HU182051B

HU182051B - Process for preparing tetrapeptide-hydrazyde derivatives

Info

Publication number: HU182051B
Authority: HU
Inventors: Masahiko Fujino; Susumu Shinagawa; Kiyohisa Kawai
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Priority date: 1978-05-02
Filing date: 1979-04-27
Publication date: 1983-12-28
Also published as: EP0005248A3; DK178279A; DK149064B; EP0005248B1; CA1144542A; DE2962325D1; DK149064C; EP0005248A2

Description

A találmány tárgya eljárás uj fájdalomcsillapító hatású tetrapeptid-hidrazid-származékok előállítására.

Hughea és munkatársai a malac agyából általános néven enkefalinnak nevezett pentapeptideket izoláltak, amelyek intracerebrálls adagoláskor morfinomimetikus aktivitásuak, és amelyeket sorrendben a következő képlettel adnak meg: H-TYR-GLY-GLY-PHE-MET-OH és a H-TYR-GLY-GLY-IHE-LEU-OH /Natúré 258,577. 19?5/» Bár ezek a vegyületek morfinomimetikus hatásúak abban az esetben, ha közvetlenül intracerebrálisan adagoljuk őket, ez a fájdalomcsillapító hatás nem jelentkezik intravénás adagoláskor.

A ,3-endorfin a /?>-lipotropin karboxil-terminális végéről hasítható le, és ha intravénásán adagoljuk, úgy jelentős fájdalomcsillapító hatású; mivel azonban ez a vegyület 31 aminosavból álló polipeptid, szerves kémiai eljárással rendkívül nehézkes lenne belőle nagy mennyiségben felhasználható gyógyszert előállítani. Kutatásokat végeztünk a gyakorlatban előnyösen használható stabil és intravénásán vagy .szubkután adagolható kifejezett fájdalmat csökkentő vegyületek, felfedezésére és úgy találtuk, hogy bizonyos tetrapeptid-szár.mazékok kielégítik a fenti várakozást. A felfedezést további kutatások követték, ezen kutatások eredményeit a jelen szabadalmi leírásban közöljük.

A találmány tárgya eljárás az I általános képletű tetrapeptid-hidrazid-származékok és ezek savaddiciós sóinak előállitására, ahol az általános képletben

1/

és Rj hidrogénatom, X jelentése D-Leu és -R^ hidrogén· atom vagy 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, vagy

11/ R^ és Rj jelentése hidrogénatom, X jelentése D-Nva,D-Gln, D-Glu/OCHj/, D-Phe, D-Iys, D-LYs/Cl-z/, D-s'er vagy D-his és R^ 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, vagy

Ili/ R^ hidrogénatom, Rj metilcsoport, X jelentése D-met/0₂/ és 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, vagy ív/ R_x és R^ hidrogénatom vagy metilcsoport, X jelentése ,_________ D-Ala és hidrogénatom, 2-5 szénatomos alkoxikarbonil-,

4-5 szénatomos alkenoil- vagy 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, mely utóbbi adott esetben hidroxilcsoporttal vagy ómega-helyzetben halogénatommal, amino-, acetil- vagy rövidszénláncú alkoxi-csoporttál lehet helyettesítve, vagy v/ Rj, és Rj hidrogénatom vagy metilcsoport, X jelentése D-Met/0/ és R^ hidrogénatom, 2-5 szénatomos alkoxikarbonil- vagy 2-6 szénatomos alkanoilcsoport, mely utóbbi ómega-helyzetben halogénatommal, hidroxil-^ oxo-, acetil-, metiltio-, metilszulfoxid- vagy rövidszénláncú alkoxi-csoporttal lehet helyettesítve.

A találmány értelmében az I általános képletű tetrapepticl· -hidrazid-származékok előállitására úgy járunk el, hogy egy I általános képletű, a peptidkémiában szokásos N-terminális védőcsoporttal, valamint adott esetben a tirozin hidroxilesoporfeján, az X amlnosav oldalláncán és/vagy a C-terminális alkanoil-hidrazino-csöpörtjár\ valamely, peptidkémiában szokásos védő-2182.051 csoporttal védett tetrapeptid-származékról - ahol Rp R^, R^ és X a fent megadott - lehasitjuk a védőcsoportokat, és kivánt esetben a kapott vegyületet savaddíciós sójává alakítjuk.

• A jelen leírásban az aminosavakat és a peptideket vagy az irodalomban általánosan használt rövidítésekkel, vagy a Committeeon Chemical Nomenclature of IUPAC-IUB által elfogadott jelekkel

Alá : Gly : Leu : Phe : MePhe : Tyr : MeTyr : Gin : Thr : Ser : Nva : Met/O/: Met/0p/: Lys : His ; Glu :

adjuk meg.

A következő rövidítéseket használjuk: alanin glicin leucin fenil-alanin N-metil-fenil-alanin tirozin N-metil-tirozin glutamin üreonin szerin norvalin raetionin-szulfoxid raetionin-szulfon lizin hisztidin glutaminsav

A következőkben az ismételten előforduló vegyületeket az alábbi rövidítésekkel jelöljük:

DCC : NjN’-diciklo-hexil-karbodiimid

HONB : N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarboxiimid.

ONB : HONB-észtercsoport

Z : benzil-oxi-karbonilesöpört

OEt : etoxiesoport

ONP : para-nitro-fenilészter

TOS : tozilcsoport

BOG : tercier-butoxi-karbonilesöpört

Bút : tercier-butilcsoport

DMF : d íme ti 1-f orma mid

BZL : benzilcsoport

HOBT : N-hidroxi-benzotriazolcsoport

MeOH : metilalkohol

AcOEt : etil-acetát

TEA : trietil-amin

THF : tetrahidro-furán

TPA : trifluor-ecetsav

DOHA : diciklohexil-amin

OCHj : metoxicsoport

Cl-Z : para-klór-benziloxi-karbonilcsoport.

A szabadalmi leírás során, ha bármilyen aminosavat vagy aminosavból származó csoportot rövidítve jelölünk, úgy értelemszerűen az L-alakot értjük, a D-alaku aminosavakat vagy aminosavakból származó gyököket külön D-betüvel jelöljük.

A 2-5 szénatomos aIkanoilcsoport például fortnil-, acetil-, propionil-, izopropionil-, η-butiril-, izobutiri1-, n-valerilvagy izovalerilesöpört lehet. A 2-6 szénatomos alkenoilcsoport

-3182.051 például krotonoil-j metakril- vagy akrilcsoport lehet.

Az R_z szubsztituált alkanoilcsoport Lehet például hidroxi-acetil-, 2-hidroxi-propionil-, 3-hidroxi-propionil-, 2-hidroxi-butiril-, 3-hidroxi-butiril-, 4-hidroxi-butiril-, 2-5-dihidroxi-propionil-, amino-acetil-, 2-amino-propioni1-, 5-amino-propionil-, 4-araino-butiril-, etoxi-formil-, raetoxi-acetil-, J-metoxi-propionil-, J-etoxi-propionil-, 4-metoxi-butiril-, klór-acetil-, diklór-acetil-, 2-klór-propionil-, 3-klór-propionil~, 2,3-diklór-propionil-, 2-klór-butiril-, 3-klór-butiril-,

4-klór-butiril-, 3-oxo-butiríl-, 3-oxo-valeril-, 4-oxo-valeril-, metil-tio-acetií-, J-meti1-tio-propionil-, etil-tio-acetil-,3-eti1-tio-propionil-, metil-tio-oxido-acetil-, 3-raetil-tio-oxido-propionil-, éti1-tio-oxido-acetil- vagy 3-etil-tio-oxido-propi onilesöpört.

Az N-terminális védőcsoport például benzil-oxi-karbonil-, tercier-butoxi-karbonil-, tercier-amil-oxi-karbonil-, izobornil-oxi-karbonil-, adamantil-oxi-karbonil-, klóratommal vagy nitrocsoporttal szubsztituált benzil-oxi-karbonil-, o-fenil-tio vagy difenil-foszfino-metilcsoport.

A tirozilgyök hidroxi-védőcsoportja például benzilcsoport vagy tercier-butilcsoport lehet.

Az X aminosav-oldalláncon, illetve a C-terrainális alkanoil-hidrazinocsoportokcn lévő védőcsoportok, amelyek a hidroxilcsoportot és/vagy a karboxilcsoportot védik, például a fent megadott csoportok lehetnek, ugyanakkor az aminocsoportot védő csoportok például az N-terminális védőcsoport ismertetésekor megadottak lehetnek.

A találmány szerinti I általános képletü tetrapeptid-hidrazid-származékot úgy állítjuk elő, hogy egy N-terminális arainosavat vagy N-terminális aminosavval rendelkező I általános képletü tetrapeptid-hidrazid peptidfragraenst kondenzálunk az I általános képletü tetrapeptid-hidrazid visszamaradó részével. Például az alábbi módszerek szerint járunk el: Bodansky és Ondetti: Peptide Synthesis Interscionce, New York, 1965; Finn és Hofraan: The Proteins 2. kötet, Nenrath és Hill szerkesztése, Academic Press Inc., New York, 1976; vagy Nobuo Izumya és munkatársai: Peptide Gosei /Peptide Synthesis/, Maruzen Inc.,1975· Használhatjuk például az azidos módszert, a kloridos módszert, a savanhidrides módszert, a vegyes anhidrides módszert, a savanhidrides módszert, a vegyes anhidrides módszert, a DCC módszert, az aktiv észteres módszert, a Woodward reagenssel végzett eljárást, a karbodiimidazolos módszert, a redukción és oxidáción alapuló módszert vagy például a DCC/HONB /lásd előbb/ módszert. Egyes esetekben használható az NCA /N-karboxi-anhidrid/ módszer is, amely az aminosavnak megfelelő intramolekuláris ciklusos karbonilvegyület használatán alapul, és amelynek során védőcsoportot nem alkalmazunk.

A kondenzációs reakció előtt a kiindulási vegyület reakcióban részt nem vevő karboxil- vagy/és aminocsoportjait védhetjük, vagy a reakcióban résztvevő karboxil- vagy/és aminocsoportokat aktiválhatjuk.

A kiindulási vegyület védőcsoportjai az előzőekben megadott védőcsoportok lehetnek. A kiindulási vegyület karboxilcsoportja fémsóként /például nátriumsóként vagy káliumsóként/ is védhető, védhotjük ezen felül például tercíer-alki 1-aniinsóként /például tirietil-aminsóként, N-raetil-morfolinosóként/ vagy észterként /például metil-észtorként, etilészterként, ben

-4182.051 zil-észtorként, para-nitro-benzil-észtorként, tercior-butil-észterkónt vagy tercior-amil-ószterkónt/.

A kiindulási vegyület aminocsoportjét védő védocsoportot példóul bonzil-oxi-karbonil-, tereier-butoxi-karbonil-vagy izobornil-oxi-karbonilcsoport lehet. A hiszbidin iminocsoportját például benzil-, toszil-, 2,4-dinitro-fenil-, tercier-buti 1-oxi-karbonil- V3gy karbo-bonzoxicsoporttal védjük.

A tirozin hidroxilcsoportja éteres alakban benzil- vagy · tercier-butilcsoporttal védhétő. Az arginin guadininocsoportját nitro-, toszil-, karbo-benzoxi-, izobornil-oxi-karbonilvagy adamantil-oxi-karbonilcsoporttal védhetjük. ·

A kiindulási vegyület karboxilcsoportját az alábbi vegyületekkel aktiválhatjuk: a megfelelő savanhidrid, szid, aktív észter ^.például alkoholokkal előállított észterek /például pentaklór-fenol, 2,4,5-triklór-fenol, 2,4-dinitro-fenol, ciano-metil-alkohol, para-nitro-fenol, N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarboxiimid, N-hidroxi-szukcinimid, N-hidroxi-ftálimid, N-hidroxi-benzo-triazol/1. Λ kiindulási vegyiiletben lévő aminocsoport aktív alakja például a megfelelő foszforsav-amid lehet.

Az A és B kiindulási vegyületekben a karboxil- és aminocsoportok az 1. táblázatban megadott koordinációkban szerepelhetnek.

1, Táblázat

Kombinációs példa	Kiindulási	vegyületek	aminocsoport
A	B
karboxil- aminocsoport csoport	karboxiΙο söpört
1	szabad védett	védett	szabad
2	aktivált védett	szabad	szabad
3	szabad védett	védett	aktivált

Megjegyzés: ebben az esetben a reakcióelegyben előnyösen egy dehidratálószer /például egy karbidiimid reagens, például diciklo-hexil-karbodiimid/ van jelen.

A reakciót oldószerrel készült reakcióelegyben végezzük. Az oldószert a peptid-szintézises reakcióban ez ideig ismert oldószerek közül választjuk ki. így például választhatunk vízmentes vagy vizes dimeti1-formamidot, dimetil-szulfoxidot, piridint, kloroformot, dioxánt, diklórmetánt vagji tetrahidrofuránt, de használhatunk ezek megfelelő elegyeit is.

A reakció hőmérsékletét a peptidek szintézisekor ez ideig használt hőmérséklet intervallumból választjuk ki, általában -20 C^ö és 30 C^ö közötti hőmérsékleten dolgozunk.

A találmány szerinti eljárás során használt prekurzor vegyületeket /a védett peptideket/ előállíthatjuk szilárd fázishoz kötött szintézissel is.

Az előállított I általános képletű védett vegyületet hasítási reakciónak vetjük alá, amelynek során a védőcsoportokat eltávolítjuk. A hasítási reakció típusa függ a szóbanforgó védőcsoportoktól, gyakorlati okokból azonban előnyösen olyan reakciót választunk ki, aminek során egy lépésben eltávolítható

-5182.051 az összes védőcsoport anélkül, hogy a peptidkötések hasadnának* A védőcsoportokat öleve a fenti lehetőségek figyelembevételével választjuk ki. A 2. táblázatban ismertetünk különböző védőcsoportokat és ismertetjük a tipikus hasitási reakciókörülményeket is.

2. Táblázat

A hasítás körülménye	^Y1	< Védőcsoport	^Y5
4	Az RZ, védő- Az csoportja cs	R^ védőoportja
H₂/katalizátor	z	Bzl	-	-	z
H_o/katalizát or	z	-	-	-	—
CF^COOH	BOC	Bu^h	Bu^fc	Bu^fc	BOC
2n-HCl	BOC	-	-	-	-
ecetsavban	BOC	-	-	-	BOC
CH₇30_zH 3 9	Z	—	—	—	BOC

Bár a 2. táblázatban megadunk néhány hasitási reakciót, például a palládiummal, palládium-szén katalizátorral, platinával vagy hasonló katalizátorral végzett katalitikus redukciót, trifluorecetsavval, hig hidrogénkloriddal vagy metánszulfonsavval végzett savas hidrolízist, más redukciós reakciókat is végezhetünk. Ilyen például a folyékony ammóniában fém- nátriummal végzett redukció és a trifluor-metánszulfonsavval végzett savas hidrolízis, továbbá a jsgecetben lévő hídrogén-bromidos oldattal vagy hidrogén-fluoridda1 végzett redukció. Ezeket a reakciókat általában -20 C° és 40 C° közötti hőmérsékleten végezzük, a savas hidrolíziskor előnyösen kation-akeeptorral egészítjük ki a reakcióelegyet, például anizollal, fenollal vagy tio-anizollal.

Ha olyan I általános képletű vegyületet akarunk előállítani, amelyben a D-c-aminosav, D-metionin-szulfoxid, úgy az oxidocsoport bevezetését a találmány szerinti módon végzett peptidszintézis során bármikor elvégezhetjük, amikor a vegyület már metionint tartalmaz.

Például úgy járunk el, hogy 1. kiindulási vegyületként D-metionin-szulfoxidót használunk; 2. oxidálunk egy III általános képletű intermedier vegyületet, ahol az általános képletben R^, és R^ az előzőekben megadott jelentésű, majd az előállított vegyülettel folytatjuk a peptid szintézisét; vagy 3. oxidáljuk a III általános képletű vegyületet.

Az oxidációs redukciókor oxidálószerként például hidrogénper oxidot. nátrium-perkloridot, nátrium-perborátot, kloramin T-t tribrom-krezolt, N-klór-szukcinimidet vagy klór-aurinsavat használunk.

A reakcióban használt oxidálószer mennyisége általában ekvivalens mennyiségnél nem kevesebb, előnyösen a III általános képletű vegyületre számítva 1-10 ekvivalens mennyiséget adagolunk a reakcióelegyhez. A reakcióelegy készítésekor használt oldószer lehet például viz, ecetsav, alkohol /metil-alkohol, etil-alkohol/ vagy ezek elegye. _z

A reakciót általában -20 C és 40 C közötti hőmérsékleten végezzük*

-6182.051

A reakció lezajlását követően az előállított I általános képletü peptid-származékot a peptid-származékok izolálásakor megismert módszerek egyikével különítjük el, például extrakcióval, megoszlásos kromatográfiával, többszöri kicsapással, kikristályositással vagy oszlopkromatográfiával.

A találmány szerinti eljárás során az I általános képletü peptidet sóként /például szerves sav sójaként vagy szervetlen sav sójaként, előnyösen acetátként, citrátként, tartarát ként, hidrogen-kloridként vagy szulfátként/ is előállíthatjuk.

A következőkben ismertetjük a találmány szerinti eljárással előállított I általános képletü vegyület farmakológiai vizsgálatának eredményeit.

Forró lemezzel végzett vizsgálatok

A kísérletek során GF^ egereket használunk, az állatok négy hetesek, testsúlyuk 18-22 g. Az állatok az 55 + 0,5 0° hőmérsékletű rézből készült lapra helyezve bizonyos válaszokat adnak a hőingerre, például nyalogatják hátsó lábaikat vagy szökni kívánván ugrálnak. Azokat az állatokat, amelyek a forró lemezre helyezést követő 20 másodpercen belül ilyen ingerválaszokat adnak kiválasztják és 10 állatot tartalmazó csoportokba osztjuk. A vizsgált vegyületet intravénásán vagy szubkután adjuk, majd 5, 10, 20, 30, 45 és 60 perc múlva vizsgáljuk a kontroll csoporttal összehasonlítva az ingerválasz idejét. Az állatok talpainak irreverzibilis sérüléseinek elkerülésére 60 másodpercben állapítottuk meg a maximális vizsgálati időt. A fájdalomcsillapító hatás indexét az alábbi egyenlettel számítjuk:

adagolást követő ingerválasz ideje/mp/ - adagolás előtti

- adagolás előtti ingerválasz

A las z.....ide je/mg/ _{χ 1Q0} ideje/mp/

A fenti vizsgálatban a találmány szerinti I általános képletü vegyület 2 mg/kg dózisban, előnyösen 1 mg/kg vagy 200 rug/kg mennyiségben fájdalomcsillapító hatású, a hatás legalább ;40 % ingerválasz meghosszabbodásnak felel meg,a meghosszabbodás maximumát az 5-60. percben, előnyösen az 5-30. vagy 5-20. percben mérjük; egyes különösen hatásos I általános kepletü vegyületek még kisebb dózisban is jelentős fájdalom-feloldó hatásúak, ez a dózis kisebb mint 0,5 mg/kg, esetenként 0,1 mg/kg vagy kisebb mint 20 yug/kg.

Ahogy azt az előzőekben ismertettük a találmány szerinti I általános képletü vegyületek kifejezett fájdalomcsillapító hatásúak, ami hatást a forró lemezen egerekkel végzett vizsgálatok eredményei bizonyítanak és amely hatás 0,05 mg és 10 mg, előnyösen 0,05 mg és 2 mg, vagy 0,2 mg és 1 mg testsulykilogrammonkénti. mennyiségben jelentkezik. Ez azt jelenti, hogy a találmány szerinti vegyületek fájdalomcsillapító gyógyszerként előnyösebbek a F -endorfinnál.

A találmány szerinti I általános képletü vegyületeket és ezek farmakológiai szempontból elfogadható savaddiciós sóit ily módon előnyösen használhatjuk például fájdalomcsillapítóként a fájdalom feloldására, többek között az előrehaladott rákos beteg fájdalmának csökkentésére és az emésztőrendszer megbetegedésekor, például a hasmenéskor jelentkező fájdalom megszüntet ésé r9 emlősálla tokban, például_egérben, pa tkányba n,

-7182051 nyulban, kutyában, majomban vagy emberben; használható a talál* mány szerinti vegyület a mentális megbetegedések kezelésére isi

A találmány szerinti eljárással előállított I általános képletü vegyületek és ezek savaddíciós sói rendkívül alacsony toxicitással rendelkeznek és még 200 mg/testsulykilógram menynyiségben adagolva sem okoznak halált, pedig ez a mennyiség messze nagyobb a hatásos dózist jelentő mennyiségnél.

A találmány szerinti vegyületet adagolhatjuk szabad bázisként vagy savaddíciós' sójaként. A szabad vegyület esetén az előnyös dózisérték általában testsulykilogramra számítva 0.01 mg és 50 mg, előnyösen 0,05 mg és 30 mg vagy 0,1 mg és 20 mg közé esik. Az I általános képletü vegyületek savaddíciós sóinak hatásos dózisa testsulykilogramra számítva 0,01 rag és 50 mg, előnyösen 0,05 mg és 30 mg vagy 0,1 mg és 20 rag közé esik, hasonlóan a szabad vegyületéhez.

A találmány szerinti vegyületet vagy ennek sóját általában nem orálisan, hanem például intravénásán, szubkután vagy rektálisan adagoljuk, bár a körülményektől függően adagolható szájon át is. Különösen előnyösen adagolhatok a találmány szerinti vegyületek folyamatos infúzióval vagy instinációval műtéti beavatkozáskor.

A találmány szerinti vegyületet például injekcióként, azuppozitőri uraként, por alakban vagy ehhez hasonló alakban állítjuk elő, bár csepp formában adagolható készítményt is előállíthatunk. Mivel a találmány szerinti vegyületek stabilak, tárolhatók fiziológiás sóoldatban, eltehetjük azonban fagyasztva szárított ampullákban, például manittal vagy azorbittal együtt.

Intravénás vagy szubkután injekciókban a hatóanyag koncentrációja előnyösen 1 rag/ml és 25 mg/ml_? előnyösen 10 mg/ml és 25 mg/ml vagy 10 mg/ml és 20 mg/ml köze esik;, az oldatot fiziológiás sóoldattal készítjük.

A találmány szerinti I általános képletü vegyületek rendelkeznek prolaktin vagy növekedési hormon-felszabaditó /releasing/ aktivitással, a vékonybél motoros aktivitását gátolják és befolyásolják a’ központi idegrendszert.

Egyes esetekben a II általános képletü vegyületek, amelyek védőcsoportokat hordoznak hasonló aktivitással bírnak, mint az I általános képletü vegyületek.

A következőkben a találmány szerinti eljárást példákkal szemléltetjük. A kísérletek során használt Sephadex LH-20 gyanta a svéd Pharmacia cég terméke. Az előállított vegyületek tisztaságát vékonyréteg kromatografiával határoztak meg,a kromatográfiát Merek gyártmányi Kieselgel 60F-254 géllel végeztük, az eluáláshoz a következő oldószereket használtuk:

: kloroform, metanol és ecetsav 9:1:0,5 arányú elegye, : etil-acetát, piridin, ecetsav és viz 60:20:6:10 aránya elegye, : n-butanol, ecetsav és viz 4:1:1 arányú elegye.

A példa

A Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-0H előállítása

I. A Z-/D/-Leu-Gly-OH előállítása ml vizben 3,3. g glicint oldunk, majd 3,4 g nátrium-8182.051

-hidrogénkarbonátot adunk az oldathoz. Ezután keverés közben 17,0 g /40 mmól/, 100 ml dimetil-formamidban oldott Z-/D/-Le-ONB-t adunk az oldathoz. Szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük a reakcióelegyet. Reggel desztillációval eltávolítjuk a dimeti1-formamidot, majd a desztillációs maradékhoz 200 ml etil-acetátot és 50 ml In vizes hidrogénkloridot adunk. Vizzel mossuk pz etil-acetátos fázist, majd vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot petrolétérből kikristályositjuk. A terméket etil-acetát ég petroléter elegyéből újra kristályosítva 75 %-os kitermeléssel 9,8 g Z-/D/-Leu-GlyrOH-t kapunk. Az előállított vegyület olvadáspontje 110-111 C ;

Γ-Πρ? ^! +24,5° /c. : 1,0 metanol/; R^ : 0,42.

Elemanalizis a képlet alapján:

számított: C: 59,61; H: 6,88; N: 8,69 %; mért: C: 59,59; H: 6,85; N: 8,74 %.

II. A Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-OH előállítása

100 ml metanolban 7,0 g /22 mii/ Z-/D/-Leu-Gly-OH-t oldunk, majd katalizátorként palládiumot használva katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a metanolt desztillációval eltávolítjuk, A desztillációs maradékot 100 ml tetrahidrofurán és 10 ml viz elegyében szuszpendáljuk. Lehűtjük a szuszpenziót majd 3 ml trietil-amin cseppenkénti adagolásával feloldjuk. Az oldathoz 10,5 g Z-Tyr-0NB-f adunk, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. A tetrahidrofuránt desztillációval eltávolítjuk, a desztillációs maradékhoz 200 ml etil-acetátot és 25 ml In vizes hidrogén-kloridot adunk. Vizzel mossuk az etil-acetátos oldatot, majd ezt követően vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. Desztillációval eltávolítjuk az etilacetátot, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adun« es etilacetátból kikristályositjuk a terméket. 78 %-os kitermeléssel 8,2 g Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-OH-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja 179-181 C°;

+ 45,2° /c.: 0,5, metanol/; R^ : 0,38.

Elemanalizis a ^25^Η31θ7^Ν3 képlet alapján: számított: C: 61,68; H: 6,51; N: 8,64 %;

mért: C: 61,84; H: 6,44; N: 8,66 %.

1. példa

A H-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-NH -NH₂ előállítása

I. Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-Fhe-0Me előállítása i 50 ml tetrahidrofuránban 1,45 Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-0H-t és 590 mg N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarboximidet oldunk,majd 0 C° hőmérsékletre hütjük a reakcióelegyet és 680 mg Ν,Ν’-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk a reakcióelegyhez, amiután 4 órán át keverjük. Szűréssel eltávolítjuk a melléktermékként képződött karbainid-származékot, a szürlethez 750 mg H-Fhe-FMe-hidrogén-kloridot és 0*5 ml trifluor-ecetsavat adunk, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet.Désztillációval eltávolítjuk á tetrahidrofuránt, a desztillációs

-9182.051 maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot %-os vizes nátriumhidrogén-karbonát oldattal mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizraentesitjük. Desztillációva1 eltávolítjuk az éti1-acetátot, a desztillációs maradékot petroléterböl kicsapjuk és etilacetát és dietil-éter elegyéből kikristályositjuk. Ily módon 1,73 g kitermelés: 89 %/ Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-OMe-t kapunk.

Az előállított vegyület 100 C° és 101 C° közötti hőmérsékleten olvad;

- 2,6° /c. : 0,5, dimetilformamidban/; : 0,68.

Elemanalizis a ^55^42^8¾ képlet alapján:

számított: C: 65,00; H: 6,55» N: 8,66 %;

mért: C: 64,97; H: 6,95? N: 8,62 %.

II. A Z-Tyr-/D/-Ieu-Gly-Phe-NH-NH₂ előállítása ml dimetil-fortnaraidhoz 517 mg Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-OMe-T adunk, majd 0,1 ml NH₂-NH₂ X H₂0-val egészítjük ki a reakcióelegyet. Három napon át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Deszti llációval eltávolítjuk a dimetil-formamidot, a desztillációs maradékot vizzel mossuk, majd szűrjük és metanol és dietil-éter elegyéből kicsapjuk. Ily módon 410 mg /kitermelés 80 %/ Z-Tyr-/D/-Ieu-Gly-Bie-NIi-NH₂-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja: 176-177 C°/bomlik/;

]}{j.p²: - 22,7° /c. : 0,4, dimetil-formamidban/; R¹ : 0,20.

Elemanalizis a · 1/2 H₂0 képlet alapján:

számított: C: 62,27; H: 6,45; N: 12,82 %;

mért: C: 62,03; H: 5,57; N: 12,64 %.

III. A H-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-NH-NH₂ előállítása ml metanolban 350 mg Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-NH-NH₂-t oldunk, majd 0,1 ml ecetsavat adunk az oldathoz, ezt követően pedig 5 g palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a szürletet koncentráljuk és a desztillációs maradékot kevés In vizes ecestavban oldjuk. Az oldatot 2,5 x 120 cm méretű Sephadex LH20 gyantából készült oszlopra öntjük. A terméket In vizes ecetsavval eluáljuk. A 320 rnl-tól a 340 ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 210 mg H-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-NH-NH₂-t kapunk. /Kitermelés 60 %/;

+ 22,6° /c.: 0,38, metanol/; r| : 0,34.

Az előállított vegyület aminosav-analízisének /savas hidrolizátum/ eredménye: Gly: 1,00, Leu: 1,00, Tyr: 0,90, Phe: 1,02, kinyerési arány: 70 %.

2. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Pho-NH-NH₂ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-OH előállítása

200 ml metanolban 8,2 g Z-/D/-Ala-Gly-OBu -ot óldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében redukciót végzünk.

-10182.051

Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a metanolt desztillációval eltávolítjuk és a desztillációs maradékot 70 ml trifluor-ecetsavban oldjuk. 40 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni az oldatot. Desztillációval eltávolítjuk a trifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk,majd szűréssel összegyűjtjük a terméket.

A száraz szűrési maradókot 50 ml vízben szuszpendáljuk, a szuszpehziót 4,7 g nátrium-hidrogón-karbonát adagolásával feloldjuk. 100 ml 13,3 g /20 mmól/ Z-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen-5,3-dikarboximidet tartalmazó tetrahidrofuránt adunk az oldathoz? majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. In hidrogen-klorid oldattal semlegesítjük a reakcióelegyet, majd 150 ml etil-acetáttal extraháljuk. Vizzel mossuk az extraktumot és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk. A kivált terméket szűréssel elkülönítjük és etil-acetátból kikrist ályosit juk. Ily módon 8,5 g /kitermelés 69%/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-OH-t kapunk.

Az előállított ve-yület olvadáspontja: 184-185 C°; fÍÁ'ip²: + 25,6°/c.: 0,5, metanol/; R^ : 0,16.

Elemanalizis a θ₂2^25θ7^3 képlet alapján:

számított: C: 59,58; Hí 5,68; N: 9,48 %; mért: C: 59,29; H: 5,ol; N; 9,32 %.

II. A Z-Phe-NHNH-B0C előállítása

100 ml tetrahidrofuránban 18,4 g Z-Phe-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarboxiraid-észtért oldunk, majd 5,3 g Níhj-NH-BOC-t adunk az oldathoz. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk a tetrahidrofuránt, a desztillációs maradékot 150 ml etil-acetáttal 'extraháljuk, az extraktumot vizes citromsavval és 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk, majd ezt követően vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük és az etil-acetát eltávolítására desztilláljuk az elegyet. A kapott desztillációs maradékot petroléterrel mossuk, a terméket szűréssel elkülönítjük és etil-acetát és petroléter elegyéből kikristályositjuk. Ily módon 13,2 g /kitermelés 80 százalék/ Z-Phe-NHNH-BOC-t kapunk. .. , o ¹ Az előállított termek olvadáspontja 107-109 ;

Ι'Όϋθ⁵ ” 23,4° /c : 0,5, metanol/; R^ : 0,71.

Elemanalizis a 022^27^5^3 képlet alapján: számított: C: 63,90; H: 6,58; N: 10,16 %;

mért: C: 64,18; H: 6,61; N: 9,88 %.

III. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-BOC előállítása

100 ml metanolban 3,6 g Z-Fhe-NH-NH-BOC-t oldunk? az oldathoz 0,5 ml ecetsavat adunk, majd ezt követően katalizátorként palládiumot használva katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, 10 ml dinétilformamidot adunk a szürlethez és a metanolt desztillációval eltávolítjuk.

ml tetrahidrofuránban 3,5 g Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-OH-t és 1,56 g N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet oldunk,_zmajd 0 C° hőmérsékletre hütjük az elegyet és 1,80 g N,N’-dicik11

-11182.051 lo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá. 0 0° hőmérsékleten 6 órán át keverjük a reakcióelegyet. Szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan anyagokat, a szürlethez hozzáadjuk az amin-vegyületet. Ezután egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. A tetrahidrofuránt desztillációval eltávolítjuk, a desztillációs maradékot 150 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk, majd a mosást vizes citroinsavval megismételjük. Vizmentes nátrium-szulfáttal vizmentasitjük az oldatot, maid desztillációval eltávolítjuk az éti1-acetátot, a desztillációs maradékhoz petrolétert adunk és a terméket etil-acetát és petroléter elegyéből kikristályositjuk. Ily módon 3,7 g /kitermelés 67 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-BOC-t kapunk.

Az előállított vegyület 143 0° és 146 C° közötti hőmérsékleten bomlás közben olvad;

- 25,4° /c : 0,5, dimetil-formamid/; R^ : 0,38. Elemanalizis a képlet alapján;

számított: C: 61,35; H: 6,29; Ns 11,93 %;

mért; 0: 61,05; H: 6,42; N; 11,58 %.

IV. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH₂ előállítása ml trifluor-ecetsavban 3,5 g Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Rie-NH-NH-BOC-t oldunk, az oldatot 20 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Desztillációval eltávolítjuk a tíifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk és a terméket szűréssel elkülönítjük. A kapott poralaku anyagot 10 ml dimetil-formamidban oldjuk és az oldathoz 1,4 ml triflu-. or-ecetsavat adunk, majd keverjük a reakcióelegyet. A dimetil-formamidot desztillációval eltávolítjuk, a desztillációs maradékhoz vizet adunk, a terméket szűréssel elkülönítjük, majd metanol és dietil-éter elegyéből kicsapva tisztitjuk. Ily módon

2,8 g /kitermelés 96 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-PheTNH-NH₂-t kapunk.

Az előállított vegyület 182 C° és 184 C° közötti hőmérsékleten bomlás közben olvad;

²²: - 23,0° /c : 0,5, dimetil-formamid/; rJ : 0,17.

Elemanalizis a képlet alapján:

számított: C: 61,58; H: 6,00; N: 13,90 %; mért: C: 61,32; H: 5,91; N: 13,72 %.

V. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH₂ előállítása ml metanolban 250 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH₂-t oldunk, majd 0,1 ml ecetsavval egészítjük ki az oldatot. Ezután palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót vég- ; zünk. Szűréssel eltávolitjuk a katalizátort, a szürlethez kevés In vizes ecetsav oldatot adunk, majd 2,5 x 120 cm méretű ? Sephadex IH20 gyantából készült oszlopra hütjük. Az eluálást In vizes ecetsav oldattal végezzük, az eluátumok közül a 310 ml-től a 335 ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük a fagyasztva szárítjuk. Ily módon 95 mg /kitermelés 38 %/ H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH₂-t kapunk.

Az előállított vegyület forgatása:

^{+ 2}θ»5° /^{c J} θ»²? metanol/; R² : 0,22.

-12182.051

-

A hidrogénkloridda1 kivitelezett hidrolízis után az alábbi aminosav-analizis eredményeket kaptuk: Gly: 1,00; Ala;l,05; Tyr: 0,89; Phe: 1,01: kinyerési arány 81 %. példa A H-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása I.-A Z-íhe-NH-NH-CO-CHj előállítása 50 ml tetrahidrofuránban 2,OJ g /6,5 mmól/ Z-Phe-NH-NH₂-t oldunk, majd hűtés közben 1,4 ml ecetsav-anhidridet és 0,9 ml trietll-amint adunk a reakcióelegyhez. cseppenként. lét órán át szobahőmérsékleten keverjük á reakcióelegyet. Szűréssel elkülönítjük az elegyből kivált kristályokat, dietil-éterrel mossuk és etil-acetatból kikristályositjuk.Ily módon 1,9 g /kitermelés 83 %/ Z-Phe-NH-NH-CO-CHj-t kapunk. Az előállított vegyület olvadáspontja 205-206 G°; - 16,4° /c s 0,5, dimeti1-forma mid/; R^ : 0,60. Elemanalizis a θ2Ο^23θ5^3 képlet alapján: számított C : 62,32; H: 6,02; N: 10,90 %\ mért; C ; 62,38; H: 6,09; N; 10,49 %. . II. A Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása 50 ml· metanolban 700 g Z-Phe-NH-NH-CO-CHj-t oldunk, majd 0,2 ml ecetsavat adunk az oldathoz. Ezután palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. A katalizátort szűréssel, a metanolt desztillációval eltávolítjuk, a kapott desztillációs maradékot 20 ml tetrahidrofuránban oldjuk. 20 ml tetrahidro-furánban 680 mg /1,4 mmó]/Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-OH-t és 300 g N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet oldunk, majd lehűtjük az elegyet és 33 0 mg N,N*-diciklo-hexil-karbodiImidet adunk hozzá, amiután 5 órán át 0 G' hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan anyagokat, a szürletet az előzőleg előállított és az amin-vegyületet tartalmazó oldattal elegyítjük. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. Desztillációval eltávolítjuk a tetrahidro-furánt, a desztillációs maradékhoz éti1-acetátot adunk, a kivált terméket szűréssel elkülönítjük és metanol és etil-acetát elegyéből újra kicsapva tisztítjuk. Ily módon 0,71 g /kitermelés 74 %/ Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH^-t kapunk. Az előállított vegyület 184 C° és 185 6° közötti hőmérsékleten olvad; ^r<''23· _ 13,4° /c ; 0,5, dimet i 1-f orma mid/; R^ : 0,28. Elemanalizis a Ο^θΗ^ΟθΝθ képlet alapján: számított: C: 62,77; H: 6,44; N: 12,20%; * mért: C: 62,52; H: 6,81; N: 12,04%. III. A H-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phc-NH-NH-CO-CHj előállítása 50 ml metanolban 500 mg Z-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj-t oldunk, az oldathoz 1 ml ecetsavat adunk, majd pal-

-13182.051 ládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, az oldószert desztilláljuk, a desztillációs maradékhoz vizet adunk, majd ezt követően szűréssel eltávolitjuk az oldhatatlan, terméket. Fagyasztva szárítjuk a szürletet, a kapott poralaku terméket 2,5 x 120 cm méretű Sephadex LH-20 gyantából készült oszlopra öntjük.

, Az anyagot In vizes ecetsavval eluáljuk, a 320 ml-től a 345 ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 245 mg /kitermelés 50 %/ H-Tyr-/D/-Leu-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₇-t kapunk.

Az előállított vegyület fizikai jellemzői:

' p³: + 26,7° /c : 0,3, metanol/; r| : 0,41.

A terméket hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredményes Gly: 1,00; Leus 1,05; Tyr: 0,93· Phe: 1,02; a visszanyerés aránya: 82 %.

4. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-/CH₂/₅-CH₅ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-/0H₂/^ előállítása ml dimetil-formamidban 604 mg /1 mmól/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NHp-t, 297 mg N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet és 0,2 ml valeriánsavat oldunk. 0 C° hőmérsékletre hütjük az elegyet, majd 454 mg Ν,Ν’-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá. Ezután 0 0 hőmérsékleten 4 órán át, majd szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük a reakcióelegyet.

Szűréssel eltávolitjuk az oldhatatlan anyagokat, a dimetil-formamidot desztilláljuk és a desztillációs .maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot 5 %-os nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk és vízmentes nátriumszulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolitjuk az etil-acetátot, a gélszerű desztillációs maradékhoz dietilétert adunk. A terméket szűréssel elkülönítjük-és metanol és etil-acetát elegyéböl újra kicsapva tisztítjuk. Ily módon 480 mg /kitermelés 70%/ Z-Tyr-/D/-A1a-Gly-Phe-NH-NH-C0-/0H₂/-CH-1 kap unk,

Az előállított vegyület olvadáspontja: 178-179 0°; ι<(·ρ³: - 22,4° /c : 0,16, dimetil-formamid/; R^ : 0,46.

Elemanalizis a C,._fiH 0_fíN_fi képlet alapján:

számított: C: 62,77; H: 6,44; N: 12,20 %; mért: C: 62,71; H: 6,77; N: 11,98 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-/CH_?/₇-CH₇ előállítása 2 2 ml metanolban 430 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₂/j-t oldunk, majd 1 ml ecetsav adagolását követően palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolitjuk a katalizátort, a metanolt desztilláljuk, a desztillációs maradékot kevés ín vizes ecetsav oldatban oldjuk, az oldatot 2,5x120 cm méretű Sephadex LH20 gyantából készült oszlopon kromatografáljuk. Az eluálást In vizes ecetsav oldattal végezzük. A 325 ml-től a 340 ml-ig terjedő’ frakciókat összegyűjtöttük és fagyasztva száritjuk. Ily módon 240mg

-14182051 /kitermelés 56 % H-Tyr-/D/-Ala-Gly-E'ie-NII-Nn-C0-/CH2/^“CH^-t kapunk.

Az előállitott vegyület jellemzői:

[₍U²⁵: + 24,5° /c : 0,2, metanol/; R² : 0,47

Hidrogén-kloriddal hidrolizálva a terméket, majd aminosav-analizist végezve az alábbi₍eredményeket kapjuk:

Gly: 1,00; Alá: 0,95» Tyr: 0,88, Phe: 1,01; átlagos kinyerési arány 82%.

5. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH-/CH,/₂ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-00-CH_o-CH-/CH,/_o előállítása

A 4. példa I. pontjában megadottakat 530 mg /0,88 mmól/ Z-Tyr-/D/-Ala_Gly-Phe-NH-NH₂-vel és 0,15 ml /CHj/₂CH-CH₂-COOH-val megismételjük. Ily módon 320 rag /kitermelés 53 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CH-/CH₅/₂-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja 228-230 C°;

- 23,9 /c : 0,28, dimetil-formaraid/ R¹ : 0,46.

Elemanaliz is a C₅₆H₄₄0₈N₆ képlet alapján: számított: C: 62,77; H: 6,44; N: 12,20 %; χ mért: C: 62,58; H: 6,35; N: 11,95 %·

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CH-/CH₅/₂ előállítása

A 4. példa II. pontjában megadottakat 170 mg Z-Tyr-/D/~Alá-Gly-Phe-NH-NH-C 0-CH₂-CH-/GHj/₂-ve1 meg is mét e1jük. Ily módon 105 mg /kitermelés 62 %/ H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-GH₂-CH/CH₅/₂ -t kapunk.

Az előállított vegyület forgatása:

ÍGj²^: + 21,1° /c.: 0,18, metanol/; R^ : 0,49.

A terméket hidrogén-kloridos hidrolízis után aminosav-analizisnek vetjük alá. Ennek eredménye:

Gly: 1,00; Alá: 1,02; Tyr: 0,96; Phe: 1,02; átlagos kinyerési arány 80 %.

6. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-/GH₂/₂-Cl előállítása

I. Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₂/₂-Cl előállítása

A 4. példa I. pontjában megadottakat 513 mg /0,85 mmól/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NHp-vel és 120 mg G1-GH₂-CH₂-COOH-val megismételjük. Ily módon 360 mg /kitermelés 59 %ZZ-Tyr-/D/-Alá-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₂/₂-01-t kap unk.

-15182.051

Az előállított vegyület olvadáspontja: Í69-17O C°

2-5 0 hí-p : -21,1 /c.: 0,37, dimetíl-formamidban/.

Elemanalizis a Cj^Hj^OQNg-Cl képlet alapján:

.számított: C: 58,74; H: 5,65; N: 12,09; Cl: 5,10%;

mért: C: 58,61; H: 5,59; N; 11,81, Cl: 4,92%.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₂/₂-Cl előállítása

A 4. példa II. pontjában megadottakat 250 rag Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₂/₂-Cl-da1 megismételjük. Ily módon I50 mg /kitermelés 60 %/ H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-/CH₂/₂-Cl-t kapunk.

Az előállított vegyület forgatása:

: + 20,5° /c: 0,2, metanol/; r| . q,42

A terméket savasan hidrolizáljuk majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye:

Gly: 1,01; Alá: 0,95; Tyr: 0,88; Phe: 0,98; átlagos kinyerési arány 79 %· '

7. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-0H előállítása

I. Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-0H előállítása

A 4. példa I. pontjában megadottakat 540 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH₂-vel és 0,12 ml HO-CH₂-CH₂-COOH-val megismételjük. Ily módon 320 mg /kitermelés 53 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CII₂-0H-t kap unk.

Az előállított vegyület olvadáspontja 178-179 C°;

: - 22,3° /c.: 0,3, dimeti1-formamid/; R^ : 0,10.

Elemanalizis a képlet alapján:

számított: C: 60,34; H: 5,96; N: 12,42 %;

mért: C: 59,98; H: 5,85; N: 12,18 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-0H előállisa

A 4. példa II. pontjában megadottakat 250 mg Z-Tyr-/D/-Ala>-Gly-Hie-rTH-NH-C0-CH₂-CH₂-0H-dal megismételjük. Ily módon 100 mg /kitermelés 40 %/ H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Pho-NH-NH-C0-CII₂-CH₂-0H-t kapunk.

-16182.051

Az előállított vegyület forgatása:

⁺ ^.5° /c : 0,21, metanolban/; r| : 0,32.

Az előállított vegyületet savagan hidrolizáljuk ég aminosav-analizist végzünk. Az eredmények a következők; Gly: 1,00; Alá: 1,05; Tyr: 0,92; Phe: 1,00; átlagos kinyerési arány 79 %·

8. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CHj előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CHj előállítása A 4. példa I. pontjában megadottakat 496 mg /0,82 mM/

Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH₂-vel és 0,1 ml propionsawal megismételjük. Ily módon 350 mg /kitermelés 65 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Rie-NH-NH-C0-CH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja 190-191 C°;

- 20,5° /0 ; 0,3 m dimetil-formamid/: R^ : 0,26.

Elemanalizis a Ο^Η^ΟθΝθ képlet alapján: számított: C: 61,80; H: 6,10; Ns 12,72 %;

mért: C: 61,53; H: 6,02; N: 12,65 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CHj előállítása A 4. példa II. pontjában megadottakat 250 mg Z“Tyr-

-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-0H₂-CHj-val megismételjük. -Ily módon I30 mg /kitermelés 52 %/ H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-0H₂-CH,-t kapunk.

Az előállított vegyület optikai forgatása: · (dŰD^^{s + 29}»5° c ί 0,23, metanol/; R? : 0,42.

< A savasan hidrolizált termékből aminosav.analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00; Alá: 0,95; Phe: 1,01; Tyr: 0*95» átlagos kinyerési arány 81 %.

9, példa

A.H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-NH₂ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-0H_o'OH_o-NH-Z előálli- ml diemtil-formamidban 495 mg /0,82 mmól Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH₂-t és 390 mg Z-_/J'-Ala-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert oldunk. Lehűtjük az elegyet,majd 0^14 ml trietil-amint adunk hozzá és ezt követően szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk a dimetil-formamidot, a desztillációs mara;dékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot 5 %-os vízmentes vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk, majd ezt ^követően nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolít juk az etil-acetátot, a desztillációs maradékhoz dietil‘-étert adunk. Szűréssel elkülönítjük a terméket és metanol és etjil-acetát elegyéből kicsapva tisztítjuk. Ily módon 370 mg /kitermelés 56 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-NH-Z-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja 231-233 0°;

- 21,5° c : 0,27, dimetil-formamid/; R¹ : 0,26.

182.051 számított: C: 62,28; H: 5,85; N: 12,20 %;

mért: C: 61,99; H: 5,94; N: 11,95 %.

II. H-Tyr-/D/-Ala-Crly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-NH₂ előállítása A 4. példa II. pontjában megadottakat 280 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NII-NH-CO-CH₂-CH-NH-ZTVel megismételjük. Ily módon 160 mg /kitermelés 61 %/ H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-NH₂-t kapunk.

Az előállított vegyület optikai forgatása:

+ 16,7° /c : 0,27, metanol/; R² 0,07.

Savas hidrolízis után aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00; Alá: O,95í Z^-Ala: 0,99; Tyr: 0,89; Phe: 1,00; átlagos kinyerési arány 79 %·

10. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-G0-/CH₂/₂-CHj előállítása

I. A Z-Phe-NH-NH-G0-GH₂-CH₂-CHj előállítása ml dimetil-formamidban 2,5 g /8 mmól/ Z-Phe-NH-NH₂-t oldunk, majd lehűtjük az oldatot és.0,9 ml CHj- CH₂-GH₂-C0Cl-t és 1,1 ml trietil-amint adunk hozzá. 5 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Ezután vizet adunk hozzá és a kivált kristályos anyagot szűréssel elkülönítjük, a terméket szárítjuk és etil-acetát és petroléter elegyéből kikristályositjuk. Ily módon-2,6 g /kitermelés 85 %/ Z-Phe-tfH-KH-CO-CHp-CH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja: 150-158 C°;

,_v - 27,2° /c : 0,5, metanol/; : 0,71.

Elemanalizis a ^C21^H25⁰4^N3 képlet alapján: számított: C: 65,46; H: 6,48; N: 10,87 %; mért: C: 65,78; H: 6,57; N: 10,96 %.

11. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-/0H_o/_o-CH, előállítása ^d 2 ml metanolban 505 mg Z-Hie-NH-NH-G0-GH₂-GH₂-GHj-t oldunk,·majd palládium katalizátorral katalitikus redukciót végzünk. A reakciót követően szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a metanolt ledesztilláljuk és a desztillációs maradékot 20 ml tetrahidrofuránban oldjuk.

Másrészről 5θ ®1 tetrahidrofuránban 530 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-OH-t és 237 mg N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-lmidet oldunk, majd 0 C° hőmérsékletre hütjük az elegyet és 271 mg Ν,Ν’-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá. Ezután 4 órán át 0 G° hőmérsékleten keverjük a reákoióelegyet. A melléktermékként keletkező karbamid-származékot szűréssel eltávolítjuk, a szürletet a fentiekben megadottak szerint előállított amin-komponenst tartalmazó oldattal keverjük, majd szobahőmérsékleten 1 órán át folytatjuk a keverést.

Desztillácival eltávolítjuk a tetrahidrofuránt, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékhoz dietil

-18182.051

-étert adunk. A terméket szűréssel elkülönítjük és etil-acetátból kikristályositva tisztítjuk. Ily módon 420 mg /kitermelés 50 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-mi-C0-/CH₂/₂-CH₃“t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja 20J-206 C°; .'23. _ o,4° /c : 0,5, metanol/; R¹ : 0,2b.

Elemánalizis a alapján:

számított: C: 62,30; H: 6,27; N: 12,46 %; mért:. C: 62,60; H: 6,52; N: 12,18%.

III. A H-Tyr-/D/“Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CH₂-GH₅ előállítása ml metanolban 250 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-CHj-t oldunk, majd 0,2 ml ecetsavat adunk az oldathoz. Ezután palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. A reakció lezajlása után szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a szürletet töményitjük és a desztillációs maradékot kis mennyiségű In vizes ecetsavban oldjuk, az oldatot

2,5 x 120 cm méretű Sephadex IH-20 gyantából készült kromatografáló oszlopra öntjük. Az eluálást In vizes ecetsavval végezzük, a 320 ml-től a 340 ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva száritjuk. Ily módon 110 mg /kitermelés 44 %/ H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-CH₃-t kapunk.

Az előállított vegyület optikai forgatóképességes + 23,2° /c : 0,25, metanol/; r| : 0,40.

Hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk a terméket és aminosav-analizist végzünk. Az analízis eredménye; Gly: 1,06; Ala:l,00; Tyr: 0,93; Fhe: 0,93; átlagos kinyerési arány 90 %.

11. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-OCH₂-CH₅ előállítása

I. A Z-Phe-NH-NH-CO-OCH₂-CH₅ előállítása

A 10. példa I, pontja szerinti eljárást 1,8 g /5,7 mmól/ Z-Phe-NH-NHg-vel és 0,7 ml etil-klór-karbonáttal megismételjük. Ily módon 1,5 g /kitermelés 69 %/ Z-Phe-NH-NH-CO-OCHi -OCH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja 134 C°;

' < ^3. - 20,6° /c : 0,5, dimetil-formamid/: R^ : 0,69· Elemanalizis a θ20^Η23θ5^Ν3 alapján:

számított: C: 62,32; H: 6,02; N: 10,90 %;

mért: C: 62,38; H: 6,09; N: 10,49 %·

II. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-0GH₂-CH₃ előállítása A 10. példa II. pontját 580 mg /1,3 mmól/ Z-Tyr-/D/-

-Ala-Gly-OH-val és 620 mg Z-Hie-NII-NH-CO-OCHg-CHj-val megismételjük, amikor 820 mg /kitermelés 93 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-0CH₂-CH₅-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja 154-155 C°; ^Jj^3 : - 24,2° /c : 0,45,' Öi met il-f orma mid/; Rf » 0,40.

-19182.051

Elemanalizis a ^34^40^9^5 képlet alapján:

számított: C: 60,34; Η: 5,96; N: 12,42 %; mért: C: 60,09? H: 5,87; N: 12,21 %.

III. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH~CO-OCH₂-CH₃ előállítása · ?

A 10. példa III, pontját 450 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-0CH₂-CH^-val megismételjük, ami után 240 mg /kitermelés 53 %/ H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Ihe-NH-NH-C0-0CH₂-0H,-t kapunk.

kz előállított vegyület optikai forgatása: + 18,1° /c : 0,2, metanol/; R² ; 0,49.

Az aminosav-analizis eredményei: Oly: 1,00; Alá: 0,98; Tyr: 0,88; Phe: 1,02; átlagos kinyerési arány 78 %.

12. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeHie-MÍ-NH₂ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-0CH₅ előállítása ml metanolban 1,8 g /5,7 mmól/ Z-MePhe-OH-t oldunk, az oldathoz 20 ml, dioxánnal készült 5n hidrogén-kloridőt adunk. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot vizzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval ezután eltávolítjuk az etil-acetáto^ amikor desztillációs maradékként 1,5 g olajos anyagot kapunk.

1.1 g ilyen olajos terméket 50 ml metanolban oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a metanolt ledesztilláljuk és a desztillációs maradékot 20 ml dimetil-formamidban oldjuk. Az oldathoz 1,55 g /5,5 mmól Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-0H-t és 0,75 5 N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet adunk,majd 0 G° hőmérsékletre hütjük a reakcióelegyet és 0,80 g N,N*-dicikló-hexil-karbodiimidet adunk hozzá. 5 órán át 0 C° hőmérsékleten, majd ezt követően egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. A melléktermékként kapott karbamid-származékot szűréssel eltávolítjuk és a dimetil-formamidot ledesztilláljuk. A desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk, majd ezt követően vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd a terméket metanol és dietil-éter elegyéből kicsapva tisztítjuk. Ily módon 1,2 g /kitermelés 56 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-OCH,-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja 103-104 C ;

P²⁵: - 17,2° /c : 0,31, metanol/; R^ : 0,68. Elemanalizis a Ο^^Η^^ΟθΝ^ képiét alapjan: számított: G: 64,06; H: 6,19; N: 9,06 %; mért: C: 63,91; N: 6,05; N: 8,89 %.

II. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NII₂ előállítása

Az 1. példa II. pontjában megadottak szerint éljárva

-20182.051

1,0 β /1,6 mmól/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePlie-OCH^-t 0,5 ml NHp-NHp-HpO-val kezelünk, ami után 820 mg /kitermelés 82 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeFhe-NH-NH₂-t kapunk.

Az előállított vegyület 95-95 C° hőmérsékleten bomlás köz-r ben olvad;

ί - 26,8° /c : 0,5, dimetil-formamidban/; R^ : 0,29. Elemanalízís a C^H^O^Ng képlet alapján: számított: C: 62,12; H: 6,19; N: 15,59 %;

mért: C: 61,85; Hí 6,28; N: 15,09 %.

III. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeFhe-NH-NH2 előállítása

A 4. példa II. pontjában megadottak szerint 500 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeHie-NH-NH₂-t reagálhatunk, araikor 155 mg /kitermelés 52 %/ G-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH₂-t kapunk.

Az előállított vegyület optikai forgatóképessége:

+12,0° /c : 0,2, metanolban/; r| : 0,46.

A terméket savason hidrolizálva aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00; Alá: 0,98; Tyr: 0,91; átlagos kinyerési arány 79 %·

15. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Plie-NH-NH-C0-CH_o-CH_o-CH_o-Cl előállítása

I. A Z-Phe-M-I-NH-C0-CH2-CH2-GH₂-Cl előállítása ml dimetil-formamidban 5,15 g /10 mmól Z-Phe-NH-NH2~t és 1,27 6 /10 mmól/ -klór-vajsavat oldunk, majd 0 C° hőmérsékleten 2,2 g NjN’-diciklo-hexil-karbodiiáidét adunk a reakcióelegyhez. 20 órán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. Ezután szűrjük és csökkentett nyomáson töményitjük. A desztillációs maradékot 150 ml etil-acetátban oldjuk, az oldatot vízzel, In hidrogén-kloridda1, majd végül 4 %-os nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk. Ezután vízmentes nátrium-szulf úttal vizmentesitjük és csökkentett- nyomáson szárazra desztilláljuk. A desztillációs maradékot etil-acetát és petroléter elegyéből kristályosítjuk. Ily módon tűszerű kristályos anyagként 5,6 g /kitermelés 85,7 %/ Z-Phe-NH-NH-CO-CHg-Cl^-CHp-Cl-t kapunk.

Az előállított vegyület 185-186 C^u hőmérsékleten olvad;

Rf : 0,52.

Elemanalízís a 02^2^0^201 képlet alapján: számított: C: 60,35; H: 5,79; N: 10,06; Cl: 0,49 %; mért: C: 61,51} H: 5,60; N: 10,15; Cl: 8,27%.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH_o-CH_o-0H_o-Cl előállítása Ad'- ml metanolban 420 mg Z-Phe-NH-NH-CO-CI^-CI^-CI^—Cl—t oldunk, majd palládium-katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel elkülönítjük a katalizátort és a szürletet szárazra desztilláljuk. A száraz desztillációs maradékhoz 445 ing Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-OH-t adunk, majd 10 ml di21

-21meti 1-f or mamidban oldjuk. Az oldathoz 180 mg N-hidroxi-5~norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet adunk. 0 C° hőmérsékletre hütjük a reakcióelegyet, majd 250 mg N,N’-diciklo-hexil-karbodiimiddel egészítjük ki. 3 órán át 0 C° hőmérsékleten, majd ezt követően 12 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Szűréssel elkülönítjük az oldhatatlan anyagokat, a dimetil-formamidot csökkentett nyomáson kivitelezett desztillációval eltávolitjuk, a desztillációs maradékot -n-butanol és etil-acetát 1:2 arányú elegyének 100” ml-ében oldjuk. In hidrogén-kloriddal, 4 %-os nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, majd végül vízzel mossuk az oldatot. Csökkentett nyomáson végzett desztillációval eltávolitjuk az oldószert, a desztillációs maradékot 50 ml metanolban oldjuk. Az oldathoz 1 ml jégecetet adunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolitjuk a katalizátort, a szürletet csökkentett nyomáson szárazra desztilláljuk. A desztillációs maradékot 10 ml In vizes eeetsavban oldjuk. A kivált oldhatatlan anyagokat szűréssel elkülönítjük, a szürletet 3 x 45 cm méretű Sephadex LH-20 gyantából készült oszlopon kromatografáljuk. Az eluálást In vizes ecetsavval végezzük. A 215 ml-től a 236 ml-ig terjedő frakoiókat összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 350 mg H*Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-CH₂-Cl-t kapunk.

Az előállított vegyület forgatása:

+ 18,2° /c : 0,2% metanolban/·, R² : 0,485.

Az aminosav-analizis eredménye: Gly: 1,00; Alá: 1,02;

Tyr: 0,89; Éhe: 1,00; átlagos visszanyerési arány 78 %.

14. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CHj előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CHj előállítása ml dimetil-formamidban 426 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Glv-MeEhe-NH-NHg-t és 0,07 ml propionsavat oldunk, majd 0 C hőmérsékletre hütjük a reakcióelegyet és ekkor 130 mg N-hidroxi-benzo-triazolt és 200 mg Ν,Ν’-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá. 5 órán át. 0 C° hőmérsékleten, majd ezt követően szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet· Szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan anyagokat, a dimet 1-formamidot ledesztilláljuk és a desztillációs maradékot 50 ml etil-acetátI®.¹ extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk, majd vízmentes áátrium-szulf áttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolitjuk az etil-acetátot_f a desztillációs maradékhoz dietil-étert pdunk. A kivált termeket szűréssel elkülönítjük. Ily módon 410 mg /kitermelés 87 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH₂-CH,-t kapunk. « 1

Az előállított vegyület olvadáspontja 139-141 C°;R£: 0,35

- 32,0° /c : 0,43, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a O55^42^8^6 képlet alapján: számított: Cs 57,68; H: · 6,63; Ns 11,53 %; mért: C: 57,55; H: 6,42; N: 11,33 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH₂-CH, előállítása 2 x • 50 ml metanolban25Ojng ,Z~Tyr-/p/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH

-22182.051

-CO-CHg-CH^-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a metanolt ledesztilláljuk a desztillációs maradékot 50 ml vízben oldjuk. Szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan a-, nyagokat, az oldatot fagyasztva szárítjuk. Az igy kapott poralaku terméket kevés In vizes ecetsavban oldjuk, az oldatot .

2,5 x 120 cm méretű Sephadex Ifí-20 gyantából készült oszlopra öntjük. Az eluálást In vizes,ecetsavval végezzük. A 2§0 ml-töl a 3Ϊ5 ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük a fagyasztva szárítjuk. Ily módon 100 mg H-Tyr-ZöZ-Ala-Gly-MeRie-NH-NH-CO-CH^-CH,-t kapunk.

? kz előállított vegyület optikai forgatása:

G‘-D^4í “ 7,7° ^{/c :} θ’¹⁶’ ^mefcanolA Rf ’ °»47.

Az aminosav-analizis eredménye: Gly: 1,00; Alá: 1,03;

Tyr: 0,92; átlagos kinyerési arány Öl

15. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH_?-CH_p-CH, előállítása ^d 2

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH₉-CH₉-CH, előállítása 2 $

A 14. példa I. pontjában megadottakat 426 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NHp-vel és 0,08 ml n-vajsavval megismételve 395 mg /kitermelés 83 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeJ?he-NH-NH-C0-CH₂-OHg-CH^-t kapunk.

_Ί Az előállított vegyület olvadáspontja 135-137 0°;

Rf : O,37í ^! · ρ2· - 3.1,5° /c : 0,3, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a C^gH^OgNg képlet alapján: számított: C: 62,77; H: 6,44; . N: 12,20 %; mért: C: 62,48; H: 6,31; Ni- 11,95 %· . II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeRie-NH-NH-CO-CH₂-CH₂-CH₅-előállítása

A 14. példa II. pontjában megadottakat megismételve 250 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NII-NH-CO-CH₂-CH₂-CH,-t hasítunk és tisztítunk, ami után 110 mg H-Tyr-/D/-AÍa-GÍy-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-0H₂-CH₅-t kapunk.

Az előállított vegyület optikai forgatása:

_ 7,2° /c : 0,2, metanol/; r| : 0,48.

Az aminosav-analizis eredményei: Gly: 1,00; Alá: 0,98; Tyr: 0,86; átlagos kinyerési arány 83 %.

16. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH~-CH„-CO-CH₇ előállítása £ d f)

A 14. példa I. pontjában megadottak szerint, de 482 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH₂-t és 0,13 ml 4-oxo-n-valeriánsavat használva 390 mg /kitermelés 70 %/ H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Merhe-NH-IBI-CO-CH2-CH2-űO-CH₅-t kapunk*

-23182.051

Az előállított vegyület 130-140 C° hőmérsékleten olvadj

Rf : 0,49;

- 27,6° /c ; 0,27, dimetil-formamidban/;

Elemanalizis a Ο^Η^Ο^Νθ » H^O képlet alapján: •számított: 0: 60,48; H: 6,31; N: 11,44 %; mért: C: 60,19;' H: 6,25; N: 11,28 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeHie-NH-NH-00-GH_o-CH_o-C0-GH, előállítása -------------------------------- — ·.........3 .

A 14. példa II. pontjában megadottak 340 mg Z-Tyr-/D/~ -Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-Cl^-CHg-CO-CH^-val megismételjük, amikor 170 mg H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-OO-CHp-CHp-CO-CH^-t kapunk. . ^d '

R²: 0,49; - 6,0° /c : 0,3, metanolban/.

Az arainosav-analizis eredményei: Gly: 1,00; Alá: 0,98; Tyr: 0,97; átlagos kinyerési arány 85 %.

17« példa

A H-MeTyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0¥3H₂-CH₃ előállítása

I. A Z-/D/~Ala-Gly-Phe-PEt-t előállítása ml dimetil-formamidban 0,90 g Z-/D/-Ala-Gly-OH-t és 0,63 g N-hidroxiy5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet oldunk, majd 0 0° hőmérsékletre hütjük a reakcióelegyet és 0,75 g N,N*-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá. 4 órán át keverjük a reakcióelegyet, majd ezt követően szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan, anyagokat. _____________________________________ _--------------, .

0,81 g H-Phe-OEt-hidrogén-kloridot és 0,5’ ml trietil-amint adunk a szürlethez, majd egy éjszakán át keverjük. Desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, majd In vizes hidrogénkloriddal, és ezt követően 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk az extraktumot. Vizmentesitjük az oldatot vízmentes nátrium-szulfáttal. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékként kapott kristályos anyagot szűréssel elkülönítjük és etil-acetát és petroléter elegyéből újra kikris tály ősit juk. Tly módon 1,2 g /kitermelés 83%/ Z-/D/-Ala-Gly-OEt-t kapunk.

Az előállított vegyület 109-110 0° hőmérsékleten olvad; Rf: 0,78;pyJ²7_{: +} 1,5° /_c . 0,44, dimetil-formamidban/.

Elemanalizis a 0₂4^Η29°6^Ν3 ^kéP^{lefc ala}PJán:

számított: G: 63,28; H: 6,42; N: 9,23 %;

mért: G: 63,38; H: 6,47; N: 9,03 %.

II. A Z-/D/-Ala^-Gly^Phs=NH-NHö~elöállitása-----------50 ml metanolban 3,3 g Z-/D/-Ala-Gly-Phe-OEt-t és ezután 1 ml hidrazin-hidrátot oldunk, az oldatot 2 napon át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Ezután dietil-étert adunk hozzá* a kivált terméket szűréssel elkülönítjük és etanolból kikristályositjuk. Ily módon 3,0 g /kitermelés 94 %/ Z-/D/-Ala-Gly-Fhe-NH-NlLj-t kapunk.

ι Az: előállított vegyület 196-197 C° hőmérsékleten olvad; Bp 0,34;

-24182.051

I ζζ]ρ⁷: + 2,4° /ű : 0,37, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a számított: C:

^G22^H27°5^N5

59,85; Hí képlet alapján:

6,16; N: 15,86 mért:

C: 59,62; H: 6,12; N: 16,13%.

III. A Z-/D/-Ala-Gly-Hie-NH-NH-CO-CH₂-OH₅ előállítása ml dimetil-formamidban 1,1 g Z-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH₂-t és 0,22 ml propionsavat oldunk,, majd 0 C° hőmérsékletre hütjük az oldatot és 0,44 g N-hidroxi-benzo-triazolt és 0,62 g Ν,Ν’-diciklo-hexil-karbidimidet adunk hozzá.

órán át 0 0° hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten folytatjuk a keverést. Szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan anyagokat, a dimetil-f oo** mamidot ledesztilláljuk, a·desztillációs maradékot pedig 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk az extraktumot és vizmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, majd a gélszerű desztillációs maradékot szűréssel elkülönítjük? Forralás közben etil-acetáttal mossuk a terméket, majd szárítjuk. Ily módon 0,95 g /kitermelés 77 %/ Z-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-GH₃-t kapunk.

Az előállított vegyület 197-197 0° hőmérsékleten olvad; R.jh 0,46;y.xJp⁷: +> 4,8° / C! 0,27, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a °25^Η31θ6^1ί5 ^k^plet alapján!

számított: Cí 60,34; H: 6,28; N: 14,08%;·

- mért: Gí 60,14; -H; 6,36; Ni 13,65 %.

IV. A Z-MeTyr/tercier-butil/-D/D-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CH₅ előállítása ml metanolban 497 mg Z-/D/-Ala-Gly-Rie-NH-NH-CO-CH₂-CHj-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel elkülönítjük a katalizátort, a metanolt ledesztilláljuk, és a desztillációs maradékot 10 ml dimetil fór mamidban oldjuk.

Ugyanakkor 10 ml tetrahidrofuránban 385 mg Z-MeTyr-/tercier-butil/-OH-t és 215 mg N-hidroxi-5-norboernen-2,3-dikarbonpav-imidet oldunk, majd 0 C° hőmérsékletre hütjük az elegyet, és 227 mg N,N’-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá. 4 órán át 0 C° hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet, majd szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan anyagokat. A szürletet a fentiék szerint előállított és az amin-származékot tartalmazó dimetil-f ormamidos oldathoz öntjük, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. Desztillációval eltávolítjuk az oldószert,-a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk, végül vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, májd a desztillációs maradékként kapott gélszerű anyagot szűréssel elkülönítjük. Ily módon 620 mg /kitermelés 85 %/ Z-MeTyr-/tercier-butil/-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH^-t kakapun k. _z

Az előállított vegyület 143-144 C° hőmérsékleten olvad;

-25182.051

R¹: 0,6J; |'κ ¹ ρ'^{7 !} “ 43,7° /c : 0,4, dimeti 1-formamid/.

Elemanalizis a ^39^50^8^6 képlet alapján:

számított: C: 64,0; H: 6,90; N: 11,50 %\ mért: C: 64,33; H: 7,21; N: 11,40 %.

' V. A H-MeTyr-/D/-Ala-Gly-Ehe-NH-NH-CO-CH₂-CHj előállítása ml metanolban 500 mg Z-MeTyr-/D/-Ala-Gly-Ehe-NH-NH-CO-CHg-CHj-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalikikus redukciót végzünk. Szűréssel elkülönítjük a kata- .. lizátort, a szűr letet desztilláljuk és a desztillációs maradékként kapott anyagot In vizes ecetsav oldatban oldjuk. Az olda-í tót 2,5 x 120 cm méretű Sephadex IH-20 gyantából készült kromatografáló oszlop tetejére öntjük, a terméket vizes In ecetsav oldattal eluáljuk. A 330 ml-tőí a 370 ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük'és fagyasztva szárítjuk. Ily módón 360 mg súlyú anyagot kapunk. Ebből 200 mg-nyit 2 ml trifluor-ecetsavban oldunk, az oldatot 30 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Ezután desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot szárítjuk és 50 ml vizben oldjuk. Az oldatot 2 x 6 cm /acetát-alaku/ Amberlite IRA-410 gyantából készült kromatografáló oszlopra öntjük. Az eluátumokat és a mosófolyadékot egyesítjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 170 mg súlyú anyagot kapunk. Ezt a poralaku termeket kevés vizes In ecetsav oldatban oldjuk. Az oldatot 2 x 120. cm méretű Sephadex IH-20 gyantából készült oszlopra öntjük, az eluálást In vizes ecetsav oldattal végezzük. A 285 ml-től a 300 ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 70 mg terméket kapunk.’ ·

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás viselkedése :

Rf : 0,33? % ^! + 32,80 /c: 0,21, metanol/.

Az aminosav-analizis eredménye: Gly: 1,00; Alá: 0,92; Phe: 1,02; kinyerési arány 78 %.

18. példa

A H-MeTyr-/D/-Ala-Gly-Merhe-NH-NH-C0-CH₂-GHj előállítása

I. A Z-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH₂ előállítása ml metanolban 1,1 g Z-MeHie-OMe-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a metanolt ledesztilláljuk' és a desztillációs maradékot 10 ml dimetilformamidban oldjuk.

Ugyanakkor 10 ml dimeti 1-f ormamidban 0,92 g Z-/D/-Ala~Gly-OH-t és 0,71 g R-hidroxi-5-hörbőrnén-2,3-dikarbonsav-imidet oldunk. 0 0° hőmérsékletre hütjük az elegyet és 0,75 Ν,Ν’-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá. 4 órán át 0 C° hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet, ami után szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan anyagokat. Az igy kapott szűrletet egyesítjük a fentiek szerint előállított és amin-származékot tártál- ; mazó oldattal, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. Desztillációval eltávolítjuk a dimetil-rformamidot, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extra26

-26182.051 háljuk, az extraktumot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük; Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, ami után olajos desztillációs maradékként 2,5 g anyagot kapunk. Ezt az olajat 20 ml metanolban oldjuk, majd 1,5 ml hidrazin-hidrátot adunk az oldathoz, egy éjszakán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni az elegyet. Ezután desztillációval eltávolítjuk a metanolt, a desztillációs maradékként kapott anyagot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs.maradékhoz dletil-étert adunk és a kivált terméket szűréssel elkülönítjük. Ily módon 2,0 g /kitermelés 80 %/ Z-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH₂-t Kapunk.

Az előállított vegyület 85 C° és 87 C° közötti g hőmérsékleten olvad: _R1 . _Oj55.

Elemanalizis a

képlet alapján:

számított: C: 60,64; H: 6,42; N: 15,38 %; mért: C: 60,51; H: .6,55; N: 15,11 %.

II, A Z-MeTyr/tercier-butil/-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH₂-CHj előállitása ml tetrahidrofuránhan 0,91 g Z-/DZ-Ala-Gly-MePhe-NH-NH^-t és 0,19 ml propionsavat oldunk, 0 C^O hőmérsékletre hütjük az oldatot, majd ezt követően ugyanezen a hőmérsékleten 0,38 g N-hidroxi-benzo-triazolt és 0,45 g NjN’-dicíklo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá.

4,órán át 0 C° hőmérsékleten, majd ezután egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Az oldhatatlan anyagokat szűréssel, a tetrahidro-furánt desztillációval eltávolitjuk, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal mossuk, majd vizes nátrium-hidrogén-karbonáttál mossuk az extraktumot. Ezután vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük.

Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, ami után desztillációs maradékként 1.00 g olajat kapunk. Ezt az olajat 50 ml metanolban feloldjuk és palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a metanolt 'ledesztilláljuk, és a desztillációs maradékot 10 ml tetrahidrofuránban oldjuk.

Ugyanakkor 10 ml tetrahidrofuránban 0,73 g Z-MeTyr-/tercier-buuil/-OH-t és 0,41 g N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet oldunk, majd 0 C° hőmérsékleten 0,43 g N,N*-diciklo-hexil-karbodiImidet adunk az oldathoz. 4 órán át 0 C° hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan anyagokat, a szürletet a fentiek szerint előállított és amin-származékot tartalmazó tetrahidrofurános oldathoz öntjük. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk a tetrahidrofuránt, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot 5 %-os vizes nátriuoL-hidrogén-karbonát oldattal mossuk. Vízmentes nátrium-szulfottal vizmentesitjük az oldatot, majd desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot és a desztillációs maradékot dietil-éterből kicsapva tisztítjuk. Ily módon 1,2 g /kitermelés 86%/ Z-MeTyr/tercier-butil/-/D/-Ala-GIy-MePhe-NH-NH-C0-0H₂-CH,-t^zkapunk. ⁵

-27182.051

Az előállított vegyület 110-112 C° hőmérsékleten olvad;

Rfj 0,61./.í'-S’p'⁷: - 54,7° /c : 0,45, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a Ο^θΗ^ΟθΝθ képlet alapján: számított: C: 64,50; H: 7,Oá; N: 11,28 %; mért: C: 64,25; H:_ 7,16; N: 11,35 %.

III. A H-MeTyr-/D/_TAla-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-0k₅ előállítása

A 17· példa V- pontjában megadottak szerint 600 mg Z-MeTyr/tercier-butil/-I/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₅-t katalitikusán redukálunk, majd trifluor-ecetsawal kezelünk, a terméket gélszüréssel tisztítjuk, majd összegyűjtjük a 150 mg súlyú H-MeTyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH_o-CH,-t.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R^ : értéke: 0,48;/k/²⁵: + 14,4° /c : 0,25, metanol/.

Az aminosav-analízis eredménye: Gly: 1,00; Alá: 0,95; kinyerési .arány 81 %. *

19. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe~NH-NH-CO-CH₅ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Merhe-NH-NH-CO-GH^ előállítása. ' A 14. példa I. pontjában megadottakat megismételve

426 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH₂-t és 0,06 ml ecetsavat reagáltatunk, amikor 405 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-OH,-t /kitermelés 85 %/ kapunk. --------Az előállított vegyület 142-143 0° hőmérsékleten olvad;

Rf : 0,33;/^t5Jp⁷: - 31,8° /c : 0,4, diemti 1-f orma mid/.

Elemanalizis a θ^4^Η4ο°8^Ν6 alapján:

számított: C: 61,80; H: 6,10; N: 12,72 %; mért: C: 61,65; H: 6,02; N: 12,66 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeRie-NH-NH-CO-CH_?-CH, előállítása ^2

A 14. példa II. pontjában megadottak szerint 250 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CHj-t hasítunk és tisztítunk, ami után 130 mg H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH₂-CH,-t ka* púnk. ² 2 '

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás Rf ér-í téke: 0,44; - 6,9° /c : 0,3, metanol/.

Az aminosav-analízis eredménye: Gly: 1,00; Alá: 0,99; . Tyr: 0,92; kinyerési arány 82%.

20, példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂0-CH₂-CH₅ előtása ⁵

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeThe-NH-NH-00-CH_o-CH_o-0-GH -CH, , előállítása ^{2 2 2 5} : A 14. példa I. pontjában megadottakat 358 mg Z^-Tyr*/Ώ/-Α13-61?-Μβ*Σ^&^^*1ΕΗ^έ£1.Α3Χθφ.ΰ£ί,_κΤ-/3-*θίθχί-ρΓορ1οηθΗν-28182.051 val megismételjük, amikor 500 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MöPhe~NH-NH-GO-GH^-GI^-O-GH^-t kapunk. /Kitermelés 75 %/.

Az előállított vegyület 122-124 C° hőmérsékleten olvad;

Rf i “ ²¹»θ° /° ^: °»24, dimeti1-forma mid/.

Elemanalizis a Ο^Η^Ο^Νθ képlet alapján:

számított: C: 62,00; H: 6,19; N: 11,72 %;

mért: 0:61,73; H; 6,24; N: 11,59%·

-II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeFhe-Iffi-Mi-CÖ-CH_P-CH_?-O-GH_?-GH, előállítása ⁵

A 14. példa II. pontjában megadottakat 150 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-0-ÖH₂CH₅ val megismételjük, az előállított anyagot tisztítjuk, amikor 75 mg H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-0-0H₂-CH^-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R^: értéke: 0,47:^^. ₊ 2,0° /c : 0,2, metanol/.

Az aminosav-analízis eredményei: Gly: 1,00; Alá: 0,97; Tyr: 0,96; átlagos kinyerési arány 81 %.

21. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-KH-NH-G0-CH_o-CH/CH,/_o előállítása 2 3 2

I. A.Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeFhe-NH-NH-CO-CH₂-CH/GH₃/₂ ölőál- 'példa I. pontjában megadottakat 426 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeBHe-NH-NH₂-vel és 0,09 ml izovaleriánsavval megismételjük, ami után 590 mg /kitermelés 82%/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-GH₂-CH/CH₅/₂-t kapunk.

Az előállított vegyület 129-133 0° hőmérsékleten olvad;

Rft 0,40; _ 52,0° /c : 0,5, dimetil-f orma mid/.

Elemanalizis a Ο^Η^θΟ^Ν^ képlet alapján:

számított: C: 65,25; H: 6,60; N: 11,96 %;

mért: 0: 65,05; H: 6,45; N: 11,72%.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH_o-CH/CH_x/_o előállítása 2 5 d-

A 14. példa II. pontjában megadottakat 500 mg Z-Tyr-/DZ-Ala-Gly-MeBhe-NH-NH-CO-CH -CH/CH/-vel megismételjük,majd a hasitott terméket tisztítjuk. Ily módon^- 170 mg H-Tyr-/D/-Alst-Gly-MeHie-NH-NH-CO-GH₂-CH/CH₃/₂-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás Rp -értéke: 0,48;/^ρ3χ _ 7_ti° /_{c ;} p_t2, metanol/.

Az aminosav-analízis eredményei: Gly: 1,00; Alá: 1,05; Tyr: 0,89? átlagos kinyerési arány 79 %·

22. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-Cl előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-0H_o-CH_o-Cl előállítása. ² s

A 14. példa I. pontjában megadottakat 482 mg Z-Tyr-/D/-.

-29182.051

-/Ala-Gly-MePhe-NTI-NHg-ve 1 és 0,12 g 3-klór-propionsawal megismételjük, amikor 420 mg /kitermelés 85 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePtie-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-Cl-t kapunk.

Az előállított vegyület 126-129 C° hőmérsékleten olvad;

R¹ ; 0,38;/y'p⁹: - 28,6° /c : 0,5, dimetil-formamid/. Elemanalizis a képlet alapján:

számított: C: 59,26; H: 5,82; N: 11,85; Cl: 5,00 %; mért: 0: 59,33? H: 5,94; N: 11,81; Cl: 4,88 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂Cl előállítása

A 14. példa II. pontjában megadottak szerint 250 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂Cl-t hasítunk és tisztítunk,' ami után 105 mg H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-Cl-t kapunk. ₂

Az előállított vegyület vékonyrégeg kromatográfiás -értéke: 0,50;p⁹: - 6,9° /c : 0,2, metanol/.

Aminosav-analízis: Gly: 1,00; Alá: 0,96; Tyr; 0,92; átlagos kinyerési arány 81 %.

23« példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeBie-NH-NH-Co-CH/OH/-C5₅ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH/OH/-CH, előállítása -³

A 14. példa I. pontjában megadottak 462 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH₂-vel és 0,08 ml tejsavval megismételjük, amikor 380 rag /kitermelés 81 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH/0H/-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 131-134 C° hőmérsékleten olvad;

Rf : 0,29;£<^p⁹: - 29,6° /c : 0,4, dimetil-formamid/. Elemanalizis a θ^^Η^Ο^Νθ képlet alapján: számított: C: 60,85? H: 6,12; N: 12,16 %; mért: 0: 60,77; H: 5,96; N: 12,03 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-GO-CH/OH/-CH_x előállít ása 2

A 14. példa II. pontjában megadottak szerint eljárva

300 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeFhe-NH-NH-CO-CH/OH/-CHj-t hasitunk .és tisztítunk, ami után 160 mg H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH/0H/-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás ^Rf “értéke: 0,41; - 7,1° /c : 0,2, metanol/.

Arainosav-analizis eredményei: Gly: 1,00; Alá: 0,98; Tyr: 0,91? átlagos kinyerési arány 82%.

24. példa ,

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeJhe-NH-NH-C0-0-CH₂-CHj előállít ága

-30182.051

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeRie-NH-NH-C0-0-CH₂-CH, előállítása p ml dimetil-formamidban 426 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Mefhe-NH-NH₂-t oldunk, majd lehűtjük az oldatot és 90 mg etil-klór-karbonátot éa 0,11 ml trietil-amint adunk'hozzá. 2 órán át 0 C° hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Ezután-vizes nátrium-rkloridoldatot adunk a reakcióelegyhez és 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk. Elkülö- nitjük az etil-acetatos fáziát és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Az oldószert csökkentett nyomáson kivitelezett desztillációval eltávolítjuk, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd szűréssel elkülönítjük a terméket és etanol és dietil-éter elegyéből kicsapjuk. Ily módon 350 mg /kitermelés 73 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-0-CH₂-CH,-t kapunk. 3

Az előállított vegyület 131-133 0° hőmérsékleten,olvad;

R^ : 0,40; : - 32,2° c.: 0,3, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a Ο^Η^Ο^Νθ képlet alapján:

számított Cs 60,85; H: 6,13; N: 12,16%;

mért: C: 60,67; H: 6,3 ; N: 12,11 %;

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-0-CH₂-CHj-t hasítunk és tisztítunk, ami után 105 mg H-Tyr-/D/-Ala-

-Gly-MeHie-NH-NH-C0-0-0H₂-CHj-t kapunk.

Az előállított termék vékonyréteg kromatográfiás’ r| -értéke: 0,47;/^;p⁹ : - 6,7° c : 0,2, metanol/.

Az aminosav-analízis eredményei: Gly: 1,00; Alá: 0,99; Tyr: 0,88; átlagos kinyerési· arány 79 %·

25« példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeRie-NH-NH-C0-0H₂CH₂-CH₂-CH, előálli t/ ét 9 a

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-CHj _előál_ litása

A 14. példa I. pontjában megadottakat 426 rag Z-Tyr-/D/-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH₂-vel és 0,09 ml n-valeriánsavval megismételve 390 mg /kitermelés 82 %/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Melhe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-CH₂-CHj- t állítunk elő.

Az előállított vegyület 131-133 0° hőmérsékleten olvad: Rg : 0,40;[f-ip⁴ : - 31,4° c : 0,3, dimetil-forraamid/.

Elemanalizis a Cj? ^H46⁰8^H6 képlet alapján: számított: C: 63,23; H: 6,60; N: 11,96 %;

mért: C: 63,42; H: 6,71? N: 11,72 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-MeRie-NH-NH-C0-0H_o-CH_o-CH_o-CH, előállítása 2 t A 14. példa II. pontjában megadottak szerint 300 mg

Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH -CH -CH -CH -t hasítunk és tisztítunk, ami után 150 mg H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Melhe-NH-NH-C0-CH2-CH₂-CH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg-kromatográfiás r| -ér-31182.051 téke: 0,49; [,.-C^'· - 6,4° /c : 0,2, metanol/.

Az aminogav-analizis eredményei: Gly: 1,00; Alá: 1,00; Tyr: 0,94; átlagos kinyerési arány 80 %.

26. példa

A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Fhe-NH-NH-CO-CH₂-OH₅ előállítása

I. A Z-Phe-NH-NH₂ előállítása

200 ml metanolban 59 g Z-Phe-OH-t oldunk, majd 5 ml 6n hidrogén-klorid-dioxánt adunk az oldathoz. Egy éjszakán·át szobahőmérsékleten hagyjuk állni a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolitjuk a metanolt, a desztillációs maradékot 300 ml dietil-éterben oldjuk. Az oldatot vízzel mossuk. Vízmentes nátri m-szulfáttal vizmentesitjük az oldatot, a dietil-étert desztillációval eltávolitjuk, a desztillációs maradékot 150 ml me+ tanolban oldjuk.

lyos anyagot petroléterrel szűrve összegyűjtjük, dietil-éter_f -j____ . _ i_ Λ _Λ j, j η _Λ Λ n A — - - - j n < i_ „ π _ li_ z Ί . - __ _Λ i j _ * z lyositjuk. Ily módon 49 g /kitermelés 79 %/ Z-Phe-NH-NH_P-t kapunk.

Az előállított

R¹: 0,62:/¾^¹ : Elemanalizis a

Az oldathoz 16 ml hidrazin-hidrátot adunk, majd 2 napon át szobahőmérsékleten hagyjuk állni a reakcióelegyet* Ezután desztillációva1 eltávolitjuk a metanolt, a kicsapódott kristályos anyagot petroléterrel szűrve összegyűjtjük, dietil-éterrel mossuk és etil-acetát és petroléter elegyéböl újra kristá,₂-u cvavegyület 159-160 C° hőmérsékleten olvad; 9,8° /c : 0,8, dimetil-formamid/. ^G17^19θ3^3 ^^dP^det alapján;· számitott: C: 65,16; H: 6,11; N: 13,41 %; mért: C: 65,02; H: 6,32; N: 13,20 ?.

II. A Z-Phe-NH-NH-CO-CHg-CH^ előállítása ml dimetil-formamidban 12,4 g Z-Phe-NH-NH₂~t oldunk,az oldathoz hűtés után 5,8 ml vízmentes propionsavat és 3 ml piridint adunk. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Ezután vizet adunk az oldathoz, a kivált csapadékot szűréssel elkülönítjük. Az elkülönített terméket metanol éa acetonitril elegyéböl kikristályositva 9,8 g /kitermelés 68 %/ Z-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₅-t kapunk.

Az előállított vegyület 203-204 0° hőmérsékleten olvad; R¹ : 0,60; - 17,6° /c : 0,46, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a ^20^23¾¹^ ^,íCdP^lefc alapján:

számitott: C: 65,92; H: 6,27; . N: 10,25 %;

mért: C: 65,87; H: 6,72; N: 9,93 %·

III. A Z-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CH₃ előállítása ml metanolban 2,2 g Z-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH^-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel a katalizátort, desztillációval a metanolt távolitjuk el, a desztillációs maradékot 10 ml dimetil-formamidban oldjuk.

Az oldathoz 2,2 g Z-Gly-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-idikarbonsav-imid-észtert adunk,majd egy éjszakán át szobahőmérsék

-32182.051 létén keverjük a reakeióelegyet. Ezután desztilláöióval eltávolítjuk a dinteti 1-formamidot, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfattal vizmentesif jük. Desztillálóval eltávolítjuk az etil-acetátot, a kicsapódott kristályokat szűréssel összegyűjtjük és etil-acetát és acetonitril elegyéből kikristályosit juk. Ily módon 1,8 g /kitermelés 71 %/ Z-Gly-Phe-rNH-NH-CO-CHp-CH^-t kapunk.

Az előállitott vegyület'151-152 C° hőmérsékleten olvad; Rf : 0,46;/^/p¹: - 1,2° / cs 0,5, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a °22^Η26θ5^Ν4 alapján:

számított: C: 61,96; H: 6,15; N: 13,14 %;

mért: C: 62,25; H: 6,23; N: 12,85 %.

IV. A tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-00-0¾-CH^ előállítása ml metanolban 1,0 g Z-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHg-CH^-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel elkülönítjük a katalizátort, a metanolt desztillációval eltávolítjuk, végül a desztillációs maradékot 20 ml acetonitrilben oldjuk.

Az oldathoz 600 mg tercier-butoxi-karbonil-/D/-Mat-0H-va1 és 470 mg H-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imiddel az Ν,Ν’-diciklo-hexil-karbodiimides módszerrel előállitott tercier -bút oxi-karboni 1-/D/ -Met -N-hidroxi-5-norbor ne n-2, 3-d ikarbonsav-imid-észtert adunk, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakeióelegyet.

Ezután 0*5 ml 30 %-os vizes hidrogén-peroxid oldatot adunk a reakcióelegyhez, majd 10 órán át szobahőmérsékleten folytatjuk a keverést. Palládium katalizátorral bontjuk a nem reagált hidrogén-peroxidot, majd desztillációval eltávolítjuk az acetonitrilt. A desztillációs maradékot 100 ml n-butanollal extraháljuk, az extraktumot vízzel mossuk. Desztillációval eltávolítjuk az elegyből az n-butanolt és a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk. Ily módon 1,1 g /kitermelés 88 %/ tereier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHp-CH^-t kapunk. _ 2

Az előállitott vegyület 121-122 C hőmérsékleten olvad;

Rf : 0,40; : 0 0° /c : 0,5, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a θ24^Η37θ6^Ν5θ . 1/2 H₂0 képlet alapján:

számított: C: 52,53; H: 6,97; N: 12,76; S: 5,84 %;

mért: C: 52,41; H: 6,99; N: 12,46; S: 5,61 %.

V. A tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₅ előállítása ml trifluor-ecetsavban 0,82 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-GH₂-CH^-t oldunk, az oldatot 20 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Desztill cióval eltávolitjuk a trifluor-ecetsavat* a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk. A kivált termeket szűréssel elkülönítjük. A száraz poralaku anyagot 10 ml dimetil-formamidban oldjuk/ az oldathoz 710 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-N-hidroxi-5-norbor

-33182.051 nen-2,3-dikarbonsav-ímid-észtert és 0,3 ml trietil-amint adunk. Egy éjszakán út szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Ezután desztillációval eltávolítjuk a dimeti1-formamidot, a desztillációs maradékot pedig 100 ml n-butanollal extraháljak. Az extraktumot vizzel mossuk. Az n-butanolt desztillációval el· távolitjuk, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk. Ily módpn 0,75 6 /kitermelés 72 %/ kristályos tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 134-135 C° hőmérsékleten olvad;

R^ : OjlOvQ'.'p¹: 0 ⁰ /c : 0,5, dimetil-f ormamid/.

Elemanalízis: a CjjHg^O^NgS · h₂0 képlet alapján: számított: C: 54,98; H: 6,71; N: 11,66; S: 4,44 %;

mért: C: 54,72; H: 6,ö2; N: 11,16; S: 4,43 %.

előálli-

VI. A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH_P-CH_x tása ml trifluor-ecetsavban 400 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-0Hj-t oldunk, majd 20 percen át szobahőmérsékleten hagyjak állni az oldatot. Desztillációval eltávolítjuk a trifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd szűréssel elkülönítjük a kivált terméket. A szűrési maradókot 30 ml vizben oldjak, az oldatot 2 x 6 cm méretű ecetsav-tipasu Amberilete IRA-410 gyantával készült kromatografáló oszlopon vezetjük át. Az effluenst és a mosófolyadékot egyesitjük és fagyasztva szárítjuk. A kapott poralaku terméket kevés 0,ln vizes ecetsavban oldjuk, az oldatot Sephadex LH-20 gyantával töltött· kromatografáló oszlopon vezetjük át. Az eluáíást 0,ln vizes ecetsav -oldattal végezzük. A 310 ml-töl a 33θ ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 310 mg II-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyrégeg kromatográfiás R^ -értéke: O,35;«^/7n^ ^{! +} 24,3° /c : 0,35, metanol /.

f

A terméket hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00, Met: 0,57; Tyr: 0,88; Phe: 1,00.

27. példa

A IÍ-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH_o-CHo-CH, előállítása έ έ 2

A Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-0Et előállítása ml acetonitrilben 4,8 g H-Phe-etilészter hidrogén-kloridot oldunk. Lehűtjük az oldatot, majd 2,8 ml trietil-amint és 7,4 g Z-Gly-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert adunk hozzá, majd ezt követően egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot 200 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot vizzel mossak és ezt követően vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot 100 ml metanolban oldjuk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a metanolt ledésztilláljuk, a desztillációs maradékként

-34182.051 kapott terméket 50 ml acetonitrilben oldjuk. 4,7 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met-OH-val és 3,7 g N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imiddel a Ν,Ν’-diciklo-hexil-karbodiimides módszerrel t ercier-but oxi-karbonil-/D/-Met-N-hídroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert állítunk elő, majd ezt hozzáadjuk a reakcióelegyhoz. Ezután egy éjszakán át szobahőmérsékle— ten keverjük. Ezt követően 1 ml In vizes hidrogén-klorid oldatot és 2,2 ml 30 %-os vizes hidrogén-peroxid oldatot adunk a reakcióelegyhez, majd 10 órán át szobahőmérsékleten folytatjuk a keverést. Palládium katalizátorral bontjuk a fölös hidrogen-peroxidot. majd desztillációval eltávolítjuk az acetonitrilt. A desztillációs maradékot 200 ml etil-acetáttal extraháljuk,az extraktumot vizzel mossuk és nátrium-szulfáttal vizmentesitjük, Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot 30 ml trifluor-ecetsavban oldjuk. 20 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni a reakcióelegyet, majd a trifluor-ecetsavat ledesztilláljuk, a desztillációs maradékhoz pedig dietil-étert adunk. A kapott terméket szűréssel elkülönítjük. Ezt 60 ml acetonitrilben oldjuk, az oldatot lehűtjük, majd 2,5 ml trietilamint és 7,2 g Z-Tyr-N-hidroxi-5“norbornen-2,3~<iikarbonsav-imid-észtert adunk hozzá. Ezután-egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradókot 200 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot vizzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesítjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a kristályos desztillációs maradékot szűréssel elkülönítjük. Etil-acetátból kikristályositva a terméket 6,9 5 Z-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-OEt-t kapunk.Az előállított vegyület 162-163 C° hőmérsékleten olvad;

Rp: 0,42^-^/^: - 3,2° /c : 0,37, diraeti 1-f orma mid/.

Elemanalizis a képlet alapján:

számított: C: 60,50; H: 6,09; N; 8,06; S: 4,61 %;

mórt: C: 60,45; H: 6,38; N: 8,07; S: 4,37 %.

II. A Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Pn©-NH-NH₂ előállítása ml etil-alkohol és 20 ml dimeti1-formamid elegyében 6,0 g Z-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Pho-OEt-t oldunk, az oldathoz 2 ml hidrazin-hidrátot adunk, majd ezt követően 2 napon át szobahőmérsékleten hagyjuk állni a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk az etil-alkoholt, majd a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk és szűréssel elkülönítjük a kivált kristályos anyagot. A kristályokat forró acetonitrilben mossak, ami után 5,0 g Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH₂-t kapunk.

Az előállított vegyület 182-184 C° hőmérsékleten olvad; R¹ : 0,10; TcPlp¹ - 13,4° /c : 0,44, dimetil-formamdiban/.

Elemanalizis a θ^Η^θΟθΝθβ képlet alapján:

számított: C: 58,21; H: 5,92; N: 12,34; S: 4,71 %;

mért: C: 57,95; H: 5,98; N: 12,10; S: 4,55 %.

III. A Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-0H_o-CH_o-CH_z előállítása .

ml dimetil-formamidban 0,51 g Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NHg-t és 0,08 ml n-vajsavat oldunk. 0 0° hőmérsékletre hütjük az oldatot, majd 120 mg N-hidroxi-5-norbornen-2,3-<likar

-35182.051 bonsav-imidet és 190 mg NjN’-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk a reakcióelegyhez. 0 0° hőmérsékleten 5 órán át és ezt követően egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet.Desztillációval eltávolítjuk a dimetil-formamidot, a desztillációs maradékot dietil-éterrel extraháljuk, a kapott terméket metanol és acetonitril elegyéből kicsapva tisztítjuk. Ily módon 410 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-GH₂-CH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 161-163 C° hőmérsékleten olvad; R^ : 0,31; - 8,8° /c : 0,34, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a Cj^H^gOgNgS képlet alapján:' számított: C: 59,18; H: 6,17; N: 11,19; S: 4,27 %;

mért: C: 58,85; H: 6,02; N: 10,86; S: 4,05 %.

IV. A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH_o-CH_o-0H, előállítása z cí 5 ml metán-szulfonsavhoz 0,3 aniszolt adunk, majd 300 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-CHj-t oldunk az elegyben. 30 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni a reakcióelegyet , majd dietil-étert adunk hozzá, ami után 30 percen át -20 C°-on tartjuk. A felüluszó oldatot eltávolítjuk, a kapott olajos anyagot 30 ml vizben oldjuk, az oldatot 2 x 6 cm méretű ecetsav tipusu Amberlite IRA-410 gyantából készült kromatografáló oszlopra öntjük. Az effluenst és a mosófolyadékot egyesítjük éa fagyasztva szárítjuk. A kapott poralaku terméket kevés 0,ln vizes ecetsav oldatban oldjuk, az oldatot 2,5 x 125· cm méretű Sephadex IH-20 gyantából készült kromatográfaló oszlopra töltjük. Az eluálást 0,ln vizes ecetsav oldattal végezzük. A 275 ml-től a 290 .ml-ig terjedő frakciókat’ összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 110 mg H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Rie-NH-NH-C0-CH₂-GH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás -értéke: 0,371//0/^-: + 23,7° /c : 0,32, metanol/.

Hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk a terméket, majd aminosav-analizist végzünk. Az analízis eredménye: Gly: 1,00; Met: 0,38; Tyr: 0,91; Phe: 1,05.

28. példa

A,H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH/CHj/₂ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH/CH,/p előállítása ²

A 27. példa III. pontjában megadottak szerint 0,51 g Z-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Hie-NH-NH₂-ből és 0,08 ml izovajsavból kiindulva 440 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-G0-CH/CH₃/₂-t kapunk. ^p

Az előállított vegyület 181-183 C hőmérsékleten olvad; flpp¹ : “ 8,3° /c : 0,37, dimetil-formamid/; : 0,32

Elemanalizis a Cj^H^gOjN^S képlet alapján: számított: C: 59,18; H: 6,17; N: 11,19; S: 4,27 %;

mért: C: 58,77; H: 6,01; N: 10,82; S: 4,15 %.

-36182.051

II. A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH/GÍI_x/p előállítása ^p *

A 27. példa IV. pontjában megadottak szerint 300 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-G0-GH/CHj/₂-ből 105 mg. H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-G0-CH/GH^/₂-t kapunk.

Az, előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R^ -értéke: O,37;.C- ⁺ 26;8° /c : 0,32, metanol/.

A hidrogén-kloriddal végzett hidrolízist követő aminosav-analízis eredményei: Gly: 1,00; Met: 0,38} Tyr: 0,89: Phe:l,02.

29. Példa

A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Hie-NH-NH-C0-CH₃ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH^ előállítása 0,51 g Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH₂-ből és 0,06 ml ecetsavból kiindulva a 27. példa III. pontjában megadottak szerint eljárva 405 mg Z-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-lTH-GO-CH^-t állítunk elő. _

Az előállított vegyület 180-182 C hőmérsékleten olvad;

R¹ : 0,28: -7^: - 9,1° /c : 0,30, dimetil-formamid/.

Elemanalízís a C^H^gO^NgS · h₂0 képlet alapján: számított: C: 56,75; H: 5,72; N: 11,34; S: 4,33 %;

mért: C: 56,48; H: 5,62; N: 11,08; S: '4,05 %.

II. A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-ITH-GO-GH^ előállítása A 27. példa IV. pontjában megadottak szerint eljárva

300 mg Z-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH^-ből kiindulva 130 mg H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj-t állítunk elő.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás Rf -értéke: 0,30; * + 19,6° /c : 0,27, metanol/.

Hidrogén-kloridos hidrolizálás után végzett aminosav-ana* llzis eredménye: Gly: 1,00; Met: 0,35; Tyr: 0,91 és Phe: 1,02.

30. példa

A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-/CH₂/₅-OH₃ előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₂/,-CH, előállítása

A 27. példa III. pontjában megadottak szerint 0,47 g Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH₂-ből és 0,1 ml n-valeriánsavból kiindulva 0,39 g Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CHp/,-CH,-t állítunk elő. 22 j Az előállított vegyület 159-161 C° hőmérsékleten olvad; í 0,33://^/^ - 8,6° /c : 0,4, dimetil-formamid/.

, ; Elemanalízís a θ^8^Η48θ9^6$ képlet alapján:

' számított: C: 59,66; H: 6,23; N: 10,98; S: 4,19 %;

mért: C: 59,39; ' H: 6,24; N: 10,69; S: 4,06 %.

II. A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-/CHp/,-CH, előállítása · ^{p p}

-37182 051

A 27. példa IV. pontjában megadottak sze'rint eljárva és

300 mg Z-T:yr-/D/-Met/Ó/-Gly-Pho-NH-NII-CO-/CH₂/^-CH₇-ból kiindulva 110 mg H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-/CH_?/,-CH,-t állítunk elő. 2 2

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás -értéke: 0,385/^7^¹: + 24,8° /c : 0,32, metanol/.

Savas hidrolízis után aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00; Met: 0,29; Tyr: 0,89 és Bie: 1,00.

példa

A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH_o/,,-GH_x előállítása 2

I. A Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₅/_ZL-CH, előállítása 2

A 27. példa III. pontjában megadottak szerint 0,51 g Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Pb.e-NH-NH₂-t és 0,09 ml n-kapronsavat reagáltatva 430 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Hie-NH-NH-00-/CH_o/_z,-CH_x-t állítunk elő. _ h- 5

Az előállított vegyület 170-172 0 hőmérsékleten olvad;

R^ : 0,34; ~ 9,1° /c : 0,48, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a Ο^Η^θΟ^Νθδ képlet alapján: számított: C: 60,13; H: 6,47; N: 10,79; S: 4,11 %;

mért: C: 59,88; H: 6,42; N: 10,55; S: 4,22 %.

II. A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Fhe-NH-NH-CO-/CHÓA-CH_x előállítása * ^% 2

A 27. példa IV. pontjában megadottakat 350 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-/G?I₂/^-CH;>-val megismételjük, amikor 210 mg H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Rie-NH-NH-CO-/CHpA-CH,-t kapunk. 2

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás

R^ -értéke: 0,42; [-ijp¹: + 25,7° /c : 0,30, metanol/.

A terméket hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00; Met: 0,29; Tyr: 0,88 és Phe: 0,99.

32. példa

A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-/CH_?/₂-O-CH_?-CH, előállítása 2

I. A Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-00-/CH,/_o-0-CH_o-CH_xelőállítása 2223

A 27. példa III. pontjában megadottakat 0,51 g Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH₂-vel és 0,09 ml -etoxi-propionsavval megismételjük, s 440 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₂/₂-0-CH₂-CH₅-t állítunk elő.

Az előállított vegyület 159-161 G° hőmérsékleten olvad;

Rf : 0,32; L y. p¹: ” 7,5° /c : 0,48, dimetil-formamid/. Elemanalizis a °58^H48°10^N6^S képlet alapján: . számított: C: 58,44; H: 6,19; N: 10,76; S: 4_>10 %» mért; C: 58,22; H: 6,31} N: 10,59} S: 3,99

-38182.051

II. A H-Tyr-/D/-Möt/0/-Gly-Phe-NII-NH-C0-/CH_o/_o-0-CH_o-CH_zelőállítása ²² 2 3

A 27. példa IV. pontjában, megadottakat 350 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/ -Gly-Phe-RH-NH~C0-/CH₂/₂-0-CH₂-0Hj-va 1 megismételve 105 mg H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-HH-C0-/CH₂/₂-0-CH₂-CH₅-t állítunk elő. Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R² -értéke: 0,40; ’ 2’²¹: + 2£,1° /o : 0,57/.

Az előállított terméket savasan hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00; Met: 0,32; Tyr: 0,89 és Phe: 0,98.

31·-. Példa ^Rf

A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-0-CH₂-CHj előállítása

I. A tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met-Gly-etilészter előállítása

100 ml tetrahidrofuránban 10,0 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met-OH-t és 7,9 g N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-iraidet oldunk, 0 C° hőmérsékletre hütjük az elegyet, majd 9,0 g NjN’-diciklo-hexil-karbodiimidet adunkhozzá. 6 órán át 0 0° hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Szűréssel elkülönítjük az oldhatatlan anyagokat, majd 5,9 g H-Tyr-etilészter-hidrogén-kloridot és 5,6 ml trietil-amint adunk a szürlethez. Ezután egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük e reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk a tetrahidrofuránt, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljak.Vízzel mossuk az extraktumot és ezt követően vízmentes n’átrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot petroléterből kikristályositjuk. Az igy kapott terméket etil-acetát és petroléter elegyéből újra kikristályositva 9,8 g H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-C0-0-CH₂-CH,-t kapunk.

Az előállítótü vegyület 55“5θ 0° hőmérsékleten olvad; 0,70; [-Πρ¹: = 12,5° /c : 0,57, dimetil-formamid/. Elemanalizis a C^^H26^G5^2^G képlet alapján: számított: C: 50,28; H: 7,83; N: 8,37; S:

mért: 0: 5θ,88; H: 7,99; N: 8,46; S:

9,59

9,42

II. A tercier-bútoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met-Gly-OSt- előállítása ml trifluor-eöetsavban 3,0 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met-Gly-OEt-t oldunk, az oldatot 10 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Desztillációval eltávolítjuk a trifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd szűréssel elkülönítjük a kivált terméket. Ezt 20 ml tetrahidrofuránban oldjuk. Lehűtjük az oldatot, majd 1,6 ml trietil-amint és 4,0 g tercier-butoxi-karbonil-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert adunk hozzá. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk a tetrahidrofuránt, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot petroléterből kikristályositjuk. Ezt a terméket éti1-acetátból újra kikristályositva 3,l.g tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/DZ-

-39182.051

-Mot-Gly-OEt-t kapunk.

Az előállított vegyület 121-122 C hőmérsékleten olvad; Rf : 0,62; í J ²¹: + 16,8° /c : 0,40, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a CgjHjjO^NjS képlet alapján: számított: C: 55,51» H: 7,09; N: 8,44; S: 6,44 %;

mért: C: 55,32; H: 6,93; N: 8,25; S: 6,27%.

III. A tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met-Gly-OH előállítása ml metanolban 2,8 g tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met-Gly-OEt-t oldunk. Lehűtjük az oldatot és 12 ml In vizes nátrium-hidroxid oldatot adunk hozzá, majd egy órán át szobahőmérsékleten keverjük. Lehűtjük a reakcióelegyet, 60 ml 0,2n vizes hidrogén-klorid oldatot adunk hozzá, a kivált kristályokat szűréssel elkülönítjük, a kristályokat hideg vízzel mossuk. Ily módon 2,3 g tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met-Gly-OH-t kapunk, ’ Az előállított vegyület 184-186 0° hőmérsékleten olvad; Rf : 0,24; '... p¹: + 13,5° /c : 0,46, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a ^21^31^7^3² képlet alapján: számított;: C: 53,71; H: 6,65; N? 8,94; S: 6,83 %;

mért: C: 54,32; H: 6,71; N; 8,49; S: 6,70%.

IVo A torcier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-*.Iet/0/'-Gly-0H előállítása ml metanol és 5 ml ecetsav elegyében 2,2 g tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met-Gly-OH-t oldunk, az.oldathoz 0,6 ml 30 %-os vizes hidrogén-peroxid oldatot adunk, majd 5 órán át szobahőmérsékleten keverjük α roakcióologyet. Kevés palládium katalizátort adunk az elegyhez majd keverjük. Szűréssel . eltávolitjuk a katalizátort, az oldatot ledesztilláljuk, a desztillációs maradókként kapott kristályos anyagot szűréssel elkülönítjük. Ily módon 2,1 g tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-OH-t kapunk.

Az előállított vegyület 185 0° hőmérsékleten bomlás közben olvad;

R^ : 0,20;+ 1,8° /c : 0,5, dimetil-formamid/. Elemanalizis a θ21^Η31θ8^Ν3² · ^Η2θ alapján:

számított:' C: 50,08; H: 6,20; N: 8,35; S: 6,36 %; mért: C: 49,77; H: 6,32; N: 8,25; S: 6,10%.

V. A tercier-butoxi-karboni1-Tyr-/D/-Met/L/-Gly-Phe-NH-NH-C0-0-CH₂-CHj előállítása ml metanolban 460 mg Z-Phe-NH-NH-C0-0-CH₂-CHj-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus reakciót végzünk. Szűréssel eltávolitjuk a katalizátort, a metanolt ledesztilláljuk és a desztillációs maradékot 10 ml dimetil-formamidban oldjuk.

Ugyanakkor 5 ml dimetil-formamidban 485 tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-0H-t és 215 mg N-hidroxi-5-nor- bornen-2,3-dikarbonsav-imidet oldunk, 0 G° hőmérsékletre hűtőjük az oldatot, majd 230 mg N,N*-diciklo-hexil-karbodiímidet .

-40182.051 adunk hozzá. 6 órán át 0 C° hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet .

Szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan anyagokat, majd hozzáöntjük a fenti módon kapott és amin-származékokat tartalmazó szürlethez. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakv cióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk a dimetil-formamidot, a desztillációs maradékot 50 ml n-butanollal extraháljuk. Vizzel mossuk az extraktumot, majd desztillációval eltávolítjuk az n-butanolt és dietil-étert adunk a desztillációs maradékhoz. A kivált terméket szűréssel elkülönítjük. Ily módon 630 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-00-0-CH₂-CH,-t kapunk.

Az előállított vegyület 145-147 C° hőmérsékleten olvad; R^ : 0,28^^-(^: - 3,6° /c : 0,5, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a Ο^Η^θΟ^θΝθδ képlet alapján:

számított: 0: 55»13; H: 6,45; N: 11,69; S: 4,46 %;

mért: G: 54,85; H: 6,29; N: 11,45; 8: 4,35 %.

VI. A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Hie-NH-NH-C0-0-CH₂-CHj élőálltja példa VI. pontjában megadottakat 350 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-0-CH₂-CHj-val megismételjük, amikor 205 mg H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Rie-NH-NH-G0-O-CH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyré eg kromatográfiás R² -értéke: 0,39;' p¹: 15,0° /c : 0,38, metanol/.

A terméket savasan hidrolizáljuk és aminosav-analizist végzünk. Az analízis eredményei: Gly: 1,00; Met: 0,22; Tyr: 0,88 és Phe: 1,00.

34. példa

A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-G0-CH₂-S-CHj előállítása

I. A tercier-butoxi-karbonil-Phe-NH-NH-OO-CHpS-CH, előállítása ⁷ ml acetonitrilben 1,4 ml etil-tioglikolátot oldunk, az oldathoz 1 ml metil-jodidot adunk. Hűtés közben keverjük a reakcióelegyet, közben cseppenként 2,1 ml trietil-amint adunk hozzá. 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk az acetonitrilt, a desztillációs maradékot dietil-éterrel extraháljuk. Vizzel mossuk az extrakrumot és ezt követően vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk a dietil-étert, a desztillációs maradékot metanolban oldjuk, az oldathoz 0,7 ml hidrazln-hidrátot adunk. 2 napon át szobahőmérsékleten hagyjuk állni a reakcióelegyet. Ezután Íedesztilláljuk a metanolt, a desztillációs maradékot 20 ml dimetil-formamidban oldjuk. Az oldathoz

3,2 g tercier-butoxi-karbonll-Phe-N-hidroxi-5-norbornen-2,3;-dikarbonsav-imid-észtert adunk, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Desztillációval eltávolítjuk a dimetil-formamidot, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vizzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékként kapott kristályos anyagot szűréssel elkülönítjük. Etil-acetát és petroléter elegyéből-'ki kristályosítjuk, amikor 2,-3 g tercier-butoxi-karboni1-Fhe-NH-41182.051

-NH-OO-CH₂-S-OHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 151-152 C° hőmérsékleten.olvad;

Rp : 0,66; CíJ²¹: -18,6° /c : 0,5, dimetil-forraamid/.

Elemanalizis a O^HgjO^NjS képlet alapján:

' számított: C: 55,55» Hí 6,86; N: 11,44; S: 8,73 %;

mért: C: 55,59; H; 6,89; N: 11,23; S: 8,33 %«

II. A tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-S-CHj előállítása ml trifluor-ecetsavban 420 mg tercier-butoxi-karbonil-Phe-NH-NH-C0-CH₂-S-CHj-t oldunk, majd 20 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni az oldatot. Desztillációval eltávolítjuk a trifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékhoz dietil-etert adunk, majd szűréssel elkülönítjük a terméket.A kapott poralaku anyagot 10 ml dimetil-formamidban oldjuk, az oldathoz 0,16 ml trietil-amint adunk.

Ugyanakkor 5 ml dimetil-formamidban 485 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-0H-t és 215 mg N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet oldunk, majd 0 C° hőmérsékletre hütjük az elegyet és 200 mg NjN’-diciklo-hexil-karbodiimidet a** dunk hozzá. Ezután 6 órán át 0 C° hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Szűréssel eltávolítjuk az oldhatatlan anyagokat, majd az előzőleg előállított és az amin-származékot tartalmazó elegyhez öntjük a szűrletet. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk a dimetil-formamidot, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk. Ily módon 630 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-S^CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 154-156 C° hőmérsékleten olvad; Rp : 0,25; Í'x/Jq¹: - 2,0° /c : 0,46, dimetil-f orma mid/.

Elemanalizis a CjjH₄g0gNgS₂ képlet alapján:

számított: C: 53,93; H: 6,31; N: 11,43; S: 8,72 %;

mért: G: 53,64’; H: 6,42; N: 11,25; S: 8,45 %.

III. A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH_o-S-0H_x előállítása ^d 2

A 26. példa VI. pontjában megadottakat 300 mg tercier-but oxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/Ó/ -Gly-Phe-NH-NH-CO-CH-S-CH-val megismételjük, ami után 220 mg H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-S-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás Rp -értéke: 0,42^^^: + 15,4° /c : 0,33, metanol/.

A terméket savasan hidrolizáljuk és aminosav-analizist végzünk. Az analízis eredménye: Gly: 1,00; Met: 0,38; Tyr: 0,58; Phe: 1,02.

35« példa

A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-G0-CH₂-S-CHj előállítása a ml In vizes ecetsav oldatban 100 mg H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-S-CHj-t oldunk. Keverés közben Ofl ml 30 %-os vizes hidrogén-peroxid oldatot adunk az elegyhez,majd

-42182.051 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Fagyasztva szárítjuk a reakcióelegyet, majd a kapott poralaku terméket kevés 0,ln vizes ecetsav oldatban oldjuk, az oldatot 2,5 * 120 cm méretű. Sephadex ΠΙ-20 gyantából készült kromatografaló oszlopra öntjük.Az eluálást 0,ln vizes ecetsav oldattal végezzük. A 290 ml-től a 305 ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva száritjuk. Ily módon 70 mg H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Lhe-NH-NH~C0-CH₂rSO-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg-kromatográfiás R² -értékei 0,32; ' p¹; + 13,5° / c : 0,46, metanol/.

Savasan hidrolizálva a terméket, aminosav-analizist végzünk, amelynek eredménye a következő: Gly: 1,00; Met: 0,29; Tyr: 0,65 és Phe: 1,02.

36. példa

A .H-Tyr-/D/-Met/0/-Gl_y-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CHj előállít ása

I. A tercier-butoxi~karbonil-/D/-Met-Gly-OH előállítása ml etil-alkoholban 4,7 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met-Gly-etilésztert oldunk. Lehűtjük az oldatot, majd 16 ml In vizes nátrium-hidroxid oldatot adunk hozzá, ami után 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az etil-alkoholt desztillációval eltávolítjuk, a desztillációs maradékhoz vizes citromsav oldatot adunk semlegesítés céljából, majd 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval. éltávolitjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot petroléterből kikristályositjuk. Ezt a terméket újra kikristályositjuk, etil- . acetát és petroléter elegyéből, arai után 3,8 g tőreier-bútoxi-karbonil-/D/-Met-Gly-0H-t kapunk.

Az előállított vegyület 124-125 C° hőmérsékleten olvad; Rf : 0,41; y-'-'p¹: + 12,3° /c : 0,59, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a C?i2^H22°5^N2^{S k}®plet alapján: számított: C: 47,04; H: 7,23; N: 9,14; S: 10,46 %;

mért: 0: 46,79; H: 7,45; N; 9,20; S: 10,21

II. A tercier-butoxi-karbonll-/D/-Met/0/-Gly-MeHie-NH-NH-

-C0-CH₂-0Hj előállítása ral metanolban 4,7 g Z-MePhe-OH-t oldunk, majd 2 ml 6n, dioxánnal készült hidrogén-kloridot adunk az oldathoz, ami után egy éjszakán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Desztillációval eltávolítjuk a metanolt, a desztillációs maradékot vízzel mossuk és 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizraentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot 50 ml metanolban oldjuk, az oldathoz 1,5 ml hidrazin-hidrátot adunk és 3 napon át szobahőmérsékleten hagyjuk állni az elegyet. Ezután desztillációval eltávolítjuk a me-. tanolt, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal extrahaljuk, az extraktumot vízzel mossak és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot 20 ml tetrahidrofuránban oldjuk, az oldathoz 1,4 ml propionsav-anhidridet adunk.lehűtjük a reakcióelegyet es 1,4 ml trietil-aminnal egészítjük ki, majd 5 órán ⁶t szobahőmérsékleten keverjük. Desztillációval el

-43182.051 távolit, juk a tótra hídról uránt , a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal oxtraliáljuk, az extraktumot 5 %-os vizes nátrium-kari) ?nát oldattal mossuk éa vízmentes nátrium-szulfáttal vizmontesitjük, Dosztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, ami után desztillációs maradékként 3,8 g súlyú olajos terméket kapunk, ami a Z-MePhe-NII-NH-OO-OIL^-CH^-val azonos. Ebből 2,3 g-ot 50 ml metanolban oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a metanolt ledesztilláljuk, a desztillációs maradékot 10 ml dimetil-formamidban oldjuk.

Ugyanakkor 20 ml acetonitrilben 1,85 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met-Gly-OH-t és 1,2 g N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet oldunk. 0 Ó° hőmérsékletre hütjük az oldatot, ma;jd 1,4 g N,N*-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá.Ezután 4 órán át 0 0° hőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Szűréssel elkülönítjük az oldhatatlan anyagokat, a szűrletet hozzáöntjük a fentiek szerint előállított és az amin-szár mazékot tartalmazó oldathoz. Szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk az oldószert; a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetátban oldjuk és vizzel mossuk. 20 ml-re töményitjük az etil-acetátos oldatot, a sűrítményhez 5 ml ecetsavat és 0,5 ml 30 %-os vizes hidrogén-peroxidoldatot adunk, majd 5 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. 5θ ml n-butanollal extraháljuk az elegyet, az extraktumot vizzel mossuk. Desztillációval eltávolítjuk az n-butanolt, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd szűréssel elkülönítjük a terméket.- Ily módon '1,9 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0/-Gly-MeJ?he-NH-NH-CO-CH₂-CH_:5-t kapunk.

Az előállított vegyület 116-117 C^u hőmérsékleten olvad;

: 0,20; p¹ * - 25,7° /c í 0,38, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a Ο^Η^Ο^Ν^δ képlet alapján:

számított: C: 54,22; H: 7,09; N: 12,65; S: 5,79 %;

mért: C: 54,05; H: 6,98; N: 12,41; S: 5,48 %.

III, A tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/O/-MePhe-NH-

-NH-CO-CH₂-CH₅ előállítása ml trifluor-ecetsavban 420 mg tereier-bútoxi-karbonil-/D/-Met/O/-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH₂-GH₅-t oldunk, majd 20 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk a trifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékot dietil-éterrel kezeljük, majd szűréssel elkülönítjük a terméket és szárítjuk. A kapott poralaku anyagot 10 ml dimetil-formamidban oldjuk, az oldatot lehűtjük és 0,14 ml trietil-amint adunk hozzá. 330 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtért adunk az elegyhez. majd szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Desztillációval eltávolítjuk a dimeti1-formamidot, a desztillációs maradékot 50 ml n-butanollal extraháljuk. Az extraktumot vizzel mossuk, Desztillációval eltávolítjuk az n-butanolt, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk és szűréssel elkülönítjük a terméket. Ezt metanol és dietil-éter elegyéből kicsapva 310 mg tercíer-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH₂-CH₃-t kapunk. z . Az: előállított végyület 138-139 0° hőmérsékleten olvad;

-44182051

R¹: 0,20; bk/p¹* - 21,3° / c : 0,55, dimetil-formamid/. Elemanalizis a C^H^gOgN^S képlet alapján: számított: C: 56,96; H: 6,74; N: 11,72; S: 4,47 %;

mért: 0: 56,58; H: 6,48; N: 11,58; S: 4,23 %.

IV, A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH_o-0H, előállítása 2 ml trifluor-ecetsavban 150 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-MePhe-NH-NlI-00-CH₂-CH₅-t oldunk, az oldatot 30 percen át szobahőmérsékleten hagyjak állni. Desztillációval eltávolítjuk a trifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk és szűréssel elkülönítjük a terméket. A kapott poralaku anyagot kevés vizben oldjuk, az oldatot 2 x 4 cm méretű ecotsav tipusu Amberlite IRA-410 gyantából készült kromatografáló oszlopra töltjük. Az effluenst és a mosófolyadékot egyesítjük és fagyasztva szárítjuk. A kapott poralaka anyagot a 26. példa VI. pontjában megadottakat megismételve tisztítjuk, ami után 60 mg H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-MeFhe-NH-NH-00-CH₂CH₅-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás r| -értéke: 0,33;. -^: + 1° /^{c :} θ,21, metanol/.

Az előállított termék savas hidrolizáturnából aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye a következő: Gly: 1,00, Met: 0,24 és Tyr: 0,91

57. példa

A H-Me-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Plie-NH-NII-C0-CH₂-CH, előállítá-

I. A Z-MeTyr/tercier-butil/-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-

-CH₂~CHj előállítása ml trifluor-ecetsavban 470 mg tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0/-Gly-Phe-lTH-NIí-C0-CH₂-CH^-t oldunk, az oldatot 10 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Desztillációval eltávolítjuk a trifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd szűréssel elkülönítjük a terméket. A kapott poralaku anyagot 10 ml dimetil-formamidban oldjuk, az oldatot lehűtjük és 0,15 ml trietil-amint és 380 mg Z-MeTyr/tercier-butil/-OH-ból és 215 mg N-hidroxi-5~norbornon-2,3-dikarbonsav-imidból N,N*-diciklo-hexil-karbodiimides módszerrel előállított Z-MeTyr/tercier-butil/-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert adunk hozzá. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk □ dimetil-formamidot, a desztillációs maradékot 100 ml etil·· -acetáttal extraháljuk. Vizzel mossuk az extraktumot, majd vizmentes nátrium-szulfát felett vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk és szűréssel elkülönítjük a terméket. Ily módon 450 mg Z-MeTyr-/tercier-butil/-/D/-Met/O/-Gly-NH-NH-CO-CH₂-CH₇-t kapunk.

« ^J Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R¹ -értéke: 0,46; í - 30,0° / c : 0,5, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a C^gHgjOgNgS képlet alapján: számított: 0: 62,46; H: 6,85; Ns 9,34; S: 4,27 mért: 0: 62,15í H; 6,63; N: 9,05; S: 3,91

-45182.051

II. A H-MeTyr-/D/-Met/O/-Gly-HTe-NH-NH-CÓ-GH_P-CH, előállítása

A 27· példa IV. pontjában megadottakat 350 mg Z-MeTyr-/törcior-butil/-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CH₅-val megismételjük, amikor 120 mg H-MeTyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂~CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R² -értéke: 0,34; + 19,5° /c : 0,20, metanol/.

A termékből savas hidrolízist követően aminosav-analizist végzünk. Az analízis eredménye a következő: Gly: 1,00; Met: 0,32 és Phe: 0,98.

38. példa

A H-MeTyr-/D/-Met/O/-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH₉-OH_x előállítása 2

I. A Z-MeTyr/tercier-butil/-/D/-Met/0/-Gly-MePhe-NH-NH-00-0H_o-0H_z előállítása

3 ml trifluor-ecetsavban 550 mg tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0/-Gly-MePhe-NH-NH-C0-GH₂-CH₅-t oldunk, az oldatot 10 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Desztillációval eltávolítjuk a trifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd ezt követően szűréssel elkülönítjük a terméket és szárítjuk. A kapott port 10 ml dimetil-formamidban oldjuk, majd lehűtjük az oldatot és 0,16 ml trifluor-ecetsavat adunk hozzá. Az elegyhez ezután 385 mg Z-MeTyr/tercier-butil/-OH-val és 210 mg N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imiddel a NjN’-dicikló-hexil-karbodiimides módszerrel előállított Z-MeTyr/tercier-butil/-N-hidroxi-5-norbornen-2,3^,;-dikarbonsav-imid-észtert adunk. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk a dimetil-formamidot, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetáttal ’ extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk és vízmentes nátrlunt-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot dietil-éterrel kezeljük, majd szűréssel elkülönítjük a terméket. Ily módon 450 mg Z-MeTyr/tercier-butil/-/D/-Met/0/-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH₂-CH,-t kapunk. £ 3

Az előállított vegyület 121-123 C° hőmérsékleten olvad;

Rf : 0,48.

Elemanalizis a G^gH^gO^NgS . H₂0 képlet alapján: számított: Ct 60,12; H: 6,97; N: 10,01; S: 3,82 %;

mért: C: 59,88; H: 6,86; N: 9,75; S: 3,91 %·

II. A H-MeTyr-/D/-Met/0/-Gly-MeRie-NH-NH-C0-CH_o-0H, előállítása ^ά >

A 27· példa IV. pontjában megadottakat 250 mg Z-MeTJyr/ /tercier-butil/-/D/-Met/O/-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH₂-CH₅-val megismételjük, amikor 105 mg H-MeTyr-/D/-Met/O/-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CHxj-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás

Rf -értéke: 0,36; ^z

A terméket hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd amino

-46182.051 sav-analízist végzünk. Ennek eredménye a következő: Gly: 1,00 és Met: 0,31.

39» példa

A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH~-CH_?-Cl előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-00-CH_o-CH_-Cl előállítása d d

A 27. példa III. pontjában megadottakat 510 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH₂-vel és 100 mg y^-klór-propion-savval megismételjük, ami után 410 mg Z-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Rie-NH-NH-C0-0H₂-CH₂-Cl-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja: 172-175 0°;

: 0,26; {rÖp¹ 5 - 8,9° /c : 0,50, dimetil-formamid/. Elemanalizis a Ο^θΗ^ΟθΝθβΟΙ . H₂0 képlet alapján: számitott: C: 54,78} H: 5,74; N: 10,65; S: 4,06} 01:4,49%; mért: C: 54,45; H: 5,62; N: 10,54; S: 4,12; 01:4,03%.

II. A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Rie-NH-NH-C0-CH₉-CH_o-Cl előállítása

A 27. példa IV. pontjában megadottakat 300 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-0H₂-Cl-vel megismételjük, amikor 120 mg H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Ihe-NH-NH-C0-CH₂-CHp-Cl-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás

-értéke: 0,37? » + 25,4° /c : 0,40, metanol/.

Az előállított vegyület savas hidrolizátumából arainosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00; Met: 0,40; Tyr: 0,92 és Phe: 0,98.

40. példa

A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Rie-NH-NH-CO-CH₂-CH₂-CH₇ előállítása 2

I. A Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Fhe-NH-NH-C0-CH₂-C0-CH, előállítása 2

A 27. példa III. pontjában megadottakat 510 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH₂-vel és 110 mg lcvulinsavvaI megismételjük, amikor 380 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-C0-CH₇-t kapunk.

Az előállított vegyület olvadáspontja: 161-162 C°; Rf: 0,25; [4/²¹ : - 7,6° /c : 0,35, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a C jaVAoV · h₂o képlet alapján: számitott: 0: 57,27; H: 6,07; N: 10,54; S: 4,02 %; mért: C: 57,05; H: 6,12; N: 10,23; S: 3,85 %.

II. A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CIi,.-CHp-CO-CH, ¹ előállítása ε e 2

A 27. példa IV. pontjában megadottakat 550 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-C0-CH^-val megismételjük, amikor 130 mg H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CHp-CH~-C0-r -CH^-t kapunk.

-47182.051

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás

Rf -értéke: 0,35» í'KJp¹: + 26,0° /c : 0,25, metanol/.

A termék savas hidrolizát urnából aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly:.1,00; Met: 0,33» Tyr: 0,98 és Phe: 1,02.

‘ 41. példa . A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂0H előállítása

I. A tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-00-CH₂-CH₂-0H előállítása

A 30. példa V. pontjában megadottak szerint eljárva

460 rag Z-Fhe-NH-NH-C0-CH₂-GH₂-0H--ból és 485 mg tercier-butoxikarbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-0H-ból kiindulva 620 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH_p-0H-t kapunk.

Az előállított vegyület 148-150 C° hőmérsékleten olvad;

R 0,20; : - 2,6° /c : 0,40, dimetil-forraamid/.

Elemanalizis a Ο^^Η^θΟ^θΝθδ képlet alapján:

számított: C: 55,13; H: 6,45; Ns 11,69; S: 4,46 %;

mért: C: 54,86; H: 6,25; N: 11,42; S: 4,19 %·

II. A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH_o-0H_o0H előállítása . d

350 mg tercier-butoxi-karboníl-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0_CH₂-GH₂-0H-t a 26. példa IV. pontjában megadottak szerint reagáltatunk, amikor 150 mg H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CH₂-0H-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyré eg kromatográfiás

Rf-értéke: 0,30; + 19,4° /c t 0,35, metanol/.

A vegyület aminosav-analizisének eredményei: Gly: 1,00; Met: 0,32; Tyr: 0,89 és Phe: 1,00.

42. példa

A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH₂ előállítása

A 27é példa II. pontjában megadottak szerint eljárva 300 mg Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH₂-t, majd a 27» példa IV. pontjában megadottak szerint 140 mg H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH₂- állítunk elő.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás

Rf : -értéke: 0,20; + 33,0° /c 1 0,35, metanol/.

A terméket savasan hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye a következő: Gly: 1,00; Met: 0,29; Tyr: 0,95 és Phe: 1,00.

43. példa

A H-Tyr-/D/-Thr-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₂/j-CHj előállítása

I. A Z-/D/-Thr-Gly-O-tercier-butil-származék előállítása ml tetrahidrofuránban 5,θ g Z-/D/-Thr-0H-t és 3,6 S

-48182.051

H-Gly-O-tercier-butil-származékot oldunk. Lehűtjük az elegyet, majd 3,9 g N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidet és 4,5 g N,N’-dicikló-hexi1-karbodiimidet adunk hozzá, majd egy éjszakán át keverjük. Desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékhoz 100 ml etil-acetátot adunk, az extraktumot vizzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük.·Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékhoz petrolétert adunk. A terméket etil-acetát' és petrolétor elegyéből kikristályositva 5,·0 g Z-/D/-Thr-Gly-O-tereior-buti1-származékot kapunk.

Az előállított vegyület 56-5? 7 0° hőmérsékleten olvad:

[a jp^·’ + 13,8° / c: 0,5, metanol/; r|: 0,69Elemanalizis a 6^8^26^6^2 ^k®plet alapján: számított: Gs 59,60; H: 7,15; Ν: 7,θ5 mért: C: 58,73; H; 7,11; N: 7,87 %.

II. A Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-0H előállítása

100 ml metanolban 4,6 Z-/D/-Thr-Gly-O-tercier-butil-származékot oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, majd ledesztilláljuk a metanolt. A desztillációs maradékot 50 ml tetrahidrofuránban oldjuk. Az oldathoz 5,9 g Z-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-ΉIcarbonsav-imid-észtért adunk,majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot 100 ml etil-acetátban oldjak. Vizzel mossuk az ctil-acetátos oldatot, majd vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolítjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékhoz étert adunk, amikor kiválik a termék. Ezt a poralaku anyagot /súly 3,7 g/ 40 ml trifluor-ecetsavhoz adjuk, majd 40 percen át szobahőmérsékleten tartjuk a reakcióelegyet. Desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk. A kivált csapadékot összegyűjtjük, szárítjuk, majd a poralaku anyagot éti1-acetátból kikristály ősit juk. Ily módon 2,9 g Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-0H-t kapunk.

Az előállított vegyület 143-144 G° hőmérsékleten olvad;

+18,2° /c : 0,5, metanol/; R²: 0,49«

Elemanalizis a °23^H27°8^N3 * ^{172 H}2° ^képlet alapján: számított: 0: 57,25; H; 5,85; N: 8,87 %; mért: C: 57,57; H; 5,92; N: 8,55 %.

III. Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-Phe-OCH₅ előállítása

Az 1. példa I. pontjában megadottak szerint 1,5 g Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-OH-t és 0,73 g H-Phe-OCH^-hidrogén-kloridot reagáltatunk, amikor megkapjuk a Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-Phe-OCH^-t.

Az előállított vegyület 102-103 G° hőmérsékleten olvad; 'jTq²⁵: +20,3°; /c : 0,33» metanol/; R^: 0,44.

Elemanalizis a ^G33^H38°9^N4 képlet .alapján: számított: C: 62,45;· H: 6,04; N: 8,83 %; mért: 0: 62,31; H: 6,28; N: 8,59 %.

-49182.051

IV. A Z-Tyr-/D/-Tlir-Gly-Phe-NH-NH₂ előállítása

1,5 g Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-Pho-OCH₇-t és 0,5 ml NH₂-NH₂« •NHgO-t reagáltatunk, amikor 1,4 g Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-Phe-NH-NH₂~t kapunk az 1. példa II. pontjában megadottak szerint eljárva.

Az előállított vegyület 212-215 C hőmérsékleten olvad;

F₍J~p3_: -25,9° /c ; 0,52, dimoti 1-f orma mid/; R¹ : 0,12. Elemanalizis a ^^Η^ΟθΝθ képlet alapján: számított: C: 60,55; H: 6,04; N: 13,24 %; mért: C: 60,51; H: 6,25; N: 12,98 %.

V. A Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-Phe-NH-W-COVCH_?/_{7 GH} előállítása ^J 3

A 4. példa I. pontjában megadottak szerint eljárva 0,5*1 Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-Phe-NH-NH₂-t és 0,14 ml n-valeriánsavat reagáltatunk, amikor 0,42 g Z-Tyr-/D/-Thr-Gly-Phe-NH-NH-CO-/GH₂/j-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 172-173 G° hőmérsékleten olvad;

· -17,5° /c : 0,39, dimetil-formamid/; R^ : 0,45.

Elemanalizis a °37^H46⁰9^N6 képlet alapján:

számított: 0: 61,82; H: 6,45; N: 11,69 %5 mért: 0: 61,66; H: 6,44; N: 11,43 %. ’

VI. A H-Tyr-/D/-Thr-Gly-Phe-NH-NH-C0-/0H_o/_x-CH, előállítása ⁵ *

A 4. példa II. pontjában megadottakat 0,25 g Z-Tyr-/ -/D/-Thr-Gly-Phe-NH-NH-C0-/CH₂/j-CHj-val megismételjük, amikor 105 mg H-Tyr-/D/-Thr-Gly-Phe-NH-NH-C0-/GH₂/j-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás r| -értéke: 0,50,^24» _{+ 10},₈° / _c . metanol/.

Hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk a terméket, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredmenye: Thr: 0,97; Gly: 1,00; Tyr: 1,10 és Phe: 1,15.

44. példa

A H-Tyr-/D/-Met-Gly-Pho-NH-NH-CO-CH_?-CH₇ előállítása %-os vizes tioglikolsav 6 ml-ében 100 mg H-Tyr-/D/-Met/~ -/0/-Gly-Pho-NH-NH-C0-CH_?CHj-t oldunk, az oldatot 10 órán át 50 0° hőmérsékleten hagyjuk állni. Ezután Sephadex G-25 gyantából készült kromatografáló oszlopra öntjük'az oldatot, majd 30 %-os vizes ecetsavval eluáljuk a terméket. A 270-510 ml közötti frakciókat egyesitjük és fagyasztva szárítjuk, ami után 80 mg H-Tyr-/D/-Met-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás ' r| -értéke: 0,61; jv : +20,0° / c : 0,2, metanol/.

A terméket hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd arnino

-50182.051 sav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00; Met: 0,77;' Tyr: 0,80 és Phe: 1,02.

45« példa

A H-Tyr-/D/-Nva-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása

I. Z-Plie-NH-NH-CO-CH_z előállítása '300 ml tetrahidrofuránban 115 β Z-Phe-N-hidroxi-5-nor-. bornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert oldunk, az oldathoz 20 g acetil-hidrazintadunk. 10 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Szűréssel elkülönítjük a kivált kristályokat,

II. A Z-Gly-Phe-NH-NH-CO-OHj előállítása

400 ml metanolban 42,6 g Z-Phe-NH-NH-CO-CHj-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A katalizátor eltávolítására szűrjük a reakcióelegyet, a szürletet desztilláljuk. A desztillációs maradékot 100 ml dimet'il-formamidban oldjuk, majd az oldathoz 44 g Z-Gly-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert adunk.

órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet, majd ezt követően desztilláljuk. A desztillációs maradékhoz aietil-étert adunk^ majd az igy előállított poralaku terméket vizes acetonitrilból kikristályősitjuk. Ily módon 45,2 g Z-Gly-Hie-NH-NH-CO-CH,-t kapunk.

Az előállított vegyület 154-155 C° hőmérsékleten olvad; -0,9° /c : 05, dimetil-formamid/; R^ : 0,52.

Elemanalizis a ^21^24^5¾ képlet alapján:

számított: C: 61,15; H: 5,87; Ni 13,59 %» mért: C: 60,89; H: 5,62; N: 13,40 %.

III. A Z-/D/-Nva-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása

dunk, majd palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a szürletet desztilláljuk, ami után kristályos anyagként 3,5 g H-Gly-Fhe-NH-NH-CO-CH_x'-t kapunk.

<0,89 g H-Gly-Fhe-NH-NH-CO-CHj-t és az N,N’-diciklo-hexil-karbodiimides módszerrel 0,80 g Z-/D/-Nva-OH-ból és 0,63 g N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imidből előállított Z-/D/-Nva-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert oldunk 10 ml dimetil-formamidban. 10 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet, majd desztilláljuk. A desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd a kapott poralaku terméket ácetonitrilből kikristályoáitjuk. Ily módon 1,3 g Z-/D/-Nva-Gly51

-51182.Ű51

-Phe-NH-NH-CO-CH^-t kapunk.

Az előállitott vegyület 235-237 C° hőmérsékleten olvad;

+ 3,4° /c : 0,45, dimetil-formamid/; R^: 0,44 Elemanalizis a 026^33^6^5 képlet alapján: számított: C: 61,04; H: 6,50; N: 13,69 %;

mért: C: 61,33« H: 6,62; N: 13,66 %.

IV. A Z-Tyr-/D/-Nva-Gly-Fhe-NH-NH-CO-CHj előállítása ml metanolban 0,92 g Z-/D/-Nva-Gly-íhe-NH-NH-CO-CH^-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezünk. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a szürletet desztilláljuk. A desztillációs maradékot 10 ml dimetil-formamidban oldjuk, az oldathoz 0,86 g Z-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen2,3-clikarbongav-imid-észtert adunk. 10 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakeióelegyet, majd ezt követően desztilláljuk. A desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd a kapott poralaku terméket acetonitrilből kikristályositjuk. Ily módon 0,85 g Z-Tyr-/D/-Nva-Gly-Phe-NH--NH-CO-CH -t kapunk.

Az előállitott vegyület 210-211 C° hőmérsékleten olvad;

18»3° /c : 0,48, dimetil-formamid/; Rf : 0,38.

Elemanalizis a C^H^OθΝθ képlet alapján: számított: C: 62,30; H: 6,27, N: 12,46 mért: C: 62,15; H: 6,06; N: 12,33 %.

V. A H-Tyr-/D/-Nva-Gly-Fhe-NH-NH-C0-CH₅ előállítása

A 4. példa II. pontjában megadottak szerint eljárva és 0,40 g Z-Tyr-/D/-Nva-Gly-Phe-NH--NH-OO-GHj-t használva 0,16 g H-Tyr-/D/-Nva-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH^-t állítunk elő.

Az előállitott vegyület vékonyréteg kromatográfiás R²-értéke: 0,36; + 22,6° /c : 0,30, metanol/.

Hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk a terméket, majd.aminosav-analizist végzünk. Az analízis eredménye: Gly: 1,00; Nva: 1,10; Tyr: 0,99 es Fhe: 1,07.

46. példa

A H-Tyr-/D/-Gln-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása

I. A tercier-butoxi-karbonil-/D/-Gln-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH, előállítása 2

A 45. példa III. pontjában megadottakat 0,9θ g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Gln-N-hidroxi-5-norbornenen-2,3-dikarbonsav-imid-észterrel és 0,72 g H-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH^-val megismételjük, amikor 0,95 g tercier-butoxi-karboni 1-/D/-Gln-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH, -t kapunk.

Az előállitott vegyület 189-199 0° hőmérsékleten olvad;

- 0,8° /c : 0,5Ó, dimetil-formamid/; R^: 0,19. Elemanalizis a 0 23^Η34θ7^6 képlet alapján:

-52182051 számított: G: 54.53? H: 6,77; N: 16,59 %;

mért: C: 54,29; H: 6,81; N: 16,65 %·

II. A Z-Tyr-/D/-Gln-Gly-Plie-NH-NH-CO-GHj előállítása

A 26. példa V. pontjában megadottak szerint eljárva, de 0,55 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Gln-Gly-Pho-NH-NH-CO-CHj-t és 0,52 g Z-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert használva 0,60'g Z-Tyr-/D/-Gln-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 209-210 C° hőmérsékleten olvad;

- 21,5° /0 : 0,40, dlmet 11-formamid/; R¹ : 0,12.

Elemanalizis a C^H^O^N? képlet alapján:

számított: C: 59,73; H: 5,87; N: 13,95 %; mért:’ C: 59,72; H: 5,92; N: 13,86 %.

III. A H-Tyr-/D/-Gln-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH^ előállítása

A 4. példa II. pontjában megadottak szerint 0,40 g Z-Tyr-ZöZ-Gln-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH^-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás

-értéke: 0,25;Ε^^^{: +} ^»5° /° ^! 0,35, metanol/.

A terméket hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gin: 0,88; Gly: 1,00, Tyr: 0,90 és Phe: 0,98.

47. példa

A H-Tyr-/D/-Phe-Gly-Phe-NH-NH-CO-GH^ előállítása

I. A tercier-butoxi-karbonil/DZ-Phe-Gly-Hie-NH-NH-CO-CH, előállítása ^p

A 45. példa III. pontjában megadottakat 0,44 g H-Gly-Phe-NH-NH-GO-GH^-val és 0,68 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-rhe-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-őikarbonsav-imid-észterrel megismételjük, amikor 0,68 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Phe-Gly“ -Phe-NH-NH-C0-GH,-t kapunk.

Az előállított vegyület 208-209 C° hőmérsékleten olvad;

7° ^! θ’^5, dimetil-formamid/; Rp : 0,51· Elemanalizis a ^27^H35°6^N5 ^plet alapján: számított: C: 61,70; H: 6,71; N: 13,33 %; mért: C: 61,45; H: 6,65; N: 13,46 %.

II. A Z-Tyr-/D/-Phe-Gly-Fhe-NH-NH-CO-CH₅ előállítása

A 26. példa V. pontjában megadottakat 0,51 g tercierbi;toxi-karbonil-/D/-Phe-Gly-Phe-NH-NH-G0-CH3-val és 0,46 g Z-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-<iikarbonsav-imid-észterrel megismételjük, amikor Z-Tyr-/D/-Pho-Gly-Phe-NH-NH-GO-CHj-t kapunk¹. Az előállított vegyület 203-204 C° hőmérsékletön olvadj -13,0° /0 t 0,44, dimeti1-formamid/1 R^t 0,38.

-53182.051

Elemanalizis a CjgH^O^Ng képlet alapján: számított: C: 64,80? H: 5,86; N: 11,63 %; mért: C: 64,70; H; 5,95; N: 11,40 %.

III. A H-Tyr-/D/-Phe-01y-P}ie-NH-NH-C0-CHj előállítása' ' 50 ml metanolban 0,45 g Z-Tyr-/D/-Phe-Gly-Plie-NH-NH-CO-CHj-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort és a .szürletet desztilláljuk. A desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd a poralaku terméket acetonitrilből kikristályositjuk. Ily módon 0,22 g H-Tyr-/D/-Phe-Gly-Phe-NH-NH-OO-CH,-t kapunk. ²

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás Rf -értéke: 0,37;£<S-Jp^ : -11,4° /c : 0,35, metanol/.

A terméket hidrogén-kloridda'l hidrolizáljuk, majd atninosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00; Tyr: 0,98 és Phe: 0,95»

48. példa

A H-Tyr-/D/-Glu/OGHj/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása

I. A tercier-butoxi-karbonil/D/-Glu/OCH,/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH, előállítása

A 45. példa III. pontjában megadottakat O‘,44 g H-Gly-Phe-NH-NH-CO-OHj-val és 0,68 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Glu/OCHj/-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imiddel megismételjük, ami után 0,50 g tercier-bútoxi-karbohil-/D/-Glu/OCHj/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj-1 kap unk.

Az előállított vegyület 205-206 C° hőmérsékleten olvad; · l/-Jp^ t + 2,8° /c : Ó,42, dimetil-formamid/; R^ : 0,43«

Elemanalizis a θ24^Η35°8^Ν5 ^plet alapján:

számított: C: 55,26; H: 6,76; N: 13,43 %; mért: C: 55,31} H: 6,55; N: 13,46 %.

II. A Z-Tyr-/D/-Glu/OCHj/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása A 26. példa V. pontjában megadottakat 0,46 g tercier- butoxi-karbonil-/D/-Glu/0CH,/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH5-val és 0,42 g Z-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imld-észterrel megismételjük, ami után megkapjuk a Z-Tyr-/D/-Glu/0CH,/-Gly.-Phe-NH-NH-CO-CH,-t. ?

Az előállított vegyület 200-202 C° hőmérsékleten olvad; -14,8° /c : 0,44, dimetil-formamid/; Rp : 0,31.

Elemanalizis a Cjg^J42°10^N6 ^plet alapján számított: C: 60,16; H: 5,89; N:.ll,69 %; mért: 0: 59,53; H: 5,78; N: 11,51%.

III. _; A H-Tyr-/D/-Glu/OCHj/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása • A 47. példa III. pontjában megadottakat 0,40 g Z-Tyr

-54182.051

-/D/-Glu/OCHj/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj-val megismételjük, amikor 0,28 g H-Tyr-/D/-Glu/OCHj/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás Rf-értóke: 0,27; Lá“^2j: +17,5° /c : 0,38, metanol/.

A terméket hidrogén-kloridda1 hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek,eredménye: Glu: 0,95; Gly: 1,00; Tyr: 0,92 és Phe: 0,98.

49» példa

A H-Tyr-/D/-Iys-/Cl-Z/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása

I. A tercier-butoxi-karbonil.-/D/-Lys/Cl-Z/-Gly-Phe-NH-NHCO-CH, előállítása

A 45. példa III. pontjában megadottakat 0,58 g H-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH-val és 1,15 g tercier-butoxi-karboni 1-/D/-Iye/ /Cl-Z/-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikerrbonsav-imid-észterrel me megismételjük, amikor 1,05 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Lys/ /Cl-Z/-Gly-Ptie-NTI-NlI-CO-CH₇-t kapunk.

d o

Az előállított vegyület 169-171 C hömérsékleton olvad;

⁺ ^⁷° ^{7c 5} θ’¹*⁷’ dimetil-f ormamid/; R¹ : 0,45.

Elemanalizis a C^H^OgNgCL képlet alapján: számitott: C: 57,00; H: 6,27; N: 12,46; Cl: 5,26 %;

mért: C: 5θ,88; H: 6,05; N: 12,29; Cl: 5,35 %·

II. A tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Lys/Cl-Z/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH, előállítása

A 26. példa V. pontjában megadottakat 0,70 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Lys/Cl-Z/-Gly-I^:tLe-NII-MH-CO-CHj-val és í 0,50 g tercier-butoxi-karbonil-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észterrel megismételjük, amikor 0,71 g tercier-but oxi-karbonil-Tyr-/D/-Lys/Cl-Z/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH,-t kapunk. '

Az előállított vegyület 196-198 C° hőmérsékleten olvad;

- 2,0° /c : 0,46, dimetil-formamid/ : 0,46.

Elemanalizis a ^G41^H51⁰10^N7^C1 képlet alapján: számitott: C: 58,80; H: 6,13; N: 11,70 %; mért: C: 58,69; H: 6,25; N: 11,49 %»

III. A H-Tyr-/D/-Lys/Cl-Z/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH, előállítása ' *

A 26. példa VI. pontjában megadottakat 0,65 G tercier -b u t oxi - ka rb o ni 1 -Ty r -/ D/ - Iy s / C 1 -Z/ -Gly - Phe -NH -NH -C 0-CH , -v a 1 megismételjük, amikor 0,33 g H-Tyr-/D/-Iys-/Cl-Z/-Gly-Phé-NH-NH-CO-CH,-t kapunk.

' Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R²-értéke: 0,42;: +16,5° /c : 0,26, metanol/.

Az előállított vegyületet hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Iyst0,85; Gly: 1,00; Tyr: 0,88 és Phe: 1,00.

-55182.051

90. példa

A H-Tyr-/D/-Iys-Gly-Plio-NH-NII-CO-CH^ előállítása >0 ml metanolbon 0,18 g H-Tyr-/D/-Iys/01-Z/-Gly-Phe-NH-NH-CÖ-ClIj-t oldunk, majd palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. Szűréssel eltávolítjuk a katalizátort, a szürletet desztilláljuk, majd az igy kapott nyersterméket a 4.példa II. pontjában megadottak szerint eljárva tisztitjük. Ily módon 0,10 g H-Tyr-/D/-Iys-Gly-Phc—NH-NH-CO-CII^-t kapunk.

A vegyület vékonyréteg kromatográfiás

Rf-értóke: 0,15:^^: + 26,1° /c : 0,36, metanol/.

Az előállított terméket hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: lys: 0,98; Gly: 1,00; Tyr: 0,99 és Rie: 1,02.

51. példa

A H-Tyr-/D/-Ser-Gly-Fh.e-NH“lTH-CO-CHj előállítása

I. A Z-/D/-Ser-Gly-Phe-NMH-C0-CH₃ előállítása

A 45. példa III. pontjában megadottakat 0,69 g H-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH -val és 1,08 g Z-/D/-Ser-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-iraid-észterrel megismételjük, ami után

1,25 g z-/D/-Ser-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH, -t kapunk.

Az előállított vegyület 168-169 C hőmérsékleten olvad;

⁺ 3,4° /c : 0,5, dimetil-formamid/; R^: 0,25.

Elemanalízís a ^G24^H29°7^N5 képlet alapján: számított: C: 57,72; · H: 5,85; N: 14,02 %; mért: 0: 57,48; H: 5,99? N: 13,80%.

II. A Z-Tyr-/D/-Ser-Gly-Phe-NH-NH-CO-GH₃ előállítása

A 45. példa IV. pontjában megadottakat 0,75 g Z-/D/-Ser-Gly-Fhe-NH-HH-CO-CH^ -val és 0,72 g Z-Tyr-N-hidroxl-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észterrel megismételjük, amikor megkapjuk A Z-Tyr-/D/-Ser-Gly-Phe-NH-NH-CO-GH₅-t.

Az előállított vegyület 184-186 C° hőmérsékleten olvad; /° ^s θ»3θ» dimetil-f orma mid/; Rjh 0,19.

Elomanalizis a C^^H^gO^Ng képlet alapján: számított: Cs 59,81; H: 5,78; N: 12,68 %; mért:. C: 59,69; H: 5,82; N: 12,51 %.

III. A H-Tyr-/D/-Ser-Gly-Fhe-NH-NH-CO-CHj előállítása

A 4. példa II. pont jában .megadottakat 0,40 g Z-Tyr-/D/-Ser-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH^-val megismételjük, araikor 0,21 g H-Tyr-/D/-Ser-Gly-Phe-NH-NH-GO-GH^-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás Rf-értéke; 0,21;]t/jjp: = 11,4° /c : 0,31, metanol/.

Hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk a terméket és aminosav-analizlst végzünk. Az analízis eredménye: Ser; 0,85; Gly;l,00; Tyr: 0,90 és Rhe: 0,92.

-56182.051

52. példa

A H-Tyr-/D/-Hi9-Gly-Phe-NH-NH-G0-CH₂-CHj előállítása

I. A tercier-butoxi-karbonil-/D/-His/tozil/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CHj előállítása

A 26. példa IV. pontjában megadottakat 0,85 g Z-Gly-Phe-NH^<-NH-G0-CH₂-GHj-val és 1,15 g tereier-buüoxi-karboni]-/D> -Hls/tozi1/-N-hidroxi-5-norbórnen-2,3-dikarbonsav-imid-észtérrel megismételjük, amikor megkapjuk a tercier-butoxi-karbonil-/D/-His/tozil/-Gly-Phe-NH-NH-C0-GII₂-CHj-t.

Az előállított vegyület 178-179 0° hőmérsékleten olvad;

-1,7° /c : 0,4-7, metanol/; : 0,48.

Elemanalizis a C^2^H41^G8^R7^G képlet alapján: számított: 0: 56,21; H: 6,04; -N: 14,34; S: 4,69 %» mért.: C: 56,32; H: 6,01; N: 14,15; S: 4,38 %.

II. A tercier-butoxi-karbonil-/D/-His-Gly-Phe-NH-NH-CO-GH₂-CHj előállítása ml metanolban 0,55 G tercier-butoxi-karbonil-/D/-His/tozll/-Gly-Phe-NH-NH-GÓ-CH₂-CHj-t szuszpendálunk, a szuszpenzióhoz 1 ml In nátrium-hidroxid oldatot adunk 0 C° hőmérsékleten. 60 percen át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet, majd desztilláljuk. A desztillációs maradékhoz acetonitrilt adunk, majd a kapott poralaku terméket vízzel mossuk és szárítjuk. Ily módon 0,29 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-His-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 261-263 0° hőmérsékleten olvad;

⁺ 9,5° /c : 0,40, ditneti 1-f ormamid/; R² : 0,38.

Elemanalizis a	°25^H35	°6^N7	. h₂o	képlet alapján:
számitott: C:	54,83;	H:	6,44;	N:	17,90 %;
mért: C:	54,61;	H:	6,13;	N:	17,80 %.

III. A Z_Tyr-/D/-His-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CHj előállítása A 26. példa V. pontjában megadottakat 0,25 g tercier- butoxi-karbonil-/D/-His-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CHj-val es 0,24 g Z-Tyr-N-hidroxi-5-norbornen-2,3“dikarbonsav-iraid-észterrel megismételjük, amikor 0,31 g Z-Tyr-/D/-His-Gly-Phe-NH-NH-G0-CH₂-CH,-t kapunk. .

? Az előállított vegyület 181-182 0° hőmérsékleten olvad; ,'p^: -10,5° /c : 0,38, dimetil-formamid/; R² : 0,56. Elemanalizis a ^σ3?^Η ₄2°8^Ν8 ’ ^H2° ^kéP^lefc alapján: számított: C: 59,θ7; H: 5,68; N: 15,03 %;

‘ mért: C: 59,31; H: 5,92; N: 14,81 %.

IV. A H-Tyr-/D/-His-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-CHj előállítása A 4. példa II. pontjában megadottakat 200 mg Z-Tyr.-

-/D/-His-Gly-Phe-NH-NH-G0-rCH₂-GHj-val megismételjük, amikor 90

-57182.051 mg H-Tyr-/D/-His-Gly-Fhe-NH-NH-C0-CH₂-CH^-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R² -értéke: 0,15. Aminpsav-analizis: His: 0,95; Gly: 1,00; Tyr: 0,85 és Phe: 1,02.

53. példa

A H-Tyr-/D/-Met/0₂/-Gly-Phe-NH-NH-00-CH₃ előállítása’

I. A tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0₂/-0H x diciklo-

-hexil-amin előállítása ^c ml metanol, 10 ml ecetsav és 10 ml In kensav elegyében 1,7 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met-0H -t oldunk, 5 ml 30 %-os vizes hidrogén peroxid oldatot adunk az oldathoz. 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet, majd desztilláljuk. A desztillációs maradékot 50 ml etil-acetáttal extraháljuk. Vízzel mossuk az etil-acetátos oldatot, majd ezt követően vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. A vízmentes etil-acetátos oldathoz 0,9 ml diciklo-hexil-amint adunk, majd szűréssel elkülönítjük a kivált kristályokat. Ily módon

1,8 g tercler-butoxi-karbonil-/D/-Met/0₂/-0H»diciklo-hexil-amint kapunk.

Az előállított vegyület 201 C° hőmérsékleten olvad;

. -15,5° /_c : 0,18, dimetil-f ormamid/; R² : 0,61.

Elemanalizis a ^σ22^42θ6^Ν2^{δ k}^P^let θlapján:

számított: C: 57,11; H: 9,14; N: 6,05; S: 6,93 %; mért: . C: 57,43; H: 9,25; N: 6,10; S:. 7,08 %.

II. A tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0_Q/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH, előállítása

A 45. példa III. pontjában megadottakat 0,69 g H-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH^-val és 0,66 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0/-0H-val megismételjük, araikor 0,67 g tercier-butoxi-karbonil-/D/-Met/0₂/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 198-199 C° hőmérsékleten bomlás közben olvad;

-2,5° /c : 0,49, dimetil-formamid/; Rf : 0,25« Elemanalizis a C^Hj^OgN^S képlet alapján: számított: 0: 51,00; H: 6,51; N: 12,93; S: 5,92 %;

mért: 0: 50,92; H: 6,63; N: 12,75; S: 5,68 %.

III. A tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0₀/-Gly-Fhe-

NH-HH-CO-CHj előállítása *

A 26. példa V. pontjában megadottakat 0,52 g tercier· -butoxi-karbonil-/D/-Met/0₂/-Gly-Hie-NH-NH-C0-CH3-val és 0,46g tercier-butoxi-karbonil-Tyr-N-hidroxi-5-norboronen-2,3-dikarbonsav-imidészterrel megismételjük ami után tereier-bútoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0₂/-Gly-Phe-NH-NH-00-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület 176-177 0° hőmérsékleten olvad;

-2,9° /c : 0,24, dimetil-formamid/; Rf : 0,23.

-58182.051

Elemanalizis a Ο^Η^Ο^θΝθβ képlet alapján:

számított: C: 54,52; H: 6,29; N: 11,92; S: 4,55 %\ mórt: G: 54,61; H: 6,32; N: 11,99; S: 4,62%.

IV. A H-Tyr-/D/-Met/0₂/-Gly-Fhe-NH-NH-C0-CHj előállítása < A 26. példa VI. pontjában megadottakat 0,35 g tercier-bút oxi-karbon! 1-Τ7Γ-/Ώ/-Μοί/Ο₂/-&1γ-ΗΐΘ-ΝΉ-ΝΉ-ΟΟ-ΟΗ2-νθ1 megismételjük, amikor 0,21 g H-Tyr-/D/-Met/0₂/ÍGly-Phe-NH-NH-C0-CHj-t kapunk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R² -értéke: 0,19; : + 19,0° /c : 0,33? metanol/;

Az aminosav-analizis eredménye: Gly: 1,00; Tyr: 0,95 és Phe: 1,05.

54. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása

I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHj előállítása

A 11. példa II. pontjában megadottakat 0,66 g Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-0H-val és 0,59 g Z-Phe-NH-NH-CO-CHj-val megismételjük, amikor 0,82 g Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Hie-NH-NH-CO-CHj-t kapunk. ?

Az előállított vegyület 210-211 C^u hőmérsékleten olvad;

- 22,9° /c : 0,31, dimeti.-formamid/; Rf : 0,20. Elemanalizis a ’ ^H2° képlet alapján:

számított: 0: 59,62; H: 6,07;. N: 12,64 %; mért: C: 59,99; H: 6,28; N: 12,62 %.

II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-GO-GHj előállítása

A 10. példa III. pontjában megadottakat 0,35 8 Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Pho-NH-NH-CO-CHj-val megismételjük, amikor 0,16 g H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Fhe-NH-NH-OO-CHj-t kap unk.

Az előállított vegyület vékonyréteg kromatográfiás R² -értéke: 0,40; . * + 21,6° / c : 0,3, metanolban/.

A terméket hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd a hidrolizátumból aminosav-analizist végzünk. Ennek eredmenye: Gly: 1,00; Alá: 1,02; Tyr: 0,85; Éhe: 0,99·

55» példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₀-CH₉-CH_z hidrogén-klorid előállítása

A 10. példában megadottak szerint eljárva, 80 mg H-Tyr-/ -/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₂-CH₂-GHj-t oldunk 7,5 ml 0,02n hidrogén-kloridban. Az oldatot fagyasztva szárítjuk, ami után finom eloszlású porhlaku terméket kapunk, amit ezután etanol és acetonitril elegyéből kikirsátlyositunk. Ily módon 55 mg H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH₂-GH₂-CHj · hidrogén-klorldot kapunk.

-59182.051

Az előállított vegyület 169-170 C° hőmérsékleten olvad;

+ 33,1° /c : 0,26, dimetil-formaraid/.

56. példa

A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CHj előállítása , I. A B0C-/D/-Met/0/-0H előállítása g B00-/D/-Met-0H-t oldunk 200 ml acetonitrilben, majd 19 ml 30 %-os vizes hidrogén-peroxid oldatot adunk, és az elegyet 8 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcioelegyhez 5 %-os palládium-szén katalizátort adunk, és az elegyet további 1 órán át keverjük. Ezután a palládium-szén katalizátort leszűrjük, majd az acetonitrilt lepároljuk. A maradékot 300 ml n-butanollal extraháljuk. Az n-butanolos fázist vizes nátrium-klorid oldattal mossuk, majd az n-butanolt ledesztilláljuk. A maradékot dietil-éterből kikristályositjuk, majd etil-acetát és dietil-éter elegyéböl átkristályositva 32 g kristályos terméket kapunk.

Az előállított vegyület 125-126 C° hőmérsékleten olvad; p³: + 7,2° /c : 0,5, dimetil-formamid/, R^ : 0,27. Elemanalizis a O^qH^OjN^S képlet alapján: számított: . C: 45,26; H: 7,21; N: 5,27; S: 12,08 %; mért: C: 45,31; H: 7,27; N: 5,01; S: 11,83 %.

II. A B0C-/D/-Met/0/-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CHj.előállítása ml tetrahidro-furánban oldunk 3,1 g ώ-MePhe-OH-t és 1,9 g HONB-t, majd jeges hűtés közben az elegyhez 2,3 g DDO-t adunk. A reakcióelegyet 4 órán át 0 C° hőmérsékleten keverjük. Az oldhatatlan anyagot kiszűrjük, majd a szürlethez 0,9 g NE^-NH-COCHj-t adunk, majd tovább 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a tetrahidro-furánt ledesztilláljuk és a maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vizzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk.

Ezután az etil-acetátot ledesztilláljuk es a maradékot 100 ml metanolban oldjuk és palládium-szén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük.

A katalizátor szűréssel történő eltávolítása után a metanolt ledesztilláljuk. Az ekkor kivátl kristályokhoz 10 ml petrolétert adunk, majd a kristályokat kiszűrjük a reakcióelegyből. 1,3 g igy nyert terméket és 2,0 g BOC-Gly-ONB-t oldunk 30 ml acetonitrilben, és az elegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vizzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett száritjuk,majd az etil-acetátot ledesztillálva 2,3 g olajos terméket kapunk.Ezt 20 ml trifluor-ecetsavban oldjuk,és az oldatot 20 percen át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután a trifluor-ocetsavat ledcsztilláljuk, és a maradékhoz dietil-étert adunk.

Az elegyet dekantálással mossuk, majd a kapott termékhez 20 ml dimetil-formamidot adunk, és ezután az elegyhez 0,8 g TEA-t ás 1,3 g B0C-/D/r-Met/0/-0NB-t, melyet DDC módszerrel állítunk elő, 1,3 g B0C-/D/-Met/O/-OH-ból és 1,0 g HONB-ből jéghűtés közben adunk, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. A dimetil-formamidot ledesztilláljuk és a maőadékot 100 iní n-butanollal éxtraháljuk. Az extraktumot vizzel mossuk

-60182.051 ó-s az n-butanolt Íedesztilláljuk. A maradékot; dietil-éterrel közöljük ég metanol-dieti1-étor elegyből ismételten átkristályosítva 1,5 E csapadékot kapunk.

Az előállított vegyület; olvadáspontja 119-121 0° ?⁴i -29,0° /c : 0,38, dimetil-formamid/, vékonyrétegkroma1 tográfiás Rj, -értéke: 0,19.

Elemanalizis a C^HjyOryN^S · H₂0 képlet alapján:

számított: C: 51,θ9; H: 7,01; N: 12,56; S: 5,05 %; mért: C: 51,64; H: 7,18; N: 12,11; S: 5,7θ %·

III. A BOC-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-MeFhe-NH-NH-CO-CH_z előállítása ·>

0,54 g BOC-/D/-Met/O/-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CHj-ból és

0,46 g BOC-Tyr-ONB-ből a 36. példa III. pontjában megadott eljárást követve 0,46 g cira szerinti terméket kapunk, melynek olvadáspontja 141-142 C°.

kA’²²: -25,4° /c : 0,48, dimetil-formamid/, vékonyrétegkromatográfiás R^ -értéke: 0,22.

Elemanalizis a Ο^^Η^θΟ^Νθδ . 2H₂0 képlet alapján:

számított: C: 53,64; H: 6,81; N: 11,37; Sí 4,34 %; mért: 0: 53,15; H: 6,65; N: 10,77; S: 4,23 %.

IV. A H-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-MePhe-NH-MH-CO-CHj előállítása

0,35 g B0O-Tyr-/D/-Met/O/-Gly-MeFhe-NH-NH-CO-OHj-ból kiindulva, a 36. példa IV. pontjában leírtakat követve 0,19 g cim szerinti terméket kapunk, o

P : 0 /c : 0,25, metanol/, vékonyrétegkroraatográfiás R²- értéke: 0,16.

Aminosavanalizis: Gly: 1,00, Met: 1,00, Tyr: 1,20.

57« példa

H-MeTyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CHj előállítása

I. A Z-Ihe-NH-NH-CO-CH_z előállítása

2,0 g Z-Phe-NH-NH₂-t 50 ml tetrahidro-furánban oldunk, majd 1,4 ml vízmentes ecetsavat és 0,9 ml TEA-t adunk hozzá jéghütés'közben, majd az elegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A kivált kristályokat leszűrjük, dietil-éterrel alaposan mossuk és etil-acetátból átkristályositva 1,9 g kristályos terméket kapunk, melynek olvadáspontja 205-206 C°,

Jp, -16,4° /0 : 0,50, dimetil-formamid/, vékonyrétegkromatográfiás R^ -értéke: 0,60.

' Elemanalizis a 0₂qH₂j0jNj képlet alapján:

számított: 0: 62,32; H: 6,02; N: 10,90 %;

mért: C: 62,38; H: 6,09; N: 10,49 %.

II. A Z-Gly-Rie-NH-N^-CO-CHj előállítása

-61182.051

2,1 g Z-Rie-NH-NH-CO-CHj-ból és 2,2 g Z-Gly-ONB-ből kiindulva, a 26. példa III. pontjában leirt eljárást követkve nyerjük a cim szerinti terméket, melynek olvadáspontja 154-155 0°, p\ -0,9° /c : 0,50, dimetil-formamid/, vékonyrétegkromatográfí-ás R^ -értéke: 0,52.

Elemanalizis a ^21^H24®5^N4 ^plet alapján: számított: C: 61,15; H: 5,87; N: 13,59 %; mért: C: 60,98; H: 6,09; N: 13,27 %. .

III. A B00-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-OH^ előállítása 0,60 g BOC-/D/-Met-OH-ból és 1,0 g Z-Gly-Phe-NH-NH-

-CO-CH^-ból kiindulva a 26. példa 4. pontjában leirt eljárást követve nyerjük az 1,0 g kivánt terméket, melynek olvadáspontja 122-123 C°,

0° /c : 0,5, dimetil-formamid/, vékonyrétegkromatográfiás R^ -értéke: 0,38.

Elemanalizis a 02^^^0^^3 képlet alapján: számított: C: 52,56; H: 6,72; N: 13,32; S: 6,09 %;

mért: C: 52,35; H: 6,62; N: 13,12; S: 5,93

IV. A Z-MeTyr-/Bu^t/-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH, előállítása ' 2

0,55 g BOC-/D/-Met/O/-Gly-Rie-NH-NH-CO-CH₃-ból és

0,59 g Z-MeTyr-/Bu^/-OH-ból kiindulva, a 37. példa I. pontjában leírtak szerint eljárva 0,61 g kivánt terméket kapunk,melynek olvadáspontja 140-142 C°, '· p : -29,0° /c : 0,5 dimetil-f ormamid/, vékony réteg kromatográfiás R¹ -értéke: 0,43.

Elemanalizis a Ο^θΗ^Ο^Νθβ képlet alapján: számított: 0: 60,59; H: 6,61; N: 10,59; S: 4,04 %;

mért: C» 60,28; H: 6,55; N: 10,28; S: 3,88 %.

V. A H-MeTyr-/Bu^fc/-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH_x előállítása . 2

300 mg Z-MeTyr-/Bu^u/-/D/-Met/O/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH₅ból kiindulva a 27. példa IV. pontjában leírtak szerint eljárva 110 mg kivánt terméket kapunk, ¹ λ 21 o ' - p : +18,5 /c : 0,25, metanol/, vékonyrétegkromatográfiás R? -értéke: 0,29·

Aminosavanalizis: Gly: 1,00, Met: 0,35; FH: 0,99·

58. példa

A H-MeTyr-/D/-Met/0/-Gly-/MoHie-NH-NH-C0-CH^ előállítása

I. A Z-MoTyr-/Bu^fc/-/D/-Met/O/-Gly-MePhe-NH-NH-CO-CH, előállítása 2

0,50 g B0C-/D/-Met/0/-Gly-MePhe-NH-NH-C0-CH,-ból és 0,39 β Z-McTyr-/Bu^fc/-OH-ból kiindulva a 38. példa I, pontjában

-62182.051 leírtak szerint eljárva 0,40 g kivánt terméket kapunk, melynek olvadáspontja 120-122 C , vókonyrétegkromatográfiás

-értéke: 0,46.

Elemanalizis a C^^H^O^NgS képlet alapján: számított: G: 61,02; H: 6,74; N: 10,42; S: 3,97 %; mért: C: 60,79; H: 6,82; N: 9»92; S: 3,81 %.

II. A H-MeTyr-/D/-Met/OT-Gly-MeFhe-NH-NH-CO-CH, előállítása

0.20 g Z-MeTyr-/Bu^t/-/D/-Met/O/-Gly-MePhe-NH-NH-CO-COyból kiindulva a . példa IV. pontjában leírtak szerint eljárva 0,90 g kivánt terméket kapunk, vékonyrétegkromatográfiás R^-értéke: 0,34.

Aminosavanalizis: Gly: 1,00, Met: 0,38;

59. példa

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-GH=GH-CH^ előállítása

I. A BOG-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-OEt előállítása ml etanolban 1,10 g Z-/D/-Ala-Gly-Phe-OEt-t oldunk, melyet a 17. példa I. pontjában leírtak szerint állítottunk elő. és palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezzük.A katalizátort ezután kiszűrjük, az etanolt ledesztilláljuk, és a maradékot 30 ml tetrahidrofuránban oldjuk, majd 0,71 g BOO-Tyr-OH-t 0,49 g HONB-t és 0,57 g DOC-t adunk az oldathoz 0°0 hőmérsékleten. Az elegyet 4 órán át _0°C hőmérsékleten, és egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldhatatlan anyagot kiszűrjük, a tetrahidrofuránt ledesztilláljuk, és a maradékot etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot 5 %-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, és vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. Az etil-acetátot ledesztilláljuk, és a terméket petroléterből kikristályositjuk. A kristályos anyagot szűréssel elválasztjuk. _Ί

Kitermelés: 0,90 g. Op.: 125-126^UC R£: 0,66.

!~5_: -8,6° /c : 0,32, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a Ο^θΗ^θΟθΝ^ képlet alapján: számitott: C: 61,63; H: 6,90; N: 9»58 %;

mért: C: 61,88; H: 7,19: N: 9,66 %.

II. A B0C-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH₂ előállítása ml etanolban 0,85 g Boc-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-OEt-t oldunk, és az oldathoz 0,2 ml NHp-NEL·, · H₂0-t adunk, majd az elegyet 2 napon át szobahőmérsékleten állni hagyjuk.

Az etanolt ledesztilláljuk, majd a maradékhoz dietil-étert adunk, és a kivált kristályokat kiszűrjük.

Kitermelés: 0,72 g, op.: 183-184°C, R£: 0,19,

-20,4° /ö : 0,52, dimetil-formamid/.

Elemanalizis a θ₂8^Η38θ7^Ν6 képlet alapján: számitott: C: 58,93; Η: 6,71| N: 14,73 %; mért: C: 5θ»65ί Hí 6,90; N: 14,60 %.

-63182.051

III. A Boc-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-CH=CH-CH, előállí- tása ^p

A fenti vegyületet a 4. példa 1. pontjában leírt módszerrel állítjuk elő, 456 mg Boc-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH_?ből, és 103 mg CHj-CH=CH-C00H-ból

Kitermelés: 440 mg. Op.: 1?6-178°C, /bomlás/, R¹: 0,35,

25.

D ’

Elemanalizis a számított: C:

mért; C:

IV.

-10,6^⁵ /c : 0,43,. dimeti 1-f orma mid/.

,ΗζιΡθη^ς képlet alapján: 60,17; H: 6,63;

6,88;

A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-OH=CxH-CH, előállítása · 2

A 26. példa VI. pontjában leírt eljárást ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy 310 mg Boc-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-CO-GH=CH-CHj-t és 3 ml trifluor-ecetsavat használunk.

Kitermelés; 120 mg, R^: 0,41,·’ ü· +14,5° /c : 0,2 metanol/, aminosavanalizis: /sósavas hidrolizátum/: Gly: 1,00; Alá: 0,98; Tyr: 0,97; Phe: 1,06.

Claims

Szabadalmi igénypontok

1. Eljárás I általános képletü tetrapeptid-hidrazid-ezármazékok ég savaddiciós aóik előállítására, mely képletben

R^ és Rj hidrogénatom, X jelentése D-Leu és ‘R^ hidrogénatom vagy 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, vagy

R^ ég Rj jelentése hidrogénatom, X jelentése D-NVa, D-Gln, D-Glu/OCHj/, D-Phe, D-Iys, D-Iys/Cl-Z/, D-S’er vagy D-His ég Rn 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, vagy

R^ hidrogénatom, Rj metilcsoport, X jelentése D-Met/0₂/ és R^ 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, vagy

R^ ég Rj hidrogénatom vagy metilcsoport, X jelentése -D-Ala és R^ hidrogénatom, 2-5 szénatomos alkoxikarbonil-, 4-5 szénatomos alkenoil- vagy 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, mely utóbbi adott esetben hidroxilcsoporttal vagy ómega-helyzetben halogénatommal, amino-, acetil- vagy rövidszénláncu alkoxicsoporttal lehet helyettesítve, vagy R^ ég Rj hidrogénatom vagy metilcsoport, X jelentése D-Met/O/ és R^ hidrogénatom, 2-5 szénatomos alkoxikarbonil vagy 2-6 szénatomog alkanoilcsoport, mely utóbbi ómega-helyzetben halogénatommal, hidroxil-, 0x0-, acetil-, metiltio-, metilszulfoxid- vagy rövidszénláncú aíkoxicsoporttal lehet helyettesítve, azzal jellemezve, hogy egy I általános képletü, a peptidkémiában szokásos N-terrainális védőcsoporttal, valamint adott esetben a tirozin hidroxilcsoportján, az X arainosav oldalláncán és/vagy a C-terminális’alkanoil-hidrazino-csoportján valamely peptidkémiában szokásos cédőcsoporttal védett tetrapeptid-gzármazékról - ahol R^, R,, R^ és X a fent megadott - lehaeitjuk a védőcsoportokát, ég kívánt esetben a kapott vegyületet sav°32^h42^v8%

60,27; H:

N: 13,13%;

N: 13,29%,

-J i/

11/ ül/

Ív/ v/

-64182051 addíciós sójává alakítjuk. /Elsőbbsége: 1979· április 27./
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja, olyan I általános képletü tetrapeptid-hidrazid-származékok és savaddiciós sóik előállítás ára, mely képletben i/ R^- és Rj hidrogénatom, X jelentése D-Leu és R^ hidrogénatom vagy 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, vagy

11/ és Rj jelentése hidrogénatom, X jelentés D-Nva, D-Gln, D-Glu/OCHj/, D-Phe, D-Iye, D-Iys/Cl-Z/, D-Ser vagy D-His és 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, vagy iii/ R^ hidrogénatom, Rj metilcsoport, X jelentése D-Met/C^/ és R^ 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, vagy iv/ R^ és Rj hidrogénatom vagy metilcsoport, X jelentése D-Ala és R^ hidrogénatom, 2-5 szénatomos alkoxikarbonil-, 4-5 szénatomos alkenoil- vagy 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, mely utóbbi adott esetben hidroxilcsoporttal vagy omega-helyzetben halogénatommal, amino- vagy rövidszénláncú alkoxicsoporttal lehet helyettesítve, vagy v/

R·^ és Rj hidrogénatom vagy metilcsoport, X jelentése D~ -Met/0/ és R^ hidrogénatom, 2-5 szénatomos a lkoxikarbonilvagy 2-6 szénatomos alkanoilcsoport, mely utóbbi omega-helyzetben halogénatommal., hidroxil- vagy rövidszénláncú alkoxicsoporttal lehet helyettesítve, azzal jellemezve, hogy egy I általános képletü, a peptidkémiában Szokásos N-terminális védőcsoporttal, valamint adott esetben a tirozin hidroxilcsoportján, az X aminosav oldalláncán és és/vagy a C-terminális alkanoil-hidrazino-csoportján valamely peptidkémiában szokásos védőcsoporttal védett tetrapeptid-származékról - ahol R*, Rj, R^ és X a fent megadott - lehasitjuk a védőcsoportokat, és kivánt esetben a kapott vegyületet savaddiciós sójává alakítjuk.

/Elsőbbsége: 1978. május 2./

5. A 5. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja olyan I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^ metilcsoport és Rj, X és R^ a 2. igénypont iv/ és v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ a fenti és Rj, X és R^ a 2. igénypont ív/ és v/ pontjában megadott.

/Elsőbbsége: 1978. május 2./
4. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja olyan I általános képletü vegyületek előállítására, ahol hidrogénatom és Rj, X és R^ a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R, a fenti és Rj, X és R^ a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott.

/Elsőbbsége: 1978. május 2./

-65182.051
5. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja olyan I általános képletü vegyületek előállítására, ahol X jelentése D-Ala, és Rp Rj és a 2. igénypont iv/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^, Rj és R^ a 2. igénypont iv/ pontjában megadott és X a fenti. /Elsőbbsége: 1978. május, 2./
6. A 2. igénypont szerinti eljárás' foganatosítási módja olyan I általános képletü vegyületek előállítására, ahol X jelentése D-Met/0/ és Rp Rj és R_Z)_ a 2. igénypont v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett 1 általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol Rp Rj és R^ a 2. igénypont v/ pontjában megadott, és X jelentése D-Met/0/. /Elsőbbsége: 1978. május 2./
7. Az 1. igénypont szerinti-eljárás foganatosítási módja olyan I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol X D-Met/0/ és Rp Rj és' R^ az 1. igénypont v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol Rp Rj és R^ az 1. igénypont v/ pontjában megadott, és X a fenti.

/Elsőbbsége: 1979· április 27./
8. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja olyan I általános képletü vegyületek előállítására, ahol X jelentése D-Gln és Rp Rj és R^ az 1. igénypont ii/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol Rp Rj és R^ a 2. igénypont ii/ pontjában megadott és X a fenti. /Elsőbbsége: 1978. május 2./
9. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja olyan I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol X jelentése D-Met/0/, R^ hidrogénatom, és R^ és Rj az 1. igénypont v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ és X a fenti és R^ és Rj az 1. igénypont v/ pontjában megadott. /Elsőbbsége: 1979· március 7·/
10. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R. hidrogénatom, és X, és Rj a 2. igénypont i/, iv/ vagy v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol hidrogénatom és X, és Rj az 1. igénypont i/, iv/ vagy v/ pontjában megadott. ^/Elsőbbsége: 1978. május 2./
11. A 10. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol Rj metilcsoport és X, R^ és R^ a 2. igénypont iv/ vagy v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol Rj a fenti és X, és R^ az 1. igénypont iv/ vágy v/ pontjában megadott.

/ELaőbbsége: 1978. május 2./

-66182.051
12. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános képletű vegyületek előállítására, ahol R^ 2-5 szénatomos alkanoil- vagy 4-5 szénatomos alkenoilesöpört, és X, Rf és Rj a 2. igénypont iv/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan védett I általános használunk, ahol R^ a fenti és X, pontjában megadott. /Elsőbbsége: 1978. május 2./

15· A 12. igénypont szerinti az I általános képletű vegyületek szénatomos alkanoilcsoport, és X, képletű kiindulási anyagokat' Rf és Rj a 2. igénypont iv/

2-5 i-v/ ^L4

Rfés Rj a 2. igénypont eljárás foganatosítási módja előállítására, ahol R^ 5-5 R·^ és Rj a 2. igénypont i-v/

I ál5-5 i-v/ eljárás foganatosítási módja előállítására, ahol R^ 2-5 R^ és Rj a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletű kiindulási anyagokat használunk, ahol R, ‘ ^_szénatomos alkanoilcsoport, és X, pontjában megadott. /Elsőbbsége: 1978. május 2./
14. A 12. igénypont szerinti az I általános képletű vegyületek szénatomos alkanoilcsoport, és X, pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett talános képletű kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ szénatomos alkanoilcsoport és X, R. és R, a 2. igénypont pontjában megadott. ° /Elsőbbsége: 1978. május 2./
15. A 12. igénypont szerinti eljárás foganatosítási az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol R^ tilcsoport, és X, Rf és Rj a 2. igénypont i-v/ pontjában adott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ acetilcsoport, és X, Rf és Rj a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott. /Elsőbbsége: 197θ· május 2./
16. A 12. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol R^ propionilesöpört, és X, Rf és Rj a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletű kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ propionilesöpört, és X, R_x és Rj a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott. /Elsőbbsége: 1978. május 2./
17. A 12. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol R^ butirilcsoport, és X, Rf és Rj a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ bútirilesöpört és X, Rf és Rj a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott. /Elsőbbsége: 1978. május 2./
18. A 12. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja

-67182.051 az 1 általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^izobutirijcsoport, ós X, Rf és R^ a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott, azzal, jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagukat használunk, ahol 1b izobutirilcsoport és X, Rf és R, a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott. /Elsőbbsége: 1978. május 2./
19· A 12. igénypont' szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol n-valerilcsoport, és X, Rf és R^ a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ n-valerilesöpört, és X, Rf és R, a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott. /Elsőbbségé: 1978. május 2./
20. A 12. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^ izovalerilcsoport, és X, Rf és R^ a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ izovalerilcsoport, és X, Rf és R, a 2. igénypont i-v/ pontjában megadott. /Elsőbbsége: 1978. május 2./
21. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol 2-hidroxi-propionilcsoport, X jelentése D-Ala és Rf és R^ egyike hidrogénatom és a másik metilcsoport, azzal jellemezve,hogy olyan, vedett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ 2-hidroxi-propionilesöpört, és X, Rf és R^ a fenti.

/Elsőbbsége: 1978. szeptember 5/·
22. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol X jelentése D-Ala, R^ 4-hidroxi-propionilesöpört, Rf és R^ egyike hidrogénatom és a másik metilcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ 3-hidroxi-propionilcsoport és X, Rf és R^ a fenti. /Elsőbbséget 1978. szeptember 5·/
23. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol metil-tio-acetilcsoport, X jelentése D-Met/O/ és Rf és R^ az 1. igénypont v/ pontjában megadott, azzal jellemezve, hogy olyan, vedett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol R^ metil-tio-acetilcsoport, és X, Rf és az 1. igénypont v/ pontjában megadott.

/Elsőbbsége: 1979· március 7·/
24. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol Rf hidrogénatom, X jelentése D-Ala, R^ hidrogénatom és R^ acetilcsoport. azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R-i»Rx és R_a a fenti. /Elsőbbséges 1978. május 2./ ^p

-68182.051
25· A 2. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^ hidrogénatom, X jelentése D-Ala, R^ hidrogénatom és n-butirilesöpört , azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü,. kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R,, R, és R., a fenti. /Elsőbbsége: 1978. május 2./ ^{1 2 H}
26. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^ hidrogénatom, X jelentése D-Ala, Rj hidrogénatom és R^ propionilcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R,, R_x és Ry. a fenti. ² /Elsőbbsége:·1978. május 2./
27. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^ hidrogénatom, X jelentése D-Ala, R^ metilcsoport és R^ propionilcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R, , R, és R_a a fenti., ² /Elsőbbsége: 1978. május 2./
28. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^ hidrogénatom, X jelentése D-Met/O/, Rj hidrogénatom és propionilcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü'kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R,, R, és R_aa fenti. · ² /Elsőbbsége: 1979· március 7·/
29. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol R^ hidrogénatom, X jelentése D-Met/O/, Rj hidrogénatom és R^ acetilceoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R,, R_x és R. q fenti. ² /Elsőbbsége: 1979· március 7·/
30. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja ja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol hidrogénatom, X jelentése D-Met/O/, Rj hidrogénatom és R^ metil-tio-acetilcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R-,, R, és R^ a fenti.

/Elsőbbsége: 1979· március 7·/
31. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol hidrogénatom, X jelentése D-Met/O/, Rj hidrogénatom és R^ n-butirílcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R,, R, és R. a fenti.

/Elsőbbsége: 1979· március 7·/
32. Az 1. igénypont s.zérinti eljárás foganatositási módja

-69182.051 az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^ hidrogénatom, X jelentése D-Met/0/, Rj metilcsoport és R^ propionilcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R,, R_x és R,. a fenti. 154 /Elsőbbsége:1979· március 7·/
33. A 2. igénypont -szerinti eljárás foganatositási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^ hidrogénatom, X jelentése D-Gln, Rj hidrogénatom és R^ acetilcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R,, R, és R. a fenti. /Elsőbbsége: 1978· május 2./ 12^
34. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol R^ metilcsoport, X jelentése D-Ala, Rj hidrogénatom és R^ propionilcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R., R_x és R_A a fenti. /Elsőbbsége: 1978. szeptember 5./ ¹ 2 +
35· Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános képletü vegyületek előállítására, ahol R^ metilcsoport, X jelentése D-Met/O/, Rj hidrogénatom és R^ propionilcsoport, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R,,’ R_x és R.. a fenti. 12 4 /Elsőbbsége: 1979· március 7·/
36. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol R^ oxocsoporttal szubsztituált rövidszénláncú alkanoilcsoport, R^ és Rj közül az egyik hidrogénatom és a másik metilcsoport, és X D-Ala, azzal jellemezve, hogy olyan, védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R-., R, és R,. a fenti. x 2 4 /Elsőbbsége: 1978. szeptember 5·/
37. A 36. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja az I általános kepletü vegyületek előállítására, ahol R^ 4-oxo-n-valeri le söpört, R-l és Rj közül az egyik hidrogénatom és a másik metilcsoport és X D-Ala,fjzzal jellemezve, hogy olyan védett I általános képletü kiindulási anyagokat használunk, ahol X, R_p Rj és R^ a.fenti.