HU194311B - Process for preparing new acidic polycyclic antibiotics of ether type - Google Patents
Process for preparing new acidic polycyclic antibiotics of ether type Download PDFInfo
- Publication number
- HU194311B HU194311B HU85578A HU57885A HU194311B HU 194311 B HU194311 B HU 194311B HU 85578 A HU85578 A HU 85578A HU 57885 A HU57885 A HU 57885A HU 194311 B HU194311 B HU 194311B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- antibiotic
- agar
- gray
- growth
- formula
- Prior art date
Links
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 title claims description 10
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 10
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 title abstract description 5
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 title abstract 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 title description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 4
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims abstract description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 18
- 241000969734 Streptomyces hygroscopicus subsp. hygroscopicus Species 0.000 claims abstract description 11
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 13
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical class [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 claims 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 150000003385 sodium Chemical class 0.000 claims 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 abstract description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 abstract description 4
- 208000003495 Coccidiosis Diseases 0.000 abstract description 3
- 206010023076 Isosporiasis Diseases 0.000 abstract description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 26
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 26
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 25
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 24
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Chemical class CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 18
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 15
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 15
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 11
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 11
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 11
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 210000004215 spore Anatomy 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 241000223931 Eimeria acervulina Species 0.000 description 8
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 8
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 8
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 8
- 241000894007 species Species 0.000 description 8
- 241000223932 Eimeria tenella Species 0.000 description 7
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 7
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 7
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 7
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 229930191564 Monensin Natural products 0.000 description 6
- GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N Monensin A Natural products O1C(CC)(C2C(CC(O2)C2C(CC(C)C(O)(CO)O2)C)C)CCC1C(O1)(C)CCC21CC(O)C(C)C(C(C)C(OC)C(C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 6
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 6
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 229960005358 monensin Drugs 0.000 description 6
- GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N monensin A Chemical compound C([C@@](O1)(C)[C@H]2CC[C@@](O2)(CC)[C@H]2[C@H](C[C@@H](O2)[C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@](O)(CO)O2)C)C)C[C@@]21C[C@H](O)[C@@H](C)[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](OC)[C@H](C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N 0.000 description 6
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 6
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 5
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 5
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 5
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 5
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 description 5
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 4
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 4
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 4
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- SJUWEPZBTXEUMU-LDXVYITESA-N 7-bromo-6-chloro-3-[3-[(2s,3r)-3-hydroxypiperidin-2-yl]-2-oxopropyl]quinazolin-4-one;hydrobromide Chemical compound Br.O[C@@H]1CCCN[C@H]1CC(=O)CN1C(=O)C2=CC(Cl)=C(Br)C=C2N=C1 SJUWEPZBTXEUMU-LDXVYITESA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 3
- 241000589893 Brachyspira hyodysenteriae Species 0.000 description 3
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 3
- 241000223924 Eimeria Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000178870 Lavandula angustifolia Species 0.000 description 3
- 235000010663 Lavandula angustifolia Nutrition 0.000 description 3
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Natural products O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 3
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 3
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 3
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000001165 anti-coccidial effect Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000001102 lavandula vera Substances 0.000 description 3
- 235000018219 lavender Nutrition 0.000 description 3
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 3
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000499566 Eimeria brunetti Species 0.000 description 2
- 244000309702 Eimeria hagani Species 0.000 description 2
- 241000223934 Eimeria maxima Species 0.000 description 2
- 241000530449 Eimeria mivati Species 0.000 description 2
- 241000499563 Eimeria necatrix Species 0.000 description 2
- 241000499544 Eimeria praecox Species 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 2
- 241000589886 Treponema Species 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000001362 calcium malate Substances 0.000 description 2
- OLOZVPHKXALCRI-UHFFFAOYSA-L calcium malate Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)C(O)CC([O-])=O OLOZVPHKXALCRI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940016114 calcium malate Drugs 0.000 description 2
- 235000011038 calcium malates Nutrition 0.000 description 2
- 230000025938 carbohydrate utilization Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- -1 digestion positive Substances 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000002555 ionophore Substances 0.000 description 2
- 230000000236 ionophoric effect Effects 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940043265 methyl isobutyl ketone Drugs 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 210000003250 oocyst Anatomy 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BBBFYZOJHSYQMW-LGDQNDJISA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O BBBFYZOJHSYQMW-LGDQNDJISA-N 0.000 description 1
- UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N 0.000 description 1
- ALQNAINCHNBUOD-HKOYGPOVSA-N (e)-8-[7-hydroxy-2-[2-(6-hydroxy-3,5,6-trimethyloxan-2-yl)-9-(5-methoxy-6-methyloxan-2-yl)oxy-4,10-dimethyl-1,6-dioxaspiro[4.5]decan-7-yl]-2,8-dimethyl-1,10-dioxaspiro[4.5]decan-9-yl]-2,4,6-trimethyl-5-oxonon-6-enoic acid Chemical compound O1C(C)C(OC)CCC1OC1C(C)C2(C(CC(O2)C2C(CC(C)C(C)(O)O2)C)C)OC(C2(C)OC3(OC(C(C)C(O)C3)C(C)\C=C(/C)C(=O)C(C)CC(C)C(O)=O)CC2)C1 ALQNAINCHNBUOD-HKOYGPOVSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000224483 Coccidia Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001840 Dandruff Diseases 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001430190 Eggerthia catenaformis Species 0.000 description 1
- 241000179199 Eimeria mitis Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000605909 Fusobacterium Species 0.000 description 1
- 241000605952 Fusobacterium necrophorum Species 0.000 description 1
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000567229 Isospora Species 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019759 Maize starch Nutrition 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N Metaphosphoric acid Chemical compound OP(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588622 Moraxella bovis Species 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 241000711850 Peptococcus sp. Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 239000004721 Polyphenylene oxide Substances 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- KQXDHUJYNAXLNZ-XQSDOZFQSA-N Salinomycin Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](CC)C(O)=O)CC[C@H](C)[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](CC)[C@@H]1[C@@H](C)C[C@@H](C)[C@@]2(C=C[C@@H](O)[C@@]3(O[C@@](C)(CC3)[C@@H]3O[C@@H](C)[C@@](O)(CC)CC3)O2)O1 KQXDHUJYNAXLNZ-XQSDOZFQSA-N 0.000 description 1
- 239000004189 Salinomycin Substances 0.000 description 1
- 241000589973 Spirochaeta Species 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 1
- 240000001949 Taraxacum officinale Species 0.000 description 1
- 235000005187 Taraxacum officinale ssp. officinale Nutrition 0.000 description 1
- 241000186064 Trueperella pyogenes Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910001860 alkaline earth metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L barium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ba+2] RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001863 barium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007613 bennett's agar Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 150000004648 butanoic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020197 coconut milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000571 coke Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 125000004177 diethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002038 ethyl acetate fraction Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 239000004088 foaming agent Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000001030 gas--liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 1
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 1
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- DKAGJZJALZXOOV-UHFFFAOYSA-N hydrate;hydrochloride Chemical compound O.Cl DKAGJZJALZXOOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- KELXKDDAALYTDI-BTVCFUMJSA-N nitric acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound O[N+]([O-])=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O KELXKDDAALYTDI-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920000570 polyether Polymers 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 229960001548 salinomycin Drugs 0.000 description 1
- 235000019378 salinomycin Nutrition 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 208000012153 swine disease Diseases 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 239000011667 zinc carbonate Substances 0.000 description 1
- 235000004416 zinc carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000010 zinc carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/01—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing oxygen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/195—Antibiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/445—The saccharide radical is condensed with a heterocyclic radical, e.g. everninomycin, papulacandin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Description
A találmány tárgya eljárás CP-63,517 jelzésű új antiotikus anyag előállítására, melyet az Okyama közigazgatási terület (Japán) talajmintájából Izolált és N479-34 kódszámmal ellátott Srrepiomyces nemzetség új törzsének fermentációja útján különítettünk el. A találmány szerinti új antibiotikum szerkezetileg a savas pollciklusos éter (ionofor) antibiotikumok új tagja. Ebbe az antibiotikum-családba tartozik a dianemiein (J. Antiobitics 22, 161 (1969) és 33, 137 (1980), monenzin (J, Amer. Chem. Soc. 89 5737 (1967), a szalinomicin (J. Antibiotlcs 27, 814 (1974), a TM-531 antibiotikum (4,269, 971 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás), és az 53,607 antibiotikum (4,361,649 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás).
A találmány szerint CP-63,517 jelzésű I általános képletű új savas pollciklusos éter antibiotikumot ahol Me jelentése metilcsoport - és gyógyszerészetileg elfogadható kadnos sóit állítjuk elő, melyek számos mikroorganizmus ellen hatásosak és kokcidlózis, vékonybélgyulladás, sertés-vérhas és -emlőmirigygyulladás kezelésére, valamint sertés és marha növekedésének serkentésére, továbbá sertés és marha táplálékhasznosítási hatásfokának növelésére használhatók.
A CP-63,517 antibiotikumot az Okayama japán közigazgatási területen gyűjtött talajmintából izolált új törzs tenyésztése útján különítettük el. E törzset az N497-34 kódszámmal jelöltük meg és a Streptomyces endus subsp. aureus új törzseként azonosítottuk. Az „American Type Culture Collection nál deponáltuk 39574 nyilvántartási szám alatt.
A találmány szerint előállított antibiotikum és sói alkalmasak sertés és marha táplálékhasznosításának fokozására, sertés és marha számára a fend antibiotikumot vagy sóit tartalmazó tökéletesebb tápszert állítottunk elő, eljárást dolgoztunk ki a CP63,517 antibiotikumnak és gyógyszerészetileg elfogadható sóinak előállítására. A Streptomyces endus subsp. aureus új törzsét vizes tápközegben tenyésztve és a Streptomyces endus subsp. aureus, ATTCC39574 biológiailag tiszta tenyészetét állítottuk elő.
A találmány szerinti antiotikus anyagot az Okayama japán közigazgatási területen gyűjtött talajmintából izolált, N497-33 jelzésű törzs fermentációja útján állítjuk elő. Az N497-34 tenyészetet Uang H. Huang (Central Research, Pfizer Inc., Groton, Cennectiut, USA) jellemezte és azonosította az alábbiak szerint.
A vizsgálat során az N497-34 tenyészet Streptomyces fajtának bizonyult a hifák keskenysége, légmicéliumok képződése és a légmicéliumon láncszerűen elhelyezkedő spórák alapján.
Az N497-34 tenyészetet ferde táptalajról ATCC 172 folyadékba oltjuk át és rázógépen 4 napig 28°Con tenyésztjük. Utána 20 percig centrifugáljuk, steril desztillált vízzel háromszor mossuk és az Aetíttomycetales család tagjainak azonosításához használt tápközegekre oltjuk rá.
A tenyészetet 28*C-on inkubáljuk és az eredményeket különböző időpontokban, de leginkább a 14. napon értékeljük. A színeket a szokásos terminológia szerint fajuk ,le, de az exakt színeket a „Color Harmony Manuel ’ (4. kiadás) színmintáival váló összehasonlítás útján határozzuk meg. A teljes sejtek aminosav- és cukorelemzésére Becker és munkatársai (Appl. Mkrobiol. 12,421-423 (1964)), és Lechevalier (J. Láb. Clin. Med. 71, 934-944 (1968)) módszerét használjuk, összehasonlítás céljából Streptomyces endus subsp. aureus NRRL12174 törzset .kaptunk a „Northern Régiónál Research Center”-től (NRRC) (U.S.D.A., Peoria, IlUnob).
A tenyészet jellemzésére használt tápközegek és az összetételükre szolgáló hivatkozások az alábbiak:
1. Tripton-élesztőkivonat táptalaj (ISP * 1 médium, Difco).
2. Élesztőklvonat-malátakivonat agar — (ISP ♦ 2 médium, Difco).
3. Zabliszt agar - (ISP ♦ 3 médium, Difco).
4. Szervetlen sók-keményítő agar - (ISP * 4 médium, Difco)·
5. GUcerin-aszparagln agar - (ISP * 5 médium, Difco).
6. Pepton-élesztőklvonat-vasagar - (ISP * 6 médium, Difco)
7. Czapek-szacharóz agar - S. A. Waksman, The Actlnomycetes, 2. kötet, 1. sz. médium, 328. oldal, 1961.
8. Glűkóz-aszpargln agar — ugyanott, 2. sz., 328. oldal.
9. Benett-agar - ugyanott, 30. sz. médium, 331. oldal.
10. Emerson-agar - ugyanott, 28. sz. médium, 331. oldal.
11. Tápagar - ugyanott, 14. sz. médium, 330. oldal.
12. Gordon és Smith féle tirozin agar — R. E. Gordon és Μ. M. Smith, J. Bact. 69, 147-150 (1955).
13. Kazein agar - ugyanott.
14. Kalcium malát agar — S. A. Waksman, Bact. Rév. 27, 1-29.(1957).
15. Zselatin - R. E. Gordon és J. M. Mlhm. J. Bact. 73, 15-17(1957).
16. Keményítő - ugyanott.
17. Szerves nitrát táptalaj - ugyanott.
18. Dextróz nitrát táptalaj - S. A. Waksman, The Actlnomycetes, 2. kötet, 1. sz. médium, 328. oldal, 1961, a 30 g szacharózt 3 g dextrózzal helyettesítve és az agart elhagyva.
19. Burgonya répa agar - Μ. P. Lechevaler, J. Láb. and Clin. Med. 71, 934-944 (1968), de csak 30 g burgonyát, 2,5 g répát és 20 g agart használva.
20. 2% csapvíz agar.
21. Soványtej - Difco.
22. Cellulóz hasznosítás —
a) H. L. Jensen, Proc. Linn. Soc. N. S. W., 55,231-248(1930).
b) M. Levine és H. W. Schoenlein, A Compllcatlon of Cultura Media, 2511. számú médium,' Difco.
23. Szénhidrátok - ISP + 9 médium, Difco.
24. Hőmérséklettartomány - PS ♦ 2 médium plusz ml kókusztej per liter médium.
Az N497-34 tenyészet a következő jellegzetességeket mutatja a színek és a teljes sejtek aminosavés cukoranaÚzise alapján, a fentebb megadott eljárásokat alkalmazva.
Elesztőkivonat-maldtakivonat agar - Növekedés, jó, fehér, halványsárga - halvány rózsaszínes szürke (Ica, 1 l/2ca, közel a 3de, 5dc, 5fe szürke sorozathoz), kiemelkedő, ráncos, légmlcélium a felszínnel azonos; fonák barna (2pg, 3ne), oldható pigment sárgásbarna (21c, 3nc).
Zabliszt agar — Növekedés mérsékelt - jó, szürkésfehér, szürke - rózsaszínes szürke ( közel a 3fe,
194 311
5fe, 7fe, 7Ih szürke sorozathoz), enyhén kiemelkedő, sima, bársonyos, légmlcélium hasonló a felszínhez; fonák sárga (2ca) - szürke (közel a 3dc, 3fe szürkesorozathoz), oldható pigment halványsárgás - sárgás (1 l/2ea, 1 l/2ga).
Szervetlen sók - keményítő agar - Növekedés mérsékelt - jó, fehéressárga - pirosszürke (1 1/2 ca, közel az lba, 5fe, 7fe, 71h szürke sorozathoz), kiemelkedő, ráncos, légmlcélium hasonló a felszínhez, fonák sárgáspirosas szürke (1 1/2 ga, közel az 5fe szürke sorozathoz), oldható pigment sárgás (1 l/2ga, 1 1/2 ca).
Glicerin - aszparagin agar - Növekedés gyenge mérsékelt, szürkésfehér (közel a 2ba szürke sorozathoz), vékony, sima, vagy izolált telepekként jelenik meg, légmlcélium szürkésfehér, fonák színtelen halványsárgás (1 12/ca), nincs oldható pigment. Czapek - szacharóz agar - Növekedés mérsékelt, halványszürkés (közel az 1 1 /2ca, közel a 2cb szürke sorozathoz), vékony, sima, körkörös vagy ívalakú vonalakkal, nincs légmlcélium, fonák krémszínű (1 l/2ca), oldható pigment krémszínű (1 l/2ca). Glükóz - aszparagin agar - Növekedés jó, szürke, pirosasszürke (közel a 3fe, 5fe szürke sorozathoz) - sárgás Qea, Iga), mérsékelten kiemelkedő, ráncos vagy szemcsés, légmlcélium hasonló a felszínhez, fonák sárgásszurke - szürke (2gc, 2ge, közel a 3fe, eih szürke sorozathoz), oldható pigment sárgás (1 l/2ia, 1 1 /21 a).
Gordon és Smith-féle tirozin agar — Növekedés mérsékelt, szürkés (közel a 2ba szürke sorozathoz), mérsékelten kiemelkedő, ráncos, vagy Izolált telepekként jelenik meg, légmlcélium szürkésfehér, fonák halványsárga fi l/2ca, 1 12ea), oldható pigment halványsárga (1 l/2ca, 1 i/2ea), oldható pigment halványsárga (2ea).
Kalcium - malát agar - Növekedés mérsékelt, fehér - szürkésfehér (közel a lba szürke sorozathoz), vékony, dma, vagy izolált telepeket képez, légmlcélium szórványos, fehér - szürkésfehér, fonák krémszínű (1 l/2ca), oldható pigment krémszínű (1 l/2ca). Kazein agar - Növekedés jó, fehér — halvány szürkéskrémszínű (közel 2ec, 3ec), mérsékelten kiemelkedő, finoman ráncos, nincs légmlcélium, fonák halványlevendula (3ec), oldható pigment halványlevendula (4ec).
Benneti-agar - Növekedés jó, fehér, halványsárga — halványrózsaszín (lea, közel az 5fe, 7fe, 71h szürke sorozathoz), kiemelkedő, ráncos, légmlcélium a felszínhez hasonló, fonák levendulaszürke (4ig, 411, 5ig, 511), oldható pigment sárgás (1 l/2na). · Enerson-agar - Növekedés jó, fehér - szürkésfehér, kiemelkedő, ráncos, vagy izolált telepekként jelenik meg, fehér - szürkésfehér légmicéliummal, fonák sárgásbarna (2ea, 21c), oldható pigment barna (31c). Tápagar - Növekedés mérsékelt, fehér, ráncos, kiemelkedő, vagy izolált telepekként jelenik meg, légmicéllum fehér, fonák krémszínű (1 l/2ca), nincs oldható pigment.
Zselatin agar - Növekedés jó, fehér, kiemelkedő, ráncos, légmlcélium fehér, fonák krémszínű (2ca), nincs oldható pigment.
Keményítő agar — Növekedés jó, fehér, kiemelkedő, ráncos, légmlcélium fehér, fonák halványsárgás sárgásbarna (2ea, 21c), oldható pigment krémszínű (2ca),
Burgonya-répa agar - Növekedés mérsékelt, szürke — rózsaszínes szűrke - 3fe, 5fe, 7fe, 7ih szürke sorozathoz közel), bársonyos, közepén kiemelkedő, de széle felé vékony, sima, légmlcélium hasonló a felszínhez, fonák rózsaszínes szürke (közel az 5fe, Sih szürke sorozathoz), oldható pigment krémszínű (1 l/2ca).
Csapvíz agar — Növekedés mérsékelt — jó, szürke rózsaszínes szürke (közel a 3fe, 5fe, Sih szürke sorozathoz), kiemelkedő, izolált, bársonyos telepekként
Íelenik meg, légmicéliuin szürke - rózsaszínes szűrre, fonák szürke — sötétszürke (közel az Sih, 3ih, 3ml szürke sorozathoz), nincs oldható pigment.
Alaktani tulajdonságok — Az alaktani tulajdonságokat zabliszt agaron határozzuk meg 14 napi inkubálás után: spóratömeg a szürke színsorozatban, spórahordozó részek inonopodiálisan elágaznak, spóralánc spirális, kis átmérőjű (3-4 μτη), kissé nyitott,
3-7 csavarulat per spóralánc, 10-50 spóra per spóralánc, spóra rövid pálcaalakú, olykor gömbölyű, ovális vagy ellipszis alakú, egyenes vagy kissé görbült, a kissé görbültek közül egyesek végei nem párhuzamosak és ötszögűekuek látszanak, átmérőjűk 1,0-1,8x0,9-1,2 pun vagy 0,9-1,2 μιη, szemölcsös (pásztázó elektronmikroszkóppal vizsgálva).
Biokémiai tulajdonságok — Melanin nem képződik. hidrogéu-szulfid képződik, zselatint elfolyósitja, keményítőt hídrolizálja, nitrátot nitritté redukálja, jól növekszik Levin-Schoenlein-féle cellulóz táptalajon, egyik cellulóz táptalajon sem bomlik el, tejet koagulál és feltisztít, kazein-emésztés pozitív, kalcium-malát emésztés pozitív, tirozin-emésztés negatív. Szénhidráthasznosítás: glükózt, arablnőzt, fruktózt, inozitot, mannitot, raffinózt, ramnózt, szacharózt és xflózt egyaránt hasznosít.
Hőmérsékleti összefüggések
21°C 28°C 37°C 45°C jó kitűnő jó mérsékelt növekedés növekedés növekedés növekedés
Az N497-34 tenyészet sejtfal-elemzésekor azt találtuk, hogy a teljes sejtek hidrollzátumai LL-dlamlno-pimelinsavat tartalmaznak, de jellemző cukrot nem. Az N497-34 tenyészetet szürke színű spóratömeg, negatív melanin-reakció, spirális spóraláncok, és szemölcsös felszínű sprórák jellemzik. E tulajdonságok és a teljes sejtek analízise alapján a tenyészetet a Streptomyces nembe soroljuk. Az Irodalomból Ismert Streptomyces fajták leírásával összehasonlítva erősen hasonlít az S. endus Anderson Gottlieb subsp. aureus Tomlta, Nakano, Sato, Shirahata, Yoshida Mormoto NRRL 12174 törzshöz, melyet a Japan Kokai Tokkyo Koho, 57-4975 közleményben írtak le (1982. január 11.) Az utóbbi törzset az NRRL-től kaptuk és egymás mellett hasonlítottuk össze az N497-34 tenyészettel. Eltekintve attól a ténytől, hogy az N497-34 — szemben az NRRL 12174-gyel - 45°C-on növekedik és megalyasztja a tejet, mindkét tenyészet azonos biokémiai és fiziológiai tulajdonságokkal rendelkezik. ISP * 2 táptalajon, ISP + 4 táptalajon és Bennett-agarod az N497-34 tenyészet több pirosasszürke légmicéllumot képez sárga izzadmány nélkül: telepei ISP * 5 táptalajon és tápagaron kisebbek, telepei Czapekszaharóz agaron krémszínű vonalakat és köröket mutatnak, telepei glűkóz-aszparagln táptalajon Inkább pirosasszürkék, mint fehér - krémszlnűek és inkább sárga, mint oldhatatlan pigmentet képeznek. E tenyésztési eltérések nem jelentősek és előfordulhat-31
194 311 nak Streptomyces fajok különböző törzsei között. Az N497-34 tenyészetet ezért a Streptomyces endus Andcrson Gottlleb subsp. aureus Toinita, Nakano, Sato, Shirahata, Yoshida Moriinoto új törzsén^ tartjuk. Az „American Type Culture Collection nál deponáltuk (123-1 Parklaqn Drive, RockvQle, Maryland, 20852, USA) a budapesti egyezség feltételei között 1984. január 10-én, ATCC-39574 nyilvántarts! számon. Az „American Type Culture Collection -nál deponált N497-34 tenyészet állandósága garantált e bejelentés alapján engedélyezett bármely szabadalom hatályos fennállása folyamán, az N497-34 tenyészet e bejelentés folyamán a „Szabadalmak és védjegyek' meghatalmazottja” által meghatározott személy számára a 35 USC 122 és 37 CF3 1,14 név alatt férhető hozzá, és a deponált tenyészet hozzáférhetőségével kapcsolatos összes korlátozás végérvényesen megszűnik a kért szabadalom megadásakor.
A találmány szerinti új antibiotlkus anyagot, a Streptomyces endus subps. aureus, ATCC-39574 új törzsének fermentálása, a teljes tenyészlének természetes pli-n metil-lzobutil-ketonnal történő extraliálása és az oldat bepárlása útján állítjuk elő. A visszamaradt olajat heptánban szuszpendáljuk és a sarzsot szflikageílel kezeljük. A szflikagél-pogácsát kloroformmal, kloroform/etil-acctát eleggyel, etfl-acetáttal és etil-acetát/aceton eleggyel eluáljuk. Bepárlás után az etfl-acctátos frakcióban kis mennyiségű nyers CP-63,517 antibiotikumot kapunk, melyet vegyes nátrium/káliumsó alakjában kristályosítunk.
A Streptomyces endus subsp. áureus ATCC-39574 24-36°C hőmérsékleten, szubmerziós körülmények között, rázás és levegőztetés közben tenyészthető olyan tápközegekben, melyek szénhidrátforrásokból, mint cukrokból, keményítőből, glicerinből, szerves nitrogénból (kazln-pepton), élesztőkivonatból, növekedési anyagokból, mint gabona oldható anyagaiból, hallisztből, gyapotmag lisztből, nyomelemeket, mint vasat, kobaltot, rezet, cinket tartalmazó ásványi sókból és pufferező anyagokként kalcium-karbonátból vagy foszfátokból ál. Az antibiotikum úgy nyerhető ki, hogy a teljes tenyészlevet különböző szerves oldószerekkel, például n-butanollal, metfl-lzobutfl-kétonnal, vagy kloroformmal extraháljuk 4,0 -8,0 pH-tartományban, vagy a mlcéliumot a tenyésztés befejezése után elválasztjuk, és a micéliumot extraháljuk, a szürletet elöntjük. A kivonatot híg sziruppá pároljuk be, például heptánban oldjuk, és szilíkagélen kromatografálva tiszta vegyületet kapunk.
fnokulumot az ATCC-39574 tenyészettel beoltott ferde táptalajok vagy Roux-palackok vegetatív sejtjeinek lekaparása után állítunk elő. A ferde táptalajokon vagy Roux-palackokban történő kezdeti tenyésztésre alkalmas szilárd tápközeg az ATCC 172 számú táptalaj.
| ATCC 172 | |
| Alkotórészek | Grammfliter |
| Glükóz | 10 |
| Oldható keményítő | 20 |
| Élesztőkivonat | 5 |
| NZ Amine A* | 1 |
| Kalcium-karbonát | 1 |
| Desztillált víz 100 ml-ig, pH-beállitás 7,0-re KOH-dal Agar | 20 |
•Kazein enzimes hldrollzátumának bejegyzett márkaneve, Humko Sheffleld Chemical Co., Inc.
A ferde táptalajokról nyert vegetatív sejteket használjuk rázólombikok vagy lnokulumtartályok beoltására, vagy pedig az inokulum-tartáiyokat oltjuk be a zárólombikokból. A rázólornbikokban maximális növekedés 96 120 óra alatt érhető el, mig az inokuluin-tartályokban a növekedés legelőnyösebb időszaka a 72 -96. óra. Az Inokuluin-lombikból vagy tartályból származó vegetatív táptalajjal teljesen fertözésmentes körülmények között fermentort oltunk be és a fermentációt 48-120 óráig folytatjuk. A rázólombikban rázógépen való rázással tartjuk fenn a levegőztetést, a tartályokba pedig steril levegőt vezetünk be 1 - 2 térfogat levegő/térfogat tápközeg/perc ütemben. A rázás (keverés) sebessége a használt rázógép típusától függ, a rázólombikot általában 150-200 ciklus per perc (CPM) és a fermentort 300-1700 fordulat per perc (RPM) sebességgel rázatjuk ül. keverjük. A sterilitásról állandóan gondoskodni kell. A hőmérsékletet 28-36°C között szabályozzuk. A fermentáció folyamán a habzást steril habzásgádókkal, például finomított szójaolajjal vagy más alkalmas habzásgátlóval akadályozzuk meg, melyet a beoltás után fertőzésmentes körülmények között adunk a lombikhoz vagy a fermentorhoz.
Rázólombikokat a következő tápközegek egyikével készítünk elő:
CL13MZ
Alkotórészek Grammfliter
Glükóz 20
Szójaliszt 10
NZAmlneYTT* 5
Nátrium-szulfát 03
Kobalt-klorid 0,002
Kalcium-karbonát 2
Víz 1 literig, pH 6,9-7,0
JDYTT
Alkotórészek Grammflitér
Cerelóz 10
Kukoricakeményítő 5
Kukoricalekvár 5
NZ Amine YTT* 5
Kobalt-klorid 0,002
Kalcium-karbonát 3
Víz 1 literig, pH 6,9-7,0 •Kazein enzimes hldrollzátumának bejegyzett márkaneve, Humko Sheffleld, Co., Inc.
100 ml tápközeget 300 ml-es rázólombikba mérünk be és 120°C-on 933.104 Pa nyomáson 30 percig sterűezzük. Lehűlés után a tápközeget beoltjuk agarban levő ATCC 172 táptalajon tenyésztett
S. endus subsp. aureus ATCC-39574 kultúra ferde táptalajról nyert vegetatív sejtszuszpenziójával. A lombikokat 28*C-on, 3-4 napig 3,8-5,1 cm kitéréssel és 150-200 CPM-mel forgó rázógépen rázatjuk. Egy lombikot 5 literes fermentáló palack beoltására Használunk, mely utóbbi 3 litert tartalmaz a következő tápközegek egyikéből: CN-2 (alább), vagy CL13MZ vagy JDY TT (fent).
194 311
CN-2
Alkotórészek Gramm/Uter
Cerelóz 10
Kukoricakeményitő 10
Szójaliszt 10
NZ Amine YTT* 10
Kobalt-klorid 0,02
Kalcium-karbonát 1 'Kazein enzimes hidrolizátumának bejegyzett márkaneve, Huinko Sheffleld Co., Inc.
ml habzásgátló szert adunk hozzá, majd a palackot légmentesen lezáijuk és 120°C-on és 9,33.104 PA nyomáson 45 percig sterüezzük. Az edényeket az egyik palackkal (körülbelül 3% inokulum) beoltjuk, 96-144 óráig 30°C-on fermentáljuk, 1700 CPM-mel keveijük, és a levegőztetés mértéke 1 térfogat levegő per térfogat folyadék per perc.
Amikor a fermentáció befejeződött (B. subtilis ATCC 6633 elleni antibiotikus korongpróba alapján), a fermentorokat leállítjuk és tartalmukat a természetes pH-η szűrési segédanyagot, például celitet használva leszűijük. A szűrőtésztát metanolban szuszpendáljuk, vákuumban bepároljuk, 2-3 térfogat vízzel felhígítjuk, majd kétszer 1/3—1/2 térfogat vízzel nem elegyedő oldószerrel, mint metfl-lzobutÜ-ketonnal vagy n-butanoilal extraháljuk. Az oldószerréteget a vizes fázistól leszívással vagy centrifugálással elválasztjuk, szűrjük és a szürletet vákuumban bepárolva viszkózus olajat kapunk.
A fermentáló biológiai aktivitását, majd a kinyert anyagot Bacillus subtilis ATCC 6633 vagy Staphylococcus aureus ATCC 6538 érzékeny törzsének alkalmazásával követjük. A fermentlé komponenseit és a kinyert anyagokat rétegkroniatográ fiával (TLC) tesszük láthatóvá szilikagél [Sflica gél G (70-230M ASTM) E. MerckJ lemezeket és tiszta etil-acetátot használva. A kifejlesztett lemezeket vanfllin reagenssel (3 g vanfllin 75 ml etanolban és 25 ml 85% foszforsavban) permetezzük be és 80°C-ra melegítjük. A CP-63,517 antibiotikum zöldes folt alakjában jelenik meg. A kifejlesztett TLC-lemezre S. aureusszal vagy B. subtilis-szel beoltott agart Is rétegezhetünk, melyhez, tetrazolium-festéket (2,3,5-trÍfenfl-2H-tetrazollum-klorid-monohidrát, 98%, Aldrich Chemical Co., Inc. T-8485-9) adtunk és 37°C-on 16 óráig inkubáljuk az antibiotikum láthatóvá tétele céljából (rózsaszín háttérben fehér).
Nagy méretű fermentorokhoz az eljárást úgy adaptáljuk, hogy 0,7 liter CL13MZ vagy JDY TT tápközeget tartalmazó rázólombikot készítünk. A rázólombik inokulumát 3-5 napig 28°C-on fennentáljuk. A rázólombik inokulumát 3-5 napig 28eC-on fermentáljuk és 96 vagy 4600 liter JDY TT tápközeget tartalmazó 190 vagy 6540 literes fermentor beoltására használjuk. Megközelítőleg 1 liter inokulumot használunk a kádban. 5-7 napi fermentálás után a fermentor tartalmát összegyűjtve 96 vagy 4230 liter fermentlevet kapunk. A teljes fermentlevet 1/5 térfogat metfl-bobutll-ketonpal extraháljuk természetes pH-,n, „Alpha DeLaval -szeparátoron vagy .JPodMelnink’-extraktoron elválasztjuk és az oldószert vákuumban bépároljuk. A kapott olajat tovább koncentráljuk, szirupot kapunk, melyet heptánban szuszpendálunk, szfllkagéüel keverünk, , szflikagél-ágyon átszűrjük és a gélt többször heptánnal mossuk. Az antibiotikumot fokozatosan eluáljuk kloroformmal, klorofonn/etil-acetát eleggyel, etil· -acetáttal és végül 50% acetont tartalmazó étŰ-acétáttal. Az cluciót rétegkromatográfla és a frakciók biológiai próbája követi. Az aktív frakciókat egyesítjük, bepároljuk és újra kromatografáljuk a CP-63,517 antibiotikum izolálása céljából. Az aktív eluátumok szemcsés szén-oszlopon való á(bocsátása eltávolítja a zavaró anyagokat, és javítja a kinyerést, úgyhogy kristályos CP-63,517 antltlotikumot kapunk.
A találmány szerinti I általános képletű antibiotikumos vegyület savas jellegű, és bázikus reagensekkel reagáltatva kationos sókat képez. Minden ilyen só beletartozik a találmány hatókörébe. E sókat polléter (ionofor) antibiotikumok előállítására használatos módszerekkel állítjuk elő. Az egyik eljárás szerint az I általános képletű vegyületet Illékony, vízzel nem elegyedd szerves oldószerben oldjuk és az oldatot legalább 1 ekvivalens, de előnyösen nagy feleslegű alkalmas bázikus reagenst tartalmazó vizes oldattal kezeljük. A szerves oldószeres oldatot szárítás után vákuumban bepároljuk és így a kívánt kationos sóhoz jutunk. A használható jellemző bázikus reagensek közé tartoznak alkálifém-hldroxidok, mint nátrium-hidroxid és kállum-hidroxld, alkáliföldfém-hidroxidok, mint kalcium-hidroxid és bárium-hidroxid, és ammónium-hldroxid.
A CP-63,517 antibiotikum számos Grampozitiv mikroorganizmus növekedését gátolja. Az alábbi I. táblázatban az Ín vitro MIC-próbák eredményeit összegezzük. E próbához minden organizmust beoltunk a CP-63,517 antibiotikum kémcsősorozatából, hogy meghatározzuk az antibiotikum minimális koncentrációját mcg/ml-ben, amely az organizmus növekedését 24 órás időszak alatt gátolja (MIC, legkisebb gátló koncentráció).
A sertés-dizentéria egyike az Egyesült Államokbeli diagnosztizált leggyakoribb sertésbetegségeknek. Ezenfelül a betegség sok más országban is gyakori és a sertéstenyésztőknek évente sok ezer dolláros veszteséget okoz az egész világon. Újabban felfedezték, hogy egy nagy spirochaeta okozza a betegséget. Ezt az organizmust, a Treponema hyody senteriae Λ most izolálták és kimutatták, hogy képes e betegség előidézésére (Harris D. L. és munkatársai, „Swine Dysentery-1 Inoculation of Pigs with Treponema hyodysenteriac (New Species) and Reproduction of the Disease”, Vet. Med/SAC, 67, 61-64 (1972)]. Megjegyzendő, hogy nem tudjuk, vájjon a T. hyodysenteriae a sertés-vérhas egyetlen kórokozója-e. Mégis a rendelkezésre álló adatokból arra lehet következtetni, hogy a fertőzés elsődleges forrása.
194 311 ' I. táblázat
| Organizmus | CP-63,517 1J1P | |
| Staphylococcus aureus | 01A005 | mcg/ml 0J9 |
| 01A052 | 039 | |
| 01A11O | 039 | |
| 01A106 | 0,78 | |
| 01A539 | 0,78 | |
| 01A543 | 3,12 | |
| Staphylococcus epidermidin | 01B087 | 0,78 |
| 01B111 | 939 | |
| Streptococcus pyogenes | 0,20054 | 0,10 |
| Eryrip. rhusdo | 04A005 | 039 |
| Lactobacülus casei | 09B001 | 039 |
| L. catenaforme | 09C001 | 039 |
| Corynebacterium pyogenes | 11D001 | 12,5 |
| UD002 | 12,5 | |
| 11D003 | 12,5 | |
| Peptococcus sp. | 17B001 | <0,10 |
| HaemophÜus parahaemol. | 54B002 | 25 |
| Pasteureüa múltoddá | 59A013 | 50 |
| 59A048 | 039 | |
| P. haemolycita | 59B018 | 039 |
| 59B046 | 039 | |
| 59B061 | 50 | |
| Bordateüa bronchi | 73A006 | 039 |
| 73A016 | 635 | |
| Bacteriodes vulgates | 78E032 | 25 |
| Fusobacterium plauti | 84G001 | 039 |
| F. necrophorum | 84C004 | 25 |
| Moraxella bovis | 93A001 | 50 |
| Treponema hyodysenterlas | 94A001 | 635 |
| 94A002 | 6,25 |
A jól ismert protozod-okozta betegség, a kok-, ddlózis súlyos probléma lett és visszaszorítása gazdaságilag fontos állategészségügyi szempontból különösen a baromfiipar számára. A kokddlózlst egy vagy több Eimeria vagy Isospora fajta fertőzés okozza (összefoglalásként lásd Lund és Fan, .JMseaes of Poultry , 5. kiadás, Biester és Schwarte szerkesztők, Iowa State University Press, Ames, la., 1965, 1056— 1096. oldal). Tíz kokddiumfaj van, amely könnyen észrevehető betegséget okoz érzékeny csirkéknél. Az Eimeria tenella, E. necatrix, E. brunetti, E. acervulina, E. maxima és E. mivati vagy közvetlenül károsít az emésztőrendszer hámsejtjeinek a pusztítása révén, vagy közvetve, toxínok képzése útján. Ugyanazon nemzetséghez tartozó három másik protozod fajt viszonylag ártalmatlannak tartanak; mégis az £. mitis, E. hagani és E. praecox képesek a tömeggyarapodás, a táplálékhasznosltás csökkentésére és károsan befolyásolják a tojástermelést.
A CP-63,517 antibiotikum és kationos sói rend5 kívül hatásosak a baromfi kokcidiumos fertőzései ellen. A csirketápba 5—40 ppm koncentrációban bedolgozva e vegyületek hatásosan gátolják az Eimeria tenella és E. acervulina okozta fertőzéseket.
A CP-63,517 antibiotikumnak és sóinak csirkék kokcidiumos fertőzéseivel szembeni hatásosságát a következőképpen mutattuk ki. 10 napos SPF leghom kakasok 3-5-ös csoportjait CP-63,517 antibiotikum nátriumsóját, vagy az Ismert monenzint vagy stenorolt egyenletesen eloszlatva tartalmazó pépes eleséggel tápláltunk. Miután 24 órán át ezt a tápot ették, mindegyik csirkét per o$ beoltottuk a vizsgálandó Eimeria fajta oocisztáival. A 10 napos csirkék többi 3-5-ös csoportjait vizsgálandó vegyületet nem tartalmazó, azonos pépes takarmányon tartottuk. 24 óra múlva észrevehető betegséget okoz érzékeny csirkéknél. Az Eimeria tenella, E. necatrix,
E. brunetti, E. acervulina, E. maxima és E. mivati vagy közvetlenül károsít az emésztőrendszer hámsejtjeinek a pusztítása révén, vagy közvetve, toxinok képzése útján. Ugyanazon nemzetséghez tartozó három másik protozoa fajt viszonylag ártalmatlannak tartanak: mégis az E. mitis, E. hagani és E. praecox képe25 sek a tömeggyarapodás. a táplálékhasznosítás csökkentésére és károsan befolyásolják a tojást emelést.
A CP-63,517 antibiotikum és kationos sói rendkívül hatásosak a baromfi kokcidiumos fertőzései ellen. A csirketápba 5-40 ppm koncentrációban bedolgozva e vegyületek hatásosan gátolják az Eimeria tenella és E. acervulina okozta fertőzéseket.
A CP-63,517 antibiotikumnak és sóinak csirkék kokcidiumos fertőzéseivel szembeni hatásosságát a következőképpen mutattuk ki. 10 napos SPF leghom kakasok 3-5-ös csoportjait CP-63,517 antibiotikum nátriumsóját, vagy az ismert monenzint vagy stenorolt egyenletesen eloszlatva tartalmazó pépes eleséggel tápláltunk. Miután 24 órán át ezt a tápot ették, mindegyik csirkét per os beoltottuk a vizsgálandó Eimeria fajta oocisztáival. A 10 napos csirkék többi 3-5-ös csoportjait vizsgálandó vegyületet nem tartalmazó, azonos pépes takarmányon tartottuk. 24 óra múlva ezeket is megfertőztük és fertőzött kontroüokként szolgáltak. A 10 napos csirkék egy további 3-5-ös csoportját vizsgálandó vegyületet nem tartalmazó pépes takarmányon tartottuk és kokcidlummal nem fertőztük meg. Ezek normális kontrollokként szolgáltak. A kezelés eredményeit E. acervulina esetében 5 nap múlva, és E. teneüa esetében 6 nap múlva értékeltük ki. A kapott eredményeket a Π. táblázat összegzi.
194 311
| II, Táblázat | ||||||
| Vizsgált | Fertőző faj | Dózis | Fertőzés | Arány* | Tömeg- | |
| vegyület | (ppm) | átlagos foka* | gyarapodás (%) | |||
| CP-63,517 | Eimeria tenella | 40 | 0,0 (0,0) | 0,0 (0,0) | 0(2) | |
| 30 | 0,0(0,0) | 0,0 (0,0) | 0(23) | |||
| 20 | 0,0(0,0) | 0,0 (0,0) | • 14 (26) | |||
| 10 | 0,0(1,0) | 0.0 (0,3) | 36 (66) | |||
| 5 | 1,0 | 0,3 | 63 | |||
| Monenzin* | Eimeria tenella | 120 | 0,3(1.0) | 0,09 (0,32) | 71 (68) | |
| 53 | 2,3(1,7) | 0,69 (0,54) | 92 (99) | |||
| Sztenorol* | Eimeria tenella | 9 | 0,0 (0,0) | 0,0 (0.0) | 63 (77) | |
| 3 | 0,0(0,0) | 0,0 (0,0) | 86(103) | |||
| CP-63,517 | Eimeria acervulina | 0,75 40 | 1,7(23) 1,2(1,2) | 0,51(0,73) 0,60(0,60) | 66 (90) 0(0) | |
| • | 30 | 0,4 (0,6) | 0,20 (0,30) | 0(0) | ||
| 20 | 0,8 (0,4) | 0,40(0,20) | 30(60) | |||
| CP-63,517 | Eimeria acervulina | 10 | 1,0(0,6) | 0,50 (030) | 40(0) | |
| 5 | 2,2 | 1,10 | 11 | |||
| Sztenorol* | Eimeria acervulina | 9 | 0,0 (0,0) | 0,0 (0,0) | 48(51) |
* A zárójelben levő számok párhuzamos vizsgálatok eredményei
Monenzin: 3,501,568 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás, J. Am. Chem. Soc. 89, 5737 (1967), Sztenorol (Halofugjnon): 3,320,124 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás, ^A kokcidiumellenes hatékonyság mérésére alkalmazott kritérium alapján 0-4 pontú megbetegedési skálát alkalmazunk Eimería tenella-nál J. E. Lynch szerint, „A New Method fór the Primary Evaluation of Anticoccidial Activity , Am. J. Vet. Rés. 22, 324-326 (1961), és a többi fajnál 0-3 pontú skálát alkalmazunk, a J. Johnson és W. H. Reid által ajánlott pontozó rendszer módosítása alapján („Anticoccidial Drugs. Lesion Scoring Technlques in Battery and Floor Pen Experiments in Chlcks ”, Exp. Parasit. 28, 30-36 (1970).) Állandó arányt kapunk, ha a kezelt csoportok megbetegedési pontszámát elosztottuk a kezelt kontrollok megbetegedési pontszámával.
Amint az I. táblázat adatai mutatják, a találmány szerinti új antibiotikus anyag baktériumellenes hatást mutat számos Gram-pozitív baktériummal, mint Staphylococcus aureussztá, Staphylococcus epidermidis-szél és Streptococcus pyogenes-szcl szemben. Ez a körülmény az I általános képletű vegyületeket és sóikat egészségügyi célokra, mint kézmosásra és kórházi felületek és berendezések fertőtlenítésére teszi alkalmassá.
Ezenfelül a találmány szerinti I általános képletű antibiotikus vegyületek hatásosak a sertésnél vérhast okozó Treponema hyodysenteriae-vel szemben, így a találmány szerinti I általános képletű antibiotikus anyagok sertés-vérhas ellen használhatók. Ebből a célból az I általános képletű vegyület a sertésnek önmagában, vagy előnyösen gyógyszerkészítmény formájában alkalmazható, mely az I általános képletű vegyületet gyógyszerészetÜeg elfogadható hordozóval vagy hígítóval elkeverve tartalmazza.
E gyógyszerkészítményt állatgyógyászati antibiotikumok előállítására használatos eljárásokkal állítjuk elő. Például kapszulákat úgy készítünk, hogy zselatinkapszulákat megtöltünk a közömbös hígítóval, mint glükózzal, laktózzal, szacharózzal, keményítővel vagy cellulózzal alkalmasan hígított I általános képletű vegyülettel. Tabletták szokványos módon állíthatók elő, például úgy, hogy az
I. általános képletű vegyület és hígító, mint laktóz vagy „keményítő, kötőanyag, mint zselatin vagy „guar mézga, és dkositó anyag, mint magnézium•«ztearát vagy paraffinviasz keverékét tablettákká sajtoljuk. Az I általános képletű vegyület orálisan elixirek, szirupok, oldatok és szuszpenziók alakjában is alkalmazhatók. Az oldatok és szuszpenziók vizesek, neinvizesek vagy részlegesen vizesek lehetnek. Parenterálális alkalmazás körébe tartozik az intramuszkuláris, intraperitoneális, szubkután és intravénás alkalmazás. Intravénás adagoláshoz az oldott anyagok összkoncentrációját ellenőrzni kell, hogy a készítmény izotóniás legyen.
Áz I általános képletű vegyület és a gyógyszerészetücg elfogadható hordozóanyag aránya függ a tervezett dózistól és az alkalmazás útjától, mégis . a fenti arány általában az 1 : 1 — 2 : 1, különösen az 1 :5 — 1 :1 tartományba esik.
Ha az I általános képletű vegyületet sertés-dizentéria ellen alkalmazzuk, a vegyületet célszerűen az állat takarmányával keverjük össze. Ebben az esetben az I általános képletű vegyületet az állati takar45 mányhoz olyan koncentrációban adjuk hozzá, amely az I általános képletű vegyület alkalmas napi adagját képviseli.
A kezelő állatorvos dönt végül Is a sertés-vérhas leküzdésére alkalmazandó I általános képletű vegyület dózisáról, és ez a dózis függ az alkalmazás céljá50 tói és az állat tüneteinek súlyosságától. Mégis az I általános képletű vegyületet általában orálisan, napi 20-50 mg/testsúly-kg tartományban alkalmazzuk, szokás szerint osztott dózisokban. Egyes esetekben szükség lehet a fenti tartományon kívül eső dózisok alkalmazására.
Ezenfelül a találmány szerinti I általános képletű antibiotikum és gyógyszerészetÜeg elfogadható bázikus sói fokozzák sertésnél és kérődzőknél a táplálékhasznosítási hatásfokot, azaz növekedésserkentőkként hatnak. A kérődző-takarmány fő tápláló részének
-η (szénhidrátok) felhasználási mechanizmusa jól ismert. ou Az állat bensőjében levő mikroorganizmusok elbont7
194 311 ják a szénhidrátokat és Így monoszacharidok képződnek, majd ezek a monoszacharidok plruvátvegyületekké alakulnak át. A plruvátok mikrobiológiai folyamatokban acetátokká, butirátokká vagy propionátokká metaboUzálódnak, melyeket együttesen Olékony zsírsavaknak (VFA) nevezünk. (Részletesebb ismertetéshez lásd: „Physiology of Digestlon and MetaboUsm in the Runiinant”, Phillipson és munkatársai, szerkesztők, Oriel Press, Newcastle-uponTyne, Anglia, 1970, 408-410. oldal.) A VFA felhasználás relatív hatásosságát tárgyalja McCuüogh (Feddstoffs, 1971. június 19, 19. oldal), Eskeland és munkatársai (J. An. Sci. 33, 282 (1971), és Church és munkatársa], („Digestive Physiology and Nutrition of Ruminants', 2. kötet, 1971, 622-625. oldal). Bár az.acetátok és butirátok felhasználódnak, a propionátok nagyobb hatékonysággal hasznosulnak. Egy jótékony hatású vegyület ezért arra serkenti az állatot, hogy a szénhidrátokból nagyobb arányban képezzen propionátokat, növelve ezzel a szénhidrátfelhasználás hatékonyságát.
Az állati takarmány értékét közvetlenül az állat táplálása útján határozzák meg. Az 1,197,826 számú brit szabadalmi leírás részletesen leír egy in vitro bendőtechnlkát, mellyel a táplálékban bekövetkező, mikroorganizmusok okozta változások könnyebben és nagy pontossággal lemérhetők az állati takarmány értékelésekor. E technikához használt készülék segítségével az állatok emésztési folyamata in vitro modellezhető és vizsgálható. Az állati takarmányt, bendő-lnokulumot és különböző növekedésserkentő anyagokat egy laboratóriumi egységbe visznek be, majd onnan eltávolítják gondosan ellenőrzött körülmények között és a létrejött változásokat kritikusan és fokozatosan tanulmányozzák, miközben a táplálékot a mikroorganizmusok megemésztik. A bendőfolyadék propionsavtartalmának növekedése azt jelzi, hogy az egész kérődző folyamatban kívánt reakciót váltott ki a tápkészítményben levő növekedésserkentő anyag. A propionsavtartalom változását a kontroll bendőfolyadékban talált proplon-savtartalom %-ában fejezzük ki. Hosszan tartó in vivő táplálási vizsgálatokat végzünk annak a kimutatására, hogy megbízható összefüggés áll fenn a bendőfolyadék propionsavtartalmának növekedése és a jobb állati teljesítmény között.
A bendőfolyadék sipollyal ellátott borjúból gyűjtjük, melyet szokványos hizlaló tápon és szénán tartunk. A bendőfolyadékot sajtvásznon azonnal átszűrjük, és 10 nü-ét 400 mg standard sztibsztrátot (68% Kukoricakeményítő ♦ 17% cellulóz +15% extrahált azójallszt), 10 ml 6,8 pH-jú puffért és a vizsgálandó vegyületet tartalmazó 50 ml-es kúpos palackhoz adjuk. A palackokat oxlgénmentcs nitrogéngázzal körülbelül 2 percig átöblítjük, és rázó vízfürdőben 39 C-on mintegy 16 óráig inkubáljuk. Minden esetben 3 párhuzamos próbát végzünk.
Inkubálás után 5 ml mintát 1 ml 25% metafoszforsawal keverünk össze. 10 perc múlva 0,25 ml hangyasavat adunk hozzá és a keveréket 10 percig percenkénti 1500 fordulattal-centrifugáljuk. Utána a mintákat gáz-folyadékkromatográfiával elemezzük
D. W. Kellogh (J. Dalry Sd. 52, 1960 (1969)) módazerével. Az ecetsav, proplonsav és vajsav csúcsok magasságát meghatározzuk a kezeletlen és kezelt inkubádós palackok mintáiból.
A leírt in vitro eljárással vizsgálva a CP-63,517 antibiotikum 20 és 10 pg/ml koncentrációban 96%
Illetve 95%-kal fokozza a propionsavképződést, a CP-63,517 antibiotikumot nem tartalmazó kontroll oldathoz viszonyítva, összehasonlításképpen, a kereskedelmileg kapható Monenzin (másik polidklusos éter antibiotikum) 10 pg/ml koncentrációban körülbelül 20%-os proponsavemelkedést okoz a kontrollal szemben (J. Am. Chem. Soc. 89, 5737 (1967)).
összehasonlítva a Szallnomidnnnel (1. Antibiotics 27, 814 (1974)), a CP-63,517 antibiotikum 86%-kal növeli a propionsavat 20 pg/ml koncentrádóban, és körülbelül 66%-os emelkedést eredményez 5 pg/ml koncentrádóban, összehasonlítva a 10 pg/ml SzaUnomicin mintegy 65%-os propionsav-fokozásával.
Ezen adatok alapján arra lehet következtetni, hogy a CP-63,517 antibiotikum megjavítja kérődzők, mint marha és juh, valamint egygyomrú állatok, mint sertés és nyúl takarmányhasznositását. A CP-63,517 antibiotikum szabad sav, nátriumsó, káliumsó vagy ezek keverékei formájában dolgozható be a takarmányba. A CP-63,517 antibiotikum nyers formái, vagy az antibiotikumot tartalmazó szárított fermentlé a kívánt hatásosságú koncentrádókban keverhetők össze a tápkészítményekkel.
A következő példa klzáiólagos célja a találmány további bemutatása.
Példa
CP-63,517 antibiotikum izolálása á fermentléböl
ATCC-39574 tenyészet 10 fermentádós edényének teljes fermenüevét (össztérfogat körülbelül 25 liter) ^térfogat metil-izobutfl-ketonnal extraháljuk. A kivonatot vákuumban bepároljuk. A kapott barna olajat kromatográfiás minőségű, etil-acetátban felvett szilikagéllel töltött 5x100 cm-es oszlopon kromatografáljuk. Az oszlopot etfl-acetáttal fejlesztjük ld 10 ml/perc átfolyási sebességet alkalmazva. 10 ml-es frakciókat gyűjtünk. E frakciókat rétegkromatográviával vizsgáljuk etfl-acetáttal eluált szilikagélenlemezeken. A lemezeket 3%-os etanolos vanfllinoldat - 85% foszforsavoldat (3:1) eleggyel permetezzük be és 80°C-on hevítjük. Á kívánt CP-63,517 antibiotikum ilyen körülmények között zöld folt alakjában jelenik meg. A CP-63,517 antibiotikumot tartalmazó frakdókat egyesítjük (össztérfogat körülbelül 300 ml) és 15 perdg 2 g „Darco G60” aktív szénnel (JC1 America Inc., Wilmington, Delaware 19899) keverjük. A keveréket átszűrjük, a szürletet 300 nú 5% dinátrium-hidrogén-foszfát pufferrel keverjük és a pH-t In nátríum-hldroxid-oldattal 10,0-re állítjuk be. A fázisokat szétválasztjuk és az etfl-acetátot vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük és vákuumban bepároljuk.
A visszamaradt viszkózus olajat kevés acetonban oldjuk. A képződött kristályokat szűréssel összegyűjtve és vákuumban megszárftva 800 mg CP-63,517 antibiotikumot kapunk nátriumsó alakjában, olvadáspont 215-220eC.
Infravörös spektrum (KBr) cm1:
3436, 2964, 2928, 2871, 2728, 1666, 1563, 1462, 1404, 1372, 1319, 1293, 1271, 1234, 1205, 1167, 1100, 1050, 1033 , 995, 980, 940, 926,902,858,538.
Optikai forgatás: αθ +25 C (c « 0,5, metanol).
194 311
Elemzés C«7H77O14N-ra:
C Η N számított 63,49 8,89 0,0 talált 62,45 8,61 0,0
A CP-63,517 antibiotikum szabad savformáját úgy állítjuk elő, hogy & CP-63,517 kloroformos oldatát azonos térfogatú vfzzel keverjük és foszforsavval a pH-t 3,0-ig csökkentjük. Utána a fázisokat szétválasztjuk és a klroformot vákuumban lepárolva szabad savformájú CP-63,517-et kapunk amorf szilárd anyag alakjában, olvadáspont 95-105°C.
UV spektrum, X^ax = 232 nm.
Infravörös spektrum (KBr) cm'*,
3474, 2968, 2932, 2877. 1715, 1670, 1460, 1380, 1315, 1265, 1233, 1202, 1165, 1113, 1099, 1066, 1046, 1021, 987, 950, 923, 900. Optikai forgatás: αβ = +47,4° (c <= 0,5, metanol).
Elemzés C47H7eO14-re számított talált
C H NO
65,10 9,07 25,83
64,05 8,93 27,03 (a különbségből).
Az I általános képletű CO-63,517 szerkezetét protonmágneses magrezonancia és nagy felbontású tömegspektnun elemzéssel határozta meg Earl B.
Whlpple és R. S. Ware, Central Research, Pfizer Inc., Groton, Connecticut, USA.
Claims (3)
1. Eljárás az I képletű antibiotikum — ahol Mejelentése metílcsoport - vagy gyógyszerészetileg elfogadható kationos sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces endus subsp. aureus ATCC-39574 jelű mikroorganizmus törzset
15 vagy annak az antibiotikum képzésére képes mutánsát vagy variánsát asszimilálható szén-, nitrogén- és szervetlen sóforrást tartalmazó vizes tápközegben szubmerz, aerob fermentációs körülmények között tenyésztjük, és a kapott antibiotikumot kívánt esetben kationos sójává alakítjuk.
20
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az antibiotikumot nátrium- vagy káliumsója alakjában állítjuk élő.
3. Az 1. Igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a tenyésztést 24-36eC hőméreéklétén hajtjuk végre.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/581,384 US4552843A (en) | 1984-02-17 | 1984-02-17 | Process for producing an acidic polycyclic ether antibiotic by cultivation of a novel strain of Streptomyces endus subspecies aureus |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT37655A HUT37655A (en) | 1986-01-23 |
| HU194311B true HU194311B (en) | 1988-01-28 |
Family
ID=24324993
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU85578A HU194311B (en) | 1984-02-17 | 1985-02-15 | Process for preparing new acidic polycyclic antibiotics of ether type |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4552843A (hu) |
| EP (1) | EP0153128B1 (hu) |
| JP (1) | JPS60199895A (hu) |
| KR (1) | KR870000236B1 (hu) |
| AT (1) | ATE41424T1 (hu) |
| AU (1) | AU552957B2 (hu) |
| CA (1) | CA1234771A (hu) |
| DE (1) | DE3568781D1 (hu) |
| DK (1) | DK158988C (hu) |
| ES (1) | ES8605861A1 (hu) |
| FI (1) | FI78118C (hu) |
| GR (1) | GR850399B (hu) |
| HU (1) | HU194311B (hu) |
| IE (1) | IE58131B1 (hu) |
| IL (1) | IL74353A (hu) |
| MX (1) | MX164678B (hu) |
| NO (1) | NO164422C (hu) |
| NZ (1) | NZ211133A (hu) |
| PH (1) | PH19992A (hu) |
| PL (1) | PL145197B1 (hu) |
| PT (1) | PT79974B (hu) |
| SU (1) | SU1431682A3 (hu) |
| YU (1) | YU43398B (hu) |
| ZA (1) | ZA851160B (hu) |
| ZW (1) | ZW2085A1 (hu) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4510317A (en) * | 1983-07-28 | 1985-04-09 | Hoffmann-La Roche Inc. | Antibiotic X-14934A |
| US5242814A (en) * | 1989-10-10 | 1993-09-07 | Eli Lilly And Company | Polyether antibiotic |
| US5573724A (en) * | 1994-07-29 | 1996-11-12 | Magneco/Metrel, Inc. | Ladle port assembly |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5592387A (en) * | 1978-12-29 | 1980-07-12 | Taisho Pharmaceut Co Ltd | Antibiotic substance tm-531 |
| JPS574975A (en) * | 1980-06-12 | 1982-01-11 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Phenazine derivative and its preparation |
| US4359583A (en) * | 1980-09-16 | 1982-11-16 | Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. | Antibiotics TM-531 B and TM-531 C |
| JPS5758687A (en) * | 1980-09-27 | 1982-04-08 | Taisho Pharmaceut Co Ltd | Antibiotic |
| US4361649A (en) * | 1981-07-20 | 1982-11-30 | Pfizer Inc. | Polycyclic ether antibiotic |
-
1984
- 1984-02-17 US US06/581,384 patent/US4552843A/en not_active Expired - Lifetime
-
1985
- 1985-01-17 YU YU64/85A patent/YU43398B/xx unknown
- 1985-02-12 EP EP85300909A patent/EP0153128B1/en not_active Expired
- 1985-02-12 AT AT85300909T patent/ATE41424T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-02-12 DE DE8585300909T patent/DE3568781D1/de not_active Expired
- 1985-02-14 GR GR850399A patent/GR850399B/el unknown
- 1985-02-14 ES ES540399A patent/ES8605861A1/es not_active Expired
- 1985-02-14 MX MX27029A patent/MX164678B/es unknown
- 1985-02-15 DK DK071285A patent/DK158988C/da active
- 1985-02-15 IL IL74353A patent/IL74353A/xx not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 SU SU853857495A patent/SU1431682A3/ru active
- 1985-02-15 NO NO85850609A patent/NO164422C/no unknown
- 1985-02-15 PL PL1985251964A patent/PL145197B1/pl unknown
- 1985-02-15 PH PH31864A patent/PH19992A/en unknown
- 1985-02-15 ZA ZA851160A patent/ZA851160B/xx unknown
- 1985-02-15 AU AU38759/85A patent/AU552957B2/en not_active Ceased
- 1985-02-15 PT PT79974A patent/PT79974B/pt not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 HU HU85578A patent/HU194311B/hu not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 NZ NZ211133A patent/NZ211133A/en unknown
- 1985-02-15 KR KR1019850000931A patent/KR870000236B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 IE IE38185A patent/IE58131B1/en not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 CA CA000474379A patent/CA1234771A/en not_active Expired
- 1985-02-15 ZW ZW20/85A patent/ZW2085A1/xx unknown
- 1985-02-15 FI FI850650A patent/FI78118C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-02-18 JP JP60030143A patent/JPS60199895A/ja active Granted
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4195079A (en) | New polycyclic ether antibiotic | |
| US4148882A (en) | Polycyclic ether antibiotics produced by new species of actinomycete | |
| HU194312B (en) | Process for preparing novel polycyclic ether antibiotics and compositions comprising the same | |
| US4431801A (en) | Polycyclic ether antibiotic | |
| US4361649A (en) | Polycyclic ether antibiotic | |
| HU194311B (en) | Process for preparing new acidic polycyclic antibiotics of ether type | |
| US4625041A (en) | Acidic polycyclic ether antibiotic | |
| US4533553A (en) | Polycyclic ether antibiotic | |
| US5206263A (en) | Acidic polycyclic ether useful as an anticoccidial agent and as a growth promotant | |
| US4547523A (en) | Polyether antibiotic from streptomyces | |
| EP0117107B1 (en) | Dianemycin derivative and process therefor | |
| US4081532A (en) | Polycyclic ether antibiotic produced by new species of dactylosporangium | |
| US5064855A (en) | Acid polycyclic ether antibiotic | |
| US4707493A (en) | 19-epi-dianemycin as an anticoccidial and antibacterial agent | |
| US4652523A (en) | Method of preparing a new polyether antibiotic from streptomyces | |
| US5298524A (en) | Acidic polycyclic ether antibiotic having an anticoccidial and growth promotant activity | |
| US4920050A (en) | Acidic polycyclic ether antibiotic | |
| HUT59932A (en) | Microbiological process for producing acidic, polycyclic ether-type antibiotica | |
| WO1989012105A1 (en) | Acidic polycyclic ether antibiotic having anticoccidial and growth promotant activity |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HU90 | Patent valid on 900628 | ||
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee | ||
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |