HU193017B - Process for producing new poliether-type antibiotic - Google Patents

Process for producing new poliether-type antibiotic Download PDF

Info

Publication number
HU193017B
HU193017B HU842884A HU288484A HU193017B HU 193017 B HU193017 B HU 193017B HU 842884 A HU842884 A HU 842884A HU 288484 A HU288484 A HU 288484A HU 193017 B HU193017 B HU 193017B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
antibiotic
feed
formula
compound
salts
Prior art date
Application number
HU842884A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT36178A (en
Inventor
Liu
Westley
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of HUT36178A publication Critical patent/HUT36178A/hu
Publication of HU193017B publication Critical patent/HU193017B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C12P19/46—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical bound to a cyclohexyl radical, e.g. kasugamycin
    • C12P19/54—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical bound to a cyclohexyl radical, e.g. kasugamycin the cyclohexyl radical being bound directly to a nitrogen atom of two or more radicals, e.g. streptomycin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/01—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing oxygen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C12P19/445—The saccharide radical is condensed with a heterocyclic radical, e.g. everninomycin, papulacandin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/465—Streptomyces
    • C12R2001/55—Streptomyces hygroscopicus

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Measurement Of Velocity Or Position Using Acoustic Or Ultrasonic Waves (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Találmányunk új poliéter-tlpusú antibiotikum és az e vegyületet tartalmazó készítmények előállítására vonatkozik.
Találmányunk tárgya közelebbről eljárás az /1/ képlete új poliéter-tlpusú ionoíor antibiotikum és sói előállítására.
Az „Me“ rövidítés a metilcsoportot jelenti. Az /1/ képletö vegyület és sói antibakteriális és antikokcidiális szerként alkalmazhatók.
Az /1/ képletű, valamely Streptomyces mikroorganizmus által termelt kristályos antibiotikumot „X-14934A antibiotikum-ként jelöljük. A mikroorganizmus liofilizált tenyészetét az NRRL intézménynél [US Department of Agriculture, Agricultural Research Service, Northern Régiónál Research Laboratories /NRRL/, Peoria, Illinois] deponáltuk, NRRL 15518 számon.
Az X-14934A antibiotikum poliéter-tlpusú anyag és sokfajta sót képez. A sókat a szabad sav alakjában levő antibiotikumból a poliéter-tlpusú vegyületek kémiájában jólismert módszerekkel képezhetjük pl. oly módon, hogy a szabad savat a megfelelő bázis vagy só oldatával kezeljük. A sóképzéshez bázikus anyagként pl. alkálifém-bázisokat /pl. nátrium-hidroxidot, kálium-hidroxidot, litium-hídroxidot stb./, alkáliföldíém-hidroxidokat /pl. kálcium-hidroxidot, bárium-hidroxidot stb./ vagy ammónium-hidroxidot, míg sóként alkálifém- vagy alkáliföldíém-sókat /pl. karbonátokat, hidrogén-karbonátokat vagy szulfátokat/ alkalmazhatunk.
A poliéter-tlpusú vegyületekkel továbbá szerves bázisok is sókat képeznek. E célra pl. primer, szekunder vagy tercier kis szén2 atomszámú alkil-aminokat vagy hidroxi-alkil-aminokat /pl. etil-amint, izopropil-amint, dietil-amint, metil-n-butil-amint, etanol-amint vagy dietanol-amint stb./ használhatunk.
A Streptomyces X-14394 mikroorganizmus törzs jellemző adatait és leírását az alábbiakban ismertetjük:
Morfológiai jellemzők
1. Mikroszkopikus jellemzők:
Az X-14934 mikroorganizmus különböző összetételű agar-táptalajokon növekedik és szubmerz micéliumot képez, amely az agarba behatol, az idő előrehaladásával nem fragmeritálódik; a képződő légmicélium részlegesen spóra-láncokra válik szét. Ezek a láncok spirálisak és mindegyik lánc 10-nél több spórát tartalmaz. A spórák az egész láncot borító burok miatt nem láthatók és dehidratálódáskor ráncossá válnak. A spórák simák és nagyságuk átlagosan 0,6—1,1 nm. A teljes sejthidrolizátum paptrkromatográfiás elemzése LL-diamino-pimelinsav jelenlétét mutatja ki és ez azt igazolja és azonosítja, hogy a mikroorganizmus a Streptomyces genushoz tartozó törzs.
2· Makroszkopikus jellemzők
Az I. táblázatban a mikroorganizmus növekedési jellemzőit, a-spóraképződés mértékét, a légmicélium és micélium-hátoldal színét különböző táptalajokon mutatjuk be. Az eredményeket 28°C-on végzett 14 napos inkubálás után jegyezzük fel.
I. táblázat
Táptalaj Spóraképződés nagysága és mértéke Légmicélium színe (1) Micélium hátoldalának színe (1)
Élesztő- bőséges nő- osztriga- szalmaszínű
-maláta vekedés; fehér (b) (2 fb)
extraktum spóraképződés
(ISP-2) nincs
Zabliszt- bőséges növeke- drapp-barna ezüstszürke
agar dés; hidroszkó- (3 ig) fehér (3 fe) fehér
(ISP-3)· pos; jó spóraképződés foltokkal foltokkal
Szervet- bőséges növeke- ezüstszürke pasztellsárga
len sók- dés és jó spóra- - (3 fe) (1 1/2 fb)
keményítő képződés
agar (ISP A) Glicerin- gyenge növeke- fehér fehér
-aszpara- dés csekély (a) (a)
gin agar (ISP-5) spóraképződés
-2193017 /1/ A szín-kód irodalmi helye: Color Harmony Manual 4. kiadás, Container Corporation of America, 1958.
3. Fiziológiai jellemzők
Az X-14934 mikroorganizmus egyetlen szénforrásként glükózt, L-arabinózt, szacharózt, i-inozitot, mannitot, fruktózt, ramnózt és raffinózt hasznosít, míg xilózt kevésbé hatékonyan értékesít. A cellulóz-hasznosítás negatív.
A kén-hidrogén termelés pozitív/ezt pepton-élesztőextrakt-vas-agar táptalajon — ISP 6 fellépő sötétedés jelzi/. Tirozintartalmú táptalajon /ISP 7/ sötét szín /melamin/ alakul ki. A nitrát-redukció negatív. A zselatin-, keményítő- és kazein-hidrolízis pozitív; 3,5% vagy nagyobb nátrium-klorid koncentráció mellett nincs növekedés.
4, Ismert Streptomyces törzsekkel való összehasonlítás
A spóramassza színe, a spóraláncok alakja, a spóra felülete, a melanoid pigmentek termelése és a telepek ugyanazon táptalajon mutatott higroszkópikus jellege, valamint a szénforrás hasznosítás alapján az X-14934 törzs Streptomyces hygroscopicus fajhoz tartozik.
A Streptomyces hygroscopicus X-14934 mikroorganizmus megfelelő körülmények között végzett fermentáció esetében X-14934A antibiotikumot termel. A Streptomyces hygroscopicus X-14934 tartalmú fermentlevet oly módon állíthatjuk elő, hogy az antibiotikum termelésére képes mikroorganizmus spóráit vagy micéliumát megfelelő táptalajba inokuláljuk, majd aerob körülmények között tenyésztjük. Az antibiotikum szilárd táptalajon is előállítható, azonban nagy antibiotikum mennyiség gyárfása esetén előnyösen folyékony táptalajokkal dolgozhatunk. A tenyésztést tág hőmérsékleti határok között végezhetjük el; általában 20—35* C -on, előnyösen 26—30*C°-on dolgozhatunk. Az eljárást előnyösen semleges körüli pH-értéken végezhetjük el.
Az X-14934A antibiotikum szubmerz aerob fermentációval történő gyártásához felhasznált táptalaj szénforrásként kereskedelmi forgalomban lévő glicerid-olajokat vagy nyers vagy tisztított szénhidrátokat /pl, glicerint, glükózt, maltózt; laktózt, dextrint, keményítőt stb./, nitrogén-forrásként szerves anyagokat /pl. szójabablisztet, desztillációnál nyert oldható anyagokat, mogyorólisztet, gyapotmaglisztet, húsextraktumokat, peptonokat, hallisztet, élesztő extraktumokat, kukoricalekvárt stb./és kívánt esetben szervetlen nitrogén-forrásokat /pl. nitrátokat, ammónium-sókat és ásványi sókat, mint pl. ammónium-szulfátot, magnézium-szulfátot stb./ tartalmazhat. A táptalaj továbbá nátrium-kloridot, kálium-kloridot, kálium-foszfátot stb.
és pufferező anyagokat /pl. nátrium-citrátot, kalcium-karbonátot vagy foszfátokat / vagy nyomnyi mennyiségben nehézfémsókat is tartalmazhat. A levegőztetett szubmerz fermentációs eljárásoknál habzásgátlókat is adhatunk a rendszerhez/pl. folyékony parrafint, zsíros olajokat vagy szilikon-vegyületeket stb./
Az X-14934A antibiotikum gyártásához egynél több szén-forrást, nitrogén-forrást vagy habzásgátlót is alkalmazhatunk.
Az X-14934A antibiotikum nátrium-só-monoh drát toxicitása /LD50/ egéren 25 mg/kg /p.o./ és 7,75 mg/kg /i.p./.
Eljárásunk további részleteit az alábbi példákban ismertetjük anélkül, hogy találmányunkat a példákra korlátoznánk.
1. példa
Streptomyces hygroscopicus X-14934 mikroorganizmust alábbi összetételű ferde keményítő-kazein-agar táptalajon tenyésztünk: Komponens Mennyiség, g/1 desztillált víz
Oldható keményítő 10,0
Kazein 1,0
Dikálium-hidrogén-foszfát /K2HPO4/ 0,5
Magnézium-szulfát 0,5
Agar 20,0
A pH-t autoklávozás előtt 7,4-re állítjuk be /NaOH/.
Az X-14934 törzzsel inokulált ferde táptalajt 28* C -on 7—14 napon át inkubáljuk. Vegetatív inokulumot oly módon készítünk, hogy az inkubált ferde tenyészet spórákat és micéliumot tartalmazó részletét 500 ml-es Erlenmeyer-lombikban levő, 100 ml mennyiségö alábbi összetételű táptalajba inokuláljuk.
Komponens Mennyiség, g/1 csapviz
Szójalóz/kereskedelmi forgÉT lomban levő szójababliszt;
gyártó cég: Centrál Soya Company/ 10,0
Cerelóz /technikai minőségű glükóz/ 10,0
Nátrium-szulfát 1,0
Kalcium-karbonát 0,2
Kobalt-klorid-hexahidrát /CoCl2.6H2O/ 0,001
A pH-t sterilezés előtt 6,0 értékre állítjuk be.
Az inokulált táptalajt 28 °C -on 4 napon át inkubáljuk, percenkénti 250-es fordulatszámmal működő forgó rázatógépen. A kapott tenyészet kétszer 30 ml-es mennyiségét használjuk fel 2 db 6 literes Erlenmeyer-lombikban levő 2-2 liter, fenti összetételű táptalaj inokulálására. Az inokulált 6-li3
-3193017 teres Erlenmeyer-lombikokat percenkénti 250-es íordulátszámmal működő forgó rázatógépen 28°C-on 4 napón át inkubáljuk. Az ily módon kapott vegetatív tenyészét 4 literes mennyiségét használjuk fel 454 literes /100 gallonos/ fermentorban levő, alábbi összetételű, 227,1 liter /60 gallon/ termelő táptalaj inókulálására.
Komponens Mennyiség, g/l ~ csapvíz
Cerelóz /technikai minőség?! glükóz/ 20,0
Szójalóz/kereskedelmi forgalomban levő szójababliszt; gyártó cég: Centrál Soya Company/ 10,0
Nátrium-szulfát 1,0
Kalcium-karbonát 0,2
Kobalt-klorid-hexahidrát /CoCl2.6H2O/ 0,001
SÁG 4130 habzásgátló/szükség szerint adjuk hozzá a fermentáció alatt/.
A pH-t sterilezés előtt 6,0 értékre állítjuk be.
Az inokulált tank-fermentort 3 m3/perc levegővel levegőztetjük és percenként 280 fordulatszámmal működő keverővei keverjük. A fermentációt 28eC -on 97 órán át végezzük.
2. példa
Az X-14934A nátrium-sójának izolálása
A-lépés
A 227,1 literes fermentáció /1. példa/ teljes fermentlevéhez 139 órás fermentálás után azonos térfogatú etil-acetátot adunk. Az elegyet ega órán át keverjük, majd az oldószeres réteget elválasztjuk és a vizes fázist azonos térfogatú etil-acetáttal ismét extraháljuk. A két oldószeres fázist egyesítjük és vákuumban 2,6 literre bepároljuk. B-lépés
Az etil-acetátos extraktumot bepároljuk. A visszamaradó olajat n-hexánban oldjuk és azonos térfogatú acetonitrillel ötször, majd 9:1 arányú acetonitril-metanol eleggyel egyszer extraháljuk. Az acetonitriles és 9:1 arányú acetonitril-metanol elegyes extraktumokat egyesítjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot etil-acetátban oldjuk, majd 1 n sósavval, szobahőmérsékleten telített nátrium-karbonát-oldattal és vízzel mossuk. Az oldószeres fázist nátrium-szulfát felett szárítjuk és vákuumban bepároljuk. 38 g olajos maradékot nyerünk.
C· lépés
A B-lépésnél nyert olajat metilén-kloridban oldjuk és 500 g szilikagélt /Davison 62/ tartalmazó, metilén-kloriddal töltött oszlopra 5 visszük fel. Az oszlopot 2 liter metilén-kloriddal, 4 liter 7:3 arányú etil-acetát/hexán eleggyel, 2 liter 95:5 arányú etil-acetát/metanol eleggyel és 2 liter 9:1 arányú etil-acetát/metanol eleggyel eluáljuk.
'u 20 ml-es frakciókat veszünk le és a 490—512. sz. frakciót összegyűjtjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot /8 g/ 250 g szilikagélt tartalmazó, metilén-kloriddal töltött oszlopon kromatografáljuk. Az 15 oszlopot 2 liter dietil-éterrel és 2 liter 20:0,5 arányú dietil-éter/etanol eleggyel eluáljuk. 20 ml-es frakciókat veszünk le.
D-lépés ~
A C-lépésnél a 250 g szilikagélt tartalmazó oszlopról eluált 60—100. sz. frakciót egyesítjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot acetonitril-víz elegyböl kristályosítjuk. A ka25 patt kristályos X-14934A-antibiotikum-nátr um-só 156—158°C-on olvad.
Mikroanalízis: C48H79O15Na.2H2O képletre /955,18/:
számított: C%=60,36; H%=8,76;
7n Na%=2,4l; H2O%=3,77;
30 talált: C%=60,62; H%=8,96;
60,90; 9,11;
Na%=2,34; H2O%=4,52.
35
3. példa
Az X-14934A-antibiotikum rubidium-sójának előállítása
4θ 100 mg X- 14934A-antibiotikum-nátriumsó netilén-kloridos oldatát előbb 1 π sósavval, majd vízzel, végül vizes rubidium-Uidroxid-oldattal négyszer mossuk. Az oldószeres fázist celiten történő átszűréssel tisztítjuk és vákuumban bepároljuk. A mara5 cékot víz hozzáadása közben acetonitrilből kristályosítjuk. Átkristályosítás után röntgen-analízisre alkalmas kristályokat nyerünk.
5θ Analízis : /C
48^79 O15/2Rb/H2O/2 képletre: számított: C%=60,25; H%=8,53;
Rb%=4,47; H2O% = 1,88; talált: C%=59,73; H%=8,41;
Rb%=4,63; H2O% = 1,74.
A só konfigurációját röntgen-analízissel igazoltuk.
Az X-14934A antibiotikum antimikróbás aktivitását a II. táblázatban mutatjuk be:
Mikroorganizmus
ATCC
II. táblázat
Minimális gátlási
- koncentráció /MGK/X /MCG/ml/
G-pálcikák
Pseudomonas aeruginosa 8705 Proteus vulgáris 6380 >1000 >1000
-4193017
Mikroorganizmus
II. táblázat
ATCC szám (folyt.)
Minimális gátlási koncentráció /MGK/X /MCG/ml/
Escherichia coli 27856 >1000
Klebsiella pneumoniae 27858 >1000
Serratia marcescens 27857 >1000
Serratia sp. 93 >1000
Acinetobacter calcoaccticus 10153 >1000
G+ cocci Streptococcus faecium ATCC 8043 0,9
Staphylococcus aureus 6538P 1 ,9
Micrococcus luteus 9341 7,9
G+ pálcikák Bacillus megaterium 8011 3,9
Bacillus sp. E 27359 0,45 r xv
Bacillus subtilis 558 3,9
Bacillus sp. TA 27860 3,9
G+ szálak Mycobacterium phlei 355 7,9
Streptomyces cellulosae 3313 15,7
Penészek Paecilomyces varioti 25820 62,5
Penicillum digitatum χ26821 125
Élesztők Candida albicans 477 7,9
Saccharomyces cerevisiae 4226 125 xxNRRL-szám
Az X-14934A antibiotikum és sói — mint már említettük — bizonyos Gram-pozitív baktériumok növekedését jelentős mértékben gátolják.
Az /1/ képletű antibiotikum és sói az egészségügyben felhasználható mosófolyadékokban /pl. kézmosásra vagy szennyezett szobákban vagy laboratóriumokban levő berendezések, padlók vagy bútorzatok tisztitására/alkalmazhatók. Az /1/ képletű antibiotikumot továbbá érzékeny mikroorganizmusok növekedésének gátlására alkalmazhatjuk lemez-assaykben /antibakteriális anyagok standard-agarlemezes tesztje/ és más mikrobiológiai közegekben.
Az X-14934A antibiotikum a Treponema hyodysenteria ellen hatásos; utóbbi a sertés dizentéria kórokozója. Az antibiotikum már 1 mcg/ml koncentrációban kifejezett aktivitást mutat.
Az X-14934A antibiotikum kokcidiosztatikus szerként erős hatást fejt ki.
Az antikokcidiális aktivitást laboratóriumi csirkéken az alábbi teszttel igazoljuk:
xlegalacsonyabb koncentráció, amely az agar-diffuziós módszernél még gátlási zónát mutat.
Az alábbi teszt-módszert alkalmazzuk:
Minden gyógyszer-adagoláshoz 10—10 csirkéből álló csoportokat alkalmazunk. Súly-kontrollként és fertőzött kontrollként ugyancsak 10—10 csirkéből álló csoportok szolgálnak. A teszt-vegyü letet 48 órával a fertőzés előidézése előtt adjuk be. 1 g teszt-ve40 gyületet mechanikus keverőberendezésben keverünk össze a kívánt dózist biztosító menynyiségű csirketáppal. A fertőzést kb. 200000 db, pipettával orálisan beadott oocisztával idézzük elő. A teszt időtartama 11 nap. Ezután a túlélő baromfikat felboncoljuk és a vakbélben levő durva sérüléseket megvizsgáljuk. A kísérleti állatokat a túlélő csirkék száma és a vakbél-sérülések száma alapján osztályozzuk. Az eredményeket mint átlagos sérü50 lési fok.· /Á.S.F./ fejezzük ki. A 2,5-nél kisebb átlagos sérülési fok szignifikáns eredménynek tekinthető.
Az eredményeket a III. és IV. táblázatban foglaljuk össze.
-5193017
III, táblázat
E. Tenella elleni aktivitás
Antibiotikum Koncentráció a tápban, ppm Súlygya- Puszturapodás, lás, Átlagos sérülési fok
/0 %-b an
Fertőzetlen kezeletlen kontroll 0 100 0 0,0
Fertőzött kezeletlen kontroll 0 60 20 3,0
Lasalocid 75 98 0 0,0
X-14394A 100 21 0 0,0
25 25 0 0,0
10 101 0 0,6
Vegyes IV. táblázat fertőzés elleni aktivitás****
Ant ibiotikum Koncentráció a tápban, ppm Súlygyarapodás , % Pusztu lás %-ban - Felső X Közép XX Vak- bél XXX
Fértőzet len kezeletlen kontroll 0 100 0 0,0 0,0 0,0
Fertőzött kezeletlen kont ro11 0 34 20 3,0 3,0 3,1
X-14394A 5 44 40 3,1 3,1 3,2
nátrium-só 10 65 20 2,7 2,4 2,7
15 62 0 2,0 2,0 2,0
x = csibebél duodenális része; xx = csibebél jejunális része; xxx = csibebél alacsony értéke; xxxx = Különböző Eimeria speciesekből - beleértve monensin-rez
tennella törzseket - vegyesen vett 500 000 oociszta.
A találmányunk szerinti, hatóanyagként kristályos X-14934A antibiotikumot vagy sóját vagy a szárított szüretien fermentlevet tartalmazó kokcidiosztatikus készítményeket oly módon állítjuk elő, hogy a hatóanyagot inért hordozóanyagokkal összekeverjük. Inért hordozóanyagként takarmányt, tápot, hígítóanyagokat stb. alkalmazhatunk. Az „inért hordozóanyag kifejezésen olyan anyagokat értünk, amelyek parazitaellenes/pl. kokcidio-. sztatikus/ hatást nem fejtenek ki, a hatóanyaggal szemben inaktívak és a kezelendő állatokkal biztonságosan megetethetők.
A találmányunk szerinti, orálisán adagolható kokcidiosztatikus készítmények kokcidiozisnak kitett háziszárnyasokon — különösen pulykán és csirkén — a kokcidiózis hatékony kezelésére és megelőzésére egyaránt alkalmasak. A találmányunk szerinti kompozl55 ciók további előnye, hogy a kezelt baromf súlyát megtartja, sőt a kontrolihoz viszonyítva súlygyarapodás is jelentkezik. így a tilálmányunk szerinti kompozíciók egyrészről a kokcidiózist gyógyítják és megelőzik, másrészről javítják a takarmány súlygyarapodáshoz vezető hasznosítását.
Az állatokkal megetetett takarmány végső hatóanyagtartalma természetesen az adott θ5 eset követelményeitől függ és tág határokon belül változhat. A koncentráció-tartomány
-6193017 alsó határát az képezi, hogy a hatóanyag a kívánt kokcidiózis-ellenes hatást még kifejtse. A koncentráció-tartomány felső határának megválasztásánál arra kell ügyelni, hogy nem-kívánatos mellékhatások ne lépjenek fel. így pl. a naponta fogyasztott takarmány-premix vagy teljes takarmány hatóanyagtartalma általában kb. 1—20 ppm. Az előnyös koncentráció kb. 10—15 ppm. A k<?kcidiózis kezelésére illetve megelőzésére általában kb.z 1 —15 ppm hatóanyagkoncentráció elegendő. A 20 ppm feletti hatóanyag-koncentráció általában már nem mutat jobb eredményt a fenti előnyös tartománynál, ugyanakkor bizonyos esetekben a növekedést, takarmányhasznosltást és elhullást kedvezőtlenül befolyásolhatja.
Az optimális dózis természetesen az állat nagyságától függően változik. Az X-14934A antibiotikumot tartalmazó, kokcidiózis kezelésére vagy megelőzésére szolgáló készítményeket oly módon állítjuk elő, hogy a hatóanyagot takarmánnyal vagy hordozóanyaggal összekeverve takarmány-premixet, takarmány-koncentrátumot vagy takarmány-adalékot készítünk. Az ily módon készített takarmány-premixet, -koncentrátumot vagy -adalékot felhasználás előtt hígítással a kívánt koncentrációjú kész takarmánnyá alakítjuk. Takarmány-adalékon az állat által közvetlenül elfogyasztható vagy további hígítással kész takarmánnyá alakítható termékeket értünk. A takarmány-adalékot, koncentrátumok és premixek viszonylag nagymennyiségű /1/ általános képletű hatóanyagot tartalmaznak és oly módon állíthatók elő, hogy a hatóanyagot megfelelő hordozóanyagban összekeverve a hordozóanyagban egyenletesen eloszlatjuk. Hordozóanyagként a hatóanyaggal szemben inért, a kezelendő állattal biztonságosan megetethető szilárd anyagokat értünk. Hordozóanyagként pl. kereskedelmi forgalomban levő baromfitápot, őrölt gabonaszemeket és gabonamagokat, szemes melléktermékeket, növényi fehérjekoncentrátumokat/szója, mogyoró/, fermentációs melléktermékeket, sót, mészkövet, szervetlen vegyűleteket és ezek keverékeit alkalmazhatjuk. A folyékony diszperziók készítéséhez vizet vagy növényi olajokat alkalmazhatunk, amelyek előnyösen felületaktív anyagokat, emulgeálószereket stb. tartalmazhatnak. A folyékony diszperziók továbbá pl. etilén-diamin-tetraecetsavat stb. és oldást elősegítő anyagokat tartalmazhatnak. A találmányunk szerinti kompozíciók készítésénél minden olyan megfelelő hordozó- vagy hígítóanyagot felhasználhatunk, amely inért és a kezelendő állatra nézve nem toxikus.
A hatóanyagot az inért hordozó- vagy hígítóanyaggal bármely szokásos módszerrel vagy berendezéssel megfelelő formára hozhatjuk vagy őrölhetjük/pl. porkeverék, szemcse stb./. Eljárhatunk pl. oly módon, hogy a hatóanyagot és az inért komponenseket — a takarmány10 anyagok jelenlétében vagy anélkül — bármely megfelelő őrlő- vagy porítóberendezésben finoman megőröljük vagy porltjuk. Amennyiben az őrlést vagy porítást a takarmányanyagok nélkül végezzük el, a kapott terméket utólag bármely megfelelő takarmányban vagy tápban egyenletesen eloszlatjuk. Az /1/ általános képletű hatóanyaggal való.összekeverésre felhasználható baromfitápok sok komponenst tartalmazhatnak, pl. nagy energiatartalmú szemes terményeket/pl. kukoricát, búzát, búzalisztet, zablisztet stb./; közepes vagy alacsony energiatartalmú szemes terményeket/pl. zabot, árpát, búzalisztet, dercét, darát stb./; stabilizált zsírokat; növényi fehérjéket/pl. szójabablisztet, kukoricaglutinlisztet, mogyorólisztet stb./; allati fehérjéket/pl. hallisztet, oldható halmaradványokat, húslisztet/; nem-azonosított növekedési faktor forrásokat és más B-vitamintartalmú hordozóanyagokat/pl. szárított tejtermékeket, szárított sörélesztőt, szárított desztillációs maradványokat, oldható fermentációs melléktermékeket stb./; vízmentesített lucernalisztet és másfajta speciális adalékanyagokat/pl. riboflavint, B12-vitamint, kaldum-pantotenátot, niacint, kolint. K-vitainint, E-vitamint stb./; stabilizált A-vitamint, D3-vitamint/D-vitaminnal aktivált állati szterolokat/; kálcium- és foszfor-adalékokat/pl. dikálcium-foszfátot, gőzölt csontlisztet, fluormentesített foszfátot, mészkövet stb./; jódozott sót, mangán-szulfátot, cink-karbonátot, antibiotikum táp-kiegészítőket; metionint vagy hidroxi-analógját vagy antioxidánsokat.
A találmányunk szerinti kokcidiosztatikus kompozíciók orálisan adagolhatok. A kompozíciókat a kezelendő állat szokásos takarmányába keverhetjük be vagy más módon juttathatjuk az állat szervezetébe/pl. tablettába, drazséba vagy bóluszba bedolgozzuk és megetetjük az állattal/. A hatóanyag kikészítése, formázása és az állat szervezetébe juttatása az állattenyésztésben szokásos és jólismert módszerekkel történhet.
Broiler indltótápként felhasználható gyógyszertartalmú baromfitápot oly módon készíthetünk, hogy 10—15 ppm X-14934A antibiotikumot az alábbi összetételű baromfi alap-tápba keverünk be:
Komponens
Kukoricaliszt, 2. sz., sárga, őrölt Stabilizált zsír vagy növényi olaj Szójababolajliszt/alacsony száltartalom, fehérje 50 %/ Kukoricagíutinliszt Halliszt, antioxidánssal kezelt, fehérjetartalom 60 %
Mennyiség kg/tonna 561,5 kg/tonna 30 kg/tonna 240 kg/tonna 25 kg/tonna 15
-7193017
Komponens
Oldható halmaradékok, szárazanyag Hús- és csontmaradványok, 50 % fehérje Kukoricadesztillációnál nyert szárított oldható maradékok Lucernaliszt, 17 % fehérje, 100 000 A/Ib Jódozott só Mangán-szulfát, takarmány minőségű Cink-karbonát vagy -oxid
Riboflavin
B,2-vitamin
Kalcium-pantotenát
Niacin
Stabilizált A-vitamin USPI-egységek D3-vitamin, N.E. E-vitamin-acetát, N.E. E-vitamin/menadione nátrium-biszulfit/ DL-metionin vagy analógja
Antioxidáns/ethoxyguin vagy butilezett hidroxi-toluol/
Mennyiség kg/tonna 5 kg/tonna 70 kg/tonna 25 kg/tonna 15
kg/tonna 2,5
kg/tonna 0,375
kg/tonna 0,125
g 3
mg 6
g 5
g 30 6.000.000
650 000 5 000
g 2
kg/tonna 0,5
kg/tonna 0,125
A gyógyszerezett takarmány készítéséhez az antibiotikumot más koncentrációban is alkalmazhatjuk és az antibiotikumot megfelelő antibiotikum-koncentrációt biztosító mennyiségű szárított, nem-szűrt fermentlé alakjában is hozzáadhatjuk.
Az X-14934A antibiotikum kérődzőkön is súlyhozamnövelő és takarmányhasznosításjavító hatást fejt ki. Az /1/ képletű hatóanyag az illékony zsírsavak arányának 10 eltolásával a propionát-szintet kb. 50 ppm-re növeli.

Claims (3)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás az /1/ képletű vegyület és sói előállítására, azzal jellemezve, hogy az NRRL-15518 számon deponált Streptomyces hygroscopicus törzset vagy annak az /1/ kép2Q letű vegyület termelésére képes mutánsát vagy variánsát nitrogén-forrást tartalmazó vizes szénhidrát-oldatban szubmerz aerob körülmények között tenyésztjük, majd az /1/ képletű vegyületet az oldatból izolál25 juk és kívánt esetben sóvá alakítjuk.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az /1/ képletű vegyületet nátriumsóvá alakítjuk.
  3. 3. Eljárás kokcidiosztatikus kompozíció előállítására, azzal jellemezve, hogy az /1/ képletű vegyületet vagy sóját inért megfelelő hordozóanyagokkal összekeverjük.
HU842884A 1983-07-28 1984-07-27 Process for producing new poliether-type antibiotic HU193017B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/518,233 US4510317A (en) 1983-07-28 1983-07-28 Antibiotic X-14934A

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT36178A HUT36178A (en) 1985-08-28
HU193017B true HU193017B (en) 1987-08-28

Family

ID=24063126

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU842884A HU193017B (en) 1983-07-28 1984-07-27 Process for producing new poliether-type antibiotic

Country Status (21)

Country Link
US (1) US4510317A (hu)
EP (1) EP0133971B1 (hu)
JP (1) JPS6051198A (hu)
KR (1) KR910005629B1 (hu)
AT (1) ATE33390T1 (hu)
AU (1) AU575574B2 (hu)
CA (1) CA1253097A (hu)
DE (1) DE3470313D1 (hu)
DK (1) DK159452C (hu)
ES (1) ES534644A0 (hu)
FI (1) FI76836C (hu)
GR (1) GR82437B (hu)
HU (1) HU193017B (hu)
IE (1) IE57274B1 (hu)
IL (1) IL72517A (hu)
MC (1) MC1615A1 (hu)
NO (1) NO158881C (hu)
NZ (1) NZ209022A (hu)
PH (1) PH20120A (hu)
PT (1) PT78991B (hu)
ZA (1) ZA845601B (hu)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4707493A (en) * 1983-02-15 1987-11-17 Pfizer Inc. 19-epi-dianemycin as an anticoccidial and antibacterial agent
US4591559A (en) * 1983-07-28 1986-05-27 Hoffmann-La Roche Inc. Antibiotic X-14934A and a method for its preparation
US4625041A (en) * 1984-02-17 1986-11-25 Pfizer Inc. Acidic polycyclic ether antibiotic
US4894366A (en) * 1984-12-03 1990-01-16 Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. Tricyclo compounds, a process for their production and a pharmaceutical composition containing the same
EP0209971B1 (en) * 1985-05-28 1991-03-06 Eli Lilly And Company Polyether antibiotic and process for its production
US5888788A (en) * 1994-05-18 1999-03-30 Union Nationale Des Groupements De Distillateurs D'alcool (Ungda) Use of ionophoretic polyether antibiotics for controlling bacterial growth in alcoholic fermentation
TW393413B (en) * 1996-01-19 2000-06-11 Shimano Kk Clipless bicycle pedal with large shoe-contacting area
EP2825178A4 (en) * 2012-03-16 2015-10-14 Univ Georgia GLYCOMIMETIKA FOR INHIBITING PATHOGEN HOST INTERACTIONS

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3953474A (en) * 1974-11-15 1976-04-27 Eli Lilly And Company Antibiotic A204I derivatives
GB2024806B (en) * 1978-03-16 1982-05-06 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Onomycin derivatives
JPS5592387A (en) * 1978-12-29 1980-07-12 Taisho Pharmaceut Co Ltd Antibiotic substance tm-531
US4431665A (en) * 1979-08-13 1984-02-14 Syntex (U.S.A.) Inc. Acylated laidlomycin derivatives
FR2463144A1 (fr) * 1979-08-13 1981-02-20 Syntex Inc Nouveaux diesters de laidlomycine, leur procede de production, compositions a usage veterinaire les contenant et leur utilisation pour accroitre le rendement d'assimilation des aliments chez un ruminant
US4359583A (en) * 1980-09-16 1982-11-16 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. Antibiotics TM-531 B and TM-531 C
US4361649A (en) * 1981-07-20 1982-11-30 Pfizer Inc. Polycyclic ether antibiotic
GB2113671A (en) * 1982-01-19 1983-08-10 Pfizer Ltd Polycyclic ether antibiotics
GT198400008A (es) * 1983-02-15 1985-07-12 19-epi-dianemicina y procedimiento para el mismo
US4552843A (en) * 1984-02-17 1985-11-12 Pfizer Inc. Process for producing an acidic polycyclic ether antibiotic by cultivation of a novel strain of Streptomyces endus subspecies aureus

Also Published As

Publication number Publication date
ES8600640A1 (es) 1985-10-16
PT78991B (en) 1986-10-23
DK366084A (da) 1985-01-29
IE57274B1 (en) 1992-07-01
NO843054L (no) 1985-01-29
HUT36178A (en) 1985-08-28
EP0133971B1 (de) 1988-04-06
GR82437B (hu) 1984-12-13
NO158881C (no) 1988-11-09
PH20120A (en) 1986-10-02
ZA845601B (en) 1985-03-27
DK159452B (da) 1990-10-15
NO158881B (no) 1988-08-01
AU575574B2 (en) 1988-08-04
IL72517A (en) 1988-03-31
DE3470313D1 (en) 1988-05-11
US4510317A (en) 1985-04-09
FI76836B (fi) 1988-08-31
AU3124684A (en) 1985-01-31
KR910005629B1 (ko) 1991-08-01
NZ209022A (en) 1987-08-31
MC1615A1 (fr) 1985-07-18
PT78991A (en) 1984-08-01
CA1253097A (en) 1989-04-25
FI843009A0 (fi) 1984-07-27
FI843009A (fi) 1985-01-29
DK159452C (da) 1991-03-18
IE841949L (en) 1985-01-28
KR850001291A (ko) 1985-03-18
EP0133971A1 (de) 1985-03-13
IL72517A0 (en) 1984-11-30
ATE33390T1 (de) 1988-04-15
JPS6051198A (ja) 1985-03-22
ES534644A0 (es) 1985-10-16
DK366084D0 (da) 1984-07-26
FI76836C (fi) 1988-12-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA1160972A (en) Polyether compounds
US4038384A (en) Antibiotic a-28086 and process for production thereof
US4035481A (en) Antibiotic A-28086 and process for production thereof
US4141907A (en) Deoxynarasin antibiotics
HU193017B (en) Process for producing new poliether-type antibiotic
US4591559A (en) Antibiotic X-14934A and a method for its preparation
US4174404A (en) Deoxynarasin antibiotics
US4085224A (en) Method of increasing feed utilization
US4168272A (en) Homologs of lasalocid A
US4582853A (en) Treatment of coccidiosis with antibiotic X-14934A
US4368265A (en) Culturing a strain of nocardia to produce antibiotic X-14868A
HU203789B (en) Process for producing polycyclic acidic ether-type antibiotica of anticoccidial and growth-stimulating activity
US4100171A (en) Antibiotic X-14547
US4204039A (en) Process for producing deoxynarasin antibiotics
US4537956A (en) Antibiotics X-14889 A, C and D
US4410712A (en) Antibiotics X-14873 A, G and H
US4601984A (en) Process to produce antibiotics X-14873 A, G and H
US4476139A (en) Discovery of antibiotic L-681,217 in fermentation broth
US4170595A (en) 3-Ethyl-1,3-dihydro-3-methoxy-2H-indole 2-one
US4167579A (en) Antibiotic X-14547 and its use for increasing feed efficiency in ruminants
CS209848B2 (cs) Způsob přípravy polyetberických antibiotik A-28086
DK142061B (da) Fremgangsmåde til fremstilling af antibiotikum A-28086-kompleks, dets komponenter faktor A, faktor B og faktor D eller salte eller estere deraf.
HU195253B (en) Microbiological process for producing macrolide antibiotica i sposob poluchenija veterinary compositions containing these antibiotica

Legal Events

Date Code Title Description
HU90 Patent valid on 900628
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee