FR2791683A1

FR2791683A1 - Derives de n-sulfonyl-dipeptides, leur preparation et leur application en therapeutique

Info

Publication number: FR2791683A1
Application number: FR9903933A
Authority: FR
Inventors: Gary Mccort; Patrice Bellevergue; Christopher Latham; Valerie Martin; Christine Masson; Chantal Alcouffe; Genevieve Dellac
Original assignee: Synthelabo SA
Current assignee: Synthelabo SA
Priority date: 1999-03-30
Filing date: 1999-03-30
Publication date: 2000-10-06
Also published as: AU3301700A; WO2000058346A1

Abstract

La présente invention a pour objet des composés de formule générale (I) (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle,R1 représente soit un groupe (C1 -C7 ) alkyle pouvant être substitué soit un groupe cycloalkyle ou cycloalkylalkyle, soit un groupe - (CH2 ) n -X-R3 , R2 représente soit un groupe (C1 -C7 ) alkyle pouvant être substitué soit un groupe cycloalkyle ou cycloalkylalkyle, soit un groupe phényle, benzyle ou 2-phényléthyle, pouvant être substitué sur le groupe phényle soit un groupe carbocyclique ou hétérocyclique,Y est représenté par la formule (II) (CF DESSIN DANS BOPI) où R4 représente soit un atome d'hydrogène, soit un groupe méthyle,et Q représente un groupe R5 -SO2 -, où R5 représente soit un groupe (C1 -C8 ) alkyle, soit un groupe cycloalkylalkyle, soit un groupe benzyle, pouvant être substitué.Procédés de préparation et application en thérapeutique.

Description

DERIVES DE N-SULFONYL-DIPEPTIDES; LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE La présente invention a pour objet des dérivés N-sulfonyl-dipeptides, leur préparation et leur application en thérapeutique.

Les composés de l'invention répondent à la formule générale (I)

dans laquelle, R1 représente soit un groupe (C1-C7)alkyle pouvant être substitué par un groupe hydroxy ou un groupe trifluorométhyle, soit un groupe cycloalkyle ou un groupe cycloalkylalkyle, soit un groupe -(CH2)n-X-R3 où R3 représente un groupe (C1-C3)alkyle, n est égal à 1, 2 ou 3 et X représente un atome de soufre ou d'oxygène, R2 représente soit un groupe (C1-C7)alkyle pouvant être substitué par un groupe amino, un groupe-COOH, un groupe hydroxyle ou un groupe trifluorométhyle, soit un groupe cycloalkyle ou un groupe cycloalkylalkyle, soit un groupe phényle, benzyle ou 2-phényléthyle, pouvant être substitué sur le groupe phényle par l'un des substituants suivants : un atome d'halogène, un groupe trifluorométhyle, un groupe amino ou un groupe (C1-C4)alcoxy, soit un groupe carbocyclique ou un groupe hétérocyclique,

Y est représenté par la formule (II)

où R4 représente soit un atome d'hydrogène, soit un groupe méthyle, et Q représente un groupe R5-SO2- où R5 représente soit un groupe (C1-C8)alkyle, soit un groupe cycloalkylalkyle, soit un groupe benzyle, pouvant être substitué sur le groupe phényle par un groupe méthoxy.

Dans le cadre de la présente invention les termes ci-après ont les significations suivantes : - un groupe alkyle est une chaîne hydrocarbonée, saturée, linéaire ou ramifiée, - un groupe cycloalkyle est une chaîne hydrocarbonée saturée cyclique comprenant 3 à 7 atomes de carbone, - un groupe cycloalkylalkyle est un groupe cycloalkyle lié à un groupe alkyle, ce dernier groupe comprenant 1 à 3 atomes de carbone, - un groupe carbocyclique est une chaîne hydrocarbonée comportant deux cycles, aromatiques ou non, choisi parmi les groupes naphtyle, 2-naphtylméthyle, 2-indanyle, 1-benzocyclobutanylméthyl, - un groupe hétérocyclique est une chaîne hydrocarbonée comportant un ou deux cycles, comprenant 1 ou deux hétéroatomes d'oxygène, de soufre ou d'azote, ces cycles étant aromatiques ou non, choisi parmi le groupe

2,3-dihydro-1,4-benzodioxyn-2-ylméthyle, indol-2 ou 3-ylméthyle, benzofuran-2 ou 3-ylméthyle, benzothiophén-2 ou 3-ylméthyle, benzisoxasol-3-ylméthyle, indazol-3-ylméthyle, thiazol-4 ou 5-ylméthyle, oxazol-4 ou 5-ylméthyle, 2,3 ou 4-pyridylméthyle, pyrimidin-2,4 ou 5-ylméthyle, 2-pyridazinylméthyle, 1 ou 3-isoquinolinylméthyle, 3,4 ou 5-isothiazolylméthyle, 4-imidazolylméthyle.

Les composés de formule générale (I) peuvent comporter un ou plusieurs carbones asymétriques. Ils peuvent donc exister sous forme d'énantiomères ou diastéréoisomères. Ces énantiomères, diastéréoisomères ainsi que leurs mélanges, y compris les mélanges racémiques font partie de l'invention.

Dans le cadre de la présente invention, les atomes d'halogènes sont préférentiellement le chlore et le fluor.

Les composés de formule générale (I) peuvent se présenter sous forme de bases libres ou de sels d'addition à des acides pharmaceutiquement acceptables, qui font également partie de l'invention.

Les composés préférés selon l'invention sont tels que le carbone qui porte R1 est de configuration absolue (S), et le carbone qui porte R2 est de configuration absolue (R).

Ces composés préférés peuvent être préparés selon les schémas qui vont suivre en partant de composés de départ chiraux.

Les composés de formule (I) peuvent être aisément synthétisés utilisant de nombreuses approches synthétiques employées de façon habituelle par l'homme de l'art (Fridkin et Patchornik, Ann. Rev. Biochem., 43, 419-443 (1974) ; Kent, Ann. Rev. Biochem., 57, 957-990 (1988) ; Bodansky, "The practice of peptide synthesis", Springer-Verlag, Berlin(1984) ; Jones, "Amino acid and peptide synthesis", Oxford University Press, Oxford(1997)).

Les couplages peptidiques utilisés pour préparer les

composés de l'invention emploient typiquement la méthode à la N'-(3-diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide (N'-(3DIMÉTHYLAMINOPROPYL)-N-ÉTHYLCARBODIIMIDE) / 1-hydroxybenzotriazole ou au [O-(7-azabenzotriazol-1-yl)- 1,1,3,3-tétraméthyluronium hexafluorophosphate (HATU).

D'autres méthodes pour former les liaisons amides comprennent l'utilisation d'un chlorure d'acide, azide, anhydride mixte ou ester activé.

Les groupements fonctionnels des dérivés d'acides aminés utilisés peuvent par exemple être bloqués par des groupements protecteurs orthogonaux afin d'empêcher des réactions secondaires lors des couplages. Des exemples de tels groupements protecteurs et leur utilisation sont décrits par exemple dans Greene, "Protecting Groups in organic synthesis", 2è édition, Wiley-Interscience(1991), dans Jones "Amino acide and peptide synthesis", Oxford University Press (1997) et dans "The peptides", Gross et Meienhofer, vol 3, Academic Press (1981).

Typiquement, les synthèses sont réalisées en phase liquide mais la synthèse en phase solide du type Merrifield peut être également employée.

Selon l'invention, on peut préparer les composés de formule (I) par des procédés illustrés pas les schémas 1, 2 et 3.

Selon le schéma 1, on fait réagir un chlorure de sulfonyle de formule Q-Cl, dans laquelle Q est tel que défini ci-dessus avec un acide aminé de formule (III), dans laquelle R2 est tel que défini ci-dessus et la fonction acide carboxylique est protégée par un groupement protecteur GP1, où GP1 représente, par exemple, un

groupement méthyle, éthyle, tert-butyle ou benzyle, en présence d'une base organique telle que la triéthylamine ou la N-méthylmorpholine, dans un solvant aprotique tel que le dichlorométhane ou la diméthylformamide, à une température comprise entre 0 et 60 C. On déprotège le composé de formule (IV) obtenu, par exemple par l'hydroxyde de lithium, dans un mélange tétrahydrofurane/eau, dans les cas d'un ester méthylique ou éthylique, ou par l'acide trifluoroacétique ou chlorhydrique anhydre dans le dichlorométhane dans le cas d'un ester tert-butylique, à une température comprise entre 0 et 25 C, pour obtenir l'acide carboxylique de formule (V). On condense le dérivé de formule (V) avec un acide aminé de formule (VI), dans laquelle R1 est tel que défini ci-dessus, en présence d'un agent de couplage peptidique tel que la N'-(3diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide (N'-(3DIMÉTHYLAMINOPROPYL)-N-ÉTHYLCARBODIIMIDE) / 1-hydroxybenzotriazole ou le [O-(7-azobenzotriazol-1-yl)- 1,1,3,3-tétraméthyluronium hexafluorophosphate (HATU), en présence d'une base organique telle que la N,N-diisopropyl-N-éthylamine, N-méthylmorpholine ou la triéthylamine, dans un solvant aprotique tel que le dichlorométhane ou la diméthylformamide ou un mélange des deux, à une température comprise entre 0 et 25 C. On déprotège le composé dipeptidique de formule (VII) ainsi obtenu dans les conditions décrites auparavant pour GP1 et on condense ensuite l'acide carboxylique de formule (VIII) avec un composé de formule (II), dans laquelle R4 est tel que défini ci-dessus et Z représente un groupement protecteur tel qu'un groupe benzyloxycarbonyle, en présence d'un agent de couplage tel que ceux décrits pour la préparation des composés de formule (VII). Le composé de formule (IX) ainsi obtenu est alors hydrogénolysé en présence de palladium sur charbon et d'acide chlorhydrique dans un solvant polaire tel que le méthanol ou l'éthanol pour obtenir un composé de formule (I), que l'on peut purifier, par exemple par HPLC sur phase inverse, en éluant, par exemple avec un gradient de 0 à 100% d'acétonitrile dans de l'acide hydrochlorique aqueux N/1000

ou de l'acide trifluoroacétique de 0,1 à 1%.

Selon l'invention, les composés de formule (I) peuvent être également synthétisés selon le schéma 2.

On condense un acide aminé de formule (X), dans laquelle la fonction amine est protégée par un groupement protecteur orthogonal GP2, où GP2 représente, par exemple, un groupe tert-butyloxycarbonyle, avec un acide aminé de formule (VI) dont la fonction acide carboxylique est protégée par un groupement protecteur orthogonal GP1, où GP1 représente, par exemple, un groupe méthyle ou éthyle, en présence d'un agent de couplage tel que l'N'-(3-DIMÉTHYLAMINOPROPYL)-N- ÉTHYLCARBODIIMIDE, HATU ou autre, et d'une base organique telle que la N,N-diisopropyl-N-éthylamine, Nméthylmorpholine ou triéthylamine, dans un solvant aprotique tel que le dichlorométhane ou la diméthylformamide ou dans un mélange des deux, à une température comprise entre 0 et 25 C. On obtient un dérivé dipeptidique doublement protégé de formule (XI). On déprotège la fonction amine du dérivé (XI), par exemple, quand GP2 représente un groupement tert-butyloxycarbonyle, à l'aide de l'acide trifluoroacétique ou chlorhydrique anhydre dans un solvant tel que le dichlorométhane ou acétate d'éthyle et à une température comprise entre 0 et

25 C, pour fournir un composé de formule (XII). On traite ce composé de formule (XII) par un chlorure de sulfonyle de formule Q-Cl en présence d'une base organique dans un solvant aprotique, à une température comprise entre 0 et 50 C, pour obtenir une sulfonamide de formule (VII), que l'on traite comme décrit dans le schéma 1 pour obtenir un composé de formule (I).

Selon l'invention, les composés de formule (I) peuvent être également synthétisés selon le schéma 3. On fait réagir un acide aminé de formule (X), dans laquelle la fonction amine est protégée par un groupement protecteur orthogonal GP2, où GP2 représente par exemple un groupement tert-butyloxycarbonyle, avec un composé de formule (II), tel que défini pour le schéma 1 en présence d'un agent de couplage tel que décrit précédemment et d'une base organique dans un solvant aprotique tel que le dichlorométhane ou la diméthylformamide ou un mélange des deux à une température comprise entre 0 et 25 C. On déprotège le composé de formule (XIII) ainsi obtenu au niveau de son extrémité N-terminale par traitement à l'acide trifluoroacétique ou chlorhydrique anhydre, lorsque GP2 représente un groupement tert-butyloxycarbonyle, pour fournir un composé de structure (XIV). On condense le composé de structure (XIV) avec un dérivé d'acide aminé de formule (XV) convenablement protégé, en présence d'un agent de couplage dans les conditions décrites auparavant. On forme un composé de structure (XVI) dont on déprotège l'extrémité N-terminale dans les conditions décrites pour les composés de formule (XVII). On fait réagir le composé de formule (XVII) ainsi obtenu avec un chlorure de sulfonyle de formule Q-Cl en présence d'une base organique pour obtenir une sulfonamide de structure (IX). Finalement, les composés de structure (IX) sont transformés en composés de formule (I), par hydrogénolyse comme déjà décrit plus haut.

Les composés de départ sont disponibles dans le commerce ou décrits dans la littérature et peuvent être préparés selon des méthodes qui y sont décrites ou qui sont connues de l'homme du métier. Ainsi le dichlorhydrate de [[4-(aminométhyl)phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle est préparé selon une modification du brevet EP 672658.

Les exemples qui suivent illustrent l'invention sans la limiter. Les microanalyses et les spectres RMN, de masse et

IR confirment la structure des composés obtenus.

Les numéros indiqués entre parenthèse dans les titres des exemples correspondent à ceux de la 1ère colonne du tableau donné plus loin.

Exemple 1 : (composé N 8) Chlorhydrate d' (a-R) -N- [ (1S) -1- [ [ [ [4- (aminoiminométhyl) phényl]méthyl]amino]carbonyl]pentyl]-a-[[(phénylméthyl) sulfonyl]amino]-lH-indole-3-propanamide.

1.1. (a-R) -a- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] -1H-indole-3- propanoate de méthyle.

A un mélange de 1,09 g (5,0 mmoles) de l'ester méthylique de (R)-tryptophane et 1,30 ml (11,80 mmoles) de N-méthylmorpholine dans 20 ml de dichlorométhane à 5 C, on ajoute goutte à goutte une solution de 1,15 g (6,03 mmoles) de chlorure de a-toluène sulfonyle dans 10 ml de dichlorométhane. Le milieu réactionnel est ensuite agité à température ambiante pendant 15 heures puis évaporé à sec.

On reprend le résidu dans 200 ml d'acétate d'éthyle et lave la solution successivement à l'acide citrique aqueux 1M (2 x 50 ml), bicarbonate de sodium aqueux saturé (2 x 50 ml) puis chlorure de sodium aqueux saturé. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 1,78 g du produit sous forme d'huile.

Rendement : 96 %

1.2. Acide (a-R) -a- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] -1H- indole-3-propanoïque.

A 1,78 g (4,78 mmoles) de ([alpha]-R)-[alpha]-[[(phénylméthyl)sulfonyl] amino]-1H-indole-3-propanoate de méthyle dissout dans 14 ml de tétrahydrofurane, on ajoute une solution de 0,30 g (7,09 mmoles) d'hydroxyde de lithium monohydraté dans 7 ml d'eau.

Le mélange réactionnel est agité à température ambiante pendant 3 heures, puis le solvant organique est évaporé. On acidifie la solution aqueuse à pH 2 avec de l'acide

chlorhydrique 1N et extrait le produit à l'acétate d'éthyle (2 x 75 ml). On sèche les phases organiques sur sulfate de sodium, filtre puis évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 1,68 g d'une huile jaune orangée.

Rendement : 98 %

1.3. (2S) -2- [ [ (2R) -3- (1H-Indol-3-yl) -1-oxo-2- [[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]propyl]amino] hexanoate de méthyle.

A un mélange agité de 0,500 g (1,40 mmoles) d'acide (a-R)-

a-[[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]-1H-indole-3-propanoïque et 0,266 g (1,46 mmoles) de chlorhydrate de (S)-2aminohexanoate d'éthyle dans 20 ml de dichlorométhane à 20 C, on ajoute 0,207 g (1,53 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, 0,73 ml (4,2 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine et 0,294 g (1,53 mmoles de N'-(3-diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide et on poursuit l'agitation à cette température pendant 16 heures.

On concentre le milieu réactionnel et évapore le solvant sous pression réduite. On reprend le résidu par 200 ml d'acétate d'éthyle. On lave la solution successivement à l'acide citrique aqueux 1M (2 x 50 ml), au bicarbonate de sodium aqueux saturé (2 x 50 ml) puis au chlorure de sodium aqueux saturé. On sèche la phase organique sur sulphate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant avec un mélange méthanol/dichlorométhane (2:98).

On obtient 0,567 g de produit sous forme de mousse.

Rendement : 83 %.

1.4. Acide (2S)-2-[[(2R)-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] propyl] amino] hexanoïque.

On agite à température ambiante pendant deux heures un mélange de 0,567 g (1,17 mmoles) de (2S)-2-[[(2R)-3-(1H-

indol-3-yl)-1-oxo-2-[[(phénylméthyl)sulfonyl]amino] propyl]amino] hexanoate de méthyle et de 0,105 g (2,5 mmoles) d'hydroxyde de lithium monohydraté dans 10 ml d'une solution de tétrahydrofuranne/eau (2: 1). On évapore le solvant organique et on acidifie la solution aqueuse à pH2 avec de l'acide chlorhydrique 1N. Le précipité est essoré et rincé à l'eau puis séché sous vide.

On obtient 0,460 g d'une poudre blanche.

Rendement . 84 %.

Point de fusion : 193 C

1.5. [ [4- [ [ [ (2S) -2- [ [ (2R) -3- (1H-Indol-3-yl) -1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] propyl] amino] -1- oxohexyl]amino]méthyl]phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle.

A un mélange de 0,450 g (0,95 mole) d' acide (2S)-2-[[(2R)-

3- (IH-Indol-3-yl) -1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] propyl]amino] hexanoïque et de 0,356 g (1,0 mmole) de dichlorhydrate de [[4-(aminométhyl)phényl]iminométhyl] carbamate de phénylméthyle dans 15 ml de diméthylformamide à température ambiante, on introduit 0,150 g (1,11 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, 0,53 ml (3,04 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine puis 0,21 g (1,09 mmoles) de N'-(3-diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide. On poursuit l'agitation à cette température pendant la nuit puis on concentre le milieu réactionnel. On reprend le résidu avec 150 ml de dichlorométhane et lave la solution successivement à l'acide citrique aqueux 1M (2 x 25 ml), au bicarbonate de sodium en solution aqueuse saturée, puis au chlorure de sodium en solution aqueuse saturée. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 0,500 g d'un solide blanc cassé.

Point de fusion : 212-214 C Rendement : 71 % 1. 6. Chlorhydrate d'([alpha]-R)-N-[(1S)-1-[[ [[4- (aminoiminométhyl)phényl]méthyl]amino]carbonyl]

pentyl]-a- [[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]-1H-indole-
3-propanamide.

On hydrogène à 40 psi pendant 3 heures 0,50 g (0,68 mmoles)

de [ [4- [ [ [ (2S) -2- [ [ (2R) -3- (1H-Indol-3-yl) -1-oxo-2- [[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]propyl]amino]-l-oxohexyl] amino]méthyl]phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle dans 80 ml de méthanol en présence de 0,38 g de palladium sur charbon à 10 %. On filtre ensuite le milieu réactionnel sur papier de verre et concentre le filtrat sous pression réduite. On purifie le produit brut par HPLC phase inverse C-18 en éluant avec un gradient d'acétonitrile de 20 à 80 % en 150 minutes, dans l'acide chlorhydrique aqueux N/1000.

Après lyophilisation des fractions contenant le produit, on obtient 0,150 g du composé attendu.

Point de fusion : 125 C [a]D = + 10 (c = 0,2 ; méthanol) HPLC : temps de rétention : 16,3 min C18 (20 % à 50 % d'acétonitrile en 20 minutes dans de l'eau à 0,1% d'acide trifluoroacétique) Rendement : 35% Exemple 2 : (composé N 2)

Chlorhydrate de (2R) -N- [ (1S) -1- [ [ [ [4- (aminoiminométhyl) phényl]méthyl]amino]carbonyl]-3-(méthylthio)propyl]- 3,3-diméthyl-2-[[(phénylméthyl)sulfonyl] amino]butanamide

2.1. (2R) -3, 3-diméthyl-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] butanoate de 1,1-diméthyléthyle.

A une solution refroidie à 0 C de 2,00 g (10,07 mmoles) de (R)-2-amino-3,3-diméthylbutyrate de tert-butyle et 3,0 ml (27,29 mmoles) de N-méthylmorpholine dans 40 ml de dichlorométhane, on ajoute goutte à goutte une solution de 2,60 g (13,64 mmoles) de chlorure de a-toluène sulfonyle dans 10 ml de dichlorométhane. On agite à température ambiante pendant 17 heures puis on dilue le milieu réactionnel dans 200 ml de dichlorométhane. On lave la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide

citrique à 1M, une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium, puis une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant avec un mélange méthanol/dichlorométane (2:98).

On obtient 2,04 g d'une huile épaisse incolore.

Rendement : 56 %

2.2. Acide (2R)-3,3-diméthyl-2-[[(phénylméthyl)sulfonyl] amino]butanoique.

On ajoute goutte à goutte 15,0 ml d'acide trifluoroacétique à une solution refroidie de 0 C de 2,04 g (5,99 mmoles) de (2R)-3,3-diméthyl-2-[[(phénylméthyl)sulfonyl] amino]butanoate de 1,1-diméthyléthyle dans 40 ml de dichlorométhane. On agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 6 heures puis le concentre sous pression réduite. On reprend le résidu obtenu dans 250 ml d'éther diéthylique et lave la solution avec une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium (3 x 75 ml). On acidifie les phases aqueuses à pH 1-2 avec de l'acide chlorhydrique 6N et on extrait plusieurs fois à l'éther. On sèche les phases organiques sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 1,45 g de produit sous forme d'huile incolore.

Rendement : 85 %

2.3. (2S) -2- [ [ (2R) -3, 3-diméthyl-1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl]amino]butyl]amino]-4-(méthylthio)butanoate de méthyle.

A un mélange de 1,10 g (3,85 mmoles) d' acide (2R)-3,3- diméthyl-2-[[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]butanoïque et de 0,81 g (4,06 mmoles) de chlorhydrate de l'ester méthylique de la (L)-methionine, ester méthylique dans 20 ml de dichlorométhane refroidi à 5 C, on ajoute 0,57 g (4,22 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, 2,00 ml (11,48 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine, puis 0,82 g (4,43 mmoles

de N'-(3-diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide puis on agite à température ambiante pendant 16 heures. On concentre le milieu réactionnel sous pression réduite et reprend le résidu par 200 ml d'acétate d'éthyle. On lave la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide citrique 1M (3 x 50 ml), une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium (3 x 50 ml) et enfin une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium (50 ml). On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant par un mélange méthanol/dichlorométhane (2: 98).

On obtient 1,36 g de produit sous forme de mousse blanche.

Rendement : 81 %.

2. 4. Acide (2S)-2-[[(2R)-3,3-diméthyl-1-oxo-

2 [ [ (phénylméthyl ) sul f onyl ] amino] butyl ] amino] -4 - (méthylthio)butanoïque.

On refroidit à 0 C une solution de 1,34 g (3,09 mmoles) de (2S)-2-[[(2R)-3,3-diméthyl-1-oxo-2-[[(phénylméthyl) sulfonyl] amino] butyl] amino] -4- (méthylthio) butanoate de méthyle dans 16 ml d'un mélange tétrahydrofurane / eau (3: 1). On ajoute 0,50 g (11,92 mmoles) d'hydroxyde de lithium monohydraté puis on agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 4 heures. On évapore le tétrahydrofurane sous pression réduite et on acidifie la solution aqueuse à pH 1 avec de l'acide chlorhydrique aqueux à 1N. On extrait 2 fois à l'acétate d'éthyle et rassemble les phases organiques, puis les lave avec une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore sous pression réduite.

On obtient 1,40 g d'un solide blanc.

Point de fusion : 100-102 C Rendement : 100 %

2.5. [ [4- [ [ [ (2S) -2- [ [ (2R) -3, 3-diméthyl-1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] butyl] amino] -4-

(méthylthio)-l-oxobutyl]amino]méthyl]phényl] iminométhyl]carbamate de phénylméthyle.

On ajoute à un mélange de 0,80 g (1,70 mmoles) d'acide

(2S) -2- [ [ (2R) -3, 3-diméthyl-1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl]amino]butyl]amino]-4-(méthylthio)butanoique et 0,636 g (1,79 mmoles) de dichlorhydrate de[[4-(aminométhyl)phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle dans 10 ml de dichlorométhane et 2 ml de diméthylformamide, refroidi à 5 C, 0,253 g (1,87 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, 1,20 ml (6,89 mmoles) de N,Ndiisopropyl-N-éthylamine puis 0,36 g (1,88 mmoles) de N'- (3-diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide. On laisse remonter la température à l'ambiante et on agite à cette température pendant 15 heures. On concentre le milieu réactionnel sous pression réduite puis reprend le résidu dans 150 ml d'acétate d'éthyle. On lave ensuite la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide citrique 1M (3 x 50 ml), une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium (3 x 50 ml), puis une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant par un mélange méthanol/dichlorométhane (3: 97).

On obtient 0,567 g de produit.

Rendement : 46 % 2.6. Chlorhydrate de (2R)-N-[(1S)-1-[[[[4- (aminoiminométhyl)phényl]méthyl]amino]carbonyl]-3- (méthylthio)propyl]-3,3-diméthyl-2-[[(phénylméthyl) sulfonyl]amino]butanamide.

1,0 g (1,46) mmoles de [ [4- [ [ [ (2S) -2- [ [ (2R) -3, 3-diméthyl-1oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] butyl] amino] -4- (méthylthio)-1-oxobutyl]amino]méthyl]phényl]iminométhyl] carbamate de phénylméthyle dans 40 ml de méthanol est hydrogéné pendant 6 heures à une pression de 50 psi en présence de 0,50 g de palladium sur charbon à 10 % et de

3 ml d'acide chlorhydrique 1N. On filtre ensuite le catalyseur sur papier de verre et évapore le filtrat sous pression réduite. On purifie le produit brut par HPLC phase inverse C-18 en éluant par un gradient d'acétonitrile de 0 à 100 % en 180 minutes, dans l'acide chlorhydrique aqueux N/1000. Après lyophilisation des fractions contenant le produit, on obtient 0,505 g de lyophilisat blanc.

Point de fusion : 150 C (décomposition) [a]D = + 10,0 (c = 0,3 ; méthanol)HPLC : temps de rétention : 18,4 min C18 (2 % à 98 % d'acétonitrile en 35 minutes dans de l'eau à 0,02 % d'acide trifluoroacétique) Rendement : 58% Exemple 3 : (composé N 23) Chlorhydrate d' (a-R) -N- [ (1S) -1- [ [ [ [4- (aminoiminométhyl) phényl]méthyl]amino]carbonyl] pentyl]-a-[[(phénylméthyl) sulfonyl]amino]thiazole-4-propanamide.

3.1. (2S) -2- [ [ (2R) -2- [ [ (l, 1-diméthyléthoxy) carbonyl] amino] -1-oxo-3-thiazol-4-ylpropyl]amino]hexanoate de méthyle.

A un mélange agité et refroidi à 0 C de 2,50 g (9,18 mmoles) de l'ester méthylique de N-tert- butyloxycarbonyl-(D)-4-thiazol-p-yl-alanine et de 1,75 g (9,64 mmoles) de chlorhydrate de (L)-norleucine dans 30 ml de dichlorométhane, on ajoute 1,37 g (10,10 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, 2,00 g (10,10 mmoles) de N'-(3diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide, puis 5,70 ml (33,01 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine, goutte à goutte. On laisse remonter la température à la température ambiante et on agite à cette température pendant 16 heures.

On dilue le milieu réactionnel dans 100 ml de dichlorométhane et lave la solution successivement avec une solution d'acide citrique 1M, une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium, puis une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous

pression réduite.

On obtient 3,54 g d'un sirop épais incolore.

Rendement : 100% 3. 2. Chlorhydrate de (2S)-2-[[(2R)-2-amino-1-oxo-3- thiazol-4-ylpropyl]amino]hexanoate de méthyle.

On fait barboter un courant d'acide chlorhydrique gaz pendant 5 minutes dans une solution refroidie à 0 C de 3,50 g (9,08 mmoles) de (2S)-2-[[(2R)-2-[[(1,1-

diméthyléthoxy)carbonyl]amino]-1-oxo-3-thiazol-4-ylpropyl] amino]hexanoate de méthyle dans 100 ml de dichlorométhane.

On agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 8 heures, concentre sous pression réduite. On triture le solide obtenu dans de l'éther diéthylique puis l'essore et le sèche sous vide.

On obtient 2,64 g d'une poudre blanche.

Point de fusion : 158 C (décomposition) Rendement : 87 %

3.3. (2S) -2- [ [ (2R) -l-Oxo-2- [ [ (phénylméthyl) suif onyl] amino]-3-thiazol-4-ylpropyl]amino]hexanoate de méthyle.

A une suspension refroidie à 5 C de 1,50 g (4,47 mmoles) de chlorhydrate de (2S)-2-[[(2R)-2-amino-1-oxo-3-thiazol-4- ylpropyl]amino] hexanoate de méthyle et de 0,894 g (4,69 mmoles) de chlorure de a-toluène sulfonyle dans 10 ml de dichlorométhane, on ajoute goutte à goutte une solution de 1,18 g (11,64 mmoles) de N-méthylmorphonine dans 5 ml de dichlorométhane. On agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 15 heures puis le dilue dans 100 ml de dichlorométhane. On lave la solution à l'eau puis avec une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium, puis de nouveau à l'eau. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, la filtre puis évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 1,24 g d'une huile épaisse incolore.

Rendement : 63 %.

3.4. Acide (2S) -2- [ [ (2R) -1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino]-3-thiazol-4-ylpropyl]amino]hexanoique.

A 1,22 g (2,70 mmoles de (2S)-2-[[(2R)-1-oxo-2- [[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]-3-thiazol-4- ylpropyl]amino]hexanoate de méthyle en solution dans 10 ml de tétrahydrofurane à température ordinaire, on ajoute une solution de 0,29 g (6,91 mmoles) d'hydroxyde de lithium monohydraté dans 2 ml d'eau. On agite la solution à cette température pendant 4 heures puis on évapore le solvant sous pression réduite. On dilue la solution aqueuse dans 3 ml d'eau, puis l'acidifie à pH 2 avec de l'acide chlorhydrique 6N. On extrait le produit avec de l'acétate d'éthyle et sèche les phases organiques sur sulfate de sodium, on filtre puis évapore le solvant sous vide.

On obtient 1,11 g d'un solide amorphe.

Rendement : 94 %.

3.5. [[4-[[[(2S)-2-[[(2R)-1-oxo-2- [[(phénylméthyl)sulfonyl] amino]-3-thiazol-4- ylpropyl]amino]-l-oxohexyl]amino] méthyl]phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle.

A une suspension agitée refroidie à 5 C de 0,55 g (1,54 mmoles) d' acide (2S)-2-[[(2R)-1-oxo-2- [[(phénylméthyl) sulfonyl]amino]-3-thiazol-4-ylpropyl] amino]hexanoique et de 0,550 g (1,54 mmoles) de dichlorhydrate de [[4-(aminométhyl)phényl]iminométhyl] carbamate de phénylméthyle dans 10 ml de dichlorométhane, on ajoute 0,199 g (1,47 mmoles) de 1-hydroxytriazole et 0,292 g (1,48 mmoles) de N'-(3diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide. On ajoute ensuite, goutte à goutte, une solution de 0,61 g (4,69 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine dans 10 ml de dichlorométhane. On agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 15 heures puis évapore le solvant sous pression réduite. On reprend le résidu par 150 ml d'acétate d'éthyle et lave la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide citrique

1M, une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium, puis une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 0,51 g d'un solide amorphe qui est utilisé tel quel dans l'étape suivante.

Rendement : 54 % 3.6. Chlorhydrate d' (a-R) -N- [ (1S) -1- [ [ [[4- (aminoiminométhyl) phényl] méthyl] amino] carbonyl] pentyl]-a-[[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]thiazole-4- propanamide.

On hydrogène pendant 4 heures à une pression de 40 psi 0, 50 g (0, 709 mmol) de [[4-[[[(2S)-2-[[(2R)-1-oxo-2- [[(phénylméthyl) sulfonyl]amino]-3-thiazol-4-ylpropyl] amino] -1-oxohexyl] amino] méthyl] phényl] iminométhyl] carbamate de phénylméthyle dans 30ml de méthanol en présence de 0,10 g de palladium "black" et 10 ml d'acide chlorhydrique à 0,1N dans l'isopropanol. On essore le catalyseur sur papier de verre et concentre le filtrat sous pression réduite. On purifie le produit brut par MPLC phase inverse C18 en éluant avec un mélange de méthanol/acide chlorhydrique aqueux N/1000 (3: 7).

On obtient 0,38 g d'un solide blanc.

Point de fusion : 164 C [[alpha]]D : + 14 (c = 0,45, méthanol) HPLC : temps de rétention : 15,1 min C18 (2 % à 98 % d'acétonitrile en 35 minutes dans de l'eau à 0,02 % d'acide trifluoroacétique) Rendement : 43 % Exemple 4 : (composé N 1) Chlorhydrate d' (a-R) -N- [ (1S) -1- [ [ [ [4- (aminoiminométhyl)

phényl] méthyl] amino] carbonyl] -3- (méthylthio) propyl] -a- [(butylsulfonyl)amino]-2,3-dihydro-1H-indène-1-acétamide.

4.1. (2S) -2- [ [ (2R) -2- (2, 3-Dihydro-1H-indèn-1-yl) -2- [ [ (l, 1- diméthyléthoxy) carbonyl] amino] acétyl] amino] -4-

(méthylthio)butanoate de méthyle.

A un mélange refroidi à 5 C de 1,0 g (3,43 mmoles) de N-tert-butyloxycarbonyl-(2-indanyl)-(D)-glycine et 0,72 g (3,61 mmoles) d'ester méthylique de la (L)-méthionine dans 10 ml de dichlorométhane, on ajoute 0,51 g (3,78 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, 1,8 ml (10,33 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine, puis 0,724 g (3,78 mmoles) de N'-(3-diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide. On agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 13 heures puis le dilue dans 200 ml d'acétate d'éthyle. On lave la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide citrique à 1M (3 x 50 ml), une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium (3 x 50 ml), puis une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium (50 ml). On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, la filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 1,36 g d'un solide blanc.

Point de fusion : 120 C Rendement : 90 % 4.2. Chlorhydrate de (2S)-2-[[(2R)-2-amino-2-(2,3-dihydro-

1H-indèn-1-yl)acétyl]amino]-4-(méthylthio)butanoate de méthyle.

On fait barboter pendant 5 minutes un courant d'acide chlorhydrique gazeux dans une solution refroidie à 5 C de 1,36 g (3,11 mmoles) de (2S)-2-[[(2R)-2-(2,3-dihydro-1H-

indèn-1-yl)-2-[[(1,1-diméthyléthoxy)carbonyl]amino]acétyl] amino]-4-(méthylthio)butanoate de méthyle dissout dans 100 ml de dichlorométhane. On agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 5 heures puis évapore la solvant sous pression réduite.

On obtient 1,16 g de produit sous forme de sirop épais.

Rendement : 100 %.

4.3. (2S) -2- [ [ (2R) -2- [ (butylsulfonyl) amino] -2- (2, 3dihydro-1H-indèn-1-yl)acétyl]amino]-4-(méthylthio) butanoate de méthyle.

On additionne goutte à goutte 0,85 g (5,43 mmoles) de chlorure de n-butyl sulfonyle dissout dans 3 ml de dichlorométhane, à une solution refroidie à 0 C de 1,16 g (3,11 mmoles) de chlorhydrate de (2S)-2-[[(2R)-2-amino-2-

(2,3-dihydro-1H-indèn-1-yl)acétyl]amino]-4-(méthylthio) butanoate de méthyle dans 6 ml de dichlorométhane, suivie d'une solution de 1,10 g (10,89 mmoles) de N-méthylmorpholine dans 6 ml de dichlorométhane. On agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 18 heures puis le dilue dans 150 ml de dichlorométhane. On lave la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide citrique 1M, une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium, puis une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, la filtre et évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant avec un mélange méthanol/dichlorométhane (2: 98).

On obtient 1,02 g de produit sous forme d'un solide blanc.

Point de fusion : 140 C Rendement : 72 %

4.4. Acide (2S) -2- [ [ (2R) -2- [ (butylsulfonyl) amino] -2- (2, 3dihydro-1H-indèn-1-yl)acétyl]amino]-4-(méthylthio) butanoique.

A une solution agitée à 20 C de 1,02 g (2,23 mmoles de

(2S) -2- [ [ (2R) -2- [ (butylsulfonyl) amino] -2- (2, 3-dihydro-1H- indèn-l-yl)acétyl]amino]-4-(méthylthio) butanoate de méthyle dans 9 ml de tétrahydrofurane et 3 ml d'eau, on ajoute 0,34 g (8,10 mmoles) d'hydroxyde de lithium monohydraté et on poursuit l'agitation pendant 4 heures. On évapore le tétrahydrofurane sous pression réduite et dilue la solution aqueuse dans 10 ml d'eau. On acidifie à pH 1-2 par addition d'acide chlorhydrique 1N et on extrait plusieurs fois à l'acétate d'éthyle. On sèche les phases organiques sur sulfate de sodium, les filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 0,98 g de produit sous forme d'une huile

incolore.

Rendement : 100 %.

4.5. [[4-[([(2S)-2-[[(2R)-2-[(Butylsulfonyl)amino]-2-(2,3dihydro-1H-indèn-1-yl)acétyl]amino]-4-(méthylthio)-1- oxobutyl]amino]méthyl]phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle.

A une suspension refroidie à 0 C de 0,98 g (2,21 mmoles)

d' acide (2S) -2- [ [ (2R) -2- [ (butylsulfonyl) amino] -2- (2, 3dihydro-1H-indèn-1-yl)acétyl]amino]-4-(méthylthio) butanoïque, 0,83 g (2,34 mmoles) de dichlorhydrate de [[4-(aminométhyl)phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle, 0,300 g (2,44 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole et 0,47 g (2,44 mmoles) de N'-(3diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide dans 13 ml de dichlorométhane et 4 ml de diméthylformamide, on ajoute goutte à goutte 1,50 ml (8,61 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine. On agite le milieu réactionnel pendant 15 heures puis le concentre sous pression réduite. On reprend le résidu par 200 ml d'acétate d'éthyle et lave la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide citrique 1M, une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium et enfin une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, la filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 1,20 g d'un solide blanc.

Point de fusion : 163 C Rendement : 77 % 4.6. Chlorhydrate d'([alpha]-R)-N-[(1S)-1-[[[[4- (aminoiminométhyl)phényl]méthyl]amino]carbonyl]-3- (méthylthio)propyl]-a-[(butylsulfonyl)amino]-2,3- dihydro-1H-indène-1-acétamide.

Dans un appareil de Parr, on soumet pendant 12 heures à une pression de 50 psi d'hydrogène, 1,20 g (1,70 mmoles) de

[ [4- [ [ [ (2S) -2- [ [ (2R) -2- [ (butylsulfonyl) amino] -2- (2, 3dihydro-1H-indèn-1-yl)acétyl]amino]-4-(méthylthio)-1- oxobutyl]amino]méthyl]phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle dans 70 ml de méthanol en présence de 0,50 g de palladium sur charbon à 10 % et 3,4 ml d'acide chlorhydrique 1N. On filtre le catalyseur et concentre le filtrat sous pression réduite. On purifie le produit brut par HPLC phase inverse C18en éluant avec un gradient d'acétonitrile de 0 à 100 % en 180 minutes dans une solution aqueuse d'acide chlorhydrique N/1000.

On obtient 0,257 g d'un solide blanc.

Point de fusion : 150 - 155 C [[alpha]]D : - 5,4 (c = 0,13 ; méthanol) HPLC : temps de rétention = 20,0 min C18 (2 à 98 % d'acétonitrile en 35 min dans de l'eau à 0,02 % d'acide trifluoroacétique) Rendement : 20% Exemple~~5. : (composé N 27)

Chlorhydrate d' (a-R) -N- [ (1R) -2- [ [ [4- (aminoimino méthyl)phényl]méthyl]amino]-1-[(éthylthio)méthyl]-2- oxoéthyl]-a-[[(phénylméthyl)sulfonyl]amino] benzènebutanamide.

5.1. [ [4- [ [ [ (2R) -2- [ [ (1, 1-diméthyléthoxy) carbonyl] amino] - 2- [ (éthylthio) méthyl] acétyl] amino] méthyl] phényl] iminométhyl]carbamate de phénylméthyle.

A un mélange agité à 0 C de 1,0 g (4,01 mmoles) de (L)-N-tert-butyloxycarbonyl S-éthylcystéine et de 1,50 g (4,21 mmoles) de dichlorhydrate de [[4-(aminométhyl)phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle dans 12 ml d'un mélange dichlorométhane/diméthylfornamide (2:1), on ajoute 0,60 g (4,44 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, 2,80 ml (16,07 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine, puis 0,85 g (4,43 mmoles) de N' - (3-diméthylaminopropyl) -N-

éthylcarbodiimide. On agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 16 heures puis le concentre sous pression réduite. On reprend le résidu par 200 ml d'éther diéthylique et lave la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide citrique à 1M (3 x 50 ml), de l'eau (50 ml), une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium, et enfin une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 1,43 g de produit sous forme d'une poudre blanche.

Point de fusion : 100-101 C Rendement : 69 % 5. 2. Chlorhydrate de [[4-[[[(2R)-2-amino-3-(éthylthio)-1- oxopropyl]amino]méthyl]phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle.

On fait barboter pendant 5 minutes un courant d'acide chlorhydrique gazeux dans une solution refroidie à 0 C de 1,43 g (2,77 mmoles) de [[4-[[[(2R)-2-[[(1,1diméthyléthoxy)carbonyl]amino]-2-[(éthylthio)méthyl] acétyl]amino]méthyl]phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle dans 100 ml de dichlorométhane. On agite le milieu réactionnel à 20 C pendant 4 heures puis le concentre sous pression réduite.

On obtient 1,01 g d'une poudre blanche.

Point de fusion : 149 C Rendement : 80 % 5. 3. (a-R)-a-[[(Phénylméthyl)sulfonyl]amino]benzène butanoate de méthyle.

A une suspension refroidie à 0 C de 3,0 g (13,06 mmoles) de chlorhydrate de l'ester méthylique de la (D)-homophénylalanine dans 50 ml de dichlorométhane, on ajoute goutte à goutte une solution de 3,74 g (19,62 mmoles) de chlorure d'a-toluène sulfonyle dans 30 ml de

dichlorométhane, suivi de l'addition goutte à goutte de 4,23 g (41,79 mmoles) de N-méthylmorpholine. On agite le milieu réactionnel à 20 C pendant 17 heures puis le lave avec une solution d'acide chlorhydrique 1N, une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium, puis une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant avec un mélange méthanol/dichlorométhane (3: 97).

On obtient 2,73 g de produit sous forme d'une meringue blanc cassé.

Rendement : 60 %

5.4. Acide (a-R) -a- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] benzène butanoïque.

A une solution agitée à température ambiante de 0,732 g

(2,10 mmoles) de (a-R) -a- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] benzène butanoate de méthyle dans 8 ml de tétrahydrofurane et 3 ml d'eau, on ajoute 0,31 g (7,40 mmoles)d'hydroxyde de lithium monohydraté que l'on agite à cette température pendant 4 heures. On évapore le tétrahydrofurane sous pression réduite et on dilue la solution aqueuse dans 15 ml d'eau. On acidifie la solution à pH 1 par addition d'acide chlorhydrique 1N. On extrait plusieurs fois à l'acétate d'éthyle et lave les phases organiques rassemblées avec une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, que l'on sèche ensuite sur sulfate de sodium. On filtre puis évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 0,671 g de produit sous forme d'un solide blanc.

Point de fusion : 130 C Rendement : 95 %.

5.5. [[4-[[[(2S)-3-(Ethylthio)-2-[[(2R)-l-oxo-4-phényl-2- [[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]butyl]amino]-l- oxopropyl]amino]méthyl]phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle.

A un mélange refroidi à 5 C de 0,658 g (1,97 mmoles)

d' acide (a-R) -a- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] benzène butanoïque et de 0,934 g (2,07 mmoles) de dichlorhydrate de [ [4- [ [ [ (2R) -2-amino-3- (éthylthio) -1-oxopropyl] amino] méthyl] phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle dans 10 ml de dichlorométhane, on ajoute 0,293 g (2,17 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, 0,764 g (5,91 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine, puis 0,416 g (2,17 mmoles) de N'-(3-diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide. On agite le milieu réactionnel à 20 C pendant 16 heures puis le dilue dans 200 ml d'acétate d'éthyle. On lave la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide citrique 1M (3 x 100 ml), de l'eau (100 ml), une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium (3 x 100 ml) puis une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique est séchée sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant avec un mélange méthanol/dichlorométhane (3: 97).

On obtient 0,82 g de produit sous forme de meringue blanche.

Rendement : 60 % 5.6. Chlorhydrate d'([alpha]-R)-N-[(1R)-2-[[[4-

(aminoiminométhyl ) phényl ] méthyl ] amino] -1- [ (éthylthio) méthyl] -2-oxoéthyl] -a- [[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]benzènebutanamide.

Une solution de 0,818 g (1,17 mmoles) de [ [4- [ [ [ (2S) -3- (éthylthio)-2-[[(2R)-l-oxo-4-phényl-2-[[(phénylméthyl) sulfonyl]amino]butyl]amino]-l-oxopropyl]amino]méthyl] phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle dans 40 ml de méthanol est hydrogéné dans un appareil de Parr à une pression de 50 psi pendant 4 heures, en présence de 0,30 g de palladium sur charbon à 10 % et 1,2 ml d'acide chlorhydrique 1N. On filtre le catalyseur et concentre le filtrat sous pression réduite. On purifie le produit par HPLC sur phase inverse C-18 en éluant par un gradient de 0 à 100 % d'acétonitrile en 180 minutes dans de l'acide

chlorhydrique N/1000.

On obtient 0,250 g de produit sous forme de solide blanc.

Point de fusion : 125 C [[alpha]]D : - 5,77 (c = 0,225 ; méthanol) HPLC : temps de rétention = 20,7 min C18 (2 à 98 % d'acétonitrile en 35 min dans de l'eau à 0,02 % d'acide trifluoroacétique) Rendement : 35 % Exemple 6 : (composé N 5) Chlorhydrate d' (a-R) -N- [ (1S) -1- [ [ [ [4- (aminoiminométhyl) phényl]méthyl]amino]carbonyl]pentyl]-a-[[(phénylméthyl) sulfonyl]amino]naphtalène-3-propanamide.

6.1. (2S) -2- [ [ (2R) -2- [ [ (l, 1-Diméthyléthoxy) carbonyl] amino]-3-naphtalèn-2-yl-1-oxopropyl]amino)hexanoate de méthyle.

A un mélange refroidi à 0 C de 2,0 g (6,34 mmoles) de (D)-N-tert-butyloxycarbonyl-3-(2-naphtyl)alanine, 1,20g (6,60 mmoles) de chlorhydrate de l'ester méthylique de la (L) -norleucine, 0,943 g (6,98 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole et 3,30 ml (18,94 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine, on ajoute 1,34 g (6,99 mmoles) de N'-(3-diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide puis on agite à température ambiante pendant 12 heures. On dilue le milieu réactionnel dans 300 ml d'éther diéthylique et lave la solution successivement avec une solution aqueuse d'acide citrique 1M (3 x 100 ml), de l'eau (100 ml), une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium (3 x 100 ml), et enfin une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre puis évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant avec un mélange méthanol/dichlorométhane (2: 98).

On obtient 2,74 g de produit sous forme d'une meringue.

Rendement : 98 %

6. 2. Chlorhydrate de (2S)-2-[[(2R)-2-amino-3-naphtalèn-2- yl-l-oxopropyl]amino]hexanoate de méthyle.

On fait barboter pendant 5 minutes un courant d'acide chlorhydrique gazeux dans une solution refroidie à 0 C de 2,80 g (6,42 mmoles) de (2S)-2-[[(2R)-2-[[(1,1-

diméthyléthoxy)carbonyl]amino]-3-naphtalèn-2-yl-1- oxopropyl]amino]hexanoate de méthyle dans 200 ml de dichlorométhane puis on poursuit l'agitation à 20 C pendant 4 heures. On concentre le milieu réactionnel sous pression réduite.

On obtient 2,40 g d'un solide amorphe.

Rendement : 100 %

6.3. (2S) -2- [ [ (2R) -3-naphtalèn-2-yl-1-oxo-2- [[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]propyl]amino] hexanoate de méthyle.

A un mélange de 2,40 g (6,33 mmoles) de chlorhydrate de

(2S) -2- [ [2R) -2-amino-3-naphtalèn-2-yl-1-oxopropyl] amino]hexanoate de méthyle et 3,53 ml (25,34 mmoles) de triéthylamine dans 100 ml de dichlorométhane refroidi à 0 C, on ajoute 2,20 g (11,54 mmoles) de chlorure de a-toluène sulfonyle puis on agite à température ambiante pendant 19 heures. On lave la solution avec une solution d'acide chlorhydrique 1N, puis une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium, et enfin une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant avec un mélange méthanol / dichlorométhane (1: 99).

On obtient 1,60 g de produit sous forme d'une meringue.

Rendement : 51 % 6. 4. Acide (2S)-2-[[(2R)-3-naphtalèn-2-yl-1-oxo-2- [[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]propyl]amino] hexanoïque.

A une solution agitée à température ambiante de 1,60 g

(3,22 mmoles) de (2S) -2- [ [ (2R) -3-naphtalèn-2-yl-1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] propyl] amino] hexanoate de méthyle dans 12 ml de tétrahydrofurane et 4 ml d'eau, on ajoute 0,48 g (11,44 mmoles)de d'hydroxyde de lithium monohydraté. Le milieu réactionnel est agité à 20 C pendant 4 heures, puis on évapore le tétrahydrofurane sous pression réduite. On dilue la solution aqueuse dans 10 ml d'eau puis acidifiée à pH 2 par addition d'acide chlorhydrique 3N. On extrait plusieurs fois à l'acétate d'éthyle puis sèche les phases organiques sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite.

On obtient 1,50 g d'un solide blanc.

Point de fusion : 129 C Rendement : 97 %.

6.5. [ [4- [ [ [ (2S) -2- [ [ (2R) -3-naphtalèn-2-yl-1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl ) sul fonyl ] amino] propyl ] amino] -1- oxohexyl]amino]méthyl]phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle.

On ajoute 0,26 g (1,36 mmoles)de N'-(3-diméthylaminopropyl)-N-éthylcarbodiimide à un mélange de 0,60 g (1,24 mmoles) d' acide (2S)-2-[[(2R)-3-naphtalèn-

2-yl-1-oxo-2- [ [ (phénylméthyl) sulfonyl] amino] propyl] amino] hexanoïque, 0,42 g (1,31 mmoles) de dichlorhydrate de [[4-aminométhyl)phényl]iminométhyl]carbamate de phénylméthyle, 0,185 g (1,37 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole et 0,65 ml (3,73 mmoles) de N,N-diisopropyl-N-éthylamine dans 6 ml d'un mélange dichlorométhane/diméthylformamide (1: 1) refroidi sur bain de glace. On concentre le milieu réactionnel sous pression réduite et purifie le produit brut par chromatoflash sur gel de silice en éluant avec un mélange méthanol/dichlorométhane (3: 97).

On obtient 0,79 g de produit sous forme d'une mousse blanche.

Rendement : 85 %

6. 6. Chlorhydrate d'([alpha]-R)-N-[(1S)-1-[[ [ [4- (aminoimino méthyl)phényl]méthyl]amino]carbonyl]pentyl]-a- [[(phénylméthyl)sulfonyl]amino]naphtalène-3- propanamide.

On hydrogène pendant 5 heures à température ambiante à une pression de 40 psi 0,790 g (1,06 mmoles) de [[4-[[[(2S)-2-

[[(2R)-3-naphtalèn-2-yl-1-oxo-2-[[(phénylméthyl)sulfonyl] amino] propyl] amino] -1-oxohexyl] amino] méthyl] phényl] iminométhyl]carbamate de phénylméthyle dans 30ml de méthanol en présence de 0,20 g de palladium sur charbon à 10 % et 1 ml d'acide chlorhydrique à 1N. On filtre le catalyseur et évapore à sec le filtrat. On purifie le produit brut par HPLC sur phase inverse C-18 en éluant par un gradient de 0 à 100 % d'acétonitrile en 180 minutes dans de l'acide chlorhydrique aqueux N/1000.

On obtient 0,505 g d'un solide blanc.

Point de fusion : 135-140 C [a]D : +5,0 (c = 0,2 ; méthanol) HPLC : temps de rétention = 8,7 min C18 (40 % d'acétonitrile dans de l'eau à 0,1 % d'acide trifluoroacétique) Rendement : 74 %

Tableau 0 Ri Q-J0JYy R2 0 o F (OC) fal Pi 2 (HCl) [a] NH 5,40 1 CH3 (CH2) 3S02- -CH2CH2SCH3 1 / \ 150-155 (c=0,13 = méthanol) so2 -CH CH SCH tBu NH 150 (c=0,3 -N "=" z (dec) méthanol) so- 1 NH + 20,50 3 nBu -CH2CH2C02H -N H -C>-NH2 135 (c=0,2 H NH2 méthanol) INH + 170 4 CH3CH2S02- -CH2CH2SCH3 -CH 2 CH(CH 3) /\~/\ 120 (c=0,1 -N NH2 méthanol)

N RI R2 Y (HC1 ) [a] D so- / \ NH + 5 0 5 II nBu /\~/\ NH2 135-140 méthanol) /V H 2 méthanol) /##\ NH + 2,250 6 CH3(CH2)3SO2- nBu ( )## / \ 210 (c=0,35 \ / h NH2 méthanol) 7 [ F 2 -CH2SCH3 cr -1q NH 130 (c=0,2 ::::::-.. -CH2SCH3 130 méthanol) fYs 2- T NH 100 8 / I \ SO2 ~ nBu oS /#\ /\ 125 (c=0,2 H méthanol) rVso# fV" NH + 3 8 9 I II nBu lf / \ / \ 180 (c=0,18 F3c H z méthanol) S07- Y-Yx NH 2,3- 10 ()80- -CH2CH2SCH3 [ ! } /(,~/\ 120 (c=0,35 -CH2CH2SCH3 -N NH méthanol ' NH2 méthanol 11 HOzC-(CH2)3-S02 nBu -CH2-CH(CH3)2 - NH 203-206 non - -N \==/ NH détermine H

Q RI R2 Y (HCl) [qj, so- / \ NH + 2 O 12 h nBu 00- / \ / \ 165 (c=0,25 >V/ - z méthanol) (Ys - /#\ NH 13 2 nBu ( )## / \ 166 (c=0318 1 nBu \ / 2 méthanol) ()80- flj# + 26,50 14 1 -CH20CH3 -CH2CH(CH3)2 / \~/\ 110 (c=0,2 >- NH2 méthanol) r"Vso2 NE 120 + 28 15 I \s02 nPr -CH,CH (CH3) /\ /\ (deo) (c=0,l ~~~~~~~~~~~~~~~ H \=/ nh2 (dec) méthanol) so- NH 2c> 16 I H 2 -CH2SCH2CH3 tBu / \~/\ 85 (c=0,17 223 H z méthanol) S02 nBu rr NH 155 (c=0,2 + 17 17 jj nBu /\~/\ 155 (c=0,2 Pli méthanol) rVsos- rV NH + 4,50 18 I J nBu cr -NI 132 méthanol) >~S NHa méthanol)

F(OC) N Q Ri R2 (HCI) [a] D (HCl) so2 nBu -CH2CH2CH (CH3) 163 nBu -CH,CH9CH(CHo)9 -N/-N'mH2 163 déterminé -N x=/ détermine so- fV -Z11 5'2 20 So- 2 nBu N 192* (c=0,135 / HzN - méthanol) 21 CH3- (CH2) 3-S02- -CH2CHZSCH3 - CH2CH2-o , 130 (c=0,2 N 2 méthanol) 22 2 -CH2CH2SCH, # CH.CH, <7 X> - / \ 120 (c=0, 3 ::::-... H 2 méthanol) So2 nBu 164 + 140 802 nBu -NI (dec) (c=0,45 ::::-... svN - NHz ( ec) méthanol) 24 2 -CH2SCH3 -CH2CH (CH3) / \ / \ 115 non 802 -CH2SCH3 (CH3) -N/-NH2 115 déterminé ks. 232 -N \==y NH déterminé NH 25 CH3CH2S02- -CH2SCH3 -CH2CH(CH,)2 f 78 non J2 2*32 -N 2 déterminé

o F (OC) la] R2 (HCl) [a] D (rr NH 22,50 26 CH CH SO - nBu (J() / W \ 165 (c=0,2 ::::-... h- -N NH2 méthanol) 5, 770 27 2 -CH2SCH2CH3 -CH CH 2 / \ / \ 125 (c=0,225 x -N NH2 méthanol) 2 8 nBu -N NHZ ( dec ) méthanol ) >F H2 (dec) méthanol) NH 170 3 29 CH3(CH2)3SO2- nBu -CH2CH2-o -N / \ NH (de0c) (C=0, 1 3(CH j H z méthanol) rïï NH 210 30 CH3CH2S02- -CH2CH2SCH3 (J() -N /-- lc~ NH2 1 - (c=O,l ::::-... h- -N NH2 méthanol) H3C/OVVSO2- NH 28,50 31 o Bzz nBu -CH2CH(CH,)2 - / \ nu 150 (c=0, 2 H NH2 méthanol) rV NH 13,50 32 CH CH S02- -CH2CH2SCH3 - H NH2 110 méthanol) N 2 méthanol)

N Q RI R2 Y (HC1 ) [#]D so2 - NH + 16 33 (J \S02 nBu -CH2CH 2--o / \ 110-115 (c=0, 25 ' - -1 H NH2 méthanol) rYso- NH + 1 34 ()80- -CH2SCH2CH3 -CH2CH(CH,)2 / \ 110 (c=0,2 1 -CH2SCH2CH3 -CH2CH(CH3)2 \ NH2 110 méthanol) / so2 / \ NH + 320 35 1 nBu -CH3 -N H NHi 140 (c=0,175 H NH2 méthanol) so2 NH 178* + 14 36 2 nBu -(CH9)4NH? / \ 178* (c=0, 5 - NH2 (dec) méthanol) 1-l' so- rY- / \ NH 6 37 nBu 150* (c=0,2 5 N H NH2 méthanol) / \ NH 4 60 CH3(CH2)3SO2- nBu tBu /##( 174 (c=0,35 38 CH3(CH2)3S02- nBu tBu 1 74 (c=0,35 2)3su2 H z (dec) méthanol) 1-1 so- NH + 17,50 39 () 2 -CH 2 CH(CH 3)2 -CH2CH (CH3) / \ / \ 110 (c=0, 2 V S NH2 méthanol)

o F (OC) la] (HCl) [a]D 9,60 -nBu NH 149 960 -nBu s H nu2 149 méthanol) Xs NH2 méthanol) rVSO- NH 250 41 2 -CH2CH2 CH (CH -CH2CH(CH3)2 / \ / \ 160 (c=0,1 -CH2CH2CH(CH3)2 -CH2CH(CH3)2 -Nr-NH2 160 méthanol) ::::-... ~~S NH2 méthanol) so- rr NH 12 42 -CH2CH(CH 3) / \ / \ 141 (c=0,2 - NH2 méthanol) so- NH - 19 43 I |l 2 nBu tBu / \ / \ 182 (c=0,2 N NHz méthanol ) H NH2 méthanol) 130 44 -CH2CH(CH3)2 -NF-CNH2 140 (c=0,1 S02 -CH2CH(CH3)2 140 méthanol) N NH2 méthanol) w NH 25- 45 2 -CH (CH 2CH3 -CH CH (CH3) / \ / \ 210 (c=0, 2 5 -N NH2 méthanol) NH 8,90 46 CL, S02 nBu -CH2CH(CH3)2 , 156 (c=0,225 S02 H NH2 méthanol)

F (OC) la] (HCl) [a] su2 253 220 47 OH -CH2CH(CH3)2 ~N / \ NH2 (dec) (c=0,2 CH3 H \=/ 2 méthanol) 48 2 nBu -CH2CH(CH3)2 -N -c:m NH2 110 (c=0,2 / -N NH2 méthanol) - [a]D désigne le pouvoir rotatoire. Tous les composés du tableau sont optiquement purs, de configuration (S) sur le carbone portant R1 et (R) sur le carbone portant R2.

- Tous ce composés se présentent sous forme de chlorhydrate, sauf les composés marqués par * qui sont des dichlorhydrates.

- "dec" signifie que le composé se décompose à son point de fusion.

- "tBu" représente le groupe tert-butyle (ou 1,1-diméthyléthyle).

- "nBu" représente le groupe butyle linéaire.

- "nPr" représente le groupe propyle linéaire.

Les composés de l'invention ont fait l'objet d'études pharmacologiques qui ont mis en évidence leur intérêt comme substances actives en thérapeutique.

Les composés de l'invention ont été soumis en particulier à un test d'inhibition du facteur de coagulation VII/VIIa (facteur VII/VIIa).

Test Ki VII Principe du test Ki Facteur VIIa Ce test a pour but de mesurer l'activité amidolytique du complexe Facteur VIIa/Facteur Tissulaire sur un substrat chromogénique en présence de concentrations variables de l'inhibiteur testé. Un composé est dit inhibiteur compétitif s'il augmente le Km du Facteur VIIa pour son substrat c'est à dire qu'il diminue l'affinité du Facteur VIIa pour son substrat.

Cette activité amidolytique du Facteur VIIa (FVIIa), testé à une concentration, est mesurée de façon cinétique (calcul de la vitesse) en déterminant le clivage du substrat (deux concentrations testées) au cours du temps à l'aide d'un lecteur de microplaque qui détermine la libération de para-nitroaniline en mesurant l'absorbance à 405 nm. Le composé est testé à 7 concentrations.

La détermination du Ki est faite selon la méthode de Dixon dans laquelle on trace 1/vitesse en fonction de la concentration du composé et pour chaque concentration de substrat (SI et S2).

Le point d'intersection des droites de régression linéaire projeté sur l'axe des x détermine la concentration d'inhibiteur correspondant à-Ki.

Protocole Le Facteur VIIa utilisé est humain recombinant (produit dans des cellules CHO). Le Facteur Tissulaire (FT) est humain recombinant (produit dans E. Coli) et correspond à

la partie soluble extracellulaire (acides aminés 1 à 219).

Les complexes FVIIa/Facteur Tissulaire sont préalablement formés en incubant le Facteur VIIa et le Facteur Tissulaire dans un rapport de concentration molaire de 1/5 en présence de chlorure de calcium à 5 mM et utilisé à la concentration finale de 3,75 nM de FVIIa en présence de 18,75 nM de FT.

On utilise un tampon TBSA : Tris 50 mM pH7,5, chlorure de sodium 100 mM, BSA 0,1% ; un complexe FVIIa/FT à 3,75 nM/18,75 nM en tampon TBSA + chlorure de calcium à 5 mM ; un substrat chromogénique CBS-3447 (HD-CHG-But-ArgpNA) à 0,66 et 2,64 mM. Les composés sont mis en solution à 1 mM pour être testés.

Les réactifs sont déposés dans les godets dans l'ordre suivant (sans incubation ; concentrationsfinales) : composé (aux 7 concentrations + un témoin) puis substrat (Sl=0,66 mM et S2= 2,64 mM) puis complexe FVIIa/FT (3,75 nM/18,75 nM), les volumes respectifs des godets étant 25 fil, 50 fil et 25 fil.

Les Ki des composés de l'invention sont de préférence inférieurs à 1 M.

Les composés de l'invention ont également fait l'objet d'une étude de leur activité antithrombotique.

Test antithrombotique in vivo Principe du test La formation d'un thrombus FT-dépendant chez le Rat ou le Cobaye est obtenu par la mise en place d'un shunt artérioveineux dans lequel est inséré un fil de coton imprégné de thromboplastine (Facteur Tissulaire : FT).

Protocole On anesthésie le Rat, (Sprague Dawley), ou le Cobaye (Hartley), d'un poids moyen de 300-350 g au pentobarbital de sodium (60 mg/kg ip). Une veine fémorale (Rat) ou la

veine jugulaire droite (Cobaye) est canulée pour les injections intra-veineuses tandis que la veine jugulaire gauche et l'artère carotide droite sont canulées à l'aide d'un cathéter rempli de soluté physiologique à 0,9 % pour la constitution du shunt. Cinq minutes après l'administration intra-veineuse de plusieurs doses de composé (groupes traités) ou de son solvant (groupe témoin), le shunt est assemblé en connectant les deux cathéters à l'aide d'un tube de plastique souple de 3 mm de diamètre intérieur et de 6 cm de long contenant un fil de coton imprégné de thromboplastine. La circulation sanguine est rétablie pendant 5 min (Rat) ou 10 min (Cobaye). Le shunt est alors retiré et le fil de coton associé au thrombus est prélevé et immédiatement pesé.

Expression des résultats Les moyennes ( ESM) des poids de thrombi dans les différents groupes sont déterminées. Les pourcentages de diminution du poids de thrombus pour chaque groupe traité, comparativement au groupe témoin, sont calculés afin de déterminer une DA50, dose de composé inhibant de 50 % le poids de thrombus chez les animaux témoins.

Les DA50 des composés de l'invention sont de préférence inférieurs à 5 mg/kg.

Les résultats de ces essais biologiques ont montré que les composés de l'invention présentent des propriétés inhibitrices du facteur VII/facteur VIIa.

A ce titre, ils peuvent être utilisés dans le traitement et la prévention de diverses formes de pathologie impliquant le facteur VII/facteur VIIa et la cascade de coagulation.

Ils peuvent donc être utilisés dans le traitement de la thrombose veineuse, artérielle ou coronaire, la coagulation intravasculaire disséminée, la resténose après angioplastie, l'hypercoagulabilité oncologique, la fibrillation atrale, l'embolisme pulmonaire, l'oedème,

l'inflammation ou la fibrose pulmonaire, le choc septique, le traitement post-pontage cardiaque, la prévention de la reocclusion aggravée suite à une thrombose ou en prophylaxie pour l'angore instable.

A cet effet, ces composés de l'invention, en association avec des excipients appropriés, peuvent être présentés sous toutes forme convenant à une administration orale, parentérale ou intraveineuse, telles que comprimés, gélules, dragées, capsules, suspensions, solutions buvables ou solutions injectables et dosés pour permettre une administration de 0,1 mg à 1 g par jour, en une ou plusieurs prises.

Ils peuvent également être présentés sous toutes formes appropriées à l'administration transdermique et occulaire.

Claims

dans laquelle, R1 représente soit un groupe (C1-C7)alkyle pouvant être substitué par un groupe hydroxy ou un groupe trifluorométhyle, soit un groupe cycloalkyle ou un groupe cycloalkylalkyle, soit un groupe -(CH2)n-X-R3 où R3 représente un groupe (C1-C3)alkyle, n est égal à 1,2 ou 3 et X représente un atome de soufre ou d'oxygène, R2 représente soit un groupe (C1-C7)alkyle pouvant être substitué par un groupe amino, un groupe-COOH, un groupe hydroxyle ou un groupe trifluorométhyle, soit un groupe cycloalkyle ou un groupe cycloalkylalkyle, soit un groupe phényle, benzyle ou 2-phényléthyle, pouvant être substitué sur le groupe phényle par l'un des substituants suivants : un atome d'halogène, un groupe trifluorométhyle, un groupe amino ou un groupe (C1-C4)alcoxy, soit un groupe carbocyclique ou un groupe hétérocyclique, Y est représenté par la formule (II)

Revendications 1. Composé de formule générale (I)

<Desc/Clms Page number 45>

où R4 représente soit un atome d'hydrogène, soit un groupe méthyle, et Q représente un groupe R5-SO2- où R5 représente soit un groupe (C1-C8)alkyle, soit un groupe cycloalkylalkyle, soit un groupe benzyle, pouvant être substitué sur le groupe phényle par un groupe méthoxy.
2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le carbone qui porte R1 est de configuration absolue (S), et le carbone qui porte R2 est de configuration absolue (R) .
3. Procédé de préparation d'un composé de formule (I) selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (VIII)

dans laquelle R1, R2, et Q sont tels que définis dans la revendication 1, avec un composé de formule (II)

dans laquelle R4 est tel que défini dans la revendication 1 et Z est un groupement protecteur, pour obtenir un composé de formule (IX)

<Desc/Clms Page number 46>

dans laquelle R1, R2' Q et R4 sont tels que définis dans la revendication 1 et Z est tel que défini dans la formule (II), que l'on déprotège enfin par hydrogénolyse.
4. Procédé de préparation d'un composé de formule (I) selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (XIV)

dans laquelle R1 et R4 sont tels que définis dans la revendication 1 et Z est un groupement protecteur avec un composé de formule (XV)

dans laquelle R2 est tel que défini dans la revendication 1 et GP2 est un groupement protecteur orthogonal pour obtenir un composé de formule (XVI)

<Desc/Clms Page number 47>

dans laquelle R1, R2 et R4 sont tels que définis dans la revendication 1 et Z et GP2 sont tels que définis respectivement dans les formules (XIV) et (XV), que l'on déprotège puis sur lequel on fait réagir un chlorure de sulfonyle de formule Q-Cl, dans laquelle Q est tel que défini dans la revendication 1, pour obtenir un composé de formule (IX) tel que défini dans la revendication 3, que l'on déprotège enfin par hydrogénolyse.
5. Médicament caractérisé en ce qu'il contient un composé selon la revendication 1 ou 2.
6. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient un composé selon la revendication 1 ou 2 en association avec tout excipient pharmaceutiquement acceptable.