GR1009544B - Συνδυασμος εκχυλισματος δεντρολιβανου, εγχυματος δεντρολιβανου και εκχυλισματος ιπποφαους για τοπικη χρηση στο τριχωτο της κεφαλης και μεθοδος παραγωγης του - Google Patents

Abstract

Ένας συνδυασμός εκχυλίσματος δενδρολίβανου, εγχύματος δενδρολίβανου και εκχυλίσματος ιπποφαούς για τοπική χρήση στο τριχωτό της κεφαλής είτε ως συστατικό σε προϊόντα μαλλιών για τόνωση του τριχωτού της κεφαλής, ο οποίος χαρακτηρίζεται από το ότι το εκχύλισμα του δενδρολίβανου, το έγχυμα του δενδρολίβανου και το εκχύλισμα του υποφαούς, χρησιμοποιούνται σε αναλογίες w/w που κυμαίνονται από 95/3,5/1.5 έως 99,875/0,056/0,069 ανά στοιχείο του συνδυασμού αντιστοίχως, όπου η μέθοδος παρασκευής του περιλαμβάνει δύο στάδια, την παρασκευή του εγχύματος δενδρολίβανου και τη συνδυαστική παραγωγή του εκχυλίσματος δενδρολίβανου και ιπποφαούς.

Description

ΠΕΡΙΓΡΑΦΗ

ΣΥΝΔΥΑΣΜΟΣ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΟΣ ΔΕΝΤΡΟΛΙΒΑΝΟΥ, ΕΓΧΥΜΑΤΟΣ

ΔΕΝΤΡΟΛΙΒΑΝΟΥ ΚΑΙ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΟΣ ΙΠΠΟΦΑΟΥΣ ΓΙΑ ΤΟΠΙΚΗ ΧΡΗΣΗ

ΣΤΟ ΤΡΙΧΩΤΟ ΤΗΣ ΚΕΦΑΛΗΣ ΚΑΙ ΜΕΘΟΔΟΣ ΠΑΡΑΓΩΓΗΣ ΤΟΥ

Τεχνικό πεδίο

Η παρούσα επινόηση αναφέρεται σε έναν συνδυασμό εκχυλίσματος και εγχύματος δεντρολίβανου (Rosmarinus officinalis) & εκχυλίσματος ιπποφαούς (Hippophae rhamnoides) και στη μέθοδο παραγωγής του. Ο ως άνω συνδυασμός προορίζεται για χρήση τοπική απευθείας στο τριχωτό της κεφαλής, είτε ως συστατικό σε προϊόντα μαλλιών για τόνωση του τριχωτού της κεφαλής.

Τεχνολογικό υπόβαθρο

Μέχρι σήμερα δεν έχει γίνει γνωστό κανένα ανάλογο προϊόν. Ειδικότερα, τα τελευταία χρόνια χρησιμοποιούνται φυτικά εκχυλίσματα για την περιποίηση των μαλλιών. Τα φυτικά εκχυλίσματα προέρχονται από βότανα κάποια από τα οποία χρησιμοποιούνται από την αρχαιότητα για τη θεραπεία διαφόρων παθήσεων. Τα βότανα αυτά δεν είναι μόνο κατάλληλα για την αντιμετώπιση ορισμένων ασθενειών, αλλά και για τη γενική φροντίδα του σώματος, την περιποίηση των μαλλιών, την περιποίηση του τριχωτού της κεφαλής αλλά και της επιδερμίδας του προσώπου

Παρά το μέγεθος της αγοράς στα προϊόντα περιποίησης των μαλλιών, οι γνώσεις μας για το τι ελέγχει τα ενδογενή χαρακτηριστικά των μαλλιών παραμένει ανεπαρκώς κατανοητή προκειμένου να αναπτυχθούν αποτελεσματικά προϊόντα για τα μαλλιά. Κατά την τελευταία δεκαετία, οι ειδικοί του τομέα έχουν μετακινηθεί στην επιστήμη της γενετικής. Συγκεκριμένα, υπάρχουν γονίδια που ρυθμίζουν την διαδικασία ανάπτυξης της τρίχας όπως τα γονίδια clock και noggin. Η ανάπτυξη της τρίχας πραγματοποιείται σε τρεις φάσεις. Η περίοδος όπου τα μαλλιά αναπτύσσονται ενεργά ονομάζεται αναγενής φάση και διαρκεί 1 ως 3 ή 4 χρόνια. Στη φάση αυτή, ο βολβός της τρίχας που βρίσκεται στη βάση του θυλάκου, αναζωογονείται και στη συνέχεια παράγει την τρίχα. Η δεύτερη φάση ονομάζεται καταγενής ή μεταβατική φάση και διαρκεί περίπου 2 ως 3 εβδομάδες. Η τρίχα παύει να αναπτύσσεται και παραμένει στη φάση αυτή για λίγες εβδομάδες πριν περάσει στη φάση ηρεμίας. Η τρίτη και τελική φάση του κύκλου ζωής της τρίχας είναι η τελογενής φάση που αντιστοιχεί σε μια περίοδο ηρεμίας. Η τρίχα δεν αναπτύσσεται πια, αλλά παραμένει προσαρτημένη στον θύλακο για 3 μήνες περίπου. Σύμφωνα με πρόσφατη μελέτη τα γονίδια του κιρκάδιου ρυθμού, clock εμπλέκονται στην διαδικασία ανάπτυξης της τρίχας και υπερεκφράζονται κατά την μετάβαση από την τελογενή στην αναγενή φάση αυξάνοντας τον χρόνο ανάπτυξης της αναγενούς φάσης. Αντίστοιχα, η υπερέκφραση του γονίδιου nog (noggin) οδηγεί στην μείωση του χρόνου της τελογενούς φάσης. Επιπλέον, η ανάπτυξη της τρίχας εξαρτάται από τους αυξητικούς παράγοντες οι οποίοι, επάγουν στην αγγειογένεση, πολλαπλασιασμό των επιθηλιακών κυττάρων του δέρματος και δημιουργία νέων ινοβλαστών. Ο αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας, VEGFa είναι ένας από τους ισχυρότερους παράγοντες αγγειογένεσης με σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη της τρίχας.

Το επινοηθέν εκχύλισμα αποτελείται από το συνδυασμό τριών επί μέρους συστατικών τα οποία έχουν αναπτυχθεί ώστε να έχουν συγκεκριμένη επίδραση στα γονίδια clock, nog και VEGFa των ανθρώπινων κερατινοκυττάρων:

Εκχύλισμα δεντρολίβανου (Rosmarinus officinalis)

Έγχυμα δεντρολίβανου (Rosmarinus officinalis)

Εκχύλισμα Ιπποφαούς (Hippophae rhamnoides)

Παρόλο που τα επιμέρους συστατικά του επινοηθεντος εκχυλίσματος έχουν χρησιμοποιηθεί ξεχωριστά σε καλλυντικά προϊόντα για τα μαλλιά, ο συνδυασμός των συγκεκριμένων εκχυλισμάτων ως δραστικό συστατικό δεν έχει αναφερθεί παγκοσμίως σε κανένα ανάλογο προϊόν.

Το δεντρολίβανο (Rosmarinus officinalis) ανήκει στην οικογένεια Lamiaceae, είναι πυκνόφυλλος και πολύκλαδος θάμνος με ύψος που δε ξεπερνά τα 2 μέτρα. Τα φύλλα του είναι δερματώδη, μικρά, γραμμοειδή και μοιάζουν με πευκοβελόνες. Τα άνθη βρίσκονται κατά ομάδες και βγαίνουν στις μασχάλες των φύλλων. Το χρώμα τους είναι μωβ, κυανόλευκο ή και λευκό. Το εκχύλισμα και το έγχυμα δεντρολίβανου έχουν χρησιμοποιηθεί σε διάφορα προϊόντα για την περιποίηση των μαλλιών: Ειδικότερα, στο Δίπλωμα FR 1545601 γίνεται αναφορά σε μια αντιπιτυριδική λοσιόν στην οποία περιέχεται εκχύλισμα δεντρολίβανου. Στο Δίπλωμα JP 05051308 περιφράφεται μια λοσιόν για τα μαλλιά για θρέψη στην οποία περιέχεται εκχύλισμα δεντρολίβανου. Στο Δίπλωμα JP091 75950 περιγράφεται ένα τονωτικό μαλλιών που περιέχει σταθεροποιημένο χλωριούχο καρπρόνιο και φυτικά εκχυλίσματα μεταξύ των οποίων αναφέρεται και το εκχύλισμα δεντρολίβανου. Στο Δίπλωμα JP 09183718 αναφέρεται ένα καλλυντικό προϊόν του οποίου τα κύρια δραστικά συστατικά είναι φυτικά οξέα και/ ή άλατα αυτών. Ως προαιρετικά συστατικά αναφέρεται το εκχύλισμα δενδρολίβανου. Στο Δίπλωμα ΕΡ0797984 περιγράφεται μια σύνθεση τελικού προϊόντος κυρίως για γήρανση δέρματος αλλά μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως τονωτικό μαλλιών. Μεταξύ των συστατικών που αναφέρονται είναι και το εκχύλισμα δεντρολίβανου. Το Δίπλωμα JP071 96456 έχει ως αντικείμενο ένα τονωτικό μαλλιών που περιέχει συμπολυμερή βινυλοπυρρολιδόνης και εκχυλίσματα φυτών, μεταξύ των οποίων και εκείνο του δενδρολίβανου. Στο Δίπλωμα CH682631 περιγράφεται ένα καλλυντικό προϊόν που βοηθά στην ανάπτυξη μαλλιών και περιέχει διάφορα φυτικά συστατικά όπως το έγχυμα δεντρολίβανου. Στο Δίπλωμα SU1247011 περιγράφονται συνθέσεις για τα μαλλιά και μεταξύ των συστατικών που αναφέρονται είναι το εκχύλισμα του δεντρολίβανου. Στο Δίπλωμα US4933177 περιγράφεται καλλυντική σύνθεση για τα μαλλιά και θεραπεία του δέρματος με τη μορφή σκόνης όπου το δεντρολίβανο βρίσκεται ανάμεσα στα συστατικά. Στο Δίπλωμα US5053222 περιγράφεται μια καλλυντική σύνθεση για την περιποίηση των μαλλιών της οποίας τα κύρια ενεργά συστατικά είναι ένας διεστέρας του φωσφορικού οξέος με ασκορβικό οξύ και τοκοφερόλη. Μεταξύ άλλων προαιρετικών συστατικών αναφέρονται διάφορα εκχυλίσματα βοτάνων όπως το δεντρολίβανο. Το Δίπλωμα ΕΡ0872228 αναφέρεται στην σύνθεση καλλυντικού προϊόντος για τα μαλλιά αποκλειστικά φυτικής προέλευσης μεταξύ των συστατικών της οποίας είναι το εκχύλισμα δεντρολίβανου. Στο Δίπλωμα US4919846 αναφέρεται σε μια σύνθεση επιφανειοδραστικού συστατικού η οποία περιέχει ένα κατιονικό τεταρτοταγές αμμώνιο επιφανειοδραστικό και μια καρβοξυλική ανιονική ομάδα. Η εν λόγω σύνθεση, η οποία έχει χρησιμότητα ως ένα σαμπουάν, μπορεί να περιέχει και άλλα συστατικά προαιρετικά όπως το εκχύλισμα δεντρολίβανου.

Το Ιπποφαές (Hippophae rhamnosus) είναι φυλλοβόλος θάμνος που ανήκει στην οικογένεια των Ελαιαγνοειδών. Τα κλαδιά του είναι ακανθώδη ενώ τα φύλλα του μοιάζουν με αυτά της ιτιάς. Τα άνθη είναι δυσδιάκριτα και αναπτύσσονται σε πορτοκαλί μούρα. Τα βασικά συστατικά του είναι βιταμίνες (κυρίως βιταμίνη C), οξέα φρούτων, ιχνοστοιχεία και φλαβονοειδή. Το ιπποφαές έχει χρησιμοποιηθεί σε διάφορα προϊόντα για περιποίηση μαλλιών. Αναφέρουμε το Δίπλωμα CN103690854 όπου αναφέρεται σ' ένα προϊόν για τα μαλλιά που περιέχει εκχύλισμα ιπποφαούς για την αντιμετώπιση της τριχόπτωσης βασισμένο στις αρχές της κινεζικής ιατρικής. Επίσης το Δίπλωμα CN103655348 που αναφέρεται σ<'>ένα σαμπουάν φρουτένιας σύνθεσης που περιέχει εκχύλισμα ιπποφαούς για περιποίηση και θρέψη του τριχωτού της κεφαλής. Το Δίπλωμα CN103550266B όπου αναφέρεται σ ένα χάπι όπου περιέχεται εκχύλισμα ιπποφαούς, κατά της αλωπεκίας βασισμένο στην κινέζικη ιατρική. Το Δίπλωμα US201 33441 78 όπου αναφέρεται στην σύνθεση ενός φυτικού σαμπουάν, στο οποίο περιέχεται έγχυμα ιπποφαούς, για προστασία έναντι της τριχόπτωσης. Το Δίπλωμα US201 3196004 όπου γίνεται αναφορά στη σύνθεση και την παρασκευή ενός φυτικού σαπουνιού που περιέχει διάφορα εκχυλίσματα και εγχύματα βοτάνων όπως έγχυμα ιπποφαούς. Το Δίπλωμα RU2097017 όπου αναφέρεται στη σύνθεση ενός λαδιού διαφόρων βοτάνων, όπως το έλαιο ιπποφαούς, για καλλυντική δερματολογική και ιατρική χρήση. Το Δίπλωμα LV10038 αναφέρεται στη σύνθεση ενός καλλυντικού προϊόντος που περιέχει εκχύλισμα ιπποφαούς για περιποίηση μαλλιών μετά το λούσιμο. Το Δίπλωμα ΕΡ1 759683 αναφέρεται στην σύνθεση ενός προϊόντος για προστασία και φροντίδα του δέρματος της κεφαλής που περιέχει εκχύλισμα ιπποφαούς. Το Δίπλωμα CN 1857703 όπου αναφέρεται στην μέθοδο παρασκευής και σύνθεσης λοσιόν που περιέχει έλαιο ιπποφαούς για τα μαλλιά για την αντιμετώπιση της αλωπεκίας και το Δίπλωμα CN 104622785 οπού αναφέρεται σε σαμπουάν με νανοεκχυλίσμα διαφόρων βοτάνων, όπως το έλαιο ιπποφαούς, με πληθώρα ευεργετικά αποτελέσματα τόσο για τα μαλλιά όσο και για το δέρμα της κεφαλής.

Στην παρούσα επινόηση αναπτύχθηκε συνδυασμός εγχύματος και εκχυλίσματος δενδρολίβανου με εκχύλισμα ιπποφαούς με γνώμονα τη επίδραση στην έκφραση των γονιδίων clock, nog και VEGFa.

Αποκάλυψη της επινόησης

Προκειμένου η επινόησή μας να καταστεί κατανοητή στους ειδικούς της παρούσας τεχνικής, προβαίνουμε στη συνέχεια στην περιγραφή της σύστασης του επιθυμητού συνδυασμού εκχυλίσματος και εγχύματος δεντρολίβανου & εκχυλίσματος ιπποφαούς καθώς και της μεθόδου παραγωγής του.

Ο επινοηθείς συνδυασμός αποτελείται από έγχυμα δενδρολίβανου, εκχύλισμα δενδρολίβανου και εκχύλισμα Ιπποφαούς στοιχεία τα οποία χρησιμοποιούνται σε αναλογίες w/w που κυμαίνονται από 95/3,5/1.5 έως 99,875/0,056/0,069 αντιστοίχως.

Η μέθοδος παρασκευής του συνδυασμού περιλαμβάνει δύο στάδια: την παρασκευή του εγχύματος δενδρολίβανου και τη συνδυαστική παραγωγή του εκχυλίσματος δενδρολίβανου και ιπποφαούς.

Βήμα 1° Προετοιμασία φυτικού υλικού.

Σύμφωνα με την προτεινόμενη εφαρμογή της επινόησης, προκειμένου το έγχυμα και το εκχύλισμα δενδρολίβανου να εμφανίζουν συγκεκριμένη αύξηση στην έκφραση των γονίδιών clock, nog και VEGFa όταν έρθουν σε επαφή με τα κερατινοκύτταρα, θα πρέπει το αποξηραμένο φύλλο του δενδρολίβανου να περιέχει τουλάχιστον 10 mg/g ροσμαρινικού οξέος, μετρούμενο με HPLC.

Αντίστοιχα, για το εκχύλισμα του Ιπποφαούς, ο καρπός του ιπποφαούς θα πρέπει να εμφανίζει αντιοξειδωτική ικανότητα >3.0 (Trolox equivalent) μετά από σύνθλιψη, εκχύλιση με αιθανόλη για 5' στους 25°C και διήθηση.

Τα φύλλα δενδρολίβανου τεμαχίζονται σε κομμάτια διαστάσεων 1 -10 mm ώστε η επιφάνεια επαφής τους με το διαλύτη εκχύλισης να είναι όσο το δυνατόν μεγαλύτερη.

Οι καρποί του ιπποφαούς συνθλίβονται σε μηχανική πρέσα και χρησιμοποιούνται για την εκχύλιση χωρίς περεταίρω κατεργασία.

Βήμα 2° Παραγωγή συνδυαστικού εκχυλίσματος δενδρολίβανου - ιπποφαούς . Τα φύλλα δενδρολίβανου αναμιγνύονται με τους καρπούς του ιπποφαούς που έχουν συνθλίβει, έως πλήρους ομογενοποίησης, σε αναλογία 70/30 έως 45/55. Το ομοιογενές μίγμα τοποθετείται σε σακόφιλτρο με πόρους διαμέτρου 25 μ. Το σακόφιλτρο στη συνέχεια τοποθετείται σε συσκευή εκχύλισης όπου μπορεί να ελεγχθεί η πίεση και η θερμοκρασία. Στη συνέχεια προστίθεται ο διαλύτης που αποτελείται από απιονισμένο νερό και γλυκερόλη σε αναλογία w/w 10/90 έως 60/40. Η αναλογία του φυτικού υλικού προς διαλύτη είναι 2,44/97,56 έως 6,40/93,60. Η εκχύλιση λαμβάνει χώρα υπό πίεση 3 bar έως 10 bar στους 25°C έως 32°C. Η διαδικασία περιλαμβάνει 14 έως 33 κύκλους συμπίεσης, διάρκειας 3’ έως 6’ και αντίστοιχους κύκλους αποσυμπίεσης διάρκειας 2’ έως 5’.

Το εκχύλισμα που προκύπτει αφήνεται σε ηρεμία στους 4°C για 24h, αφαιρείται η ποσότητα του υπερκείμενου σχηματιζόμενου ελαίου και στη συνέχεια διηθείται εν ψυχρώ από cartridge φίλτρα διαμέτρου πόρων 10μ — 5μ — 1 μ — 0.2μ.

Βήμα 3° Παραγωγή εγχύματος δενδρολίβανου.

Για το έγχυμα ως διαλύτης εκχύλισης χρησιμοποιείται απιονισμένο νερό που έχει παραληφθεί με τη μέθοδο της αντίστροφης ώσμωσης με την ακόλουθη διαδικασία:

Το νερό του δικτύου ύδρευσης εισέρχεται στη δεξαμενή του ακατέργαστου ύδατος (όγκου 2m<3>), μέσω κατάλληλου αντλητικού συγκροτήματος, διέρχεται από αυτόματο φίλτρο θολότητας για την αφαίρεση της θολότητας και των στερεών σωματιδίων και ενεργού άνθρακα για αφαίρεση χλωρίου και οργανικού φορτίου και στην συνέχεια δοσομετρείται αντικαθαλατωτικό για την δέσμευση της σκληρότητάς του. Πριν την είσοδό του στο κεντρικό συγκρότημα της μονάδας αντίστροφης όσμωσης, διέρχεται από φίλτρο φυσιγγίου 1 micron. Στη συνέχεια, αφού το νερό έχει την κατάλληλη κατεργασία για χρήση, σε αντίστροφη ώσμωση εισέρχεται στην μονάδα αντίστροφης ώσμωσης παραγωγής 350 lt/h με ανάκτηση 70%. Το παραγόμενο νερό της μονάδας δεξαμενίζεται σε ανοξείδωτη δεξαμενή, όγκου 5 m<3>. Από την δεξαμενή αυτή το νερό με κατάλληλο αντλητικό συγκρότημα, τροφοδοτεί τον απιονιστή και on line οδηγείται στη δεξαμενή εκχύλισης του δενδρολίβανου μέσω UV. Για την αποφυγή στάσιμου νερού στο δίκτυο υπάρχει συνεχής ανακυκλοφορία του νερού με επιστροφή στην δεξαμενή. Η απαίτηση ποιότητας απιονισμένου νερού είναι: <= 1 pS/cm στους 25 °C, που υπερκαλύπτει την προδιαγραφή της Ευρωπαϊκής Φαρμακοποιίας για την παρασκευή παρεντερικών φαρμακευτικών προϊόντων. Η ποιότητα αυτή είναι απαραίτητη για να μπορέσει να δημιουργηθεί σταθερό έγχυμα δενδρολίβανου, καθώς η παρουσία αλάτων μεταβάλει σημαντικά τη διαλυτότητα και τη σταθερότητα των δευτερογενών μεταβολιτών των φυτών στους οποίους οφείλεται και η βιολογική του δράση στα ανθρώπινα δερματικά κύτταρα.

Η αναλογία του μίγματος των φύλλων δενδρολίβανου προς το διαλύτη κατά βάρος είναι από 3 % έως 10%.

Προκειμένου να λάβει χώρα η επιθυμητή εκχύλιση, ακολουθείται η εξής διαδικασία: Το φυτικό υλικό τοποθετείται σε σακόφιλτρο με πόρους διαμέτρου 100 μ. Το σακόφιλτρο στη συνέχεια τοποθετείται σε συσκευή εκχύλισης όπου μπορεί να ελεγχθεί η πίεση και η θερμοκρασία. Στη συνέχεια προστίθεται ο διαλύτης (απιονισμένο νερό που έχει παραληφθεί με τη μέθοδο της αντίστροφης ώσμωσης) και η διαδικασία της εκχύλισης ξεκινάει. Η εκχύλιση λαμβάνει χώρα υπό πίεση Ο bar έως 4 bar στους 45°C έως 98°C. Η διάρκεια της εκχύλισης μπορεί να είναι από 1 min έως 30 min.

Περίπτωση 1. Χρήση του συνδυασμού απευθείας στο τριχωτό της κεφαλής.

Με το πέρας της διαδικασίας παραγωγής εγχύματος αφαιρείται το σακόφιλτρο με το φυτό από τη συσκευή και το έγχυμα αφήνεται να λάβει θερμοκρασία 37 °C -45 °C. Στη θερμοκρασία αυτή και υπό έντονη ανάδευση (3000 rpm) προστίθεται σταδιακά το συνδυαστικό εκχύλισμα δενδρολίβανου-ιπποφαούς. Το μίγμα αφήνεται να έρθει στη θερμοκρασία περιβάλλοντος όπου και προστίθενται σε αναλογία w/w 1% μίγμα βενζοϊκού νατρίου - σορβικού καλίου (40/60) και σε αναλογία w/w 0,4% κιτρικό οξύ. Στη συνέχεια το μίγμα συσκευάζεται.

Περίπτωση 2: Χρήση ως συστατικό καλλυντικών και φαρμακοκαλλυντικών προϊόντων.

Με το πέρας της διαδικασίας παραγωγής εγχύματος αφαιρείται το σακόφιλτρο με το φυτό από τη συσκευή και το έγχυμα αφήνεται να λάβει θερμοκρασία από 50 °C έως 70 °C. Ακολούθως το έγχυμα διηθείται από σακόφλιτρο διαμέτρου πόρων 10μ και χρησιμοποιείται άμεσα ως δραστικό συστατικό στην υδατική φάση καλλυντικών και φαρμακοκαλλυντικών προϊόντων. Η αναλογία w/w του εγχύματος στην τελική μορφοποίηση μπορεί να είναι από 150% έως 80%.

Όταν η υδατική φάση λάβει θερμοκρασία από 37 °C έως 45 °C προστίθεται το συνδυαστικό εκχύλισμα δενδρολίβανου-ιπποφαούς σε αναλογία w/w 0,1 έως 2,5%.

Πειραματική τεκμηρίωση χρήσης συνδυασμού εκχυλίσματος και εγχύματος δεντρολίβανου & εκχυλίσματος ιπποφαούς εκχυλίσματος δεντρολίβανου, εγχύματος δεντρολίβανου και εκχυλίσματος ιπποφαές (fortifying mixture). Ο συνδυασμός εκχυλίσματος και εγχύματος δεντρολίβανου & εκχυλίσματος ιτπτοφαούς συμβάλλει σημαντικά στην τόνωση του τριχωτού της κεφαλής μέσω ενεργοποίησης της διαδικασίας ανάπτυξης της τρίχας. Προκειμένου να τεκμηριωθεί το παραπάνω για τη χρήση του συνδυασμού εκχυλίσματος και εγχύματος δεντρολίβανου & εκχυλίσματος ιπποφαές ως δραστικό συστατικό σε καλλυντικές φόρμουλες για προϊόντα μαλλιών προβήκαμε σε μελέτη In vitro του συνδυασμού χρησιμοποιώντας ανθρώπινα δερματικά κερατινοκύτταρα.

Αρχικός στόχος ήταν η εκτίμηση της κυτταρικής βιωσιμότητας/ζωτικότητας των παραπάνω δερματικών κερατινοκυττάρων μετά από 48ωρη επώαση του συνδυασμού (συγκέντρωση 1%) σε αυτούς. Η εκτίμηση αυτή βασίστηκε στην ανίχνευση των επιπέδων ATP (Crouch SPM et al., 1993). Η μέτρηση των επιπέδων ΑΤΡ έγινε με φθορισμόμετρο και με τη χρησιμοποίηση κιτ (ViaLight™ Plus Cell Proliferation and Cytotoxicity) Τα μόρια του ATP χαρακτηρίζονται ως η ενεργειακή νομισματική μονάδα στις ενδοκυτταρικές μεταβιβάσεις ενεργειας απο το ένα βιοχημικό μόριο στο άλλο (Crouch SPM et al., 1993). Η ενέργεια αυτή αποθηκεύεται σε προσωρινή βάση στα μόρια του ΑΤΡ ως χημική ενέργεια μέχρις ότου γίνει χρήση της σε διάφορες βιολογικές διεργασίες όπως η οικοδόμηση ουσιών απαραίτητων για τη διατήρηση και την ανάπτυξη των ζώντων οργανισμών (π.χ πρωτεϊνοσύνθεση) Ο συνδυασμός δεν παρουσίασε κυτταροτοξικότητα στα κερατινοκύτταρα. Αντιθέτως ενίσχυσε την ενέργεια τους για την έναρξη ενεργοποίησης σημαντικών βιοχημικών μονοπατιών (αύξηση επιπέδων ΑΤΡ 100%). Περαιτέρω διερεύνηση του σημαντικού αυτού αποτελέσματος μας οδήγησε σε μελέτη των μεταβολών που προκαλεί η επίδραση του συνδυασμού εκχυλίσματος και εγχύματος δεντρολίβανου & εκχυλίσματος ιπποφαούς στην έκφραση γονιδίων που εμπλέκονται στην ανάπτυξη της τρίχας. Για το σκοπό αυτό χρησιμοποιήθηκε η τεχνική της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης σε πραγματικό χρόνο RT-PCR (Giulietti A et al.). Απο τη γονιδιακή μελέτη προέκυψε ότι τα κερατινοκύτταρα με τον συνδυασμό, εκχύλισμα και έγχυμα δεντρολίβανου & εκχύλισμα ιπποφαούς οδηγούνται σε υπερέκφραση (>100%)(ρ<0.05) του γονιδίου clock σε σχέση με κερατινοκύτταρα χωρίς τον συνδυασμό. Η υπερέκφραση του γονιδίου clock αυξάνει τον χρόνο ανάπτυξης της τρίχας (αναγενής φάση) με αποτέλεσμα να συμβάλλει σημαντικά στην τόνωση και υγεία του τριχωτού της κεφαλής. Το παραπάνω αποτέλεσμα ενισχύεται με την υπερέκφραση του γονιδίου nog (>100%)(p<0.05) που παρατηρήθηκε στα κερατινοκύτταρα με τον συνδυασμό. Το γονίδιο nog συμβάλλει στην μείωση της τελογενούς φάσης ενισχύοντας την ανάπτυξη της τρίχας. Τα παραπάνω αποτελέσματα επιβεβαιώθηκαν με την αύξηση της έκφρασης(>50%) (p<0.05) του γονιδίου VEGFa που παρατηρήθηκε στα κερατινοκύτταρα με τον συνδυασμό σε σχέση με τα κερατινοκύτταρα χωρίς τον συνδυασμό. Ο παράγοντας, VEGFa είναι ένας από τους ισχυρότερους παράγοντες αγγειογένεσης ο οποίος παίζει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη της τρίχας.

Κλινική μελέτη

Στη συνέχεια για να την απόδειξη της επιτυχούς χρήσης του συνδυασμού εκχυλίσματος και εγχύματος δεντρολίβανου & εκχυλίσματος ιπποφαούς έγινε κλινική μελέτη σε τελικά προϊόντα τα οποία περιέχουν το εν λόγω συνδυασμό. Τα τελικά προϊόντα ήταν μια αλκοολούχα λοσιόν και ένα διφασικό υγρό με λιπαρή και υδατική φάση.

Στη μελέτη που διεξήχθη για τη λοσιόν πήραν μέρος 50 εθελοντές εκ των οποίων 20 γυναίκες που αντιμετώπιζαν προσωρινή απώλεια μαλλιών και με κανονικό προς λιπαρό τύπο μαλλιών και 30 άντρες με ελαφριά ως μέτρια φαλάκρα και λιπαρό τύπο μαλλιών. Η διάρκεια της ήταν 84 ημέρες. Οι εθελοντές πληρούσαν τα εξής κριτήρια:

• Είχαν γενικά καλή κατάσταση υγείας

• Δεν εμφάνιζαν δερματοπάθειες

• Δεν αντιμετώπιζαν αλλεργίες

■ Δεν λάμβαναν καμία φαρμακολογική θεραπεία

• Δεν άλλαξαν την καθημερινή τους ρουτίνα

• Δεν αντιμετώπιζαν κάποιο ψυχολογικό νόσημα

Η λοσιόν αποτελούνταν από τον συνδυασμό των συστατικών της παρούσας επινόησης σε συγκέντρωση 50-70% κατά βάρος και επιπλέον βοηθητικές αδρανείς ουσίες μεταξύ των οποίων και αιθυλική αλκοόλη σε ποσοστό 15-30% κατά βάρος.

Η ποσόστωση των τριών συστατικών της παρούσας επινόησης εμφανίζεται σύμφωνα με το λόγο:

Έγχυμα Δενδρολίβανου> Εκχύλισμα Ιπποφαούς> Εκχύλισμα Δενδριολίβανου Και η σχετική συγκέντρωση του κάθε συστατικού (στο σύνολο του συνδυασμού) είναι:

Έγχυμα Δενδρολίβανου: 95-99,25%

Εκχύλισμα Ιπποφαούς: 0,5-41 ,5%

Εκχύλισμα Δενδρολίβανου: 0,25-23,5%

Η εφαρμογή του προϊόντος ήταν καθημερινή και περιλάμβανε ψέκασμα στις άκρες στις ρίζες των μαλλιών (8-10 φορές από κάθε πλευρά του κεφαλιού) χωρίς να ξεπλένεται και μασάζ στις περιοχές αυτές για αύξηση της μικροκυκλοφορίας στο τριχωτό της κεφαλής.

Η αξιολόγηση των αποτελεσμάτων έγινε με ενόργανες μετρήσεις (instrumental evaluation), με κλινική παρατήρηση εξειδικευμένου προσωπικού (clinical parameters) και με αυτό-αξιολόγηση από τους εθελοντές (self-evaluation). Συγκεκριμένα, οι παράμετροι που εξετάστηκαν ήταν: η πυκνότητα των μαλλιών (αριθμός τριχών/cm<2>), ο βαθμός τριχόπτωσης και ο προσδιορισμός της φάσης του κύκλου ζωής της τρίχας.

Τα αποτελέσματα της κλινικής μελέτης έδειξαν 1) αύξηση της πυκνότητας των μαλλιών κατά μέσο όρο 4% μετά από 84 μέρες, 2) μείωση της τριχόπτωσης και συγκεκριμένα, οι εθελοντές παρουσίαζαν 60% μείωση της τριχόπτωσης μετά την χρήση του προϊόντος για 84 ημέρες και 3) αύξηση των τριχών που βρίσκονται στην αναγενή φάση κατά 6,8% με ταυτόχρονη μείωση των τριχών που βρίσκονται στην τελογενή φάση κατά 5,7% στο διάστημα των 84 ημερών.

Στη μελέτη που διεξήχθη για το διφασικό υγρό πήραν μέρος 30 εθελοντές γυναίκες που αντιμετώπιζαν προσωρινή απώλεια μαλλιών και με κανονικό προς λιπαρό τύπο μαλλιών. Η διάρκεια της ήταν 84 ημέρες. Οι εθελοντές πληρούσαν τα εξής κριτήρια:

• Είχαν γενικά καλή κατάσταση υγείας

• Δεν εμφάνιζαν δερματοπάθειες

· Δεν αντιμετώπιζαν αλλεργίες

• Δεν λάμβαναν καμία φαρμακολογική θεραπεία

• Δεν άλλαξαν την καθημερινή τους ρουτίνα

• Δεν αντιμετώπιζαν κάποιο ψυχολογικό νόσημα

Το διφασικό υγρό αποτελούνταν από ελαιώδη και υδατική φάση σε αναλογία 50/50% κατ<'>όγκο. Η ελαιώδης φάσης αποτελούνταν από φυτικά έλαια και φυτικής προέλευσης εστέρες. Η υδατική φάση περιείχε τον συνδυασμό της παρούσας επινόησης.

Η ποσόστωση των τριών συστατικών της παρούσας επινόησης εμφανίζεται σύμφωνα με το λόγο:

Έγχυμα Δενδρολίβανου> Εκχύλισμα Ιπποφαούς> Εκχύλισμα Δενδριολίβανου Και η σχετική συγκέντρωση του κάθε συστατικού (στο σύνολο του συνδυασμού) είναι:

Έγχυμα Δενδρολίβανου: 9495-98%

Εκχύλισμα Ιπποφαούς: 01,4-2%

Εκχύλισμα Δενδρολίβανου: 01 ,6-13%

Η εφαρμογή του προϊόντος ήταν 2-3 φορές την εβδομάδα και περιλάμβανε ικανοποιητική διαβροχή από τις ρίζες ως τις στις άκρες των μαλλιών χωρίς να ξεπλένεται για τουλάχιστον 3 ώρες και μασάζ στις περιοχές αυτές για αύξηση της μικροκυκλοφορίας στο τριχωτό της κεφαλής.

Η αξιολόγηση των αποτελεσμάτων έγινε με ενόργανες μετρήσεις (instrumental evaluation), με κλινική παρατήρηση εξειδικευμένου προσωπικού (clinical parameters και με αυτό-αξιολόγηση από τους εθελοντές (self-evaluation). Συγκεκριμένα, οι παράμετροι που εξετάστηκαν ήταν: η πυκνότητα των μαλλιών (αριθμός τριχών/cm<2>) και ο βαθμός τριχόπτωσης.

Τα αποτελέσματα της κλινικής μελέτης μαλλιών κατά μέσο όρο 5% μετά από 8 και συγκεκριμένα, οι εθελοντές παρουσία την χρήση του προϊόντος για 84 ημέρες.

έδειξαν 1) αύξηση της πυκνότητας των 4 μέρες και 2) μείωση της τριχόπτωσης ζαν 73% μείωση της τριχόπτωσης μετά

Claims (7)

ΑΞΙΩΣΕΙΣ

1. Ένας συνδυασμός εκχυλίσματος δενδρολίβανου, εγχύματος δενδρολίβανου και εκχυλίσματος ιπποφαούς για τοπική χρήση στο τριχωτό της κεφαλής, ο οποίος χαρακτηρίζεται από το ότι το εκχύλισμα του δενδρολίβανου, το έγχυμα του δενδρολίβανου και το εκχύλισμα του υποφαούς, χρησιμοποιούνται σε αναλογίες w/w που κυμαίνονται από 95/3,5/1.5 έως 99,875/0,056/0,069 ανά στοιχείo τoυ συνδυασμού αντιστοίχως και υπό την προϋπόθεση ότι τα μεν αποξηραμένα φύλλα του δενδρολίβανου περιέχουν ένα ελάχιστο ποσοστό ροσμαρινικού οξέως οι δε καρποί του ιπποφαούς συγκεκριμένη αντιοξειδωτική ικανότητα. .

2. Μία μέθοδος παραγωγής συνδυασμού εκχυλίσματος δενδρολίβανου, εγχύματος δενδρολίβανου και εκχυλίσματος ιπποφαούς για τοπική χρήση στο τριχωτό της κεφαλής σύμφωνα με την αξίωση 1 , που χαρακτηρίζεται από το ότι, στο πρώτο στάδιο, παραγωγής τα φύλλα δενδρολίβανου τεμαχίζονται σε κομμάτια διαστάσεων 1 -10 mm ώστε η επιφάνεια επαφής τους με το διαλύτη εκχύλισης να είναι όσο το δυνατόν μεγαλύτερη, ενώ προκειμένου το έγχυμα και το εκχύλισμα δενδρολίβανου να εμφανίζουν συγκεκριμένη αύξηση στην έκφραση των γονίδιών clock, nog και VEGFa όταν έρθουν σε επαφή με τα κερατινοκύτταρα, θα πρέπει το αποξηραμένο φύλλο του δενδρολίβανου να περιέχει τουλάχιστον 10 mg/g ροσμαρινικού οξέος, μετρούμενο με HPLC, ενώ αντιστοίχως οι καρποί του ιπποφαούς, που συνθλίβονται σε μηχανική πρέσα και χρησιμοποιούνται για την εκχύλιση χωρίς περεταίρω κατεργασία, θα πρέπει να εμφανίζουν αντιοξειδωτική ικανότητα >3.0 (Trolox equivalent) μετά από σύνθλιψη, εκχύλιση με αιθανόλη για 5’ στους 25° C και διήθηση.

3. Μία μέθοδος παραγωγής συνδυασμού εκχυλίσματος δενδρολίβανου, εγχύματος δενδρολίβανου και εκχυλίσματος ιπποφαούς για τοπική χρήση στο τριχωτό της κεφαλής σύμφωνα με την αξίωση 1 , που χαρακτηρίζεται από το ότι, στο δεύτερο στάδιο, παράγεται συνδυαστικά εκχύλισμα δενδρολίβανου και ιτπτοφαούς, όπου τα φύλλα δενδρολίβανου αναμιγνύονται με τους καρπούς του ιπποφαούς που έχουν συνθλίβει, μέχρι την πλήρη ομογενοποίηση του μίγματος, σε αναλογία που κυμαίνεται σε ποσοστό από 70/30 για δενδρολίβανο και ιπποφαές αντιστοίχους έως 45/55, ενώ εν συνεχεία το μίγμα τοποθετείται σε σακόφιλτρο με πόρους διαμέτρου 25 μ και εν συνεχεία το σακόφιλστρο τοποθετείται σε συσκευή εκχύλισης όπου μπορεί να ελεγχθεί η πίεση και η θερμοκρασία όπου προστίθεται ο διαλύτης που αποτελείται από απιονισμένο νερό και γλυκερόλη σε αναλογία w/w από 10/90 έως 60/40, ενώ η αναλογία του φυτικού υλικού προς διαλύτη είναι 2,44/97,56 έως 6,40/93,60 με την εκχύλιση να λαμβάνει χώρα υπό πίεση 3 bar έως 10 bar στους 25°C έως 32°C, με την διαδικασία να περιλαμβάνει 14 έως 33 κύκλους συμπίεσης, διάρκειας 3’ έως 6’ και αντίστοιχους κύκλους αποσυμπίεσης διάρκειας 2’ έως 5', το δε εκχύλισμα που προκύπτει αφήνεται σε ηρεμία στους 4°C για 24h και στη συνέχεια διηθείται εν ψυχρώ από cartridge φίλτρα διαμέτρου πόρων 10μ — 5μ — 1 μ — 0.2μ.

4. Μία μέθοδος παραγωγής συνδυασμού εκχυλίσματος δενδρολίβανου, εγχύματος δενδρολίβανου και εκχυλίσματος ιπποφαούς για τοπική χρήση στο τριχωτό της κεφαλής σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 έως 3, που χαρακτηρίζεται από το ότι, για την παραγωγή εγχύματος δενδρολίβανου, χρησιμοποιείται ως διαλύτης εκχύλισης απιονισμένο νερό που παραλαμβάνεται με τη μέθοδο της αντίστροφης ώσμωσης, όπου το νερό του δικτύου ύδρευσης εισέρχεται στη δεξαμενή του ακατέργαστου ύδατος, μέσω κατάλληλου αντλητικού συγκροτήματος, διέρχεται από αυτόματο φίλτρο θολότητας και ενεργού άνθρακα, δοσομετρείται αντικαθαλατωτικό για την δέσμευση της σκληρότητάς του και πριν την είσοδό του στο κεντρικό συγκρότημα της μονάδας αντίστροφης ώσμωσης, διέρχεται από φίλτρο φυσιγγίου 1 micron και εν συνεχεία, αφού το νερό έχει την κατάλληλη κατεργασία για χρήση εισέρχεται στην μονάδα παραγωγής 350 lt/h με ανάκτηση 70% και αφού δεξαμενισθεί σε ανοξείδωτη δεξαμενή, με κατάλληλο αντλητικό συγκρότημα, τροφοδοτεί τον απιονιστή και on line οδηγείται στη δεξαμενή εκχύλισης του δενδρολίβανου μέσω UV. Για την αποφυγή στάσιμου νερού στο δίκτυο υπάρχει συνεχής ανακυκλοφορία του νερού με επιστροφή στην δεξαμενή.

5. Μία μέθοδος παραγωγής συνδυασμού εκχυλίσματος δενδρολίβανου, εγχύματος δενδρολίβανου και εκχυλίσματος ιπποφαούς για τοπική χρήση στο τριχωτό της κεφαλής σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 έως 3, που χαρακτηρίζεται από το ότι, η απαίτηση ποιότητας απιονισμένου νερού είναι: <= 1 μS/cm στους 25 °C, που υπερκαλύπτει την προδιαγραφή της Ευρωπαϊκής Φαρμακοποιίας για την παρασκευή παρεντερικών φαρμακευτικών προϊόντων, ενώ η αναλογία του μίγματος των φύλλων δενδρολίβανου προς το διαλύτη κατά βάρος είναι από 3 % έως 10%.

6. Μία μέθοδος παραγωγής συνδυασμού εκχυλίσματος δενδρολίβανου, εγχύματος δενδρολίβανου και εκχυλίσματος ιπποφαούς για τοπική χρήση στο τριχωτό της κεφαλής σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 έως 5, που χαρακτηρίζεται από το ότι, για τη χρήση του απευθείας στο τριχωτό της κεφαλής, με το πέρας της διαδικασίας παραγωγής εγχύματος αφαιρείται το σακόφιλτρο με το φυτό από τη συσκευή και το έγχυμα αφήνεται να λάβει θερμοκρασία από 37 °C έως 45 °C όπου σε αυτή τη θερμοκρασία και υπό έντονη ανάδευση (3000 rpm) προστίθεται σταδιακά το συνδυαστικό εκχύλισμα δενδρολίβανου-ιπποφαούς και εν συνεχεία το μίγμα αφήνεται να έρθει στη θερμοκρασία περιβάλλοντος όπου και προστίθενται σε αναλογία w/w 1% μίγμα βενζοϊκού νατρίου - σορβικού καλίου (40/60) και σε αναλογία w/w 0,4% κιτρικό οξύ.

7. Μία μέθοδος παραγωγής συνδυασμού εκχυλίσματος δενδρολίβανου, εγχύματος δενδρολίβανου και εκχυλίσματος ιπποφαούς για τοπική χρήση στο τριχωτό της κεφαλής σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 έως 5, που χαρακτηρίζεται από το ότι, σε περίπτωση που ο συνδυασμός προορίζεται ως συστατικό καλλυντικών και φαρμακοκαλλυντικών προϊόντων, με το πέρας της διαδικασίας παραγωγής εγχύματος αφαιρείται το σακόφιλτρο με το φυτό από τη συσκευή και το έγχυμα αφήνεται να λάβει θερμοκρασία από 50°C έως 70°C ενώ ακολούθως το έγχυμα διηθείται από σακόφλιτρο διαμέτρου πόρων 10μ και χρησιμοποιείται άμεσα ως δραστικό συστατικό στην υδατική φάση καλλυντικών και φαρμακοκαλλυντικών προϊόντων, με αναλογία w/w του εγχύματος στην τελική μορφοποίηση η οποία κυμαίνεται από 1% έως 80% ενώ όταν η υδατική φάση λάβει θερμοκρασία 37 °C έως 45 °C προστίθεται το συνδυαστικό εκχύλισμα δενδρολίβανου-ιπποφαούς σε αναλογία w/w 0,1 έως 2,5%.