HU186309B - Reagent for determining the thrombacyta and leucocyte number - Google Patents
Reagent for determining the thrombacyta and leucocyte number Download PDFInfo
- Publication number
- HU186309B HU186309B HU306083A HU306083A HU186309B HU 186309 B HU186309 B HU 186309B HU 306083 A HU306083 A HU 306083A HU 306083 A HU306083 A HU 306083A HU 186309 B HU186309 B HU 186309B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- parts
- weight
- platelet
- solution
- reagent
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 14
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 26
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 12
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 claims abstract description 7
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 claims abstract description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims abstract description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 239000001016 thiazine dye Substances 0.000 claims abstract description 3
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 claims description 36
- 238000004820 blood count Methods 0.000 claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 14
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 14
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 14
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 5
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N [9-(dimethylamino)-10-methylbenzo[a]phenoxazin-5-ylidene]azanium;chloride Chemical compound [Cl-].O1C2=CC(=[NH2+])C3=CC=CC=C3C2=NC2=C1C=C(N(C)C)C(C)=C2 ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N cocaine Chemical compound O([C@H]1C[C@@H]2CC[C@@H](N2C)[C@H]1C(=O)OC)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000012886 linear function Methods 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- PVPBBTJXIKFICP-UHFFFAOYSA-N (7-aminophenothiazin-3-ylidene)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(=[NH2+])C=C2SC3=CC(N)=CC=C3N=C21 PVPBBTJXIKFICP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 16-Epiaffinine Natural products C1C(C2=CC=CC=C2N2)=C2C(=O)CC2C(=CC)CN(C)C1C2CO PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000981 basic dye Substances 0.000 description 1
- 239000001045 blue dye Substances 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 229960003920 cocaine Drugs 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- ZXJXZNDDNMQXFV-UHFFFAOYSA-M crystal violet Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC=C1[C+](C=1C=CC(=CC=1)N(C)C)C1=CC=C(N(C)C)C=C1 ZXJXZNDDNMQXFV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960001235 gentian violet Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229940053973 novocaine Drugs 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010981 turquoise Substances 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5094—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for blood cell populations
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
- G01N2001/305—Fixative compositions
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
A találmány tárgya teljes vérből thrombocyta-szám és fehérvérsejt-szám normál fénymikroszkopikus úton történő egyidejű meghatározására alkalmas reagens.
Ismeretes, hogy mind a thrombocyta-szám, mind a fehérvérsejt-szám meghatározása a klinikai laboratóriumok standard módszerei közé tartozik.
A thrombocyta-számlálás többféle módon végezhető el:
1. Elektronikus részecskeszámlálás thrombocyta számlálásra kifejlesztett automatákkal. Bár ez a módszer gyors és egyszerű; előfeltétele azonban drága műszerek beszerzése, és egyes esetekben nem helyettesíthetők a mikroszkópos meghatározások. Az eljárás reprodukálhatósága is rosszabb a mikroszkópos számlálókénál.
2. Fáziskontraszt-mikroszkóp segítségével végzett thrombocyta-számlálás kokainos-, novokainos- vagy egyéb thrombocyta-számláló oldattal. A vizsgálat elvégzéséhez a fáziskontraszt-mikroszkóp nélkülözhetetlen, további jelentős hátránya, hogy a vizsgálatot végző személy számára fárasztó, szemrontó, különösen nagy vizsgálati szám mellett.
3. Thrombocyta-szám meghatározása festékes módszerrel : ez a legegyszerűbb és mikroszkóppal elvégezhető módszer. A jelenleg használt festékes módszerek kristály-ibolyát (gencián ibolya, kémiai neve: hexametil-para-rozanilin-hidroklorid) használnak festékként és velük szemben azonban az a jogos kifogás merült fel, hogy a fáziskontraszt meghatározásához képest torzítanak, eltérést okoznak, mert nem festik meg valamenynyi thrombocytát jól láthatóan.
A fehérvérsejt-számlálás a legáltalánosabban alkalmazott módszer a haematológiai diagnosztikában. A magyar gyógyszerkönyvben (Ph. Hg. VI.) ismertetett Türk-oldat erre a célra általánosan bevált és elterjedt, de alkalmatlan a thrombocyta-szám meghatározására, pedig számos esetben a két elterjedt laboratóriumi vizsgálatra együttesen van szükség. A thrombocyta és a fehérvérsejtszám teljes vérből normál fénymikroszkóp segítségével történő meghatározásához egy olyan festékoldatra van szükség, mely:
a) a vörösvértestek teljes hemolízisét létrehozza a thrombocyták és fehérvérsejtek számbeli redukciója nélkül, bj egyaránt fixálja a thrombocytákat és a fehérvérsejteket, cj olyan festéket tartalmaz, mely nagy affinitással kötődik az előbb említett alakos elemekhez, így ezeket normál fényben vizualizálja.
Az első két követelménynek eleget tévő oldatot ugyan sikerült kifejleszteni [Scand. J. Clin. Invest. 33, 121 (1974)], de csak fáziskontraszt-mikroszkóppal végezhető el vele a thrombocyta-számlálás.
A találmány célja tehát olyan festékoldat előállítása, amellyel teljes vérből normál-fénymikroszkóp használatával elvégezhető a thrombocyta és fehérvérsejt meghatározása úgy, hogy az ismert reagensek említett hátrányai kiküszöbölhetők.
Kísérleteink során arra a meglepő felismerésre jutottunk, hogy a haemolizáló-fixáló oldatnak nagy affinitású, bázikus festékkel való kombinálásával olyan reagens oldatot kapunk, amellyel a thrombocyta- és fehérvérsejt-szám együtt meghatározható, és normál fénymikroszkóp elegendő a vizsgálat elvégzésére. Ezen két feltétel akkor teljesíthető, ha a haemolizáló-fixáló oldat és a festék között nincsen precipitáció formájában megnyilvánuló inkompatibilitás.
Megelőzendő az, hogy akárcsak mikroszkopikus méretű precipitátumok kialakuljanak, mert ezek a kicsapódások thrombocyta jelleget ölthetnek, torzítva ezzel a meghatározás eredményét.
A fenti feltételeknek az eddig használt kresii-ibolyatípusú festékoldatok csak részben tesznek eleget, mert a számláló oldat kresil-ibolya festékkomponense gyengén bázikus karakterű; ennek eredményeként a thrombocyták viszonylag halványan festődnek, a fehérvérsejteket pedig nem tüntetik fel egyértelműen.
Kísérleteink során felismertük, hogy a kívánt célra az ún. tiazin-típusú festékek kiválóan alkalmasak. Ezek jellemzője, hogy két kromofor-csoporttal rendelkeznek. A tiazin-tipusú vegyületeket az orvosi gyakorlatban már több területen, pl. baktériumfestésben, hisztokémiában már alkalmazták, de ebből még egyáltalán nem volt várható fenti felismerésünk és erre semmiféle szabadalmi utalás nincsen. A vegyületcsoport legfontosabb képviselői a toluidin-kék (lásd I. képlet), a tionin (lásd ΓΙ. képlet) és a metilén-kék (lásd III. képlet).
A fentiek alapján a találmány thrombocyta-szám és fehérvérsejt-szám normál fénymikroszkopikus úton történő egyidejű meghatározására alkalmas reagens, amely abban áll, hogy 0,1—5 súlyrész acetont, 0,05—2,0 súlyrész formaldehidet vagy glutáraldehidet, 0,001—0,1 súlyrész tiazin-szinezéket, előnyösen toluidin-kéket, 0,1—2,0 súlyrész ásványi sót, előnyösen nátrium-kloridot és a fennmaradó részben vizet tartalmaz.
A találmány szerinti reagens célszerűen 0,1—5,0 súlyrész acetonból, 0,05—2,0 súlyrész formaldehidből, 0,001—0,1 súlyrész toluidin-kékből, 0,1—2 súlyrész nátrium-kloridból áll.
A találmányban használt festékek különleges előnye abban áll, hogy rendkívül nagy affinitással rendelkeznek a thrombocyták és fehérvérsejtek savanyú makromolekuláihoz is, ennek eredményeként igen intenzív, markáns vizualizálást érhetünk el alkalmazásukkal.
A találmány szerinti reagens legfontosabb előnye, hogy az ismert reagensek érzékenységét jelentősen felülmúlja. Ezt az alábbi vizsgálatok igazolják:
Ismeretlen thrombocyta- és fehérvérsejt-számú mintából kapott adatokat 20, egymást követő thrombocytaós fehérvérsejt-szám meghatározása során nyertünk. Sejtszámlálásnál a vizsgálatok pontossága akkor kielégítő, ha a standard eltérés 10% alatt van. 218,8 G/l-es thrombocyta-szám mellett a SD= ±5,0-nek adódott, ezen értékek felhasználásával a variációs koefficiens, standard eltérésként %-ban kifejezve 2,28 (1. ábra). Megjegyezzük, hogy G/l érték az Sí-rendszerben megadott thrombocyta- és fehérvérsejt-számot jelenti. [G/l=giga(sejtszám) (1 = 109/l).] (1. ábra.)
A fehérvérsejt-számolás optimális hibája 5,08 G/l atlag mellett SD= ±0,042, ami 0,8%-os variációs koefficiensnek felel meg (3. ábra).
Összehasonlító kísérletet végeztünk a találmány szerinti reagens-oldattal thrombocyta-számlálás szempontjából a Gödecke-cég által THROMBOFIX® néven forgalomba hozott thrombocyta-számláló készítménnyel, továbbá — fehérvérsejtszámolás szempontjából — Türk-oldattal 41 beteg véréből paralell thrombocyta- és fehérvérsejtszám-meghatározásokat végezve.
Eredményeinket Descartes-i koordinátarendszerbe foglaltuk (2., 4. ábra), s Hewlett—Packard HP—90 szá3
-2186309 mológéppel meghatároztuk a két-két módszer közötti korrelációt és a kapcsolatokat leíró y=ax+b függvény standard (a, b) paramétereit.
Thrombocyta-számlálásra a korreláció (r)=0,927, és a két módszer közötti lineáris függvénykapcsolat az y=l,05x—0,94 kapcsolattal írható le, y-nal a találmány szerinti thrombocyta-számláló-oldat, míg x-szel a THROMBOFIX® alkalmazásával nyert eredményt jelölve (2. ábra).
Megállapítható, hogy a találmány szerinti reagensoldat alkalmazásával nyert thrombocytaszám kb. 5%kal magasabb ugyanabból a mintából, mint THROMBOFIX® használatakor.
A meghatározás természetéből eredően felülmérésről nem lehet szó; hanem az a magyarázat, hogy a találmány szerinti reagens-oldat festékkomponense lényegesen affinisabb a thrombocyta makromolekuláinak savanyú csoportjaihoz és így a kép kontrasztosabb, jobban érzékelhető, azaz oldatuk kiküszöböli a korábbi festékoldstokkal kapott szisztémás alámérést.
Megjegyzendő, hogy a THROMBOFIX® a fáziskontraszt mikroszkóppal végzett technikához viszonyítva is hasonló alámérést eredményezett.
Fehérvérsejt-számolásra módszerünk a Türk-oldatos számlálással r=0,959-es korrelációt mutat, az összefüggés az X=0,97x+0,23 lineáris függvénnyel írható le, mely jelzi, hogy a két eljárás között nincs szignifikáns különbség.
A következő példák a találmány szerinti reagensoldatok összeállítását és használatát mutatják be:
1. példa
Számláló oldat:
200 ml 0,9%-os desztillált vizes NaCl-oldatot 5 ml 35%-os formaldehiddel és 770 ml ioncserélt deszt. vízzel összemérünk. Alapos keverés után ebben 100 mg toluidin-kék festéket feloldunk és az oldatot G—4-es üvegszűrőn szűrjük. 25 ml aceton hozzáadása után az oldatnak tisztának, szemcsementesnek kell lennie.
2. példa
Thrombocyta- és fehérvérsejt-szám meghatározása alvadásgátolt vénás vérből:
A meghatározást leghelyesebb etiléndiamin-tetraecetsavval (a továbbiakban: EDTA-val) alvadásgátolt vérből végezni, mivel az EDTA jelenlétében a thrombocyták minimális összecsapódása sem észlelhető. A vér EDTA-val történő levételekor az EDTA koncentrációját 2 mg/ml-re kell beállítani, vizes dínátrium-EDTA törzsoldat műanyag csőbe való előzetes beszárításával. Az alvadásgátlás történhet 3,3%-os desztillált vizes tri nátrium-citrát-oldattal is, 9 rész vér, 1 rész citrát-arányt biztosítva a vér műanyag fecskendőbe történő levételekor.
Kivitelezés:
mikroliter alvadásgátolt vénás vérhez műanyag kémcsőbe 475 mikroliter számláló-oldatot mérünk és felkeverés után 15 percig szobahőn állni hagyjuk. A thrombocyta- és fehérvérsejt-számlálást ezt követően hat órán belül el kell végezni. Számlálás előtt az oldatot ismét felkeverjük és Bürker-kamrába cseppentjük, majd nedves kamrában 10 percig ülepedni hagyjuk.
a) Thrombocyta-számolás:
A Bürker-kamra 10 téglalapjába leszámolt thrombocyták számának összege szorozva 2-vel, ha az alvadás EDTA-val történt, illetve 2,2-vel, ha citráttal. A throm10 bocyta-számot G/literben kapjuk meg.
b) Fehérvérsejt-számolás:
Négy, három vonallal határolt nagy négyzetben található fehérvérsejtek számát 18-cal osztjuk (vagy 0,055del szorozzuk), ha az alvadásgátlás citráttal és 20-szal (vagy 0,05-dal szorozzuk), ha EDTA-val történt. A fehérvérsejt-számot így G/l-ben kapjuk.
3. példa
A thrombocyta- és fehérvérsejt-szám meghatározása kapilláris vérből:
Fertőtlenített ujjbegyen vagy sarkon ejtett szúrás után az első vércseppet letörölve műanyag hegyű pipettába (típusa pl. Finnpipetta, Gilson vagy Eppendorf stb.) 25 ul vért szívunk, ezt a vérmennyiséget 25 μΐ2 mg/ml-es EDTA-oldatot tartalmazó műanyag csőbe mérjük és az alvadásgátlóval jól összekeverjük. 450 μΐ számláló oldat hozzáadása és alapos összerázás után legalább 15 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk az oldatot, majd ismételt felkeverés után Bürker-kamrába cseppentjük és nedves kamrában 10 percig ülepítjük.
A thrombocyta- és fehérvérsejt-számolás az alvadásgátolt vérre leírtakkal azonos, thrombocyta-számolás35 nál a szorzófaktor 2, fehérvérsejt-számolásnál 20-szal kell osztani.
4. példa
Mindenben az 1. példában leírtak szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy formaldehid helyett 80 g 25%os glutáraldehidet mérünk be.
Claims (2)
1. Thrombocyta-szám és fehérvérsejt-szám normál fénymikroszkopikus úton történő egyidejű meghatározására alkalmas reagens, azzal jellemezve, hogy 0,1—
50 5 súlyrész acetont, 0,05—2,0 súlyrész formaldehidet vagy glutáraldehidet, 0,001—0,1 súlyrész tiazin-színezéket, előnyösen toluidin-kéket, 0,1—2,0 súlyrész ásványi sót, előnyösen nátrium-kloridot és 10—1000 súlyrész vizet tartalmaz.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 200 ml 0,9%-os nátrium-klorid-oldatot, 25 ml acetont, 5 ml 35%-os formaldehidet, 770 ml ioncserélt desztillált vizet és 100 mg toluidin-kék festéket elegyítünk.
Priority Applications (14)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU306083A HU186309B (en) | 1983-09-02 | 1983-09-02 | Reagent for determining the thrombacyta and leucocyte number |
| CH407684A CH665030A5 (de) | 1983-09-02 | 1984-08-27 | Reagens zur bestimmung der thrombozyten- und leukozytenzahl. |
| BE1/11080A BE900439A (fr) | 1983-09-02 | 1984-08-28 | Reactif pour la determination du nombre des thrombocytes et des leucocytes. |
| FR8413421A FR2551551B1 (fr) | 1983-09-02 | 1984-08-30 | Reactif pour la determination du nombre des thrombocytes et des leucocytes |
| NL8402670A NL8402670A (nl) | 1983-09-02 | 1984-08-31 | Reagens voor het bepalen van het thrombocyten- en leukocytengetal. |
| DD26685584A DD232557A5 (de) | 1983-09-02 | 1984-08-31 | Reagens zur bestimmung der thrombozyten- und leukozytenzahl |
| FI843429A FI77938C (fi) | 1983-09-02 | 1984-08-31 | Reagens foer bestaemning av antalet trombocyter och leukocyter. |
| LU85526A LU85526A1 (fr) | 1983-09-02 | 1984-08-31 | Reactif pour la determination du nombre des thrombocytes et des leucocytes |
| CS658184A CS274409B2 (en) | 1983-09-02 | 1984-08-31 | Agent for simultaneous determination of thrombocytes and leucocytes number |
| SE8404355A SE455235B (sv) | 1983-09-02 | 1984-08-31 | Reagens for samtidig bestemning av trombocyt- och leukocyttal pa normal ljusmikroskopisk veg samt forfarande for dess framstellning |
| PL24942784A PL142043B1 (en) | 1983-09-02 | 1984-08-31 | Agent for simultaneous determination of thrombocyte and leucyte numers |
| AT0279984A AT390844B (de) | 1983-09-02 | 1984-08-31 | Reagens zur bestimmung der thrombozyten- und leukozytenzahl |
| DE19843432351 DE3432351A1 (de) | 1983-09-02 | 1984-09-03 | Reagenzien zur gleichzeitigen bestimmung der thrombozyten- und leukozytenzahl auf normalem lichtmikroskopischem wege sowie verfahren zu deren herstellung und ihre verwendung |
| IN135/DEL/85A IN162894B (hu) | 1983-09-02 | 1985-02-18 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU306083A HU186309B (en) | 1983-09-02 | 1983-09-02 | Reagent for determining the thrombacyta and leucocyte number |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU186309B true HU186309B (en) | 1985-07-29 |
Family
ID=10962336
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU306083A HU186309B (en) | 1983-09-02 | 1983-09-02 | Reagent for determining the thrombacyta and leucocyte number |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| AT (1) | AT390844B (hu) |
| BE (1) | BE900439A (hu) |
| CH (1) | CH665030A5 (hu) |
| CS (1) | CS274409B2 (hu) |
| DD (1) | DD232557A5 (hu) |
| DE (1) | DE3432351A1 (hu) |
| FI (1) | FI77938C (hu) |
| FR (1) | FR2551551B1 (hu) |
| HU (1) | HU186309B (hu) |
| IN (1) | IN162894B (hu) |
| LU (1) | LU85526A1 (hu) |
| NL (1) | NL8402670A (hu) |
| PL (1) | PL142043B1 (hu) |
| SE (1) | SE455235B (hu) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2685482B1 (fr) * | 1991-12-24 | 1994-07-29 | Melet Francois | Procede de numeration des hematies ou des thrombocytes et dispositif de mise en óoeuvre. |
| WO2013102076A1 (en) * | 2011-12-30 | 2013-07-04 | Abbott Point Of Care, Inc. | Method and apparatus for automated platelet identification within a whole blood sample from microscopy images |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3916205A (en) * | 1973-05-31 | 1975-10-28 | Block Engineering | Differential counting of leukocytes and other cells |
| CH613523A5 (en) * | 1975-06-27 | 1979-09-28 | Inst Nat Sante Rech Med | Method for displaying basophils |
| US4290769A (en) * | 1980-10-14 | 1981-09-22 | Miles Laboratories, Inc. | Stabilized Romanowsky stain solution |
| US4392864A (en) * | 1982-02-01 | 1983-07-12 | Miles Laboratories, Inc. | Stabilized Romanowsky stain solution |
-
1983
- 1983-09-02 HU HU306083A patent/HU186309B/hu not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-08-27 CH CH407684A patent/CH665030A5/de not_active IP Right Cessation
- 1984-08-28 BE BE1/11080A patent/BE900439A/fr not_active IP Right Cessation
- 1984-08-30 FR FR8413421A patent/FR2551551B1/fr not_active Expired
- 1984-08-31 PL PL24942784A patent/PL142043B1/pl unknown
- 1984-08-31 CS CS658184A patent/CS274409B2/cs unknown
- 1984-08-31 FI FI843429A patent/FI77938C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-08-31 AT AT0279984A patent/AT390844B/de not_active IP Right Cessation
- 1984-08-31 LU LU85526A patent/LU85526A1/fr unknown
- 1984-08-31 NL NL8402670A patent/NL8402670A/nl not_active Application Discontinuation
- 1984-08-31 SE SE8404355A patent/SE455235B/sv not_active IP Right Cessation
- 1984-08-31 DD DD26685584A patent/DD232557A5/de not_active IP Right Cessation
- 1984-09-03 DE DE19843432351 patent/DE3432351A1/de not_active Withdrawn
-
1985
- 1985-02-18 IN IN135/DEL/85A patent/IN162894B/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DD232557A5 (de) | 1986-01-29 |
| SE455235B (sv) | 1988-06-27 |
| PL142043B1 (en) | 1987-09-30 |
| FR2551551B1 (fr) | 1987-04-24 |
| SE8404355D0 (sv) | 1984-08-31 |
| ATA279984A (de) | 1989-12-15 |
| FI77938C (fi) | 1989-05-10 |
| CS658184A2 (en) | 1990-09-12 |
| PL249427A1 (en) | 1985-07-30 |
| FI77938B (fi) | 1989-01-31 |
| AT390844B (de) | 1990-07-10 |
| BE900439A (fr) | 1985-02-28 |
| DE3432351A1 (de) | 1985-03-21 |
| CS274409B2 (en) | 1991-04-11 |
| LU85526A1 (fr) | 1986-03-11 |
| NL8402670A (nl) | 1985-04-01 |
| SE8404355L (sv) | 1985-03-03 |
| CH665030A5 (de) | 1988-04-15 |
| IN162894B (hu) | 1988-07-16 |
| FI843429A (fi) | 1985-03-03 |
| FI843429A0 (fi) | 1984-08-31 |
| FR2551551A1 (fr) | 1985-03-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3886271B2 (ja) | 赤芽球の分類計数用試薬及び分類計数方法 | |
| DE69325848T2 (de) | Vorbehandlungsreagenz, Verfahren und Kit und Diagnoseverfahren für Infektionskrankheiten | |
| US4581223A (en) | Individual leukocyte determination by means of differential metachromatic dye sorption | |
| Howard et al. | Ristocetin: a means of differentiating von Willebrand’s disease into two groups | |
| EP1262776B1 (de) | Verfahren zum quantitativen Nachweis vitaler ephithelialer Tumorzellen in einer Körperflüssigkeit | |
| KR920010294B1 (ko) | 백혈구의 3개의 모 집단에 대한 혈액학 콘트롤 조성물 · 및 그 조제방법과 전혈액 조절체계에 있어서의 사용방법 | |
| Dertinger et al. | Three‐color labeling method for flow cytometric measurement of cytogenetic damage in rodent and human blood | |
| DE69029785T2 (de) | Kinetische Bestimmungsmethode für Endotoxin unter Verwendung von Limulus-Amoebocyten-Lysat und chromogenem Substrat | |
| EP0430719B1 (en) | Compounds and reagents for determination of reticulocytes | |
| JPH068817B2 (ja) | 白血球弁別用組成物および弁別方法 | |
| JPH07110328A (ja) | 染色試薬とその調整方法およびその使用方法 | |
| DE3587636T2 (de) | Reagenssystem und verfahren zum nachweis, aufzählen und prüfen der klassen und unterklassen von blutleukozyten. | |
| EP0912891B1 (de) | Verfahren zum durchführen von bluttests | |
| US5945340A (en) | Reticulocyte assay control | |
| DE69123445T2 (de) | Verfahren zur bestimmung von endotoxinen | |
| Martel et al. | Serology for automated cytotoxicity assays: contrast fluorescence test | |
| US4714606A (en) | Method of staining and identifying cells and compositions thereof | |
| HU186309B (en) | Reagent for determining the thrombacyta and leucocyte number | |
| US5698398A (en) | Control compositions for determination of molecular cytogenetic abnormalities with DNA probes | |
| US4800168A (en) | Two reagent system for the colorimetric determination of chloride ions in body fluids | |
| CN112639467B (zh) | 血小板模拟粒子及其制备方法以及含该模拟粒子的质控物或校准物 | |
| CN113433053B (zh) | 网织红细胞检测染料、检测试剂、检测试剂的制备方法、样本分析仪检测方法及样本分析仪 | |
| JP3631203B2 (ja) | 溶血性貧血検査方法 | |
| RU2007720C1 (ru) | Способ диагностики острого лейкоза | |
| CN113447423A (zh) | 网织血小板检测染液、检测试剂、检测试剂的制备方法、样本分析仪检测方法及样本分析仪 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HU90 | Patent valid on 900628 | ||
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |