó peptidet Sephadex G15 oszlopon gélszűrésnek vetjük alá. További tisztítást hajtunk végre az A jelű oszlopon végzett félpreparatív HPLC módszerrel, oldószerként i jelű lineáris gradiens oldószerrendszert alkalmazva 5,0 ml/perc átfolyási sebességnél.
Az IB jelti peptid i I
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 előállítását (IB előállítás) a fentiekhez hasonló módon hajtjuk végre azzal az eltéréssel, hogy Boc-Trp-t rögzítünk a gyantához Boc-Thr(Bzl) helyett az első lépésben.
Az IC jelű peptidet
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 az IA peptid előállításával megegyező módon hajtjuk végre, azzal az eltéréssel, hogy a harmadik lépésben Boc-Thr(Bzl)-t építünk be Boc-Val helyett.
Az IA, IB és IC tisztított peptidek (28 mg, 21 mg, 32 mg) analitikai HPLC módszerrel vizsgálva tisztának (>95%) bizonyultak i jelű lineáris grandiens oldószerrendszert alkalmazva, és az aminosavanalízis a kívánt eredményt szolgáltatta.
| Előállítás | Pepiid kód | Gradiens (%) B/perc | Retenciós idő D jelű csoporton | |
| tisztítás | analízis | ||||
| esetén | ||||
| IA | 25-55/60 | 20-60/40 | 15,5 | |
| IB | 30-60/60 | 25-65/40 | 19,5 | |
| IC | 25-55/60 | 20-60/40 | 17,4 |
HU 211 612 A9
II. előállítás
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(FMOC)-Val-Cys-Thr-NH2 IIA
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(FMOC)-Val-Cys-Trp-NH2 IIB
D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys(FMOC)-Thr-Cys-Thr-NH2 IIC
A IIA peptid lépésenkénti előállítását az IA peptid előállításánál leírt módon BAH gyantán hajtjuk végre azzal az eltéréssel, hogy Boc-Lys(FMOC)-t alkalmazunk Boc-Lys[Z(2-Cl)] helyett. A peptidet nyolc egymást követő kapcsolási lépéssel állítjuk elő és így kapjuk a következő vegyületet:
Boc-D-Phe-Cys(MBzl)-Tyr[Z(2-Br)]-D-Trp-Lys(FMOC)-Val-Cys(MBzl)-Thr(Bzl)-BHA gyanta. A Boc védőcsoportmentesített gyantát HF/anizollal kezeljük, jóddal oxidáljuk, majd Sephadex G15 oszlopon és Ajelű oszlopon i oldószerrendszert alkalmazva tisztítjuk.
III. előállítás
| Előállítás | Peptid kód | Gradiens (%) B/perc | Retenciós idő D jelű csoporton | |
| tisztítás | analízis | |||
| esetén | ||||
| HA | 55-85/60 | 50-90/40 | 12,2 | |
| HB | 55-85/60 | 50-90/40 | 14,6 | |
| IIC | 50-80/60 | 50-90/40 | 12,0 |
A2pr-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys
-Cys-Thr-NH2 IIIA
A2pr-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-LysA IIIA jelű peptidet az első pepiid előállításánál leírt BAH gyantán (1,0 g, 0,55 mekv NH2) szilárd fázisú technikát alkalmazva állítjuk elő, azzal az eltéréssel. hogy a szintézist nem állítjuk le a D-Phe adago- I lásával. Az oktapeptidet (Boc)A2-lal aciláljuk és így kapunk 391 mg (Boc)2-A2pr-D-Phe-Cys(MBzl)Tyr[Z(2-Br)]-D-Trp
-Lys[Z(2-Cl)]-Val-Cys(MBzl)-Thr(Bzl)-BHA gyantát.
A Boc csoportok eltávolítását követően a peptidgyantát 1 HF/anizollal kezeljük, hogy megkapjuk a szabad peptidet. Az oxidálást Sephadex G15 oszlopon és Ajelű
-Cys-Trp-NH2 IIIB oszlopon végzett HPLC módszerrel tisztítjuk az i jelű grandiens oldószerrendszert alkalmazva (20-50%, B eljárás, 60 perc). 86 mg IIIA jelű peptidet kapunk.
A fentiekhez hasonló módon eljárva, de az első lépésben Boc-Trp-t alkalmazva Boc-Thr(Bzl) helyett 77 mg IIIB jelű peptidet kapunk.
A nyers peptidek (>94%) 14,5 perces, illetve 23,7 perces HPLC retenciós idővel rendelkeznek, amikor az i jelű lienáris gradiens oldószerrendszert alkalmazzuk (20-50%, B, 30 perc). A kapott anyagok a várt aminosavszerkezettel rendelkeznek.
IV. előállítás
A2pr-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(FMOC)-Val-Cys-Thr-NH2 IV
A IV jelű peptid előállítása során az I jelű peptidek előállításánál leírtak szerint járunk el azzal az eltéréssel, hogy a negyedik kapcsolási lépésben Boc- 45 Lys(FMOC)-t alkalmazunk Boc-Lys[Z-(2-CI)] helyett. HF-s hasítást, oxidálást és tisztítási eljárást követően (A jelű oszlop, i jelű gradiens oldószerrendszer: 50-80% B, 60 perc) 47 mg IV jelű peptidet kapunk. A nyers peptid analitikai HPLC vizsgálat során egy csúcsot mutat 12,5 perces retenciós idővel.
V. előállítás
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(Boc)-Val-Cys-Thr-NH2 VA
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(Boc)-Val-Cys-Trp-NH2 VB
Az VA peptidet az IA peptid előállításánál leírt módszer szerint állítjuk elő azzal az eltéréssel, hogy FMOC-D-Phe-t alkalmazunk Boc-D-Phe helyett. A peptid-gyantát HF/anizollal kezeljük, majd ezt követően a diszulfid hidat oxidálással alakítjuk ki és a peptidet Sephadex G15 oszlopon és HPLC módszerrel (A jelű oszlop, i jelű gradiens oldószerrendszer: 55-85% B, 60 perc) tisztítjuk. Az FMOC védett peptidet DMFben oldjuk, majd 1,2 ekvivalens di-terc-butil-dikarbonátot és 1,2 ekvivalens ΤΈΑ-t adagolunk és így kapjuk a Boc-Lys(-Boc)-tartalmú peptidet. Mikor a reakció 60 teljessé válik, a védett peptidet éterrel kicsapatjuk és az
HU 211 612 A9
FMOC csoportot 50%-os piperidinnel eltávolítjuk. A Boc-védett pepiidet Ajelű oszlopon kromatografáljuk i jelű oldószerrendszert alkalmazva (45-75% B, 60 perc) és így kapjuk az Va jelű peptidet.
Az VB jelű peptidet hasonló módon a fentiekhez 5 hasonló módon állítjuk elő, azzal az eltéréssel, hogy Boc-Trp-t alkalmazunk Boc-Thr(Bzl) helyett. A peptid tisztának bizonyult az i jelű oldószerrendszer (45-85% B, 40 perc) alkalmazásával végrehajtott analitikai HPLC vizsgálat során.
VI. előállítás
Glt-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(FMOC)-Val-Cys-Thr-NH2 VI
A VI jelű peptidet a ΠΑ peptid előállításánál leírtak szerint és az N-terminális aminosavnak glutársavanhidriddel való acilezésével állítjuk elő. A peptid-gyantát HF/anizollal kezeljük oxidációval kialakítjuk a diszulfid hidat, majd Sephadex G15 oszlopon és végül HPLC módszerrel végzett tisztítást hajtunk végre. (Ajelű oszlop, i jelű gradiens oldószerrendszer: 50-80% B, 60 perc).
1. példa
Me1-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 1
D-Mel-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2 2
Az 1 jelű peptid előállítása során a következő aminosavakat kapcsoljuk BAH gyantához (100 mg) az I előállításnál megadott módon: Boc-Thr(BzI), BocCys(MBzl), Boc-Val, Boc-Lys[Z(2-Cl)], Boc-D-Trp, Boc-Tyr[Z(2-Br)]. Boc-Cys(MBzl) és Boc-Mel. A következő aminosavak lépésenkénti összekapcsolása BAH gyantán (100 mg) vezet a 2. jelű peptidhez: Boc-Thr(Bzl), Boc-Cys(MBzl), Boc-Val, BocLys[Z(2Cll], Boc-D-Trp. Boc-Tyr[Z(2-Brj], Boc-Cys(MBzl) és Boc-D-Mel. A peptideknek a gyantáról való lehasítását követően azokat oxidáljuk és liofilizáljuk, majd Sephadex G15 oszlopon végzett gélszűrésnek vetjük alá, melynek során 80%-os AcOH-val végzett mosással távolítjuk el a jódot. B jelű oszlopon ii jelű lineáris gradiensű oldattal (55-85 B%, 60 perc) végzett HPLC tisztítással kapjuk az 1 pepiidet (13 mg) és a 2 peptidet (14 mg) 95%-nál nagyobb tisztasággal. Az 1 illetve 2 jelű peptidhez tartozó retenciós idők: 20,1 perc és 22,8 perc, amikor ι jelű oldószerrendszerrel (30-70 B%, 40 perc) végrehajtott analitikai HPLC-t hajtunk végre.
2. példa
| Me1-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH, | (3) | |
| 1 I Mel-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH, | (6) | (4) |
| 1 1 Me1-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2 | (7) | (5) |
| 1 Me1-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH, | (9) | (6) |
D-Phe-Cys(MBzl)-Tyr[Z(2-Br))-D-Trp-Lys[Z(2Cl)]-Val-Cys(MBzl)-Thr(Bzl)-BAH-gyantát állítunk elő az I. előállítás szerinti módon, majd az N-terminális védőcsoport mentesítése után Boc-Mel-lel acilezést hajtunk végre és így kapjuk a védett 3-nonapeptidet.
Boc-Thr(Bzl), Boc-Cys(MBzl), Boc-Thr(Bzl), Boc-Lys -Lys[Z(2-Cl)], Boc-D-Trp, Boc-Phe, BocCys(MBzl), Boc-D-Phe és Boc-Mel benzhidril-amingyantán az I. előállítás szerint végrehajtott kapcsolásával állítjuk elő a 4 jelű védett nonapeptidet.
Boc-Thr(Bzl), Boc-Cys(MBzl), Boc-Thr(Bzl), BocLys[Z(2-Cl)], Boc-D-Trp, Boc-Phe, Boc-Cys(MBzl), Boc-Phe és Boc-Mel B AH-gyantán végzett egymás utáni kapcsolásával kapjuk a védett 5 jelű peptidet.
Mel-D-Phe-Cys(Bzl)-Tyr[Z(2-Br)]-D-Trp-Lys[Z(2Cl)]-Val-Cys(MBzl)-Trp-BAH-gyantát (6 jelű védett peptid) az I. előállításnál leírt kilenc kapcsolási lépéssel állítjuk elő.
Az 1. példában leírt hasítás, oxidálás, kisméretű Sephadex G15 jelű oszlopon végzett gélszűréssel és a B jelű oszlopon ii jelű oldószerrendszert alkalmazva kapjuk >92% tisztasággal az 3,4, 5, és 6 jelű peptideket (a megfelelő tömegek 8,4 mg, 10,6 mg, 9,9 mg, 7,9 mg).
HPLC adatok
| Előállítás | Peptid kód | Gradiens (%) B/perc | Retencibs idő D jelű oszlop (perc) | |
| tisztítás | analízis | |||
| 3 | 60-90/60 | 40-80/40 | 16,1 | |
| 4 | 60-90/60 | 40-80/40 | 14,0 | |
| 5 | 69-90/60 | 35-75/40 | 17,8 | |
| 6 | 65-95/60 | 40-80/40 | 22,4 |
HU 211 612 A9
Annak bizonyítására, hogy a szilárd fázisú peptidszintézis alkalmazható az instabil melphalannak a szekvenciába való beépítésére, egy másik úton is előállítottuk a 3 peptidet,_
FMOC-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2-t 5 állítunk elő az IA előállításnál megadott módon azzal az eltéréssel, hogy FMOC-D-Phe-t alkalmazunk BocPhe helyett.
Ehhez az oktapeptidhez klasszikus szintézis eljárásokkal kapcsoljuk a Boc-Melt.
FMOC-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Va1-Cys-Thr-NH2
Boc2O
FMOC-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(Boc)-Val-Cys-Thr-NH2
50% piperídin DMF-ben 30 percen át
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(Boc)-Val-Cys-Thr-NH2
Boc-Mel-lel végzett kapcsolás DCC + HOBt
I i
Boc-Mel-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(Boc)-Val-Cys-Thr-NH2
DCM-ben 50%-os TFA-val végzett védőcsoport eltávolítás
I i
Mel-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 (3)
A fenti úton előállított 3 jelű peptid a szilárd fázisú eljárással előállított vegyülettel megegyező aminosavösszetételt. UV-spektrumot és HPLC retenciós időt mutatott.
3. példa [A2pr(PtCl2)]-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 (7) [A2pr(PtCl2)]-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 (8)
A (7) jelű platina-tartalmú peptidet 30 mg
A2pr-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 intermedier peptid TFA sójának (HA előállítás), 100 μΐ DMFben oldva és nátrium-hidroxiddal semlegesítve) kálium-klórplatinát (8,4 mg) 4 nátrium-acetát jelenlétében 48 órán át reagáltatásával állítjuk elő. Ezt követően a reakciókeveréket vízzel hígítjuk, majd Cjelű oszlopra injektáljuk és kromatografáljuk i jelű oldószerrendszer (25-50% B, 50 perc) alkalmazásával.
A (8) jelű peptidet a fentiekhez hasonló módon 40 állítjuk elő azzal az eltéréssel, hogy
A2pr-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 trifluor-ecetsav-sót (31 mg, IIB előállítás) alkalmazunk kiindulási anyagként a megfelelő THF8 származék (HA előállítás) helyett.
Az i jelű oldószerrendszer (30-60% B, 30 perc) alkalmazása esetén a kapott metallopeptidek (4,8 mg, illetve 5,3 mg) egy-egy HPLC csúcsot mutatnak 9.1 perces, illetve 19,5 perces retenciós idővel.
4. példa [A2pr(SÁL)2Cu]-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 (9)
I I (A2pr (ClSAL)2Cu] -D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 (10)
A (9) jelű metallopeptidet két különböző úton is előállítottuk annak bizonyítására, hogy a Cu komplex előállítható a szabad Lys-E-csoport ellenére is.
Az A eljárás szerint az
A2pr-D-Phe-cÍys-Tyr-D-Trp-Lys(FMOC)-Val-CysThr-NH2-t (ΙΠ. előállítás) 100 μΐ DMF-ben oldjuk, majd a pH-t 8-ra állítjuk be NaOC és NaOAc adagolá60 sával, majd ezután 4 mg szalicilaldehidet adagolunk. 1
HU 211 612 A9 órás szobahőmérsékleten végzett állást követően a fémkomplexet réz(II)acetáttal végzett (3 mg, 50 μΐ vízben) 30 percen át való reagáltatással állítjuk elő. Az FMOC védőcsoport eltávolítása végett a keveréket 50 μΐ piperidinnel keverjük össze, majd 30 perc múlva az 5 elegyet 100 μΐ vízzel hígítjuk. A kivált anyagot centrifugáljuk, a zöld felülosztó oldatot C jelű oszlopra visszük, majd i jelű oldószerrendszerrel (35-50% B, 40 perc) eluáljuk és így izoláljuk a (9) jelű metalopeptidel (4,1 mg). D jelű oszlopon i jelű oldószerrendszerrel (40-85% B, 30 perc) vizsgálva a pepiid tisztának bizonyul és a retenciós ideje 11,2 perc.
A B eljárás szerint 30 mg szabad intermedier peptidet (IIA előállítás) reagáltatunk 7,4 mg előre kialakított bisz(szalicil-aldehideato)-réz(II) vegyület [Y. Nakao és A. Nakahara, Bull. Chem. Soc. Japan 46, 187 (1973)]
300 μΐ 90%os vizes DMF-oldatával, amely nátrium10 acetátot tartalmaz (2 mg). A reakciót 48 órán át vezetjük le. A peptid-SAL rézkomplexet C jelű oszlopon választjuk el iii oldószer-rendszert alkalmazva (4060% B, 40 perc). Az így kapott (9) jelű peptid (7,6 mg) az A eljárással előállított peptiddel megegyező retenciós idővel és UV-spektrummal rendelkezik.
CISAL-lal ellátott (10) jelű peptidet állítunk elő a B eljárással a következők szerint:
mg intermedier peptid TFA sót (IIA előállítás) reagáltatunk 48 órán át 3,9 mg bisz-(5-klór-szalicil-aldehidáto)-réz(II) vegyület NaOAc pufferát vizes DMFoldatában. A reakciókeveréket C jelű oszlopon kromatografáljuk eluensként az iii oldószerrendszert (4570% B, 50 perc) alkalmazva. Az izolált zöldes színű peptid (4,1 mg) retenciós ideje 11,4 perc volt, amikor azt D oszlopon ii jelű lineáris gradiensű oldószerrendszerrel (45-90% B, 30 perc) vizsgáltuk.
5. példa
MTX-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 (11)
MTX-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2 (12) A (11) pepiidet tartalmazó antimetabolit szintézise során a ι |
D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(FMOC)-Val-Cys-Thr-NH2-t (HA előállítás) metotrexáttal végzett acilezésével állítjuk elő. 5,6 mg metotrexátnak 100 μΐ DMF-ben készült oldatához ekvivalens mennyiségű diizopropil-karbodiimidet adunk. 15 perc után az elegyet összekeverjük 14 mg peptidnek semlegesített oldatával (DMF) majd az elegyet egész éjen át 0 C-on tartjuk. Az FMOC védőcsoportot 50 μΐ piridinnel való kezeléssel eltávolítjuk, majd a peptidet C jelű oszlopon i jelű oldószerrendszer alkalmazásával (25-50% B, 50 perc) eluáljuk. Két peptidet detektálunk és izolálunk, melyek retenciós idejei 14,9 illetve 15,4 perc. Ezek a vegyületek a metotrexát α-karboxil- vagy karboxilcsoportján acilezett származékok és ezt a D jelű oszlopon i jelű oldószerrendszer (30-50% B, 20 perc) alkalmazásával vizsgáltuk meg.
A (13) peptideket a fentiekkel egyező módon állítottuk elő azzal az eltéréssel, hogy kiindulási anyagként
D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-LysíFMOCj-Thr-Cys-Thr-NH--1 (IIC előállítás) alkalmaztunk.
6. példa
A találmány szerinti peptideknek biológiai hatásait, receptor kötődési képességüket, citotoxikus aktivitásukat az 1-4. táblázatok foglalják össze.
Az 1. táblázat mutatja be a találmány szerinti vegyületeknek növekedési hormon kibocsátást gátló aktivitását szomatosztatin(l-14)-hez viszonyítva, in vitro vizsgálva diszpergált patkány hipofízis szuperfuzionált sejtrendszerben [S. Vigh és A. V. Schally, Peptides 5, 241-247 (1984)]. Az 1. táblázat tartalmaz még adagokat ezeknek a vegyületeknek patkány agykéreg és pat30 kány prosztata tumor (Dunningt R3327H) receptor membránokhoz való affinitásukról.
A 2. táblázat adatai mutatják az (5) jelű peptidnek a 3T3 fibroblaszt sejtek növekedésére való hatását spektrofotometriás módszerrel mérve. 105 sejtet növesztünk DME-ben készült 10%-os NCS oldatban 96 lyukú tányéron, a sejteket poli-D-lizinnel kezeltük előzetesen, és hagytuk a sejteket erősen letapadni. A sejteket 3 napon át kezeljük úgy, hogy naponta cseréltük a citotoxikus peptideket 1-10 000 ng/ml koncentrációban. Az inkubálási periódust követően metabolikus festéket. MTT-t (3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difenil-2H-tetrazolium-bromid) adagolunk, majd élő sejtek lila formazán színének kialakulása után 590 nm-en mérjük az abszorbanciát (4. nap). Ismert számos sejttel előzetesen végrehajtott standardizál ássál következtetünk az abszorbanciából az aktuális élő sejtszámra.
A 3. táblázat mulatja be a 3H-timidinnek DNS-be való beépülésének szomatosztatin analógokkal történő gátlására vonatkozó adatokat, humán pankreatisz MiaPaCa rákos sejtvonalon tenyésztve. A 0. napon 1 x 105 sejtet viszünk tányérokra 10% magzati boíjúszérumot (FCS-t) tartalmazó DME közegben. 24 óra múlva a közeget eltávolítjuk és szérum nélküli DME közeggel helyettesítjük azt, majd 2 napon át 37 ‘C-on végzünk inkubálást. Ezt követően a közeget eltávoltíjuk és 5%-os FCS tartalmú DME közeggel helyettesítjük, amely vagy tartalmaz szomatosztatin analógot vagy nem. A peptideket tartalmazó közeget naponta cseréljük 4 napon át. A negyedik napon 1 pCi 3H-timidint adagolunk, majd további 17 órán át folytatjuk az inkubálást. Ezt követően a közeget eltávollítjuk és a sejteket tripszinálással feltárjuk. A DNS-t 1 n perklórsavval extraháljuk és a radioaktivitást mérjük.
HU 211 612 A9
A 4. táblázat tartalmaz adatokat arra vonatkozóan, hogy a szomatosztatin analógok hogyan gátolják a 3Htimidin beépülését H-69 kis sejtű tüdőrák sejtvonalak DNS-ébe. 6,5 x 104 sejtet viszünk be steril polipropilén tubusokba 10% lószérumot és 5% magzati boíjúszérumot tartalmazó RPMI-1640 közegben. 3 nap után adagoljuk a szomatosztatin analógokat, majd 5 napon át inkubálunk 37 ‘C-on. A negyedik napon 1 gCi tríciumozott timidint adagolunk, majd az 5. napon a sejteket mossuk, üvegpapírra gyűjtjük, 10%-os vizes triklórecetsavval, majd etil-alkohollal mossuk, végül folyadékszcintillációs számlálóval beütésszámot mérünk.
1. táblázat
Citotikus csoportot hordozó szomatosztatin analógok GH-felszabadulást gátló és receptorkötődési aktivitása
| Peptid száma | Gátló aktivitás | Affinitási konstans** | |
| patkány agykéreg | Dunning tumor | ||
| SS-14 | 12,0 | 15,795 | 1,378 |
| 1. | 26,0 | 13.355 | 0,188 |
| 3. | 18,790 | N.K. | |
| 4. | N.K. | 0,111 | |
| 6. | 5,371 | 0,694 | |
| 7. | 44,6 | 49,529 | 1,947 |
| 8. | N.K. | 0,115 | |
| 9. | 7,3 | 166,035 | 0,004 |
| 10. | 38,5 | 4,027 | 0,277 |
| HA. | 30,5 | 11,396 | 0,642 |
| HB. | 26,4 | 3,287 | 9,589 |
GH-felszabadulást gátló aktivitást 200 nM-nél ellenőriztük |125I-Tyrl]szomatosztatin(l-14)-et alkalmaztunk címkézett ligandumként
N.K.: nincs kötődés
2. táblázat
A 7 jelű peptideknek a 3T3 fibroblast sejtek növekedésére való hatása MTT spektrofotometriásán vizsgálva
| Vegyület | Dózis | Abszorbancia | %-os csökkenés |
| Kontroll | - | 0,252 | 0 |
| 5 jelű peptid | 10 | 0,125 | 50* |
| 100 | 0,192 | 24* | |
| 100 | 0,206 | 18* | |
| 1000 | 0,186 | 26* | |
| 10 000 | 0,121 | 52* |
p < 0.01 Duncan-féle meghatározás (multiple rangé test)
3. táblázat
A 7 jelű peptideknek és melfalannak MiaPaCa sejtek növekedésére való hatása sejtszámlálással és 3H-timidinnek DNS-be való beépülésével meghatározva
| Vegyület | Dózis | %-os sejtszámcsökkenés | 3H-ti midin beépülésének %-os gátlása |
| Kontroll | 0 | - | - |
| 5 jelű peptid | ÍO^M | 22** | 68” |
| 10‘7 M | 33*’ | 63” | |
| 108M | 35** | 53” | |
| Melfalan | 10-6 M | 29’* | 20 |
| io-7m | 1 | 18 | |
| 10’8M | 1 | - |
* < 0,05 Duncan-féle meghatározás (multiple rangé test) »» < 0,01
4. táblázat
Az 5 jelű pepiidnek hatása iH-timidinnek SCLC H-69 sejtvonal DNS-ébe való beépülésén vizsgálva
| Vegyület | Dózis | %-os gátlása a 3H-timidin beépülésének | P* |
| Kontroll | 0 | 0 | - |
| 5 jelű peptid | 1 | 37 | 0,01 |
| 10 | 34 | 0,01 | |
| 100 | 25 | 0,01 | |
| 1000 | 29 | 0,01 | |
| 10 000 | 36 | 0,01 |
a szigniftkanciát a Duncan-féle meghatározás (multiple rangé lest) teszttel határoztuk meg.
Claims (9)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Az alábbi képletű peptidQ-R1 -éys-R3-D-Trp-Lys-R6-Cys-R8-NH2 -aholR1 jelentése L- vagy D-Phe, L- vagy D-Mel,R3 jelentése Phe, ha Rí Thr, vagy R3 jelentése Tyr, haRe Val,RB jelentése Thr vagy Trp, ésQ jelentése hidrogénatom, L- és D-Mel, metotrexoilés AQ1 csoportok közül választott csoport, ahol A jelentése 2,3-diamino-propioniI-csoport,Q1 jelentése PtCl2 vagy Cu(B)2, és B jelentése 2-O_-l-benzilidenil- vagy 5-klór-2O'-l-benzilidenil-csoportok közül választott csoport, vagy gyógyászatilag elfogadható savakkal és bázisokkal képezett sóik, azzal a kikötéssel, hogy amikor Q jelentése hidrogénatom, akkor R, jelentése D- vagy L-Mel.HU 211 612 A9
- 2. Az 1. igénypont szerinti peptid, ahol R' jelentése D-Mel, R8 jelentése Thr, Q jelentése hidrogén és R3 jelentése Phe.
- 3 . Az 1. igénypont szerinti peptid, ahol Q jelentése Mel, R8 jelentése Thr és R1 jelentése Phe.
- 4. Az 1. igénypont szerinti peptid, ahol R1 jelentése DPhe, R3 jelentése Phe és Q jelentése metotrexoilcsoport.
- 5. Az 1. igénypont szerinti peptid, ahol Q jelentése hidrogénatom, R' jelentése Mel, R3 jelentése T\r és R8 jelentése Thr.
- 6. Az 1. igénypont szerinti peptid, ahol R1 jelentése D-Phe, R3 jelentése Tyr és Q jelentése Mel.
- 7. Az 1. igénypont szerinti peptid, ahol R1 jelentése D-Phe, R3 jelentése Tyr, Q jelentése metotrexoilcsoport és R8 jelentése Thr.
- 8. Az 1. igénypont szerinti peptid, ahol R1 jelentése 5 D-Phe, R3 jelentése Tyr, R8 jelentése Thr és Q jelentése2,3-diamino-propionil-PtClj vagy 2,3-diamino-propionil-Cu(B)2, ahol B jelentése 2-O~-l-benzilidenil- vagy 5-klór-2-0-l-benzilidenil-csoport közül választott csoport.
- 10 9. Az 1-8. igénypontok szerinti peptidek alkalmazása rákos tumorok növekedését gátló vegyületek előállítására.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US50550190A | 1990-04-06 | 1990-04-06 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU211612A9 true HU211612A9 (en) | 1995-12-28 |
Family
ID=24010564
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU911117A HUT59165A (en) | 1990-04-06 | 1991-04-05 | Process for producing somatostatine analogues |
| HU95P/P00588P HU211612A9 (en) | 1990-04-06 | 1995-06-29 | Somatostatine analogues |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU911117A HUT59165A (en) | 1990-04-06 | 1991-04-05 | Process for producing somatostatine analogues |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0450480B1 (hu) |
| JP (1) | JPH0641194A (hu) |
| AT (1) | ATE124054T1 (hu) |
| AU (1) | AU638118B2 (hu) |
| CA (1) | CA2039880A1 (hu) |
| DE (1) | DE69110519T2 (hu) |
| DK (1) | DK0450480T3 (hu) |
| ES (1) | ES2075244T3 (hu) |
| GR (1) | GR3017298T3 (hu) |
| HR (1) | HRP921276A2 (hu) |
| HU (2) | HUT59165A (hu) |
| IE (1) | IE65825B1 (hu) |
| MC (1) | MC2266A1 (hu) |
| NZ (1) | NZ237704A (hu) |
| YU (1) | YU62091A (hu) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5783170A (en) * | 1991-11-27 | 1998-07-21 | Diatide, Inc. | Peptide-metal chelate conjugates |
| US5716596A (en) * | 1992-06-23 | 1998-02-10 | Diatide, Inc. | Radioactively labeled somatostatin-derived peptides for imaging and therapeutic uses |
| US5871711A (en) * | 1992-06-23 | 1999-02-16 | Diatide, Inc. | Radioactively-labeled somatostatin-derived peptides for imaging and therapeutic uses |
| US5932189A (en) * | 1994-07-29 | 1999-08-03 | Diatech, Inc. | Cyclic peptide somatostatin analogs |
| US5583104A (en) * | 1993-12-06 | 1996-12-10 | Mayo Foundation For Medical Research And Education | Treatment of proliferation of bile duct epithelium |
| US5843903A (en) * | 1995-11-27 | 1998-12-01 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Targeted cytotoxic anthracycline analogs |
| AU2002341792B2 (en) * | 2001-09-21 | 2007-09-06 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Diagnostic or therapeutic somatostatin or bombesin analog conjugates and uses thereof |
| AU2004232314B2 (en) * | 2003-04-22 | 2007-11-22 | Ipsen Pharma S.A.S. | Peptide vectors |
| KR101423898B1 (ko) * | 2005-12-14 | 2014-07-28 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 비-천연 아미노산 및 폴리펩티드를 함유하는 조성물, 비-천연 아미노산 및 폴리펩티드를 포함하는 방법, 및 비-천연 아미노산 및 폴리펩티드의 용도 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4725577A (en) * | 1985-04-25 | 1988-02-16 | Administrators Of The Tulane Educational Fund | Biologically active lysine containing octapeptides |
| ZA895838B (en) * | 1988-08-18 | 1991-03-27 | Syntex Inc | Pharmaceutical compounds |
-
1991
- 1991-03-27 ES ES91104845T patent/ES2075244T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-27 DE DE69110519T patent/DE69110519T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-27 DK DK91104845.2T patent/DK0450480T3/da active
- 1991-03-27 EP EP91104845A patent/EP0450480B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-27 AT AT91104845T patent/ATE124054T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-04-04 YU YU62091A patent/YU62091A/sh unknown
- 1991-04-05 NZ NZ237704A patent/NZ237704A/en unknown
- 1991-04-05 IE IE113391A patent/IE65825B1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-04-05 AU AU74105/91A patent/AU638118B2/en not_active Ceased
- 1991-04-05 HU HU911117A patent/HUT59165A/hu unknown
- 1991-04-05 JP JP3072935A patent/JPH0641194A/ja active Pending
- 1991-04-05 CA CA002039880A patent/CA2039880A1/en not_active Abandoned
- 1991-04-08 MC MC912184A patent/MC2266A1/xx unknown
-
1992
- 1992-11-16 HR HRP-620/91A patent/HRP921276A2/hr not_active Application Discontinuation
-
1995
- 1995-06-29 HU HU95P/P00588P patent/HU211612A9/hu unknown
- 1995-09-05 GR GR950402423T patent/GR3017298T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HU911117D0 (en) | 1991-10-28 |
| HRP921276A2 (en) | 1998-08-31 |
| ES2075244T3 (es) | 1995-10-01 |
| HUT59165A (en) | 1992-04-28 |
| EP0450480A2 (en) | 1991-10-09 |
| IE911133A1 (en) | 1991-10-09 |
| IE65825B1 (en) | 1995-11-15 |
| DE69110519T2 (de) | 1995-11-30 |
| YU62091A (sh) | 1994-09-09 |
| MC2266A1 (fr) | 1993-04-26 |
| CA2039880A1 (en) | 1991-10-07 |
| JPH0641194A (ja) | 1994-02-15 |
| AU7410591A (en) | 1991-10-10 |
| ATE124054T1 (de) | 1995-07-15 |
| DE69110519D1 (de) | 1995-07-27 |
| EP0450480B1 (en) | 1995-06-21 |
| EP0450480A3 (en) | 1991-12-18 |
| GR3017298T3 (en) | 1995-12-31 |
| AU638118B2 (en) | 1993-06-17 |
| DK0450480T3 (da) | 1995-08-14 |
| NZ237704A (en) | 1992-12-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2944669B2 (ja) | ペプチド、その製造法、該ペプチドを含有する、ｌｈｒｈ拮抗剤 | |
| JP2514518B2 (ja) | ヘプタペプチドおよびオクタペプチドのソマトスタチン類似アミド誘導体、それを含有する抗腫瘍剤 | |
| SK285381B6 (sk) | Peptid antagonistický k hormónu uvoľňujúcemu gonadotropín (GnRH), farmaceutický prostriedok s jeho obsahom, jeho použitie a medziprodukt | |
| JP2001527507A (ja) | 改良された環状ｃｒｆ拮抗剤 | |
| EP0794959B1 (en) | Amino acids for making betides and methods of screening and making betide libraries | |
| JP3838656B2 (ja) | ポリペプチドのボンベシン拮抗物質 | |
| HU211603A9 (en) | Nonapeptide bombesin antagonists | |
| EP0914340B1 (en) | hGH-RH(1-29)NH2 ANALOGUES HAVING ANTAGONISTIC ACTIVITY | |
| EP0155786B1 (en) | New peptide, and production and use thereof | |
| AU757222B2 (en) | Antagonistic analogs of GH-RH inhibiting IGF-I and -II | |
| WO1997042223A9 (en) | hGH-RH(1-29)NH2 ANALOGUES HAVING ANTAGONISTIC ACTIVITY | |
| EP0450461B1 (en) | LHRH Analogs | |
| WO1995016707A1 (en) | ANALOGUES OF hGH-RH (1-29)NH2 HAVING ANTAGONISTIC ACTIVITY | |
| HU211612A9 (en) | Somatostatine analogues | |
| US6214969B1 (en) | Luteinizing hormone releasing hormone analogs with cytotoxic moiety | |
| Zhao et al. | Synthetic laminin-like peptides and pseudopeptides as potential antimetastatic agents | |
| EP0402313A1 (en) | Novel endothelin derivative | |
| JP3354173B2 (ja) | ポリペプチドおよびその用途 | |
| US20030105009A1 (en) | Polypeptides of covalently linked synthetic bioactive peptide analog(s) for treatment of cancer | |
| HU211932A9 (hu) | Az átmeneti oltalom az 1-21. igénypontokra vonatkozik. |