HU197928B - Process for the production poor in racemate of peptide intermediary of hormon synthesis of gonadorelin and gonadorelin analog - Google Patents
Process for the production poor in racemate of peptide intermediary of hormon synthesis of gonadorelin and gonadorelin analog Download PDFInfo
- Publication number
- HU197928B HU197928B HU851032A HU103285A HU197928B HU 197928 B HU197928 B HU 197928B HU 851032 A HU851032 A HU 851032A HU 103285 A HU103285 A HU 103285A HU 197928 B HU197928 B HU 197928B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- formula
- ser
- pro
- arg
- gly
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/13—Luteinizing hormone-releasing hormone; related peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
A találmány tárgya új eljárás az (I) általános képletű peptidek előállítására. Az (I) általános képletben
Z jelentése benzil-oxi-karbonil-csoport,
A4 jelentése Gly vagy D-Ser(But) és X jelentése OBut, Arg-Pro-Gly-NH2 vagy
Arg-Pro-NH(1—3 szénatomos alkil).
A találmány szerint az (I) általános képletű pepiidet (II) képletű tripeptid — ahol Z jelentése az előzőekben megadott — és (III) általános képletű peptid — ahol A4 és X jelentése az előzőekben megadott — vagy ennek savaddíciós sója reagáltatásával nyerjük.
Az (1) általános képletű peptidek a gonadorelin szintézis vagy analógiái előállításának köztitermékei.
Más ilyen célra alkalmas vegyületeket ismertetnek a Biochem. Biophys. Rés. Commun. 43, 1334—39 (1971) szakirodalmi helyen, illetve a 4 024 248. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban.)
A Biochem. Biophys. Rés. Commun. 43, 1334—39 (1971) szakirodalmi helyen sertés LH és FSH-felszabadító hormont, illetve annak aminosavszekvenciáját [(piro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2] írják le.
A 4 024 248. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban olyan nagy LH-RH/FSR-RH aktivitású vegyületeket ismertetnek, amelyek (VI) általános képletében X jelentése D-Ser(Bu'), D-Cys(Bu'), D-Asp(OBu'), D-Glu(OBu'), D-Orn(Boc) vagy D-Lys(Boc) és Y jelentése glicinamid, NHC2H5 vagy NH-ciklopropil.
Ismeretes, hogy a (IV) képletű gonadorelin (LHRH) a hipotalamusból származó hormon, amely a hipofízisben az LH és FSH gonadotróp hormonok felszabadulását kiváltja. Gonadorelin (LHRH)-analógként azok a peptidek jöhetnek számításba, amelyekben az LHRH egy vagy több aminosava ki van cserélve és/vagy a peptidlánc az LHRH láncához képest rövidített vagy hoszszabbított és/vagy az LHRH valamely származékai. Különös jelentőségűek azok a peptidek, amelyekben a 6-helyzetű glicin helyén valamely D-aminosav áll és a 10-helyzetű glicin helyén valamely helyettesítő csoportot, például alkil-amino-csoportot tartalmaznak. Példaként az (V) képletű buzerelint említjük.
A szakirodalomból ismeretesek az (I) általános képletű vegyületek előállítására szolgáló eljárások /Biochem. Biophys. Rés. Commun., 45, 767 (1971); 4024 248. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás], amelyek közül az azid eljárással végzett szintézis a fragmentum szintézisek körében kevéssé racemizáló eljárásként ismert [ld. a
J. Chem. Soc. (London), 1960, 3902 és Helv. Chim. Acta, 44 1991 (1961) szakirodalmi helyeken] .
Az azid eljárás alkalmazása esetén azonban számos mellékreakció jelentkezésével 2 kell számolnunk. így 1,2-diacil-hidrazin keletkezésével mindenekelőtt akkor kell számolnunk, ha az azidképzés alatt savhiányos állapot uralkodik.
Ebben az esetben a tirozin a fenolos hidroxilcsoporthoz képest orto-helyzetben nitrálódhat, a triptofánon pedig N-nitrozálódás következhet be. Megfigyelhető a peptid-azid megfelelő amiddá való átalakulása is. [Lásd a Liebigs Ann., 659, 168 (1962) és a Synthesis (1974) 549 szakirodalmi helyeken közölt összefoglaló irodalmat.)
Jelentős fogyatékossága az eljárásnak a peptid-azidok instabilitása. A peptid-azid már enyhén emelt hőmérsékleten Curtius-lebomlás révén izocianáttá alakulhat és ennék folytán karbamid és más melléktermékek képződnek [lásd a Helv. Chim. Acta, 44, 1991, S. 1997 (1961) és a Synthesis (1974) 549 szakirodalmi helyeken].
A feldolgozása során éppen ezek az izocianát képzéssel és ezt követő karbamid keletkezéssel járó mellékreakciók voltak megfigyelhetők (lásd a 4.1 és 4.2 példákban). A karbamidszármazék mellékterméket igen nehéz a megfelelő pepiidtől elválasztani és jelenlétük csak nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással (HPLC) igazolható. A mellékreakció mértéke a 15%-ot is elérheti (lásd a 4.2 példában).
Az azid szintézis hozama ritkán haladja meg a 70—80%-ot. Ezt az előzőekben felsorolt mellékreakciók okozzák.
Az azid képző eljárás gyártási léptékben nem használható. Az eljárás során keletkező azoimid vagy sói az azidok bizonyos menynyiségen felül technikailag nehezen leküzdhető biztonsági rizikófaktort jelentenek. így például körülbelül 25 kg tripeptid-azid alkalmazásakor a feldolgozás során, például savas extrakció esetén legalább 1 kg azoimid keletkezik, amely heves robbanáshoz vezethet (lásd Römpps Chemie Lexikon, 7. Auflage, Frankh’sche Verlagshandlung, Stuttgart 1975, S. 3348).
Ennek a rizikónak a leküzdésére számos drága méréstechnikai folyamatellenőrzést kellene kifejleszteni és üzembehelyezni. Ezen kívül szükséges lenne gondoskodni az anyalúgoknak és a vizes extraktumokrak azoimidtől és sóitól való mentesítésére, ami ugyancsak nagy analitikai ráfordítást igényelne.
Az azoimidet ezen kívül még munkavédelmi szempontból is kedvezőtlennek tekintjük, ez igen alacsony MAK-értékében fejeződik ki. Az azoimid MAK-értéke 0,1 ml/m3, illetve 0,27 mg/m3 (TRga 900, 1982).
Az eddigiekben megnevezett okok lehetetlenné tették az azid-eljárás laboratóriumi méreten túli léptéknövelését. Célul tűztük ki az (I) általános képletű vegyületek előállítását az azid módszernél kedvezőbb eljárással.
Azt találtuk, hogy a kevéssé racemizáló éljárással előállított új (II) képletű védett
-2197928 tripeptidből az alábbiakban ismertetendő öt kapcsolási eljárással meglepően könnyen nyerjük a racemátszegény (I) általános képletű terméket.
A találmány szerinti eljárás, például a PPA-módszer alkalmazása, az azid-eljárással ellentétben nem esik biztonságtechnikai korlátozások alá. Ezen felül az eljárás gyakorlati-kémiai szempontból is éppilyen problémamentesnek bizonyult. A léptéknövelés a gyártásra sem a kitermelés csökkenéséhez, sem a termék tisztaságának romlásához nem vezetett (lásd a 6.1. példát).
A (II) képlető csoport tripeptid reagáltatását a (III) általános képletű szabad aminocsoportot és védett karboxilcsoportot tartalmazó peptiddel előnyösen valamely, a peptidkémiában szokásosan alkalmazott oldószerben vagy víz — oldószer elegyben, alkalmas kondenzálószer jelenlétében végezzük, például:
1) diciklohexil-karbodiimidet és 1-hidroxi-benzotriazolt alkalmazunk [DCCI/HOBt eljárás; Chem. Bér. 103, 788 (1970)] vagy
2) diciklohexil-karbodiimidet és 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,2,3-benzotriazint alkalmazunk [DCCl/HOOBt eljárás; Chem. Bér., 103, 2034 (1970)] vagy
3) diciklohexil-karbodiimidet és N-hidroxi-szukcinimidet alkalmazunk [DCCI/ /HONSu eljárás; Z. Naturforsch., 21b, 426 (1966)] vagy
4) alkán-foszfonsavanhidridet, például n-propil-foszfonsavanhidridet alkalmazunk [PPA eljárás; Angew. Chemie, Int. Ed., 19, 133 (1980)] vagy
5) dialkil-foszfinsavanhidridet, például metil-etil-foszfinsavanhidridet alkalmazunk [ΜΕΡΑ eljárás; 4 426 325. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás]. Amennyiben a szintetizálandó gonadorelin analóg 6-helyzetű aminosavja savlabilis aminosavszármazék — mint például a D-Ser(But) nincs értelme, hogy az (I) általános képletben X helyettesítőként OBut csoportot tartalmazó köztiterméket állítsuk elő, a szintézist az Xy=OBut helyettesítő jelentésű köztiterméken át kell vezetni.
-A találmány szerinti eljárásban alkalmas oldószerként oldhatósági okokból kifolyólag többnyire poláris oldószereket, például dimetil-acetamidot, dimetil-formamidot, dimetil-szulfoxidot, foszforsav-trisz(dimetil-amidot),
N-metil-pirrolidont, vizet vagy a felsorolt oldószerek vízzel alkotott elegyeit használjuk. Az utóbbi főként a ΜΕΡΑ eljárásnál bizonyul megfelelőnek. Ezeken kívül azonban kloroform, metilén-klorid vagy etil-acetát is használható. A reagáltatást —10°C és szobahőmérséklet között, hajtjuk végre, előnyösen 0°C-on kezdjük a reagáltatást és később emeljük a reakcióelegy hőmérsékletét szobahőmérsékletig.
Előnyös az az eljárásváltozat, ahol X jelentése a következő:
OBut, Arg-Pro-NHC2H5 vagy Arg-Pro-Gly-NH2.
Különösen előnyös az az eljárásváltozat, ahol Z-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2-t és Z-T rp-Ser-Tyr-D-Ser (Bút) -Leu-Arg -Pro-NHC2H5-t — ahol Z jelentése az előzőekben megadott — állítunk elő.
A racemizálódásnak a találmány szerinti eljárás alkalmazása esetén jelentkező igen alacsony mértékét az egyébként (I) általános képletnek megfelelő, de Z helyett hidrogénatomot tartalmazó nem védett peptid nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással való vizsgálatával bizonyítottuk. Ha olyan, az előzőekben ismertetett (I) általános képíetű hepta- vagy oktapeptidet állítunk elő, amelybe az A3 helyzetbe Tyr helyett D-Tyr-t építünk be, olyan terméket nyerünk, amelynek az A3 helyzetben Tyr-t tartalmazó vegyület összekapcsolás alatt történő racemizálódása során kell keletkeznie. Mivel ez a két diasztereomer nem védett pepiidként HPLC eljárással elválasztható, a racemizálódás mértéke az egyes öszszekapcsolási módszerek alkalmazásánál ellenőrizhető.
I. Táblázat
A racemizálódás mértéke
Z-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-t különféle, a táblázatban megadott módszerekkel állítunk elő és a kapott reakcióterméket tisztítás nélkül hidráljuk. A kapott terméket HPLC eljárással ellenőrizve H-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-nak találtuk.
HPLC eljárás:
Oszlop: NucleosilR 5SA (4X300 mm); eluálószer: 40% 1%-os, pH 5,8-as KH2PO4 puffer, 60% acetonitril; áramlási sebesség 1 ml/perc; detektor: UV, 220 nm.
-3197928
Szintézis eljárás a D-izomer aránya % x)
DCCI/HOBt
DGCI/HOOBt
DCCI/HONSu
PPA
ΜΕΡΑ
Az iá
-5
1,5 - 2,5
1,5 - 2,5
-2
1,5 - 2,5
-2
k) A H-Trp-Ser-D-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt D-izomer retencióidejét a vegyület PPA eljárással történő célzott előállítása segítségével állapítottuk meg.
Említésre méltó, hogy a PPA eljárás alkalmazása esetén az alacsony mértékű racemizálódás mellett a termék hozama és tisztasága is különösen jó.
II. Táblázat
A termék tisztaságának és hozamának összehasonlítása
Z-Trp-Ser-Tyr-D-Ser (Bút) -Leu-Arg-Pro-NHEt-t állítunk elő, a reakcióterméket elkülönítjük, majd lemérjük. Ebből kiszámít25 juk az elméleti hozamhoz viszonyított hozamot és HPLC eljárással megállapítjuk a termék relatív tisztaságát.
HPLC eljárás:
oszlop: Nucleosil” 5SA (4X300 mm); eluálószer: 40% 1%-os, pH 5,8-as KH2PO4 33 puffer, 60% acetonitril, áramlási sebesség: 1 ml/perc, detektor: UV, 220 nm.
Szintézis eljárás Hozam (az elméleti %-ában) | Tisztaság (terület %) | |
DCCI/HOBt | 69 | 73 |
DCCI/HOOBt | 72 | 75 |
DCCI/HONSu | 75 | 77 |
PPA | 85-88 | 80 |
ΜΕΡΑ | 63 | 76 |
Azid | 70-80 | 55 |
h) A HPLC eljárásnál megadott relatív tisztaság kritériuma:
A reakciótermék kromatogramjának valamennyi, UV-ben, 220 nm-nél abszorbeáló anyaga összes csúcs alatti területét együttesen 100-nak tekintjük, ebből a kívánt vegyületre eső részt %-ban kifejezve adjuk meg tisztaságként .
-4197928
A találmány kiindulási anyagául alkalmazott (11) képletű tripeptid — ahol Z jelentése az (I) általános képletnél megadott — új vegyület. Ezt a vegyületet a peptidkémiában szokásosan alkalmazott peptidtöredék fragmentumkondenzációs eljárással, az 1. reakcióvázlatban látható (1—2)-f-3 vagy 1 + (2— 3) -kondenzációs séma szerint állítjuk elő, miközben az egyéb funkciós csoportokat adott esetben lúgos vagy savas közegben lehasítható védőcsoportokkal, adott esetben átmenetileg védjük.
A (II) képletű tripeptid szintézisét előnyösen kevés racemizálódással járó módon végezzük, azaz elkerüljük azokat a szintézislépéseket, amelyekben elszappanosítás szerepel. Ilyen megfelelő eljárás például a Z-Trp-Ser-Tyr-OH 1. reakcióvázlat szerinti előállítása.
Az 1. reakcióvázlatban szereplő (II), (VI/ /2) és (VI/3) vegyületeket még nem írták le az irodalomban. A (VI/1) vegyület Shields, McGregor és Carpenter [J. Org. Chem., 26 1491 (1961)], a (VI/4) vegyület pedig E. Wünsch és K- H. Deimer [Hoppe-Seyler’s Z. Physiol. Chem., 353, 1246 (1972)] eljárása szerint állíthatók elő. Azt találtuk, hogy az 1 reakcióvázlatban ismertetett (VI/1) —>(VI/ /4) reakcióút szokatlanul gyorsan és egyszerűen vezetett a célhoz, mivel az egyes köztitermékek kristályos formában, jó hozammal keletkeznek és tisztaságuk nagyfokú. Említésre méltóan egyszerű a hidrogénezési lépés kivitelezése, amellyel a dipeptidről a védőcsoportokat eltávolítjuk (lásd az 5.2 pél-
dában.) | |
Boc | Az alkalmazott rövidítések jelentése: tere-butil-oxi-karbonil-csoport |
DCCI | diciklohexil-karbodiimid |
DMF | dimetil-formamid |
Et | etilcsoport |
HOBt | 1-hidroxi-benzotriazol |
HONSu N-hidroxi-szukcinimid | |
HOOBt | 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-1,2,3-ben- |
ΜΕΡΑ | zotriazin metil-etil-foszfinsavanhidrid |
ONb | p-nitro-benzil-észter |
ONSu | N-hidroxi-szukcinimid-észter |
OBut | terc-butil-észter |
PPA | n-propil-foszforisavanhidrid |
Bút | terc-butil-éter |
Tos-OH p-toluol-szulfonsav | |
Z | benzil-oxi-karbonil |
NEM | N-etil-morfolin. |
A következő példák a találmány szerinti eljárás megvilágítását szolgálják, a példák nem korlátozó jellegűek. A példák egy részében a technika állásának megfelelő eljárással végzett összehasonlító kísérleteket ismertetünk.
1.1. példa
Z-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEtTos-OH előállítása DCCI/HOBt eljárással
29,4 g (0,05 mól) Z-Trp-Ser-Tyr-OH-t,
44.7 g (0,05 mól) H-D-Ser (Bút)-Leu-Arg-Pro-NHEb2Tos-OH-t és 6,75 g 1-hidroxi-benzotriazolt 250 ml DMF-ban oldunk és az oldatot +5°C-ra hűtjük. Ezután az oldathoz
6,4 ml N-etil-morfolint és 11,3 g DCCl-t adunk, majd az adagolás befejezése után a reakcióelegy hőmérsékletét körülbelül 20°C-ra emeljük. Az elegyet éjszakán át keverjük, majd a kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A visszamaradó anyagot 600 ml butanolban felvesszük, majd kétszer 150 ml 5%-os nátrium-karbonát-oldattal, 150 ml 13%-os nátrium-klorid-oldattal, 150 ml 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldatta! és 150 ml 5%-os nátrium-klorid-oldattal extraháljuk. A szerves fázist bepároljuk, majd kiszűrjük belőle a kivált nátrium-kloridot, és a 200 ml tömény oldatot 1,5 1 diizopropil-éterbe keverjük. Az oldatot szűrjük, a csapadékot 200 ml diizopropil-éterrel mossuk, majd foszfor-pentoxidon vákuumban szárítjuk. 69%-os hozammal
44.8 g terméket nyerünk. [a]p2=—31,6° (c= = 1, dimetil-acetamid)
1.2. példa
Z-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-Tos-OH előállítása DCCI/HOOBt eljárással
Az 1.1. példa szerinti eljárást alkalmazzuk, de 1-hidroxi-benzotriazol helyett 8,15 g 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,2,3-benzotriazint (HOOBt) használunk. 72%-os hozammal
46,7 g cím szerinti terméket nyerünk.
[a]p2: —31° (c=I, dimetil-acetamid).
1.3. példa
Z-Trp-Ser-Tyr-D-Ser( But)-Leu-Arg-Pro-NHEt Tos-OH előállítása DCCI/HONSu eljárással
Az 1.1. példa szerinti eljárást alkalmazzuk, de 1-hidroxi-benzotriazol helyett 5,75 g N-hidroxi-szukcinimidet (HONSu) alkalmazunk. 75%-os hozammal 48,7 g cím szerinti terméket nyerünk.
[a]p2=—32° (-c=l, dimetil-acetamid).
1.4. példa
Z-Trp-Ser-Tyr-D-Ser( But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-Tos-OH előállítása PPA eljárással
6,8 g (11,5 mmól) Z-Trp-Ser-Tyr-OH-t és 10,3 g (íl,5 mmól) H-D-Ser (Bút)-Leu-Arg-Pro-NHEt-2Tos-OH-t szobahőmérsékleten 65 ml DMF-ban oldunk és az oldatot 5°C-ra lehűtjük. Ezután az oldathoz körülbelül 20 perc alatt, egyidejűleg két csöpögtetőtölcsérből hozzácsöpögtetünk 11,1 ml N-etil-morfolint és 11,1 ml n-propil-foszfonsavanhidridet 50 tömeg%-os metilén-kloridos oldat formájában. A reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd vákuumban kb. 20 ml-re bepároljuk és 150 ml n-butanolban felvesszük. A butanolos oldatot 2X X30 ml 5%-os nátrium-karbonát-oldattal, 5
-5197928 ml 13%-os nátrium-klorid-oldattal, 150 ml 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és 150 ml 5%-os nátrium-klorid-oldattal extraháljuk, vákuumban bepároljuk, kiszűrjük belőle a kivált nátrium-kloridot és a tömény szűrletet körülbelül 250 ml diizopropil-éterbe csöpögtetjük. Az elegyet ezután szűrjük, a csapadékot 30—40 ml diizopropil-éterrel mossuk, majd foszfor-pentoxidon vákuumban szárítjuk. Ily módon 88%-os hozammal 13,1 g cím szerinti terméket nyerünk.
[a]22=—33,7° (c=l, dimetil-acetamid).
1.5. példa
Z-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-Tos-OH előállítása ΜΕΡΑ eljárással
Lényegében az 1.4. példában ismertetett módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy az összekapcsolandó peptideket 30—30 ml DMF-ban és vízben oldjuk, majd 5 ml DMFdal hígított MEPA-t csepegtetünk hozzá, és a pH-t kb. 3 ml N-etil-morfolin hozzácsöpögtetésével 7,5-re állítjuk. Ily módon 63%-os hozammal 9,4 g cím szerinti terméket nyerünk.
[a]p2=—30 40 (c=l, dimetil-acetamid).
1. összehasonlító példa
Z-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-HCl előállítása azid eljárással g (83 mmól) Z-Trp-Ser-Tyr-N2H3-t 350 ml DMF-ban oldunk, az oldatot —30°C-ra hütjük és 20 perc alatt hozzáfolyatunk 45 ml dioxános 8n hidrogén-kloridot, legalább —20°C hőmérsékleten újabb 20 perc alatt hozzáadunk 100 ml dioxánban oldott 12,5 ml butil-nitritet, majd az elegyet —20°C-on 20 percig keverjük, ezután —30°C-ra hűtjük és
45,7 ml N-etil-morfolint adunk hozzá. Az így készült azidoldathoz hozzáadjuk 55 g (61 mmól), 150 ml DMF-ban oldott H-D-Ser (But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-2Tos-OH és 15,2 ml N-etil-morfolin reakcióelegyet. A reakcióelegyet ezután 5°C-ra melegítjük és az elegyet még 20 órán át keverjük.
Ezután a reakcióelegyet 400 ml n-butanol és 4 1 25%-os nátrium-klorid-oldat között megosztjuk. A vizes fázist még háromszor 200 ml butanollal, majd az egyesített szerves fázisokat háromszor 200 ml 6,7%-os kálium-hidrogén-szulfát, 3,3%-os kálium-szulfát-oldat eleggyel extraháljuk. Ezután a szerves fázist még 200 ml 25%-os nátrium-klorid-oldattal, majd 200 ml 5%-os hidrogén-karbonát-oldattal extraháljuk. A butanolos fázist vákuumban bepároljuk, és kmég cseppfolyós koncentrátumot erős keverés közben 1 1 etil-acetátba adjuk. A leváló 'csapadékot kiszűrjük, majd 200 ml észterrel mossuk és vákuumban szárítjuk. Ily módon 73%-os hozammal 51,7 g cím szerinti terméket nyerünk. [a]p2=—31,8° (c=l, metanol).
2. példa
Z-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-GIy-NH2-Tos-OH előállítása PPA eljárással
29,4 g (0,05 mól) Z-Trp-Ser-Tyr-OH-t és 42,08 g (0,05 mól) H-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2-2Tos-OH-t 200 ml DMF-ban oldunk, kb. +5°C-ra hűtjük és 48,6 ml NEM-et adunk hozzá. Ezután kb. 20—30 percen belül 47,3 ml 50%-os metilén-kloridos PPA oldatot csepegtetünk hozzá, a reakcióelegy hőmérsékletét hagyjuk szobahőmérsékletre emelkedni, és a reakcióelegyet éjszakán át keverjük. A reakció lefolyását DC-eljárással, futtató elegyként butanol, jégecet, víz 3:1:1 arányú elegyét alkalmazva követjük nyomon. Az oldatot ezután kb. 100 ml-re pároljuk be, majd 600 ml butanolban vesszük fel és 2X150 ml 5%-os nátrium-karbonát oldattal, 150 ml 13%os nátrium-klorid oldattal, 150 ml 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és 150 ml 5%-os nátrium-klorid-oldattal extraháljuk. A szerves fázist bepároljuk, a kiváló nátrium-klorid-sót kiszűrjük belőle és a 200 ml tömény oldatot 1,5 1 diizopropil-éterbe keverjük be. Szűrés és 200 ml diizopropil-éterrel történő mosás után a kapott csapadékot vákuumban foszfor-pentoxidon szárítjuk. Ily módon 89%-os hozammal 55,2 g cím szerinti terméket nyerünk.
[a]22=—30,1° (c=l, metanol).
2. összehasonlító példa
Z-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 Tos-OH előállítása azid-eljárással
573 g (95,8 mmól) Z-Trp-Ser-Tyr-N2H3-ot 400 ml DMF-ban oldunk, az oldatot —30°Cra hütjük, majd 20 perc alatt 43,5 ml dioxános 8n hidrogén-klorid oldatot engedünk hozzá, majd legalább —20°C hőmérsékleten újabb 20 perc alatt 125 ml dioxánban oldott 13,9 ml t-butil-nitritet adunk hozzá, majd az elegyet —20°C-on 20 percen át keverjük, ezután —30°C-ra lehűtjük és 50 ml N-etil-morfolint adunk hozzá. Az azidoldathoz ezután hozzáadjuk 70 g (83 mmól), 400 ml DMF-ban oldott H-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 · 2Tos-OH 30 ml N-etil-morfolin reakcióelegyét. A reakcióhőmérsékletet +5°C-ra emeljük és az elegyet még 20 órán át keverjük.
Ezután a reakcióelegyet 400 ml n-butanol és 5 1 25%-os nátrium-klorid-oldat között megosztjuk. A vizes fázist még kétszer 200 ml n-butanollal mossuk és az egyesített szerves fázisokat 2X250 ml 8%-os hidrogén-karbonát-oldattal és 4X150 ml 13%-os nátríum-klorid-oldattal extraháljuk. A butanolos fázist nátrium-szulfáton szárítjuk majd szűrjük. Ezután a butanolos oldatot 6 liter etil-acetátba keverjük, a leváló csapadékot kiszűrjük, majd 500 ml etil-acetáttal mossuk és vákuumban szárítjuk. Ily módon 71 %-os hozammal 63 g cím szerinti terméket nyerünk.
[a]p2=—31,8° (c=l, metanol)
-6197928
3. példa
Z-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-OBut előállítása
PPA eljárással
58,9 g (0,1 mól) Z-Trp-Ser-Tyr-OH-t és
41.7 g (0,1 mól) H-Gly-Leu-OBut-Tos-OH-t 400. ml diklór-metilénben oldunk és az oldatot 0—)-50C-ra hűtjük. Ezután az oldathoz hűtés közben kb. 20—30 perc alatt egyidejűleg két csöpögtetőtölcsérből hozzácsöpögtetünk 96,5 ml N-etil-morfolint és 96,5 ml n-propil-foszfonsavanhidridet 50 tömeg%-os metilén-kloridos oldat formájában. Ezután a reakcióelegyet szobahőmérsékletre melegítjük, majd 3—20 óra elteltével 2X150 ml 5%os nátrium-karbonát-oldattal, 150 ml 13%os nátrium-klorid-oldattal, 150 ml 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és 5%-os nátrium-klorid-oldattal extraháljuk. A metilén-kloridos fázist vákuumban bepároljuk, majd a visszamaradó anyagot etil-acetát, Ugróin elegyből kristályosítjuk. A kristályokat kiszűrjük és 100 ml ligroinnal mossuk, majd vákuumban szárítjuk. Ily módon 86%-os hozammal 70 g cím szerinti terméket nyerünk. [a]zz=—25,8° (c=í, metanol).
1. referenciapélda
Z-Trp-Ser-Tyr-N3 előállítása g (10 mmól) Z-Trp-Ser-Tyr-N2H3-t 40 ml DMF-ban oldunk, az oldatot —30°C-ra hütjük, majd kb. 20 perc alatt hozzáfolyatunk
52,5 ml (42 mmól) 8n dioxános hidrogén-klorid-oldatot, majd —20°C hőmérsékleten újabb 20 perc alatt 1,4 ml t-butil-nitritet adunk hozzá 12 ml dioxánban oldva. Az elegyet ezután —20°C-on 20 percig keverjük, —30°C-ra hűtjük és 5,3 ml N-etil-moríolinnal reagáltatjuk. A hideg oldatot 650 ml hideg dietil-éterbo visszük és a kiváló csapadékot a felülúszótól dekantálással különítjük el, majd ismét hideg éterrel keverjük és dekantáljuk. A visszamaradó anyagot 40 ml metilén-kloridban vesszük fel, háromszor kb. 25 g jeges vízzel extraháljuk, és az oldatot nátrium-szulfáton szárítjuk. Az így kapott oldatot az IR-spektrum felvétele alatt hűtőszekrényben őrizzük. A friss oldat IR spektrumában
4.7 pm-nél éles sávot észlelünk, körülbelül 1 óra eltelte után 4,5 pm-nél egy új jelet kapunk, amely 24 óra elteltével már nagyobb, mint az eredeti, 4,7 pm-nél észlelt sáv Schwyzer és mtársai [Helv. chim. Acta, 44, (1961) 1991] szerint ez a megfigyelés savazidnak a megfelelő izocianáttá való Curtius-féle átalakulásával magyarázható.
2. referenciapélda
Tárolt azid-oldat reagáltatása H-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-2Tos-OH-val
A 4.1. példa szerint előállított oldatot 1 napon át hűtőszekrény hőmérsékleten tároljuk, majd 5 g (5,6 mmól) H-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-2Tos-OH 15 ml DMFban készült oldatával és 1 ml N-etil-morfolinnal reagáltatjuk, majd ismét +5°C-on tároljuk éjszakán át. A terméket az 1.6. példá12 bán ismertetett feldolgozási eljárás szerint elkülönítjük, majd metanolos oldatban aktívszénhordozós palldiumkatalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A hidrogénezés után kapott reakcióterméket nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással vizsgáljuk. A vizsgálatot nukleozilR 5SA oszlopon (4X X300 mm), 40% 1%-os, ρΗ=5,8-3·δ kálium-dihidrogén-foszfát puffer, 60% acetonitril elegy futtatószer alkalmazásával végezzük. Az áramlási sebesség 1 ml/perc, detektor: UV, 220 nm. Azt találtuk, hogy a körülbelül 25 perc retenciós idejű főtermék a H-Trp-Ser-Tyr-D-Ser (Bút) -Leu-Arg-Pro-NHEt mellett egy kevésbé intenzív, körülbelül 30 perces retenciós idejű melléktermék is jelentkezik. Az 1.1 —1.6 példák szerint előállított termék összehasonlító vizsgálatával azt találtuk, hogy csak az 1.6 példa szerint előállított termék tartalmaz 30 perc retenciós idejű melléktermék csúcsot, a melléktermék menynyisége a csúcs alatti területnek körülbelül 15%-a, míg a találmány szerinti eljárással előállított termékek nem tartalmaznak mellékterméket. Nyilvánvalónak tűnik, hogy a nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárás során 30 perces retenciós idővel jelentkező melléktermék egy karbamidszármazék, amely az azidból Curtius-féle átalakulással a 4.1 példában képződött izocianát további átalakulásának terméke.
3. referenciapélda Z-Ser-Tyr-ONb előállítása literes négynyakú lombikban szobahőmérsékleten 1,8 1 dimetil-formamidban 244,0 g tirozin-p-nitro-benzil-észter-toluolszulfonátot és 119,6 g benzil-oxi-karbonil-szerint oldunk, majd az oldatot 0—J-5°C közötti hőmérsékletre hűtjük. Az elegyhez kb. 5°C hőmérsékleten 300,0 ml N-etil-morfolint adunk, majd 20 perc alatt 275,0 liter propán-foszfonsavnahidrid/metilén-klorid-oldat elegyét csepeghetjük hozzá.
Ezután a reakcióelegy hőmérsékletét 1 /2 óra alatt szobahőmérsékletre emeljük.
Körülbelül 4 óra elteltével megkezdjük a DMFs ledesztillálását vákuumban. A desztilláláshoz rotációs bepárlót használunk. A desztillálás befejezése után a visszamaradó anyagot etil-acetátban oldjuk és vízzel éles oldattá keverjük. A vizes fázis pH-értéke kb. 6 körüli. Az etil-acetátos fázist választótölcsérrel elválasztjuk, a vizes fázist ismét etilacetáttal elkeverjük, majd a két szerves fázist egyesítjük és a visszamaradó vizes fázist DC eljárással történő ellenőrzést követően elöntjük. A szerves fázist kálium-hidrogén-s’ulfát oldattal, nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel extraháljuk. Az etil-acetátos oldatot vákuumban szárazra pároljuk, a visszamaradó olajos anyagot dietil-éterrel elegyítjük, miközben az olaj kristályos anyaggá alakul. A kapott kristályokat kiszűrjük és vákuumban szárítjuk. Ily módon 7
-7197928
65%-os hozammal 174,8 g cím szerinti termeket nyerünk. A kapott termék olvadáspontja 202—2O8°C (bomlik).
|ct]22— -13,2° (c=l, dimetil-acetamid).
4. referencia példa
Szcrii-tiroziií (H-Ser-Tyr-OH) előállítása literes négynyakú lombikban szobahőmérsékleten 2,0 1 metanolban és 1,0 1 dimetil-formamidban 177,0 g benzil-oxi-karbonil-szeril-tirozin-p-nitro-benzil-észtert (Z-Ser-Tyr-ONb) oldunk. Az oldathoz 10,0 g, vízzel nedvesített aktívszénhordozós palíádiumkataiizátort adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten keverés közben 2 órán át hidrogénezzük.
Ezután az elegyet leszűrjük, 2:1 arányú metanol, DMF eleggyel kétszer mossuk. A szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. A visszamaradó anyagot diizopropil-éterben felvesszük, miközben a termék pelyhes, gyorsan ülepedő csapadék formájában kiválik. A csapadékot kiszűrjük, majd vákuumban szárítjuk. Ily módon 87%-os hozammal 100,3 g terméket nyerünk.
[a] 22=-j-33,2° (c=l, metanol).
referencia példa
Z-Trp-Ser-Tyr-OH előállítása
500 ml DMF-ban 100,3 g 77%-os szeril-tirozint szuszpendálunk. A szuszpenziót 249 g 50%-os, dimetil-formamidos Z-Trp-ONSu-oldattal és 35 ml N-etil-morfolinnal reagáltatjuk. Körülbelül 2 óra alatt keverés közben szobahőmérsékleten a szuszpenzió feloldódik. Ezután az elegyből az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a visszamaradó anyagot 500 ml etil-acetátban felvesszük. Az etil-acetátos fázist 1 1 85%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal keverjük össze, majd a szerves fázist DC eljárással történő ellenőrzést követően elöntjük, a vizes fázishoz ismét 1 liter etil-acetátot adunk és 1,4 liter 10%os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal óvatosan magsavanyítjuk. A szerves fázist elkülönítjük, I liter vízzel mossuk és vákuumban körülbelül 300 ml-re bepároljuk. A bepárlás közben a termék kristályosodása már megkezdődik. A kristályosodást 1,5 liter diizopropil-éter hozzáadásával teljessé tesszük. A kristályokat, majd 40°C-on vákuumban szárítjuk. Ily módon 75%-os hozammal 126,7g terméket nyerünk.
A kapott termék olvadáspontja 165—172°C. [a]p2=+6,2° (c=l, metanol).
4. példa
Z-T rp-Ser-Tyr-D-Ser( But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-Tos-OH előállítása
100 literes keverős tartályba 60 kg (63 liter) DMF-t töltünk, majd ebben egymás után 10,34 kg (11,5 mól) H-D-Ser(Bút)-Leu-Arg-Pro-NHEt-2Tos-OH-t, 6,77 kg (11,5 mól) Z-Trp-Ser-Tyr-OH-t oldunk, és az oldatot -|-5°C-ra hűtjük. Adagoló edénybe 10,13 kg (11,12 1) N-etil-morfolint töltünk, és ebből 8 először 1,5 litert folyatunk a reakcióelegybe. Ezután +5—H0°C hőmérsékleten kb.
óra alatt a maradék N-etil-morfolinnal együtt 15,3 kg (11,1 1) n-propil-foszfonsavanhidridet adunk 50%-os metilén-kloridos oldat formájában a reakcióelegyhez. Az adagolás befejezése után a reakcióelegy hőmérsékletét 25°C körüli hőmérsékletre emeljük és az elegyet 5 órán át keverjük. A reakcióoldatot ezután vákuumban kb. 25 1 térfogatra pároljuk be. A visszamaradó bepárolt anyagot 250 literes keverős tartályban 150 liter n-butanollal keverjük össze. A tartálynak a fázisok elválasztására alkalmas edénye is van. Az elválasztott butanolos fázist egymás után a következő vizes oldatokkal extraháljuk: nátrium-karbonát-oldat, nátrium-klorid-oldat, nátrium-karbonát-oldat, víz, kálium-hidrogén-szulfát-oldat, és nátrium-klorid-oldat. A szerves fázist ezután kb. 50 1 térfogatra pároljuk be. A bepárolt oldatot a keverős adagoló tartály edényébe visszük át, a keverős tartályba 165 kg (230 t) diizopropil-étert töltünk, és ebbe a folyadékba 1 óra alatt keverés közben beadagolunk 25 liter butanolos koncentrátumot. A keletkező csapadékot még egy órán át keverjük, majd lecentrifugáljuk. A butanolos koncentrátum másik felét ugyanígy dolgozzuk fel. A terméket vákuumban 35—40°C-os hőmérsékleten szárítjuk. Ily módon 90%-os hozammal
13,5 kg cím szerinti terméket nyerünk.
[ct]p2=—33,7° (c=l, dimetil-acetamid).
Claims (9)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás az (I) általános képletű pép tidek előállítására — a képletbenZ jelentése benzil-oxi-karbonil-csoport,A4 jelentése Gly vagy D-Ser(But) és X jelentése OBut, Arg-Pro-Gly-NH2 vagyArg-Pro-NH(1—3 szénatomos alkil) —, azzal jellemezve, hogy a (II) képletű tripeptidet — ahol Z jelentése a tárgyi körben megadott— egy (III) általános képletű pepiiddel — ahol A4 és X jelentése a tárgyi körben megadott — vagy annak savaddíciós sójával reagáltatunk poláros oldószerben, előnyösen dimetil-acetamidban, dimetil-formamidban, dimetil-szulfoxidban, foszforsav-trisz (dimetil-amid)-ban, N-metil-pirrolidinben, vízben vagy e megnevezett oldószerek vízzel, kloroformmal, metilén-kloriddal vagy etil-acetáttal alkotott elegyében —10°C és szobahőmérséklet között, kondenzálószer jelenlétében.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás az X helyettesítőként OBut-t, Arg-Pro-NHQHs-t vagy Arg-Pro-Gly-NH2-t tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített (III) általános képletű peptjdet vagy savaddíciós sóit alkalmazzuk.
- 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás az A4 helyettesítőként Gly-t, X helyén Arg-Pro-Gly-8197928-NH2-t tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített (III) általános képletű peptidet vagy savaddíciós sóit alkalmazzuk.
- 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás az A4 helyén D-(Ser)But és X helyén Arg-Pro-NHC2H5 helyettesítőt tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített (III) általános képletű peptidet vagy sóit alkalmazzuk.
- 5. Az 1; igénypont szerinti eljárás Z-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített (III) általános képletű peptidet alkalmazzuk.
- 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás a Z-Trp-Ser-Tyr-D-Ser (Bút) -Leu-Arg-Pro-NHC2H5 előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített (III) általános képletű vegyületeket alkalmazzuk.
- 7. Az 1—6. igénypontok bármelyike sze5 rinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kondenzálószerként diciklohexil-karbodiimid jelenlétében 1-hidroxi-benzotriazolt vagy 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,2,3-benzotriazint vagy Nhidroxi-szukcinimidot alkalmazunk.
- 8. Az 1—6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kondenzálószerként alkán-foszfonsavanhidrideket vagy dialkil-foszfinsavanhidrideket alkalma15 zunk.
- 9. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kondenzálószerként n-propil-foszfonsavanhidridet vagy metil-etil-foszfonsavanhidridet alkalmazunk.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19843411224 DE3411224A1 (de) | 1984-03-27 | 1984-03-27 | Verfahren zur racematarmen herstellung von peptidzwischenprodukten der gonadorelin- und gonadorelinanaloga-synthese und neue zwischenprodukte bei diesem verfahren |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HUT37445A HUT37445A (en) | 1985-12-28 |
HU197928B true HU197928B (en) | 1989-06-28 |
Family
ID=6231739
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU851032A HU197928B (en) | 1984-03-27 | 1985-03-20 | Process for the production poor in racemate of peptide intermediary of hormon synthesis of gonadorelin and gonadorelin analog |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4691008A (hu) |
EP (1) | EP0156280B1 (hu) |
JP (1) | JPH0686478B2 (hu) |
AT (1) | ATE50267T1 (hu) |
CA (1) | CA1278650C (hu) |
DE (2) | DE3411224A1 (hu) |
DK (1) | DK170820B1 (hu) |
ES (1) | ES8607342A1 (hu) |
HU (1) | HU197928B (hu) |
IL (1) | IL74703A (hu) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4608251A (en) * | 1984-11-09 | 1986-08-26 | Pitman-Moore, Inc. | LHRH analogues useful in stimulating anti-LHRH antibodies and vaccines containing such analogues |
DE3839379A1 (de) * | 1988-11-22 | 1990-05-23 | Hoechst Ag | Verfahren zur herstellung von tripeptiden |
US5191065A (en) * | 1988-11-22 | 1993-03-02 | Hoechst Aktiengesellschaft | Process for the preparation of tripeptides |
DE19527574A1 (de) * | 1995-07-28 | 1997-01-30 | Basf Ag | Verfahren zur Herstellung vona-(N,N-Dialkyl)-aminocaarbonsäureamiden |
AUPO776897A0 (en) * | 1997-07-09 | 1997-07-31 | Csl Limited | A method of achieving production gains in livestock and agents useful for same |
AUPP807399A0 (en) | 1999-01-08 | 1999-02-04 | Csl Limited | Improved immunogenic lhrh composition and methods relating thereto |
DE10333042B4 (de) | 2003-07-21 | 2005-09-29 | Clariant Gmbh | Verfahren zur Herstellung von cyclischen Phosphonsäureanhydriden und deren Verwendung |
CN112500455A (zh) * | 2020-10-12 | 2021-03-16 | 湖南津安生物科技有限公司 | 一种多肽固液组合合成戈那瑞林的方法 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3953416A (en) * | 1971-12-20 | 1976-04-27 | Karl Folkers | Synthetic decapeptide having the activity of the luteinizing hormone releasing hormone and method for manufacturing the same |
FR2238700B1 (hu) * | 1973-07-24 | 1977-10-14 | Takeda Chemical Industries Ltd | |
CS180644B2 (en) * | 1973-09-29 | 1978-01-31 | Takeda Chemical Industries Ltd | Process for preparing nonapeptides |
US3915947A (en) * | 1974-07-11 | 1975-10-28 | Lilly Co Eli | Des-{8 His{hu 2{b ,Gly{hu 10{b {9 -D-Ala{hu 6 {b LHRH ethylamide as an inhibitor of LHRH |
DE2438350C3 (de) * | 1974-08-09 | 1979-06-13 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | Peptide mit starker LH-RH/FSH-RH-Wirkung, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende pharmazeutische Zubereitungen |
US3963691A (en) * | 1974-10-07 | 1976-06-15 | Merck & Co., Inc. | Synthetic antigens of luteinizing hormone releasing hormone |
US4272432A (en) * | 1974-11-13 | 1981-06-09 | American Home Products Corporation | Claudogenic-interceptive nonapeptide |
FR2329293A1 (fr) * | 1975-10-29 | 1977-05-27 | Parke Davis & Co | Nouveaux nonapeptides et procedes pour leur production |
GB1524747A (en) * | 1976-05-11 | 1978-09-13 | Ici Ltd | Polypeptide |
US4101537A (en) * | 1977-04-07 | 1978-07-18 | Parke, Davis & Company | Octapeptides and methods for their production |
DE3020941A1 (de) * | 1980-06-03 | 1981-12-17 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | Nonapeptid, verfahren zu seiner herstellung, dieses enthaltendes mittel und seine verwendung |
JPS57118563A (en) * | 1981-01-14 | 1982-07-23 | Takeda Chem Ind Ltd | Indole derivative and preparation of peptide |
US4481190A (en) * | 1982-12-21 | 1984-11-06 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH useful as LHRH antagonists |
-
1984
- 1984-03-27 DE DE19843411224 patent/DE3411224A1/de not_active Withdrawn
-
1985
- 1985-03-18 AT AT85103106T patent/ATE50267T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-03-18 EP EP85103106A patent/EP0156280B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-03-18 DE DE8585103106T patent/DE3575931D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-03-20 HU HU851032A patent/HU197928B/hu unknown
- 1985-03-25 US US06/715,418 patent/US4691008A/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-03-25 ES ES541535A patent/ES8607342A1/es not_active Expired
- 1985-03-25 IL IL74703A patent/IL74703A/xx not_active IP Right Cessation
- 1985-03-26 JP JP60059701A patent/JPH0686478B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1985-03-26 DK DK137085A patent/DK170820B1/da not_active IP Right Cessation
- 1985-03-26 CA CA000477529A patent/CA1278650C/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP0156280B1 (de) | 1990-02-07 |
ES8607342A1 (es) | 1986-05-16 |
DK137085A (da) | 1985-09-28 |
DK170820B1 (da) | 1996-01-29 |
EP0156280A2 (de) | 1985-10-02 |
JPH0686478B2 (ja) | 1994-11-02 |
DE3411224A1 (de) | 1985-10-10 |
EP0156280A3 (en) | 1987-10-21 |
DE3575931D1 (de) | 1990-03-15 |
ATE50267T1 (de) | 1990-02-15 |
CA1278650C (en) | 1991-01-02 |
IL74703A0 (en) | 1985-06-30 |
IL74703A (en) | 1988-11-30 |
DK137085D0 (da) | 1985-03-26 |
ES541535A0 (es) | 1986-05-16 |
US4691008A (en) | 1987-09-01 |
JPS60218399A (ja) | 1985-11-01 |
HUT37445A (en) | 1985-12-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2540534B2 (ja) | オリゴペプチジルニトリル誘導体 | |
US8217142B2 (en) | Liquid phase peptide synthesis of KL-4 pulmonary surfactant | |
CA2569204A1 (en) | Crystalline d-isoglutamyl-d-tryptophan and the mono ammonium salt of d-isoglutamyl-d-tryptophan | |
US6235876B1 (en) | Liquid phase process for the preparation of GNRH peptides | |
JPH0377178B2 (hu) | ||
EP0282891B1 (en) | New thymopentin retro-inverso analogs and fragments thereof, a process of preparation of the new compounds and the intermediates obtained therein | |
US5349050A (en) | Peptides, and antidementia agents containing the same | |
HU197928B (en) | Process for the production poor in racemate of peptide intermediary of hormon synthesis of gonadorelin and gonadorelin analog | |
US4623715A (en) | Novel peptides which are active on the central nervous system and have an action on the cholinergic system | |
JPS6317839B2 (hu) | ||
JPS5973574A (ja) | 環状ジペプチド類 | |
SE447261B (sv) | Nya tripeptidamider, som inverkar pa det centrala nervsystemet | |
US4491541A (en) | Peptides | |
EP0227410A2 (en) | Peptide derivatives, their production and use | |
JPH049800B2 (hu) | ||
HU221619B1 (hu) | Eljárás peptidek előállítására és intermedierek | |
HU181402B (en) | Process for preparing new peptides with psychopharmacological activity | |
EP0406931B1 (en) | New analogues of all-bond retroinverted thymopentin, the method for the synthesis of the same and their employment for the preparation of pharmaceutical compositions | |
Nagase et al. | Application of the tetrabutylammonium salt of an amino acid for liquid phase peptide synthesis: An easy way to prepare endothelin antagonistic linear peptides via an azide method | |
RU2111972C1 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕПТИДА δ СНА | |
CA1336738C (en) | Intermediates produced during the preparation of new thymopentin retroinverso analogs | |
Sureshbabu et al. | HOAt. DCHA as co-coupling agent in the synthesis of peptides employing Fmoc-amino acid chlorides as coupling agents: Application to the synthesis of β-casomorphin | |
EP0015036A1 (en) | Psycho-pharmacological peptides, process for their preparation and therapeutical compositions containing them | |
HU189204B (en) | Process for producing cholecistokinin-octapeptide-sulfate-ester and salts thereof | |
JPH0322398B2 (hu) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HU90 | Patent valid on 900628 | ||
HPC4 | Succession in title of patentee |
Owner name: AVENTIS PHARMA DEUTSCHLAND GMBH, DE |