FR2903310A1 - Composition cosmetique contenant un extrait de limnocitrus littoralis - Google Patents
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Abstract
L'invention concerne une composition cosmétique, caractérisée en ce qu'elle contient, à titre d'agent actif, un extrait de Limnocitrus littoralis obtenu par extraction au moyen d'un solvant d'extraction choisi dans le groupe constitué des alcools et des mélanges hydroalcooliques, dans un véhicule cosmétiquement acceptable compatible avec une application topique.Elle concerne également un procédé de traitement cosmétique notamment destiné à apaiser les manifestations cutanées non pathologiques d'origine inflammatoire et/ou prévenir et/ou lutter contre les effets du vieillissement intrinsèque et/ou photo-induit, comprenant l'application sur la peau d'une composition cosmétique de l'invention.
Description
La présente invention concerne le domaine de la cosmétique. Elle concerne
plus particulièrement de nouvelles compositions cosmétiques contenant un extrait de Li/77/70c/Cr1s littoreslis (51iq.) Sodngle, ci-après désigné par L/m/ ocitrus //ttora/is, ainsi que de nouvelles utilisations de cet extrait dans le domaine de la cosmétique. Lo2roeitrus //1-tore//s est une plante de la famille des rutacées et a pour basionyme Faramigrgya littaralis Mit]. Elle est originaire d'Asie du -Est et elle est selon nos informations la seule espèce répertoriée à ce jour dans te genre Limnocitrus. Son habitat est essentiellement situé dans les zones chaudes et sèches. Il s'agit d'arbustes se présentant sous la forme de buissons que l'on trouve essentiellement, mais pas de façon unique, au Vietnam d'où sont d'ailleurs originaires ceux utilisés dans le cadre de la description de la présente invention.
Des utilisations traditionnelles ou religieuses de cette plante sont relatées dans les légendes et dans la littérature vietnamienne. On a également décrit des usages et des effets thérapeutiques traditionnels, notamment des feuilles de Limn0eitrus liitvralrs, comme produit expectorant, antitussif ou pour préparer des bains de vapeur considérés comme des remèdes efficaces pour l'exsudation et le traitement des rhumes et des fiée res. On connaît également différentes utilisations en médecine ,dit orme soit ac n s comme' etique qu , -sit des feuilles pou! ner i'as1 me o1 25 Enfin, différents remèdes traditionnels, notamment de l'utérite, instipation et de la toux proposent des décoctions contenant, entre I7n0C/t" 11ttOraI!s 'rai sol ées, 2903310 2 On a également décrit l'utilisation de feuilles brûlées pour [eurs fumées odorantes. La famille des rutacées, à laquelle appartient L2r7nocitros Iïttorali comprend notamment le genre Citrus, très répandu et très 5 connu, qui comprend environ 165 espèces. II est connu qu'un certain nombre d'espèces de plantes appartenant au genre Citrus ont des propriétés anti-inflammatoires. Toutefois, ce caractère anti-inflammatoire est loin d'are général. Les inventeurs se sont donc également intéressés aux espèces 10 de plantes appartenant au genre Citrus même si leur genre botanique était différent de celui de Limnocl`trus lïttoralfs Ainsi, au contraire, certaines espèces de plantes du genre Citrus présentent un caractère pro-inflammatoire. Par ailleurs, comme cela a été mis en évidence par les essais réalisés par la demanderesse, 15 d'autres espèces de plantes du genre Citrus seraient toxiques sur le modèle utilisé à des doses où ils présentent une activité anti-inflammatoire. Les inventeurs de la présente invention ont maintenant découvert en testant différentes espèces de plantes du genre Citrus qu'il 20 était possible de préparer, à partir de la plante Limrrocitrus I; torabs, des extraits a la fois non toxiques au . doses utilisées et particulièrement actifs en cosmetique. Plus p cisément, inventeur présente in",~ au cours s ,r xtr 7t~ rnrehlemer pathologiques d'origine inflammatoire )eaux sensibles. nar un effet apaisant peau sen ..,canées 2903310 de manière plus rapide et parfois plus violente, sans pour autant que ladite peau présente un état pathologique. Les manifestations cutanées non pathologiques généralement associées aux peaux sensibles sont bien connues. Elles se traduisent par 5 des sensations d'inconfort plus ou moins marquées selon les personnes au niveau de la peau et notamment par des sensations de chaleur ou de brûlure, des picotements, des démangeaisons et/ou des tiraillements ou encore par l'apparition cle rougeurs. Ces désordres cutanés sont occasionnés par des facteurs extérieurs tels que les émotions, les facteurs 10 environnementaux (pollution, UV, tabac, température etc...), les agents chimiques présents notamment dans les compositions cosmétiques comme les tensioactifs, conservateurs, les parfums ou certains agents cosmétiques actifs. Les mécanismes d'actions qui conduisent à ces manifestations 15 sont diversement connus mais ils ont à la fois comme point commun et comme origine des processus inflammatoires. Ceux-ci vont conduire à une excitation, plus ou moins importante des nerfs sensitifs cutanés, consécutive à la libération de médiateurs de l'inflammation, comme les espèces réactives de l'oxygène, les cytokines (comme l'interleukine H) ou 20 les prostaglandines, en particulier les prostaglandines de type E2. Les inventeurs ont, par ailleurs, pu constater que ces nlémes extraits savéraient efficaces dans d'autres applications cosmétiques, en 25 leur. culler d ls l'' domaine dl_1 `.Iei;Ilssenreni thé, r Raison Ainsi, Selo mposition cosmétigt ntenant `ores, Selon ixième aspi en1 utilisa 2903310 4 conférer différentes propriétés cosmétiques permettant de lutter contre les manifestations cutanées non pathologiques d'origine inflammatoire et de prévenir et/ou lutter contre les effets du vieillissement de la peau. Selon un troisième aspect, l'invention concerne un procédé de 5 traitement cosmétique destiné au soin de la peau, en particulier un soin destiné à lutter contre les manifestations cutanées non pathologiques d'origine inflammatoire ou à un soin destiné à prévenir et/ou lutter contre les effets du vieillissement de la peau, en particulier un soin anti-rides. Ainsi, selon une première caractéristique essentielle, l'invention 10 concerne une composition cosmétique, caractérisée en ce qu'elle contient, à titre d'agent actif, un extrait de Limnocitrus littorales obtenu au moyen d'un solvant d'extraction alcoolique ou hydroalcoolique, dans un véhicule cosmétiquement acceptable compatible avec une application topique. Selon une deuxième caractéristique essentielle, l'invention 15 concerne une utilisation, dans une composition cosmétique ou pour la fabrication d'une composition cosmétique, d'un extrait de Limnocitrus littoralis de l'invention en tant qu'agent actif conférant à ladite composition cosmétique des propriétés cosmétiques permettant de lutter contre les manifestations cutanées non pathologiques d'origine inflammatoire telles 20 que celles associées aux peaux sensibles, par un effet apaisant cutané. Selon cette première utilisation, l'invention concerne l'utilisation de ladite composition cosmétique pour apaiser les manifestations cutanées non pathologiques d'origine inflammatoire tels que les sensations de ch r ou de b ni ars tir ién et les rntnm une second utilisation, l'invention concerne une utilisation, dans une composition cosmétique ou pour la fabricati une ;anosition cosmét extrait de Limnocitrus littora; 2903310 5 Selon cette seconde utilisation, l'invention concerne l'utilisation de ladite composition pour prévenir et/ou lutter contre les effets du vieillissement intrinsèque et/ou photo-induit de la peau Selon une autre caractéristique essentielle, l'invention concerne 5 un procédé de traitement cosmétique notamment destiné à apaiser les manifestations cutanées non pathol rigine inflammatoire et/ou à prévenir et/ou à lutter contre les effets du vieillissement intrinsèque et/ou photo-induit, comprenant l'application sur la peau d'une composition cosmétique selon l'invention.
10 Selon cette dernière caractéristique, l'invention concerne plus particulièrement un procédé de traitement cosmétique destiné à un soin asti-rides. D'autres caractéristiques de l'invention apparaîtront au vu de la description et des exemples détaillés qui suivent.
15 Les compositions cosmétiques de l'invention sont caractérisées par la présence d'un agent actif constitué d'un extrait de Limnocitrus /ittora//s. Cet extrait est obtenu dans un procédé qui comprend au moins une étape d'extraction au moyen d'un solvant d'extraction alcoolique ou 20 hydroalcooliqueä Les essais réalises par les inventeurs de a présente invention ont montré qu'il est préférable d'utiliser les parties aériennes la plante pour l'obtention des extraits utiles selon l'invention. lièretT 1 -ise de 1 lit de cools util 'n r lange hydroalcooliqu sont avantageusement dE loalcools t a ou des glycols en C C5.
2903310 6 A titre d'alcools particulièrement préférés pour la préparation des extraits utiles selon l'invention, on citera l'éthanol, le butylène glycol ainsi que les mélanges éthanol/eau et butylène glycol/eau. Il est apparu au cours des essais réalisés par les inventeurs de 5 la présente invention, que la qualité des extraits et, notamment la stabilité de leurs propriétés intrinsèques dans le temps, était largement améliorée lorsque le solvant d'extraction contenait des quantités relativement faibles d'eau ou même était anhydre. Ainsi, selon une variante avantageuse, le solvant d'extraction 10 est l'éthanol ou un mélange éthanol/eau comprenant au plus 50% d'eau, de préférence au plus 4% d'eau. Selon une autre variante particulièrement avantageuse de l'invention, l'extrait est obtenu en utilisant le butylène glycol pur comme solvant d'extraction.
15 Ainsi, les extraits de Limnocitrus /ittoralls de l'invention sont avantageusement obtenus en utilisant un solvant anhydre et, tout particulièrement le butylène glycol. Par ailleurs, selon un mode de réalisation particulièrement avantageux, même lorsque l'extrait n'est pas obtenu directement par une 20 extraction au butylène glycol, il s'avère intéressant de l'introduire dans la composition de l'invention sous forme d'une solution dans le butylène glycol, en particulier sous forme d'une solution contenant de 0,05 à 5% en nnii mieux 0,1 à 1% en poids d entrait sec par rapport au poids de il 25 iante~ sep soumli var impositio est iscore en soluti nt d'extraction utilisé lon l'invention a une étape de séparatioi i solide-liquida afin '`'.miner la par sol 2903310 7 L'extrait pourra également être soumis à différentes étapes de décoloration, en particulier à une étape de décoloration sur charbon actif. La concentration en extrait, exprimée en pourcentage en poids d'extrait sec, des compositions de l'invention pourra varier dans de larges 5 proportions. Toutefois, cette concentration sera avantageusement comprise entre 10-4 et 5% en poids, de préférence entre 0,01 et 2 % en poids d'extrait sec par rapport au poids total de la composition, l'extrait étant de préférence un extrait de feuilles de Limrrocitrus littvrails 10 Les compositions de l'invention pourront contenir au moins un agent conservateur, choisi parmi les agents conservateurs classiquement utilisés dans le domaine de la cosmétique. Les compositions de l'invention pourront également comprendre au moins un agent anti-oxydant.
15 A titre d'agents asti-oxydants particulièrement préférés selon l'invention, on citera l'alpha-tocophérol, l'acide ascorbique ainsi que leurs dérivés cosmétiquement acceptables et notamment leurs esters. Les compositions de l'invention peuvent être formulées de façon très variable et se présenter sous toute forme compatible avec une 20 application topique sur la peau. Elles peuvent se présenter en particulier sous forme de crème, de gel, de lotion, de stick, de fard à paupières ou de fond de teint. !es commoositions préférées de 11nnention nonrprendront pie quantités parte d'eau ou s à paupière :rime PxnnçP nrPcédemme:: ntérêl Itiellement lié )riétés d'apaisement fions est est 2903310 de lutte ou de prévention des effets du vieillissement intrinsèque et/ou photo-induit de la peau, en particulier les rides. Il a été mis en évidence par les inventeurs de la présente invention, que les propriétés d'apaisement était liée essentiellement à une 5 activité d'inhibition des prostaglandines de type E2 (PGE2) et l'activité anti- vieillissement à une activité de stimulation de la synthèse du collagène. Les extraits tels que définis précédemment pourront, du fait de leurs propriétés, être utilisés dans des compositions cosmétiques ou pour la fabrication de ces compositions, en tant qu'agent apaisant cutané.
10 Les compositions ainsi obtenues pourront être utilisées pour apaiser les manifestations cutanées non pathologiques d'origine inflammatoire, telles que les sensations de chaleur ou de brûlure, les picotements, les rougeurs, les tiraillements, les démangeaisons qui ont pour origine des phénomènes de type inflammatoire de la peau.
15 Du fait de leur deuxième type d'activité sur la synthèse du collagène, les extraits de l'invention pourront être utilisés dans des compositions cosmétiques ou pour la fabrication de telles compositions en tant qu'agent stimulant la synthèse du collagène. De telles compositions pourront être utilisées dans tous les cas 20 où l'on cherche à prévenir et/ou à lutter contre les effets du vieillissement intrinsèque et/ou photo induit de la peau, en particulier les rides. On reconnaît également auxdits phénomènes de type Flamma lie mentioiii ssus rôle dans l'accélération du Air les 3its selor nvent )ar leur doublE 'ité cutanée$ itholoç 2903310 9 d'autre part, sont particulièrement adaptés au domaine du vieillissement cutané. Comme exposé précédemment, l'invention concerne également un procédé de traitement cosmétique destiné notamment à apaiser les 5 désordres cutanés d'origine inflammatoire et/ou prévenir et/ou lutter contre les effets du vieillissement intrinsèque et/ou photo-induit, caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur la peau d'une composition cosmétique telle que définie précédemment.
10 EXEMPLES L PREPARATION D'EXTRAITS UTILES SELON L'INVENTION a. Préparation d'un extrait par extraction hydro-éthanolique A 10 g de feuilles broyées sont ajoutées 150 ml d'un mélange 15 éthanol/eau dans les proportions 90/10 volume/volume (v/v) dans un ballon de 250 ml. Le mélange est porté à reflux 30 minutes. Après refroidissement, l'extrait est filtré sur Büchner avec 2 filtres GF/F (Whatmann), puis le gâteau de filtration est rincé par 50 ml de mélange éthanol/eau (90/10 v/v). Ensuite, le filtrat est évaporé à sec à l'aide d'un 20 évaporateur rotatif. A partir de l'extrait sec ainsi obtenu, on prépare 3 solutions une solution à 1 AH poids/volume (p/v) dans un mélange éthano 'eau Jr-,I/50 notée c orès Extrait A, i 1, % v l 25 Extr une anol /Eau ange riant des antic 2903310 10 Ce mélange d'antioxydants est composé de 0.20 g d'alpha-tocophérol + 0.05g de Lécithine palmityol + 0.01 g de palmitate d'ascorbyle, le tout dans 6 ml d'un mélange Eau/ Ethanol (16/84 v/v). 5 b. Préparation d'un extrait par extraction au butylène glycol A 10 g de feuilles broyées sont ajoutées 150 ml de butylène glycol-1,3 dans un ballon de 250 ml. Le mélange est agité 1 heure à 50 C. Après refroidissement, l'extrait est filtré sur büchner avec 1 filtre de 0,45pm (Millipore). Le gâteau de filtration est rincé par 50 ml de butylène 10 glycol-1,3. L'extrait sec de la solution est environ 0,4% en poids par rapport au poids totale de la solution. L'extrait sec ainsi obtenu est désigné ci-après par Extrait D. c. Préparation d'un extrait décoloré 15 La solution dans le butylène glycol obtenue en b) est décolorée sur charbon actif (CxV)(fournisseur : CECA) en procédant selon le procédé décrit ci-dessous. Une première étape est réalisée à partir de 50,07 ml de solution ci-dessus avec 10 mg de charbon actif (soit environ 5 % en poids 20 par rapport au poids de matière sèche). Le tout est agité 2 heures à température ambiante. La solution est filtrée sur filtre GF/F ( Whatmann). A cette solution est ajoutée à nouveau 10 mg de charbon actif. Le tout agité 1 heure a température ambiante. La solution est filtrée sui dit 25 rets ;olutio ajoutée à nouvea eure empéra biante, r nitre vhatmann) puis évapor a sec, xtrait sel ette solution ainsi obtenu 2 2903310 11 IL MISE EN EVIDENCE DE L'ACTIVITE ANTI-INFLAMMATOIRE 1. Principe du test, 5 Le test est réalisé sur kératinocytes humains et vise à déterminer l'inhibition de la libération de la prostaglandine de type E2 en présence d'extraits selon l'invention. 2. Protocole du test de mesure de l'activité anti-inflammatoire 10 a. Préparation du témoin positif et de l'échantillon à tester Le témoin positif utilisé pour inhiber la libération de PGE2 est l'indométacine ( Sigma réf : 17378 ). Une solution mère à 3.10-3 molaire a été réalisée dans du DMSO. L'indométacine a été introduite dans le 15 milieu de culture à 0.1 % v/v soit à la concentration finale en actif de 3.10-6 M. Parallèlement un témoin excipient (DMSO) â 0.1% final v/v a été réalisé. Chaque extrait de Limnoeitrus littorales à tester est mis en solution dans du DMSO à la concentration de 5% v/v, puis dilué à la concentration de 3,125 mg/ ml.
20 Chaque extrait de Limno trus littorales à tester est ensuite introduit dans le milieu de culture à 0.1 % v/v soit une concentration finale en actif de 3,125 pg/ ml. Parallèlement un témoin excipient (DMSO) à 0J % final v/v a été réalisé. Il a été effectué au préalable un test de viabilité cellulaire par la éth_ de u T (test effectué es '1 belle, (le trsitce (afin de vP hsE totoxicitE la dose- de fiée. 2903310 12 b. Traitement des cellules Les kératinocytes (type HaCaT) sont mis en culture dans un milieu KSFM complémenté ( Gibco réf : 17005-034 + 37000-015). Les kératinocytes sont ensemencés en microplaques 96 puits à raison de 5 10000 cellules par puits. Ce premier jour de culture est considéré comme 30. Après 24 heures (31) d'incubation, le milieu est remplacé par du milieu KSFMc contenant soit un extrait de Limno,iltris erres; tel que décrit au point I, soit de l'indométacine soit le témoin solvant (DMSO). Après 48 heures (33) soit 24 heures de traitement le milieu de 10 culture est récupéré puis congelé à -20 C, les cellules sont rincées une fois au PBS et font l'objet d'un dosage de protéine par la méthode au BCA. Le milieu de culture après décongélation est dosé selon le protocole du kit EIA (Enzym Immuno Assay) portant la référence 514010 et vendu par la société Cayman référence .
15 Une gamme d'étalonnage selon le même protocole est établie en même temps (gamme de 0 à 1 ng ml). c. Résultats Le tableau I ci-dessous rassemble les résultats exprimés en 20 pourcentage d'inhibition des prostaglandines de type E2 en présence des extraits A, B, C, D et E, utilisés mg mL et 0,1 mg/mL dans le DMSO. TABLEAU I o.1 2903310 13 On constate que les extraits A, B, C, D et E présentent tous une activité d'inhibition des PGE-2 et qu'à une concentration plus importante, mais non toxique pour les cellules, l'activité d'inhibition des PGE-2 devient même très significative. III. MISE EN EVIDENCE DE L'INTERET DE LI/ViVOCITRUS LITTORALIS PAR RAPPORT A D'AUTRES PLANTES APPARTENANT AU GENRE CITRUS 10 Les essais relatés ci-dessous illustrent l'intérêt de Limnocitrus /fttora/is par rapport à d'autres citrus en terme d'activité anti-inflammatoire et de toxicité. Dans l'étude réalisée dans cette partie, on a utilisé pour la détermination de l'activité anti-inflammatoire, le test décrit dans la partie 15 Il ci-dessus. L'étude a porté sur les cinq espèces suivantes du genre Citrus : 1 : Otrus maxima (Burm. Ex Rumph.) Merr. Il : Citrus aurentifolia (Christm.) swingle III : Ctrusnobilis{Loura 20 IV : C/trus hystrix (DC.) V Ci* Li f,c 'st Blanco. Les inventeurs présente invention ont cherché à comparer !es capacités inhibition des P(2F entre le fr 770tT/ii-LiS /l/t-0/c7/iS 1 :raits Yrl 1 1 i 1111 ?nus même conditions d'extraction elles décrites pou. extrait A testés à des ncentrations identiques Par ailleur vérifié )xicité des traits mparaison avec cent 7mocii tura/is obter lb 2903310 14 1. Détermination de la limite de cytotoxicité Pour la détermination de la limite de cytotoxicité, on a considéré, comme limite acceptable de la non-cytotoxicité, la limite correspondant à 5 une viabilité de 90% des cellules. Les résultats sont donnés dans le tableau II ci-dessous : TABLEAU II Références Limnocitrus/ittora/ls 1 III IV V Limite de cytotoxicité 12.5 pg/ml 12.5 pg/ml 6.25 pg/ml 3.125 pg/ml 80 % de viabilité à 0.19 pg/ml 70 % de viabilité à 0.19 pg/ml 10 Les échantillons IV et V sont dans les conditions expérimentales utilisées, considérés comme cytotoxiques. 2. Détermination de la libération de PGE2 Tous les extraits ont été testés à 3.125 pg/ml dans les 15 conditions décrites au II b) en utilisant pour le dosage un kit EIA (Réf : 514010) commercialisé par la société Cayman. Les extraits obtenus à partir des espèces genre citrus IV et V présentant un plateau de cytotoxicité à partir de cette dose. aleus présentées dans le tableau. ci-dessous sont des liera témoin sa ffecte arbitrairement fixe libératiol cellu de libération GE, est pondant à l'activité basale de 25 2903310 15 TABLEAU III LÎmnocitruS' I ! Il III j IV V lr`ttoralis I Libération -52 -32,76 36,86 46,86 78,14 56,73 de PGE2 Ecart-type 12,59 14,96 15,86 20,22 36,90 9,16 Ce premier résultat réalisé sur seulement 3 points (d'où des écarts types assez importants) indique qu'avec le modèle utilisé et dans 5 les conditions opératoires, seul le Citais maxima (I) parmi toutes les autres espèces du genre citrus testées présente une libération de PGE2 négative de -32,76 par rapport au témoin, ce qui en pratique traduit une activité d'inhibition des PGE2. On constate également que cette activité est nettement plus faible que celle de Limnocltrus /ittoralis avec -52, soit une 10 capacité d'inhibition des PGE2 bien supérieure. IV. MISE EN EVIDENCE DE L'ACTIVITE ANTIVIEILLISSEMENT 15 1-Principe et but du test Les radicaux libres sont impliqués dans l'accélération du vieillissement chronologique de la peau par leur action directe et indirecte par l'intermédiaire de leur activité pro-inflammatoire. On a donc choisi un modèle de stress onydatif par rayonnement UVA et UVB permettant de simuler on 20 ça in Ç 1g. Ag g Res l'aff,:& d'QVtraits ention e collagène. 2903310 16 2.Modèle expérimental de peau humaine maintenue en survie et soumise à un stress oxydatif Des fragments de peau ont été obtenus chez des femmes après chirurgie plastique (8 donneuses différente Les fragments ont été déposés 5 dans des inserts eux-mêmes disposés en suspension au-dessus de puits de culture. Du milieu de culture est ajouté dans le fond des puits, un passage s'effectuant par diffusion lente entre les deux compartiments par l'intermédiaire d'une membrane poreuse (12 pm). Ce milieu de culture des puits a cté renouvelé tous les 3 jours.
10 Un modèle expérimental de stress oxydatif a été réalisé par une séance (à 30) d'irradiation en UV A (8 3/cm2) et en UV B (16 3/dm2) afin de provoquer la génération de radicaux libres oxygénés. Puis un extrait de Limnocitrus littoral/1s' selon l'invention à tester est appliqué à la surface de la peau une fois par jour.
15 Le protocole comporte donc les conditions suivantes : peau témoin (sans stress oxydatif et non traitée) peau + stress oxydatif (peau contrôle) peau + stress oxydatif + extrait de Limnocitrus littora/is selon l'invention à tester 20 Les cultures de peau ont ensuite été stoppées à 37 pour les différentes analyses. Analyse de Veffet d'un extrait de //dddOidd-U sfs sur la co Adana i niveau di do iiiue id" collagène l'eff--ait de Limnoc ittora/is s stimulation métabolisme des fibroblastes de la peau niveau 3 synthè lagène. 2903310 17 fragments de peaux sont digérés enzymatiquement pendant une nuit à +4 C dans une solution d'acide acétique à 0,5Nl contenant de la pepsine. Cette méthode permet de récupérer le collagène nouvellement synthétisé. Après broyage mécanique, par exemple à l'aide d'un putter, la 5 quantité de collagène (pg/ml) est évaluée par une méthode de dosage spectrocolorimétrique à 540 nm: le collagène acido-soluble est détecté après fixation spécifique du colorant rouge sinus (Sircol Collagen Assay, Inter-ch m). Pour comparer les différents résultats, la quantité de collagène est 10 rapportée à la quantité de protéines totales de l'échantillon. Le dosage de la concentration en protéines est réalisé spectrophotométriquement à 562 nm (BCA assay, Pierce). Les résultats sont exprimés en pg de collagène / mg de protéine. 15 4. Analyses statistiques Une étude comparative des résultats entre les peaux traitées par un extrait de Limnocitrus littoralis et les peaux non traitées mais ayant subi un stress oxydatif par les UV a été effectuée et porte sur : peau témoin peau vieillie expérimentalement par les UV A et B (peau contrôle) peau r UV A / p -f extrait de Lii77/70c/Mos /jtt ic7t Selon l'invention Une moyenne a été réalisée à partir des résultats obtenus sur les 8 mece u, . ann se s 5. Résultats du dosage biochimique du collagène :ats présentés dans 'ableau obtenus avec 2903310 Synthèse du collagène (erg 18 TABLEAU IV g de protéines totales): pgfmg 114,5 32,2 87,3 22,3 *p=0,02 128,4 52,6 peau témoin peau + UV peau + UV + Extrait D # p =0,04 * : différence statistiquement significative par rapport à la peau témoin (test apparié de Student, p < 0,05) # : différence statistiquement significative par rapport à la peau contrôle UV (test apparié de Student, p < 0,05) 10 On a constate d'une part une diminution statistiquement significative de la synthèse de collagène avec un taux de 87,3 pg/mg au niveau de la peau soumise au stress oxydatif par rapport à la peau témoin dont le taux est de 114,5pg/mg (p = 0,02). On constate d'autre part que le traitement par l'extrait D de 15 Limnocitrus littoralis a permis d'obtenir une stimulation statistiquement significative de la synthèse de collagène avec un taux de 128,4 pg/mg versus 87,3 pour [a peau contrôle (p = 0,04). 6. Conclusion -3rtir Jeli au 'nt( soumise à un stress ydatif sir ant un vieil) ent cutar éléré, [-flic n évidence une stimulation statistiquem( nificatiyh a synthèse Ilagène, démontrant ainsi une a 'ité anti-vieillissemer (trait de 2903310 19 V-EXEMPLES DE FORMULATION SELON L'INVENTION On prépare les compositions cosmétiques à application topique, décrites ci-après, à partir des compositions centisémales en poids suivantes, de manière classique. Gel Eau déionisée 73.5 10 Alcool 96,2% vol 21 Polymère d'AMPS (Sepigel 305) 3 Conservateur 0.3 Concentré de parfum 0.1 Extrait D de Limnocitrus littorales 2 15 Hyaluronate de sodium (Haut Poids Moléculaire) 0,1 Emulsion pour le corps Palmitate d'octyle 7, 0 % Triglycérides caprylale/caprate de glycérol 3,0 20 Octanoate d'octyle 2,0 Phényl triméthicone 2,0 Glycérine 2,0 Acide stéarique 1,0 Stéarate de sc~ ,Itan 0,9 25 Alcool stéarylique Stéarate dE )rbitar trait E dE 'mnoc torafis nservate uli^, colorants, neutrons 30 2903310 20 Lotion Butylene glycol 3 % EDTA 0.1 Solubilisant 1 5 Concentré de parfum 0.1 Alcool 5.2 Extrait A de Limnocitrus littoralis 0,5 Benzophénone-4 0.13 Conservateurs, parfum, colorants, neutralisant 0,1 10 Eau qsp Fond de teint Polyglycéryl-4 d'isostéarate Cétyl Diméthicone Copolyol Hexyl laurate (commercialisé par exemple sous la dénomination Abil WE 09) 5.1 % Cyclopentasiloxane et Cyclohexasiloxane 5.0 15 (par exemple: Fluid DC345 de Dow Corning) Cétyl Diméthicone (par exemple Abil wax 9840) 1.0 Caprylique/Caprique Triglycérides 2.2 Stéarate d'octyle 1.4 Huile minérale 3.5 20 Huile de ricin hydrogénée 1.2 Cire d'abeille 0.8 Polyméthacrylate de méthyle 1.1 Oxydes de f e r 5 Dioxy( Il Oi6 2 2903310 21 Fond de teint anhydre Mica Dioxyde de titane 5 Talc Extrait D de Limnocitns Silice anhydre Nylon-12 Méthoxycinnamate d'octyle 10 Benzophénone-3 Acide stéarique Stéarate de magnésium Colorants et pigments (oxydes de fer) Parfums 15 Conservateurs Gel apaisant après solaire Glycérine Triglycérides caprylique/caprique/succinique 20 Méthoxycinnamate d'octyle Diméthicone copolyols Acrylates CI0-C30 alkyle t! crosspo!ymer Extrait B de Z.0onoc-itros ttoro'os N-c7icOtyl c`isteine 25 uni ,arr. 46.0 22.4 11. 0 1.0 5.0 4.0 2.0 2.0 2.0 1.5 2.5 0.3 0.3 5,0 5,0 1,0 0,5 0,5 3 0,2 % 30 2903310 22 Fluide protecteur solaire Pentacylornéthicone 49,0 Dioxyde de titane 15,0 Méthoxycinnamate d'octyle 7,5 5 Glycérine 5,0Phényltriméthicone 5,0 Diméthicone copolyols 3,0 Polyméthylmétacrylate 2, 5 Extrait C de Limnocitrus /ittoralis 5 10 Conservateurs, parfum, colorants, neutralisant 0,1 Eau qsp Crème de soin anti-rides Glycéryl stéarate + PEG-100 stéarate 15 Polyisobutène hydrogéné Squalane Triglycérides caprylale/caprate de glycérol Glycérine Méthoxycinnamate d'octyle 20 Octanoate de cétostéaryle Cire d'abeilles Alcool cétylique Alcool stéarylique mme , 2athane trait E de L roc, alis nservateurs an Eau 6,0 3,0 3,0 3,0 2,0 2,0 1,0 1,0 1,0 0,2 LM)
Claims (7)
1. Composition cosmétique, caractérisée en ce qu'elle contient, à titre d'agent actif, un extrait de Limnoc/tros /t'oral/s obtenu au moyen d'un solvant d'extraction alcoolique ou hydroalcoolique, dans un véhicule cosmetiquement acceptable compatible avec une application topique.
2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit extrait est obtenu à partir d'une partie aérienne de L/mnocitrus airs 10
3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que ledit extrait est obtenu à partir de feuilles de Limnocitrus fittora/is.
4. Composition selon l'une des revendications 1 caractérisée en ce que ledit solvant d'extraction est choisi dans le groupe constitué des mono alcools en Cl à c5 et des glycols en C2 à C5. 15
5. Composition selon l'une des revendications 1 â 4, caractérisée en ce que ledit solvant d'extraction est choisi dans le groupe constitué de l'éthanol, du butylène glycol et des mélanges éthanol/eau et butylène glycol/eau.
6. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que 20 ledit solvant d'extraction est l'éthanol ou un mélange éthanol/eau comprenant au plus 5001 d"- u, de préférence au plus 4 d'eau.
7. Composition selon l'une des revendications 1 à 5 caractérisée en ce nue ledit sol` ont die, trac,' -)n este butylène nI I'uä~ l.: que de ' '' ractériséE solutic.. ledit solvant extraction a ete soumis le étape dE éparatior ie-liquide, afin d'éliminer la partie solide. 2903310 24 9. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que ledit extrait a subi une étape de décoloration, notamment une étape de décoloration sur charbon actif. 1O. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisée en ce qu'elle contient 10 %, de préférence de 0,010/0 à 2%, exprimé en poids d'extrait sec par rapport au poids total de la composition, d'un extrait de Limnodtrus //ittdirabis, en particulier un extrait de feuilles. 11. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisée en ce qu'elle contient en outre au moins un anteoxydant, tel que l'alpha-tocophérol, l'acide ascorbique et leurs dérivés cosmétiquement acceptables, en particulier leurs esters. 12. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme de crème, de gel, de lotion, de stick, de fard à paupières ou de fond de teint. 13. Composition selon l'une des revendications 1 à 11, caractérisée en ce qu'elle est sous forme anhydre et en ce qu'il s'agit, en particulier, d'un fond de teint, d'un fard à paupières, d'un stick. 14. Composition selon l'une des revendications 1 à 13, caractérisée en ce que ledit extrait est introduit sous forme d'une solution dans le butylène glycol, en particulier sous forme d'une solution contenant de 0,05 5% en poids, mieux de 0,1 à 1% en poids dudit extrait, exprimé tyléne glyco ii 1 il ,5 mp_ iii. on -rétique ou fat ati( )ositio osmétique, tel que dé ne quelconque evendications 1 à n tant J'agent actif capable de conférer à lai omposition cosmétique des I priétés cosmétiques permette de lutter contre les ma lations 'taré- qiques 2903310 25 crongine inflammatoire telles que celles associées aux peaux sensibles, par un effet apaisant cutané. 16. Utilisation selon la revendication 15, caractérisée en ce que ladite composition cosmétique est destinée à apaiser les manifestations 5 cutanées non pathologiques d'origine inflammatoire telles que les sensations de chaleur ou de brûlure, les rougeurs, les tiraillements, les démangeaisons et les picotements. 17. Utilisation, dans une composition cosmétique ou pour la fabrication d'une composition cosmétique, d'un extrait tel que défini dans 10 l'une des revendications 1 à 10, en tant qu'agent stimulant la synthèse du collagène. 18. Utilisation selon la revendication 17, caractérisée en ce que ladite composition est destinée à prévenir et/ou lutter contre les effets du vieillissement intrinsèque et/ou photo-induit de la peau. 15 19. Procédé de traitement cosmétique notamment destiné à apaiser les manifestations cutanées non pathologiques d'origine inflammatoire et/ou prévenir et/ou lutter contre les effets du vieillissement intrinsèque et/ou photo-induit, caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur la peau d'une composition cosmétique telle que définie 20 dans l'une des revendications 1 à 14. Procédé de traitement cosmétique selon la revendication 19, caractérisé en ce qu'il est destiné à un soin anti-rides.
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