FR2918571A1

FR2918571A1 - Compositions antibiotiques a base d'huiles essentielles prophylaxie et traitement d'infections nosocomiales

Info

Publication number: FR2918571A1
Application number: FR0704991A
Authority: FR
Inventors: Elisabeth Marie Ange Yvette Rossines; Gerard Panhelleux
Original assignee: Aroma Technologies SAS
Current assignee: Aroma Technologies SAS
Priority date: 2007-07-10
Filing date: 2007-07-10
Publication date: 2009-01-16
Anticipated expiration: 2027-07-10
Also published as: EP2175870A1; FR2918571B1; WO2009043987A9; WO2009043987A1

Abstract

L'invention objet de la présente demande concerne une nouvelle composition antibiotique, de nouvelles associations médicamenteuses et de nouvelles formulations à base d'huile(s) essentielle(s), ainsi que leur utilisation pour la prophylaxie et/ou le traitement d'infections en général et d'infections bactériennes nosocomiales en particulier. L'invention a également pour objet une méthode pour diminuer le nombre de bactéries présentes sur une surface. L'invention a également pour objet une méthode pour prévenir ou traiter une infection bactérienne, en particulier une infection nosocomiale, chez un mammifère en particulier chez un humain, ladite méthode comprenant (i) l'administration d'au moins un antibiotique et (ii) l'administration d'au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s). Les composés (i) et (ii) peuvent être administrés simultanément (sous la forme d'un mélange ou, alternativement, sous la forme de formulations distinctes) et/ou séparément dans le temps.

Description

COMPOSITIONS ANTIBIOTIQUES A BASE D'HUILES ESSENTIELLES - PROPHYLAXIE ET

TRAITEMENT D'INFECTIONS NOSOCOMIALES

La présente invention concerne une nouvelle composition antibiotique, une nouvelle combinaison médicamenteuse et un kit, qui comprennent ou consistent en (i) au moins un antibiotique et (ii) au moins une formulation d'huiles essentielles, ainsi que des formulations à base d'huiles essentielles. Lesdites composition antibiotique, combinaison et formulations d'huiles essentielles et ledit kit selon l'invention peuvent être utilisés pour la prophylaxie et/ou le traitement d'infections en général et d'infection bactériennes en particulier. La présente demande a également pour objet une méthode pour diminuer le nombre de bactéries présentes sur une surface, ainsi qu'une méthode pour prévenir ou traiter une infection bactérienne, en particulier une infection nosocomiale, chez un mammifère, en particulier chez un humain. L'émergence d'infections nosocomiales de plus en plus virulentes et résistantes est devenue particulièrement préoccupante. Ainsi, en France, les infections nosocomiales touchent chaque année entre 700 000 et 1 million de personnes ; environ 6,9% des patients admis à l'hôpital en France et environ 8 à 10% des patients admis à l'hôpital dans d'autres pays Européens sont victimes d'une ou plusieurs infection(s) nosocomiale(s), ce qui se traduit directement par 4200 décès en France et 50 000 décès en Europe chaque année. Aux Etats-Unis, on estime qu'environ 10% des patients hospitalisés contractent une infection nosocomiale, soit 2 millions-de patients par an. En moyenne, ces infections prolongent l'hospitalisation de 4 à 5 jours. La surconsommation d'antibiotiques et, en particulier, d'antibactériens, est la cause principale des infections nosocomiales; la généralisation de l'utilisation des antibiotiques, en particulier dans les hôpitaux, crée une pression de sélection qui favorise la sélection de souches de bactéries résistantes à certains antibiotiques, et contribue à l'émergence de souches hospitalières multirésistantes, qui peuvent se transmettre d'un patient à l'autre. Ce phénomène a atteint une telle ampleur que certaines maladies, qui étaient initialement traitées avec succès avec des antibiotiques, deviennent incurables. Ainsi, la majorité des familles d'antibiotiques ont atteints leurs limites d'activités et, selon l'organisation mondiale de la santé, certains antibiotiques disponibles pourraient ne plus être efficaces d'ici dix ans. Outre le fait que l'efficacité des traitements antibiotiques proposés est de plus en plus limitée, certains traitements antibiotiques s'accompagnent d'effets indésirables dits secondaires, tels que des troubles gastro-intestinaux, une irritation au site d'infection, un rash, une fièvre, des convulsions, des troubles hémodynamiques (leucopénies, neutropénie, éosinophilie), ou une élévation des enzymes hépatiques.

Ainsi, certains antibiotiques, en raison de leurs effets toxiques, risquent d'aggraver des problèmes préexistants (tels qu'une insuffisance rénale, une insuffisance hépatique ou une immunosuppression) chez certains patients. Ces effets secondaires peuvent même conduire à réduire les concentrations d'antibiotiques utilisées, parfois au détriment de leur activité antimicrobienne. La lutte contre les infections nosocomiales est une bataille essentielle compte tenu du taux de mortalité, de la souffrance des patients, de l'augmentation de la durée d'hospitalisation et des traitements, de l'invalidité, des séquelles et des coûts engendrés par ces infections. Par conséquent, le développement de nouveaux traitements antibiotiques et, en-particulier, de traitements efficaces contre les infections nosocomiales, constitue un enjeu majeur. Les huiles essentielles sont des composés aromatiques volatiles que l'on trouve dans différentes parties d'une plante, en particulier dans les graines, les racines, l'écorce, la tige, les feuilles, le calice ou les fleurs. Elle sont généralement produites et emmagasinées dans les cellules sécrétoires, les glandes, les poils glandulaires et les conduits résineux. Elles peuvent être obtenues à partir de plantes de différentes façons, en particulier par compression, distillation à la vapeur d'eau, extraction (par exemple en utilisant des solvants ou du dioxyde de carbone supercritique), absorption, ou encore par pression (en particulier pression à froid) et macération. Les compositions chimiques des huiles essentielles diffèrent en fonction du type de plante et de la partie de la plante dont elles dérivent et du lieu géographique, de l'altitude et de l'exposition zénithale. De nombreuses huiles essentielles sont des terpènes, c'est-à-dire des composés constitués de carbone et d'hydrogène. D'autres huiles essentielles contiennent des terpénoïdes : aldéhydes, des cétones ou des phénols. D'autres encore peuvent contenir de l'oxygène, du souffre ou de l'azote. En général, les huiles essentielles sont des mélanges moléculaires complexes. En raison de leurs propriétés, en particulier leurs propriétés aromatiques et antimicrobiennes, les huiles essentielles ont été largement utilisées en cosmétique, en médecine et comme aromatisant. Ainsi, le brevet US 5,716,928 décrit l'utilisation d'huiles essentielles pour augmenter la biodisponibilité de composés pharmaceutiques hydrophobes administrés par voie orale. A cet égard, les huiles essentielles ont permis d'accroître la biodisponibilité en inhibant le métabolisme de substances actives par le cytochrome P450 et/ou en augmentant l'absorption nette à travers la paroi intestinale en inhibant le transport de substances actives par la P-glycoprotéine (P-gp). Le brevet Américain US 7,192,575 B2 décrit une composition antimicrobienne comprenant de l'huile essentielle de clou de girofle, de l'huile d'eucalyptus, de l'huile de lavande, de l'huile de Melaleuca (ou huile de théier), et de l'huile d'orange, pour traiter des animaux de ferme et du bétail et qui peut être utilisée comme inhibiteur de la croissance microbienne sur des récoltes, des plantes ou d'autres produits alimentaires.

La demande de brevet KR20040072459 décrit une composition antibiotique qui contient un mélange de 10 à 60% en volume d'huile essentielle d'eucalyptus globulus et de 40 à 90% en volume de deux huiles essentielles ou plus choisies parmi les huiles essentielles de radis noir, de cinnamomum Cassia Presl., d'ail et de Eugenia caryophyllata Thunb. Cette composition antibiotique est décrite comme inhibant les bactéries du genre Bad/lus et les champignons. Bien que l'art antérieur décrive l'utilisation de différentes huiles essentielles dans différentes applications médicinales, l'utilisation conjointe d'une formulation d'huile(s) essentielle(s) et d'un antibiotique, en particulier pour traiter des infections bactériennes telles que des infections nosocomiales, n'a jamais été décrite dans l'état de la technique. De même, rien ne suggérait que la mise en oeuvre d'huiles essentielles permettrait d'améliorer l'effet des antibiotiques et pourrait même agir en synergie avec les antibiotiques, permettant ainsi de lutter contre l'antibiorésistance et même de réduire les quantités d'antibiotiques utilisées. La présente invention apporte une contribution majeure à la lutte contre les infections en général et les infections nosocomiales en particulier.

Un premier objet de la présente invention est de proposer une alternative aux traitements antibiotiques classiques et de nouvelles stratégies thérapeutiques pour palier à l'épuisement des traitements antibiotiques. Un autre objet de l'invention est de fournir de nouvelles formulations d'huile(s) essentielle(s). La présente invention est également destinée à améliorer l'efficacité des traitements antibiotiques existants. Un autre objet de l'invention est de proposer de nouvelles associations médicamenteuse et de nouvelles méthodes de traitement permettant d'utiliser des quantités réduites d'antibiotiques et, par conséquent, de réduire les effets secondaires induits par les traitements avec certains antibiotiques. La présente invention vise également à réduire le taux de bactéries multirésistantes hospitalières et la fréquence des infections nosocomiales dans les hôpitaux et autres établissements de santé. Enfin, la présente invention est en outre destinée à augmenter les chances de survie et de guérison des patients contractant une infection nosocomiale, à limiter, voire supprimer, les séquelles chez ces patients et/ou à diminuer les durées d'hospitalisation.

Selon un premier aspect, la présente invention propose une composition antibiotique comprenant, consistant essentiellement en, ou consistant en : (i) au moins un antibiotique et (ii) au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s).

Un second aspect de l'invention concerne une combinaison comprenant, consistant essentiellement en, ou consistant en : (i) au moins un antibiotique et (ii) au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s), dans laquelle les composés (i) et (ii) sont sous forme juxtaposée ( kit-of- parts ). Les composés (i) et (ii) de cette composition peuvent être administrés simultanément (sous la forme d'un mélange ou, alternativement, sous la forme de formulations ou compositions distinctes) et/ou séquentiellement, séparément dans le temps. La présente invention concerne également un kit comprenant, consistant essentiellement en, ou consistant en : (i) au moins un antibiotique et (ii) au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s). Les composés (i) et (ii) de ce kit peuvent être administrés simultanément et/ou séparément dans le temps.

Selon un autre aspect, la présente invention propose également une formulation d'huiles essentielles comprenant, consistant essentiellement en, ou consistant en les huiles essentielles suivantes : (i) de l'huile essentielle d'origan, de l'huile essentielle de thym, de l'huile essentielle de clou de girofle, de l'huile essentielle de sarriette, de l'huile essentielle de ravintsara, de l'huile essentielle de laurier feuille, de l'huile essentielle de pin sylvestre et de l'huile essentielle de cajeput ; ou (ii) de l'huile essentielle d'origan, de huile essentielle de feuilles de girofle et de l'huile essentielle de cannelle. La composition antibiotique, la combinaison, le kit et la formulation d'huiles essentielles selon l'invention sont notamment destinés à une utilisation comme médicament, en particulier comme antibiotique. Plus précisément, ils peuvent être utilisés pour la prophylaxie et/ou le traitement d'une infection bactérienne, en particulier d'une infection bactérienne nosocomiale, chez un mammifère ou un humain. Un autre aspect de la présente invention concerne l'utilisation d'une formulation d'huile(s) essentielle(s) pour la fabrication d'un médicament destiné à potentialiser un effet prophylactique ou thérapeutique d'un ou plusieurs antibiotique(s), pour la prophylaxie et/ou le traitement d'une infection bactérienne, en particulier d'un infection nosocomiale, chez un mammifère et en particulier chez un humain. Selon un autre aspect, la présente invention concerne également l'utilisation d'une formulation d'huile(s) essentielle(s), ou l'utilisation d'une composition antibiotique, d'une combinaison ou d'un kit selon l'invention,: pour diminuer la quantité d'antibiotique utilisée pour la fabrication d'un médicament destiné à la prophylaxie et/ou au traitement d'une infection, en particulier d'une infection bactérienne, et plus particulièrement d'une infection nosocomiale, chez un mammifère et en particulier chez un humain.

Selon autre aspect, la présente invention propose une méthode pour diminuer le nombre de bactéries présentes sur une surface, ladite méthode comprenant la mise en contact de ladite surface avec une formulation d'huile(s) essentielle(s).

Selon un autre aspect, la présente invention concerne une méthode pour prévenir ou traiter une infection, en particulier une infection bactérienne, chez un mammifère nécessitant un tel traitement, ladite méthode comprenant ou consistant en l'administration d'une formulation d'huile(s) essentielle(s) à un mammifère, en particulier un humain, et par laquelle l'infection bactérienne est prévenue ou traitée. Par antibiotique on entend tout composé naturel (tel qu'une substance produite par un micro-organisme), semi synthétique (préparé, par exemple, par modification chimique d'un composé de base naturel), ou complètement synthétique, capable de tuer ou d'inhiber la croissance de microorganismes tels que des champignons ou des bactéries. Ce terme inclut notamment tout agent antibactérien, c'est-à-dire tout composé qui, selon sa nature et sa concentration, a une action bactériostatique et/ou une action bactéricide. Ainsi, un antibiotique au sens de la présente demande est en particulier un agent antibactérien, c'est-à-dire un agent efficace pour prévenir ou traiter une infection bactérienne, notamment chez un humain ou un autre mammifère. Ce terme couvre notamment les antibiotiques de large spectre, c'est-à-dire les antibiotiques qui peuvent être efficace contre une large gamme d'espèces, notamment contre des bactéries gram positives et des bactéries gram négatives.

Le terme antibiotique tel qu'utilisé dans la présente demande-inclut également tout sel pharmaceutiquement acceptable d'un antibiotique (en particulier d'un antibiotique indiqué ci-après), c'est-à-dire tout sel pouvant être utilisé comme sel d'un antibiotique dans l'industrie pharmaceutique. Cela inclut, par exemple, les sels de sodium, de potassium, de calcium, etc. et les sels aminés de procaine, dibenzylamine, éthylendiamine, éthanolamine, méthylglucamine taurine, etc., de même que 2918571- 8 les sels d'addition acide tels que les hydrochlorides et les acides aminés basiques. Un antibiotique a un effet bactériostatique sur une ou plusieurs souche(s) bactérienne(s) lorsqu'il est capable d'inhiber ou, du moins, de 5 réduire la croissance de ladite ou desdites souche(s) bactérienne(s). Un antibiotique a un effet bactéricide sur une ou plusieurs souche(s) bactérienne(s) lorsqu'il est capable de détruire les bactéries ou au moins une partie des bactéries de ladite ou desdites souche(s) bactérienne(s) de façon ciblée. 10 La mise en évidence de l'effet bactériostatique ou bactéricide d'un antibiotique sur une souche bactérienne peut se faire en étudiant la cinétique de croissance de ladite souche bactérienne en présence de concentrations croissantes d'antibiotique. À des intervalles de temps réguliers, le nombre de bactéries présentes dans chaque tube est 15 déterminé par étalement sur un milieu gélosé ne contenant pas d'antibiotique. Après incubation, chaque bactérie viable donne naissance à une colonie, ce qui permet d'apprécier le nombre de bactéries viables contenues dans chaque échantillon. On considère alors que l'antibiotique a une action bactériostatique sur ladite souche bactérienne à une 20 concentration donnée lorsque la croissance bactérienne est affectée (en comparaison à la croissance observée en l'absence de l'antibiotique) mais que le nombre de bactéries viables reste supérieur ou égal au nombre de bactéries ensemencées. Un tel effet résulte soit d'une diminution du nombre de divisions des bactéries sans altération de leur vitalité soit d'un 25 équilibre entre la croissance et la mort des bactéries. L'action de-l'antibiotique est dite bactéricide à une concentration donnée si le nombre de bactéries viables est inférieur au nombre de bactéries ensemencées. La bactéricidie, la destruction des bactéries sous l'effet de l'antibiotique, augmente plus ou moins rapidement en fonction de la concentration en 30 antibiotique et en fonction du temps de contact. En utilisant des doses très élevées, pratiquement tout antibiotique peut être bactéricide.

L'expression formulation d'huile(s) essentielle(s) telle qu'utilisée dans la présente demande désigne toute composition contenant au moins une huile essentielle (ou essence végétale). Cette formulation comprend généralement plusieurs huiles essentielles différentes, par exemple, un mélange de 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 huiles essentielles différentes, voir plus encore. Cette expression inclut les huiles essentielles d'origine naturelle, c'est-à-dire extraites de plantes, et les huiles essentielles isolées. Le terme mammifère comprend tout animal vertébré à sang chaud de la classe Mammalia, qui inclut les humains, caractérisé par une couche de poils sur la peau et, chez les femelles, des glandes mammaires produisant du lait pour nourrir la progéniture. L'expression combinaison de composés sous forme juxtaposée (ou kit-of-parts ) fait référence à l'association, dans la posologie d'un traitement antibiotique destiné à un mammifère (en particulier à un humain), d'au moins deux composés appropriés pour une utilisation dans un traitement antibiotique (en particulier un traitement antibactérien), chez un mammifère (en particulier un humain): au moins un antibiotique et au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s). Ladite combinaison inclut toute association médicamenteuse, toute composition pharmaceutique, tout kit pharmaceutique, et tout médicament comprenant (i) au moins un antibiotique, en particulier un antibactérien et (ii) au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s). Les composés (i) et (ii) peuvent être présent sous la forme d'un mélange ou sous la forme de formulations ou compositions distinctes dans ladite combinaison. La combinaison peut également comprendre plusieurs antibiotiques, par exemple 2, 3 ou 4 antibiotiques ou-plus, et/ou plusieurs formulations d'huile(s) essentielle(s), en particulier 2 ou 3 formulations ou plus. Ces constituants forment une unité fonctionnelle du fait d'une indication commune, qui est la mise en oeuvre d'un traitement antibiotique. Cette thérapie combinée est plus spécifiquement destinée à la prophylaxie et/ou au traitement d'infections et de maladies d'origine bactérienne, en particulier d'infections aigues ou sévères telles que des infections nosocomiales, chez un mammifère, en particulier chez un humain. Le terme simultanément et l'expression administration simultanée signifient que ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) et ledit ou lesdits antibiotique(s) sont administrés en même temps, au même moment, à un mammifère (en particulier à un humain). Cela ne signifie pas pour autant que ces composés sont nécessairement administrés sous la forme d'un mélange ; ils peuvent en effet être administrés simultanément mais séparément, sous la forme de compositions distinctes. Par présents dans deux compositions distinctes , on entend que ledit ou lesdits antibiotique(s) et ladite ou desdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) sont physiquement séparé(s). Ils sont alors mis en oeuvre, administrés séparément, sans mélange préalable, dans plusieurs (au moins deux) formes posologiques (par exemple deux capsules distinctes). L'expression présents dans une même composition signifie que la combinaison de ladite ou desdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) et dudit ou desdits antibiotique(s) est physique. Le ou les antibiotique(s) et la ou les formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) sont alors nécessairement administrés simultanément puisqu'ils sont administrés ensemble, sous la forme d'un mélange, dans une même forme posologique (par exemple dans une capsule contenant les deux composés). L'expression administration séquentielle signifie que ledit ou un desdits antibiotique(s) et ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) sont administrés non pas simultanément mais séparément dans le temps, l'un après l'autre. Les termes précéder ou précédant et suivre ou suivant s'appliquent alors. Le terme précéder ou précédant est utilisé lorsqu'un composé (ou plusieurs composés) de la combinaison ou du kit selon l'invention est administré quelque minutes ou plusieurs heures, voire 2918571- 11 plusieurs jours avant l'administration du ou des autre(s) composé(s) de la combinaison ou du kit. A l'inverse, le terme suivre ou suivant est utilisé lorsqu'un composé (ou plusieurs composés) de la combinaison ou du kit est 5 administré quelque minutes ou plusieurs heures, voire plusieurs jours après l'administration du ou des autre(s) composé(s) de la combinaison ou du kit. L'expression consiste essentiellement en signifie que d'autres ingrédients ou molécules mineur(e)s peuvent être présents avec les principes actifs expressément listés, sans affecter l'activité desdits 10 principes actifs. Lorsque deux composés d'une composition antibiotique, d'une combinaison ou d'un kit selon l'invention agissent en synergie , cela signifie que ladite composition antibiotique ou combinaison ou ledit kit selon l'invention peut produire un effet prophylactique ou thérapeutique supérieur 15 à la somme des effets individuels de chacun des deux composés de ladite composition antibiotique ou de ladite combinaison ou dudit kit. Le terme véhicule désigne tout support (c'est-à-dire tout ce qui peut transporter au moins un principe actif) qui n'interfère pas avec l'efficacité de l'activité biologique des substances actives (en particulier le 20 ou les antibiotique(s) et le ou les formulation(s) d'huile(s) essentielle(s)). De nombreux véhicules sont connus dans l'état de la technique et leur formulation sous forme de composition pharmaceutique est divulguée dans "Remington's Pharmaceutical Sciences", 18ième édition, Mack Publishing Company, Easton, Pa. 25 Le terme diluant signifie un agent de dilution et inclut les diluants, solubles et les diluants insolubles. On utilise généralement un diluant insoluble quand le principe actif est soluble et un diluant soluble quand le principe actif est insoluble. Un principe actif insoluble peut être totalement insoluble en milieu aqueux ou avoir une solubilité limitée (c'est à 30 dire une solubilité inférieure à 10mg/ml dans 250 ml d'eau à un pH de 1.0 à 7.5) en milieu aqueux.

Une substance ou une combinaison de substances est dite pharmaceutiquement acceptable lorsqu'elle est appropriée pour une administration à un être vivant (par exemple un humain ou, plus généralement, à un mammifère) à des fins thérapeutiques ou prophylactiques. Elle est donc préférentiellement non toxique pour l'hôte auquel elle est administrée. Les termes administration et administrer tels qu'utilisés dans la présente demande incluent toute administration, quelle que soit la voie d'administration choisie. Ils peuvent notamment signifier respectivement application et appliquer , en particulier dans le cas d'une administration locale. Une concentration sub-inhibitrice est une concentration inférieure à la concentration inhibitrice minimale. La concentration inhibitrice minimale (CMI) caractérise l'effet bactériostatique d'un antibiotique ; la CMI d'un antibiotique pour une souche bactérienne donnée est définie comme la concentration la plus faible qui inhibe complètement la croissance de ladite souche dans des conditions standardisées in vitro, par exemple après 18 heures de culture à 37 C. La CMI peut être déterminée en milieu liquide ou en milieu solide.

Une infection bactérienne au sens de la présente invention désigne une infection provoquée par une souche bactérienne telle que définie dans le présente demande et inclut aussi bien les phases les plus précoces de la contamination bactérienne, en particulier la colonisation de l'hôte (par exemple un mammifère, en particulier un humain) par ladite souche bactérienne, que les phases les plus tardives, notamment les-pathologies diverses qui sont la conséquence de la colonisation par ladite souche bactérienne ; une fois qu'une souche bactérienne a colonisé un hôte ou un tissu de l'hôte, sa prolifération a généralement pour conséquence des réactions cellulaires, tissulaires ou générales, qui se traduisent habituellement par un syndrome inflammatoire. L'expression infection bactérienne englobe donc tout effet néfaste, signe clinique, symptôme ou toute maladie apparaissant chez un mammifère et en particulier chez un humain suite à la colonisation dudit mammifère ou dudit patient par une souche bactérienne. Par infection nosocomiale (ou infection hospitalière), on entend une infection contractée à l'hôpital ou qui se développe à l'hôpital, c'est-à-dire qui n'était ni en incubation, ni présente lors de l'admission du patient à l'hôpital. De telles infections se développent généralement 48 heures au moins après l'admission dans un établissement de santé. Le délai d'incubation est très souvent supérieur dans le cas des infections liées à un acte invasif réalisé à l'hôpital. Ainsi, pour les infections du site opératoire, on considère comme nosocomiales les infections survenant dans les 30 jours suivant l'intervention chirurgicale ou, s'il y a mise en place d'un matériel prothétique ou d'un implant, les infections survenant dans l'année qui suit l'intervention. Selon un mode de réalisation particulier, une infection nosocomiale au sens de la présente demande est une infection nosocomiale bactérienne, c'est-à-dire une infection provoquée par des bactéries. Cependant, une infection nosocomiale peut être provoquée par d'autres microorganismes, en particulier par des mycobactéries, des champignons ou des parasites.

Le terme prophylaxie tel qu'utilisé dans la présente demande désigne tout degré de retardement dans le moment d'apparition de signes cliniques ou de symptômes de l'infection, ainsi que tout degré d'inhibition de la sévérité des signes cliniques ou symptômes de l'infection, y compris, mais sans limitation à, la prévention totale de ladite infection. Ceci nécessite qu'une composition antibiotique, une combinaison, un kit ou une-formulation d'huiles essentielles de l'invention soit administré(e) à un mammifère (en particulier un humain) susceptible d'être colonisé par un microorganisme (par exemple une souche bactérienne) à titre préventif, c'est à dire dans le but de prévenir la colonisation par ledit microorganisme ou d'éviter l'apparition de tout signe clinique ou symptôme de l'infection. Cette administration prophylactique peut avoir lieu avant que ledit 2918571- 14 mammifère (en particulier ledit humain), ne soit exposé à un organisme susceptible de provoquer une infection (en particulier une infection nosocomiale) chez ledit mammifère (en particulier chez ledit humain) ou au moment de l'exposition. Une telle administration prophylactique sert à 5 empêcher, améliorer, et/ou réduire la sévérité de n'importe quelle infection subséquente. La définition du terme prophylaxie ci-dessus s'applique également à l'expression prévenir une infection . Le terme traitement au sens de la présente demande implique 10 que les substances actives sont administrées à un mammifère et en particulier à un humain au moment de la colonisation ou après la contamination ou la suspicion de contamination d'un mammifère et, en particulier d'un humain, par un microorganisme (tel qu'une souche bactérienne) susceptible de provoquer une infection telle qu'une infection 15 nosocomiale. Lorsqu'une composition antibiotique, une combinaison, un kit ou une formulation d'huiles essentielles de l'invention est administré(e) après la colonisation par ledit microorganisme ou après une suspicion de contamination, elle peut être administrée pendant la phase asymptomatique et/ou après l'apparition de signes cliniques ou de 20 symptômes de l'infection. Le terme traitement inclut tout effet curatif (destruction du microorganisme) obtenu grâce à une composition antibiotique, une combinaison, un kit ou une formulation d'huiles essentielles de l'invention, ainsi que l'amélioration des signes cliniquesou des symptômes observés 25 chez un mammifère, en particulier chez un humain, de même que-l'amélioration de l'état dudit mammifère. Le terme traitement couvre également le ralentissement, l'interruption, ainsi que l'arrêt de la progression de l'infection. Une composition antibiotique, une combinaison, un kit ou une formulation 30 d'huiles essentielles de l'invention peut en effet également permettre de ralentir la progression d'une souche bactérienne et/ou empêcher 2918571- 15 complètement ou partiellement une infection bactérienne de s'étendre aux tissus environnants et au-delà. Enfin, le terme traitement inclut également l'inhibition, l'atténuation ou la prévention des conséquences néfastes de l'infection 5 telles que les dommages cellulaire ou physiologiques provoqués par les toxines produites par certaines souches bactériennes au niveau des tissus infectés ou avoisinants. Ainsi, le terme traitement s'applique au point d'infection principal et/ou au(x) point(s) d'infection secondaire(s), de même qu'aux symptômes 10 découlant de l'infection. Un traitement au sens de la présente demande n'exige pas nécessairement l'élimination complète de tous les signes cliniques et symptômes de l'infection bactérienne, ni même l'élimination complète de toutes les bactéries ou l'inhibition totale de la croissance de ces bactéries. 15 La définition du terme traitement s'applique également à l'expression traiter une infection . L'expression souche bactérienne ou souche de bactéries telle qu'utilisée dans la présente demande désigne toute souche de bactéries capable de provoquer une infection et, en particulier, toute 20 souche de bactéries potentiellement pathogène pour un mammifère et plus particulièrement pour un être humain. II peut notamment s'agir de bactéries commensales ou de bactéries saprophytes. L'expression souches bactériennes englobe ici les souches de bactéries gram positif et les souches de bactéries gram négatif. Les souches bactériennes selon la 25 présente demande incluent les souches dites sensibles ,- intermédiaires ou résistantes à un antibiotique donné, ainsi que les souches multirésistantes aux antibiotiques ou pan résistantes . La susceptibilité d'une souche bactérienne donnée à un ou plusieurs antibiotiques supposé(s) ou connu(s) peut être notamment déterminée in 30 vitro en réalisant un antibiogramme. Le principe consiste à placer une culture de bactéries en présence du ou des antibiotiques (par exemple en plaçant plusieurs pastilles imbibées d'antibiotiques sur une souche bactérienne mise en culture sur une boîte de Pétri) et à observer les conséquences sur le développement et la survie des bactéries. Sensible signifie qu'une bactérie ou une souche de bactéries peut être tuée ou que sa croissance peut être inhibée par l'antibiotique testé. Intermédiaire signifie que l'antibiotique n'est efficace que dans certaines conditions, à fortes doses, contre ladite souche bactérienne. Résistante signifie que l'antibiotique est inefficace contre ladite souche bactérienne. L'expression Multirésistante aux antibiotiques (ou BMR) s'applique à une bactérie ou une souche de bactéries résistante à tous les antibiotiques testés dans au moins deux classes d'antibiotiques; suite à l'accumulation de résistances naturelles (mutations) et/ou de résistances acquises (notamment par l'acquisition de plasmides), une bactérie ou une souche de bactéries n'est plus sensible qu'à un petit nombre d'antibiotiques habituellement actifs en thérapeutique. Plus spécifique, pan résistante (ou toto résistante ) signifie que la bactérie ou la souche bactérienne est résistante à tous les antibiotiques testés. Une éradication partielle d'une souche bactérienne , signifie que seule une partie des bactéries a été tuée dans l'hôte ou certains tissus infectés de l'hôte. L'éradication d'une souche bactérienne est considérée comme totale lorsqu'il ne reste plus aucune bactérie responsable de l'infection qui soit viable dans le ou les tissus infecté(s) de l'hôte. L'expression potentialiser ou accroître un effet prophylactique ou thérapeutique d'un ou plusieurs antibiotiques signifie que l'utilisation-d'une formulation d'huile essentielle permet d'obtenir un effet prophylactique ou thérapeutique supérieur à l'effet prophylactique ou thérapeutique obtenu en utilisant le ou lesdits antibiotiques seuls ou en combinaison avec d'autres régimes médicamenteux.

L'expression diminuer la quantité d'antibiotique utilisée signifie que l'utilisation d'huiles essentielles permet d'utiliser une quantité d'antibiotique inférieure à la quantité d'antibiotique normalement nécessaire pour obtenir un effet thérapeutique ou prophylactique donné (par exemple pour obtenir une réduction, une inhibition ou un ralentissement de la croissance, ou une éradication partielle ou totale d'une souche bactérienne donnée) lorsque l'antibiotique est administré seul ou en combinaison avec d'autres régimes médicamenteux ne contenant pas d'huiles essentielles. La diminution de la quantité d'antibiotique utilisée peut être plus ou moins importante ; elle est de préférence d'au moins 10%, et plus préférablement d'au moins 20 %, encore plus préférablement d'au moins 40%, voire 50% ou plus. L'expression méthode pour diminuer le nombre de bactéries présentes sur une surface signifie que ladite méthode permet de réduire le nombre de bactéries présentes sur une surface par rapport au nombre de bactérie présentes sur ladite surface avant que celle-ci ne soit mise en contact avec une formulation d'huile(s) essentielle(s). Cette diminution du nombre de bactéries peut être plus ou moins importante ; elle est de préférence d'au moins 10%, et plus préférablement d'au moins 30 %, encore plus préférablement d'au moins 50%, voire 70% ou plus. Elle peut résulter d'une inhibition, d'une diminution ou d'un ralentissement de la croissance des bactéries ou d'une partie des bactéries et/ou de la destruction des bactéries ou d'une partie des bactéries. Dans les cas extrêmes, cette diminution peut correspondre à une éradication totale des bactéries. Le terme surface telle qu'utilisé dans la présente demande désigne aussi bien la surface d'un objet que la surface de la peau d'un-mammifère, et en particulier d'un humain. Ce terme peut désigner la surface externe et/ou la surface interne d'un objet. Le terme objet inclut ici tout objet, en particulier tout objet faisant partie d'un équipement médical et plus partiellement tout objet hospitalier.

Ce terme désigne en particulier tout objet susceptible d'entrer en contact avec un mammifère et en particulier avec un humain.

Une quantité thérapeutiquement efficace de principe actif est une quantité suffisante pour obtenir effet significatif et en particulier apporter un bénéfice significatif à un mammifère et, en particulier, à un patient, dans le cadre d'une application pour la prophylaxie ou le traitement tel que défini dans la présente demande. Une telle quantité peut correspondre à une quantité efficace pour empêcher, inhiber, diminuer ou retarder la croissance d'une souche bactérienne, ou pour tuer au moins une partie des bactéries au site d'infection. Cette expression est également utilisée pour signifier une quantité efficace pour faire disparaître, réduire, ou améliorer toute infection existante provoquée par une souche bactérienne. Une quantité thérapeutiquement efficace est également une quantité pour laquelle les effets bénéfiques l'emportent sur un quelconque effet toxique ou néfaste de la ou des substance(s) active(s). Comme l'illustrent les exemples ci-après, les huiles essentielles présentent un pouvoir antibactérien et l'utilisation combinée d'au moins un antibiotique et d'au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s) permet d'obtenir un effet antibactérien (bactéricide et/ou bactériostatique) supérieur à l'effet obtenu en utilisant le ou les même(s) antibiotique(s) individuellement. Ainsi, la présente invention offre de nouvelles perspectives pour la prophylaxie et/ou le traitement d'infections, en particulier d'infections bactériennes et, plus particulièrement d'infections provoquées par des souches de bactéries résistantes ou multirésistantes, contre lesquelles les antibiotiques individuellement ou en combinaison avec d'autres régimes médicamenteux sont seulement faiblement efficaces, voire inefficaces. L'utilisation d'huiles essentielles, en particulier, l'utilisation-d'une composition antibiotique, d'une combinaison, d'un kit ou d'une formulation d'huiles essentielles de l'invention, peut donc permettre d'améliorer, de potentialiser un traitement antibiotique classique, en particulier un traitement antibiotique peu efficace contre une infection nosocomiale. 2918571- 19 Plus spécifiquement, la présente invention concerne une composition antibiotique comprenant, consistant essentiellement en, ou consistant en : (i) au moins un antibiotique et (ii) au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s). 5 Les antibiotiques utilisables en thérapeutique et, par conséquent, utilisables dans la présente invention et, en particulier, dans la composition antibiotique, la combinaison (voir ci-après), ou le kit (voir ci-après) de l'invention, sont très nombreux et sont regroupés par familles en fonction de leur spectre d'action, de leur structure chimique, ainsi qu'en fonction de 10 leur mode d'action sur les bactéries. Selon un mode de réalisation particulier, l'antibiotique ou au moins un des antibiotique(s) utilisé(s) est choisi parmi : (i) les antibiotiques agissant sur la paroi bactérienne, en particulier, interférant avec la synthèse de peptidoglycane, 15 (ii) les antibiotiques agissant sur les membranes des cellules (membrane externe et/ou membrane cytoplasmique), (iii) les antibiotiques agissant sur la synthèse des protéines, en particulier sur le ribosome bactérien, (iv) les antibiotiques bloquant la synthèse de l'ARN messager, 20 (v) les antibiotiques agissant sur l'ADN (coupure des brins d'ADN et déroulement de l'ADN ou inhibition de la réplication d'ADN), (vi) les antibiotiques agissant par inhibition compétitive, en particulier un antibiotique interférant avec le métabolisme des folates, (vii) un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables, et 25 (viii) une de leurs combinaisons. A titre d'exemple, les antibiotiques agissant sur la paroi bactérienne peuvent être choisi parmi (i) la fosfomycine (ou phosphomycine), (ii) un antibiotique de la famille des glycopeptides, tel que la vancomycine, la téicoplanine (ou téichoplanine), la ristocétine, ou l'avoparcine, ou (iii) un 30 antibiotique de la famille des bêta-lactamines. La famille des bêtalactamines est notamment représentée par (i) les pénames, en particulier le groupe G de la pénicilline G, le groupe M des pénicillines antistaphylococciques, le groupe A de l'amino-benzylpénicilline (ampicilline), le groupe des acyl-uréido-pénicillines, le groupe des amidinopénicillines et le groupe des inhibiteurs des bétalactamases, (ii) les pénemes et les carbapénèmes, tels que le méropénèm (ou méropénem) et l'imipénème, (iii) les céphemes, en particulier les céphalosporines de 1 ière, 2ème et 3ième génération, et (iv) les monobactames. Les bêta-lactamines ont pour cibles des protéines présentes sur la face externe de la membrane cytoplasmiques et dénommées protéines liant la pénicilline (PLP).

A titre d'exemple également, les antibiotiques agissant sur les membranes des cellules peuvent être choisi parmi la famille des polymyxines, la famille des gramicidines, et la tyrocidine. Encore à titre d'exemple, les antibiotiques agissant sur le ribosome bactérien, peuvent être choisi parmi l'acide fusidique, la famille des aminosides, la famille des phénicolés, la famille des tétracyclines, la famille des oxazolidinones et le groupe des macrolides, lincosamides et synergistines (ou streptogramines). Quant aux antibiotiques bloquant la synthèse de l'ARN messager, ils incluent notamment la famille des rifamycines, représentée par la rifamycine SV et la rifampicine. Les rifamycines se fixent sur la sous-unité b de l'ARN polymérase et empêchent l'initiation de la synthèse des ARNm. Toujours à titre d'exemple les antibiotiques agissant sur l'ADN peuvent être choisi parmi la famille des quinolones, la famille des fluoroquinolones, et les produits nitrés tels que les oxyquinoléines, les nitrofuranes ou les nitro-imidazolés. Enfin, les antibiotiques interférant avec le métabolisme des folates incluent la famille des sulfamides et le triméthoprime. Selon un mode de réalisation particulier, l'antibiotique ou au moins un desdits antibiotique(s) est choisi parmi le méropénèm, la rifampicine et la tigecycline.

Selon un mode de réalisation particulier, l'antibiotique ou un desdits antibiotique(s) est le méropénèm ou la rifampicine. Une formulation d'huile(s) essentielle(s) de l'invention, en particulier la formulation ou au moins une des formulations utilisée(s) dans la composition antibiotique, la combinaison ou le kit de l'invention, peut comprendre, consister essentiellement en, ou consister en au moins une huile essentielle choisie parmi : l'huile essentielle d'origan, l'huile essentielle de thym, l'huile essentielle de clou de girofle, l'huile essentielle de feuille de girofle, l'huile essentielle de sarriette, l'huile essentielle de ravintsara, l'huile essentielle de laurier feuille, l'huile essentielle de pin sylvestre, l'huile essentielle d'eucalyptus, l'huile essentielle de cajeput, l'huile essentielle de cannelle, l'huile essentielle de lavande, l'huile essentielle de Melaleuca (ou huile de théier), en particulier l'huile essentielle de Melaleuca à feuilles alternes, et une huile essentielle essentielle d'agrumes, en particulier l'huile essentielle d'orange. Selon un mode de réalisation particulier, ladite ou au moins une desdites formulation(s) d'huiles essentielles comprend, consiste essentiellement en, ou consiste en plusieurs huiles essentielles. Ladite formulation peut être obtenue en ajoutant successivement les différentes huiles essentielles et en les mélangeant à température ambiante, puis stockée à l'abri de la lumière. Des exemples d'huiles essentielles utilisées dans l'invention sont les huiles essentielles de: Ravensara anisata, Havozo, Ecorces, Eugenia caryophyllata, Griffes de Girofle, Anis Vert, Aspic, Basilic, Bergamote, Bigarade Petitgrain, Bois de Rose, Bouleau, Cade, Cajeput (ou Cajuput),-Camphre, Cannelier, Cannelle, Cèdre, Citron, Citronnelle, Coriandre, Cumin, Cyprès, Eucalyptus, Gaiac, Genièvre, Géranium Bourbon, Gingembre, Girofle, Giroflier Feuilles, Hysope, Laurier Noble, Lavande, Lavandin, Lemongrass, Limette, Mandarine, Marjolaine, Melaleuca, Menthe Poivrée, Noix de muscade, Myrrhe, Myrte, Neroli, Niaouli, Oignon, Oliban, Orange, Oranger, Origan, Palmarosa, Pamplemousse, Patchouli, Pin, Ravensare, Romarin, Bois de Santal, Sarriette, Sassafras, Sauge, Serpolet, Souci, Térébenthine, Thuya, Thym, Verveine, Vetivier, WintergreenlGaultherie, Ylang-Ylang. Selon un mode de réalisation particulier, une des huiles essentielles de ladite formulation ou d'au moins une desdites formulations d'huiles essentielles est de l'huile essentielle d'origan, en particulier de l'huile essentielle d'origan à haute teneur en carvacrol, ayant un large spectre d'activité sur les bactéries gram positif et gram négatif. Une liste non-exhaustive d'huiles essentielles d'origan est la suivante : Corydothymus capitatus, Origanum vulgare, Origanum compactum, Origanum creticum, Origanum dictamnus, Origanum, heracleoticum, Origanum hirsutum, Origanum marjorana, Origanum smyrneum, Origanum syriacum. Par exemple, ladite ou une desdites formulation(s) peut comprendre ou consister en les huiles essentielles suivantes : (i) de l'huile essentielle d'origan (en particulier, d'origan d'Espagne), de l'huile essentielle de thym (en particulier, de thym rouge), de l'huile essentielle de clou de girofle, de l'huile essentielle de sarriette, de l'huile essentielle de ravintsara, de l'huile essentielle de laurier feuille, de l'huile essentielle de pin sylvestre, et de l'huile essentielle de cajeput (en particulier, de cajeput verte), ou (ii) de l'huile essentielle d'origan (en particulier d'origan du Maroc), de l'huile essentielle de feuilles de girofle et de l'huile essentielle de cannelle. A titre d'exemple également, ces huiles essentielles peuvent être apportées dans des concentrations allant (i) de 20 à 30% d'huile essentielle-d'origan (en particulier, d'origan d'Espagne), de 3 à 14% d'huile essentielle de thym (en particulier, de thym rouge), de 13 à 24 % d'huile essentielle de clou de girofle, de 1 à 12% d'huile essentielle de sarriette, de 4 à 15% d'huile essentielle de ravintsara, de 4 à 15% d'huile essentielle de laurier feuille, de 1 à 12% d'huile essentielle de pin sylvestre et de 1 à 12% d'huile essentielle de cajeput (en particulier, de cajeput verte), ou (ii) de 9 à 20% d'huile essentielle d'origan (en particulier d'origan du Maroc), de 65 à 76% d'huile essentielle de feuilles de girofle et de 9 à 20% d'huile essentielle de cannelle. Plus précisément, ladite formulation ou au moins une desdites formulation(s) d'huiles essentielles peut comprendre, consister essentiellement en ou consister en l'une des deux formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 suivantes : formulation MAT POWER : - huile essentielle d'origan d'Espagne à 63,09% de carvacrol : 25 parts en grammes ; - huile essentielle de thym rouge d'Espagne (Thymus vulgaria) à 47,37% de thymol : 8,75 parts en grammes ; - huile essentielle de clou de girofle de Madagascar (Eugenia caryophyllata) à 85,19% d'eugénol : 18,75 parts en grammes ; - huile essentielle de sarriette d'Albanie à 27,68% de thymol : 6,25 parts en grammes ; - huile essentielle de ravintsara de Madagascar à 55,26% d'eucalyptol: 9,38 parts en grammes ; - huile essentielle de laurier feuille de Croatie (Laurus nobilis) à 48.56% de cineole-1,8 : 9,38 parts en grammes ; - huile essentielle de pin sylvestre d'Autriche à 64,84% d'alpha pinène : 6,25 parts en grammes ; et - huile essentielle de cajeput verte à 62,11% de cineole-1,8 : 6,25 parts en grammes ; formulation MAT POWER R2 : - huile essentielle d'origan du Maroc à 33,20% de carvacrol : 14,7 parts en grammes ; - huile essentielle de feuilles de girofle de Madagascar à 82,57% d'eugénol : 70,6 parts en grammes ; et - huile essentielle de cannelle (cassia) de Chine à 77,57% de trans cinnamaldéhyde :14,7 parts en grammes.

Une variante consiste à isomériser l'eugénol contenu dans les huiles essentielles ou dans une des huiles essentielles utilisées dans le cadre de la présente invention, en particulier l'eugénol contenu dans l'huile essentielle de feuilles de girofle. Cette isomérisation de l'eugénol permet d'augmenter l'activité antibactérienne de l'huile essentielle. Elle permet de modifier la répartition des électrons sur le cycle aromatique et la partie allylique en para. Il y a alors conjugaison des doubles liaisons et potentialisation de la fonction organique fonction phénol en terme d'activité. L'isomérisation peut se faire dans un réacteur, en présence d'une solution de KOH, à 180 C. En outre, compte tenu de la mauvaise tenue des huiles essentielles à haute température, la réaction s'effectue généralement sous vide, sous une pression ramenée à 30 mbar, à 40 C, durant une heure. Lorsque ladite formulation ou une desdites formulations d'huile(s) essentielle(s) contient de l'huile essentielle de feuilles de girofle, en particulier, dans le cas de la formulation MAT POWER indiquée ci-dessus, selon un mode de réalisation particulier, l'eugénol contenu dans l'huile essentielle de feuilles de girofle est isomérisé. Une telle modification électronique permet d'obtenir une activité antibactérienne s'approchant ou égalant les activité antibactériennes d'une huile essentielle d'origan contenant du carvacrol. Alternativement, l'eugénol contenu dans les huiles essentielles ou dans une des huiles essentielles utilisées dans le cadre de la présente invention peut ne pas être isomérisé. En outre, selon un mode de réalisation particulier, ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) est (sont) capable(s) d'agir en synergie entre elles et/ou d'agir en synergie avec ledit ou lesdits antibiotique(s). Dans la mesure ou les formulations d'huile(s) essentielle(s) peuvent potentialiser l'effet du ou des antibiotiques, voire agir en synergie avec le ou les antibiotique(s), l'utilisation de formulations d'huile(s) essentielle(s) peut également permettre de diminuer les doses d'antibiotiques utilisées, tout en augmentant les activités bactériennes. Les exemples de la présente demande démontrent en effet que l'utilisation combinée d'au moins un antibiotique et d'au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s) peut permettre d'utiliser des concentrations en antibiotique(s) et en formulation d'huile(s) essentielle(s) inférieures aux concentrations normalement utilisées lorsque ces composés sont utilisés seuls pour lutter contre une infection bactérienne. Il n'est en effet pas nécessaire d'utiliser les formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) de l'invention sous forme concentrée ; ces formulations peuvent être administrées ou appliquées à un patient ou un mammifère sous forme diluée ; ces formulations sont de préférence utilisées à une concentration comprise entre environ 0.05% et environ 0.50%, plus préférablement entre environ 0.10% et environ 0.40%, et plus préférablement encore entre environ 0.10% et environ 0.30%, par exemple à une concentration d'environ 0.10%, environ 0.15%, environ 0.20% ou environ 0.30%. Ces formulations peuvent être diluées dans de l'eau distillée, dans du DMSO, dans un ou plusieurs alcool(s), dans une ou plusieurs huile(s) végétale(s) ou dans tout autre(s) diluant(s) pharmaceutiquement acceptable(s). Lorsqu'elle sont destinées à être administrées par injection, ces formulations peuvent être diluées dans des huiles végétales ou, dans le cas d'une micronisation, par exemple nanométrique, dans de l'eau émulsionnée. De même, lorsque l'antibiotique est associé à une formulation d'huile(s) essentielle(s), l'emploi de concentrations sub-inhibitricesd'antibiotique(s) est suffisant pour obtenir un effet antibactérien (effet bactériostatique et/ou bactéricide) de même intensité, voire d'intensité supérieure, à l'effet obtenu en utilisant l'antibiotique seul. Aussi, l'utilisation de formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) pourrait-il permettre de réduire les effets secondaires néfastes qui accompagnent habituellement l'administration de certains antibiotiques et également de raccourcir la 2918571- 26 durée des traitements antibiotiques et de réduire les durées d'hospitalisation. Ainsi, selon un mode de réalisation particulier, la concentration dudit ou desdits antibiotique(s) et/ou de ladite ou desdites formulation(s) 5 d'huile(s) essentielle(s) utilisée dans la composition antibiotique, la combinaison, ou le kit selon l'invention est une concentration subinhibitrice. Bien entendu, on peut également utiliser une concentration d'antibiotique et/ou de formulation d'huile(s) essentielle(s) égale ou supérieure à la CMI. 10 La composition pharmaceutique selon l'invention peut être formulée de façon à faciliter son administration et en particulier, peut être formulée avec un ou plusieurs véhicule(s) ou diluant(s) ou une de leurs combinaisons. Dans le cas d'une administration injectable, on peut notamment choisir une formulation dans une solution aqueuse, non 15 aqueuse ou isotonique. Selon un mode de réalisation préféré, les véhicule(s) ou diluant(s) ou leurs combinaisons utilisés dans l'invention sont des substances ou une combinaison de substances pharmaceutiquement acceptables. Les véhicules utilisés peuvent être, par exemple, de l'eau, une 20 solution saline, de l'albumine sérique, une solution Ringer, le polyéthylène glycol, des solvants miscibles dans l'eau, des sucres, des lieurs, des excipients, des pigments, des huiles végétales ou minérales, des polymères solubles dans l'eau, des agents tensioactifs, des agents épaississants ou gélifiants, des agents cosmétiques, des agents de 25 solubilisation, des agents stabilisation, des agents conservateurs, des-agents alcalinisants ou acidifiants ou une de leurs combinaisons. Le diluant utilisé dans la présente invention peut être soluble ou insoluble. Des exemples de diluant insoluble incluent la cellulose microcristalline, la cellulose microcristalline silicifiée, 30 l'hydroxyméthylcellulose, le phosphate de dicalcium, le carbonate de calcium, le sulfate de calcium, le carbonate de magnésium, le phosphate de tricalcium, etc. Des exemples de diluants solubles incluent le mannitol, le glucose, le sorbitol, le maltose, les dextrates, les dextrines, le dextrose, etc. Selon un autre mode de réalisation particulier, la composition antibiotique de l'invention, les constituants du kit de l'invention (voir ci-après), la combinaison de l'invention ou ses constituants (voir ci-après) et les formulations d'huiles essentielles selon l'invention (voir ci-après) se présentent sous forme sèche, solide (en particulier cachet, poudre, gélule, pilule, granule, suppositoire, comprimé, et plus précisément comprimé à libération accélérée, comprimé gastrorésistants ou comprimé à libération prolongée), gélatineuse (en particulier gel, pommade, crème ou ovule), liquide (en particulier sirop, solution injectable, infusible ou buvable ou collyre), sous forme d'un aérosol (spray, vapeur ou gaz) ou sous la forme d'un patch. Ces composés, en particulier les formulations d'huiles essentielles, peuvent notamment être formulés pour une administration sous la forme d'un complément alimentaire. Selon un mode de réalisation particulier, ces composés peuvent se présenter sous la forme de doses sous forme sèche (poudre, lyophilisat, etc.) à reconstituer au moment de l'utilisation en utilisant un diluant approprié.

Par ailleurs, la composition antibiotique de l'invention, ainsi que les constituants du kit de l'invention, la combinaison de l'invention ou ses constituants et les formulations d'huiles essentielles de l'invention peuvent être conditionnés pour une administration sous la forme d'une dose unique (monodose) ou multiple (multidose). Afin d'augmenter les effets du traitement, il est en effet envisageable de procéder à une administration-sous la forme de plusieurs administrations successives, répétées à une ou plusieurs occasions, après un intervalle de temps particulier. On peut, par exemple, procéder à plusieurs administrations par jour ou par semaine. Les voies d'administration et les posologies varient en fonction d'une variété de paramètres, par exemple en fonction de l'état du patient, du type 2918571- 28 d'infection et de la sévérité de l'infection à traiter ou de l'antibiotique et des huiles essentielles utilisés. Suivant leur forme galénique, la composition antibiotique de l'invention, ainsi que les constituants du kit de l'invention, la combinaison 5 de l'invention ou ses constituants et les formulations d'huiles essentielles selon l'invention peuvent être administrés par voie entérale, parentérale (intraveineuse, intramusculaire ou sous-cutanée), transcutanée (ou transdermique ou percutanée), cutané, orale, mucosale, en particulier transmuqueuse-buccale, nasale, ophtalmique, otologique (dans l'oreille), 10 vaginale, rectale, ou encore les voies intragastrique, intracardiaque, intrapéritonéale, intrapulmonaire ou intratracheal. Selon un autre aspect, la présente invention concerne également une combinaison comprenant, consistant essentiellement en, ou consistant en : (i) au moins un antibiotique, en particulier un antibactérien et 15 (ii) au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s), dans laquelle les composés (i) et (ii) sont sous forme juxtaposée ( kit-ofparts ). Les composés (i) et(ii) de ladite combinaison sont tels que définis ci-dessus. 20 Les composés (i) et (ii) de la combinaison de l'invention peuvent être appliqués au corps humain ou, plus généralement au corps d'un mammifère, simultanément, séparément ou de manière étalée dans le temps, dans le cadre d'un traitement antibiotique, en particulier dans le cadre d'un traitement anti-microbien. 25 Ainsi, selon un premier mode de réalisation, ladite ou lesditesformulation(s) d'huile(s) essentielle(s) et ledit ou lesdits antibiotique(s) de ladite combinaison sont présents dans une même composition pharmaceutique. Ces composés ne sont cependant pas nécessairement mis en oeuvre sous la forme d'un mélange; il peut être avantageux de les 30 utiliser séparément, et en particulier séparément dans le temps.

Par conséquent, selon un second mode de réalisation, ledit ou lesdits antibiotique(s) et ladite ou desdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) de ladite combinaison sont présents dans deux compositions distinctes. Ladite combinaison correspond alors à une présentation de l'antibiotique d'une part et de la formulation d'huile(s) essentielle(s) d'autre part, dans des compositions ou formulations distinctes, mais qui sont présentées comme associées pour une utilisation combinée. L'antibiotique n'étant pas mélangé avec les huiles essentielles, il n'est pas modifié chimiquement, et est, par conséquent administré tel que décrit dans l'autorisation de mise sur le marche (AMM) couvrant cet antibiotique. Lorsque ledit ou lesdits antibiotique(s) et ladite ou desdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) sont présents dans deux compositions distinctes, ils peuvent alors être formulés pour une administration simultanée dans le temps et/ou pour une administration séquentielle. II est possible en effet que certains constituants de ladite combinaison n'exercent pas nécessairement simultanément ou immédiatement leur activité commune. Dans le cas ou ils sont administrés séquentiellement dans le temps, l'ordre d'administration n'a pas d'importance, l'administration dudit ou desdits antibiotique(s) pouvant précéder ou suivre l'administration de ladite ou desdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s). Selon un mode de réalisation particulier, l'antibiotique ou au moins un des antibiotiques est administré avant d'administrer la formulation d'huiles essentielles ou au moins une des formulations d'huiles essentielles. Alternativement, la formulation d'huiles essentielles ou au moins une des formulations d'huiles essentielles peut être administrée avant d'administrer l'antibiotique ou au moins un des antibiotiques. En outre, selon un mode de réalisation particulier, les composés (i) et (ii) sont formulés pour une administration à une ou plusieurs heures d'intervalle, de préférence à 1, 2, 3 ou 4 heure(s) d'intervalle, plus préférablement à 1 ou 2 heures d'intervalle, plus préférablement encore à 1 heure d'intervalle. Le ou les antibiotique(s) et/ou la ou les formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) de la combinaison selon l'invention, qu'il soient administrés sous forme d'un mélange ou de compositions ou formulations séparées, peuvent être formulés avec un ou plusieurs véhicule(s) ou diluant(s) tels que définis ci-dessus ou une de leurs combinaisons. Par ailleurs, lorsqu'ils sont utilisés sous la forme de formulations distinctes, ledit ou lesdits antibiotique(s) et ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) peuvent être administrés par les mêmes voies d'administration ou, au contraire, par des voies d'administrations distinctes. Les voies d'administration envisageables sont celles décrites ci-dessus. Par exemple, on peut administrer ledit, lesdits ou un desdits antibiotique(s) par injection, par exemple par voie intraveineuse et ladite ou une desdites ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) par une autre voie, par exemple par voie topique ou par voie orale, en particulier sous la forme d'une solution buvable. La présente invention concerne également un kit comprenant, consistant essentiellement en, ou consistant en : (i) au moins un antibiotique, en particulier un antibactérien et (ii) au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s). Les composés (i) et (ii) dudit kit sont tels que définis ci-dessus. Les composés (i) et (ii) du kit de l'invention peuvent être formulés pour une administration simultanée dans le temps et/ou pour une administration séquentielle à un mammifère et en particulier à un humain. Dans le cas ou les composés (i) et (ii) sont administrés séquentiellement dans le temps, l'ordre d'administration n'a pas d'importance, l'administration dudit ou desdits antibiotique(s) pouvant précéder ou suivre l'administration de ladite ou desdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s). En outre, selon un mode de réalisation particulier, lesdits composés sont formulés pour une administration à une ou plusieurs heures d'intervalle, de préférence à 1, 2, 3 ou 4 heure(s) d'intervalle, plus préférablement à 1 ou 2 heures d'intervalle, plus préférablement encore à 1 heure d'intervalle. Les composés (i) et (ii) dudit kit peuvent être formulés avec un ou plusieurs véhicule(s) ou diluant(s) tels que définis ci-dessus ou une de leurs combinaisons. Par ailleurs, les composés (i) et (ii) dudit kit peuvent être administrés par les mêmes voies d'administration ou, au contraire, par des voies d'administrations distinctes. Les voies d'administration envisageables sont celles décrites ci-dessus. Par exemple, on peut administrer ledit, lesdits ou un desdits antibiotique(s) par voie intraveineuse et ladite ou une desdites ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) par voie topique ou par voie orale, en particulier sous la forme d'une solution buvable. Selon un autre aspect, la présente invention concerne également une formulation d'huiles essentielles comprenant, consistant essentiellement en, ou consistant en au moins une huile essentielle choisie parmi : l'huile essentielle d'origan, l'huile essentielle de thym, l'huile essentielle de clou de girofle, l'huile essentielle de feuille de girofle, l'huile essentielle de sarriette, l'huile essentielle de ravintsara, l'huile essentielle de laurier noble, l'huile essentielle de pin sylvestre, l'huile essentielle d'eucalyptus, l'huile essentielle de cajeput et l'huile essentielle de cannelle. Selon un mode de réalisation particulier, ladite formulation d'huiles essentielles comprend, consiste essentiellement en, ou consiste en les huiles essentielle suivantes : (i) de l'huile essentielle d'origan, de l'huile essentielle de thym, de-l'huile essentielle de clou de girofle, de l'huile essentielle de sarriette, de l'huile essentielle de ravintsara, de l'huile essentielle de laurier noble, de l'huile essentielle de pin sylvestre et de l'huile essentielle de cajeput (en particulier de cajeput verte) ; ou (ii) de l'huile essentielle d'origan, de huile essentielle de feuilles de girofle et de l'huile essentielle de cannelle.

Plus précisément, ladite formulation d'huiles essentielles peut comprendre, consister essentiellement en, ou consister en les huiles essentielle suivantes : (i) 20 à 30% d'huile essentielle d'origan (en particulier, d'origan d'Espagne), 3 à 14% d'huile essentielle de thym (en particulier, de thym rouge), 13 à 24 % d'huile essentielle de clou de girofle, 1 à 12% d'huile essentielle de sarriette, 4 à 15% d'huile essentielle de ravintsara, 4 à 15% d'huile essentielle de laurier feuille, 1 à 12% d'huile essentielle de pin sylvestre et 1 à 12% d'huile essentielle de cajeput (en particulier, de cajeput verte), ou (ii) 9 à 20% d'huile essentielle d'origan (en particulier d'origan du Maroc), 65 à 76% d'huile essentielle de feuilles de girofle et 9 à 20% d'huile essentielle de cannelle. Plus précisément encore, ladite formulation d'huiles essentielles peut comprendre, consister essentiellement en, ou consister en l'un des deux formulation d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 définies ci-dessus. Selon un mode de réalisation particulier, ladite formulation d'huiles essentielles selon l'invention comprend en outre un ou plusieurs véhicule(s) ou diluant(s) tels que définis ci-dessus ou une de leurs combinaisons. Un autre aspect de la présente invention concerne également une composition antibiotique, une combinaison, un kit ou une formulation d'huiles essentielles selon l'invention telles que définies ci-dessus pour une utilisation comme médicament, en particulier comme antibiotique et/ou comme bactéricide et plus précisément pour la prophylaxie et/ou le-traitement d'une infection bactérienne, notamment d'une infection bactérienne nosocomiale, chez un mammifère, en particulier un humain. Ladite infection bactérienne peut être, par exemple, choisie parmi une infection des voies respiratoires (telle qu'une pneumopathie ou une pneumonie), une infection urinaire, une infection de la peau ou des tissus mous, une légionellose nosocomiale, une infection du système nerveux central, une aspergillose invasive, une méningo-encéphalite, une empyème, une infection gastro-intestinale, une complication cardio-pulmonaire (telle qu'une endocardite), une bactériémie, une infection du site opératoire ou une infection généralisée (telle qu'une septicémie).

A titre d'exemple, ladite infection peut avoir été provoquée par une souche bactérienne gram positif choisie parmi les familles suivantes : -la famille des Staphylococcaceae, en particulier le genre Staphylococcus, représenté par les espèces Staphylococcus aureus (ou staphylocoque doré) et Staphylococcus epidermidis; - la famille des Enterococcaceae, en particulier le genre Enterococcus, représenté par les espèces Enterococcus faecalis et Enterococcus faecium ; - la famille des Clostridiaceae, en particulier le genre Clostridium, représenté par l'espèce Clostridium difficile ; et - la famille des Streptococcaceae, en particulier le genre Streptococcus, représenté par les espèces Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus viridans, et Streptococcus pyogenes. Alternativement, et toujours à titre d'exemple, ladite infection peut avoir été provoquée par une souche bactérienne gram négatif choisie parmi les souches des familles suivantes : - la famille des Moraxellaceae, en particulier le genre Acinetobacter, représenté par les espèces Acinetobacter baumannii et Acinetobacter calcoaceticus ; - la famille des Legionellaceae, en particulier le genre Legionella, 25 représenté par les espèces Legionella Pneumophila, Legionella longbeachae, Legionella bozmanii, et Legionella micdadei; - la famille des Enterobacteriaceae, en particulier le genre Enterobacter, représenté par l'espèces Enterobacter cloacae, le genre Escherichia, représenté par les espèces Escherichia col/ et Escherichia hermannii, le 30 genre Klebsiella, représenté par l'espèce Klebsiella pneumoniae, le genre Serratia, représenté par l'espèce Serratia marcescens, le genre Citrobacter, représenté par les espèces Citrobacter freundii et Citrobacter koseri, et les genres Salmonella, Shigella et Proteus; et - la famille Pseudomonadaceae, en particulier le genre Pseudomonas, représenté par l'espèce Pseudomonas aeruginosa.

Selon un mode de réalisation particulier, ladite infection est provoquée par une souche bactérienne résistante à un ou plusieurs antibiotique(s), en particulier par une souche bactérienne multirésistante aux antibiotiques ou une souche pan résistante. De telles souches résistantes ou multirésistantes aux antibiotiques sont généralement des souches bactériennes d'origine hospitalière (souches bactériennes cliniques), susceptibles de provoquer des infections nosocomiales. Parmi les souches résistantes ou multirésistantes aux antibiotiques, on trouve notamment les souches suivantes : des Staphylococcus aureus résistants à la méticilline (SARM), des Enterococcaceae résistants à de multiples antibiotiques, notamment à la vancomycine, des Streptococcus pneumoniae (pneumocoques) résistants à la pénicilline, des Clostridium difficile et des Pseudomonas aeruginosa multirésistants, des Acinetobacter baumannii résistants à la ticarcilline ou multirésistants ; des Salmonella polypharmacorésistantes, des Enterobacteriaceae productrices de bêtalactamases à spectre étendu (BLSE) et des souches de bactéries gram négatif résistantes à une troisième génération de céphalosporines, en particulier des Enterobacteriaceae hyperproductrices de céphalosporinases.

A titre d'exemple, ladite souche peut être une souche clinique d'Acinetobacter baumannii, en particulier, la souche "SAN008", la souche "RCH", la souche "CIP 107292", la souche "12" ou la souche "CIP 7034" telles que définies ci-après (voir partie exemples ). Selon un mode de réalisation particulier, la composition antibiotique, la combinaison, le kit ou une formulation d'huiles essentielles selon l'invention tels que définis ci-dessus sont utilisés pour prévenir, réduire, ou inhiber la virulence d'une souche bactérienne, c'est-à-dire le caractère pathogène, la capacité d'une souche bactérienne à provoquer une infection, par exemple pour prévenir, réduire, ou inhiber la croissance, ralentir le taux de croissance d'une ou plusieurs souche(s) bactérienne(s) ou pour éradiquer une ou plusieurs souche(s) bactérienne(s) chez un mammifère, en particulier un humain. La prévention ou l'inhibition de la croissance bactérienne peut-être soit partielle, soit totale, soit partielle pour un tissu de l'hôte et totale pour un autre tissu de l'hôte. De même, l'éradication d'une souche bactérienne peut être partielle ou totale. Ladite utilisation est alors destinée à stabiliser, voire réduire le nombre de bactéries pathogènes présentes dans l'hôte ou dans certains tissus de l'hôte, par rapport à ce qu'on observe en absence de ladite composition antibiotique, de ladite combinaison, dudit kit ou de ladite formulation d'huiles essentielles selon l'invention, en particulier lorsqu'on utilise seulement le ou les antibiotique(s); le nombre de bactéries d'une souche responsable d'une infection bactérienne est réduit de préférence d'au moins 10%, plus préférablement d'au moins 30 %, et plus préférablement encore d'au moins 50%, voire 70% ou plus. La composition antibiotique, la combinaison, le kit ou une formulation d'huiles essentielles selon l'invention tels que définis ci-dessus ou toute composition les contenant peuvent être administrés à tout mammifère où a tout humain en ayant besoin et/ou susceptible de bénéficier d'une telle administration, en particulier à tout mammifère où, a tout humain qui présente un risques d'être contaminé, colonisée par un microorganisme tel qu'une souche bactérienne (prophylaxie), ou dans le cas d'une suspicionde contamination ou après que la colonisation par ledit microorganisme ait eu lieu, en particulier après la manifestation des premiers signes cliniques ou symptômes de l'infection (traitement). Selon un mode de réalisation particulier, on débute l'administration lorsque le patient ou le mammifère présente des signes cliniques d'infection.

La composition antibiotique, la combinaison, le kit ou une formulation d'huiles essentielles selon l'invention tels que définis ci-dessus sont particulièrement recommandés pour la prophylaxie ou le traitement d'un humain (ou patient) présentant un terrain propice au développement d'infections en général et d'infection nosocomiales en particulier (plus particulièrement une infection bactérienne nosocomiale), notamment un patient dont l'état de santé est altéré ; certaines bactéries, même résistantes, ne sont pas forcément pathogènes pour les individus en bonne santé, mais elles le sont souvent pour ceux dont l'état de santé est altéré.

Les patients prédisposés à une infection en générale et à une infection bactérienne en particulier sont notamment les patients hospitalisés (qui ont, par nature, un état de santé faible et des défenses immunitaires altérées), les patients souffrant de pathologies portant directement atteinte à leurs défenses immunitaires (patients malades du SIDA ou aplasiques, diabétiques, patients atteints d'une infection respiratoire, d'une pathologie immunitaire...), les nouveau-nés, et plus particulièrement les enfants prématurés, les personnes âgées, les grands brûlés, ou les personnes dénutries. En outre, le traitement du patient lui-même peut le rendre vulnérable à l'infection ; les immunosuppresseurs, un traitement anti-acide, les corticostéroïdes, le rayonnement infrarouge, une thérapie antimicrobienne ou encore les transfusions sanguines répétitives ébranlent les défenses du corps, et prédisposent les patients à une infection, en particulier nosocomiale. Enfin, les techniques invasives utilisées dans les hôpitaux pour le diagnostique, la surveillance, et le traitement ouvrent souvent de nouvelles portes à l'infection. Ainsi les patients portant un dispositif invasif tels qu'un cathéter, un drain chirurgical, une sonde urinaire, une sonde d'intubation, des perfusions de toutes nature, un tube de trachéotomie, un dispositif de mesure de la pression veineuse centrale, ou auxquels on implante une prothèse, présentent un terrain propice au développement d'une infection bactérienne telle qu'une infection nosocomiale. Par conséquent, les produits objets de l'invention sont en 2918571- 37 particulier destinés à une utilisation dans une unité de soins intensifs ou dans un service de réanimation, où les infections nosocomiales sont particulièrement fréquentes. Selon un autre aspect de l'invention, la composition antibiotique, la 5 combinaison, le kit ou une formulation d'huiles essentielles selon l'invention tels que définis ci-dessus sont également destinés à une utilisation pour des applications cosmétiques, alimentaires ou vétérinaires (animaux domestiques ou de compagnie). Un autre aspect de l'invention concerne l'utilisation d'une 10 composition antibiotique, d'une combinaison, d'un kit ou d'une formulation d'huiles essentielles selon invention tels que définis ci-dessus pour la fabrication d'un médicament destiné à la prophylaxie et/ou au traitement d'une infection bactérienne, en particulier d'une infection bactérienne nosocomiale, chez un mammifère, en particulier chez un humain. Selon un 15 mode de réalisation particulier, ladite infection et ledit patient sont tels que définis ci-dessus. Un autre aspect de la présente invention concerne l'utilisation d'une formulation d'huile(s) essentielle(s), en particulier d'une formulation d'huile(s) essentielle(s) telle que définie ci-dessus, pour la fabrication d'un 20 médicament destiné à potentialiser, à accroître un effet prophylactique ou thérapeutique d'un ou plusieurs antibiotique(s), en particulier d'un ou plusieurs antibiotique(s) tels que définis ci-dessus et/ou à diminuer la quantité d'antibiotique administrée à un mammifère et en particulier à un humain. Ladite méthode peut être utilisée pour la prophylaxie ou le 25 traitement d'une infection bactérienne, en particulier une infectionnosocomiale, chez un mammifère, en particulier un humain. Selon un autre aspect, la présente invention concerne également l'utilisation d'une formulation d'huile(s) essentielle(s), et en particulier une formulation d'huile(s) essentielle(s) telle que définie dans la présente 30 demande, ou l'utilisation d'une composition antibiotique, d'une combinaison ou d'un kit selon l'invention pour diminuer la quantité d'antibiotique utilisée 2918571- 38 pour la fabrication d'un médicament destiné à la prophylaxie et/ou au traitement d'une infection, en particulier d'une infection bactérienne, et plus particulièrement d'une infection nosocomiale, chez un mammifère et en particulier chez un humain. En effet, comme indiqué ci-dessus et comme 5 illustré dans la partie exemple de la présente demande, l'utilisation d'une formulation d'huiles essentielles peut en effet permettre d'utiliser des doses d'antibiotique(s) inférieures aux doses habituellement prescrites et en particulier, de limiter les dose administrées à un mammifère ou un patient à des concentrations sub-inhibitrices. 10 Selon un autre aspect, la présente invention concerne une méthode pour diminuer le nombre de bactéries présentes sur une surface, ladite méthode comprenant ou consistant en la mise en contact de ladite surface avec une formulation d'huile(s) essentielle(s), en particulier une formulation d'huiles essentielles telle que définie dans la présente demande. La 15 présente méthode peut être utilisée en particulier en milieu hospitalier et plus particulièrement dans une unité de soins intensifs ou dans un service de réanimation. Ladite méthode est notamment destinée à nettoyer les surfaces des équipements médicaux ou la surface de la peau d'un mammifère ou d'un patient (par exemple avant de réaliser un acte invasif). 20 Selon un mode de réalisation particulier, la formulation d'huile(s) essentielle(s) et, le cas échéant, le ou les antibiotiques, sont incorporés à une poudre, un savon, une mousse, une solution, un gel, un aérosol et/ou un ustensile (lingette, éponge, coton, compresse, essuie-main, gants, serpillière...) utilisés pour le nettoyage et/ou la désinfection des mains du 25 personnel médical, de la peau d'un mammifère ou d'un patient ou encore-pour le nettoyage et/ou la désinfection du matériel ou des instruments médicaux (gants, plateaux de stérilisation, stéthoscopes, otoscopes, marteaux à réflexes, tensiomètres, thermomètres, scalpels, pinces, écarteurs et divers instruments chirurgicaux, tables d'examen, brancards...) 30 ou du sol et des murs d'un local médical (tel qu'une salle d'opération). 2918571- 39 Selon un mode de réalisation particulier, ladite surface est la surface de la peau d'un mammifère ou d'un humain. Selon un autre mode de réalisation particulier, ladite surface est la surface (interne et/ou externe) d'un objet utilisé dans les dispositifs invasifs 5 pour le diagnostique, la surveillance, ou le traitement de malades, par exemple, un cathéter, un drain chirurgical, une sonde urinaire, une sonde d'intubation, de perfusions, un tube de trachéotomie, un dispositif de mesure de la pression veineuse centrale, ou encore la surface d'une prothèse ou d'un implant. 10 Un autre aspect de la présente invention concerne une méthode pour prévenir ou traiter une infection, en particulier une infection bactérienne, chez un mammifère (en particulier un humain) nécessitant un tel traitement, ladite méthode comprenant ou consistant en l'administration d'une formulation d'huile(s) essentielle(s) (telle que définie ci-dessus) à un 15 mammifère, en particulier un humain, et par laquelle l'infection bactérienne est prévenue ou traitée. Selon un mode de réalisation particulier, ladite formulation d'huile(s) essentielle(s) comprend, consiste essentiellement en, ou consiste en la formulation MAT POWER ou en la formulation MAT POWER R2 telles que 20 décrites ci-dessus. Ladite méthode peut en outre comprendre l'administration d'un antibiotique (tel que défini ci-dessus). Il est alors satisfaisant d'administrer l'huile essentielle et l'antibiotique simultanément ou séquentiellement dans le temps, comme indiqué ci-dessus. Ainsi, selon un mode de réalisation 25 particulier, ladite méthode consiste en l'administration d'une composition-antibiotique, d'une combinaison ou d'un kit selon l'invention à mammifère et en particulier à un humain nécessitant un tel traitement ou susceptible de bénéficier d'un tel traitement. Selon un autre mode de réalisation particulier, ladite méthode est 30 appliquée à un patient développant ou susceptible de développer une 2918571infection sévère telle qu'une infection nosocomiale, par exemple un patient tel que défini dessus. Selon un autre aspect, la présente invention concerne également une méthode destinée à accroître un effet thérapeutique ou prophylactique 5 d'un ou plusieurs antibiotique(s) chez un mammifère, en particulier un humain, ladite méthode comprenant ou consistant en l'administration d'une ou plusieurs formulation(s) d'huile(s) essentielle(s), en particulier une ou plusieurs formulation(s) telles que définies dans la présente invention, à un mammifère, en particulier un humain. Comme indiqué ci-dessus et comme 10 illustré dans la partie exemple de la présente demande, l'utilisation d'une formulation d'huile(s) essentielle(s) peut en effet permettre d'obtenir un effet prophylactique ou thérapeutique dans le cas d'infections provoquées par des souches bactériennes contre lesquelles les antibiotiques individuellement sont peu efficaces ou inefficaces. 15 La présente invention concerne également une méthode pour diminuer la quantité d'antibiotique administrée à un mammifère ou à un humain ayant besoin d'un tel traitement, ladite méthode comprenant l'administration d'un antibiotique et l'administration d'une formulation d'huile(s) essentielle(s). Ledit antibiotique et ladite formulation d'huile(s) 20 essentielle(s) sont tels que décrit dans la présente demande. L'antibiotique et la formulation d'huile essentielle peuvent être administrés à un mammifère ou à un humain simultanément (sous la forme d'un mélange ou sous la forme de compositions distinctes) ou séquentiellement dans le temps, comme indiqué ci-dessus. 25 Selon un mode de réalisation particulier, ladite formulation d'huile(s) essentielle(s) comprend, consiste essentiellement en, ou consiste en la formulation MAT POWER ou en la formulation MAT POWER R2 telles que décrites ci-dessus. Selon un autre mode de réalisation particulier, ladite méthode 30 comprend ou consiste en l'administration d'une composition antibiotique, d'une combinaison ou d'un kit selon l'invention tels que définis ci-dessus, à un mammifère et, en particulier, à un humain. Ladite méthode peut notamment être appliquée à un patient tel que défini ci-dessus présentant une prédisposition à une infection, en particulier à une infection bactérienne et/ou nosocomiale. Des quantités particulières de substances actives, en particulier des quantités particulières d'antibiotique et/ou de formulations d'huile(s) essentielle(s) que l'on peut administrer à un mammifère ou à un humain dans le cadre de la présente invention sont des quantités thérapeutiquement efficaces. Ces quantités thérapeutiquement efficaces varient en fonction de facteurs tels que l'état d'infection, rage, le sexe ou le poids du mammifère ou du patient. Les régimes posologiques peuvent être ajustés de façon à obtenir un effet thérapeutique optimum. A titre d'exemple, les doses administrées à un patient ou à un mammifère peuvent être de l'ordre de ou inférieures aux doses conventionnellement utilisées pour les antibiotiques ou combinaisons d'antibiotiques. A titre indicatif, des doses variant de 10 mg/kg/jour à 100 mg/kg/jour, suivant rage ou le poids du patient, la sévérité ou le stade de l'infection, le nombre d'administrations ou le mode d'administration, peuvent être administrées.

DESCRIPTION DES DESSINS Figure 1 : Cinétique de croissance des souches 12 (A), CIP 7034 (B), RCH (C), SAN (D) et CIP 107292 (E) en fonction de la concentration en formulation d'huiles essentielles MAT POWER. La formulation MAT POWER a été utilisée à différentes dilutions : 0,10, 0,15, 0,20, 0,30, 0,40, et 0,50%. Figure 2 : Cinétique de croissance des souches 12 (A), CIP 7034 (B), RCH (C), SAN (D) et CIP 107292 (E) en fonction de la concentration en formulation d'huiles essentielles MAT POWER R2. La formulation MAT POWER R2 a été utilisée à différentes dilutions : 0,10, 0,15, 0,20, 0,30 et 0,40%. Figure 3 : Cinétique de croissance des souches 12 (A), RCH (B), SAN (C), CIP 7034 (D) et CIP 107292 (E) en fonction de la concentration en antibiotique méropénèm. Figure 4 : Cinétique de croissance des souches 12 (A), RCH (B), SAN (C), CIP 7034 (D) et CIP 107292 (E) en fonction de la concentration en antibiotique rifampicine.

Figure 5 : Cinétique de croissance des souches 12 (A), RCH (B), SAN (C),CIP 7034 (D) et CIP 107292 (E) en fonction de la concentration en antibiotique tigecycline. Figure 6 : Cinétique de croissance des souches 12 (A), RCH (B), SAN (C), CIP 7034 (D) et CIP 107292 (E) en fonction de la concentration en antibiotiques piperacilline + tazobactam. Figure 7 : Cinétique de croissance des souches SAN (A), RCH (B), CIP 107292 (C), CIP 7034 (D) et 12 (E) en présence d'une quantité subinhibitrice d'antibiotique méropénèm et/ou d'une formulation d'huiles essentielles (MAT POWER ou MAT POWER R2). La concentration de méropénèm utilisée est de 0,25 pg/mI pour la souche SAN, 4 pg/ml pour la souche RCH, 16 pg/ml pour la souche CIP 107292, 0,75 pg/ml pour la souche CIP 7034 et 2 pg/ml pour la souche 12. Figure 8 : Cinétique de croissance des souches SAN (A), RCH (B),_ CIP 107292 (C) et CIP 7034 (D) en présence d'une quantité sub-inhibitrice de l'antibiotique rifampicine et/ou d'une formulation d'huiles essentielles (MAT POWER ou MAT POWER R2). La concentration de rifampicine utilisée est de 2 pg/ml pour la souche SAN, 2 pg/ml pour la souche RCH, 2 pg/ml pour la souche CIP 107292, 0,75 pg/ml pour la souche CIP 7034 et 4 pg/ml pour la souche 12.

Figure 9 : Cinétique de croissance des souches SAN (A), RCH (B), 12 (C), CIP 7034 (D) et CIP 107292 (E) en présence d'une quantité subinhibitrice de la formulation d'huiles essentielles MAT POWER administrée au temps TO et/ou de l'antibiotique méropénèm administré aux temps TO, T+1 heure, T2heures ou T+3heures. Figure 10 : Cinétique de croissance des souches SAN (A), RCH (B), 12 (C), CIP 7034 (D) et CIP 107292 (E) en présence d'une quantité subinhibitrice de la formulation d'huiles essentielles MAT POWER R2 administrée au temps TO et/ou de l'antibiotique méropénèm administré aux temps TO, T+1 heure, T+2heures ou T+3heures. Figure 11 : Cinétique de croissance des souches SAN (A), RCH (B), CIP 7034 (C) et CIP 107292 (D) en présence d'une quantité sub-inhibitrice de la formulation d'huiles essentielles MAT POWER administrée au temps TO et/ou de l'antibiotique rifampicine administré aux temps TO, T+1 heure, T2heures ou T+3heures. Figure 12 : Cinétique de croissance des souches SAN (A), RCH (B), CIP 7034 (C) et CIP 107292 (D) en présence d'une quantité sub-inhibitrice de la formulation d'huiles essentielles MAT POWER R2 administrée au temps TO et/ou de l'antibiotique rifampicine administré aux temps TO, T+1 heure, T2heures ou T+3heures. Figure 13: Antibiogramme de la souche de P. aeruginosa multirésistante aux antibiotiques. Figure 14: Cinétique de bactéricidie de l'huile essentielle MAT POWER sur S. aureus.

Figure 15: Cinétique de bactéricide de MAT POWER pour la souche de S.aureus ATCC 29 213 (courbe représentant la moyenne des log des 3 séries).

Figure 16: Cinétique de bactéricide de MAT POWER pour la souche de P. aeruginosa ATCC 27 53 (courbe représentant la moyenne des log des 3 séries). Figure 17: Cinétique de bactéricide de MAT POWER pour la souche de P. aeruginosa d'aspect muqueux (courbe représentant la moyenne des log des 3 séries). Figure 18: Cinétique de bactéricide de MAT POWER pour la souche de P. aeruginosa multi-résistante aux antibiotiques (courbe représentant la moyenne des log des 3 séries).

Figure 19 : Cinétique de bactéricide de MAT POWER R2 pour la souche de S.aureus (courbe représentant la moyenne des log des 2 séries). Figure 20 : Cinétique de bactéricide de MAT POWER R2 pour la souche de P. aeruginosa (courbe représentant la moyenne des log des 2 séries). Figure 21 : Cinétique de bactéricide de MAT POWER R2 pour la souche de P. aeruginosa d'aspect muqueux (courbe représentant la moyenne des log des 3 séries). Figure 22 : Cinétique de bactéricide de MAT POWER R2 pour la souche de P. aeruginosa multi-résistant aux antibiotiques (courbe représentant la moyenne des log des 3 séries).

La présente invention est illustrée plus en détails dans les exemples_ suivants, qui ne doivent pas être interprétés comme limitant la portée de l'invention.

EXEMPLES L'efficacité antibactérienne de compositions antibiotiques, de combinaisons, de kits et de formulations d'huiles essentielles selon l'invention a été évaluée in vitro et/ou in vivo.

A. MATERIEL A.1. Souches bactériennes Acinetobacter baumannii est une bactérie responsable d'infections nosocomiales et de bouffées épidémiques en milieu hospitalier. Cette bactérie d'origine environnementale possède un pouvoir d'adaptation important qui permet à l'espèce baumannii de se présenter comme une espèce multirésistante aux antibiotiques ou "BMR". La multiplicité des mécanismes de résistance qu'elle a su développer, sa capacité à persister plus que d'autres dans l'environnement expliquent la crainte qu'elle inspire aux cliniciens et plus particulièrement aux réanimateurs face aux difficultés de traitement parfois rencontrées, lorsque la souche est pan résistante. Cinq souches bactériennes cliniques d'Acinetobacter baumannii ont été testées : quatre souches d'Acinetobacter baumannii responsables d'infections chez des patients hospitalisés et présentant des profils de résistance différents vis-à-vis des antibiotiques et une souche de référence CIP de phénotype sensible.

• La souche "SAN008" a été isolée à partir d'une hémoculture d'un patient hospitalisé. Elle présente un phénotype de résistance type 25 producteur de "céphalosporinase haut niveau" ; • La souche "RCH" a été isolée à partir d'un prélèvement péritonéal de patient et est à l'origine d'une épidémie dans un hôpital parisien. C'est une souche productrice de céphalosporinase hyper produite avec un phénotype associé d'imperméabilité entraînant une résistance 30 partielle à l'imipénème (antibiotique de la famille des carbapénèmes); • La souche "CIP 107292" a été isolée à partir d'un prélèvement pulmonaire d'un patient en réanimation et est à l'origine d'une bouffée épidémique dans hôpital parisien. Son profil de résistance est du type producteur de "carbapénémase" (pan résistante); • La souche "12" a été isolée à partir d'un prélèvement urinaire d'un patient hospitalisé dans un hôpital français. C'est une souche pan-résistante par production de "BLSE" (Bêta-lactamase à spectre étendu); • La souche "CIP 7034" est une souche de référence provenant de la Collection Nationale de Culture de Microorganismes de l'Institut Pasteur (CMCM).

A.2. Extraits d'huiles essentielles (HE) Deux formulations ont été notamment testées in vitro : MAT POWER et MAT POWER (voir composition indiquée ci-dessus). 2 ml de formulation d'huiles essentielles sont ajoutés à 3 ml de DMSO pour une solution mère à 400 pg/ml. On réalise ensuite une dilution au quart (1 ml de solution mère dans 3ml de bouillon Muller Hinton) pour une solution de 100mg/I (ou 100pg/ml), qui correspond à une concentration de 10%. Des dilutions sont ensuite réalisées pour obtenir des concentrations finales variant entre 0,05% à 0,5%. Les dilutions préparatoires sont réalisées dans de l'eau déminéralisée stérile et les dernières dilutions se font dans du bouillon de Muller-Hinton. Les concentrations des formulations d'huiles essentielles sont exprimées dans la présente demande en pourcentage final par rapport à la concentration "pure" de départ.

A.3. Antibiotiques Quatre antibiotiques ou associations d'antibiotiques ont été testés : Le Méropenèm (Laboratoire ASTRA ZENEA ; poudre prête à l'emploi ; 1 g) est un antibiotique à très large spectre réservé à l'usage hospitalier. Cet antibiotique de la famille des carbapénèmes est actif sur 2918571- 47 Pseudomonas aeruginosa et constitue un traitement de référence contre les bactéries Acinetobacter. La Rifampicine (Laboratoire AVANTIS ; poudre prête à l'emploi ; 600 mg) fait partie de la famille des piperazines et rifamycines. Cette 5 molécule est active sur les bactéries gram+ et certaines bactéries gram-. Elle peut en particulier être utilisée dans le traitement des infections à Staphylocoque et antituberculeux. Cet antibiotique possède une action efficace sur 40 à 50% des bactéries Acinetobacter mais le risque d'émergence de souches résistantes est important. 10 La tigecycline (Laboratoire Wyeth ; poudre prête à l'emploi est une nouvelle molécule (glycylcycline) apparentée aux cyclines (famille des glycylcyclines). Son spectre d'action est très large. Son utilisation est réservée au milieu hospitalier. Cet antibiotique est actif sur bactéries gram+ mais n'agit pas sur pseudomonas aeruginosa. D'autre part, son efficacité et 15 la stabilité de son efficacité sur Acinetobacter doivent être démontrées. L'association Pipéracilline / Tazobactam (Laboratoire Wyeth) correspond à l'association d'une pénicilline à large spectre (ureido pénicilline) à un inhibiteur de bêta-lactamase, le tazobactam. Cet antibiotique est réservé à l'usage hospitalier. Son efficacité sur les 20 bactéries Acinetobacter est variable selon le mécanisme de résistance incriminé. Mode de dilution des antibiotiques pour l'obtention d'une solution mère: les antibiotiques sont fournis avec une ampoule de dilution. Chaque antibiotique est dissout dans sont diluant d'origine. Les gammes de 25 dilution ultérieures se font soit en eau distillée, soit en bouillon Muller Hinton (BH) (étude en milieu liquide). Dans le cas du Méropénèm : reprendre le flacon de 1 g dans sa totalité dans 10 ml d'eau distillée. On obtient une solution à 100mg/ml. Faire une dilution au 1/100è (100 pl dans 10mI) pour obtenir une solution 30 mère à 1 mg/ml. Les dilutions seront choisies en fonction des "CMI" des souches bactériennes. 2918571- 48 Dans le cas de la Rifampicine : reprendre le flacon de 600 mg dans sa totalité avec l'ampoule de solvant de 10ml correspondante. On obtient une dilution à 60mg/ml. Mettre 100pg dans 6 ml d'eau distillée et on obtient une solution à 1 mg/ml. On réalise alors les dilutions pour obtenir les 5 concentrations désirées en fonction des "CMI" des souches bactériennes. Dans le cas de la Tiqecycline : reprendre le flacon de 50mg dans 10mI de solution saline, puis réaliser une solution à 1 mg/ml. Réaliser les gammes de dilution comme ci-dessus. Dans le cas de l'association Pipéracilline / Tazobactam 10 (4q/500mq) : la Pipéracilline est associée au Tazobactam en proportion de 8/1. Reprendre le flacon de 4g/500ml dans 10mI de solution saline, puis réaliser une solution de lmg/ml. Réaliser les gammes de dilution comme ci-dessus.

15 B. METHODOLOGIE IN VITRO Concentrations minimales inhibitrices : pour chacune des souches bactériennes, on a réalisé un antibiogramme complet et déterminé la concentration minimale inhibitrice (CMI) par ETEST pour les 4 antibiotiques indiqués ci-dessus. La CMI permet de déterminer les 20 concentrations à utiliser pour réaliser les courbes d'association. La méthodologie choisie pour tester in vitro les huiles essentielles et les antibiotiques est la cinétique de bactéricidie sur 3 points : au temps T zéro, au temps T + 6 heures et au temps T + 18 heures (et également au temps T + 36 heures pour les huiles essentielles). Les souches 25 bactériennes sont mises en contact avec des gammes de dilution des produits testés (formulation d'huiles essentielles, antibiotique(s) ou formulation d'huiles essentielles + antibiotique(s)) dans un bouillon Muller Hinton. Un aliquot de solution est prélevé à T0, T+6h, T+18h et inoculé sur un milieu gélosé afin de réaliser un dénombrement bactérien. Les boîtes 30 gélosées sont incubées 24 à 72 heures à 37 C.

L'inoculum bactérien est réalisé à partir d'une suspension à 0,5 MF (Mac Farland) correspondante pour Acinetobacter baumannii à environ 2x10$ UFC (Unité Formant une Colonie). L'inoculum final correspond à une dilution au 1/100e du MF 0,5, soit environ 2.106 UFC/mI. L'inoculum final est contrôlé à chaque expérimentation. Le dénombrement bactérien est réalisé par la technique de dilution successive et étalement au râteau sur des boites de gélose. Tests d'associations : Les associations d'antibiotiques et d'huiles essentielles ont été testées à des concentrations sub-inhibitrices (concentration immédiatement inférieure à la concentration d'efficacité) afin de pouvoir mettre en évidence une éventuelle synergie ou indifférence ou antagonisme d'association. Si on associe un antibiotique Al et une formulation d'huiles essentielles A2, on considère que les activités antibactériennes des composés Al et A2 sur une souche bactérienne donnée sont indépendantes l'une de l'autre si : CMI de l'association (Al +A2) + CMI de l'association (Al +A21 = 1, CMI de Al CMI de A2 CMI représentant la concentration minimale inhibitrice. Si la fraction de concentration inhibitrice (FIC index) est supérieure ou égale à 2, les activités antibactériennes des composés Al et A2 sont dites antagonistes. Lorsque FIC index est supérieure à 1 et inférieure ou égale à 2, on parle d'indifférence à l'antagonisme d'association. Enfin, si FIC index est inférieure ou égale à 0,75, ont considère que les composés Al et A2 agissent en synergie. Les tests ont été élaborés sur la base de l'introduction séquentielle de l'antibiotique ou de la formulation d'huile essentielle, par exemple : introduction de la formulation d'huiles essentielles (ou de l'antibiotique) au temps TO et introduction de l'antibiotique (ou de la formulation d'huiles essentielles) au temps TO ou plus tardivement, au temps T+1 h, T+2h ou T+3h.

Analyse : tous les tests sont dupliqués ou tripliqués.

C. RESULTATS in vitro Parmi les formulations testées in vitro, on a notamment évalué l'efficacité antibactérienne de formulations d'huiles essentielles en émulsion dans de l'eau, en présence ou en absence d'antibiotique(s) sur des souches bactériennes Acinetobacter baumannii multirésistantes d'origine hospitalière.

C.1. Cinétiques de bactéricidie des formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 sur les 5 souches d'Acinetobacter

C.1.a. Activité des huiles essentielles sur les 5 souches d'Acinetobacter Les résultats obtenus, qui sont en partie présentés aux figures 1 et 2, sont résumés dans le tableau 1 ci-dessous. Huiles SAN RCH 12 CIP7034 C1P107292 essentielles Bactériostase en MAT POWER 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 6 heures MAT POWER R2 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 Bactéricidie en 6 MAT POWER 0.10 0.10 0.15 0.10 0.15 heures MAT POWER R2 0.10 0.10 0. 10 0.10 0.15 Bactéricidie en 18 MAT POWER 0.40 0.20 0.20 0.20 0.20 heures MAT POWER R2 0.20 0.20 0.30 0.30 0.20 Sans . recroissance Bactéricidie en 36 MAT POWER 0.40 0.30 0.40 0.30 0.30 heures MAT POWER R2 0.30 0.20 0.40 0. 40 0.40 Sans recroissance Tableau 1 Une bactériostase sur 6 heures est obtenue avec des concentrations de 0.10% quelque soit la sensibilité de la souche aux antibiotiques. La bactéricidie (-3 à 4 log de UFC) est obtenue pour des concentrations entre 0.20% et 0.40% ; il n'y a pas de relation entre la concentration bactéricide et le phénotype de résistance aux antibiotiques. Pour des concentrations inférieures à 0.5% finales il n'y a aucune recroissance bactérienne en 36 heures dans le milieu de culture. Par ailleurs, ces résultats démontrent que la mise en contact d'une surface (par exemple, la surface de la boite de gélose) avec une formulation d'huiles essentielles (par exemple, MAT POWER ou MAT POWER R2) permet de diminuer de façon drastique le nombre de bactéries pathogènes présentes sur ladite surface, voire d'éliminer complètement lesdites bactéries, qui sont issues d'une souche clinique responsable d'infections nosocomiales.

C.1.b. Influence de la conservation des huiles à température ambiante sur l'efficacité des formulations d'huiles essentielles Pour chacune des formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2, deux formulations provenant du même lot de départ ont été testées : - MAT POWER-1 ou MAT POWER R2-1, une formulation utilisée moins de 15 jours après sa fabrication ; et - MAT POWER-2 ou MAT POWER R2-2, une formulation utilisée 6 mois après sa fabrication. . • Test avec la formulation d'huiles essentielles MAT POWER Les dilutions auxquelles on observe une bactériostase en 6 heures, une bactéricidie en 6 heures, une bactéricidie en 18 heures sans recroissance ou une bactéricidie en 36 heures sans recroissance sont indiquées dans le tableau 2 ci-dessous.

MAT POWER Huiles SAN RCH 12 CIP7034 CIP107292 essentielles Bactériostase en 6 MAT POWER-1 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 heures MAT POWER- 2 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 Bactéricidie en 6 MAT POWER-1 0.10 0.10 0.15 0. 10 0.15 heures MAT POWER-2 0.15 0.15 0.20 0.15 0.10 Bactéricidie en MAT POWER-1 0.40 0.20 0.20 0.20 0.20 18heures sans MAT POWER-2 0.40 0.40 0.30 0.40 0.40 recroissance Bactéricidie en 36 MAT POWER-1 0.40 0.30 0.40 0.30 0.30 heures sans MAT POWER-2 0.40 0.40 0.50 0.40 0.40 recroissance Tableau 2

La moyenne des différences entre les 2 formulations MAT POWER-1 et MAT POWER-2 est de 0.0625% (écart de 0 à 0.20%). II n'y a pas de différence significative de l'activité des deux formulations sur les bactéries testées. La conservation à température ambiante n'est donc pas significativement délétère sur l'activité du produit MAT POWER. • Test avec la formulation d'huiles essentielles MAT POWER R2

Les dilutions auxquelles on observe une bactériostase en 6 heures, une bactéricidie en 6 heures, une bactéricidie en 18 heures sans recroissance ou une bactéricidie en 36 heures sans recroissance sont indiquées dans le tableau 3 ci-dessous. MAT POWER R2 Huiles SAN RCH 12 C1P7034 CIP107292 essentielles Bactériostase en 6 MAT POWER R2-1 0.10 0. 10 0.10 0.10 0.10 heures MAT POWER R2-2 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 Bactéricidie en 6 MAT POWER R2-1 0.10 0.10 0.10 0.10 0.15 heures MAT POWER R2-2 0.15 0.15 0.15 0.10 0.15 Bactéricidie en MAT POWER R2-1 Non 0.20 0.15 0.30 0. 20 18heures atteinte Sans recroissance aux concent rations testées MAT POWER R2-2 0.20 0.20 0.30 0.30 0.30 • Bactéricidie en 36 MAT POWER R2-1 0.40 0.20 0.20 0.30 0.30 heures MAT POWER R2-2 0.30 0.20 0.40 0.40 0.40 Sans recroissance Tableau 3 La moyenne des différences entre les 2 formulations MAT POWER R2-1 et MAT POWER R2-2 est de 0.055% (écart de 0 à 0.20%). Il n'y a pas de différence significative de l'activité des deux formulations sur les bactéries testées. La conservation à température ambiante n'est donc pas significativement délétère sur l'activité du produit MAT POWER R2.

C.2. Activité des antibiotiques C.2.a. Profil de sensibilité des souches vis-à-vis de 3 antibiotiques Les concentrations minimales inhibitrices (CMI) des antibiotiques Méropénèm, Rifampicine et Tigecycline ont été déterminées par la technique du ETESTO dans le cas de 5 souches d'Acinetobacter baumannii. Les résultats obtenus sont les suivants: Souche al pour chaque ANTIBIOTIQUE d'Acinetobacter baumannii Méropénèm Rifampicine Tigecycline p glm l pglm l pg/ml SAN 0.75 4 8 RCH 6 4 16 12 4 8 4 CIP 7034 1.5 1.5 1.5 CIP 107292 32 4 4 Tableau 4

C.2.b. Cinétiques de bactéricidie des antibiotiques C.2.b.1. Méropénèm L'activité du méropénèm, de la famille des carbapénèmes, est essentiellement bactériostatique vis-à-vis des 4 souches d'Acinetobacter sensibles aux carbapénèmes, les souches 12, RCH, SAN et CIP 7034 (voir Figure 3A-D), quelque soit le mécanisme de résistance. Aucune action n'est observée vis-à-vis de la souche CIP 107292 résistante aux carbapénèmes (voir figure 3E).

C.2.b.2. Rifampicine Les résultats obtenus démontrent que l'activité de la rifampicine est variablement bactériostatique (2 souches sur 5 ; souches SAN et CIP 7034; voir figure 4C,D) ou bactéricide (3 souches sur 5 ; souches 12, RCH et CIP 107292; voir figure 4A,B,E) à des concentrations 2 ou 4 fois supérieures à la CMI. La CMI n'est pas prédictive de l'activité bactéricide de la molécule.

C.2.b.3. Tigecycline Les CMI mesurées dans le cas de la tigecycline sont généralement élevées (4-16 pg/ml) sauf pour la souche 7034 (CMI de 1.5 pg/ml); cette molécule est le plus souvent bactériostatique (voir figure 5). La bactéricidie. est obtenue avec une concentration de tigecycline 4 fois supérieure à la CMI pour la souche RCH, 2 et 4 fois supérieure à la CMI pour la souche CIP 7034, et 4 fois supérieure à la CMI pour la souche CIP 107292 (voir figure 5B,D,E respectivement). 5 C.2.b.4. Association pipéracilline I tazobactam Avec l'association pipéracilline I tazobactam, une activité bactériostatique est observée au mieux au temps TO + 6 heures (Voir Figure 6). C.3. Activité antibiotique des associations d'huiles essentielles et des antibiotiques

C.3.a. Concentrations des antibiotiques et des huiles essentielles 10 utilisées au cours des cinétiques de bactéricidie d'association en 3 points dans le cas des 5 souches d'Acinetobacter Huiles essentielles Meropenem pg/mi Rïfampicinè peul Tigeccline uglrnl SAN MAT POWER 0.15 % 0,375 2 4 MAT POWER R2 0.10 % 0,375 2 4 RCH MAT POWER 0.15 % 3 2 8 MAT POWER R2 0.10% 3 2 8 12 MAT POWER 0.15 % 2 4 2 MAT POWER R2 0.10% 2 4 2 CIP 7034 MAT POWER 0.15 % 0,75 0,75 0,75 MAT POWER R2 0.10 % 0,75 0,75 0,75 CIP 107292 MAT POWER 0.15 % 16 2 2 MAT POWER R2 0.10% 16 2 2 Tableau 5

15 C.3.b. Association de concentrations sub-inhibitrices de méropenème et de formulations d'huiles essentielles

Souche SAN Dans le cas de la souche SAN, une synergie d'action entre la 20 formulation d'huiles essentielles MAT POWER R2 et l'antibiotique méropenème est observée à T+6 heures (voir Figure 7A).

Souche RCH Dans le cas de la souche RCH, on observe une synergie d'action entre les formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 et le méropenème. Celle-ci est particulièrement significative dans le cas de MAT POWER (voir Figure 7B).

Souche CIP 107292 Dans le cas de la souche CIP 107292, une synergie très partielle est obtenue d'action entre la formulation d'huile essentielle MAT POWER R2 et le méropenème (voir Figure 7C).

Souche CIP 7034 Dans le cas de la souche CIP 107292, on obtient un effet synergique entre les formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 et le méropenème à T+6 heures et jusqu'à T+18heures (voir Figure 7D).

Souche 12 Dans le cas de la souche 12, une synergie est obtenue d'action entre la formulation d'huile essentielle MAT POWER R2 et le méropenème jusqu'à T+18 heures (voir Figure 7E).

C.3.c. Association de concentrations sub-inhibitrices de rifampicine et de formulations d'huiles essentielles

Souche SAN Dans le cas de la souche SAN, les formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 ont été utilisée à des dilutions de 0.15% et 0.10% respectivement.

On observe une synergie partielle (à 6 heures) entre MAT POWER R2 et l'antibiotique Rifampicine (voir Figure 8A).

Souche RCH Dans le cas de la souche RCH, les formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 ont été utilisée à des dilutions de 0.30% et 0.15% respectivement. On observe une synergie bactéricide à 6 heures entre MAT POWER R2 et la Rifampicine (voir Figure 8B).

Souche CIP 107292 Dans le cas de la souche CIP 107292, les formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 ont été utilisée à des dilutions de 0.15% et 0.10% respectivement. Une synergie bactéricide est observée à T+6 heures entre MAT POWER R2 et la Rifampicine et à T+18 heures entre MAT POWER et la Rifampicine (voir Figure 8C).

Souche CIP 7034 Pour la souche 7034, une synergie bactéricide est observée à 6 heures entre MAT POWER R2 et la Rifampicine (voir Figure 8D).

C.4. Influence du délai entre l'administration de la formulation d'huiles 25 essentielles et l'administration de l'antibiotique sur la bactéricidie de l'association formulation d'huiles essentielles I antibiotique vis-à-vis d'Acinetobacter

C.4.a.1 Association MAT POWER I Méropénèm 10 15 20 30 Souche SAN Dans le cas de la souche SAN, on observe une synergie partielle (à 6 heures) entre la formulation MAT POWER et le Méropénèm lorsque la formulation MAT POWER est administrée à TO et le Méropénèm est administré à TO (introduction concomitante), T+2h ou à T+3heures (voir Figure 9A).

Souche RCH Dans le cas de la souche RCH, une synergie est obtenue lorsque le Méropénèm est administré à T+2h ou à T+3heures (voir Figure 9B).

Souche 12 Dans le cas de la souche 12, une synergie est obtenue lorsque le Méropénèm est administré à TO (introduction concomitante), T+1 h, T+2h ou à T+3heures (voir Figure 9C).

Souche CIP7034 Dans le cas de la souche CIP7034, la cinétique obtenue n'est pas interprétable en terme de synergie d'action (voir Figure 9D).

Souche CIP 107292 Pour la souche CIP 107292, on observe une absence de synergie ou une synergie faible et non significative (voir Figure 9E). 25 C.4.a.2 Association MAT POWER R2 / Méropénèm Souche SAN Dans le cas de la souche SAN, on observe une synergie entre le Méropénèm et la formulation MAT POWER R2 lorsque le Méropénèm est administré aux temps suivants : TO, T+l heure et T+2heures (voir figure 30 10A). 15 20 Souche RCH Pour la souche RCH, une synergie est obtenue lorsque le Méropénèm est administré aux temps suivants : TO (administration simultanée), T+1 heure, T+2heures et T+3heures (voir Figure 10B).

Souche 12 Dans le cas de la souche 12, une synergie est obtenue lorsque le Méropénèm est administré à T+1 heure (voir Figure 10C).

Souche CIP7034 Dans le cas de la souche CIP7034, on observe une synergie lorsque le Méropénèm est administré aux temps suivants : TO (administration simultanée), T+1 heure, T+2heures et T+3heures (voir Figure 10D).

Souche CIP 107292 Pour la souche CIP 107292, on observe une synergie lorsque le Méropénèm est administré aux temps suivants : TO (administration simultanée), T+1 heure, et T+2heures (voir Figure 10E). C.4.b.1 Association MAT POWER I Rifampicine Souche SAN Pour la souche SAN, on observe une synergie partielle (à 6 25 heures) entre la Rifampicine et la formulation MAT POWER uniquement lorsque la Rifampicine est administrée à T+1 heure (voir Figure 11A). Cet effet est durable. 10 15 20 30 Souche RCH Dans le cas de la souche RCH, une synergie est obtenue à T+6 heures lorsque la Rifampicine est administrée au temps TO (administration simultanée), T+1 heure ou T+3heures (voir Figure 11 B).

Cet effet est durable lorsque la Rifampicine et la formulation MAT POWER sont administrées simultanément (à TO).

Souche CIP7034 Pour la souche CIP7034, on n'observe pas de synergie, que la 10 Rifampicine soit administrée au temps TO, T+1 heure, T+2heures ou T+3heures (voir Figure 11C).

Souche CIP 107292 Pour la souche CIP 107292, une synergie est observée lorsque la 15 Rifampicine est administrée au temps TO (synergie obtenue à T+18heures) ou au temps T+1 heure ou T+2h (effet durable) (voir Figure 11). C.4.b.2 Association MAT POWER R21 Rifampicine Souche 12A Dans le cas de la souche 12A, on observe une synergie à 6 heures entre la Rifampicine et la formulation MAT POWER R2 lorsque la Rifampicine est administrée au temps T+1 heure ou T+3 heures (voir Figure 12). Souche RCH Pour la souche RCH, une synergie est obtenue à 6 heures lorsque la Rifampicine est administrée aux temps TO (administration simultanée) ou T+1 heure (voir Figure 12). 20 25 30 Souche CIP7034 Dans le cas de la souche CIP7034, une synergie est obtenue à 6 heures quel que soit le délai d'administration, et en particulier lorsque la Rifampicine est administrée au temps TO (administration simultanée), T+1 heure ou T+3heure (voir Figure 12).

Souche CIP 107292 Pour la souche CIP 107292, on observe une synergie à 6 heures lorsque la Rifampicine est administrée aux temps suivants : TO (administration simultanée), T+1 heure, et T+3heures (voir Figure 12).

C.5. CONCLUSION Les résultats décrits ci-dessus démontrent que les formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 ont uneactivité bactéricide sur des souches cliniques d'Acinetobacter baumannii à des concentrations faibles, variant de 0.05% à 0.5%, et plus particulièrement à des concentrations comprises entre 0.10% et 0.15% pour MAT POWER R2 et des concentration supérieures ou égales à 0.15% (et inférieures à 0.5%) dans le cas de MAT POWER. Pour des concentrations inférieures, on observe une activité bactéricide rapide (- 5 log à T+3 h) avec une re-croissance à 18h montrant un effet de type concentration dépendant. Il n'existe pas de différence significative entre les 4 souches testées vis-à-vis des formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2. L'association de concentrations sub-inhibitrices d'une formulation d'huiles essentielles (MAT POWER ou MAT POWER R2) et d'un antibiotique permet d'obtenir une synergie d'action dans le cas des deux antibiotiques testés (Méropénèm et Rifampicine), qui appartiennent à deux familles différentes d'antibiotiques. Lorsque l'antibiotique et la formulation d'huile essentielle sont administrés simultanément ou à une heure d'intervalle, on observe généralement une action synergique. L'efficacité bactéricide observée in vitro en utilisant des formulations d'huiles essentielles selon l'invention est due à une action combinée synergique de différents composants sur la paroi bactérienne, sur la membrane cellulaire sur le métabolisme et sur la synthèse protéique. Les résultats présentés dans cette étude suggèrent par conséquent qu'une formulation d'huiles essentielles, une composition antibiotique, une combinaison ou un kit selon l'invention pourrait permettre de lutter contre I 'émergence de résistances aux antibiotiques.

D. EXPERIMENTATION in vivo : Administration d'un antibiotique et d'une formulation d'huiles essentielles à des patients pour traiter une infection nosocomiale Une étude in vivo porte sur des patients adultes ayant contracté une infection urinaire provoquée par une souche d'Acinetobacter baumannii à l'hôpital.

Les patients sont traités avec un antibiotique, la rifampicine, et/ou avec la formulation d'huiles essentielles MAT POWER. La formulation MAT POWER est diluée à 0.15% dans de l'eau distillée et administrée oralement, sous la forme d'une solution buvable, deux fois par jour pendant 10 jours.

Le traitement avec la rifampicine consiste en l'administration de 20 mg/kg/jour deux fois par jour en intraveineuse par perfusion lente (environ 1 heure) pendant dix jours. Pour chaque patient, on réalise une analyse d'urine (numération des bactéries Acinetobacter baumannii) avant la première administration de formulation MAT POWER et/ou d'antibiotique, puis tous les 6 jours pendant un mois. • Etude 1 Une première étude porte sur 18 patients, répartis en trois groupes: - groupe I : patients traités avec la rifampicine; - groupe Il : patients traités avec la formulation MAT POWER; - groupe III : patients auxquels on administre simultanément la formulation MAT POWER et la rifampicine. L'analyse des numérations des bactéries Acinetobacter baumannii dans l'urine des patients confirme les résultats obtenus in vitro : les formulation d'huiles essentielles selon l'invention sont particulièrement efficaces pour lutter contre les infections nosocomiales et peuvent permettent de renforcer l'efficacité d'un traitement antibiotique chez un patient. • Etude 2 Une seconde étude porte sur 20 patients, répartis en quatre groupes: - groupe I : patients traités avec la rifampicine; groupe Il : patients auxquels on administre simultanément la formulation MAT POWER et la rifampicine; - groupe III : patients auxquels on administre (i) la formulation MAT POWER puis, une heure après la fin du traitement, (ii) la rifampicine; et - groupe IV : patients auxquels on administre (i) la formulation MAT POWER puis, deux heures après la fin du traitement, (ii) la rifampicine. Les huiles essentielles sont administrées en premier pour préparer le "terrain" bactérien, afin de faciliter l'action de l'antibiotique de synthèse. L'analyse des numérations des bactéries Acinetobacter baumannii dans l'urine des patients démontre qu'une formulation d'huiles essentielles peut permettre de renforcer l'efficacité d'un traitement antibiotique même lorsque la formulation d'huiles essentielles et l'antibiotique ne sont pas administrés simultanément mais séquentiellement, par exemple à une ou deux heure(s) d'intervalle.

E. Activité antimicrobienne de deux formulations d'huiles essentielles extraites de végétaux vis-à-vis de souches bactériennes de Staphylococcus aureus et Pseudomonas aeruginosa

E.1. Protocole expérimental E.1.1. Matériel E.1.1.1. Souches bactériennes L'étude est réalisée sur les souches suivantes: une souche de référence de S. aureus American Type Culture Collection (ATCC) 29213 une souche de référence de P. aeruginosa ATCC 27853 un isolat clinique de P. aeruginosa isolé d'une d'expectoration et d'aspect muqueux un isolat clinique de P. aeruginosa isolé d'une d'expectoration, multi-résistant aux antibiotiques

E.1.1.2. Extraits d'huiles essentielles Deux formulations d'huiles essentielles MAT POWER et MAT POWER R2 sont testées à différentes concentrations (0,10%, 0,15%, 0,20%, 0,30%, 0,40%, 0,50% et 1%). Les formulations d'huiles essentielles sont administrées en premier, avant d'administrer l'antibiotique, pour préparer le terrain bactérien, afin de faciliter l'action de l'antibiotique de synthèse. 20 25 E.1.2. Méthodes E.1.2.1. Antibiogramme des deux souches de P. aeruginosa isolées d'expectorations Un antibiogramme des deux isolats cliniques de P. aeruginosa est réalisé. Pour cela, quelques colonies sont prélevées à l'aide d'un écouvillon et agitées dans une ampoule de NaCl à 0,85% (Biomérieux) afin d'obtenir une densité optique de 0,5 Mac Farland correspondant à environ 108 bactéries par mL. Une dilution au 100ème est ensuite réalisée en mettant 0,1 mL de ce mélange dans un tube à essai contenant 10 ml d'eau stérilisée. Puis, la suspension de bactéries est ensemencée sur deux géloses Muller-Hinton (boîtes carrées) par la technique de l'écouvillon. Enfin, les disques d'antibiotiques sont déposés sur les 2 boîtes à l'aide d'un distributeur semi-automatique. Les boîtes sont incubées à 37 C pendant 24 heures, puis, les diamètres d'inhibition sont lus et les résultats interprétés à l'aide un logiciel informatique.

E.1.2.2. Préparation de la gamme d'huile essentielle Les concentrations d'huile essentielle testées vont de 0,10% à 1%.

On réalise une dilution au 2/3 de la solution initiale d'huile essentielle en DMSO de façon à solubiliser l'huile: pour cela, on mélange 1 mL d'huile essentielle pure dans 1,5 mL de DMSO (dimethylsulfoxyde). On obtient une solution mère à 400pg/mL. Ensuite une dilution au 1/4 est réalisée: 1,5mL de la solution mère est prélevée et mélangée dans 4,5mL de bouillon cceur/cerveau. Une solution A à 100pg/mL est ainsi obtenue. Ceci correspond à une concentration d'huile essentielle à 10%. Si on veut par exemple une dilution d'huile essentielle à 0,2%, 200pl de la solution A sont prélevés et mélangés avec 9,8mL de bouillon BH. 65 E.1.2.3. Le Mac Farland et le témoin Pour chaque expérimentation, un mélange à 0,5 Mac Farland et un témoin sont réalisés, systématiquement vérifiés et comparés pour permettre la validation du protocole. Le Mac Farland est une unité bactériologique de densité optique. - le Mac Farland 0,5: c'est une unité bactériologique de densité optique qui correspond à une suspension d'environ 108 CFU/mL. A partir de cette solution sont réalisées 3 dilutions au 100ème en cascade (prélever 0,1 mL du MF et les diluer dans 10 mL d'eau préalablement stérilisée). Ainsi sont obtenues 3 dilutions 10-3, 10-5 et 10-7. Puis un volume de 0,1 mL de chacune de ces dilutions est prélevé et ensemencé sur gélose au sang. - le témoin: 0,1 mL du MF 0, 5 sont prélevés et mis dans 10mL de bouillon BH. Puis trois dilutions en cascade sont réalisées (10-3, 10-5 et 10-7), et ensemencées, ce qui correspond au témoin TO. Le tube contenant le témoin est incubé à 37 C pendant 6 heures puis 18 heures avec, à chaque fois, une réalisation des 3 dilutions en cascade et de leurs ensemencements.

E.1.2.4. Cinétique de bactéricidie La méthodologie choisie pour le test in vitro des huiles essentielles est la cinétique de bactéricidie sur trois points. Les souches bactériennes sont mises en contact avec des gammes de dilution des produits testés dans un bouillon coeur/cerveau. Un volume de solution est prélevé à TO, T+ 6h, T+18h (c'est-à-dire après incubation à 37 sous agitation pendant 6h puis 18h) et ensemencé sur gélose au sang par étalement au râteau. Les boîtes de Pétri sont mises à l'étuve pendant 24h puis un dénombrement bactérien est réalisé. Les résultats sont reportés dans un tableau permettant par la suite la réalisation d'une courbe. Chaque expérimentation est réalisée en triple.

E.2. Résultats - Discussion E.2.1. Antibiogramme des deux souches de P. aeruginosa isolées à partir d'expectorations L'antibiogramme de la souche P. aeruginosa multi-résistante aux 5 antibiotiques est présente en Figure 13. Celui de la souche d'aspect muqueux a également été réalisé mais n'a pas été intégré dans ce travail. Antibiotique Sensibilité Antibiotique Sensibilité céfépime R amikacine R amoxicilline R tobramycine R pipéracilline R gentamicine 1 pipéracilline + tazobactam I netilmicine I Amoxicilline + ac R kanamycine R clavulanique ceftazidime R colistine S cefamandole R rifampicine I cefoxitine R sulfaméthoxazole R cefuroxime R furantoine R imipénème S doxycyline R ticarcilline R Ac. Nalidixique R ticarcilline + ac clavulanique R ofloxacine R aztreonam R ciprofloxacine S cefalotine R chloramphénicol 1 fosfomycine R S = sensible 1 = intermédiaire R = résistant

10 La souche de P. aeruginosa est résistante à toutes les blactamines excepté à l'imipénème, qui reste l'antibiotique de choix. Par_ ailleurs, la bactérie n'est sensible à aucun aminoside. Elle reste toutefois sensible à la colistine et à la ciprofloxacine. Ce profil est dû à des accumulations de mécanismes de résistance (b-lactamases, pompes à 15 efflux...). Des souches de P. aeruginosa multi-résistantes aux antibiotiques sont fréquemment isolées chez des patients en milieu hospitalier. 67 E.2.2. Résultats de la cinétique de bactéricidie de l'huile essentielle MAT POWER Pour qu'une substance soit considérée comme bactéricide, elle doit tuer 99,90% des bactéries, c'est-à-dire qu'elle doit faire baisser de 3 log au moins la concentration de bactéries initialement présentes. La concentration de rupture tuant 99,90% de bactéries, est appelée concentration minimale bactéricide ou CMB. La limite de bactéricidie est indiquée par une ligne horizontale sur les Figures 14 à 22.

E.2.2.1. S. aureus ATCC 29213: Pour avoir une représentation moyenne de ces cinétiques, nous avons réalisé un graphique moyen représentant la cinétique de bactéricidie, en prenant en compte la moyenne des log des concentrations bactériennes sur les trois séries. Pour réaliser cette courbe moyenne (Figure 15) quelques notions de la cinétique de bactéricidie sont précisées ici: - l'erreur admise: Pour ce genre de cinétiques il est admis qu'une erreur de 1log est acceptable. Les moyennes seront donc réalisées, à partir des valeurs qui respectent cette condition. - la limite de détection: Nous travaillons sur des dilutions en cascade, la moins grande étant 10-3. Sur la gélose correspondant à cette dilution le plus petit dénombrement que nous puissions faire est de 1 colonie. Cette colonie représente initialement 1 bactérie. Cela signifie que dans la solution non diluée il y aurait 1000 bactéries, soit 3log. En-appliquant l'erreur admise, nous considérons que la limite de détection est donc de 2log. Grâce à ce graphique nous pouvons estimer que la CMB de MAT POWER pour la souche de S.aureus est aux alentours de 0,15%.

On observe également qu'à 18 heures, les bactéries se multiplient à nouveau, malgré la présence d'huile essentielle à concentration élevée.

Ainsi, l'huile essentielle ne semble être active que pendant 6 heures. En terme de posologie in vivo, cela ce traduirait donc par une administration toutes les 6 heures.

E.2.2.2. P. aeruginosa ATCC 27853 Pour la souche de référence de P .aeruginosa, La CMB de MAT POWER est proche de 0,15% (Figure 16). Ici encore, à 18 heures nous constatons que la souche recommence à se développer; et comparée à la souche de S.aureus, nous pouvons dire qu'elle semble se redévelopper plus rapidement.

E.2.2.3. P. aeruginosa d'aspect muqueux La gamme comprend les concentrations suivantes: 0,10%, 0,16%, 0,22%, 0,33%, 0, 44%, 0,55% et 1%. Malgré cela, la cinétique a la même allure et la CMB peut être déterminée (Figure 17). Ici, la CMB est comprise entre 0,10% et 0,15%. A de faibles concentrations (jusqu'à 0,15%) la souche se redéveloppe après 18h. Par contre pour les concentrations plus élevées, MAT POWER reste active même à + 18 heures.

E.2.2.4. P. aeruginosa multi-résistante aux antibiotiques: Pour cette souche, nous constatons que la CMB est faible (environ 0,15%) malgré le fait qu'elle soit multi-résistante aux antibiotiques (Figure 18). Cela montre bien que les huiles essentielles n'ont pas le même mode d'action que les antibiotiques. Par ailleurs, ces résultats semblent montrer que la souche n'a pas de mécanisme de résistance vis-à-vis de MAT POWER. En comparant les résultats des 3 souches de P.aeruginosa, nous constatons que l'huile essentielle MAT POWER n'a pas le même comportement. En effet il semblerait que pour l'ATCC 27893 la HE n'est plus active après 6H, même à de fortes concentrations, alors que pour les 2 autres souches, de fortes concentrations en huile essentielle empèchent une recroissance. E.2.3. Résultats de bactéricidie de l'huile essentielle MAT POWER R2 E.2.3.1. S. aureus ATCC 29213 Pour ce test, nous n'avons réalisé que deux séries. La CMB semble être ici plus proche de 0,20% que de 0,15%. Pour des concentrations égales ou supérieurs à la CMB la souche ne se redeveloppe plus, même à 18h (Figure 19).

E.2.3.2. P. aeruginosa ATCC 27853: Pour ce test, nous n'avons réalisé que deux séries. Pour cette bactérie la CMB de MAT POWER R2 semble être comprise entre 0,10% et 0,15%. En comparaison avec la série de MAT POWER, nous remarquons que l'effet bactéricide reste présent à +18h pour des concentrations supérieures à 0,20% (Figure 20).

E.2.3.3. P. aeruginosa d'aspect muqueux: La CMB est comprise entre 0 et 0,10%. Comme pour les autres séries de MAT POWER R2, l'effet bactéricide est maintenu à +18h à partir de la concentration de 0,15% (Figure 21).

E.2.3.4. P. aeruginosa multi-résistant aux antibiotiques: D'après ces données, la CMB est très proche de 0,10%. Les bactéries se redéveloppent à +18h uniquement pour les concentrations de 0,10% et 0,15% (Figure 22).30 E.2.4. Discussion générale Les résultats des différentes expérimentations montrent des variabilités au sein des séries. Lors d'études de cinétiques bactériennes, un écart type de 1 log est considéré comme acceptable.

Les phénomènes de variabilités sont dus, en partie, au fait que ces tests se sont inscrits sur une période de temps assez longue. Donc le matériel ne provient pas toujours des mêmes lots (Müller Hinton, Gélose au Sang ...), sauf pour les huiles essentielles. De plus, la technique manuelle offre une variabilité plus grande que celle d'un automate. Par ailleurs, la bactérie est un être vivant dont le comportement biologique est soumis à variation. De plus, dans ces manipulations, nous utilisons des huiles essentielles qui sont des composés très peu solubles dans l'eau. La solubilité est augmentée grâce au DMSO. Ces spécificités physiques de viscosité peuvent être un biais dans les résultats des expérimentations (résidus plus ou moins importants sur le matériel de prélèvement). Pour ces raisons, il peut être nécessaire de réaliser les tests en triplicat pour pouvoir obtenir des résultats significatifs exploitables. Il faut tout de même rappeler que les valeurs de CMB que nous donne cette manipulation, restent très acceptable dans le cadre de la thérapie in vivo. L'intérêt de cette étude a été d'observer l'effet de formulations d'huiles essentielles sur différentes souches retrouvées dans les infections nosocomiales. Mais elle a aussi permis d'observer les différences entre deux formulations d'huiles essentielles. D'après les résultats que nous avons obtenus, nous pouvons dire que MAT POWER R2 semble avoir un meilleur pouvoir bactéricide que MAT POWER. Cette observation s'appuie d'une part sur le fait que pour chaque souche la CMB est plus faible pour MAT POWER R2 que pour MAT POWER, et d'autre part sur le fait que MAT POWER R2 reste bactéricide plus longtemps.

BIBLIOGRAPHIE

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RYAN et MORRIS (2007). Brevet Américain US 7,192,575 B2 publié le 20 mars 2007. CHOI et al. (2004). Demande de brevet Coréen KR20040072459 publiée le 18 aout 2004. 72

Claims

REVENDICATIONS

1. Une composition antibiotique comprenant ou consistant en : (i) au moins un antibiotique et (ii) au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s).

2. Une combinaison comprenant ou consistant en : (i) au moins un antibiotique et (ii) au moins une formulation d'huile(s) essentielle(s), dans laquelle les composés (i) et (ii) sont sous forme juxtaposée.

3. Combinaison selon la revendication 2, dans laquelle ledit ou lesdits antibiotique(s) et ladite ou lesdites formulation d'huile(s) essentielle(s) sont présents dans deux compositions distinctes.

4. Combinaison selon la revendication 2, dans laquelle ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) et ledit ou lesdits antibiotique(s) sont présents dans une même composition. 20

5. Composition antibiotique selon la revendication 1 ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 2 à 4, dans laquelle ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) agissent en synergie avec ledit ou lesdits antibiotique(s). 25

6. Composition antibiotique selon la revendication 1 ou 5 ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 2 à 5, comprenant en outre un ou plusieurs véhicule(s) ou diluant(s) pharmaceutiquement acceptables ou une de leurs combinaisons. 30

7. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans laquelle ledit ou lesdits 7315antibiotique(s) et/ou ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) est (sont) formulé(s) pour une administration par voie entérale, parentérale (intraveineuse, intramusculaire ou sous-cutanée), transcutanée, cutanée, orale, ophtalmique, otologique, mucosale, en particulier buccale, nasale, oesophagique, vaginale, rectale, ou encore les voies intragastrique, intracardiaque, intrapéritonéale, intrapulmonaire ou intratrachéale.

8. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, dans laquelle ledit ou lesdits antibiotique(s) et/ou ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) est (sont) sous forme sèche (en particulier cachet, poudre, gélule, pilule, granule, suppositoire, comprimé, et plus précisément comprimé à libération accélérée, comprimé gastrorésistants ou comprimé à libération prolongée), gélatineuse (en particulier gel, pommade, crème ou ovule), liquide (en particulier sirop, solution injectable, infusible ou buvable ou collyre), sous forme d'un aérosol (spray, vapeur ou gaz) ou sous la forme d'un patch.

9. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans laquelle la concentration dudit ou desdits antibiotique(s) et/ou de ladite ou desdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) est une concentration sub-inhibitrice.

10. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, dans laquelle ledit antibiotique ou au moins un desdits antibiotiques est choisi parmi : (i) un antibiotique agissant sur la paroi bactérienne, en particulier un antibiotique choisi parmi : - la fosfomycine ; - un antibiotique de la famille des glycopeptides, tel que la vancomycine, la téicoplanine, la ristocétine, et l'avoparcine ; ou - un antibiotique de la famille des bêta-lactamines, représentée par- les pénames, en particulier le groupe G de la pénicilline G, le groupe M des pénicillines antistaphylococciques, le groupe A de l'amino-benzylpénicilline, le groupe des acyl-uréidopénicillines, le groupe des amidino-pénicillines et le groupe des inhibiteurs des bétalactamases ; - les pénemes et carbapénèmes, tel que le méropénèm; les céphemes, en particulier les céphalosporines de 11ère, 2ème et 31ème génération ; et - les monobactames ; (ii) un antibiotique agissant sur les membranes des cellules, en particulier un antibiotique de la famille des polymyxines, de la famille des gramicidines et la tyrocidine ; (iii) un antibiotique agissant sur le ribosome bactérien en particulier l'acide fusidique ou un antibiotique de la famille des aminosides, des phénicolés, des tétracyclines, des oxazolidinones ou du groupe des macrolides, lincosamides et synergistines (groupe "MLS") ; (iv) un antibiotique bloquant la synthèse de l'ARN messager, en particulier un antibiotique de la famille des rifamycines, représentée par la rifamycine SV et la rifampicine; (v) un antibiotique agissant sur l'ADN, en particulier un antibiotique de la famille des quinolones, des fluoroquinolones, ou des produits nitrés tels que les oxyquinoléines, les nitrofuranes ou les nitroimidazolés , (vi) un antibiotique interférant avec le métabolisme des folates, en particulier un antibiotique de la famille des sulfamides ou le triméthoprime ; (vii) un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables ; et (viii) une de leurs combinaisons.

11. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, dans laquelle ledit antibiotique ou au moins un desdits est choisi parmi le méropénème, la rifampicine et la tigecycline, un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables et une de leurs combinaisons.

12. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, dans laquelle ladite ou au moins une desdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) comprend au moins une huile essentielle choisie parmi : l'huile essentielle d'origan, l'huile essentielle de thym, l'huile essentielle de clou de girofle, l'huile essentielle de feuille de girofle, l'huile essentielle de sarriette, l'huile essentielle de ravintsara, l'huile essentielle de laurier feuille, l'huile essentielle de pin sylvestre, l'huile essentielle d'eucalyptus, l'huile essentielle de cajeput et l'huile essentielle de cannelle.

13. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, dans laquelle ladite ou au moins une desdites formulations d'huiles essentielles comprend ou consiste en les huiles essentielle suivantes : (i) de l'huile essentielle d'origan, de l'huile essentielle de thym, de l'huile essentielle de clou de girofle, de l'huile essentielle de sarriette, de l'huile essentielle de ravintsara, de l'huile essentielle de laurier noble, de l'huile essentielle de pin sylvestre, et de l'huile essentielle de cajeput ; ou (ii) de l'huile essentielle d'origan, de l'huile essentielle de feuilles de girofle et de l'huile essentielle de cannelle.

14. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, dans laquelle ladite ou une desditesformulations d'huiles essentielles comprend ou consiste en la formulation d'huiles essentielles suivante : - huile essentielle d'origan d'Espagne à 63,09% de carvacrol : 25 parts en grammes ; - huile essentielle de thym rouge d'Espagne (Thymus vulgaria) à 47,37% de thymol : 8,75 parts en grammes ; -huile essentielle de clou de girofle de Madagascar (Eugenia caryophyllata) à 85,19% d'eugénol : 18,75 parts en grammes ; - huile essentielle de sarriette d'Albanie à 27,68% de thymol : 6,25 parts en grammes ; - huile essentielle de ravintsara de Madagascar à 55,26% d'eucalyptol: 9,38 parts en grammes ; - huile essentielle de laurier feuille de Croatie (Laurus nobilis) à 48.56% de cineole-1,8 : 9, 38 parts en grammes ; - huile essentielle de pin sylvestre d'Autriche à 64,84% d'alpha pinène: 6,25 parts en grammes ; et - huile essentielle de cajeput verte à 62,11% de cineole-1,8 : 6,25 parts en grammes ;

15. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 14, dans laquelle ladite ou une desdites formulations d'huiles essentielles comprend ou consiste en la formulation d'huiles essentielles suivante : - huile essentielle d'origan du Maroc à 33,20% de carvacrol : 14,7 parts en grammes ; - huile essentielle de feuilles de girofle de Madagascar à 82,57% d'eugénol : 70,6 parts en grammes ; et -huile essentielle de cannelle (cassia) de Chine à 77.57% de trans cinnamaldéhyde : 14,7 parts en grammes.30

16. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 12, 13 et 15, dans laquelle l'eugénol contenu dans l'huile essentielle de feuilles de girofle est isomérisé ou n'est pas isomérisé.

17. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 16, dans laquelle ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) sont diluées à une concentration comprise entre environ 0.05% et environ 0.50%, de préférence entre environ 0.10% et environ 0.30%.

18. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 17, pour une utilisation comme médicament, en particulier comme antibiotique et/ou comme bactéricide.

19. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 18, pour la prophylaxie et/ou le traitement d'une infection bactérienne, en particulier d'une infection bactérienne nosocomiale, chez un mammifère, en particulier un humain. 20

20. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 19, pour prévenir, diminuer, inhiber ou ralentir la croissance d'une ou plusieurs souche(s) bactérienne(s) ou éradiquer une ou plusieurs souche(s) bactérienne(s), chez un mammifère, 25 en particulier un humain.

21. Composition antibiotique ou combinaison selon la revendication 19 ou 20, dans laquelle ladite infection bactérienne est choisie parmi une infection des voies respiratoires (telle qu'une 30 pneumopathie ou une pneumonie), une infection urinaire, une infection de la peau et des tissus mous, une légionellose nosocomiale, une infection du15système nerveux central, une aspergillose invasive, une méningoencéphalite, une empyème, une infection gastro-intestinale, une complication cardio-pulmonaire (telle qu'une endocardite), une bactériémie, une infection du site opératoire ou une infection généralisée (telle qu'une septicémie).

22. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 19 à 21, dans laquelle ladite infection bactérienne est provoquée par une souche bactérienne gram positif, en particulier une souche choisie parmi les familles suivantes : la famille des Staphylococcaceae, en particulier le genre Staphylococcus, représenté par les espèces Staphylococcus aureus et Staphylococcus epidermidis; la famille des Enterococcaceae, en particulier le genre Enterococcus, représenté par les espèces Enterococcus faecalis et Enterococcus faecium ; la famille des Clostridiaceae, en particulier le genre Clostridium, représenté par l'espèce Clostridium difficile ; et la famille des Streptococcaceae, en particulier le genre Streptococcus, représenté par les espèces Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus viridans, et Streptococcus pyogenes..

23. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 19 à 22, dans laquelle ladite infection bactérienne est provoquée par une souche bactérienne gram négatif, en particulier une souche choisie parmi les familles suivantes : la famille des Moraxellaceae, en particulier le genre Acinetobacter, représenté par les espèces Acinetobacter baumannli et Acinetobacter calcoaceticus ;la famille des Legionellaceae, en particulier le genre Legionella, représenté par les espèces Legionella Pneumophila, Legionella longbeachae, Legionella bozmanii, et Legionella micdadei; la famille des Enterobacteriaceae, en particulier le genre Enterobacter, représenté par l'espèce Enterobacter cloacae, le genre Escherichia, représenté par les espèces Escherichia col/ et Escherichia hermannii, le genre Klebsiella, représenté par l'espèce Klebsiella pneumoniae, le genre Serratia, représenté par l'espèce Serratia marcescens, le genre Citrobacter, représenté par les espèces Citrobacter freundii et Citrobacter koseri, et les genres Salmonella, Shigella et Proteus; et la famille Pseudomonadaceae, en particulier le genre Pseudomonas, représenté par l'espèce Pseudomonas aeruginosa.

24. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 19 à 23, dans laquelle ladite infection est provoquée par une souche bactérienne résistante à un ou plusieurs antibiotique(s).

25. Composition antibiotique ou combinaison l'une quelconque des revendications 19 à 24, dans laquelle ladite infection est provoquée par une souche bactérienne multirésistante aux antibiotiques, une souche pan résistante.

26. Composition antibiotique ou combinaison selon l'une quelconque des revendications 19 à 25, dans laquelle ladite infection est provoquée par une souche clinique d'Acinetobacter baumannil, en particulier, par la souche "SAN008", la souche "RCH", la souche "CIP 107292", la souche "12" ou la souche "CIP 7034".30

27. Utilisation d'une composition antibiotique ou d'une combinaison selon l'une quelconque des revendications 1 à 26, pour la fabrication d'un médicament destiné à la prophylaxie et/ou au traitement d'une infection bactérienne, en particulier d'une infection bactérienne nosocomiale, chez un mammifère, en particulier un humain.

28. Utilisation selon la revendication 27, dans laquelle ledit ou lesdits antibiotique(s) et ladite ou lesdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s) sont formulés (i) pour une administration simultanée dans le temps ; ou (ii) pour une administration séquentielle, l'administration dudit ou desdits antibiotique(s) précédant et/ou suivant l'administration de ladite ou desdites formulation(s) d'huile(s) essentielle(s), en particulier pour une administration à une ou plusieurs heures d'intervalle, de préférence, à 1, 2, 3 ou 4 heure(s) d'intervalle, plus préférablement, à 1 ou 2 heure(s) d'intervalle et plus préférablement encore, à 1 heure d'intervalle.

29. Utilisation selon la revendication 27 ou 28, dans laquelle ladite infection bactérienne est choisie parmi une infection des voies respiratoires (telle qu'une pneumopathie ou une pneumonie), une infection urinaire, une infection de la peau et des tissus mous, une légionellose nosocomiale, une infection du système nerveux central, une aspergillose invasive, une méningo-encéphalite, une empyème, une infection gastro-intestinale, une complication cardio-pulmonaire (telle qu'une endocardite), une bactériémie, une infection du site opératoire ou une infection généralisée (telle qu'une- septicémie).

30. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 27 à 29, dans laquelle ladite infection bactérienne est provoquée par (i) une souche bactérienne gram positif, en particulier une souche choisie parmi les familles suivantes :la famille des Staphylococcaceae, en particulier le genre Staphylococcus, représenté par les espèces Staphylococcus aureus et Staphylococcus epidermidis; la famille des Enterococcaceae, en particulier le genre Enterococcus, représenté par les espèces Enterococcus faecalis et Enterococcus faecium ; la famille des Clostridiaceae, en particulier le genre Clostridium, représenté par l'espèce Clostridium difficile ; et la famille des Streptococcaceae, en particulier le genre Streptococcus, représenté par les espèces Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus viridans, et Streptococcus pyogenes ; ou (ii) une souche bactérienne gram négatif, en particulier une souche choisie parmi les familles suivantes : la famille des Moraxellaceae, en particulier le genre Acinetobacter, représenté par les espèces Acinetobacter baumannii et Acinetobacter calcoaceticus ; la famille des Legionellaceae, en particulier le genre Legionella, représenté par les espèces Legionella Pneumophila, Legionella longbeachae, Legionella bozmanii, et Legionella micdadei; - la famille des Enterobacteriaceae, en particulier le genre Enterobacter, représenté par l'espèce Enterobacter cloacae, le genre Escherichia, représenté par les espèces Escherichia coli et Escherichia hermannii, le genre Klebsiella, représenté par l'espèce Klebsiella pneumoniae, le genre Serratia, représenté par l'espèce` Serratia marcescens, le genre Citrobacter, représenté par les espèces Citrobacter freundii et Citrobacter koseri, et les genres Salmonella, Shigella et Proteus; et la famille Pseudomonadaceae, en particulier le genre Pseudomonas, représenté par l'espèce Pseudomonas aeruginosa.

31. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 27 à 30, dans laquelle ladite infection bactérienne est provoquée par une souche bactérienne résistante à un ou plusieurs antibiotique(s), en particulier par une souche bactérienne multirésistante aux antibiotiques.

32. Utilisation d'une formulation d'huile(s) essentielle(s), pour la fabrication d'un médicament destiné à potentialiser un effet prophylactique ou thérapeutique d'un ou plusieurs antibiotique(s), pour la prophylaxie et/ou le traitement d'une infection bactérienne, chez un mammifère, en particulier un humain.

33. Utilisation selon la revendication 32, dans laquelle ledit antibiotique ou au moins un desdits antibiotiques est choisi parmi : (i) un antibiotique agissant sur la paroi bactérienne, en particulier un 15 antibiotique choisi parmi : - la fosfomycine ; - un antibiotique de la famille des glycopeptides, tel que la vancomycine, la téicoplanine, la ristocétine, et l'avoparcine ; ou - un antibiotique de la famille des bêta-lactamines, représentée par 20 - les pénames, en particulier le groupe G de la pénicilline G, le groupe M des pénicillines antistaphylococciques, le groupe A de l'amino-benzylpénicilline, le groupe des acyl-uréido- pénicillines, le groupe des amidino-pénicillines et le groupe des inhibiteurs des bétalactamases ; 25 - les pénemes et carbapénèmes, tel que le méropénèm; - les céphemes, en particulier les céphalosporines de 11e~e, 2ème et 31ème génération ; et - les monobactames ;(ii) un antibiotique agissant sur les membranes des cellules, en particulier un antibiotique de la famille des polymyxines, de la famille des gramicidines et la tyrocidine ; (iii) un antibiotique agissant sur le ribosome bactérien en particulier l'acide fusidique ou un antibiotique de la famille des aminosides, des phénicolés, des tétracyclines, des oxazolidinones ou du groupe des macrolides, lincosamides et synergistines (groupe "MLS") ; (iv) un antibiotique bloquant la synthèse de l'ARN messager, en particulier un antibiotique de la famille des rifamycines, représentée par la rifamycine SV et la rifampicine; (v) un antibiotique agissant sur l'ADN, en particulier un antibiotique de la famille des quinolones, des fluoroquinolones, ou des produits nitrés tels que les oxyquinoléines, les nitrofuranes ou les nitroimidazolés ; (vi) un antibiotique interférant avec le métabolisme des folates, en particulier un antibiotique de la famille des sulfamides ou le triméthoprime ; (vii) un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables ; et (viii) une de leurs combinaisons.

34. Utilisation selon la revendication 32 ou 33, dans laquelle ledit antibiotique ou au moins un desdits est choisi parmi le méropénème, la rifampicine et la tigecycline, un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables et une de leurs combinaisons.

35. Utilisation d'une formulation d'huile(s) essentielle(s), ou d'une composition antibiotique ou d'une combinaison telles que définies aux revendications 1 à 17, pour diminuer la quantité d'antibiotique utilisée pour 25la fabrication d'un médicament destiné à la prophylaxie et/ou au traitement d'une infection bactérienne, chez un mammifère, en particulier un humain.

36. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 32 à 35, dans laquelle ladite formulation d'huiles essentielles comprend ou consiste en les huiles essentielle suivantes : (i) de l'huile essentielle d'origan, de l'huile essentielle de thym, de l'huile essentielle de clou de girofle, de l'huile essentielle de sarriette, de l'huile essentielle de ravintsara, de l'huile essentielle de laurier noble, de l'huile essentielle de pin sylvestre et de l'huile essentielle de cajeput ; ou (ii) de l'huile essentielle d'origan, de l'huile essentielle de feuilles de girofle et de l'huile essentielle de cannelle.

37. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 32 à 36, dans laquelle ladite formulation d'huiles essentielles comprend ou consiste (i) en la formulation suivante: - huile essentielle d'origan d'Espagne à 63,09% de carvacrol : 25 parts en grammes ; - huile essentielle de thym rouge d'Espagne (Thymus vulgaria) à 47,37% de thymol : 8,75 parts en grammes ; - huile essentielle de clou de girofle de Madagascar (Eugenia caryophyllata) à 85,19% d'eugénol : 18,75 parts en grammes ; - huile essentielle de sarriette d'Albanie à 27,68% de thymol : 6,25 parts en grammes ; - huile essentielle de ravintsara de Madagascar à 55,26% d'eucalyptol: 9,38 parts en grammes ; - huile essentielle de laurier feuille de Croatie (Laurus nobilis) à 48.56% de cineole-1,8 : 9, 38 parts en grammes ; - huile essentielle de pin sylvestre d'Autriche à 64,84% d'alpha pinène : 6,25 parts en grammes ; et- huile essentielle de cajeput verte à 62,11% de cineole-1,8 : 6,25 parts en grammes ; ou (ii) en la formulation suivante: - huile essentielle d'origan du Maroc à 33,20% de carvacrol : 14,7 parts en grammes ; - huile essentielle de feuilles de girofle de Madagascar à 82,57% d'eugénol : 70,6 parts en grammes ; et -huile essentielle de cannelle (cassia) de Chine à 77,57% de trans cinnamaldéhyde : 14,7 parts en grammes.

38. Utilisation selon la revendications 36 ou 37, dans laquelle l'eugénol contenu dans l'huile essentielle de feuilles de girofle est isomérisé ou n'est pas isomérisé.

39. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 32 à 38, dans laquelle ladite infection bactérienne est choisie parmi une infection des voies respiratoires (telle qu'une pneumopathie ou une pneumonie), une infection urinaire, une infection de la peau et des tissus mous, une légionellose nosocomiale, une infection du système nerveux central, une aspergillose invasive, une méningo-encéphalite, une empyème, une infection gastro-intestinale, une complication cardio-pulmonaire (telle qu'une endocardite), une bactériémie, une infection du site opératoire ou une infection généralisée (telle qu'une septicémie).

40. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 32 à 39, dans laquelle ladite infection bactérienne est provoquée par (i) une souche bactérienne gram positif, en particulier une souche choisie parmi les familles suivantes : la famille des Staphylococcaceae, en particulier le genre Staphylococcus, représenté par les espèces Staphylococcus aureus et Staphylococcus epidermidis;la famille des Enterococcaceae, en particulier le genre Enterococcus, représenté par les espèces Enterococcus faecalis et Enterococcus faecium ; la famille des Clostridiaceae, en particulier le genre Clostridium, représenté par l'espèce Clostridium difficile ; et la famille des Streptococcaceae, en particulier le genre Streptococcus, représenté par les espèces Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus viridans, et Streptococcus pyogenes ; ou (ii) une souche bactérienne gram négatif, en particulier une souche choisie parmi les familles suivantes : - la famille des Moraxellaceae, en particulier le genre Acinetobacter, représenté par les espèces Acinetobacter baumannll et Acinetobacter calcoaceticus ; la famille des Legionellaceae, en particulier le genre Legionella, représenté par les espèces Legionella Pneumophila, Legionella longbeachae, Legionella bozmanii, et Legionella micdadei; - la famille des Enterobacteriaceae, en particulier le genre Enterobacter, représenté par l'espèce Enterobacter cloacae, le genre Escherichia, représenté par les espèces Escherichia colt et Escherichia hermannii, le genre Klebsiella, représenté par l'espèce Klebsiella pneumoniae, le genre Serratia, représenté par l'espèce Serratia marcescens, le genre Citrobacter, représenté par les espèces Citrobacter freundii et Citrobacter koseri, et les genres Salmonella, Shigella et Proteus; et la famille Pseudomonadaceae, en particulier le genre Pseudomonas, représenté par l'espèce Pseudomonas aeruginosa.

41. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 32 à 40, dans laquelle ladite infection bactérienne est provoquée par une souchebactérienne résistante à un ou plusieurs antibiotique(s), en particulier par une souche bactérienne multirésistante aux antibiotiques.