FI78118B - Foerfarande foer framstaellning av ett antibiotikum cp-63517, som aer 19-de/(tetrahydro-5-metoxi-6-metyl-2h- pyran-2-yl)oxi/-15-/(tetrahydro-5-metoxi-6-metyl-2h-pyran-2-yl)oxi/- dianemycin och dess katjonsalt. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av ett antibiotikum cp-63517, som aer 19-de/(tetrahydro-5-metoxi-6-metyl-2h- pyran-2-yl)oxi/-15-/(tetrahydro-5-metoxi-6-metyl-2h-pyran-2-yl)oxi/- dianemycin och dess katjonsalt. Download PDFInfo
- Publication number
- FI78118B FI78118B FI850650A FI850650A FI78118B FI 78118 B FI78118 B FI 78118B FI 850650 A FI850650 A FI 850650A FI 850650 A FI850650 A FI 850650A FI 78118 B FI78118 B FI 78118B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- antibiotic
- methyl
- pyran
- tetrahydro
- oxi
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- -1 TETRAHYDRO-5-METHOXY-6- METHYL-2H-PYRAN-2-YL Chemical class 0.000 title claims description 7
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 title description 10
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 title description 8
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims abstract description 40
- 241000969734 Streptomyces hygroscopicus subsp. hygroscopicus Species 0.000 claims abstract description 8
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 claims 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 abstract description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 7
- 208000003495 Coccidiosis Diseases 0.000 abstract description 4
- 206010023076 Isosporiasis Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 abstract description 4
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 abstract description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 abstract description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 29
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 29
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Chemical class CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 17
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 16
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 9
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 8
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 8
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 7
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 7
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 7
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 7
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 6
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 5
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 5
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 5
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N Monensin A Natural products O1C(CC)(C2C(CC(O2)C2C(CC(C)C(O)(CO)O2)C)C)CCC1C(O1)(C)CCC21CC(O)C(C)C(C(C)C(OC)C(C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 3
- 241000589893 Brachyspira hyodysenteriae Species 0.000 description 3
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 3
- 241000223924 Eimeria Species 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 244000178870 Lavandula angustifolia Species 0.000 description 3
- 235000010663 Lavandula angustifolia Nutrition 0.000 description 3
- KQXDHUJYNAXLNZ-XQSDOZFQSA-N Salinomycin Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](CC)C(O)=O)CC[C@H](C)[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](CC)[C@@H]1[C@@H](C)C[C@@H](C)[C@@]2(C=C[C@@H](O)[C@@]3(O[C@@](C)(CC3)[C@@H]3O[C@@H](C)[C@@](O)(CC)CC3)O2)O1 KQXDHUJYNAXLNZ-XQSDOZFQSA-N 0.000 description 3
- 239000004189 Salinomycin Substances 0.000 description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 3
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000001165 anti-coccidial effect Effects 0.000 description 3
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 3
- 239000007613 bennett's agar Substances 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000001362 calcium malate Substances 0.000 description 3
- OLOZVPHKXALCRI-UHFFFAOYSA-L calcium malate Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)C(O)CC([O-])=O OLOZVPHKXALCRI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229940016114 calcium malate Drugs 0.000 description 3
- 235000011038 calcium malates Nutrition 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 3
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000001102 lavandula vera Substances 0.000 description 3
- 235000018219 lavender Nutrition 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 3
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 3
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 229960001548 salinomycin Drugs 0.000 description 3
- 235000019378 salinomycin Nutrition 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- BBBFYZOJHSYQMW-LGDQNDJISA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O BBBFYZOJHSYQMW-LGDQNDJISA-N 0.000 description 2
- UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N 0.000 description 2
- SJUWEPZBTXEUMU-LDXVYITESA-N 7-bromo-6-chloro-3-[3-[(2s,3r)-3-hydroxypiperidin-2-yl]-2-oxopropyl]quinazolin-4-one;hydrobromide Chemical compound Br.O[C@@H]1CCCN[C@H]1CC(=O)CN1C(=O)C2=CC(Cl)=C(Br)C=C2N=C1 SJUWEPZBTXEUMU-LDXVYITESA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Natural products CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000224483 Coccidia Species 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 229930191564 Monensin Natural products 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004648 butanoic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000025938 carbohydrate utilization Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000002555 ionophore Substances 0.000 description 2
- 230000000236 ionophoric effect Effects 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 229960005358 monensin Drugs 0.000 description 2
- GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N monensin A Chemical compound C([C@@](O1)(C)[C@H]2CC[C@@](O2)(CC)[C@H]2[C@H](C[C@@H](O2)[C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@](O)(CO)O2)C)C)C[C@@]21C[C@H](O)[C@@H](C)[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](OC)[C@H](C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- FELYAZAWTURXNF-KWJIWYEDSA-N (E,2S,4R,8S)-8-[(2S,5R,7S,8R,9R)-7-hydroxy-2-[(2R,4S,5S,7R,9S,10R)-2-[(2S,3S,5R,6R)-6-hydroxy-6-(hydroxymethyl)-3,5-dimethyloxan-2-yl]-9-[(2S,5S,6R)-5-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4,10-dimethyl-1,6-dioxaspiro[4.5]decan-7-yl]-2,8-dimethyl-1,10-dioxaspiro[4.5]decan-9-yl]-2,4,6-trimethyl-5-oxonon-6-enoic acid Chemical compound O1[C@H](C)[C@@H](OC)CC[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)[C@]2([C@H](C[C@@H](O2)[C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@](O)(CO)O2)C)C)O[C@@H]([C@@]2(C)O[C@]3(O[C@@H]([C@H](C)[C@@H](O)C3)[C@@H](C)\C=C(/C)C(=O)[C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC2)C1 FELYAZAWTURXNF-KWJIWYEDSA-N 0.000 description 1
- ALQNAINCHNBUOD-HKOYGPOVSA-N (e)-8-[7-hydroxy-2-[2-(6-hydroxy-3,5,6-trimethyloxan-2-yl)-9-(5-methoxy-6-methyloxan-2-yl)oxy-4,10-dimethyl-1,6-dioxaspiro[4.5]decan-7-yl]-2,8-dimethyl-1,10-dioxaspiro[4.5]decan-9-yl]-2,4,6-trimethyl-5-oxonon-6-enoic acid Chemical compound O1C(C)C(OC)CCC1OC1C(C)C2(C(CC(O2)C2C(CC(C)C(C)(O)O2)C)C)OC(C2(C)OC3(OC(C(C)C(O)C3)C(C)\C=C(/C)C(=O)C(C)CC(C)C(O)=O)CC2)C1 ALQNAINCHNBUOD-HKOYGPOVSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- YNYXSFRHEOMCNV-UHFFFAOYSA-N 2,3,5-triphenyl-1h-tetrazol-1-ium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Cl-].[NH2+]1N(C=2C=CC=CC=2)N(C=2C=CC=CC=2)N=C1C1=CC=CC=C1 YNYXSFRHEOMCNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 241000203809 Actinomycetales Species 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007087 Apium graveolens Species 0.000 description 1
- 235000015849 Apium graveolens Dulce Group Nutrition 0.000 description 1
- 235000010591 Appio Nutrition 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 1
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001430190 Eggerthia catenaformis Species 0.000 description 1
- 241000223931 Eimeria acervulina Species 0.000 description 1
- 241000499566 Eimeria brunetti Species 0.000 description 1
- 241000223934 Eimeria maxima Species 0.000 description 1
- 241000179199 Eimeria mitis Species 0.000 description 1
- 241000530449 Eimeria mivati Species 0.000 description 1
- 241000499563 Eimeria necatrix Species 0.000 description 1
- 241000499544 Eimeria praecox Species 0.000 description 1
- 241000223932 Eimeria tenella Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 244000268590 Euryale ferox Species 0.000 description 1
- 235000006487 Euryale ferox Nutrition 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000605909 Fusobacterium Species 0.000 description 1
- 241000605952 Fusobacterium necrophorum Species 0.000 description 1
- 241000606790 Haemophilus Species 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 241000567229 Isospora Species 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 1
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 1
- 241001293418 Mannheimia haemolytica Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N Metaphosphoric acid Chemical compound OP(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588622 Moraxella bovis Species 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JWOLLWQJKQOEOL-UHFFFAOYSA-N OOOOOOOOOOOOO Chemical compound OOOOOOOOOOOOO JWOLLWQJKQOEOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000606856 Pasteurella multocida Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 241000711850 Peptococcus sp. Species 0.000 description 1
- 239000004721 Polyphenylene oxide Substances 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 241000589970 Spirochaetales Species 0.000 description 1
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- 241000589886 Treponema Species 0.000 description 1
- 241000186064 Trueperella pyogenes Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 229910001860 alkaline earth metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L barium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ba+2] RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001863 barium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020197 coconut milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002038 ethyl acetate fraction Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000001030 gas--liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000009422 growth inhibiting effect Effects 0.000 description 1
- LVASCWIMLIKXLA-LSDHHAIUSA-N halofuginone Chemical compound O[C@@H]1CCCN[C@H]1CC(=O)CN1C(=O)C2=CC(Cl)=C(Br)C=C2N=C1 LVASCWIMLIKXLA-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 229950010152 halofuginone Drugs 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- KELXKDDAALYTDI-BTVCFUMJSA-N nitric acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound O[N+]([O-])=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O KELXKDDAALYTDI-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 229940051027 pasteurella multocida Drugs 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920000570 polyether Polymers 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 150000004728 pyruvic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 208000012153 swine disease Diseases 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 239000001052 yellow pigment Substances 0.000 description 1
- 239000011667 zinc carbonate Substances 0.000 description 1
- 235000004416 zinc carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000010 zinc carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/01—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing oxygen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/195—Antibiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/445—The saccharide radical is condensed with a heterocyclic radical, e.g. everninomycin, papulacandin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Virology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Hematology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
Description
1 78118
Menetelmä 19-de£Hetrahydro-5-metoksi-6-metyyli-2H-pyran-2-yyli) oksi/-15-£'(tetrahydro-5-metoksi-6-metyyli-2H-pyran-2-yyli)oksijdianemysiiniantibiootin CP-63517 ja sen katio-nisuolan valmistamiseksi 5
Keksinnön kohteena on menetelmä antibiootin valmis-tamiseiksi, joka on 19-de/1[tetrahydro-5-metoksi-6-metyyli-2H-pyran-2-yyli)oksijtetrahydro-5-metoksi-6-metyyli-2H-pyran-2-yyli)oksi7dianemysiini ja jolla on kaava I
10 7.
OMe (^V»e 11 ’ y 0
36 OH J
15 *5 f f 3li Me £ «e 3 M 7 la A btA f C 1/ΠΛ / / Λ co2««1 «e ^ H ffH " J\° 2 0 OH 2 jossa Me on metyyli, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän kationi-suolan valmistamiseksi.
Uusi kaavan (I) mukainen antibiootti on nimetty CP-63517:ksi ja se on eristetty Streptomyces-sukuun kuulu- 25 van uuden kannan fermentoinnista, joka kanta on eristetty maaperänäytteestä, joka on kerätty Okayaman hallintoalueelta Japanista ja jolle on annettu koodinumero N497-34. Rakenteellisesti tämä uusi antibiootti on happamien polysyklisten eetteri (ionofori)-antibioottien uusi jäsen.
30 Tämä antibioottien ryhmä käsittää dianemysiinin Π5. Antibiotics, 22, 161 (1967)7 ja ibid., 33, 137 (1980); monen-siinin £J. Amer. Chem. Soc, 89, 5737 (1967)7; salinomysii-nin £r. Antibiotics, 27, 814 (1974)7; antibiootin TM-531, joka on esitetty US-patentissa 4 269 971 ja antibiootin 35 53 607, joka on esitetty US-patentissa 4 361 649.
2 781 1 8
Uusi kaavan (I) mukainen hapan polysyklinen eetteri-antibiootti CP-63517 sekä sen farmaseuttisesti hyväksyttävät kationi-suolat ovat aktiivisia useita eri mikro-organismeja vastaan ja ovat tehokkaita kokkidioosin, suolitulehduk-5 sen, sian punataudin ja teilerioosin torjunnassa ja ovat samoin tehokkaita kasvun edistäjinä sioille ja märehtijöille; sekä edistämään rehun hyödyntämisen lisääntynyttä tehokkuutta sialla ja karjalla.
CP-63517 on eristetty viljelemällä uutta kantaa, jo-10 ka on eristetty maaperänäytteestä, joka on kerätty Okayaman hallintoalueelta, Japanissa. Tämä kanta nimettiin N497-34:ksi ja se on tunnistettu Streptomyces endus, alalajin aureus uudeksi kannaksi. Se on nyt talletettu kokoelmaan American Type Culture Collection talletusnumerolla ATCC-39574.
15 Kaavan (I) mukaista antibioottia tuotetaan fermentoi- malla kantaa, joka on nimetty N497-34:ksi ja joka eristettiin maaperänäytteestä, joka kerättiin Okayaman hallintoalueella, Japanissa. Kannan N497-34 karakterisoi ja identifioi PLD. Liang H. Huang, Central Research, Pfizer Inc., 20 Groton, Connecticut, U.S.A., kuten jäljempänä selostetaan.
Tutkimuksissa kanta N497-34 tunnistettiin Strepto-myces-lajiksi rihmojen kapeiden ulottuvuuksien, ilmahuovas-ton ja ilmahuovastossa olevien ketjujen kantamien itiöiden tuottamisen perusteella.
25 Kanta N497-34 istutettiin viilloksesta ATCC no. 172- liemeen ja kasvatettiin 4 päivää 28°C:ssa ravistimella. Sitä lingottiin sitten 20 minuuttia, pestiin kolmesti steriilillä tislatulla vedellä ja istutettiin kasvualustoille, joita tavallisesti käytetään Actinomycetales-jäsenten tun-30 nistamiseen.
Viljelmää inkuboitiin 28°C:ssa ja tulokset luettiin vaihtelevina ajankohtina, mutta tavallisimmin ne otettiin 14 päivän aikana. Värit selostettiin tavallisessa terminologiassa, mutta tarkat värit määritettiin vertailemalla 35 niitä käsikirjan Color Harmony Manual, 4. painos värisuika-leisiin. Menetelmät kokosolu-aminohappo- ja sokerianalyy- 3 78118 sejä varten on kuvattu julkaisuissa Becker et ai., Appi. Microbiol., 12, 421-423 (1964); ja Lechevalier J. Lab.
Clin. Med., 71, 934-944 (1968). Vertailua varten saatiin Streptomyces endus alalaji aureus NRRL 12174 tutkimuskes-5 kuksesta Northern Regional Research Center (NRRC), U.S.D.A., Peoria, Illinois.
Identifiointialustat, joita käytettiin viljelmän karakterisointiin ja viitteet niiden koostumuksesta ovat seuraavat: 10 1. Tryptoni-hiivauuteliemi - (ISP Φ=Φ 1 alusta, Difco) .
2. Hiivauute-mallasuute-agar - (ISP ΦΦ 2 alusta, Difco).
3. Kaurajauho-agar - (ISP ΦΦ 3 alusta, Difco).
4. Epäorgaaniset suolat-tärkkelys-agar - (ISP ΦΦ 4 alusta, Difco).
15 5. Glyseroli-asparagiini-agar - (ISP φφ 5 alusta, Difco).
6. Peptoni-hiivauute-rauta-agar - (ISP φφ 6 alusta,
Difco).
7. Czapek-sakkaroosi-agar - S.A. Waksman, The Actinomy-cetes, Voi. 2, alusta no 1, s. 328, 1961.
20 8. Glukoosi-asparagiini-agar - Ibid, alusta no 2, s. 328.
9. Bennettin agar - Ibid, alusta no 30, s. 331.
10. Emersonin agar - Ibid, alusta no 28, s. 331.
11. Ravintoaine-agar - Ibid, alusta no 14, s. 330.
12. Gorgonin ja Smithin tyrosiini-agar - R. E. Gordon 25 ja M. M. Smith, J. Bact., 69, 147-150 (1955).
13. Kaseiini-agar - Ibid.
14. Kalsiummalaatti-agar - S.A. Waskman, Bact. Rev., 21, 1-29 (1957).
15. Gelatiini - R. E. Gordon ja J. M. Mihm, Bact., 30 23, 15-27 (1957).
16. Tärkkelys - Ibid.
17. Orgaaninen nitraatti-liemi - Ibid.
18. Dekstroosi-nitraatti-liemi - S.A. Waksman, The Ac-tinomyeetes, Voi. 2, alusta no 1, s. 238, 1961, 35 jossa 30 g sakkaroosia on korvattu 3 g:11a dekstroo- sia ja agar on jätetty pois.
4 78118 19. Peruna-porkkana-agar - M. P. Lechevalier, J^_ Lab.
and Clinical Med., 71, 934-944 (1968), mutta käyttäen ainoastaan 30 g perunaa, 2,5 g porkkanaa ja 20 g agaria.
5 20. 2 % vesijohtovesi-agar.
21. Kuorittu maito - Difco.
22. Selluloosan hyödyntäminen - a) H. L. Jensen, Proc. Linn. Soc. N.S.W. 55,231-248 (1930) .
10 b) M. Levine ja H. W. Schoenlein, A Compilation of
Culture media, alusta no 2511, 1930.
23. Hiilihydraatit - ISP φφ 9 alusta, Difco.
24. Lämpötila-alue - ISP ΦΦ 2 alusta plus 50 ml kookos- pähkinämaitoa litraa kohti alustaa.
15 Viljelmällä N497-34 oli seuraavat tunnusominaisuudet, jolloin värit ja kokosoluaminohappo- ja sokerianalyysit on määritetty edellä mainituilla menetelmillä.
Hiivauute-mallasuute-agar - hyvä kasvu, valkoinen, vaaleankeltaisesta vaalean punaharmaaseen (lea, 1 1/2 ca, 20 lähellä harmaata sarjaa 3dc, 5dc, 5fe), kohonnut, poimuttu-nut, ilmahuovasto sama kuin pinta; kääntöpuoli ruskea (2pg, 3ne); liukoinen pigmentti kellertävän ruskea (21c, 3nc) .
Kaurajauho-agar - kasvu kohtalaisesta hyvään, harmahtava, harmaasta vaaleanpunaiseen harmaaseen (lähellä 25 harmaata sarjaa 3fe, 5fe, 7fe, 7ih), lievästi kohonnut, sileä, sametin hieno, ilmahuovasto sama kuin pinta; kääntöpuoli vaaleankeltaisesta (2ca) harmaaseen (lähellä harmaata sarjaa 3dc, 3fe); liukoinen pigmentti vaaleankeller-tävästä kellertävään (1 l/2ea, 1 1/2 ga).
30 Epäorgaaniset suolat - tärkkelys-agar - kasvu kohta laisesta hyvään, valkean keltaisesta vaaleaan punaharmaaseen (1 l/2ca, lähellä harmaata sarjaa lba, 5fe, 7fe, 7ih), kohonnut, poimuttunut, ilmahuovasto sama kuin pinta; kääntöpuoli kellertävästä punaharmaaseen (1 l/2ga, lähellä har-35 maata sarjaa 5fe); liukoinen pigmentti kellertävä (1 l/2ga, 1 l/2ea).
5 78118
Glyseroli-asparaqiini-agar - kasvu huonosta kohtuulliseen, harmahtava (lähellä harmaata sarjaa 2ba), ohut, tasainen tai esiintyy eristettyinä pesäkkeinä, ilmahuovasto harmahtava; kääntöpuoli värittömästä vaaleaan kellertävään 5 (1 l/2ca); ei liukoista pigmenttiä.
Czapek-sakkaroosi-agar - kasvu kohtalainen, vaalean harmahtava (lähellä 1 l/2ca, lähellä harmaata sarjaa 2cb), ohut, tasainen, pyöreitä tai käyriä viivoja, ei ilmahuovas-toa; kääntöpuoli kermanvärinen (1 l/2ca); liukoinen pigmentit) ti kermanvärinen (1 l/2ca).
Glukoosi-asparagiini-agar - kasvu hyvä, harmaa vaalean punaharmaasta (lähellä harmaata sarjaa 3fe, 5fe) kellertävään (lea, lga), kohtuullisesti kohonnut, poimuttunut tai rakeinen, ilmahuovasto sama kuin pinta; kääntöpuoli kel-15 lertävän harmaasta harmaaseen (2gc, 2ge, lähellä harmaata sarjaa 3fe, 3ih); liukoinen pigmentti kellertävä (1 l/2ia, 1 l/21a).
Gordonin ja Smithin tyrosiini-aqar - kasvu kohtuullinen, harmahtava (lähellä harmaata sarjaa 2ba), kohtuulli-20 sesti kohonnut, poimuttunut, tai esiintyy eristettyinä pesäkkeinä, ilmahuovasto harmahtava; kääntöpuoli vaaleankeltainen 1 l/2ca, 1 l/2ea); liukoinen pigmentti vaaleankeltainen (2ea) .
Kalsiummalaatti-agar - kasvu kohtuullinen, valkoi-25 sesta harmahtavaan (lähellä harmaata sarjaa lba), ohut, tasainen tai esiintyy eristettyinä pesäkkeinä; ilmahuovasto hajanainen valkoisesta harmahtavaan; kääntöpuoli kermanvärinen (1 l/2ca); liukoinen pigmentti kermanvärinen (1 1/2ca).
30 Kaseiini-agar - kasvu hyvä, valkoisesta vaalean har mahtavan kermanväriseen (lähellä 2ec, 3ec), kohtuullisesti kohonnut, hienosti rypyttynyt, ei ilmahuovastoa; kääntöpuoli vaaleanlaventelinsininen (3ec); liukoinen pigmentti vaaleanlaventelinsininen (4ec).
6 78118
Bennettin agar - kasvu hyvä, valkoinen, vaaleankeltaisesta vaaleanpunaharmaaseen (lea, lähellä harmaata sarjaa 5fe, 7fe, 7ih), kohonnut, poimuttunut, ilmahuovasto sama kuin pinta; kääntöpuoli laventelinsiniharmaa (4ig, 4li, 5 5ig, 51i) ; liukoinen pigmentti kellertävä (1 l/2na) .
Emersonin-agar - kasvu hyvä, valkoisesta harmahtavaan, kohonnut, poimuttunut tai esiintyy eristettyinä pesäkkeinä, joissa valkoisesta harmahtavaan ilmahuovasto; kääntöpuoli kellertävän ruskea (2ea, 21c); liukoinen pigmentti ruskea (31c).
10 Ravintoaine-agar - kasvu kohtuullinen, valkoinen, poimuttunut, kohonnut tai esiintyy eristettyinä pesäkkeinä, ilmahuovasto valkoinen; kääntöpuoli kermanvärinen (1 l/2ca); ei liukoista pigmenttiä.
Gelatiini-agar - kasvu hyvä, valkoisesta kermanväri-15 seen (1 l/2ca), kohtuullisesti kohonnut, poimuttunut, ilmahuovasto valkoinen; kääntöpuoli kermanvärinen (2ca); ei liukoista pigmenttiä.
Tärkkelys-agar - kasvu hyvä, valkoinen, kohonnut, poimuttunut, ilmahuovasto valkoinen, kääntöpuoli vaalean-20 kellertävästä kellertävän ruskeaan .(2ea, 2ic); liukoinen pigmentti kermanvärinen (2ca).
Peruna-porkkana-agar - kasvu kohtuullinen, harmaasta vaaleanharmaaseen (lähellä harmaata sarjaa 3fe, 5fe, 7fe, 7ih), sametin hieno, kohonnut keskustasta mutta ohut reunaa kohti; 25 tasainen, ilmahuovasto sama kuin pinta; kääntöpuoli vaalean-punaharmaa (lähellä harmaata sarjaa 5fe, 5ih); liukoinen pigmentti kermanvärinen (1 l/2ca).
Vesijohtovesi-agar kasvu kohtuullisesta hyvään, harmaasta vaaleanpunaharmaaseen (lähellä harmaata sarjaa 30 3fe, 5fe, 5ih); esiintyy kohonneina, eristettyinä sametin hienoina pesäkkeinä; ilmahuovasto harmaasta vaaleanpunaharmaaseen; kääntöpuoli harmaasta tummanharmaaseen (lähellä harmaata sarjaa 5ih, 3ih, 3ml); ei liukoista pigmenttiä.
Morfologiset ominaisuudet - morfologisia ominaisuuksia 35 tarkkailtiin kaurajauho-agarilla 14 päivää inkuboinnin jäi- I: 7 7 81 1 8 keen: itiömassa Harmaan värisarjassa; sporoforit yksijalkai-sesti haarautuneet; itiöketjut kierukkamaisia, joilla on pieni läpimitta (3-4^um), lievästi avoin, 3-7 kierrosta itiöketjua kohti, 10-50 itiötä itiöketjua kohti; itiö lyhyt 5 sauvan muotoinen, joskus pallomainen, munan muotoinen tai elliptinen, suora tai lievästi käyristynyt, jolloin joillakin lievästi käyristyneistä on epäyhdensuuntaiset päät ja näyttävät siten viisikulmaisilta, läpimitta 1,0-1,8 x 0,9- 1,2 ^im tai 0,9-1,2 yum; nystyräinen tarkasteltuna pyyhkäi-10 syelektronimikroskoopilla.
Biokemialliset ominaisuudet - melaniinia ei muodostu; rikkivetyä muodostuu; gelatiini nesteytyy; tärkkelys hydrolysoituu; nitraatti pelkistyy nitriitiksi; hyvä kasvu Levinen ja Schoenleinin selluloosa-liemellä mutta huono 15 kasvu Jensenin selluloosa-liemellä; ei hajoamista kummallakaan selluloosa-liemellä; koaguloiminen ja selkeytyminen maidolla; kaseiini-uutto positiivinen; kalsiummalaatti-uutto positiivinen; tyrosiini-uutto negatiivinen; hiilihydraatin hyväksikäyttö: glukoosi, arabinoosi, fruktoosi, inositoli, 20 mannitoli, raffinoosi, ramnoosi, sakkaroosi ja ksyloosi kaikki hyödynnettäviä.
Lämpötilasuhteet -
21°C 28°C 37°C 45°C
25 hyvä kasvu erinomainen kasvu hyvä kasvu kohtuullinen kasvu
Viljelmän N497-34 soluseinä-analyyseissä havaittiin, että kokosolu-hydrolysaatit sisältävät LL-diaminopimeliini-happoa mutta ei luonteenomaisia sokereita. Viljelmä N497-34 on tunnettu itiöiden harmaasta väristä massassa, negatiivisesta 30 melaniini-reaktiosta, kierukkamaisista itiöketjuista ja itiöistä, joilla on nystyräinen pinta. Nämä ominaisuuspiirteet ja kokosolu-analyysien tulokset sijoittavat viljelmän Streptomyces-sukuun. Verrattuna .tunnettujen Streptomyces-lajien selostuksiin, joita kirjallisuudessa on esitetty, se 35 muistuttaa läheisesti endus Anderson & Gottlieb alalajia 8 78118 aereus Tomita, Nakano, Sato, Shirahata, Yoshida & Morimoto NRRL 12174, kuten on selostettu Japan Kokai Tokyo Kohotssa 57-4975, julkaistu 11.1.1982. Jälkimmäinen saatiin NRRL:sta ja sitä verrattiin sivu sivulta N497-34-ään. Lukuunottamat-5 ta sitä tosiasiaa, että N497-34, mutta ei NRRL 12174, kasvaa 45°C:ssa ja koaguloi maidon, kummallakin viljelmällä on samat biokemialliset ja fysiologiset ominaisuudet. ISP φφ 2 alustalla, ISP ΦΦ 4 alustalla ja Bennettin agarilla kannan N497-34 viljely tuottaa vaalean punaharmaamman ilma-10 huovaston ilman keltaista tihkuvaa nestettä; sen pesäkkeet ISP φφ 5 alustalla ja ravintoaine-agarilla ovat pienempiä; sen pesäkkeillä Czapek-sakkaroosi-agarilla on kermanvärisiä viivoja tai ympyröitä; sen pesäkkeet glukoosi-asparagiinil-la ovat vaalean punaharmaita mieluummin kuin valkeasta ker-15 manväriseen ja tuottavat keltaista pigmenttiä mieluummin kuin ei ollenkaan liukoista pigmenttiä. Nämä viljelykselli-set vaihtelut ovat vähäisiä ja niitä voi esiintyä Strepto-myces-lajien eri kantojen joukossa. Kanta N497-34 katsotaan sentähden uudeksi Streptomyces endus Anderson & Gottlieb 20 alalajiksi aureus Tomita, Nakano, Sato, Shirahata, Yoshida & Morimoto. Se on talletettu 10.1.1984 kokoelmaan American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, U.S.A. Budapestin sopimuksen mukaisesti talletusnumerolla ATCC 39574. Talletetun kannan N497-34 25 pysyvyys American Type Culture Collection'issa on taattu jokaisen tämän hakemuksen perusteella myönnetyn patentin voimassaoloajan; kannasta N497-34 saavat näytteitä tämän hakemuksen vireilläolon aikana Commissioner of Patent and Trademarks'in määräämä henkilösäännösten 35 USC 122 ja 30 37 CFR 1.14 perusteella; ja kaikki rajoitukset talletetun kannan käytettävissäolosta poistetaan peruuttamattomasti patentin myöntämisen jälkeen tälle hakemukselle.
Kaavan (I) mukaista uutta antibioottia saadaan fer-mentoimalla Streptomyces endus alalajin aureus uutta kan-35 taa, ATCC-39574, ja uuttamalla täyslientä luonnollisessa 9 781 1 8 pH:ssa metyyli-isobutyyliketonilla ja väkevöimällä liuotin viskoosiksi öljyksi, öljy suspendoitiin heptaaniin ja panosta käsiteltiin silikageelillä. Silikageelikakkua elu-oitiin kloroformilla, kloroformi/etyyliasetaatilla, etyy-5 liasetaatilla ja etyyliasetaatti/asetonilla. Väkevöimisen jälkeen etyyliasetaatti-jae antoi pienen määrän raakaa tuotetta, josta antibiootti CP-63517 kiteytettiin natrium/ka-lium-sekasuolana.
Streptomyces endus alalajia aureus ATCC-39574 voi-10 daan kasvattaa lämpötilassa 24-36°C uppo-olosuhteissa sekoittaen ja ilmastaen alustoilla, jotka sisältävät hiili-hydraattilähteitä, kuten sokereita, tärkkelystä, glyserolia; orgaanisia typpi-aineita, kuten soijapapujauhoa, kasa-minohappoja, hiivauutetta; kasvuainetta, kuten liukoisia 15 jyväosia, kalajauhoa, puuvillansiemenjauhoa; mineraalisuo-loja, jotka sisältävät hivenaineita, kuten rautaa, kobolttia, kuparia, sinkkiä ja kalsiumkarbonaattia tai fosfaatteja puskureina. Antibiootti voidaan ottaa talteen uuttamalla täyslientä erilaisilla orgaanisilla liuottimilla, 20 esim. n-butanolilla, metyyli-isobutyyliketonilla tai kloroformilla pH:ssa alueella 4,0-8,0, tai erottamalla huo-vasto kasvun loputtua ja uuttamalla huovasto; jolloin suo-dos hylätään. Uute väkevöidään ohueksi siirapiksi, liuotetaan heptaaniin, esimerkiksi, ja kromatografoidaan silika-25 geelillä antamaan puhdas yhdiste.
Ymppi valmistetaan kaapimalla kasvullisia soluja viilloista tai Roux-pulloista, jotka on ympätty ATCC-39574-viljelmällä. Kiinteä alusta, joka sopii alkukasvua varten viilloilla ja Roux-pulloissa on ATCC alusta no. 172.
10 781 1 8 ATCC 172
Aineosa Grammaa/litra 5 glukoosi 10 liukoinen tärkkelys 20 hiivauute 5 B* NZ Amme A 1 kalsiumkarbonaatti 1 10 tislattua vettä 1000 mlrksi; pH 7,0:ksi KOH:lla lisäagar 20 * Rekisteröity tavaramerkki kaseiinin entsymaattiselle uutteelle, Humko Sheffield Chemical Co., Inc.
Kasvullisia soluja viilloista käytetään joko ravis-15 tuspullojen tai ymppisäiliöiden ymppäämiseen; tai vaihtoehtoisesti ymppisäiliöt ympätään ravistuspulloista. Ravistus-pulloissa kasvu on yleensä saavuttanut maksiminsa 96-120 tunnissa, kun taas ymppisäiliöissä kasvu on tavallisesti edullisimmassa vaiheessaan 72-96 tunnissa. Fermenttori ympä-20 tään vegetatiivisella liemellä ymppipulloista tai -säiliöstä täysin aseptisissa olosuhteissa ja fermentoidaan 48-120 tuntia. Ilmastus ylläpidetään ravistuspulloissa sekoittamalla ravistimella tai säiliöissä pakottamalla steriiliä ilmaa suihkuttimen läpi määrässä 1/2-2 tilavuutta ilmaa tilavuut-25 ta kohti lientä/minuutti. Sekoitusnopeus riippuu käytetystä sekoitintyypistä? ravistuspulloa ravistellaan tavallisesti 150-200 syklillä/min (CPM) ja fermenttoria pyöritetään 300-1700 kierroksella/min (RPM). Steriilisyys täytyy ylläpitää koko ajan. Lämpötila säädetään välille 28-36°C. Vaahtoa-30 mistä fermentoinnin aikana voidaan hillitä steriileillä vaahtoamisenestoaineilla, esim. puhdistetulla soijaöljyllä tai muulla sopivalla vaahtoamisenestoaineella, jota on lisätty valmistukseen tai fermenttoriin aseptisesti tarpeen mukaan ymppäämisen jälkeen.
35 Ravistuspulloja valmistetaan käyttäen jompaakumpaa seuraavista alustoista: n 78118
CL13MZ
Aineosa Grammaa/litra glukoosi 20 soijajauho _ 10 (S) * 5 NZ Amine YTT^ 5 natriumsulfaatti 0^5 kobolttikloridi 0,002 kalsiumkarbonaatti 2 vettä 1 litraksi, pH 6,9-7,0 10
JDY TT
Aineosa Grammaa/litra
Cerelose® 10 maissitärkkelys 5 15 maissin liotusliemi 5 NZ Amine ΥΤΊ® * 5 kobolttikloridi 0,002 kalsiumkarbonaatti 3 vettä 1 litraks i pH 6,9-7,0 20 ♦Rekisteröity tavaramerkki kaseiinin entsymaattiselle uutteelle, Humko Sheffield Co., Inc.
100 ml alustaa jaetaan 300 ml:n ravistuspulloihin ja steriloidaan 120°C:ssa ja 103 kPa:n (15 p.s.i.) painees-25 sa 30 minuuttia. Jäähdyttämisen jälkeen alusta ympätään kasvullisella solususpensiolla S.endus alalajin aureus viilto-viljelystä ATCC-39574, joka on kasvatettu ATCC 172 alustalla agarissa. Pulloja ravistellaan 28°C:ssa pyörivällä ravistimella, jonka iskun pituus on 3,8-5,1 cm 30 (1,5-2,5 tuumaa) ja taajuus 150-200 CPM, 3-4 päivää. Yhdel lä pullolla ympätään viiden litran fermentoimisastia, joka sisältää 3 litraa yhtä seuraavista alustoista: CN-2 (seuraavassa), tai CL13MZ tai JDY TT (edellä).
i2 781 1 8
Aineosa ~ Grammaa/litra
Cerelose® 10 maissitärkkelys 10 soijajauho 10 5 NZ Amine γττ 10 kobolttikloridi 0,002 kalsiumkarbonaatti 1 *Rekisteröity tavaramerkki kaseiinin entsymaattiselle uutteelle, Humko Sheffield Co., Inc.
10 Lisättiin yksi millilitra vaahtoamisenestoainetta, sitten astiat suljettiin ja steriloitiin 120°C:ssa ja 103 kPa:n (15 p.s.i.) paineessa 45 minuuttia.. Astiat ympättiin yhdellä (n. 3 % ymppiä) pullolla, fermentoi-tiin 96-144 tuntia 33°C:ssa, sekoitettiin kierrosluvulla 15 1700 RPM ilmamäärällä yksi tilavuus ilmaa/tilavuus nes- tettä/minuutti.
Kun fermentointi oli loppuunsuoritettu (antibiootti-levyanalyysin perusteella B. subtilis ATCC 6633 vastaan), fermenttorit pysäytettiin, suodatettiin luonnollisessa 20 pH:ssa suodatuksen apuaineen, esimerkiksi, Celiterf** avulla. Suodatuskakku lietettiin metanoliin, väkevöitiin tyhjössä, laimennettiin 2-3 tilavuudella vettä,uutettiin sitten kahdesti 1/3-1/2 tilavuudella veden kanssa sekoittumatonta liuotinta kuten metyyli-isobutyyliketonia tai n-butanolia.
25 Liuotinkerros erotettiin vesipitoisesta faasista imemällä tai linkoamalla, suodatettiin ja suodos väkevöitiin tyhjössä viskoosiksi öljyksi.
Liemen bioaktiivisuutta ja myöhempiä talteenottovir-toja voidaan seurata käyttämällä herkkää Bacillus subtilis 30 ATCC 6633- tai Staphylococcus aureus ATCC 6538-kantaa. Komponentit liemessä ja talteenottovirroissa voidaan tehdä näkyviksi ohutkerroskromatografiällä (tie) käyttäen silika-geeli-levyjä /?'Silica gel G" (70-230M ASTM) E. Merc^7 puhtaassa etyyliasetaatissa. Kehitettyjä levyjä suihkutetaan 35 vanilliinireagenssilla (3 g vanilliinia 75 ml:ssa etanolia ja 25 ml:ssa 85-%:ista fosforihappoa) ja kuumennetaan I: 13 7 81 1 8 80°C:seen. Antibiootti CP-63517 näkyy vihertävänä täplänä. Kehitetty tlc-levy voidaan myös päällystää agarilla, joka on ympätty joko S. aureuksella tai B. subtiliksella, johon on lisätty tetratsolium-väriainetta, joka on 98-%:inen 5 2,3,5-trifenyyli-2H-tetratsoliumkloridimonohydraatti, (Al drich Chemical Co., Inc. T-8485-9), ja inkuboitu 37°C:ssa 16 tuntia antibiootin tekemiseksi näkyväksi (valkoinen vaaleanpunaista taustaa vastaan).
Mittakaavan suurentaminen isoissa fermenttoreissa 10 suoritettiin valmistamalla ravistuspulloja, jotka sisältävät 0,7 litraa CL13MZ- tai JDY TT-alustaa. Ravistuspullo-ymppiä fermentoitiin 3-5 päivää 28°C:ssa ja käytettiin 190 tai 6540 litran (50 tai 1700 gallonan) fermenttorin ymp-päämiseen, joka sisälsi 96 tai 4600 1 (25 tai 1200 gallonaa) 15 JDY TT-alustaa. Säiliöissä käytettiin n. yksi litra ymppiä. Fermenttorin sisältö korjattiin talteen 5-7 päivän fermen-toinnin jälkeen, sisältöä saatiin n. 96 tai 4230 litraa (n. 25 tai 1100 gallonaa), vastaavasti. Koko liemi uutettiin 1/5 tilavuudella metyyli-isobutyyliketonia luonnolli-20 sessa pH:ssa, erotettiin Alpha DeLaval-separaattorilla tai Podbielniak-uuttolaitteella ja liuotin väkevöitiin tyhjössä öljyksi, öljy väkevöitiin edelleen siirapiksi, joka sus-pendoitiin heptaaniin, sekoitettiin silikageelin kanssa, suodatettiin patjan läpi, jossa oli silikageeliä ja pestyä 25 geeliä, ja pestiin toistuvasti heptaanilla. Antibiootti eluoitiin vaiheittain kloroformilla, kloroformi/etyyliase-taatilla, etyyliasetaatilla ja lopuksi 50 % asetonia sisältävällä etyyliasetaatilla. Eluointia seurasi ohutkerros-kromatografia ja jakeiden bioanalyysi. Aktiiviset jakeet 30 yhdistettiin, väkevöitiin ja kromatografoitiin uudelleen antibiootin CP-63517 eristämiseksi. Aktiivisten eluaattien vieminen rakeisen hiilipylvään läpi poisti häiritsevät ainekset ja paransi talteenottoa niin, että kiteinen CP-63517 saatiin talteenotetuksi.
14 781 1 8
Kaavan (I) mukainen antibiootti-yhdiste on hapan ja se muodostaa kationi-suoloja reaktiolla emäksisten aineiden kanssa. Kaikki tällaiset suolat kuuluvat tämän keksinnön piiriin. Näitä suoloja valmistetaan tavanomaisin, 5 polyeetteri (ionofori)-antibiootteihin sovellettavin menetelmin. Eräässä menetelmässä kaavan (I) yhdisteen liuosta haihtuvassa, veden kanssa sekoittumattomassa, orgaanisessa liuottimessa pestään vesipitoisella liuoksella, joka sisältää ainakin stökiometrisesti ekvivalentin määrän, ja edul-10 lisesti suuren ylimäärän, sopivaa emäksistä ainetta. Orgaanisen liuotinliuoksen kuivaamisen jälkeen se haihdutetaan tyhjössä antamaan haluttu kationi-suola. Tyypillisiä emäksiä, joita voidaan käyttää tähän tarkoitukseen, ovat alka-limetallihydroksidit, kuten natriumhydroksidi ja kaliumhyd-15 roksidi, maa-alkalimetallihydroksidit, kuten kalsiumhydrok-sidi ja bariumhydroksidi, sekä ammoniumhydroksidi.
Antibiootilla CP-63517 on eräiden gram-positiivisten mikro-organismien kasvua estävä vaikutus. Tulokset in vitro MIC-testeistä on koottu seuraavaan taulukkoon I. Tätä 20 testiä varten kukin organismi ympätään sarjaan CP-63517:ää sisältäviä koeputkia antibiootin vähimmäispitoisuuden määrittämiseksi, joka estää organismin kasvun 24 tunnin ajaksi (MIC) yksikköinä yug/ml.
Sian punatauti on yksi Yhdysvalloissa tavallisimmin 26 määritetyistä sikataudeista. Lisäksi tämä tauti on vallitseva monissa muissa maissa ja se aiheuttaa sikojen kasvattajille vuosittain kymmenientuhansien markkojen tappioita kautta maailman. Äskettäin on havaittu, että eräs suuri spirokeetta on tämän taudin aiheuttava organismi. Tämä or-30 ganismi Treponema hyodysenteriae on nyt eristetty ja sen on osoitettu pystyvän aiheuttamaan tämän taudin ^Harris, D. L. et ai.: "Swine Dysentery-1 Inoculation of Pigs with Treponema hyodysenteriae (New Species) and Reproduction of the Disease", Vet. Med/SAC, 67: 61-64: 19727. Tämän 35 jälkeen esitetyt testiarvot koskevat testejä, jotka suori- li 15 781 1 8 tettiin tällä organismilla. On huomattava, että ei tiedetä, onko T. hyödysenteriae ainoa sian punataudin aiheuttava organismi. Käytettävissä olevista tiedoista voidaan kuitenkin päätellä, että se on infektion ensisijainen lähde.
16 78118
Taulukko I
CP-63517
Organismi MIC ^ig/ml
Staphylococcus aureus 01AQ05 0,39 01A052 0,39 5 01A110 0,39 01A106 0,78 01A539 0,78 01A543 3,12
Staphylococcus epidermidis 01B087 0,78 10 01B111 0,39
Streptococcus pyogenes 020054 0,10
Erysip. rhusio 04A005 0,39
Lactobacillus casei .09B001 0,39 L. catenaforme 09C001 0,39 15 Corynebacterium pyogenes 11D001 12,5 11D002 12,5 11D003 12,5
Peptococcus sp. 17B001 <0,10
Haemophilus parahemol. 54B002 25 20 Pasteurella multocida 59A013 50 59A048 0,39 P. haemolytica 59B018 0,39 59B046 0,39 59B061 50 25 Bordatella bronchi 73A006 0,39 73A016 6,25
Bacteroides vulgates 78E032 25
Fusobacterium plauti 84G001 0,39 F. necrophorum 84C004 25 30 Moraxella bovis 93A0Q1 50
Treponema hyodysenteriae 94A001 6,25 94A002 6,25 17 781 1 8
Hyvin tunnettu alkueläintauti, kokkidioosi, on jatkuvasti vakava ongelma ja sen torjunta on taloudellisesti tärkeä eläinlääketieteelle, erityisesti siipikarjateolli-suudelle. Kokkidioosi on seuraus yhden tai useamman Eime-5 ria- tai Isospora-lajin aiheuttamasta infektiosta (yhteenvetoa varten, ks. Lund ja Farr julkaisussa "Disease of Poultry", 5. painos, Biester ja Schwarte, toimittajia,
Iowa State University Press, Ames, Ia., 1965, sivut 1056-1096). On olemassa kuusi kokkidi-lajia, jotka aikaan-10 saavat helposti erotettavaa tautisuutta herkissä kananpojissa. Eimeria tenella.E. necatrix, E. brunetti, E. acer-vulina, E. maxima ja E. mivati aiheuttavat tuhoa joko suoraan hajottamalla ruoansulatuskanavan epiteeli-soluja tai epäsuorasti myrkkyjä tuottamalla. Kolmen muun alkueläinla-15 jin, jotka kuuluvat samaan sukuun, katsotaan olevan suhteellisen vaarattomia; kuitenkin E. mitis, E. haqani ja E. prae-cox pystyvät alentamaan painonlisäystä, alentamaan ruokinnan tehokkuutta ja vaikuttamaan vahingollisesti munan tuotantoon.
20 Antibiootilla CP-63517 ja sen kationi-suoloilla on erinomainen vaikutus kokkidi-infektiota vastaan siipikarjassa. Kun näitä yhdisteitä lisätään kananpoikien ruokavalioon 5-40 ppm, saadaan tehokkaasti torjuttua Eimeria te-nella'n ja E. acerluna'n aiheuttamia infektioita.
25 Tehokkuusarvoja antibiooteille CP-63517 ja sen suo loille kokkidi-infektioita vastaan kananpojissa saatiin seuraavalla tavalla. 10 päivän ikäisiä urospuolisia, valkoisia SPF-Leghorn-kananpoikia syötettiin 3-5 yksikön ryhmissä silppuruokavaliolla, joka sisälsi siihen tasaisesti 30 dispergoituina antibioottia CP-63517, sen natrium-ja/tai ka-liumsuolaa, tai tunnettuja aineita Monensin® tai Stenorol®. Oltuaan tällä ravinnolla 24 tuntia kukin kukonpoika ympättiin suun kautta testattavan Eimeria-erikoislaj in itiörak-kuloilla. Toisia 10 päivän ikäisiä kukonpoikia syötettiin 35 3-5 yksikön ryhmissä samanlaisella silppurehulla, joka ei 18 7 81 1 8 sisältänyt testiyhdistettä. Ne tartutettiin myös 24 tunnin kuluttua ja toimivat infektoituina kontrolleina. Lisäksi eräitä toisia 10 päivän ikäisiä kukonpoikia ruokittiin 3-5 yksikön ryhmässä silppurehulla, joka ei sisältänyt tes-5 tiyhdistettä, eikä niitä tartutettu kokkideilla. Nämä toimivat normaali kontrolleina. Käsittelyn tulokset arvioitiin viiden päivän kuluttua E. acervulina1 n tapauksessa ja muissa tapauksissa kuuden päivän kuluttua. Saadut tulokset on koottu taulukkoon II.
10 Taulukossa II käytetään seuraavia alaviitteitä: *Sulkeissa olevat luvut ovat toistotuloksia;
Monesin. ks. esim. US-patentti 3 501 568; J. Amer. Chem. Soc., 8j), 5737 (1967); Stenorol® (Halofuginone) , ks. esim. US-patentti 3 320 124.
15 "* Arvosteluperusteet, joita käytettiin kokkidin vastaisen aktiivisuuden mittaamiseen, käsittivät vammautumispisteitä 0:sta 4:ään Eimeria tenelia1 lie J.E. Lynch'in mukaan, "A New Method for the Primary Evaluation of Anticoccidial Activity", Am. J. Vet. Res. 22: 324-326 (1961): ja 0-3 20 muille lajeille, mikä perustuu arvostelusysteemin muunnokseen, jonka ovat suunnitelleet J. Johnson ja W. H. Reid, "Anticoccidial Drugs. Lesion Scoring Techniques in Battery and Floor Pen Experiments in Chicks", Exp. Parasit. 28: 30-36 (1970). Muuttumaton suhde saatiin syntymään jakamal-25 la jokaisen käsitellyn ryhmän vammautumispisteet infektoidun kontrollin vammautumispisteillä.
19 7 81 1 8 I f — n m w «o\r-oo— C m . n n n ie voor-Hcnoovoo in G :¾ 'd “j oovvofn^itsnvovooooo^Hoo ιΗ<ηνοη·σννοοονο m ττ *h m^·—»^rooooo — o o o m mmoot—voromo o H ·» n *i »* #** ·» *s «> · t» φ o o o o ooooooooo o
ä OI Λ H O O O O O
UJ oooomovooomvocM^rinpHO
OOOOOOOOOOOOOOr-IO O O O O ΟΓ'ΟΟΠΓΜίη^νΟ o 1 **»·>►#* ^ »·*>«« r ^ r· r* f« ·»
2 O O O iH iHrHOOm·—(OOO O
S4Jh '-WWW WWWWWWWWW w H y ixj ooooopnmoor^m-rcoomo h tnn-t-P ----------------
G) G - W OOOOr—(OCNOOr-HrHOOf—iCNO
O 5*5 -3 (0 .§ i s S a h aoooomoroainooooomci ^ ' <r n in h min ττ m m -n
H
(0 (0 ' c c
•*4 *H
<3 R} fj H «H
r-1 *H iH SJ D
»H iH iH > > <u o o u u c c c tt) o 1 <u oi <u υ υ o, -u +i +> e e ti Ό (0 (0 «J e 'Ti i '—4 Ή Ή *-H Ή
tä -π P U U U P
e ns (D 0) 0) 0) <U
M -T E E E E E
•H «H Ή ·Η ·Η ta cd ta ω ta p- * * r* *
r—4 C fH —H rH
m m -PO m o
I Pj C0h - M
•h tn ^ G O r) o 4J -H Ό (DC VO c w ώ i cat i 0) ,ο Ä o> o -u a -u ^ >> υ s w u w ✓ * r 20 781 1 8
Kuten taulukon I tiedot osoittavat, on kaavan (I) mukaisella antibiootilla bakteerinvastainen vaikutus joukkoa erilaisia gram-positiivisia bakteereja, kuten Staphylococcus aureus 1 tarStaphylococcus epidermidis1 ta ja Strepto-5 coccus pyogenes1 ta, vastaan. Tämä tekee kaavan (I) mukaisen yhdisteen ja sen suolat, käyttökelpoisiksi terveydenhoidollisiin tarkoituksiin, kuten käsien pesuun sekä sai-raalapintojen ja laitteiden sterilointiin.
Lisäksi kaavan (I) mukainen antibiootti on aktiivi-10 nen Treponema hyödysenteriae'ta, mikro-organismia vastaan, joka aiheuttaa punatautia sialla. Niinmuodoin kaavan (I) mukainen antibiootti on käyttökelpoinen sian punataudin torjuntaan. Tätä tarkoitusta varten kaavan (I) mukaista yhdistettä voidaan antaa sialle pelkästään, tai edullises-15 ti farmaseuttisena yhdistelmänä, jossa kaavan (I) mukainen yhdiste on sekoitettu farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan tai täyteaineen kanssa.
Kaavan (I) mukainen antibiootti ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät emässuolat lisäävät myös rehun hyödyn-20 tämisen tehokkuutta sioilla ja märehtijöillä, ts. ne toimivat kasvua edistävinä aineina. Mekanismi märehtijöiden rehujen ravinto-osan (hiilihydraattien) hyödyntämiseksi on hyvin tunnettu. Eläimen pötsissä olevat mikro-organismit hajottavat hiilihydraatteja tuottaen monosakkarideja 25 ja muuttavat sitten monosakkaridit pyruvaattiyhdisteiksi. Mikrobiologiset prosessit metaboloivat pyruvaatit muodostamaan asetaatteja, butyraatteja ja propionaatteja, jotka yhteisesti tunnetaan haihtuvina rasvahappoina (VFA). Yksityiskohtaisempaa tarkastelua varten ks. Leng kirjoitukses-30 sa "Physiology of Digestion and Metabolism in the Ruminant", Phillipson et ai., toimittajia, Oriel Press, I.
21 781 1 8
Newcastle-upon-Tyne, Englanti, 1970, sivut 408-410. VFA:n hyödyntämisen suhteellista tehokkuutta ovat tarkastelleet McCullough julkaisussa "Feedstuffs", kesäkuu 19, 1971, sivu 19; Eskeland et ai. julkaisussa J. _An. Sei., 33, 282 5 (1971); ja Church et ai. julkaisussa "Digestive Physiology and Nutrition of Ruminants" Voi. 2, 1971, sivut 622 ja 625. Vaikka asetaatteja ja butyraatteja käytetään, on propio-naattien hyväksikäyttö tehokkaampaa. Siten edullinen yhdiste stimuloi eläimet tuottamaan suuremman osuuden propionaat-10 teja hiilihydraateista lisäten siten hiilihydraattien hyväksikäytön tehokkuutta.
Eläinrehujen arvo on yleensä määritetty suoraan eläintä ruokkimalla. GB-patentissa no 1 197 826 esitetään yksityiskohtaisesti in vitro-pötsimenetelmä, jolla muutok-15 set, joita rehuissa tapahtuu mikro-organismien aiheuttamina, mitataan helpommin ja suuremmalla tarkkuudella eläin-rehuja arvioitaessa. Tämä menetelmä käsittää laitteen käytön, jossa eläinten ruoansulatusprosessit toteutetaan ja tutkitaan in vitro. Eläinrehuja, pötsiymppiä ja erilaisia 20 kasvua edistäviä aineita tuodaan laboratorioyksikköön ja poistetaan siitä huolellisesti valvotuissa olosuhteissa ja tapahtuneita muutoksia tutkitaan kriittisesti ja progressiivisesti mikro-organismien rehun kulutuksen aikana. Lisäys propionihapposisällössä pötsinesteessä osoittaa, että 25 rehukoostumuksessa oleva kasvua edistävä aine on saanut aikaan toivottavan vasteen märehtijän kokonaissuoritusky-kyyn. Muutos propionihapposisällössä ilmaistaan prosenttina propionihapposisällöstä, joka löytyy vertailupötsines-teestä. Pitkäaikaisia in vivo-ruokintatutkimuksia käytetään 30 osoittamaan luotettava vastaavuussuhde propionihappolisäyk-sen pötsinesteessä ja eläimen parantuneen suorituskyvyn välillä.
Pötsinestettä kerätään vasikasta, jolle on tehty avanne ja jota ruokitaan kaupallisella lihotusruokinnalla 35 plus heinillä. Pötsineste suodatetaan välittömästi juusto- 22 7 81 1 8 kankaan läpi ja 10 ml lisätään 50 ml:n kartiomaiseen pulloon, joka sisältää 400 mg standardisubstraattia (68 % mais-sitärkkelystä + 17 % selluloosaa + 15 % uutettua soijajauhoa) , 10 ml pH 6,8 puskuria ja testiyhdistettä. Pulloja 5 kaasutetaan happivapaalla typellä n. 2 minuuttia ja inku-boidaan täryvesihauteella 39°C:ssa n. 16 tuntia. Kaikki testit suoritetaan kolminkertaisina.
Inkuboinnin jälkeen 5 ml näytettä sekoitetaan 1 ml:n kanssa 25-%:ista metafosforihappoa. 10 minuutin kuluttua 10 lisätään 0,25 ml muurahaishappoa ja seosta lingotaan kierrosluvulla 1500 r/min 10 minuuttia. Näytteet analysoidaan kaasu-neste-kromatografiällä D. W. Kellog'in menetelmällä J. Dairy Science, 52^, 1960 (1969) . Huippukorkeudet etikka-, propioni- ja voihapolle määritetään näytteille käsittele-15 mättömistä ja käsitellyistä inkubointipulloista.
Testattaessa tällä in vitro-menetelmällä antibiootti CP-63517 aiheutti määrissä 20 ja 10 mikrogrammaa/ml 96 %:n ja vastaavasti 95 %:n nousun propionihapon tuotannossa verrattuna tähän tuotteeseen kontrolliliuoksessa il-20 man lisättyä antibioottia CP-63517. Vertailun vuoksi kau- (S) pallisesti saatava Monesin4* (toinen polysyklinen eetteri-antibiootti) aikaansai annoksella 10 yug/ml n. 20 %:n pro-pionihappolisäyksen kontrolliin verrattuna ^J. Amer. Chem. Soc., 89, 5737 (1967)7.
25 Verrattuna salinomysiiniin £3. Antibiotics, 27: 814 (1974)7» antoi antibiootti CP-63517 noin 86 %:n lisäyksen propionihappoon määrään annoksella 20 yug/ml ja noin 66 %:n lisäyksen annoksella 5 yag/ml verrattuna noin 65 %:n lisäykseen, jonka salinomysiini antoi annoksella 10 yug/ml.
30 Näiden arvojen perusteella voidaan esittää, että antibiootti CP-63517 parantaa rehun hyödyntämistä märehtijöillä, kuten karjalla ja lampailla ja yksimahaisilla eläimillä kuten sioilla ja kaniineilla. Antibioottia CP-63517 voidaan yhdistää rehukoostumuksiin vapaana happo-35 na, natriumsuolana, kaliumsuolana tai niiden seoksina. Antibiootin CP-63517 raakoja muotoja tai antibioottia sisäl- 23 78118 tävää kuivattua fermentointilientä voidaan yhdistää rehu-koostumuksiin halutun vahvuisissa pitoisuuksissa.
Seuraava esimerkki annetaan lisävalaisua varten. Esimerkki 5 Antibiootin CP-63517 eristäminen fermentoimisliemestä
Kannan ATCC-39574 fermentoinnin kokolientä (10 pulloa; kokonaistilavuus noin 25 1) uutettiin puolella tilavuudella metyyli-isobutyyliketonia. Uute haihdutettiin tyhjössä ruskeaksi öljyksi (20 g). Tämä aines kromatografoi-10 tiin 5 x 100 cm:n pylväällä, joka oli täytetty kromatogra-fia-asteisella silikageelillä etyyliasetaatissa. Pylväs kehitettiin etyyliasetaatilla virtausmäärällä 10 ml/minuutti. Otettiin 10 ml:n jakeita. Nämä jakeet tutkittiin ohutker-roskromatografiällä silikageeli-levyillä ja kehitettiin 15 etyyliasetaatissa. Levyt suihkutettiin 3-%:isella vanillii- niliuoksella, joka on tehty etanolin ja 85 % fosforihapon (3:1)-seokseen ja kuumennettiin 80°C:seen. Toivottu antibiootti CP-63517 esiintyy vihreänä täplänä näissä olosuhteissa. Jakeet, jotka sisältävät CP-63517:ää, yhdistettiin 20 (kokonaistilavuus noin 300 ml) ja sekoitettiin 15 minuuttia 2 g:n kanssa "Darco G60"-hiiltä ICI America Inc., Wilmington, Delaware 19899. Seos suodatettiin ja suodosta sekoitettiin 300 ml:n kanssa 5-%:ista natriumfosfaatti-kaksiemäksistä puskuria ja pH asetettiin 10,0:aan IN 25 NaOH:lla. Faasit erotettiin ja etyyliasetaatti kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä. Haihduttamisen jälkeen jäljelle jäänyt keltainen viskoosi öljy liuotettiin pieneen määrään asetonia, minkä jälkeen tapahtui kiteytyminen. Kiteet koottiin 30 suodattamalla ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin
800 mg CP-63517:ää natrium-suolana; sp. 215-220°C, UV
1% lambda (max.) 232 nanometriä, Elcm = 155.
Infrapunaspektri (KBr) cm 24 781 1 8 3436, 2964, 2928, 2871, 2728, 1666, 1563, 1462, 1404, 1372, 1319, 1293, 1271, 1234, 1205, 1167, 1100, 1050, 1033, 995, 980, 967, 940, 926, 902, 858, 538.
Optinen kierto: foi./D = +25° (c = 0,5 metanoli) .
5 Analyysi:
Laskettu: C47H7?014Na:lie C 63,49; H 8,89; N 0,0 Löydetty: C 62,45; H 8,61; N 0,0 CP-63517:n vapaa happomuoto valmistettiin sekoittamalla CP-63517:n kloroformi-liuosta yhtä suuren tilavuus-10 määrän kanssa vettä ja alentamalla pH 3,0:aan fosforihapol-la. Faasit erotettiin ja kloroformi haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin CP-63517:n vapaana happona, joka oli amorfinen kiinteä aine, sp. 95-105°C.
1» UV lambda (max) 232 nanometriä, E^cm = 161.
15 Infrapunaspektri (KBr) cm 3474, 2968, 2932, 2877, 1715, 1670, 1460, 1380, 1315, 1265, 1233, 1202, 1165, 1113, 1099, 1066, 1046, 1021, 987, 950, 923, 900.
Optinen kierto: /"od/D = +47,7° (c = 0,5 metanoli).
20 Analyysi:
Laskettu: C47H78°14:lie C 65,10; H 9,07; O 25,83 Löydetty: C 64,05; H 8,93; O 27,03 (erotuk sella) .
CP-63517:n rakenne (I) määritettiin ^H-NMR^lä ja 25 suuren erotuskyvyn massaspektri-tutkimustuloksilla, jotka suorittivat PhD. Earl B. Whipple ja R. S. Ware, Central Research, Pfizer Inc., Groton, Connecticut, U.S.A.
Claims (3)
1. Menetelmä antibiootin CP-63517 valmistamiseksi, joka on 19-de/~(tetrahydro-5-metoksi-6-metyyli-2H-pyran-2- 5 yyli) oksi7-15-./~( tetrahydro-5-metoksi-6-metyyli-2H-pyran- 2-yyli)oksij-dianemysiini ja jolla on kaava I OMe ΛΛ-Μβ (I)
10 M-0 OH J I 9 Me M® Me > I ,Me Λ O \ Λ ,_3 / H '_ κ\ ^ X ^ JLA jÄJcVfv_/T\ 15. r I 1 H — h H CO2H Me Me Me J nz, OH UH2Uil jossa Me on metyyli, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän kationi-suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 20 viljellään Streptomyces endus alalajia aureus, ATCC-39574, jolla on kyky tuottaa tätä antibioottia vesipitoisessa vil-jelyalustassa, joka sisältää hiilen assimiloituvan lähteen, typpeä ja epäorgaanisia suoloja, upotetuissa, aerobisissa fermentoimisolosuhteissa, kunnes saadaan talteenotettava 25 määrä tätä antibioottia tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävää kationi-suolaa.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että antibiootti saadaan natrium- tai ka-liumsuolansa muodossa.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että viljely suoritetaan lämpötilassa 24 - 36°C.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US58138484 | 1984-02-17 | ||
| US06/581,384 US4552843A (en) | 1984-02-17 | 1984-02-17 | Process for producing an acidic polycyclic ether antibiotic by cultivation of a novel strain of Streptomyces endus subspecies aureus |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI850650A0 FI850650A0 (fi) | 1985-02-15 |
| FI850650L FI850650L (fi) | 1985-08-18 |
| FI78118B true FI78118B (fi) | 1989-02-28 |
| FI78118C FI78118C (fi) | 1989-06-12 |
Family
ID=24324993
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI850650A FI78118C (fi) | 1984-02-17 | 1985-02-15 | Foerfarande foer framstaellning av ett antibiotikum cp-63517, som aer 19-de/(tetrahydro-5-metoxi-6-metyl-2h- pyran-2-yl)oxi/-15-/(tetrahydro-5-metoxi-6-metyl-2h-pyran-2-yl)oxi/- dianemycin och dess katjonsalt. |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4552843A (fi) |
| EP (1) | EP0153128B1 (fi) |
| JP (1) | JPS60199895A (fi) |
| KR (1) | KR870000236B1 (fi) |
| AT (1) | ATE41424T1 (fi) |
| AU (1) | AU552957B2 (fi) |
| CA (1) | CA1234771A (fi) |
| DE (1) | DE3568781D1 (fi) |
| DK (1) | DK158988C (fi) |
| ES (1) | ES8605861A1 (fi) |
| FI (1) | FI78118C (fi) |
| GR (1) | GR850399B (fi) |
| HU (1) | HU194311B (fi) |
| IE (1) | IE58131B1 (fi) |
| IL (1) | IL74353A (fi) |
| MX (1) | MX164678B (fi) |
| NO (1) | NO164422C (fi) |
| NZ (1) | NZ211133A (fi) |
| PH (1) | PH19992A (fi) |
| PL (1) | PL145197B1 (fi) |
| PT (1) | PT79974B (fi) |
| SU (1) | SU1431682A3 (fi) |
| YU (1) | YU43398B (fi) |
| ZA (1) | ZA851160B (fi) |
| ZW (1) | ZW2085A1 (fi) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4510317A (en) * | 1983-07-28 | 1985-04-09 | Hoffmann-La Roche Inc. | Antibiotic X-14934A |
| US5242814A (en) * | 1989-10-10 | 1993-09-07 | Eli Lilly And Company | Polyether antibiotic |
| US5573724A (en) * | 1994-07-29 | 1996-11-12 | Magneco/Metrel, Inc. | Ladle port assembly |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5592387A (en) * | 1978-12-29 | 1980-07-12 | Taisho Pharmaceut Co Ltd | Antibiotic substance tm-531 |
| JPS574975A (en) * | 1980-06-12 | 1982-01-11 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Phenazine derivative and its preparation |
| US4359583A (en) * | 1980-09-16 | 1982-11-16 | Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. | Antibiotics TM-531 B and TM-531 C |
| JPS5758687A (en) * | 1980-09-27 | 1982-04-08 | Taisho Pharmaceut Co Ltd | Antibiotic |
| US4361649A (en) * | 1981-07-20 | 1982-11-30 | Pfizer Inc. | Polycyclic ether antibiotic |
-
1984
- 1984-02-17 US US06/581,384 patent/US4552843A/en not_active Expired - Lifetime
-
1985
- 1985-01-17 YU YU64/85A patent/YU43398B/xx unknown
- 1985-02-12 DE DE8585300909T patent/DE3568781D1/de not_active Expired
- 1985-02-12 EP EP85300909A patent/EP0153128B1/en not_active Expired
- 1985-02-12 AT AT85300909T patent/ATE41424T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-02-14 GR GR850399A patent/GR850399B/el unknown
- 1985-02-14 ES ES540399A patent/ES8605861A1/es not_active Expired
- 1985-02-14 MX MX27029A patent/MX164678B/es unknown
- 1985-02-15 SU SU853857495A patent/SU1431682A3/ru active
- 1985-02-15 HU HU85578A patent/HU194311B/hu not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 PH PH31864A patent/PH19992A/en unknown
- 1985-02-15 DK DK071285A patent/DK158988C/da active
- 1985-02-15 CA CA000474379A patent/CA1234771A/en not_active Expired
- 1985-02-15 NZ NZ211133A patent/NZ211133A/en unknown
- 1985-02-15 NO NO85850609A patent/NO164422C/no unknown
- 1985-02-15 PL PL1985251964A patent/PL145197B1/pl unknown
- 1985-02-15 IE IE38185A patent/IE58131B1/en not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 FI FI850650A patent/FI78118C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 ZA ZA851160A patent/ZA851160B/xx unknown
- 1985-02-15 AU AU38759/85A patent/AU552957B2/en not_active Ceased
- 1985-02-15 IL IL74353A patent/IL74353A/xx not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 KR KR1019850000931A patent/KR870000236B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1985-02-15 ZW ZW20/85A patent/ZW2085A1/xx unknown
- 1985-02-15 PT PT79974A patent/PT79974B/pt not_active IP Right Cessation
- 1985-02-18 JP JP60030143A patent/JPS60199895A/ja active Granted
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4195079A (en) | New polycyclic ether antibiotic | |
| US4992423A (en) | Polycyclic ether antibiotics | |
| US4431801A (en) | Polycyclic ether antibiotic | |
| CA1337803C (en) | Antibiotic produced by fermentation with amycolatopsis orientalis | |
| US4361649A (en) | Polycyclic ether antibiotic | |
| FI78118B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ett antibiotikum cp-63517, som aer 19-de/(tetrahydro-5-metoxi-6-metyl-2h- pyran-2-yl)oxi/-15-/(tetrahydro-5-metoxi-6-metyl-2h-pyran-2-yl)oxi/- dianemycin och dess katjonsalt. | |
| FI92411B (fi) | Menetelmä polysyklisen eetteriantibiootin valmistamiseksi | |
| US4625041A (en) | Acidic polycyclic ether antibiotic | |
| US4533553A (en) | Polycyclic ether antibiotic | |
| US4547523A (en) | Polyether antibiotic from streptomyces | |
| EP0117107B1 (en) | Dianemycin derivative and process therefor | |
| US5206263A (en) | Acidic polycyclic ether useful as an anticoccidial agent and as a growth promotant | |
| US4652523A (en) | Method of preparing a new polyether antibiotic from streptomyces | |
| US4081532A (en) | Polycyclic ether antibiotic produced by new species of dactylosporangium | |
| US4707493A (en) | 19-epi-dianemycin as an anticoccidial and antibacterial agent | |
| EP0385594B1 (en) | Acidic polycyclic ether antibiotic | |
| EP0400915A2 (en) | Novel acidic polycyclic ether antibiotics and microorganisms useful in the production thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: PFIZER INC. |