HU193358B

HU193358B - Process for preparing cholecalciferol derivatives

Info

Publication number: HU193358B
Application number: HU854834A
Authority: HU
Inventors: Enrico Baggiolini; Giacomo Pizzolato; Milan Uskokovic; Gary Truitt
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1984-12-19
Filing date: 1985-12-18
Publication date: 1987-09-28
Also published as: GR853047B; MC1727A1; DK591285A; AU579212B2; ZA859138B; FI855017A; DK159656B; DE3570075D1; JPH0684348B2; NO855119L; DK159656C; FI855017A0; EP0186102A3; JPS61145139A; EP0186102A2; HUT39137A; PT81708B; EP0186102B1; ES550072A0; PT81708A

Description

Találmányunk új kolekalciferol-származékok és az e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására vonatkozik.

A 4 248 791 sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásban a 25-tíidroxi-26,26,26,27,27,27-hexafluor-kolekalcif erőit írták le. A Proc. Workshop Vitamin D (1982) 1079—84 irodalmi helyen az la,25-dihidroxi-26,26,26,27,27,27-hexafluor-kolekalciferolt ismertették. A C.A. 96 (1982) 143178g közleményben a 25-hidroxi-26,26,26-trifluor-kolekalciferolt írták le.

A találmányunk szerinti eljárással az alábbi kolekalciferol-származékokat állítjuk elő:

26,26,26-trifluor-l<x,25-dihidroxi-koleka leltéről—különösen a 25S-epimertől gyakorlatilag mentes 25R-epimer, valamint a 25R-epimertől gyakorlatilag mentes 25S-epimer alakjában.

E vegyület az (V) képletnek felel meg.

A találmányunk tárgyát képező eljárás segítségével a fenti vegyületeket oly módon állíthatjuk elő, hogy valamely (IV) általános képletű vegyületet — a képletben Y jelentése háromszorosan alkilezett Si és a hidroxilezett C-atom előnyösen R- vagy S-konfigurációjú — a [3S-(3α,5β,Ζ) ]-2-{2-metilén-3,5-bisz- [ (1,1 -dimeti!-etil ]-dimetil-szilil-oxi] -ciklohexilidén)-etil-difenil-foszfin-oxid-karbanionjával reagáltatunk és a szilil-védőcsoportokat eltávolítjuk.

A fenti reakciót alacsonyabb hőmérsékleten — pl. —50°C-nál alacsonyabb hőmérsékleten, előnyösen —78°C körüli hőmérsékleten — argon-atmoszférában, inért oldószerben végezhetjük el. Reakcióközegként gyűrűs étereket (pl. előnyösen tetrahidrofuránt) alkalmazhatunk.

A foszfin-oxidot alkil-lítiummal (pl. n-butil-lítiummal) történő kezeléssel alakíthatjuk a megfelelő karbanionná.

A trialkil-szilil-védőcsoportot oly módon távolíthatjuk el, hogy a reakcióterméket szokásos körülmények között valamely oldószerben (pl. halogénezett alkánban, előnyösen metilén-kloridban) kationcserélő gyantával kezeljük. A kapott termékeket tisztíthatjuk, pl. szilikagélen történő kromatografálással.

A leírásban használt „kis szénatomszámú alkilcsoport kifejezésen egyenes- vagy elágazóláncú 1—4 szénatomos alkilcsoportok értendők (pl. metil-, etil-, η-propil-, izopropil- vagy tercier butilcsoport). Az „aralkilcsoport pl. benzil- vagy fenti-etil-csoport lehet.

A kiindulási anyagként felhasznált indenon-származékokat a következőképpen állíthatjuk elő:

[ÍR- [1 β, (aS*,pS*),3aa,4a6,7afi] ] -oktahidro-6,7a-dimetil-4- [ (1,1 - dimetil-etil) - di metil-sz ilil-oxi] -α-etenil-lH-indén-l-etanolt tionil-kloriddal, majd piridennel történő kezeléssel [1R-(lp(R*),-3act,4p,7ap] ]-1-(4-klór-1 -metil-2-butenil) -oktahidro-4- [ (1,1 -dimetil-etil) -dimetil-szilil-oxi] -7a-metil-lH-indénné alakítunk. 2

A kapott allíl-szerkezetü kloridot valamely aril-szulfinsavas sóval (pl. benzol-szulfinsavas-nátriumsóval) reagáltatjuk és ily módon a megfelelő aril-szulfonil-vegyülethez (pl. [1R- [1β(Κ*),-33α,4β,78β] ]-l- [ (4-fenil-szulfonil)-l-metil-2-butenil] -oktahidro-4- [ (1,1 -dimetil-etil )-dimetil-szilil-oxi)-7a-metil-1 H-indénhez) jutunk. A kapott indén-származékot palládium-szén (Pd/C) katalizátor jelenlétében katalitikusán hidrogénezzük és ily módon a megfelelő, az oldalláncban telített vegyületet — azaz [ÍR- [1β(Ρ*),33α,4β,73β] ] -1- [4-(fenil-szulíonil) -1 -metil-butil] -oktahidro-4- [ (1,1-dimetil-etil)-dimetil-szilil-oxi] -7a-metil-lH-indént kapjuk. Az oldallánc végső kialakítását oly módon végezzük el, hogy a fenti szulfonil-vegyület karbanionját n-butil-lítiummal vagy lítium-diizopropil-amiddal és trifluor-acetonnal reagáltatjuk. így (I) általános képletű vegyületet kapunk — a képletben X jelentése arilcsoport és R¹, R² és R³jelentése kis szénatomszámú alkil-, aril- vagy aralkilcsoport. A képletben X előnyösen fenilcsoportot, R¹ és R³ előnyösen metilcsoportot és. R² előnyösen tercier butil-csoportot képvisel.

Az (I) általános képletű vegyületet — az oldallánc 4-helyzetében képezett epimerek keveréke alakjában — alkálifémmel vagy alkálifém-amalgámmal, alkálifém-foszfát jelenlétében, inért szerves oldószerben (pl. kis szénatomszámú alkanolban, gyűrűs éterben vagy előnyösen ezek elegyében) végzett kezeléssel dearilszulfonálhatjuk. Előnyösen nátrium-amalgámot és dikálium-hidrogén-foszfátot alkalmazhatunk. Oldószerként előnyösen metanol, tetrahidrofurán vagy ezek elegye szolgálhat. Az alkálifém-amalgámot hűtés közben, előnyösen 0°C-nál alacsonyabb hőmérsékleten, különösen előnyösen kb. —20 C°-on adhatjuk hozzá.

A reakcióterméket tisztítás (pl. szilikagélen végzett kromatografálás) után epoxidálószerrel (pl. valamely persavval, előnyösen trifluor-perecetsavval) alacsonyabb hőmérsékleten — pl. 0°C-on — reagáltathatjuk.

A reakciót előnyösen szervetlen bázis (pl. valamely foszfát-bázis, előnyösen dikálium-hidrogén-foszfát) jelenlétében, inért szerves oldószerben (pl. halogénezett alifás vagy aromás szénhidrogénben, előnyösen metilén-kloridban) végezhetjük el. Az alkalmazott reakciókörülmények között a kapott termék részben a deszililezett termékből állhat. így a reakciótermék a védett és nem-védett (II) általános képletű vegyületek — a képletben R⁴ jelentése —Si (R',R²,R³)-csoport vagy hidrogénatom és R¹, R² és R³ jelentése a fent megadott — keveréke.

A fenti keverék egyik komponensét vagy a két (II) általános képletű komponenst tisztítás (pl. „flash kromatográfiás utón) után redukálószerrel kezelhetjük. Redukálószerként pl. alkálifémet vagy fém-hidridet

-2193358 (előnyösen lítium-alumínium-hidridet) alkalmazhatunk és inért szerves oldószerben (pl. valamely alkil-éterben, mint pl. dietil-éterben), szobahőmérsékleten és inért atmoszférában (pl. argon) dolgozhatunk.

Ily módon a megfelelő (III) általános képletű védett és/vagy nem-védett vegyületet kapjuk — a képletben R⁴ jelentése a fent megadott —, az oldallánc 5-helyzetében képezett epimerek keveréke alakjában. A (III) általános képletű vegyületet tisztíthatjuk (pl. szilikagélen végzett kromatografál ássál)i.

A (III) általános képletű vegyületből a szililtartalmú védőcsoportokat kationcserélő gyanta segítségével hasíthatjuk le és az epimer-keveréket nagyteljesítőképességű folyadékkromatográfiás (HPLC) úton szétválaszthatjuk, tisztítás után (pl. szilikagélen végzett folyadékkromatografálás). Amennyiben az epimerek keveréke a kívánt végtermék, a nagyteljesítőképességű folyadékkromatografálás elhagyható.

A (III) általános képletű nem-védett vegyületet oxidálószerrel kezelhetjük. Oxidálószerként kromátsókat (pl. piridinium-halogén-kromátokat, előnyösen piridiniúm-klór-kromátot) alkalmazhatunk. A reakciót előnyösen szobahőmérsékleten, inért oldószerben végezI. táblázat

Teszt-vegyület	Koncentráció⁰¹' / x10⁹ mól/	Burjánzás^	Differenciálódás

		HL-60 sejtek Sejt-	NBT csökkenés
		per ml	szám	formazán +
		X1O'^	Z-os	sej tek/összes
			csők-	megszámolt
			kenése	sejtek
- /kontroll közeg/	84,7+4,3	-	3/368	<1
Hordozóanyag /0,1/1 etanol/		78,9+4,9	0	4/356	1
25R-vegyület	1	59,1+1,9	30	81/353	23
25R-vegyület	10	27,2+0,3	68	299/318	94
25R-vegyület	100	22,9±1,0	73	360/367	98
25R-vegyület	1000	22,0+0,7	74	340/344	99
25S-vegyület	1	60,2+3,9	29	84/334	25
25S-vegyület	10	27,0+1,4	68	338/354	96
25S-vegyület	100	22,3+2,6	74	323/330	98
25S~vegyület	1000	20,2±0,5	76	353/358	99

“= Az összes kísérleti tenyészetben a hordozó koncentrációja 0,1 térfogat/térfogat %, etanol.

^b= A sejtek életképessége az összes tenyészetben 97% feletti érték. Az összes tenyészetet 2X10⁴ HL—60 sejt mennyiséggel iniciáltuk.

Az 1. táblázat adatai igazolják, hogy a

26,26,26-trifluor- la,25-dihidroxi-kalciferol — betjük el. Reakcióközegként halogénezett alkánokat (pl. klór-alkánokat, előnyösen metilén-kloridot) alkalmazhatunk. A reakció során Y helyén hidrogénatomot tartalmazó (IV) 5 altalános képletű ketont kapunk.

Az ily módon kapott ketont izolálás nélkül reagáltathatjuk a trimetil-szilil-védőcsoportnak az oldalláncra történő bevitelére képes szerrel (pl. trimetil-szilil-imidazollal), 10 szobahőmérsékleten, inért atmoszférában. Ily módon Y helyén trialkilezett Si csoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületet kapunk.

Az Y helyén hidrogénatomot vagy trial15 kilezett Si csoportot tartalmazó (I) és (IV) általános képletű vegyületek újak és előállításuk szintén találmányunk tárgyát képezi.

A 26,26,26-trifluor-la,25-dihidroxi-kolekalciferol D₃-vitaminszerű hatással rendelke20 zik és burjánzásgátló, valamint differenciálást előidéző hatást fejt ki. A burjánzásgátló és differenciálást előidéző hatást HL—60 sejteken in vitro ismert módszerekkel igazoljuk (Progress in Cancer Research and Therapy, ²⁵ 23. kötet; Maturation Factors and Cancer, Ed. M.A.S. Moore, Raven Press, N.Y. (1982); Natúré 270 (1977) 347—349. és Blood 54 (1979) 429—439.). Az eredményeket az 1. táblázatban foglaljuk össze.

különösen a 25R- vagy 25S-forma — in vitro gátolja a humán promielocitikus tumorsejtek burjánzását, ugyanakkor a sejtekre nem-toxikus. Ezenkívül a fenti vegyületek kis koncentrációja (10~⁹ — 10'⁸ mól) jelenlétében tenyésztett sejtek az éretebb sejt-típus irányában differenciálódnak, ahogyan azt az enzim-aktivitás és sejtfunkció alakulása iga₆₅ zolja. A fenti vegyületek várhatóan a rendellennes sejtburjánzással és/vagy differenciá3

-3193358 lódással kapcsolatos betegségek (pl. neopláziás betegségek) kezelésére alkalmazhatók.

A találmányunk szerinti eljárással előállítható vegyületeket a fenti betegségek (pl. oszteoporózis, oszteodisztrófia, szteroidok által előidézett oszteopénia, hipoparatiroidizmus, hipofoszfatémiás rachitis és hipofoszfatémiás oszteomalácia) kezelésére kb. 0,10—3,0 μ/nap előnyösen 0,25—2,0 μ/nap — dózisban alkalmazhatjuk és ez alacsonyabb az endogén módon termelt normális la,25-dihidroxi-kolekalciferol szintnél. A találmányunk szerinti eljárással előállítható vegyületeket burjánzásos betegségek (pl. leukémia) kezelése esetén ugyancsak a fenti dózisokban alkalmazhatjuk.

A hatóanyagot orális, szubkutáns, intramuszkuláris, intravénás, intraperitoneális adagolásra vagy helyi kezelésre alkalmas gyógyászati készítmények alakjában készíthetjük ki. így pl. tablettákat, kapszulákat, elixíreket (orális adagolási formák) vagy steril oldatokat vagy szuszpenziókat (parenterális adagolási formák) állíthatunk elő. A készítmények adagolási egységenként kb. 0,10—3,0 pg — előnyösen 0,25—2,0 pg — hatóanyagot tartalmazhatnak, gyógyászatilag alkalmas hordozóanyagok, hígítóanyagok, tartósítószerek, stabilizálószerek, kötőanyagok (pl. tragacant gumi), excipiensek (pl. kalcium-foszfát), szétesést elősegítő anyagok (pl. kukoricakeményítő), sikosítóanyagok (pl. magnézium-sztearát), pufferek, antioxidánsok, édesítőszerek (pl. szacharóz), izesítőanyagok (pl. borsmenta) mellett. A készítmények további komponenseket is tartalmazhatnak, pl. bevonatanyagokat (pl. sellakot) vagy a készítmény egyéb fizikai tulajdonságait módosító adalékokat.

A találmányunk szerinti eljárással előállítható vegyületek továbbá vemhes kérődzőkön vajúdás előtt a tejláz kezelésére alkalmazhatók, általában 200—1000 μ/nap — előnyösen 25—200 pg/nap — dózisban. A hatóanyagot ezen alkalmazási területen is szokásos módon formálhatjuk. így pl. steril injekciós és/vagy helyi kezelésre felhasználható steril készítményeket oly módon állíthatunk elő, hogy a hatóanyagot hordozóanyagban oldjuk vagy szuszpendáljuk. Hordozóanyagként pl. 10—20% etanolt vagy propilén-glikolt tartalmazó vizes elegyet, természetes növényi olajokat (pl. szezámolajat) vagy szintetikus zsírszerü anyagokat (pl. etil-oleátot) alkalmazhatunk. Ezenkívül 100— 1500 pg hatóanyagtartalmú intramuszkuláris injekciókat is készíthetünk; hordozóanyagként pl. növényi olajokat vagy 80— 95% etanolt vagy propilén-glikolt tartalmazó vizes elegyeket alkalmazhatunk. A hatóanyagot továbbá 25—200 pg hatóanyagtartalmú zsírsavszemcsék alakjában is formálhatjuk, orális adagolásra alkalmas készítmények előállítása céljából.

Eljárásunk további részleteit az alábbi példákban ismertetjük anélkül, hogy találmányunkat a példákra korlátoznánk.

1. példa

a) 2,9 g (8,22 millimól) [lR-[ lp,(aS*, βδ*) -3aoc,4ap,7ap] ] -oktahidro-p,7a-dimetil-4- [ (1,1 -dimetil-etil)-dimetil-szilil-oxi] -a-etenil-lH-indén-l-etanol 100 ml vízmentes éterrel képezett oldatát 0 C°-ra hűtjük, majd argon-atmoszférában 2,7 ml (37,84 millimól) tionil-kloridot és utána 0,276 ml piridint csepegtetünk hozzá. A reakcióelegyet 0 C°-on 2 órán át keverjük, majd a reakciót 50 ml 2 n nátrium-kálium-tartarát-oldat hozzáadásával leállítjuk. Az éteres fázist elválasztjuk és a vizes réteget etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat 1 n sósavval, vízzel, 2 n kálium-hidrogén-karbonát-oldattal és nátrium-klorid-oldattal mossuk, szárítjuk és bepároljuk. Az eldószert vákuumban eltávolítjuk, a maradékot szilikagélen kromatografáljuk és hexán/etil-acetát eleggyel eluáljuk. Alacsony olvadáspontú szilárd anyag alakjában 2,9 g tiszta [lR-[ip(R*), 3aa,4p, 7ap]]-1- (4-klór-l-metil-2-butenil) -oktahidro-4- [ (1,1 -dimetil-etil) -dimetil-szilil-oxi] -7a-metil-lH-indént kapunk, kitermelés: 95%.

b) 2,9 g (7,81 millimól), az la) példa szerint előállított allil-szerkezetű klorid 130 ml hexametil-foszforsav-triamiddal képezett oldatához 10,1 g (61,52 millimól) benzol-szulfinsavas-nátriumsót adunk, majd a reakcióelegyet argon-atmoszférában 24 órán át keverjük. Ezután 130 ml jegesvizet adunk hozzá, 30 percen át keverjük, az elegyet etil-acetáttal extraháljuk, az egyesített extraktumokat vízzel mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk és hexán/etil-acetát eleggyel eluáljuk. Alacsony olvadáspontú szilárd anyag alakjában 3,5 g tiszta [ÍR-[ip(R*),3aa,4p, 7ap] ] -1- ](4-fenil-szulfonil)-l-metil-2-butenil) -oktahidro-4- [ (1,1-dimetil-etil) -dimetil-szilil-oxi]-7a-metil-lH-indént kapunk, kitermelés: 94%.

c) 1,00 g (2,10 millimól), az lb) példa szerint előállított termék 40 ml etanollal képezett oldatát szolahőmérsékleten és normál nyomáson 350 mg 10%-os palládium-szén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A katalizátort 2 óra múlva leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. 1,00 g [1R-[ip(R*),3aa, 4p,7ap] ] -1 - [4- (fenil-szulfonil) -1 -metil-butil] -oktahidro-4- [ (1,1-dimetil-etil) -dimetil-szilil-oxi]-7a-metil-lH-indént kapunk.

d) 0,440 ml (3,14 millimól) diizopropilamin és 10 ml vízmentes tetrahidrofurán oldatát 0 C°-ra hűtjük és argon-atmoszférában 1,87 ml (2,99 millimól) 1,6 mólos hexános n-butil-lítium-oldatot csepegtetünk hozzá. Az elegyet 15 percen át 0 C°-on keverjük, majd az oldatot —78 C°-ra hűtjük és 10 ml vízmentes tetrahidrofuránnal hígítjuk. Ezután 1,00 g (2,09 millimól), az le) példa szerint előállított szulfonnak 15 ml tetrahidrofuránnal képezett oldatát csepegtetjük hozzá, a reakció-4193358 elegyet 5 percen át —78 C°-on, majd 30 percen keresztül 0 C°-on keverjük. A reakcióelegyet ismét —78 C°-ra hűtjük, az elegyhez 0,50 ml (5,59 millimól) 1,1,1-trifluor-acetont adunk és a fenti hőmérsékleten másfél órán át keverjük. A reakciót 2 n nátrium-kálium-tartarát-oldat és 2 π kálium-hidrogén-karbonát-oldat 1:1 arányú elegyének (30 ml) hozzáadásával leállítjuk. A reakcióelegyet szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni és metilén-kloriddal extraháljuk. A szerves extraktumokat nátrium-klorid-oldattal mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk és hexán/etil-acetát eleggyel eluáljuk. Színtelen olaj alakjában 0,71 g [ÍR-[16(R*),3aa,4p, 7a§] ] -oktahidro-l-(6,6,6-trifluor-5-hidroxi-l,5-dimetil-4-fenil-szulfonil-hexil) -4- [(1,1-dimetil-etil)-dimetil-szilil-oxi] -7a-metil-1H-indént kapunk, kitermelés: 72%.

e) 0,56 g (0,95 millimól), az ld) példa szerint előállított szulfon (epimerek keveréke), 18 ml tetrahidrofurán és 18 ml metanol oldatához 10 g dikálium-hidrogén-foszfátot adunk. Az elegyet 20 C°-ra hűtjük és 11 g 6%-os nátrium-amalgámmal kezeljük. A reakcióelegyet —20 C°-on 10 percen át keverjük, majd 30 ml nátrium-klorid-oldatot adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves extraktumokat nátrium-klorid-oldattal mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen történő kromatografálással és hexán/etil-acetát eleggyel végzett eluállással tisztítjuk. Színtelen olaj alakjában 0,40 g [ÍR- [1β(ίί*), 33α,4β,73β] ] -oktahidro-1 - (6,6,6-trif 1 uor-1,5-dimetil-4-hexenil)-4- [ (1,1 -dimetil-etil) -dimetil-szilil-oxi]-7a-metil-lH-indént kapunk (a geometriai izomerek keveréke).

f) 0,260 ml (1,84 millimól) trifluor-perecetsavanhidrid 5 ml vízmentes metilén-kloriddal képezett oldatát 0 C°-ra hűtjük, 0,052 ml (1,89 millimól) 90%-os hidrogén-peroxidot adunk hozzá és 30 percen át keverjük. A kapott oldatot 400 mg (0,92 millimól), az le) példa szerint előállított olefin és 1,5 g dikálium-hidrogén-foszfát 5 ml vízmentes metilén-kloriddal képezett oldatához adjuk 0 C°-on. Az adagolás befejezése után az elegyet 30 perc alatt szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, majd 5 ml 10%-os vizes nátrium-szulfit-oldat hozzáadásával a reakciót leállítjuk, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal hígítjuk, és az elegyet metilén-kloriddal extraháljuk. A szerves extraktumokat nátrium-klorid-oldattal mossuk, szárítjuk és bepároljuk. 190 mg tiszta védett terméket — azaz [1R-[ ip(R*),3aa,4p,7ap] ] -oktahidro-1 - (6,6,6-tr ifi uor-1,5-dimetil-4,5-epoxi-hexil) -4- [ (1,1 - dimetil-etil) -dimetil-szilil-oxi] -7a-metil-lH-indént — kapunk (epimer-keverék alkjában), 140 mg deszililezett termék mellett. Flashkromatográfiás tisztítás után mindkét terméket felhasználhatjuk a következő lépésben.

g) 100 mg (2,63 millimól) lítium-alumínium-hidrid 3 ml vízmentes éterrel képezett szuszpenziójához 190 mg (0,42 millimól), az lf) bekezdés szerint előállított védett termék és 2 ml éter oldatát adjuk, szobahőmérsékleten, argon-atmoszférában. A reakcióelegyet 24 órán át keverjük, majd a reakciót 2 n vizes nátrium-kálium-tart arát hozzáadásával leállítjuk és az elegyet éterrel extraháljuk. Az extraktumokat nátrium-klorid-oldattal mossuk, szárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen történő kromatografálással és hexán/etil-acetát eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. Surfi olaj alakjában 175 mg tiszta [ÍR- [1β^*),38(Χ,4β,73β] ] -oktahidro-1 - (6,6,6-trif luor-5-hidroxi-1,5-dimeti 1 -hexi 1) -4- [(1,1-dimetil-etil) - dimetil-szilil-oxi] -7a-metil-lH-indént kapunk (epimer keverék).

h) 175 mg (0,39 millimól), az lg) példa szerint előállított epimer-keverék és 9 ml metanol oldatához 2,8 g kationcserélő gyantát (AG 50W—X4, 200—400 mesh, Bio-Rád Laboratory, Richmond CA) adunk és szobahőmérsékleten 12 napon át keverjük. A gyantát szűréssel eltávolítjuk és metanollal mossuk. A szűrleteket szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen történő kromatografálással és hexán/etil-acetát eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. A két epimert szilikagélen (Magnum 9 Partisii-10 szilikagél oszlop, Whatman Inc., Clifton NJ) végzett folyadékkromatografálással és kloroform/etil-acetát eleggyel végrehajtott eluálással választjuk szét. 65 mg kristályos 5R*-terméket — azaz [ 1 R-Πβ (1 R*,5R*) ,-33<χ,4β,73β] ] -oktahidro-1- (6,6,6-trif luor-5-hid roxi-1,5-dimetil-hexil) -7a-metil-lH-inden-4-olt, op.: 110—111 C°; [a]p⁵ = -)-40,3° (c=0,2%> kloroform) — és 55 mg 5S*-terméket — azaz [1R-[^(1R*, 5S*) ,33α,4β,73β] ] -oktahidro-1 - (6,6,6-trifluor-5-hid roxi-1,5-dimetil-hexil) -7a-metil- 1H-indén-4-olt, [a]£⁵ = +31,6° (c = 0,2%, kloroform) — kapunk.

i) 50 mg (0,15 millimól), az lh) példa szerint előállított 5R*-diol 2 ml metilén-kloriddal képezett oldatát 97 mg (0,45 millimól) piridinium-klór-kromátnak 4 ml metilén-kloriddal képezett szuszpenziójához adjuk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten másfél órán át keverjük, 10 ml éterrel hígítjuk, 15 percen át keverjük és kovasavgélen szűrjük A szűrőn levő maradékot éterrel eldörzsöljük. Az extraktumokat egyesítjük, szűrjük és szárazra pároljuk. A maradékot kromatografálással, hexán/etil-acetát elegy felhasználásával tisztítjuk. 49 mg kapott terméket 4 ml vízmentes metilén-klridban oldunk, az oldathoz 0,13 ml (0,89 millimól) trimetil-szilil-imidazolt adunk és szobahőmérsékleten argon-atmoszférában 22 órán át keverjük. Ezután 0,5 ml vizet adunk hozzá, az elegyet 20 percen át keverjük, vízzel hígítjuk és etil-acetáttal extaháljuk. Az extraktumokat vízzel és nátrium-klorid-oldattal mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk.

-5193358

A maradékot kromatografálással tisztítjuk, hexán/etil-acetát elegy felhasználásával. Sűrű olaj alakjában 51 mg [lR-[ip(lR*,5R*), 3aa,4p, 7ap] ] -oktahidro-1- (6,6,6-trifluor-5-trimetil-szilil-oxí-1,5-dimetil-hexil) -7a-metil-lH-indén-4-ont kapunk.

j) 141 mg (0,23 millimól) [3S- [3α,5βΖ) j -2- [2-metilén-3,5-bisz- [ (1,1 -dimetil-etil)-dimetil-szilil-oxi] -ciklohexilidén) -éti 1 - dif en il -foszfin-oxid és 6 ml vízmentes tetrahidrofurán oldatát —78 C°-ra hűtjük és argon-atmoszférában 0,137 ml (0,22 millimól) 1,6 mólos hexános n-butil-lítium-oldatot csepegtetünk hozzá. Az elegyet 5 percen át keverjük, majd a foszfin-oxi karbanion narancsszínű oldatához 51 mg (0,13 millimól), az li/ példa szerint előállított keton és 1,5 ml tetrahidrofurán oldatát csepegtetjük. A reakcióelegyet másfél órán át —78 C°-on keverjük, majd 2 π kálium-nátrium-tartarát-oldat és 2 π kálium-hidrogén-karbonát-oldat 1:1 arányú elegyét (3 ml) adjuk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, vízzel hígítjuk, majd vízzel és etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves rétegeket nátrium-klorid-oldattal mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen átszűrjük, hexán/etil-acetát eleggyel eluáljuk, majd 0,5 ml metilén-kloridban és 5 ml metanolban oldjuk, egy éjjelen át 2 g kationcserélő gyantával (AG 50W—X4) szobaKomponens

Ί. Találmányunk szerinti eljárással előállított hatóanyag

2. Poli/etilén-glíkol/ 400

3. Butilezett hidroxi-anizol

4. Aszkorbil-palmitát hőmérsékleten keverjük. Ezután leszűrjük, a szűrletet bepároljuk és a maradékot kromatográfiás úton tisztítjuk, hexán/etil-acetát elegy felhasználásával. 23 mg 26,26,26-tri5 fluor-la,25R-dihidroxi-kolekalciferolt kapunk. ’H NMR (400 MHz, CD₃OD) 0,60 (s, 3H), 0,99 (d, J=6,4, 3H), 1,30 (s,3H),4,15 (m, IH) 4,38 (m, IH), d 4,90 (br s, IH), 5,31 (br s, IH), 6,10 (dm, J = 11,2 Hz, IH), 6,34 (d, J= ¹⁰ =11,2 Hz, IH).

2. példa

a) Az li/ példában leírtak szerint 56 mg, az lh) példa szerint előállított 5S*-diolból 59 mg [lR-[^(lR*,5S*),3aa^,7ap]]-oktahidro-l-(6,6,6-trifluor-5-trimetil-szilil-oxi-l,5-dimetil-hexil)-7a-metil-lH-indén-4-ont állítunk elő.

b) Az lj) példában leírtak szerint 58 mg, a 2a) példa szerint előállított ketonból 59 mg

26,26,26-trifluor-la,25S-dihidroxi-kolekalciferolt állítunk elő.

Ή NMR (400 MHz, CD₃OD) 0,58 (s, 3H),

0,97 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,28 (s, 3H), d 4,13 (m, IH), d 4,36 (m, IH), 4,90 (br s, IH), 5,29 (br s, IH), 6,09 (d, J = 11,2 Hz, IH), 6,32 '(d, J = 11,2 Hz, IH).

3. példa

Alábbi összetételű kapszulákat készítünk:

zula

0,00010 0,00025 0,00050

200,00 200,00 200,00

0,100 0,100 0,100

1,00 1,00 1,00

Az 1., 3. és 4. sz. komponenst nitrogén-atmoszférában a 2. sz. komponensben oldjuk, majd kapszulázzuk.

4. példa

Alábbi összetételű injekciós oldatot készítünk:

Komponens

1. Találmányunk szerinti eljárássá előállított hatóanyag

2. 95% etanol és 5% víz elegye

Az 1. sz. komponenst nitrogén-atmoszférában a 2. sz. komponensben oldjuk és intramuszkuláris injekciós oldatot nyerünk.

Claims

1. Eljárás az (V) képietű 26,26,26-trifluor-1 a,25-dihidroxi-kolekalciferol előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely (IV) általános képietű vegyületet — a képletben Y jelen 6

Mennyiség

0,10 mg 0,50 mg

2,00 ml 3,00 ml tése háromszorosan alkilezett Si - a [3S-(3cc^,Z)]-2-[2-metilén-3,5-bisz-[(l,l- dimetil-etil) - dimetil- szilil-oxij -ciklohexili50 dén]-etil-difenil-foszfin-oxid karbanionjával reagáltatjuk és a szilil-védőcsoportokat eltávolítjuk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás a _gg 25S-epimertől gyakorlatilag mentes 26,26,26-trifluor-la,25R-dihidroxi-kolekalciferol és a

-6193358

25R-epimertől gyakorlatilag mentes 26,26,26-trifluor-la,25S-dihidroxi-kolekalciferol előállítására, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként olyan (IV) általános képletü vegyületeket alkalmazunk, amelyekben a hidroxilezett C-atom R-, illetve S-konfiguráciőjű.

3. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igény12 pont szerinti eljárással előállított (V) képletü 26,26,26-trifluor-la,25-dihidroxi-kolekalciferolt — előnyösen a 25S-epimertől gyakorlatilag mentes 26,26,26-trifluor-la,25S-dihidr5 oxi-kolekalciferolt vagy a 25R-epimertőI gyakorlatilag mentes 26,26,26-trifluor-la, 25S-dihidroxi-kolekalciferolt — inért gyógyászati hordozóanyagokkal összekeverünk és galenikus formára hozunk.

2 lap rajz képletekkel