HU201962B - Process for producing renin inhibiting dipeptides and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient - Google Patents

Process for producing renin inhibiting dipeptides and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient Download PDF

Info

Publication number
HU201962B
HU201962B HU895949A HU594989A HU201962B HU 201962 B HU201962 B HU 201962B HU 895949 A HU895949 A HU 895949A HU 594989 A HU594989 A HU 594989A HU 201962 B HU201962 B HU 201962B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
formula
sub
preparation
chemistry
hydrogen
Prior art date
Application number
HU895949A
Other languages
German (de)
English (en)
Other versions
HUT51650A (en
HU895949D0 (en
Inventor
Wolfgang Rueger
Hansjoerg Urbach
Dieter Ruppert
Bernward Schoelkens
Original Assignee
Hoechst Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoechst Ag filed Critical Hoechst Ag
Publication of HU895949D0 publication Critical patent/HU895949D0/hu
Publication of HUT51650A publication Critical patent/HUT51650A/hu
Publication of HU201962B publication Critical patent/HU201962B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás renin-gátló új dipeptidek és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására.
A172 346,172347,189 203,229 667,230 266,255 082,273 893 és 274 259 számú európai szabadalmi leírások dipeptid-származékokat és ezek renin-gátló hatását ismertetik.
Olyan új dipeptid-származékokat találtunk, amelyek az eddig lényegesnek tartott szerkezeti részek hiánya ellenére meglepő módin in vitro és in vivő körülmények között hatékonyan gátolják a renin-enzimet.
A találmány tárgya tehát eljárás (I) általános képletű dipeptidek előállítására, a képletben
R1 jelentése az egyik hidrogénatom, a másik 2-6 szénatomos alkilcsoport vagy a két R1 a kapcsolódó nitrogénatommal együtt morfolinocsoportot képez,
A jelentése L-fenil-alanil-csoport,
B jelentése L-hisztidil-csoport vagy L-norvalilcsoport,
R2 jelentése alkilrészében 1-4 szénatomos ciklohexil-alkil-csoport,
D jelentése -CH(OR3)- általános képletű csoport, ahol
R3 jelentése hidrogénatom, vagy 2-6 szénatomos aUdl-amino-tio-karbonil-csoport,
E jelentése -(CH2)n- képletű csoport, ahol n értéke 1,2 vagy 3,
X jelentése közvetlen kötés,
Y jelentése piridilcsoport.
Az alkilcsoport lehet egyenes- vagy elágazószénláncú, és ugyanaz érvényes az alkilcsoportból levezethető csoportokra, így például a ciklohexil-alkilcsoportra és alkil-amino-tiokarbonil-csoportra is.
Az (I) általános képletben előforduló A és B jelentésébe eső aminosavak amidkötéssel kapcsolódnak egymáshoz.
Előnyösek azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében
R1 jelentése az egyik hidrogénatom, a másik 2-6 szénatomos alkilcsoport, vagy a két R1 a kapcsolódó nitrogénatommal együtt morfolinocsoportot képez,
A jelentése L-fenil-alanil-csoport,
B jelentése L-hisztidil-csoport vagy L-novalilcsoport,
Rz jelentése ciklohexil-metil-csoport,
D jelentése -CH(OR3)- általános képletű csoport, ahol R3 jelentése hidrogénatom,
E jelentése közvetlen kötés vagy -(CH2)n- képletű csoport, ahol n értéke 1,2 vagy 3,
X jelentése közvetlen kötés,
Y jelentése piridilcsoport,
Az (I) általános képletű dipeptid-származékok a találmány értelmében előállíthatók, ha egy (II) általános képletű vegyületet, a képletben
A, B, Ó, Ε, X, Y és R2 jelentése a fenti, egy (III) általáno» iépletű izotiocianáttal reagáltatunk, a a fenti, megfelelő azerves oldószerben, például benzolban, toluolban, klór-benzolban, alifás szénhidrogénben, alifás klórozott szénhidrogénben, dietiléterben, tetrahidrofuránban, dimetil-szulfoxidban képletbe*
Rjeleatfce vagy oldószertávollétében adott esetben Lewis-sav vagy Lewis-bázis jelenlétében, például tercieramin, előnyösen trietilamin, l-4-diazabiciklp[2.2.2]oktán, ciklohexil-dimetilamin, benzil-dimetilamin, 4metil-morfolin, tetrametil-guanidin vagy 4-dimetilamino-piridin jelenlétében -80 °C és az oldószer forráspontja közötti, előnyösen -30 és + 80 ’C közötti hőmérsékleten, amikoris az érzékeny funkciós csoportokat, így a hidroxilcsoportokat vagy aminocsoportokat kívánt esetben előzetesen védőcsoporttal blokkoljuk és a védőcsoportot a reakció végén adott adott esetben eltávolítjuk..
Az (I) általános képletű vegyületek előállítása során a védőcsoportok bevitelére és lehasítására alkalmazott eljárások ismertek, például a T.W. Green: Protective Groups in Organic Synthesis című irodalomból. Az (I) általános képletű vegyületek sóit önmagában ismert módon állítjuk elő, amelynek során a bázikus csoporttal rendelkező (I) általános képletű vegyületet például sztöchiometrikus mennyiségű megfelelő savval reagáltatjuk. A racém A vagy B sav felhasználásakor keletkező sztereomer elegyek, elsősorban diasztereomer elegyek önmagában ismert módon, például frakcionált kristályosítással vagy ktormatográfiásan szétválasztothatók.
A kiindulási anyagként alkalmazott (II) általános képletű vegyületröl, a képletben
A, B, D, Ε, X, Y és R2 jelentése a fenti,
SG jelentése amino védőcsoport, például tercbutil-oxi-karbonil-csoport, vagy benzil-oxi-karbonil-csoport, a védőcsoportot a szokásos módon, például savas hidrolízissel vagy hidrogenolízissel lehasítjuk.
A (III) általános képletű izotiocianátok az irodalomból ismertek, illetve az irodalomból ismert eljárásokkal analóg módon előállíthatók.
A (VIII) általános képletű vegyületek előállíthatók, ha védett SG-A-OH általános képletű aminosav-származékot (V) általános képletű vegyülettel, vagy védett SG-A-B-OH általános képletű dipeptidet (VII) általános képletű vegyülettel kapcsolunk.
Az (V) általános képletű vegyületek előállíthatók, ha egy (VII) általános képletű vegyületet védett SG-B-OH általános képletű aminosav-származékkal kapcsolunk, a képletben
B és SG jelentése a fenti, és az SG védőcsoportot lehasítjuk.
A (VII) általános képletű vegyületek az ismert renin-gátlók úgynevezett központi részét képezik és előállításuk R , D, Ε, X és Y jelentésétől függően erősen változik, és számos szabadalmi leírásból és más irodalomból ismert. Példaként említhető a 255 082, 230 266,229 667, 258 183 számú európai szabadalmi leírás, a 3 729 729 számú NSZK-beli közrebocsátási irat, valamint J. Chem. Soc. Perkin Trans, I., 1177,1987, J. Med. Chem. 30,1617,1987, J. Org. Chem. 53,869,1988.
Az új (I) általános képletű dipeptid-származékok erős enzimgátló hatással rendelkeznek, elsősorban a természetes renin-enzimet gátolják. Ez a hatás meglepő és előre nem volt várható, mivel valamennyi ismert renin-gátló (lásd például B.W. Greenlee: Pharmac. Rés. 4,364,1987) a P-pozícióban (vagyis az (I) általános képletű vegyületekben
-2HU 201962 Β levő -CS- csoporttal ekvivalens pozícióban) karbonilcsoportot vagy szulfoncsoportot tartalmaznak. Ebben a pozícióban tehát egy oxigénatomot tartalmaznak. Ebben a pozícióban tehát egy oxigénatomot tartalmaznak, amely hidrogénhíd akceptorként működhet és így az enzimmel kialakított kölcsönhatás szempontjából potenciálisan nagy jelentőséggel bír. Meglepő tehát, hogyha az oxigénatomot nagyobb térfogatú és hidrogénhíd létesítésére kisebb affinitást mutató kénatomra cseréljük, ugyanolyan hatásos renin-inhibitort kapunk, amelynek hatása az oxigén analóg vegyületek hatását sok esetben túlszárnyalja.
A renin az aszpartil-proteázok osztályába tartozó proteolitikus enzim, amely különböző ingerek (nagy térfogatú ürítés, nátriumhiány, β-receptor stimuláció) hatására a vese juxtaglomeruláris sejtjeiből a vérkeringésbe kerül. Ott a májból kivált angiotenziogénről lehasítja az angiotenzin I dekapeptidet. Ezt az „angiotensin converting enzyme” (ACE) angiotenzin II enzimmé alakítja. Az angiotenzin II fontos szereppel bír a vérnyomás szabályozásában, amivel a véredények összehúzásával közvetlenül szabályozza a vérnyomást. Emellett stimulálja az aldoszteronnak a mellékvesékből történő kiválasztását és így növeli a nátriumkiválasztás gátlásával az extracelluláris folyadék térfogatát, amely a maga részéről szintén a vérnyomás növekedését fokozza. A renin enzimatikus aktivitásának gátlói csökkentik az angiotenzin I képzését, amelynek következménye az angiotenzin II termelés csökkenése, A renin-gátlók vérnyomáscsökkentő hatásának közvetlen oka tehát a fenti aktív peptid hormon koncentrációjának csökkentése.
A renin-gátlók hatékonyságát in vitro vizsgálattal ellenőrizhetjük. Ennek során az angiotenzin I képződésének csökkentését különböző rendszerekben (humán plazma, tisztított humán renin) méijük.
A vizsgálat alapelve, hogy például a humán plazmát, amely mind renint, mind angiotenzinogént tartalmaz, 37 °C hőmérsékleten a vizsgálandó vegyülettel inkubáljuk. Ennek során az angiotenzinogénből a renin hatására angiotenzin I válik ki, amely a szokásos radioimmuno assay vizsgálattal mérhető. A renin-gátlók ezt az angiotenzin felszabadulást gátolják.
A plazma előállításához önkéntes jelentkezőktől vért veszünk (mintegy 0,5 liter fejenként, BlukoEntnahmegerat dér Fa. ASID Bonz und Sons, Unterschleissheim, NSZK) és jéghűtés közben részben légtelenített üvegekben felfogjuk. A véralvadás meggátlásához 10 mmól/1 végkoncentrációban EDTA-t adagolunk, majd a mintát 3500 fordulat/perc mellett 0-4 °C közötti hőmérsékleten 15 percen keresztül centrifugáljuk (HS 4 rotor, Sorvall), amelyet kilenc esetben megismételünk, majd a plazmát pipettával óvatosan eltávolítjuk és megfelelő adagokban -30 °C hőmérsékleten fagyasztjuk. A vizsgálatokhoz csak a megfelelő renin-aktivitást mutató plazmát alkalmazzuk. Az alacsony renin-aktivitást mutató plazmát megfelelő kezeléssel (-4 °C hőmérsékleten tárolva 3 napon keresztül) aktiváljuk, amelynek során a proreninből renin képeződik.
A vizsgálatok megvalósításához az angiotenzin I mennyiségét Renin-Maia készlettel (Soreno Diagnostics SA., Coinsins, Svájc) határozzuk meg. A plazma inkubálását az ott megadott útmutató szerint végezzük. Az inkubáláshoz alkalmazott oldatok:
1000 μΐ plazma (0-4 °C hőmérsékleten felolvasztva)
100 μΐ foszfát puffer (pH = 7,4) (adalékanyag 104 mól/1 ramiprilát) μΐ PMSF-oldat μΐ 0,1 tömeg%-os Genapol PFIC μΐ dimetil-szulfoxid, illetve tesztkészítmény.
A tesztkészítményt 102 mól/1 koncentrációban 100 tömeg%-os dimetil-szulfoxidban oldjuk és dimetil-szulfoxiddal a kívánt koncentrációra hígítjuk. Az inkubáláshoz alkalmazott oldat legfeljebb 1 tömeg% dimetil-szulfoxidot tartalmazhat.
Az oldatokat jégen hűtve összekeverjük és egy órán keresztül vízfürdőben 37 °C hőmérsékleten inkubáljuk. Egy további vizsgálati elegyből, amely inhibitort nem tartalmaz, inkubálás nélkül összesen hat mintát (egyenként 100 μΐ) veszünk a kiinduló angiotenzin I tartalom meghatározására.
A vizsgálati készítmények koncentrációját úgy választjuk meg, hogy mintegy 10-90%-os enzimgátlásnak feleljen meg (legalább öt különböző koncentráció). Az inkubálás végén minden elegyből háromszor 100 μ,Ι mintát veszünk egy előre lehűtött Eppendorg edényben, majd száraz jégen fagyasztjuk és mintegy -25 °C hőmérsékleten tároljuk az angiotenzin I mennyiségének meghatározásáig (három mérésből számolunk átlagértéket).
Az angiotenzin I radioimmuno assay vizsgálatához pontosan betartjuk a Renin-Maia készlet előírásait. A koncentrációgörbét 0,2-25,0 ng/ml angioteinz I koncentrációnál vesszük fel. Az alap angiotenzin I tartalmaz minden mérési eredményből levonjuk. A plazma a renin-aktivitást (PRA) az angiotenzin I-re vonatkoztatott ng/ml x óra mértékegységben adjuk meg. A vizsgált hatóanyag jelenlétében mért PRA értéket inhibitor nélküli minta eredményére, mint 100%-ra vonatkoztatjuk és ez alapján százalékos maradék aktivitást adunk meg. A maradék aktivitást a vizsgált hatóanyag koncentrációjával szemben ábrázolva meghatározzuk az IC50 értéket.
Az új (I) általános képletű vegyületek in vitro körülmények között mintegy 10 -10'10 mól/1 koncentrációban mutatnak gátlást.
A renin-gátlók sószegény állatokban csökkentik a vérnyomást. Mivel az emberi renint megkülönböztetik a más fajokból származó renintől, az in vivő vizsgálatokhoz főemlősök, például Rhesus-majom alkalmazhatók. A főemlős renin és a humán renin szekvenciájában messzemenően homológ. Furoszemid i.v. injekció formában történő beadásával endogén renin kiválasztást váltunk ki. A vizsgált hatóanyagot folyamatos infúzió formájában adagoljuk és a vérnyomás és a szívfrekvenciára gyakorolt hatását mérjük. Az új (I) általános képletű hatóanyagok mintegy 0,1-5 mg/kg i.v. dózisban hatékonyak gasztroszkópon keresztül intraduodenálisan adagolva a dózishatár mintegy 1-50 mg/kg. Az új (I) általános képletű vegyületek tehát felhasználhatók a magas vérnyomás csökkentésére és szíve3
-3HU 201962 Β légtelenségek kezelésére.
A találmány szerint előállított (I) általános képletű vegyületet elsősorban gyógyszerkészítmény formájában alkalmazzuk főemlősöknél, elsősorban embereknél.
A gyógyszerkészítmények a hatékony mennyiségű (I) általános képletű vegyület mellett szervetlen vagy szerves gyógyászatilag alkalmnazható intranazálisan, intravénásán, szubkután, orálisan vagy intraduodenálisan. A hatóanyag mennyisége a kezelt fajtól, a testtömegtől, a kortól és az adagolás módjától függ.
A gyógyszerkészítményeket a találmány értelmében a szokásos oldási, keverési, granuláló és drazsírozó eljárásokkal állíthatjuk elő.
Orális adagoláshoz a hatóanyagot szokásosan adalékanyagokkal, így hordozóanyagokkal, stabilizátorokkal, vagy inért hígítóanyagokkal keverjük, és a szokásos módon alkalmas formára alakítjuk, így tablettává, drazsévá, kapszulává, vizes, alkoholos vagy olajos szuszpenzióvá vagy vizes, alkoholos vagy olajos oldattá. Inért hordozóanyagként alkalmazható gumiarábikum, magnézium, magnéziumkarbonát, kálium-foszfát, tejcukor, glükóz, magnézium-sztearil-fumarát vagy keményítő, előnyösen kukoricakeményítő. A készítmény lehet száraz vagy nedves granulátum is. Olajos hordozóanyagként vagy oldószerként például növényi vagy állati olajokat, így napraforgóolajat vagy csukamájolajat használunk.
Szubkután vagy intravénás adagoláshoz a hatóanyagot vagy azok fiziológiailag alkalmazható sóit kívánt esetben alkalmas anyagokkal, így oldásközvetítókkel, emulgeátorokkal vagy további segédanyagokkal oldattá, szuszpenzióvá vagy emulzióvá alakítjuk. Oldószerként alkalmazhatunk vizet, fiziológiás konyhasó oldatot, alkoholt, például etanolt, propándiolt vagy glicerint, valamint cukoroldatot, így glükóz vagy mannitoldatot, vagy ezek keverékét.
A példákban a következő rövidítéseket alkalmazzuk:
AcOH ecetsav
Boc terc-butoxi-karbonil-csoport
DCI Desorption Chemical Ionisation (kémiai ionizálás deszorpciója)
DNP 2,4-dinitro-fenil-csoport
DMF dimetil-formamid
El Electron Impact (elektronbecsapódás)
FAB Fás atom bombardment (gyors atombombázás)
M molekulacsúcs
MeOH metanol
MPLC közepes nyomású oszlopkromatográfia
MS tömegspektrum
Az aminosavak megjelölésére a peptidkémiában szokásos hárombetűs kódot [Eur. J. Biochem. 138, 9-37 (1984)] alkalmazzuk. Ellenkező értelmű megjelölés hiányában a megadott aminosav L-konfigurációjú.
Az Rf értékek meghatározását Kiesel-gélen végeztük.
A találmány szerinti eljárást közelebbről az alábbi példákkal világítjuk meg anélkül, hogy az oltalmi kör a példákra korlátozódna.
1. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-am ino-tiokarbonil-Phe-His)-amino]-3S-hexanol la) H-His(DNP)-OH
0,42 g (1 mmól) Boc-His(DNP)-OH 5 ml dimetoxi-etánban felvett oldatához 0-5 ’C hőmérsékleten 4 ml sósavval teh'tett dimetoxietánt csepegtetünk és 1 órán keresztül 0-5 ’C hőmérsékleten, majd 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk és a maradékot toluolban felvesszük, ismét bepároljuk és toluolban ismét felvesszük. így 0,5 g cím szerinti vegyületet kapunk hidroklorid formájában.
Rf = 0,16 (metilén-klorid/MeOH/AcOH/víz 70:30:1:1) lb) Boc-Phe-His(DNP)-OH
0,5 g (1 mmól) H-His(DNP)-OH-hidroklorid
12,5 ml 0,25 n nátrium-hidrogén-karbonát oldatban felvett elegyéhez szobahőmérsékleten 0,362 g (1 mmól) Boc-Phe-hidroxi-szukcinimid-észter 5 ml etanolban és 5 ml THF-ben felvett oldatát adagoljuk. A reakcióelegyet 3 napon keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd 0,83 g citromsavval elegyítjük, amelynek hatására a cím szerinti vegyület olajos formában kiválik. A terméket metilén-kloriddal extraháljuk, a szerves fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a maradékot kevés etil-acetáttal elegyítjük. Diizopropil hozzáadásával kicsapjuk, majd szűrjük a cím szerinti vegyületet. Kitermelés 0,74 g (83%).
Rf = 0,43 (metilén-klorid/MeOH 7:3)
MS (FAB): 569 (M + l).
le) 2S-Amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol
214 mg (0,513 mmól) 3-Boc-4S-cÍklohexil-metil2,2-dimetil-5-(3-(2-piridil)-propil)-oxazolidin 10 ml dimetoximetánban felvett elegyéhezjeges hűtés közben 5 ml sósavval telített dimetoxietánt csepegtetünk és az elegyet egy órán keresztül 0 ’C hőmérsékleten, majd 5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Ezután vákuumban bepároljuk, a maradékot toluolban felvesszük, ismét bepároljuk és toluolban ismét felvesszük, így 179 mg cím szerinti vegyületet kapunk hidroklorid formájában.
d) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(Boc-PheHis(DNSP))-amino)-3S-hexanol
1,5 g (3,18 mmól) 2S-amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidroklorid (le. példa) és 1,8 g (3,18 mmól) Boc-Phe-His(DNP)-OH (lb példa) 15 ml abszolút dimetil-formamidban felvett oldatához 0,59 g (6,36 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-hidrátot adunk, jégfürdőn mintegy 4 ’C hőmérsékletre hűtjük, majd ezen a hőmérsékleten egymásután
2,44 ml (19,1 mmól) N-etil-morfolint és 0,65 g (3,18 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk. A reakcióelegyet egy órán keresztül fürdőn, majd 7 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd egy éjszakán keresztül állni hagyjuk. Ezután újabb 0,9 g (1,59 mmól) Boc-Phe-His(DNP)-OH-t, 0,28 g (3,18 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-hidrátot és 0,32 g (1,58 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá és további 10 órán keresztül szobahó-4HU 201962 Β
Ί mérsékleten keverjük. A csapadékot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradékot etilacetátban oldjuk telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, vízzel és telített nátrium-klorid oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (3,8 g) közepes nyomású oszlopkromatográfiával (Kiesel-gélen metilénklorid/metanol 98:2, 95:5, 9:1 eleggyel) tisztítjuk, így 1,8 g (68%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Rf = 0,46 (metilén-klorid/MeOH 9:1)
MS (FAB): 827 (M + l).
le) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(PheHis(DNP)-amino)-3S-hexanol mg l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(BocPhe-His(DNP))-amino-3S-hexanolt 0-5 °C hőmérsékleten 2 ml jéghideg trifluor-ecetsawal elegyítünk, és két órán keresztül ezen a hőmérsékleten keveijük. Ezután a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot toluolban felvesszük, ismét bepároljuk és toluolban ismét felvesszük. Kitermelés 83 mg cím szeirnti vegyület bisz(trifluor-acetát) formájában.
lf) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butilamino-tio-karbonil-Phe-His(DNP-amino]-3S-hex anol mg (0,092 mmól) l-ciklohexil-6-(2-pÍrÍdÍl)2S-[N-(Phe-His(DNP))-amino]-3S-hexanolt (le példa) 2 ml abszolút dimetil-formamidban oldunk, majd az oldathoz 0,06 ml (0,42 mmól) trietilamint és 0,061 ml (0,46 mmól) terc-butil-izotiocianátot adunk, a reakcióelegyet 5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, egy hétvégén keresztül állni hagyjuk, majd egy órán keresztül 40 °C hőmérsékleten keverjük, majd azonos mennyiségű terc-butilizotiocianáttal elegyítjük és további 2 órán keresztül 40 °C hőmérsékleten, majd 9 órán keresztül 60 ’C hőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután jeges vízre öntjük, etil-acetáttal extraháljuk és az egyesített extraktumot telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, vízzel és telített nátriumklorid oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (85 mg) MPLC segítségével Kiesel-gélen metilénklorid/MeOH 95:5,9:1 eleggyel tisztítjuk.
Kitermelés: 39,3 mg (51%) cím szerinti vegyület.
Rf = 0,39 (metilén-klorid/MeOH 9:1)
MS (FAB): 842 (M + l).
lg) l-Ciklohexil-6-(2-pmdil)-2S-[N-(terc-butilamino-tio-karbonil-Phe-His)-amino]-3S-hexanoI mg (0,046 mmól) l-ciklohexil-6-(2-pirÍdil)2S-[N-(terc-butil-amino-tiokarbonil-Phe-His(D NP))-amino]-3S-hexanolt (lf példa) 5 ml acetonitrilben 0,1 ml (1 mmól) tiofenollal elegyítünk és 4 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután vákuumban bepároljuk és a nyersterméket MPLC segítségével Kiesel-gélen metilén-klorid/MeOH 95:5 és 9:1 eleggyel tisztítjuk. így 24,3 mg (78%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Rf = 0,14 (metilén-klorid/MeOH 9:1)
MS (FAB): 676 (M + l).
2. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-am mo-tiokarbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol
2a) Boc-Phe-Nva-OMe
15,0 g (0,056 mól) Boc-Phe-OH és 9,4 g (0,056 mól) Nva-OMe-hidroklorid 250 ml abszolút metilén-kloridban felvett oldatához jeges hűtés közben először 38,6 ml (0,28 mól) abszolút trietilamint, majd 36,4 ml propán-foszfonsavanhidridet (50 tömeg%-os, metilén-kloridban) csepegtetünk. A reakcióelegyet 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd egy éjszakán keresztül állni hagyjuk. A hidrolízishez jeges vízre öntjük, 2 órán keresztül intenzíven keveijük, a szerves fázist elválasztjuk és 10 tömeg%-os citromsav oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk.
Kitermelés 20,8 g (98%) cím szerinti vegyület.
Rf = 0,69 (metilén-klorid/MeOH 9:1)
MS (DCI): 378 (M + l).
2b) Boc-Phe-Nva-OH
20,1 g (0,053 mól) Boc-Phe-Nva-OMe (2a példa) 30 ml vízben és 30 ml dioxánban felvett szuszpenziójához szobahőmérsékleten 2,5 g (0,106 mól) lítium-hidroxidot adunk és három órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet 10 tömeg%-os nátrium-hidrogén-szulfát oldattal megsavanyítjuk, a terméket szűrjük és diizopropiléterrel eldörzsöljük.
Kitermelés: 19,1 g (98%)
MS (DCI): 364 (M + l).
2c) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(Boc-PheNva )-amino )-3S-hexanol
1,7 g (3,36 mmól) 2S-amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidrokloridból (le példa) és
1,22 g (3,36 mmól) Boc-Phe-Nva-OH-ból (2b példa) az ld példával analóg módon 0,8 g cím szerinti vegyületet kapunk.
Rf = 0,53 (metilén-klorid/MeOH 9:1)
MS (FAB): 623 (M + l)
2d) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(Phe-Nva)atnino)-3S-hexanol mg l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(BocPhe-Nva)-amino)-3S-hexanolból (2c. példa) az le példával analóg módon 92 mg cím szerinti vegyületet kapunk dihidroklorid formájában.
2e) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil· amino-tiokarbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol
101 mg (0,17 mmól) l-ciklohexil-6-(2-piridil)2S-[N-(Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol (2d példa) 4 ml abszolút dimetil-formamidban felvett oldatát szobahőmérsékleten egymás után 104 μΐ (0,73 mmól) frissen desztillált trietilaminnal és
22,5 μΐ (0,17 mmól) terc-butil-izotiacianáttal elegyítjük. A reakcióelegyet egy éjszakán keresztül keverjük, majd ismét 10 μΐ (0,076 mmól) terc-butilizotiocianátot adunk hozzá, és további 8 órán keresztül szobahómérsékelten keverjük. Az oldószert magas vákuumban ledesztilláljuk, a maradékot etilacetátban felvesszük, telített nátrium-hidrogén5
-5HU 201962 Β karbonát oldattal, vízzel és telített nátrium-klorid oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (129 mg) MPLC segítségével Kiesel-gélen metilén-klorid/metanol 98:2, 95:5 eleggyel tisztítjuk. így
53,5 mg (49%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Rf = 0,43 (metilén-klorid/MeOH 9:1)
MS (FAB): 638 (M + l).
3. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-am ino-tiokarboniI-Phe-Nva)-amino]-3S-(terc-butilamino-tiokarbonil-oxi)-hexán mg (0,16 mmól) l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S[N-(Phe-Nva)-amino]-3S-hexanolt a 2e példában megadott módon 0,104 ml (0,73 mmól) trietilaminnal és 0,106 ml (0,8 mmól) terc-butil-izotiocianáttal 10 órán keresztül szobahőmérsékleten reagáltatunk és analóg módon feldolgozzuk. így 16 mg (13%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Rf = 0,81 (metilén-klorid/MeOH 9:1)
MS (FAB): 753 (M + l).
A megfelelő kiindulási anyagok felhasználásával és az 1-3. példában leírt eljárásokkal állíthatók elő a következő vegyületek:
4. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-am ino-tiokarbonil-Phe-Nva)-amino]-3R-hexanol
Rf = 0,46 (metilén-klorid/MeOH 9:1)
MS (FAB): 638 (M+1).
5. példa l-Ciklohexil-6-(2-pÍridil)-2S-[N-(morfolino-tio karbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol
Rf = 0,3 (metilén-klorid/MeOH 8:2)
MS (FAB): 652 (M + l).
6. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(morfolino-tio karbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol
Rf = 0,1 (metilén-klorid/MeOH 8:2)
MS (FAB): 690 (M + l).

Claims (3)

1. Eljárás (I) általános képletű dipeptid-származékok előállítására, a képletben
R1 jelentése az egyik hidrogénatom és a másik 2-6 szénatomos alkilcsoport vagy a két R1 a kapcsolódó nitrogénatommal együtt morfolinocsoportot képez,
A jelentése L-fenil-alanil-csoport,
B jelentése L-hisztidil-csoport vagy L-norvalilcsoport,
R2 jelentése alkilrészében 1-4 szénatomos ciklohexil-alkil-csoport,
D jelentése -CH(OR3)- általános képletű cso10 port. ahol
R3 jelentése hidrogénatom vagy 2-6 szénatomos alkil-amino-tio-karbonil-csoport,
E jelentése -(CH2)n- képletű csoport, ahol n értéke 1,2 vagy 3,
Xjelentése közvetlen kötés,
Y jelentése piridilcsoport, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános képletű vegyületet, a képletben
A, B, C, D, Ε, X, Y és R2 jelentése a tárgyi körben megadott, egy (III) általános képletű izotiocianáttal reagáltatunk, a képletben
R1 jelentése a tárgyik körben megadott, megfelelő szerves oldószerben, mint benzolban, toluoolban, klór-benzolban, alifás szénhidrogénbán, alifás klórozott szénhidrogénben, dieitl-éterben, tetrahidrofuránban, dimetil-szulfoxidban vagy oldószer távollétében adott esetben Lewis-sav vagy Lewis-bázis jelenlétében, mint tercier amin, előnyösen trietilamin, l,4-diazabiciklo[2.2.2]oktán, ciklohexil-dimetilamin, benzil-dimetilamin, 4-metil-morfolin, tetrametil-guanidin vagy 4-dimetilamino-piridin jelenlétében -80 ’C és az oldószer forráspontja közötti, előnyösen -30 és +80 ’C közötti hőmérsékleten, amikoris az érzékeny funkciós csoportokat, így a hidroxilcsoportokat vagy aminocsoportokat kívánt esetben előzetesen védőcsoporttal blokkoljuk és a védőcsoportot a reakció végén adott esetben eltávolítjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános képletű dipeptid-származékok előállítására, amelyek képletében
Rr jelentése az egyik hidrogénatom és a másik 2-6 szénatomos alkilcsoport, vagy a két R1 a kapcsolódó nitrogénatommal együtt morfilinocsoportot képez,
A jelentése L-fenil-alanil-csoport,
B jelentése L-hisztidil-csoport vagy L-norvalilcsoport,
R2 jelentése ciklohexil-metil-csoport,
D jelentése -CH(OR3)- általános képletű csoport, ahol R3 jelentése hidrogénatom,
E jelentése közvetlen -(CH2)n- képletű csoport, ahol n értéke 1,2 vagy 3,
X jelentése közvetlen kötés,
Y jelentése piridilcsoport, azzal jellemezve, hogy a megfelelően szubsztituált kiindulási vegyületeket alkalmazzuk.
3. Eljárás gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely 1. igénypont szerint előállított (I) átlalános képletű dipeptid-származékot, a képletben
R1, A, B, R2, D, Ε, X és Y jelentése az
1. igénypontban megadott, gyógyszerészeti célra alkalmas hordozóanyaggal és adott esetben egyéb segédanyaggal keverünk össze és a keveréket adagolásra alkalmas gyógyszerkészítménnyé alakítjuk.
HU895949A 1988-11-19 1989-11-17 Process for producing renin inhibiting dipeptides and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient HU201962B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3839128A DE3839128A1 (de) 1988-11-19 1988-11-19 Renin-hemmende dipeptide, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU895949D0 HU895949D0 (en) 1990-02-28
HUT51650A HUT51650A (en) 1990-05-28
HU201962B true HU201962B (en) 1991-01-28

Family

ID=6367478

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU895949A HU201962B (en) 1988-11-19 1989-11-17 Process for producing renin inhibiting dipeptides and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient

Country Status (12)

Country Link
EP (1) EP0370383A3 (hu)
JP (1) JPH02180897A (hu)
KR (1) KR900007869A (hu)
AU (1) AU616072B2 (hu)
DE (1) DE3839128A1 (hu)
DK (1) DK578689A (hu)
FI (1) FI895460A0 (hu)
HU (1) HU201962B (hu)
IL (1) IL92347A0 (hu)
NO (1) NO894593L (hu)
PT (1) PT92329A (hu)
ZA (1) ZA898783B (hu)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0163237A3 (en) * 1984-05-29 1988-04-27 Merck & Co. Inc. Di- and tri-peptidal renin inhibitors
NZ222755A (en) * 1986-12-23 1989-11-28 Warner Lambert Co Renin inhibiting acyl peptide derivatives containing two to four amino acid residues, and pharmaceutical compositions
DE3815913A1 (de) * 1988-05-10 1989-11-23 Sandoz Ag Neue reninhemmer, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung
DE3839559A1 (de) * 1988-11-24 1990-05-31 Hoechst Ag Renin-hemmende aminodiol-derivate

Also Published As

Publication number Publication date
PT92329A (pt) 1990-05-31
NO894593L (no) 1990-05-21
AU616072B2 (en) 1991-10-17
ZA898783B (en) 1990-08-29
JPH02180897A (ja) 1990-07-13
HUT51650A (en) 1990-05-28
DK578689D0 (da) 1989-11-17
DE3839128A1 (de) 1990-05-31
EP0370383A3 (de) 1991-07-17
HU895949D0 (en) 1990-02-28
IL92347A0 (en) 1990-07-26
EP0370383A2 (de) 1990-05-30
KR900007869A (ko) 1990-06-02
DK578689A (da) 1990-05-20
FI895460A0 (fi) 1989-11-16
AU4479989A (en) 1990-09-13
NO894593D0 (no) 1989-11-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5071837A (en) Novel renin inhibiting peptides
HU203369B (en) Process for producing enzyme inhibiting dipeptidecarbamoyl derivatives and pharmaceutical compositions comprising same
US5036054A (en) Renin inhibitors containing alpha-heteroatom amino acids
US6232468B1 (en) Dipeptides with neurokinin-antagonistic activity
US5153176A (en) Tripeptide derivatives and protease inhibitor composition comprising the same
HUT68200A (en) Process for producing peptides inhibiting il-1-beta release and pharmaceutical compositions containing them as active component
HU204847B (en) Process for producing new peptidase inhibitors
WO1989003820A1 (en) Branched backbone renin inhibitors
HUT68563A (en) Peptide analogs as irreversible interleukin-1-beta protease enzim inhibitors, pharmaceutical compositions containing the said peptidanalogs and process to prepare them
NZ260675A (en) Phosphinyloxymethyl ketones containing 1-3 amino acids as enzyme inhibitors; medicaments
JPH04211095A (ja) 新規ジペプチド、その製造方法及び薬剤におけるレニン阻害剤としてのその使用
HU206704B (en) Process for producing piperidine derivatives of amino acids and pharmaceutical compositions containing them
US5416111A (en) Cyano-containing n-phenyl-amino-terminated non-peptidyl α-succinamidoacyl aminodiols as anti-hypertensive agents
HU201961B (en) Process for producing 2,3-disubstituted isoxazolidines and pharmaceutical compositions comprising same
HU204539B (en) Process for producing oligopeptides containing cyclic proline-analogue amino-acids and pharmaceutical compositions contaiing them as active components
HU205770B (en) Process for producing renin inhibiting dipeptide derivatives and pharmaceutical compositions comprising same
HU205369B (en) Process for producing enzyme inhibiting amino acid and dipeptide derivatives and pharmaceutical compositions comprising such compounds as active ingredient
US5453488A (en) Amino-substituted heterocycles as renin inhibitors
HU203771B (en) Process for producing renine-inhibiting dipeptide-carbamoyl-derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active components
CA2070983A1 (en) Cyclic renin inhibitors
US5268361A (en) Hydroxyazido derivatives and related compounds as renin inhibitors
US5219851A (en) Tetrahydroisoquinoline-type renin inhibiting peptides
EP0297815B1 (en) Fluorine containing renin inhibitors
HU203770B (en) Process for producing histidine derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active components
HU201962B (en) Process for producing renin inhibiting dipeptides and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee