FR3051369A1 - Extraits de faine de hetre, compositions et utilisations - Google Patents

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Abstract

La présente invention concerne le domaine de la cosmétique, de la dermo-cosmétique et/ou de la nutraceutique. Plus particulièrement, l'invention s'intéresse à des extraits aqueux de faîne de hêtre, notamment de la famille des Fagus, et à leur utilisation en tant qu'actif cosmétique ou dermo-cosmétique, ou principe actif en nutraceutique.

Description

EXTRAITS DE FAÎNE DE HÊTRE, COMPOSITIONS ET UTILISATIONS DOMAINE DE L’INVENTION
La présente invention concerne le domaine de la cosmétique, de la dermo-cosmétique et/ou de la nutraceutique. Plus particulièrement, l’invention s’intéresse à des extraits de faîne de hêtre, notamment de la famille des Fagus, et à leur utilisation en tant qu’actif cosmétique ou dermo-cosmétique, ou en tant qu’actif nutraceutique.
ÉTAT DE LA TECHNIQUE
Si en premier lieu, l’application d’un produit cosmétique vise à embellir, la cosmétologie est devenue aujourd’hui une véritable science basée sur des recherches accrues en biologie et en chimie. Ainsi, le consommateur de produits cosmétiques ne vise plus seulement à améliorer son apparence physique, mais également, à prendre soin de son corps afin de conserver une bonne santé tout au long de sa vie.
Dans cette optique, de nombreuses recherches ont porté sur la mise au point de formulations pour la peau. De récentes études ont montré que le vieilhssement des neurones entraîne un vieillissement cutané via une diminution de la conununication entre les nerfs et les cellules résidentes du derme qui assurent la cohérence et la souplesse de la peau (les fibroblastes).
La recherche et/ou l’élaboration d’actifs ou de principes actifs s’est souvent orientée vers l’utilisation de ressources naturelles ; en particulier, l’exploitation de végétaux.
Parmi les plantes d’intérêts, le hêtre est un arbre à feuilles caduques appartenant à la Famille des Fagaceae. Π est l’une des principales essences représentées en Europe. L’utilisation d’extrait de hêtre en association avec d’autres extraits et/ou actifs a déjà été mise en œuvre pour la synthèse de produits dermo-cosmétiques.
Par exemple, US2008/0241084 décrit une composition topique pour éclaircir la peau et/ou inhiber la mélanogenèse. Cette composition comprend une combinaison d’un extrait de Fagus sylvatica, un extrait d’Arctostaphylos uva ursi, un extrait de Scutellaria et un extrait de Glycine soja. US2004/0131571 décrit un produit pour les soins de la peau comprenant un complexe de trois éléments actifs : des enzymes, des cytolines, et des biostimulines issues d’un extrait de hêtre Fagus Sylvatica. FR3009195 concerne l’utilisation d’extrait de pin en association avec un extrait de bourgeon de framboisier et/ou de cassis et/ou de hêtre comme actif anti-âge.
La Demanderesse a acquis une forte expertise dans l’extraction enzymatique d’actifs à partir de plantes et s’intéresse particulièrement aux propriétés des extraits issus de composés naturels.
La Demanderesse a constaté que son procédé d’extraction enzymatique permet d’obtenir des extraits d’intérêts cosmétique, dermocosmétique et/ou nutraceutique à partir de faînes de hêtre.
La faîne est le fruit du hêtre. Plus précisément, la faîne est un akène de la catégorie des nucules (Le. du fruit sec) du hêtre. La paroi de la faîne est dure et ne s’ouvre que pour libérer des graines. La faîne n’est pas un bourgeon du hêtre, le terme « bourgeon » désignant une excroissance apparaissant sur les végétaux et donnant naissance aux branches, aux feuilles, aux fleurs et aux fruits. De ce fait, la récolte de faînes de hêtre ne produit aucun traumatisme à l’arbre, et s’inscrit dans une démarche de développement durable. À la connaissance de la Demanderesse, l’intérêt des extraits de faînes de hêtre ont été très peu, voire pas explorés en cosmétique et en nutraceutique. Or, il existe toujours un besoin de trouver de nouveaux actifs permettant d’une part, de lutter contre les effets du vieillissement ; et d’autre part, de soigner d’atténuer les imperfections de la peau telles que notamment les inflammations, les rougeurs ou les cicatrices superficielles, de cicatriser les plaies superficielles ou encore d’atténuer l’hyperpigmentation de la peau.
De manière surprenante, la Demanderesse a mis en évidence qu’un extrait aqueux de faîne de hêtre pouvait être utilisé comme actif cosmétique et/ou dermocosmétique ou comme actif nutraceutique, comme agent antiâge, hydratant, lissant, apaisant, cicatrisant et/ou éclaircissant de la peau, notamment des peux ethniques, ou pour lutter contre le stress ou les troubles cognitifs. RÉSUMÉ
Ainsi, dans un premier aspect, l’invention concerne un extrait aqueux de faîne de hêtre. De préférence ladite faîne de hêtre est de la famille des Fagus, très préférentiellement Fagus Sylvatica. Selon un mode de réalisation, l’extrait de l’invention comprend de 0,01 à 95 g/L de composés polyphénoliques en poids par rapport au poids de l’extrait sec. Dans un mode de réalisation l’extrait selon l’invention ne contient pas d’huile ni d’acide gras.
Dans un second aspect, l’invention a pour objet une composition comprenant un extrait de faîne de hêtre selon l’invention, en association avec au moins un excipient acceptable, notamment cosmétique, dermocosmétique ou nutraceutique.
Avantageusement, la composition de l’invention comprend de plus de 0 à 10%, de préférence de 0,01 à 5 % ; plus préférentiellement, de 0,1 à 3% d’extrait aqueux de faîne de hêtre selon l’invention en poids par rapport au poids total de ladite composition.
Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est caractérisée en ce que l’extrait est associé avec un excipient cosmétique ou dermocosmétique et se présente sous forme de gel, lait, crème, lotion, émulsion, huile, baume ou onguent, apte à être appliquée topiquement sur la peau du visage et/ou du corps. Dans ce mode de réalisation, l’extrait aqueux de faîne de hêtre selon l’invention est utilisé en tant qu’actif cosmétique ou dermocosmétique.
Dans un mode de réalisation, 1 la composition de l’invention est caractérisée en ce que l’extrait est associé avec un excipient nutraceutique, et se présente sous forme liquide, solide ou gel, notamment sous forme poudre, de comprimé sécable ou non, pelliculé ou non, sous forme orodispersible, ou encore sous forme de granule, de capsule, de gélule, ou d’ampoule. L’invention concerne également un actif cosmétique ou dermocosmétique caractérisé en ce qu’il comprend un extrait aqueux de faîne de hêtre selon l’invention ou une composition cosmétique ou dermocosmétique le contenant, et son utilisation en tant qu’agent antiâge, hydratant, lissant, apaisant, cicatrisant et/ou éclaircissant de la peau. L’invention concerne également un actif nutraceutique caractérisé en ce qu’il comprend un extrait aqueux de faîne de hêtre selon l’invention ou une composition cosmétique ou dermocosmétique le contenant, et son utilisation en tant qu’agent antiâge, hydratant, lissant, apaisant, cicatrisant et/ou éclaircissant, ou pour lutter contre le stress ou les troubles cognitifs.
Avantageusement, l’extrait de faîne de hêtre de l’invention est utile comme agent antiâge. Avantageusement, l’extrait de faîne de hêtre de l’invention est utile comme agent lissant. Avantageusement, l’extrait de faîne de hêtre de l’invention est utile comme agent apaisant. Avantageusement, l’extrait de faîne de hêtre de l’invention est utile comme agent cicatrisant. Avantageusement, l’extrait de faîne de hêtre de l’invention est utile comme agent hydratant. Avantageusement, l’extrait de faîne de hêtre de l’invention est utile comme agent éclaircissant de la peau. Avantageusement, l’extrait de faîne de hêtre de l’invention est utile comme agent destiné à lutter contre le stress ou les troubles cognitifs. L’invention a également pour objet une méthode de soin cosmétique comprenant l’application topique d’un extrait aqueux de faîne de hêtre ou d’une composition cosmétique ou dermocosmétique selon l’invention.
DÉFINITIONS
Dans la présente invention, les termes ci-dessous sont définis de la manière suivante :
Le terme « extrait » concerne une préparation liquide, semi-solide ou solide, obtenue par extraction de faîne de hêtre. Selon un mode de réalisation selon l’invention, l’extrait est aqueux. Selon un autre mode de réalisation selon l’invention, l’extrait aqueux est ensuite séché, par toute méthode connu de l’homme du métier. Au sens de la présente invention, le terme « extrait aqueux » inclut l’extrait obtenu directement par un procédé enzymatique ou hydroalcoolique ou subcritique ou de macération aqueuse, ainsi que ledit extrait ayant subi une étape de séchage et étant rendu sec. De préférence, l’extraction est biologique, très préférentiellement enzymatique.
Le terme « actif » concerne un ingrédient qui possède une activité précise à l’origine de l’efficacité du produit cosmétique et/ou dermocosmétique ou nu traceu tique.
Le terme « anti-âge » concerne un agent possédant la propriété de retarder et/ou de lutter contre les effets du vieillissement de la peau et des tissus.
Le terme « anti-inflammatoire » concerne une substance qui s’oppose ou qui combat une inflammation.
Le terme « lissant » concerne une substance qui réduit les irrégularités de la peau.
Le terme « apaisant » concerne une substance qui aide à réduire l’inconfort de la peau.
Les termes « cosmétiquement acceptable » concernent un composant qui est utilisable en contact avec la peau sans effet secondaire tel que toxicité, irritation ou réponse allergique.
Le terme « nutraceutique » concerne un produit fabriqué à partir de substances alimentaires, mais rendu disponible sous forme de liquide ou solide, et qui s'avère avoir un effet physiologique bénéfique ou protecteur contre des conditions chroniques, et notamment dans la lutte contre le vieillissement, contre les irritations cutanées ou les cicatrices superficielles, en tant qu’agent éclaircissant de la peau, ou pour lutter contre le stress ou les troubles cognitifs, notamment de la mémoire.
Le terme « antioxydant » concerne un agent qui diminue ou empêche l’oxydation d’autres substances. Un antioxydant peut protéger les cellules contre les effets des espèces réactives d’oxygène.
Précédant une valeur chiffrée, le terme « environ » signifie plus ou moins 10% de ladite valeur. DESCRIPTION DÉTAILLÉE Extrait
La présente invention concerne un extrait issu de faîne de hêtre, en particulier un extrait aqueux de faîne de hêtre.
Selon un mode de réalisation, le hêtre dont est issu l’extrait de l’invention est du genre Fagus ; de préférence, de la famille des Fagaceae. Selon un mode de réalisation, le hêtre dont est issu l’extrait de l’invention, est un hêtre Fagus Sylvatica.
Selon un mode de réalisation, l’extrait de l’invention n’est pas une solution huileuse, ni une émulsion. Selon un mode de réalisation, l’extrait de l’invention comprend des composés polyphénoliques. Selon un mode avantageux de réalisation, l’extrait de l’invention comprend de 0,01 à 95 g/L ; de préférence de 0,1 à 20 g/L ; de préférence de 0,3 à 5 g/L ; plus préférentiellement, de 0,5 à 3 g/L de composés polyphénoliques en poids par rapport au poids total de l’extrait sec. Selon un mode de réalisation, l’extrait de l’invention comprend environ 2 g/L. Selon un mode de réalisation, l’extrait de l’invention comprend environ 6 g/L.
Selon un mode de réalisation, l’extrait de l’invention comprend des sucres. Selon un mode avantageux de réalisation, l’extrait de l’invention comprend de 0,01 à 100 g/L ; de préférence de 1 à 60 g/L ; plus préférentiellement, de 10 à 50 g/L de sucres en poids par rapport au poids total de l’extrait sec. Selon un mode de réalisation, l’extrait de l’invention comprend environ 47 g/L. Selon un mode de réalisation, l’extrait de l’invention comprend environ 11 g/L.
Selon un premier mode de réalisation, l’extrait de l’invention ne comprend pas de protéines.
Selon un second mode de réalisation, l’extrait de l’invention comprend des protéines. Dans ce mode de réalisation, l’extrait de l’invention peut comprendre de 0,01 à 100 g/L ; de préférence de 1 à 60 g/L ; plus préférentiellement, de 10 à 50 g/L de protéines, et de manière encore plus préférentielle environ 34 g/L. en poids de protéines par rapport au poids total de l’extrait sec.
Selon un mode de réalisation, l’extrait de l’invention est un extrait aqueux qui comprend de plus de 0 à 90 %; de préférence, de 1 à 50 % ; plus préférentiellement, de 5 à 15 %, de manière encore plus préférentielle environ 10 % de masse sèche, en poids par rapport au poids total de l’extrait. Selon un mode de réalisation, l’extrait aqueux est séché, atomisé, lyophilisé ou déshydraté et comprend 95 à 100 % de matière sèche; dans la présente invention, le terme « extrait aqueux » est aussi utilisé en référence à un tel extrait.
Procédé L’extrait selon l’invention peut être obtenu par toute méthode d’extraction connue de l’homme du métier. Selon un mode de réalisation, le procédé d’extraction comprend une étape de macération aqueuse. Selon un mode de réalisation, le procédé d’extraction comprend une étape de macération hydro-alcoolique ; de préférence, eau-éthanol. Selon un mode de réalisation, le procédé d’extraction comprenant une étape d’extraction à l’eau subcritique.
Cependant, la Demanderesse a acquis une expertise dans l’extraction de composés d’intérêts à partir de végétaux, ayant l’avantage de fournir des produits non contaminés par des composés ou solvants chimiques. En particulier, la Demanderesse a acquis une expertise dans le domaine des procédés d’extraction biologique, de préférence enzymatique. Selon un mode de réalisation, le procédé d’extraction comprend au moins une étape d’hydrolyse enzymatique. Selon un mode de réalisation, le procédé d’extraction est réalisé suivant le procédé décrit dans la demande de brevet internationale WO2011045387.
Ainsi, l’invention concerne également un procédé d’extraction de faîne de hêtre et l’extrait de faîne de hêtre susceptible d’être obtenu par ledit procédé, comprenant au moins : une étape de mélange de faînes de hêtre préalablement broyées et d’eau ; l’addition à ce mélange d’au moins une enzyme ou d’un mélange enzymatique.
Selon un mode de réalisation, les faînes de hêtre sont issues du genre Fagus ; de préférence, de la famille des Fagaceae. Selon un mode de réalisation, la faîne est une faîne de hêtre Fagus Sylvatica.
Selon un mode de réalisation, l’enzyme ou le mélange enzymatique comprend au moins une enzyme choisie parmi les cellulases, les hémicellulases, les pectinases ou les protéases. Selon un mode de réalisation, le mélange enzymatique comprend une cellulase et une hémicellulase. Selon un mode de réalisation, le mélange enzymatique comprend une cellulase et une pectinase. Selon un mode de réalisation, le mélange enzymatique comprend une pectinase et une hémicellulase Selon un mode de réalisation, le mélange enzymatique est constitué d’une cellulase, d’une hémicellulase, d’une pectinase et d’une protéase. Selon un mode de réalisation, le mélange enzymatique est constitué d’une cellulase, d’une hémicellulase et d’une protéase. Selon un mode de réalisation, le mélange enzymatique est constitué d’une cellulase, d’une hémicellulase et d’une pectinase.
Selon un mode de réalisation du procédé de l’invention, on mélange les faînes de hêtre broyées et l’eau dans un ratio massique de la quantité de faînes de hêtre sur la quantité d’eau compris de plus de 0 à 50 ; de préférence, de 0,1 à 10 ; plus préférentiellement, de 0,2 à 5 ; encore plus préférentiellement de 1 à 3. Selon un mode de réalisation, le ratio massique du mélange faîne de hêtre/eau est compris de 1 à 2,5. Selon un mode de réalisation, le ratio massique du mélange faîne de hêtre/eau est environ égal à 1. Puis, on introduit une quantité d’enzyme ou de mélange enzymatique de plus de 0 à 20 % ; de préférence, de 1 à 10% ; plus préférentiellement, d’environ 5% en poids par rapport au poids du mélange faînes de hêtre/eau.
Selon un mode de réalisation, l’addition de l’enzyme ou du mélange enzymatique est réalisée à une température comprise dans une gamme de 30°C à 80°C ; de préférence, de 40°C à 60°C, plus préférentiellement environ 50°C.
Selon un mode de réalisation, l’addition du mélange enzymatique est réalisée sous agitation, située entre 300 et 10 000 rpm ; de préférence, entre 350 et 500 rpm.
Selon un mode de réalisation, le procédé de préparation de l’invention comprend en outre une étape de centrifugation.
Selon un mode de réalisation, le procédé de préparation de l’invention comprend en outre une étape de désactivation des enzymes avant et/ou après leur introduction dans le mélange faîne de hêtre/eau. Selon un mode de réalisation, la désactivation des enzymes est réalisée par les techniques connues de l’homme du métier ; de préférence, par chauffage et/ou par microondes.
Selon un mode de réalisation, le procédé de préparation de l’extrait de l’invention est réalisé à un pH compris dans une gamme de 4 à 7 ; de préférence, environ égal à 5.
Compositions L’invention concerne également une composition comprenant l’extrait de l’invention en tant qu’actif en cosmétique, en dermocosmétique et/ou actif en nutraceutique. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend au moins un extrait de l’invention en tant qu’actif cosmétique ou dermocosmétique, et au moins un excipient. Avantageusement, l’extrait selon l’invention comprend l’ADN végétal non dénaturé de la faîne de hêtre. Ainsi, l’invention concerne également une composition cosmétique ou dermocosmétique comprenant l’ADN végétal de faîne de hêtre.
Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est une composition cosmétique et comprend un excipient cosmétiquement acceptable. Selon un autre mode de réalisation, la composition de l’invention est une composition dermocosmétique et comprend un excipient dermocosmétiquement acceptable.
Les excipients acceptables et leurs quantités sont ceux classiquement utilisés dans les domaines considérés et bien connus par l’homme du métier.
Selon un mode de réalisation, la composition selon l’invention ne comprend pas de bourgeon de hêtre ou d’extrait de bourgeons de hêtre. Selon un mode de réalisation, la composition selon l’invention ne comprend pas de bourgeon de pin ou d’extrait de bourgeon de pin. Selon un mode de réalisation, la composition selon l’invention ne comprend pas de bourgeon de framboisier ou d’extrait de bourgeon de framboisier. Selon un mode de réalisation, la composition selon l’invention ne comprend pas de bourgeon de cassis ou d’extrait de bourgeon de cassis. Selon un mode de réalisation, la composition ne comprend pas d’extrait de Arctostaphylos uva ursi. Selon un mode de réalisation, la composition ne comprend pas d’extrait de Glycine soja.
Dans un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend une teneur en extrait de l’invention allant de plus de 0 à 10 %, de préférence de 0,01 à 5 %, plus préférentiellement de 0,1 à 3% en poids par rapport au poids total de la composition.
Dans un mode de réalisation, la composition cosmétique ou dermocosmétique de l’invention peut comprendre en outre au moins un actif additionnel, par un exemple un extrait naturel ou un actif cosmétique ou dermocosmétique. Selon un mode de réalisation, la composition ne comprend pas d’association avec une cytokine et/ou une enzyme.
La composition cosmétique ou dermocosmétique selon l’invention peut également contenir les adjuvants habituels dans le domaine de la cosmétique ou de la dermocosmétique tels que les gélifiants, les épaississants, les conservateurs, les solvants, les parfums, les agents chélateurs, les absorbeurs d’odeur, les filtres chimiques ou minéraux, les pigments minéraux, les tensioactifs, les polymères et les matières colorantes. Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés.
Dans un mode de réalisation, la composition cosmétique ou dermocosmétique de l’invention est administrée topiquement sur le visage et le corps. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est avantageusement appliquée sur la peau du visage, c’est-à-dire la peau de la face, du cou, du décolleté et/ou du contour des yeux et sur la peau des mains. Selon un autre mode de réalisation, la composition de l’invention est avantageusement appliquée sur la peau du corps, en particulier de l’abdomen, des cuisses, des hanches, des fesses, des seins, des bras. La composition de l’invention peut alors être sous forme, par exemple, de gel, lait, crème, lotion, émulsion, huile, baume, onguent. L’invention a également pour objet un nutraceutique comprenant un extrait aqueux de faînes de hêtre selon l’invention, ou une composition comprenant un tel extrait. Selon un mode de réalisation, la composition nutraceutique de l’invention est utile pour lutter contre l’oxydation ou les radicaux libres (ROS). Selon un mode de réalisation, le nutraceutique ou la composition nutraceutique selon l’invention est utile pour lutter contre l’inflammation. Selon un mode de réalisation, le nutraceutique ou la composition nutraceutique selon l’invention est utile pour lutter contre l’hyperpigmentation.
Selon un mode de réalisation, le nutraceutique ou la composition nutraceutique de l’invention est sous une forme adaptée connue de l’homme du métier pour une administration par voie orale, parentérale, entérale, de préférence orale, telle que, mais non limitée aux poudres, comprimés sécables ou non, pelliculés ou non, de granules, de capsules, de gélules, d’ampoules. Suivant un mode de réalisation préféré, le nutraceutique selon l’invention est sous forme de comprimé sécable. Suivant un autre mode de réalisation préféré, le nutraceutique selon l’invention est sous forme de comprimé orodispersible.
Utilisations L’invention concerne également Tutilisation d’un extrait ou d’une composition cosmétique, dermocosmétique ou nutraceutique de l’invention.
Antiâge
Le collagène est l’une des principales protéines structurales de la peau produit par les fibroblastes. Ses principales fonctions consistent à (1) fournir à la peau une fermeté mécanique grâce à sa structure rigide en triple-hélice, (2) amortir le tissu conjonctif, et (3) maintenir l’adhésion cellulaire. En particulier, il permet de renforcer et tendre la peau afin de la protéger des stimuli ou contraintes extérieures.
Avec le temps, la dégradation du collagène endogène par les collagénases conduit à (i) une diminution de l’élasticité et la souplesse de la peau, et (ii) à l’apparition de rides. L’invention a pour objet l’utilisation d’extrait de faîne de hêtre ou d’une composition contenant un tel extrait, comme agent antiâge. Dans la présente invention, il est démontré une forte action de l’extrait ou la composition de l’invention sur le collagène cutané. En particulier, selon un mode de réalisation, l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour inhiber l’activité des collagénases.
Selon un mode de réalisation, l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour prévenir et/ou lutter contre le vieillissement cutané. Selon un mode de réalisation, l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour prévenir et/ou lutter contre le photo-vieillissement.
La matrice extracellulaire est structurée par une trame fibreuse faite de faisceau de collagène et de fibres élastiques (notamment fibrilline), en vagues parallèles à la surface de la peau.
Les résultats des essais biologiques réalisés par la Demanderesse montrent que l’extrait de faîne de hêtre de l’invention présente des effets stimulants de la production de procollagène par les fibroblastes, et en particulier stimule la libération de procollagène I par les fibroblastes dermiques : l’extrait selon l’invention est donc utile comme actif cosmétique pour favoriser la synthèse du collagène, en particulier pour tonifier et densifier l’épiderme et/ou le derme. De ce fait, l’extrait ou la composition de l’invention peut être utile comme agent volumateur et/ou tenseur de la peau.
Les résultats des essais biologiques réalisés par la Demanderesse montrent aussi que l’extrait de faîne de hêtre de l’invention présente une action anti-glycation et notamment permet d’inhiber la dégradation de la fibrilline provoquée par la glycation. Ainsi, l’extrait selon l’invention permet de renforcer les fibres élastiques de la matrice extracellulaire.
Ainsi, l’extrait ou la composition de l’invention est utile comme composition anti-âge, notamment pour prévenir et/ou atténuer le vieillissement de la peau et/ou l'apparition des signes de vieillissement de la peau. Les signes de vieillissement de la peau sont notamment les rides et/ou ridules, le relâchement cutané, la perte d'élasticité des fibres cutanées, une peau flétrie, une peau amincie, et une peau terne et/ou sans éclat.
Action anti-inflammatoire, antioxydante et antiradicalaire
Un autre objet de l’invention concerne rutilisation d’un extrait ou d’une composition de l’invention pour ses propriétés anti-inflammatoires. Selon un mode de réalisation, l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour lutter et/ou prévenir l’oxydation de la peau. Selon un mode de réalisation, l’extrait ou la composition de l’invention est utile comme agent anti-radicalaire. Selon un mode de réalisation, l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour ses propriétés anti-oxydantes.
Ainsi, l’extrait ou d’une composition de l’invention pour prévenir ou atténuer les imperfections de la peau telles que les rougeurs ou les cicatrices superficielles. En particulier, l’extrait ou la composition de l’invention est utile comme agent lissant.
Selon un mode de réalisation, l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour réduire et/ou atténuer les cicatrices d’acné. Selon un autre mode de réalisation l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour réduire et/ou atténuer les cicatrices liées à l’âge. Selon un autre mode de réalisation l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour réduire et/ou atténuer les cicatrices liées à une brûlure. Selon un autre mode de réalisation l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour réduire et/ou atténuer les cicatrices liées à une coupure.
Agent éclaircissant de la peau
Selon un mode de réalisation, l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour éclaircir la peau ou pour lutter contre l’hyperpigmentation de zones de la peau, en particulier contre les tâches de pigmentation liées à l’âge.
Restauration des fibres nerveuses
Un autre objet concerne rutilisation d’un extrait ou d’une composition de l’invention pour restaurer les fibres nerveuses de la peau. En particulier, l’extrait ou la composition de l’invention est utile pour favoriser la croissance neuritique.
Un autre objet de l’invention concerne rutilisation d’un extrait ou d’une composition nutraceutique de l’invention en tant qu’agent activateur de la cognition, notamment pour prévenir et diminuer le stress ou les troubles de la mémoire.
Activité antibactérienne
Un autre objet de l’invention concerne rutilisation d’un extrait ou d’une composition de l’invention pour ses propriétés antibactériennes. Méthode de soin L’invention concerne également une méthode de soin cosmétique ou dermocosmétique comprenant l’application d’un extrait ou d’une composition de l’invention à un être vivant.
Dans la présente invention, par « soin cosmétique ou dermocosmétique » on entend un soin non thérapeutique. Par « être vivant », on entend tout mammifère, de préférence, un être humain. Selon un mode de réalisation, l’invention s’adresse aux femmes. Selon un mode de réalisation, l’invention s’adresse aux hommes. Selon un mode de réalisation, l’invention s’adresse aux adultes (personnes de plus de 18 ans). Selon un mode de réalisation, l’invention s’adresse aux adolescents (personnes entre 8 et 18 ans).
Selon un mode de réalisation, l’application est effectuée par voie topique. Selon un mode de réalisation, l’application est effectuée topiquement sur la peau du visage, des mains et/ou du corps, de préférence les zones sensibles visées par Putilisation. Par exemple, l’application peut être réalisée simplement sur la peau ou accompagnée d'un massage de la peau avec la composition de la présente invention. Selon un mode de réalisation, il est recommandé de masser la peau jusqu’à pénétration complète de la composition dans la peau.
Selon un mode de réalisation, la quantité à appliquer de l’extrait ou de la composition de l’invention est suffisante pour que la surface de peau soit totalement couverte par l’extrait ou la composition de l’invention.
Selon un mode de réalisation, la méthode de soin comprend l’application d’un extrait ou d’une composition de l’invention à un être humain par une application quotidienne, hebdomadaire ou mensuelle. Selon un mode de réalisation, l’application est réalisée au moins une fois par jour. Selon un mode de réalisation, la composition est administrée le matin en tant que soin de jour et/ou le soir au coucher en tant que soin de nuit.
Selon un mode de réalisation, la méthode de soin est une méthode de soin pour lutter contre le vieillissement de la peau, comprenant l’application d’un extrait ou d’une composition de l’invention.
Selon un mode de réalisation, la méthode de soin est une méthode de soin antiâge. Selon un mode de réalisation, la méthode de soin est utile pour prévenir la formation de rides et/ou ridules. L’invention concerne également une méthode de soin cosmétique ou dermocosmétique pour lutter contre les imperfections de la peau, comprenant l’application d’un extrait ou d’une composition de l’invention.
Selon un mode de réalisation, la méthode de soin est utile pour prévenir ou atténuer les irritations de la peau telles que les rougeurs de la peau. Selon un mode de réalisation, la méthode de soin est utile pour prévenir ou atténuer les cicatrices superficielles de la peau. L’invention concerne également une méthode de soin cosmétique ou dermocosmétique pour lutter contre l’oxydation cutanée comprenant l’application d’un extrait tel que défini selon l’invention en tant qu’actif, ou d’une composition selon l’invention.
BRÈVE DESCRIPTION DES FIGURES
Figure 1 est un histogramme montrant le pourcentage de réduction des radicaux libres en fonction de la concentration un extrait aqueux de faîne de hêtre dans une composition.
Figure 2 est un cliché de microscopie optique montrant une coupe d’un expiant de peau humain glyquée sans traitement (a) et après traitement avec un extrait aqueux de faîne de hêtre à une concentration de 2 % (b).
EXEMPLES
La présente invention se comprendra mieux à la lecture des exemples suivants qui illustrent non-limitativement l’invention.
Abréviations BSA : albumine de sérum bovin {Bovin Sérum Albumin) g : gramme(s) h : heure(s) L : litre(s) ng : nanogramme(s) PBS : tampon phosphate {Phosphate Bujfered Saline) rpm : tour par minute {Rounds per minute) pg : microgramme
EXEMPLE 1 ; EXTRAITS ET COMPOSITIONS 1.1. Extrait 1 : extraction par hydrolyse enzymatique L’extrait aqueux de l’invention est obtenu selon le protocole suivant.
Dans un réacteur ont été introduits 500g de faîne de hêtre {Fagus Sylvatica), de l’eau et 5% en poids d’un mélange enzymatique un mélange de 1-50 % d’une hémicellulase, d’une cellulase et d’une pectinase, et de 1-100 % d’un mélange de protéases. Le ratio faîne de hêtre/eau est compris dans une gamme de 1 à 1,25.
Le mélange réactionnel est ensuite agité une première fois à une température d’environ 50°C. L’agitation est comprise dans une gamme d’environ 350 à 450 rpm. Le pH de ce mélange est compris dans une gamme d’environ 5,2 à 5,8. Puis une étape de centrifugation est réalisée.
Finalement, une phase aqueuse a été extraite et caractérisée. L’extrait aqueux comprend des polyphénols (environ 2,2 g/L), des sucres (environ 47,6 g/L). L’extrait aqueux est caractérisé par une matière sèche moyenne environ égale à 9,7 %. 1.2. Extrait 2 : Extraction par macération hydro-alcoolique L’extrait aqueux de l’invention est obtenu selon le protocole suivant.
Dans un réacteur ont été introduits 500g de faîne de hêtre (Fagus Sylvatica) et un mélange eau/éthanol (20/80). Le ratio faîne de hêtre/eau est compris dans une gamme de 1 à 1,25.
Le mélange réactionnel est ensuite agité une première fois à une température d’environ 50°C pendant 3 jours. L’agitation est comprise dans une gamme d’environ 350 à 450 rpm.
Finalement, une phase aqueuse a été extraite et caractérisée. L’extrait aqueux comprend des polyphénols (environ 6 g/L) et des sucres (environ 11 g/L). 1.3. Compositions cosmétiques
1.4. Compositions nutraceutiques
Formule comprimé à croquer
Formule comprimé orodispersible
Formules liquides A et B
TESTS BIOLOGIQUES
Dans les tests biologiques, l’extrait utilisé a été l’extrait 1 décrit ci-dessus.
Exemple 2 : Production de procollagène I L’atténuation des effets du vieillissement de la peau nécessitent d’avoir à disposition des actifs aptes à favoriser la restructuration de l’épiderme, i.e. à agir sur les fibroblastes dermiques. En particulier, il est nécessaire d’avoir à disposition des composés actifs capables de stimuler la production de procollagène qui est une protéine largement impliquée dans la tonicité de la peau.
Ces expériences ont donc pour but de montrer qu’un extrait aqueux de faîne de hêtre selon l’invention, permet d’agir efficacement sur la synthèse de procollagène endogène.
Protocole
Les fibroblastes humains normaux (NHDE) ont été ensemencés en plaques 96 puits et cultivés en milieu de culture pendant 24h. Le milieu a ensuite été remplacé par du milieu d’essai contenant : soit un extrait aqueux de faîne de hêtre à une concentration égale à environ 0,2 % ; 0,4 % ou 0,8 % en poids par rapport au poids total du milieu ; soit la référence (vitamine C à une concentration de 20 pg/L).
Puis, les cellules ont été incubées pendant 72h. Après incubation, les surnageants de cultures ont été collectés afin de doser les quantités de procollagène I sécrétées (Tableau 1).
Un essai témoin a été réalisé avec du milieu d’essai sans aucun composé (témoin). Résultats
Les résultats sont présentés dans le Tableau 1.
Tableau 1. Effets des composés sur la synthèse de procollagène I par les fibroblastes. Essai avec la référence (contrôle positif)
Ce traitement a fortement stimulé la production de procollagène I en comparaison par rapport au témoin et a permis de valider les conditions expérimentales.
Essai avec l’extrait de faîne de hêtre
Les résultats montrent que l’extrait de faîne de hêtre de l’invention présente des effets stimulants sur la libération de procollagène I par les fibroblastes dermiques.
En conclusion, l’extrait aqueux de faîne de hêtre peut être utilisé comme actif cosmétique pour redensifier et retonifier la peau.
Exemple 3 : Action anti-radicalaire - Test DPPH
Le but de ces expériences est de montrer que les extraits aqueux de faîne de hêtre (Fagus Sylvatica) permettent de protéger ou de rétablir la communication entre les neurones et les fibroblastes.
Le vieillissement des neurones est un des facteurs du vieillissement de la peau. Au cours du temps, la senescence des neurones réduit la communication des fibroblastes et provoque une forte diminution de la synthèse de collagène et d’élastine. Ainsi, la peau devient de moins en moins élastique et tonique : les effets du vieillissement (tels que des rides) apparaissent. L’augmentation des radicaux libres contribue au vieillissement des neurones. Par conséquent, un des moyens de lutter contre le vieillissement des cellules est de diminuer la formation de ces radicaux libres.
Principe
Le potentiel anti-radicalaire d’une substance peut être testé à l’aide d’une méthode colorimétrique appelée test DPPH, en utilisant des radicaux de substitution tels que le radical l,l-diphényle-2-picrylhydrazil appelé DPPH. A température ambiante et en solution, le radical DPPH présente une coloration violette intense. Son passage à la forme non radicalaire, après saturation de ses couches électroniques s’accompagne d’une disparition de cette coloration suivant l’équation suivante :
La diminution de l’intensité de la coloration d’une solution contenant le radical DPPH, appelée solution de DPPH, est suivie par mesure colorimétrique à 517 nm. Elle permet de se rendre compte de la capacité de piégeage des composés étudiés par rapport à celle du DPPH°. La diminution de l’absorbance met ainsi en évidence les propriétés anti-radicalaires des composés étudiés.
Protocole
Un volume de ΙΟΟμΙ d’extrait aqueux de faînes de hêtre Fagus Sylvatica ou de solution témoin est déposé dans une microplaque de 96 puits. 200μ1 d’une solution de DPPH ajusté à une densité optique comprise entre 0.7 et 0.8 sont ajoutés. Après agitation et incubation pendant 30 min à température ambiante et à l’abri de la lumière, l’absorbance de la solution est mesurée à 517 nm. Chaque échantillon est préparé en triplicat et le résultat correspond à la moyenne des trois valeurs mesurées. Résultats
Les résultats (Figure 1) montrent que plus la concentration en extrait de faîne de hêtre est élevée et plus le nombre de radicaux libres est diminué.
En conclusion, l’extrait de faîne de hêtre présente une activité anti-oxydante.
Exemple 4 : Action anti-oxydante - test ORAC
Le but de ces expériences est de monter que les extraits aqueux de faîne de hêtre (Fagus Sylvatica) ont une activité anti-oxydante.
Principe
Le potentiel antioxydant de l’extrait de l’invention a été testé à l’aide de la méthode de dosage ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity). Ce dosage est basé sur l’oxydation d’une sonde fluorescente.
Dans ce test, les radicaux libres présents dans l’échantillon réagissent avec une sonde fluorescente ce qui a pour conséquence de diminuer son intensité. Plus le nombre de radicaux est élevé dans l’échantillon, plus l’intensité de la sonde est faible. L’ajout d’un composé antioxydant dans l’échantillon permet d’absorber les radicaux libres et donc, permet de prolonger la durée de fluorescence de la sonde.
Pour déterminer si un composé présente une activité anti-oxydante, on compare la fluorescence de la sonde obtenue avec le composé d’intérêt, et la fluorescence obtenue avec un antioxydant de référence. Si le composé présente une activité antioxydante, son activité est donnée en mol d’équivalent de la référence par gramme de masse sèche du composé d’intérêt.
Protocole
Dans cette étude, la référence est le Trolox® (ou acide 6-hydroxy-2,5,7,8-tétraméthylchromane-2-carboxylique) et la sonde fluorescente est la fluorescéine.
Une solution témoin (T) a été réalisée par dissolution de Trolox® dans un tampon phosphate à pH=7,4. La concentration en Trolox® dans la solution témoin est de 1 mM.
La solution à analyser (S) est une solution comprenant l’extrait de l’invention tel que décrit précédemment. Cette solution est réalisée dans un tampon phosphate à pH=7,4.
La fluorescence de la sonde a été mesurée au cours du temps pour chacune des solutions (S) et (T). Résultats
Le dosage ORAC a permis de mettre en évidence une activité anti-oxydante de l’extrait aqueux de faîne de hêtre (433 pmol de Trolox®/g de masse sèche).
Exemple 5 : Activation de la neuritogenèse par un extrait de l’invention
De récentes études (Lebonvallet et al., « Effects of the re-innervation of organotypic skin expiants on the epidermis » Experimental Dermatology, 2011, 21, 154-160.) ont montré que le vieillissement des neurones entraîne un vieillissement cutané via une diminution de la communication entre les neurites (fibres nerveuses de la peau) et les fibroblastes (cellules résidentes du derme qui assurent la cohérence et la souplesse de la peau).
En agissant sur le développement des neurites, il est donc possible de prévenir et/ou lutter contre les effets du vieillissement cutané.
Le but de ces expériences est de monter que les extraits aqueux de faîne de hêtre (Fagus Sylvatica) permettent de restaurer le développement neuritique (neuritogenèse).
Protocole L’étude a été menée in vitro sur des neurones cultivés dans des boîtes de culture de 96 puits. Le milieu de culture est supplémenté par DMEM -Ham/F12 et contient ou non l’extrait aqueux de faîne de hêtre à une concentration de 0,01 % ou 0,03 %.
Les neurones sont issus de cortex de souris. Les cellules sont incubées pendant 72h. Toutes les expériences ont été réalisées trois fois.
Après incubation, une solution de MTT( bromure de 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyl tétrazolium) est ajoutée au milieu de culture et après agitation les cellules sont incubées 10 min.
Le milieu est alors remplacé par du PBS (tampon phosphate) et une acquisition photographique est réalisée sur chacune des conditions testées.
Une analyse d’image semi-manuelle est effectuée afin de quantifier la longueur totale des neurites. Le pourcentage d’activation de la neuritogenèse a été évalué pour chaque solution. Résultats
Une augmentation de 74% du développement neuritique a été observée avec la solution comprenant 0,01 % d’extrait aqueux de faîne de hêtre.
Une augmentation de 55 % du développement neuritique a été observée avec la solution comprenant 0,03 % d’extrait aqueux de faîne de hêtre.
En conclusion, l’extrait de faîne de hêtre permet de réactiver la neuritogenèse et donc de restaurer la densité des fibres nerveuses cutanées.
Exemple 6 : Protection de la fibrilline I contre la glycation par un extrait de l’invention
La fibrilline est une glycoprotéine. Elle est le principal composant des microfibres de la matrice extracellulaire du derme et participe à la formation des fibres élastiques. En évitant la dégradation de la fibrilline, il est possible de réduire fortement l’apparition des effets du vieillissement.
Le but de ces expériences est de montrer que les extraits aqueux de faîne de hêtre permettent d’inhiber la dégradation de la fibrilline I provoquée par la glycation.
Protocole L’étude a été réalisée sur des expiants humains pendant 9 jours.
Divers lots ont été analysés : lot T : lot témoin. lot MG : lot traité par du méthylglyoxal à une concentration de 500 pM ; et lot E-MG : lot traité par un extrait de faîne de hêtre à une concentration de 2 % et du méthylglyoxal à une concentration de 500 pM. L’immunomarquage de la fibrilline a été réalisé sur coupes congelées avec un anticorps monoclonal de souris anti-fibrilline humaine dilué au l/500ème dans du PBS-BSA 0,3 %-Tween 20 0,5 % pendant 1 heure à température ambiante avec un système amplificateur biotine/streptavidine et révélé par l’isocyanate de fluorescéine (FITC).
Les noyaux ont été contre colorés à l’iodure de propidium. La coloration a été évaluée par un examen microscopique.
Les observations microscopiques ont été réalisées en microscopie optique, à l’aide d’un microscope Leica type DMLB ou Olympus BX43. Les prises de vue ont été réalisées avec une caméra Olympus DP72 et le logiciel Cell^D. Résultats
Les résultats montrent qu’après 9 jours, et comparativement au lot témoin à JO : - l’expression de la fibrilline est diminuée pour le lot MG ; - l’expression de la fibrilline est augmentée pour le lot E-MG.
Des observations en microscopie ont également été réalisées sur le lot MG et le lot E-MG (Figure 2).
Les résultats montrent que : pour le lot glyqué (Figure 2a) le réseau de collagène est parsemé ; pour le lot traité par l’extrait de l’invention à une concentration de 2%, une réactivation de la production de collagène a été obtenue (Figure 2b).
En conclusion, l’extrait de faîne de hêtre de l’invention permet (1) d’inhiber la dégradation de la fibrilline induite par le méthylglyoxal et (2) d’agir sur la réactivation de la production de collagène endogène.
Exemple 7 : Activité anti-inflammatoire d’un extrait selon l’invention L’objectif de ce test est de montrer qu’un extrait aqueux de faîne de hêtre selon l’invention a des propriétés anti-inflammatoires ; en particulier, en inhibant les marqueurs de l’inflammation IL-6 et IL-8.
Protocole
Les kératinocytes épidermiques humains normaux (NHEK) ont été ensemencés en plaques 96 puits et cultivés en milieu de culture pendant 24h. Les cellules ont ensuite été traitées en milieu de culture pendant 24h. Le milieu a ensuite été remplacé par du milieu d’essai contenant :
Soit un extrait aqueux de faîne de hêtre à une concentration égale à environ 0,5 % ; 1 % ou 2 % en poids par rapport au poids total du milieu ; soit la référence (bafilomycine à une concentration de 100 nM).
Après une pré-incubation le milieu a été remplacé par du milieu de culture contenant ou non (témoin stimulé) l’extrait de faîne de hêtre ou la référence, et contenant l’inducteur d’inflammation (Poly(I :C) à 1 pg/ml). Puis, les cellules ont été incubées pendant 24h. Un essai a été mené en parallèle sans inducteur (témoin non stimulé).
Après incubation, les surnageants de cultures ont été collectés afin de doser par le dosage ELISA les quantités d’IL-6 et d’IL-8 sécrétées. Résultats
Les résultats sont présentés dans les Tableaux 2 et 3.
Tableau 2. Effets des composés sur la libération d’lL-6 par des kératinocytes stimulés par du Poly (LC). *ns : non significatif.
Tableau 3. Effets des composés sur la libération d’lL-8 par des kératinocytes stimulés par du Polv (I:C). *ns : non significatif.
Les résultats montrent que : dans des conditions basales (témoin stimulé), les kératinocytes ont libéré un taux très faible d’IL-6 et d’IL-8.
Cette libération de cytokines a été fortement augmentée par le traitement avec du Poly (I:C). La référence bafilomycine (testée à 100 nM) a complètement et significativement inhibé l’effet stimulant du poly (I:C) (100 % d’inhibition). Ces lots témoins et référence ont permis de valider les conditions de l’étude.
Dans les conditions expérimentales du test, l’extrait de faîne de hêtre à 0,08 % a fortement inhiber la production d’IL-6 et d’IL-8 par les NHEK stimulés par le Poly (I:C).
En conclusion, l’extrait aqueux de faîne de hêtre présente des propriétés antiinflammatoires et apaisantes.
Exemple 8 : Activité antibactérienne d’un extrait selon l’invention L’objectif de ce test est de montrer qu’un extrait de faîne de hêtre selon l’invention a des propriétés antibactériennes.
Protocole L’extrait de l’invention a été étudié vis-à-vis de diverses souches bactériennes référencées ATCC « American Type Culture Collection ». Les microorganismes ont été ensemencés avec un inoculum de 10^ à 10^ bactéries sur gélose Mueller Hinton. Dans le cas des fungi, le milieu de culture a été remplacé par du milieu Sabouraud. Les concentrations ont été mesurées après 24h d’incubation à 37°C.
Le tableau 4 présente la concentration antibiotique maximale (extrait de l’invention) pour inhiber l’activité de la bactérie cible.
Tableau 4. Concentrations antibiotiques maximales (CMI) pour inhiber l’activité de la bactérie cible.
Les résultats montrent que l’extrait de l’invention utilisé comme antibiotique a une activité sur des souches bactériennes.
En conclusion, l’extrait de faîne de hêtre de l’invention a des propriétés antibactériennes.
Exemple 9 : Activité dépigmentante d’un extrait selon l’invention
Le but est de montrer qu’un extrait de faîne de hêtre selon l’invention a des propriétés antibactériennes.
Principe
La tyrosinase est une enzyme clé qui catalyse les deux premières étapes de la voie de synthèse de la mélanine. L’activité de cette enzyme peut être déterminée par mesure de l’oxydation de la L-DOPA (L-3,4-dihydroxyphenylalanine) en dopachrome, un intermédiaire de synthèse de la mélanine, en utilisant une tyrosinase de champignon. Une inhibition de la production de dopachrome correspond donc à une inhibition de la tyrosinase et à une inhibition de la synthèse de mélanine.
Protocole
Matériel
Tyrosinase from Mushroom > 1000 U/mg (ref Sigma T3824)
Tampon Phosphate de sodium pH 7.2 (ref Sigma 32048)
Tyrosine (ref Sigma T2900000)
Acide kojique (ref Sigma K3125) Méthode L’extrait est dilué dans du tampon phosphate de sodium pH 7.2 (dilutions finales 1/2.5 à 1/160) puis est incubé avec la tyrosinase (9 U/puits) pendant 5 minutes à 35°C dans des plaques 96 puits. La tyrosine (2 mM) est ensuite ajoutée au mélange et la réaction est suivie par lecture de la DO à 492 nm pendant 5 minutes (apparition du dopachrome) à l'aide d'un spectrophotomètre à lecteur de microplaques (Optima Fluostar, BMG Labtech). Un témoin négatif est réalisé sans addition d'extrait (tampon) et un témoin positif (acide kojique) est également testé.
Le calcul du pourcentage d’inhibition de l'activité tyrosinase par les extraits est effectué en rapportant la DO de l'extrait à la DO du témoin négatif (sans extrait). La dilution de l'extrait qui inhibe 50 % de l'activité tyrosinase (IC50) est calculée à partir des équations des courbes dose-réponse. Résultats
Le calcul de la concentration de l’extrait qui inhibe 50% de l’activité tyrosinase est obtenu à partir de l’équation de la courbe présentée dans la Figure 6. Cette équation est : y = 21.0 ln(x)-I- 126.72. L’extrait de l’invention présente une IC50 pour l’activité tyrosinase de 2.6 %, soit une dilution de 1/38.7. L’extrait présente donc une activité anti-tyrosinase et par conséquent une activité inhibitrice de la synthèse de la mélanine.
Exemple 10 : Activité inhibitrice d’un extrait selon l’invention sur la collagénase Principe
Ce test permet de déterminer l’activité enzymatique de la collagénase, enzyme dégradant les liaisons peptidiques du collagène.
Le collagène est une protéine qui a pour fonction de conférer aux tissus une résistance mécanique à l'étirement, il est notamment indispensable aux processus de cicatrisation. Π existe plusieurs type de collagène, chacun possède une structure propre et se retrouve dans des organes particuliers (le collagène de type I intervient dans la formation de la peau, des tendons, des os... le type III se retrouve au niveau du système cardiovasculaire).
Le test se base sur la dégradation par la collagénase d’un substrat (N-[3-(2-Luryl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala ou LALGPA) qui absorbe à 345 nm. La diminution de l’absorbance correspond donc à la dégradation du substrat, elle peut être empêchée ou ralentie en présence d’inhibiteur. Des inhibiteurs connus de la collagénase sont les tanins. L’acide tannique sert donc de contrôle positif.
Protocole
Le test est réalisé en plaque 96 puits. 5 pL d’échantillon, soit l’extrait selon l’invention à tester, soit l’acide tannique utilisé comme témoin positif à une concentration de 75 pg/mL, sont mélangés à 5 pL de collagénase à 10 U/mL (Sigma, C6885), dans un volume de 50 pL de tampon tricine 50 mM. Après une incubation de 5 min à température ambiante, le substrat LALGPA est ajouté au mélange réactionnel (90 pL à 0.25 mM, Sigma, L5135). Une cinétique de 40 min est alors démarrée, avec une lecture à 325 nm toutes les 5 min. Résultats L’extrait selon l’invention présente une activité inhibitrice de la collagénase. En effet, l’extrait selon l’invention à 5% présente une activité inhibitrice de la collagénase de 50%. L’extrait de l’invention présente donc une activité inhibitrice de la collagénase significative.

Claims (13)

  1. REVENDICATIONS
    1. Extrait aqueux de faîne de hêtre.
  2. 2. Extrait aqueux selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit hêtre est de la famille des Fagus ; de préférence, de la famille des Fagus Sylvatica.
  3. 3. Composition comprenant un extrait aqueux de faîne de hêtre selon l’une des revendications 1 ou 2, en association avec au moins un excipient acceptable.
  4. 4. Composition selon la revendication 3, caractérisée en ce que la composition comprend de plus de 0 à 10%, de préférence de 0,01 à 5%, plus préférentiellement, de 0,1 à 3%, en poids par rapport au poids total de ladite composition, d’extrait aqueux de faîne de hêtre selon l’une des revendications 1 ou 2.
  5. 5. Composition selon l’une des revendications 3 ou 4, caractérisée en ce que l’excipient est cosmétiquement acceptable et que la composition est sous forme de gel, lait, crème, lotion, émulsion, huile, baume ou onguent.
  6. 6. Composition selon l’une des revendications 3 ou 4, caractérisée en ce que l’excipient est nutraceutiquement acceptable et que la composition est sous forme solide, liquide ou gel, notamment sous forme poudre, comprimé sécable ou non, pelliculé ou non, sous forme orodispersible, ou encore sous forme de granule, de capsule, de gélule, d’ampoule.
  7. 7. Actif cosmétique ou dermocosmétique caractérisé en ce qu’il comprend un extrait selon l’une des revendications 1 ou 2, ou une composition selon l’une quelconque des revendications 3 à 6.
  8. 8. Actif nutraceutique, caractérisé en ce qu’il comprend un extrait aqueux de faîne de hêtre selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2, ou une composition selon l’une quelconque des revendications 3 à 6.
  9. 9. Utilisation d’un extrait de faîne de hêtre selon l’une des revendications 1 ou 2, d’une composition selon l’une quelconque des revendications 4 à 6 ou d’un actif selon l’une des revendications 7 ou 8, en tant qu’agent antiâge et/ou agent lissant de la peau, notamment pour prévenir et/ou atténuer le vieillissement de la peau et/ou l'apparition des signes de vieillissement de la peau, que sont notamment les rides et/ou ridules, le relâchement cutané, la perte d'élasticité des fibres cutanées, une peau flétrie, une peau amincie, et une peau terne et/ou sans éclat.
  10. 10. Utilisation d’un extrait de faîne de hêtre selon l’une des revendications 1 ou 2, d’une composition selon l’une quelconque des revendications 4 à 6 ou d’un actif selon l’une des revendications 7 ou 8, pour la préparation d’une composition pharmaceutique pour prévenir et atténuer les inflammations, les rougeurs ou les cicatrices superficielles de la peau.
  11. 11. Utilisation d’un extrait de faîne de hêtre selon l’une des revendications 1 ou 2, d’une composition selon l’une quelconque des revendications 4 à 6 ou d’un actif selon l’une des revendications 7 ou 8, en tant qu’agent apaisant.
  12. 12. Utilisation d’un extrait de faîne de hêtre selon l’une des revendications 1 ou 2, d’une composition selon l’une quelconque des revendications 4 à 6 ou d’un actif selon l’une des revendications 7 ou 8, en tant qu’agent éclaircissant de la peau, notamment des peaux ethniques, ou pour lutter contre l’hyperpigmentation de zones de la peau, en particulier contre les tâches de pigmentation liées à l’âge.
  13. 13. Méthode de soin cosmétique comprenant l’application d’un extrait de faîne de hêtre selon l’une des revendications 1 ou 2, d’une composition selon l’une quelconque des revendications 4 à 6 ou d’un actif selon l’une des revendications 7 ou 8.
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